薬剤副作用に関連したＨＬＡアレルおよびその検出方法
本発明は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１といった特定のＨＬＡアレルの存在を決定する方法、および当該方法を実施するためのキットに関する。遺伝子マーカー（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）の存在または不存在に基づいて、患者が薬剤副作用（例えば、スティーブン−ジョンソン症候群、中毒性表皮剥離症または過敏性症候群）を引き起こすリスクがあるか否かを評価する方法もまた、開示される。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
（関連出願のクロスリファレンス）
この出願は、その内容全体が引用される、２００６年５月１１日に出願された、米国仮特許出願第６０／８００，１２１号の利益を主張する。
【０００２】
（背景）
薬剤副作用（ＡＤＲ）は、望ましくない、かつ意図しない、薬剤の作用である。特に、予防、診断または治療に用いられる用量で、薬剤副作用は発生する。広く引用されているメタ分析によれば、ＡＤＲは死因の第４位から第６位の間にランクされている（Ｌａｚａｒｏｕ ｅｔ ａｌ., ＪＡＭＡ, ２７９（１５）：１２００−１２０５, １９９８）。皮膚のＡＤＲは、すべての入院の約２〜３％を占めている（Ｂｉｇｂｙ ｅｔ ａｌ．， ＪＡＭＡ， ２５６（２４）：３３５８−３３６３， １９８６）。これらは軽度の斑丘疹（ＭＰＥ）から、重症度が増すと、生命を脅かすＡＤＲ、例えば、過敏性症候群（ＨＳＳ）、スティーブン−ジョンソン症候群（ＳＪＳ）、および中毒性表皮剥離症（ＴＥＮ；ライル症候群）にまで及ぶ。後者の死亡率は４０％もありうる。
【０００３】
ＨＳＳは、発疹に加えて全身性の症状（例えば、発熱、関節痛、好酸球増多症、リンパ節腫脹）を伴う多臓器の関与（例えば、肝炎または腎炎）を特徴とする（Ｒｏｕｊｅａｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ３３１：１２７２−１２８５， １９９４）。ＳＪＳおよびＴＥＮは、紫斑の水膨れの発疹の急速な成長並びに、斑の関与および皮膚の剥離を伴う標的様の損傷により特徴づけられる、免疫複合体媒介性の過敏性障害である（Ｒｏｕｊｅａｕ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ， １９９４， １０２：２８Ｓ−３０Ｓ）。これらの多くは、スルホンアミド類、抗けいれん薬、アロプリノール、非ステロイド性抗炎症薬、および抗マラリア薬などの薬剤により引き起こされる（Ｒｏｕｊｅａｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ３３３（２４）：１６００−１６０７， １９９５）。台湾では、抗けいれん薬（例えば、ＣＢＺ、フェニトインおよびフェノバルビタール）、並びにアロプリノールがＳＪＳ／ＴＥＮを引き起こす最も一般的な薬剤である。
【０００４】
近年の薬理ゲノミクスの発展により、ＡＤＲへの罹患しやすさは特定の遺伝子アレルと関連していることが示唆されている。例えば、チオプリンメチルトランスフェラーゼの遺伝子多型は、リウマチ疾患または癌のための薬剤であるアザチオプリンにより誘発されるＡＤＲと密接に関連していることが判明した（Ｙａｔｅｓ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｉｎｔｅｒｎ． Ｍｅｄ．， １２６（８）：６０８−６１４， １９９７）。また、特定の薬剤により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮ／ＨＳＳへの罹患しやすさは遺伝学的に決定されるということも示唆されている（Ｇｅｎｎｉｓ ＭＡ， Ａｍ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ９１（６）：６３１−６３４， １９９１； Ｅｄｗａｒｄｓ ＳＧ， Ｐｏｓｔｇｒａｄ． Ｍｅｄ． Ｊ．， ７５（８８９）：６８０−６８１， １９９９）。しかしながら、実際に関与している遺伝的因子はいまだ同定されていない。
【０００５】
薬理ゲノミクスのこれらの研究によれば、患者におけるＡＤＲに関連したアレルの検出は、当該患者がＡＤＲを引き起こすリスクがあるか否かを評価するのに有用なアプローチであることが示唆されている。臨床検査改善修正法案により認定されたこの種の分子診断は現在、米国および欧州において参照試験所により提供されている。
【０００６】
特定の遺伝子アレルの存在を決定するには、１または２以上のアレル特異的ヌクレオチドを検出する必要がある。多くの場合、正確な決定を保証するには、当該アレル内の複数の領域を標的とせざるを得ない。例えば、現在利用可能なＨＬＡ−Ｂアレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１）を決定する方法では、当該アレル内の少なくとも６つの領域を検出することが必要である。
【発明の開示】
【０００７】
（発明の概要）
本発明は、患者が薬剤副作用（特に、ＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳ）を引き起こすリスクを予測する方法を提供する。数多くの薬剤（例えば、カルバマゼピン（ＣＢＺ））により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮには、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２が関連していることが判明している。また、また、アロプリノールにより誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮには、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１が特に関連している。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１はまた、アロプリノール誘発性のＨＳＳにも関連している。斑点状丘疹、多形性紅斑、蕁麻疹、または固定薬疹などの、ＣＢＺにより誘発されるより緩和な皮膚反応には、ＨＬＡ−Ｂ＊４６０１が特に関連している。
【０００８】
したがって、本願は、患者が薬剤に応答して薬剤副作用を引き起こすリスクを評価する方法を提供するが、当該方法は、患者からの生体サンプルを用いてＨＬＡタイピングを行なうことを含む。本発明では、少なくとも約４０％の感度でＡＤＲと関連している任意のＨＬＡアレルがリスクファクターとして用いられうる。好ましくは、このリスクファクターの感度は、少なくとも約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、または約９０％である。より好ましくは、当該感度は少なくとも９５％である。薬剤は、ＣＢＺ、オキシカルバゼピン（ブランド名：トリレプタール）、リカルバゼピン、アロプリノール、フェニトイン、スルファサラジン、アモキシシリン、イブプロフェンおよびケトプロフェンからなる群から選択されるものであることが好ましい。あるいは、当該薬剤は、好ましくは非ステロイド性抗炎症薬以外のものである。好ましくは、ＨＬＡ−Ｂアレルがリスクファクターである。
【０００９】
患者が薬剤に応答して薬剤副作用を引き起こすリスクの評価は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１からなる群から選択されるＨＬＡ−Ｂアレルの存在を決定することにより行なわれうる。ここで、ＨＬＡ−Ｂアレルの存在は、薬剤副作用についてのリスクの指標である。薬剤は、ＣＢＺ、オキシカルバゼピン、リカルバゼピン、アロプリノール、オキシプリノール、フェニトイン、スルファサラジン、アモキシシリン、イブプロフェンおよびケトプロフェンからなる群から選択されうる。
【００１０】
薬剤副作用は、ＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳのような皮膚の薬剤副作用である。一実施形態では、薬剤がＣＢＺ、オキシカルバゼピン、リカルバゼピンから選択され、前記アレルがＨＬＡ−Ｂ＊１５０２である。他の実施形態では、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１がＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳについてのリスクを予測するのに用いられ、薬剤はアロプリノールまたはオキシプリノールから選択されうる。ＨＬＡ−Ｂ１５、Ｂ５８、またはＢ４６の他のサブタイプ（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０３またはＨＬＡ−Ｂ＊１５５８）もまた、ＡＤＲの発生についてのリスクを予測するのに用いられうる。
【００１１】
遺伝子アレルは、生体サンプル（例えば、血液、唾液、尿または毛髪）から調製されたゲノムＤＮＡを用いて、アレル内の領域／ヌクレオチドを直接検出することによって、検出されうる。当該アレルはまた、例えば血清学的な手法または微量細胞毒性による手法によっても決定されうる。当該アレルはまた、当該アレルの等価遺伝的マーカーを検出することにより決定されることができ、当該マーカーは例えば、ＳＮＰ（一塩基多型）、マイクロサテライトマーカーまたは他の種類の遺伝子多型でありうる。換言すれば、当該アレルそのものの存在よりもむしろ、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、５８０１、または４６０１ハプロタイプの存在が、薬剤副作用に対するリスクの指標である。ＨＬＡ−Ｂ Ｂ＊１５０２ハプロタイプの等価遺伝的マーカーの例としては、Ｃｗ＊０８０１、Ｃｗ＊０８０６、Ａ＊１１０１、およびＭＩＣＡ＊０１９が挙げられる。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の等価遺伝的マーカーの例としては、ＨＬＡ−Ａ＊３３０３、Ｃｗ＊０３０２、ＤＲＢ１＊０３０１、およびＭＩＣＡ＊００２０１が挙げられる。
【００１２】
本発明の他の形態は、薬理ゲノミクスプロファイリングの方法である。当該方法は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１からなる群から選択される少なくとも１つのＨＬＡ−Ｂアレルの存在を決定することを含む。一例としては、上記群から選択される少なくとも２つ（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＨＬＡ−Ｂ＊５８０１）の存在を決定する。他の例としては、３つの全てのアレルの存在を決定する。当該方法は、場合によっては、他の遺伝的因子の決定を含んでもよい。かような他の遺伝的因子は、ＡＤＲなどの任意の疾患または医学的症状の素因に関連していてもよい。例えば、これらの他の遺伝的因子は、チオプリンメチルトランスフェラーゼおよびＱＴ延長症候群の遺伝子からなる群から選択されうる。
【００１３】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定する方法もまた、本発明の範囲に包含される。当該方法は、（１）ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６のいずれかから選択される第１領域を検出する段階、（２）ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６のいずれかから選択され、前記第１領域とは異なる第２領域を検出する段階、および、（３）患者が対象アレルを有しているか否かを決定することを含む。ここで、前記第１領域および前記第２領域が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有することが示される。これらの領域は、リアルタイムＰＣＲ、またはＥＬＩＳＡと共役した競合配列特異的オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションアッセイ（ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡ）により決定されうる。一例では、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６から、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６から選択される２つの領域を検出すれば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在または不存在を決定するのに十分である。あるいは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１中の３つ以上の領域を検出する。
【００１４】
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１、領域２、および領域３の検出はそれぞれ、領域１における１位および３位、領域２における１位および６位、並びに領域３における１位および３位のヌクレオチド（これらの位置でのセンス鎖またはアンチセンス鎖のいずれかにおけるヌクレオチドを含む）を同定することにより、行われうる。
【００１５】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６の検出はそれぞれ、領域１における１位、２位および５位、領域２における１位、４位、６位、７位、８位、１５位、１６位および２０位、領域３における２位、４位、５位、８位および９位、領域４における３位および５位、領域５における１位および９位、並びに領域６における３位および１０位のヌクレオチドを同定することにより、行われうる。
【００１６】
本発明はまた、遺伝子アレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１）を検出するためのキットをも提供する。一例として、当該キットは、それぞれＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６から選択される領域を標的とする第１プローブおよび第２プローブを含む。この２つのプローブは、異なる領域を標的とする。当該キットは、内部制御アレルを標的とする第３プローブをさらに含んでもよい。また、当該キットは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１における１以上の追加の領域を検出するための１以上の追加のプローブを含んでもよい。
【００１７】
さらに、ある化合物が、薬剤（ＣＢＺ、アロプリノール、またはフェニトイン）により誘発される薬剤副作用（ＡＤＲ）に関連したＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）を有する患者におけるＡＤＲ（ＳＪＳ／ＴＥＮ、ＨＳＳ、またはより緩和な皮膚のＡＤＲ）を誘発する候補であるか否かを決定する方法が提供される。当該方法は、（１）ＡＤＲに関連したＨＬＡアレルを有する当該ＡＤＲの患者からＴ細胞を単離する段階、（２）前記ＡＤＲを誘発する薬剤に反応性のＴ細胞を展開する段階、（３）前記患者から抗原提示細胞を単離する段階、（４）ＡＰＣの存在下で、展開されたＴ細胞を化合物と接触させること、および（５）前記化合物が、展開されたＴ細胞を活性化するか否かを調べる段階を含む。上記Ｔ細胞を活性化する化合物は、同一のＨＬＡアレルを有する患者におけるＡＤＲを誘発する候補である。
【００１８】
一般の人口集団がＡＤＲを引き起こす可能性よりも、患者がＡＤＲを引き起こす可能性が高い場合、当該患者はＡＤＲについて「リスク」を有することになる。患者がＡＤＲを引き起こす可能性は、一般の人口集団がＡＤＲを引き起こす可能性の、少なくとも約１．５倍高く、より好ましくは少なくとも約２倍高く、さらにより好ましくは少なくとも約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、または約９倍高く、最も好ましくは少なくとも約１０倍高い。この可能性は、リスクファクターの発生率を用いるなどの、本技術分野において公知の任意の方法により決定されうる。例えば、あるリスクファクターは一般の人口集団の５％に存在する。仮にこのファクターがＡＤＲを有する患者の１０％に存在するのであれば、当該リスクファクターを有する患者がＡＤＲを引き起こす可能性は、一般の人口集団がＡＤＲを引き起こす可能性の２倍高い。
【００１９】
ＡＤＲについての「リスクファクター」は、ＡＤＲに関連したファクターである。リスクファクターの感度は、好ましくは少なくとも約４０％であり、より好ましくは少なくとも約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、または約９０％である。最も好ましくは、当該感度は少なくとも９５％である。ＡＤＲを予測するためのリスクファクターの「感度」は、ＡＤＲ患者のうち、リスクファクターを有する者の百分率である。換言すれば、全てのＳＪＳ患者がアレルＡを有する場合、ＳＪＳを予測するためのアレルＡの感度は１００％である。４０名のＳＪＳ患者のうち２０名がアレルＢを有するのであれば、ＳＪＳを予測するためのアレルＢの感度は５０％である。
【００２０】
対象アレルの「等価遺伝子マーカー」とは、対象アレルと連鎖した遺伝子マーカーを意味する。すなわち、等価遺伝子マーカーは、対象アレルと連鎖非平衡性を示す。
【００２１】
「薬理ゲノミクスプロファイリング」とは、疾患または医学的症状（特に、薬剤に対する望ましくない反応）に関連した対象者に存在する遺伝的因子の決定を意味する。典型的には、薬理ゲノミクスプロファイリングでは一連の遺伝的因子を決定するが、当該因子は、同じ疾患、医学的症状、または薬剤に対する反応に関連するものであってもよいし、そうでなくてもよい。
【００２２】
本明細書で用いられる場合、医薬化合物とは、薬剤である化合物、または、薬剤における少なくとも１つの水素がハロ、ヒドロキシル、アシルアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、アリールオキシアリール、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アリール、置換アリールオキシ、置換アリールオキシアリール、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、または置換ヘテロサイクリックの基で置換されたこと以外は薬剤と同一である化合物を意味する。上記化学基は、以下に定義される。置換基は、０〜１０個、０〜６個、０〜４個、または０〜２個の炭素原子を含みうる。
【００２３】
本明細書で用いられる場合、「アルキル」とは、１〜１０個の炭素原子または１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。「置換アルキル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキルカルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホンチオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンからなる群から選択される１〜５個の置換基を有する、好ましくは１〜１０個の炭素原子のアルキル基；慣用の保護基で保護されたアミノ基を有する置換アルキル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリック、または−ＳＯ２−-ＮＲＲで置換されたアルキル基／置換アルキル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。
【００２４】
「アルコキシ」とは、「アルキル−Ｏ−」基を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキソキシ、１，２−ジメチルブトキシなどが挙げられる。「置換アルコキシ」とは、「置換アルキル−Ｏ−」基を意味する。
【００２５】
「アシル」とは、Ｈ−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、アルキニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、アリール−Ｃ（Ｏ）−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）−、および置換ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）−の基を意味し、ここで、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００２６】
「アシルアミノ」とは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ基を意味し、ここでＲはそれぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択され、Ｒはそれぞれ、窒素原子とともにヘテロ環または置換ヘテロ環を形成してもよい。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００２７】
「アシルオキシ」とは、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルキニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、および置換ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）Ｏ−の基を意味する。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００２８】
「アルケニル」とは、好ましくは２〜１０個、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個のアルケニル不飽和部位を有する、アルケニル基を意味する。「置換アルケニル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキルカルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホンチオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンからなる群から選択される１〜５個の置換基を有するアルケニル基；慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護されたアミノ基を有する置換アルケニル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリック、または−ＳＯ２−-ＮＲＲで置換されたアルケニル基／置換アルケニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。
【００２９】
「アルキニル」とは、好ましくは２〜１０個、より好ましくは３〜６個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個のアルキニル不飽和部位を有する、アルキニル基を意味する。「置換アルキニル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキルカルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホンチオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンからなる群から選択される１〜５個の置換基を有するアルキニル基；慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護されたアミノ基を有する置換アルキニル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリック、または−ＳＯ２−-ＮＲＲで置換されたアルキニル基／置換アルキニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。
【００３０】
「アミノアシル」とは、−ＮＲＣ（Ｏ）アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）置換アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）置換シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−置換アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−置換アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）置換アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）置換ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）ヘテロサイクリック、および−ＮＲＣ（Ｏ）置換ヘテロサイクリックの基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００３１】
「アミノカルボニルオキシ」とは、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ-アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−ヘテロサイクリック、および−-ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロサイクリックの基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００３２】
「オキシカルボニルアミノ」とは、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アルキル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アルキル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アルケニル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アルケニル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アルキニル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アルキニル −ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−シクロアルキル、−-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換シクロアルキル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−ヘテロアリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−ヘテロサイクリック、および−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換ヘテロサイクリックの基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味し、Ｒはそれぞれ、窒素原子とともにヘテロ環または置換ヘテロ環を形成してもよい。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００３３】
「アリール」または「Ａｒ」とは、単環（例えば、フェニル）または縮合した複数の環（例えば、ナフチルもしくはアントリル）を有する、６〜１４個の炭素原子の不飽和芳香族炭素環基を意味する。なお、縮合した環は芳香族（例えば、２−ベンズオキサゾリノン、２Ｈ−１，４−ベンズオキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イルなど）であってもなくてもよい。好ましいアリールとしては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。
【００３４】
置換アリールとは、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル-置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、カルボキシルアミド、シアノ、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＳＯ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換アリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−-Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−-ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ-置換 ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−-ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二-置換アミン、慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護された置換アリール上のアミノ基、並びに−ＳＯ２ＮＲＲ（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたアリール基を意味する。
【００３５】
「置換アリールオキシアリール」とは、一方または双方のアリール環上が、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、カルボキシルアミド、シアノ、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換アリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−-ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二-置換アミン、慣用の保護基で保護され、−ＳＯ２ＮＲＲで置換された置換アリール上のアミノ基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたアリールオキシアリール基を意味する。
【００３６】
「シクロアルキル」とは、単環を有する３〜８個の炭素原子の環状のアルキル基を意味し、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが挙げられる。アダマンタニルのような複数環のアルキル基はこの定義から除かれる。「シクロアルケニル」とは、１以上の不飽和結合を有するが芳香族ではない、３〜８個の炭素原子の環状のアルケニル基を意味する。
【００３７】
「置換シクロアルキル」および「置換シクロアルケニル」とは、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシル-シクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル-置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−-ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換 アルキル、 アリール、 置換 アリール、 ヘテロアリール、置換 ヘテロアリール、 ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミン、慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護されたアミノ基を有する置換アルキニル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリックまたは−ＳＯ２ＮＲＲで置換されたアルキニル基／置換アルキニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜５個の置換基を有する、好ましくは３〜８個の炭素原子のシクロアルキル基およびシクロアルケニル基を意味する。
【００３８】
「シクロアルコキシ」とは、−Ｏ−シクロアルキル基を意味する。「置換シクロアルコキシ」とは、−Ｏ−置換シクロアルキル基を意味する。
【００３９】
「ハロ」とは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味し、好ましくはクロロまたはブロモのいずれかを意味する。
【００４０】
「ヘテロアリール」とは、２〜１０個の炭素原子、並びに、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される１〜４個の環内のヘテロ原子の芳香族炭素環基を意味する。かようなヘテロアリール基は、単環（例えば、ピリジルもしくはフリル）または縮合した複数の環（例えば、インドリジニルもしくはベンゾチエニル）を有しうる。好ましいヘテロアリール基としては、ピリジル、ピロリル、インドリルおよびフリルが挙げられる。
【００４１】
「置換ヘテロアリール」とは、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル-置換アルキル、カルボキシル-シクロアルキル、カルボキシル-置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル-置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル-置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル-置換ヘテロサイクリック、カルボキシルアミド、シアノ、チオl、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換アリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリック、慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護された置換アリール上のアミノ基、および−ＳＯ２ＮＲＲからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミン（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたヘテロアリール基を意味する。
【００４２】
「ヘテロアリールオキシ」とは、−Ｏ−ヘテロアリール基を意味し、「置換ヘテロアリールオキシ」とは、−Ｏ−置換ヘテロアリールを意味する。
【００４３】
「ヘテロ環」または「ヘテロサイクリック」とは、１〜１０個の炭素原子と、窒素、硫黄または酸素からなる群から選択される１〜４個の環内のヘテロ原子とを含み、単環または縮合した複数の環を有する、飽和または不飽和の基を意味する。縮合環系においては、１以上の環がアリールまたはヘテロアリールでありうる。
【００４４】
「置換ヘテロサイクリック」とは、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル−置換アルキル、カルボキシル−シクロアルキル、カルボキシル−置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル−置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル−置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル-置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−-ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミン；慣用の保護基で保護されたアミノ基を有する置換アルキニル基；並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリックまたは−ＳＯ２ＮＲＲで置換されたアルキニル基／置換アルキニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたヘテロ環基を意味する。
【００４５】
ヘテロ環およびヘテロアリールの例としては、以下に限定されないが、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。
【００４６】
「ヘテロサイクリルオキシ」とは、−Ｏ−ヘテロサイクリック基を意味し、「置換ヘテロサイクリルオキシ」とは、−Ｏ−置換ヘテロサイクリックを意味する。
【００４７】
本発明の１または２以上の実施形態の詳細を以下に記載する。本発明の他の特徴、目的、および利点は、詳細な説明および図面、並びに特許請求の範囲から明らかである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４８】
ある証拠によれば、いくつかの類似の多臓器ＡＤＲの発症には、ＭＨＣ分子に直接結合するか内因性タンパク質に結合する薬剤またはその代謝物の制限されたＭＨＣ提示と、Ｔ細胞の活性化が関わっていることが示唆されている（Ｓｖｅｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｒｅｖ．， ５３（３）：３５７−３７９， ２０００）。ＳＪＳ／ＴＥＮといった水泡性反応では、皮膚浸潤性のＣＤ８＋細胞毒性Ｔ細胞が支配的であることが判明している（Ｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｅｘｐ． Ａｌｌｅｒｇｙ， ３１（９）：１３９８−１４０８， ２００１）。これに対し、斑点状丘疹といった軽度の皮膚のＡＤＲの特徴は、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞である（Ｐｉｃｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ． Ａｒｃｈ． Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １１３（１−３）：１７７−１８０， １９９７）。
【００４９】
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１は、ＣＢＺにより誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮ、アロプリノールにより誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮ／ＨＳＳ、およびＣＢＺにより誘発される軽度の皮膚のＡＤＲ（例えば、斑点状丘疹、多形性紅斑、蕁麻疹、または固定薬疹）に、それぞれ関連していることが判明している。よって、これらのＨＬＡ−Ｂアレルは、患者が、ＣＢＺ化合物、アロプリノール化合物、または類似の構造を有する他の薬剤により誘発されるＡＤＲを引き起こすリスクがあるか否かを決定するのに有用な遺伝子マーカーである。
【００５０】
ＣＢＺ（テグレトール、テゴール、Ｇ−３２８８３、ビストン、カレプシン、カルバトロール、エピトール、フィンレプシン、シルタール、スタゼピン、テレスミン、またはチモニールとしても知られている）は、芳香族抗けいれん薬である。フェニトイン（ディランチン）およびフェノバルビタールなどの他の芳香族抗けいれん薬は、ＣＢＺに類似のＡＤＲを引き起こす。したがって、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２は、これらの他の芳香族抗けいれん薬に対するＡＤＲについてのリスクを評価するのにも同様に用いられうる。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２がリスクファクターとして用いられうる芳香族抗けいれん薬としては、ＣＢＺ、フェニトインまたはフェノバルビタールの化合物または代謝物も含まれる。これらの薬剤の代謝物は、本技術分野において公知であり（例えば、Ｇｅｎｎｉｓ ｅｔ ａｌ．， １９９１； Ｌｅｅｄｅｒ， Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ， ３９ Ｓｕｐｐｌ． ７：Ｓ８−１６， １９９８； Ｎａｉｓｂｉｔｔ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ６３（３）：７３２−７４１， ２００３を参照）、例えば、ＣＢＺ−１０，１１エポキシド、ＣＢＺ−１０，１１−ジオール、ＣＢＺ−２，３−ジオール、ジヒドロＣＢＺ、ＣＢＺカテコール、およびＣＢＺｏ−キノン、ｐ−ヒドロキシフェニトイン、フェニトインジヒドロジオール、フェニトインカテコール、フェニトインメチルカテコール、およびフェニトインｏ−キノンが挙げられる。
【００５１】
アロプリノールは、高尿酸血症および慢性痛風のための薬剤である。
【００５２】
本発明は、患者における特定のＨＬＡアレルまたはその等価遺伝子マーカーの存在に基づいて、患者がＡＤＲ（特に、ＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳ）を引き起こすリスクがあるか否かを予測する方法を提供する。
【００５３】
一例では、患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の存在は、当該患者が、ＣＢＺ化合物、ＣＢＺに構造的に類似した化合物、またはこれらの代謝物により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮを引き起こすリスクがあることを示す。表Ｉは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２キャリアにおいてＳＪＳ／ＴＥＮを誘発しうる化合物の例を示す。
【００５４】
【表１】
【００５５】
他の例では、患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在は、当該患者が、アロプリノール化合物、アロプリノールに構造的に類似した化合物、またはこれらの代謝物により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳを引き起こすリスクがあることを示す。表ＩＩは、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有する患者においてＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳを誘発しうる化合物の例を示す。
【００５６】
【表２】
【００５７】
さらに他の例では、患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊４６０１の存在は、当該患者が、ＣＢＺにより誘発される軽度の皮膚のＡＤＲ（例えば、斑点状丘疹）を引き起こすリスクがあることを示す。
【００５８】
他のＨＬＡ−Ｂもまた、皮膚のＡＤＲの素因となりうる。例えば、強直性脊椎炎は、Ｂ＊２７０１−Ｂ＊２７２３などのＨＬＡ−Ｂ２７アレルと強く関連している（Ｋｈａｎ， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．， １２（４）：２３５−２３８， ２０００； Ｆｅｌｔｋａｍｐ ｅｔ ａｌ．， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．， １３（４）：２８５−２９０， ２００１）。
【００５９】
遺伝的マーカー（例えば、ＨＬＡアレル）の存在は、当該マーカーの直接的な検出、または当該マーカー内の特定の領域の直接的な検出により決定されうる。アレル検出用のゲノムＤＮＡは、本技術分野において周知の手法（例えば、ミネソタ州のジェントラ システムズ（Ｇｅｄｔｒａ Ｓｙｓｔｅｍｓ）からのピュアジーン（ＰＵＲＥＧＥＮＥ）ＤＮＡ精製システム）により、患者から調製されうる。対象となる遺伝的マーカー内の領域の検出では、当該領域内のセンス鎖またはアンチセンス鎖のいずれかに位置するヌクレオチドを調べる。例えば、配列特異的オリゴヌクレオチド−ハイブリダイゼーション、リアルタイムＰＣＲ、またはＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡ（Ｍ． Ｈｉｒａｔｓｕｋａ ｅｔ ａｌ， Ｊ． ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃ． Ｍｅｔｈｏｄｓ， ６７：８７−９４， ２００６）などの本技術分野において公知の手法が、特定の領域を検出するのに用いられうる。
【００６０】
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の存在は、図１に示す領域１〜領域６の少なくとも２つを検出することにより決定されうる。これらの領域の存在は、これらの領域内の特定の位置（例えば、領域１の１位および３位、領域２の１位および６位、並びに領域３の１位および３位）のヌクレオチドを検出することにより決定されうる。領域１〜領域６のうちの任意の２つの存在により、当該患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２のキャリアであることが示される。
【００６１】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在は、図２に示す領域１〜領域６の少なくとも２つを検出することにより決定されうる。これらの領域の存在は、これらの領域内の特定の位置（例えば、領域１の１位、２位および５位、領域２の１位、４位、６位、７位、８位、１５位、１６位、および２０位、領域３の２位、４位、５位、８位、および９位、領域４の３位、および５位、領域５の１位、および９位、並びに、領域６の３位、および１０位）のヌクレオチドを検出することにより決定されうる。領域１〜領域６のうちの任意の２つの存在により、当該患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１のキャリアであることが示される。
【００６２】
ＰＣＲにより得られたＤＮＡ産物は、配列特異的プローブ（例えば、タックマン、ビーコンズ、スコーピオンズ（ＴａｑＭａｎ，Ｂｅａｃｏｎｓ，Ｓｃｏｒｐｉｏｎｓ）からの加水分解プローブ）またはハイブリダイゼーションプローブを用いて検出されうる。これらのプローブは、対象となる領域（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６）に結合するように設計される。当該ＰＣＲ産物はまた、ＤＮＡ結合剤（例えば、ＳＹＢＲ（登録商標）グリーン）によっても検出されうる。
【００６３】
対象アレルの存在はまた、当該アレルと等価な遺伝的マーカーを検出することにより決定されうる。対象アレルに近い遺伝的マーカーは、当該アレルと一緒に分離しているか、または当該アレルと連鎖非平衡性を示す。したがって、これらのマーカー（等価遺伝的マーカー）の存在は、対象アレルの存在の指標となり、そしてこれがＡＤＲの発生に対するリスクの指標となるのである。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２に等価な遺伝的マーカーの例としては、ＤＲＢ１＊１２０２、Ｃｗ＊０８０１、Ｃｗ＊０８０６、Ａ＊１１０１、およびＭＩＣＡ＊０１９が挙げられる。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１に等価な遺伝的マーカーの例としては、Ａ＊３３０３、Ｃｗ＊０３０２、ＤＲＢ１＊０３０１、およびＭＩＣＡ＊００２０１が挙げられる。
【００６４】
等価遺伝的マーカーは、例えば、ＨＬＡアレル、マイクロサテライトマーカー、または一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーなどの任意の種類でありうる。有用な等価遺伝的マーカーは通常、対象アレルから約２００ｋｂ（例えば、１００ｋｂ、８０ｋｂ、６０ｋｂ、４０ｋｂ、または２０ｋｂ）以内である。上述の手法または本技術分野において公知の手法が、等価遺伝的マーカーの存在または不存在を検出するのに用いられうる。
【００６５】
上記に代えて、またはこれに加えて、対象アレルのＲＮＡ産物、ｃＤＮＡ産物またはタンパク質産物を検出して、当該アレルの存在または不存在を決定してもよい。例えば、血清タイピング法または微量細胞毒性による手法が、ＨＬＡアレルのタンパク質産物を決定するのに用いられうる。
【００６６】
リスク予測の正確さをさらに増大させるべく、対象アレルおよび／またはその等価遺伝的マーカーを、抗原提示細胞とＴ細胞との間の相互作用に関与するアクセサリー分子および共刺激分子の遺伝的マーカーと一緒に決定してもよい。これらの遺伝的マーカーとしては、マイクロサテライトマーカーおよび一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーが挙げられる。上記アクセサリー分子および共刺激分子としては、細胞表面分子（例えば、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ２８、ＣＤ４、ＣＤ８、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ５８、ＣＤ２など）および炎症性サイトカインまたは前炎症性サイトカイン、ケモカイン（例えば、ＴＮＦ−α）、並びにメディエータ（例えば、補体、アポトーシスタンパク質、酵素、細胞外マトリックス成分など）が挙げられる。薬剤の生物学的活性化または非毒化に関与する薬剤代謝酵素の遺伝的マーカーもまた、対象となる。これらの遺伝的マーカーには、マイクロサテライトマーカーおよびＳＮＰマーカーも含まれる。薬剤代謝酵素には、Ｉ相酵素（例えば、チトクロームＰ４５０スーパーファミリーなど）およびＩＩ相酵素（例えば、ミクロソームエポキシドヒドロラーゼ、アリールアミンＮ−アセチルトランスフェラーゼ、ＵＤＰ−グルクロノシルトランスフェラーゼなど）が含まれる。
【００６７】
本発明はさらに、薬理ゲノミクスプロファイリングのための方法を提供する。所定の個体に対して、それぞれがＡＤＲなどの疾患または臨床症状に対する素因と関連している一連の遺伝的因子が決定される。この方法では、遺伝的因子のパネルは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１からなる群から選択される少なくとも１つのアレルを含む。このパネルは、当該群からの２つのアレルまたは３つのすべてのアレルを含みうる。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、５８０１および／または４６０１に加えて、当該パネルは、チオプリンメチルトランスフェラーゼ、およびＱＴ延長症候群の遺伝子などの他の任意の公知の遺伝的因子を含みうる。上述したアクセサリー分子、共刺激因子、および／または薬剤代謝酵素の遺伝的マーカーもまた含まれうる。
【００６８】
遺伝的マーカー（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）を検出するためのプローブを含有するキットもまた、本発明の範囲に含まれる。本明細書で用いられる「プローブ」との語は、他の物質を検出するのに有用な任意の物質を意味する。よって、プローブは、対象アレル内の特定の領域に特異的にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドまたは共役オリゴヌクレオチドでありうる。共役オリゴヌクレオチドとは、受容体分子（例えば、抗原に特異的な抗体）に高度に特異的なリガンド（当該抗原）を含むクロモフォアまたは分子に共有結合したオリゴヌクレオチドを意味する。当該プローブはまた、他のプライマーとともに対象アレル内の特定の領域を増幅するためのＰＣＲプライマーであってもよい。さらに、当該プローブは、対象アレルまたは当該アレルのタンパク質産物を認識する抗体であってもよい。場合によっては、上記キットは内部制御アレルを標的とするプローブを含有してもよく、当該内部制御アレルは、ＧＡＰＤＨ、β−アクチン、ＫＩＲなどの一般的な集団にみられる任意のアレルでありうる。内部制御アレルの検出は、当該キットの性能を保証するために設計される。
【００６９】
上記キットはさらに、患者から生物学的サンプルを回収するための器具および／または試薬、並びに、当該サンプルからゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＲＮＡ、またはタンパク質を調製するための器具および／または試薬を含みうる。例えば、ゲノムＤＮＡの関係する領域を増幅するためのＰＣＲプライマーが含まれてもよい。当該キットはまた、薬理ゲノミクスプロファイリングに有用な遺伝的因子（例えば、チオプリンメチルトランスフェラーゼ）に対するプローブを含有しうる。
【００７０】
一例では、当該キットは、それぞれＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６から、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６から選択される領域を検出するための第１プローブおよび第２プローブを含有する。当該第１プローブおよび第２プローブは、異なる領域を標的とする。これらの２つのプローブは、１対のＰＣＲプライマー、またはハイブリダイゼーションアッセイに有用なラベル化オリゴヌクレオチドでありうる。場合によっては、当該キットは、内部制御アレルを検出するための第３プローブを含みうる。当該キットはまた、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１内の追加の領域を検出するための追加のプローブを含んでもよい。
【００７１】
さらに他の形態において、本発明は、ＡＤＲ（例えば、ＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳ）に関連したＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）を有する患者においてＡＤＲを誘発する医薬化合物を同定する方法を提供する。薬剤は特定のＨＬＡ複合体により提示されてＴリンパ球を活性化し、その結果としてＡＤＲを誘発することが示唆されている。これらの薬剤に反応性のＴ細胞は、これらの薬剤により誘発されるＡＤＲの発生に関与していることが示唆される。よって、これらのＴ細胞を活性化しうる化合物は、これらのＡＤＲに関連した１または２以上のＨＬＡアレルを有する患者においてＡＤＲを誘発する候補である。その結果、この方法は、かようなＡＤＲを誘発しうる医薬化合物を発見するための新規薬剤の開発におけるスクリーニング方法として用いられうる。
【００７２】
ＡＤＲ患者が、当該疾患に関連したＨＬＡアレルを有するか否かを決定するには、当該患者のジェノタイピングが行なわれうる。Ｔリンパ球および抗原提示細胞（例えば、Ｂ細胞または単球）が患者から単離され、本技術分野において周知の方法に従ってインビトロで培養されうる（Ｎａｉｓｂｉｔｔ ＤＪ， Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ２００３ Ｍａｒ；６３（３）：７３２−４１ ， Ｗｕ ｅｔ ａｌ， Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２００６ Ｊｕｌ；１１８（１）：２３３−４１． Ｅ−ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎ ２００６ Ａｐｒ ２７）。こうして単離されたＢ細胞は、エプスタイン・バーウイルスによって形質転換されてＢ細胞系を生成しうる。薬剤に反応性のＴ細胞は、薬剤および自己の抗原提示細胞の双方の存在下で展開されうる。次いで、展開されたＴ細胞を、自己の抗原提示細胞の存在下で試験化合物に曝露し、当該試験化合物が当該Ｔ細胞を活性化しうるか否かを決定する。そうであれば、当該試験化合物は、同一のＨＬＡアレルを有する患者においてＡＤＲを誘発しうる候補である。
【００７３】
さらなる詳細を必要とすることなく、上述の記載によって本発明は十分に実施可能であると考えられる。以下の実施例はしたがって、単なる例示のためのものであって、残りの開示をいかようにも限定するものではないと解されるべきである。本明細書に引用されたすべての文献は、その全体が参照により本明細書に引用される。
【実施例】
【００７４】
実施例１．リアルタイムＰＣＲを用いたＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の検出
ゲノムＤＮＡを、患者の血液または唾液から抽出した。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１および領域５、領域１および領域４、または領域１、領域３および領域４をそれぞれ標的とする３対のＰＣＲプライマー（図１を参照）を合成した。また、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域２および領域４を標的とする１対のプライマー（図２を参照）を合成した。ＳＹＢＲ（登録商標）グリーン リアルタイムＰＣＲシステム（アプライド バイオシステム）を用いて、上記標的領域を増幅し、検出した。簡単に言えば、上記プライマー、上記ゲノムＤＮＡ、およびパワーＳＹＢＲ（登録商標）グリーンＰＣＲマスターミクスチャ（上記リアルタイムＰＣＲシステムに付属）を混合し、（ｉ）９５℃にて１０分間ポリメラーゼを活性化させ、（ｉｉ）９５℃にて１５秒間変性させ、７１℃にて１分間ＤＮＡ鎖をアニーリング／伸長させ、（ｉｉｉ）変性／アニーリング／伸長を４０サイクル行ない、（ｉｖ）９５℃にて１５秒間、および６０℃にて１分間、増幅産物をそのテンプレートから解離させることにより、ＰＣＲを行なった。キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）のＰＣＲ増幅を内部コントロールとして用いた。患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在または不存在は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１のＣｔ値、および、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２／ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１とＫＩＲとの間のＣｔ値の差（ΔＣｔ値）に基づいて決定した。Ｃｔ値（閾値サイクル）は、レポーターダイの発光強度がバックグラウンドノイズを上回るサイクル数を同定することにより決定した。当該閾値サイクルは、反応の最も指数関数的な相で決定し、従来のＰＣＲ法により用いられる蓄積ＰＣＲ産物の最終時点での測定よりも信頼性が高い。当該閾値サイクルは、標的テンプレートのコピー数に逆比例し、テンプレート数が多くなるほど、測定される閾値サイクルは小さくなる。
【００７５】
ヒトＢ細胞系から抽出した１７０個のゲノムＤＮＡサンプル、およびヒト血液またはヒト唾液から調製した３５個のゲノムＤＮＡサンプルについて、上述の方法に従って、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の存在を検出する目的で試験を行なった。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＫＩＲのＣｔ値は、それぞれ２３〜２７および１９〜２５の範囲であった。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２とＫＩＲとの間のΔＣｔの範囲が７未満であるときに、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２は陽性であるとした。これらの１７０個のスーパーコントロール中、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するｇＤＮＡは１５個存在していたが、これをダイナル（Ｄｙｎａｌ）ＳＳＯキットにより確認した結果、この方法の感度および特異性はともに９９％を超えていることが示された。
【００７６】
ヒトＢ細胞系から抽出した１７０個のゲノムＤＮＡサンプル、およびヒト血液またはヒト唾液から調製した８７個のゲノムＤＮＡサンプルについて、上述の方法に従って、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在を検出する目的で試験を行なった。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１陽性の患者由来のＤＮＡサンプルについて、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１およびＫＩＲのＣｔ値は、それぞれ２２〜２８および１０〜２６の範囲であった。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１とＫＩＲとの間のΔＣｔの範囲が７未満であるときに、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は陽性であるとした。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１陰性の患者由来のＤＮＡサンプルについて、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１のＣｔ値は約３４であり、ΔＣｔは１３超であった。全てのサンプル中、５１個のｇＤＮＡがＨＬＡ−Ｂ＊５８０１陽性であることが判明し、これをダイナルＳＳＯキットにより確認した。その結果、感度および特異性はともに９９％を超えていることが示された。
【００７７】
実施例２．ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡを用いたＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の検出
ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡを行なう手法を図３に概説する。
【００７８】
一般に、ゲノムＤＮＡをテンプレートとして用いてＰＣＲを行なうと、図１または図２に示す特異領域を含む産物が産生する。フォワードプライマーまたはリバースプライマーのいずれかをリガンドＩ（ＬＩ）でラベル化した。なお、当該リガンドＩは、酵素（例えば、ＨＲＰ）に連結された分子Ｉ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉ）により認識されうる。ＰＣＲ反応は、１以上の特異領域（すなわち、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６）を含む産物が産生するように設計して行なった。２つの競合配列特異的オリゴヌクレオチド（ＣＳＳＯ１およびＣＳＳＯ２）を設計した。ＣＳＳＯ１はＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６の１つを特異的に認識し、ＣＳＳＯ２はＨＬＡ−Ｂ＊１５の一般的なタイプ（すなわち、非Ｂ＊１５０２アレルまたは非Ｂ＊５８０１）にプライミングするように設計した。ＣＳＳＯ１についてはリガンド２でラベル化した。なお、当該リガンド２は、反応プレートまたはストリップ上にコーティングされた分子ＩＩ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ＩＩ）により認識されうる。このようにして得られたＰＣＲ産物を、反応プレートまたは反応ストリップ上の２つのＣＳＳＯとハイブリダイズした。遊離分子を洗浄したのち、反応プレートに酵素の基質を添加した。色の存在により信号化された酵素反応は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在の指標である。
【００７９】
実施例３．ＣＢＺ誘導性ＳＪＳ／ＴＥＮとＨＬＡ−Ｂ＊１５０２との相関
この研究のために、長庚記念病院（Ｃｈａｎｇ Ｇｕｎｇ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ）または台湾中の他のいくつかの医療機関のいずれかから、合計で２３８名のＡＤＲ患者（モンゴロイドまたはその子孫）を集めた。この患者について、用量および期間などの薬歴、並びにＡＤＲの表現型を記録した。臨床形態の診断基準は、Ｒｏｕｊｅａｕ， Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ．， １０２（６）：２８Ｓ−３０Ｓ， １９９４に従って定義した。例えば、ＳＪＳは体表面積の１０％未満の皮膚剥離として定義し、重複ＳＪＳ−ＴＥＮは１０〜３０％の皮膚剥離として定義し、ＴＥＮは３０％超のものとして定義した。ＳＪＳ、重複ＳＪＳ−ＴＥＮ、およびＴＥＮをまとめてＳＪＳ／ＴＥＮと称する。
【００８０】
それぞれの患者について、関与が疑われる薬剤を停止し、患者の症状を観察した。薬剤を止めても改善しない皮膚のＡＤＲを発症した患者は除外した。
【００８１】
上述の判断基準によれば、１１２名の患者がＳＪＳ／ＴＥＮであると診断され、１２６名の患者が種々の薬剤に対するより緩和な過敏性を示した。１１２名のＳＪＳ／ＴＥＮ患者のうち、４２名がＣＢＺ（テグレトール）に曝露され、１７名がアロプリノールを摂取しており、５３名がＣＢＺおよびアロプリノール以外の薬剤による治療を受けていた。
【００８２】
テグレトールに耐性を示す７３名の患者をコントロールとして含めた。台湾人の一般的な集団からのボランティア（ｎ＝９４；年齢範囲：２０〜８０歳）を集めた。この研究は施設内治験審査委員会の承認を受けており、インフォームドコンセントを得た。
【００８３】
これらの患者全員について、ジェノタイピングを行なった。簡単に言えば、配列特異的オリゴヌクレオチド（ＳＳＯ）を用いたリバースラインブロットアッセイを行なうための試薬をダイナル バイオテック リミテッド（ＤＹＮＡＬ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｌｔｄ．）（ブロムボロ、イギリス）より購入した。ＨＬＡのクラスＩまたはクラスＩＩの遺伝子座の第２エクソンおよび第３エクソンのためのビオチン化プライマーを用いてＰＣＲ産物を得、次いでナイロン膜上に固定化したプローブのＳＳＯのラインブロットにハイブリダイズさせた。特異的プローブに結合したビオチン化ＰＣＲ産物の存在を、ストレプトアビジン−西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）および発色性の可溶性基質を用いて検出して、陽性プローブの位置に青い「ライン」を生成させた。このプローブ反応性のパターンを、ジェノタイピングソフトウェアであるダイナルＲＥＬＩ（商標）ＳＳＯ（ダイナル バイオテック リミテッド；ブロムボロ、イギリス）により解読した。潜在的な曖昧さについては、ＩＨＷＧ技術マニュアル（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ）に従った、配列に基づいたタイピングおよびＤＮＡシーケンシングによりさらに解消した。Ｇｅｎｏｍｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ ＭＨＣ ＤＮＡＢａｓｅｄ Ｔｙｐｉｎｇ ｆｏｒ ＨＬＡ Ａｌｌｅｌｅｓ ａｎｄ Ｌｉｎｋｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ． Ｍａｒｃｅｌ Ｇ．Ｊ． Ｔｉｌａｎｕｓ， Ｅｄｉｔｏｒ ｉｎ Ｃｈｉｅｆ， ＩＳＢＮ Ｎｏ． ０−９４５２７８−０２−０を参照のこと。
【００８４】
一部の患者については、高スループットＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法を用いてＳＮＰジェノタイピングを行なった。簡単に言えば、スペクトロデザイナー（ＳｐｅｃｔｒｏＤＥＩＳＧＮＥＲ）ソフトウェア（シーケノム、サン ディエゴ、カリフォルニア州、アメリカ合衆国）を用いて、プライマーおよびプローブを設計した。多重ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行ない、エビアルカリフォスファターゼ（ホフマン−ラ ロシュ、バーゼル、スイス）を用いて取り込まれなかったｄＮＴＰを脱リン酸化し、次いでプライマー伸長を行なった。精製したプライマー伸長の反応物を３８４素子のシリコンチップ（スペクトロチップ（ＳｐｅｃｔｒｏＣＨＩＰ、シーケノム））にスポットし、ブルーカー バイフレックス（Ｂｒｕｋｅｒ Ｂｉｆｌｅｘ） ＩＩＩ ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ スペクトロリーダー（ＳｐｅｃｔｒｏＲＥＡＤＥＲ）質量分析装置（シーケノム）を用いて分析し、スペクトロタイパー（ＳｐｅｃｔｒｏＴＹＰＥＲ）（シーケノム）を用いてスペクトルを加工した。
【００８５】
異なる群のアレル頻度を、２×２の表を作製することによるイェーツ補正を伴うχ二乗法により比較した。生のＰ値に、遺伝子座内での存在が観察されたＨＬＡアレルの数を積算することにより、複数のＨＬＡアレルの比較のためにＰ値を補正した（Ｐｃ）。ゼロカウントの可能性を調整するために全セルに０．５を加算するというハルデン修飾を用いて、オッズ比を算出した。
【００８６】
表１に示すように、ＨＬＡ−Ｂの遺伝子座におけるＤＮＡ変異体（ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２）は、患者において、特にＣＢＺ（テグレトール）を服用していた患者において、薬剤誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮに関連していた。
【００８７】
【表３】
【００８８】
ＣＢＺを服用していた４２名のＳＪＳ／ＴＥＮ患者のうち、４２名（１００％）においてＨＬＡ−Ｂ＊１５０２が検出された。当該アレルはまた、他の薬剤を服用していた５３名のＳＪＳ／ＴＥＮ患者のうち、１７名（３２％）において見られた（フェニトイン８名、アロプリノール２名、アモキシシリン２名、スルファサラジン１名、ケトプロフェン１名、イブプロフェン１名、および不明の薬剤２名）。特に、フェニトインの服用後にＳＪＳ／ＴＥＮを発症した１７名の患者のうち８名（４７．０５％）が、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２アレルを有していた。これに対し、当該アレルが見られたのは、ＣＢＺ耐性群では４．１％（３／７３）、フェニトイン耐性群では０％（０／３２）、ＳＪＳ以外のより緩和なＡＤＲを有する患者では６．３％（９／１４２）、一般的な集団では５．３％（５／９４）のみであった。上記の耐性群をコントロールとして用いることで、ＣＢＺ誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮに関連したＢ＊１５０２のオッズ比、感受性、特異性、陽性的中率および陰性的中率は、それぞれ１７１２、１００％、９５．８９％、９６．０％および１００％であった。陽性的中率および感受性がこのように高いため、当該ＨＬＡ−Ｂアレルのタイピングは、薬剤誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮ、特にＣＢＺまたはフェニトイン誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮに対する高リスク患者の同定に用いられうる。
【００８９】
ＣＢＺにより誘発される緩和なＡＤＲは、他のアレルであるＨＬＡ−Ｂ＊４６０１に関連していることが判明した。これらのＣＢＺに対するより緩和な反応を示した１６名の患者のうち、１０名（６２．５％）がＨＬＡ−Ｂ＊４６０１を有していた。一方、当該アレルは、ＣＢＺ耐性群では２６％（１９／７３）のみに見られた。Ｂ＊４６０１に関連した、ＣＢＺ誘発性のより緩和な皮膚のＡＤＲのオッズ比は４．７３であった。したがって、ＨＬＡ−Ｂ＊４６０１はＣＢＺにより誘発される緩和な皮膚のＡＤＲに対するリスク評価に用いられうる。
【００９０】
【表４−１】
【００９１】
【表４−２】
【００９２】
実施例４．アロプリノール誘発性ＳＪＳ／ＴＥＮとＨＬＡ−Ｂ＊５８０１との相関
アロプリノール誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮにはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１が関連していることが判明した。このＨＬＡ−Ｂアレルは、アロプリノールで処置された１７名のＳＪＳ／重篤ＡＤＲ患者のすべて（１００％）で見られたが（表３および表４）、一般的な台湾人の集団では１８％のみに見られた（オッズ比１５５、感受性１００％、特異性８２％、陽性的中率８４．７％、陰性的中率１００％、Ｐｃ＝３．７×１０−９）。これらの結果から、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は、単独でまたは他の遺伝的マーカーと組み合わせて、アロプリノールを服用する患者がＳＪＳ／ＴＥＮを発症するリスクがあるか否かを評価するのに有用な遺伝的マーカーであることが示唆される。
【００９３】
【表５】
【００９４】
【表６】
【００９５】
実施例５．ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１とアロプリノール誘発性ＨＳＳとの相関
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１はまた、アロプリノール誘発性ＨＳＳとも関連していることが判明した。このアロプリノール誘発性ＨＳＳとしては、皮膚疹（例えば、拡散型丘疹、剥脱性皮膚炎）、発熱、好酸球増多症、異型循環リンパ球、白血球増多症、急性肝細胞損傷、または腎機能の悪化が挙げられる（Ａｒｅｌｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．， ２７：３３７， １９９３）。
【００９６】
３１名の患者について調べたが、これらのうち２１名がＳＪＳ、３名がＳＪＳ／ＴＥＮ、１名がＴＥＮ、そして１５名がＨＳＳを発症していた。登録されたすべての場合において、アロプリノール暴露から最初の２月以内にＡＤＲの症状が開始し、かつ、そのＡＤＲの症状が当該薬剤の停止により消失した場合には、アロプリノールを原因薬剤であるとみなした。ただし、以下の条件のいずれかを満たす患者は除外した：アロプリノールへの再暴露後も症状が出ない患者、および、ＨＳＳ、ＳＪＳまたはＴＥＮの判断基準を満たさない、より緩和な皮膚発疹を有する患者。
【００９７】
３１名のすべての患者で、ＨＳＳ症状の開始はアロプリノール暴露後の最初の２月以内であり、２名の患者では、アロプリノールへの再暴露後２日以内に第２の症状が見られた。１２名の患者がアロプリノール以外にも他の薬剤を服用していたが、彼らの薬歴によればこれらの併用薬のみをアロプリノールなしに服用した場合にはＡＤＲは発現しなかったことがわかっている。すべての患者で高尿酸血症および／または痛風性関節炎、並びに、高血圧（１４／３１）、慢性腎臓病（１６／３１）、および糖尿病（９／３１）などの他の慢性疾患が見られた。
【００９８】
アロプリノールを少なくとも６月服用している（平均＝３８月、範囲＝６〜１０７月）がＡＤＲの症状を示さなかった９８名の痛風性関節炎の患者を、アロプリノール耐性コントロールとした。当該耐性群の性分布は、中国人における一般的な痛風の有病率と同程度であった。さらに、９３名の健常人を健常コントロール群とした。これらの３つの群の人口統計学的変数を表５に示す。
【００９９】
【表７】
【０１００】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は、アロプリノール誘発性の重篤なＡＤＲを有する患者の３１名すべてに、アロプリノール耐性の９８名の患者のうち１６名（１６．３％）に（オッズ比３１５、Ｐｃ＜１０−１５）、そして９３名の健常者のうち１９名（２０％）に（オッズ比２４１、Ｐｃ＜１０−１３）、存在していた。アロプリノール耐性群について、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の不存在はアロプリノール誘発性ＡＤＲに対して１００％の陰性的中率を示し、当該アレルの存在は６６％の陽性的中率を示した。したがって、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は、皮膚のＡＤＲ（例えば、ＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳ）などのアロプリノール誘発性ＡＤＲ、およびアロプリノール誘発性ＤＲＥＳＳ（好酸球増多症および全身症状を伴う薬剤反応）に高い特異性（８４％）および感受性（１００％）を示す有用なマーカーである。
【０１０１】
実施例６．ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１と等価な遺伝的マーカー
対象となるＨＬＡアレルに近い遺伝的マーカーは、当該対象アレルと一緒に分離するか、またはこれと連鎖非平衡性を示す傾向にある。その結果、これらのマーカー（等価遺伝的マーカー）の存在は、当該アレルの存在の指標となる。
【０１０２】
ＡＤＲを示した患者における潜在的な等価遺伝的マーカーの発生率を調べる目的で、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２ハプロタイプにおける種々のマーカーについて、そのＡＤＲとの関連を決定した。実際、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２ハプロタイプのＨＬＡマーカー（ＤＲＢ１＊１２０２、Ｃｗ＊０８０１、Ｃｗ＊０８０６、Ａ＊１１０１、およびＭＩＣＡ＊０１９など）は、ＣＢＺに曝露されたＳＪＳ／ＴＥＮ患者において有意に高い頻度を示した（表６）。
【０１０３】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１に関連したマーカーについても決定した。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１についてホモ接合性の４名の患者でアレル分布を分析し、当該アレルの祖先のハプロタイプがＨＬＡ−Ａ＊３３０３、Ｃｗ＊０３０２、Ｂ＊５８０１およびＤＲＢ１＊０３０１を含むものであることを同定した。この祖先のハプロタイプは、３１名のアロプリノールＡＤＲ患者のうち１２名（３８．７％）に存在していた（表７）が、耐性患者では７．１％のみ、健常者では９．７％のみであった。
【０１０４】
【表８】
【０１０５】
【表９】
【０１０６】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１と関連したＭＨＣマーカーについても、ショートタンデムリピート多型アッセイ（ＳＴＲＰ）を用いて決定した。簡単に言えば、ＭＨＣ領域に位置する高度に多型性の２０個のマイクロサテライトマーカーを、ＮＣＢＩデータベースから選択した（すなわち、Ｄ６Ｓ２５８、Ｄ６Ｓ２９７２、Ｄ６Ｓ５１０、Ｄ６Ｓ２６５、Ｄ６Ｓ３８８、Ｄ６Ｓ２８１４、ＨＬＡＣ＿ＣＡ１、ＨＬＡＢＣ＿ＣＡ２、ＭＩＢ、ＭＩＣＡ、ＴＮＦｄ、ＢＡＴ２＿ＣＡ、Ｄ６Ｓ２７３、Ｄ６Ｓ１６１５、ＤＱＣＡＲ、Ｇ５１１５２、Ｄ６Ｓ２４１４、Ｄ６Ｓ１８６７、Ｄ６Ｓ１５６０、およびＤ６Ｓ１５８３）。これらのマーカーのヘテロ接合性の平均は、２３０ｋｂの推定間隔で０．７２であった。
【０１０７】
データベースに記載のこれらのマーカーの配列に基づき、プライマーを設計した。これらのマーカーを増幅し、患者におけるこれらのマーカーの存在または不存在を検出する目的で、ジーンアンプ（ＧｅｎｅＡｍｐ）９７００サーモサイクラー（アプライド バイオシステムズ、フォスター シティ、カリフォルニア州、アメリカ合衆国）を用いて、（１０ｎｇのゲノムＤＮＡおよび０．３３μＭの各プライマーを含有する５μＬ体積で）ＰＣＲを行なった。
【０１０８】
適当なサイズを有し蛍光シグナルを示す６個以下のＰＣＲ産物をプールし、キャピラリーゲル電気泳動を行なった。内部サイズスタンダードとしてＬＩＺ５００サイズスタンダード（アプライド バイオシステムズ）を用い、ＡＢＩ３７３０ＤＮＡシーケンサー（アプライド バイオシステムズ）の電気泳動により、多型アンプリコンのサイズを決定した。アレルのサイズについては、ジーンマッパー（ＧＥＮＭＡＰＰＥＲ）プログラム バージョン３．０（アプライド バイオシステムズ）を用いて算出した。ＳＡＳプログラムを用いて、アレルの呼び出し・除去（ｃａｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｂｉｎｎｉｎｇ）を行なった。すべてのジェノタイピング実験で、質を担保する目的で３つのＣＥＰＨコントロール個体（１３３１−０１、１３３１−０２、１３４７−２）およびＨ２０を含めた。
【０１０９】
連鎖比平衡性プロットを用いたところ、ＨＬＡ−ＣとＴＮＦｄとの間に位置するアレルブロックがアロプリノール誘発性ＡＤＲ患者群では見られたが、アロプリノール耐性群では見られなかった。当該ブロックにおいて、ＨＬＡ−Ｂアレルに近いハプロタイプ（ＭＩＢ＊３５８−ＭＩＣＡ＊２０６−ＴＮＦｄ＊１４０）が同定された。当該ハプロタイプのＡＤＲとの関連性は、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の同一ＡＤＲとの関連性と一致している（ｐ＝０．００１８）。ＳＴＲＰマーカーおよびＭＩＣＡアレルのシーケンシングを用いることで、アロプリノール誘発性ＡＤＲ患者全員が同一のＢアレル（Ｂ＊５８０１）、ＭＩＣＡアレル（ＭＩＣＡ＊００２０１）、およびＴＮＦＳＴＲＰマーカー（ＴＮＦｄ＊１４０）を有していることが判明した。１名の患者を除いて、他のすべての患者は同一のＭＩＢマーカー（ＭＩＢ＊３５８）をも有していることが判明した。
【０１１０】
実施例７．ＣＢＺ反応性Ｔ細胞のオキシカルバゼピンおよびリカルバゼピンに対する交差反応性
ＣＢＺ誘発性ＳＪＳ／ＴＥＮを有する２名の患者を、長庚記念病院から集めた。一方の患者はＨＬＡ−Ｂ＊１５０２／Ｂ＊４６０１を有しており、もう１名の患者はＨＬＡ−Ｂ＊１５０２／Ｂ＊５１０１を有していた。ピュアジーン（ＰＵＲＥＧＥＮＥ）ＤＮＡ精製システム（ジェントラ システムズ、ミネソタ州、アメリカ合衆国）を用いて、当該患者からゲノムＤＮＡを抽出した。ＨＬＢ−アレルについては、配列特異的オリゴヌクレオチドリバースラインブロット（ダイナル バイオテック リミテッド、ブロムボロ、イギリス）を用いて確認した。
【０１１１】
フィコール−アイソパーク（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｉｓｏｐａｑｕｅ）（ファルマシア ファイン ケミカルズ、ピスカタウェイ、ニュージャージー州）密度勾配遠心分離により、当該患者から末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離した。当該ＰＢＭＣの一部をエプスタイン・バーウイルスによって形質転換し、自家のＢ細胞系を樹立した。
【０１１２】
ＣＢＺに反応性のＴ細胞を、以下の通り展開した。上記患者から調製したＰＢＭＣを、３７℃の５％ＣＯ２インキュベータ中、１０％熱不活性化ヒト血清、ＩＬ−２（２５Ｕ／ｍＬ）およびＣＢＺ（２５μｇ／ｍＬ）（シグマ）を含有する完全ＲＰＭＩ培地中で、７日間培養した。次いで、ＣＢＺの存在下で１０日間、放射線照射（５０Ｇｙ）した自家Ｂ細胞と共培養することにより、このＴ細胞を展開した。上記共培養の操作を２サイクルした後、ＣＢＺ活性化Ｔ細胞を集め、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ（イーバイオサイエンス（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ））に供した。
【０１１３】
このＣＢＺ反応性Ｔ細胞について、化合物（例えば、ＣＢＺ１０，１１−エポキシド、オキシカルバゼピン（商品名：トリレプタール）、リカルバゼピン、およびスリンダク）に対する交差反応性を調べた。簡単に言えば、Ｔリンパ球（５×１０３細胞）を、試験化合物の存在下または不存在下で、１０％ＦＢＳを含有する２００μＬのＲＰＭＩ培地中で自家Ｂ細胞（５×１０４細胞）と混合した。次いでその細胞を、抗インターフェロンγ抗体（ミリポア）でコートしたＥＬＩＳＰＯＴプレートのウェル中で２４時間インキュベートした。インキュベーション後、細胞培養の上清を回収し、本技術分野において公知の抗体介在性の手法を用いて、その中に含まれるインターフェロンγを検出した。
【０１１４】
本研究の結果によれば、ＣＢＺ反応性Ｔ細胞はＣＢＺ１０，１１−エポキシド、オキシカルバゼピン、およびリカルバゼピンには交差反応性であるが、スリンダクに対してはそうではないということが判明した。
【０１１５】
（他の実施形態）
本明細書に開示された全ての特徴は、任意の組み合わせで組み合されうる。本明細書に開示されたそれぞれの特徴は、同一の、等価な、または類似の目的に資する他の特徴により置換されうる。よって、そうでないと明記しない限り、開示されたそれぞれの特徴は、等価な、または類似の上位概念の一連の特徴の例示にすぎない。
【０１１６】
上述の記載から、当業者は、本発明の本質的な特徴を容易に把握することができ、その思想および範囲から逸脱することなく、本発明を種々の用途および条件に適合させる目的で種々の変更および修飾を加えることが可能である。よって、他の実施形態もまた、後述する特許請求の範囲に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１１７】
【図１】ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の特異領域を示す図である。
【図２】ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の特異領域を示す図である。
【図３】ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡを行なう手法を概説する図である。
【背景技術】
【０００１】
（関連出願のクロスリファレンス）
この出願は、その内容全体が引用される、２００６年５月１１日に出願された、米国仮特許出願第６０／８００，１２１号の利益を主張する。
【０００２】
（背景）
薬剤副作用（ＡＤＲ）は、望ましくない、かつ意図しない、薬剤の作用である。特に、予防、診断または治療に用いられる用量で、薬剤副作用は発生する。広く引用されているメタ分析によれば、ＡＤＲは死因の第４位から第６位の間にランクされている（Ｌａｚａｒｏｕ ｅｔ ａｌ., ＪＡＭＡ, ２７９（１５）：１２００−１２０５, １９９８）。皮膚のＡＤＲは、すべての入院の約２〜３％を占めている（Ｂｉｇｂｙ ｅｔ ａｌ．， ＪＡＭＡ， ２５６（２４）：３３５８−３３６３， １９８６）。これらは軽度の斑丘疹（ＭＰＥ）から、重症度が増すと、生命を脅かすＡＤＲ、例えば、過敏性症候群（ＨＳＳ）、スティーブン−ジョンソン症候群（ＳＪＳ）、および中毒性表皮剥離症（ＴＥＮ；ライル症候群）にまで及ぶ。後者の死亡率は４０％もありうる。
【０００３】
ＨＳＳは、発疹に加えて全身性の症状（例えば、発熱、関節痛、好酸球増多症、リンパ節腫脹）を伴う多臓器の関与（例えば、肝炎または腎炎）を特徴とする（Ｒｏｕｊｅａｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ３３１：１２７２−１２８５， １９９４）。ＳＪＳおよびＴＥＮは、紫斑の水膨れの発疹の急速な成長並びに、斑の関与および皮膚の剥離を伴う標的様の損傷により特徴づけられる、免疫複合体媒介性の過敏性障害である（Ｒｏｕｊｅａｕ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ， １９９４， １０２：２８Ｓ−３０Ｓ）。これらの多くは、スルホンアミド類、抗けいれん薬、アロプリノール、非ステロイド性抗炎症薬、および抗マラリア薬などの薬剤により引き起こされる（Ｒｏｕｊｅａｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ３３３（２４）：１６００−１６０７， １９９５）。台湾では、抗けいれん薬（例えば、ＣＢＺ、フェニトインおよびフェノバルビタール）、並びにアロプリノールがＳＪＳ／ＴＥＮを引き起こす最も一般的な薬剤である。
【０００４】
近年の薬理ゲノミクスの発展により、ＡＤＲへの罹患しやすさは特定の遺伝子アレルと関連していることが示唆されている。例えば、チオプリンメチルトランスフェラーゼの遺伝子多型は、リウマチ疾患または癌のための薬剤であるアザチオプリンにより誘発されるＡＤＲと密接に関連していることが判明した（Ｙａｔｅｓ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｉｎｔｅｒｎ． Ｍｅｄ．， １２６（８）：６０８−６１４， １９９７）。また、特定の薬剤により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮ／ＨＳＳへの罹患しやすさは遺伝学的に決定されるということも示唆されている（Ｇｅｎｎｉｓ ＭＡ， Ａｍ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ９１（６）：６３１−６３４， １９９１； Ｅｄｗａｒｄｓ ＳＧ， Ｐｏｓｔｇｒａｄ． Ｍｅｄ． Ｊ．， ７５（８８９）：６８０−６８１， １９９９）。しかしながら、実際に関与している遺伝的因子はいまだ同定されていない。
【０００５】
薬理ゲノミクスのこれらの研究によれば、患者におけるＡＤＲに関連したアレルの検出は、当該患者がＡＤＲを引き起こすリスクがあるか否かを評価するのに有用なアプローチであることが示唆されている。臨床検査改善修正法案により認定されたこの種の分子診断は現在、米国および欧州において参照試験所により提供されている。
【０００６】
特定の遺伝子アレルの存在を決定するには、１または２以上のアレル特異的ヌクレオチドを検出する必要がある。多くの場合、正確な決定を保証するには、当該アレル内の複数の領域を標的とせざるを得ない。例えば、現在利用可能なＨＬＡ−Ｂアレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１）を決定する方法では、当該アレル内の少なくとも６つの領域を検出することが必要である。
【発明の開示】
【０００７】
（発明の概要）
本発明は、患者が薬剤副作用（特に、ＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳ）を引き起こすリスクを予測する方法を提供する。数多くの薬剤（例えば、カルバマゼピン（ＣＢＺ））により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮには、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２が関連していることが判明している。また、また、アロプリノールにより誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮには、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１が特に関連している。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１はまた、アロプリノール誘発性のＨＳＳにも関連している。斑点状丘疹、多形性紅斑、蕁麻疹、または固定薬疹などの、ＣＢＺにより誘発されるより緩和な皮膚反応には、ＨＬＡ−Ｂ＊４６０１が特に関連している。
【０００８】
したがって、本願は、患者が薬剤に応答して薬剤副作用を引き起こすリスクを評価する方法を提供するが、当該方法は、患者からの生体サンプルを用いてＨＬＡタイピングを行なうことを含む。本発明では、少なくとも約４０％の感度でＡＤＲと関連している任意のＨＬＡアレルがリスクファクターとして用いられうる。好ましくは、このリスクファクターの感度は、少なくとも約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、または約９０％である。より好ましくは、当該感度は少なくとも９５％である。薬剤は、ＣＢＺ、オキシカルバゼピン（ブランド名：トリレプタール）、リカルバゼピン、アロプリノール、フェニトイン、スルファサラジン、アモキシシリン、イブプロフェンおよびケトプロフェンからなる群から選択されるものであることが好ましい。あるいは、当該薬剤は、好ましくは非ステロイド性抗炎症薬以外のものである。好ましくは、ＨＬＡ−Ｂアレルがリスクファクターである。
【０００９】
患者が薬剤に応答して薬剤副作用を引き起こすリスクの評価は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１からなる群から選択されるＨＬＡ−Ｂアレルの存在を決定することにより行なわれうる。ここで、ＨＬＡ−Ｂアレルの存在は、薬剤副作用についてのリスクの指標である。薬剤は、ＣＢＺ、オキシカルバゼピン、リカルバゼピン、アロプリノール、オキシプリノール、フェニトイン、スルファサラジン、アモキシシリン、イブプロフェンおよびケトプロフェンからなる群から選択されうる。
【００１０】
薬剤副作用は、ＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳのような皮膚の薬剤副作用である。一実施形態では、薬剤がＣＢＺ、オキシカルバゼピン、リカルバゼピンから選択され、前記アレルがＨＬＡ−Ｂ＊１５０２である。他の実施形態では、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１がＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳについてのリスクを予測するのに用いられ、薬剤はアロプリノールまたはオキシプリノールから選択されうる。ＨＬＡ−Ｂ１５、Ｂ５８、またはＢ４６の他のサブタイプ（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０３またはＨＬＡ−Ｂ＊１５５８）もまた、ＡＤＲの発生についてのリスクを予測するのに用いられうる。
【００１１】
遺伝子アレルは、生体サンプル（例えば、血液、唾液、尿または毛髪）から調製されたゲノムＤＮＡを用いて、アレル内の領域／ヌクレオチドを直接検出することによって、検出されうる。当該アレルはまた、例えば血清学的な手法または微量細胞毒性による手法によっても決定されうる。当該アレルはまた、当該アレルの等価遺伝的マーカーを検出することにより決定されることができ、当該マーカーは例えば、ＳＮＰ（一塩基多型）、マイクロサテライトマーカーまたは他の種類の遺伝子多型でありうる。換言すれば、当該アレルそのものの存在よりもむしろ、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、５８０１、または４６０１ハプロタイプの存在が、薬剤副作用に対するリスクの指標である。ＨＬＡ−Ｂ Ｂ＊１５０２ハプロタイプの等価遺伝的マーカーの例としては、Ｃｗ＊０８０１、Ｃｗ＊０８０６、Ａ＊１１０１、およびＭＩＣＡ＊０１９が挙げられる。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の等価遺伝的マーカーの例としては、ＨＬＡ−Ａ＊３３０３、Ｃｗ＊０３０２、ＤＲＢ１＊０３０１、およびＭＩＣＡ＊００２０１が挙げられる。
【００１２】
本発明の他の形態は、薬理ゲノミクスプロファイリングの方法である。当該方法は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１からなる群から選択される少なくとも１つのＨＬＡ−Ｂアレルの存在を決定することを含む。一例としては、上記群から選択される少なくとも２つ（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＨＬＡ−Ｂ＊５８０１）の存在を決定する。他の例としては、３つの全てのアレルの存在を決定する。当該方法は、場合によっては、他の遺伝的因子の決定を含んでもよい。かような他の遺伝的因子は、ＡＤＲなどの任意の疾患または医学的症状の素因に関連していてもよい。例えば、これらの他の遺伝的因子は、チオプリンメチルトランスフェラーゼおよびＱＴ延長症候群の遺伝子からなる群から選択されうる。
【００１３】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定する方法もまた、本発明の範囲に包含される。当該方法は、（１）ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６のいずれかから選択される第１領域を検出する段階、（２）ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６のいずれかから選択され、前記第１領域とは異なる第２領域を検出する段階、および、（３）患者が対象アレルを有しているか否かを決定することを含む。ここで、前記第１領域および前記第２領域が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有することが示される。これらの領域は、リアルタイムＰＣＲ、またはＥＬＩＳＡと共役した競合配列特異的オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションアッセイ（ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡ）により決定されうる。一例では、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６から、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６から選択される２つの領域を検出すれば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在または不存在を決定するのに十分である。あるいは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１中の３つ以上の領域を検出する。
【００１４】
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１、領域２、および領域３の検出はそれぞれ、領域１における１位および３位、領域２における１位および６位、並びに領域３における１位および３位のヌクレオチド（これらの位置でのセンス鎖またはアンチセンス鎖のいずれかにおけるヌクレオチドを含む）を同定することにより、行われうる。
【００１５】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６の検出はそれぞれ、領域１における１位、２位および５位、領域２における１位、４位、６位、７位、８位、１５位、１６位および２０位、領域３における２位、４位、５位、８位および９位、領域４における３位および５位、領域５における１位および９位、並びに領域６における３位および１０位のヌクレオチドを同定することにより、行われうる。
【００１６】
本発明はまた、遺伝子アレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１）を検出するためのキットをも提供する。一例として、当該キットは、それぞれＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６から選択される領域を標的とする第１プローブおよび第２プローブを含む。この２つのプローブは、異なる領域を標的とする。当該キットは、内部制御アレルを標的とする第３プローブをさらに含んでもよい。また、当該キットは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１における１以上の追加の領域を検出するための１以上の追加のプローブを含んでもよい。
【００１７】
さらに、ある化合物が、薬剤（ＣＢＺ、アロプリノール、またはフェニトイン）により誘発される薬剤副作用（ＡＤＲ）に関連したＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）を有する患者におけるＡＤＲ（ＳＪＳ／ＴＥＮ、ＨＳＳ、またはより緩和な皮膚のＡＤＲ）を誘発する候補であるか否かを決定する方法が提供される。当該方法は、（１）ＡＤＲに関連したＨＬＡアレルを有する当該ＡＤＲの患者からＴ細胞を単離する段階、（２）前記ＡＤＲを誘発する薬剤に反応性のＴ細胞を展開する段階、（３）前記患者から抗原提示細胞を単離する段階、（４）ＡＰＣの存在下で、展開されたＴ細胞を化合物と接触させること、および（５）前記化合物が、展開されたＴ細胞を活性化するか否かを調べる段階を含む。上記Ｔ細胞を活性化する化合物は、同一のＨＬＡアレルを有する患者におけるＡＤＲを誘発する候補である。
【００１８】
一般の人口集団がＡＤＲを引き起こす可能性よりも、患者がＡＤＲを引き起こす可能性が高い場合、当該患者はＡＤＲについて「リスク」を有することになる。患者がＡＤＲを引き起こす可能性は、一般の人口集団がＡＤＲを引き起こす可能性の、少なくとも約１．５倍高く、より好ましくは少なくとも約２倍高く、さらにより好ましくは少なくとも約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、または約９倍高く、最も好ましくは少なくとも約１０倍高い。この可能性は、リスクファクターの発生率を用いるなどの、本技術分野において公知の任意の方法により決定されうる。例えば、あるリスクファクターは一般の人口集団の５％に存在する。仮にこのファクターがＡＤＲを有する患者の１０％に存在するのであれば、当該リスクファクターを有する患者がＡＤＲを引き起こす可能性は、一般の人口集団がＡＤＲを引き起こす可能性の２倍高い。
【００１９】
ＡＤＲについての「リスクファクター」は、ＡＤＲに関連したファクターである。リスクファクターの感度は、好ましくは少なくとも約４０％であり、より好ましくは少なくとも約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、または約９０％である。最も好ましくは、当該感度は少なくとも９５％である。ＡＤＲを予測するためのリスクファクターの「感度」は、ＡＤＲ患者のうち、リスクファクターを有する者の百分率である。換言すれば、全てのＳＪＳ患者がアレルＡを有する場合、ＳＪＳを予測するためのアレルＡの感度は１００％である。４０名のＳＪＳ患者のうち２０名がアレルＢを有するのであれば、ＳＪＳを予測するためのアレルＢの感度は５０％である。
【００２０】
対象アレルの「等価遺伝子マーカー」とは、対象アレルと連鎖した遺伝子マーカーを意味する。すなわち、等価遺伝子マーカーは、対象アレルと連鎖非平衡性を示す。
【００２１】
「薬理ゲノミクスプロファイリング」とは、疾患または医学的症状（特に、薬剤に対する望ましくない反応）に関連した対象者に存在する遺伝的因子の決定を意味する。典型的には、薬理ゲノミクスプロファイリングでは一連の遺伝的因子を決定するが、当該因子は、同じ疾患、医学的症状、または薬剤に対する反応に関連するものであってもよいし、そうでなくてもよい。
【００２２】
本明細書で用いられる場合、医薬化合物とは、薬剤である化合物、または、薬剤における少なくとも１つの水素がハロ、ヒドロキシル、アシルアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、アリールオキシアリール、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アリール、置換アリールオキシ、置換アリールオキシアリール、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、または置換ヘテロサイクリックの基で置換されたこと以外は薬剤と同一である化合物を意味する。上記化学基は、以下に定義される。置換基は、０〜１０個、０〜６個、０〜４個、または０〜２個の炭素原子を含みうる。
【００２３】
本明細書で用いられる場合、「アルキル」とは、１〜１０個の炭素原子または１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。「置換アルキル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキルカルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホンチオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンからなる群から選択される１〜５個の置換基を有する、好ましくは１〜１０個の炭素原子のアルキル基；慣用の保護基で保護されたアミノ基を有する置換アルキル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリック、または−ＳＯ２−-ＮＲＲで置換されたアルキル基／置換アルキル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。
【００２４】
「アルコキシ」とは、「アルキル−Ｏ−」基を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキソキシ、１，２−ジメチルブトキシなどが挙げられる。「置換アルコキシ」とは、「置換アルキル−Ｏ−」基を意味する。
【００２５】
「アシル」とは、Ｈ−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、アルキニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、アリール−Ｃ（Ｏ）−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）−、および置換ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）−の基を意味し、ここで、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００２６】
「アシルアミノ」とは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ基を意味し、ここでＲはそれぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択され、Ｒはそれぞれ、窒素原子とともにヘテロ環または置換ヘテロ環を形成してもよい。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００２７】
「アシルオキシ」とは、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルキニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、および置換ヘテロサイクリック−Ｃ（Ｏ）Ｏ−の基を意味する。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００２８】
「アルケニル」とは、好ましくは２〜１０個、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個のアルケニル不飽和部位を有する、アルケニル基を意味する。「置換アルケニル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキルカルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホンチオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンからなる群から選択される１〜５個の置換基を有するアルケニル基；慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護されたアミノ基を有する置換アルケニル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリック、または−ＳＯ２−-ＮＲＲで置換されたアルケニル基／置換アルケニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。
【００２９】
「アルキニル」とは、好ましくは２〜１０個、より好ましくは３〜６個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１〜２個のアルキニル不飽和部位を有する、アルキニル基を意味する。「置換アルキニル」とは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキルカルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホンチオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンからなる群から選択される１〜５個の置換基を有するアルキニル基；慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護されたアミノ基を有する置換アルキニル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリック、または−ＳＯ２−-ＮＲＲで置換されたアルキニル基／置換アルキニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。
【００３０】
「アミノアシル」とは、−ＮＲＣ（Ｏ）アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）置換アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）置換シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−置換アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−置換アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）−アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）置換アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）置換ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）ヘテロサイクリック、および−ＮＲＣ（Ｏ）置換ヘテロサイクリックの基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００３１】
「アミノカルボニルオキシ」とは、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アルケニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ-アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アルキニル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルキル、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換アリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−ヘテロサイクリック、および−-ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロサイクリックの基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味する。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００３２】
「オキシカルボニルアミノ」とは、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アルキル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アルキル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アルケニル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アルケニル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アルキニル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アルキニル −ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−シクロアルキル、−-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換シクロアルキル、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−アリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換アリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−ヘテロアリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−ヘテロサイクリック、および−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ−置換ヘテロサイクリックの基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）を意味し、Ｒはそれぞれ、窒素原子とともにヘテロ環または置換ヘテロ環を形成してもよい。なお、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、および置換ヘテロサイクリックは、本明細書で定義される。
【００３３】
「アリール」または「Ａｒ」とは、単環（例えば、フェニル）または縮合した複数の環（例えば、ナフチルもしくはアントリル）を有する、６〜１４個の炭素原子の不飽和芳香族炭素環基を意味する。なお、縮合した環は芳香族（例えば、２−ベンズオキサゾリノン、２Ｈ−１，４−ベンズオキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イルなど）であってもなくてもよい。好ましいアリールとしては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。
【００３４】
置換アリールとは、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル-置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、カルボキシルアミド、シアノ、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＳＯ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換アリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−-Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−-ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ-置換 ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−-ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二-置換アミン、慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護された置換アリール上のアミノ基、並びに−ＳＯ２ＮＲＲ（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたアリール基を意味する。
【００３５】
「置換アリールオキシアリール」とは、一方または双方のアリール環上が、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシルシクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル置換ヘテロサイクリック、カルボキシルアミド、シアノ、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換アリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−-ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二-置換アミン、慣用の保護基で保護され、−ＳＯ２ＮＲＲで置換された置換アリール上のアミノ基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたアリールオキシアリール基を意味する。
【００３６】
「シクロアルキル」とは、単環を有する３〜８個の炭素原子の環状のアルキル基を意味し、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが挙げられる。アダマンタニルのような複数環のアルキル基はこの定義から除かれる。「シクロアルケニル」とは、１以上の不飽和結合を有するが芳香族ではない、３〜８個の炭素原子の環状のアルケニル基を意味する。
【００３７】
「置換シクロアルキル」および「置換シクロアルケニル」とは、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル置換アルキル、カルボキシル-シクロアルキル、カルボキシル置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル-置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−-ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ、アルキル、置換 アルキル、 アリール、 置換 アリール、 ヘテロアリール、置換 ヘテロアリール、 ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミン、慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護されたアミノ基を有する置換アルキニル基、並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリックまたは−ＳＯ２ＮＲＲで置換されたアルキニル基／置換アルキニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜５個の置換基を有する、好ましくは３〜８個の炭素原子のシクロアルキル基およびシクロアルケニル基を意味する。
【００３８】
「シクロアルコキシ」とは、−Ｏ−シクロアルキル基を意味する。「置換シクロアルコキシ」とは、−Ｏ−置換シクロアルキル基を意味する。
【００３９】
「ハロ」とは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味し、好ましくはクロロまたはブロモのいずれかを意味する。
【００４０】
「ヘテロアリール」とは、２〜１０個の炭素原子、並びに、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される１〜４個の環内のヘテロ原子の芳香族炭素環基を意味する。かようなヘテロアリール基は、単環（例えば、ピリジルもしくはフリル）または縮合した複数の環（例えば、インドリジニルもしくはベンゾチエニル）を有しうる。好ましいヘテロアリール基としては、ピリジル、ピロリル、インドリルおよびフリルが挙げられる。
【００４１】
「置換ヘテロアリール」とは、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル-置換アルキル、カルボキシル-シクロアルキル、カルボキシル-置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル-置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル-置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル-置換ヘテロサイクリック、カルボキシルアミド、シアノ、チオl、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−置換シクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２−アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−置換アルケニル、−Ｓ（Ｏ）２−アリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換アリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−Ｓ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−Ｓ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリックアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリック、慣用の保護基（例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、ホルミルなど）で保護された置換アリール上のアミノ基、および−ＳＯ２ＮＲＲからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミン（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたヘテロアリール基を意味する。
【００４２】
「ヘテロアリールオキシ」とは、−Ｏ−ヘテロアリール基を意味し、「置換ヘテロアリールオキシ」とは、−Ｏ−置換ヘテロアリールを意味する。
【００４３】
「ヘテロ環」または「ヘテロサイクリック」とは、１〜１０個の炭素原子と、窒素、硫黄または酸素からなる群から選択される１〜４個の環内のヘテロ原子とを含み、単環または縮合した複数の環を有する、飽和または不飽和の基を意味する。縮合環系においては、１以上の環がアリールまたはヘテロアリールでありうる。
【００４４】
「置換ヘテロサイクリック」とは、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、アリールオキシアリール、置換アリールオキシアリール、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル−置換アルキル、カルボキシル−シクロアルキル、カルボキシル−置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル−置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル−置換ヘテロアリール、カルボキシルヘテロサイクリック、カルボキシル-置換ヘテロサイクリック、シクロアルキル、置換シクロアルキル、グアニジノ、グアニジノスルホン、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオヘテロサイクリック、置換チオヘテロサイクリック、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリック、置換ヘテロサイクリック、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロサイクリルオキシ、置換ヘテロサイクリルオキシ、オキシカルボニルアミノ、オキシチオカルボニルアミノ、−ＯＳ（Ｏ）２−アルキル、−-ＯＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＯＳ（Ｏ）２−アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＯＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＯＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＯＳＯ２−ＮＲＲ、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロアリール、−-ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−置換ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−アルキル、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換アリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−-ＮＲ−置換ヘテロアリール、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−ヘテロサイクリック、−ＮＲＳ（Ｏ）２−ＮＲ−置換ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−（置換アリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−（置換ヘテロアリール）アミノ、モノ−およびジ−ヘテロサイクリック、モノ−およびジ−（置換ヘテロサイクリック）アミノ；アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロサイクリックおよび置換ヘテロサイクリックからなる群から選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミン；慣用の保護基で保護されたアミノ基を有する置換アルキニル基；並びに、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アルケニル、−ＳＯ２−置換アルケニル、−ＳＯ２−シクロアルキル、−ＳＯ２−置換シクロアルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−置換アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、−ＳＯ２−置換ヘテロアリール、−ＳＯ２−ヘテロサイクリック、−ＳＯ２−置換ヘテロサイクリックまたは−ＳＯ２ＮＲＲで置換されたアルキニル基／置換アルキニル基（ここで、Ｒは水素またはアルキルである）からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されたヘテロ環基を意味する。
【００４５】
ヘテロ環およびヘテロアリールの例としては、以下に限定されないが、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。
【００４６】
「ヘテロサイクリルオキシ」とは、−Ｏ−ヘテロサイクリック基を意味し、「置換ヘテロサイクリルオキシ」とは、−Ｏ−置換ヘテロサイクリックを意味する。
【００４７】
本発明の１または２以上の実施形態の詳細を以下に記載する。本発明の他の特徴、目的、および利点は、詳細な説明および図面、並びに特許請求の範囲から明らかである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４８】
ある証拠によれば、いくつかの類似の多臓器ＡＤＲの発症には、ＭＨＣ分子に直接結合するか内因性タンパク質に結合する薬剤またはその代謝物の制限されたＭＨＣ提示と、Ｔ細胞の活性化が関わっていることが示唆されている（Ｓｖｅｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｒｅｖ．， ５３（３）：３５７−３７９， ２０００）。ＳＪＳ／ＴＥＮといった水泡性反応では、皮膚浸潤性のＣＤ８＋細胞毒性Ｔ細胞が支配的であることが判明している（Ｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｅｘｐ． Ａｌｌｅｒｇｙ， ３１（９）：１３９８−１４０８， ２００１）。これに対し、斑点状丘疹といった軽度の皮膚のＡＤＲの特徴は、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞である（Ｐｉｃｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ． Ａｒｃｈ． Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １１３（１−３）：１７７−１８０， １９９７）。
【００４９】
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１は、ＣＢＺにより誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮ、アロプリノールにより誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮ／ＨＳＳ、およびＣＢＺにより誘発される軽度の皮膚のＡＤＲ（例えば、斑点状丘疹、多形性紅斑、蕁麻疹、または固定薬疹）に、それぞれ関連していることが判明している。よって、これらのＨＬＡ−Ｂアレルは、患者が、ＣＢＺ化合物、アロプリノール化合物、または類似の構造を有する他の薬剤により誘発されるＡＤＲを引き起こすリスクがあるか否かを決定するのに有用な遺伝子マーカーである。
【００５０】
ＣＢＺ（テグレトール、テゴール、Ｇ−３２８８３、ビストン、カレプシン、カルバトロール、エピトール、フィンレプシン、シルタール、スタゼピン、テレスミン、またはチモニールとしても知られている）は、芳香族抗けいれん薬である。フェニトイン（ディランチン）およびフェノバルビタールなどの他の芳香族抗けいれん薬は、ＣＢＺに類似のＡＤＲを引き起こす。したがって、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２は、これらの他の芳香族抗けいれん薬に対するＡＤＲについてのリスクを評価するのにも同様に用いられうる。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２がリスクファクターとして用いられうる芳香族抗けいれん薬としては、ＣＢＺ、フェニトインまたはフェノバルビタールの化合物または代謝物も含まれる。これらの薬剤の代謝物は、本技術分野において公知であり（例えば、Ｇｅｎｎｉｓ ｅｔ ａｌ．， １９９１； Ｌｅｅｄｅｒ， Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ， ３９ Ｓｕｐｐｌ． ７：Ｓ８−１６， １９９８； Ｎａｉｓｂｉｔｔ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ６３（３）：７３２−７４１， ２００３を参照）、例えば、ＣＢＺ−１０，１１エポキシド、ＣＢＺ−１０，１１−ジオール、ＣＢＺ−２，３−ジオール、ジヒドロＣＢＺ、ＣＢＺカテコール、およびＣＢＺｏ−キノン、ｐ−ヒドロキシフェニトイン、フェニトインジヒドロジオール、フェニトインカテコール、フェニトインメチルカテコール、およびフェニトインｏ−キノンが挙げられる。
【００５１】
アロプリノールは、高尿酸血症および慢性痛風のための薬剤である。
【００５２】
本発明は、患者における特定のＨＬＡアレルまたはその等価遺伝子マーカーの存在に基づいて、患者がＡＤＲ（特に、ＳＪＳ、ＴＥＮ、またはＨＳＳ）を引き起こすリスクがあるか否かを予測する方法を提供する。
【００５３】
一例では、患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の存在は、当該患者が、ＣＢＺ化合物、ＣＢＺに構造的に類似した化合物、またはこれらの代謝物により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮを引き起こすリスクがあることを示す。表Ｉは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２キャリアにおいてＳＪＳ／ＴＥＮを誘発しうる化合物の例を示す。
【００５４】
【表１】
【００５５】
他の例では、患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在は、当該患者が、アロプリノール化合物、アロプリノールに構造的に類似した化合物、またはこれらの代謝物により誘発されるＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳを引き起こすリスクがあることを示す。表ＩＩは、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有する患者においてＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳを誘発しうる化合物の例を示す。
【００５６】
【表２】
【００５７】
さらに他の例では、患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊４６０１の存在は、当該患者が、ＣＢＺにより誘発される軽度の皮膚のＡＤＲ（例えば、斑点状丘疹）を引き起こすリスクがあることを示す。
【００５８】
他のＨＬＡ−Ｂもまた、皮膚のＡＤＲの素因となりうる。例えば、強直性脊椎炎は、Ｂ＊２７０１−Ｂ＊２７２３などのＨＬＡ−Ｂ２７アレルと強く関連している（Ｋｈａｎ， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．， １２（４）：２３５−２３８， ２０００； Ｆｅｌｔｋａｍｐ ｅｔ ａｌ．， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．， １３（４）：２８５−２９０， ２００１）。
【００５９】
遺伝的マーカー（例えば、ＨＬＡアレル）の存在は、当該マーカーの直接的な検出、または当該マーカー内の特定の領域の直接的な検出により決定されうる。アレル検出用のゲノムＤＮＡは、本技術分野において周知の手法（例えば、ミネソタ州のジェントラ システムズ（Ｇｅｄｔｒａ Ｓｙｓｔｅｍｓ）からのピュアジーン（ＰＵＲＥＧＥＮＥ）ＤＮＡ精製システム）により、患者から調製されうる。対象となる遺伝的マーカー内の領域の検出では、当該領域内のセンス鎖またはアンチセンス鎖のいずれかに位置するヌクレオチドを調べる。例えば、配列特異的オリゴヌクレオチド−ハイブリダイゼーション、リアルタイムＰＣＲ、またはＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡ（Ｍ． Ｈｉｒａｔｓｕｋａ ｅｔ ａｌ， Ｊ． ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃ． Ｍｅｔｈｏｄｓ， ６７：８７−９４， ２００６）などの本技術分野において公知の手法が、特定の領域を検出するのに用いられうる。
【００６０】
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の存在は、図１に示す領域１〜領域６の少なくとも２つを検出することにより決定されうる。これらの領域の存在は、これらの領域内の特定の位置（例えば、領域１の１位および３位、領域２の１位および６位、並びに領域３の１位および３位）のヌクレオチドを検出することにより決定されうる。領域１〜領域６のうちの任意の２つの存在により、当該患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２のキャリアであることが示される。
【００６１】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在は、図２に示す領域１〜領域６の少なくとも２つを検出することにより決定されうる。これらの領域の存在は、これらの領域内の特定の位置（例えば、領域１の１位、２位および５位、領域２の１位、４位、６位、７位、８位、１５位、１６位、および２０位、領域３の２位、４位、５位、８位、および９位、領域４の３位、および５位、領域５の１位、および９位、並びに、領域６の３位、および１０位）のヌクレオチドを検出することにより決定されうる。領域１〜領域６のうちの任意の２つの存在により、当該患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１のキャリアであることが示される。
【００６２】
ＰＣＲにより得られたＤＮＡ産物は、配列特異的プローブ（例えば、タックマン、ビーコンズ、スコーピオンズ（ＴａｑＭａｎ，Ｂｅａｃｏｎｓ，Ｓｃｏｒｐｉｏｎｓ）からの加水分解プローブ）またはハイブリダイゼーションプローブを用いて検出されうる。これらのプローブは、対象となる領域（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６）に結合するように設計される。当該ＰＣＲ産物はまた、ＤＮＡ結合剤（例えば、ＳＹＢＲ（登録商標）グリーン）によっても検出されうる。
【００６３】
対象アレルの存在はまた、当該アレルと等価な遺伝的マーカーを検出することにより決定されうる。対象アレルに近い遺伝的マーカーは、当該アレルと一緒に分離しているか、または当該アレルと連鎖非平衡性を示す。したがって、これらのマーカー（等価遺伝的マーカー）の存在は、対象アレルの存在の指標となり、そしてこれがＡＤＲの発生に対するリスクの指標となるのである。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２に等価な遺伝的マーカーの例としては、ＤＲＢ１＊１２０２、Ｃｗ＊０８０１、Ｃｗ＊０８０６、Ａ＊１１０１、およびＭＩＣＡ＊０１９が挙げられる。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１に等価な遺伝的マーカーの例としては、Ａ＊３３０３、Ｃｗ＊０３０２、ＤＲＢ１＊０３０１、およびＭＩＣＡ＊００２０１が挙げられる。
【００６４】
等価遺伝的マーカーは、例えば、ＨＬＡアレル、マイクロサテライトマーカー、または一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーなどの任意の種類でありうる。有用な等価遺伝的マーカーは通常、対象アレルから約２００ｋｂ（例えば、１００ｋｂ、８０ｋｂ、６０ｋｂ、４０ｋｂ、または２０ｋｂ）以内である。上述の手法または本技術分野において公知の手法が、等価遺伝的マーカーの存在または不存在を検出するのに用いられうる。
【００６５】
上記に代えて、またはこれに加えて、対象アレルのＲＮＡ産物、ｃＤＮＡ産物またはタンパク質産物を検出して、当該アレルの存在または不存在を決定してもよい。例えば、血清タイピング法または微量細胞毒性による手法が、ＨＬＡアレルのタンパク質産物を決定するのに用いられうる。
【００６６】
リスク予測の正確さをさらに増大させるべく、対象アレルおよび／またはその等価遺伝的マーカーを、抗原提示細胞とＴ細胞との間の相互作用に関与するアクセサリー分子および共刺激分子の遺伝的マーカーと一緒に決定してもよい。これらの遺伝的マーカーとしては、マイクロサテライトマーカーおよび一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーが挙げられる。上記アクセサリー分子および共刺激分子としては、細胞表面分子（例えば、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ２８、ＣＤ４、ＣＤ８、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、ＩＣＡＭ−１、ＣＤ１１ａ、ＣＤ５８、ＣＤ２など）および炎症性サイトカインまたは前炎症性サイトカイン、ケモカイン（例えば、ＴＮＦ−α）、並びにメディエータ（例えば、補体、アポトーシスタンパク質、酵素、細胞外マトリックス成分など）が挙げられる。薬剤の生物学的活性化または非毒化に関与する薬剤代謝酵素の遺伝的マーカーもまた、対象となる。これらの遺伝的マーカーには、マイクロサテライトマーカーおよびＳＮＰマーカーも含まれる。薬剤代謝酵素には、Ｉ相酵素（例えば、チトクロームＰ４５０スーパーファミリーなど）およびＩＩ相酵素（例えば、ミクロソームエポキシドヒドロラーゼ、アリールアミンＮ−アセチルトランスフェラーゼ、ＵＤＰ−グルクロノシルトランスフェラーゼなど）が含まれる。
【００６７】
本発明はさらに、薬理ゲノミクスプロファイリングのための方法を提供する。所定の個体に対して、それぞれがＡＤＲなどの疾患または臨床症状に対する素因と関連している一連の遺伝的因子が決定される。この方法では、遺伝的因子のパネルは、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、およびＨＬＡ−Ｂ＊４６０１からなる群から選択される少なくとも１つのアレルを含む。このパネルは、当該群からの２つのアレルまたは３つのすべてのアレルを含みうる。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、５８０１および／または４６０１に加えて、当該パネルは、チオプリンメチルトランスフェラーゼ、およびＱＴ延長症候群の遺伝子などの他の任意の公知の遺伝的因子を含みうる。上述したアクセサリー分子、共刺激因子、および／または薬剤代謝酵素の遺伝的マーカーもまた含まれうる。
【００６８】
遺伝的マーカー（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）を検出するためのプローブを含有するキットもまた、本発明の範囲に含まれる。本明細書で用いられる「プローブ」との語は、他の物質を検出するのに有用な任意の物質を意味する。よって、プローブは、対象アレル内の特定の領域に特異的にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドまたは共役オリゴヌクレオチドでありうる。共役オリゴヌクレオチドとは、受容体分子（例えば、抗原に特異的な抗体）に高度に特異的なリガンド（当該抗原）を含むクロモフォアまたは分子に共有結合したオリゴヌクレオチドを意味する。当該プローブはまた、他のプライマーとともに対象アレル内の特定の領域を増幅するためのＰＣＲプライマーであってもよい。さらに、当該プローブは、対象アレルまたは当該アレルのタンパク質産物を認識する抗体であってもよい。場合によっては、上記キットは内部制御アレルを標的とするプローブを含有してもよく、当該内部制御アレルは、ＧＡＰＤＨ、β−アクチン、ＫＩＲなどの一般的な集団にみられる任意のアレルでありうる。内部制御アレルの検出は、当該キットの性能を保証するために設計される。
【００６９】
上記キットはさらに、患者から生物学的サンプルを回収するための器具および／または試薬、並びに、当該サンプルからゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＲＮＡ、またはタンパク質を調製するための器具および／または試薬を含みうる。例えば、ゲノムＤＮＡの関係する領域を増幅するためのＰＣＲプライマーが含まれてもよい。当該キットはまた、薬理ゲノミクスプロファイリングに有用な遺伝的因子（例えば、チオプリンメチルトランスフェラーゼ）に対するプローブを含有しうる。
【００７０】
一例では、当該キットは、それぞれＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６から、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６から選択される領域を検出するための第１プローブおよび第２プローブを含有する。当該第１プローブおよび第２プローブは、異なる領域を標的とする。これらの２つのプローブは、１対のＰＣＲプライマー、またはハイブリダイゼーションアッセイに有用なラベル化オリゴヌクレオチドでありうる。場合によっては、当該キットは、内部制御アレルを検出するための第３プローブを含みうる。当該キットはまた、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１内の追加の領域を検出するための追加のプローブを含んでもよい。
【００７１】
さらに他の形態において、本発明は、ＡＤＲ（例えば、ＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳ）に関連したＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１、またはＨＬＡ−Ｂ＊４６０１）を有する患者においてＡＤＲを誘発する医薬化合物を同定する方法を提供する。薬剤は特定のＨＬＡ複合体により提示されてＴリンパ球を活性化し、その結果としてＡＤＲを誘発することが示唆されている。これらの薬剤に反応性のＴ細胞は、これらの薬剤により誘発されるＡＤＲの発生に関与していることが示唆される。よって、これらのＴ細胞を活性化しうる化合物は、これらのＡＤＲに関連した１または２以上のＨＬＡアレルを有する患者においてＡＤＲを誘発する候補である。その結果、この方法は、かようなＡＤＲを誘発しうる医薬化合物を発見するための新規薬剤の開発におけるスクリーニング方法として用いられうる。
【００７２】
ＡＤＲ患者が、当該疾患に関連したＨＬＡアレルを有するか否かを決定するには、当該患者のジェノタイピングが行なわれうる。Ｔリンパ球および抗原提示細胞（例えば、Ｂ細胞または単球）が患者から単離され、本技術分野において周知の方法に従ってインビトロで培養されうる（Ｎａｉｓｂｉｔｔ ＤＪ， Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ２００３ Ｍａｒ；６３（３）：７３２−４１ ， Ｗｕ ｅｔ ａｌ， Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２００６ Ｊｕｌ；１１８（１）：２３３−４１． Ｅ−ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎ ２００６ Ａｐｒ ２７）。こうして単離されたＢ細胞は、エプスタイン・バーウイルスによって形質転換されてＢ細胞系を生成しうる。薬剤に反応性のＴ細胞は、薬剤および自己の抗原提示細胞の双方の存在下で展開されうる。次いで、展開されたＴ細胞を、自己の抗原提示細胞の存在下で試験化合物に曝露し、当該試験化合物が当該Ｔ細胞を活性化しうるか否かを決定する。そうであれば、当該試験化合物は、同一のＨＬＡアレルを有する患者においてＡＤＲを誘発しうる候補である。
【００７３】
さらなる詳細を必要とすることなく、上述の記載によって本発明は十分に実施可能であると考えられる。以下の実施例はしたがって、単なる例示のためのものであって、残りの開示をいかようにも限定するものではないと解されるべきである。本明細書に引用されたすべての文献は、その全体が参照により本明細書に引用される。
【実施例】
【００７４】
実施例１．リアルタイムＰＣＲを用いたＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の検出
ゲノムＤＮＡを、患者の血液または唾液から抽出した。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１および領域５、領域１および領域４、または領域１、領域３および領域４をそれぞれ標的とする３対のＰＣＲプライマー（図１を参照）を合成した。また、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域２および領域４を標的とする１対のプライマー（図２を参照）を合成した。ＳＹＢＲ（登録商標）グリーン リアルタイムＰＣＲシステム（アプライド バイオシステム）を用いて、上記標的領域を増幅し、検出した。簡単に言えば、上記プライマー、上記ゲノムＤＮＡ、およびパワーＳＹＢＲ（登録商標）グリーンＰＣＲマスターミクスチャ（上記リアルタイムＰＣＲシステムに付属）を混合し、（ｉ）９５℃にて１０分間ポリメラーゼを活性化させ、（ｉｉ）９５℃にて１５秒間変性させ、７１℃にて１分間ＤＮＡ鎖をアニーリング／伸長させ、（ｉｉｉ）変性／アニーリング／伸長を４０サイクル行ない、（ｉｖ）９５℃にて１５秒間、および６０℃にて１分間、増幅産物をそのテンプレートから解離させることにより、ＰＣＲを行なった。キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）のＰＣＲ増幅を内部コントロールとして用いた。患者におけるＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在または不存在は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１のＣｔ値、および、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２／ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１とＫＩＲとの間のＣｔ値の差（ΔＣｔ値）に基づいて決定した。Ｃｔ値（閾値サイクル）は、レポーターダイの発光強度がバックグラウンドノイズを上回るサイクル数を同定することにより決定した。当該閾値サイクルは、反応の最も指数関数的な相で決定し、従来のＰＣＲ法により用いられる蓄積ＰＣＲ産物の最終時点での測定よりも信頼性が高い。当該閾値サイクルは、標的テンプレートのコピー数に逆比例し、テンプレート数が多くなるほど、測定される閾値サイクルは小さくなる。
【００７５】
ヒトＢ細胞系から抽出した１７０個のゲノムＤＮＡサンプル、およびヒト血液またはヒト唾液から調製した３５個のゲノムＤＮＡサンプルについて、上述の方法に従って、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の存在を検出する目的で試験を行なった。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＫＩＲのＣｔ値は、それぞれ２３〜２７および１９〜２５の範囲であった。ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２とＫＩＲとの間のΔＣｔの範囲が７未満であるときに、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２は陽性であるとした。これらの１７０個のスーパーコントロール中、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するｇＤＮＡは１５個存在していたが、これをダイナル（Ｄｙｎａｌ）ＳＳＯキットにより確認した結果、この方法の感度および特異性はともに９９％を超えていることが示された。
【００７６】
ヒトＢ細胞系から抽出した１７０個のゲノムＤＮＡサンプル、およびヒト血液またはヒト唾液から調製した８７個のゲノムＤＮＡサンプルについて、上述の方法に従って、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在を検出する目的で試験を行なった。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１陽性の患者由来のＤＮＡサンプルについて、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１およびＫＩＲのＣｔ値は、それぞれ２２〜２８および１０〜２６の範囲であった。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１とＫＩＲとの間のΔＣｔの範囲が７未満であるときに、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は陽性であるとした。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１陰性の患者由来のＤＮＡサンプルについて、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１のＣｔ値は約３４であり、ΔＣｔは１３超であった。全てのサンプル中、５１個のｇＤＮＡがＨＬＡ−Ｂ＊５８０１陽性であることが判明し、これをダイナルＳＳＯキットにより確認した。その結果、感度および特異性はともに９９％を超えていることが示された。
【００７７】
実施例２．ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡを用いたＨＬＡ−Ｂ＊１５０２およびＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の検出
ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡを行なう手法を図３に概説する。
【００７８】
一般に、ゲノムＤＮＡをテンプレートとして用いてＰＣＲを行なうと、図１または図２に示す特異領域を含む産物が産生する。フォワードプライマーまたはリバースプライマーのいずれかをリガンドＩ（ＬＩ）でラベル化した。なお、当該リガンドＩは、酵素（例えば、ＨＲＰ）に連結された分子Ｉ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉ）により認識されうる。ＰＣＲ反応は、１以上の特異領域（すなわち、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６、またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６）を含む産物が産生するように設計して行なった。２つの競合配列特異的オリゴヌクレオチド（ＣＳＳＯ１およびＣＳＳＯ２）を設計した。ＣＳＳＯ１はＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜領域６またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜領域６の１つを特異的に認識し、ＣＳＳＯ２はＨＬＡ−Ｂ＊１５の一般的なタイプ（すなわち、非Ｂ＊１５０２アレルまたは非Ｂ＊５８０１）にプライミングするように設計した。ＣＳＳＯ１についてはリガンド２でラベル化した。なお、当該リガンド２は、反応プレートまたはストリップ上にコーティングされた分子ＩＩ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ＩＩ）により認識されうる。このようにして得られたＰＣＲ産物を、反応プレートまたは反応ストリップ上の２つのＣＳＳＯとハイブリダイズした。遊離分子を洗浄したのち、反応プレートに酵素の基質を添加した。色の存在により信号化された酵素反応は、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の存在の指標である。
【００７９】
実施例３．ＣＢＺ誘導性ＳＪＳ／ＴＥＮとＨＬＡ−Ｂ＊１５０２との相関
この研究のために、長庚記念病院（Ｃｈａｎｇ Ｇｕｎｇ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ）または台湾中の他のいくつかの医療機関のいずれかから、合計で２３８名のＡＤＲ患者（モンゴロイドまたはその子孫）を集めた。この患者について、用量および期間などの薬歴、並びにＡＤＲの表現型を記録した。臨床形態の診断基準は、Ｒｏｕｊｅａｕ， Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ．， １０２（６）：２８Ｓ−３０Ｓ， １９９４に従って定義した。例えば、ＳＪＳは体表面積の１０％未満の皮膚剥離として定義し、重複ＳＪＳ−ＴＥＮは１０〜３０％の皮膚剥離として定義し、ＴＥＮは３０％超のものとして定義した。ＳＪＳ、重複ＳＪＳ−ＴＥＮ、およびＴＥＮをまとめてＳＪＳ／ＴＥＮと称する。
【００８０】
それぞれの患者について、関与が疑われる薬剤を停止し、患者の症状を観察した。薬剤を止めても改善しない皮膚のＡＤＲを発症した患者は除外した。
【００８１】
上述の判断基準によれば、１１２名の患者がＳＪＳ／ＴＥＮであると診断され、１２６名の患者が種々の薬剤に対するより緩和な過敏性を示した。１１２名のＳＪＳ／ＴＥＮ患者のうち、４２名がＣＢＺ（テグレトール）に曝露され、１７名がアロプリノールを摂取しており、５３名がＣＢＺおよびアロプリノール以外の薬剤による治療を受けていた。
【００８２】
テグレトールに耐性を示す７３名の患者をコントロールとして含めた。台湾人の一般的な集団からのボランティア（ｎ＝９４；年齢範囲：２０〜８０歳）を集めた。この研究は施設内治験審査委員会の承認を受けており、インフォームドコンセントを得た。
【００８３】
これらの患者全員について、ジェノタイピングを行なった。簡単に言えば、配列特異的オリゴヌクレオチド（ＳＳＯ）を用いたリバースラインブロットアッセイを行なうための試薬をダイナル バイオテック リミテッド（ＤＹＮＡＬ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｌｔｄ．）（ブロムボロ、イギリス）より購入した。ＨＬＡのクラスＩまたはクラスＩＩの遺伝子座の第２エクソンおよび第３エクソンのためのビオチン化プライマーを用いてＰＣＲ産物を得、次いでナイロン膜上に固定化したプローブのＳＳＯのラインブロットにハイブリダイズさせた。特異的プローブに結合したビオチン化ＰＣＲ産物の存在を、ストレプトアビジン−西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）および発色性の可溶性基質を用いて検出して、陽性プローブの位置に青い「ライン」を生成させた。このプローブ反応性のパターンを、ジェノタイピングソフトウェアであるダイナルＲＥＬＩ（商標）ＳＳＯ（ダイナル バイオテック リミテッド；ブロムボロ、イギリス）により解読した。潜在的な曖昧さについては、ＩＨＷＧ技術マニュアル（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ）に従った、配列に基づいたタイピングおよびＤＮＡシーケンシングによりさらに解消した。Ｇｅｎｏｍｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ ＭＨＣ ＤＮＡＢａｓｅｄ Ｔｙｐｉｎｇ ｆｏｒ ＨＬＡ Ａｌｌｅｌｅｓ ａｎｄ Ｌｉｎｋｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ． Ｍａｒｃｅｌ Ｇ．Ｊ． Ｔｉｌａｎｕｓ， Ｅｄｉｔｏｒ ｉｎ Ｃｈｉｅｆ， ＩＳＢＮ Ｎｏ． ０−９４５２７８−０２−０を参照のこと。
【００８４】
一部の患者については、高スループットＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法を用いてＳＮＰジェノタイピングを行なった。簡単に言えば、スペクトロデザイナー（ＳｐｅｃｔｒｏＤＥＩＳＧＮＥＲ）ソフトウェア（シーケノム、サン ディエゴ、カリフォルニア州、アメリカ合衆国）を用いて、プライマーおよびプローブを設計した。多重ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行ない、エビアルカリフォスファターゼ（ホフマン−ラ ロシュ、バーゼル、スイス）を用いて取り込まれなかったｄＮＴＰを脱リン酸化し、次いでプライマー伸長を行なった。精製したプライマー伸長の反応物を３８４素子のシリコンチップ（スペクトロチップ（ＳｐｅｃｔｒｏＣＨＩＰ、シーケノム））にスポットし、ブルーカー バイフレックス（Ｂｒｕｋｅｒ Ｂｉｆｌｅｘ） ＩＩＩ ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ スペクトロリーダー（ＳｐｅｃｔｒｏＲＥＡＤＥＲ）質量分析装置（シーケノム）を用いて分析し、スペクトロタイパー（ＳｐｅｃｔｒｏＴＹＰＥＲ）（シーケノム）を用いてスペクトルを加工した。
【００８５】
異なる群のアレル頻度を、２×２の表を作製することによるイェーツ補正を伴うχ二乗法により比較した。生のＰ値に、遺伝子座内での存在が観察されたＨＬＡアレルの数を積算することにより、複数のＨＬＡアレルの比較のためにＰ値を補正した（Ｐｃ）。ゼロカウントの可能性を調整するために全セルに０．５を加算するというハルデン修飾を用いて、オッズ比を算出した。
【００８６】
表１に示すように、ＨＬＡ−Ｂの遺伝子座におけるＤＮＡ変異体（ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２）は、患者において、特にＣＢＺ（テグレトール）を服用していた患者において、薬剤誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮに関連していた。
【００８７】
【表３】
【００８８】
ＣＢＺを服用していた４２名のＳＪＳ／ＴＥＮ患者のうち、４２名（１００％）においてＨＬＡ−Ｂ＊１５０２が検出された。当該アレルはまた、他の薬剤を服用していた５３名のＳＪＳ／ＴＥＮ患者のうち、１７名（３２％）において見られた（フェニトイン８名、アロプリノール２名、アモキシシリン２名、スルファサラジン１名、ケトプロフェン１名、イブプロフェン１名、および不明の薬剤２名）。特に、フェニトインの服用後にＳＪＳ／ＴＥＮを発症した１７名の患者のうち８名（４７．０５％）が、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２アレルを有していた。これに対し、当該アレルが見られたのは、ＣＢＺ耐性群では４．１％（３／７３）、フェニトイン耐性群では０％（０／３２）、ＳＪＳ以外のより緩和なＡＤＲを有する患者では６．３％（９／１４２）、一般的な集団では５．３％（５／９４）のみであった。上記の耐性群をコントロールとして用いることで、ＣＢＺ誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮに関連したＢ＊１５０２のオッズ比、感受性、特異性、陽性的中率および陰性的中率は、それぞれ１７１２、１００％、９５．８９％、９６．０％および１００％であった。陽性的中率および感受性がこのように高いため、当該ＨＬＡ−Ｂアレルのタイピングは、薬剤誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮ、特にＣＢＺまたはフェニトイン誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮに対する高リスク患者の同定に用いられうる。
【００８９】
ＣＢＺにより誘発される緩和なＡＤＲは、他のアレルであるＨＬＡ−Ｂ＊４６０１に関連していることが判明した。これらのＣＢＺに対するより緩和な反応を示した１６名の患者のうち、１０名（６２．５％）がＨＬＡ−Ｂ＊４６０１を有していた。一方、当該アレルは、ＣＢＺ耐性群では２６％（１９／７３）のみに見られた。Ｂ＊４６０１に関連した、ＣＢＺ誘発性のより緩和な皮膚のＡＤＲのオッズ比は４．７３であった。したがって、ＨＬＡ−Ｂ＊４６０１はＣＢＺにより誘発される緩和な皮膚のＡＤＲに対するリスク評価に用いられうる。
【００９０】
【表４−１】
【００９１】
【表４−２】
【００９２】
実施例４．アロプリノール誘発性ＳＪＳ／ＴＥＮとＨＬＡ−Ｂ＊５８０１との相関
アロプリノール誘発性のＳＪＳ／ＴＥＮにはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１が関連していることが判明した。このＨＬＡ−Ｂアレルは、アロプリノールで処置された１７名のＳＪＳ／重篤ＡＤＲ患者のすべて（１００％）で見られたが（表３および表４）、一般的な台湾人の集団では１８％のみに見られた（オッズ比１５５、感受性１００％、特異性８２％、陽性的中率８４．７％、陰性的中率１００％、Ｐｃ＝３．７×１０−９）。これらの結果から、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は、単独でまたは他の遺伝的マーカーと組み合わせて、アロプリノールを服用する患者がＳＪＳ／ＴＥＮを発症するリスクがあるか否かを評価するのに有用な遺伝的マーカーであることが示唆される。
【００９３】
【表５】
【００９４】
【表６】
【００９５】
実施例５．ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１とアロプリノール誘発性ＨＳＳとの相関
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１はまた、アロプリノール誘発性ＨＳＳとも関連していることが判明した。このアロプリノール誘発性ＨＳＳとしては、皮膚疹（例えば、拡散型丘疹、剥脱性皮膚炎）、発熱、好酸球増多症、異型循環リンパ球、白血球増多症、急性肝細胞損傷、または腎機能の悪化が挙げられる（Ａｒｅｌｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．， ２７：３３７， １９９３）。
【００９６】
３１名の患者について調べたが、これらのうち２１名がＳＪＳ、３名がＳＪＳ／ＴＥＮ、１名がＴＥＮ、そして１５名がＨＳＳを発症していた。登録されたすべての場合において、アロプリノール暴露から最初の２月以内にＡＤＲの症状が開始し、かつ、そのＡＤＲの症状が当該薬剤の停止により消失した場合には、アロプリノールを原因薬剤であるとみなした。ただし、以下の条件のいずれかを満たす患者は除外した：アロプリノールへの再暴露後も症状が出ない患者、および、ＨＳＳ、ＳＪＳまたはＴＥＮの判断基準を満たさない、より緩和な皮膚発疹を有する患者。
【００９７】
３１名のすべての患者で、ＨＳＳ症状の開始はアロプリノール暴露後の最初の２月以内であり、２名の患者では、アロプリノールへの再暴露後２日以内に第２の症状が見られた。１２名の患者がアロプリノール以外にも他の薬剤を服用していたが、彼らの薬歴によればこれらの併用薬のみをアロプリノールなしに服用した場合にはＡＤＲは発現しなかったことがわかっている。すべての患者で高尿酸血症および／または痛風性関節炎、並びに、高血圧（１４／３１）、慢性腎臓病（１６／３１）、および糖尿病（９／３１）などの他の慢性疾患が見られた。
【００９８】
アロプリノールを少なくとも６月服用している（平均＝３８月、範囲＝６〜１０７月）がＡＤＲの症状を示さなかった９８名の痛風性関節炎の患者を、アロプリノール耐性コントロールとした。当該耐性群の性分布は、中国人における一般的な痛風の有病率と同程度であった。さらに、９３名の健常人を健常コントロール群とした。これらの３つの群の人口統計学的変数を表５に示す。
【００９９】
【表７】
【０１００】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は、アロプリノール誘発性の重篤なＡＤＲを有する患者の３１名すべてに、アロプリノール耐性の９８名の患者のうち１６名（１６．３％）に（オッズ比３１５、Ｐｃ＜１０−１５）、そして９３名の健常者のうち１９名（２０％）に（オッズ比２４１、Ｐｃ＜１０−１３）、存在していた。アロプリノール耐性群について、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の不存在はアロプリノール誘発性ＡＤＲに対して１００％の陰性的中率を示し、当該アレルの存在は６６％の陽性的中率を示した。したがって、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１は、皮膚のＡＤＲ（例えば、ＳＪＳ／ＴＥＮまたはＨＳＳ）などのアロプリノール誘発性ＡＤＲ、およびアロプリノール誘発性ＤＲＥＳＳ（好酸球増多症および全身症状を伴う薬剤反応）に高い特異性（８４％）および感受性（１００％）を示す有用なマーカーである。
【０１０１】
実施例６．ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２またはＨＬＡ−Ｂ＊５８０１と等価な遺伝的マーカー
対象となるＨＬＡアレルに近い遺伝的マーカーは、当該対象アレルと一緒に分離するか、またはこれと連鎖非平衡性を示す傾向にある。その結果、これらのマーカー（等価遺伝的マーカー）の存在は、当該アレルの存在の指標となる。
【０１０２】
ＡＤＲを示した患者における潜在的な等価遺伝的マーカーの発生率を調べる目的で、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２ハプロタイプにおける種々のマーカーについて、そのＡＤＲとの関連を決定した。実際、ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２ハプロタイプのＨＬＡマーカー（ＤＲＢ１＊１２０２、Ｃｗ＊０８０１、Ｃｗ＊０８０６、Ａ＊１１０１、およびＭＩＣＡ＊０１９など）は、ＣＢＺに曝露されたＳＪＳ／ＴＥＮ患者において有意に高い頻度を示した（表６）。
【０１０３】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１に関連したマーカーについても決定した。ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１についてホモ接合性の４名の患者でアレル分布を分析し、当該アレルの祖先のハプロタイプがＨＬＡ−Ａ＊３３０３、Ｃｗ＊０３０２、Ｂ＊５８０１およびＤＲＢ１＊０３０１を含むものであることを同定した。この祖先のハプロタイプは、３１名のアロプリノールＡＤＲ患者のうち１２名（３８．７％）に存在していた（表７）が、耐性患者では７．１％のみ、健常者では９．７％のみであった。
【０１０４】
【表８】
【０１０５】
【表９】
【０１０６】
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１と関連したＭＨＣマーカーについても、ショートタンデムリピート多型アッセイ（ＳＴＲＰ）を用いて決定した。簡単に言えば、ＭＨＣ領域に位置する高度に多型性の２０個のマイクロサテライトマーカーを、ＮＣＢＩデータベースから選択した（すなわち、Ｄ６Ｓ２５８、Ｄ６Ｓ２９７２、Ｄ６Ｓ５１０、Ｄ６Ｓ２６５、Ｄ６Ｓ３８８、Ｄ６Ｓ２８１４、ＨＬＡＣ＿ＣＡ１、ＨＬＡＢＣ＿ＣＡ２、ＭＩＢ、ＭＩＣＡ、ＴＮＦｄ、ＢＡＴ２＿ＣＡ、Ｄ６Ｓ２７３、Ｄ６Ｓ１６１５、ＤＱＣＡＲ、Ｇ５１１５２、Ｄ６Ｓ２４１４、Ｄ６Ｓ１８６７、Ｄ６Ｓ１５６０、およびＤ６Ｓ１５８３）。これらのマーカーのヘテロ接合性の平均は、２３０ｋｂの推定間隔で０．７２であった。
【０１０７】
データベースに記載のこれらのマーカーの配列に基づき、プライマーを設計した。これらのマーカーを増幅し、患者におけるこれらのマーカーの存在または不存在を検出する目的で、ジーンアンプ（ＧｅｎｅＡｍｐ）９７００サーモサイクラー（アプライド バイオシステムズ、フォスター シティ、カリフォルニア州、アメリカ合衆国）を用いて、（１０ｎｇのゲノムＤＮＡおよび０．３３μＭの各プライマーを含有する５μＬ体積で）ＰＣＲを行なった。
【０１０８】
適当なサイズを有し蛍光シグナルを示す６個以下のＰＣＲ産物をプールし、キャピラリーゲル電気泳動を行なった。内部サイズスタンダードとしてＬＩＺ５００サイズスタンダード（アプライド バイオシステムズ）を用い、ＡＢＩ３７３０ＤＮＡシーケンサー（アプライド バイオシステムズ）の電気泳動により、多型アンプリコンのサイズを決定した。アレルのサイズについては、ジーンマッパー（ＧＥＮＭＡＰＰＥＲ）プログラム バージョン３．０（アプライド バイオシステムズ）を用いて算出した。ＳＡＳプログラムを用いて、アレルの呼び出し・除去（ｃａｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｂｉｎｎｉｎｇ）を行なった。すべてのジェノタイピング実験で、質を担保する目的で３つのＣＥＰＨコントロール個体（１３３１−０１、１３３１−０２、１３４７−２）およびＨ２０を含めた。
【０１０９】
連鎖比平衡性プロットを用いたところ、ＨＬＡ−ＣとＴＮＦｄとの間に位置するアレルブロックがアロプリノール誘発性ＡＤＲ患者群では見られたが、アロプリノール耐性群では見られなかった。当該ブロックにおいて、ＨＬＡ−Ｂアレルに近いハプロタイプ（ＭＩＢ＊３５８−ＭＩＣＡ＊２０６−ＴＮＦｄ＊１４０）が同定された。当該ハプロタイプのＡＤＲとの関連性は、ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の同一ＡＤＲとの関連性と一致している（ｐ＝０．００１８）。ＳＴＲＰマーカーおよびＭＩＣＡアレルのシーケンシングを用いることで、アロプリノール誘発性ＡＤＲ患者全員が同一のＢアレル（Ｂ＊５８０１）、ＭＩＣＡアレル（ＭＩＣＡ＊００２０１）、およびＴＮＦＳＴＲＰマーカー（ＴＮＦｄ＊１４０）を有していることが判明した。１名の患者を除いて、他のすべての患者は同一のＭＩＢマーカー（ＭＩＢ＊３５８）をも有していることが判明した。
【０１１０】
実施例７．ＣＢＺ反応性Ｔ細胞のオキシカルバゼピンおよびリカルバゼピンに対する交差反応性
ＣＢＺ誘発性ＳＪＳ／ＴＥＮを有する２名の患者を、長庚記念病院から集めた。一方の患者はＨＬＡ−Ｂ＊１５０２／Ｂ＊４６０１を有しており、もう１名の患者はＨＬＡ−Ｂ＊１５０２／Ｂ＊５１０１を有していた。ピュアジーン（ＰＵＲＥＧＥＮＥ）ＤＮＡ精製システム（ジェントラ システムズ、ミネソタ州、アメリカ合衆国）を用いて、当該患者からゲノムＤＮＡを抽出した。ＨＬＢ−アレルについては、配列特異的オリゴヌクレオチドリバースラインブロット（ダイナル バイオテック リミテッド、ブロムボロ、イギリス）を用いて確認した。
【０１１１】
フィコール−アイソパーク（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｉｓｏｐａｑｕｅ）（ファルマシア ファイン ケミカルズ、ピスカタウェイ、ニュージャージー州）密度勾配遠心分離により、当該患者から末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離した。当該ＰＢＭＣの一部をエプスタイン・バーウイルスによって形質転換し、自家のＢ細胞系を樹立した。
【０１１２】
ＣＢＺに反応性のＴ細胞を、以下の通り展開した。上記患者から調製したＰＢＭＣを、３７℃の５％ＣＯ２インキュベータ中、１０％熱不活性化ヒト血清、ＩＬ−２（２５Ｕ／ｍＬ）およびＣＢＺ（２５μｇ／ｍＬ）（シグマ）を含有する完全ＲＰＭＩ培地中で、７日間培養した。次いで、ＣＢＺの存在下で１０日間、放射線照射（５０Ｇｙ）した自家Ｂ細胞と共培養することにより、このＴ細胞を展開した。上記共培養の操作を２サイクルした後、ＣＢＺ活性化Ｔ細胞を集め、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ（イーバイオサイエンス（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ））に供した。
【０１１３】
このＣＢＺ反応性Ｔ細胞について、化合物（例えば、ＣＢＺ１０，１１−エポキシド、オキシカルバゼピン（商品名：トリレプタール）、リカルバゼピン、およびスリンダク）に対する交差反応性を調べた。簡単に言えば、Ｔリンパ球（５×１０３細胞）を、試験化合物の存在下または不存在下で、１０％ＦＢＳを含有する２００μＬのＲＰＭＩ培地中で自家Ｂ細胞（５×１０４細胞）と混合した。次いでその細胞を、抗インターフェロンγ抗体（ミリポア）でコートしたＥＬＩＳＰＯＴプレートのウェル中で２４時間インキュベートした。インキュベーション後、細胞培養の上清を回収し、本技術分野において公知の抗体介在性の手法を用いて、その中に含まれるインターフェロンγを検出した。
【０１１４】
本研究の結果によれば、ＣＢＺ反応性Ｔ細胞はＣＢＺ１０，１１−エポキシド、オキシカルバゼピン、およびリカルバゼピンには交差反応性であるが、スリンダクに対してはそうではないということが判明した。
【０１１５】
（他の実施形態）
本明細書に開示された全ての特徴は、任意の組み合わせで組み合されうる。本明細書に開示されたそれぞれの特徴は、同一の、等価な、または類似の目的に資する他の特徴により置換されうる。よって、そうでないと明記しない限り、開示されたそれぞれの特徴は、等価な、または類似の上位概念の一連の特徴の例示にすぎない。
【０１１６】
上述の記載から、当業者は、本発明の本質的な特徴を容易に把握することができ、その思想および範囲から逸脱することなく、本発明を種々の用途および条件に適合させる目的で種々の変更および修飾を加えることが可能である。よって、他の実施形態もまた、後述する特許請求の範囲に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１１７】
【図１】ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の特異領域を示す図である。
【図２】ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の特異領域を示す図である。
【図３】ＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡを行なう手法を概説する図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定する方法であって、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定することを含む、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有することが示される。
【請求項２】
前記領域１の検出は、当該領域１における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記領域２の検出は、当該領域２における１位および６位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記領域３の検出は、当該領域３における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第１領域または前記第２領域のいずれかがＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡまたはリアルタイムＰＣＲにより検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定する方法であって、実質的に、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定することからなる、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有することが示される。
【請求項７】
前記領域１の検出は、当該領域１における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記領域２の検出は、当該領域２における１位および６位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記領域３の検出は、当該領域３における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記領域がＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡまたはリアルタイムＰＣＲにより検出される、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定するためのキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
を含む、キット。
【請求項１２】
内部制御アレルを検出するための第３プローブをさらに含む、請求項１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記第１プローブおよび前記第２プローブがオリゴヌクレオチドである、請求項１１に記載のキット。
【請求項１４】
前記オリゴヌクレオチドが１対のプライマーである、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定するための３プローブキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
内部制御アレルを検出するための第３プローブと、
を含む、キット。
【請求項１６】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定する方法であって、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定することを含む、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有することが示される。
【請求項１７】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定する方法であって、実質的に、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定することからなる、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有することが示される。
【請求項１８】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定するためのキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
を含む、キット。
【請求項１９】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定するためのキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
内部制御アレルを検出するための第３プローブと、
を含む、キット。
【請求項２０】
ある化合物が、薬剤により誘発される薬剤副作用（ＡＤＲ）に関連したＨＬＡアレルを有する患者におけるＡＤＲを誘発する候補であるか否かを決定する方法であって、
前記ＡＤＲに関連したＨＬＡアレルを有するＡＤＲ患者からＴ細胞を単離すること、
前記薬剤に対して反応性のＴ細胞を展開すること、
前記患者から抗原提示細胞（ＡＰＣ）を単離すること、
前記ＡＰＣの存在下で、展開された前記Ｔ細胞を化合物と接触させること、および、
前記化合物が、展開された前記Ｔ細胞を活性化するか否かを調べることを含む、方法；
この際、展開された前記Ｔ細胞を活性化する化合物は、ＡＤＲに関連したＨＬＡアレルを有する患者におけるＡＤＲを誘発する候補である。
【請求項１】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定する方法であって、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定することを含む、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有することが示される。
【請求項２】
前記領域１の検出は、当該領域１における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記領域２の検出は、当該領域２における１位および６位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記領域３の検出は、当該領域３における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第１領域または前記第２領域のいずれかがＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡまたはリアルタイムＰＣＲにより検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定する方法であって、実質的に、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定することからなる、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有することが示される。
【請求項７】
前記領域１の検出は、当該領域１における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記領域２の検出は、当該領域２における１位および６位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記領域３の検出は、当該領域３における１位および３位のヌクレオチドを同定することにより行なわれる、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記領域がＣＳＳＯ−ＥＬＩＳＡまたはリアルタイムＰＣＲにより検出される、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定するためのキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
を含む、キット。
【請求項１２】
内部制御アレルを検出するための第３プローブをさらに含む、請求項１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記第１プローブおよび前記第２プローブがオリゴヌクレオチドである、請求項１１に記載のキット。
【請求項１４】
前記オリゴヌクレオチドが１対のプライマーである、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊１５０２を有するか否かを決定するための３プローブキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊１５０２の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
内部制御アレルを検出するための第３プローブと、
を含む、キット。
【請求項１６】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定する方法であって、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定することを含む、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有することが示される。
【請求項１７】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定する方法であって、実質的に、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出すること、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出すること、および、
前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定することからなる、方法；
この際、前記第１領域および前記第２領域の双方が存在すれば、前記患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有することが示される。
【請求項１８】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定するためのキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
を含む、キット。
【請求項１９】
患者がＨＬＡ−Ｂ＊５８０１を有するか否かを決定するためのキットであって、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第１領域を検出するための第１プローブと、
ＨＬＡ−Ｂ＊５８０１の領域１〜６からなる群から選択される第２領域を検出するための第２プローブと、
内部制御アレルを検出するための第３プローブと、
を含む、キット。
【請求項２０】
ある化合物が、薬剤により誘発される薬剤副作用（ＡＤＲ）に関連したＨＬＡアレルを有する患者におけるＡＤＲを誘発する候補であるか否かを決定する方法であって、
前記ＡＤＲに関連したＨＬＡアレルを有するＡＤＲ患者からＴ細胞を単離すること、
前記薬剤に対して反応性のＴ細胞を展開すること、
前記患者から抗原提示細胞（ＡＰＣ）を単離すること、
前記ＡＰＣの存在下で、展開された前記Ｔ細胞を化合物と接触させること、および、
前記化合物が、展開された前記Ｔ細胞を活性化するか否かを調べることを含む、方法；
この際、展開された前記Ｔ細胞を活性化する化合物は、ＡＤＲに関連したＨＬＡアレルを有する患者におけるＡＤＲを誘発する候補である。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公表番号】特表２００９−５３６８２８（Ｐ２００９−５３６８２８Ａ）
【公表日】平成２１年１０月２２日（２００９．１０．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５１０１８３（Ｐ２００９−５１０１８３）
【出願日】平成１９年５月１１日（２００７．５．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０６８７８２
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１３４２３５
【国際公開日】平成１９年１１月２２日（２００７．１１．２２）
【出願人】（５９６１１８４９３）アカデミア シニカ (33)
【氏名又は名称原語表記】ＡＣＡＤＥＭＩＡ ＳＩＮＩＣＡ
【出願人】（５０８３１６３０２）ファーミジーン インコーポレイテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１０月２２日（２００９．１０．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年５月１１日（２００７．５．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０６８７８２
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１３４２３５
【国際公開日】平成１９年１１月２２日（２００７．１１．２２）
【出願人】（５９６１１８４９３）アカデミア シニカ (33)
【氏名又は名称原語表記】ＡＣＡＤＥＭＩＡ ＳＩＮＩＣＡ
【出願人】（５０８３１６３０２）ファーミジーン インコーポレイテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
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