キメラカニューレタンパク質、それをコードする核酸、その製造方法およびその使用方法
本発明は、キメラカニューレポリペプチド及びそれらの作製法及び使用法を提供する。一例として、本発明は、タンパク又はリガンドの同定、選別又は合成のための組成物及び方法を提供する。一例として、本発明は、ナノチューブルの作製および使用のための組成物及び方法を提供する。一例として、本発明は、ラセミ混合物からキラル構成成分を選別及び精製するための組成物及び方法を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも、カニューレポリペプチドを含む第一のドメイン、および異種ポリペプチド又はペプチドを含む第二のドメイン、を含むキメラポリペプチド。
【請求項２】
異種ポリペプチド又はペプチドがカニューレペプチドのアミノ末端、カルボキシル末端、またはカニューレペプチド内部に挿入されている、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項３】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し70％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である又はキラル選別因子として作用可能である、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項４】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し80％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項３記載のキメラポリペプチド。
【請求項５】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し90％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項４記載のキメラポリペプチド。
【請求項６】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し95％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項５記載のキメラポリペプチド。
【請求項７】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6の配列を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項６記載のキメラポリペプチド。
【請求項８】
カニューレポリペプチドがポリマーにアッセンブルすることが出来る、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項９】
カニューレポリペプチドがナノチューブルへアッセンブルすることが出来る、請求項８記載のキメラポリペプチド。
【請求項１０】
異種ポリペプチド又はペプチドがナノチューブルの内腔で発現される、請求項９記載のキメラポリペプチド。
【請求項１１】
異種ポリペプチド又はペプチドがナノチューブルの外表面で発現される、請求項９記載のキメラポリペプチド。
【請求項１２】
異種ポリペプチド又はペプチドがキラル選別モチーフを含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１３】
異種ポリペプチド又はペプチドが受容体又はリガンドを含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１４】
異種ポリペプチド又はペプチドが酵素を含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１５】
異種ポリペプチド又はペプチドが酵素の活性部位を含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１６】
異種ポリペプチド又はペプチドが抗原又は抗原結合部位を含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１７】
異種ポリペプチド又はペプチドがグリーン蛍光タンパク質、α-ガラクトシターゼ又はクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼを含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１８】
キメラポリペプチドが組換えタンパク質である、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１９】
カニューレポリペプチドの少なくとも一つのサブ配列が除去されている、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項２０】
カニューレポリペプチドのサブ配列が除去された箇所へ異種ポリペプチド又はペプチドが挿入されている、請求項１９記載のキメラポリペプチド。
【請求項２１】
カニューレポリペプチドがCanAポリペプチドであり、そして除去されたサブ配列が配列番号:2(PDKTGYTNTSIWVP)の残基123から136から成る14残基モチーフ、又は配列番号:2 (PDKTGYTNTSIWVPGEP) の残基123から139から成る17の残基モチーフである、請求項１９記載のキメラポリペプチド。
【請求項２２】
CanAポリペプチドの配列が除去された箇所へ異種ポリペプチド又はペプチドが挿入されている、請求項２１記載のキメラポリペプチド。
【請求項２３】
異種ポリペプチド又はペプチドが、除去された14又は17残基モチーフを置き換えるためのCanAポリペプチドに挿入された、14又は17残基モチーフである、請求項２２記載のキメラポリペプチド。
【請求項２４】
請求項１記載のキメラポリペプチドを含む固定化キメラポリペプチド。
【請求項２５】
請求項１記載の複数のキメラポリペプチドを含むナノチューブル。
【請求項２６】
異種ポリペプチド又はペプチドが酵素を含む、請求項２５記載のナノチューブル。
【請求項２７】
複数の異なった酵素を含む、請求項２６記載のナノチューブル。
【請求項２８】
複数の酵素が生合成経路を含む、請求項２７記載のナノチューブル。
【請求項２９】
複数の酵素がナノチューブルに沿って生合成経路での作用順序と同じ順序で配置されている、請求項２８記載のナノチューブル。
【請求項３０】
異種ポリペプチド又はペプチドがキラル選別モチーフを含む、請求項２５記載のナノチューブル。
【請求項３１】
請求項１のキメラポリペプチドをコードする配列を含む核酸。
【請求項３２】
請求項３１の核酸を含む発現用カセット。
【請求項３３】
請求項３１の核酸を含む細胞。
【請求項３４】
細菌性細胞、植物細胞、酵母細胞、真菌細胞、昆虫細胞又は哺乳類細胞である、請求項３３記載の細胞。
【請求項３５】
請求項３１記載の核酸を含む非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３６】
請求項３１記載の核酸を含む植物。
【請求項３７】
a) 請求項１２記載のキメラポリペプチドを提供する工程；
b) 組成物のラセミ混合物を提供する工程；および、
c) 前記組成物のただ一種のエナンチオマーのみが前記キメラポリペプチドと結合する条件の下、前記ラセミ混合物と前記キメラポリペプチドを接触させる工程を含み、
それによって、前記ラセミ混合物から単一のキラル種を選別する、組成物のキラル選別方法。
【請求項３８】
a) 請求項29記載のナノチューブルを提供する工程；
b) ラセミ混合物組成を提供する工程；および、
c) 前記組成物のただ一種のエナンチオマーのみが前記ナノチューブルと結合する条件の下、前記ラセミ混合物と前記ナノチューブルを接触させる工程を含み、
それにより前記ラセミ混合物から単一のキラル種を選定する、組成物のキラル選別方法。
【請求項３９】
a) 請求項28記載の生合成経路を構成する複数の酵素を含むナノチューブルを提供する工程；
b) 少なくとも一つの前記酵素に対する基質を提供する工程；および、
c) 前記生合成経路の前記酵素が組成物の合成を触媒するような条件の下、前記ナノチューブルと前記基質とを接触させる工程、
を含む、組成物の酵素的生合成方法。
【請求項４０】
酵素がナノチューブルの内腔にて発現される、請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
酵素がナノチューブルの外表面にて発現される、請求項３９記載の方法。
【請求項１】
少なくとも、カニューレポリペプチドを含む第一のドメイン、および異種ポリペプチド又はペプチドを含む第二のドメイン、を含むキメラポリペプチド。
【請求項２】
異種ポリペプチド又はペプチドがカニューレペプチドのアミノ末端、カルボキシル末端、またはカニューレペプチド内部に挿入されている、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項３】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し70％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である又はキラル選別因子として作用可能である、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項４】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し80％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項３記載のキメラポリペプチド。
【請求項５】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し90％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項４記載のキメラポリペプチド。
【請求項６】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6に対し95％の配列同一性を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項５記載のキメラポリペプチド。
【請求項７】
カニューレポリペプチドが、配列番号:2、配列番号:4、又は配列番号:6の配列を有するタンパク質を含み、ポリマーへのアッセンブルが可能である請求項６記載のキメラポリペプチド。
【請求項８】
カニューレポリペプチドがポリマーにアッセンブルすることが出来る、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項９】
カニューレポリペプチドがナノチューブルへアッセンブルすることが出来る、請求項８記載のキメラポリペプチド。
【請求項１０】
異種ポリペプチド又はペプチドがナノチューブルの内腔で発現される、請求項９記載のキメラポリペプチド。
【請求項１１】
異種ポリペプチド又はペプチドがナノチューブルの外表面で発現される、請求項９記載のキメラポリペプチド。
【請求項１２】
異種ポリペプチド又はペプチドがキラル選別モチーフを含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１３】
異種ポリペプチド又はペプチドが受容体又はリガンドを含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１４】
異種ポリペプチド又はペプチドが酵素を含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１５】
異種ポリペプチド又はペプチドが酵素の活性部位を含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１６】
異種ポリペプチド又はペプチドが抗原又は抗原結合部位を含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１７】
異種ポリペプチド又はペプチドがグリーン蛍光タンパク質、α-ガラクトシターゼ又はクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼを含む、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１８】
キメラポリペプチドが組換えタンパク質である、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項１９】
カニューレポリペプチドの少なくとも一つのサブ配列が除去されている、請求項１記載のキメラポリペプチド。
【請求項２０】
カニューレポリペプチドのサブ配列が除去された箇所へ異種ポリペプチド又はペプチドが挿入されている、請求項１９記載のキメラポリペプチド。
【請求項２１】
カニューレポリペプチドがCanAポリペプチドであり、そして除去されたサブ配列が配列番号:2(PDKTGYTNTSIWVP)の残基123から136から成る14残基モチーフ、又は配列番号:2 (PDKTGYTNTSIWVPGEP) の残基123から139から成る17の残基モチーフである、請求項１９記載のキメラポリペプチド。
【請求項２２】
CanAポリペプチドの配列が除去された箇所へ異種ポリペプチド又はペプチドが挿入されている、請求項２１記載のキメラポリペプチド。
【請求項２３】
異種ポリペプチド又はペプチドが、除去された14又は17残基モチーフを置き換えるためのCanAポリペプチドに挿入された、14又は17残基モチーフである、請求項２２記載のキメラポリペプチド。
【請求項２４】
請求項１記載のキメラポリペプチドを含む固定化キメラポリペプチド。
【請求項２５】
請求項１記載の複数のキメラポリペプチドを含むナノチューブル。
【請求項２６】
異種ポリペプチド又はペプチドが酵素を含む、請求項２５記載のナノチューブル。
【請求項２７】
複数の異なった酵素を含む、請求項２６記載のナノチューブル。
【請求項２８】
複数の酵素が生合成経路を含む、請求項２７記載のナノチューブル。
【請求項２９】
複数の酵素がナノチューブルに沿って生合成経路での作用順序と同じ順序で配置されている、請求項２８記載のナノチューブル。
【請求項３０】
異種ポリペプチド又はペプチドがキラル選別モチーフを含む、請求項２５記載のナノチューブル。
【請求項３１】
請求項１のキメラポリペプチドをコードする配列を含む核酸。
【請求項３２】
請求項３１の核酸を含む発現用カセット。
【請求項３３】
請求項３１の核酸を含む細胞。
【請求項３４】
細菌性細胞、植物細胞、酵母細胞、真菌細胞、昆虫細胞又は哺乳類細胞である、請求項３３記載の細胞。
【請求項３５】
請求項３１記載の核酸を含む非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３６】
請求項３１記載の核酸を含む植物。
【請求項３７】
a) 請求項１２記載のキメラポリペプチドを提供する工程；
b) 組成物のラセミ混合物を提供する工程；および、
c) 前記組成物のただ一種のエナンチオマーのみが前記キメラポリペプチドと結合する条件の下、前記ラセミ混合物と前記キメラポリペプチドを接触させる工程を含み、
それによって、前記ラセミ混合物から単一のキラル種を選別する、組成物のキラル選別方法。
【請求項３８】
a) 請求項29記載のナノチューブルを提供する工程；
b) ラセミ混合物組成を提供する工程；および、
c) 前記組成物のただ一種のエナンチオマーのみが前記ナノチューブルと結合する条件の下、前記ラセミ混合物と前記ナノチューブルを接触させる工程を含み、
それにより前記ラセミ混合物から単一のキラル種を選定する、組成物のキラル選別方法。
【請求項３９】
a) 請求項28記載の生合成経路を構成する複数の酵素を含むナノチューブルを提供する工程；
b) 少なくとも一つの前記酵素に対する基質を提供する工程；および、
c) 前記生合成経路の前記酵素が組成物の合成を触媒するような条件の下、前記ナノチューブルと前記基質とを接触させる工程、
を含む、組成物の酵素的生合成方法。
【請求項４０】
酵素がナノチューブルの内腔にて発現される、請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
酵素がナノチューブルの外表面にて発現される、請求項３９記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公表番号】特表２００６−５０２６９５（Ｐ２００６−５０２６９５Ａ）
【公表日】平成１８年１月２６日（２００６．１．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００３−５６９８５３（Ｐ２００３−５６９８５３）
【出願日】平成１５年２月１８日（２００３．２．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／００４８２８
【国際公開番号】ＷＯ２００３／０７０９６１
【国際公開日】平成１５年８月２８日（２００３．８．２８）
【出願人】（５０３０８９４８９）ダイヴァーサ コーポレイション (31)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年１月２６日（２００６．１．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年２月１８日（２００３．２．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／００４８２８
【国際公開番号】ＷＯ２００３／０７０９６１
【国際公開日】平成１５年８月２８日（２００３．８．２８）
【出願人】（５０３０８９４８９）ダイヴァーサ コーポレイション (31)
【Ｆターム（参考）】
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