【課題】癌細胞特異的なアポトーシス誘導剤の提供。
【解決手段】染色体の安定化に関連する遺伝子の発現もしくは該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物。この化合物は、染色体の安定化に関連する種々の遺伝子について、該遺伝子の発現を抑制することにより、癌細胞特異的にアポトーシスを誘導し、細胞増殖を抑制する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
染色体の安定化を阻害する化合物を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
【請求項２】
染色体の安定化の阻害が、以下の（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能を阻害することによる、請求項１に記載のアポトーシス誘導剤。
（ａ）ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子
（ｂ）染色体ＤＮＡの複製開始、複製フォークの進行を含む染色体ＤＮＡ複製反応
（ｃ）ＤＮＡ損傷チェックポイント
（ｄ）姉妹染色分体凝集・分離
（ｅ）塩基除去修復
（ｆ）ミスマッチ除去修復
（ｇ）ヌクレオチド除去修復
（ｈ）相同組換え修復
（ｉ）非相同末端結合修復（非相同組換え修復）
（ｊ）二本鎖ＤＮＡ切断修復
（ｋ）ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）
（ｌ）ＤＮＡ架橋損傷修復
（ｍ）ＤＮＡ−タンパク質架橋損傷修復
（ｎ）ＤＮＡポリメラーゼ
（ｏ）ヌクレアーゼ
（ｐ）ヌクレオチド浄化
（ｑ）クロマチン構造維持
（ｒ）テロメア構造維持
【請求項３】
請求項２の（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能に関与する遺伝子の発現を阻害する化合物を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
【請求項４】
以下のいずれかの遺伝子の発現を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
APE2、ATR、BRCA1、Chk1、Cdc5、Cdc6、Cdc7、Cdc45、Cdt1、CSA、CSB、Ctf18、DDB1、DDB2、DNA2、DUT、Elg1、EndoV、Esp1、Exonuclease1、FBH1、FEN1、Geminin、Hus1、KNTC2 (NDC80)、Ku80、Ligase1、Mad2、MBD4、Mcm3、Mcm4、Mcm5、Mcm6、Mcm7、Mcm8、Mcm10、MGMT、MLH3、Mms4、MPG、MSH2、Mus81、NBS1、NEIL2、NEIL3、NTH1、Orc1、Orc3、PARP1、PCNA、Pif1、PMS1、PMS2、PNK、Pola p180、Pola p70、Pola Spp1(Prim2a)、Polb、Pold p125、Pole Dpb3、Pole Dpb4、Pole Pol2、Poli、Poll、Polm、Psf1、Psf2、Psf3、Rad1、Rad18、Rad23A、Rad23B、Rad51、Rad51D、Rad54、Rad6A、RPA34、RPA70、Scc1、Scc3、Sir2、SIRT1 (Sirtuin)、TDG、TDP1、TIMELESS、Tin2、Topoisomerase I、Topoisomerase IIIa、Topoisomerase IIIb、Ubc13、UNG、XAB2、XPC、XPF、XPG、Xrcc2、XRCC4
【請求項５】
請求項４に記載の各遺伝子の塩基配列が、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８に記載の塩基配列からなる群より選択される、請求項４に記載のアポトーシス誘導剤。
【請求項６】
請求項４に記載のいずれかの遺伝子の発現を抑制する化合物が、該遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNAである、請求項４に記載のアポトーシス誘導剤。
【請求項７】
二本鎖RNAが、請求項４に記載のいずれかの遺伝子のmRNAにおける連続する任意の20〜30塩基と相同な配列からなるセンスRNAおよび該センスRNAに相補的な配列からなるアンチセンスRNAからなる二本鎖RNAである、請求項６に記載のアポトーシス誘導剤。
【請求項８】
請求項４に記載のいずれかの遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNAを発現し得るDNAを有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
【請求項９】
請求項４に記載のいずれかの遺伝子の発現を抑制する化合物が以下の（ａ）または（ｂ）である、請求項４に記載のアポトーシス誘導剤。
（ａ）前記遺伝子の転写産物、またはその一部に対するアンチセンス核酸
（ｂ）前記遺伝子の転写産物を特異的に開裂するリボザイム活性を有する核酸
【請求項１０】
請求項４に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
【請求項１１】
請求項４に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物が、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかの化合物である、請求項１０に記載のアポトーシス誘導剤。
（ａ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質に対してドミナントネガティブの性質を有する変異体タンパク質
（ｂ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体
（ｃ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する低分子化合物
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれかに記載のアポトーシス誘導剤を有効成分とする、抗癌剤。
【請求項１３】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）請求項４に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記タンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物との結合活性を測定する工程
（ｃ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと結合する化合物を選択する工程
【請求項１４】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）請求項４に記載のいずれかの遺伝子を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記遺伝子の発現レベルを測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、該発現レベルを低下させる化合物を選択する工程
【請求項１５】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）請求項４に記載のいずれかの遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞または細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記レポーター遺伝子の発現レベルを測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、前記発現レベルを低下させる化合物を選択する工程
【請求項１６】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）請求項４に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質、または該タンパク質を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記タンパク質の活性を測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、前記タンパク質の活性を低下させる化合物を選択する工程
【請求項１７】
以下の工程（ａ）および（ｂ）を含む、請求項４または１０に記載のアポトーシス誘導剤を医薬組成物として製造する方法。
（ａ）請求項１３〜１６のいずれかに記載の方法によって、化合物をスクリーニングする工程
（ｂ）該化合物を薬学上許容される担体と混合する工程

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【公開番号】特開２０１２−１３１８１８（Ｐ２０１２−１３１８１８Ａ）
【公開日】平成２４年７月１２日（２０１２．７．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−４６６５２（Ｐ２０１２−４６６５２）
【出願日】平成２４年３月２日（２０１２．３．２）
【分割の表示】特願２０１１−２６９８０（Ｐ２０１１−２６９８０）の分割
【原出願日】平成１７年４月８日（２００５．４．８）
【出願人】（５０２０２８４３０）株式会社ジーンケア研究所 (14)
【Ｆターム（参考）】