質量分析方法および質量分析装置
【課題】蛋白質の酵素による消化分解物など、複雑で分離の難しい混合物に対しても、含まれている成分毎にマススペクトルを分離して得る。
【解決手段】質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させ、表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択し、選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するものであって、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に高次関数曲線またはガウス関数曲線をフィットさせることによって行なう。
【解決手段】質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させ、表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択し、選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するものであって、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に高次関数曲線またはガウス関数曲線をフィットさせることによって行なう。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物などに代表される、極めて複雑な試料混合物の迅速な定性・定量分析を行なう質量分析装置および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、蛋白質や、蛋白質を酵素で消化分解して得られたペプチドのマススペクトルを、既知の蛋白質のアミノ酸配列情報（分子構造）を格納したデータベース・ライブラリと照合して、蛋白質を同定することが行なわれている。蛋白質を酵素で消化分解して得られるペプチド混合物は、数十種類以上のペプチドを含み、蛋白質を的確に同定するためには、少なくとも数種類のペプチドの精密なマススペクトル情報を得ることが重要とされている。
【０００３】
ペプチド混合物など液体中の各種成分を分離分析するためには、液体クロマトグラフ装置が広く用いられている。この液体クロマトグラフ装置は、ポンプ、インジェクタ、カラム等で構成される試料分離部と、クロマトグラム測定部とより構成され、複数成分から成る混合物試料を試料分離部で各成分へ分離し、その溶出過程を質量分析計で測定し、成分毎に分離されたマススペクトルを得ることが行なわれている。
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−５０９４５号公報
【特許文献２】特開平１−１１８７６３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、既存の液体クロマトグラフ装置では、一度の分析操作で複数の成分を完全に分離することは、極めて困難な場合が多い。特に、蛋白質の酵素による消化分解物など、天然由来の試料を完全に分離するためには、それぞれの試料に合わせて、液体クロマトグラフ装置の分離条件を検討する必要があり、労力と時間を要していた。
【０００６】
また、労力や時間を費やしても、目的成分を分離できない場合も多く、簡便に成分毎のマススペクトルを得ることは、極めて困難であった。
【０００７】
例えば、図１は、牛血清アルブミンをトリプシンで酵素消化して得られたペプチド混合物のマスクロマトグラムの一部を拡大したものである。実線は、トータルイオンクロマトグラム、点線は、ｍ／ｚ＝1479.43におけるクロマトグラム、一点鎖線は、ｍ／ｚ＝966.474におけるクロマトグラムである。
【０００８】
同図より明らかなように、36.65minのピークは、少なくとも異なる２つの成分が共に溶出しており、ピークのほとんどの領域において、それぞれの純粋なスペクトルが得られるほど、分離した領域は存在しない。
【０００９】
このような場合、従来技術では、それぞれ成分毎に個別のマススペクトルを得るためには、
（１）分離条件を再検討して分離する。
（２）ＭＳ／ＭＳを使用する。
のいずれかの方法が行なわれてきた。
【００１０】
しかしながら、分離条件の再検討には、多くの時間、労力、および、熟練を必要とし、かつ、蛋白質分解物のような複雑な混合物の場合には、一度のクロマトグラフィですべてを分離することはできないのが通例である。
【００１１】
また、ＭＳ／ＭＳを用いる方法は、クロマトグラフィ分離の後、質量分析計を用いて目的物質を選択的に分離した上で、マススペクトルを取得することから、迅速に前記の問題を解決することが可能であるが、ＭＳ／ＭＳ装置は一般に高価であり、かつ、操作が複雑でもあるため、簡便で安価な方法が求められてきた。
【００１２】
本発明の目的は、上述した点に鑑み、蛋白質の酵素による消化分解物など、複雑で分離の難しい混合物に対しても、含まれている成分毎にマススペクトルを分離して得られる質量分析方法および質量分析装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
この目的を達成するため、本発明にかかる質量分析方法は、
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させ、表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択し、選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するようにしたことを特徴としている。
【００１４】
また、前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴としている。
【００１５】
また、前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴としている。
【００１６】
また、前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴としている。
【００１７】
また、前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴としている。
【００１８】
また、クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データを記憶装置に記憶させ、その記憶されたマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
検出されたすべてのマスクロマトグラムを格納した記憶領域の中から、所定のピーク強度を有するマスピークのマスクロマトグラムとクロマトグラムの波形が一致するマスピーク群を一括してグルーピングする操作を繰り返すことにより、分子イオンピークとそのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルを分離再構成するようにしたことを特徴としている。
【００１９】
また、前記所定のピーク強度を有するマスピークは、まだグルーピングされていないマスピーク群の中で最大のピーク強度を有するマスピークであることを特徴としている。
【００２０】
また、前記クロマトグラムの波形の一致不一致は、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の比較により見分けることを特徴としている。
【００２１】
また、前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴としている。
【００２２】
また、前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴としている。
【００２３】
また、前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴としている。
【００２４】
また、前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴としている。
【００２５】
また、本発明にかかる質量分析装置は、
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析装置において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させる表示手段と、
表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択する選択手段と、
選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成する再構成手段と
を備えたことを特徴としている。
【００２６】
また、前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴としている。
【００２７】
また、前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴としている。
【００２８】
また、前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴としている。
【００２９】
また、前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴としている。
【００３０】
また、マルチファンクションで測定された質量分析装置条件の異なる複数のマスクロマトグラム間で請求項１または６記載の質量分析方法を適用することにより、分子イオンピークと、そのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルとを再構成するようにしたことを特徴としている。
【発明の効果】
【００３１】
本発明の質量分析方法および質量分析装置によれば、
クロマトグラフにより混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物のスペクトルを格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析装置および質量分析方法において、
取得された複数のマスピーク毎のマスクロマトグラムの中から、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致するマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するものであって、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に高次関数曲線またはガウス関数曲線をフィットさせることによって行なうので、
蛋白質の酵素による消化分解物など、複雑で分離の難しい混合物に対しても、含まれている成分毎にマススペクトルを分離して得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
以下、図面を参照して、本発明の実施の形態を説明する。
【実施例１】
【００３３】
図２は、本発明にかかる質量分析装置および方法の一実施例である。図２には、本発明に用いられる液体クロマトグラフ質量分析計の要部構成が示されている。
【００３４】
図２において、分離カラム１の流入端１ａには、複数成分を含有する試料液が供給され、流出端１ｂからは、成分毎に分離された分離液が流出する。そして、流出端１ｂの下流には、質量分析計２が備えられている。
【００３５】
質量分析計２から得られるスペクトルは、データ処理装置３で解析される。データ処理装置３は、記憶部４と、ピーク選択部５と、出力部６を備えている。記憶部４は、ハードディスクなどから成り、質量分析計２から送られてくる各タイミングでのスペクトルデータの記憶を行なう。ピーク選択部５は、マスクロマトグラムを表示する表示装置と、マスピークを選択するマウスなどの入力装置とから成り、複数の質量数の異なるマスピークの選択を可能にしている。
【００３６】
データ処理部３の動作について、図３に基づきながら説明する。まず、データ処理部３は、トータル・イオン・クロマトグラムの中から、オペレータによって選択された所定のピークトップＴの近傍を表示する。図３（ａ）は、そのようすを示したものである。ここには、成分Ａと成分Ｂとが、重なって溶出しているものとする。
【００３７】
次に、ピークトップＴを中心にして、オペレータが指定した所定の時間範囲Δｔの積算スペクトル（Ｓ）を表示する。図３（ｂ）は、そのようすを示したものである。
【００３８】
次に、オペレータは、マススペクトル（Ｓ）上の着目する任意の質量数（Ａ）を選択する。データがマルチファンクション（１回のクロマトグラフィ分析において、複数の異なるイオン化電圧の測定条件を高速に切り替えて、異なるイオン化電圧で並行してマススペクトルを取得すること）で測定されている場合は、経験的に最もフラグメンテーションを起こさない条件で測定されたマスクロマトグラムでの質量数（Ａ）（例えば、ｍ／ｚ＝1479.84）のマスピークを指定する。
【００３９】
さて、データ処理部３は、選択されたマスピーク（Ａ）について、以下の処理を実施する。まず、処理対象のマスピーク（Ａ）について、そのマスピークが描くマスクロマトグラムのピーク中心Ｔ’から、例えば前後約１０σ（ここで、σは、マスクロマトグラムのピーク中心から、ピークの時間方向への拡がりを、標準偏差として表わした値を意味する）の時間範囲のマスクロマトグラムをデータ記憶部４から読み出す。図３（ｃ）は、そのようすを示したものである。
【００４０】
次に、マスピーク（Ａ）について作成された、マスクロマトグラムの溶出曲線のキャラクタリゼーションを行なう。得られたクロマトグラム波形に対しては、２次関数などの高次関数曲線、もしくはガウス関数曲線による曲線の当てはめを行ない、このカーブ・フィッティング法によって、そのマスピークの元となっている溶出成分の、分離カラムからの溶出開始時間ｔ1、最大溶出時間ｔ2、溶出終了時間ｔ3の値を、高い精度で推定し、ピークの幅（例えば、４σの幅）を計算させる。
【００４１】
次に、積算スペクトル（Ｓ）上のそれぞれの質量数に対応する各マスピーク（例えば、マスピーク（Ｂ））の分離カラムからの溶出開始時間ｔ4、最大溶出時間ｔ5、溶出終了時間ｔ6の値を、マスクロマトグラムを用いた同様の方法で求め、オペレータが指定した質量数（Ａ）のマスクロマトグラムの溶出開始時間ｔ1、最大溶出時間ｔ2、溶出終了時間ｔ3の値との比較を行ない、あらかじめ設定されたしきい値を超えない、許容範囲内の値を与えるマスピークの質量数のみを、一時的に記憶させる。
【００４２】
これにより、溶出曲線のパターンが同じマスピークのみを選び出すことができる。マスピーク（Ｂ）の場合は、溶出曲線のパターンが異なるので、記憶されない。図３（ｄ）は、そのようすを示したものである。
【００４３】
最後に、図４（ａ）に示す積算スペクトル（Ｓ）中のマスピークから、前記データ処理操作によって一時的に記憶している質量数に一致するマスピーク以外のマスピークを除外すれば、オペレータが選択した質量数（Ａ）に対応する物質の純粋なマススペクトルを得ることができる。結果は、出力部６から出力させる。
【００４４】
このような方法で、ｍ／ｚ＝1479.84のマスピークが描くマスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値に着目して分離されたスペクトルが図４（ｂ）、同じく、ｍ／ｚ＝1172.58のマスピークが描くマスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値に着目して分離されたスペクトルが図４（ｃ）である。
【００４５】
データが、マルチファンクションで測定されている場合は、格納されている他のイオン化電圧のデータについても、同様に処理し、最初に出力した積算スペクトル（Ｓ）に対応する他のイオン化電圧のマススペクトル（フラグメンテーションを起こしたマススペクトル）から、マスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値が一致するマスピークを抽出し、結果を出力部６から出力させる。
【実施例２】
【００４６】
以下は、本発明にかかる質量分析装置および方法の別の実施例である。液体クロマトグラフ質量分析装置の要部構成は、実施例１の図２と同じである。
【００４７】
本実施例では、まず、データ処理部３は、オペレータによって選択された、トータル・イオン・クロマトグラムの所定ピークの、例えば３σもしくは４σの時間幅に相当する時間範囲の積算スペクトル（Ｓ）を作成し、一時的に記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）に格納する。
【００４８】
次に、データ処理部３は、選択されたトータル・イオン・クロマトグラム・ピークの、例えば前後１０σの時間範囲について、積算スペクトル（Ｓ）上のすべてのマスピークに対応するマスクロマトグラムを内部的に生成させ、マスクロマトグラム・ピークの検出を行なう。
【００４９】
次に、検出されたすべてのマスクロマトグラム・ピークの波形について、２次関数などの高次関数曲線、もしくはガウス関数曲線による曲線の当てはめを行ない、このカーブ・フィッティング法によって、クロマトグラム・ピーク幅に、例えば４σ幅を仮定したときの最大溶出時間、溶出開始時間、および、溶出終了時間を、高い精度で推定する。
【００５０】
次に、得られたすべてのマスピークを、ピーク強度の強い順に整列させ、最も強度の強いマスピーク（Ｐ１）の溶出曲線のパターンと同じパターンの溶出曲線を持つマスピーク群を、最大溶出時間、溶出開始時間、および、溶出終了時間の値を参照することによって抽出し、それらを記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）から削除すると共に、抽出された結果を、第２の記憶領域（Ｍ１）に格納する。
【００５１】
次に、記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）に保持している残りのマスピークの中から、最も強度の強いピーク（Ｐ２）の溶出曲線のパターンと同じパターンの溶出曲線を持つマスピーク群を、最大溶出時間、溶出開始時間、および、溶出終了時間の値を参照することによって抽出し、それらを記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）から削除すると共に、抽出された結果を、第３の記憶領域（Ｍ２）に格納する。
【００５２】
このような処理を、記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）が空になるまで繰り返し、（Ｍ１）、（Ｍ２）、……、（Ｍｎ）を得る。
【００５３】
最初に得られた積算スペクトル（Ｓ）から、第２の記憶領域（Ｍ１）に格納されているピークの質量数と一致するマスピークのみを抽出し、これをスペクトル（Ｓ１）とする。同様にして、記憶領域（Ｍ２）、……、（Ｍｎ）に格納されているピークの質量数と一致するマスピークのみを抽出し、これをスペクトル（Ｓ２）、……、（Ｓｎ）とする。
【００５４】
得られたスペクトル（Ｓ１）、（Ｓ２）、……、（Ｓｎ）を、混合物スペクトル（Ｓ）から成分毎に単離されたマススペクトルとして、出力部６より出力させる。
【００５５】
尚、データがマルチファンクションで測定されている場合は、最初に出力した積算スペクトル（Ｓ）に対応する他のイオン化電圧のマススペクトル（フラグメンテーションを起こしたマススペクトル）についても同様に処理し、格納されているデータからマスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値が一致するマスピークを抽出し、抽出された結果から、分子イオンピークと、そのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルとを再構成して、出力部６から出力させる。
【００５６】
尚、上記実施例２では、第１の記憶領域に格納されているマスピークを削除すると同時に、削除されたマスピークを一括して第２の記憶領域に格納するように説明したが、これは、あくまで見かけ上の話であり、必ずしも第１の記憶領域から第２の記憶領域へマスピークを実際に移動させることを意味するものではない。マスクロマトグラムとして同じ特徴を有するマスピークに共通の標識を付けて、それらを他のマスピークから識別できるようにグルーピングすることをも含むことは言うまでもない。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
クロマトグラフ質量分析装置に、広く利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】牛血清アルブミンをトリプシンで酵素消化して得られたペプチド混合物のマスクロマトグラムの一例である。
【図２】本発明にかかる液体クロマトグラフ質量分析計の一実施例を示す図である。
【図３】本発明にかかる質量分析方法の一実施例を示す図である。
【図４】本発明にかかる質量分析方法により得られたマススペクトルの一例を示す図である。
【符号の説明】
【００５９】
１：分離カラム、２：質量分析計、３：データ処理部、４：記憶部、５：ピーク選択部、６：出力部
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物などに代表される、極めて複雑な試料混合物の迅速な定性・定量分析を行なう質量分析装置および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、蛋白質や、蛋白質を酵素で消化分解して得られたペプチドのマススペクトルを、既知の蛋白質のアミノ酸配列情報（分子構造）を格納したデータベース・ライブラリと照合して、蛋白質を同定することが行なわれている。蛋白質を酵素で消化分解して得られるペプチド混合物は、数十種類以上のペプチドを含み、蛋白質を的確に同定するためには、少なくとも数種類のペプチドの精密なマススペクトル情報を得ることが重要とされている。
【０００３】
ペプチド混合物など液体中の各種成分を分離分析するためには、液体クロマトグラフ装置が広く用いられている。この液体クロマトグラフ装置は、ポンプ、インジェクタ、カラム等で構成される試料分離部と、クロマトグラム測定部とより構成され、複数成分から成る混合物試料を試料分離部で各成分へ分離し、その溶出過程を質量分析計で測定し、成分毎に分離されたマススペクトルを得ることが行なわれている。
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−５０９４５号公報
【特許文献２】特開平１−１１８７６３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、既存の液体クロマトグラフ装置では、一度の分析操作で複数の成分を完全に分離することは、極めて困難な場合が多い。特に、蛋白質の酵素による消化分解物など、天然由来の試料を完全に分離するためには、それぞれの試料に合わせて、液体クロマトグラフ装置の分離条件を検討する必要があり、労力と時間を要していた。
【０００６】
また、労力や時間を費やしても、目的成分を分離できない場合も多く、簡便に成分毎のマススペクトルを得ることは、極めて困難であった。
【０００７】
例えば、図１は、牛血清アルブミンをトリプシンで酵素消化して得られたペプチド混合物のマスクロマトグラムの一部を拡大したものである。実線は、トータルイオンクロマトグラム、点線は、ｍ／ｚ＝1479.43におけるクロマトグラム、一点鎖線は、ｍ／ｚ＝966.474におけるクロマトグラムである。
【０００８】
同図より明らかなように、36.65minのピークは、少なくとも異なる２つの成分が共に溶出しており、ピークのほとんどの領域において、それぞれの純粋なスペクトルが得られるほど、分離した領域は存在しない。
【０００９】
このような場合、従来技術では、それぞれ成分毎に個別のマススペクトルを得るためには、
（１）分離条件を再検討して分離する。
（２）ＭＳ／ＭＳを使用する。
のいずれかの方法が行なわれてきた。
【００１０】
しかしながら、分離条件の再検討には、多くの時間、労力、および、熟練を必要とし、かつ、蛋白質分解物のような複雑な混合物の場合には、一度のクロマトグラフィですべてを分離することはできないのが通例である。
【００１１】
また、ＭＳ／ＭＳを用いる方法は、クロマトグラフィ分離の後、質量分析計を用いて目的物質を選択的に分離した上で、マススペクトルを取得することから、迅速に前記の問題を解決することが可能であるが、ＭＳ／ＭＳ装置は一般に高価であり、かつ、操作が複雑でもあるため、簡便で安価な方法が求められてきた。
【００１２】
本発明の目的は、上述した点に鑑み、蛋白質の酵素による消化分解物など、複雑で分離の難しい混合物に対しても、含まれている成分毎にマススペクトルを分離して得られる質量分析方法および質量分析装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
この目的を達成するため、本発明にかかる質量分析方法は、
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させ、表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択し、選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するようにしたことを特徴としている。
【００１４】
また、前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴としている。
【００１５】
また、前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴としている。
【００１６】
また、前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴としている。
【００１７】
また、前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴としている。
【００１８】
また、クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データを記憶装置に記憶させ、その記憶されたマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
検出されたすべてのマスクロマトグラムを格納した記憶領域の中から、所定のピーク強度を有するマスピークのマスクロマトグラムとクロマトグラムの波形が一致するマスピーク群を一括してグルーピングする操作を繰り返すことにより、分子イオンピークとそのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルを分離再構成するようにしたことを特徴としている。
【００１９】
また、前記所定のピーク強度を有するマスピークは、まだグルーピングされていないマスピーク群の中で最大のピーク強度を有するマスピークであることを特徴としている。
【００２０】
また、前記クロマトグラムの波形の一致不一致は、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の比較により見分けることを特徴としている。
【００２１】
また、前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴としている。
【００２２】
また、前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴としている。
【００２３】
また、前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴としている。
【００２４】
また、前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴としている。
【００２５】
また、本発明にかかる質量分析装置は、
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析装置において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させる表示手段と、
表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択する選択手段と、
選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成する再構成手段と
を備えたことを特徴としている。
【００２６】
また、前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴としている。
【００２７】
また、前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴としている。
【００２８】
また、前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴としている。
【００２９】
また、前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴としている。
【００３０】
また、マルチファンクションで測定された質量分析装置条件の異なる複数のマスクロマトグラム間で請求項１または６記載の質量分析方法を適用することにより、分子イオンピークと、そのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルとを再構成するようにしたことを特徴としている。
【発明の効果】
【００３１】
本発明の質量分析方法および質量分析装置によれば、
クロマトグラフにより混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物のスペクトルを格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析装置および質量分析方法において、
取得された複数のマスピーク毎のマスクロマトグラムの中から、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致するマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するものであって、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に高次関数曲線またはガウス関数曲線をフィットさせることによって行なうので、
蛋白質の酵素による消化分解物など、複雑で分離の難しい混合物に対しても、含まれている成分毎にマススペクトルを分離して得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
以下、図面を参照して、本発明の実施の形態を説明する。
【実施例１】
【００３３】
図２は、本発明にかかる質量分析装置および方法の一実施例である。図２には、本発明に用いられる液体クロマトグラフ質量分析計の要部構成が示されている。
【００３４】
図２において、分離カラム１の流入端１ａには、複数成分を含有する試料液が供給され、流出端１ｂからは、成分毎に分離された分離液が流出する。そして、流出端１ｂの下流には、質量分析計２が備えられている。
【００３５】
質量分析計２から得られるスペクトルは、データ処理装置３で解析される。データ処理装置３は、記憶部４と、ピーク選択部５と、出力部６を備えている。記憶部４は、ハードディスクなどから成り、質量分析計２から送られてくる各タイミングでのスペクトルデータの記憶を行なう。ピーク選択部５は、マスクロマトグラムを表示する表示装置と、マスピークを選択するマウスなどの入力装置とから成り、複数の質量数の異なるマスピークの選択を可能にしている。
【００３６】
データ処理部３の動作について、図３に基づきながら説明する。まず、データ処理部３は、トータル・イオン・クロマトグラムの中から、オペレータによって選択された所定のピークトップＴの近傍を表示する。図３（ａ）は、そのようすを示したものである。ここには、成分Ａと成分Ｂとが、重なって溶出しているものとする。
【００３７】
次に、ピークトップＴを中心にして、オペレータが指定した所定の時間範囲Δｔの積算スペクトル（Ｓ）を表示する。図３（ｂ）は、そのようすを示したものである。
【００３８】
次に、オペレータは、マススペクトル（Ｓ）上の着目する任意の質量数（Ａ）を選択する。データがマルチファンクション（１回のクロマトグラフィ分析において、複数の異なるイオン化電圧の測定条件を高速に切り替えて、異なるイオン化電圧で並行してマススペクトルを取得すること）で測定されている場合は、経験的に最もフラグメンテーションを起こさない条件で測定されたマスクロマトグラムでの質量数（Ａ）（例えば、ｍ／ｚ＝1479.84）のマスピークを指定する。
【００３９】
さて、データ処理部３は、選択されたマスピーク（Ａ）について、以下の処理を実施する。まず、処理対象のマスピーク（Ａ）について、そのマスピークが描くマスクロマトグラムのピーク中心Ｔ’から、例えば前後約１０σ（ここで、σは、マスクロマトグラムのピーク中心から、ピークの時間方向への拡がりを、標準偏差として表わした値を意味する）の時間範囲のマスクロマトグラムをデータ記憶部４から読み出す。図３（ｃ）は、そのようすを示したものである。
【００４０】
次に、マスピーク（Ａ）について作成された、マスクロマトグラムの溶出曲線のキャラクタリゼーションを行なう。得られたクロマトグラム波形に対しては、２次関数などの高次関数曲線、もしくはガウス関数曲線による曲線の当てはめを行ない、このカーブ・フィッティング法によって、そのマスピークの元となっている溶出成分の、分離カラムからの溶出開始時間ｔ1、最大溶出時間ｔ2、溶出終了時間ｔ3の値を、高い精度で推定し、ピークの幅（例えば、４σの幅）を計算させる。
【００４１】
次に、積算スペクトル（Ｓ）上のそれぞれの質量数に対応する各マスピーク（例えば、マスピーク（Ｂ））の分離カラムからの溶出開始時間ｔ4、最大溶出時間ｔ5、溶出終了時間ｔ6の値を、マスクロマトグラムを用いた同様の方法で求め、オペレータが指定した質量数（Ａ）のマスクロマトグラムの溶出開始時間ｔ1、最大溶出時間ｔ2、溶出終了時間ｔ3の値との比較を行ない、あらかじめ設定されたしきい値を超えない、許容範囲内の値を与えるマスピークの質量数のみを、一時的に記憶させる。
【００４２】
これにより、溶出曲線のパターンが同じマスピークのみを選び出すことができる。マスピーク（Ｂ）の場合は、溶出曲線のパターンが異なるので、記憶されない。図３（ｄ）は、そのようすを示したものである。
【００４３】
最後に、図４（ａ）に示す積算スペクトル（Ｓ）中のマスピークから、前記データ処理操作によって一時的に記憶している質量数に一致するマスピーク以外のマスピークを除外すれば、オペレータが選択した質量数（Ａ）に対応する物質の純粋なマススペクトルを得ることができる。結果は、出力部６から出力させる。
【００４４】
このような方法で、ｍ／ｚ＝1479.84のマスピークが描くマスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値に着目して分離されたスペクトルが図４（ｂ）、同じく、ｍ／ｚ＝1172.58のマスピークが描くマスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値に着目して分離されたスペクトルが図４（ｃ）である。
【００４５】
データが、マルチファンクションで測定されている場合は、格納されている他のイオン化電圧のデータについても、同様に処理し、最初に出力した積算スペクトル（Ｓ）に対応する他のイオン化電圧のマススペクトル（フラグメンテーションを起こしたマススペクトル）から、マスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値が一致するマスピークを抽出し、結果を出力部６から出力させる。
【実施例２】
【００４６】
以下は、本発明にかかる質量分析装置および方法の別の実施例である。液体クロマトグラフ質量分析装置の要部構成は、実施例１の図２と同じである。
【００４７】
本実施例では、まず、データ処理部３は、オペレータによって選択された、トータル・イオン・クロマトグラムの所定ピークの、例えば３σもしくは４σの時間幅に相当する時間範囲の積算スペクトル（Ｓ）を作成し、一時的に記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）に格納する。
【００４８】
次に、データ処理部３は、選択されたトータル・イオン・クロマトグラム・ピークの、例えば前後１０σの時間範囲について、積算スペクトル（Ｓ）上のすべてのマスピークに対応するマスクロマトグラムを内部的に生成させ、マスクロマトグラム・ピークの検出を行なう。
【００４９】
次に、検出されたすべてのマスクロマトグラム・ピークの波形について、２次関数などの高次関数曲線、もしくはガウス関数曲線による曲線の当てはめを行ない、このカーブ・フィッティング法によって、クロマトグラム・ピーク幅に、例えば４σ幅を仮定したときの最大溶出時間、溶出開始時間、および、溶出終了時間を、高い精度で推定する。
【００５０】
次に、得られたすべてのマスピークを、ピーク強度の強い順に整列させ、最も強度の強いマスピーク（Ｐ１）の溶出曲線のパターンと同じパターンの溶出曲線を持つマスピーク群を、最大溶出時間、溶出開始時間、および、溶出終了時間の値を参照することによって抽出し、それらを記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）から削除すると共に、抽出された結果を、第２の記憶領域（Ｍ１）に格納する。
【００５１】
次に、記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）に保持している残りのマスピークの中から、最も強度の強いピーク（Ｐ２）の溶出曲線のパターンと同じパターンの溶出曲線を持つマスピーク群を、最大溶出時間、溶出開始時間、および、溶出終了時間の値を参照することによって抽出し、それらを記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）から削除すると共に、抽出された結果を、第３の記憶領域（Ｍ２）に格納する。
【００５２】
このような処理を、記憶部４の第１の記憶領域（Ｍ）が空になるまで繰り返し、（Ｍ１）、（Ｍ２）、……、（Ｍｎ）を得る。
【００５３】
最初に得られた積算スペクトル（Ｓ）から、第２の記憶領域（Ｍ１）に格納されているピークの質量数と一致するマスピークのみを抽出し、これをスペクトル（Ｓ１）とする。同様にして、記憶領域（Ｍ２）、……、（Ｍｎ）に格納されているピークの質量数と一致するマスピークのみを抽出し、これをスペクトル（Ｓ２）、……、（Ｓｎ）とする。
【００５４】
得られたスペクトル（Ｓ１）、（Ｓ２）、……、（Ｓｎ）を、混合物スペクトル（Ｓ）から成分毎に単離されたマススペクトルとして、出力部６より出力させる。
【００５５】
尚、データがマルチファンクションで測定されている場合は、最初に出力した積算スペクトル（Ｓ）に対応する他のイオン化電圧のマススペクトル（フラグメンテーションを起こしたマススペクトル）についても同様に処理し、格納されているデータからマスクロマトグラムの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の値が一致するマスピークを抽出し、抽出された結果から、分子イオンピークと、そのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルとを再構成して、出力部６から出力させる。
【００５６】
尚、上記実施例２では、第１の記憶領域に格納されているマスピークを削除すると同時に、削除されたマスピークを一括して第２の記憶領域に格納するように説明したが、これは、あくまで見かけ上の話であり、必ずしも第１の記憶領域から第２の記憶領域へマスピークを実際に移動させることを意味するものではない。マスクロマトグラムとして同じ特徴を有するマスピークに共通の標識を付けて、それらを他のマスピークから識別できるようにグルーピングすることをも含むことは言うまでもない。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
クロマトグラフ質量分析装置に、広く利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】牛血清アルブミンをトリプシンで酵素消化して得られたペプチド混合物のマスクロマトグラムの一例である。
【図２】本発明にかかる液体クロマトグラフ質量分析計の一実施例を示す図である。
【図３】本発明にかかる質量分析方法の一実施例を示す図である。
【図４】本発明にかかる質量分析方法により得られたマススペクトルの一例を示す図である。
【符号の説明】
【００５９】
１：分離カラム、２：質量分析計、３：データ処理部、４：記憶部、５：ピーク選択部、６：出力部
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させ、表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択し、選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するようにしたことを特徴とする質量分析方法。
【請求項２】
前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴とする請求項１記載の質量分析方法。
【請求項３】
前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴とする請求項２記載の質量分析方法。
【請求項４】
前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴とする請求項１ないし３のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項５】
前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴とする請求項１ないし４のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項６】
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データを記憶装置に記憶させ、その記憶されたマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
検出されたすべてのマスクロマトグラムを格納した記憶領域の中から、所定のピーク強度を有するマスピークのマスクロマトグラムとクロマトグラムの波形が一致するマスピーク群を一括してグルーピングする操作を繰り返すことにより、分子イオンピークとそのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルを分離再構成するようにしたことを特徴とする質量分析方法。
【請求項７】
前記所定のピーク強度を有するマスピークは、まだグルーピングされていないマスピーク群の中で最大のピーク強度を有するマスピークであることを特徴とする請求項６記載の質量分析方法。
【請求項８】
前記クロマトグラムの波形の一致不一致は、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の比較により見分けることを特徴とする請求項６または７記載の質量分析方法。
【請求項９】
前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴とする請求項８記載の質量分析方法。
【請求項１０】
前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴とする請求項９記載の質量分析方法。
【請求項１１】
前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴とする請求項６ないし１０のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項１２】
前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴とする請求項６ないし１１のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項１３】
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析装置において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させる表示手段と、
表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択する選択手段と、
選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成する再構成手段と
を備えたことを特徴とする質量分析装置。
【請求項１４】
前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴とする請求項１３記載の質量分析装置。
【請求項１５】
前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴とする請求項１４記載の質量分析装置。
【請求項１６】
前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴とする請求項１３ないし１５のいずれか１項に記載の質量分析装置。
【請求項１７】
前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴とする請求項１３ないし１６のいずれか１項に記載の質量分析装置。
【請求項１８】
マルチファンクションで測定された質量分析装置条件の異なる複数のマスクロマトグラム間で請求項１または６記載の質量分析方法を適用することにより、分子イオンピークと、そのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルとを再構成するようにしたことを特徴とする質量分析装置。
【請求項１】
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させ、表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択し、選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成するようにしたことを特徴とする質量分析方法。
【請求項２】
前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴とする請求項１記載の質量分析方法。
【請求項３】
前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴とする請求項２記載の質量分析方法。
【請求項４】
前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴とする請求項１ないし３のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項５】
前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴とする請求項１ないし４のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項６】
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データを記憶装置に記憶させ、その記憶されたマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析方法において、
検出されたすべてのマスクロマトグラムを格納した記憶領域の中から、所定のピーク強度を有するマスピークのマスクロマトグラムとクロマトグラムの波形が一致するマスピーク群を一括してグルーピングする操作を繰り返すことにより、分子イオンピークとそのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルを分離再構成するようにしたことを特徴とする質量分析方法。
【請求項７】
前記所定のピーク強度を有するマスピークは、まだグルーピングされていないマスピーク群の中で最大のピーク強度を有するマスピークであることを特徴とする請求項６記載の質量分析方法。
【請求項８】
前記クロマトグラムの波形の一致不一致は、クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の比較により見分けることを特徴とする請求項６または７記載の質量分析方法。
【請求項９】
前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴とする請求項８記載の質量分析方法。
【請求項１０】
前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴とする請求項９記載の質量分析方法。
【請求項１１】
前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴とする請求項６ないし１０のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項１２】
前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴とする請求項６ないし１１のいずれか１項に記載の質量分析方法。
【請求項１３】
クロマトグラフ装置により混合物を分離し、イオン化して質量分析計の測定データを取得し、取得された所定期間の測定データのマスクロマトグラムに基づいてスペクトルを抽出し、既知の化合物の分子構造情報を格納したライブラリを検索して、化合物の定性分析または定量分析を行なう質量分析装置において、
質量分析計により取得されたトータル・イオン・クロマトグラムの中から、所望のピークトップ近傍の積算マススペクトルを表示させる表示手段と、
表示された積算マススペクトルの中から所望のマスピークを選択する選択手段と、
選択されたマスピークのマスクロマトグラムと溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間が一致する他のマスクロマトグラムを抽出し、マスピークとして選び出すことにより、単一成分のマススペクトルを再構成する再構成手段と
を備えたことを特徴とする質量分析装置。
【請求項１４】
前記クロマトグラフ装置からの溶出開始時間、最大溶出時間、溶出終了時間の決定は、マスクロマトグラムの時間的変化に所定の関数曲線をフィットさせることにより行なうことを特徴とする請求項１３記載の質量分析装置。
【請求項１５】
前記所定の関数曲線は、高次関数曲線またはガウス関数曲線であることを特徴とする請求項１４記載の質量分析装置。
【請求項１６】
前記クロマトグラフ装置は、液体クロマトグラフ装置であることを特徴とする請求項１３ないし１５のいずれか１項に記載の質量分析装置。
【請求項１７】
前記混合物は、蛋白質の酵素消化によって得られるペプチド混合物であることを特徴とする請求項１３ないし１６のいずれか１項に記載の質量分析装置。
【請求項１８】
マルチファンクションで測定された質量分析装置条件の異なる複数のマスクロマトグラム間で請求項１または６記載の質量分析方法を適用することにより、分子イオンピークと、そのピークに対応する単一成分のフラグメントスペクトルとを再構成するようにしたことを特徴とする質量分析装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２００６−１８４２７５（Ｐ２００６−１８４２７５Ａ）
【公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−３２５５５７（Ｐ２００５−３２５５５７）
【出願日】平成１７年１１月１０日（２００５．１１．１０）
【出願人】（０００００４２７１）日本電子株式会社 (811)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１１月１０日（２００５．１１．１０）
【出願人】（０００００４２７１）日本電子株式会社 (811)
【Ｆターム（参考）】
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