本開示は、バチルス・ズブチリス・アルファ・アミラーゼ（ＡｍｙＥ）またはその変異体に関する。ＡｍｙＥまたはその変異体は、より効率的にデンプンから発酵性糖を生産するために用いられることが出来る。さらに、グルコアミラーゼ及びＡｍｙＥまたはその変異体を含む組成物、及び本開示の酵素組成物を利用するデンプンの加工方法が開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルコアミラーゼ及びアルファ・アミラーゼを含む、デンプンを糖化するための組成物であって、前記アルファ・アミラーゼが、配列番号１と少なくとも約８０％の配列同一性があるアミノ酸配列を有する、バチルス・ズブチリス・アルファ・アミラーゼ（ＡｍｙＥ）またはＡｍｙＥ変異体である、前記組成物。
【請求項２】
前記アルファ・アミラーゼが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３または配列番号３４で示すアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＡｍｙＥ変異体が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＡｍｙＥと比較して、一以上の改変された特性を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記一以上の改変された特性が、基質特異性、基質結合性、基質切断パターン、熱安定性、ｐＨ／活性プロファイル、ｐＨ／安定性プロファイル、酸化への安定性、カルシウムイオン（Ｃａ^２＋）のより少ない量での安定性、比活性度またはそれらの任意の組み合わせである、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
フィターゼ、プルラナーゼ、ベータ・アミラーゼ、菌性アルファ・アミラーゼ、プロテアーゼ、セルロース、ヘミセルラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、イソアミラーゼまたはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
デンプンを糖化するのに十分な時間で請求項１に記載の組成物を混合する工程を含む、デンプンの加工方法。
【請求項７】
フルクトース高含有コーンシロップを生産する工程をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
グルコースイソメラーゼの混合により、フルクトース高含有コーンシロップの生産が達成される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
エタノールを生産するためにデンプンを発酵する工程をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
糖化と発酵が同時に行われる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
エタノールを回収する工程をさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
エタノールを得るためにデンプンを蒸留する工程であって、発酵及び蒸留が、同時に、別途または連続して行なわれる、前記工程をさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
グルコアミラーゼ及びアルファ・アミラーゼをオリゴ糖またはデンプン基質と混合する工程であって、前記アルファ・アミラーゼが、配列番号１と少なくとも約８０％の配列同一性があるアミノ酸配列を有する、バチルス・ズブチリス・アルファ・アミラーゼ（ＡｍｙＥ）またはＡｍｙＥ変異体である、前記工程を含む、デンプンの糖化方法。
【請求項１４】
前記アルファ・アミラーゼが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３または配列番号３４で示すアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＡｍｙＥ変異体が、配列番号１のアミノ酸配列を有するＡｍｙＥと比較して、一以上の改変された特性を有する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記一以上の改変された特性が、基質特異性、基質結合性、基質切断パターン、熱安定性、ｐＨ／活性プロファイル、ｐＨ／安定性プロファイル、酸化への安定性、カルシウムイオン（Ｃａ^２＋）のより少ない量での安定性、比活性またはそれらの任意の組み合わせである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記グルコアミラーゼは、乾燥固形物のグラム当たりのグルコアミラーゼ単位（ＧＡＵ／ｇ ｄｓ）が０．１１以下の量で用いられる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
フィターゼ、プルラナーゼ、ベータ・アミラーゼ、菌性アルファ・アミラーゼ、プロテアーゼ、セルロース、ヘミセルラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、イソアミラーゼまたはそれらの任意の組み合わせをオリゴ糖またはデンプン基質と混合する工程をさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
フルクトース高含有コーンシロップを生産する工程をさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
グルコースイソメラーゼの混合により、フルクトース高含有コーンシロップの生産が達成される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
エタノールを生産するためにデンプンを発酵させる工程をさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項２２】
糖化と発酵が、同時に行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
エタノールを回収する工程をさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
エタノールを得るためにデンプンを蒸留する工程であって、発酵及び蒸留が、同時に、別途または連続して行なわれる、前記工程をさらに含む、請求項２１に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【公表番号】特表２０１１−５２２５４５（Ｐ２０１１−５２２５４５Ａ）
【公表日】平成２３年８月４日（２０１１．８．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５１２６６０（Ｐ２０１１−５１２６６０）
【出願日】平成２１年６月４日（２００９．６．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０４６２９６
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１４９２８３
【国際公開日】平成２１年１２月１０日（２００９．１２．１０）
【出願人】（５０９２４０４７９）ダニスコ・ユーエス・インク (81)
【Ｆターム（参考）】