イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの塩
本発明は、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト（ｏｃｔ）−５−エン−２−イルエステルの結晶塩、その製造方法、当該結晶塩を含む医薬組成物、及び医薬、特にチャンネルブロッカーとしてのそれらの使用に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
塩結晶型
本発明は、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト（ｏｃｔ）−５−エン−２−イルエステル（以下、「化合物」とも記載する。）又はそのエナンチオマーの新規な塩結晶型、その製造方法、当該塩結晶型を含む医薬組成物、及び慢性安定狭心症、高血圧、（腎臓及び心臓の）虚血、心房細動を含む不整脈、心肥大又はうっ血性心不全の治療又は予防におけるカルシウムチャンネルブロッカーとしてのそれらの使用に関する。本発明の当該塩結晶型はまた、単独で、又は医薬組成物中で、人及び他の哺乳類における腎臓病、糖尿病及びその合併症、高アルドステロン症、てんかん、神経因性疼痛又は癌の治療のために使用してもよい。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
多くの心血管疾患は、心臓及び血管平滑筋細胞の細胞膜を介した、異常に上昇したカルシウムの流入の結果としてのカルシウム過負荷と関連づけられる。細胞外カルシウムがこれらの細胞内に入る３つの主要な経路がある：１）受容体―活性化型カルシウムチャンネル、２）リガンド依存型カルシウムチャンネル、３）電圧駆動型カルシウムチャンネル（ＶＯＣｓ）。
【０００３】
ＶＯＣｓは、６つの主要なカテゴリーに分類される：Ｌ（Ｌｏｎｇ−ｌａｓｔｉｎｇ）、Ｔ（Ｔｒａｎｓｉｅｎｔ）、Ｎ（Ｎｅｕｒｏｎａｌ）、Ｐ（プルキンエ細胞）、Ｑ（Ｐの後）及びＲ（Ｒｅｍａｉｎｉｎｇ又はＲｅｓｉｓｔａｎｔ）。
【０００４】
Ｌ型カルシウムチャンネルは、カルシウムの内側への移動を司り、心臓及び血管平滑筋細胞の収縮を引き起こすため、心血管系分野における、これらのチャンネルのブロッカーの適用が示唆される。このような見地から、Ｌ型カルシウムチャンネルは、６０年代初期より、医療において用いられており、現在、収縮期拡張期高血圧及び狭心症の一次治療として推奨されている。
【０００５】
Ｔ型カルシウムチャンネルは、冠状及び抹消脈管、洞結節及びプルキンエ繊維、脳、副腎等の種々の組織及び腎臓において見られる。この広範な分布は、Ｔ型カルシウムチャンネルが心血管保護作用を有し、睡眠障害、気分障害、うつ病、偏頭痛、高アルドステロン血症、早期分娩、尿失禁、アルツハイマー病等の脳老化又は神経変性障害に対し効果を有することを示唆する。
【０００６】
最初のＬ型及びＴ型カルシウムチャンネルブロッカーであるＭｉｂｅｆｒａｄｉｌ（Ｐｏｓｉｃｏｒ（登録商標））は、主にＬチャンネルを標的とするカルシウムチャンネルブロッカーに対し優位な効果を示した。Ｍｉｂｅｆｒａｄｉｌは、Ｌチャンネルブロッカーでよく見られる、変力作用、反射性頻脈、血管収縮性ホルモンの分泌又は末梢性浮腫等の好ましくない副作用を示すことなく、高血圧及び狭心症の治療に用いられた。加えて、ｍｉｂｅｆｒａｄｉｌは、潜在的な心筋保護効果（Ｖｉｌｌａｍｅ、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ １５、４１−２８、２００１；Ｒａｍｉｒｅｓ、Ｊ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｃａｒｄｉｏｌ １９９８、３０、４７５−８３）、腎保護作用（Ｈｏｎｄａ、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ １９、２０３１−３７、２００１）を示し、また、心不全の治療において有効な効果を示した（Ｃｌｏｚｅｌ、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ １９９９、１１１、４２９−３７、）。
【０００７】
このようなプロファイルを持つ化合物に対する大きな需要にもかかわらず、許容できないＣＹＰ ３Ａ４薬物間相互作用のため、ｍｉｂｅｆｒａｄｉｌは、１９９８年に（上市から１年後）市場から回収された。さらに、ＥＣＧ異常（すなわち、ＱＴ延長）及びＭＤＲ−１介在ジゴキシン流出との相互作用も報告された（ｄｕ Ｓｏｕｉｃｈ、Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ６７、２４９−５７、２０００；Ｗａｎｄｅｌ、Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ ２０００、２８、８９５−８、）。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
「化合物」（イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル）の塩結晶型が、特定の条件下において見出されることがわかった。「化合物」の当該塩結晶型は新規であり、そして、特に「化合物」の遊離塩基（ＷＯ２００８／１３２６７９）又は二塩酸塩と比べて有利な特性を有するかもしれない。そのような利点は、より良い流動特性、より良い溶解性、より小さい吸湿性、製造におけるより良い再現性（例えば、より良いろ過パラメーター、形成のより良い再現性、より良い沈降性）、制御された形態学的特性及び／又はより良い長期安定性を含むかもしれない。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、参照実施例Ｓ１から得られた結晶型における、「化合物」の二塩酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：３．０２°（１００％）、９．１９°（８８％）、９．７７°（８１％）、１０．８１°（１６％）、１２．５０°（１９％）、１２．９４°（２１％）、１３．１５°（３０％）、１４．３０°（２６％）、１４．６２°（２４％）、１５．３６°（６６％）、１６．１４°（３７％）、１７．０８°（７３％）、１８．１２°（７６％）、１９．４６°（４５％）、１９．７１°（４０％）、２０．５４°（３５％）、２０．９２°（３１％）、２１．１７°（２９％）、２１．５６°（４１％）、２２．４７°（２９％）、２２．９０°（２２％）、２３．９９°（２４％）、２５．４１°（５２％）、２６．０５°（３１％）、２６．９０°（３２％）、２７．２８°（２４％）及び２８．４５°（３７％）。
【図２】図２は、実施例Ｓ２から得られた結晶型における、「化合物」の二メチルスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：３．９７°（１００％）、７．２１°（４２％）、１０．００°（３９％）、１４．０９°（４０％）、１４．４５°（２９％）、１５．９９°（５５％）、１６．３８°（２２％）、１７．１６°（５１％）、１８．１２°（４４％）、１８．３４°（５３％）、１８．６０°（１９％）、１９．３８°（２５％）、２０．６２°（３５％）、２１．０２°（７４％）、２１．７９°（１８％）、２２．２４°（２５％）、２６．６６°（３０％）及び２７．６３°（２９％）。
【図３】図３は、実施例Ｓ３から得られた結晶型における、「化合物」の二トルエンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：４．３５°（３１％）、５．７９°（１００％）、７．４３°（１６％）、８．６２°（１７％）、１０．９３°（１９％）、１１．５１°（３１％）、１３．９８°（３４％）、１５．８１°（２６％）、１８．０６°（３０％）、１９．００°（２０％）、１９．３９°（２１％）、１９．８４°（３１％）、２０．３０°（２５％）及び２５．５１°（２０％）。
【図４】図４は、実施例Ｓ４から得られた結晶型における、「化合物」の硫酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−３０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：２．８５°（１００％）、８．５０°（２１％）、９．５０°（２８％）、１１．７８°（８５％）、１３．２６°（４１％）、１３．６９°（５１％）、１４．１９°（８２％）、１５．７８°（４０％）、１６．４７°（３９％）、１７．１２°（３８％）、１８．９１°（４０％）、１９．４８°（４３％）、２６．７７°（６５％）及び２７．２４°（６３％）。
【図５】図５は、実施例Ｓ５から得られた結晶型における、「化合物」の二マレイン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：５．０７°（２６％）、８．１９°（１２％）、１０．１５°（９３％）、１５．２６°（３９％）、１７．２０°（１２％）、１７．６１°（１８％）、２０．３９°（１００％）、２０．８８°（１２％）、２２．６３°（４７％）、２３．９３°（４３％）、２４．２７°（２６％）、２４．５１°（１３％）、２４．７３°（１７％）、２５．６１°（２１％）、２９．４２°（２５％）及び３２．９３°（１６％）。
【図６】図６は、実施例Ｓ６から得られた結晶型における、「化合物」のセスキ−フマル酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：５．２７°（５７％）、８．０５°（１００％）、１２．９３°（１８％）、１５．２０°（１０％）、１５．５０°（２０％）、１９．４５°（１４％）、２０．３１°（３１％）、２０．６１°（６２％）、２１．１１°（２７％）、２２．７７°（１５％）、２５．４２°（１１％）、２６．２２°（１１％）及び３１．２７°（２１％）。
【図７】図７は、実施例Ｓ７から得られた結晶型における、「化合物」の二臭化水素酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：３．１°（５９％）、６．２°（２８％）、９．３°（１８％）、１４．４°（１１％）、１５．６°（１００％）、１７．３°（３３％）、１８．１°（１５％）、１９．４°（２０％）、２０．０°（３７％）、２１．４°（１４％）、２２．８°（１６％）及び３４．８°（４３％）。
【図８】図８は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」のセスキ−ナフタレン−１，５−ジスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：９．９°（４０％）、１０．４°（１８％）、１２．８°（４２％）、１４．２°（１００％）、１５．０°（７３％）、１８．３°（６８％）、１９°（５４％）、２０．１°（３９％）、２０．６°（４８％）、２１．３°（８３％）、２３．８°（１３％）、２４．９°（１４％）及び２６．２°（２２％）。
【図９】図９は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」の二ベンゼンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：８．１°（１６％）、８．５°（１８％）、１０．９°（２０％）、１１．４°（１６％）、１２．３°（２０％）、１２．６°（３７％）、１２．９°（２２％）、１３．４°（５５％）、１４．６°（３２％）、１５．３°（３７％）、１６．１°（２７％）、１７．５°（７１％）、１７．９°（３７％）、１９．１°（２２％）、１９．４°（２５％）、２０．１°（４６％）、２１．３°（９１％）、２１．８°（４６％）、２２．７°（１００％）、２３．６°（１８％）、２４．５°（２０％）及び２５．５°（２１％）。
【図１０】図１０は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」の二エタンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：９．６°（２５％）、９．９°（２１％）、１０．５°（２３．３％）、１１．２°（２７％）、１１．９°（１７％）、１２．９°（４８％）、１４．５°（５３％）、１５．０°（４０％）、１５．７°（１００％）、１６．５°（６５％）、１７．０°（４０％）、１７．７°（４９％）、１９．０°（６７％）、１９．７°（６９％）、２０．４°（６８％）、２１．５°（５５％）、２２．６°（６７％）及び２３．３°（４７％）。
【図１１】図１１は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」の二ナフタレン−２−スルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：９．８°（９８％）、１１．２°（４５％）、１１．８°（２４％）、１３．７°（２０％）、１４．６°（３３％）、１５．６°（１００％）、１６．９°（９０％）、１９．４°（９６％）、２２．４°（４５％）及び２３．９°（２３％）。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
図の説明
図１〜図１１のＸ線回折ダイアグラムにおいては、屈折角２シータ（２θ）を横軸に、測定値を縦軸にプロットする。
【００１１】
発明の詳細な説明
１） 本発明は、「化合物」（イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル）の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩に関し；当該結晶塩は：
・１当量の「化合物」；
・臭化水素酸、硫酸、マレイン酸、フマル酸、メタンスルホン酸、パラ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸及びエタンスルホン酸から成る群より選択される酸、１〜２当量からなる酸成分；及び
・０〜５当量の水
からなる。
【００１２】
２） 別の態様は、「化合物」が光学的に活性なイソ酪酸 （１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、態様１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１３】
３） 別の態様は、「化合物」が光学的に活性なイソ酪酸 （１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、態様１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１４】
４） 別の態様は、「化合物」が、負の旋光性を有する光学活性形態のイソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、態様１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１５】
５） 別の態様は、当該結晶塩が、０〜３（特に０．５〜３、とりわけ１〜２）当量の水を含む、態様１）〜４）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１６】
６） 別の態様は、当該結晶塩が、０当量の水を含む、態様１）〜４）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１７】
７） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が、１又は２（特に２）当量の臭化水素酸、１又は２当量の硫酸、１又は２（特に２）当量のマレイン酸、１〜２（特に１．５）当量のフマル酸、１又は２（特に２）当量のメタンスルホン酸、１又は２（特に２）当量のパラ−トルエンスルホン酸、１又は２（特に２）当量のベンゼンスルホン酸、１〜２（特に１．５）当量のナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１又は２（特に２）当量のナフタレン−２−スルホン酸又は１又は２（特に２）当量のエタンスルホン酸からなる、態様１）〜６）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１８】
副態様において、当該結晶塩の酸成分は、好ましくは、２当量の臭化水素酸、１又は２当量の硫酸、２当量のマレイン酸、１〜２（特に１．５）当量のフマル酸、２当量のメタンスルホン酸、２当量のパラ−トルエンスルホン酸又は２当量のベンゼンスルホン酸からなる。別の副態様において、当該結晶塩の酸成分は、好ましくは、１又は２（特に２）当量のマレイン酸又は１〜２（特に１．５）当量のフマル酸からなる。
【００１９】
８） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量の臭化水素酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。副態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量の臭化水素酸からなり；そして当該結晶塩が約３当量の水を含む、態様１）〜５）又は７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２０】
９） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が１又は２当量の硫酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２１】
１０） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のマレイン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２２】
１１） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が１〜２（特に１．５）当量のフマル酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２３】
１２） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のメタンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２４】
１３） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のパラ−トルエンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２５】
１４） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のベンゼンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２６】
１５） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が１〜２（特に１．５）当量のナフタレン−１，５−ジスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２７】
１６） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のナフタレン−２−スルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２８】
１７） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のエタンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２９】
１８） 別の態様は、当該結晶塩が：
・１当量の「化合物」又は態様２）〜４）のいずれか１つに定義する光学的に活性な「化合物」；
・２当量のマレイン酸；及び
・０当量の水：
からなる、態様１）又は１０）に従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩に関する。
【００３０】
１９） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ： １０．１５°、２０．３９°及び２２．６３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１０）又は１８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３１】
２０） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．０７°、８．１９°、１０．１５°、１５．２６°、１７．６１°、２０．３９°、２２．６３°、２３．９３°、２４．２７°及び２５．６１°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１０）又は１８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３２】
２１） 別の態様は、本質的に、図５に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１０）又は１８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３３】
２２） 別の態様は、本明細書に記載の方法を用い、示差走査熱量測定により決定した約１４７℃の融点を有する、態様１０）又は１８）〜２１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３４】
２３） 別の態様において、本発明は：
１． 「化合物」（６８２ｇ、８４％ｗ／ｗ、１．０５ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６．３Ｌ、１１容量）中の溶液を還流し；
２． ＭｅＯＨ（６３０ｍＬ、１．１容量）中に溶解したマレイン酸（２５６ｇ、２．２ｍｏｌ、２．１ｅｑ）を添加し；
３． 得られた混合物を還流下で１５分間攪拌し、そして３０分以内に６５−６８℃に冷却し；
４． ０．０４％ｗ／ｗのシードクリスタルで任意にシードし；
５． ３時間以内に当該混合物を４０℃に冷却し；
６． １時間以内に当該混合物を２０℃に冷却し；
７． ０．２ｂａｒの窒素下、固形物をろ過し、そして当該固形物をＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ ２．６容量）でリンスし；そして
８． 当該固形物を１気圧の窒素下で２４時間乾燥する；
ことにより得ることができる、態様１０）又は１８）〜２２）のいずれか１つに従う結晶塩に関する。
【００３５】
２４） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．３°、１５．６°及び１７．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３６】
２５） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：６．２、９．３°、１５．６°、１７．３°、１８．１°、１９．４°、２０．０°及び２２．８°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様８）又は２４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３７】
２６） 別の態様は、本質的に、図７に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様８）、２４）又は２５）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３８】
２７） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．２７°、８．０５°及び２０．６１°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３９】
２８） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．２７°、８．０５°、１２．９３°、１９．４５°、２０．６１°、２１．１１°及び３１．２７°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１１）又は２７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４０】
２９） 別の態様は、本質的に、図６に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１１）、２７）又は２８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４１】
３０） 別の態様は、本明細書に記載の方法を用い、示差走査熱量測定により決定した約１８０℃の融点を有する、態様１１）又は２７）〜２９）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４２】
３１） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：７．２１°及び１０．００°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１２）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４３】
３２） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：３．９７°、７．２１°、１０．００°、１５．９９°、１７．１６°及び２１．０２°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１２）又は３１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４４】
３３） 別の態様は、本質的に、図２に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１２）、３１）又は３２）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４５】
３４） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．７９°及び１９．８４°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１３）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４６】
３５） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：４．３５°、５．７９°、１０．９３°、１３．９８°、１５．８１°及び１９．８４°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１３）又は３４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４７】
３６） 別の態様は、本質的に、図３に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１３）、３４）又は３５）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４８】
３７） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１３．４°、１７．５°及び２１．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４９】
３８） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１２．６°、１３．４°、１４．７°、１７．５°、２１．３°及び２２．７°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１４）又は３７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５０】
３９） 別の態様は、本質的に、図９に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１４）、３７）又は３８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５１】
４０） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．９°、１４．２°及び２１．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１５）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５２】
４１） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．９°、１２．９°、１４．２°、２０．１°、２０．６°及び２１．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１５）又は４０）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５３】
４２） 別の態様は、本質的に、図８に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１５）、４０）又は４１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５４】
４３） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．８°、１１．２°及び１５．６°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１６）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５５】
４４） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．８°、１１．２°、１５．６°、２２．４°及び２３．９°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１６）又は４３）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５６】
４５） 別の態様は、本質的に、図１１に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１６）、４３）又は４４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５７】
４６） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１１．２°、１５．７°及び２０．４°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５８】
４７） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１１．２°、１４．５°、１５．７°、１７．７°、２０．４°及び２２．６°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１７）又は４６）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５９】
４８） 別の態様は、本質的に、図１０に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１７）、４６）又は４７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６０】
４９） 本発明はさらに、
・１当量の「化合物」；
・約１当量の硫酸からなる酸成分；及び
・約６当量の水；
からなる、「化合物」（イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル）の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩に関する。
【００６１】
５０） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１１．７８°、１３．６９°及び１４．１９°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様４９）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６２】
５１） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：２．８５°、８．５０°、９．５０°、１１．７８°、１３．２６°、１３．６９°及び１４．１９°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様４９）又は５０）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６３】
５２） 別の態様は、本質的に、図４に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様４９）、５０）又は５１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６４】
疑義を避けるために、上記態様の１つ、特に態様１９）、２０）、２４）、２５）、２７）、２８）、３１）、３２）、３４）、３５）、３７）、３８）、４０）、４１）、４３）、４４）、４６）、４７）、５０）及び５１）の１つが、「粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおける、以下の屈折角２θにおけるピーク」に言及する場合は常に、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムは、Ｃｕ Ｋα１照射（λ＝１．５４０６Å）を用いて得られたものであり；そして本明細書で提供される２θ値の精度は＋／−０．１〜０．２°の範囲内であることが理解されるべきである。特に、本発明の態様及びクレーム中でピークに対する屈折角２シータ（２θ）を特定する場合、記載された当該２θ値は、当該値−０．２°から当該値＋０．２°（２θ＋／−０．２°）の間；そして好ましくは当該値−０．１°から当該値＋０．１°（２θ＋／−０．１°）の間と理解されるべきである。
【００６５】
疑義を避けるために、立体異性体の相対配置は下記のように示される：イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルは、
イソ酪酸 （１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル又は
イソ酪酸 （１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル、
又は、例えばラセミ体のように、これらの２種のエナンチオマーの混合物を意味する。
【００６６】
本明細書に記載した「化合物」、すなわちイソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの塩結晶型が本発明の範囲に包含され、「化合物」はラセミ体であってもよく；絶対配置（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）のエナンチオマーの光学活性体であっても；絶対配置（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）のエナンチオマーの光学活性体であっても；又はこれらの２種のエナンチオマーのいかなる混合物あってもよい。好ましくは、本明細書に記載の方法を用いて決定される負の旋光性を有する光学活性体である。
【００６７】
化合物、塩、医薬組成物、疾病等について複数形が使用される場合は、単数の化合物、塩等をも意味することが意図されている。
【００６８】
「光学的に活性な」という用語は、本発明の文脈において、「化合物」の少なくとも９０、好ましくは少なくとも９５、そして最も好ましくは少なくとも９９重量パーセントが、「化合物」の一方のエナンチオマーの形態で存在することを意味するものと理解される。
【００６９】
「本質的に純粋な」という用語は、本発明の文脈において、「化合物」の結晶の少なくとも９０、好ましくは少なくとも９５、そして最も好ましくは少なくとも９９重量パーセントが、本発明の結晶型、特に本発明の単一の結晶型で存在すること、を特に意味するものと理解される。
【００７０】
例えば、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおけるピークの存在を定義する場合、通常の方法は、Ｓ／Ｎ比（Ｓ＝シグナル、Ｎ＝ノイズ）の点からこれを行うことである。この定義に従えば、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにピークが存在しなければならないと述べる場合、粉末Ｘ線回折ダイアグラムのピークは、ｘ（ｘは１より大きい数値である。）より大きい、通常は２より大きい、特に３より大きいＳ／Ｎ比（Ｓ＝シグナル、Ｎ＝ノイズ）を持つことにより定義されるものと理解されるべきである。
【００７１】
結晶型が、本質的に、それぞれ図１〜図１１に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、という記載の文脈において、「本質的に」という用語は、少なくとも当該図に表されるダイアグラムの主要なピーク、すなわち、ダイアグラムにおいて最も強いピークと比べ、１０％、特に２０％を超える相対強度を有するピークが存在しなければならないことを意味する。しかしながら、粉末Ｘ線回折の当業者は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムの相対強度が、好ましい配向効果に起因する強い強度変動に付され得ることを認識しているはずである。
【００７２】
温度に関して使用されていない場合には、数値「Ｘ」の前に置かれる「約」という用語は、本出願において、Ｘ−１０％ＸからＸ＋１０％Ｘの間、好ましくはＸ−５％ＸからＸ＋５％Ｘの間を表す。温度の特定の場合には、温度「Ｙ」の前に置かれる「約」の用語は、この出願において、Ｙ−１０℃からＹ＋１０℃の間、好ましくはＹ−５℃からＹ＋５℃の間を表す。室温は約２５℃の温度を意味する。本出願において、ｎ当量（ｎは数値である。）という用語が用いられる場合、本出願の範囲内において、ｎは数値ｎの近傍を意味し、好ましくはｎは正確な数値ｎを意味する。
【００７３】
態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、医薬として、例えば経腸又は非経口投与のための医薬組成物の形態で使用することができる。
【００７４】
医薬組成物の製造は、いずれの当業者にもよく知られた様式で（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００５）、Ｐａｒｔ ５、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ」［ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ］を見よ。）、本発明の結晶型を、任意にその他の治療的に有益な物質と組み合わせて、適切な無毒の不活性な薬学的に許容される固体又は液体の担体材料及び必要に応じて、通常の薬学的アジュバントと共に、製剤投与形態とすることにより遂行することができる。
【００７５】
態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、単一成分として、又は「化合物」の他の結晶型若しくはアモルファス形態との混合物として使用してもよい。
【００７６】
態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、
・慢性安定狭心症、高血圧、（腎臓及び心臓の）虚血、心房細動を含む不整脈、心肥大又はうっ血性心不全の治療又は予防に適切であり、そして／又はそのための医薬の製造において有用である。
【００７７】
さらにまた、態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、以下の疾病群の単独の疾病又はそれらの任意の組み合わせに対して適切であり、そして／又はそのための医薬の製造に有用である：
・人及び他の哺乳類における腎臓病、糖尿病及びその合併症、高アルドステロン症、てんかん、神経因性疼痛又は癌の治療用；
・抗細動薬、抗喘息薬、抗動脈硬化薬、肺バイパス用心停止液の添加剤、血栓溶解療法の補助薬としての、抗凝集薬としての、又は、不安定性狭心症の治療薬としての使用のため；
・高血圧、特に、門脈圧亢進、エリスロポエチンによる治療に続発する高血圧及び低レニン性高血圧の治療又は予防のため；
・低酸素性又は虚血性疾患における使用、又は、例えば、（例えば、心肺バイパス手術後に起こる）心、腎及び脳虚血及び再灌流、冠動脈及び脳血管れん縮等の治療のための抗虚血薬としての使用、抹消血管疾患（例えば、レイノー病、間欠は行、高安病）、疼痛クリーゼの初発及び／又は進展を含む鎌状赤血球症の治療における使用のため；
・急性及び慢性腎不全、糖尿病性ネフローゼ、高血圧によるネフローゼ、糸球体傷害、老化又は透析に関連する腎障害、腎硬化症、造影剤及びシクロスポリンに関連する腎毒性、腎虚血、原発性膀胱尿管逆流症又は糸球体硬化症を含む、腎、糸球体及びメサンギウム細胞機能に関連する疾患の治療又は予防のため；
・心筋梗塞の治療、心肥大、原発性及び二次性肺高血圧症の治療、繊維化の阻害、左心室肥大、リモデリング及び不全の阻害を含むうっ血性心不全、又は血管形成術若しくはステント後の再狭窄の治療における使用のため；
・内毒血症若しくはエンドトキシンショック、又は出血性ショックの治療のため；
・生殖器、特に海綿体への血流を改善することによる、男性（例えば、糖尿病、脊髄損傷、前立腺全摘除、心理的要因及び他の原因による勃起不全）及び女性双方における性機能障害の治療のため；
・癌又は細胞増殖に関連する臓器障害の予防及び／若しくは縮小のため；
・代謝障害又は慢性炎症性疾患、インスリン依存性又は非インスリン依存性糖尿病及びその合併症（例えば、神経障害、網膜症）、高アルドステロン症、骨リモデリング、乾癬、関節炎、関節リウマチ、変形性関節症サルコイドーシス又は湿疹性皮膚炎の治療のため；
・肝毒性及び突然死、合併症（例えば、肝毒性、繊維化、硬変）を含む初期及び進行肝疾患及び障害、血管外皮細胞腫に起因する高血圧等の腫瘍の有害な影響、尿路及び／又は膀胱の痙攣性疾患、肝腎症候群、全身性エリテマトーデス、全身性硬化症、混合型クリオグロブリン血症等の血管炎に関連する免疫疾患、腎不全及び肝毒性に関連する繊維化の治療のため；
・潰瘍性大腸炎、クローン病、胃粘膜損傷、潰瘍炎症性腸疾患及び虚血性腸疾患等の胃腸疾患、胆管炎等の胆嚢若しくは胆管に基づく疾患、膵炎、細胞増殖の制御、前立腺肥大症又は移植における使用のため、又は止痢薬としての使用のため；
・気管支収縮に関連する疾患、又は閉塞性肺疾患及び成人窮迫症候群等の慢性若しくは急性の炎症性障害の治療のため；
・神経因性疼痛、末梢性の痛み、及び前立腺癌又は骨癌に関連する痛み等の癌に関連する痛みを含む痛みの緩和のため；
・脳梗塞、一過性脳虚血発作、偏頭痛及びクモ膜下出血等の中枢神経系血管障害、中枢神経系行動障害の治療、アルツハイマー型痴呆、老人性痴呆及び血管性痴呆等を含む痴呆、てんかん又は睡眠障害の治療のため；又は
・上記の使用の結果としての一般罹患率及び／又は死亡率の減少のため。
【００７８】
本発明はまた、薬学的に活性な量の態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩を対象に投与することを含む、ここに言及した疾患又は障害の予防又は治療のための方法に関する。
【００７９】
さらに、態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩はまた、好ましくは、スタチン等の高脂血症薬、クマリン等の抗凝固薬、クロピドグレル等の抗血栓薬、β−ブロッカー及び他の心保護薬から選択される１又は２以上の薬剤と組み合わせて使用してもよい。
【００８０】
本発明はまた、ラセミ体及び光学的に活性な形態の「化合物」を製造する方法、及び態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩の製造及び定性分析の方法にも関し、当該方法は、下記の実験の部に記載される。
【実施例】
【００８１】
実験の部
以下の実施例は本発明をより詳細に説明する。温度は摂氏度で記載する。他の記載が無い場合には、百分率は重量によって記載する。
【００８２】
この項において、及び前記の部分において使用される略語：
ａｑ． 水性
ｃａ． 約
ＣＣ シリカゲル上カラムクロマトグラフィー
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＡ ジイソプロピルアミン
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン、Ｈｕｅｎｉｇの塩基、
エチル−ジイソプロピルアミン
ＤＭＡＰ ４−ジメチルアミノ−ピリジン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＳＣ 示差走査熱量測定
ｅｑ． 当量
Ｅｔ２Ｏ ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
Ｆｉｇ． 図
ｈ 時間
１Ｈ−ＮＭＲ 水素−１ 核磁気共鳴
Ｈｅｐｔ ヘプタン
Ｈｅｘ ヘキサン
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＭＥＫ ２−ブタノン
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭｅＯＨ メタノール
ＮＥｔ３ トリエチルアミン
Ｐｄ／Ｃ 炭素上パラジウム
２−ＰｒＯＨ イソプロパノール
Ｒｅｄ−Ａｌ 水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム
ＲＨ 相対湿度
ｒｔ 室温
ｒｐｍ 分当たりの回転数
ｓａｔ． 飽和
ＴＢＭＥ ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ｔｅｒｔ．− 三級
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴｓＯＨ パラ（ｐ）−トルエンスルホン酸
ＸＲＰＤ 粉末Ｘ線回折
【００８３】
粉末Ｘ線回折分析（ＸＲＰＤ）
方法１：粉末Ｘ線回折パターンは、反射配置におけるＣｕ Ｋα−照射で作動する３°のウィンドウを持つＬｙｎｘＥｙｅ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ＡｄｖａｎｃｅＸ線回折計（Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ）上で収集した。典型的には、Ｘ−線チューブを４０ｋＶ／４０ｍＡで走査させた。２〜５０°、２シータ（２θ）の走査範囲に渡って、０．０２°（２θ）のステップサイズ及び３７秒のステップタイムを適用した。発散スリットは、サンプルホルダーの深さに応じて、可変的にＶ１２又はＶ２０に設定した。粉末（０．１ｍｍの深さに対しては約１５ｍｇ、そして１ｍｍの深さに対しては約８０ｍｇ）を、０．１ｍｍ又は１ｍｍの深さのシリコン単結晶サンプルホルダー内にわずかにプレスし、そして分析の間、サンプルをそれ自体のプレイン中で回転させた。選択したサンプルをカプトンホイルで覆った。回折データは、装置評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を用いて、Ｋα２成分を除去した後に、Ｃｕ Ｋα１（λ＝１．５４０６Å）を用いてレポートされる。加えて、データ取得中にカプトンで覆ったサンプルについては、装置評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を用いて、バックグラウンドシグナルを除いた。これまでに測定された粉末Ｘ線回折パターンが一般的にそうであるように、本明細書で提供される２θ値の精度は、＋／−０．１〜０．２°の範囲内である。
【００８４】
方法２：粉末Ｘ線回折パターンは、反射配置におけるＣｕ Ｋα−照射で作動するＧＡＤＤＳ ＨｉＳｔａｒ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ＨＴＳ Ｘ線回折計上で収集した。典型的には、Ｘ線チューブを、４０ｋＶ／４０ｍＡにて走査させた。装置の作動は、コランダム標品（ＮＩＳＴ１９７６）を用いてチェックする。室温条件下で走査するサンプルは、受け取った状態の粉末を用いて平板試料として調製した。約３ｍｇのサンプルを、顕微鏡用スライド上に静かにプレスした。データは、１フレーム内で、１８０秒のアクイジション時間（ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｔｉｍｅ）で、７．６°〜２６．７°、２θの角度範囲に渡って収集した。回折データは、Ｋα２成分を除去することなくレポートし、バックグラウンドシグナルは装置評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を用いて除いた。これまでに測定された粉末Ｘ線回折パターンが一般的にそうであるように、本明細書で提供される２θ値の精度は、＋／−０．１〜０．２°の範囲内である。
【００８５】
融点は、Ｂｕｃｈｉ Ｂ−５４０装置上で測定し、そして校正しないか；又は、明記する場合には、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定した：
ＤＳＣデータは、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＤＳＣ７上で収集した。典型的には、乾燥窒素下で蓋をせずに前もって１６時間貯蔵した２−３ｍｇのサンプルを、封止したゴールドパン内で、−２０℃から２００℃に、２０℃ ｍｉｎ−１で加熱した。融点はピーク温度としてレポートする。
【００８６】
旋光度は、室温にて、ナトリウムＤ線（λ＝５８９ｎｍ）を用いて、Ｊａｓｃｏ Ｐ−１０３０装置上で測定した。
【００８７】
１Ｈ−ＮＭＲはＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ４００（４００ＭＨｚ）上で測定した；化学シフトは、使用溶媒と関連して、ｐｐｍで示す；多重度：ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｐ＝五重項、ｈｅｘ＝六重項、ｓｅｐｔ＝九重項、ｍ＝多重項、ｄｍ＝多重項の二重項、ｂｒ＝広域、結合定数はＨｚで示す。）ＮＭＲアッセイは、ヒドロキノンジメチルエーテルを内部標準として用いて測定した。
【００８８】
吸湿性は、ＳＰＳ１１−１００ｍ（Ｐｒｏｊｅｋｔ Ｍｅｓｓｔｅｃｈｎｉｋ、ウルム、ドイツ）上での、走査重量測定蒸気吸着測定により評価した（スキャン速度は、時間当たり５％の相対湿度変化とし、サイクルを５０％の相対湿度で開始し、次いで乾固までスキャンし、そして９５％の相対湿度まで吸着スキャン（ａｎ ｕｐｗａｒｄｓ ｓｃａｎ）を行った。分類は、ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅａ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ（１９９９年版）（例えば、わずかに吸湿性：２％未満の質量増加及びｍａｓｓ／ｍａｓｓが０．２％か、それ以上）に従って行った。吸着スキャンにおける４０％相対湿度と８０％相対湿度との間の質量変化を考慮した。
【００８９】
ＬＣ−ＭＳは下記の条件を用いて行った：ＨＰ １１００ Ｂｉｎａｒｙ Ｐｕｍｐ及びＤＡＤを備えたＦｉｎｎｉｇａｎ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ、カラム：４．６ｘ５０ｍｍ、Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ−ＡＱ、５μｍ、１２０Å、勾配：０．０４％のトリフルオロ酢酸を含む５−９５％のアセトニトリル水溶液、１ｍｉｎ、流速：４．５ｍＬ／ｍｉｎ、ｔＲはｍｉｎで記載する。
【００９０】
化合物は、分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｘ−ｔｅｒｒａ ＲＰ１８、５０ｘ１９ｍｍ、５μｍ、勾配：０．５％のギ酸を含む１０−９５％のアセトニトリル水溶液）又はシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーで精製する。ラセミ体は、分取用ＨＰＬＣにより、それらのエナンチオマーに分離することができる（好ましい条件：Ｄａｉｃｅｌ、ＣｈｉｒａｌＣｅｌ ＯＤ ２０ｘ２５０ｍｍ、１０μｍ、ヘキサン中４％エタノール、流速１０−２０ｍＬ／ｍｉｎ）。
【００９１】
Ｉ． 「化合物」の製造及び定性分析
「化合物」の製造はＷＯ２００８／１３２６７９により知られている：
中間体の製造
重要な中間体Ｋの製造のための一般的手順：
ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル又はビシクロ［３．２．２］ノン（ｎｏｎ）−８−エン−６−イル誘導体である重要な中間体Ｋ１Ａ及びＫ２Ａは、相対配置（Ｒ＊，Ｒ＊，Ｒ＊）を有する主ラセミ体（すなわち、シクロヘキセン部分の架橋−（ＣＨ２）２−が、ヒドロキシである基−ＯＲ２に対しｃｉｓである）と相対配置（Ｒ＊，Ｓ＊，Ｒ＊）を有する副ラセミ体（すなわち、シクロヘキセン部分の架橋−（ＣＨ２）２−が、ヒドロキシである基−ＯＲ２に対しｔｒａｎｓである）の混合物として得られる。主及び副ラセミ体は、手順Ａ１．５において、重要な中間体Ｋ１Ａについて記載した通りに分離することができる。主ラセミ体は分離され、そして下記の実施例の製造において使用される。
【００９２】
Ｋ１Ａ：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル
Ｋ１Ａ．１（手順Ａ１．１）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，５−ジオン
２５ｍＬの２−（トリメチルシリルオキシ）−１，３−シクロヘキサジエンと１３ｍＬのα−アセトキシアクリロニトリルを混合し、そして封止した容器内で、１５０℃にて２２ｈ加熱した。得られた暗オレンジ色の粘凋な油状物を２００ｍＬのＭｅＯＨに溶解した。２．２ｇのナトリウムメトキシドの、１５０ｍＬのＭｅＯＨ中の溶液を滴下した後、反応混合物をｒｔにて３ｈ攪拌し、氷／水中に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機相を真空濃縮し、そして粗製の残渣を、ＥｔＯＡｃ−Ｈｅｐｔ（１：２）を用いてＣＣで精製して、７．９ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，５−ジオンを得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．４４ｍｉｎ。
【００９３】
Ｋ１Ａ．２（手順Ａ１．２）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−スピロ［ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，２’−［１，３］ジオキソラン］−５−オン
１２０ｍＬのトルエン中に溶解した、４．０ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，５−ジオン（中間体Ｋ１Ａ．１）に、１．７ｍＬのエチレングリコールと０．２７ｇのＴｓＯＨを添加し、そして溶液を激しく攪拌しながら３．５ｈ加熱還流した。反応混合物をｒｔに冷却し、飽和ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、Ｅｔ２Ｏで抽出し、そして有機相を蒸発させた。粗生成物を、Ｈｅｘ−ＥｔＯＡｃ（７：３）を用いてＣＣで精製し、２．４１ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−スピロ［ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，２’−［１，３］ジオキソラン］−５−オンを黄色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．６４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ＋ＣＨ３ＣＮ］＋：２２４．３５。
【００９４】
Ｋ１Ａ．３（手順Ａ１．３）：ｒａｃ−（７Ｒ＊，８Ｒ＊，１０Ｒ＊）−とｒａｃ−（７Ｒ＊，８Ｓ＊，１０Ｒ＊）−７，１０−（１，２−エチレン）−８−フェニル−１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オールの混合物
２．４１ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−スピロ［ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，２’−［１，３］ジオキソラン］−５−オン（中間体Ｋ１Ａ．２）の、Ｅｔ２Ｏ中の溶液８０ｍＬに、フェニルマグネシウムブロミド溶液（Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ）１４．５ｍＬを１０ｍｉｎに渡って滴下した。反応混合物をｒｔにて４ｈ攪拌した。次いで混合物を氷で注意深くクェンチし、２Ｎ ＨＣｌ、８ｍＬを添加し、そして相を分離した。有機相を蒸発させ、そして粗生成物を、Ｈｅｐｔ−ＥｔＯＡＣ（７：３）を用いてＣＣで精製して、０．３７ｇの７，１０−（１，２−エチレン）−８−フェニル−１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オールを無色の油状物として得た。（ジアステレオマーのＣＣによる分離が可能であるが、ここでは行わなかった。）ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４３．３４。
【００９５】
Ｋ１Ａ．４（手順Ａ１．４）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オン
０．５４ｇの７，１０−（１，２−エチレン）−８−フェニル−１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オール（中間体Ｋ１Ａ．３）の、２０ｍＬのアセトン中の溶液に、２００ｍｇのＴｓＯＨを添加し、次いで混合物をｒｔにて２ｄ攪拌した。反応混合物をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、ＥｔＯＡＣで抽出し、そして有機相を蒸発させた。粗生成物を、Ｈｅｐｔ−ＥｔＯＡＣ（７：３）を用いてＣＣで精製し、０．３４ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オンを無色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９３ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ＋ＣＨ３ＣＮ］＋：２４０．１１。
【００９６】
Ｋ１Ａ．５（手順Ａ１．５）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル及びｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｓ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル
０．５１ｍＬのＤＩＰＡの、０．５ｍＬのＴＨＦ中の溶液に、２．２ｍＬのｎ−ブチルリチウム（Ｈｅｘ中１．６Ｍ）を−２０℃にて滴下した。１０ｍｉｎ後、０．５ｍＬのトルエンを添加し、そして溶液を３０ｍｉｎ攪拌した。混合物を−５０℃に冷却し、０．７３ｍＬの酢酸ｔｅｒｔ．−ブチルを添加し、そして攪拌を−５０℃にて１ｈ継続した。次いで、１ｍＬのＴＨＦに溶解した０．３２ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オン（中間体Ｋ１Ａ．４）を添加し、そして溶液を−５０〜−２０℃にて２．５ｈに渡って攪拌した。反応混合物を氷／ａｑ．ＨＣｌ上に注ぎ、有機相を分離し、洗浄し、そして蒸発させた。粗製の反応生成物を、Ｈｅｐｔ−ＥｔＯＡｃ（９：１）を用いてＣＣで精製し、０．３０ｇの主ラセミ体、ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルを白色の固体として、そして０．０７ｇの副ラセミ体、ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｓ＊，４Ｒ＊）−２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルを無色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ（主ラセミ体）：ｔＲ＝１．０６ｍｉｎ；［Ｍ−（ＣＨ３）３−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．１１。ＬＣ−ＭＳ（副ラセミ体）：ｔＲ＝１．０５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３１５．１８。
【００９７】
Ｋ１Ａ．６：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル及び（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル
ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルを、ｐｒｅｐ．キラルＨＰＬＣ（カラム：Ｄａｉｃｅｌ ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２０ｘ２５０ｍｍ、５μｍ；Ｈｅｘ／ＥｔＯＨ、９５：５、流速１６ｍＬ／ｍｉｎ）を用いて、各エナンチオマーに分離した。キラル分析ＨＰＬＣ（Ｄａｉｃｅｌ ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、４．６ｘ２５０ｍｍ、５μｍ；Ｈｅｘ／ＥｔＯＨ、９５：５、流速０．８ｍＬ／ｍｉｎ）：（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル：エナンチオマーＡ：ｔＲ＝６．７０ｍｉｎ。（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル：エナンチオマーＢ：ｔＲ＝７．９３ｍｉｎ。
【００９８】
ＢＢ． ［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミン
ＢＢ．１ ３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミン
６．０ｇの１，４−ジメトキシ−２，３−ジニトロ−ベンゼン（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００６、２７８６−２７９４）を２２０ｍＬのＥｔＯＨ中に溶解し、Ｎ２で３回脱気し、そして６００ｍｇの１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃを添加することにより、３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンを合成した。反応液をＨ２雰囲気下（バルーン）で攪拌した。２日後、さらに３００ｍｇの１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃを添加し、そして混合物をさらに２４ｈ攪拌した。セライトのパッド上でろ過し、そしてＥｔＯＨ及びＥｔＯＡｃで洗浄することにより、真空濃縮の後、４．３ｇの３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンを黒色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．４８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１６９．０９。
【００９９】
ＢＢ．２ ［３−（２−アミノ−３，６−ジメトキシ−フェニルカルバモイル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステル
３．１ｇの４−（ベンジルオキシカルボニル−メチル−アミノ）−酪酸の、８０ｍＬのＤＣＭ中の溶液に、６．５ｍＬのＤＩＰＥＡ、１．８ｇのＨＯＢｔ、２．６ｇのＥＤＣ及び１５４ｍｇのＤＭＡＰを添加した。１０ｍｉｎ攪拌した後、２０ｍＬのＤＣＭに溶解した２．１ｇの３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンを添加し、そして混合物をｒｔにて一晩攪拌した。反応をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、相を分離し、そして有機相を塩水（ｂｒｉｎｅ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮して、粗製の表題化合物を黒色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４０２．０６。
【０１００】
ＢＢ．３ ［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステル
上記の粗製３−（２−アミノ−３，６−ジメトキシ−フェニルカルバモイル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステルの、１６ｍＬのトルエン中の混合物に、４ｍＬのＤＭＦと１．９ｇのＴｓＯＨを添加し、そして反応液を１５０℃に２ｈ、マイクロ波中で加熱した。Ｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３を添加し、そして相を分離した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮し、シリカゲルのショートパッド上でＥｔＯＡｃを用いてろ過し、そして再び濃縮した。ＥｔＯＡｃを用いたＣＣによる精製により、２．７ｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステルを茶色の樹脂として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３８４．６２。
【０１０１】
ＢＢ．４ ［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミン
２．６ｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステルの、６０ｍＬのＥｔＯＨ中の溶液を、Ｎ２で３回脱気した後、２６０ｍｇの１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃを添加した。次いで、反応混合物を、Ｈ２雰囲気下（バルーン）、ｒｔにて５ｈ攪拌した。セライトのパッド上でのろ過、そしてＥｔＯＨでの洗浄により、真空濃縮の後、１．７ｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミンを茶色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．５７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２５０．１３。
【０１０２】
「化合物」の製造
参照実施例１Ａ：ｒａｃ−イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
１．１（手順Ｐ１．１）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸
４．０ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルの、２５ｍＬのＥｔＯＨ中の溶液に、２．１ｇのＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ、８ｍＬのＨ２Ｏ及び２２ｍＬのＭｅＯＨを添加した。反応混合物をｒｔにて３ｄ攪拌し、次いで濃縮した。残渣を水とＥｔ２Ｏの間で分画した。水層を分離し、そして１Ｎ ＨＣｌで酸性化することにより、白色の固体が生成した。その固体をろ過し、５ｍＬのａｑ．ＨＣｌで洗浄し、そして真空乾燥して、３．２ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸を白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８６ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．２８。
【０１０３】
１．２（手順Ｐ１．２）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−Ｎ−［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−２−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−Ｎ−メチル−アセタミド
２８０ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸の、７ｍＬのＴＨＦ中の溶液に、０．５８ｍＬのＤＩＰＥＡ、１７５ｍｇのＨＯＢｔ及び２５０ｍｇのＥＤＣを、ｒｔにて添加した。１０ｍｉｎ攪拌した後、２７０ｍｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミンを添加し、そして反応混合物をｒｔにて一晩攪拌した。反応混合物をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、相を分離し、そして有機相を水と塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮した。ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（５：１から２：１へ）を用いてＣＣにより精製して、４７５ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−Ｎ−［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−２−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−Ｎ−メチル−アセタミドを白色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４９０．０６。
【０１０４】
１．３（手順Ｐ１．３）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オール
３１０ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−Ｎ−［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−２−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−Ｎ−メチル−アセタミドの、８ｍＬのトルエン中の溶液に、０．７７ｍＬのＲｅｄ−Ａｌ溶液（トルエン中６５％）を０℃にて滴下した。０℃にて１０ｍｉｎ攪拌した後、冷却浴を除き、そして攪拌をｒｔにて３ｈ続けた。次いで、反応混合物を、１Ｍ ＮａＯＨ／氷の混合物中に注意深く注ぎ、そして１０ｍｉｎ攪拌した。水相をトルエンで抽出し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮した。ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（２：１）を用いてＣＣで精製して、２３０ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールを白色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７６．１３。
【０１０５】
１．４：ｒａｃ−イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
１９９ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールの、４ｍＬのＤＣＭ中の溶液に、０．２ｍＬのＮＥｔ３と０．１ｍＬのイソ酪酸クロリドを、０℃にて添加した。反応混合物を一晩攪拌して、温度をゆっくりとｒｔに到達させた。反応をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、相を分離し、そして水相をＤＣＭで再抽出した。合わせた有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮した。残渣を３ｍＬのＥｔＯＡｃに再溶解し、シリカゲルと１．５ｍＬのＭｅＯＨを添加し、そして混合物を７ｄ激しく攪拌した。混合物をろ過し、ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（２：１）で徹底的に洗浄し、そして蒸発させた。ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（５：１から３：１へ、＋０．１％ＮＥｔ３）を用いてＣＣで精製して、１８６ｍｇのｒａｃ−イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルをベージュ色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９０ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４６．２３。
【０１０６】
参照実施例２Ａ：イソ酪酸（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
２．１：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸
ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルのエナンチオマーＢ（Ｋ１Ａ．６を見よ。）を用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．１に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９１ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．１０。
【０１０７】
２．２：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オール
上記の（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸を用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．２〜Ｐ１．３に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７６．０９。
【０１０８】
２．３：イソ酪酸（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
上記の２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールを用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．４に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４６．１９。
【０１０９】
参照実施例３Ａ：イソ酪酸（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
３．１：（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸
ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルのエナンチオマーＡ（Ｋ１Ａ．６を見よ。）を用い、参照実施例１中の手順Ｐ１．１に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９１ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．１６。
【０１１０】
３．２：（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オール
上記の（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸を用い、参照実施例１中の手順Ｐ１．２〜Ｐ１．３に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７６．０９。
【０１１１】
３．３：イソ酪酸（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
上記の２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールを用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．４に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４６．１１。旋光度：αＤ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ ＥｔＯＨ）＝−２１．５°。１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ） δ７．３９−７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．３０（ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２４−７．２０（ｍ、１Ｈ）、６．６０（ｓ、２Ｈ）、６．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、６Ｈ）、３．２７−３．２３（ｍ、１Ｈ）、３．１８−３．１５（ｍ、１Ｈ）、２．８７（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．５４（ｓｅｐｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．４７−２．３７（ｍ、４Ｈ）、２．２１（ｓ、３Ｈ）、２．１９−２．１２（ｍ、１Ｈ）、２．０１−１．９２（ｍ、５Ｈ）、１．７５−１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．４８−１．３８（ｍ、１Ｈ）、１．２７−１．１９（ｍ、１Ｈ）、１．１６（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）。
【０１１２】
生物学的試験
インビトロアッセイ Ｌチャンネル
参照実施例１Ａ、２Ａおよび３ＡのＬチャンネル拮抗活性（ＩＣ５０値）を、下記の実験法に従って測定した。補助サブユニットβ−２ａ及びα２δ−１に加え、ヒトＣａｖ１．２チャンネルを発現するヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ２９３）細胞を、培地（１０％の熱非働化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、１００μｇ／ｍｌのＧ４１８、４０μｇ／ｍｌのゼオシン及び１００μｇ／ｍｌのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ）で培養する。細胞を、３８４穴ブラッククリアボトム滅菌済プレート（ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ−コート、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に、２０．０００細胞／ウェルにてシードする。シードしたプレートを、３７℃、５％ ＣＯ２にて、一晩インキュベートする。アッセイにおいて２０ｍＭの最終濃度で使用するため、アッセイバッファー（０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３を含み、ＮａＯＨでｐＨ７．４に調整したＨＢＳＳ）中の８０ｍＭストックソリューションとして、ＫＣｌ溶液を調製する。拮抗薬は、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックソリューションとして調製し、３８４穴プレート内で、まずＤＭＳＯで、次にアッセイバッファーで希釈し、３ｘのストックを得る。アッセイの日に、２５μｌの染色バッファー（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３及び３μＭの蛍光性カルシウム指示薬ｆｌｕｏ−４ ＡＭ（１０％のｐｌｕｒｏｎｉｃを含む、ＤＭＳＯ中の１ｍＭストックソリューション）を含むＨＢＳＳ）を、シードしたプレートの各ウェルに添加する。３８４穴セルプレートを、３７℃、５％ＣＯ２で６０ｍｉｎインキュベートした後、各ウェルを、５０μｌのアッセイバッファーで２回洗浄し、各ウェルにつき５０μｌの同バッファーを、室温での平衡化（３０−６０分）のために残しておく。Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＦＬＩＰＲ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）内で、各ウェルにつき２５μｌの拮抗薬をプレートに添加し、３ｍｉｎインキュベートし、最後に、細胞の脱分極のために、各ウェルにつき２５μｌのＫＣｌ溶液を添加する。各ウェルについて、２秒のインターバルで８分間、蛍光を測定し、各蛍光ピークの曲線下の面積を、拮抗剤の代わりにビークルを用いた場合に、２０ｍＭ ＫＣｌにより誘導される蛍光ピークの面積と比較する。各拮抗薬について、ＩＣ５０値（ＫＣｌ−により誘導される蛍光反応の５０％を阻害するのに必要な化合物の（ｎＭで表した）濃度）を、１０μＭまで測定する。
【０１１３】
参照実施例化合物１Ａ、２Ａおよび３ＡのＩＣ５０値が測定され、１５６〜４３９ｎＭの範囲内である。
【０１１４】
インビトロアッセイ Ｔチャンネル：
参照実施例１Ａ、２Ａおよび３ＡのＴチャンネル拮抗活性（ＩＣ５０値）を、下記の実験法に従って測定し、データを表１に示す。
【０１１５】
ヒトＣａｖ３．１、Ｃａｖ３．２又はＣａｖ３．３チャンネルをそれぞれ発現するヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ２９３）細胞を、培地（１０％の熱非働化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン及び１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を含むＤＭＥＭ）で培養する。細胞を、３８４穴ブラッククリアボトム滅菌済プレート（ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ−コート、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に、２０．０００細胞／ウェルにてシードする。シードしたプレートを、３７℃、５％ＣＯ２にて、一晩インキュベートする。アッセイにおいて１０ｍＭの最終濃度で使用するため、ＴＥＡ−ヒドロキシドでｐＨ７．２に調整した、１００ｍＭのテトラメチルアンモニウムクロリド（ＴＥＡ−クロリド）、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのＣａＣｌ２、５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２中の１００ｍＭストックソリューションとして、Ｃａ２＋溶液を調製する。拮抗薬は、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックソリューションとして調製し、３８４穴プレート内で、まずＤＭＳＯで、次にＴＥＡ−ヒドロキシドでｐＨ７．２に調整した、１００ｍＭのＴＥＡ−クロリド、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのＣａＣｌ２、５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２で希釈し、９ｘのストックを得る。アッセイの日に、２５μｌの染色バッファー（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３及び３μＭの蛍光性カルシウム指示薬ｆｌｕｏ−４ ＡＭ（１０％のｐｌｕｒｏｎｉｃを含む、ＤＭＳＯ中の１ｍＭストックソリューション）を含むＨＢＳＳ）を、シードしたプレートの各ウェルに添加する。３８４穴セルプレートを、３７℃、５％ＣＯ２で６０ｍｉｎインキュベートした後、各ウェルを、０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３を含むＨＢＳＳ、５０μｌを用いて２回洗浄し、各ウェルにつき５０μｌの同バッファーを、室温での平衡化（３０−６０分）のために残しておく。Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＦＬＩＰＲ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）内で、各ウェルにつき６．２５μｌの拮抗薬をプレートに添加し、３ｍｉｎインキュベートし、最後に、各ウェルにつき６．２５μｌのＣａ２＋溶液を添加する。各ウェルについて、２秒のインターバルで８分間、蛍光を測定し、各蛍光ピークの曲線下の面積を、拮抗剤の代わりにビークルを用いた場合に、１０ｍＭ Ｃａ２＋により誘導される蛍光ピークの面積と比較する。各拮抗薬について、ＩＣ５０値（Ｃａ２＋により誘導される蛍光反応の５０％を阻害するのに必要な化合物の（ｎＭで表した）濃度）を、１０μＭまで測定する。
【０１１６】
【表１】
【０１１７】
Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ法（Ｌｇｄｆｆ）による単離した心臓に対する効果
参照実施例１Ａ、２Ａおよび３Ａを、それらの血圧降下作用及び心筋収縮に対するそれらの効果について試験した。単離したマウスの心臓に対するＥＣ５０を、文献（Ｄｏｒｉｎｇ ＨＪ．、Ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｐｅｒｆｕｓｅｄ ｈｅａｒｔ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ−−ｆｕｎｃｔｉｏｎ−−ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ、Ｐｈｙｓｉｏｌ． Ｂｏｈｅｍｏｓｌｏｖ． １９９０、３９（６）、４８１−５０４；Ｋｌｉｇｆｉｅｌｄ Ｐ、Ｈｏｒｎｅｒ Ｈ、Ｂｒａｃｈｆｅｌｄ Ｎ．、Ａ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｇｒａｄｅｄ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｐｅｒｆｕｓｅｄ ｒａｔ ｈｅａｒｔ、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９７６ Ｊｕｎ、４０（６）、１００４−８）に従って測定した。
【０１１８】
上記のＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ試験について記載した手順を用い、参照実施例１Ａの化合物について５ｎＭのＥＣ５０が測定された。
【０１１９】
ＩＩ． 「化合物」の塩結晶型の製造
ＩＩ．ａ） 「化合物」を用いた塩形成の一般的手順：
１ｅｑ．の「化合物」を溶媒１に溶解した。溶液を５０℃にした。溶媒２に溶解した２当量の酸を添加した。混合物を５０℃にて５ｍｉｎ攪拌し、そして熱源のスイッチを切った。混合物を１時間以内にｒｔに冷ました。沈殿が観察された場合には、混合物をろ過し、そして固形物を単離した。固形物が得られない場合には、混合物を蒸発乾固し、そして６容量のヘプタンを添加した。混合物を加熱還流し、全部が溶解するまで３容量のＥｔＯＡｃを添加した。溶解が完了しない場合には、さらに３容量のＥｔＯＡｃを添加した。溶解がなお完了しない場合には、できるだけ少量のＭｅＯＨを、溶解が完了するまで添加した。混合物をゆっくりとｒｔに冷ました。Ｒｔにて、容器をスパチュラで引っかき、そして０℃にさらに冷却した。混合物をろ過し、そして溶液をｒｏｔａｖａｐｏｒ上で蒸発乾固した。
【０１２０】
ここで使用する「容量」という用語は、１ｋｇの固形物質に対して１Ｌを意味する。
【０１２１】
溶媒１＝ベンゼンスルホン酸、安息香酸、サリチル酸、サッカリン、パラ−トルエンスルホン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、リンゴ酸、グリコール酸、ケトグルタル酸及びフマル酸に対しては、８容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒１＝臭化水素酸及び塩酸に対しては、１．８容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒１＝硫酸及びリン酸に対しては、８容量のアセトン；
溶媒１＝クエン酸、コハク酸及び酒石酸に対しては７容量のアセトン。
溶媒２＝クエン酸に対しては７容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒２＝ベンゼンスルホン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、サリチル酸及びサッカリン（部分的に溶解性）に対しては３容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒２＝パラ−トルエンスルホン酸、マロン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、リンゴ酸、グリコール酸、ケトグルタル酸及びフマル酸に対しては３容量のＭｅＯＨ；
溶媒２＝コハク酸に対しては１５容量のアセトン；
溶媒２＝酒石酸に対しては１２容量のＥｔＯＨ；
溶媒２＝臭化水素酸、塩酸、硫酸及びリン酸に対しては水。
【０１２２】
上記の一般的手順を用いて得られた結果を、表１及び２に要約する。「化合物」の塩結晶型を製造するために特定の手順を用いた場合には、そのうような手順を、下記の参照実施例Ｓ１及び実施例Ｓ２〜Ｓ７に記載する。
【０１２３】
【表２】
【０１２４】
【表３】
【０１２５】
【表４】
【０１２６】
【表５】
【０１２７】
参照実施例Ｓ１：「化合物」の二−塩酸塩の製造及び定性分析
７．５９８ｍＬのａｑ．ＨＣｌ（０．１Ｎ）を２００．７ｍｇの「化合物」に添加し、白色の懸濁液を生成させた。５ｍＬの２−ＰｒＯＨを添加し、そして得られた清澄な溶液を窒素下で蒸発乾固させた。４ｍＬのＴＢＭＥを残渣に添加し、そして懸濁液を温度サイクル（Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度は５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥して、「化合物」の二−塩酸塩、２６５ｍｇを得た。
【０１２８】
【表６】
【０１２９】
実施例Ｓ２：「化合物」の二−メタンスルホン酸塩の製造及び定性分析
０．０４７６ｍＬのメタンスルホン酸を、７ｍｌのＥｔＯＡｃに溶解した、１９９．７ｍｇの「化合物」の清澄な溶液に添加した。この清澄な溶液を窒素下で蒸発乾固し、そして得られた残渣を、４ｍＬのＥｔＯＡｃ／ヘプタン（１：３）混合物中に懸濁し、そして温度サイクル（Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥した。得られた固形物を１ｍＬのＴＢＭＥに懸濁し、そして温度サイクル（Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥して、「化合物」の二−メタンスルホン酸塩を得た。
【０１３０】
【表７】
【０１３１】
実施例Ｓ３：「化合物」の二−パラ−トルエンスルホン酸塩の製造及び定性分析
１９９．７ｍｇの「化合物」を、７ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した。１０ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した、１３９．２ｍｇのパラ−トルエンスルホン酸を添加した。清澄な溶液を窒素下で蒸発乾固し、そして残渣を、４ｍＬのＥｔＯＡｃ／Ｈｅｐｔ（１：３）混合物に懸濁し、そして温度サイクル（温度サイクル：Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、溶媒を窒素下で蒸発させ、そして固体残渣を２ｍｌのＥｔＯＡｃに懸濁した。短時間（３ｍｉｎ）の超音波処理の後、懸濁液を、温度サイクル（温度サイクル：Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥して、１７３．８ｍｇの「化合物」の二−パラ−トルエンスルホン酸塩を得た。
【０１３２】
【表８】
【０１３３】
実施例Ｓ４：「化合物」の硫酸塩の製造及び定性分析
０．７３３ｍＬの水性硫酸（０．５Ｍ）を、２００．２ｍｇの「化合物」のＭＥＫ１０ｍＬ中の溶液に添加し、清澄な溶液を生成させた。２日後、得られた懸濁液をろ過し、そして固形物を１ｈ真空乾燥して、約６当量の水を含む、「化合物」のモノ硫酸塩を得た。
【０１３４】
【表９】
【０１３５】
実施例Ｓ５：「化合物」の二−マレイン酸塩の製造及び定性分析
ＭｅＯＨ（６３０ｍＬ、１．１容量）に溶解したマレイン酸（２５６ｇ、２．２ｍｏｌ、２．１ｅｑ）を、「化合物」（６８２ｇ、８４％ｗ／ｗ（ＮＭＲアッセイ）、１．０５ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６．３Ｌ、１１容量）中の還流溶液に添加した。得られた混合物を還流下で１５分攪拌し、次いで３０分以内に６５−６８℃に冷却し、そして「化合物」の二−マレイン酸塩のシードクリスタル（シードクリスタルは、同じプロトコルを用いた注意深い結晶化の後に得られた。）０．０４％ｗ／ｗでシードした。次いで、混合物を３ｈ以内に６５−６８℃から４０℃に冷却した。次いで、得られた懸濁液を１ｈに渡って２０℃に冷却し、０．２ｂａｒの窒素下でろ過し、そしてＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ ２．６容量）でリンスした。次いで、得られた白色の固体を、１気圧の窒素下で２４時間乾燥して、「化合物」の二−マレイン酸塩７１５ｇ（８８％）を得た。
【０１３６】
【表１０】
【０１３７】
実施例Ｓ６：「化合物」のセスキ−フマル酸塩の製造
１９９．５ｍｇの「化合物」を、５ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した。８５．４ｍｇのフマル酸の、５ｍＬのＴＨＦ中の清澄な溶液を、ゆっくりと添加した。得られた清澄な溶液を、窒素下で３ｍＬの溶液に濃縮し、沈殿を生成させた。混合物をろ過し、そして固形物を真空乾燥した。得られた固体は、「化合物」のセスキ−フマル酸塩であった。
【０１３８】
【表１１】
【０１３９】
実施例Ｓ７：「化合物」の二−臭化水素酸塩の製造
水性臭化水素酸の２モル水溶液０．３６６５ｍＬを、１９９．８ｍｇの「化合物」の、０．４ｍｌのＴＨＦ中の溶液にゆっくりと添加し、そして得られた懸濁液を加熱した（ヒートガン）。清澄な溶液をｒ．ｔ．に冷却して、沈殿を生成させた。３ｍＬのＴＨＦを添加し、懸濁液を振とうし、そして固形物を真空乾燥した（１ｈ、３ｍｂａｒ）。得られた固体は、約３当量の水を含む、「化合物」の二−臭化水素酸塩であった。
【０１４０】
【表１２】
【技術分野】
【０００１】
塩結晶型
本発明は、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト（ｏｃｔ）−５−エン−２−イルエステル（以下、「化合物」とも記載する。）又はそのエナンチオマーの新規な塩結晶型、その製造方法、当該塩結晶型を含む医薬組成物、及び慢性安定狭心症、高血圧、（腎臓及び心臓の）虚血、心房細動を含む不整脈、心肥大又はうっ血性心不全の治療又は予防におけるカルシウムチャンネルブロッカーとしてのそれらの使用に関する。本発明の当該塩結晶型はまた、単独で、又は医薬組成物中で、人及び他の哺乳類における腎臓病、糖尿病及びその合併症、高アルドステロン症、てんかん、神経因性疼痛又は癌の治療のために使用してもよい。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
多くの心血管疾患は、心臓及び血管平滑筋細胞の細胞膜を介した、異常に上昇したカルシウムの流入の結果としてのカルシウム過負荷と関連づけられる。細胞外カルシウムがこれらの細胞内に入る３つの主要な経路がある：１）受容体―活性化型カルシウムチャンネル、２）リガンド依存型カルシウムチャンネル、３）電圧駆動型カルシウムチャンネル（ＶＯＣｓ）。
【０００３】
ＶＯＣｓは、６つの主要なカテゴリーに分類される：Ｌ（Ｌｏｎｇ−ｌａｓｔｉｎｇ）、Ｔ（Ｔｒａｎｓｉｅｎｔ）、Ｎ（Ｎｅｕｒｏｎａｌ）、Ｐ（プルキンエ細胞）、Ｑ（Ｐの後）及びＲ（Ｒｅｍａｉｎｉｎｇ又はＲｅｓｉｓｔａｎｔ）。
【０００４】
Ｌ型カルシウムチャンネルは、カルシウムの内側への移動を司り、心臓及び血管平滑筋細胞の収縮を引き起こすため、心血管系分野における、これらのチャンネルのブロッカーの適用が示唆される。このような見地から、Ｌ型カルシウムチャンネルは、６０年代初期より、医療において用いられており、現在、収縮期拡張期高血圧及び狭心症の一次治療として推奨されている。
【０００５】
Ｔ型カルシウムチャンネルは、冠状及び抹消脈管、洞結節及びプルキンエ繊維、脳、副腎等の種々の組織及び腎臓において見られる。この広範な分布は、Ｔ型カルシウムチャンネルが心血管保護作用を有し、睡眠障害、気分障害、うつ病、偏頭痛、高アルドステロン血症、早期分娩、尿失禁、アルツハイマー病等の脳老化又は神経変性障害に対し効果を有することを示唆する。
【０００６】
最初のＬ型及びＴ型カルシウムチャンネルブロッカーであるＭｉｂｅｆｒａｄｉｌ（Ｐｏｓｉｃｏｒ（登録商標））は、主にＬチャンネルを標的とするカルシウムチャンネルブロッカーに対し優位な効果を示した。Ｍｉｂｅｆｒａｄｉｌは、Ｌチャンネルブロッカーでよく見られる、変力作用、反射性頻脈、血管収縮性ホルモンの分泌又は末梢性浮腫等の好ましくない副作用を示すことなく、高血圧及び狭心症の治療に用いられた。加えて、ｍｉｂｅｆｒａｄｉｌは、潜在的な心筋保護効果（Ｖｉｌｌａｍｅ、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ １５、４１−２８、２００１；Ｒａｍｉｒｅｓ、Ｊ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｃａｒｄｉｏｌ １９９８、３０、４７５−８３）、腎保護作用（Ｈｏｎｄａ、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ １９、２０３１−３７、２００１）を示し、また、心不全の治療において有効な効果を示した（Ｃｌｏｚｅｌ、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ １９９９、１１１、４２９−３７、）。
【０００７】
このようなプロファイルを持つ化合物に対する大きな需要にもかかわらず、許容できないＣＹＰ ３Ａ４薬物間相互作用のため、ｍｉｂｅｆｒａｄｉｌは、１９９８年に（上市から１年後）市場から回収された。さらに、ＥＣＧ異常（すなわち、ＱＴ延長）及びＭＤＲ−１介在ジゴキシン流出との相互作用も報告された（ｄｕ Ｓｏｕｉｃｈ、Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ６７、２４９−５７、２０００；Ｗａｎｄｅｌ、Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ ２０００、２８、８９５−８、）。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
「化合物」（イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル）の塩結晶型が、特定の条件下において見出されることがわかった。「化合物」の当該塩結晶型は新規であり、そして、特に「化合物」の遊離塩基（ＷＯ２００８／１３２６７９）又は二塩酸塩と比べて有利な特性を有するかもしれない。そのような利点は、より良い流動特性、より良い溶解性、より小さい吸湿性、製造におけるより良い再現性（例えば、より良いろ過パラメーター、形成のより良い再現性、より良い沈降性）、制御された形態学的特性及び／又はより良い長期安定性を含むかもしれない。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、参照実施例Ｓ１から得られた結晶型における、「化合物」の二塩酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：３．０２°（１００％）、９．１９°（８８％）、９．７７°（８１％）、１０．８１°（１６％）、１２．５０°（１９％）、１２．９４°（２１％）、１３．１５°（３０％）、１４．３０°（２６％）、１４．６２°（２４％）、１５．３６°（６６％）、１６．１４°（３７％）、１７．０８°（７３％）、１８．１２°（７６％）、１９．４６°（４５％）、１９．７１°（４０％）、２０．５４°（３５％）、２０．９２°（３１％）、２１．１７°（２９％）、２１．５６°（４１％）、２２．４７°（２９％）、２２．９０°（２２％）、２３．９９°（２４％）、２５．４１°（５２％）、２６．０５°（３１％）、２６．９０°（３２％）、２７．２８°（２４％）及び２８．４５°（３７％）。
【図２】図２は、実施例Ｓ２から得られた結晶型における、「化合物」の二メチルスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：３．９７°（１００％）、７．２１°（４２％）、１０．００°（３９％）、１４．０９°（４０％）、１４．４５°（２９％）、１５．９９°（５５％）、１６．３８°（２２％）、１７．１６°（５１％）、１８．１２°（４４％）、１８．３４°（５３％）、１８．６０°（１９％）、１９．３８°（２５％）、２０．６２°（３５％）、２１．０２°（７４％）、２１．７９°（１８％）、２２．２４°（２５％）、２６．６６°（３０％）及び２７．６３°（２９％）。
【図３】図３は、実施例Ｓ３から得られた結晶型における、「化合物」の二トルエンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：４．３５°（３１％）、５．７９°（１００％）、７．４３°（１６％）、８．６２°（１７％）、１０．９３°（１９％）、１１．５１°（３１％）、１３．９８°（３４％）、１５．８１°（２６％）、１８．０６°（３０％）、１９．００°（２０％）、１９．３９°（２１％）、１９．８４°（３１％）、２０．３０°（２５％）及び２５．５１°（２０％）。
【図４】図４は、実施例Ｓ４から得られた結晶型における、「化合物」の硫酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−３０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：２．８５°（１００％）、８．５０°（２１％）、９．５０°（２８％）、１１．７８°（８５％）、１３．２６°（４１％）、１３．６９°（５１％）、１４．１９°（８２％）、１５．７８°（４０％）、１６．４７°（３９％）、１７．１２°（３８％）、１８．９１°（４０％）、１９．４８°（４３％）、２６．７７°（６５％）及び２７．２４°（６３％）。
【図５】図５は、実施例Ｓ５から得られた結晶型における、「化合物」の二マレイン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：５．０７°（２６％）、８．１９°（１２％）、１０．１５°（９３％）、１５．２６°（３９％）、１７．２０°（１２％）、１７．６１°（１８％）、２０．３９°（１００％）、２０．８８°（１２％）、２２．６３°（４７％）、２３．９３°（４３％）、２４．２７°（２６％）、２４．５１°（１３％）、２４．７３°（１７％）、２５．６１°（２１％）、２９．４２°（２５％）及び３２．９３°（１６％）。
【図６】図６は、実施例Ｓ６から得られた結晶型における、「化合物」のセスキ−フマル酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：５．２７°（５７％）、８．０５°（１００％）、１２．９３°（１８％）、１５．２０°（１０％）、１５．５０°（２０％）、１９．４５°（１４％）、２０．３１°（３１％）、２０．６１°（６２％）、２１．１１°（２７％）、２２．７７°（１５％）、２５．４２°（１１％）、２６．２２°（１１％）及び３１．２７°（２１％）。
【図７】図７は、実施例Ｓ７から得られた結晶型における、「化合物」の二臭化水素酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法１により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（２−４０°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：３．１°（５９％）、６．２°（２８％）、９．３°（１８％）、１４．４°（１１％）、１５．６°（１００％）、１７．３°（３３％）、１８．１°（１５％）、１９．４°（２０％）、２０．０°（３７％）、２１．４°（１４％）、２２．８°（１６％）及び３４．８°（４３％）。
【図８】図８は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」のセスキ−ナフタレン−１，５−ジスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：９．９°（４０％）、１０．４°（１８％）、１２．８°（４２％）、１４．２°（１００％）、１５．０°（７３％）、１８．３°（６８％）、１９°（５４％）、２０．１°（３９％）、２０．６°（４８％）、２１．３°（８３％）、２３．８°（１３％）、２４．９°（１４％）及び２６．２°（２２％）。
【図９】図９は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」の二ベンゼンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：８．１°（１６％）、８．５°（１８％）、１０．９°（２０％）、１１．４°（１６％）、１２．３°（２０％）、１２．６°（３７％）、１２．９°（２２％）、１３．４°（５５％）、１４．６°（３２％）、１５．３°（３７％）、１６．１°（２７％）、１７．５°（７１％）、１７．９°（３７％）、１９．１°（２２％）、１９．４°（２５％）、２０．１°（４６％）、２１．３°（９１％）、２１．８°（４６％）、２２．７°（１００％）、２３．６°（１８％）、２４．５°（２０％）及び２５．５°（２１％）。
【図１０】図１０は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」の二エタンスルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：９．６°（２５％）、９．９°（２１％）、１０．５°（２３．３％）、１１．２°（２７％）、１１．９°（１７％）、１２．９°（４８％）、１４．５°（５３％）、１５．０°（４０％）、１５．７°（１００％）、１６．５°（６５％）、１７．０°（４０％）、１７．７°（４９％）、１９．０°（６７％）、１９．７°（６９％）、２０．４°（６８％）、２１．５°（５５％）、２２．６°（６７％）及び２３．３°（４７％）。
【図１１】図１１は、塩形成の一般的手順から得られた結晶型における、「化合物」の二ナフタレン−２−スルホン酸塩の粉末Ｘ線回折ダイアグラムを示す。方法２により測定されたＸ線回折ダイアグラムは、示した屈折角２シータ（２θ）での、ダイアグラムにおける最も強いピークと比較して、下記のパーセンテージの相対強度を有するピークを示す（相対的ピーク強度を括弧内に記載する。）（８−２６．５°の範囲の２シータから選択した、１０％より大きな相対強度を有するピークを報告する。）：９．８°（９８％）、１１．２°（４５％）、１１．８°（２４％）、１３．７°（２０％）、１４．６°（３３％）、１５．６°（１００％）、１６．９°（９０％）、１９．４°（９６％）、２２．４°（４５％）及び２３．９°（２３％）。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
図の説明
図１〜図１１のＸ線回折ダイアグラムにおいては、屈折角２シータ（２θ）を横軸に、測定値を縦軸にプロットする。
【００１１】
発明の詳細な説明
１） 本発明は、「化合物」（イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル）の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩に関し；当該結晶塩は：
・１当量の「化合物」；
・臭化水素酸、硫酸、マレイン酸、フマル酸、メタンスルホン酸、パラ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸及びエタンスルホン酸から成る群より選択される酸、１〜２当量からなる酸成分；及び
・０〜５当量の水
からなる。
【００１２】
２） 別の態様は、「化合物」が光学的に活性なイソ酪酸 （１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、態様１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１３】
３） 別の態様は、「化合物」が光学的に活性なイソ酪酸 （１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、態様１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１４】
４） 別の態様は、「化合物」が、負の旋光性を有する光学活性形態のイソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、態様１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１５】
５） 別の態様は、当該結晶塩が、０〜３（特に０．５〜３、とりわけ１〜２）当量の水を含む、態様１）〜４）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１６】
６） 別の態様は、当該結晶塩が、０当量の水を含む、態様１）〜４）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１７】
７） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が、１又は２（特に２）当量の臭化水素酸、１又は２当量の硫酸、１又は２（特に２）当量のマレイン酸、１〜２（特に１．５）当量のフマル酸、１又は２（特に２）当量のメタンスルホン酸、１又は２（特に２）当量のパラ−トルエンスルホン酸、１又は２（特に２）当量のベンゼンスルホン酸、１〜２（特に１．５）当量のナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１又は２（特に２）当量のナフタレン−２−スルホン酸又は１又は２（特に２）当量のエタンスルホン酸からなる、態様１）〜６）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００１８】
副態様において、当該結晶塩の酸成分は、好ましくは、２当量の臭化水素酸、１又は２当量の硫酸、２当量のマレイン酸、１〜２（特に１．５）当量のフマル酸、２当量のメタンスルホン酸、２当量のパラ−トルエンスルホン酸又は２当量のベンゼンスルホン酸からなる。別の副態様において、当該結晶塩の酸成分は、好ましくは、１又は２（特に２）当量のマレイン酸又は１〜２（特に１．５）当量のフマル酸からなる。
【００１９】
８） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量の臭化水素酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。副態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量の臭化水素酸からなり；そして当該結晶塩が約３当量の水を含む、態様１）〜５）又は７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２０】
９） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が１又は２当量の硫酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２１】
１０） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のマレイン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２２】
１１） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が１〜２（特に１．５）当量のフマル酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２３】
１２） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のメタンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２４】
１３） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のパラ−トルエンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２５】
１４） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のベンゼンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２６】
１５） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が１〜２（特に１．５）当量のナフタレン−１，５−ジスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２７】
１６） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のナフタレン−２−スルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２８】
１７） 別の態様は、当該結晶塩の酸成分が２当量のエタンスルホン酸からなる、態様１）〜７）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００２９】
１８） 別の態様は、当該結晶塩が：
・１当量の「化合物」又は態様２）〜４）のいずれか１つに定義する光学的に活性な「化合物」；
・２当量のマレイン酸；及び
・０当量の水：
からなる、態様１）又は１０）に従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩に関する。
【００３０】
１９） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ： １０．１５°、２０．３９°及び２２．６３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１０）又は１８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３１】
２０） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．０７°、８．１９°、１０．１５°、１５．２６°、１７．６１°、２０．３９°、２２．６３°、２３．９３°、２４．２７°及び２５．６１°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１０）又は１８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３２】
２１） 別の態様は、本質的に、図５に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１０）又は１８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３３】
２２） 別の態様は、本明細書に記載の方法を用い、示差走査熱量測定により決定した約１４７℃の融点を有する、態様１０）又は１８）〜２１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３４】
２３） 別の態様において、本発明は：
１． 「化合物」（６８２ｇ、８４％ｗ／ｗ、１．０５ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６．３Ｌ、１１容量）中の溶液を還流し；
２． ＭｅＯＨ（６３０ｍＬ、１．１容量）中に溶解したマレイン酸（２５６ｇ、２．２ｍｏｌ、２．１ｅｑ）を添加し；
３． 得られた混合物を還流下で１５分間攪拌し、そして３０分以内に６５−６８℃に冷却し；
４． ０．０４％ｗ／ｗのシードクリスタルで任意にシードし；
５． ３時間以内に当該混合物を４０℃に冷却し；
６． １時間以内に当該混合物を２０℃に冷却し；
７． ０．２ｂａｒの窒素下、固形物をろ過し、そして当該固形物をＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ ２．６容量）でリンスし；そして
８． 当該固形物を１気圧の窒素下で２４時間乾燥する；
ことにより得ることができる、態様１０）又は１８）〜２２）のいずれか１つに従う結晶塩に関する。
【００３５】
２４） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．３°、１５．６°及び１７．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３６】
２５） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：６．２、９．３°、１５．６°、１７．３°、１８．１°、１９．４°、２０．０°及び２２．８°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様８）又は２４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３７】
２６） 別の態様は、本質的に、図７に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様８）、２４）又は２５）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３８】
２７） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．２７°、８．０５°及び２０．６１°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００３９】
２８） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．２７°、８．０５°、１２．９３°、１９．４５°、２０．６１°、２１．１１°及び３１．２７°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１１）又は２７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４０】
２９） 別の態様は、本質的に、図６に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１１）、２７）又は２８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４１】
３０） 別の態様は、本明細書に記載の方法を用い、示差走査熱量測定により決定した約１８０℃の融点を有する、態様１１）又は２７）〜２９）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４２】
３１） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：７．２１°及び１０．００°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１２）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４３】
３２） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：３．９７°、７．２１°、１０．００°、１５．９９°、１７．１６°及び２１．０２°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１２）又は３１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４４】
３３） 別の態様は、本質的に、図２に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１２）、３１）又は３２）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４５】
３４） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．７９°及び１９．８４°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１３）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４６】
３５） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：４．３５°、５．７９°、１０．９３°、１３．９８°、１５．８１°及び１９．８４°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１３）又は３４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４７】
３６） 別の態様は、本質的に、図３に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１３）、３４）又は３５）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４８】
３７） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１３．４°、１７．５°及び２１．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００４９】
３８） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１２．６°、１３．４°、１４．７°、１７．５°、２１．３°及び２２．７°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１４）又は３７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５０】
３９） 別の態様は、本質的に、図９に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１４）、３７）又は３８）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５１】
４０） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．９°、１４．２°及び２１．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１５）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５２】
４１） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．９°、１２．９°、１４．２°、２０．１°、２０．６°及び２１．３°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１５）又は４０）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５３】
４２） 別の態様は、本質的に、図８に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１５）、４０）又は４１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５４】
４３） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．８°、１１．２°及び１５．６°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１６）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５５】
４４） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．８°、１１．２°、１５．６°、２２．４°及び２３．９°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１６）又は４３）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５６】
４５） 別の態様は、本質的に、図１１に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１６）、４３）又は４４）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５７】
４６） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１１．２°、１５．７°及び２０．４°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５８】
４７） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１１．２°、１４．５°、１５．７°、１７．７°、２０．４°及び２２．６°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様１７）又は４６）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００５９】
４８） 別の態様は、本質的に、図１０に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様１７）、４６）又は４７）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６０】
４９） 本発明はさらに、
・１当量の「化合物」；
・約１当量の硫酸からなる酸成分；及び
・約６当量の水；
からなる、「化合物」（イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル）の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩に関する。
【００６１】
５０） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１１．７８°、１３．６９°及び１４．１９°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様４９）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６２】
５１） 別の態様は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：２．８５°、８．５０°、９．５０°、１１．７８°、１３．２６°、１３．６９°及び１４．１９°におけるピークの存在により特徴づけられる、態様４９）又は５０）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６３】
５２） 別の態様は、本質的に、図４に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、態様４９）、５０）又は５１）に従う「化合物」の結晶塩に関する。
【００６４】
疑義を避けるために、上記態様の１つ、特に態様１９）、２０）、２４）、２５）、２７）、２８）、３１）、３２）、３４）、３５）、３７）、３８）、４０）、４１）、４３）、４４）、４６）、４７）、５０）及び５１）の１つが、「粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおける、以下の屈折角２θにおけるピーク」に言及する場合は常に、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムは、Ｃｕ Ｋα１照射（λ＝１．５４０６Å）を用いて得られたものであり；そして本明細書で提供される２θ値の精度は＋／−０．１〜０．２°の範囲内であることが理解されるべきである。特に、本発明の態様及びクレーム中でピークに対する屈折角２シータ（２θ）を特定する場合、記載された当該２θ値は、当該値−０．２°から当該値＋０．２°（２θ＋／−０．２°）の間；そして好ましくは当該値−０．１°から当該値＋０．１°（２θ＋／−０．１°）の間と理解されるべきである。
【００６５】
疑義を避けるために、立体異性体の相対配置は下記のように示される：イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルは、
イソ酪酸 （１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル又は
イソ酪酸 （１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル、
又は、例えばラセミ体のように、これらの２種のエナンチオマーの混合物を意味する。
【００６６】
本明細書に記載した「化合物」、すなわちイソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの塩結晶型が本発明の範囲に包含され、「化合物」はラセミ体であってもよく；絶対配置（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）のエナンチオマーの光学活性体であっても；絶対配置（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）のエナンチオマーの光学活性体であっても；又はこれらの２種のエナンチオマーのいかなる混合物あってもよい。好ましくは、本明細書に記載の方法を用いて決定される負の旋光性を有する光学活性体である。
【００６７】
化合物、塩、医薬組成物、疾病等について複数形が使用される場合は、単数の化合物、塩等をも意味することが意図されている。
【００６８】
「光学的に活性な」という用語は、本発明の文脈において、「化合物」の少なくとも９０、好ましくは少なくとも９５、そして最も好ましくは少なくとも９９重量パーセントが、「化合物」の一方のエナンチオマーの形態で存在することを意味するものと理解される。
【００６９】
「本質的に純粋な」という用語は、本発明の文脈において、「化合物」の結晶の少なくとも９０、好ましくは少なくとも９５、そして最も好ましくは少なくとも９９重量パーセントが、本発明の結晶型、特に本発明の単一の結晶型で存在すること、を特に意味するものと理解される。
【００７０】
例えば、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおけるピークの存在を定義する場合、通常の方法は、Ｓ／Ｎ比（Ｓ＝シグナル、Ｎ＝ノイズ）の点からこれを行うことである。この定義に従えば、粉末Ｘ線回折ダイアグラムにピークが存在しなければならないと述べる場合、粉末Ｘ線回折ダイアグラムのピークは、ｘ（ｘは１より大きい数値である。）より大きい、通常は２より大きい、特に３より大きいＳ／Ｎ比（Ｓ＝シグナル、Ｎ＝ノイズ）を持つことにより定義されるものと理解されるべきである。
【００７１】
結晶型が、本質的に、それぞれ図１〜図１１に表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、という記載の文脈において、「本質的に」という用語は、少なくとも当該図に表されるダイアグラムの主要なピーク、すなわち、ダイアグラムにおいて最も強いピークと比べ、１０％、特に２０％を超える相対強度を有するピークが存在しなければならないことを意味する。しかしながら、粉末Ｘ線回折の当業者は、粉末Ｘ線回折ダイアグラムの相対強度が、好ましい配向効果に起因する強い強度変動に付され得ることを認識しているはずである。
【００７２】
温度に関して使用されていない場合には、数値「Ｘ」の前に置かれる「約」という用語は、本出願において、Ｘ−１０％ＸからＸ＋１０％Ｘの間、好ましくはＸ−５％ＸからＸ＋５％Ｘの間を表す。温度の特定の場合には、温度「Ｙ」の前に置かれる「約」の用語は、この出願において、Ｙ−１０℃からＹ＋１０℃の間、好ましくはＹ−５℃からＹ＋５℃の間を表す。室温は約２５℃の温度を意味する。本出願において、ｎ当量（ｎは数値である。）という用語が用いられる場合、本出願の範囲内において、ｎは数値ｎの近傍を意味し、好ましくはｎは正確な数値ｎを意味する。
【００７３】
態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、医薬として、例えば経腸又は非経口投与のための医薬組成物の形態で使用することができる。
【００７４】
医薬組成物の製造は、いずれの当業者にもよく知られた様式で（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００５）、Ｐａｒｔ ５、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ」［ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ］を見よ。）、本発明の結晶型を、任意にその他の治療的に有益な物質と組み合わせて、適切な無毒の不活性な薬学的に許容される固体又は液体の担体材料及び必要に応じて、通常の薬学的アジュバントと共に、製剤投与形態とすることにより遂行することができる。
【００７５】
態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、単一成分として、又は「化合物」の他の結晶型若しくはアモルファス形態との混合物として使用してもよい。
【００７６】
態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、
・慢性安定狭心症、高血圧、（腎臓及び心臓の）虚血、心房細動を含む不整脈、心肥大又はうっ血性心不全の治療又は予防に適切であり、そして／又はそのための医薬の製造において有用である。
【００７７】
さらにまた、態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩は、以下の疾病群の単独の疾病又はそれらの任意の組み合わせに対して適切であり、そして／又はそのための医薬の製造に有用である：
・人及び他の哺乳類における腎臓病、糖尿病及びその合併症、高アルドステロン症、てんかん、神経因性疼痛又は癌の治療用；
・抗細動薬、抗喘息薬、抗動脈硬化薬、肺バイパス用心停止液の添加剤、血栓溶解療法の補助薬としての、抗凝集薬としての、又は、不安定性狭心症の治療薬としての使用のため；
・高血圧、特に、門脈圧亢進、エリスロポエチンによる治療に続発する高血圧及び低レニン性高血圧の治療又は予防のため；
・低酸素性又は虚血性疾患における使用、又は、例えば、（例えば、心肺バイパス手術後に起こる）心、腎及び脳虚血及び再灌流、冠動脈及び脳血管れん縮等の治療のための抗虚血薬としての使用、抹消血管疾患（例えば、レイノー病、間欠は行、高安病）、疼痛クリーゼの初発及び／又は進展を含む鎌状赤血球症の治療における使用のため；
・急性及び慢性腎不全、糖尿病性ネフローゼ、高血圧によるネフローゼ、糸球体傷害、老化又は透析に関連する腎障害、腎硬化症、造影剤及びシクロスポリンに関連する腎毒性、腎虚血、原発性膀胱尿管逆流症又は糸球体硬化症を含む、腎、糸球体及びメサンギウム細胞機能に関連する疾患の治療又は予防のため；
・心筋梗塞の治療、心肥大、原発性及び二次性肺高血圧症の治療、繊維化の阻害、左心室肥大、リモデリング及び不全の阻害を含むうっ血性心不全、又は血管形成術若しくはステント後の再狭窄の治療における使用のため；
・内毒血症若しくはエンドトキシンショック、又は出血性ショックの治療のため；
・生殖器、特に海綿体への血流を改善することによる、男性（例えば、糖尿病、脊髄損傷、前立腺全摘除、心理的要因及び他の原因による勃起不全）及び女性双方における性機能障害の治療のため；
・癌又は細胞増殖に関連する臓器障害の予防及び／若しくは縮小のため；
・代謝障害又は慢性炎症性疾患、インスリン依存性又は非インスリン依存性糖尿病及びその合併症（例えば、神経障害、網膜症）、高アルドステロン症、骨リモデリング、乾癬、関節炎、関節リウマチ、変形性関節症サルコイドーシス又は湿疹性皮膚炎の治療のため；
・肝毒性及び突然死、合併症（例えば、肝毒性、繊維化、硬変）を含む初期及び進行肝疾患及び障害、血管外皮細胞腫に起因する高血圧等の腫瘍の有害な影響、尿路及び／又は膀胱の痙攣性疾患、肝腎症候群、全身性エリテマトーデス、全身性硬化症、混合型クリオグロブリン血症等の血管炎に関連する免疫疾患、腎不全及び肝毒性に関連する繊維化の治療のため；
・潰瘍性大腸炎、クローン病、胃粘膜損傷、潰瘍炎症性腸疾患及び虚血性腸疾患等の胃腸疾患、胆管炎等の胆嚢若しくは胆管に基づく疾患、膵炎、細胞増殖の制御、前立腺肥大症又は移植における使用のため、又は止痢薬としての使用のため；
・気管支収縮に関連する疾患、又は閉塞性肺疾患及び成人窮迫症候群等の慢性若しくは急性の炎症性障害の治療のため；
・神経因性疼痛、末梢性の痛み、及び前立腺癌又は骨癌に関連する痛み等の癌に関連する痛みを含む痛みの緩和のため；
・脳梗塞、一過性脳虚血発作、偏頭痛及びクモ膜下出血等の中枢神経系血管障害、中枢神経系行動障害の治療、アルツハイマー型痴呆、老人性痴呆及び血管性痴呆等を含む痴呆、てんかん又は睡眠障害の治療のため；又は
・上記の使用の結果としての一般罹患率及び／又は死亡率の減少のため。
【００７８】
本発明はまた、薬学的に活性な量の態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩を対象に投与することを含む、ここに言及した疾患又は障害の予防又は治療のための方法に関する。
【００７９】
さらに、態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩、特に本質的に純粋な結晶塩はまた、好ましくは、スタチン等の高脂血症薬、クマリン等の抗凝固薬、クロピドグレル等の抗血栓薬、β−ブロッカー及び他の心保護薬から選択される１又は２以上の薬剤と組み合わせて使用してもよい。
【００８０】
本発明はまた、ラセミ体及び光学的に活性な形態の「化合物」を製造する方法、及び態様１）〜５１）のいずれか１つに従う「化合物」の結晶塩の製造及び定性分析の方法にも関し、当該方法は、下記の実験の部に記載される。
【実施例】
【００８１】
実験の部
以下の実施例は本発明をより詳細に説明する。温度は摂氏度で記載する。他の記載が無い場合には、百分率は重量によって記載する。
【００８２】
この項において、及び前記の部分において使用される略語：
ａｑ． 水性
ｃａ． 約
ＣＣ シリカゲル上カラムクロマトグラフィー
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＡ ジイソプロピルアミン
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン、Ｈｕｅｎｉｇの塩基、
エチル−ジイソプロピルアミン
ＤＭＡＰ ４−ジメチルアミノ−ピリジン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＳＣ 示差走査熱量測定
ｅｑ． 当量
Ｅｔ２Ｏ ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
Ｆｉｇ． 図
ｈ 時間
１Ｈ−ＮＭＲ 水素−１ 核磁気共鳴
Ｈｅｐｔ ヘプタン
Ｈｅｘ ヘキサン
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＭＥＫ ２−ブタノン
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭｅＯＨ メタノール
ＮＥｔ３ トリエチルアミン
Ｐｄ／Ｃ 炭素上パラジウム
２−ＰｒＯＨ イソプロパノール
Ｒｅｄ−Ａｌ 水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム
ＲＨ 相対湿度
ｒｔ 室温
ｒｐｍ 分当たりの回転数
ｓａｔ． 飽和
ＴＢＭＥ ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ｔｅｒｔ．− 三級
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴｓＯＨ パラ（ｐ）−トルエンスルホン酸
ＸＲＰＤ 粉末Ｘ線回折
【００８３】
粉末Ｘ線回折分析（ＸＲＰＤ）
方法１：粉末Ｘ線回折パターンは、反射配置におけるＣｕ Ｋα−照射で作動する３°のウィンドウを持つＬｙｎｘＥｙｅ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ＡｄｖａｎｃｅＸ線回折計（Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ）上で収集した。典型的には、Ｘ−線チューブを４０ｋＶ／４０ｍＡで走査させた。２〜５０°、２シータ（２θ）の走査範囲に渡って、０．０２°（２θ）のステップサイズ及び３７秒のステップタイムを適用した。発散スリットは、サンプルホルダーの深さに応じて、可変的にＶ１２又はＶ２０に設定した。粉末（０．１ｍｍの深さに対しては約１５ｍｇ、そして１ｍｍの深さに対しては約８０ｍｇ）を、０．１ｍｍ又は１ｍｍの深さのシリコン単結晶サンプルホルダー内にわずかにプレスし、そして分析の間、サンプルをそれ自体のプレイン中で回転させた。選択したサンプルをカプトンホイルで覆った。回折データは、装置評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を用いて、Ｋα２成分を除去した後に、Ｃｕ Ｋα１（λ＝１．５４０６Å）を用いてレポートされる。加えて、データ取得中にカプトンで覆ったサンプルについては、装置評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を用いて、バックグラウンドシグナルを除いた。これまでに測定された粉末Ｘ線回折パターンが一般的にそうであるように、本明細書で提供される２θ値の精度は、＋／−０．１〜０．２°の範囲内である。
【００８４】
方法２：粉末Ｘ線回折パターンは、反射配置におけるＣｕ Ｋα−照射で作動するＧＡＤＤＳ ＨｉＳｔａｒ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ＨＴＳ Ｘ線回折計上で収集した。典型的には、Ｘ線チューブを、４０ｋＶ／４０ｍＡにて走査させた。装置の作動は、コランダム標品（ＮＩＳＴ１９７６）を用いてチェックする。室温条件下で走査するサンプルは、受け取った状態の粉末を用いて平板試料として調製した。約３ｍｇのサンプルを、顕微鏡用スライド上に静かにプレスした。データは、１フレーム内で、１８０秒のアクイジション時間（ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｔｉｍｅ）で、７．６°〜２６．７°、２θの角度範囲に渡って収集した。回折データは、Ｋα２成分を除去することなくレポートし、バックグラウンドシグナルは装置評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を用いて除いた。これまでに測定された粉末Ｘ線回折パターンが一般的にそうであるように、本明細書で提供される２θ値の精度は、＋／−０．１〜０．２°の範囲内である。
【００８５】
融点は、Ｂｕｃｈｉ Ｂ−５４０装置上で測定し、そして校正しないか；又は、明記する場合には、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定した：
ＤＳＣデータは、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＤＳＣ７上で収集した。典型的には、乾燥窒素下で蓋をせずに前もって１６時間貯蔵した２−３ｍｇのサンプルを、封止したゴールドパン内で、−２０℃から２００℃に、２０℃ ｍｉｎ−１で加熱した。融点はピーク温度としてレポートする。
【００８６】
旋光度は、室温にて、ナトリウムＤ線（λ＝５８９ｎｍ）を用いて、Ｊａｓｃｏ Ｐ−１０３０装置上で測定した。
【００８７】
１Ｈ−ＮＭＲはＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ４００（４００ＭＨｚ）上で測定した；化学シフトは、使用溶媒と関連して、ｐｐｍで示す；多重度：ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｐ＝五重項、ｈｅｘ＝六重項、ｓｅｐｔ＝九重項、ｍ＝多重項、ｄｍ＝多重項の二重項、ｂｒ＝広域、結合定数はＨｚで示す。）ＮＭＲアッセイは、ヒドロキノンジメチルエーテルを内部標準として用いて測定した。
【００８８】
吸湿性は、ＳＰＳ１１−１００ｍ（Ｐｒｏｊｅｋｔ Ｍｅｓｓｔｅｃｈｎｉｋ、ウルム、ドイツ）上での、走査重量測定蒸気吸着測定により評価した（スキャン速度は、時間当たり５％の相対湿度変化とし、サイクルを５０％の相対湿度で開始し、次いで乾固までスキャンし、そして９５％の相対湿度まで吸着スキャン（ａｎ ｕｐｗａｒｄｓ ｓｃａｎ）を行った。分類は、ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅａ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ（１９９９年版）（例えば、わずかに吸湿性：２％未満の質量増加及びｍａｓｓ／ｍａｓｓが０．２％か、それ以上）に従って行った。吸着スキャンにおける４０％相対湿度と８０％相対湿度との間の質量変化を考慮した。
【００８９】
ＬＣ−ＭＳは下記の条件を用いて行った：ＨＰ １１００ Ｂｉｎａｒｙ Ｐｕｍｐ及びＤＡＤを備えたＦｉｎｎｉｇａｎ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ、カラム：４．６ｘ５０ｍｍ、Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ−ＡＱ、５μｍ、１２０Å、勾配：０．０４％のトリフルオロ酢酸を含む５−９５％のアセトニトリル水溶液、１ｍｉｎ、流速：４．５ｍＬ／ｍｉｎ、ｔＲはｍｉｎで記載する。
【００９０】
化合物は、分取用ＨＰＬＣ（カラム：Ｘ−ｔｅｒｒａ ＲＰ１８、５０ｘ１９ｍｍ、５μｍ、勾配：０．５％のギ酸を含む１０−９５％のアセトニトリル水溶液）又はシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーで精製する。ラセミ体は、分取用ＨＰＬＣにより、それらのエナンチオマーに分離することができる（好ましい条件：Ｄａｉｃｅｌ、ＣｈｉｒａｌＣｅｌ ＯＤ ２０ｘ２５０ｍｍ、１０μｍ、ヘキサン中４％エタノール、流速１０−２０ｍＬ／ｍｉｎ）。
【００９１】
Ｉ． 「化合物」の製造及び定性分析
「化合物」の製造はＷＯ２００８／１３２６７９により知られている：
中間体の製造
重要な中間体Ｋの製造のための一般的手順：
ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル又はビシクロ［３．２．２］ノン（ｎｏｎ）−８−エン−６−イル誘導体である重要な中間体Ｋ１Ａ及びＫ２Ａは、相対配置（Ｒ＊，Ｒ＊，Ｒ＊）を有する主ラセミ体（すなわち、シクロヘキセン部分の架橋−（ＣＨ２）２−が、ヒドロキシである基−ＯＲ２に対しｃｉｓである）と相対配置（Ｒ＊，Ｓ＊，Ｒ＊）を有する副ラセミ体（すなわち、シクロヘキセン部分の架橋−（ＣＨ２）２−が、ヒドロキシである基−ＯＲ２に対しｔｒａｎｓである）の混合物として得られる。主及び副ラセミ体は、手順Ａ１．５において、重要な中間体Ｋ１Ａについて記載した通りに分離することができる。主ラセミ体は分離され、そして下記の実施例の製造において使用される。
【００９２】
Ｋ１Ａ：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル
Ｋ１Ａ．１（手順Ａ１．１）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，５−ジオン
２５ｍＬの２−（トリメチルシリルオキシ）−１，３−シクロヘキサジエンと１３ｍＬのα−アセトキシアクリロニトリルを混合し、そして封止した容器内で、１５０℃にて２２ｈ加熱した。得られた暗オレンジ色の粘凋な油状物を２００ｍＬのＭｅＯＨに溶解した。２．２ｇのナトリウムメトキシドの、１５０ｍＬのＭｅＯＨ中の溶液を滴下した後、反応混合物をｒｔにて３ｈ攪拌し、氷／水中に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機相を真空濃縮し、そして粗製の残渣を、ＥｔＯＡｃ−Ｈｅｐｔ（１：２）を用いてＣＣで精製して、７．９ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，５−ジオンを得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．４４ｍｉｎ。
【００９３】
Ｋ１Ａ．２（手順Ａ１．２）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−スピロ［ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，２’−［１，３］ジオキソラン］−５−オン
１２０ｍＬのトルエン中に溶解した、４．０ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，５−ジオン（中間体Ｋ１Ａ．１）に、１．７ｍＬのエチレングリコールと０．２７ｇのＴｓＯＨを添加し、そして溶液を激しく攪拌しながら３．５ｈ加熱還流した。反応混合物をｒｔに冷却し、飽和ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、Ｅｔ２Ｏで抽出し、そして有機相を蒸発させた。粗生成物を、Ｈｅｘ−ＥｔＯＡｃ（７：３）を用いてＣＣで精製し、２．４１ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−スピロ［ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，２’−［１，３］ジオキソラン］−５−オンを黄色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．６４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ＋ＣＨ３ＣＮ］＋：２２４．３５。
【００９４】
Ｋ１Ａ．３（手順Ａ１．３）：ｒａｃ−（７Ｒ＊，８Ｒ＊，１０Ｒ＊）−とｒａｃ−（７Ｒ＊，８Ｓ＊，１０Ｒ＊）−７，１０−（１，２−エチレン）−８−フェニル−１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オールの混合物
２．４１ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−スピロ［ビシクロ［２．２．２］オクタン−２，２’−［１，３］ジオキソラン］−５−オン（中間体Ｋ１Ａ．２）の、Ｅｔ２Ｏ中の溶液８０ｍＬに、フェニルマグネシウムブロミド溶液（Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ）１４．５ｍＬを１０ｍｉｎに渡って滴下した。反応混合物をｒｔにて４ｈ攪拌した。次いで混合物を氷で注意深くクェンチし、２Ｎ ＨＣｌ、８ｍＬを添加し、そして相を分離した。有機相を蒸発させ、そして粗生成物を、Ｈｅｐｔ−ＥｔＯＡＣ（７：３）を用いてＣＣで精製して、０．３７ｇの７，１０−（１，２−エチレン）−８−フェニル−１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オールを無色の油状物として得た。（ジアステレオマーのＣＣによる分離が可能であるが、ここでは行わなかった。）ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８４ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４３．３４。
【００９５】
Ｋ１Ａ．４（手順Ａ１．４）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オン
０．５４ｇの７，１０−（１，２−エチレン）−８−フェニル−１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デカン−８−オール（中間体Ｋ１Ａ．３）の、２０ｍＬのアセトン中の溶液に、２００ｍｇのＴｓＯＨを添加し、次いで混合物をｒｔにて２ｄ攪拌した。反応混合物をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、ＥｔＯＡＣで抽出し、そして有機相を蒸発させた。粗生成物を、Ｈｅｐｔ−ＥｔＯＡＣ（７：３）を用いてＣＣで精製し、０．３４ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オンを無色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９３ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ＋ＣＨ３ＣＮ］＋：２４０．１１。
【００９６】
Ｋ１Ａ．５（手順Ａ１．５）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル及びｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｓ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル
０．５１ｍＬのＤＩＰＡの、０．５ｍＬのＴＨＦ中の溶液に、２．２ｍＬのｎ−ブチルリチウム（Ｈｅｘ中１．６Ｍ）を−２０℃にて滴下した。１０ｍｉｎ後、０．５ｍＬのトルエンを添加し、そして溶液を３０ｍｉｎ攪拌した。混合物を−５０℃に冷却し、０．７３ｍＬの酢酸ｔｅｒｔ．−ブチルを添加し、そして攪拌を−５０℃にて１ｈ継続した。次いで、１ｍＬのＴＨＦに溶解した０．３２ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，４Ｒ＊）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オン（中間体Ｋ１Ａ．４）を添加し、そして溶液を−５０〜−２０℃にて２．５ｈに渡って攪拌した。反応混合物を氷／ａｑ．ＨＣｌ上に注ぎ、有機相を分離し、洗浄し、そして蒸発させた。粗製の反応生成物を、Ｈｅｐｔ−ＥｔＯＡｃ（９：１）を用いてＣＣで精製し、０．３０ｇの主ラセミ体、ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルを白色の固体として、そして０．０７ｇの副ラセミ体、ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｓ＊，４Ｒ＊）−２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルを無色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ（主ラセミ体）：ｔＲ＝１．０６ｍｉｎ；［Ｍ−（ＣＨ３）３−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．１１。ＬＣ−ＭＳ（副ラセミ体）：ｔＲ＝１．０５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３１５．１８。
【００９７】
Ｋ１Ａ．６：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル及び（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル
ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルを、ｐｒｅｐ．キラルＨＰＬＣ（カラム：Ｄａｉｃｅｌ ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２０ｘ２５０ｍｍ、５μｍ；Ｈｅｘ／ＥｔＯＨ、９５：５、流速１６ｍＬ／ｍｉｎ）を用いて、各エナンチオマーに分離した。キラル分析ＨＰＬＣ（Ｄａｉｃｅｌ ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、４．６ｘ２５０ｍｍ、５μｍ；Ｈｅｘ／ＥｔＯＨ、９５：５、流速０．８ｍＬ／ｍｉｎ）：（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル：エナンチオマーＡ：ｔＲ＝６．７０ｍｉｎ。（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステル：エナンチオマーＢ：ｔＲ＝７．９３ｍｉｎ。
【００９８】
ＢＢ． ［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミン
ＢＢ．１ ３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミン
６．０ｇの１，４−ジメトキシ−２，３−ジニトロ−ベンゼン（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００６、２７８６−２７９４）を２２０ｍＬのＥｔＯＨ中に溶解し、Ｎ２で３回脱気し、そして６００ｍｇの１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃを添加することにより、３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンを合成した。反応液をＨ２雰囲気下（バルーン）で攪拌した。２日後、さらに３００ｍｇの１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃを添加し、そして混合物をさらに２４ｈ攪拌した。セライトのパッド上でろ過し、そしてＥｔＯＨ及びＥｔＯＡｃで洗浄することにより、真空濃縮の後、４．３ｇの３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンを黒色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．４８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：１６９．０９。
【００９９】
ＢＢ．２ ［３−（２−アミノ−３，６−ジメトキシ−フェニルカルバモイル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステル
３．１ｇの４−（ベンジルオキシカルボニル−メチル−アミノ）−酪酸の、８０ｍＬのＤＣＭ中の溶液に、６．５ｍＬのＤＩＰＥＡ、１．８ｇのＨＯＢｔ、２．６ｇのＥＤＣ及び１５４ｍｇのＤＭＡＰを添加した。１０ｍｉｎ攪拌した後、２０ｍＬのＤＣＭに溶解した２．１ｇの３，６−ジメトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミンを添加し、そして混合物をｒｔにて一晩攪拌した。反応をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、相を分離し、そして有機相を塩水（ｂｒｉｎｅ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮して、粗製の表題化合物を黒色の油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４０２．０６。
【０１００】
ＢＢ．３ ［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステル
上記の粗製３−（２−アミノ−３，６−ジメトキシ−フェニルカルバモイル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステルの、１６ｍＬのトルエン中の混合物に、４ｍＬのＤＭＦと１．９ｇのＴｓＯＨを添加し、そして反応液を１５０℃に２ｈ、マイクロ波中で加熱した。Ｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３を添加し、そして相を分離した。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮し、シリカゲルのショートパッド上でＥｔＯＡｃを用いてろ過し、そして再び濃縮した。ＥｔＯＡｃを用いたＣＣによる精製により、２．７ｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステルを茶色の樹脂として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：３８４．６２。
【０１０１】
ＢＢ．４ ［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミン
２．６ｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−カルバミン酸 ベンジルエステルの、６０ｍＬのＥｔＯＨ中の溶液を、Ｎ２で３回脱気した後、２６０ｍｇの１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃを添加した。次いで、反応混合物を、Ｈ２雰囲気下（バルーン）、ｒｔにて５ｈ攪拌した。セライトのパッド上でのろ過、そしてＥｔＯＨでの洗浄により、真空濃縮の後、１．７ｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミンを茶色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．５７ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：２５０．１３。
【０１０２】
「化合物」の製造
参照実施例１Ａ：ｒａｃ−イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
１．１（手順Ｐ１．１）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸
４．０ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルの、２５ｍＬのＥｔＯＨ中の溶液に、２．１ｇのＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ、８ｍＬのＨ２Ｏ及び２２ｍＬのＭｅＯＨを添加した。反応混合物をｒｔにて３ｄ攪拌し、次いで濃縮した。残渣を水とＥｔ２Ｏの間で分画した。水層を分離し、そして１Ｎ ＨＣｌで酸性化することにより、白色の固体が生成した。その固体をろ過し、５ｍＬのａｑ．ＨＣｌで洗浄し、そして真空乾燥して、３．２ｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸を白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８６ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．２８。
【０１０３】
１．２（手順Ｐ１．２）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−Ｎ−［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−２−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−Ｎ−メチル−アセタミド
２８０ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸の、７ｍＬのＴＨＦ中の溶液に、０．５８ｍＬのＤＩＰＥＡ、１７５ｍｇのＨＯＢｔ及び２５０ｍｇのＥＤＣを、ｒｔにて添加した。１０ｍｉｎ攪拌した後、２７０ｍｇの３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミンを添加し、そして反応混合物をｒｔにて一晩攪拌した。反応混合物をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、相を分離し、そして有機相を水と塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮した。ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（５：１から２：１へ）を用いてＣＣにより精製して、４７５ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−Ｎ−［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−２−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−Ｎ−メチル−アセタミドを白色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４９０．０６。
【０１０４】
１．３（手順Ｐ１．３）：ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オール
３１０ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−Ｎ−［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−２−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−Ｎ−メチル−アセタミドの、８ｍＬのトルエン中の溶液に、０．７７ｍＬのＲｅｄ−Ａｌ溶液（トルエン中６５％）を０℃にて滴下した。０℃にて１０ｍｉｎ攪拌した後、冷却浴を除き、そして攪拌をｒｔにて３ｈ続けた。次いで、反応混合物を、１Ｍ ＮａＯＨ／氷の混合物中に注意深く注ぎ、そして１０ｍｉｎ攪拌した。水相をトルエンで抽出し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮した。ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（２：１）を用いてＣＣで精製して、２３０ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールを白色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７６．１３。
【０１０５】
１．４：ｒａｃ−イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
１９９ｍｇのｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールの、４ｍＬのＤＣＭ中の溶液に、０．２ｍＬのＮＥｔ３と０．１ｍＬのイソ酪酸クロリドを、０℃にて添加した。反応混合物を一晩攪拌して、温度をゆっくりとｒｔに到達させた。反応をｓａｔ．ａｑ．ＮａＨＣＯ３でクェンチし、相を分離し、そして水相をＤＣＭで再抽出した。合わせた有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、そして真空濃縮した。残渣を３ｍＬのＥｔＯＡｃに再溶解し、シリカゲルと１．５ｍＬのＭｅＯＨを添加し、そして混合物を７ｄ激しく攪拌した。混合物をろ過し、ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（２：１）で徹底的に洗浄し、そして蒸発させた。ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（５：１から３：１へ、＋０．１％ＮＥｔ３）を用いてＣＣで精製して、１８６ｍｇのｒａｃ−イソ酪酸（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルをベージュ色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９０ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４６．２３。
【０１０６】
参照実施例２Ａ：イソ酪酸（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
２．１：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸
ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルのエナンチオマーＢ（Ｋ１Ａ．６を見よ。）を用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．１に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９１ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．１０。
【０１０７】
２．２：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オール
上記の（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸を用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．２〜Ｐ１．３に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７８ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７６．０９。
【０１０８】
２．３：イソ酪酸（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
上記の２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールを用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．４に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４６．１９。
【０１０９】
参照実施例３Ａ：イソ酪酸（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
３．１：（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸
ｒａｃ−（１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸 ｔｅｒｔ．−ブチルエステルのエナンチオマーＡ（Ｋ１Ａ．６を見よ。）を用い、参照実施例１中の手順Ｐ１．１に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．９１ｍｉｎ；［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋：２４１．１６。
【０１１０】
３．２：（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オール
上記の（２−ヒドロキシ−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イル）−酢酸を用い、参照実施例１中の手順Ｐ１．２〜Ｐ１．３に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．７９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：４７６．０９。
【０１１１】
３．３：イソ酪酸（１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル
上記の２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−オールを用い、参照実施例１Ａ中の手順Ｐ１．４に従って製造。ＬＣ−ＭＳ：ｔＲ＝０．８９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］＋：５４６．１１。旋光度：αＤ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ ＥｔＯＨ）＝−２１．５°。１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、４００ＭＨｚ） δ７．３９−７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．３０（ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２４−７．２０（ｍ、１Ｈ）、６．６０（ｓ、２Ｈ）、６．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、６Ｈ）、３．２７−３．２３（ｍ、１Ｈ）、３．１８−３．１５（ｍ、１Ｈ）、２．８７（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．５４（ｓｅｐｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．４７−２．３７（ｍ、４Ｈ）、２．２１（ｓ、３Ｈ）、２．１９−２．１２（ｍ、１Ｈ）、２．０１−１．９２（ｍ、５Ｈ）、１．７５−１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．４８−１．３８（ｍ、１Ｈ）、１．２７−１．１９（ｍ、１Ｈ）、１．１６（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、６Ｈ）。
【０１１２】
生物学的試験
インビトロアッセイ Ｌチャンネル
参照実施例１Ａ、２Ａおよび３ＡのＬチャンネル拮抗活性（ＩＣ５０値）を、下記の実験法に従って測定した。補助サブユニットβ−２ａ及びα２δ−１に加え、ヒトＣａｖ１．２チャンネルを発現するヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ２９３）細胞を、培地（１０％の熱非働化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、１００μｇ／ｍｌのＧ４１８、４０μｇ／ｍｌのゼオシン及び１００μｇ／ｍｌのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ）で培養する。細胞を、３８４穴ブラッククリアボトム滅菌済プレート（ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ−コート、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に、２０．０００細胞／ウェルにてシードする。シードしたプレートを、３７℃、５％ ＣＯ２にて、一晩インキュベートする。アッセイにおいて２０ｍＭの最終濃度で使用するため、アッセイバッファー（０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３を含み、ＮａＯＨでｐＨ７．４に調整したＨＢＳＳ）中の８０ｍＭストックソリューションとして、ＫＣｌ溶液を調製する。拮抗薬は、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックソリューションとして調製し、３８４穴プレート内で、まずＤＭＳＯで、次にアッセイバッファーで希釈し、３ｘのストックを得る。アッセイの日に、２５μｌの染色バッファー（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３及び３μＭの蛍光性カルシウム指示薬ｆｌｕｏ−４ ＡＭ（１０％のｐｌｕｒｏｎｉｃを含む、ＤＭＳＯ中の１ｍＭストックソリューション）を含むＨＢＳＳ）を、シードしたプレートの各ウェルに添加する。３８４穴セルプレートを、３７℃、５％ＣＯ２で６０ｍｉｎインキュベートした後、各ウェルを、５０μｌのアッセイバッファーで２回洗浄し、各ウェルにつき５０μｌの同バッファーを、室温での平衡化（３０−６０分）のために残しておく。Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＦＬＩＰＲ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）内で、各ウェルにつき２５μｌの拮抗薬をプレートに添加し、３ｍｉｎインキュベートし、最後に、細胞の脱分極のために、各ウェルにつき２５μｌのＫＣｌ溶液を添加する。各ウェルについて、２秒のインターバルで８分間、蛍光を測定し、各蛍光ピークの曲線下の面積を、拮抗剤の代わりにビークルを用いた場合に、２０ｍＭ ＫＣｌにより誘導される蛍光ピークの面積と比較する。各拮抗薬について、ＩＣ５０値（ＫＣｌ−により誘導される蛍光反応の５０％を阻害するのに必要な化合物の（ｎＭで表した）濃度）を、１０μＭまで測定する。
【０１１３】
参照実施例化合物１Ａ、２Ａおよび３ＡのＩＣ５０値が測定され、１５６〜４３９ｎＭの範囲内である。
【０１１４】
インビトロアッセイ Ｔチャンネル：
参照実施例１Ａ、２Ａおよび３ＡのＴチャンネル拮抗活性（ＩＣ５０値）を、下記の実験法に従って測定し、データを表１に示す。
【０１１５】
ヒトＣａｖ３．１、Ｃａｖ３．２又はＣａｖ３．３チャンネルをそれぞれ発現するヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ２９３）細胞を、培地（１０％の熱非働化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン及び１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を含むＤＭＥＭ）で培養する。細胞を、３８４穴ブラッククリアボトム滅菌済プレート（ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ−コート、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に、２０．０００細胞／ウェルにてシードする。シードしたプレートを、３７℃、５％ＣＯ２にて、一晩インキュベートする。アッセイにおいて１０ｍＭの最終濃度で使用するため、ＴＥＡ−ヒドロキシドでｐＨ７．２に調整した、１００ｍＭのテトラメチルアンモニウムクロリド（ＴＥＡ−クロリド）、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのＣａＣｌ２、５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２中の１００ｍＭストックソリューションとして、Ｃａ２＋溶液を調製する。拮抗薬は、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックソリューションとして調製し、３８４穴プレート内で、まずＤＭＳＯで、次にＴＥＡ−ヒドロキシドでｐＨ７．２に調整した、１００ｍＭのＴＥＡ−クロリド、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのＣａＣｌ２、５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２で希釈し、９ｘのストックを得る。アッセイの日に、２５μｌの染色バッファー（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３及び３μＭの蛍光性カルシウム指示薬ｆｌｕｏ−４ ＡＭ（１０％のｐｌｕｒｏｎｉｃを含む、ＤＭＳＯ中の１ｍＭストックソリューション）を含むＨＢＳＳ）を、シードしたプレートの各ウェルに添加する。３８４穴セルプレートを、３７℃、５％ＣＯ２で６０ｍｉｎインキュベートした後、各ウェルを、０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．３７５ｇ／ｌのＮａＨＣＯ３を含むＨＢＳＳ、５０μｌを用いて２回洗浄し、各ウェルにつき５０μｌの同バッファーを、室温での平衡化（３０−６０分）のために残しておく。Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＦＬＩＰＲ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）内で、各ウェルにつき６．２５μｌの拮抗薬をプレートに添加し、３ｍｉｎインキュベートし、最後に、各ウェルにつき６．２５μｌのＣａ２＋溶液を添加する。各ウェルについて、２秒のインターバルで８分間、蛍光を測定し、各蛍光ピークの曲線下の面積を、拮抗剤の代わりにビークルを用いた場合に、１０ｍＭ Ｃａ２＋により誘導される蛍光ピークの面積と比較する。各拮抗薬について、ＩＣ５０値（Ｃａ２＋により誘導される蛍光反応の５０％を阻害するのに必要な化合物の（ｎＭで表した）濃度）を、１０μＭまで測定する。
【０１１６】
【表１】
【０１１７】
Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ法（Ｌｇｄｆｆ）による単離した心臓に対する効果
参照実施例１Ａ、２Ａおよび３Ａを、それらの血圧降下作用及び心筋収縮に対するそれらの効果について試験した。単離したマウスの心臓に対するＥＣ５０を、文献（Ｄｏｒｉｎｇ ＨＪ．、Ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｐｅｒｆｕｓｅｄ ｈｅａｒｔ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ−−ｆｕｎｃｔｉｏｎ−−ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ、Ｐｈｙｓｉｏｌ． Ｂｏｈｅｍｏｓｌｏｖ． １９９０、３９（６）、４８１−５０４；Ｋｌｉｇｆｉｅｌｄ Ｐ、Ｈｏｒｎｅｒ Ｈ、Ｂｒａｃｈｆｅｌｄ Ｎ．、Ａ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｇｒａｄｅｄ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｐｅｒｆｕｓｅｄ ｒａｔ ｈｅａｒｔ、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９７６ Ｊｕｎ、４０（６）、１００４−８）に従って測定した。
【０１１８】
上記のＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ試験について記載した手順を用い、参照実施例１Ａの化合物について５ｎＭのＥＣ５０が測定された。
【０１１９】
ＩＩ． 「化合物」の塩結晶型の製造
ＩＩ．ａ） 「化合物」を用いた塩形成の一般的手順：
１ｅｑ．の「化合物」を溶媒１に溶解した。溶液を５０℃にした。溶媒２に溶解した２当量の酸を添加した。混合物を５０℃にて５ｍｉｎ攪拌し、そして熱源のスイッチを切った。混合物を１時間以内にｒｔに冷ました。沈殿が観察された場合には、混合物をろ過し、そして固形物を単離した。固形物が得られない場合には、混合物を蒸発乾固し、そして６容量のヘプタンを添加した。混合物を加熱還流し、全部が溶解するまで３容量のＥｔＯＡｃを添加した。溶解が完了しない場合には、さらに３容量のＥｔＯＡｃを添加した。溶解がなお完了しない場合には、できるだけ少量のＭｅＯＨを、溶解が完了するまで添加した。混合物をゆっくりとｒｔに冷ました。Ｒｔにて、容器をスパチュラで引っかき、そして０℃にさらに冷却した。混合物をろ過し、そして溶液をｒｏｔａｖａｐｏｒ上で蒸発乾固した。
【０１２０】
ここで使用する「容量」という用語は、１ｋｇの固形物質に対して１Ｌを意味する。
【０１２１】
溶媒１＝ベンゼンスルホン酸、安息香酸、サリチル酸、サッカリン、パラ−トルエンスルホン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、リンゴ酸、グリコール酸、ケトグルタル酸及びフマル酸に対しては、８容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒１＝臭化水素酸及び塩酸に対しては、１．８容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒１＝硫酸及びリン酸に対しては、８容量のアセトン；
溶媒１＝クエン酸、コハク酸及び酒石酸に対しては７容量のアセトン。
溶媒２＝クエン酸に対しては７容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒２＝ベンゼンスルホン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、サリチル酸及びサッカリン（部分的に溶解性）に対しては３容量のＥｔＯＡｃ；
溶媒２＝パラ−トルエンスルホン酸、マロン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、リンゴ酸、グリコール酸、ケトグルタル酸及びフマル酸に対しては３容量のＭｅＯＨ；
溶媒２＝コハク酸に対しては１５容量のアセトン；
溶媒２＝酒石酸に対しては１２容量のＥｔＯＨ；
溶媒２＝臭化水素酸、塩酸、硫酸及びリン酸に対しては水。
【０１２２】
上記の一般的手順を用いて得られた結果を、表１及び２に要約する。「化合物」の塩結晶型を製造するために特定の手順を用いた場合には、そのうような手順を、下記の参照実施例Ｓ１及び実施例Ｓ２〜Ｓ７に記載する。
【０１２３】
【表２】
【０１２４】
【表３】
【０１２５】
【表４】
【０１２６】
【表５】
【０１２７】
参照実施例Ｓ１：「化合物」の二−塩酸塩の製造及び定性分析
７．５９８ｍＬのａｑ．ＨＣｌ（０．１Ｎ）を２００．７ｍｇの「化合物」に添加し、白色の懸濁液を生成させた。５ｍＬの２−ＰｒＯＨを添加し、そして得られた清澄な溶液を窒素下で蒸発乾固させた。４ｍＬのＴＢＭＥを残渣に添加し、そして懸濁液を温度サイクル（Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度は５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥して、「化合物」の二−塩酸塩、２６５ｍｇを得た。
【０１２８】
【表６】
【０１２９】
実施例Ｓ２：「化合物」の二−メタンスルホン酸塩の製造及び定性分析
０．０４７６ｍＬのメタンスルホン酸を、７ｍｌのＥｔＯＡｃに溶解した、１９９．７ｍｇの「化合物」の清澄な溶液に添加した。この清澄な溶液を窒素下で蒸発乾固し、そして得られた残渣を、４ｍＬのＥｔＯＡｃ／ヘプタン（１：３）混合物中に懸濁し、そして温度サイクル（Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥した。得られた固形物を１ｍＬのＴＢＭＥに懸濁し、そして温度サイクル（Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥して、「化合物」の二−メタンスルホン酸塩を得た。
【０１３０】
【表７】
【０１３１】
実施例Ｓ３：「化合物」の二−パラ−トルエンスルホン酸塩の製造及び定性分析
１９９．７ｍｇの「化合物」を、７ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した。１０ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した、１３９．２ｍｇのパラ−トルエンスルホン酸を添加した。清澄な溶液を窒素下で蒸発乾固し、そして残渣を、４ｍＬのＥｔＯＡｃ／Ｈｅｐｔ（１：３）混合物に懸濁し、そして温度サイクル（温度サイクル：Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、溶媒を窒素下で蒸発させ、そして固体残渣を２ｍｌのＥｔＯＡｃに懸濁した。短時間（３ｍｉｎ）の超音波処理の後、懸濁液を、温度サイクル（温度サイクル：Ｔ１＝２０℃、Ｔ２＝２５℃、それぞれの保持時間１ｈ；加熱及び冷却速度５℃／ｈ、５００ｒｐｍ）の下で振とうした。サイクルを１８回繰り返した後、懸濁液をろ過し、そして固形物を真空乾燥して、１７３．８ｍｇの「化合物」の二−パラ−トルエンスルホン酸塩を得た。
【０１３２】
【表８】
【０１３３】
実施例Ｓ４：「化合物」の硫酸塩の製造及び定性分析
０．７３３ｍＬの水性硫酸（０．５Ｍ）を、２００．２ｍｇの「化合物」のＭＥＫ１０ｍＬ中の溶液に添加し、清澄な溶液を生成させた。２日後、得られた懸濁液をろ過し、そして固形物を１ｈ真空乾燥して、約６当量の水を含む、「化合物」のモノ硫酸塩を得た。
【０１３４】
【表９】
【０１３５】
実施例Ｓ５：「化合物」の二−マレイン酸塩の製造及び定性分析
ＭｅＯＨ（６３０ｍＬ、１．１容量）に溶解したマレイン酸（２５６ｇ、２．２ｍｏｌ、２．１ｅｑ）を、「化合物」（６８２ｇ、８４％ｗ／ｗ（ＮＭＲアッセイ）、１．０５ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６．３Ｌ、１１容量）中の還流溶液に添加した。得られた混合物を還流下で１５分攪拌し、次いで３０分以内に６５−６８℃に冷却し、そして「化合物」の二−マレイン酸塩のシードクリスタル（シードクリスタルは、同じプロトコルを用いた注意深い結晶化の後に得られた。）０．０４％ｗ／ｗでシードした。次いで、混合物を３ｈ以内に６５−６８℃から４０℃に冷却した。次いで、得られた懸濁液を１ｈに渡って２０℃に冷却し、０．２ｂａｒの窒素下でろ過し、そしてＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ ２．６容量）でリンスした。次いで、得られた白色の固体を、１気圧の窒素下で２４時間乾燥して、「化合物」の二−マレイン酸塩７１５ｇ（８８％）を得た。
【０１３６】
【表１０】
【０１３７】
実施例Ｓ６：「化合物」のセスキ−フマル酸塩の製造
１９９．５ｍｇの「化合物」を、５ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解した。８５．４ｍｇのフマル酸の、５ｍＬのＴＨＦ中の清澄な溶液を、ゆっくりと添加した。得られた清澄な溶液を、窒素下で３ｍＬの溶液に濃縮し、沈殿を生成させた。混合物をろ過し、そして固形物を真空乾燥した。得られた固体は、「化合物」のセスキ−フマル酸塩であった。
【０１３８】
【表１１】
【０１３９】
実施例Ｓ７：「化合物」の二−臭化水素酸塩の製造
水性臭化水素酸の２モル水溶液０．３６６５ｍＬを、１９９．８ｍｇの「化合物」の、０．４ｍｌのＴＨＦ中の溶液にゆっくりと添加し、そして得られた懸濁液を加熱した（ヒートガン）。清澄な溶液をｒ．ｔ．に冷却して、沈殿を生成させた。３ｍＬのＴＨＦを添加し、懸濁液を振とうし、そして固形物を真空乾燥した（１ｈ、３ｍｂａｒ）。得られた固体は、約３当量の水を含む、「化合物」の二−臭化水素酸塩であった。
【０１４０】
【表１２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩であって：
・１当量のイソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル；
・臭化水素酸、硫酸、マレイン酸、フマル酸、メタンスルホン酸、パラ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸及びエタンスルホン酸から成る群より選択される酸、１〜２当量からなる酸成分；及び
・０〜５当量の水
からなる上記結晶塩。
【請求項２】
化合物が光学的に活性なイソ酪酸 （１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、請求項１に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項３】
当該結晶塩の酸成分が、１又は２当量の臭化水素酸、１又は２当量の硫酸、１又は２当量のマレイン酸、１〜２当量のフマル酸、１又は２当量のメタンスルホン酸、１又は２当量のパラ−トルエンスルホン酸、１又は２当量のベンゼンスルホン酸、１〜２当量のナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１又は２当量のナフタレン−２−スルホン酸又は１又は２当量のエタンスルホン酸からなる、請求項１又は２に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項４】
当該結晶塩の酸成分が、２当量の臭化水素酸、２当量のマレイン酸又は１．５当量のフマル酸からなる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項５】
当該結晶塩が：
・１当量の化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル；
・２当量のマレイン酸；及び
・０当量の水：
からなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１０．１５°、２０．３９°及び２２．６３°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項７】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．０７°、８．１９°、１０．１５°、１５．２６°、１７．６１°、２０．３９°、２２．６３°、２３．９３°、２４．２７°及び２５．６１°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項８】
図５に表される粉末Ｘ線回折パターンを本質的に示す、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項９】
本明細書に記載の方法を用い、示差走査熱量測定により決定した約１４７℃の融点を有する、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１０】
１． 「化合物」（６８２ｇ、８４％ｗ／ｗ、１．０５ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６．３Ｌ、１１容量）中の溶液を還流し；
２． ＭｅＯＨ（６３０ｍＬ、１．１容量）中に溶解したマレイン酸（２５６ｇ、２．２ｍｏｌ、２．１ｅｑ）を添加し；
３． 得られた混合物を還流下で１５分間攪拌し、そして３０分以内に６５−６８℃に冷却し；
４． ０．０４％ｗ／ｗのシードクリスタルで任意にシードし；
５． ３時間以内に当該混合物を４０℃に冷却し；
６． １時間以内に当該混合物を２０℃に冷却し；
７． ０．２ｂａｒの窒素下、固形物をろ過し、そして当該固形物をＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ ２．６容量）でリンスし；そして
８． 当該固形物を１気圧の窒素下で２４時間乾燥する；
ことにより得ることができる、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１１】
当該結晶塩の酸成分が１．５当量のフマル酸からなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１２】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．２７°、８．０５°及び２０．６１°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項１１に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１３】
当該結晶塩の酸成分が２当量の臭化水素酸からなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１４】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．３°、１５．６°及び１７．３°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項１３に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
医薬として使用するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩、又は請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
慢性安定狭心症、高血圧、（腎臓及び心臓の）虚血、心房細動を含む不整脈、心肥大又はうっ血性心不全の治療又は予防のための医薬粗製物の製造のための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩の使用。
【請求項１】
化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩であって：
・１当量のイソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル；
・臭化水素酸、硫酸、マレイン酸、フマル酸、メタンスルホン酸、パラ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸及びエタンスルホン酸から成る群より選択される酸、１〜２当量からなる酸成分；及び
・０〜５当量の水
からなる上記結晶塩。
【請求項２】
化合物が光学的に活性なイソ酪酸 （１Ｒ，２Ｒ，４Ｒ）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルである、請求項１に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項３】
当該結晶塩の酸成分が、１又は２当量の臭化水素酸、１又は２当量の硫酸、１又は２当量のマレイン酸、１〜２当量のフマル酸、１又は２当量のメタンスルホン酸、１又は２当量のパラ−トルエンスルホン酸、１又は２当量のベンゼンスルホン酸、１〜２当量のナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１又は２当量のナフタレン−２−スルホン酸又は１又は２当量のエタンスルホン酸からなる、請求項１又は２に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項４】
当該結晶塩の酸成分が、２当量の臭化水素酸、２当量のマレイン酸又は１．５当量のフマル酸からなる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項５】
当該結晶塩が：
・１当量の化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステル；
・２当量のマレイン酸；及び
・０当量の水：
からなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：１０．１５°、２０．３９°及び２２．６３°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項７】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．０７°、８．１９°、１０．１５°、１５．２６°、１７．６１°、２０．３９°、２２．６３°、２３．９３°、２４．２７°及び２５．６１°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項８】
図５に表される粉末Ｘ線回折パターンを本質的に示す、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項９】
本明細書に記載の方法を用い、示差走査熱量測定により決定した約１４７℃の融点を有する、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１０】
１． 「化合物」（６８２ｇ、８４％ｗ／ｗ、１．０５ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６．３Ｌ、１１容量）中の溶液を還流し；
２． ＭｅＯＨ（６３０ｍＬ、１．１容量）中に溶解したマレイン酸（２５６ｇ、２．２ｍｏｌ、２．１ｅｑ）を添加し；
３． 得られた混合物を還流下で１５分間攪拌し、そして３０分以内に６５−６８℃に冷却し；
４． ０．０４％ｗ／ｗのシードクリスタルで任意にシードし；
５． ３時間以内に当該混合物を４０℃に冷却し；
６． １時間以内に当該混合物を２０℃に冷却し；
７． ０．２ｂａｒの窒素下、固形物をろ過し、そして当該固形物をＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ ２．６容量）でリンスし；そして
８． 当該固形物を１気圧の窒素下で２４時間乾燥する；
ことにより得ることができる、請求項５に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１１】
当該結晶塩の酸成分が１．５当量のフマル酸からなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１２】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：５．２７°、８．０５°及び２０．６１°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項１１に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１３】
当該結晶塩の酸成分が２当量の臭化水素酸からなる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１４】
粉末Ｘ線回折ダイアグラムにおいて、以下の屈折角２θ：９．３°、１５．６°及び１７．３°におけるピークの存在により特徴づけられ、当該粉末Ｘ線回折ダイアグラムが、Ｃｕ Ｋα１照射を用いることにより得られ、そして２θ値の精度が２θ＋／−０．２°の範囲内である、請求項１３に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
医薬として使用するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩、又は請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
慢性安定狭心症、高血圧、（腎臓及び心臓の）虚血、心房細動を含む不整脈、心肥大又はうっ血性心不全の治療又は予防のための医薬粗製物の製造のための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の、化合物、イソ酪酸 （１Ｒ＊，２Ｒ＊，４Ｒ＊）−２−（２−｛［３−（４，７−ジメトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−プロピル］−メチル−アミノ｝−エチル）−５−フェニル−ビシクロ［２．２．２］オクト−５−エン−２−イルエステルの結晶塩の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【公表番号】特表２０１２−５０６４１６（Ｐ２０１２−５０６４１６Ａ）
【公表日】平成２４年３月１５日（２０１２．３．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５３２７５４（Ｐ２０１１−５３２７５４）
【出願日】平成２１年１０月２１日（２００９．１０．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５４６３７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４６８５７
【国際公開日】平成２２年４月２９日（２０１０．４．２９）
【出願人】（５００２２６７８６）アクテリオン ファーマシューティカルズ リミテッド (151)
【氏名又は名称原語表記】Ａｃｔｅｌｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｌｔｄ
【住所又は居所原語表記】Ｇｅｗｅｒｂｅｓｔｒａｓｓ １６，ＣＨ−４１２３ Ａｌｌｓｃｈｗｉｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年３月１５日（２０１２．３．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１０月２１日（２００９．１０．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５４６３７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４６８５７
【国際公開日】平成２２年４月２９日（２０１０．４．２９）
【出願人】（５００２２６７８６）アクテリオン ファーマシューティカルズ リミテッド (151)
【氏名又は名称原語表記】Ａｃｔｅｌｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｌｔｄ
【住所又は居所原語表記】Ｇｅｗｅｒｂｅｓｔｒａｓｓ １６，ＣＨ−４１２３ Ａｌｌｓｃｈｗｉｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ
【Ｆターム（参考）】
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