細胞の産生に対する新規方法および試薬
本発明は、幹細胞を、幹細胞の末端グリカン構造を認識する結合剤と接触させることにより、幹細胞を調節し、および増殖させるための方法および材料を提供する。調節は形態学的変化、分化状態の変化、生物学的状態または接着であってよい。本発明において提供される材料はこのような結合物質および結合剤をスクリーニングするためにも有用である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
非造血幹細胞の調節または培養のための方法であって：（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；ならびに（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、非還元末端の末端および還元末端の末端グリカン構造から選択される末端グリカン構造を結合する１または複数種の結合剤と接触させること；を含む方法。
【請求項２】
さらに（ｉｉｉ）前記細胞を、所望の刺激、状態変化または増殖を達成するに十分な期間インキュベートすること、またはｉｉｉ）幹細胞の増殖が実質的に分化を伴わずに起こる場合に幹細胞を培養すること、を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記結合剤がタンパク質またはポリペプチド結合剤であり、末端単糖エピトープＧａｌβ、ＧａｌＮＡｃβ、ＧｌｃＮＡｃβ、ＭａｎαまたはＦｕｃαまたはシアル酸α、好ましくはＮｅｕ５ＡｃαまたはＮｅｕ５Ｇｃαの群から選択される１または複数種の末端グリカン構造を認識する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記の１または複数種の結合剤が１または数種の末端β−結合Ｈｅｘ（ＮＡｃ）ｎを認識し、式中、ｎは０または１であり、ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり、ただしＨｅｘがＧｌｃである場合、ｎは１であり：末端Ｇａｌβ、ＧａｌＮＡｃβ、またはＧｌｃＮＡｃβを含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記の１または複数種の結合剤が１または数種の末端非還元末端α−結合ピラノシド残基Ｍａｎα Ｆｕｃα、またはシアル酸α、好ましくはＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５Ｇｃを認識する、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記の１または複数種の結合剤が幹細胞または幹細胞群上の末端グリカン構造を認識する、請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記の１または複数種の結合剤が表面に付着する、請求項１記載の方法。
【請求項８】
幹細胞がヒト胚幹細胞であり、本質的にフィーダー細胞を含まず、または幹細胞はヒト間葉系幹細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項９】
ヒト胚幹細胞が、好ましくはＥＣＡ、ガレクチン、ＤＳＡおよびＵＥＡ−１の群から選択される、（Ｆｕｃα２）ｎＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ［式中、ｎは０または１である］を認識するレクチンとの接触の下で培養される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記細胞が未分化状態で２０回の継代の間維持される、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
幹細胞の状態の変化の調節が、接着、形態、増殖速度または分化を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】
前記結合剤が、抗体、レクチン、グリコシダーゼ、糖転移酵素およびそれらの断片からなる群より選択されるポリペプチドである、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
前記結合剤がレクチン、好ましくは植物レクチンである、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記グリカン構造が式ＣＣ０
［ＳＡ］ｐＨｅｘ（ＮＡｃ）ｎβ４［ＦｕｃαＸ］ｍＧｌｃＮＡｃβＲ
［式中、ｎ、ｍ、およびｐは独立に０または１であり
Ｘは３または６のいずれかの結合位置であり、
ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり
ＳＡは伸長する単一またはオリゴ糖構造、
好ましくはシアル酸であり、これは好ましくはＳＡα３、もしくはＳＡα６であって、好ましいシアル酸型はＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５Ｇｃであり、または、Ｎ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４であって、ここでＭａｎα残基はさらに１つまたはいくつかのＧｌｃＮＡｃβ２またはＬａｃＮＡｃβ２等の複合型末端構造により伸長されていてよく、Ｒは任意の伸長単糖残基構造であって、好ましくはＮ−アセチルラクトサミンの／ラクトシル−セラミド等の糖脂質の／Ｏ−グリカンの／３／６Ｇａｌ（ＮＡｃ）、またはＮ−グリカンの２Ｍａｎ、または、Ｈｅｘ（ＮＡｃ）がＧｌｃＮＡｃである場合の潜在的な結合コアタンパク質／ペプチドを表すＡｓｎ−（ペプチド）０または１であり、ただしｍが１であり、Ｘが６である場合、ｎは１であり、およびＨｅｘはＧｌｃであり、およびＳＡはＮ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβまたはその伸長バリアントであり、ｎが１であり、ＨｅｘがＧａｌである場合、ｐは０である］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
前記末端構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、ＧａｌＮＡｃβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｆｕｃα２Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｇａｌβ４（Ｆｕｃα３）ＧｌｃＮＡｃ、およびＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記結合剤がＥＣＡ、ＰＷＡ、ＷＦＡ、ＭＡＡ、ＳＮＡ、ＵＥＡ、ＬＴＡおよびＰＳＡからなる植物レクチン群から選択される、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
前記幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、請求項１５〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記間葉系幹細胞が本質的に未分化の形態で維持される、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
前記結合剤が短縮された末端エピトープＧｌｃＮＡｃβまたはＭａｎα、好ましくはＧＳＡＩＩまたはＮＰＡを認識する植物レクチン群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
前記グリカン構造が式ＣＣ１：
［ＳＡ］ｐＨｅｘ（ＮＡｃ）ｎβ４［Ｆｕｃα６］ｍＧｌｃＮＡｃβＲ
［式中、ｎ、ｍ、およびｐは独立に０または１であり、ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり、
ＳＡは伸長する単−またはオリゴ糖構造、
好ましくはシアル酸であり、これは好ましくはＳＡα３であって、好ましいシアル酸型はＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５ＧｃまたはＮ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４であって、ここで前記Ｍａｎα残基はさらに１つまたはいくつかのＧｌｃＮＡｃβ２またはＬａｃＮＡｃβ２等の複合型末端構造により伸長されていてよく、Ｒは任意の伸長単糖残基構造であって、好ましくはＮ−アセチルラクトサミンの／ラクトシル−セラミド等の糖脂質の／Ｏ−グリカンの／３／６Ｇａｌ（ＮＡｃ）、または、Ｎ−グリカンの２Ｍａｎ、またはＨｅｘ（ＮＡｃ）がＧｌｃＮＡｃである場合の潜在的な結合コアタンパク質／ペプチドを表すＡｓｎ−（ペプチド）０または１であり、
ただし、ｍが１である場合、ｎは１であり、およびＨｅｘはＧｌｃであり、およびＳＡはＮ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβまたはその伸長バリアントであり、
ｎが１であり、ＨｅｘがＧａｌである場合、ｐは０である］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
前記構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、ＧａｌＮＡｃβ４ＧｌｃＮＡｃ、およびＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記結合剤がＥＣＡ、ＰＳＡ、ＰＷＡ、ＭＡＡ、およびＷＦＡからなる植物レクチン群より選択される、請求項１〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記グリカン構造が式ＣＣ２：
［ＳＡ］ｐＧａｌ（ＮＡｃ）ｎβ４ＧｌｃＮＡｃβＲ、
［式中、残っており
ｐおよびｎは独立に０または１であり
ＳＡはシアル酸ＳＡα３であり、好ましいシアル酸型はＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５Ｇｃ、より好ましくはＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが１であり、ＨｅｘがＧａｌである場合、ｐは０である］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
前記構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、およびＧａｌＮＡｃβ４ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記グリカン構造が式ＣＣ３
Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＲ
［式中、Ｍａｎα残基はさらに１つまたはいくつかのＧｌｃＮＡｃβ２、またはＬａｃＮＡｃβ２、またはＬａｃＮＡｃの末端シアル化バリアント、好ましくはＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、等の複合型末端構造により伸長されてよく、Ｒは任意にＡｓｎ−（ペプチド）０または１であり、潜在的な結合コアタンパク質／ペプチドを示す］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
前記構造が、
ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃ、ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ
ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＡｓｎ、Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃ、Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＲ、
Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＡｓｎ、
Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ、
Ｍａｎα３［ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ、
ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ、および
ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα３［ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ
からなる群より選択される、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記結合物質がレクチンＧＳ ＩＩまたはＬＴＡと同一のエピトープに結合する、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
前記レクチンがＥＣＡ、ＰＳＡ、ＰＷＡ、ＭＡＡ、ＷＦＡ、ＧＳ ＩＩおよびＬＴＡからなる群より選択される、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記の少なくとも１個の幹細胞が：身体の全ての組織型の細胞へと分化することができる、全能性；身体の多数の細胞へと分化することができるが全てではない、多能性；の群より選択される特徴を有するか、またはそれは限られた組織型へと分化することができる前駆細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項３１】
前記幹細胞が；全能性幹細胞は胚幹細胞、非胚幹細胞（ｅｘｔｒａｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）、クローン化された幹細胞、および単為生殖由来細胞からなる群より選択される；多能性幹細胞は造血幹細胞、脂肪幹細胞、間葉系幹細胞、臍帯血幹細胞、および胎盤幹細胞からなる群より選択される；前駆幹細胞は神経、肝臓、腎形成、脂質生成、骨芽、破骨、肺胞、心臓、腸、および内皮前駆細胞からなる群より選択される；群より選択される、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
前記胚幹細胞が、ステージ特異的胚抗原（ＳＳＥＡ）３、ＳＳＥＡ４、Ｔｒａ−１−６０およびＴｒａ−１−８１、Ｏｃｔ−３／４、Ｃｒｉｐｔｏ、ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）受容体、ポドカリキシン様タンパク質（ＰＯＤＸＬ）、ならびにヒトテロメラーゼ逆転写酵素からなる群より選択される少なくとも１種のマーカーを発現する、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記細胞が請求項９または１０に従って増殖させられる、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記間葉系幹細胞がＳＴＲＯ−１、ＣＤ１０５、ＣＤ５４、ＣＤ１０６、ＨＬＡ−Ｉマーカー、ビメンチン、ＡＳＭＡ、コラーゲン−１、およびフィブロネクチンからなるがＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１７、および造血細胞ではないマーカーの群より選択される少なくとも１種のマーカーを発現するか、またはＲＵＮＸ ｏｒの少ない発現量を有する、請求項３０記載の方法。
【請求項３５】
前記細胞が請求項１８または１９に従って増殖させられる、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
さらに細胞培養培地、少なくとも１種の増殖因子を添加した細胞培養培地、または馴化培地を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３７】
前記の少なくとも１種の増殖因子が、ＷＮＴシグナル伝達アゴニスト、ＴＧＦ−ｂ、ｂＦＧＦ、ＩＬ−６、ＳＣＦ、ＢＭＰ−２、トロンボポエチン、ＥＰＯ、ＩＧＦ−１、ＩＬ−１１、ＩＬ−５、Ｆｌｔ−３／Ｆｌｋ−２リガンド、フィブロネクチン、ＬＩＦ、ＨＧＦ、ＮＦＧ、アンギオポイエチン様２および３、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｔｐｏ、Ｓｈｈ、Ｗｎｔ−３ａ、Ｋｉｒｒｅ、およびそれらの混合物からなる群より選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
前記馴化培地が、マウスフィーダー細胞馴化培地およびヒトフィーダー細胞馴化培地からなる群より選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
前記培地が、Ｒｏｓｗｅｌｌ Ｐａｒｋ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ （ＲＰＭＩ−１６４０）、ダルベッコ修飾必須培地（ＤＭＥＭ）、イーグル修飾必須培地（ＥＭＥＭ）、Ｏｐｔｉｍｅｍ、およびＩｓｃｏｖｅ培地からなる群より選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項４０】
前記表面が、プレート、ディッシュ、バッグ、ロッド、ペレット、ファイバー、粒子およびメッシュからなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項４１】
前記粒子が、ビーズ、ミクロスフィア、ナノ粒子、およびコロイド粒子からなる群より選択される、請求項４０記載の方法。
【請求項４２】
前記表面が、ガラス、シリカ、シリコン、コラーゲン、ヒドロキシアパタイト、ヒドロゲル、ＰＴＦＥ、ポリプロピレン、ポリスチレン、ナイロン、デキストラン、およびポリアクリルアミドからなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項４３】
前記表面が生体適合性、天然、合成であるか、またはポリマーを含む、請求項１記載の方法。
【請求項４４】
前記ポリマーが、ポリエステル、ポリエーテル、ポリアンヒドリド（ｐｏｌｙａｎｈｙｄｒｉｄｅｓ）、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリオルトエステル、ポリホスファゼン、ポリ酢酸ビニル、ブロック共重合体、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、およびポリウレタンからなる群より選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
前記生体適合性表面が、コラーゲン、金属、ヒドロキシアパタイト、バイオガラス、アルミン酸塩、バイオセラミック材料、ヒアルロン酸ポリマー、アルギン酸塩、アクリル酸エステルポリマー、乳酸ポリマー、グリコール酸ポリマー、乳酸／グリコール酸ポリマー、精製タンパク質、精製ペプチド、および細胞外マトリクス組成物からなる群より選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４６】
前記結合剤が前記表面に共有結合的に、非共有結合的に、静電的に、または疎水的に付着する、請求項１記載の方法。
【請求項４７】
少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団が、培養において、２０、４０、または１００回の継代後に実質的に未分化のままである、請求項２記載の方法。
【請求項４８】
結合剤と接触させられる前記の少なくとも１個の幹細胞が、薬剤を用いて分化するように誘導される、請求項４７記載の方法。
【請求項４９】
少なくとも１個の幹細胞の拡張を誘導することができる前記薬剤が、ＴＰＯ、ＳＣＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−７、ｆｌｔ−３Ｌ、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｅｐｏ、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＦＧＦ−４、ＦＧＦ−２０、ＶＥＧＦ、アクチビン−Ａ、ＩＧＦ、ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＬＩＦ、ＰＤＧＦ、および骨形成タンパク質ファミリーのメンバーからなる群より選択される、請求項４８記載の方法。
【請求項５０】
多分化能または多能性ヒト胚幹細胞の精製された調製物であって、前記細胞が：（ｉ）内胚葉、中胚葉、および外胚葉組織の派生物に分化する能力、（ｉｉ）正常な核型、（ｉｉｉ）少なくとも約１０回の継代の間、ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養において増殖する能力を有し、ならびに（ｉｖ）請求項１記載の方法から得られる、調製物。
【請求項５１】
前記細胞が、結合剤と接触した際、本質的に分化を阻害される、請求項５０記載の調製物。
【請求項５２】
前記結合剤が、抗体、抗体断片、レクチン、およびグリコシダーゼからなる群より選択される、請求項５０記載の調製物。
【請求項５３】
前記結合剤がレクチンである、請求項２２記載の調製物。
【請求項５４】
前記レクチンがＥＣＡ、ＰＳＡ、ＰＷＡ、ＭＡＡ、ＷＦＡ、ＧＳ ＩＩおよびＬＴＡからなる群より選択される、請求項５３記載の調製物。
【請求項５５】
前記調製物が、培養において、２０、４０、または１００回の継代後に実質的に未分化のままである、請求項５０記載の調製物。
【請求項５６】
前記調製物が動物で生成された抗体または血清に曝露されていない、請求項５０記載の調製物。
【請求項５７】
前記細胞がＳＳＥＡ−３およびＳＳＥＡ−４マーカーに対して陽性である、請求項５０記載の調製物。
【請求項５８】
前記細胞がＴＲＡ−１−６０およびＴＲＡ−１−８１マーカーに対して陽性である、請求項５０記載の調製物。
【請求項５９】
前記細胞が、懸濁培養にかけられたか、または免疫無防備状態の動物に移植された際に、胚様体を形成することができる、請求項５０記載の調製物。
【請求項６０】
請求項１に従って得ることができる、幹細胞の集団または少なくとも１個の幹細胞。
【請求項６１】
前記細胞または細胞群が幹細胞マーカーを少なくとも２０回の継代の間維持する、請求項５０記載の幹細胞の集団または少なくとも１個の幹細胞。
【請求項６２】
式Ｔ１
［式中、Ｘは結合位置であり Ｒ１、Ｒ２、およびＲ６はＯＨもしくはグリコシド結合した単糖残基シアル酸、好ましくはＮｅｕ５Ａｃα２もしくはＮｅｕ５Ｇｃ α２、最も好ましくはＮｅｕ５Ａｃα２であり、またはＲ３、はＯＨまたはグリコシド結合した単糖残基Ｆｕｃα１（Ｌ−フコース）またはＮ−アセチル（Ｎ−アセトアミド、ＮＣＯＣＨ３）であり；Ｒ４、はＨ、ＯＨまたはグリコシド結合した単糖残基Ｆｕｃα１（Ｌ−フコース）であり、Ｒ４がＨである場合、Ｒ５はＯＨであり、Ｒ４がＨではない場合、Ｒ５はＨであり；Ｒ７はＮ−アセチルまたはＯＨであり、Ｘは前記細胞からの天然オリゴ糖主鎖構造、好ましくはＮ−グリカン、Ｏ−グリカンもしくは糖脂質構造であり；またはｎが０である場合、Ｘは無であり、Ｙはリンカー基、好ましくはＯ−グリカンおよびＯ−結合末端オリゴ糖および糖脂質のための酸素、ならびにＮ−グリカンのためのＮ、またはｎが０である場合、無であり；Ｚは担体構造、好ましくは細胞により産生された天然担体であり、例えばタンパク質または脂質であって、好ましくは担体上のセラミドもしくは分岐グリカンコア構造、またはＨであり；アーチはガラクトピラノシルからの結合が左側の残基の３位または４位いずれかに対するものであること、およびＲ４構造が他の４または３位にあることを表し；ｎは０または１の整数であり、ｍは１〜１０００、好ましくは１〜１００、および最も好ましくは１〜１０の整数（担体上のグリカンの数）であり、ただしＲ２およびＲ３のうち１つはＯＨまたはＲ３はＮ−アセチルであり、左側の第１の残基が右側の残基の４位に結合する場合、Ｒ６はＯＨであり：ＸはＧａｌα４Ｇａｌβ４Ｇｌｃではなく、（ＳＳＥＡ−３または４のコア構造）またはＲ３はフコシルである］
の幹細胞上のグリカン構造を認識することができる結合剤の群より選択される結合剤を選択する工程を含む方法。
【請求項６３】
前記グリカン構造が式Ｔ２
［式中、Ｒ１〜Ｒ６を含む変数は式Ｔ１に対して記載されるものと同様である］
によるものである、請求項６２記載の方法。
【請求項６４】
前記グリカン構造が式Ｔ３
［式中、Ｒ１〜Ｒ７を含む変数は式Ｔ１に対して記載されるものと同様である］
によるものである、請求項６２記載の方法。
【請求項６５】
前記グリカン構造が式Ｔ４：
Ｇａｌβ１−ｘＨｅｘ（ＮＡｃ）ｐ、 （Ｔ４）
［ｘは結合位置３または４であり、
および、ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり
ただしｐは０または１であり、ｘが結合位置３である場合、ｐは１であり、ＨｅｘＮＡｃはＧｌｃＮＡｃまたはＧａｌＮＡｃであり、および、ｘが結合位置４である場合、ＨｅｘはＧｌｃである。コアＧａｌβ１−３／４エピトープは、１または２個の構造ＳＡαまたはＦｕｃαにより、任意に水酸基に置換され、ここでＳＡはシアル酸である］
のグリカン構造である、請求項６２記載の方法。
【請求項６６】
前記細胞調製物が胚性幹細胞または非造血成体幹細胞調製物である、請求項６２記載の方法。
【請求項６７】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、グリカン構造を結合する１または複数種の結合剤と接触させること、を含み、前記結合剤はＭａｎα結合レクチンＦＲＩＬ群レクチンもしくは同様な特異性を有するレクチンまたは造血幹細胞の培養のために用いられる他のレクチンではなく、または前記結合剤は共有結合的に表面に付着する、造血幹細胞の調節または培養のための方法。
【請求項６８】
前記結合剤が上記請求項のうちいずれかに記載される特異性を有する、請求項６４記載の方法。
【請求項６９】
前記調節が前記細胞の分化を伴う、請求項６７および６８のいずれかに記載の方法。
【請求項７０】
前記結合物質がＧＦ２８７、ＧＦ２７９、ＧＦ２８８、ＧＦ２８４、ＧＦ２８３、ＧＦ２８６、ＧＦ２９０、ＧＦ２８９、ＧＦ２７５、ＧＦ２７６、ＧＦ２７７、ＧＦ２７８、ＧＦ２９７、ＧＦ２９８、ＧＦ３０２、ＧＦ３０３、ＧＦ３０５、ＧＦ３０７、ＧＦ３５３、およびＧＦ３５４からなる群より選択される抗体と同一のエピトープに結合する、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記結合物質がＧＦ２８７、ＧＦ２７９、ＧＦ２８８、ＧＦ２８４、ＧＦ２８３、ＧＦ２８６、ＧＦ２９０、およびＧＦ２８９、ＧＦ２７５、ＧＦ２７６、ＧＦ２７７、ＧＦ２７８、ＧＦ２９７、ＧＦ２９８、ＧＦ３０２、ＧＦ３０３、ＧＦ３０５、ＧＦ３０７、ＧＦ３５３、およびＧＦ３５４からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項７２】
前記タンパク質が、少なくとも部分的に２つの単糖構造および前記単糖残基間の結合構造を認識する高特異性結合剤である、請求項１３記載の方法。
【請求項７３】
保存された増殖する能力を有するが、本発明の幹細胞を本発明の結合剤との接触の下で培養することを含む、分化状態における阻害を有し、ここで任意に前記結合剤は表面に付着する、幹細胞。
【請求項７４】
前記細胞が全能性幹細胞、多能性幹細胞、および前駆幹細胞からなる群より選択される、請求項７３記載の方法。
【請求項７５】
最初にある期間結合剤との接触の下で培養され、次いで第２の／異なる結合剤を含んだ第２の培養液中およびサイトカインまたは増殖因子の同一のまたは各種の混合物中で培養される、請求項７３記載の細胞。
【請求項７６】
任意に少なくとも１種の、幹細胞を支持するまたはその分化を誘導することが知られる、ＷＮＴシグナル伝達アゴニスト、ＴＧＦ−ｂ、ｂＦＧＦ、ＩＬ−６、ＳＣＦ、ＢＭＰ−２、トロンボポエチン、ＥＰＯ、ＩＧＦ−１、ＩＬ−１１、ＩＬ−５、Ｆｌｔ−３／Ｆｌｋ−２リガンド、フィブロネクチン、ＬＩＦ、ＨＧＦ、ＮＦＧ、アンギオポイエチン様２および３、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｔｐｏ、Ｓｈｈ、Ｗｎｔ−３ａ、Ｋｉｒｒｅ、およびそれらの混合物からなる群より選択される増殖因子を添加した細胞培養液または増殖培地中で前記細胞が維持される、請求項７３記載の細胞。
【請求項７７】
ＩＬ−３（約２０ｎｇ／ｍｌ）、ＩＬ−６（約２５０ｎｇ／ｍｌ）、ＳＣＦ（約１０ｎｇ／ｍｌ）、ＴＰＯ（約２５０ｎｇ／ｍｌ）、ｆｌｔ−３Ｌ（約１００ｎｇ／ｍｌ）からなる群より選択される増殖因子を添加した、請求項７６記載の培地。
【請求項７８】
前記細胞が、ＧＳＫ−３の阻害剤、ヒストン脱アセチル化酵素活性の阻害剤、およびＤＮＡメチル基転移酵素活性の阻害剤、のうちの１または複数種から選択される薬剤の存在下で維持される、請求項７３または７６に記載の細胞。
【請求項７９】
前記結合剤がレクチン、抗体またはグリコシダーゼである、請求項７３〜７６のうちいずれか１項に記載の細胞。
【請求項８０】
前記表面が、金属、ガラス、プラスチック、共重合体、コロイド、脂質、細胞表面等からなる群より選択される、上記請求項のうちいずれかに記載される方法または細胞。
【請求項８１】
前記結合剤がグリカン結合タンパク質の複合体であって、好ましくは前記結合剤タンパク質のグリカンから結合する、好ましくはポリバレントな複合体である、請求項１記載の方法。
【請求項８２】
前記結合剤が固定化される、請求項１または８１記載の方法。
【請求項８３】
固定化が非共有結合的な相互作用または共有結合的な固定化を含む、請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；ならびに（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の、グリカン構造を結合する結合剤または幹細胞の培養に用いられる他のレクチンと接触させ、または前記結合剤は特異的にもしくは共有結合的に表面に付着し、および任意に、ここで前記結合剤は図のいずれかに記載の結合剤を含むこと；を含む、幹細胞の調節または培養のための結合剤を選択するための方法。
【請求項８５】
幹細胞上の前記グリカン構造が請求項または明細書内の上記グリカン構造の式のうちいずれかを含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項８６】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、およびここで幹細胞の増殖の速度が増加し、前記幹細胞の未分化状態が維持される、結合剤の選択または最適化のための方法。
【請求項８７】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、およびここで幹細胞の増殖の速度が減少し、前記幹細胞の未分化状態が維持される、結合剤の選択のための方法。
【請求項８８】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、およびここで幹細胞の増殖の速度が減少し、前記幹細胞の未分化状態が維持される、結合剤の選択のための方法。
【請求項８９】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、ならびにここで幹細胞の接着状態、形態、増殖速度および／または分化状態が変化する、結合剤の選択のための方法。
【請求項９０】
グリカン構造がα３−フコシル化構造を含む、上記請求項のうちいずれかに記載の方法または細胞。
【請求項９１】
前記構造がＬｅｗｉｓ ｘおよびシアリルＬｅｗｉｓ ｘからなる群より選択される、請求項９０記載の方法または細胞。
【請求項９２】
前記結合剤が、α３−フコシル化構造、α２−フコシル化構造、非フコシル化シアリルラクトサミン、Ｇａｌβ３ＧａｌＮＡｃ構造、ＧａｌＮＡｃα構造、ポリ−Ｎ−アセチルラクトサミン構造、および特異的マンノース構造からなる群より選択される構造を認識する、上記請求項のうちいずれかに記載の方法。
【請求項９３】
前記表面が、プレート、ディッシュ、バッグ、ロッド、ペレット、ファイバー、粒子およびメッシュからなる群より選択される、請求項７３または８０に記載の方法。
【請求項９４】
前記粒子が、ビーズ、ミクロスフィア、ナノ粒子、およびコロイド粒子からなる群より選択される、請求項９３記載の方法。
【請求項９５】
前記表面が、ガラス、シリカ、シリコン、コラーゲン、ヒドロキシアパタイト、ヒドロゲル、ＰＴＦＥ、ポリプロピレン、ポリスチレン、ナイロン、デキストラン、およびポリアクリルアミドからなる群より選択される、請求項９３記載の方法。
【請求項９６】
前記表面が生体適合性、天然、合成であるか、またはポリマーを含む、請求項９３記載の方法。
【請求項９７】
前記ポリマーが、ポリエステル、ポリエーテル、ポリアンヒドリド（ｐｏｌｙａｎｈｙｄｒｉｄｅｓ）、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリオルトエステル、ポリホスファゼン、ポリ酢酸ビニル、ブロック共重合体、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、およびポリウレタンからなる群より選択される、請求項９６記載の方法。
【請求項９８】
前記生体適合性表面が、コラーゲン、金属、ヒドロキシアパタイト、バイオガラス、アルミン酸塩、バイオセラミック材料、ヒアルロン酸ポリマー、アルギン酸塩、アクリル酸エステルポリマー、乳酸ポリマー、グリコール酸ポリマー、乳酸／グリコール酸ポリマー、精製タンパク質、精製ペプチド、および細胞外マトリクス組成物からなる群より選択される、請求項９６記載の方法。
【請求項９９】
前記結合剤が前記表面に共有結合的に、非共有結合的に、静電的に、疎水的に付着し、または前記結合剤はグリカン結合タンパク質の複合体であって、好ましくは前記結合剤タンパク質のグリカンから結合する、好ましくはポリバレントな複合体である、請求項７２〜９８のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１００】
少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団が、培養において、２０、４０、または１００回の継代後に実質的に未分化のままである、請求項７２〜９９のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０１】
結合剤と接触させられる前記の少なくとも１個の幹細胞が、前記結合剤を用いて分化するように誘導される、請求項７２〜９９のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０２】
前記構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｆｕｃα２Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、およびＧａｌβ４（Ｆｕｃα３）ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項１〜１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記結合剤がＥＣＡ、ＤＰＡ、ガレクチン−１、およびＵＥＡからなる植物レクチン群から選択される、請求項１〜１０２のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０４】
前記タンパク質のＮ グリコシル化部位が変異している、組み替え非グリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）ＥＣＡタンパク質。
【請求項１０５】
表面に結合した、請求項１０４記載の組み替え非グリコシル化ＥＣＡタンパク質。
【請求項１０６】
請求項１０４記載の組み替え非グリコシル化ＥＣＡタンパク質またはその機能断片をコードするアミノ酸配列。
【請求項１０７】
請求項１０４記載の非グリコシル化ＥＣＡタンパク質またはその機能断片をコードする核酸配列。
【請求項１０８】
請求項１０７記載の核酸を含む宿主細胞。’
【請求項１０９】
式ＣＯＮＪ
Ｂ−（Ｇ−）ｍＲ１−Ｒ２−（Ｓ１−）ｎＴ−
［式中、Ｂは前記結合剤であり、Ｇはグリカン（前記結合剤がグリカンを結合する場合）であり、
Ｒ１およびＲ２は化学選択的連結基であり、Ｔはタグ、好ましくはビオチンであり、Ｌはタグに特異的に結合するリガンドであり；Ｓ１は任意のスペーサー基、好ましくは炭素数１〜１０のアルキルであり、
ｍおよびｎは独立に０または１のいずれかの整数である］
の結合剤複合体構造。
【請求項１１０】
前記結合剤が、好ましくは酸化グリカンを介してグリカンと複合化する、請求項１０９記載の結合剤複合体。
【請求項１１１】
式ＣＯＭＰ
Ｂ−（Ｇ−）ｍＲ１−Ｒ２−（Ｓ１−）ｎ（Ｔ−）ｐ（Ｌ−）ｒ−（Ｓ２）ｓ−ＳＯＬ
［式中、Ｂは結合剤であり、ＳＯＬは固相またはマトリクスまたは表面であり、Ｇはグリカン（前記結合剤がグリカンを結合する場合）であり、Ｒ１およびＲ２は化学選択的連結基であり、Ｔはタグ、好ましくはビオチンであり、Ｌはタグに特異的に結合するリガンドであり、Ｓ１およびＳ２は任意のスペーサー基、好ましくは炭素数１〜１０のアルキルであり、ｍ、ｎ、ｐ、ｒおよびｓは独立に０または１のいずれかの整数である］
の構造を含む複合体。
【請求項１１２】
請求項１１１に記載の複合化結合剤。
【請求項１１３】
前記結合剤が、好ましくはＳＯＬへの酸化グリカンを介してグリカンと複合化する、請求項１１１記載の結合剤結合複合体。
【請求項１】
非造血幹細胞の調節または培養のための方法であって：（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；ならびに（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、非還元末端の末端および還元末端の末端グリカン構造から選択される末端グリカン構造を結合する１または複数種の結合剤と接触させること；を含む方法。
【請求項２】
さらに（ｉｉｉ）前記細胞を、所望の刺激、状態変化または増殖を達成するに十分な期間インキュベートすること、またはｉｉｉ）幹細胞の増殖が実質的に分化を伴わずに起こる場合に幹細胞を培養すること、を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記結合剤がタンパク質またはポリペプチド結合剤であり、末端単糖エピトープＧａｌβ、ＧａｌＮＡｃβ、ＧｌｃＮＡｃβ、ＭａｎαまたはＦｕｃαまたはシアル酸α、好ましくはＮｅｕ５ＡｃαまたはＮｅｕ５Ｇｃαの群から選択される１または複数種の末端グリカン構造を認識する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記の１または複数種の結合剤が１または数種の末端β−結合Ｈｅｘ（ＮＡｃ）ｎを認識し、式中、ｎは０または１であり、ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり、ただしＨｅｘがＧｌｃである場合、ｎは１であり：末端Ｇａｌβ、ＧａｌＮＡｃβ、またはＧｌｃＮＡｃβを含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記の１または複数種の結合剤が１または数種の末端非還元末端α−結合ピラノシド残基Ｍａｎα Ｆｕｃα、またはシアル酸α、好ましくはＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５Ｇｃを認識する、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記の１または複数種の結合剤が幹細胞または幹細胞群上の末端グリカン構造を認識する、請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記の１または複数種の結合剤が表面に付着する、請求項１記載の方法。
【請求項８】
幹細胞がヒト胚幹細胞であり、本質的にフィーダー細胞を含まず、または幹細胞はヒト間葉系幹細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項９】
ヒト胚幹細胞が、好ましくはＥＣＡ、ガレクチン、ＤＳＡおよびＵＥＡ−１の群から選択される、（Ｆｕｃα２）ｎＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ［式中、ｎは０または１である］を認識するレクチンとの接触の下で培養される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記細胞が未分化状態で２０回の継代の間維持される、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
幹細胞の状態の変化の調節が、接着、形態、増殖速度または分化を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】
前記結合剤が、抗体、レクチン、グリコシダーゼ、糖転移酵素およびそれらの断片からなる群より選択されるポリペプチドである、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
前記結合剤がレクチン、好ましくは植物レクチンである、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記グリカン構造が式ＣＣ０
［ＳＡ］ｐＨｅｘ（ＮＡｃ）ｎβ４［ＦｕｃαＸ］ｍＧｌｃＮＡｃβＲ
［式中、ｎ、ｍ、およびｐは独立に０または１であり
Ｘは３または６のいずれかの結合位置であり、
ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり
ＳＡは伸長する単一またはオリゴ糖構造、
好ましくはシアル酸であり、これは好ましくはＳＡα３、もしくはＳＡα６であって、好ましいシアル酸型はＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５Ｇｃであり、または、Ｎ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４であって、ここでＭａｎα残基はさらに１つまたはいくつかのＧｌｃＮＡｃβ２またはＬａｃＮＡｃβ２等の複合型末端構造により伸長されていてよく、Ｒは任意の伸長単糖残基構造であって、好ましくはＮ−アセチルラクトサミンの／ラクトシル−セラミド等の糖脂質の／Ｏ−グリカンの／３／６Ｇａｌ（ＮＡｃ）、またはＮ−グリカンの２Ｍａｎ、または、Ｈｅｘ（ＮＡｃ）がＧｌｃＮＡｃである場合の潜在的な結合コアタンパク質／ペプチドを表すＡｓｎ−（ペプチド）０または１であり、ただしｍが１であり、Ｘが６である場合、ｎは１であり、およびＨｅｘはＧｌｃであり、およびＳＡはＮ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβまたはその伸長バリアントであり、ｎが１であり、ＨｅｘがＧａｌである場合、ｐは０である］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
前記末端構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、ＧａｌＮＡｃβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｆｕｃα２Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｇａｌβ４（Ｆｕｃα３）ＧｌｃＮＡｃ、およびＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記結合剤がＥＣＡ、ＰＷＡ、ＷＦＡ、ＭＡＡ、ＳＮＡ、ＵＥＡ、ＬＴＡおよびＰＳＡからなる植物レクチン群から選択される、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
前記幹細胞がヒト間葉系幹細胞である、請求項１５〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記間葉系幹細胞が本質的に未分化の形態で維持される、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
前記結合剤が短縮された末端エピトープＧｌｃＮＡｃβまたはＭａｎα、好ましくはＧＳＡＩＩまたはＮＰＡを認識する植物レクチン群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
前記グリカン構造が式ＣＣ１：
［ＳＡ］ｐＨｅｘ（ＮＡｃ）ｎβ４［Ｆｕｃα６］ｍＧｌｃＮＡｃβＲ
［式中、ｎ、ｍ、およびｐは独立に０または１であり、ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり、
ＳＡは伸長する単−またはオリゴ糖構造、
好ましくはシアル酸であり、これは好ましくはＳＡα３であって、好ましいシアル酸型はＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５ＧｃまたはＮ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４であって、ここで前記Ｍａｎα残基はさらに１つまたはいくつかのＧｌｃＮＡｃβ２またはＬａｃＮＡｃβ２等の複合型末端構造により伸長されていてよく、Ｒは任意の伸長単糖残基構造であって、好ましくはＮ−アセチルラクトサミンの／ラクトシル−セラミド等の糖脂質の／Ｏ−グリカンの／３／６Ｇａｌ（ＮＡｃ）、または、Ｎ−グリカンの２Ｍａｎ、またはＨｅｘ（ＮＡｃ）がＧｌｃＮＡｃである場合の潜在的な結合コアタンパク質／ペプチドを表すＡｓｎ−（ペプチド）０または１であり、
ただし、ｍが１である場合、ｎは１であり、およびＨｅｘはＧｌｃであり、およびＳＡはＮ−グリカンコア構造Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβまたはその伸長バリアントであり、
ｎが１であり、ＨｅｘがＧａｌである場合、ｐは０である］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
前記構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、ＧａｌＮＡｃβ４ＧｌｃＮＡｃ、およびＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記結合剤がＥＣＡ、ＰＳＡ、ＰＷＡ、ＭＡＡ、およびＷＦＡからなる植物レクチン群より選択される、請求項１〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記グリカン構造が式ＣＣ２：
［ＳＡ］ｐＧａｌ（ＮＡｃ）ｎβ４ＧｌｃＮＡｃβＲ、
［式中、残っており
ｐおよびｎは独立に０または１であり
ＳＡはシアル酸ＳＡα３であり、好ましいシアル酸型はＮｅｕ５ＡｃまたはＮｅｕ５Ｇｃ、より好ましくはＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが１であり、ＨｅｘがＧａｌである場合、ｐは０である］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
前記構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｎｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、およびＧａｌＮＡｃβ４ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記グリカン構造が式ＣＣ３
Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＲ
［式中、Ｍａｎα残基はさらに１つまたはいくつかのＧｌｃＮＡｃβ２、またはＬａｃＮＡｃβ２、またはＬａｃＮＡｃの末端シアル化バリアント、好ましくはＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、等の複合型末端構造により伸長されてよく、Ｒは任意にＡｓｎ−（ペプチド）０または１であり、潜在的な結合コアタンパク質／ペプチドを示す］
によるものである、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
前記構造が、
ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃ、ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ
ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＡｓｎ、Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃ、Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＲ、
Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβＡｓｎ、
Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ、
Ｍａｎα３［ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ、
ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα３［Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ、および
ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα３［ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα６］Ｍａｎβ４ＧｌｃＮＡｃβ４（Ｆｕｃα６）ＧｌｃＮＡｃβ
からなる群より選択される、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記結合物質がレクチンＧＳ ＩＩまたはＬＴＡと同一のエピトープに結合する、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
前記レクチンがＥＣＡ、ＰＳＡ、ＰＷＡ、ＭＡＡ、ＷＦＡ、ＧＳ ＩＩおよびＬＴＡからなる群より選択される、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記の少なくとも１個の幹細胞が：身体の全ての組織型の細胞へと分化することができる、全能性；身体の多数の細胞へと分化することができるが全てではない、多能性；の群より選択される特徴を有するか、またはそれは限られた組織型へと分化することができる前駆細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項３１】
前記幹細胞が；全能性幹細胞は胚幹細胞、非胚幹細胞（ｅｘｔｒａｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）、クローン化された幹細胞、および単為生殖由来細胞からなる群より選択される；多能性幹細胞は造血幹細胞、脂肪幹細胞、間葉系幹細胞、臍帯血幹細胞、および胎盤幹細胞からなる群より選択される；前駆幹細胞は神経、肝臓、腎形成、脂質生成、骨芽、破骨、肺胞、心臓、腸、および内皮前駆細胞からなる群より選択される；群より選択される、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
前記胚幹細胞が、ステージ特異的胚抗原（ＳＳＥＡ）３、ＳＳＥＡ４、Ｔｒａ−１−６０およびＴｒａ−１−８１、Ｏｃｔ−３／４、Ｃｒｉｐｔｏ、ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）受容体、ポドカリキシン様タンパク質（ＰＯＤＸＬ）、ならびにヒトテロメラーゼ逆転写酵素からなる群より選択される少なくとも１種のマーカーを発現する、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記細胞が請求項９または１０に従って増殖させられる、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記間葉系幹細胞がＳＴＲＯ−１、ＣＤ１０５、ＣＤ５４、ＣＤ１０６、ＨＬＡ−Ｉマーカー、ビメンチン、ＡＳＭＡ、コラーゲン−１、およびフィブロネクチンからなるがＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１１７、および造血細胞ではないマーカーの群より選択される少なくとも１種のマーカーを発現するか、またはＲＵＮＸ ｏｒの少ない発現量を有する、請求項３０記載の方法。
【請求項３５】
前記細胞が請求項１８または１９に従って増殖させられる、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
さらに細胞培養培地、少なくとも１種の増殖因子を添加した細胞培養培地、または馴化培地を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３７】
前記の少なくとも１種の増殖因子が、ＷＮＴシグナル伝達アゴニスト、ＴＧＦ−ｂ、ｂＦＧＦ、ＩＬ−６、ＳＣＦ、ＢＭＰ−２、トロンボポエチン、ＥＰＯ、ＩＧＦ−１、ＩＬ−１１、ＩＬ−５、Ｆｌｔ−３／Ｆｌｋ−２リガンド、フィブロネクチン、ＬＩＦ、ＨＧＦ、ＮＦＧ、アンギオポイエチン様２および３、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｔｐｏ、Ｓｈｈ、Ｗｎｔ−３ａ、Ｋｉｒｒｅ、およびそれらの混合物からなる群より選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
前記馴化培地が、マウスフィーダー細胞馴化培地およびヒトフィーダー細胞馴化培地からなる群より選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
前記培地が、Ｒｏｓｗｅｌｌ Ｐａｒｋ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ （ＲＰＭＩ−１６４０）、ダルベッコ修飾必須培地（ＤＭＥＭ）、イーグル修飾必須培地（ＥＭＥＭ）、Ｏｐｔｉｍｅｍ、およびＩｓｃｏｖｅ培地からなる群より選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項４０】
前記表面が、プレート、ディッシュ、バッグ、ロッド、ペレット、ファイバー、粒子およびメッシュからなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項４１】
前記粒子が、ビーズ、ミクロスフィア、ナノ粒子、およびコロイド粒子からなる群より選択される、請求項４０記載の方法。
【請求項４２】
前記表面が、ガラス、シリカ、シリコン、コラーゲン、ヒドロキシアパタイト、ヒドロゲル、ＰＴＦＥ、ポリプロピレン、ポリスチレン、ナイロン、デキストラン、およびポリアクリルアミドからなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項４３】
前記表面が生体適合性、天然、合成であるか、またはポリマーを含む、請求項１記載の方法。
【請求項４４】
前記ポリマーが、ポリエステル、ポリエーテル、ポリアンヒドリド（ｐｏｌｙａｎｈｙｄｒｉｄｅｓ）、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリオルトエステル、ポリホスファゼン、ポリ酢酸ビニル、ブロック共重合体、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、およびポリウレタンからなる群より選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
前記生体適合性表面が、コラーゲン、金属、ヒドロキシアパタイト、バイオガラス、アルミン酸塩、バイオセラミック材料、ヒアルロン酸ポリマー、アルギン酸塩、アクリル酸エステルポリマー、乳酸ポリマー、グリコール酸ポリマー、乳酸／グリコール酸ポリマー、精製タンパク質、精製ペプチド、および細胞外マトリクス組成物からなる群より選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４６】
前記結合剤が前記表面に共有結合的に、非共有結合的に、静電的に、または疎水的に付着する、請求項１記載の方法。
【請求項４７】
少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団が、培養において、２０、４０、または１００回の継代後に実質的に未分化のままである、請求項２記載の方法。
【請求項４８】
結合剤と接触させられる前記の少なくとも１個の幹細胞が、薬剤を用いて分化するように誘導される、請求項４７記載の方法。
【請求項４９】
少なくとも１個の幹細胞の拡張を誘導することができる前記薬剤が、ＴＰＯ、ＳＣＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−７、ｆｌｔ−３Ｌ、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｅｐｏ、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＦＧＦ−４、ＦＧＦ−２０、ＶＥＧＦ、アクチビン−Ａ、ＩＧＦ、ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＬＩＦ、ＰＤＧＦ、および骨形成タンパク質ファミリーのメンバーからなる群より選択される、請求項４８記載の方法。
【請求項５０】
多分化能または多能性ヒト胚幹細胞の精製された調製物であって、前記細胞が：（ｉ）内胚葉、中胚葉、および外胚葉組織の派生物に分化する能力、（ｉｉ）正常な核型、（ｉｉｉ）少なくとも約１０回の継代の間、ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養において増殖する能力を有し、ならびに（ｉｖ）請求項１記載の方法から得られる、調製物。
【請求項５１】
前記細胞が、結合剤と接触した際、本質的に分化を阻害される、請求項５０記載の調製物。
【請求項５２】
前記結合剤が、抗体、抗体断片、レクチン、およびグリコシダーゼからなる群より選択される、請求項５０記載の調製物。
【請求項５３】
前記結合剤がレクチンである、請求項２２記載の調製物。
【請求項５４】
前記レクチンがＥＣＡ、ＰＳＡ、ＰＷＡ、ＭＡＡ、ＷＦＡ、ＧＳ ＩＩおよびＬＴＡからなる群より選択される、請求項５３記載の調製物。
【請求項５５】
前記調製物が、培養において、２０、４０、または１００回の継代後に実質的に未分化のままである、請求項５０記載の調製物。
【請求項５６】
前記調製物が動物で生成された抗体または血清に曝露されていない、請求項５０記載の調製物。
【請求項５７】
前記細胞がＳＳＥＡ−３およびＳＳＥＡ−４マーカーに対して陽性である、請求項５０記載の調製物。
【請求項５８】
前記細胞がＴＲＡ−１−６０およびＴＲＡ−１−８１マーカーに対して陽性である、請求項５０記載の調製物。
【請求項５９】
前記細胞が、懸濁培養にかけられたか、または免疫無防備状態の動物に移植された際に、胚様体を形成することができる、請求項５０記載の調製物。
【請求項６０】
請求項１に従って得ることができる、幹細胞の集団または少なくとも１個の幹細胞。
【請求項６１】
前記細胞または細胞群が幹細胞マーカーを少なくとも２０回の継代の間維持する、請求項５０記載の幹細胞の集団または少なくとも１個の幹細胞。
【請求項６２】
式Ｔ１
［式中、Ｘは結合位置であり Ｒ１、Ｒ２、およびＲ６はＯＨもしくはグリコシド結合した単糖残基シアル酸、好ましくはＮｅｕ５Ａｃα２もしくはＮｅｕ５Ｇｃ α２、最も好ましくはＮｅｕ５Ａｃα２であり、またはＲ３、はＯＨまたはグリコシド結合した単糖残基Ｆｕｃα１（Ｌ−フコース）またはＮ−アセチル（Ｎ−アセトアミド、ＮＣＯＣＨ３）であり；Ｒ４、はＨ、ＯＨまたはグリコシド結合した単糖残基Ｆｕｃα１（Ｌ−フコース）であり、Ｒ４がＨである場合、Ｒ５はＯＨであり、Ｒ４がＨではない場合、Ｒ５はＨであり；Ｒ７はＮ−アセチルまたはＯＨであり、Ｘは前記細胞からの天然オリゴ糖主鎖構造、好ましくはＮ−グリカン、Ｏ−グリカンもしくは糖脂質構造であり；またはｎが０である場合、Ｘは無であり、Ｙはリンカー基、好ましくはＯ−グリカンおよびＯ−結合末端オリゴ糖および糖脂質のための酸素、ならびにＮ−グリカンのためのＮ、またはｎが０である場合、無であり；Ｚは担体構造、好ましくは細胞により産生された天然担体であり、例えばタンパク質または脂質であって、好ましくは担体上のセラミドもしくは分岐グリカンコア構造、またはＨであり；アーチはガラクトピラノシルからの結合が左側の残基の３位または４位いずれかに対するものであること、およびＲ４構造が他の４または３位にあることを表し；ｎは０または１の整数であり、ｍは１〜１０００、好ましくは１〜１００、および最も好ましくは１〜１０の整数（担体上のグリカンの数）であり、ただしＲ２およびＲ３のうち１つはＯＨまたはＲ３はＮ−アセチルであり、左側の第１の残基が右側の残基の４位に結合する場合、Ｒ６はＯＨであり：ＸはＧａｌα４Ｇａｌβ４Ｇｌｃではなく、（ＳＳＥＡ−３または４のコア構造）またはＲ３はフコシルである］
の幹細胞上のグリカン構造を認識することができる結合剤の群より選択される結合剤を選択する工程を含む方法。
【請求項６３】
前記グリカン構造が式Ｔ２
［式中、Ｒ１〜Ｒ６を含む変数は式Ｔ１に対して記載されるものと同様である］
によるものである、請求項６２記載の方法。
【請求項６４】
前記グリカン構造が式Ｔ３
［式中、Ｒ１〜Ｒ７を含む変数は式Ｔ１に対して記載されるものと同様である］
によるものである、請求項６２記載の方法。
【請求項６５】
前記グリカン構造が式Ｔ４：
Ｇａｌβ１−ｘＨｅｘ（ＮＡｃ）ｐ、 （Ｔ４）
［ｘは結合位置３または４であり、
および、ＨｅｘはＧａｌまたはＧｌｃであり
ただしｐは０または１であり、ｘが結合位置３である場合、ｐは１であり、ＨｅｘＮＡｃはＧｌｃＮＡｃまたはＧａｌＮＡｃであり、および、ｘが結合位置４である場合、ＨｅｘはＧｌｃである。コアＧａｌβ１−３／４エピトープは、１または２個の構造ＳＡαまたはＦｕｃαにより、任意に水酸基に置換され、ここでＳＡはシアル酸である］
のグリカン構造である、請求項６２記載の方法。
【請求項６６】
前記細胞調製物が胚性幹細胞または非造血成体幹細胞調製物である、請求項６２記載の方法。
【請求項６７】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、グリカン構造を結合する１または複数種の結合剤と接触させること、を含み、前記結合剤はＭａｎα結合レクチンＦＲＩＬ群レクチンもしくは同様な特異性を有するレクチンまたは造血幹細胞の培養のために用いられる他のレクチンではなく、または前記結合剤は共有結合的に表面に付着する、造血幹細胞の調節または培養のための方法。
【請求項６８】
前記結合剤が上記請求項のうちいずれかに記載される特異性を有する、請求項６４記載の方法。
【請求項６９】
前記調節が前記細胞の分化を伴う、請求項６７および６８のいずれかに記載の方法。
【請求項７０】
前記結合物質がＧＦ２８７、ＧＦ２７９、ＧＦ２８８、ＧＦ２８４、ＧＦ２８３、ＧＦ２８６、ＧＦ２９０、ＧＦ２８９、ＧＦ２７５、ＧＦ２７６、ＧＦ２７７、ＧＦ２７８、ＧＦ２９７、ＧＦ２９８、ＧＦ３０２、ＧＦ３０３、ＧＦ３０５、ＧＦ３０７、ＧＦ３５３、およびＧＦ３５４からなる群より選択される抗体と同一のエピトープに結合する、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記結合物質がＧＦ２８７、ＧＦ２７９、ＧＦ２８８、ＧＦ２８４、ＧＦ２８３、ＧＦ２８６、ＧＦ２９０、およびＧＦ２８９、ＧＦ２７５、ＧＦ２７６、ＧＦ２７７、ＧＦ２７８、ＧＦ２９７、ＧＦ２９８、ＧＦ３０２、ＧＦ３０３、ＧＦ３０５、ＧＦ３０７、ＧＦ３５３、およびＧＦ３５４からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項７２】
前記タンパク質が、少なくとも部分的に２つの単糖構造および前記単糖残基間の結合構造を認識する高特異性結合剤である、請求項１３記載の方法。
【請求項７３】
保存された増殖する能力を有するが、本発明の幹細胞を本発明の結合剤との接触の下で培養することを含む、分化状態における阻害を有し、ここで任意に前記結合剤は表面に付着する、幹細胞。
【請求項７４】
前記細胞が全能性幹細胞、多能性幹細胞、および前駆幹細胞からなる群より選択される、請求項７３記載の方法。
【請求項７５】
最初にある期間結合剤との接触の下で培養され、次いで第２の／異なる結合剤を含んだ第２の培養液中およびサイトカインまたは増殖因子の同一のまたは各種の混合物中で培養される、請求項７３記載の細胞。
【請求項７６】
任意に少なくとも１種の、幹細胞を支持するまたはその分化を誘導することが知られる、ＷＮＴシグナル伝達アゴニスト、ＴＧＦ−ｂ、ｂＦＧＦ、ＩＬ−６、ＳＣＦ、ＢＭＰ−２、トロンボポエチン、ＥＰＯ、ＩＧＦ−１、ＩＬ−１１、ＩＬ−５、Ｆｌｔ−３／Ｆｌｋ−２リガンド、フィブロネクチン、ＬＩＦ、ＨＧＦ、ＮＦＧ、アンギオポイエチン様２および３、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｔｐｏ、Ｓｈｈ、Ｗｎｔ−３ａ、Ｋｉｒｒｅ、およびそれらの混合物からなる群より選択される増殖因子を添加した細胞培養液または増殖培地中で前記細胞が維持される、請求項７３記載の細胞。
【請求項７７】
ＩＬ−３（約２０ｎｇ／ｍｌ）、ＩＬ−６（約２５０ｎｇ／ｍｌ）、ＳＣＦ（約１０ｎｇ／ｍｌ）、ＴＰＯ（約２５０ｎｇ／ｍｌ）、ｆｌｔ−３Ｌ（約１００ｎｇ／ｍｌ）からなる群より選択される増殖因子を添加した、請求項７６記載の培地。
【請求項７８】
前記細胞が、ＧＳＫ−３の阻害剤、ヒストン脱アセチル化酵素活性の阻害剤、およびＤＮＡメチル基転移酵素活性の阻害剤、のうちの１または複数種から選択される薬剤の存在下で維持される、請求項７３または７６に記載の細胞。
【請求項７９】
前記結合剤がレクチン、抗体またはグリコシダーゼである、請求項７３〜７６のうちいずれか１項に記載の細胞。
【請求項８０】
前記表面が、金属、ガラス、プラスチック、共重合体、コロイド、脂質、細胞表面等からなる群より選択される、上記請求項のうちいずれかに記載される方法または細胞。
【請求項８１】
前記結合剤がグリカン結合タンパク質の複合体であって、好ましくは前記結合剤タンパク質のグリカンから結合する、好ましくはポリバレントな複合体である、請求項１記載の方法。
【請求項８２】
前記結合剤が固定化される、請求項１または８１記載の方法。
【請求項８３】
固定化が非共有結合的な相互作用または共有結合的な固定化を含む、請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；ならびに（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の、グリカン構造を結合する結合剤または幹細胞の培養に用いられる他のレクチンと接触させ、または前記結合剤は特異的にもしくは共有結合的に表面に付着し、および任意に、ここで前記結合剤は図のいずれかに記載の結合剤を含むこと；を含む、幹細胞の調節または培養のための結合剤を選択するための方法。
【請求項８５】
幹細胞上の前記グリカン構造が請求項または明細書内の上記グリカン構造の式のうちいずれかを含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項８６】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、およびここで幹細胞の増殖の速度が増加し、前記幹細胞の未分化状態が維持される、結合剤の選択または最適化のための方法。
【請求項８７】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、およびここで幹細胞の増殖の速度が減少し、前記幹細胞の未分化状態が維持される、結合剤の選択のための方法。
【請求項８８】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、およびここで幹細胞の増殖の速度が減少し、前記幹細胞の未分化状態が維持される、結合剤の選択のための方法。
【請求項８９】
（ｉ）少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を提供すること；および（ｉｉ）前記の少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団を、１または複数種の結合剤に接触させること；を含み、ここで、任意に、前記結合剤は上記請求項のうちいずれかに記載のグリカン構造に結合し、ならびにここで幹細胞の接着状態、形態、増殖速度および／または分化状態が変化する、結合剤の選択のための方法。
【請求項９０】
グリカン構造がα３−フコシル化構造を含む、上記請求項のうちいずれかに記載の方法または細胞。
【請求項９１】
前記構造がＬｅｗｉｓ ｘおよびシアリルＬｅｗｉｓ ｘからなる群より選択される、請求項９０記載の方法または細胞。
【請求項９２】
前記結合剤が、α３−フコシル化構造、α２−フコシル化構造、非フコシル化シアリルラクトサミン、Ｇａｌβ３ＧａｌＮＡｃ構造、ＧａｌＮＡｃα構造、ポリ−Ｎ−アセチルラクトサミン構造、および特異的マンノース構造からなる群より選択される構造を認識する、上記請求項のうちいずれかに記載の方法。
【請求項９３】
前記表面が、プレート、ディッシュ、バッグ、ロッド、ペレット、ファイバー、粒子およびメッシュからなる群より選択される、請求項７３または８０に記載の方法。
【請求項９４】
前記粒子が、ビーズ、ミクロスフィア、ナノ粒子、およびコロイド粒子からなる群より選択される、請求項９３記載の方法。
【請求項９５】
前記表面が、ガラス、シリカ、シリコン、コラーゲン、ヒドロキシアパタイト、ヒドロゲル、ＰＴＦＥ、ポリプロピレン、ポリスチレン、ナイロン、デキストラン、およびポリアクリルアミドからなる群より選択される、請求項９３記載の方法。
【請求項９６】
前記表面が生体適合性、天然、合成であるか、またはポリマーを含む、請求項９３記載の方法。
【請求項９７】
前記ポリマーが、ポリエステル、ポリエーテル、ポリアンヒドリド（ｐｏｌｙａｎｈｙｄｒｉｄｅｓ）、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリオルトエステル、ポリホスファゼン、ポリ酢酸ビニル、ブロック共重合体、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、およびポリウレタンからなる群より選択される、請求項９６記載の方法。
【請求項９８】
前記生体適合性表面が、コラーゲン、金属、ヒドロキシアパタイト、バイオガラス、アルミン酸塩、バイオセラミック材料、ヒアルロン酸ポリマー、アルギン酸塩、アクリル酸エステルポリマー、乳酸ポリマー、グリコール酸ポリマー、乳酸／グリコール酸ポリマー、精製タンパク質、精製ペプチド、および細胞外マトリクス組成物からなる群より選択される、請求項９６記載の方法。
【請求項９９】
前記結合剤が前記表面に共有結合的に、非共有結合的に、静電的に、疎水的に付着し、または前記結合剤はグリカン結合タンパク質の複合体であって、好ましくは前記結合剤タンパク質のグリカンから結合する、好ましくはポリバレントな複合体である、請求項７２〜９８のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１００】
少なくとも１個の幹細胞または幹細胞集団が、培養において、２０、４０、または１００回の継代後に実質的に未分化のままである、請求項７２〜９９のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０１】
結合剤と接触させられる前記の少なくとも１個の幹細胞が、前記結合剤を用いて分化するように誘導される、請求項７２〜９９のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０２】
前記構造がＧａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、Ｆｕｃα２Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃ、およびＧａｌβ４（Ｆｕｃα３）ＧｌｃＮＡｃからなる群より選択される、請求項１〜１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記結合剤がＥＣＡ、ＤＰＡ、ガレクチン−１、およびＵＥＡからなる植物レクチン群から選択される、請求項１〜１０２のうちいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０４】
前記タンパク質のＮ グリコシル化部位が変異している、組み替え非グリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）ＥＣＡタンパク質。
【請求項１０５】
表面に結合した、請求項１０４記載の組み替え非グリコシル化ＥＣＡタンパク質。
【請求項１０６】
請求項１０４記載の組み替え非グリコシル化ＥＣＡタンパク質またはその機能断片をコードするアミノ酸配列。
【請求項１０７】
請求項１０４記載の非グリコシル化ＥＣＡタンパク質またはその機能断片をコードする核酸配列。
【請求項１０８】
請求項１０７記載の核酸を含む宿主細胞。’
【請求項１０９】
式ＣＯＮＪ
Ｂ−（Ｇ−）ｍＲ１−Ｒ２−（Ｓ１−）ｎＴ−
［式中、Ｂは前記結合剤であり、Ｇはグリカン（前記結合剤がグリカンを結合する場合）であり、
Ｒ１およびＲ２は化学選択的連結基であり、Ｔはタグ、好ましくはビオチンであり、Ｌはタグに特異的に結合するリガンドであり；Ｓ１は任意のスペーサー基、好ましくは炭素数１〜１０のアルキルであり、
ｍおよびｎは独立に０または１のいずれかの整数である］
の結合剤複合体構造。
【請求項１１０】
前記結合剤が、好ましくは酸化グリカンを介してグリカンと複合化する、請求項１０９記載の結合剤複合体。
【請求項１１１】
式ＣＯＭＰ
Ｂ−（Ｇ−）ｍＲ１−Ｒ２−（Ｓ１−）ｎ（Ｔ−）ｐ（Ｌ−）ｒ−（Ｓ２）ｓ−ＳＯＬ
［式中、Ｂは結合剤であり、ＳＯＬは固相またはマトリクスまたは表面であり、Ｇはグリカン（前記結合剤がグリカンを結合する場合）であり、Ｒ１およびＲ２は化学選択的連結基であり、Ｔはタグ、好ましくはビオチンであり、Ｌはタグに特異的に結合するリガンドであり、Ｓ１およびＳ２は任意のスペーサー基、好ましくは炭素数１〜１０のアルキルであり、ｍ、ｎ、ｐ、ｒおよびｓは独立に０または１のいずれかの整数である］
の構造を含む複合体。
【請求項１１２】
請求項１１１に記載の複合化結合剤。
【請求項１１３】
前記結合剤が、好ましくはＳＯＬへの酸化グリカンを介してグリカンと複合化する、請求項１１１記載の結合剤結合複合体。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２−１】
【図３２−２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８−１】
【図３８−２】
【図３９−１】
【図３９−２】
【図４０】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２−１】
【図３２−２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８−１】
【図３８−２】
【図３９−１】
【図３９−２】
【図４０】
【公表番号】特表２０１０−５１６２３９（Ｐ２０１０−５１６２３９Ａ）
【公表日】平成２２年５月２０日（２０１０．５．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５４５９６５（Ｐ２００９−５４５９６５）
【出願日】平成２０年１月１８日（２００８．１．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＩ２００８／０５００１６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０８７２５７
【国際公開日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【出願人】（５０９２０５２５０）
【出願人】（５０９２０５２６１）グリコス フィンランド リミテッド (5)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年５月２０日（２０１０．５．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１月１８日（２００８．１．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＩ２００８／０５００１６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０８７２５７
【国際公開日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【出願人】（５０９２０５２５０）
【出願人】（５０９２０５２６１）グリコス フィンランド リミテッド (5)
【Ｆターム（参考）】
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