ω−３多価不飽和脂肪酸であるエイコサペンタエン酸［「ＥＰＡ」］を、全脂肪酸の重量パーセント［「％ ＴＦＡ」］として計測して５０重量パーセントより多く含み、且つＥＰＡ ％ ＴＦＡの、％ ＴＦＡとして計測したリノール酸に対する比が少なくとも３．１である油を産生することが可能な油性酵母ヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の改変株について記載する。これらの株は、他の異種Δ９エロンガーゼ、Δ８デサチュラーゼ、Δ５デサチュラーゼ、Δ１７デサチュラーゼ、Δ１２デサチュラーゼ、Ｃ_{１６／１８}エロンガーゼに加え、少なくとも１つのΔ９エロンガーゼ／Δ８デサチュラーゼマルチザイムを過剰発現し、さらにジアシルグリセロールコリンホスホトランスフェラーゼ、マロニルＣｏＡシンテターゼ及び／又はアシルＣｏＡリゾリン脂質アシルトランスフェラーゼを過剰発現してもよい。少なくとも１つのペルオキシソーム生合成因子タンパク質の発現は下方制御される。前記宿主細胞内でＥＰＡを産生する方法、細胞から得られる油、及びそれに由来する製品が特許請求される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）全脂肪酸の重量パーセントとして計測して少なくとも５０重量パーセントのエイコサペンタエン酸、
を含む油であって、
（ｂ）前記油は、全脂肪酸の重量パーセントとして計測したエイコサペンタエン酸の、全脂肪酸の重量パーセントとして計測したリノール酸に対する比が少なくとも３．１である、
油を産生する組換えヤロウイア・エスピー（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｓｐ．）宿主細胞。
【請求項２】
（ａ）少なくとも１つのΔ８デサチュラーゼに連結された少なくとも１つのΔ９エロンガーゼを有するポリペプチドを含む少なくとも１つのマルチザイムと、
（ｂ）発現が下方制御された少なくとも１つのペルオキシソーム生合成因子タンパク質と、
（ｃ）マロニルＣｏＡシンテターゼ及びアシルＣｏＡリゾリン脂質アシルトランスフェラーゼからなる群から選択される酵素をコードする少なくとも１つのヌクレオチド配列を含む少なくとも１つの組換えコンストラクトと、
を含む、請求項１に記載の組換えヤロウイア・エスピー（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｓｐ．）宿主細胞。
【請求項３】
前記マロニルＣｏＡシンテターゼが、配列番号４０及び配列番号４２からなる群から選択される配列から本質的になる、請求項２に記載の組換え宿主細胞。
【請求項４】
前記アシルＣｏＡリゾリン脂質アシルトランスフェラーゼが、配列番号１５、配列番号１７、配列番号２５、配列番号２９、配列番号３１及び配列番号３２からなる群から選択される配列から本質的になる、請求項２に記載の組換え宿主細胞。
【請求項５】
前記マルチザイムリンカーが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６及び配列番号７からなる群から選択される、請求項２に記載の組換え宿主細胞。
【請求項６】
前記マルチザイムが、配列番号９、配列番号１１及び配列番号１３からなる群から選択される配列から本質的になる、請求項２に記載の組換え宿主細胞。
【請求項７】
エイコサペンタエン酸を含む微生物油の作製方法であって、
ａ）請求項１〜５のいずれか一項に記載の宿主細胞を培養するステップであって、エイコサペンタエン酸を含む微生物油が産生されるステップと、
ｂ）ステップ（ａ）の前記微生物油を回収してもよいステップと、
を含む方法。
【請求項８】
ステップ（ｂ）の前記回収された油がさらに処理される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
全脂肪酸の重量パーセントとして計測して少なくとも５０重量パーセントのエイコサペンタエン酸を含む油を産生するための組換え宿主細胞であって、ＡＴＣＣ指定番号ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１００２５を有するヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｙ８４０６；ＡＴＣＣ指定番号ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１００２６を有するヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｙ８４１２；及びＡＴＣＣ指定番号ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１００２７を有するヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｙ８２５９からなる群から選択される宿主細胞。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２】

【図３】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【公表番号】特表２０１２−５２９９１３（Ｐ２０１２−５２９９１３Ａ）
【公表日】平成２４年１１月２９日（２０１２．１１．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５１６１７３（Ｐ２０１２−５１６１７３）
【出願日】平成２２年６月１４日（２０１０．６．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３８５３５
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１４７９０４
【国際公開日】平成２２年１２月２３日（２０１０．１２．２３）
【出願人】（３９００２３６７４）イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー (2,692)
【氏名又は名称原語表記】Ｅ．Ｉ．ＤＵ　ＰＯＮＴ　ＤＥ　ＮＥＭＯＵＲＳ　ＡＮＤ　ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】