脂質代謝改善剤
【課題】コレステロール合成阻害薬に抵抗性を示す高脂血症患者における脂質代謝を安全に改善する薬剤の提供。
【解決手段】ジグリセリドと、植物性ステロール類と、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤を有効成分とする、初期の血中総コレステロール値≧２００ｍｇ／ｄｌであり、かつコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【解決手段】ジグリセリドと、植物性ステロール類と、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤を有効成分とする、初期の血中総コレステロール値≧２００ｍｇ／ｄｌであり、かつコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は高脂血症患者における脂質代謝改善剤、特にコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
高脂血症は、血中コレステロール、血中トリグリセリド等が高い状態をいい、高脂血症は動脈硬化症、心疾患、脳血管性疾患等の虚血性疾患の危険因子であることから、積極的に治療が行なわれている。高脂血症のうち高コレステロール血症を伴なう疾患の代表的な治療薬として、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤であるスタチン系薬剤が開発され、大きな効果をあげている。スタチン系薬剤は、体内特に肝臓におけるコレステロール合成を拮抗的に阻害する作用を有し、一般的には、血液から肝臓へのＬＤＬ粒子の受け渡しをするタンパク質（ＬＤＬレセプター）の遺伝子発現を増加させ、血清コレステロール濃度を速やかに低下する効果を示す。
しかし、肝臓でのコレステロール合成能の低い人や小腸でのコレステロール吸収の高い人においては、血清コレステロールの十分な低下効果が得られにくく、単剤での治療には限界があることも知られている。また、スタチン系薬剤を長期間服用した場合、薬剤のフィードバック作用として小腸でのコレステロールの吸収が増加傾向となることも報告されており、コレステロールの合成と吸収の両方を制御することが重要と考えられている。
【０００３】
一般に、スタチン系薬剤単独の治療で十分なコレステロール低下効果が得られにくい場合には、食事療法を厳しく行ったり、該薬剤の服薬量を増やしたり、あるいは別な薬剤と組み合わせた治療が必要とされている。しかし、該薬剤の服薬量を増やしたり、複数の薬剤を使用する場合には、薬剤の副作用に十分に注意して安全性が損なわれないように配慮することが必要となる他、患者に金銭的・精神的な面で余分な負担をかけることになる。
【０００４】
従って、スタチン系薬剤に代表されるコレステロール合成阻害薬の投与によっても十分なコレステロール低下効果が得られない高脂血症患者、すなわちコレステロール合成阻害薬抵抗性高脂血症患者における脂質代謝改善剤が望まれている。
【０００５】
一方、ジグリセリドには、血清トリグリセリド低下作用、体重増加抑制作用など数多くの生理活性のあることが知られている（例えば、特許文献１〜６及び非特許文献１及び２参照）が、コレステロール合成阻害薬抵抗性高脂血症患者の脂質代謝に対してどのような作用があるかについては知られていない。
【０００６】
また、近年、生活習慣病である心筋梗塞や脳梗塞は、マルチプルリスクファクターとよばれる種々の動脈硬化のリスク要因（肥満、高中性脂肪、高レムナント、高コレステロール、高血糖、高血圧、炎症系因子）の集積により、症状を悪化させ発症を早めることが知られるようになってきた。よって、コレステロールの治療以外に他の動脈硬化のリスク要因を複合的に改善していくことが、生活習慣病の予防の上で非常に重要な課題となってくる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平４−３００８２５号公報
【特許文献２】特開２００１−６４１７０号公報
【特許文献３】特開２００１−３０２５０９号公報
【特許文献４】特開平１０−１７６１８１号公報
【特許文献５】国際公開第９９／４８３７８号パンフレット
【特許文献６】特開２００２−３２２０５２号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｊ． Ｎｕｔｒｉ．， １３１， ｐ．３２０４（２００１）
【非特許文献２】Ｊ． Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．， ４２， ｐ．３７２（２００１）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の課題は、コレステロール合成阻害薬に抵抗性を示す高脂血症患者における脂質代謝を安全に改善するための薬剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
そこで本発明者は、ジグリセリド、又はジグリセリドと植物性ステロールとの組み合せを、スタチン系薬剤によって十分な血中コレステロール効果の得られない高脂血症患者に対し、スタチン系薬剤と併用して投与したところ、スタチン系薬剤の投与量を増やさずに顕著に血中脂質及び種々の関連因子が改善されることを見出した。
【００１１】
すなわち、本発明は、ジグリセリドを有効成分とするコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善剤を提供するものである。
また本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とするコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善剤を提供するものである。
また本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とする血中フィブリノーゲン低下剤を提供するものである。
さらに、本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とする血中ＴＮＦ−α受容体低下剤を提供するものである。
さらにまた、本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とする血中ＶＣＡＭ−１低下剤を提供するものである。
また、本発明は、ジグリセリド又は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とするコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善作用を有する食品を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
コレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者に、ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を投与すれば、各種脂質代謝因子が改善される。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明で使用するジグリセリドの構成脂肪酸は、炭素数８〜２４、特に１６〜２２であることが好ましい。ジグリセリドの全構成脂肪酸中、不飽和脂肪酸含量は、好ましくは８０〜１００重量％（以下単に％と記載する）、より好ましくは８５〜１００％、さらに好ましくは９０〜１００％、特に好ましくは９３〜１００％、最も好ましくは９４〜９８％である。
さらに、脂質代謝改善効果をより高めるという点から、（シス型不飽和）／（トランス型不飽和＋飽和）は６以上が好ましく、より好ましくは９〜２５、さらに好ましくは９〜２０である。また、ジグリセリド中のトランス型不飽和脂肪酸は、５％以下が特に好ましい。飽和脂肪酸含量は、１０％以下が好ましく、５％以下が特に好ましい。
ジグリセリドを構成する脂肪酸のうち、オレイン酸の含有量は２０〜６５％、好ましくは２５〜６０％、特に３０〜５０％、殊更３０〜４５％であるのが外観、脂肪酸の摂取バランスの点で望ましい。
ジグリセリドを構成する脂肪酸のうち、リノール酸の含有量は１５〜６５％、好ましくは２０〜６０％、特に３０〜５５％、殊更３５〜５０％であるのが、脂肪酸の摂取バランスの点で望ましい。さらに、酸化安定性、生理効果の点から、リノール酸／オレイン酸の含有重量比が０．０１〜２．０、好ましくは０．１〜１．８、特に０．３〜１．７であることが望ましい。
ジグリセリドを構成する脂肪酸のうち、リノレン酸の含有量は１５％未満、好ましくは０〜１３％、さらに１〜１０％、特に２〜９％であるのが、脂肪酸の摂取バランス、酸化安定性の点で望ましい。リノレン酸には、異性体としてα−リノレン酸とγ−リノレン酸が知られているが、α−リノレン酸が好ましい。
ジグリセリドには、１，３−ジグリセリドと１，２−ジグリセリド（２，３−ジグリセリド）が存在する。１，３−ジグリセリドと１，２−ジグリセリドの重量比率は７：３であることがより好ましい。ジグリセリド中の１，３−ジグリセリドが、全ジグリセリド中の５０％以上、さらに５５〜１００％、特に６０〜９０％であることが、脂質代謝改善効果を強化し、工業的生産性を改善する点から好ましい。
【００１４】
本発明で使用するジグリセリドは、例えば目的の構成脂肪酸を有する油脂とグリセリンとをエステル交換反応するか、あるいは目的の構成脂肪酸又はそのエステルとグリセリンとの混合物にリパーゼを作用させてエステル化反応を行うことにより製造される。反応中の異性化を防止する上で、リパーゼを用いたエステル化反応がより好ましい。また、リパーゼを用いたエステル化反応においても、反応終了後の精製段階における異性化を防止するため、精製手段も脂肪酸の異性化が生起しないような穏和な条件で行うのが好ましい。
【００１５】
このように、ジグリセリドはトリグリセリド等も含有する油脂組成物として使用するのが好ましい。当該油脂組成物としては、効果の点からジグリセリドを１５〜１００％含むのが好ましく、より好ましくは３５〜９９％、さらに好ましくは６０〜９５％、特に好ましくは７０〜９５％、最も好ましくは８０〜９５％含有するのがよい。ジグリセリドはトリグリセリドに比べて、消化過程でリパーゼにより分解されて生じる脂肪酸が、小腸上皮中に滞留しやすいので、ジグリセリドを１５％以上含む油脂組成物を使用すると、優れた脂質代謝改善効果が得られる。
【００１６】
当該油脂組成物にはトリグリセリドを含んでいてもよく、油脂組成物中のトリグリセリド含量は、効果、風味、酸化安定性の点から０〜８５％であり、好ましくは１〜６４．９％、さらに好ましくは５〜３９．９％、最も好ましくは５〜１９．９％である。トリグリセリドの構成脂肪酸として、効果、風味、食感の点で炭素数１６〜２２の不飽和脂肪酸を好ましくは８０〜１００％、より好ましくは８５〜１００％、さらに９０〜１００％、特に９３〜１００％、最も好ましくは９４〜９８％含有するのがよい。また酸化安定性の点から、トリグリセリドの構成脂肪酸として、ω３系不飽和脂肪酸を好ましくは０〜４０％、さらに０〜３０％、特に０〜２０％、最も好ましくは０〜１５％含有するのがよい。
【００１７】
当該油脂組成物にはモノグリセリドを含んでいてもよく、その含量は、風味、酸化安定性の点から０〜３０％であり、好ましくは０．１〜１０％、さらに好ましくは０．１〜５％、特に好ましくは０．１〜２％、最も好ましくは０．１〜１．５％であるのがよい。モノグリセリドの構成脂肪酸は、製造上の観点から、ジグリセリドと同じであることが好ましい。
【００１８】
当該油脂組成物に含まれる遊離脂肪酸（塩）は、風味、発煙防止、工業的生産性の点から、３．５％以下に低減されるのがよく、好ましくは０〜２％、さらに好ましくは０〜１％、特に好ましくは０〜０．５％、最も好ましくは０．０５〜０．２％とするのがよい。
本発明に使用される油脂組成物を構成する全脂肪酸中、炭素−炭素二重結合を４つ以上有する脂肪酸の含有量は、酸化安定性の点で０〜４０％、好ましくは０〜２０％、さらに０〜１０％、特に０〜１％であるのがよく、実質的に含まないのが最も好ましい。
【００１９】
当該油脂組成物には酸化安定性を向上させるために、抗酸化剤を添加するのが好ましい。抗酸化剤としては、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、リン脂質、ポリフェノール、ターシャルブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）等が挙げられ、２種以上を組み合わせて使用してもよい。上記の抗酸化剤は、油脂組成物中に０．００５〜０．２％、特に０．０４〜０．１％含有することが好ましい。
【００２０】
当該油脂組成物には、さらに結晶抑制剤を添加するのが好ましい。本発明で使用する結晶抑制剤としては、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等のポリオール脂肪酸エステル等が挙げられる。これらは２種以上を組み合わせて使用してもよい。結晶抑制剤は、当該油脂組成物中に、０．０２〜０．５％、特に０．０５〜０．２％含有するのが好ましい。
【００２１】
また、本発明で使用される植物性ステロール類としては、例えばα−シトステロール、β−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、α−シトスタノール、β−シトスタノール、スチグマスタノール、カンペスタノール、シクロアルテノール等のフリー体、及びこれらの脂肪酸エステル、フェルラ酸エステル、桂皮酸エステル等のエステル体が挙げられる。当該植物性ステロールはジグリセリドと組み合せて用いられ、前記ジグリセリドを含有する油脂組成物中に植物性ステロール類を配合して用いるのが好ましい。当該油脂組成物中の植物性ステロール類の含有量は、０．０５〜４．７％、特に０．３〜１．２％が好ましい。
【００２２】
本発明の医薬の投与形態としては、例えば散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等の経口投与剤が挙げられる。この経口投与剤は、それぞれ上記油脂組成物の他、経口投与剤の形態に応じて一般に用いられる、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール類、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料等のうちの１種又はそれ以上を添加して製造することができる。油脂組成物を使用する場合、経口投与用医薬品中のその含有量は、医薬品の用途及び形態によっても異なるが、一般に０．１〜１００％、さらに１〜８０％、特に２〜８０％が好ましい。
【００２３】
本発明において、ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を食品形態にして摂食する場合、ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を含有した油脂加工食品とすればよく、例えば特定の機能を発揮して健康増進を図る健康食品、機能性食品、特定保健用食品、病者用食品等とすることができる。具体的には、カプセル、錠剤、顆粒剤、パンやケーキ、クッキー、パイ、バー、ベーカリーミックス等のベーカリー食品類、フレンチドレッシング等のドレッシング類、マヨネーズ等の水中油型乳化食品、マーガリンやスプレッド等の油中水型乳化食品、クリーム類、チョコレートやポテトチップス、アイスクリーム、デザート等の菓子や、飲料、スープ、ソース、コーヒーホワイトナー、ホイップクリーム、焼き肉のタレ、ピーナツバター、フライングショートニング、ベーキングショートニング、加工肉製品、冷凍食品、粉末食品、ミールリプレイサー等の他、天ぷらやフライ、炒め物等に用いる調理油のような食品素材が挙げられる。かかる食品は、油脂組成物の他に、食品の種類に応じて一般に用いられる食品原料を添加し、製造することができる。このような食品中の油脂組成物の含有量は、食品の種類によっても異なるが、一般に０．１〜１００％、さらに１〜８０％、特に２〜８０％が好ましい。
【００２４】
以下、本発明のジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を含有した油脂加工食品について説明する。本発明において、油脂加工食品とは、ジグリセリドを１５％以上含有する油脂組成物又はジグリセリドを１５％以上及び植物性ステロールを０．０５〜４．７％含有する油脂組成物と、他の食品原料を配合し、加工した食品をいう。油脂加工食品に用いられる原料成分としては、下記のものがある。
【００２５】
（１）食用油脂
本発明に使用する食用油脂は、一般的な食用油脂であれば特に限定されない。例えば、天然の動植物油脂の他、それらにエステル交換、水素添加、分別等を施した加工油脂が挙げられる。好ましくは、大豆油、菜種油、綿実油、米糠油、コーン油、ヒマワリ油、パーム油、パーム核油、ヤシ油等の植物油及びそれらの加工油脂を用いるのがよい。
【００２６】
（２）乳化剤
一般的に食品に用いられる乳化剤であれば特に限定されない。例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン及びその分解物、卵蛋白、大豆蛋白、乳蛋白及びこれらの蛋白質より分離もしくは加水分解により得られる各種蛋白質、ペプチド等が挙げられる。
【００２７】
（３）増粘剤
一般的に食品に用いられる増粘剤であれば特に限定されない。例えば、キサンタンガム、ジェランガム、グアーガム、カラギーナン、ペクチン、トラガントガム、各種デンプン等の多糖類、ゼラチン、卵白等の蛋白質が挙げられる。
【００２８】
（４）食塩、糖質、食酢、調味剤等の各種呈味料
（５）スパイス、フレーバー等の各種香味料
（６）各種着色料
（７）トコフェロール、天然抗酸化成分等の抗酸化剤
【００２９】
以下、本発明の好ましい処方例を示す。しかし、本発明の用途を限定するものではない。
【００３０】
ａ）酸性水中油型油脂加工食品
・油相／水相；２０／８０〜８０／２０（好ましくは３０／７０〜７０／３０）
・ジグリセリドの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に８０％以上）
・植物性ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・乳化剤量；０．０５〜５％
・ｐＨ；２〜６
ｐＨは、食酢、クエン酸等の有機酸又はその塩、レモン果汁等の酸味料で調整する。上記原料を用い、常法により、脂質代謝改善効果を有するドレッシング、マヨネーズ等の酸性水中油型油脂加工食品を調製することができる。
【００３１】
＜処方例＞ マヨネーズ
水相
食塩 ３．０重量部
砂糖 １．０
調味料（グルタミン酸ナトリウム） ０．５
香辛料（マスタード粉末） ０．３
卵黄 １４
食酢（酸度１０％） ８
増粘剤 ０．５
水 ２２．７
油相
油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ） ５０
【００３２】
ｂ）油中水型可塑性油脂加工食品
・水相／油相；１５／８５〜８５／１５（好ましくは２０／８０〜５０／５０）
・ジグリセリドの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に５０％以上）
・植物性ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・油相中の油脂の融点；２０〜５０℃（好ましくは２０〜４０℃）
上記原料を用い、常法により、脂質代謝改善効果を有するマーガリン、スプレッド等の油中水型可塑性油脂加工食品を調製することができる。
【００３３】
＜処方例＞ スプレッド
油相
油脂＊ ６９．３重量部
レシチン ０．１
モノグリセリド ０．５
フレーバー ０．１
水相
水 ２８．４
脱脂粉乳 ０．３
食塩 １．３
＊油脂：油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ）；７０％／部分硬化パーム油（ＩＶ＝４０）；３０％、融点３６℃
【００３４】
ｃ）ベーカリー食品
・油脂量；１０〜４０％
・ジグリセリドの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に５０％以上）
・植物性ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・小麦粉；２０〜６５％
・糖質；５〜３０％
・全卵；０〜２０％
・食塩；０．１〜２％
・ベーキングパウダー；０〜１％
上記原料を用い、常法により、脂質代謝改善効果を有するショートブレッド（バー）、ブリオッシュ等のベーカリー食品を調製することができる。
【００３５】
＜処方例＞ ショートブレッド（バー）
小麦粉 ６０重量部
油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ） １０
砂糖 ２４．６
食塩 ０．４
全卵 ５
【００３６】
コレステロール合成酵素阻害薬の投与によって血中総コレステロール値が２２０ｍｇ／ｄｌ程度までしか低下しない高脂血症患者に、当該コレステロール合成阻害薬に加えてジグリセリド、又はジグリセリドと植物性ステロール類の組み合せてを経口投与すれば、種々の脂質代謝が改善される。ここで、コレステロール合成酵素阻害薬としては、スタチン系薬剤が好ましく、例えばプラバスタチンナトリウム、アトルバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチンナトリウム等が挙げられる。
【００３７】
ジグリセリドの投与により改善される脂質代謝関連因子としては、血中トリグリセリド、血中レムナント様コレステロール、血中アポリポ蛋白Ｅが挙げられる。ここで、アポリポ蛋白Ｅとは、カイロミクロン、超低比重リポ蛋白（ＶＬＤＬ）、ＨＤＬの主要なアポ蛋白の一つである。また、アポリポ蛋白Ｅは、細胞表面に存在するＬＤＬリセプター（アポＢ）、レムナントリセプター、ＶＬＤＬリセプター関連蛋白などに結合するリガンドである。このアポリポ蛋白Ｅに異常があると、カイロミクロンレムナント、ＩＤＬの代謝が遅延し、ＩＩＩ型の高脂血症を発症することが知られている。
【００３８】
ジグリセリドと植物性ステロール類の投与により改善される脂質代謝関連因子としては、血中トリグリセリド、血中レムナント様コレステロール、血中アポリポ蛋白Ｅ、血中総コレステロール、血中ＬＤＬコレステロール、血中アポリポ蛋白Ｂが挙げられる。
【００３９】
またジグリセリドと植物性ステロール類の投与により、一般の脂質代謝関連因子以外の因子、血中フィブリノーゲン、血中ＴＮＦ−α受容体、血中ＶＣＡＭ−１が顕著に低下する。ジグリセリドと植物性ステロール類が血中フィブリノーゲンを低下させることから、これらが血栓傾向を低下させ、血栓防止剤として有用であることがわかる。
ここで、ＴＮＦ（Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ）−αとは、脂肪組織とくに内臓脂肪より多く分泌される生理活性物質（アディポサイトカイン）の一つである。体内に蓄積した脂肪組織より分泌されたＴＮＦ−αが、筋肉、脂肪組織、肝臓での糖利用を抑制し、肥満によるインスリン抵抗性を介して、糖脂質代謝に異常をもたらすものと考えられている。ジグリセリドと植物性ステロール類が血中ＴＮＦ−α受容体を低下させることから、これらがインスリン抵抗性を改善し、糖脂質代謝改善剤として有用であることがわかる。
ここで、ＶＣＡＭ（Ｖａｓｃｕｌａｒ ｃｅｌｌ ａｄｈｅｎｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ）−１とは、細胞接着因子（リガンド）の一種であり、内皮細胞の炎症を引き金に発現し、マクロファージやＴリンパ球等の遊走を仲介し、泡沫細胞の形成を経て、動脈硬化の発生に深く関与することが知られている。ジグリセリドと植物性ステロール類が血中ＶＣＡＭ−１を低下させることから、これらが動脈硬化の炎症抑制剤として有用であることがわかる。
【００４０】
高脂血症患者における該ジグリセリドの摂取量は、大人１人当たり０．１〜２５ｇ、特に０．１〜２０ｇの範囲で１日に１〜数回に分けるのが好ましい。また、該植物性ステロール類の摂取量は、大人１人当たり１００〜５００ｍｇ、特に２００〜４００ｍｇの範囲で１日に１〜数回に分けることが好ましい。その摂取期間は１週間以上、好ましくは２週間以上、より好ましくは３週間以上、さらに１ヶ月以上、特に２ヶ月以上、最も好ましくは３ヶ月以上が望ましい。このように高脂血症患者に長期間ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を摂取させるためには、トリグリセリドの一部又は全部に該ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を用いた高脂血症患者用食品を調製して摂取させるのが好ましい。
【実施例】
【００４１】
Ｉ）対象及び方法：
１．対象：
４週間以上のプラバスタチン１０ｍｇの投与によっても、血中コレステロール値に十分な改善効果が得られない通院患者で、試験に同意された方を対象とした。ただし、血糖コントロールの不良な方、肝胆道系に障害のある方、スタチンや植物性ステロールなどに過敏な方は除いた。
【００４２】
２．試験食用油：
本試験では、家庭で使用する調理油を（１）トリグリセリド油（ＴＡＧ）、（２）ジグリセリド油（ＤＡＧ）、（３）植物性ステロール（ＰＳ）を４％含有するジグリセリド油（ＰＳ／ＤＡＧ）のいずれかにブラインドのもとに置き換え、試験期間中、自由に使用・摂取してもらった。各食用油の組成は、表１と表２に示した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
【表２】
【００４５】
３．方法：
プラバスタチン１０ｍｇ／日を服用しても血清コレステロールがある程度しか低下せず安定している患者（ｎ＝４９、年齢３０−７３才）に対して、１２週間のダブルブラインドの無作為並行群間比較試験（３群）を実施した。試験期間中、被験者はプラバスタチンを毎日１０ｍｇ／ｄ服用するとともに、家庭で使用する調理油を３種の試験油、（１）トリグリセリド油（ＴＡＧ）、（２）ジグリセリド油（ＤＡＧ）、（３）植物性ステロール（ＰＳ）を４％含有するジグリセリド油（ＰＳ／ＤＡＧ）のいずれかにブラインドにて置き換え摂取した（ＴＡＧとＤＡＧは同脂肪酸組成）。試験期間中の食事は、試験前と変わらぬように指示をした。その間の血清脂質、アポリポ蛋白、凝固・炎症系因子を測定した。採血は、予備期間の前と後及び試験期間終了時の計３回を午前中の空腹時に行い、同じに体重測定を行った。
【００４６】
４．統計解析方法
初期値との比較は対応のあるｔ−検定、群間での検定は分散分析（ＡＮＯＶＡ）を用い、危険率５％以下の場合に有意差ありと判定した。なお、初期値との有意差は＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１のように表示し、群間の有意差がｐ＜０．０５の場合、該当項目に異記号（アルファベットのａ、ｂ、ｃで）を付けた。
【００４７】
５．血液検査：
血清脂質（アポ蛋白含む）、凝固・炎症マーカー、肝機能の血液検査を実施した。検査項目の詳細を以下に示す。なお、血清は採取した血液を冷蔵下（５℃）で３，０００ｒｐｍ×１０ｍｉｎ．の遠心分離して得た。検査項目は（株）ＳＲＬ東京メディカルに分析を依頼した。
【００４８】
１）脂質系因子：中性脂肪（ＴＧ）、アポ蛋白Ｅ、レムナント様コレステロール（ＲＬＰ−Ｃ）、総コレステロール（ＴＣ）、ＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、アポ蛋白Ｂ（Ａｐｏ Ｂ）、ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）。なお、ＬＤＬ−ＣはＦｒｉｅｄｅｗａｌｄの計算式で算出した。また、カンペステロールについては、常法に従いガスクロマトグラフィーにて分析した。
２）凝固・炎症系因子：ｖａｓｃｕｌａｒ ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ−１（ＶＣＡＭ−１）、フィブリノーゲン（ＦＩＢ）、Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−１（ＴＮＦｒ−１）、Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−２（ＴＮＦｒ−２）、
３）肝機能：ＧＯＴ、ＧＰＴ、γ−ＧＴＰ
【００４９】
６．食事調査：
被験者の食事調査は、予備期間と試験終了１週間前の計２回、食事調査を実施し、五訂食品成分表から摂取内容を解析した。
【００５０】
ＩＩ）結果：
１．被験者のプロフィール：
被験者の身体・血清脂質関連項目のプロフィールを表３に示す。
【００５１】
【表３】
【００５２】
２．食事調査の結果：
試験期間中の被験者の食事調査の結果を表４に示す。各群とも脂肪のエネルギー比率は約２７％、コレステロール摂取量は、約３００ｍｇ／日となった。また、試験の前後において、各群の栄養素摂取に差はなく、また試験期間中においても、群間で栄養素摂取に有意な差は認められなかった。
【００５３】
【表４】
【００５４】
３．血液検査の結果：
血液分析項目について、試験開始前と試験期間終了後の値及びその差（Δ）の結果について、表５〜表７に示した。なお、今回の試験では、副作用は認められなかった。
【００５５】
【表５】
【００５６】
【表６】
【００５７】
【表７】
【００５８】
表６から明らかなように、初期のＴＣ≧２００ｍｇ／ｄｌの被験者において（ｎ＝４４）、次のことが判明した。
（１）ＰＳ／ＤＡＧ群において、ＴＣ、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ及びＶＣＡＭ−１の濃度が初期値に対して有意に低下した（ＴＣ：−１１ｍｇ／ｄｌ，−４．３％，ＬＤＬ−Ｃ：−８ｍｇ／ｄｌ，−４．９％，ＡｐｏＢ：−８ｍｇ／ｄｌ，−６．４％、ＶＣＡＭ−１：−９２ｎｇ／ｍｌ，−１７％）。血清コレステロール関係ではとくにＡｐｏＢに及ぼされる影響が大きく、ＤＡＧとＰＳの相乗効果が推察された。また、ＴＮＦｒ−１とＴＮＦｒ−２について低下傾向が認められた。
（２）ＤＡＧ群及びＰＳ／ＤＡＧ群において、ＲＬＰ−Ｃ、ＡｐｏＥとフィブリノーゲンは低下傾向を示した。さらに、安全性の項目であるＧＯＴ、ＧＰＴとγ−ＧＴＰについても同様に低下傾向が認められた。
（３）ＰＳ／ＤＡＧによる血清ＴＣの低下作用は、試験開始前の血清カンペステロール濃度に強く相関した（ｒ＝−０．５６９，ｐ＜０．０５）。
【００５９】
また、初期のＴＣ≧２００ｍｇ／ｄｌかつ初期のカンペステロール濃度≧中央値（０．６６ｍｇ／ｄｌ）の被験者（ｎ＝２２）において、さらに明らかな血清コレステロール低下効果が認められ（初期ＴＣ≧２００ｍｇ／ｄｌと比べて、約１．５倍の低下）、ＴＣはＴＡＧ群と比較して有意に低下した（ＴＣ：−１６ｍｇ／ｄｌ，−６．２％）。
【技術分野】
【０００１】
本発明は高脂血症患者における脂質代謝改善剤、特にコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
高脂血症は、血中コレステロール、血中トリグリセリド等が高い状態をいい、高脂血症は動脈硬化症、心疾患、脳血管性疾患等の虚血性疾患の危険因子であることから、積極的に治療が行なわれている。高脂血症のうち高コレステロール血症を伴なう疾患の代表的な治療薬として、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤であるスタチン系薬剤が開発され、大きな効果をあげている。スタチン系薬剤は、体内特に肝臓におけるコレステロール合成を拮抗的に阻害する作用を有し、一般的には、血液から肝臓へのＬＤＬ粒子の受け渡しをするタンパク質（ＬＤＬレセプター）の遺伝子発現を増加させ、血清コレステロール濃度を速やかに低下する効果を示す。
しかし、肝臓でのコレステロール合成能の低い人や小腸でのコレステロール吸収の高い人においては、血清コレステロールの十分な低下効果が得られにくく、単剤での治療には限界があることも知られている。また、スタチン系薬剤を長期間服用した場合、薬剤のフィードバック作用として小腸でのコレステロールの吸収が増加傾向となることも報告されており、コレステロールの合成と吸収の両方を制御することが重要と考えられている。
【０００３】
一般に、スタチン系薬剤単独の治療で十分なコレステロール低下効果が得られにくい場合には、食事療法を厳しく行ったり、該薬剤の服薬量を増やしたり、あるいは別な薬剤と組み合わせた治療が必要とされている。しかし、該薬剤の服薬量を増やしたり、複数の薬剤を使用する場合には、薬剤の副作用に十分に注意して安全性が損なわれないように配慮することが必要となる他、患者に金銭的・精神的な面で余分な負担をかけることになる。
【０００４】
従って、スタチン系薬剤に代表されるコレステロール合成阻害薬の投与によっても十分なコレステロール低下効果が得られない高脂血症患者、すなわちコレステロール合成阻害薬抵抗性高脂血症患者における脂質代謝改善剤が望まれている。
【０００５】
一方、ジグリセリドには、血清トリグリセリド低下作用、体重増加抑制作用など数多くの生理活性のあることが知られている（例えば、特許文献１〜６及び非特許文献１及び２参照）が、コレステロール合成阻害薬抵抗性高脂血症患者の脂質代謝に対してどのような作用があるかについては知られていない。
【０００６】
また、近年、生活習慣病である心筋梗塞や脳梗塞は、マルチプルリスクファクターとよばれる種々の動脈硬化のリスク要因（肥満、高中性脂肪、高レムナント、高コレステロール、高血糖、高血圧、炎症系因子）の集積により、症状を悪化させ発症を早めることが知られるようになってきた。よって、コレステロールの治療以外に他の動脈硬化のリスク要因を複合的に改善していくことが、生活習慣病の予防の上で非常に重要な課題となってくる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平４−３００８２５号公報
【特許文献２】特開２００１−６４１７０号公報
【特許文献３】特開２００１−３０２５０９号公報
【特許文献４】特開平１０−１７６１８１号公報
【特許文献５】国際公開第９９／４８３７８号パンフレット
【特許文献６】特開２００２−３２２０５２号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｊ． Ｎｕｔｒｉ．， １３１， ｐ．３２０４（２００１）
【非特許文献２】Ｊ． Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．， ４２， ｐ．３７２（２００１）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の課題は、コレステロール合成阻害薬に抵抗性を示す高脂血症患者における脂質代謝を安全に改善するための薬剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
そこで本発明者は、ジグリセリド、又はジグリセリドと植物性ステロールとの組み合せを、スタチン系薬剤によって十分な血中コレステロール効果の得られない高脂血症患者に対し、スタチン系薬剤と併用して投与したところ、スタチン系薬剤の投与量を増やさずに顕著に血中脂質及び種々の関連因子が改善されることを見出した。
【００１１】
すなわち、本発明は、ジグリセリドを有効成分とするコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善剤を提供するものである。
また本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とするコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善剤を提供するものである。
また本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とする血中フィブリノーゲン低下剤を提供するものである。
さらに、本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とする血中ＴＮＦ−α受容体低下剤を提供するものである。
さらにまた、本発明は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とする血中ＶＣＡＭ−１低下剤を提供するものである。
また、本発明は、ジグリセリド又は、ジグリセリドと植物性ステロール類を有効成分とするコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における脂質代謝改善作用を有する食品を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
コレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者に、ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を投与すれば、各種脂質代謝因子が改善される。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明で使用するジグリセリドの構成脂肪酸は、炭素数８〜２４、特に１６〜２２であることが好ましい。ジグリセリドの全構成脂肪酸中、不飽和脂肪酸含量は、好ましくは８０〜１００重量％（以下単に％と記載する）、より好ましくは８５〜１００％、さらに好ましくは９０〜１００％、特に好ましくは９３〜１００％、最も好ましくは９４〜９８％である。
さらに、脂質代謝改善効果をより高めるという点から、（シス型不飽和）／（トランス型不飽和＋飽和）は６以上が好ましく、より好ましくは９〜２５、さらに好ましくは９〜２０である。また、ジグリセリド中のトランス型不飽和脂肪酸は、５％以下が特に好ましい。飽和脂肪酸含量は、１０％以下が好ましく、５％以下が特に好ましい。
ジグリセリドを構成する脂肪酸のうち、オレイン酸の含有量は２０〜６５％、好ましくは２５〜６０％、特に３０〜５０％、殊更３０〜４５％であるのが外観、脂肪酸の摂取バランスの点で望ましい。
ジグリセリドを構成する脂肪酸のうち、リノール酸の含有量は１５〜６５％、好ましくは２０〜６０％、特に３０〜５５％、殊更３５〜５０％であるのが、脂肪酸の摂取バランスの点で望ましい。さらに、酸化安定性、生理効果の点から、リノール酸／オレイン酸の含有重量比が０．０１〜２．０、好ましくは０．１〜１．８、特に０．３〜１．７であることが望ましい。
ジグリセリドを構成する脂肪酸のうち、リノレン酸の含有量は１５％未満、好ましくは０〜１３％、さらに１〜１０％、特に２〜９％であるのが、脂肪酸の摂取バランス、酸化安定性の点で望ましい。リノレン酸には、異性体としてα−リノレン酸とγ−リノレン酸が知られているが、α−リノレン酸が好ましい。
ジグリセリドには、１，３−ジグリセリドと１，２−ジグリセリド（２，３−ジグリセリド）が存在する。１，３−ジグリセリドと１，２−ジグリセリドの重量比率は７：３であることがより好ましい。ジグリセリド中の１，３−ジグリセリドが、全ジグリセリド中の５０％以上、さらに５５〜１００％、特に６０〜９０％であることが、脂質代謝改善効果を強化し、工業的生産性を改善する点から好ましい。
【００１４】
本発明で使用するジグリセリドは、例えば目的の構成脂肪酸を有する油脂とグリセリンとをエステル交換反応するか、あるいは目的の構成脂肪酸又はそのエステルとグリセリンとの混合物にリパーゼを作用させてエステル化反応を行うことにより製造される。反応中の異性化を防止する上で、リパーゼを用いたエステル化反応がより好ましい。また、リパーゼを用いたエステル化反応においても、反応終了後の精製段階における異性化を防止するため、精製手段も脂肪酸の異性化が生起しないような穏和な条件で行うのが好ましい。
【００１５】
このように、ジグリセリドはトリグリセリド等も含有する油脂組成物として使用するのが好ましい。当該油脂組成物としては、効果の点からジグリセリドを１５〜１００％含むのが好ましく、より好ましくは３５〜９９％、さらに好ましくは６０〜９５％、特に好ましくは７０〜９５％、最も好ましくは８０〜９５％含有するのがよい。ジグリセリドはトリグリセリドに比べて、消化過程でリパーゼにより分解されて生じる脂肪酸が、小腸上皮中に滞留しやすいので、ジグリセリドを１５％以上含む油脂組成物を使用すると、優れた脂質代謝改善効果が得られる。
【００１６】
当該油脂組成物にはトリグリセリドを含んでいてもよく、油脂組成物中のトリグリセリド含量は、効果、風味、酸化安定性の点から０〜８５％であり、好ましくは１〜６４．９％、さらに好ましくは５〜３９．９％、最も好ましくは５〜１９．９％である。トリグリセリドの構成脂肪酸として、効果、風味、食感の点で炭素数１６〜２２の不飽和脂肪酸を好ましくは８０〜１００％、より好ましくは８５〜１００％、さらに９０〜１００％、特に９３〜１００％、最も好ましくは９４〜９８％含有するのがよい。また酸化安定性の点から、トリグリセリドの構成脂肪酸として、ω３系不飽和脂肪酸を好ましくは０〜４０％、さらに０〜３０％、特に０〜２０％、最も好ましくは０〜１５％含有するのがよい。
【００１７】
当該油脂組成物にはモノグリセリドを含んでいてもよく、その含量は、風味、酸化安定性の点から０〜３０％であり、好ましくは０．１〜１０％、さらに好ましくは０．１〜５％、特に好ましくは０．１〜２％、最も好ましくは０．１〜１．５％であるのがよい。モノグリセリドの構成脂肪酸は、製造上の観点から、ジグリセリドと同じであることが好ましい。
【００１８】
当該油脂組成物に含まれる遊離脂肪酸（塩）は、風味、発煙防止、工業的生産性の点から、３．５％以下に低減されるのがよく、好ましくは０〜２％、さらに好ましくは０〜１％、特に好ましくは０〜０．５％、最も好ましくは０．０５〜０．２％とするのがよい。
本発明に使用される油脂組成物を構成する全脂肪酸中、炭素−炭素二重結合を４つ以上有する脂肪酸の含有量は、酸化安定性の点で０〜４０％、好ましくは０〜２０％、さらに０〜１０％、特に０〜１％であるのがよく、実質的に含まないのが最も好ましい。
【００１９】
当該油脂組成物には酸化安定性を向上させるために、抗酸化剤を添加するのが好ましい。抗酸化剤としては、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、リン脂質、ポリフェノール、ターシャルブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）等が挙げられ、２種以上を組み合わせて使用してもよい。上記の抗酸化剤は、油脂組成物中に０．００５〜０．２％、特に０．０４〜０．１％含有することが好ましい。
【００２０】
当該油脂組成物には、さらに結晶抑制剤を添加するのが好ましい。本発明で使用する結晶抑制剤としては、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等のポリオール脂肪酸エステル等が挙げられる。これらは２種以上を組み合わせて使用してもよい。結晶抑制剤は、当該油脂組成物中に、０．０２〜０．５％、特に０．０５〜０．２％含有するのが好ましい。
【００２１】
また、本発明で使用される植物性ステロール類としては、例えばα−シトステロール、β−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、α−シトスタノール、β−シトスタノール、スチグマスタノール、カンペスタノール、シクロアルテノール等のフリー体、及びこれらの脂肪酸エステル、フェルラ酸エステル、桂皮酸エステル等のエステル体が挙げられる。当該植物性ステロールはジグリセリドと組み合せて用いられ、前記ジグリセリドを含有する油脂組成物中に植物性ステロール類を配合して用いるのが好ましい。当該油脂組成物中の植物性ステロール類の含有量は、０．０５〜４．７％、特に０．３〜１．２％が好ましい。
【００２２】
本発明の医薬の投与形態としては、例えば散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等の経口投与剤が挙げられる。この経口投与剤は、それぞれ上記油脂組成物の他、経口投与剤の形態に応じて一般に用いられる、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール類、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料等のうちの１種又はそれ以上を添加して製造することができる。油脂組成物を使用する場合、経口投与用医薬品中のその含有量は、医薬品の用途及び形態によっても異なるが、一般に０．１〜１００％、さらに１〜８０％、特に２〜８０％が好ましい。
【００２３】
本発明において、ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を食品形態にして摂食する場合、ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を含有した油脂加工食品とすればよく、例えば特定の機能を発揮して健康増進を図る健康食品、機能性食品、特定保健用食品、病者用食品等とすることができる。具体的には、カプセル、錠剤、顆粒剤、パンやケーキ、クッキー、パイ、バー、ベーカリーミックス等のベーカリー食品類、フレンチドレッシング等のドレッシング類、マヨネーズ等の水中油型乳化食品、マーガリンやスプレッド等の油中水型乳化食品、クリーム類、チョコレートやポテトチップス、アイスクリーム、デザート等の菓子や、飲料、スープ、ソース、コーヒーホワイトナー、ホイップクリーム、焼き肉のタレ、ピーナツバター、フライングショートニング、ベーキングショートニング、加工肉製品、冷凍食品、粉末食品、ミールリプレイサー等の他、天ぷらやフライ、炒め物等に用いる調理油のような食品素材が挙げられる。かかる食品は、油脂組成物の他に、食品の種類に応じて一般に用いられる食品原料を添加し、製造することができる。このような食品中の油脂組成物の含有量は、食品の種類によっても異なるが、一般に０．１〜１００％、さらに１〜８０％、特に２〜８０％が好ましい。
【００２４】
以下、本発明のジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を含有した油脂加工食品について説明する。本発明において、油脂加工食品とは、ジグリセリドを１５％以上含有する油脂組成物又はジグリセリドを１５％以上及び植物性ステロールを０．０５〜４．７％含有する油脂組成物と、他の食品原料を配合し、加工した食品をいう。油脂加工食品に用いられる原料成分としては、下記のものがある。
【００２５】
（１）食用油脂
本発明に使用する食用油脂は、一般的な食用油脂であれば特に限定されない。例えば、天然の動植物油脂の他、それらにエステル交換、水素添加、分別等を施した加工油脂が挙げられる。好ましくは、大豆油、菜種油、綿実油、米糠油、コーン油、ヒマワリ油、パーム油、パーム核油、ヤシ油等の植物油及びそれらの加工油脂を用いるのがよい。
【００２６】
（２）乳化剤
一般的に食品に用いられる乳化剤であれば特に限定されない。例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン及びその分解物、卵蛋白、大豆蛋白、乳蛋白及びこれらの蛋白質より分離もしくは加水分解により得られる各種蛋白質、ペプチド等が挙げられる。
【００２７】
（３）増粘剤
一般的に食品に用いられる増粘剤であれば特に限定されない。例えば、キサンタンガム、ジェランガム、グアーガム、カラギーナン、ペクチン、トラガントガム、各種デンプン等の多糖類、ゼラチン、卵白等の蛋白質が挙げられる。
【００２８】
（４）食塩、糖質、食酢、調味剤等の各種呈味料
（５）スパイス、フレーバー等の各種香味料
（６）各種着色料
（７）トコフェロール、天然抗酸化成分等の抗酸化剤
【００２９】
以下、本発明の好ましい処方例を示す。しかし、本発明の用途を限定するものではない。
【００３０】
ａ）酸性水中油型油脂加工食品
・油相／水相；２０／８０〜８０／２０（好ましくは３０／７０〜７０／３０）
・ジグリセリドの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に８０％以上）
・植物性ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・乳化剤量；０．０５〜５％
・ｐＨ；２〜６
ｐＨは、食酢、クエン酸等の有機酸又はその塩、レモン果汁等の酸味料で調整する。上記原料を用い、常法により、脂質代謝改善効果を有するドレッシング、マヨネーズ等の酸性水中油型油脂加工食品を調製することができる。
【００３１】
＜処方例＞ マヨネーズ
水相
食塩 ３．０重量部
砂糖 １．０
調味料（グルタミン酸ナトリウム） ０．５
香辛料（マスタード粉末） ０．３
卵黄 １４
食酢（酸度１０％） ８
増粘剤 ０．５
水 ２２．７
油相
油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ） ５０
【００３２】
ｂ）油中水型可塑性油脂加工食品
・水相／油相；１５／８５〜８５／１５（好ましくは２０／８０〜５０／５０）
・ジグリセリドの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に５０％以上）
・植物性ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・油相中の油脂の融点；２０〜５０℃（好ましくは２０〜４０℃）
上記原料を用い、常法により、脂質代謝改善効果を有するマーガリン、スプレッド等の油中水型可塑性油脂加工食品を調製することができる。
【００３３】
＜処方例＞ スプレッド
油相
油脂＊ ６９．３重量部
レシチン ０．１
モノグリセリド ０．５
フレーバー ０．１
水相
水 ２８．４
脱脂粉乳 ０．３
食塩 １．３
＊油脂：油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ）；７０％／部分硬化パーム油（ＩＶ＝４０）；３０％、融点３６℃
【００３４】
ｃ）ベーカリー食品
・油脂量；１０〜４０％
・ジグリセリドの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に５０％以上）
・植物性ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・小麦粉；２０〜６５％
・糖質；５〜３０％
・全卵；０〜２０％
・食塩；０．１〜２％
・ベーキングパウダー；０〜１％
上記原料を用い、常法により、脂質代謝改善効果を有するショートブレッド（バー）、ブリオッシュ等のベーカリー食品を調製することができる。
【００３５】
＜処方例＞ ショートブレッド（バー）
小麦粉 ６０重量部
油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ） １０
砂糖 ２４．６
食塩 ０．４
全卵 ５
【００３６】
コレステロール合成酵素阻害薬の投与によって血中総コレステロール値が２２０ｍｇ／ｄｌ程度までしか低下しない高脂血症患者に、当該コレステロール合成阻害薬に加えてジグリセリド、又はジグリセリドと植物性ステロール類の組み合せてを経口投与すれば、種々の脂質代謝が改善される。ここで、コレステロール合成酵素阻害薬としては、スタチン系薬剤が好ましく、例えばプラバスタチンナトリウム、アトルバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチンナトリウム等が挙げられる。
【００３７】
ジグリセリドの投与により改善される脂質代謝関連因子としては、血中トリグリセリド、血中レムナント様コレステロール、血中アポリポ蛋白Ｅが挙げられる。ここで、アポリポ蛋白Ｅとは、カイロミクロン、超低比重リポ蛋白（ＶＬＤＬ）、ＨＤＬの主要なアポ蛋白の一つである。また、アポリポ蛋白Ｅは、細胞表面に存在するＬＤＬリセプター（アポＢ）、レムナントリセプター、ＶＬＤＬリセプター関連蛋白などに結合するリガンドである。このアポリポ蛋白Ｅに異常があると、カイロミクロンレムナント、ＩＤＬの代謝が遅延し、ＩＩＩ型の高脂血症を発症することが知られている。
【００３８】
ジグリセリドと植物性ステロール類の投与により改善される脂質代謝関連因子としては、血中トリグリセリド、血中レムナント様コレステロール、血中アポリポ蛋白Ｅ、血中総コレステロール、血中ＬＤＬコレステロール、血中アポリポ蛋白Ｂが挙げられる。
【００３９】
またジグリセリドと植物性ステロール類の投与により、一般の脂質代謝関連因子以外の因子、血中フィブリノーゲン、血中ＴＮＦ−α受容体、血中ＶＣＡＭ−１が顕著に低下する。ジグリセリドと植物性ステロール類が血中フィブリノーゲンを低下させることから、これらが血栓傾向を低下させ、血栓防止剤として有用であることがわかる。
ここで、ＴＮＦ（Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ）−αとは、脂肪組織とくに内臓脂肪より多く分泌される生理活性物質（アディポサイトカイン）の一つである。体内に蓄積した脂肪組織より分泌されたＴＮＦ−αが、筋肉、脂肪組織、肝臓での糖利用を抑制し、肥満によるインスリン抵抗性を介して、糖脂質代謝に異常をもたらすものと考えられている。ジグリセリドと植物性ステロール類が血中ＴＮＦ−α受容体を低下させることから、これらがインスリン抵抗性を改善し、糖脂質代謝改善剤として有用であることがわかる。
ここで、ＶＣＡＭ（Ｖａｓｃｕｌａｒ ｃｅｌｌ ａｄｈｅｎｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ）−１とは、細胞接着因子（リガンド）の一種であり、内皮細胞の炎症を引き金に発現し、マクロファージやＴリンパ球等の遊走を仲介し、泡沫細胞の形成を経て、動脈硬化の発生に深く関与することが知られている。ジグリセリドと植物性ステロール類が血中ＶＣＡＭ−１を低下させることから、これらが動脈硬化の炎症抑制剤として有用であることがわかる。
【００４０】
高脂血症患者における該ジグリセリドの摂取量は、大人１人当たり０．１〜２５ｇ、特に０．１〜２０ｇの範囲で１日に１〜数回に分けるのが好ましい。また、該植物性ステロール類の摂取量は、大人１人当たり１００〜５００ｍｇ、特に２００〜４００ｍｇの範囲で１日に１〜数回に分けることが好ましい。その摂取期間は１週間以上、好ましくは２週間以上、より好ましくは３週間以上、さらに１ヶ月以上、特に２ヶ月以上、最も好ましくは３ヶ月以上が望ましい。このように高脂血症患者に長期間ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を摂取させるためには、トリグリセリドの一部又は全部に該ジグリセリド又はジグリセリドと植物性ステロール類を用いた高脂血症患者用食品を調製して摂取させるのが好ましい。
【実施例】
【００４１】
Ｉ）対象及び方法：
１．対象：
４週間以上のプラバスタチン１０ｍｇの投与によっても、血中コレステロール値に十分な改善効果が得られない通院患者で、試験に同意された方を対象とした。ただし、血糖コントロールの不良な方、肝胆道系に障害のある方、スタチンや植物性ステロールなどに過敏な方は除いた。
【００４２】
２．試験食用油：
本試験では、家庭で使用する調理油を（１）トリグリセリド油（ＴＡＧ）、（２）ジグリセリド油（ＤＡＧ）、（３）植物性ステロール（ＰＳ）を４％含有するジグリセリド油（ＰＳ／ＤＡＧ）のいずれかにブラインドのもとに置き換え、試験期間中、自由に使用・摂取してもらった。各食用油の組成は、表１と表２に示した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
【表２】
【００４５】
３．方法：
プラバスタチン１０ｍｇ／日を服用しても血清コレステロールがある程度しか低下せず安定している患者（ｎ＝４９、年齢３０−７３才）に対して、１２週間のダブルブラインドの無作為並行群間比較試験（３群）を実施した。試験期間中、被験者はプラバスタチンを毎日１０ｍｇ／ｄ服用するとともに、家庭で使用する調理油を３種の試験油、（１）トリグリセリド油（ＴＡＧ）、（２）ジグリセリド油（ＤＡＧ）、（３）植物性ステロール（ＰＳ）を４％含有するジグリセリド油（ＰＳ／ＤＡＧ）のいずれかにブラインドにて置き換え摂取した（ＴＡＧとＤＡＧは同脂肪酸組成）。試験期間中の食事は、試験前と変わらぬように指示をした。その間の血清脂質、アポリポ蛋白、凝固・炎症系因子を測定した。採血は、予備期間の前と後及び試験期間終了時の計３回を午前中の空腹時に行い、同じに体重測定を行った。
【００４６】
４．統計解析方法
初期値との比較は対応のあるｔ−検定、群間での検定は分散分析（ＡＮＯＶＡ）を用い、危険率５％以下の場合に有意差ありと判定した。なお、初期値との有意差は＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１のように表示し、群間の有意差がｐ＜０．０５の場合、該当項目に異記号（アルファベットのａ、ｂ、ｃで）を付けた。
【００４７】
５．血液検査：
血清脂質（アポ蛋白含む）、凝固・炎症マーカー、肝機能の血液検査を実施した。検査項目の詳細を以下に示す。なお、血清は採取した血液を冷蔵下（５℃）で３，０００ｒｐｍ×１０ｍｉｎ．の遠心分離して得た。検査項目は（株）ＳＲＬ東京メディカルに分析を依頼した。
【００４８】
１）脂質系因子：中性脂肪（ＴＧ）、アポ蛋白Ｅ、レムナント様コレステロール（ＲＬＰ−Ｃ）、総コレステロール（ＴＣ）、ＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、アポ蛋白Ｂ（Ａｐｏ Ｂ）、ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）。なお、ＬＤＬ−ＣはＦｒｉｅｄｅｗａｌｄの計算式で算出した。また、カンペステロールについては、常法に従いガスクロマトグラフィーにて分析した。
２）凝固・炎症系因子：ｖａｓｃｕｌａｒ ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ−１（ＶＣＡＭ−１）、フィブリノーゲン（ＦＩＢ）、Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−１（ＴＮＦｒ−１）、Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−２（ＴＮＦｒ−２）、
３）肝機能：ＧＯＴ、ＧＰＴ、γ−ＧＴＰ
【００４９】
６．食事調査：
被験者の食事調査は、予備期間と試験終了１週間前の計２回、食事調査を実施し、五訂食品成分表から摂取内容を解析した。
【００５０】
ＩＩ）結果：
１．被験者のプロフィール：
被験者の身体・血清脂質関連項目のプロフィールを表３に示す。
【００５１】
【表３】
【００５２】
２．食事調査の結果：
試験期間中の被験者の食事調査の結果を表４に示す。各群とも脂肪のエネルギー比率は約２７％、コレステロール摂取量は、約３００ｍｇ／日となった。また、試験の前後において、各群の栄養素摂取に差はなく、また試験期間中においても、群間で栄養素摂取に有意な差は認められなかった。
【００５３】
【表４】
【００５４】
３．血液検査の結果：
血液分析項目について、試験開始前と試験期間終了後の値及びその差（Δ）の結果について、表５〜表７に示した。なお、今回の試験では、副作用は認められなかった。
【００５５】
【表５】
【００５６】
【表６】
【００５７】
【表７】
【００５８】
表６から明らかなように、初期のＴＣ≧２００ｍｇ／ｄｌの被験者において（ｎ＝４４）、次のことが判明した。
（１）ＰＳ／ＤＡＧ群において、ＴＣ、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ及びＶＣＡＭ−１の濃度が初期値に対して有意に低下した（ＴＣ：−１１ｍｇ／ｄｌ，−４．３％，ＬＤＬ−Ｃ：−８ｍｇ／ｄｌ，−４．９％，ＡｐｏＢ：−８ｍｇ／ｄｌ，−６．４％、ＶＣＡＭ−１：−９２ｎｇ／ｍｌ，−１７％）。血清コレステロール関係ではとくにＡｐｏＢに及ぼされる影響が大きく、ＤＡＧとＰＳの相乗効果が推察された。また、ＴＮＦｒ−１とＴＮＦｒ−２について低下傾向が認められた。
（２）ＤＡＧ群及びＰＳ／ＤＡＧ群において、ＲＬＰ−Ｃ、ＡｐｏＥとフィブリノーゲンは低下傾向を示した。さらに、安全性の項目であるＧＯＴ、ＧＰＴとγ−ＧＴＰについても同様に低下傾向が認められた。
（３）ＰＳ／ＤＡＧによる血清ＴＣの低下作用は、試験開始前の血清カンペステロール濃度に強く相関した（ｒ＝−０．５６９，ｐ＜０．０５）。
【００５９】
また、初期のＴＣ≧２００ｍｇ／ｄｌかつ初期のカンペステロール濃度≧中央値（０．６６ｍｇ／ｄｌ）の被験者（ｎ＝２２）において、さらに明らかな血清コレステロール低下効果が認められ（初期ＴＣ≧２００ｍｇ／ｄｌと比べて、約１．５倍の低下）、ＴＣはＴＡＧ群と比較して有意に低下した（ＴＣ：−１６ｍｇ／ｄｌ，−６．２％）。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジグリセリドと、植物性ステロール類と、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤を有効成分とする、初期の血中総コレステロール値≧２００ｍｇ／ｄｌであり、かつコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【請求項２】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２５ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり１００〜５００ｍｇ／日摂取するものである請求項１記載の血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【請求項３】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２０ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり２００〜４００ｍｇ／日摂取するものである請求項１記載の血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【請求項４】
ジグリセリドと、植物性ステロール類と、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤を有効成分とする、初期の血中総コレステロール値≧２００ｍｇ／ｄｌであり、かつコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項５】
ジグリセリドと植物性ステロール類を含む油脂組成物がＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤とともに用いられる、請求項４記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項６】
前記高脂血症患者が、更に初期の血中カンペステロール濃度≧０．６６ｍｇ／ｄｌである請求項４又は５記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項７】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２５ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり１００〜５００ｍｇ／日摂取するものである請求項４〜６のいずれか１項記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項８】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２０ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり２００〜４００ｍｇ／日摂取するものである請求項４〜６のいずれか１項記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項１】
ジグリセリドと、植物性ステロール類と、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤を有効成分とする、初期の血中総コレステロール値≧２００ｍｇ／ｄｌであり、かつコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【請求項２】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２５ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり１００〜５００ｍｇ／日摂取するものである請求項１記載の血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【請求項３】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２０ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり２００〜４００ｍｇ／日摂取するものである請求項１記載の血中アポリポ蛋白Ｅ低下剤。
【請求項４】
ジグリセリドと、植物性ステロール類と、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤を有効成分とする、初期の血中総コレステロール値≧２００ｍｇ／ｄｌであり、かつコレステロール合成阻害薬抵抗性の高脂血症患者における血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項５】
ジグリセリドと植物性ステロール類を含む油脂組成物がＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤とともに用いられる、請求項４記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項６】
前記高脂血症患者が、更に初期の血中カンペステロール濃度≧０．６６ｍｇ／ｄｌである請求項４又は５記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項７】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２５ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり１００〜５００ｍｇ／日摂取するものである請求項４〜６のいずれか１項記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【請求項８】
経口投与用剤であり、ジグリセリドを大人１人当たり０．１〜２０ｇ／日、植物ステロール類を大人１人当たり２００〜４００ｍｇ／日摂取するものである請求項４〜６のいずれか１項記載の血中ＬＤＬコレステロール低下剤。
【公開番号】特開２０１２−２０７０４１（Ｐ２０１２−２０７０４１Ａ）
【公開日】平成２４年１０月２５日（２０１２．１０．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−１６２５０６（Ｐ２０１２−１６２５０６）
【出願日】平成２４年７月２３日（２０１２．７．２３）
【分割の表示】特願２００３−１８４５５１（Ｐ２００３−１８４５５１）の分割
【原出願日】平成１５年６月２７日（２００３．６．２７）
【出願人】（００００００９１８）花王株式会社 (8,290)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１０月２５日（２０１２．１０．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２４年７月２３日（２０１２．７．２３）
【分割の表示】特願２００３−１８４５５１（Ｐ２００３−１８４５５１）の分割
【原出願日】平成１５年６月２７日（２００３．６．２７）
【出願人】（００００００９１８）花王株式会社 (8,290)
【Ｆターム（参考）】
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