粉末経鼻投与製剤
本発明によれば、生理活性物質と共に、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤が提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
本発明は、粉末経鼻投与製剤に関するものであり、生理活性物質と共に、非吸水性かつ難水溶性粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する、鼻粘膜での生理活性物質の吸収が促進された粉末経鼻投与製剤に関する。
【背景技術】
ホルモン、サイトカイン等の生理活性ペプチドは生体内で重要な役割を担っており、生理活性ペプチド自体を大量生産して医薬品として使用すること、生理活性ペプチドを遺伝子工学、タンパク合成の手法によって構造変化、修飾したものを医薬品として使用することが頻繁に行なわれるようになってきている。
しかし、生理活性ペプチドは、経口投与すると消化管内・消化管壁の消化液、酵素により、分解される危険性があり、また、消化管から吸収された場合にも、吸収後最初に肝臓を通過した後、全身に循環するため、肝臓で分解される危険性がある（肝臓による初回通過効果）と共に、親水性の高い生理活性ペプチドは高分子で極性が高いため、消化管粘膜からは通常殆ど吸収されないという問題がある。
このため、生理活性ペプチドは充分な薬効が得られるよう、通常、経口投与ではなく、注射の形態で、皮内や筋肉内或いは直接的に血液循環に生理活性ペプチドを導入することとしているが、注射剤による投与は患者の通院を必要とし、苦痛を伴うことから、在宅投与、無痛投与できる形態が望まれている。
このような形態の１つとして、粘液で覆われた繊毛をもつ上皮細胞及び基底膜からなり、下部に血管系が発達した鼻腔粘膜（とりわけ、上鼻甲介、中鼻甲介、下鼻甲介の粘膜）を経由する経鼻投与が提案されているが、上皮細胞は接合帯で密に結合しているため、分子量の大きな生理活性ペプチド等の透過性は低く、透過性を向上させるために種々の製剤が提案されている。
例えば、特公昭６２−４２８８８号公報には、生理活性を有するポリペプチド類と、水吸収性でかつ水難溶性の基剤（結晶セルロース等）からなる粉末経鼻投与用組成物が記載されており、特開平８−２７０３１号公報には、分子量４００００以下の生理活性物質を平均粒子径２５０μｍ以下の粉末ないし結晶状の多価金属化合物キャリヤ（アルミニウム化合物、カルシウム化合物等）に均一に分散、付着結合させた経鼻吸収用組成物が開示されている。
日本薬学会第２７回製剤セミナー要旨集第１９−２０頁には、分子量１０００以上の水溶性化合物について、薬物担体として、炭酸カルシウム、エチルセルロース、タルク、硫酸バリウムなどの難溶性粉末を用いた場合、経鼻投与におけるバイオアベイラビリティの向上が見られたことが報告されている。
また、特開平１１−３２２５８２号公報には、表面に多数の空隙を有する一次造粒微細結晶等（炭酸カルシウム粉末等）のキャリヤに薬物を均一に分散・吸着させた経鼻投与用組成物が開示されている。
更に、特開２００２−１２８７０４号公報には、生理活性物質、キャリヤ及び生体内吸収促進剤（高置換度ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース）を含む経鼻投与型製剤が記載されており、キャリヤとしては、水溶性高分子化合物（結晶セルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース等のセルロース誘導体）があげられている。
また、特開昭５９−１３０８２０号公報には、カルシトニンに、酢酸、酢酸ナトリウムと共に、非イオン性界面活性剤であるポリソルベイト８０を加えて、精製水に溶解した経鼻投与用水溶液が開示されている。
ファーマシューティカルリサーチ（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）第７巻、第７号第７７２−７７６頁（１９９０年）には、ヒト成長ホルモンの水性緩衝液に高濃度でＮ−アセチル−Ｌ−システイン等を添加し、ラットに経鼻投与するとバイオアベイラビリティが若干向上することが報告されている。
しかしながら、これら経鼻投与製剤は吸収の向上が充分でないという問題があった。
【発明の開示】
本発明は、生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性粉末と共に、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤を提供するものであり、その経鼻投与により、生理活性物質が生体内で活性を示すのに充分な血中濃度を達成することができる。
本発明者らは、生理活性物質に、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を添加して経鼻投与すれば、生理活性物質の経鼻吸収を著しく向上させることができることを見出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は、生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤に関する。
本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧／吸入された際、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の存在により、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が鼻腔粘膜に付着して滞留し、しかも非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が鼻粘膜の粘液を吸収しないため、生理活性物質及び粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が微量の粘液に溶解し、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が局所的高濃度溶液を生じることになる。この状態で、生理活性物質の濃度勾配を利用し、かつ、高濃度に溶解した粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の作用によって、局所的に鼻粘膜の吸収性自体を向上させて、効率よく生理活性物質を鼻粘膜からその下部に存在する血管系に到達させることができ、生理活性物質の経鼻吸収を促進することができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が、鼻腔内で溶解した薬物を自身で吸い込むことがないため、薬物の利用率を低下させることがない。
しかも、本発明の粉末経鼻投与製剤は、局所点在的に鼻粘膜に作用するため、液状の経鼻投与製剤のように鼻粘膜全体に作用することがなく、鼻粘膜に対する悪影響が少ない。
【図面の簡単な説明】
第１図は、サケカルシトニン（以下ＳＣＴ）、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（以下ＮＡＣ）及びエチルセルロース（以下ＥＣ）含有投与粉末をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第２図は、ＳＣＴ、ＮＡＣ及び酢酸セルロース含有投与粉末をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第３図は、ＳＣＴ含有比較粉末（２種）をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第４図は、ＳＣＴ含有比較溶液（２種）をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第５図は、ヒトインシュリンナトリウム塩（以下ＩＮＳ）、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＩＮＳ含有比較溶液をそれぞれラットに経鼻投与した場合の血漿ＩＮＳ濃度の経時変化を示す。
第６図は、ヒト副甲状腺ホルモン１−３４（以下ＰＴＨ）、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＰＴＨ含有比較溶液をそれぞれラットに経鼻投与した場合の血漿ＰＴＨ濃度の経時変化を示す。
第７図は、ＳＣＴ、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＳＣＴ含有比較溶液をそれぞれイヌに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第８図は、ウシインシュリン（以下ＢＩＮＳ）、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＢＩＮＳ含有比較溶液をそれぞれイヌに経鼻投与した場合の血漿ＢＩＮＳ濃度の経時変化を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
本発明の粉末経鼻投与製剤に用いられる非吸水性かつ難水溶性物質の粉末において、非吸水性かつ難水溶性物質としては、好ましくは吸水速度が５ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度（２５℃、以下同様）が１００ｍｇ／Ｌ以下の物質、より好ましくは吸水速度が１ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が５０ｍｇ／Ｌ以下の物質、最も好ましくは吸水速度が０．５ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が２０ｍｇ／Ｌ以下の物質をあげることができる。
吸水速度とは、第１６回製剤と粒子設計シンポジウム要旨集（１９９９年）、第１６３〜１６７頁に記載された方法に従い、内径２．１ｃｍのガラス筒に粉末を詰め、ガラス筒を鉛直に保ったまま、下端を純水につけ、ガラス筒の下端側から上方に吸水された水上端のガラス筒下端からの距離を測定したものである。
また、本発明の粉末経鼻投与製剤は気体を用いて鼻腔内に噴霧することによって投与することになるため、全体として粉末状の形態をとるものであり、水等の溶媒を極力含まないものが好ましい。
非吸水性かつ難水溶性物質の具体例としては、非吸水性かつ難水溶性のセルロース誘導体（例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、ニトロセルロース、セルローストリアセテート、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテート・サクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース等）、非吸水性かつ難水溶性の高級脂肪酸及びそのエステルもしくは塩（硬化油、水素添加大豆油、カルナウバロウ、サラシミツロウ、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸、ステアリン酸の塩等）、非吸水性かつ難水溶性の生体内分解性ポリマー（ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸−グリコール酸共重合体等）、非吸水性かつ難水溶性の合成ポリマー（ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル等）、非吸水性かつ難水溶性の多価金属塩（炭酸カルシウム、硫酸バリウム、ヒドロキシアパタイト等）、非吸水性かつ難水溶性の金属酸化物（タルク、二酸化ケイ素、酸化チタン等）各種のものを使用することができるが、非吸水性かつ難水溶性のセルロース誘導体を用いるのが好ましく、とりわけ、エチルセルロース、酢酸セルロースを用いるのが好ましく、特に、非吸水性の点では高置換度のエチルセルロース、酢酸セルロースが好ましい。
ここに、高置換度とは、セルロース分子を構成するＬ−グルコースの水酸基のうち、Ｌ−グルコース同士の結合に使用されていない水酸基の水素原子が置換基で平均７０％以上、好ましくは平均８０％以上、とりわけ好ましくは平均８５％以上が置換されているものである。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末としては、粉末粒子の表面に鼻粘膜粘液等が付着しにくい方がよいため、粉末粒子の表面に多数の空隙を有していないものが好ましく、粉末の平均粒子径は、粉末経鼻投与製剤に含まれる生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の種類、使用の形態等にもよるが、通常、５〜２００μｍの範囲であればよく、２０〜１５０μｍの範囲であるのが好ましく、３０〜１２０μｍの範囲であるのが更に好ましく、４０〜１００μｍの範囲であるのが最も好ましい。
非吸水性かつ難水溶性物質の粉末は、市販されている粉末製品をそのまま使用してもよいが、固形の非吸水性かつ難水溶性物質を加工し又は市販の粉末製品を更に加工して、所望の粒子径、形状として使用することもできる。 また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末は、１つの非吸水性かつ難水溶性物質の粉末であっても、複数の非吸水性かつ難水溶性物質の粉末であってもよい。
非吸水性かつ難水溶性物質を加工する方法としては、慣用の微粒子形成法を適宜使用することができ、例えば、ジェットミル粉砕、ハンマーミル粉砕、回転型ボールミル粉砕、振動ボールミル粉砕、ビーズミル粉砕、シェーカーミル粉砕、ロッドミル粉砕、チューブミル粉砕等により物理的に粉砕する方法；非吸水性かつ難水溶性物質を一旦溶媒に溶解後、温度変化、溶媒組成の変更等を行なって晶析させ、遠心分離或いはろ過等の方法で回収する晶析法；非吸水性かつ難水溶性物質を一旦溶媒に溶解後、スプレーノズルを用いてスプレードライヤーの乾燥室内に噴霧し、短時間に噴霧液内の溶媒を揮発させるスプレードライ法等が採用される。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末は、粒子径のバラツキを抑えるために、篩過、重力沈降式分級、遠心力分級、気流の流れによる慣性力式分級等の方法で粒子径が一定範囲になるように、処理を行なってもよい。
粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２とは、（ａ）粘液溶解剤、（ｂ）非イオン性界面活性剤並びに（ｃ）粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤のいずれかであることを表し、（ａ）〜（ｃ）のいずれにおいても、粘液溶解剤、非イオン性界面活性剤は、それぞれ、１つの成分のみからなるものであっても、複数の成分からなるものであってもよい。
粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤としては、生理活性物質の粘膜吸収を促進させるものであればよいが、鼻粘膜への刺激性等の悪影響が少なく、少量で鼻粘膜からの吸収を著しく向上させるものが好ましく、粘液溶解剤単独、又は粘液溶解剤と非イオン性界面活性剤との組合せを使用するのがより好ましく、鼻粘膜への刺激性の点からは粘液溶解剤を使用するのが最も好ましい。
粘液溶解剤の好ましい例としては、システイン誘導体、活性ＳＨ基含有アルコールがあげられる。システイン誘導体としては、例えば、Ｎ−アセチルシステイン等のＮ−（Ｃ２〜５アルカノイル）システイン、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−エチルシステイン等のＳ−（Ｃ１〜４アルキル）システイン、Ｓ−カルボキシメチルシステイン等のＳ−（Ｃ２〜５カルボキシアルキル）システインがあげられる。
また、システイン誘導体としては、システイン含有ペプチドも含まれ、例えば、トリペプチドの１種であるグルタチオン類があげられる。グルタチオン類の具体例としては、グルタチオンのほか、グルタチオンＣ１〜８アルキルエステル等のグルタチオンエステル類（米国特許第４７８４６８５号参照）があげられる。
これらシステイン誘導体におけるシステインには、ＤＬ体、Ｌ体、Ｄ体が含まれるが、特に、Ｌ−システインが好ましい。
活性ＳＨ基含有アルコールとしては、Ｃ３〜６の活性ＳＨ基含有アルコール、より具体的には１，４−ジチオスレイトールがあげられる。
非イオン性界面活性剤としては、タンパク変性能が小さく、膜可溶化能が小さい非イオン性界面活性剤が好ましい。
そのような非イオン性界面活性剤としては、ポリオキシエチレン−Ｃ１０〜１４アルキルエーテル、ポリオキシエチレン−（Ｃ６〜１０アルキル−フェニル）エーテル、Ｃ６〜１０アルキル−グルコースエーテル及びＮ−（Ｃ６〜１０アルキル）カルバモイル−Ｃ１〜４アルキル−グルコースエーテル等があげられる。
ポリオキシエチレン−Ｃ１０〜１４アルキルエーテル及びポリオキシエチレン−（Ｃ６〜１０アルキル−フェニル）エーテルとしては、ポリオキシエチレン部分が全体の６５〜９０重量％の範囲のものが好ましく、具体的には平均分子量が５６０〜１３００であるポリオキシエチレン−ラウリルエーテル［例えば、ニッコール製ＢＬ−９：ポリオキシエチレン（９）ラウリルエーテル；ＢＬ−２５：ポリオキシエチレン（２５）ラウリルエーテル］；平均分子量が６００〜８００であるポリオキシエチレン−オクチルフェニルエーテル、特に、平均分子量が６００〜８００であるポリオキシエチレン−ｔｅｒｔ−オクチルフェニルエーテル［例えば、ナカライ製トリトンＸ−１００：ポリオキシエチレン（９−１０）ｐ−ｔｅｒｔ−オクチルフェニルエーテル、トリトンＸ−１０２：ポリオキシエチレン（１２−１３）ｐ−ｔｅｒｔ−オクチルフェニルエーテル］；平均分子量が６００〜７００であるポリオキシエチレン−ノニルフェニルエーテル、特に、平均分子量が６００〜７００であるポリオキシエチレン−ｎ−ノニルフェニルエーテル［例えば、ニッコール製ＮＰ−１０：ポリオキシエチレン（１０）ｐ−ｎ−ノニルフェニルエーテル］をあげることができる。
Ｃ６〜１０アルキル−グルコースエーテル及びＮ−（Ｃ６〜１０アルキル）カルバモイル−Ｃ１〜４アルキル−グルコースエーテルとしては、グルコース部分が全体の５０〜６５重量％の範囲のものが好ましく、具体的には、１−Ｏ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、特に、１−Ｏ−ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド；６−Ｏ−（Ｎ−ヘプチルカルバモイル）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、特に、６−Ｏ−（Ｎ−ｎ−ヘプチルカルバモイル）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドをあげることができる。
更に、非イオン性界面活性剤としては、５０％の赤血球を溶血させる水溶液における非イオン性界面活性剤の濃度が１重量％以上、とりわけ、５重量％以上であるようなものが、鼻粘膜への悪影響が少ない点で好ましい。
ここに、５０％の赤血球を溶血させる水溶液における非イオン性界面活性剤の濃度は、様々な濃度に調整した非イオン性界面活性剤の生理食塩水溶液に、赤血球を０．２重量％の割合で加え、３７°Ｃで１０分間放置後に、上清におけるヘモグロビンの吸光度（５４０ｎｍ）を測定し、精製水に赤血球を同割合で添加して完全に溶血させた場合の吸光度を１００％として、各非イオン性界面活性剤濃度での赤血球の溶血率を算出し、内挿法により、５０％の溶血率となる非イオン性界面活性剤の濃度を推定したものである。
生理活性物質としては、鼻粘膜に対する刺激が少ない薬物であれば、特に制限はないが、経鼻投与によっては大量の製剤を投与することができないため、少量で薬効を発現する生理活性物質が好ましい。また、本発明の粉末経鼻投与製剤は経鼻吸収されにくい生理活性物質に適用した場合、生理活性物質の経鼻吸収の向上が顕著となるため、生理活性物質として親水性難吸収性物質を使用するのが好ましい。
なお、難吸収性とは生理活性物質の水溶液を噴霧により、ヒトに経鼻投与した場合には、その５％以下しか経鼻吸収されないことをいう。
かかる生理活性物質としては、抗生物質、増血剤、感染症治療剤、抗痴呆剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗アレルギー剤、向精神薬、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張剤、降圧剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、コレステロール低下剤、骨粗しょう症治療剤、ホルモン剤、ワクチン等として用いられるものがあげられる。
これらには低分子生理活性物質と共に、ペプチド性生理活性物質、多糖類系生理活性物質等が含まれるが、本発明の粉末経鼻投与製剤はペプチド性生理活性物質、多糖類系生理活性物質に適用する場合に顕著な効果を示し、とりわけ、ペプチド性生理活性物質に適用するのが好ましい。
ペプチド性生理活性物質としては、アンタゴニスト、アゴニスト又はこれらの可溶性レセプター及びこれらの誘導体もあげられ、また、糖鎖を有するものについてはその構造が異なるものも含まれる。場合によっては、ポリエチレングリコール等の合成ポリマー、ヒアルロン酸等の天然ポリマーで修飾されていてもよく、ガラクトース、マンノース等の任意の糖、或いは糖鎖又は非ペプチド性化合物で修飾されていてもよい。またリン脂質、脂肪酸等のペプチド性生理活性物質に脂溶性を付加するものでもよい。これらペプチド性生理活性物質は、分子量２００〜２０００００、好ましくは分子量２００〜５００００、更に好ましくは分子量２００〜２５０００、最も好ましくは分子量２００〜１００００のものである。
好ましいペプチド性生理活性物質としては、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、中枢及び末梢神経系に作用する因子等が含まれ、具体例としては次のものがあげられる。
サイトカインとしては、インターフェロン類（例えば、インターフェロン−α、−β、−γ）、インターロイキン類（例えば、インターロイキン−１〜１１）、腫瘍壊死因子（例えば、ＴＮＦ−α、−β）、悪性白血病阻止因子（ＬＩＦ）、造血因子［例えば、エリスロポエチン、スロンボポエチン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）］等があげられる。
ペプチドホルモンとしては、インシュリン、成長ホルモン、性腺刺激ホルモン、メラニン細胞刺激ホルモン、黄体刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）及びその誘導体（ゴセレリン、ブセレリン、リュープロレリン）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）及びその誘導体（タルチレリン）、カルシトニン等があげられる。
成長因子としては、神経成長因子類（例えば、ＮＧＦ、ＮＧＦ−２／ＮＴ−３）、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、インシュリン様成長因子（ＩＧＦ）、形質転換成長因子（ＴＧＦ）、血小板由来細胞成長因子（ＰＤＧＦ）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）等があげられる。
心臓血管系に作用する因子としては、エンドセリン、エンドセリンインヒビター、エンドセリンアンタゴニスト、エンドセリン生成酵素阻害剤、デスモプレッシン、レニン、アンジオテンシンＩ〜ＩＩＩ、心房ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）等があげられる。
中枢及び末梢神経系に作用する因子としては、エンケファリン、エンドルフィン、ダイノルフィン、ネオエンドルフィン等があげられる。
これらのペプチド性生理活性物質には、ポリペプチドの可溶性レセプターをその概念に含む。これらのペプチド性生理活性物質にはそれぞれポリエチレングリコールのようなポリマー、あるいはコンドロイチン、多糖類のような天然ポリマー、又は非ペプチド性物質で化学的に修飾されたものを含んでもよい。ここでいう非ペプチド性物質はレセプターに対するリガンドでもよいし、抗体に対する抗原でもよい。更に、上記ペプチド性生理活性物質は複数のペプチドが化学的な方法又は遺伝子組み換え技術により結合されたものを含んでもよい。
多糖類系整理活性物質としては、低分子ヘパリン、ヘパリン類似物質等をあげることができる。
また、本発明の粉末経鼻投与製剤は、投与後直ぐに生理活性物質が鼻腔粘膜下の血管系から体内に取り込まれ、投与から薬効発現迄の時間が短いため、オンセット時間（薬物を投与後、薬効が発現するまでの時間）が短いことが治療上有用である生理活性物質にも好適に使用することができる。
このため、本発明の粉末経鼻投与製剤は、例えば、麻薬性鎮痛薬（例えば、アルカロイド系麻薬）、片頭痛治療薬［例えば、５−ヒドロキシトリプタミン（ＨＴ）１受容体アゴニスト、ニューロキニン（ＮＫ）１受容体拮抗薬、ｉＧｌｕＲ５受容体拮抗薬、βアドレナリン遮断薬］、乗り物酔い薬［例えば、中枢性抗コリン作動薬、抗ヒスタミン薬、５−ヒドロキシトリプタミン（ＨＴ）１受容体アゴニスト］、制吐剤［例えば、ニューロキニン（ＮＫ）１受容体拮抗薬、５−ヒドロキシトリプタミン（ＨＴ）３受容体拮抗薬］、性機能改善薬［例えば、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）５阻害薬、α−メラニン細胞刺激ホルモン（ＭＳＨ）アナログ、ドーパミンＤ２受容体アゴニスト、非ステロイド性アンドロゲン受容体調節薬］、糖尿病薬（例えば、インシュリン）、低血糖時の救急処置薬（例えばグルカゴン）等の生理活性物質にも好適に適用することができる。
本発明の粉末経鼻投与製剤における配合比率は、生理活性物質の種類、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の種類、これらの使用形態等様々な要因にもよるが、生理活性物質が全体の０．１〜８０重量％、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が全体の１５〜９９．４重量％、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が全体の０．５〜５重量％の範囲で使用することができる。
本発明の粉末経鼻投与製剤の投与（噴霧／吸入）量は通常３〜５０ｍｇ／回、好ましくは５〜２０ｍｇ／回とするのが好ましいが、このような少ない投与（噴霧／吸入）量でも、本発明の粉末経鼻投与製剤は少量の非吸水性かつ難水溶性物質の粉末、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を使用するだけで優れた経鼻吸収促進作用が得られるため、生理活性作用を発現させるために比較的大きな体内吸収量（１ｍｇ／人／回程度）が必要な生理活性物質迄も経鼻吸収させることができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末はそれ自体鼻粘膜で生理活性作用を示さないため、小さな投与（噴霧／吸入）量で充分に生理活性作用を示す生理活性物質を経鼻吸収させる場合には、１回の噴霧／吸入で投与される生理活性物質の量のバラツキを抑制するために、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末を意図的に増量することもできる。
本発明の粉末経鼻投与製剤に含まれる生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤は、粉末状態で非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と混合して本発明の粉末経鼻投与製剤とすることができ、そのまま使用することができるが、この場合には鼻腔内に投与する際、各成分が噴霧／吸入によって分離してしまわないように、粉末粒子の密度、粒子径を調整するのが好ましい。
例えば、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の外形から計算される密度が、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の外形から計算される密度の０．７〜１．５倍、好ましくは０．８〜１．３倍の範囲内であり、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の粉末の粒子径が非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の０．３〜１．２倍、好ましくは０．４〜１．１倍の範囲となるようにするのが好ましい。
生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤も、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末を形成する際に使用する手法を使用して粉末化、粒子径調整をすることができるが、生理活性物質がペプチド性のものである場合には、ペプチド性生理活性物質及びポリエチレングリコールの混合水溶液を凍結乾燥し、得られた固形物に、ポリペプチドは溶解しないがポリエチレングリコールを溶解する有機溶媒を添加するか（特開平１１−３０２１５６号）、ペプチド性生理活性物質及び相分離誘起剤を含有する水溶液の凍結物に、ペプチド非溶解性の水混和性有機溶媒を添加し（ＷＯ０２／３０４４９）、生成する懸濁液からペプチド性生理活性物質の粉末を回収することにより、生理活性を保持したまま、粉末化を行なうことができる。
また、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤は、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の表面に固定して本発明の粉末経鼻投与製剤とすることもでき、この形で使用することもできる。
例えば、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を水性溶媒（例えば、水、水性エタノール、水性アセトン、水性メタノール、水性アセトニトリル）に溶解し、この溶液を非吸水性かつ難水溶性物質の粉末に添加し、減圧乾燥、常温乾燥、凍結乾燥等の方法で乾燥させ、必要に応じて篩過することによって、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の表面に、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を固定することができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の混合物に水性溶媒（例えば、水、水性エタノール、水性アセトン、水性メタノール、水性アセトニトリル）を添加して練合し、乾燥後に再度所望の粒子径になるよう粉砕、篩過することにより、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末に、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を固定して本発明の粉末経鼻投与製剤とすることもできる。
なお、本発明の粉末経鼻投与製剤は、乾燥状態で投与されるものであり、溶媒は一切添加しないが、他の粉末固形成分は鼻粘膜に悪影響がなく、かつ、経鼻吸収を妨げないものであれば、生理活性物質の１回の投与（噴霧／吸入）量が一定となるように増量し、生理活性物質の安定性を向上させるために、他の添成分を少量添加することもできる。
かかる少量添加成分としては、例えば、滑沢剤［タルク、ステアリン酸およびその塩（ナトリウム塩、カルシウム塩）、カープレックス等］、結合剤（デンプン、デキストリン等）、ｐＨ調節剤（クエン酸、グリシン等）、保存剤（アスコルビン酸等）、防腐剤（パラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クロロブタノール等）、矯臭剤（メントール、カンキツ香料等）をあげることができる。
本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧することによって投与することができ、所定量を空気又は人体に悪影響のないガス（空気、窒素ガス、アルゴンガス、二酸化炭素ガス、代替フロンガス等）で粉末経鼻投与製剤を鼻腔内に噴霧すればよい。
噴霧する方法としては、慣用の経鼻投与用器具を何れも使用することができ、例えば、定量噴射式の加圧投与用器具に本発明の粉末経鼻投与製剤を充填し、定量ずつ鼻腔内に噴霧する方法、本発明の粉末経鼻投与製剤を一定量ずつカプセル等に充填し、必要時に、そのまま加圧投与用器具に装着し、穿孔等により粉末経鼻投与製剤を噴霧できるようにした上で、空気又は人体に悪影響のないガスで鼻腔内に噴霧する方法等が考えられる。
また、噴霧する際の空気又は人体に悪影響のないガスの噴出速度は、粉末経鼻投与製剤の構成成分が、鼻腔粘膜のうち、最も吸収効率がよい上鼻甲介、中鼻甲介、下鼻甲介の粘膜に大部分が到達するように、調節するのが好ましく、ガスの噴出速度と共に、経鼻投与される患者が投与時に鼻から吸引するタイミングに合せて噴霧することにより、より効率的に粉末経鼻投与製剤を吸収部位に到達させることができる。
更に、本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧することなく、吸引のみにより、経鼻吸収することも可能であり、本発明の粉末経鼻投与製剤を一定量ずつブリスターパック等に充填し、必要時に、そのまま吸引器具に装着し、加圧等により粉末経鼻投与製剤を取り出すことができるようにした上で、吸引することにより、鼻腔内に粉末経鼻投与製剤を到達させることもできる。
なお、本発明の粉末経鼻投与製剤は、経肺投与、経咽頭粘膜投与等にも使用することもでき、投与方法に応じた慣用の投与器具（経肺投与用噴霧／吸入器具、経咽頭粘膜投与用噴霧器具等）を用いて、患者に投与することができる。
【実施例】
次に、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
サケカルシトニン（分子量３４３１．９、ＢＡＣＨＥＭ社製、平均粒子径３６．６μｍ、以下、ＳＣＴ）１．０ｍｇ、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（フルカ製、平均粒子径４５．８μｍ、以下、ＮＡＣ）１．５ｍｇ及びエチルセルロース（ダウケミカル製、エトセル＃１０、平均粒子径８１．４μｍ、エチル化度８７〜９０％、以下ＥＣ）２７．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例２】
ＳＣＴ１．０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及び酢酸セルロース（片山化学製、平均粒子径８８．０μｍ、アセチル化度５３〜５６％、以下同様）２７．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例３】
ヒトインシュリンナトリウム塩（分子量５７４９．５、シグマ製、以下、ＩＮＳ）１０ｍｇを３０％エタノール水溶液０．３ｍｌに溶解し、この溶液をＥＣ９０ｍｇに添加し、室温にて一夜減圧乾燥することにより、ＩＮＳ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＩＮＳ及びＥＣの混合粉末１０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及びＥＣ１８．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例４】
ヒト副甲状腺ホルモン１−３４（分子量４１１７．８、ＢＡＣＨＥＭ社製、以下、ＰＴＨ）５ｍｇを３０％エタノール水溶液０．３ｍｌに溶解し、この溶液をＥＣ４５ｍｇに添加し、室温にて一夜減圧乾燥することにより、ＰＴＨ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＰＴＨ及びＥＣの混合粉末１０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及びＥＣ１８．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例５】
ＳＣＴ１０ｍｇを３０％エタノール水溶液０．３ｍｌに溶解し、この溶液をＥＣ９０ｍｇに添加し、室温にて一夜減圧乾燥することにより、ＳＣＴ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＳＣＴ及びＥＣの混合粉末３０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及びＥＣ６８．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例６】
ウシインシュリン（分子量５８００、シグマ製、以下、ＢＩＮＳ）３ｇを０．１Ｎ−ＨＣｌを含む２０％エタノール水溶液６０ｇに溶解し、この溶液をＥＣ９７ｇに添加し、小型ハイスピードミキサーにて攪拌・混合した後、５０℃にて４時間乾燥することにより、ＢＩＮＳ及びＥＣの混合粉末を得た。同様にＮＡＣ１．５ｇを２０％エタノール水溶液６０ｇに溶解し、この溶液をＥＣ９８．５ｇに添加し、小型ハイスピードミキサーにて攪拌・混合した後、５０℃にて４時間乾燥することにより、ＮＡＣ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＢＩＮＳ及びＥＣの混合粉末とＮＡＣ及びＥＣの混合粉末を等量ずつよく混合し、投与粉末を得た。
製造例１
ディスポーザブルチップ（ニチリョー製、２００μｌ用）、三方コック（テルモ製）及び１ｍｌ注射筒（テルモ製）をこの順序で接続し、粉末経鼻投与用のデバイスを作成した。
このデバイスのディスポーザブルチップの先端部に、投与粉末を充填し、注射筒より空気を送り込むことによって、投与粉末を鼻腔内に噴霧することとした。
比較例１〜２
ＳＣＴ１．０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及び次の第１表に示す成分２７．５ｍｇをよく混合し、比較粉末を得た。
比較例３
ＳＣＴ１．０ｍｇを注射用生理食塩水（大塚製薬製、以下、同様）０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例４
ＳＣＴ１．０ｍｇ及びＮＡＣ２．５ｍｇを注射用生理食塩水０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例５
ＩＮＳ１．０ｍｇを注射用生理食塩水０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例６
ＰＴＨ１．０ｍｇを注射用生理食塩水０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例７
ＳＣＴ３．０ｍｇを注射用生理食塩水１．０ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例８
ＢＩＮＳ３．０ｍｇを注射用生理食塩水１．０ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
実験例１
（１） ウイスター系雄性ラット（９〜１１週齢、体重：１９０〜２６０ｇ、日本ＳＬＣ）を１２時間照明、室温２３±２°Ｃ、自由摂水・摂餌の条件で１週間馴化させた。その後、実験前約２０時間絶食させ、ペントバルビタール（ナカライ製）５０ｍｇ／ｋｇで麻酔後、インターナショナル・ジャーナル・オブ・ファーマシューティックス（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ）、第７巻、３１７〜３２５頁（１９８１年）に記載の方法に従い、経鼻投与のための手術を施した。
（２） 手術を施したラットに、製造例１で作成した粉末経鼻投与用デバイスを用い、検体投与群のラットには、ラットの片方の鼻腔内に、実施例１又は２で調製した投与粉末をＳＣＴ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。
一方、比較群には、ラットの片方の鼻腔内に、比較例１又は２で調製した比較粉末をＳＣＴ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。或いは比較例３又は４で調製した比較溶液をＳＣＴ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるようマイクロピペットを用いてラットの片方の鼻腔内に投与した。
（３） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に頚静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を０．１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿のＳＣＴ濃度をＳＣＴ測定用エンザイムイムノアッセイキット（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用いて測定した。
実施例１及び２の投与粉末についてのＳＣＴ血漿中濃度測定の結果をそれぞれ第１図及び第２図に示し、比較例１及び２の比較粉末並びに比較例３及び４の比較溶液についてのＳＣＴ血漿中濃度測定の結果をそれぞれ第３図及び第４図に示す。
これらの図において、ポイントは３〜５例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＳＣＴを０．１ｍｇ／ラットに静脈注射（５００μｇ／ｍｌのＳＣＴ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＳＣＴ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第２表に示す。
実験例２
（１） 実験例１（１）で得られたラットに、製造例１で作成した粉末経鼻投与用デバイスを用い、検体投与群のラットには、ラットの片方の鼻腔内に、実施例３で調製した投与粉末をＩＮＳ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。
一方、比較群には、ラットの片方の鼻腔内に、マイクロピペットを用い、比較例５の比較溶液をＩＮＳ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう投与した。
（２） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に頚静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を０．１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿の総インシュリン（ＩＮＳ及びラットインシュリン）濃度をインシュリン測定用エンザイムイムノアッセイキット（和光純薬製）を用いて測定した。なお、各測定ポイントのＩＮＳ血漿中濃度は、各測定値から投与前のラットインシュリン血漿中濃度を差引いた値として表した。
実施例３の投与粉末並びに比較例５の比較溶液についてのＩＮＳ血漿中濃度測定の結果を第５図に示す。
これらの図において、ポイントは５又は７例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＩＮＳを０．０１ｍｇ／ラットに静脈注射（２００μｇ／ｍｌのＩＮＳ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＩＮＳ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第３表に示す。
実験例３
（１） 実験例１（１）で得られたラットに、製造例１で作成した粉末経鼻投与用デバイスを用い、検体投与群のラットには、ラットの片方の鼻腔内に、実施例４で調製した投与粉末をＰＴＨ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。
一方、比較群には、ラットの片方の鼻腔内に、マイクロピペットを用い、比較例６の比較溶液をＰＴＨ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう投与した。
（２） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に頚静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を０．１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿のＰＴＨ濃度をＰＴＨ測定用エンザイムイムノアッセイキット（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用いて測定した。
実施例４の投与粉末並びに比較例６の比較溶液についてのＰＴＨ血漿中濃度測定の結果を第６図に示す。
これらの図において、ポイントは７例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＰＴＨを０．０１ｍｇ／ラットに静脈注射（２００μｇ／ｍｌのＰＴＨ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＰＴＨ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第４表に示す。
実験例４
（１） 雄性ビーグル犬（２歳、体重１２．２〜１５．１ｋｇ、北山ラベス）を実験前約２０時間絶食させ、ペントバルビタール（ナカライ製）４０ｍｇ／ｋｇで麻酔後、粉末経鼻投与用デバイス（Ｂｉ−Ｄｏｓｅ Ｎａｓａｌ Ｐｏｗｄｅｒ ｄｅｖｉｃｅ，Ｐｆｅｉｆｆｅｒ社製）を用い、検体投与群のイヌには、イヌの片方の鼻腔内に、実施例５で調製した投与粉末をＳＣＴ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるよう投与した。
一方、比較群には、イヌの片方の鼻腔内に、比較例７で調製した比較溶液をＳＣＴ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるようマイクロピペットを用いてイヌの片方の鼻腔内に投与した。
（３） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に前肢静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿のＳＣＴ濃度をＳＣＴ測定用エンザイムイムノアッセイキット（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用いて測定した。
実施例５の投与粉末及び比較例７の比較溶液についてのＳＣＴ血漿中濃度測定の結果を第７図に示す。
これらの図において、ポイントは５例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＳＣＴを５ｍｇ／イヌに静脈注射（２．５ｍｇ／ｍｌのＳＣＴ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＳＣＴ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第５表に示す。
実験例５
（１） 雄性ビーグル犬（３歳、体重１１．３〜１６．２ｋｇ、北山ラベス）を実験前約２０時間絶食させ、ペントバルビタール（ナカライ製）４０ｍｇ／ｋｇで麻酔後、粉末経鼻投与用デバイス（Ｂｉ−Ｄｏｓｅ Ｎａｓａｌ Ｐｏｗｄｅｒ ｄｅｖｉｃｅ，Ｐｆｅｉｆｆｅｒ社製）を用い、検体投与群のイヌには、イヌの片方の鼻腔内に、実施例６で調製した投与粉末をＢＩＮＳ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるよう投与した。
一方、比較群には、イヌの片方の鼻腔内に、比較例８で調製した比較溶液をＢＩＮＳ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるようマイクロピペットを用いてイヌの片方の鼻腔内に投与した。
（２） 噴霧投与前、投与後、５、１０、１５、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に前肢静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿の総インシュリン（ＢＩＮＳ及びイヌインシュリン）濃度をインシュリン測定用エンザイムイムノアッセイキット（和光純薬製）を用いて測定した。なお、各測定ポイントのＢＩＮＳ血漿中濃度は、各測定値から投与前のイヌインシュリン血漿中濃度を差し引いた値として表した。
実施例６の投与粉末及び比較例８の比較溶液についてのＢＩＮＳ血漿中濃度測定の結果を第８図に示す。
これらの図において、ポイントは３又は４例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＢＩＮＳを０．３ｍｇ／イヌに静脈注射（０．３ｍｇ／ｍｌのＢＩＮＳ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＢＩＮＳ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第６表に示す。
参考例
粉体工学会第１６回製剤と粒子設計シンポジウム要旨集（１９９９年）第１６３〜１６７頁記載の方法に従い、次の方法でＥＣ、酢酸セルロース及び結晶セルロースの吸水性を検討した。
即ち、下端をろ紙で蓋をした崩壊試験用ガラス筒（内径２．１ｃｍ、長さ７．８ｃｍ）に、それぞれ、ＥＣ、酢酸セルロース及び結晶セルロースを１０ｇずつ入れ、他端を下にしてタッピング後、鉛直に保ったまま、深さ１０ｍｍに純水をはった容器に、室温で１分間放置した。
１分後にガラス筒を取り出し、下端から、ガラス筒内容物が水を吸収した上端の部分迄の距離を測定し、吸水性の指標である１分当たりの吸水距離とした。結果を次の第７表に示す。
【産業上の利用可能性】
本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧／吸入された際、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の存在により、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が鼻腔粘膜に付着して滞留し、しかも非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が鼻粘膜の粘液を吸収しないため、生理活性物質及び粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が微量の粘液に溶解し、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が局所的高濃度溶液を生じることになる。この状態で、生理活性物質の濃度勾配を利用し、かつ、高濃度に溶解した粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の作用によって、局所的に鼻粘膜の吸収性自体を向上させて、効率よく生理活性物質を鼻粘膜からその下部に存在する血管系に到達させることができ、生理活性物質の経鼻吸収を促進することができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が、鼻腔内で溶解した薬物を自身で吸い込むことがないため、薬物の利用率を低下させることがない。
しかも、本発明の粉末経鼻投与製剤は、局所点在的に鼻粘膜に作用するため、液状の経鼻投与製剤のように鼻粘膜全体に作用することがなく、鼻粘膜に対する悪影響が少ない。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【技術分野】
本発明は、粉末経鼻投与製剤に関するものであり、生理活性物質と共に、非吸水性かつ難水溶性粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する、鼻粘膜での生理活性物質の吸収が促進された粉末経鼻投与製剤に関する。
【背景技術】
ホルモン、サイトカイン等の生理活性ペプチドは生体内で重要な役割を担っており、生理活性ペプチド自体を大量生産して医薬品として使用すること、生理活性ペプチドを遺伝子工学、タンパク合成の手法によって構造変化、修飾したものを医薬品として使用することが頻繁に行なわれるようになってきている。
しかし、生理活性ペプチドは、経口投与すると消化管内・消化管壁の消化液、酵素により、分解される危険性があり、また、消化管から吸収された場合にも、吸収後最初に肝臓を通過した後、全身に循環するため、肝臓で分解される危険性がある（肝臓による初回通過効果）と共に、親水性の高い生理活性ペプチドは高分子で極性が高いため、消化管粘膜からは通常殆ど吸収されないという問題がある。
このため、生理活性ペプチドは充分な薬効が得られるよう、通常、経口投与ではなく、注射の形態で、皮内や筋肉内或いは直接的に血液循環に生理活性ペプチドを導入することとしているが、注射剤による投与は患者の通院を必要とし、苦痛を伴うことから、在宅投与、無痛投与できる形態が望まれている。
このような形態の１つとして、粘液で覆われた繊毛をもつ上皮細胞及び基底膜からなり、下部に血管系が発達した鼻腔粘膜（とりわけ、上鼻甲介、中鼻甲介、下鼻甲介の粘膜）を経由する経鼻投与が提案されているが、上皮細胞は接合帯で密に結合しているため、分子量の大きな生理活性ペプチド等の透過性は低く、透過性を向上させるために種々の製剤が提案されている。
例えば、特公昭６２−４２８８８号公報には、生理活性を有するポリペプチド類と、水吸収性でかつ水難溶性の基剤（結晶セルロース等）からなる粉末経鼻投与用組成物が記載されており、特開平８−２７０３１号公報には、分子量４００００以下の生理活性物質を平均粒子径２５０μｍ以下の粉末ないし結晶状の多価金属化合物キャリヤ（アルミニウム化合物、カルシウム化合物等）に均一に分散、付着結合させた経鼻吸収用組成物が開示されている。
日本薬学会第２７回製剤セミナー要旨集第１９−２０頁には、分子量１０００以上の水溶性化合物について、薬物担体として、炭酸カルシウム、エチルセルロース、タルク、硫酸バリウムなどの難溶性粉末を用いた場合、経鼻投与におけるバイオアベイラビリティの向上が見られたことが報告されている。
また、特開平１１−３２２５８２号公報には、表面に多数の空隙を有する一次造粒微細結晶等（炭酸カルシウム粉末等）のキャリヤに薬物を均一に分散・吸着させた経鼻投与用組成物が開示されている。
更に、特開２００２−１２８７０４号公報には、生理活性物質、キャリヤ及び生体内吸収促進剤（高置換度ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース）を含む経鼻投与型製剤が記載されており、キャリヤとしては、水溶性高分子化合物（結晶セルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース等のセルロース誘導体）があげられている。
また、特開昭５９−１３０８２０号公報には、カルシトニンに、酢酸、酢酸ナトリウムと共に、非イオン性界面活性剤であるポリソルベイト８０を加えて、精製水に溶解した経鼻投与用水溶液が開示されている。
ファーマシューティカルリサーチ（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）第７巻、第７号第７７２−７７６頁（１９９０年）には、ヒト成長ホルモンの水性緩衝液に高濃度でＮ−アセチル−Ｌ−システイン等を添加し、ラットに経鼻投与するとバイオアベイラビリティが若干向上することが報告されている。
しかしながら、これら経鼻投与製剤は吸収の向上が充分でないという問題があった。
【発明の開示】
本発明は、生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性粉末と共に、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤を提供するものであり、その経鼻投与により、生理活性物質が生体内で活性を示すのに充分な血中濃度を達成することができる。
本発明者らは、生理活性物質に、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を添加して経鼻投与すれば、生理活性物質の経鼻吸収を著しく向上させることができることを見出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は、生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤に関する。
本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧／吸入された際、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の存在により、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が鼻腔粘膜に付着して滞留し、しかも非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が鼻粘膜の粘液を吸収しないため、生理活性物質及び粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が微量の粘液に溶解し、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が局所的高濃度溶液を生じることになる。この状態で、生理活性物質の濃度勾配を利用し、かつ、高濃度に溶解した粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の作用によって、局所的に鼻粘膜の吸収性自体を向上させて、効率よく生理活性物質を鼻粘膜からその下部に存在する血管系に到達させることができ、生理活性物質の経鼻吸収を促進することができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が、鼻腔内で溶解した薬物を自身で吸い込むことがないため、薬物の利用率を低下させることがない。
しかも、本発明の粉末経鼻投与製剤は、局所点在的に鼻粘膜に作用するため、液状の経鼻投与製剤のように鼻粘膜全体に作用することがなく、鼻粘膜に対する悪影響が少ない。
【図面の簡単な説明】
第１図は、サケカルシトニン（以下ＳＣＴ）、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（以下ＮＡＣ）及びエチルセルロース（以下ＥＣ）含有投与粉末をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第２図は、ＳＣＴ、ＮＡＣ及び酢酸セルロース含有投与粉末をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第３図は、ＳＣＴ含有比較粉末（２種）をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第４図は、ＳＣＴ含有比較溶液（２種）をラットに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第５図は、ヒトインシュリンナトリウム塩（以下ＩＮＳ）、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＩＮＳ含有比較溶液をそれぞれラットに経鼻投与した場合の血漿ＩＮＳ濃度の経時変化を示す。
第６図は、ヒト副甲状腺ホルモン１−３４（以下ＰＴＨ）、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＰＴＨ含有比較溶液をそれぞれラットに経鼻投与した場合の血漿ＰＴＨ濃度の経時変化を示す。
第７図は、ＳＣＴ、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＳＣＴ含有比較溶液をそれぞれイヌに経鼻投与した場合の血漿ＳＣＴ濃度の経時変化を示す。
第８図は、ウシインシュリン（以下ＢＩＮＳ）、ＮＡＣ及びＥＣ含有投与粉末、ＢＩＮＳ含有比較溶液をそれぞれイヌに経鼻投与した場合の血漿ＢＩＮＳ濃度の経時変化を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
本発明の粉末経鼻投与製剤に用いられる非吸水性かつ難水溶性物質の粉末において、非吸水性かつ難水溶性物質としては、好ましくは吸水速度が５ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度（２５℃、以下同様）が１００ｍｇ／Ｌ以下の物質、より好ましくは吸水速度が１ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が５０ｍｇ／Ｌ以下の物質、最も好ましくは吸水速度が０．５ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が２０ｍｇ／Ｌ以下の物質をあげることができる。
吸水速度とは、第１６回製剤と粒子設計シンポジウム要旨集（１９９９年）、第１６３〜１６７頁に記載された方法に従い、内径２．１ｃｍのガラス筒に粉末を詰め、ガラス筒を鉛直に保ったまま、下端を純水につけ、ガラス筒の下端側から上方に吸水された水上端のガラス筒下端からの距離を測定したものである。
また、本発明の粉末経鼻投与製剤は気体を用いて鼻腔内に噴霧することによって投与することになるため、全体として粉末状の形態をとるものであり、水等の溶媒を極力含まないものが好ましい。
非吸水性かつ難水溶性物質の具体例としては、非吸水性かつ難水溶性のセルロース誘導体（例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、ニトロセルロース、セルローストリアセテート、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテート・サクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース等）、非吸水性かつ難水溶性の高級脂肪酸及びそのエステルもしくは塩（硬化油、水素添加大豆油、カルナウバロウ、サラシミツロウ、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸、ステアリン酸の塩等）、非吸水性かつ難水溶性の生体内分解性ポリマー（ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸−グリコール酸共重合体等）、非吸水性かつ難水溶性の合成ポリマー（ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル等）、非吸水性かつ難水溶性の多価金属塩（炭酸カルシウム、硫酸バリウム、ヒドロキシアパタイト等）、非吸水性かつ難水溶性の金属酸化物（タルク、二酸化ケイ素、酸化チタン等）各種のものを使用することができるが、非吸水性かつ難水溶性のセルロース誘導体を用いるのが好ましく、とりわけ、エチルセルロース、酢酸セルロースを用いるのが好ましく、特に、非吸水性の点では高置換度のエチルセルロース、酢酸セルロースが好ましい。
ここに、高置換度とは、セルロース分子を構成するＬ−グルコースの水酸基のうち、Ｌ−グルコース同士の結合に使用されていない水酸基の水素原子が置換基で平均７０％以上、好ましくは平均８０％以上、とりわけ好ましくは平均８５％以上が置換されているものである。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末としては、粉末粒子の表面に鼻粘膜粘液等が付着しにくい方がよいため、粉末粒子の表面に多数の空隙を有していないものが好ましく、粉末の平均粒子径は、粉末経鼻投与製剤に含まれる生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の種類、使用の形態等にもよるが、通常、５〜２００μｍの範囲であればよく、２０〜１５０μｍの範囲であるのが好ましく、３０〜１２０μｍの範囲であるのが更に好ましく、４０〜１００μｍの範囲であるのが最も好ましい。
非吸水性かつ難水溶性物質の粉末は、市販されている粉末製品をそのまま使用してもよいが、固形の非吸水性かつ難水溶性物質を加工し又は市販の粉末製品を更に加工して、所望の粒子径、形状として使用することもできる。 また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末は、１つの非吸水性かつ難水溶性物質の粉末であっても、複数の非吸水性かつ難水溶性物質の粉末であってもよい。
非吸水性かつ難水溶性物質を加工する方法としては、慣用の微粒子形成法を適宜使用することができ、例えば、ジェットミル粉砕、ハンマーミル粉砕、回転型ボールミル粉砕、振動ボールミル粉砕、ビーズミル粉砕、シェーカーミル粉砕、ロッドミル粉砕、チューブミル粉砕等により物理的に粉砕する方法；非吸水性かつ難水溶性物質を一旦溶媒に溶解後、温度変化、溶媒組成の変更等を行なって晶析させ、遠心分離或いはろ過等の方法で回収する晶析法；非吸水性かつ難水溶性物質を一旦溶媒に溶解後、スプレーノズルを用いてスプレードライヤーの乾燥室内に噴霧し、短時間に噴霧液内の溶媒を揮発させるスプレードライ法等が採用される。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末は、粒子径のバラツキを抑えるために、篩過、重力沈降式分級、遠心力分級、気流の流れによる慣性力式分級等の方法で粒子径が一定範囲になるように、処理を行なってもよい。
粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２とは、（ａ）粘液溶解剤、（ｂ）非イオン性界面活性剤並びに（ｃ）粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤のいずれかであることを表し、（ａ）〜（ｃ）のいずれにおいても、粘液溶解剤、非イオン性界面活性剤は、それぞれ、１つの成分のみからなるものであっても、複数の成分からなるものであってもよい。
粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤としては、生理活性物質の粘膜吸収を促進させるものであればよいが、鼻粘膜への刺激性等の悪影響が少なく、少量で鼻粘膜からの吸収を著しく向上させるものが好ましく、粘液溶解剤単独、又は粘液溶解剤と非イオン性界面活性剤との組合せを使用するのがより好ましく、鼻粘膜への刺激性の点からは粘液溶解剤を使用するのが最も好ましい。
粘液溶解剤の好ましい例としては、システイン誘導体、活性ＳＨ基含有アルコールがあげられる。システイン誘導体としては、例えば、Ｎ−アセチルシステイン等のＮ−（Ｃ２〜５アルカノイル）システイン、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−エチルシステイン等のＳ−（Ｃ１〜４アルキル）システイン、Ｓ−カルボキシメチルシステイン等のＳ−（Ｃ２〜５カルボキシアルキル）システインがあげられる。
また、システイン誘導体としては、システイン含有ペプチドも含まれ、例えば、トリペプチドの１種であるグルタチオン類があげられる。グルタチオン類の具体例としては、グルタチオンのほか、グルタチオンＣ１〜８アルキルエステル等のグルタチオンエステル類（米国特許第４７８４６８５号参照）があげられる。
これらシステイン誘導体におけるシステインには、ＤＬ体、Ｌ体、Ｄ体が含まれるが、特に、Ｌ−システインが好ましい。
活性ＳＨ基含有アルコールとしては、Ｃ３〜６の活性ＳＨ基含有アルコール、より具体的には１，４−ジチオスレイトールがあげられる。
非イオン性界面活性剤としては、タンパク変性能が小さく、膜可溶化能が小さい非イオン性界面活性剤が好ましい。
そのような非イオン性界面活性剤としては、ポリオキシエチレン−Ｃ１０〜１４アルキルエーテル、ポリオキシエチレン−（Ｃ６〜１０アルキル−フェニル）エーテル、Ｃ６〜１０アルキル−グルコースエーテル及びＮ−（Ｃ６〜１０アルキル）カルバモイル−Ｃ１〜４アルキル−グルコースエーテル等があげられる。
ポリオキシエチレン−Ｃ１０〜１４アルキルエーテル及びポリオキシエチレン−（Ｃ６〜１０アルキル−フェニル）エーテルとしては、ポリオキシエチレン部分が全体の６５〜９０重量％の範囲のものが好ましく、具体的には平均分子量が５６０〜１３００であるポリオキシエチレン−ラウリルエーテル［例えば、ニッコール製ＢＬ−９：ポリオキシエチレン（９）ラウリルエーテル；ＢＬ−２５：ポリオキシエチレン（２５）ラウリルエーテル］；平均分子量が６００〜８００であるポリオキシエチレン−オクチルフェニルエーテル、特に、平均分子量が６００〜８００であるポリオキシエチレン−ｔｅｒｔ−オクチルフェニルエーテル［例えば、ナカライ製トリトンＸ−１００：ポリオキシエチレン（９−１０）ｐ−ｔｅｒｔ−オクチルフェニルエーテル、トリトンＸ−１０２：ポリオキシエチレン（１２−１３）ｐ−ｔｅｒｔ−オクチルフェニルエーテル］；平均分子量が６００〜７００であるポリオキシエチレン−ノニルフェニルエーテル、特に、平均分子量が６００〜７００であるポリオキシエチレン−ｎ−ノニルフェニルエーテル［例えば、ニッコール製ＮＰ−１０：ポリオキシエチレン（１０）ｐ−ｎ−ノニルフェニルエーテル］をあげることができる。
Ｃ６〜１０アルキル−グルコースエーテル及びＮ−（Ｃ６〜１０アルキル）カルバモイル−Ｃ１〜４アルキル−グルコースエーテルとしては、グルコース部分が全体の５０〜６５重量％の範囲のものが好ましく、具体的には、１−Ｏ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、特に、１−Ｏ−ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド；６−Ｏ−（Ｎ−ヘプチルカルバモイル）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、特に、６−Ｏ−（Ｎ−ｎ−ヘプチルカルバモイル）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシドをあげることができる。
更に、非イオン性界面活性剤としては、５０％の赤血球を溶血させる水溶液における非イオン性界面活性剤の濃度が１重量％以上、とりわけ、５重量％以上であるようなものが、鼻粘膜への悪影響が少ない点で好ましい。
ここに、５０％の赤血球を溶血させる水溶液における非イオン性界面活性剤の濃度は、様々な濃度に調整した非イオン性界面活性剤の生理食塩水溶液に、赤血球を０．２重量％の割合で加え、３７°Ｃで１０分間放置後に、上清におけるヘモグロビンの吸光度（５４０ｎｍ）を測定し、精製水に赤血球を同割合で添加して完全に溶血させた場合の吸光度を１００％として、各非イオン性界面活性剤濃度での赤血球の溶血率を算出し、内挿法により、５０％の溶血率となる非イオン性界面活性剤の濃度を推定したものである。
生理活性物質としては、鼻粘膜に対する刺激が少ない薬物であれば、特に制限はないが、経鼻投与によっては大量の製剤を投与することができないため、少量で薬効を発現する生理活性物質が好ましい。また、本発明の粉末経鼻投与製剤は経鼻吸収されにくい生理活性物質に適用した場合、生理活性物質の経鼻吸収の向上が顕著となるため、生理活性物質として親水性難吸収性物質を使用するのが好ましい。
なお、難吸収性とは生理活性物質の水溶液を噴霧により、ヒトに経鼻投与した場合には、その５％以下しか経鼻吸収されないことをいう。
かかる生理活性物質としては、抗生物質、増血剤、感染症治療剤、抗痴呆剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗アレルギー剤、向精神薬、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張剤、降圧剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、コレステロール低下剤、骨粗しょう症治療剤、ホルモン剤、ワクチン等として用いられるものがあげられる。
これらには低分子生理活性物質と共に、ペプチド性生理活性物質、多糖類系生理活性物質等が含まれるが、本発明の粉末経鼻投与製剤はペプチド性生理活性物質、多糖類系生理活性物質に適用する場合に顕著な効果を示し、とりわけ、ペプチド性生理活性物質に適用するのが好ましい。
ペプチド性生理活性物質としては、アンタゴニスト、アゴニスト又はこれらの可溶性レセプター及びこれらの誘導体もあげられ、また、糖鎖を有するものについてはその構造が異なるものも含まれる。場合によっては、ポリエチレングリコール等の合成ポリマー、ヒアルロン酸等の天然ポリマーで修飾されていてもよく、ガラクトース、マンノース等の任意の糖、或いは糖鎖又は非ペプチド性化合物で修飾されていてもよい。またリン脂質、脂肪酸等のペプチド性生理活性物質に脂溶性を付加するものでもよい。これらペプチド性生理活性物質は、分子量２００〜２０００００、好ましくは分子量２００〜５００００、更に好ましくは分子量２００〜２５０００、最も好ましくは分子量２００〜１００００のものである。
好ましいペプチド性生理活性物質としては、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に作用する因子、中枢及び末梢神経系に作用する因子等が含まれ、具体例としては次のものがあげられる。
サイトカインとしては、インターフェロン類（例えば、インターフェロン−α、−β、−γ）、インターロイキン類（例えば、インターロイキン−１〜１１）、腫瘍壊死因子（例えば、ＴＮＦ−α、−β）、悪性白血病阻止因子（ＬＩＦ）、造血因子［例えば、エリスロポエチン、スロンボポエチン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）］等があげられる。
ペプチドホルモンとしては、インシュリン、成長ホルモン、性腺刺激ホルモン、メラニン細胞刺激ホルモン、黄体刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）及びその誘導体（ゴセレリン、ブセレリン、リュープロレリン）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）及びその誘導体（タルチレリン）、カルシトニン等があげられる。
成長因子としては、神経成長因子類（例えば、ＮＧＦ、ＮＧＦ−２／ＮＴ−３）、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、インシュリン様成長因子（ＩＧＦ）、形質転換成長因子（ＴＧＦ）、血小板由来細胞成長因子（ＰＤＧＦ）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）等があげられる。
心臓血管系に作用する因子としては、エンドセリン、エンドセリンインヒビター、エンドセリンアンタゴニスト、エンドセリン生成酵素阻害剤、デスモプレッシン、レニン、アンジオテンシンＩ〜ＩＩＩ、心房ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）等があげられる。
中枢及び末梢神経系に作用する因子としては、エンケファリン、エンドルフィン、ダイノルフィン、ネオエンドルフィン等があげられる。
これらのペプチド性生理活性物質には、ポリペプチドの可溶性レセプターをその概念に含む。これらのペプチド性生理活性物質にはそれぞれポリエチレングリコールのようなポリマー、あるいはコンドロイチン、多糖類のような天然ポリマー、又は非ペプチド性物質で化学的に修飾されたものを含んでもよい。ここでいう非ペプチド性物質はレセプターに対するリガンドでもよいし、抗体に対する抗原でもよい。更に、上記ペプチド性生理活性物質は複数のペプチドが化学的な方法又は遺伝子組み換え技術により結合されたものを含んでもよい。
多糖類系整理活性物質としては、低分子ヘパリン、ヘパリン類似物質等をあげることができる。
また、本発明の粉末経鼻投与製剤は、投与後直ぐに生理活性物質が鼻腔粘膜下の血管系から体内に取り込まれ、投与から薬効発現迄の時間が短いため、オンセット時間（薬物を投与後、薬効が発現するまでの時間）が短いことが治療上有用である生理活性物質にも好適に使用することができる。
このため、本発明の粉末経鼻投与製剤は、例えば、麻薬性鎮痛薬（例えば、アルカロイド系麻薬）、片頭痛治療薬［例えば、５−ヒドロキシトリプタミン（ＨＴ）１受容体アゴニスト、ニューロキニン（ＮＫ）１受容体拮抗薬、ｉＧｌｕＲ５受容体拮抗薬、βアドレナリン遮断薬］、乗り物酔い薬［例えば、中枢性抗コリン作動薬、抗ヒスタミン薬、５−ヒドロキシトリプタミン（ＨＴ）１受容体アゴニスト］、制吐剤［例えば、ニューロキニン（ＮＫ）１受容体拮抗薬、５−ヒドロキシトリプタミン（ＨＴ）３受容体拮抗薬］、性機能改善薬［例えば、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）５阻害薬、α−メラニン細胞刺激ホルモン（ＭＳＨ）アナログ、ドーパミンＤ２受容体アゴニスト、非ステロイド性アンドロゲン受容体調節薬］、糖尿病薬（例えば、インシュリン）、低血糖時の救急処置薬（例えばグルカゴン）等の生理活性物質にも好適に適用することができる。
本発明の粉末経鼻投与製剤における配合比率は、生理活性物質の種類、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の種類、これらの使用形態等様々な要因にもよるが、生理活性物質が全体の０．１〜８０重量％、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が全体の１５〜９９．４重量％、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が全体の０．５〜５重量％の範囲で使用することができる。
本発明の粉末経鼻投与製剤の投与（噴霧／吸入）量は通常３〜５０ｍｇ／回、好ましくは５〜２０ｍｇ／回とするのが好ましいが、このような少ない投与（噴霧／吸入）量でも、本発明の粉末経鼻投与製剤は少量の非吸水性かつ難水溶性物質の粉末、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を使用するだけで優れた経鼻吸収促進作用が得られるため、生理活性作用を発現させるために比較的大きな体内吸収量（１ｍｇ／人／回程度）が必要な生理活性物質迄も経鼻吸収させることができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末はそれ自体鼻粘膜で生理活性作用を示さないため、小さな投与（噴霧／吸入）量で充分に生理活性作用を示す生理活性物質を経鼻吸収させる場合には、１回の噴霧／吸入で投与される生理活性物質の量のバラツキを抑制するために、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末を意図的に増量することもできる。
本発明の粉末経鼻投与製剤に含まれる生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤は、粉末状態で非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と混合して本発明の粉末経鼻投与製剤とすることができ、そのまま使用することができるが、この場合には鼻腔内に投与する際、各成分が噴霧／吸入によって分離してしまわないように、粉末粒子の密度、粒子径を調整するのが好ましい。
例えば、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の外形から計算される密度が、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の外形から計算される密度の０．７〜１．５倍、好ましくは０．８〜１．３倍の範囲内であり、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の粉末の粒子径が非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の０．３〜１．２倍、好ましくは０．４〜１．１倍の範囲となるようにするのが好ましい。
生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤も、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末を形成する際に使用する手法を使用して粉末化、粒子径調整をすることができるが、生理活性物質がペプチド性のものである場合には、ペプチド性生理活性物質及びポリエチレングリコールの混合水溶液を凍結乾燥し、得られた固形物に、ポリペプチドは溶解しないがポリエチレングリコールを溶解する有機溶媒を添加するか（特開平１１−３０２１５６号）、ペプチド性生理活性物質及び相分離誘起剤を含有する水溶液の凍結物に、ペプチド非溶解性の水混和性有機溶媒を添加し（ＷＯ０２／３０４４９）、生成する懸濁液からペプチド性生理活性物質の粉末を回収することにより、生理活性を保持したまま、粉末化を行なうことができる。
また、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤は、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の表面に固定して本発明の粉末経鼻投与製剤とすることもでき、この形で使用することもできる。
例えば、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を水性溶媒（例えば、水、水性エタノール、水性アセトン、水性メタノール、水性アセトニトリル）に溶解し、この溶液を非吸水性かつ難水溶性物質の粉末に添加し、減圧乾燥、常温乾燥、凍結乾燥等の方法で乾燥させ、必要に応じて篩過することによって、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の表面に、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を固定することができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の混合物に水性溶媒（例えば、水、水性エタノール、水性アセトン、水性メタノール、水性アセトニトリル）を添加して練合し、乾燥後に再度所望の粒子径になるよう粉砕、篩過することにより、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末に、生理活性物質及び／又は粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤を固定して本発明の粉末経鼻投与製剤とすることもできる。
なお、本発明の粉末経鼻投与製剤は、乾燥状態で投与されるものであり、溶媒は一切添加しないが、他の粉末固形成分は鼻粘膜に悪影響がなく、かつ、経鼻吸収を妨げないものであれば、生理活性物質の１回の投与（噴霧／吸入）量が一定となるように増量し、生理活性物質の安定性を向上させるために、他の添成分を少量添加することもできる。
かかる少量添加成分としては、例えば、滑沢剤［タルク、ステアリン酸およびその塩（ナトリウム塩、カルシウム塩）、カープレックス等］、結合剤（デンプン、デキストリン等）、ｐＨ調節剤（クエン酸、グリシン等）、保存剤（アスコルビン酸等）、防腐剤（パラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クロロブタノール等）、矯臭剤（メントール、カンキツ香料等）をあげることができる。
本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧することによって投与することができ、所定量を空気又は人体に悪影響のないガス（空気、窒素ガス、アルゴンガス、二酸化炭素ガス、代替フロンガス等）で粉末経鼻投与製剤を鼻腔内に噴霧すればよい。
噴霧する方法としては、慣用の経鼻投与用器具を何れも使用することができ、例えば、定量噴射式の加圧投与用器具に本発明の粉末経鼻投与製剤を充填し、定量ずつ鼻腔内に噴霧する方法、本発明の粉末経鼻投与製剤を一定量ずつカプセル等に充填し、必要時に、そのまま加圧投与用器具に装着し、穿孔等により粉末経鼻投与製剤を噴霧できるようにした上で、空気又は人体に悪影響のないガスで鼻腔内に噴霧する方法等が考えられる。
また、噴霧する際の空気又は人体に悪影響のないガスの噴出速度は、粉末経鼻投与製剤の構成成分が、鼻腔粘膜のうち、最も吸収効率がよい上鼻甲介、中鼻甲介、下鼻甲介の粘膜に大部分が到達するように、調節するのが好ましく、ガスの噴出速度と共に、経鼻投与される患者が投与時に鼻から吸引するタイミングに合せて噴霧することにより、より効率的に粉末経鼻投与製剤を吸収部位に到達させることができる。
更に、本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧することなく、吸引のみにより、経鼻吸収することも可能であり、本発明の粉末経鼻投与製剤を一定量ずつブリスターパック等に充填し、必要時に、そのまま吸引器具に装着し、加圧等により粉末経鼻投与製剤を取り出すことができるようにした上で、吸引することにより、鼻腔内に粉末経鼻投与製剤を到達させることもできる。
なお、本発明の粉末経鼻投与製剤は、経肺投与、経咽頭粘膜投与等にも使用することもでき、投与方法に応じた慣用の投与器具（経肺投与用噴霧／吸入器具、経咽頭粘膜投与用噴霧器具等）を用いて、患者に投与することができる。
【実施例】
次に、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
サケカルシトニン（分子量３４３１．９、ＢＡＣＨＥＭ社製、平均粒子径３６．６μｍ、以下、ＳＣＴ）１．０ｍｇ、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（フルカ製、平均粒子径４５．８μｍ、以下、ＮＡＣ）１．５ｍｇ及びエチルセルロース（ダウケミカル製、エトセル＃１０、平均粒子径８１．４μｍ、エチル化度８７〜９０％、以下ＥＣ）２７．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例２】
ＳＣＴ１．０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及び酢酸セルロース（片山化学製、平均粒子径８８．０μｍ、アセチル化度５３〜５６％、以下同様）２７．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例３】
ヒトインシュリンナトリウム塩（分子量５７４９．５、シグマ製、以下、ＩＮＳ）１０ｍｇを３０％エタノール水溶液０．３ｍｌに溶解し、この溶液をＥＣ９０ｍｇに添加し、室温にて一夜減圧乾燥することにより、ＩＮＳ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＩＮＳ及びＥＣの混合粉末１０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及びＥＣ１８．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例４】
ヒト副甲状腺ホルモン１−３４（分子量４１１７．８、ＢＡＣＨＥＭ社製、以下、ＰＴＨ）５ｍｇを３０％エタノール水溶液０．３ｍｌに溶解し、この溶液をＥＣ４５ｍｇに添加し、室温にて一夜減圧乾燥することにより、ＰＴＨ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＰＴＨ及びＥＣの混合粉末１０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及びＥＣ１８．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例５】
ＳＣＴ１０ｍｇを３０％エタノール水溶液０．３ｍｌに溶解し、この溶液をＥＣ９０ｍｇに添加し、室温にて一夜減圧乾燥することにより、ＳＣＴ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＳＣＴ及びＥＣの混合粉末３０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及びＥＣ６８．５ｍｇをよく混合し、投与粉末を得た。
【実施例６】
ウシインシュリン（分子量５８００、シグマ製、以下、ＢＩＮＳ）３ｇを０．１Ｎ−ＨＣｌを含む２０％エタノール水溶液６０ｇに溶解し、この溶液をＥＣ９７ｇに添加し、小型ハイスピードミキサーにて攪拌・混合した後、５０℃にて４時間乾燥することにより、ＢＩＮＳ及びＥＣの混合粉末を得た。同様にＮＡＣ１．５ｇを２０％エタノール水溶液６０ｇに溶解し、この溶液をＥＣ９８．５ｇに添加し、小型ハイスピードミキサーにて攪拌・混合した後、５０℃にて４時間乾燥することにより、ＮＡＣ及びＥＣの混合粉末を得た。こうして得られたＢＩＮＳ及びＥＣの混合粉末とＮＡＣ及びＥＣの混合粉末を等量ずつよく混合し、投与粉末を得た。
製造例１
ディスポーザブルチップ（ニチリョー製、２００μｌ用）、三方コック（テルモ製）及び１ｍｌ注射筒（テルモ製）をこの順序で接続し、粉末経鼻投与用のデバイスを作成した。
このデバイスのディスポーザブルチップの先端部に、投与粉末を充填し、注射筒より空気を送り込むことによって、投与粉末を鼻腔内に噴霧することとした。
比較例１〜２
ＳＣＴ１．０ｍｇ、ＮＡＣ１．５ｍｇ及び次の第１表に示す成分２７．５ｍｇをよく混合し、比較粉末を得た。
比較例３
ＳＣＴ１．０ｍｇを注射用生理食塩水（大塚製薬製、以下、同様）０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例４
ＳＣＴ１．０ｍｇ及びＮＡＣ２．５ｍｇを注射用生理食塩水０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例５
ＩＮＳ１．０ｍｇを注射用生理食塩水０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例６
ＰＴＨ１．０ｍｇを注射用生理食塩水０．０５ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例７
ＳＣＴ３．０ｍｇを注射用生理食塩水１．０ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
比較例８
ＢＩＮＳ３．０ｍｇを注射用生理食塩水１．０ｍｌに溶解し、比較溶液を得た。
実験例１
（１） ウイスター系雄性ラット（９〜１１週齢、体重：１９０〜２６０ｇ、日本ＳＬＣ）を１２時間照明、室温２３±２°Ｃ、自由摂水・摂餌の条件で１週間馴化させた。その後、実験前約２０時間絶食させ、ペントバルビタール（ナカライ製）５０ｍｇ／ｋｇで麻酔後、インターナショナル・ジャーナル・オブ・ファーマシューティックス（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ）、第７巻、３１７〜３２５頁（１９８１年）に記載の方法に従い、経鼻投与のための手術を施した。
（２） 手術を施したラットに、製造例１で作成した粉末経鼻投与用デバイスを用い、検体投与群のラットには、ラットの片方の鼻腔内に、実施例１又は２で調製した投与粉末をＳＣＴ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。
一方、比較群には、ラットの片方の鼻腔内に、比較例１又は２で調製した比較粉末をＳＣＴ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。或いは比較例３又は４で調製した比較溶液をＳＣＴ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるようマイクロピペットを用いてラットの片方の鼻腔内に投与した。
（３） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に頚静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を０．１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿のＳＣＴ濃度をＳＣＴ測定用エンザイムイムノアッセイキット（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用いて測定した。
実施例１及び２の投与粉末についてのＳＣＴ血漿中濃度測定の結果をそれぞれ第１図及び第２図に示し、比較例１及び２の比較粉末並びに比較例３及び４の比較溶液についてのＳＣＴ血漿中濃度測定の結果をそれぞれ第３図及び第４図に示す。
これらの図において、ポイントは３〜５例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＳＣＴを０．１ｍｇ／ラットに静脈注射（５００μｇ／ｍｌのＳＣＴ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＳＣＴ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第２表に示す。
実験例２
（１） 実験例１（１）で得られたラットに、製造例１で作成した粉末経鼻投与用デバイスを用い、検体投与群のラットには、ラットの片方の鼻腔内に、実施例３で調製した投与粉末をＩＮＳ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。
一方、比較群には、ラットの片方の鼻腔内に、マイクロピペットを用い、比較例５の比較溶液をＩＮＳ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう投与した。
（２） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に頚静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を０．１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿の総インシュリン（ＩＮＳ及びラットインシュリン）濃度をインシュリン測定用エンザイムイムノアッセイキット（和光純薬製）を用いて測定した。なお、各測定ポイントのＩＮＳ血漿中濃度は、各測定値から投与前のラットインシュリン血漿中濃度を差引いた値として表した。
実施例３の投与粉末並びに比較例５の比較溶液についてのＩＮＳ血漿中濃度測定の結果を第５図に示す。
これらの図において、ポイントは５又は７例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＩＮＳを０．０１ｍｇ／ラットに静脈注射（２００μｇ／ｍｌのＩＮＳ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＩＮＳ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第３表に示す。
実験例３
（１） 実験例１（１）で得られたラットに、製造例１で作成した粉末経鼻投与用デバイスを用い、検体投与群のラットには、ラットの片方の鼻腔内に、実施例４で調製した投与粉末をＰＴＨ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう噴霧投与した。
一方、比較群には、ラットの片方の鼻腔内に、マイクロピペットを用い、比較例６の比較溶液をＰＴＨ投与量が０．１ｍｇ／ラットとなるよう投与した。
（２） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に頚静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を０．１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿のＰＴＨ濃度をＰＴＨ測定用エンザイムイムノアッセイキット（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用いて測定した。
実施例４の投与粉末並びに比較例６の比較溶液についてのＰＴＨ血漿中濃度測定の結果を第６図に示す。
これらの図において、ポイントは７例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＰＴＨを０．０１ｍｇ／ラットに静脈注射（２００μｇ／ｍｌのＰＴＨ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＰＴＨ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第４表に示す。
実験例４
（１） 雄性ビーグル犬（２歳、体重１２．２〜１５．１ｋｇ、北山ラベス）を実験前約２０時間絶食させ、ペントバルビタール（ナカライ製）４０ｍｇ／ｋｇで麻酔後、粉末経鼻投与用デバイス（Ｂｉ−Ｄｏｓｅ Ｎａｓａｌ Ｐｏｗｄｅｒ ｄｅｖｉｃｅ，Ｐｆｅｉｆｆｅｒ社製）を用い、検体投与群のイヌには、イヌの片方の鼻腔内に、実施例５で調製した投与粉末をＳＣＴ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるよう投与した。
一方、比較群には、イヌの片方の鼻腔内に、比較例７で調製した比較溶液をＳＣＴ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるようマイクロピペットを用いてイヌの片方の鼻腔内に投与した。
（３） 噴霧投与後、５、１０、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に前肢静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿のＳＣＴ濃度をＳＣＴ測定用エンザイムイムノアッセイキット（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用いて測定した。
実施例５の投与粉末及び比較例７の比較溶液についてのＳＣＴ血漿中濃度測定の結果を第７図に示す。
これらの図において、ポイントは５例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＳＣＴを５ｍｇ／イヌに静脈注射（２．５ｍｇ／ｍｌのＳＣＴ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＳＣＴ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第５表に示す。
実験例５
（１） 雄性ビーグル犬（３歳、体重１１．３〜１６．２ｋｇ、北山ラベス）を実験前約２０時間絶食させ、ペントバルビタール（ナカライ製）４０ｍｇ／ｋｇで麻酔後、粉末経鼻投与用デバイス（Ｂｉ−Ｄｏｓｅ Ｎａｓａｌ Ｐｏｗｄｅｒ ｄｅｖｉｃｅ，Ｐｆｅｉｆｆｅｒ社製）を用い、検体投与群のイヌには、イヌの片方の鼻腔内に、実施例６で調製した投与粉末をＢＩＮＳ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるよう投与した。
一方、比較群には、イヌの片方の鼻腔内に、比較例８で調製した比較溶液をＢＩＮＳ投与量が０．３ｍｇ／イヌとなるようマイクロピペットを用いてイヌの片方の鼻腔内に投与した。
（２） 噴霧投与前、投与後、５、１０、１５、２０、３０、４５、６０、９０及び１２０分後に前肢静脈よりヘパリン（持田製薬製）で処理した注射筒（テルモ製、２５Ｇ）で血液を１ｍｌずつサンプリングし、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、３分）して血漿を得た。血漿の総インシュリン（ＢＩＮＳ及びイヌインシュリン）濃度をインシュリン測定用エンザイムイムノアッセイキット（和光純薬製）を用いて測定した。なお、各測定ポイントのＢＩＮＳ血漿中濃度は、各測定値から投与前のイヌインシュリン血漿中濃度を差し引いた値として表した。
実施例６の投与粉末及び比較例８の比較溶液についてのＢＩＮＳ血漿中濃度測定の結果を第８図に示す。
これらの図において、ポイントは３又は４例の平均値を、バーは標準偏差を示す。
また、これらの図において、常法により、ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）を算出し、別途、ＢＩＮＳを０．３ｍｇ／イヌに静脈注射（０．３ｍｇ／ｍｌのＢＩＮＳ注射用生理食塩水溶液を使用）した場合のＢＩＮＳ血漿中濃度測定結果から算出したＡＵＣとの対比により、経鼻投与時のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を算出した。結果を次の第６表に示す。
参考例
粉体工学会第１６回製剤と粒子設計シンポジウム要旨集（１９９９年）第１６３〜１６７頁記載の方法に従い、次の方法でＥＣ、酢酸セルロース及び結晶セルロースの吸水性を検討した。
即ち、下端をろ紙で蓋をした崩壊試験用ガラス筒（内径２．１ｃｍ、長さ７．８ｃｍ）に、それぞれ、ＥＣ、酢酸セルロース及び結晶セルロースを１０ｇずつ入れ、他端を下にしてタッピング後、鉛直に保ったまま、深さ１０ｍｍに純水をはった容器に、室温で１分間放置した。
１分後にガラス筒を取り出し、下端から、ガラス筒内容物が水を吸収した上端の部分迄の距離を測定し、吸水性の指標である１分当たりの吸水距離とした。結果を次の第７表に示す。
【産業上の利用可能性】
本発明の粉末経鼻投与製剤は、鼻腔内に噴霧／吸入された際、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の存在により、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が鼻腔粘膜に付着して滞留し、しかも非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が鼻粘膜の粘液を吸収しないため、生理活性物質及び粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が微量の粘液に溶解し、生理活性物質、粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤が局所的高濃度溶液を生じることになる。この状態で、生理活性物質の濃度勾配を利用し、かつ、高濃度に溶解した粘液溶解剤・非イオン性界面活性剤の作用によって、局所的に鼻粘膜の吸収性自体を向上させて、効率よく生理活性物質を鼻粘膜からその下部に存在する血管系に到達させることができ、生理活性物質の経鼻吸収を促進することができる。
また、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が、鼻腔内で溶解した薬物を自身で吸い込むことがないため、薬物の利用率を低下させることがない。
しかも、本発明の粉末経鼻投与製剤は、局所点在的に鼻粘膜に作用するため、液状の経鼻投与製剤のように鼻粘膜全体に作用することがなく、鼻粘膜に対する悪影響が少ない。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤。
【請求項２】
非吸水性かつ難水溶性物質が、吸水速度が５ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が１００ｍｇ／Ｌ（２５℃）以下の物質である請求の範囲第１項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項３】
非吸水性かつ難水溶性物質が、吸水速度が１ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が５０ｍｇ／Ｌ（２５℃）以下の物質である請求の範囲第２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項４】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と共に、粘液溶解剤又は粘液溶解剤と非イオン性界面活性剤との組合せを含有する請求の範囲第１〜３項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項５】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と共に、粘液溶解剤を含有する請求の範囲第４項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項６】
生理活性物質が親水性難吸収性物質である請求の範囲第１〜５項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項７】
生理活性物質が、オンセット時間が短いことが治療上有用である生理活性物質である請求の範囲第１〜５項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項８】
非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の平均粒子径が５〜２００μｍの範囲であり、生理活性物質の粉末並びに粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２の粉末が、噴霧／吸引時の飛散状態が非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と同じになるように、これらの密度及び粒子径が調整されている請求の範囲第１項、第２項、第３項、第６項又は第７項に記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項９】
非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の平均粒子径が５〜２００μｍの範囲であり、その表面に生理活性物質並びに／或いは粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２が固定されている請求の範囲第１項、第２項、第３項、第６項又は第７項に記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１０】
生理活性物質が全体の０．１〜８０重量％、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が全体の１５〜９９．４重量％、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２が全体の０．５〜５重量％である請求の範囲第１〜９項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１１】
非吸水性かつ難水溶性物質が、非吸水性かつ難水溶性セルロース誘導体である請求の範囲第２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１２】
粘液溶解剤がシステイン誘導体又は活性ＳＨ基含有アルコールである請求の範囲第１〜１１項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１３】
システイン誘導体がＮ−（Ｃ２−５アルカノイル）システイン、Ｓ−（Ｃ１−４アルキル）システイン、Ｓ−（Ｃ２−５カルボキシアルキル）システイン及びグルタチオン類からなる群より選ばれる少なくとも１である請求の範囲第１２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１４】
粘液溶解剤がＮ−アセチル−Ｌ−システイン、Ｓ−メチル−Ｌ−システイン、Ｓ−エチル−Ｌ−システイン、Ｓ−カルボキシメチル−Ｌ−システイン及び１，４−ジチオスレイトールからなる群より選ばれる少なくとも１である請求の範囲第１２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１５】
非イオン性界面活性剤がポリオキシエチレン−Ｃ１０−１４アルキルエーテル、ポリオキシエチレン−（Ｃ６−１０アルキル−フェニル）エーテル、Ｃ６−１０アルキル−グルコースエーテル及びＮ−（Ｃ６−１０アルキル）カルバモイル−Ｃ１−４アルキル−グルコースエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１である請求の範囲第１〜４項、及び第６〜１４項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１６】
非イオン性界面活性剤が、赤血球を５０％溶血させる濃度が１重量％以上である非イオン性界面活性剤である請求の範囲第１５項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１７】
生理活性物質がペプチド性生理活性物質又は多糖類系生理活性物質である請求の範囲第１〜１６項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１８】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性のエチルセルロース粉末又は酢酸セルロース粉末及びＮ−アセチル−Ｌ−システインを含有する粉末経鼻投与製剤。
【請求項１９】
生理活性物質及び／又はＮ−アセチル−Ｌ−システインが、非吸水性かつ難水溶性のエチルセルロース粉末又は酢酸セルロース粉末の表面に固定されている請求の範囲第１８項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末並びに、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２を含有する粉末経鼻投与製剤。
【請求項２】
非吸水性かつ難水溶性物質が、吸水速度が５ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が１００ｍｇ／Ｌ（２５℃）以下の物質である請求の範囲第１項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項３】
非吸水性かつ難水溶性物質が、吸水速度が１ｍｍ／分以下であり、水に対する溶解度が５０ｍｇ／Ｌ（２５℃）以下の物質である請求の範囲第２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項４】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と共に、粘液溶解剤又は粘液溶解剤と非イオン性界面活性剤との組合せを含有する請求の範囲第１〜３項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項５】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と共に、粘液溶解剤を含有する請求の範囲第４項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項６】
生理活性物質が親水性難吸収性物質である請求の範囲第１〜５項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項７】
生理活性物質が、オンセット時間が短いことが治療上有用である生理活性物質である請求の範囲第１〜５項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項８】
非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の平均粒子径が５〜２００μｍの範囲であり、生理活性物質の粉末並びに粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２の粉末が、噴霧／吸引時の飛散状態が非吸水性かつ難水溶性物質の粉末と同じになるように、これらの密度及び粒子径が調整されている請求の範囲第１項、第２項、第３項、第６項又は第７項に記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項９】
非吸水性かつ難水溶性物質の粉末の平均粒子径が５〜２００μｍの範囲であり、その表面に生理活性物質並びに／或いは粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２が固定されている請求の範囲第１項、第２項、第３項、第６項又は第７項に記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１０】
生理活性物質が全体の０．１〜８０重量％、非吸水性かつ難水溶性物質の粉末が全体の１５〜９９．４重量％、粘液溶解剤及び非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれる１又は２が全体の０．５〜５重量％である請求の範囲第１〜９項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１１】
非吸水性かつ難水溶性物質が、非吸水性かつ難水溶性セルロース誘導体である請求の範囲第２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１２】
粘液溶解剤がシステイン誘導体又は活性ＳＨ基含有アルコールである請求の範囲第１〜１１項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１３】
システイン誘導体がＮ−（Ｃ２−５アルカノイル）システイン、Ｓ−（Ｃ１−４アルキル）システイン、Ｓ−（Ｃ２−５カルボキシアルキル）システイン及びグルタチオン類からなる群より選ばれる少なくとも１である請求の範囲第１２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１４】
粘液溶解剤がＮ−アセチル−Ｌ−システイン、Ｓ−メチル−Ｌ−システイン、Ｓ−エチル−Ｌ−システイン、Ｓ−カルボキシメチル−Ｌ−システイン及び１，４−ジチオスレイトールからなる群より選ばれる少なくとも１である請求の範囲第１２項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１５】
非イオン性界面活性剤がポリオキシエチレン−Ｃ１０−１４アルキルエーテル、ポリオキシエチレン−（Ｃ６−１０アルキル−フェニル）エーテル、Ｃ６−１０アルキル−グルコースエーテル及びＮ−（Ｃ６−１０アルキル）カルバモイル−Ｃ１−４アルキル−グルコースエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１である請求の範囲第１〜４項、及び第６〜１４項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１６】
非イオン性界面活性剤が、赤血球を５０％溶血させる濃度が１重量％以上である非イオン性界面活性剤である請求の範囲第１５項記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１７】
生理活性物質がペプチド性生理活性物質又は多糖類系生理活性物質である請求の範囲第１〜１６項のいずれか１つに記載の粉末経鼻投与製剤。
【請求項１８】
生理活性物質、非吸水性かつ難水溶性のエチルセルロース粉末又は酢酸セルロース粉末及びＮ−アセチル−Ｌ−システインを含有する粉末経鼻投与製剤。
【請求項１９】
生理活性物質及び／又はＮ−アセチル−Ｌ−システインが、非吸水性かつ難水溶性のエチルセルロース粉末又は酢酸セルロース粉末の表面に固定されている請求の範囲第１８項記載の粉末経鼻投与製剤。
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０７８２１１
【国際公開日】平成１６年９月１６日（２００４．９．１６）
【発行日】平成１８年６月８日（２００６．６．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５０３１０９（Ｐ２００５−５０３１０９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／００２７６５
【国際出願日】平成１６年３月４日（２００４．３．４）
【出願人】（０００００２９５６）田辺製薬株式会社 (225)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１６年９月１６日（２００４．９．１６）
【発行日】平成１８年６月８日（２００６．６．８）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／００２７６５
【国際出願日】平成１６年３月４日（２００４．３．４）
【出願人】（０００００２９５６）田辺製薬株式会社 (225)
【Ｆターム（参考）】
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