（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドの結晶形
式（Ｉ）で示される（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドの結晶形が提供される。（３Ｒ，４Ｒ）−４−アミノ−１−［［４−［（３−メトキシフェニル）アミノ］ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−５−イル］メチル］ピペリジン−３−オールの１つまたはそれ以上の結晶形を含む医薬組成物、ならびに癌および他の増殖性疾患の治療において（３Ｒ，４Ｒ）−４−アミノ−１−［［４−［（３−メトキシフェニル）アミノ］ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−５−イル］メチル］ピペリジン−３−オールの１つまたはそれ以上の結晶形を使用する方法もまた提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドのメタンスルホン酸（ＭＳＡ）塩の結晶形に関する。本発明はまた、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドのＭＳＡ塩の結晶形を含む医薬組成物、ならびに癌および他の増殖性疾患の治療において（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドのＭＳＡ塩の結晶形を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、チロシンキナーゼ酵素を阻害する化合物の結晶形、チロシンキナーゼを阻害する化合物を含有する組成物、ならびにチロシンキナーゼ酵素の阻害剤の結晶形を用いて、癌、糖尿病、再狭窄、動脈硬化症、乾癬、アルツハイマー病、血管形成疾患および免疫疾患などのチロシンキナーゼ活性の過剰発現または上方調節によって特徴付けられる疾患を治療する方法に関する。
【０００３】
チロシンキナーゼは、細胞増殖、癌発生、アポトーシスおよび細胞分化を含むいくつかの細胞機能に関するシグナル伝達において重要な役割を果たす。これらの酵素の阻害剤は、これらの酵素に依存する増殖性疾患の治療または予防に有用である。強力な疫学的証拠により、構成的な分裂促進シグナルを生じる受容体タンパク質チロシンキナーゼの過剰発現または活性化が、増殖するヒト悪性腫瘍における重要な因子であることが示唆されている。これらの過程に関連しているチロシンキナーゼとして、Ａｂｌ、ＣＤＫ群、ＥＧＦ、ＥＭＴ、ＦＧＦ、ＦＡＫ、Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−３、ＧＳＫ−３、ＧＳＫベータ−３、ＨＥＲ−２、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、Ｊａｋ２、ＬＣＫ、ＭＥＴ、ＰＤＧＦ、Ｓｒｃ、Ｔｉｅ−２、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＶＥＧＦが挙げられる。よって、チロシンキナーゼ酵素を調節し、または阻害するために用いることができる新規な化合物を研究する必要性が存在する。
【０００４】
（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドは、式Ｉ：
【化１】
（Ｉ）
の構造を有し、本明細書では「化合物Ｉ」と称される。化合物Ｉは、インスリン様増殖因子受容体インヒビター（ＩＧＦ−１Ｒ）であり、それゆえ、抗癌剤として有用である。化合物Ｉおよび前記化合物の合成方法は、現在の譲受人に譲渡され、出典明示によりその全体が本明細書に取り込まれる特許文献１に開示される。
【０００５】
典型的に、医薬組成物の製造において、溶解速度、溶解度、バイオアベイラビリティおよび／または保存安定性などの所望される特性のバランスがとれた活性成分の形態が求められている。例えば、必要な溶解度およびバイオアベイラビリティを有し、さらに、医薬組成物の製造もしくは保存の間に、異なる溶解度および／またはバイオアベイラビリティを有する異なる形態に変換しない十分な安定性を有する活性成分の形態が望まれている。癌のような疾患の治療に適する医薬組成物の製造を可能にする特性および安定性を有する化合物Ｉの１つまたはそれ以上の形態が望まれている。さらに、例えば、製造過程の間に化合物Ｉを単離および／または精製できる化合物Ｉの１つまたはそれ以上の形態が望まれている。
【０００６】
単離された形態のＮ−１およびＮ−２バルク物質（bulk material）のＰＸＲＤパターンは、多くの類似性を示すが、ある特有の低角度ピーク（angle peak）によって容易に区別される。一方の形態がピークを示す場合、もう一方の形態は基準値およびその逆のピークを示す。実際、これらの物質は、主に低い角度で様々なピークの高さと幅のパターンの全範囲を示す。また、化合物の多形混合物のスラリーは、単一形態に変換することが予想される。この場合、当該形態の熱力学的関係の測定中に、両形態を含有するスラリーがより安定な形態にゆっくり変換されることが示された。
【０００７】
単離された形態の広範な試験により、１：１ ＭＳＡ塩のＮ−１およびＮ−２の近接した構造および動力学的関係の可能性のため、相純度は、製剤の有効性にあまり大きく影響することが予想されないことが知見されている。よって、Ｎ−１および／またはＮ−２のＰＸＲＤ特性を有する結晶形が選ばれ、Ｎ−１／Ｎ−２と呼ばれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第７，５３４，７９２号
【発明の概要】
【０００９】
本発明の第１の態様は、形態Ｎ−１を含む、化合物Ｉ：
【化２】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形を提供する。
【００１０】
本発明の第２の態様は、形態Ｎ−２を含む化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形を提供する。
【００１１】
本発明の第３の態様は、形態Ｎ−１および／または形態Ｎ−２のＰＸＲＤ特性を有する結晶形を含む、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形を提供する。
【００１２】
本発明のさらなる態様は、化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−２および／または形態Ｎ−１のうちの１つまたはそれ以上、ならびに医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物を提供する。
【００１３】
本発明の別の態様は、癌の治療を必要とする哺乳類に、治療上有効量の化合物ＩのＭＳＡ塩を投与することを特徴とする癌の治療方法であって、化合物ＩのＭＳＡ塩が、Ｎ−１および／またはＮ−２のＰＸＲＤ特性を有する結晶形である方法を提供する。
【００１４】
特定の形態、例えば、「Ｎ−１」などを特徴付けるために本明細書で用いられる名称は、類似または同一の物理的および化学的特徴を有するその他の物質のいずれかに限定するものと考慮されるべきではなく、むしろ、これらの表記は、本明細書に示される特性評価情報によって解釈されるべき単なる識別であると理解されるべきである。
【００１５】
本発明は、下記に記載の添付した図面によって例示される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の実験（室温）およびシミュレーション（Ｔ＝２５°）上の粉末Ｘ線回折パターン（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）を示す。
【図２】図２は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の実験（室温）、ハイブリッド（室温）およびシミュレーション（Ｔ＝−５０°）上の粉末Ｘ線回折パターン（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）を示す。
【図３】図３は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１／Ｎ−２結晶形で実測された選択パターンのＰＸＲＤを示す。
【図４】図４は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【図５】図５は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【図６】図６は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを示す。
【図７】図７は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを示す。
【図８】図８は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）スペクトルを示す。
【図９】図９は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）スペクトルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書で用いられるように、「多形」は、同じ組成を有するが、結晶を形成する分子および／またはイオンの異なる空間配置を有する結晶形を意味する。
【００１８】
本明細書で用いられるように、「アモルファス」は、結晶ではない分子および／またはイオンの固体形態を意味する。アモルファス固体は、明確な最大値を有するはっきりしたＸ線回折パターンを示さない。
【００１９】
本明細書で用いられるように、「実質的に純粋な」は、結晶形態に関して用いられる場合、当該化合物の重量に基づいて本化合物の９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８および９９重量％を含み、約１００重量％と同等量を含む、９０重量％以上の純度を有する化合物の結晶形の試料を意味する。残りの物質には、化合物のその他の形態、ならびに／あるいは反応不純物および／またはその製造から生じる処理不純物が含まれる。例えば、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形は、出願時点で公知であり、当該技術分野で一般に受け入れられている方法によって測定される場合、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形の９０重量％以上の純度を有する点で実質的に純粋とされ、残りの１０重量％以下の物質には、化合物ＩのＭＳＡ塩のその他の形態および／または反応不純物および／または処理不純物が含まれうる。反応不純物および／または処理不純物の存在は、当該技術分野で公知の分析技術、例えば、クロマトグラフィー、核磁気共鳴分光法、質量分析法または赤外分光法などによって決定されうる。
【００２０】
本明細書で用いられるように、パラメータ「分子／非対称ユニット」は、非対称ユニットにおける化合物ＩのＭＳＡ塩の分子数を意味する。
【００２１】
本明細書で用いられるように、単位格子パラメータ「分子／単位格子」は、単位格子における化合物ＩのＭＳＡ塩の分子数を意味する。
【００２２】
溶解されると、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形態は、その結晶構造を失い、よって化合物Ｉの溶液と呼ばれる。本明細書に開示の化合物ＩのＭＳＡ塩の１つまたはそれ以上の結晶形態は、当該化合物が溶解されるか、または懸濁される液体製剤の製造に用いられ得る。
【００２３】
治療上有効量の化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形態Ｎ−１および／または形態Ｎ−２は、本発明の医薬組成物を提供するために、医薬的に許容される担体または希釈剤と組み合わされうる。「治療上有効量」は、単独で投与された場合またはさらなる治療剤とともに投与された場合、疾患もしくは状態または疾患もしくは状態の進行を予防し、抑制し、または軽減するのに有効である量を意味する。
【００２４】
本発明は、化合物Ｉ：
【化３】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形態を提供する。
【００２５】
本発明の第１の態様は、化合物ＩのＭＳＡ塩の無溶媒の結晶形態のＭＳＡ塩を提供し、「形態Ｎ−１」または「Ｎ−１形態」と本明細書で記載される。
【００２６】
ある実施態様において、この形態は、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．３０３２Å
ｂ＝９．５９６０Å
ｃ＝１８．０１４１Å
α＝９０．０°
β＝１０４．８１４°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２1
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
体積＝２７２４．６Å3
密度（算出）＝１．３５９ｇ／ｃｍ3
（結晶形態の測定は約２５℃の温度で行われる）
とほぼ同等の単位格子パラメータによって特徴付けられる。
【００２７】
異なる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図１に示されるシミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンと実質的に一致するものおよび／または実質的に図１に示される実測された粉末Ｘ線回折パターンと一致するものによって特徴付けられる。
【００２８】
別の態様において、５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１の２θ値（約２５℃の温度でのＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有する化合物ＩのＭＳＡ塩のＮ−１形態が開示される（結晶形態の測定は約２５℃の温度で行われる）。室温での特徴的回折ピーク位置（度（degree）２θ±０．１）は、スピニングキャピラリー（spinning capillary）を備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンおよびＮＩＳＴ（国立標準技術研究所）または他の適した標準物質で校正した２θに基づくものである。
【００２９】
さらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、表１に実質的に列挙されるような分率原子座標によって特徴付けられる。
表１
Ｔ＝ＲＴでのＭＳＡ塩の形態Ｎ−１の分率原子座標
【表１】
【００３０】
なおさらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図４に示される示差走査熱量測定のサーモグラムと実質的に一致するものによって特徴付けられる。この形態は、約２０５〜２４０℃での吸熱開始によって特徴付けられうる。
【００３１】
別の実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、無視できる重量減少を示す熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムによって特徴付けられる。本発明はまた、図６に示されるＴＧＡサーモグラムと実質的に同一のものを示す化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態を提供する。
【００３２】
さらに別の実施態様において、Ｎ−１形態は、実質的に純粋な形態で提供される。実質的に純粋な形態における化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、例えば、賦形剤および担体から選択される１つまたはそれ以上の他の構成成分が含まれていてもよく；適宜、異なる分子構造の活性な化学物質を有する１つまたはそれ以上の活性な医薬成分が含まれていてもよい医薬組成物中で用いられうる。
【００３３】
好ましくは、Ｎ−１形態は、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンに存在していない余分なピークから生じる、実験で測定された粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにおける合計ピーク面積の１０％以下、好ましくは５％以下、より好ましくは２％以下によって示されるような実質的に純粋な相均一性を有する。最も好ましくは、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンに存在していない余分なピークから生じる、実験で測定された粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにおける合計ピーク面積の１％以下の実質的に純粋な相均一性を有する結晶形態である。
【００３４】
例えば、Ｎ−１形態は、実質的に純粋な形態で提供されてもよく、実質的に純粋とは、９０重量％以上の純度、好ましくは９５重量％以上の純度、およびより好ましくは９９重量％以上の純度である。
【００３５】
異なる実施態様において、本質的に化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−Ｉからなる組成物が提供される。この実施形態の組成物には、組成物中に、化合物ＩのＭＳＡ塩の重量に基づいて、形態の少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％、より好ましくは少なくとも９９重量％が含まれていてもよい。
【００３６】
本発明の第２の態様は、化合物ＩのＭＳＡ塩の無溶媒の結晶形態を提供し、本明細書では「形態Ｎ−２」または「Ｎ−２形態」と呼ばれる。
【００３７】
ある実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．２５０Å
ｂ＝９．５７６Å
ｃ＝３４．７３６Å
α＝９０．０°
β＝９０．０°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２1２1２1
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
体積＝５４０５Å3
密度（算出）＝１．３７０ｇ／ｃｍ3
（前記結晶形態の測定は、約−５０℃の温度で行われる）
とほぼ同等である単位格子パラメータによって特徴付けられる。
【００３８】
別の態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、下記：
【表２】
（ここで、前記結晶形態の算出は室温で行われる）
とほぼ同等である単位格子パラメータによって特徴付けられる。
【００３９】
異なる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図２に示されるシミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンに実質的に一致するものによって、および／または図２に示される実測された粉末Ｘ線回折パターンに実質的に一致するものによって特徴付けられる。
【００４０】
別の実施態様において、５．１±０．１、６．０±０．１、７．４±０．１、９．３±０．１、１０．２±０．１、１０．５±０．１、１１．０±０．１、１１．８±０．１、１４．５±０．１、１５．３±０．１、１７．９±０．１、２１．６±０．１の２θ値（約２５℃の温度でＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有する化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態が開示される（ここで、結晶形態の測定は、約２５℃の温度で行われる）。室温での特徴的な回折ピーク位置（度２θ±０．１）は、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンおよびＮＩＳＴもしくはその他の適当な標準物質で校正した２θに基づく。
【００４１】
さらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、表２に実質的に記載されるような分率原子座標によって特徴付けられる。
表２
Ｔ＝−５０℃での形態Ｎ−２の分率原子座標
【表３】
【００４２】
なおさらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図５に示される示差走査熱量測定サーモグラムに実質的に一致するものによって特徴付けられる。Ｎ−２形態は、約２１０〜２３５℃での吸熱開始によって特徴付けられる。
【００４３】
別の態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、約１００℃までの無視できる重量減少を示す熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムによって特徴付けられる。本発明はまた、図７に示されるＴＧＡサーモグラムと実質的に同一のものを示す化合物ＩのＭＳＡ塩のＮ−２形態を提供する。
【００４４】
なお別の実施態様において、この形態は、実質的に純粋な形態で提供される。実質的に純粋な形態における化合物ＩのＭＳＡ塩のこのＮ−２形態は、例えば、賦形剤および担体から選択される１つまたはそれ以上の構成成分が適宜含まれていてもよく；適宜、１つまたはそれ以上の異なる分子構造の活性な化学物質を有するその他の活性な医薬成分が含まれていてもよい医薬組成物中で用いられうる。
【００４５】
好ましくは、Ｎ−２形態は、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンまたはハイブリッドＰＸＲＤパターンに存在しない余分なピークから生じる実験で測定された粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにおいて、合計ピーク面積の１０％以下、好ましくは５％以下、より好ましくは２％以下によって示されるような実質的に純粋な相均一性を有する。最も好ましくは、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンに存在しない余分なピークから生じる、実験で測定したＰＸＲＤパターンにおける合計ピーク面積の１％以下の実質的に純粋な相均一性を有する結晶形である。
【００４６】
例えば、Ｎ−２形態は、実質的に純粋な形態で提供されていてもよく、実質的に純粋は、９０重量％以上純粋、好ましくは９５重量％以上純粋、ならびにより好ましくは９９重量％以上純粋である。
【００４７】
異なる実施態様において、本質的に化合物Ｉの形態Ｎ−２からなる組成物が提供される。この実施態様の組成物には、組成物中の化合物ＩのＭＳＡ塩の重量に基づいて化合物Ｉの形態Ｎ−２の少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％、より好ましくは少なくとも９９重量％が含まれていてもよい。
【００４８】
本発明はまた、化合物ＩのＭＳＡ塩が形態Ｎ−１である化合物Ｉの結晶形；および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。前記医薬組成物には、実質的に純粋な形態で形態Ｎ−２が含まれうる。
【００４９】
本発明はまた、化合物ＩのＭＳＡ塩が形態Ｎ−２である化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形；および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。前記医薬組成物には、実質的に純粋な形態で形態Ｎ−２が含まれうる。
【００５０】
本発明は、増殖性疾患の治療を必要とする哺乳類に、治療上有効量の化合物Ｉ（ここで、化合物ＩのＭＳＡ塩は、形態Ｎ−２および／または形態Ｎ−１を含むＭＳＡ塩の結晶形で供される）を投与することを特徴とする、増殖性疾患の治療方法をさらに提供する。好ましくは、哺乳類はヒトである。前記方法は、化合物ＩのＭＳＡ塩が本質的に形態Ｎ−１からなる化合物Ｉを投与することを特徴としていてもよい。あるいは、前記方法は、化合物ＩのＭＳＡ塩が本質的に形態Ｎ−２からなる化合物ＩのＭＳＡ塩を投与することを特徴としていてもよい。
【００５１】
本明細書に記載の２つの多形相の単位格子および結晶構造は、多くの類似性を示す。両形態は、広範囲の水素結合／静電相互作用を有する分子の緻密層を含有するが、層間の相互作用は比較的弱い。層間の領域にはまた、約５０Å3／分子の空間が含まれる。２つの多形のＰＸＲＤパターンは類似しているが、いくつかの特有の低角度ピーク（２シータ範囲で５〜１０度）によって容易に区別され；一方の形態がピークである場合、もう一方の形態はピークではなく、逆も同様である。従来の装置を用いると、２シータ範囲の５〜１０度の範囲で非常に弱いか、またはピークなしを示すが、残りのパターンが２つの公知の多形に非常に類似する密接に関連したパターンの物質もまた存在する。強力／高分解能な回折計を用いたさらなる実験により、２つの多形のうちの１つまたは両方の面間隔（d-spacing）に特徴を有する５〜１０度の２シータにおける小さなピークが明らかにされた。実際に、このような物質は、低い角度領域において、様々なピークの高さと幅であらゆる種類のパターンを示す。単一の結晶回折パターンおよび粉末パターン指標に基づくと、実測された範囲パターンは、様々な量の積層欠陥を含有する物質から生じるものと理解することができる。全てのピークが鋭いパターンは、積層欠陥が非常に少ないことを意味し、一方で、重要なピークの広がったパターンは、かかる欠陥が多いことを意味する。多くの「区別できる」ＰＸＲＤパターンが存在しているが、ＭＳＡ塩の２つの多形相のみが実測された。結晶物質Ｎ−１／Ｎ−２のＰＸＲＤには、図３が含まれる。このＰＸＲＤは、本発明の一部として考慮される図３に特に示されていない異なるピーク強度が存在しうるため、限定されるものではない。
【００５２】
用途および有用性
化合物Ｉの結晶形は、現在の譲受人に譲渡され、出典明示によりその全体が本明細書に取り込まれる米国特許第７，５３４，７９２号に開示されるように用いられ得る。特に、これらの形態は、Ｆｌｔ−３（Ｆｍｅ様キナーゼ３）、Ｔｉｅ−２、ＣＤＫ２、ＶＥＧＦＲ、ＦＧＦＲおよびＩＧＦＲキナーゼなどのキナーゼにより調節されるシグナル伝達経路に関連しうる疾患（例えば、急性骨髄性白血病）の治療に用いられ得る。
【００５３】
より具体的には、化合物Ｉの結晶形は、下記：
−前立腺、膵管腺、乳房、結腸、肺、卵巣、膵臓および甲状腺の癌を含む、癌；
−神経芽細胞腫、神経膠芽腫および髄芽腫を含む、中枢および末梢神経系の腫瘍；ならびに
−メラノーマおよび多発性骨髄腫を含む、その他の腫瘍
が含まれる（が、これらに限定されない）様々な癌の治療に有用でありうる。
【００５４】
一般に、阻害剤は、細胞増殖の調節におけるキナーゼの重要な役割のため、異常な細胞増殖を特徴とするいずれかの疾患過程、例えば、良性前立腺肥厚化、家族性大腸ポリープ症、神経線維腫症、肺線維症、関節炎、乾癬、糸球体腎炎、血管形成または血管の外科手術後の再狭窄、肥大性瘢痕形成および炎症性腸疾患の治療に有用でありうる可逆性細胞増殖抑制剤として作用しうる。
【００５５】
化合物Ｉの結晶形は、チロシンキナーゼ活性の高い発生率を有する腫瘍、例えば、前立腺、結腸、脳、甲状腺および膵臓の腫瘍などの治療に特に有用でありうる。また、本発明の化合物は、肉腫および小児肉腫の治療に有用でありうる。本発明の化合物の組成物（または組み合わせ）の投与によって、哺乳類宿主における腫瘍の発生が減少される。
【００５６】
活性成分を含有する本発明の医薬組成物は、経口用途に適当な形態、例えば、錠剤、トローチ、トローチ剤、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒剤、乳濁液、硬もしくは軟カプセル剤、またはシロップもしくはエリキシル剤でありうる。経口用途を目的とした組成物は、医薬組成物の製造の技術分野で公知の方法によって調製され得、かかる組成物は、医薬的に洗練され、受け入れられやすい製剤を提供するために、甘味料、香料、着色剤および保存剤からなる群から選択される１つまたはそれ以上の薬剤を含有していてもよい。
【００５７】
経口用途のための製剤はまた、活性成分が不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合される硬ゼラチンカプセル剤として提供されうるか、あるいは活性成分がポリエチレングリコールなどの水溶性担体、または落花生油、液体パラフィンもしくはオリーブ油などの油媒体と混合される軟ゼラチンカプセル剤として提供されうる。
【００５８】
前記医薬組成物は、滅菌注射水溶液の形態でありうる。用いられうる許容可能なベヒクルおよび溶媒は、水、リンガー溶液および等張性塩化ナトリウム溶液である。
【００５９】
滅菌注射製剤はまた、活性成分が油相に溶解されている滅菌注射用水中油型マイクロエマルションでありうる。例えば、活性成分は、大豆油およびレシチンの混合液中に最初に溶解されうる。次いで、油性溶液を水およびグリセロール混合液中に入れ、処理してマイクロエマルションを調製する。
【００６０】
注射溶液またはマイクロエマルションは、局所ボーラス注入によって患者の血流に注入されうる。あるいは、本化合物の一定の血中濃度を維持するように溶液またはマイクロエマルションを投与するのに有効でありうる。かかる一定濃度を維持するために、持続静脈送達装置が利用されうる。かかる装置の一例は、Ｄｅｌｔｅｃ ＣＡＤＤ−ＰＬＵＳ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ５４００静脈ポンプである。
【００６１】
前記医薬組成物は、筋肉内および皮下投与のための滅菌注射溶液または油性懸濁液の形態でありうる。この懸濁液は、上記に記載される適当な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤を用いて公知技術によって製剤化されうる。
【００６２】
本発明による化合物がヒト対象に投与されると、１日の投与量は、通常、年齢、体重、性別および各患者の反応性、ならびに患者の症状の重症度に応じて一般に変動する用量を用いて、処方医師によって決定される。
【００６３】
固定用量として製剤化される場合、かかる併用剤は、上記に記載される用量範囲内で本発明の化合物、ならびにその認可された用量範囲内でその他の医薬的に活性な薬剤または治療を用いる。式Ｉの化合物のＭＳＡ塩はまた、併用剤が不適切である場合、公知の抗癌剤もしくは細胞毒性剤とともに連続的に投与されうる。本発明は、投与の順番で限定されるものではなく；式Ｉの化合物のＭＳＡ塩は、公知の抗癌剤もしくは細胞毒性剤の投与前もしくは後のいずれかに投与されてもよい。
【００６４】
本化合物は、単回投与または２〜４回の分割投与で、約０.０５から２００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ／日以下の用量範囲で投与されうる。
【００６５】
典型的には、医薬的に活性な物質の固形物は、医薬的に活性な物質の製造、安定性および／または効力が固形物に依存しうるため、錠剤もしくはカプセル剤のような固形製剤の調製において重要である。一般に、結晶形態は、例えば、溶解性、密度、溶解速度および安定性などの均一な特性を有する医薬的に活性な物質を提供する。本発明において、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形態Ｎ−１、Ｎ−２およびＮ−１／Ｎ−２は、安定な経口製剤の提供および／またはそれを必要とする患者への化合物ＩのＭＳＡ塩の形態の送達のための錠剤またはカプセル剤の製造に適した特性を有する。
【００６６】
製造および特性測定の方法
結晶形態は、例えば、適当な溶媒からの結晶化もしくは再結晶化、昇華、融液からの成長、別の相からの固体相変態、超臨界流体からの結晶化およびジェット噴霧を含む様々な方法によって製造されうる。溶媒混合物からの結晶形態の結晶化または再結晶化のための技術には、例えば、溶媒の蒸発、溶媒混合物の低温化、分子および／またはその塩の過飽和溶媒混合物の種晶化、溶媒混合物の凍結乾燥、ならびに貧溶媒（対溶媒（countersolvent））の溶媒混合物への添加が含まれる。ハイスループット結晶化技術は、多形を含む結晶形態を調製するために用いられ得る。
【００６７】
多形を含む薬物の結晶、薬物の結晶の製造方法および特性測定方法は、Byrn, S.R. et al., Solid−State Chemistry of Drugs, 2nd Edition, SSCI, West Lafayette、 Indiana (1999)に記載される。
【００６８】
溶媒を用いる結晶化技術に関して、溶媒の選択は、典型的に、化合物の溶解性、化合物の安定性および結晶化技術などの１つまたはそれ以上の因子に依存する。合成に用いられる溶媒は、しばしば、操作を容易にするために選択される。溶媒の組み合わせは、例えば、化合物を第１の溶媒に溶解させて溶液を得て、続いて貧溶媒を加えて溶液中の化合物の溶解性を減少させ、結晶を形成させうる。貧溶媒は、化合物が低溶解性を示す溶媒である。
【００６９】
結晶を調製するためのある方法において、化合物は、適当な溶媒中で懸濁および／または攪拌されてスラリーを生じ、加熱されて溶解が促進されうる。用語「スラリー」は、本明細書で用いられるように、固形中でさらなる量の化合物を含有して、所定温度で化合物および溶媒の不均一混合物を生じうる化合物の飽和溶液を意味する。
【００７０】
種晶は、結晶化を促進するために結晶化混合物に加えられうる。播種（seeding）は、特定の多型の増殖を制御するために、または結晶生成物の粒径分布を制御するために用いられ得る。よって、必要とされる種晶の量の算出は、例えば、Mullin, J.W. et al., "Programmed Cooling of Batch Crystallizers," Chemical Engineering Science, 26:369-377 (1971)に記載されるように、利用可能な種晶のサイズおよび平均生成物粒子の所望サイズに依存する。一般に、小さいサイズの種晶は、バッチ中で結晶の成長を効率的に制御するために必要とされる。小さいサイズの種晶は、大きい結晶をふるいにかけるか、または粉砕することによって作り出されうる。結晶の粉砕は、所望の結晶形からの結晶化度に変化を一切生じないよう（すなわち、アモルファスまたは別の多型への変化）に留意しなければならない。
【００７１】
冷却した結晶化混合物は、減圧下で濾過され、単離された固形物は、冷却した再結晶化溶媒などの適当な溶媒で洗浄され、窒素パージ下で乾燥されて所望の結晶形を生じうる。単離された固形物は、生成物の好ましい結晶形の形成を確認するために、固体核磁気共鳴、示差走査熱量測定、粉末Ｘ線回折などの適当な分光技術または分析技術によって分析されうる。生じた結晶形は、結晶化方法で元々用いられる化合物の重量を基準にして、約７０重量％以上の単離収率、好ましくは９０重量％以上の単離収率の量で生成されうる。生成物は、必要に応じて、共粉砕されうるか、またはメッシュスクリーンに通して生成物の塊を崩す（delump）。
【００７２】
結晶形は、化合物ＩのＭＳＡ塩を調製するための最終工程の反応媒体から直接調製されうる。これは、例えば、最終工程段階で、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形が結晶化されうる溶媒または溶媒混合物を用いることによって達成されうる。あるいは、結晶形は、蒸留または貧溶媒添加技術によって得られうる。このための適当な溶媒としては、例えば、アルコール類などのプロトン性極性溶媒およびケトン類などの非プロトン性極性溶媒を含む前記の非極性溶媒および極性溶媒が挙げられる。
【００７３】
試料中の１種類より多い結晶形および／または多型の存在は、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）または固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）分光法などの技術によって決定されうる。例えば、実験で測定されたＰＸＲＤパターンと、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンとの比較での余分なピークの存在は、試料中の１種類より多い結晶形および／または多型を示しうる。シミュレーションされたＰＸＲＤは、単結晶Ｘ線データから算出されうる。Smith, D.K., "A FORTRAN Program for Calculating X-Ray Powder Diffraction Patterns," Lawrence Radiation Laboratory, Livemore, California, UCRL-7196 (April 1963)を参照のこと。
【００７４】
本発明による化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形は、当業者に周知である様々な技術を用いて特徴付けられうる。化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形は、固定した分析温度での形態の単一結晶の単位格子測定に基づいて、標準的な操作条件および温度下で行われる単結晶Ｘ線回折法を用いて特徴付けられ、区別されうる。おおよその単位格子定数であるオングストローム（Å）、ならびに結晶格子体積、空間群、１格子あたりの分子および結晶密度は、例えば、２５℃の試料温度で測定され得る。単位格子の詳細な説明は、出典明示により本明細書に取り込まれる、Stout et al., Chapter 3, X−Ray Structure Determination： A Practical Guide, Macmillan Co., New York (1968)で提供される。
【００７５】
あるいは、結晶格子内の空間関係での原子の特有の配置は、実測された分率原子座標によって特徴付けられうる。結晶構造を特徴付ける別の方法は、回折プロファイルが、純粋な粉末物質を示すシミュレーションされたプロファイルと比較される、粉末Ｘ線回折分析によるものであり、好ましくは、両者は、同一の分析温度、および一連の２θ値（通常、４またはそれ以上）として特徴付けられる対象の形態についての測定で行われる。
【００７６】
形態を特徴付けるその他の方法として、固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）および熱重量分析（ＴＧＡ）などが用いられうる。これらのパラメータはまた、対象の形態を特徴付けるために組み合わせて用いられうる。ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１およびＮ−２のためのｓｓＮＭＲには、図８および９が含まれる。
【００７７】
ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１の特徴的な化学シフト（ｐｐｍ1）は下記のとおりである：
【表４】
1外部ＴＭＳとの比較＝０．０ｐｐｍ
【００７８】
ＭＳＡ塩の形態Ｎ−２の特徴的な化学シフト（ｐｐｍ1）は下記のとおりである：
【表５】
1外部ＴＭＳとの比較＝０．０ｐｐｍ
【００７９】
結晶形は、下記に記載の試験方法のうちの１つまたはそれ以上を用いて分析した。
【００８０】
単結晶Ｘ線測定（Ｎ−１）
グラファイトモノクロメーターでＣｕ Ｋα照射（λ＝１．５４０５６Å）を備えた、Ｂｒｕｋｅｒ ＳＭＡＲＴ ２Ｋ ＣＣＤ回折計を用いて、室温で回折データを得た。完全な一式のデータを、結晶と検出器の距離を４.９８ｃｍで、２θ範囲にわたり、ωスキャンモードを用いて得た。経験的な吸収補正には、回折計（Bruker AXS. 1998, SMART and SAINTPLUS. Area Detector Control and Integration Software, Bruker AXS, Madison, Wisconsin, USA）を有するＳＡＤＡＢＳルーティン（routine）を利用した。。最終単位格子パラメータを、全てのデータを用いて決定した。
【００８１】
全ての構造は、直接的な方法により解析し、完全行列最小二乗技術により精密化し、ＳＨＥＬＸＴＬソフトウェアパッケージ（Sheldrick, G.M., 1997, SHELXTL. Structure Determination Programs. Version 5.10, Bruker AXS, Madison, Wisconsin, USA）を用いた。精密化において最小化した関数は、Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2であった。Ｒは、Σ｜｜Ｆo｜−｜Ｆc｜｜／Σ｜Ｆo｜とし、Ｒw＝［Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2／Σw｜Ｆo｜2］1/2（式中、ｗは、観測強度における誤差に基づく適当な重み関数である）と定義する。示差ＦＯＵＲＩＥＲ（登録商標）マップ（difference FOURIER map）を精密化の全段階で試験した。全ての非水素原子を異方性熱置換（anisotropic thermal displacement）パラメータで精密化した。水素結合で結合した水素原子を、最終的な示差ＦＯＵＲＩＥＲ（登録商標）マップに位置づけ、その他の水素原子の位置は、標準的な結合の長さと角度を用いて理論上の配置から算出した。それらを等方的な温度因子に割り当て、固定パラメータとともに構造因子計算値に含めた。
【００８２】
単結晶Ｘ線測定（Ｎ−２）
データは、Ｂｒｕｋｅｒ−Ｎｏｎｉｕｓ（BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway, Madison, WI 53711 USA）ＣＡＤ４連続回折計で得た。単位格子パラメータは、２５高角反射の実験用回折計装置の最小二乗解析により得た。強度は、θ−２θ可変走査法による一定温度でのＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いて測定し、ローレンツ偏光因子についてのみ補正した。バックグラウンド計数は、走査時間の半分で走査の両端で収集した。あるいは、単結晶データは、ＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いてＢｒｕｋｅｒ−Ｎｏｎｉｕｓ Ｋａｐｐａ ＣＣＤ２０００システムで収集した。測定した強度データの索引付けおよび処理は、集積プログラムスイート(Collect program suite)（Collect Data collection and processing user interface: Collect: Data collection software, R. Hooft, Nonius B.V.(1998)）中のＨＫＬ２０００ソフトウェアパッケージ（Otwinowski, Z. et al. in Macromolecular Crystallography, Vol. 276, pp. 307-326, Academic, NY, publ., Carter, W.C. Jr. et al., eds. (1997)）を用いて実行した。あるいは、単結晶データは、ＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いてＢｒｕｋｅｒ−ＡＸＳ ＡＰＥＸ２ ＣＣＤシステムで収集した。測定した強度データの索引付けおよび処理は、ＡＰＥＸ２ソフトウェアパッケージ／プログラムスイート（APEX2 Data collection and processing user interface: APEX2 User Manual, v1.27; BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway Madison, WI 53711 USA）で実行した。
【００８３】
必要であれば、結晶は、データ収集の間、オックスフォード極低温システム（Oxford Cryosystems Cryostream cooler: Cosier, J. et al., J. Appl. Cryst., 19:105 (1986)）の冷却流で冷却した。
【００８４】
構造は、直接的な方法によって解析し、マイナー部分に改良を施したＳＤＰ（SDP, Structure Determination Package, Enraf-Nonius, Bohemia NY 11716. ＳＤＰソフトウェアにおけるｆ’およびｆ’’を含む散乱因子は、"International Tables for Crystallography", Vol. IV, Tables 2.2Aおよび2.3.1, Kynoch Press, Birmingham, England (1974)から取得した）ソフトウェアパッケージまたは結晶学パッケージＭＡＸＵＳ（maXus solution and refinement software suite: S. Mackay, C.J. Gilmore, C. Edwards, M. Tremayne, N. Stewart, K. Shankland. ｍａＸｕｓ:回折データからの結晶構造の解析および精密化のためのコンピュータプログラム）もしくはＳＨＥＬＸＴＬ（（ＡＰＥＸ２データ収集および処理ユーザーインターフェイス: APEX2 User Manual, Vol. 27; BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway Madison, WI 53711 USA）のいずれかを用いて実測した反射に基づいて精密化した。
【００８５】
得られた原子パラメータ（座標および温度因子）は、完全行列最小二乗法により精密化した。精密化において最小化した関数は、Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2であった。Ｒは、Σ｜｜Ｆo｜−｜Ｆc｜｜／Σ｜Ｆo｜とし、Ｒw＝［Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2／Σw｜Ｆo｜2］1/2（式中、ｗは、観測強度における誤差に基づく適当な重み関数である）と定義する。距離マップは、精密化の全段階で試験した。水素原子は、等方性温度因子を用いて理論上の位置に導入したが、水素パラメータは変えなかった。
【００８６】
特に示されていない限り、シミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンは、データ収集温度で単結晶原子パラメータから作成した。
【００８７】
ハイブリッドＰＸＲＤパターン
「ハイブリッド」でシミュレーションされた粉末Ｘ線パターンは、文献（Yin. S. et al., American Pharmaceutical Review, 6(2):80 (2003)）に記載されるように調製した。室温の格子パラメータは、ＣｅｌｌＲｅｆｉｎｅ．ｘｌｓプログラムを用いて格子精密化を行うことによって得た。プログラムへの入力は、実験上の室温粉末パターンから得られた約１０リフレクション（reflection）の２シータ位置を含み；対応するミラー指数ｈｋｌを低温で収集した単結晶データに基づいて割り当てた。新規な（ハイブリッド）ＰＸＲＤは、低温で決定した分子構造を方法の第一ステップで得た室温の格子に挿入することによって、（ＡｌｅｘまたはＬａｔｔｉｃｅＶｉｅｗのいずれかのソフトウェアプログラムによって）算出した。この分子は、分子のサイズと形および格子本来の分子の位置を保ちつつ、分子間距離が格子と共に広がるように挿入される。
【００８８】
粉末Ｘ線回折測定
Ｘ線粉末回折データは、Ｂｒｕｋｅｒ Ｃ２ ＧＡＤＤＳを用いて得た。照射はＣｕＫα（４０ＫＶ，５０ｍＡ）であった。試料−検出器間距離は、１５ｃｍであった。粉末試料は、１ｍｍまたはそれ以下の直径の密封したガラスキャピラリー中に置き、前記キャピラリーをデータ収集の間に回転させた。データは、少なくとも１０００秒の試料露出時間で３≦２θ≦３５°について収集した。得られた二次元の回折弧を積分して、３〜３５°２θの範囲で０．０２°２θの刻み幅（step size）を用いて、従来の一次元ＰＸＲＤパターンを作成した。
【００８９】
ＤＳＣ
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）実験は、ＴＡ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳ（登録商標）モデルＱ１０００または２９２０で行った。試料（約２〜６ｍｇ）の重量をアルミニウムパン内で測定し、１００分の１ミリグラムまで正確に記録し、ＤＳＣに移した。装置は、窒素ガスを用いて５０ｍＬ／分でパージした。室温から３００℃の間で１０℃／分の加熱速度でデータを収集した。下向きの吸熱ピークをプロットした。
【００９０】
ＴＧＡ
熱重量分析（ＴＧＡ）実験は、ＴＡ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳ（登録商標）モデルＱ５００もしくは２９５０で行った。容器の重量を測って試料（約７〜３５ｍｇ）を白金皿に載せた。試料の重量を正確に測定し、装置により１０００分の１ミリグラムまで記録した。加熱炉は、窒素ガスを用いて１００ｍＬ／分でパージした。データは、室温から３００℃の間で１０℃／分の加熱速度で収集した。
【００９１】
固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）
全ての固体Ｃ−１３ ＮＭＲ測定は、Ｂｒｕｋｅｒ ＤＳＸ−４００、４００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計を用いて行った。高分解能スペクトルは、捕捉の間にＴＰＰＭプロトンを脱カップリングする傾斜（ramped）交差分極（ＲＡＭＰ−ＣＰ）手順を用いて得た（Bennett, A.E. et al, J. Chem. Phys.,103:6951 (1995); Metz, G. et al., J. Magn. Reson. A, 110:219-227 (1994)）。試料の約７０ｍｇを４ｍｍのキャニスターデザインジルコニア（canister-design zirconia rotor）に充填し、各実験に用いた。化学シフト（δ）は、３８．５６ｐｐｍに設定した高周波共鳴で外部基準のアダマンタンを基準とした（Earl, W.L. et al., J. Magn. Reson., 48:35-54 (1982)）。
【実施例１】
【００９２】
実施例
本発明は、発明の好ましい実施態様である下記の実施例によってさらに説明される。これらの実施例は、例示であって限定するものではなく、本願に添付された特許請求の範囲によって定義される発明の精神および範囲にあるその他の実施態様が存在しうることが理解されるべきである。
【００９３】
化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−１の結晶化条件：
方法１：
６８０ｍｇの化合物Ｉ（遊離塩基）を４．０ｍｌのエタノール中に溶解させた。１４９ｍｇのメタンスルホン酸（＞９９％純度）を１．０ｍｌのエタノール中に溶解させた。前記酸溶液を前記遊離塩基溶液に加えた。得られた混合物を０．２μｍのナイロンシリンジフィルターに通して濾過し、Ｎ2パージ環境下で蒸発させた。回収した固体試料を過剰量のアセトニトリルで洗浄し、真空濾過により単離してオフホワイト色の粉末を得た。
【００９４】
方法２：
２４ｍｇの化合物Ｉ（遊離塩基）を０．４ｍｌのアセトニトリル中に溶解させた。等モル量のアセトニトリル中のメタンスルホン酸溶液（１．０Ｍ）を遊離塩基溶液に加えた。得られた溶液に蓋をし、周囲条件で保存した。固体試料が数時間以内に溶液から晶出した。
【００９５】
化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−２の結晶化条件：
方法１：
１２４ｍｇの化合物Ｉ（遊離塩基）を０．８ｍｌのエタノール中に溶解させた。２６ｍｇのメタンスルホン酸（＞９９％純度）を０．２ｍｌのエタノール中に溶解させた。当該酸溶液を遊離塩基溶液に加えた。得られた溶液を０.４５μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターに通して濾過し、周囲条件でゆっくり蒸発させて固体を得た。
【００９６】
方法２：
化合物Ｉ（遊離塩基）およびメタンスルホン酸の１：１混合物を含有するアセトニトリル溶液を、周囲条件で急速に蒸発させて固体を得た。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドのメタンスルホン酸（ＭＳＡ）塩の結晶形に関する。本発明はまた、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドのＭＳＡ塩の結晶形を含む医薬組成物、ならびに癌および他の増殖性疾患の治療において（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドのＭＳＡ塩の結晶形を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、チロシンキナーゼ酵素を阻害する化合物の結晶形、チロシンキナーゼを阻害する化合物を含有する組成物、ならびにチロシンキナーゼ酵素の阻害剤の結晶形を用いて、癌、糖尿病、再狭窄、動脈硬化症、乾癬、アルツハイマー病、血管形成疾患および免疫疾患などのチロシンキナーゼ活性の過剰発現または上方調節によって特徴付けられる疾患を治療する方法に関する。
【０００３】
チロシンキナーゼは、細胞増殖、癌発生、アポトーシスおよび細胞分化を含むいくつかの細胞機能に関するシグナル伝達において重要な役割を果たす。これらの酵素の阻害剤は、これらの酵素に依存する増殖性疾患の治療または予防に有用である。強力な疫学的証拠により、構成的な分裂促進シグナルを生じる受容体タンパク質チロシンキナーゼの過剰発現または活性化が、増殖するヒト悪性腫瘍における重要な因子であることが示唆されている。これらの過程に関連しているチロシンキナーゼとして、Ａｂｌ、ＣＤＫ群、ＥＧＦ、ＥＭＴ、ＦＧＦ、ＦＡＫ、Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−３、ＧＳＫ−３、ＧＳＫベータ−３、ＨＥＲ−２、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、Ｊａｋ２、ＬＣＫ、ＭＥＴ、ＰＤＧＦ、Ｓｒｃ、Ｔｉｅ−２、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＶＥＧＦが挙げられる。よって、チロシンキナーゼ酵素を調節し、または阻害するために用いることができる新規な化合物を研究する必要性が存在する。
【０００４】
（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドは、式Ｉ：
【化１】
（Ｉ）
の構造を有し、本明細書では「化合物Ｉ」と称される。化合物Ｉは、インスリン様増殖因子受容体インヒビター（ＩＧＦ−１Ｒ）であり、それゆえ、抗癌剤として有用である。化合物Ｉおよび前記化合物の合成方法は、現在の譲受人に譲渡され、出典明示によりその全体が本明細書に取り込まれる特許文献１に開示される。
【０００５】
典型的に、医薬組成物の製造において、溶解速度、溶解度、バイオアベイラビリティおよび／または保存安定性などの所望される特性のバランスがとれた活性成分の形態が求められている。例えば、必要な溶解度およびバイオアベイラビリティを有し、さらに、医薬組成物の製造もしくは保存の間に、異なる溶解度および／またはバイオアベイラビリティを有する異なる形態に変換しない十分な安定性を有する活性成分の形態が望まれている。癌のような疾患の治療に適する医薬組成物の製造を可能にする特性および安定性を有する化合物Ｉの１つまたはそれ以上の形態が望まれている。さらに、例えば、製造過程の間に化合物Ｉを単離および／または精製できる化合物Ｉの１つまたはそれ以上の形態が望まれている。
【０００６】
単離された形態のＮ−１およびＮ−２バルク物質（bulk material）のＰＸＲＤパターンは、多くの類似性を示すが、ある特有の低角度ピーク（angle peak）によって容易に区別される。一方の形態がピークを示す場合、もう一方の形態は基準値およびその逆のピークを示す。実際、これらの物質は、主に低い角度で様々なピークの高さと幅のパターンの全範囲を示す。また、化合物の多形混合物のスラリーは、単一形態に変換することが予想される。この場合、当該形態の熱力学的関係の測定中に、両形態を含有するスラリーがより安定な形態にゆっくり変換されることが示された。
【０００７】
単離された形態の広範な試験により、１：１ ＭＳＡ塩のＮ−１およびＮ−２の近接した構造および動力学的関係の可能性のため、相純度は、製剤の有効性にあまり大きく影響することが予想されないことが知見されている。よって、Ｎ−１および／またはＮ−２のＰＸＲＤ特性を有する結晶形が選ばれ、Ｎ−１／Ｎ−２と呼ばれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第７，５３４，７９２号
【発明の概要】
【０００９】
本発明の第１の態様は、形態Ｎ−１を含む、化合物Ｉ：
【化２】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形を提供する。
【００１０】
本発明の第２の態様は、形態Ｎ−２を含む化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形を提供する。
【００１１】
本発明の第３の態様は、形態Ｎ−１および／または形態Ｎ−２のＰＸＲＤ特性を有する結晶形を含む、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形を提供する。
【００１２】
本発明のさらなる態様は、化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−２および／または形態Ｎ−１のうちの１つまたはそれ以上、ならびに医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物を提供する。
【００１３】
本発明の別の態様は、癌の治療を必要とする哺乳類に、治療上有効量の化合物ＩのＭＳＡ塩を投与することを特徴とする癌の治療方法であって、化合物ＩのＭＳＡ塩が、Ｎ−１および／またはＮ−２のＰＸＲＤ特性を有する結晶形である方法を提供する。
【００１４】
特定の形態、例えば、「Ｎ−１」などを特徴付けるために本明細書で用いられる名称は、類似または同一の物理的および化学的特徴を有するその他の物質のいずれかに限定するものと考慮されるべきではなく、むしろ、これらの表記は、本明細書に示される特性評価情報によって解釈されるべき単なる識別であると理解されるべきである。
【００１５】
本発明は、下記に記載の添付した図面によって例示される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の実験（室温）およびシミュレーション（Ｔ＝２５°）上の粉末Ｘ線回折パターン（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）を示す。
【図２】図２は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の実験（室温）、ハイブリッド（室温）およびシミュレーション（Ｔ＝−５０°）上の粉末Ｘ線回折パターン（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）を示す。
【図３】図３は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１／Ｎ−２結晶形で実測された選択パターンのＰＸＲＤを示す。
【図４】図４は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【図５】図５は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【図６】図６は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを示す。
【図７】図７は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを示す。
【図８】図８は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−１結晶形の固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）スペクトルを示す。
【図９】図９は、（Ｓ）−１−（４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−２−イル）−Ｎ−（６−フルオロピリジン−３−イル）−２−メチルピロリジン−２−カルボキサミドＭＳＡ塩のＮ−２結晶形の固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）スペクトルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書で用いられるように、「多形」は、同じ組成を有するが、結晶を形成する分子および／またはイオンの異なる空間配置を有する結晶形を意味する。
【００１８】
本明細書で用いられるように、「アモルファス」は、結晶ではない分子および／またはイオンの固体形態を意味する。アモルファス固体は、明確な最大値を有するはっきりしたＸ線回折パターンを示さない。
【００１９】
本明細書で用いられるように、「実質的に純粋な」は、結晶形態に関して用いられる場合、当該化合物の重量に基づいて本化合物の９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８および９９重量％を含み、約１００重量％と同等量を含む、９０重量％以上の純度を有する化合物の結晶形の試料を意味する。残りの物質には、化合物のその他の形態、ならびに／あるいは反応不純物および／またはその製造から生じる処理不純物が含まれる。例えば、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形は、出願時点で公知であり、当該技術分野で一般に受け入れられている方法によって測定される場合、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形の９０重量％以上の純度を有する点で実質的に純粋とされ、残りの１０重量％以下の物質には、化合物ＩのＭＳＡ塩のその他の形態および／または反応不純物および／または処理不純物が含まれうる。反応不純物および／または処理不純物の存在は、当該技術分野で公知の分析技術、例えば、クロマトグラフィー、核磁気共鳴分光法、質量分析法または赤外分光法などによって決定されうる。
【００２０】
本明細書で用いられるように、パラメータ「分子／非対称ユニット」は、非対称ユニットにおける化合物ＩのＭＳＡ塩の分子数を意味する。
【００２１】
本明細書で用いられるように、単位格子パラメータ「分子／単位格子」は、単位格子における化合物ＩのＭＳＡ塩の分子数を意味する。
【００２２】
溶解されると、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形態は、その結晶構造を失い、よって化合物Ｉの溶液と呼ばれる。本明細書に開示の化合物ＩのＭＳＡ塩の１つまたはそれ以上の結晶形態は、当該化合物が溶解されるか、または懸濁される液体製剤の製造に用いられ得る。
【００２３】
治療上有効量の化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形態Ｎ−１および／または形態Ｎ−２は、本発明の医薬組成物を提供するために、医薬的に許容される担体または希釈剤と組み合わされうる。「治療上有効量」は、単独で投与された場合またはさらなる治療剤とともに投与された場合、疾患もしくは状態または疾患もしくは状態の進行を予防し、抑制し、または軽減するのに有効である量を意味する。
【００２４】
本発明は、化合物Ｉ：
【化３】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形態を提供する。
【００２５】
本発明の第１の態様は、化合物ＩのＭＳＡ塩の無溶媒の結晶形態のＭＳＡ塩を提供し、「形態Ｎ−１」または「Ｎ−１形態」と本明細書で記載される。
【００２６】
ある実施態様において、この形態は、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．３０３２Å
ｂ＝９．５９６０Å
ｃ＝１８．０１４１Å
α＝９０．０°
β＝１０４．８１４°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２1
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
体積＝２７２４．６Å3
密度（算出）＝１．３５９ｇ／ｃｍ3
（結晶形態の測定は約２５℃の温度で行われる）
とほぼ同等の単位格子パラメータによって特徴付けられる。
【００２７】
異なる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図１に示されるシミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンと実質的に一致するものおよび／または実質的に図１に示される実測された粉末Ｘ線回折パターンと一致するものによって特徴付けられる。
【００２８】
別の態様において、５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１の２θ値（約２５℃の温度でのＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有する化合物ＩのＭＳＡ塩のＮ−１形態が開示される（結晶形態の測定は約２５℃の温度で行われる）。室温での特徴的回折ピーク位置（度（degree）２θ±０．１）は、スピニングキャピラリー（spinning capillary）を備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンおよびＮＩＳＴ（国立標準技術研究所）または他の適した標準物質で校正した２θに基づくものである。
【００２９】
さらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、表１に実質的に列挙されるような分率原子座標によって特徴付けられる。
表１
Ｔ＝ＲＴでのＭＳＡ塩の形態Ｎ−１の分率原子座標
【表１】
【００３０】
なおさらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図４に示される示差走査熱量測定のサーモグラムと実質的に一致するものによって特徴付けられる。この形態は、約２０５〜２４０℃での吸熱開始によって特徴付けられうる。
【００３１】
別の実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、無視できる重量減少を示す熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムによって特徴付けられる。本発明はまた、図６に示されるＴＧＡサーモグラムと実質的に同一のものを示す化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態を提供する。
【００３２】
さらに別の実施態様において、Ｎ−１形態は、実質的に純粋な形態で提供される。実質的に純粋な形態における化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、例えば、賦形剤および担体から選択される１つまたはそれ以上の他の構成成分が含まれていてもよく；適宜、異なる分子構造の活性な化学物質を有する１つまたはそれ以上の活性な医薬成分が含まれていてもよい医薬組成物中で用いられうる。
【００３３】
好ましくは、Ｎ−１形態は、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンに存在していない余分なピークから生じる、実験で測定された粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにおける合計ピーク面積の１０％以下、好ましくは５％以下、より好ましくは２％以下によって示されるような実質的に純粋な相均一性を有する。最も好ましくは、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンに存在していない余分なピークから生じる、実験で測定された粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにおける合計ピーク面積の１％以下の実質的に純粋な相均一性を有する結晶形態である。
【００３４】
例えば、Ｎ−１形態は、実質的に純粋な形態で提供されてもよく、実質的に純粋とは、９０重量％以上の純度、好ましくは９５重量％以上の純度、およびより好ましくは９９重量％以上の純度である。
【００３５】
異なる実施態様において、本質的に化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−Ｉからなる組成物が提供される。この実施形態の組成物には、組成物中に、化合物ＩのＭＳＡ塩の重量に基づいて、形態の少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％、より好ましくは少なくとも９９重量％が含まれていてもよい。
【００３６】
本発明の第２の態様は、化合物ＩのＭＳＡ塩の無溶媒の結晶形態を提供し、本明細書では「形態Ｎ−２」または「Ｎ−２形態」と呼ばれる。
【００３７】
ある実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．２５０Å
ｂ＝９．５７６Å
ｃ＝３４．７３６Å
α＝９０．０°
β＝９０．０°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２1２1２1
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
体積＝５４０５Å3
密度（算出）＝１．３７０ｇ／ｃｍ3
（前記結晶形態の測定は、約−５０℃の温度で行われる）
とほぼ同等である単位格子パラメータによって特徴付けられる。
【００３８】
別の態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、下記：
【表２】
（ここで、前記結晶形態の算出は室温で行われる）
とほぼ同等である単位格子パラメータによって特徴付けられる。
【００３９】
異なる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図２に示されるシミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンに実質的に一致するものによって、および／または図２に示される実測された粉末Ｘ線回折パターンに実質的に一致するものによって特徴付けられる。
【００４０】
別の実施態様において、５．１±０．１、６．０±０．１、７．４±０．１、９．３±０．１、１０．２±０．１、１０．５±０．１、１１．０±０．１、１１．８±０．１、１４．５±０．１、１５．３±０．１、１７．９±０．１、２１．６±０．１の２θ値（約２５℃の温度でＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有する化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態が開示される（ここで、結晶形態の測定は、約２５℃の温度で行われる）。室温での特徴的な回折ピーク位置（度２θ±０．１）は、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンおよびＮＩＳＴもしくはその他の適当な標準物質で校正した２θに基づく。
【００４１】
さらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、表２に実質的に記載されるような分率原子座標によって特徴付けられる。
表２
Ｔ＝−５０℃での形態Ｎ−２の分率原子座標
【表３】
【００４２】
なおさらなる実施態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、図５に示される示差走査熱量測定サーモグラムに実質的に一致するものによって特徴付けられる。Ｎ−２形態は、約２１０〜２３５℃での吸熱開始によって特徴付けられる。
【００４３】
別の態様において、化合物ＩのＭＳＡ塩のこの形態は、約１００℃までの無視できる重量減少を示す熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムによって特徴付けられる。本発明はまた、図７に示されるＴＧＡサーモグラムと実質的に同一のものを示す化合物ＩのＭＳＡ塩のＮ−２形態を提供する。
【００４４】
なお別の実施態様において、この形態は、実質的に純粋な形態で提供される。実質的に純粋な形態における化合物ＩのＭＳＡ塩のこのＮ−２形態は、例えば、賦形剤および担体から選択される１つまたはそれ以上の構成成分が適宜含まれていてもよく；適宜、１つまたはそれ以上の異なる分子構造の活性な化学物質を有するその他の活性な医薬成分が含まれていてもよい医薬組成物中で用いられうる。
【００４５】
好ましくは、Ｎ−２形態は、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンまたはハイブリッドＰＸＲＤパターンに存在しない余分なピークから生じる実験で測定された粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにおいて、合計ピーク面積の１０％以下、好ましくは５％以下、より好ましくは２％以下によって示されるような実質的に純粋な相均一性を有する。最も好ましくは、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンに存在しない余分なピークから生じる、実験で測定したＰＸＲＤパターンにおける合計ピーク面積の１％以下の実質的に純粋な相均一性を有する結晶形である。
【００４６】
例えば、Ｎ−２形態は、実質的に純粋な形態で提供されていてもよく、実質的に純粋は、９０重量％以上純粋、好ましくは９５重量％以上純粋、ならびにより好ましくは９９重量％以上純粋である。
【００４７】
異なる実施態様において、本質的に化合物Ｉの形態Ｎ−２からなる組成物が提供される。この実施態様の組成物には、組成物中の化合物ＩのＭＳＡ塩の重量に基づいて化合物Ｉの形態Ｎ−２の少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％、より好ましくは少なくとも９９重量％が含まれていてもよい。
【００４８】
本発明はまた、化合物ＩのＭＳＡ塩が形態Ｎ−１である化合物Ｉの結晶形；および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。前記医薬組成物には、実質的に純粋な形態で形態Ｎ−２が含まれうる。
【００４９】
本発明はまた、化合物ＩのＭＳＡ塩が形態Ｎ−２である化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形；および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。前記医薬組成物には、実質的に純粋な形態で形態Ｎ−２が含まれうる。
【００５０】
本発明は、増殖性疾患の治療を必要とする哺乳類に、治療上有効量の化合物Ｉ（ここで、化合物ＩのＭＳＡ塩は、形態Ｎ−２および／または形態Ｎ−１を含むＭＳＡ塩の結晶形で供される）を投与することを特徴とする、増殖性疾患の治療方法をさらに提供する。好ましくは、哺乳類はヒトである。前記方法は、化合物ＩのＭＳＡ塩が本質的に形態Ｎ−１からなる化合物Ｉを投与することを特徴としていてもよい。あるいは、前記方法は、化合物ＩのＭＳＡ塩が本質的に形態Ｎ−２からなる化合物ＩのＭＳＡ塩を投与することを特徴としていてもよい。
【００５１】
本明細書に記載の２つの多形相の単位格子および結晶構造は、多くの類似性を示す。両形態は、広範囲の水素結合／静電相互作用を有する分子の緻密層を含有するが、層間の相互作用は比較的弱い。層間の領域にはまた、約５０Å3／分子の空間が含まれる。２つの多形のＰＸＲＤパターンは類似しているが、いくつかの特有の低角度ピーク（２シータ範囲で５〜１０度）によって容易に区別され；一方の形態がピークである場合、もう一方の形態はピークではなく、逆も同様である。従来の装置を用いると、２シータ範囲の５〜１０度の範囲で非常に弱いか、またはピークなしを示すが、残りのパターンが２つの公知の多形に非常に類似する密接に関連したパターンの物質もまた存在する。強力／高分解能な回折計を用いたさらなる実験により、２つの多形のうちの１つまたは両方の面間隔（d-spacing）に特徴を有する５〜１０度の２シータにおける小さなピークが明らかにされた。実際に、このような物質は、低い角度領域において、様々なピークの高さと幅であらゆる種類のパターンを示す。単一の結晶回折パターンおよび粉末パターン指標に基づくと、実測された範囲パターンは、様々な量の積層欠陥を含有する物質から生じるものと理解することができる。全てのピークが鋭いパターンは、積層欠陥が非常に少ないことを意味し、一方で、重要なピークの広がったパターンは、かかる欠陥が多いことを意味する。多くの「区別できる」ＰＸＲＤパターンが存在しているが、ＭＳＡ塩の２つの多形相のみが実測された。結晶物質Ｎ−１／Ｎ−２のＰＸＲＤには、図３が含まれる。このＰＸＲＤは、本発明の一部として考慮される図３に特に示されていない異なるピーク強度が存在しうるため、限定されるものではない。
【００５２】
用途および有用性
化合物Ｉの結晶形は、現在の譲受人に譲渡され、出典明示によりその全体が本明細書に取り込まれる米国特許第７，５３４，７９２号に開示されるように用いられ得る。特に、これらの形態は、Ｆｌｔ−３（Ｆｍｅ様キナーゼ３）、Ｔｉｅ−２、ＣＤＫ２、ＶＥＧＦＲ、ＦＧＦＲおよびＩＧＦＲキナーゼなどのキナーゼにより調節されるシグナル伝達経路に関連しうる疾患（例えば、急性骨髄性白血病）の治療に用いられ得る。
【００５３】
より具体的には、化合物Ｉの結晶形は、下記：
−前立腺、膵管腺、乳房、結腸、肺、卵巣、膵臓および甲状腺の癌を含む、癌；
−神経芽細胞腫、神経膠芽腫および髄芽腫を含む、中枢および末梢神経系の腫瘍；ならびに
−メラノーマおよび多発性骨髄腫を含む、その他の腫瘍
が含まれる（が、これらに限定されない）様々な癌の治療に有用でありうる。
【００５４】
一般に、阻害剤は、細胞増殖の調節におけるキナーゼの重要な役割のため、異常な細胞増殖を特徴とするいずれかの疾患過程、例えば、良性前立腺肥厚化、家族性大腸ポリープ症、神経線維腫症、肺線維症、関節炎、乾癬、糸球体腎炎、血管形成または血管の外科手術後の再狭窄、肥大性瘢痕形成および炎症性腸疾患の治療に有用でありうる可逆性細胞増殖抑制剤として作用しうる。
【００５５】
化合物Ｉの結晶形は、チロシンキナーゼ活性の高い発生率を有する腫瘍、例えば、前立腺、結腸、脳、甲状腺および膵臓の腫瘍などの治療に特に有用でありうる。また、本発明の化合物は、肉腫および小児肉腫の治療に有用でありうる。本発明の化合物の組成物（または組み合わせ）の投与によって、哺乳類宿主における腫瘍の発生が減少される。
【００５６】
活性成分を含有する本発明の医薬組成物は、経口用途に適当な形態、例えば、錠剤、トローチ、トローチ剤、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒剤、乳濁液、硬もしくは軟カプセル剤、またはシロップもしくはエリキシル剤でありうる。経口用途を目的とした組成物は、医薬組成物の製造の技術分野で公知の方法によって調製され得、かかる組成物は、医薬的に洗練され、受け入れられやすい製剤を提供するために、甘味料、香料、着色剤および保存剤からなる群から選択される１つまたはそれ以上の薬剤を含有していてもよい。
【００５７】
経口用途のための製剤はまた、活性成分が不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合される硬ゼラチンカプセル剤として提供されうるか、あるいは活性成分がポリエチレングリコールなどの水溶性担体、または落花生油、液体パラフィンもしくはオリーブ油などの油媒体と混合される軟ゼラチンカプセル剤として提供されうる。
【００５８】
前記医薬組成物は、滅菌注射水溶液の形態でありうる。用いられうる許容可能なベヒクルおよび溶媒は、水、リンガー溶液および等張性塩化ナトリウム溶液である。
【００５９】
滅菌注射製剤はまた、活性成分が油相に溶解されている滅菌注射用水中油型マイクロエマルションでありうる。例えば、活性成分は、大豆油およびレシチンの混合液中に最初に溶解されうる。次いで、油性溶液を水およびグリセロール混合液中に入れ、処理してマイクロエマルションを調製する。
【００６０】
注射溶液またはマイクロエマルションは、局所ボーラス注入によって患者の血流に注入されうる。あるいは、本化合物の一定の血中濃度を維持するように溶液またはマイクロエマルションを投与するのに有効でありうる。かかる一定濃度を維持するために、持続静脈送達装置が利用されうる。かかる装置の一例は、Ｄｅｌｔｅｃ ＣＡＤＤ−ＰＬＵＳ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ５４００静脈ポンプである。
【００６１】
前記医薬組成物は、筋肉内および皮下投与のための滅菌注射溶液または油性懸濁液の形態でありうる。この懸濁液は、上記に記載される適当な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤を用いて公知技術によって製剤化されうる。
【００６２】
本発明による化合物がヒト対象に投与されると、１日の投与量は、通常、年齢、体重、性別および各患者の反応性、ならびに患者の症状の重症度に応じて一般に変動する用量を用いて、処方医師によって決定される。
【００６３】
固定用量として製剤化される場合、かかる併用剤は、上記に記載される用量範囲内で本発明の化合物、ならびにその認可された用量範囲内でその他の医薬的に活性な薬剤または治療を用いる。式Ｉの化合物のＭＳＡ塩はまた、併用剤が不適切である場合、公知の抗癌剤もしくは細胞毒性剤とともに連続的に投与されうる。本発明は、投与の順番で限定されるものではなく；式Ｉの化合物のＭＳＡ塩は、公知の抗癌剤もしくは細胞毒性剤の投与前もしくは後のいずれかに投与されてもよい。
【００６４】
本化合物は、単回投与または２〜４回の分割投与で、約０.０５から２００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ／日以下の用量範囲で投与されうる。
【００６５】
典型的には、医薬的に活性な物質の固形物は、医薬的に活性な物質の製造、安定性および／または効力が固形物に依存しうるため、錠剤もしくはカプセル剤のような固形製剤の調製において重要である。一般に、結晶形態は、例えば、溶解性、密度、溶解速度および安定性などの均一な特性を有する医薬的に活性な物質を提供する。本発明において、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形態Ｎ−１、Ｎ−２およびＮ−１／Ｎ−２は、安定な経口製剤の提供および／またはそれを必要とする患者への化合物ＩのＭＳＡ塩の形態の送達のための錠剤またはカプセル剤の製造に適した特性を有する。
【００６６】
製造および特性測定の方法
結晶形態は、例えば、適当な溶媒からの結晶化もしくは再結晶化、昇華、融液からの成長、別の相からの固体相変態、超臨界流体からの結晶化およびジェット噴霧を含む様々な方法によって製造されうる。溶媒混合物からの結晶形態の結晶化または再結晶化のための技術には、例えば、溶媒の蒸発、溶媒混合物の低温化、分子および／またはその塩の過飽和溶媒混合物の種晶化、溶媒混合物の凍結乾燥、ならびに貧溶媒（対溶媒（countersolvent））の溶媒混合物への添加が含まれる。ハイスループット結晶化技術は、多形を含む結晶形態を調製するために用いられ得る。
【００６７】
多形を含む薬物の結晶、薬物の結晶の製造方法および特性測定方法は、Byrn, S.R. et al., Solid−State Chemistry of Drugs, 2nd Edition, SSCI, West Lafayette、 Indiana (1999)に記載される。
【００６８】
溶媒を用いる結晶化技術に関して、溶媒の選択は、典型的に、化合物の溶解性、化合物の安定性および結晶化技術などの１つまたはそれ以上の因子に依存する。合成に用いられる溶媒は、しばしば、操作を容易にするために選択される。溶媒の組み合わせは、例えば、化合物を第１の溶媒に溶解させて溶液を得て、続いて貧溶媒を加えて溶液中の化合物の溶解性を減少させ、結晶を形成させうる。貧溶媒は、化合物が低溶解性を示す溶媒である。
【００６９】
結晶を調製するためのある方法において、化合物は、適当な溶媒中で懸濁および／または攪拌されてスラリーを生じ、加熱されて溶解が促進されうる。用語「スラリー」は、本明細書で用いられるように、固形中でさらなる量の化合物を含有して、所定温度で化合物および溶媒の不均一混合物を生じうる化合物の飽和溶液を意味する。
【００７０】
種晶は、結晶化を促進するために結晶化混合物に加えられうる。播種（seeding）は、特定の多型の増殖を制御するために、または結晶生成物の粒径分布を制御するために用いられ得る。よって、必要とされる種晶の量の算出は、例えば、Mullin, J.W. et al., "Programmed Cooling of Batch Crystallizers," Chemical Engineering Science, 26:369-377 (1971)に記載されるように、利用可能な種晶のサイズおよび平均生成物粒子の所望サイズに依存する。一般に、小さいサイズの種晶は、バッチ中で結晶の成長を効率的に制御するために必要とされる。小さいサイズの種晶は、大きい結晶をふるいにかけるか、または粉砕することによって作り出されうる。結晶の粉砕は、所望の結晶形からの結晶化度に変化を一切生じないよう（すなわち、アモルファスまたは別の多型への変化）に留意しなければならない。
【００７１】
冷却した結晶化混合物は、減圧下で濾過され、単離された固形物は、冷却した再結晶化溶媒などの適当な溶媒で洗浄され、窒素パージ下で乾燥されて所望の結晶形を生じうる。単離された固形物は、生成物の好ましい結晶形の形成を確認するために、固体核磁気共鳴、示差走査熱量測定、粉末Ｘ線回折などの適当な分光技術または分析技術によって分析されうる。生じた結晶形は、結晶化方法で元々用いられる化合物の重量を基準にして、約７０重量％以上の単離収率、好ましくは９０重量％以上の単離収率の量で生成されうる。生成物は、必要に応じて、共粉砕されうるか、またはメッシュスクリーンに通して生成物の塊を崩す（delump）。
【００７２】
結晶形は、化合物ＩのＭＳＡ塩を調製するための最終工程の反応媒体から直接調製されうる。これは、例えば、最終工程段階で、化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形が結晶化されうる溶媒または溶媒混合物を用いることによって達成されうる。あるいは、結晶形は、蒸留または貧溶媒添加技術によって得られうる。このための適当な溶媒としては、例えば、アルコール類などのプロトン性極性溶媒およびケトン類などの非プロトン性極性溶媒を含む前記の非極性溶媒および極性溶媒が挙げられる。
【００７３】
試料中の１種類より多い結晶形および／または多型の存在は、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）または固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）分光法などの技術によって決定されうる。例えば、実験で測定されたＰＸＲＤパターンと、シミュレーションされたＰＸＲＤパターンとの比較での余分なピークの存在は、試料中の１種類より多い結晶形および／または多型を示しうる。シミュレーションされたＰＸＲＤは、単結晶Ｘ線データから算出されうる。Smith, D.K., "A FORTRAN Program for Calculating X-Ray Powder Diffraction Patterns," Lawrence Radiation Laboratory, Livemore, California, UCRL-7196 (April 1963)を参照のこと。
【００７４】
本発明による化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形は、当業者に周知である様々な技術を用いて特徴付けられうる。化合物ＩのＭＳＡ塩の結晶形は、固定した分析温度での形態の単一結晶の単位格子測定に基づいて、標準的な操作条件および温度下で行われる単結晶Ｘ線回折法を用いて特徴付けられ、区別されうる。おおよその単位格子定数であるオングストローム（Å）、ならびに結晶格子体積、空間群、１格子あたりの分子および結晶密度は、例えば、２５℃の試料温度で測定され得る。単位格子の詳細な説明は、出典明示により本明細書に取り込まれる、Stout et al., Chapter 3, X−Ray Structure Determination： A Practical Guide, Macmillan Co., New York (1968)で提供される。
【００７５】
あるいは、結晶格子内の空間関係での原子の特有の配置は、実測された分率原子座標によって特徴付けられうる。結晶構造を特徴付ける別の方法は、回折プロファイルが、純粋な粉末物質を示すシミュレーションされたプロファイルと比較される、粉末Ｘ線回折分析によるものであり、好ましくは、両者は、同一の分析温度、および一連の２θ値（通常、４またはそれ以上）として特徴付けられる対象の形態についての測定で行われる。
【００７６】
形態を特徴付けるその他の方法として、固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）および熱重量分析（ＴＧＡ）などが用いられうる。これらのパラメータはまた、対象の形態を特徴付けるために組み合わせて用いられうる。ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１およびＮ−２のためのｓｓＮＭＲには、図８および９が含まれる。
【００７７】
ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１の特徴的な化学シフト（ｐｐｍ1）は下記のとおりである：
【表４】
1外部ＴＭＳとの比較＝０．０ｐｐｍ
【００７８】
ＭＳＡ塩の形態Ｎ−２の特徴的な化学シフト（ｐｐｍ1）は下記のとおりである：
【表５】
1外部ＴＭＳとの比較＝０．０ｐｐｍ
【００７９】
結晶形は、下記に記載の試験方法のうちの１つまたはそれ以上を用いて分析した。
【００８０】
単結晶Ｘ線測定（Ｎ−１）
グラファイトモノクロメーターでＣｕ Ｋα照射（λ＝１．５４０５６Å）を備えた、Ｂｒｕｋｅｒ ＳＭＡＲＴ ２Ｋ ＣＣＤ回折計を用いて、室温で回折データを得た。完全な一式のデータを、結晶と検出器の距離を４.９８ｃｍで、２θ範囲にわたり、ωスキャンモードを用いて得た。経験的な吸収補正には、回折計（Bruker AXS. 1998, SMART and SAINTPLUS. Area Detector Control and Integration Software, Bruker AXS, Madison, Wisconsin, USA）を有するＳＡＤＡＢＳルーティン（routine）を利用した。。最終単位格子パラメータを、全てのデータを用いて決定した。
【００８１】
全ての構造は、直接的な方法により解析し、完全行列最小二乗技術により精密化し、ＳＨＥＬＸＴＬソフトウェアパッケージ（Sheldrick, G.M., 1997, SHELXTL. Structure Determination Programs. Version 5.10, Bruker AXS, Madison, Wisconsin, USA）を用いた。精密化において最小化した関数は、Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2であった。Ｒは、Σ｜｜Ｆo｜−｜Ｆc｜｜／Σ｜Ｆo｜とし、Ｒw＝［Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2／Σw｜Ｆo｜2］1/2（式中、ｗは、観測強度における誤差に基づく適当な重み関数である）と定義する。示差ＦＯＵＲＩＥＲ（登録商標）マップ（difference FOURIER map）を精密化の全段階で試験した。全ての非水素原子を異方性熱置換（anisotropic thermal displacement）パラメータで精密化した。水素結合で結合した水素原子を、最終的な示差ＦＯＵＲＩＥＲ（登録商標）マップに位置づけ、その他の水素原子の位置は、標準的な結合の長さと角度を用いて理論上の配置から算出した。それらを等方的な温度因子に割り当て、固定パラメータとともに構造因子計算値に含めた。
【００８２】
単結晶Ｘ線測定（Ｎ−２）
データは、Ｂｒｕｋｅｒ−Ｎｏｎｉｕｓ（BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway, Madison, WI 53711 USA）ＣＡＤ４連続回折計で得た。単位格子パラメータは、２５高角反射の実験用回折計装置の最小二乗解析により得た。強度は、θ−２θ可変走査法による一定温度でのＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いて測定し、ローレンツ偏光因子についてのみ補正した。バックグラウンド計数は、走査時間の半分で走査の両端で収集した。あるいは、単結晶データは、ＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いてＢｒｕｋｅｒ−Ｎｏｎｉｕｓ Ｋａｐｐａ ＣＣＤ２０００システムで収集した。測定した強度データの索引付けおよび処理は、集積プログラムスイート(Collect program suite)（Collect Data collection and processing user interface: Collect: Data collection software, R. Hooft, Nonius B.V.(1998)）中のＨＫＬ２０００ソフトウェアパッケージ（Otwinowski, Z. et al. in Macromolecular Crystallography, Vol. 276, pp. 307-326, Academic, NY, publ., Carter, W.C. Jr. et al., eds. (1997)）を用いて実行した。あるいは、単結晶データは、ＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いてＢｒｕｋｅｒ−ＡＸＳ ＡＰＥＸ２ ＣＣＤシステムで収集した。測定した強度データの索引付けおよび処理は、ＡＰＥＸ２ソフトウェアパッケージ／プログラムスイート（APEX2 Data collection and processing user interface: APEX2 User Manual, v1.27; BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway Madison, WI 53711 USA）で実行した。
【００８３】
必要であれば、結晶は、データ収集の間、オックスフォード極低温システム（Oxford Cryosystems Cryostream cooler: Cosier, J. et al., J. Appl. Cryst., 19:105 (1986)）の冷却流で冷却した。
【００８４】
構造は、直接的な方法によって解析し、マイナー部分に改良を施したＳＤＰ（SDP, Structure Determination Package, Enraf-Nonius, Bohemia NY 11716. ＳＤＰソフトウェアにおけるｆ’およびｆ’’を含む散乱因子は、"International Tables for Crystallography", Vol. IV, Tables 2.2Aおよび2.3.1, Kynoch Press, Birmingham, England (1974)から取得した）ソフトウェアパッケージまたは結晶学パッケージＭＡＸＵＳ（maXus solution and refinement software suite: S. Mackay, C.J. Gilmore, C. Edwards, M. Tremayne, N. Stewart, K. Shankland. ｍａＸｕｓ:回折データからの結晶構造の解析および精密化のためのコンピュータプログラム）もしくはＳＨＥＬＸＴＬ（（ＡＰＥＸ２データ収集および処理ユーザーインターフェイス: APEX2 User Manual, Vol. 27; BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway Madison, WI 53711 USA）のいずれかを用いて実測した反射に基づいて精密化した。
【００８５】
得られた原子パラメータ（座標および温度因子）は、完全行列最小二乗法により精密化した。精密化において最小化した関数は、Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2であった。Ｒは、Σ｜｜Ｆo｜−｜Ｆc｜｜／Σ｜Ｆo｜とし、Ｒw＝［Σw（｜Ｆo｜−｜Ｆc｜）2／Σw｜Ｆo｜2］1/2（式中、ｗは、観測強度における誤差に基づく適当な重み関数である）と定義する。距離マップは、精密化の全段階で試験した。水素原子は、等方性温度因子を用いて理論上の位置に導入したが、水素パラメータは変えなかった。
【００８６】
特に示されていない限り、シミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンは、データ収集温度で単結晶原子パラメータから作成した。
【００８７】
ハイブリッドＰＸＲＤパターン
「ハイブリッド」でシミュレーションされた粉末Ｘ線パターンは、文献（Yin. S. et al., American Pharmaceutical Review, 6(2):80 (2003)）に記載されるように調製した。室温の格子パラメータは、ＣｅｌｌＲｅｆｉｎｅ．ｘｌｓプログラムを用いて格子精密化を行うことによって得た。プログラムへの入力は、実験上の室温粉末パターンから得られた約１０リフレクション（reflection）の２シータ位置を含み；対応するミラー指数ｈｋｌを低温で収集した単結晶データに基づいて割り当てた。新規な（ハイブリッド）ＰＸＲＤは、低温で決定した分子構造を方法の第一ステップで得た室温の格子に挿入することによって、（ＡｌｅｘまたはＬａｔｔｉｃｅＶｉｅｗのいずれかのソフトウェアプログラムによって）算出した。この分子は、分子のサイズと形および格子本来の分子の位置を保ちつつ、分子間距離が格子と共に広がるように挿入される。
【００８８】
粉末Ｘ線回折測定
Ｘ線粉末回折データは、Ｂｒｕｋｅｒ Ｃ２ ＧＡＤＤＳを用いて得た。照射はＣｕＫα（４０ＫＶ，５０ｍＡ）であった。試料−検出器間距離は、１５ｃｍであった。粉末試料は、１ｍｍまたはそれ以下の直径の密封したガラスキャピラリー中に置き、前記キャピラリーをデータ収集の間に回転させた。データは、少なくとも１０００秒の試料露出時間で３≦２θ≦３５°について収集した。得られた二次元の回折弧を積分して、３〜３５°２θの範囲で０．０２°２θの刻み幅（step size）を用いて、従来の一次元ＰＸＲＤパターンを作成した。
【００８９】
ＤＳＣ
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）実験は、ＴＡ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳ（登録商標）モデルＱ１０００または２９２０で行った。試料（約２〜６ｍｇ）の重量をアルミニウムパン内で測定し、１００分の１ミリグラムまで正確に記録し、ＤＳＣに移した。装置は、窒素ガスを用いて５０ｍＬ／分でパージした。室温から３００℃の間で１０℃／分の加熱速度でデータを収集した。下向きの吸熱ピークをプロットした。
【００９０】
ＴＧＡ
熱重量分析（ＴＧＡ）実験は、ＴＡ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳ（登録商標）モデルＱ５００もしくは２９５０で行った。容器の重量を測って試料（約７〜３５ｍｇ）を白金皿に載せた。試料の重量を正確に測定し、装置により１０００分の１ミリグラムまで記録した。加熱炉は、窒素ガスを用いて１００ｍＬ／分でパージした。データは、室温から３００℃の間で１０℃／分の加熱速度で収集した。
【００９１】
固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）
全ての固体Ｃ−１３ ＮＭＲ測定は、Ｂｒｕｋｅｒ ＤＳＸ−４００、４００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計を用いて行った。高分解能スペクトルは、捕捉の間にＴＰＰＭプロトンを脱カップリングする傾斜（ramped）交差分極（ＲＡＭＰ−ＣＰ）手順を用いて得た（Bennett, A.E. et al, J. Chem. Phys.,103:6951 (1995); Metz, G. et al., J. Magn. Reson. A, 110:219-227 (1994)）。試料の約７０ｍｇを４ｍｍのキャニスターデザインジルコニア（canister-design zirconia rotor）に充填し、各実験に用いた。化学シフト（δ）は、３８．５６ｐｐｍに設定した高周波共鳴で外部基準のアダマンタンを基準とした（Earl, W.L. et al., J. Magn. Reson., 48:35-54 (1982)）。
【実施例１】
【００９２】
実施例
本発明は、発明の好ましい実施態様である下記の実施例によってさらに説明される。これらの実施例は、例示であって限定するものではなく、本願に添付された特許請求の範囲によって定義される発明の精神および範囲にあるその他の実施態様が存在しうることが理解されるべきである。
【００９３】
化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−１の結晶化条件：
方法１：
６８０ｍｇの化合物Ｉ（遊離塩基）を４．０ｍｌのエタノール中に溶解させた。１４９ｍｇのメタンスルホン酸（＞９９％純度）を１．０ｍｌのエタノール中に溶解させた。前記酸溶液を前記遊離塩基溶液に加えた。得られた混合物を０．２μｍのナイロンシリンジフィルターに通して濾過し、Ｎ2パージ環境下で蒸発させた。回収した固体試料を過剰量のアセトニトリルで洗浄し、真空濾過により単離してオフホワイト色の粉末を得た。
【００９４】
方法２：
２４ｍｇの化合物Ｉ（遊離塩基）を０．４ｍｌのアセトニトリル中に溶解させた。等モル量のアセトニトリル中のメタンスルホン酸溶液（１．０Ｍ）を遊離塩基溶液に加えた。得られた溶液に蓋をし、周囲条件で保存した。固体試料が数時間以内に溶液から晶出した。
【００９５】
化合物ＩのＭＳＡ塩の形態Ｎ−２の結晶化条件：
方法１：
１２４ｍｇの化合物Ｉ（遊離塩基）を０．８ｍｌのエタノール中に溶解させた。２６ｍｇのメタンスルホン酸（＞９９％純度）を０．２ｍｌのエタノール中に溶解させた。当該酸溶液を遊離塩基溶液に加えた。得られた溶液を０.４５μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターに通して濾過し、周囲条件でゆっくり蒸発させて固体を得た。
【００９６】
方法２：
化合物Ｉ（遊離塩基）およびメタンスルホン酸の１：１混合物を含有するアセトニトリル溶液を、周囲条件で急速に蒸発させて固体を得た。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
実質的に図３に示されるような形態Ｎ−１および／またはＮ−２のＰＸＲＤ特性を有する化合物Ｉ：
【化１】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形。
【請求項２】
前記形態Ｎ−１および／またはＮ−２が、（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）の２θ値：５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有し、前記結晶形の測定が、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項３】
形態Ｎ−１を含む化合物Ｉ：
【化２】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形。
【請求項４】
本質的に前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１からなる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項５】
前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１が、実質的に純粋な形態である、請求項３に記載の結晶形。
【請求項６】
前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１が、実質的に図１に示されるようなシミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項７】
前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１が、実質的に図１に示されるような実測された粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項８】
前記形態Ｎ−１が、（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）の２θ値：５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有し、前記結晶形の測定が、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項９】
前記形態Ｎ−１が、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．３０３２Å
ｂ＝９．５９６０Å
ｃ＝１８．０１４１Å
α＝９０．０°
β＝１０４．８１４°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２１
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
（ここで、前記結晶形の測定は、約２５℃の温度で行われる）
と実質的に同等の単位格子パラメータによって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項１０】
前記形態Ｎ−１が、下記：：
ａ）格子サイズ：
ａ＝１６．３０３２Å
ｂ＝９．５９６０Å
ｃ＝１８．０１４１Å
α＝９０．０°
β＝１０４．８１４°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２１
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
（ここで、前記結晶形の測定は、約２５℃の温度で行われる）、
ｂ）５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１から選択される（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）の２θ値に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピーク（前記結晶形の測定は、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる）；および／または
ｃ）約１００℃の温度まで無視できる重量減少を示す熱重量分析サーモグラム
のうちの１つまたはそれ以上によって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項１１】
形態Ｎ−２を含む、化合物Ｉ：
【化３】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形。
【請求項１２】
前記形態Ｎ−２が、５．１±０．１、６．０±０．１、７．４±０．１、９．３±０．１、１０．２±０．１、１０．５±０．１、１１．０±０．１、１１．８±０．１、１４．５±０．１、１５．３±０．１、１７．９±０．１、２１．６±０．１の２θ値（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有し、前記結晶形の測定が、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる、請求項１１に記載の結晶形。
【請求項１３】
前記形態Ｎ−２が、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．２５０Å
ｂ＝９．５７６Å
ｃ＝３４．７３６Å
α＝９０．０°
β＝９０．０°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２１２１２１
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
（ここで、前記結晶形の測定は、約−５０℃の温度で行われる）
と実質的に同等の単位格子パラメータによって特徴付けられる、請求項１１に記載の結晶形。
【請求項１４】
請求項１に記載の結晶形および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
請求項２に記載の結晶形および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１１に記載の結晶形および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
増殖性疾患の治療を必要とする哺乳類に、治療上有効量の化合物Ｉ
【化４】
（Ｉ）
を投与することを特徴とする増殖性疾患の治療方法であって、前記化合物Ｉが請求項１に記載の結晶形として提供されるものである方法。
【請求項１８】
前記増殖性疾患が、非小細胞性肺癌または膵臓癌である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１】
実質的に図３に示されるような形態Ｎ−１および／またはＮ−２のＰＸＲＤ特性を有する化合物Ｉ：
【化１】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形。
【請求項２】
前記形態Ｎ−１および／またはＮ−２が、（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）の２θ値：５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有し、前記結晶形の測定が、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項３】
形態Ｎ−１を含む化合物Ｉ：
【化２】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形。
【請求項４】
本質的に前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１からなる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項５】
前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１が、実質的に純粋な形態である、請求項３に記載の結晶形。
【請求項６】
前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１が、実質的に図１に示されるようなシミュレーションされた粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項７】
前記ＭＳＡ塩の形態Ｎ−１が、実質的に図１に示されるような実測された粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項８】
前記形態Ｎ−１が、（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）の２θ値：５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有し、前記結晶形の測定が、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項９】
前記形態Ｎ−１が、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．３０３２Å
ｂ＝９．５９６０Å
ｃ＝１８．０１４１Å
α＝９０．０°
β＝１０４．８１４°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２１
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
（ここで、前記結晶形の測定は、約２５℃の温度で行われる）
と実質的に同等の単位格子パラメータによって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項１０】
前記形態Ｎ−１が、下記：：
ａ）格子サイズ：
ａ＝１６．３０３２Å
ｂ＝９．５９６０Å
ｃ＝１８．０１４１Å
α＝９０．０°
β＝１０４．８１４°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２１
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
（ここで、前記結晶形の測定は、約２５℃の温度で行われる）、
ｂ）５．１±０．１、６．５±０．１、８．５±０．１、１０．１±０．１、１０．５±０．１、１１．３±０．１、１４．４±０．１、１５．２±０．１、１７．８±０．１、１９．７±０．１、２１．６±０．１から選択される（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）の２θ値に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピーク（前記結晶形の測定は、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる）；および／または
ｃ）約１００℃の温度まで無視できる重量減少を示す熱重量分析サーモグラム
のうちの１つまたはそれ以上によって特徴付けられる、請求項３に記載の結晶形。
【請求項１１】
形態Ｎ−２を含む、化合物Ｉ：
【化３】
（Ｉ）
のＭＳＡ塩の結晶形。
【請求項１２】
前記形態Ｎ−２が、５．１±０．１、６．０±０．１、７．４±０．１、９．３±０．１、１０．２±０．１、１０．５±０．１、１１．０±０．１、１１．８±０．１、１４．５±０．１、１５．３±０．１、１７．９±０．１、２１．６±０．１の２θ値（ＣｕＫαλ＝１．５４１８Å）に粉末Ｘ線回折パターンの特徴的ピークを有し、前記結晶形の測定が、ＮＩＳＴまたは他の適した標準物質で校正した２θを用いて、スピニングキャピラリーを備えた回折計（ＣｕＫα）で収集した高質パターンに基づいて室温で行われる、請求項１１に記載の結晶形。
【請求項１３】
前記形態Ｎ−２が、下記：
格子サイズ：
ａ＝１６．２５０Å
ｂ＝９．５７６Å
ｃ＝３４．７３６Å
α＝９０．０°
β＝９０．０°
γ＝９０．０°
空間群：Ｐ２１２１２１
化合物Ｉ分子／非対称ユニット：２
（ここで、前記結晶形の測定は、約−５０℃の温度で行われる）
と実質的に同等の単位格子パラメータによって特徴付けられる、請求項１１に記載の結晶形。
【請求項１４】
請求項１に記載の結晶形および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
請求項２に記載の結晶形および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１１に記載の結晶形および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
増殖性疾患の治療を必要とする哺乳類に、治療上有効量の化合物Ｉ
【化４】
（Ｉ）
を投与することを特徴とする増殖性疾患の治療方法であって、前記化合物Ｉが請求項１に記載の結晶形として提供されるものである方法。
【請求項１８】
前記増殖性疾患が、非小細胞性肺癌または膵臓癌である、請求項１７に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【公表番号】特表２０１３−５１８８８９（Ｐ２０１３−５１８８８９Ａ）
【公表日】平成２５年５月２３日（２０１３．５．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５２０６７（Ｐ２０１２−５５２０６７）
【出願日】平成２３年２月３日（２０１１．２．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２３５２１
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０９７３３１
【国際公開日】平成２３年８月１１日（２０１１．８．１１）
【出願人】（３９１０１５７０８）ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー (494)
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年５月２３日（２０１３．５．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年２月３日（２０１１．２．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２３５２１
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０９７３３１
【国際公開日】平成２３年８月１１日（２０１１．８．１１）
【出願人】（３９１０１５７０８）ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー (494)
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
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