【課題】樹状細胞に特異的で、種々の障害の処置および／または診断に効果的な抗原結合フラグメントの提供。
【解決手段】BDCA-1又はBDCA-4タンパク質に特異的に結合するポリペプチドドメインを含んで成る単離された抗原−結合フラグメント。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１のエキソン１−６；エキソン１及び３−６；エキソン１−２及び４−６；又はエキソン１−３及び５−６によりコードされるBDCA-1又はBDCA-4タンパク質に特異的に結合するポリペプチドドメインを含んで成る単離された抗原−結合フラグメント。
【請求項２】
モノクローナル抗体である請求項１記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項３】
前記抗体が、ヒト、ネズミ、ヒト型化又は二特異的抗体である請求項１記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項４】
Fab、F(ab')₂、scFv、又は融合ポリペプチドであり、又はファージ表示ライブラリーによりコードされる請求項１記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項５】
化学的官能成分に接合される請求項１〜４のいずれか１項記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項６】
前記化学的官能成分が、放射性同位体、蛍光化合物、化学ルミネセント化合物、バイオルミネセント化合物、酵素及び常磁性ラベルから成る群から選択される請求項５記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項７】
BDCA-1又はBDCA-4タンパク質に結合される請求項１〜６のいずれか１項記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項８】
BDCA-1又はBDCA-4タンパク質を発現する抹消血液単核細胞又は樹状突起細胞に結合される請求項７記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項９】
前記細胞が樹状突起細胞である請求項８記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項１０】
前記細胞がプラスマ細胞様樹状突起細胞である請求項９記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項１１】
前記樹状突起細胞が、BDCA-4⁺である請求項10記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項１２】
前記樹状突起細胞がヒト細胞である請求項11記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項１３】
抗−BDCA−４抗体がまた、前記樹状突起細胞に結合される請求項10記載の抗原−結合フラグメント。
【請求項１４】
請求項１又は２記載の抗原−結合フラグメント、及び医薬的に許容できる賦形剤を含んで成る組成物。
【請求項１５】
請求項２記載のモノクローナル抗体を生成するハイブリドーマ。
【請求項１６】
BDCA-2⁺細胞について富化された細胞集団の調製方法であって、ヒト細胞の混合物と、請求項１記載の抗原−結合フラグメントとを接触し、そして前記抗原−結合フラグメントが結合する細胞を単離することを含んで成る方法。
【請求項１７】
生物学的サンプルにおけるBDCA-1又はBDCA-4タンパク質の検出方法であって、
（ａ）BDCA-1又はBDCA-4タンパク質と、請求項１記載の抗原−結合フラグメントとを、前記BDCA-1又はBDCA-4タンパク質と前記抗原−結合フラグメントとの間で複合体の形成を可能にする条件下で接触し；そして
（ｂ）前記複合体の形成を検出する；
ことを含んで成る方法。
【請求項１８】
前記BDCA-1又はBDCA-4タンパク質が、樹状突起細胞の表面上に表示される請求項17記載の方法。
【請求項１９】
前記複合体の形成を検出する段階が、前記樹状突起細胞の機能的調節の検出を含んで成り、ここで前記機能的調節が、A:CD4⁺及びCD8⁺T細胞応答の誘発及びダウンレギュレーション；B：耐性及び免疫性に対する免疫応答の分極；C：Th1細胞増殖、Th2細胞増殖又はTh3/Tregulatory-1 CD4⁺T細胞増殖に対するCD4⁺T細胞応答の分極；D：B細胞応答及び/又はNK細胞応答の調節である請求項18記載の方法。
【請求項２０】
前記複合体の形成を検出する段階が、I型インターフェロン生成の検出又はダウンレギュレーション、Th1免疫応答のダウンレギュレーション、細胞内Ca²⁺移動の誘発、又はTh2に対する免疫応答の分極を含んで成る請求項19記載の方法。
【請求項２１】
樹状突起細胞と、請求項１又は２記載の抗原−結合フラグメントとを接触することを含んで成る、前記樹状突起細胞上にBDCA-1又はBDCA-4抗原を結合する方法。
【請求項２２】
前記BDCA-1又はBDCA-4抗原の結合が、I型インターフェロン生成のダウンレギュレーション、Th1免疫応答のダウンレギュレーション、細胞内Ca²⁺移動の誘発、又はTh2に対する免疫応答の分極から選択された代謝変化をもたらす請求項21記載の方法。
【請求項２３】
BDCA-1又はBDCA-4の結合を妨げる剤についてのスクリーニング方法であって、BDCA-1又はBDCA-4タンパク質と、請求項１又は２記載の抗原−結合フラグメントとを、試験剤の存在下で接触し、そして前記試験剤が前記タンパク質に対する抗原−結合フラグメントの結合を低めるかどうかを決定することを含んで成る方法。
【請求項２４】
請求項１又は２記載の抗原−結合フラグメント、及びBDCA-1又はBDCA-4タンパク質、緩衝液、及び前記抗原−結合フラグメントに接合されるか、又は接合され得るラベルから成る群から選択された成分を含んで成るキット。
【請求項２５】
配列番号１、又は抗−BDCA-1又はBDCA-4抗体を結合できるそのポリペプチドフラグメントによりコードされる単離された又は組換えBDCA-1又はBDCA-4タンパク質。
【請求項２６】
前記BDCA-1又はBDCA-4タンパク質が、配列番号１のエキソン１−６；エキソン１及び３−６；エキソン１−２及び４−６；又はエキソン１−３及び５−６によりコードされる請求項25記載のBDCA-1又はBDCA-4タンパク質。
【請求項２７】
請求項25又は26記載のBDCA-1又はBDCA-4タンパク質をコードする、単離された又は組換えポリヌクレオチド。
【請求項２８】
（ａ）図12（配列番号１）に示され、そしてBDCA-1又はBDCA-4タンパク質又はフラグメントをコードする配列の少なくとも15個の連続ヌクレオチドを含んで成るポリヌクレオチド；（ｂ）（ａ）のDNAの補体にハイブリダイズし、そしてBDCA-1又はBDCA-4タンパク質又はフラグメントをコードする少なくとも50個のヌクレオチドのポリヌクレオチド；及び（ｃ）前記（ａ）及び（ｂ）に定義されるDNA配列に、遺伝子コードの結果として縮重し、そしてBDCA-1又はBDCA-4タンパク質又はフラグメントをコードする配列を有するポリヌクレオチドから選択された、BDCA-1又はBDCA-4タンパク質又はフラグメントをコードするポリヌクレオチド。
【請求項２９】
（ａ）図12（配列番号１）に示される配列の少なくとも15個の連続ヌクレオチドを含んで成るポリヌクレオチド；又は（ｂ）（ａ）のDNAの補体にハイブリダイズする少なくとも50個のヌクレオチドのポリヌクレオチド；又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）に定義されるDNA配列に、遺伝子コードの結果として縮重する配列を有するポリヌクレオチドによりコードされる、単離された又は組換えBDCA-1又はBDCA-4タンパク質又は抗−BDCA-1又はBDCA-4抗体を結合できるそのポリペプチドフラグメント。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【公開番号】特開２００８−１４８７００（Ｐ２００８−１４８７００Ａ）
【公開日】平成２０年７月３日（２００８．７．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−３２５８００（Ｐ２００７−３２５８００）
【出願日】平成１９年１２月１８日（２００７．１２．１８）
【分割の表示】特願２００１−５３８９７６（Ｐ２００１−５３８９７６）の分割
【原出願日】平成１２年１１月１５日（２０００．１１．１５）
【出願人】（５０２３２９１５３）ミルテニイ　バイオテック　ゲゼルシャフト　ミット　ベシュレンクテル　ハフツング (3)
【Ｆターム（参考）】