サイズが減少した自己送達用ＲＮＡｉ化合物
本発明は、最短の二本鎖領域を有するＲＮＡｉコンストラクト、および遺伝子サイレンシングにおけるそれらの使用に関する。本発明に関連するＲＮＡｉコンストラクトは、８〜１４ヌクレオチドの二本鎖領域および多様な化学修飾を含み、遺伝子サイレンシングにおいて高度に有効である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離された非対称の核酸分子であって、二本鎖核酸を形成する、１６ヌクレオチドの最短の長さを有するガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含み、二本鎖領域および一本鎖領域を有し、前記二本鎖領域は８〜１５ヌクレオチドの長さを有し、前記一本鎖領域は５〜１２ヌクレオチドの長さを有し、ここで、前記パッセンジャー鎖は親油性基に結合しており、ここで、前記二本鎖核酸のヌクレオチドのうち少なくとも４０％は修飾されており、およびここで、前記一本鎖領域は、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を有する、前記核酸分子。
【請求項２】
ガイド鎖の１位が、５’リン酸化されている、請求項１に記載の単離された非対称の核酸分子。
【請求項３】
ガイド鎖の１位が、２’Ｏ−メチル修飾および５’リン酸化されている、請求項１に記載の単離された非対称の核酸分子。
【請求項４】
単離された二本鎖核酸分子であって、ｍｉＲＮＡ配列に対して相補性を有する長さ１５〜２１ヌクレオチドのより長い鎖と、３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのより短い鎖とを含み、ここで、前記より長い鎖および前記パッセンジャー鎖が二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、より長い鎖は、長さ２〜１３ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含み、少なくとも５０％のヌクレオチドが修飾されている、前記二本鎖核酸分子。
【請求項５】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ２〜１３ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、およびここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含む、前記二本鎖核酸分子。
【請求項６】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ１０〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ５〜１１ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の少なくとも２個のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、およびここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾されている、前記二本鎖核酸分子。
【請求項７】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ６〜８ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖は、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含み、ここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含み、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項８】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖の１１〜１８位中の全てのＣおよびＵヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖中の全てのヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾されており、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項９】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１５ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、ここで、前記親油性基は、コレステロールおよび長さ５〜７または９〜１８個の炭素のＣ１７ポリ炭素鎖を有するステロール型分子からなる群より選択され、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖の１１〜１８位中の全てのＣおよびＵヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾を有し、ここで、ガイド鎖の２〜１０位中の全てのＣおよびＵヌクレオチドは、２’Ｆ修飾を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖中の全てのヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾されており、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１０】
単離された核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有するガイド配列、
３’末端において親油性基に結合したパッセンジャー配列
を含み、
ここで、前記ガイド配列および前記パッセンジャー配列が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド配列は、長さ２〜１３ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド配列は、５’リン酸修飾を有し、ここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含み、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記核酸分子。
【請求項１１】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記分子の二本鎖である領域は、８〜１４ヌクレオチド長であり、ここで、前記ガイド鎖は、４〜１２ヌクレオチド長である一本鎖領域を含み、およびここで、前記ガイド鎖の一本鎖領域は、２〜１２個のホスホロチオエート修飾を含む、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１２】
ガイド鎖が、６〜８個のホスホロチオエート修飾を含む、請求項１１に記載の核酸分子。
【請求項１３】
ガイド鎖の一本鎖領域が、６ヌクレオチド長である、請求項１１または１２に記載の核酸分子。
【請求項１４】
二本鎖領域が、１３ヌクレオチド長である、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１５】
二本鎖核酸分子が、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１６】
単離された二本鎖核酸分子であって、
ガイド鎖、ここで、前記ガイド鎖は、１６〜２８ヌクレオチド長であり、標的遺伝子に対して相補性を有し、ここで、前記ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドは、少なくとも２個のリン酸修飾を含み、およびここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含む、ならびに
パッセンジャー鎖、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対する相補性を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖は親油性基に結合している、
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、前記二本鎖核酸分子を形成する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１７】
前記ガイド鎖または配列の１位におけるヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項１、７〜１０または１６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１８】
ガイド鎖または配列の２〜１０位における少なくとも１つのＣまたはＵヌクレオチドが、２’−フルオロ修飾を有する、請求項１〜４、６〜１０または１６〜１７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１９】
ガイド鎖または配列の２〜１０位における全てのＣおよびＵヌクレオチドが、２’−フルオロ修飾を有する、請求項１８に記載の核酸分子。
【請求項２０】
ガイド鎖または配列の１１〜１８位における少なくとも１つのＣまたはＵヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する請求項１〜３、５、７、９または１６〜１９のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２１】
ガイド鎖または配列の１１〜１８位における全てのＣおよびＵヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項２０に記載の核酸分子。
【請求項２２】
ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドが、少なくとも４個のリン酸修飾を含む、請求項１、２、４、５または１６〜２１のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２３】
ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドが、少なくとも８個のリン酸修飾を含む、請求項２２に記載の核酸分子。
【請求項２４】
ガイド鎖が、４〜１４個のリン酸修飾を含む、請求項１６に記載の核酸分子。
【請求項２５】
ガイド鎖が、４〜１０個のリン酸修飾を含む、請求項１６に記載の核酸分子。
【請求項２６】
ガイド鎖の３’末端の６ヌクレオチドが、全てリン酸修飾を含む、請求項１〜５または１６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２７】
リン酸修飾が、ホスホロチオエート修飾である、請求項１６〜２６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２８】
パッセンジャー鎖上の全てのＣおよびＵヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項１６〜２７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２９】
パッセンジャー鎖上の全てのヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項２８に記載の核酸分子。
【請求項３０】
パッセンジャー鎖上の少なくとも１個のヌクレオチドが、ホスホロチオエート修飾されている、請求項１６〜３０のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３１】
パッセンジャー鎖上の少なくとも２個のヌクレオチドが、ホスホロチオエート修飾されている、請求項３０に記載の核酸分子。
【請求項３２】
親油性分子が、ステロールである、請求項１〜５または１６〜３１のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３３】
ステロールが、コレステロールである、請求項３２に記載の核酸分子。
【請求項３４】
ガイド鎖が、１８〜１９ヌクレオチド長である、請求項１６〜３３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３５】
パッセンジャー鎖が、１１〜１３ヌクレオチド長である、請求項１６〜３４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３６】
前記二本鎖核酸分子が、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、請求項１６〜３５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３７】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記ガイド鎖は１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、およびここで、前記ガイド鎖は、少なくとも２個の化学修飾を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項３８】
少なくとも２個の化学修飾が、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含む、請求項３７に記載の単離された二本鎖核酸分子。
【請求項３９】
二本鎖核酸分子が、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、請求項３７〜３８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４０】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記ガイド鎖は、１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、およびここで、前記ガイド鎖は、５ヌクレオチドまたはそれより長い一本鎖３’領域および１ヌクレオチドまたはそれより短い５’領域を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項４１】
一本鎖領域が、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含む、請求項４０に記載の核酸分子。
【請求項４２】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記ガイド鎖は、１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１６ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、およびここで、前記ガイド鎖は、５ヌクレオチドまたはそれより長い一本鎖３’領域を有し、パッセンジャー鎖は、９より長いＣ１７の付加された鎖を有するステロール型分子を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項４３】
デュプレックスポリヌクレオチドであって、
第１のポリヌクレオチド、ここで、前記第１のポリヌクレオチドは、第２のポリヌクレオチドおよび標的遺伝子に対して相補的である；ならびに
第２のポリヌクレオチド、ここで前記第２のポリヌクレオチドは、前記第１のポリヌクレオチドよりも少なくとも６ヌクレオチド短い、
を含み、
ここで、前記第１のポリヌクレオチドは、４０〜９０％の疎水性塩基修飾、４０〜９０％のホスホロチオエートおよび４０〜９０％のリボース部分の修飾または任意のこれらの組み合わせからなる群より選択される修飾を含む一本鎖領域を含む、前記デュプレックスポリヌクレオチド。
【請求項４４】
デュプレックスポリヌクレオチドであって、
第１のポリヌクレオチド、ここで、前記第１のポリヌクレオチドは、第２のポリヌクレオチドおよび標的遺伝子に対して相補的である；ならびに
第２のポリヌクレオチド、ここで、前記第２のポリヌクレオチドは、前記第１のポリヌクレオチドよりも少なくとも６ヌクレオチド短い、
を含み、
ここで、前記デュプレックスポリヌクレオチドは、前記第１のポリヌクレオチド上のヌクレオチド９、１１、１２、１３または１４と、前記第２のポリヌクレオチド上の反対のヌクレオチドとの間にミスマッチを含む、前記デュプレックスポリヌクレオチド。
【請求項４５】
哺乳動物細胞において標的遺伝子の発現を阻害するための方法であって、哺乳動物細胞を、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された二本鎖核酸分子または請求項４３もしくは４４に記載のデュプレックスポリヌクレオチドと接触させることを含む、前記方法。
【請求項４６】
対象においてＲＮＡｉを誘導する方法であって、
対象に、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された二本鎖核酸分子または請求項４３もしくは４４に記載のデュプレックスポリヌクレオチドの、標的遺伝子のｍＲＮＡのＲＮＡｉを誘導するための有効量を投与すること
を含む、前記方法。
【請求項４７】
対象が、ヒトである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
標的遺伝子が、ＰＰＩＢである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
標的遺伝子が、ＭＡＰ４Ｋ４である、請求項４５に記載の方法。
【請求項５０】
標的遺伝子が、ＳＯＤ１である、請求項４５に記載の方法。
【請求項５１】
単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、
ポリヌクレオチド、ここで、前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡであって、疎水性分子に結合し、ここで、前記疎水性分子は、非末端のヌクレオチドの塩基、リボースまたは骨格に結合し、およびここで、前記単離された二本鎖核酸分子は、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含み、ここで、前記ガイド鎖は１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有する、
を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５２】
疎水性分子が、二本鎖ＲＮＡのガイド鎖に結合している、請求項５１に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５３】
請求項５１に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、ここで、前記ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドは、少なくとも２個のリン酸修飾を含み、およびここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５４】
疎水性分子が、二本鎖ＲＮＡのパッセンジャー鎖に結合している、請求項５１に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５５】
単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、
非共有結合的に疎水性分子と複合体化したポリヌクレオチド、ここで、前記疎水性分子は、ポリカチオン性分子である、
を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５６】
ポリカチオン性分子が、プロタミン、アルギニンリッチペプチドおよびスペルミンからなる群より選択される、請求項５５に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５７】
単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、
ポリヌクレオチド、ここで、前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡであって、疎水性分子にリンカーなしで直接的に複合体化し、ここで、疎水性分子はコレステロールではない。
を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５８】
組成物であって、以下：
疎水性修飾ポリヌクレオチド、ここで、前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡであって、疎水性分子に結合し、ここで、前記二本鎖核酸分子は、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含み、ここで、前記ガイド鎖は１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、ここで、ガイド鎖の１位は、５’リン酸化されているかまたは２’Ｏ−メチル修飾を有し、ここで、前記二本鎖核酸のヌクレオチドのうち少なくとも４０％は修飾されており、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるか、または１〜２ヌクレオチドの突出を含む一つの末端を有する；
中性脂質混合物；ならびに
任意に、カーゴ分子、
を含み、
ここで、前記疎水性修飾ポリヌクレオチドと前記中性脂質混合物は、ミセルを形成する、前記組成物。
【請求項５９】
パッセンジャー鎖の３’末端が、疎水性分子に結合している、請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】
組成物が、無菌である、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６１】
中性脂質混合物が、ＤＯＰＣ（ジオレオイルホスファチジルコリン）を含む、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６２】
中性脂質混合物がＤＳＰＣ（ジステアロイルホスファチジルコリン）を含む、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６３】
中性脂質混合物が、さらにコレステロールを含む、請求項５８〜６２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６４】
ステロールが、コレステロールである、請求項６２に記載の組成物。．
【請求項６５】
少なくとも２０％のＤＯＰＣおよび少なくとも２０％のコレステロールを含む、請求項５７〜５５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６６】
疎水性修飾ポリヌクレオチドの疎水性部分が、ステロールである、請求項５７〜６４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６７】
ステロールが、コレステロール、コレステリルまたは修飾コレステリル残基である、請求項６５に記載の組成物。
【請求項６８】
疎水性修飾ポリヌクレオチドの疎水性部分が、胆汁酸、コール酸またはタウロコール酸、デオキシコール酸、オレイルリトコール酸、オレオイルコレン酸、糖脂質、リン脂質、スフィンゴ脂質、イソプレノイド類、ビタミン類、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、脂肪酸エステル類、トリグリセリド、ピレン類、ポルフィリン類、テキサフィリン、アダマンタン、アクリジン類、ビオチン、クマリン、フルオレセイン、ローダミン、Texas-Red、ジゴキシゲニン、ジメトキシトリチル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、シアニン色素（例えば、Ｃｙ３またはＣｙ５）、Hoechst 33258色素、ソラレン、またはイブプロフェンからなる群より選択される、請求項５７〜６４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６９】
疎水性修飾ポリヌクレオチドの疎水性部分がポリカチオン性分子である、請求項５７〜６４または６７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７０】
ポリカチオン性分子が、プロタミン、アルギニンリッチペプチドおよびスペルミンからなる群より選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項７１】
カーゴ分子が、脂質、ペプチド、ビタミン、または小分子である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７２】
カーゴ分子が、非経口栄養からなる群より選択される多様な目的のために利用可能な市販の脂質乳液である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７３】
市販の脂質乳液が、イントラリピッド（intralipid）またはニュートラリピッド（nutralipid）である、請求項７１に記載の組成物。
【請求項７４】
カーゴ分子が、７４％を超えるリノール酸を含む脂肪酸混合物である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７５】
カーゴ分子が、少なくとも６％のカルジオリピンを含む脂肪酸混合物である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７６】
カーゴ分子が、少なくとも７４％のリノール酸および少なくとも６％のカルジオリピンを含む脂肪酸混合物である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７７】
ポリヌクレオチドのヌクレオチドのうちの少なくとも４０％が修飾されている、請求項５７〜７５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７８】
カーゴ分子が、膜融合性脂質であり、好ましくは少なくとも１０％の膜融合性脂質である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７９】
膜融合性脂質が、ＤＯＰＥである、請求項７７に記載の組成物。
【請求項８０】
対象においてＲＮＡｉを誘導する方法であって、
対象に、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された二本鎖核酸分子、または請求項４３もしくは４４に記載のデュプレックスポリヌクレオチド、または請求項５７〜７８のいずれか一項に記載の組成物の、標的遺伝子のｍＲＮＡのＲＮＡｉを誘導するための有効量を投与すること
を含み、
ここで、前記ポリヌクレオチドは、少なくとも、前記標的遺伝子に対応する配列の領域を有し、ここで、投与の工程は、全身、静脈内、腹腔内、皮内、局所、鼻内、吸入、経口、粘膜内、局所注射、皮下、経口、気管または眼内である、前記方法。
【請求項８１】
投与が、全身である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８２】
投与が、静脈内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８３】
投与が、腹腔内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８４】
投与が、皮内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８５】
投与が、局所である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８６】
投与が、眼内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８７】
対象が、ヒトである、請求項７９に記載の方法。
【請求項８８】
標的遺伝子が、ＰＰＩＢである、請求項７９に記載の方法。
【請求項８９】
標的遺伝子が、ＭＡＰ４Ｋ４である、請求項７９に記載の方法。
【請求項９０】
標的遺伝子が、ＳＯＤ１である、請求項７９に記載の方法。
【請求項９１】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ１０〜１７ヌクレオチドのパッセンジャー鎖、
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ５〜１１ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の少なくとも２個のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、およびここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾されている、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１】
単離された非対称の核酸分子であって、二本鎖核酸を形成する、１６ヌクレオチドの最短の長さを有するガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含み、二本鎖領域および一本鎖領域を有し、前記二本鎖領域は８〜１５ヌクレオチドの長さを有し、前記一本鎖領域は５〜１２ヌクレオチドの長さを有し、ここで、前記パッセンジャー鎖は親油性基に結合しており、ここで、前記二本鎖核酸のヌクレオチドのうち少なくとも４０％は修飾されており、およびここで、前記一本鎖領域は、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を有する、前記核酸分子。
【請求項２】
ガイド鎖の１位が、５’リン酸化されている、請求項１に記載の単離された非対称の核酸分子。
【請求項３】
ガイド鎖の１位が、２’Ｏ−メチル修飾および５’リン酸化されている、請求項１に記載の単離された非対称の核酸分子。
【請求項４】
単離された二本鎖核酸分子であって、ｍｉＲＮＡ配列に対して相補性を有する長さ１５〜２１ヌクレオチドのより長い鎖と、３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのより短い鎖とを含み、ここで、前記より長い鎖および前記パッセンジャー鎖が二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、より長い鎖は、長さ２〜１３ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含み、少なくとも５０％のヌクレオチドが修飾されている、前記二本鎖核酸分子。
【請求項５】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ２〜１３ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、およびここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含む、前記二本鎖核酸分子。
【請求項６】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ１０〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ５〜１１ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の少なくとも２個のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、およびここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾されている、前記二本鎖核酸分子。
【請求項７】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ６〜８ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖は、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含み、ここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含み、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項８】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１６ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖の１１〜１８位中の全てのＣおよびＵヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖中の全てのヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾されており、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項９】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ８〜１５ヌクレオチドのパッセンジャー鎖
を含み、ここで、前記親油性基は、コレステロールおよび長さ５〜７または９〜１８個の炭素のＣ１７ポリ炭素鎖を有するステロール型分子からなる群より選択され、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖の１１〜１８位中の全てのＣおよびＵヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾を有し、ここで、ガイド鎖の２〜１０位中の全てのＣおよびＵヌクレオチドは、２’Ｆ修飾を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖中の全てのヌクレオチドは、２’Ｏ−メチル修飾されており、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１０】
単離された核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有するガイド配列、
３’末端において親油性基に結合したパッセンジャー配列
を含み、
ここで、前記ガイド配列および前記パッセンジャー配列が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド配列は、長さ２〜１３ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の各々のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド配列は、５’リン酸修飾を有し、ここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含み、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、前記核酸分子。
【請求項１１】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記分子の二本鎖である領域は、８〜１４ヌクレオチド長であり、ここで、前記ガイド鎖は、４〜１２ヌクレオチド長である一本鎖領域を含み、およびここで、前記ガイド鎖の一本鎖領域は、２〜１２個のホスホロチオエート修飾を含む、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１２】
ガイド鎖が、６〜８個のホスホロチオエート修飾を含む、請求項１１に記載の核酸分子。
【請求項１３】
ガイド鎖の一本鎖領域が、６ヌクレオチド長である、請求項１１または１２に記載の核酸分子。
【請求項１４】
二本鎖領域が、１３ヌクレオチド長である、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１５】
二本鎖核酸分子が、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１６】
単離された二本鎖核酸分子であって、
ガイド鎖、ここで、前記ガイド鎖は、１６〜２８ヌクレオチド長であり、標的遺伝子に対して相補性を有し、ここで、前記ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドは、少なくとも２個のリン酸修飾を含み、およびここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含む、ならびに
パッセンジャー鎖、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対する相補性を有し、ここで、前記パッセンジャー鎖は親油性基に結合している、
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、前記二本鎖核酸分子を形成する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項１７】
前記ガイド鎖または配列の１位におけるヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項１、７〜１０または１６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１８】
ガイド鎖または配列の２〜１０位における少なくとも１つのＣまたはＵヌクレオチドが、２’−フルオロ修飾を有する、請求項１〜４、６〜１０または１６〜１７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項１９】
ガイド鎖または配列の２〜１０位における全てのＣおよびＵヌクレオチドが、２’−フルオロ修飾を有する、請求項１８に記載の核酸分子。
【請求項２０】
ガイド鎖または配列の１１〜１８位における少なくとも１つのＣまたはＵヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する請求項１〜３、５、７、９または１６〜１９のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２１】
ガイド鎖または配列の１１〜１８位における全てのＣおよびＵヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項２０に記載の核酸分子。
【請求項２２】
ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドが、少なくとも４個のリン酸修飾を含む、請求項１、２、４、５または１６〜２１のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２３】
ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドが、少なくとも８個のリン酸修飾を含む、請求項２２に記載の核酸分子。
【請求項２４】
ガイド鎖が、４〜１４個のリン酸修飾を含む、請求項１６に記載の核酸分子。
【請求項２５】
ガイド鎖が、４〜１０個のリン酸修飾を含む、請求項１６に記載の核酸分子。
【請求項２６】
ガイド鎖の３’末端の６ヌクレオチドが、全てリン酸修飾を含む、請求項１〜５または１６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２７】
リン酸修飾が、ホスホロチオエート修飾である、請求項１６〜２６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２８】
パッセンジャー鎖上の全てのＣおよびＵヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項１６〜２７のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項２９】
パッセンジャー鎖上の全てのヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を有する、請求項２８に記載の核酸分子。
【請求項３０】
パッセンジャー鎖上の少なくとも１個のヌクレオチドが、ホスホロチオエート修飾されている、請求項１６〜３０のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３１】
パッセンジャー鎖上の少なくとも２個のヌクレオチドが、ホスホロチオエート修飾されている、請求項３０に記載の核酸分子。
【請求項３２】
親油性分子が、ステロールである、請求項１〜５または１６〜３１のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３３】
ステロールが、コレステロールである、請求項３２に記載の核酸分子。
【請求項３４】
ガイド鎖が、１８〜１９ヌクレオチド長である、請求項１６〜３３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３５】
パッセンジャー鎖が、１１〜１３ヌクレオチド長である、請求項１６〜３４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３６】
前記二本鎖核酸分子が、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、請求項１６〜３５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項３７】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記ガイド鎖は１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、およびここで、前記ガイド鎖は、少なくとも２個の化学修飾を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項３８】
少なくとも２個の化学修飾が、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含む、請求項３７に記載の単離された二本鎖核酸分子。
【請求項３９】
二本鎖核酸分子が、平滑であるかまたは１〜２ヌクレオチドの突出を含む１つの末端を有する、請求項３７〜３８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４０】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記ガイド鎖は、１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、およびここで、前記ガイド鎖は、５ヌクレオチドまたはそれより長い一本鎖３’領域および１ヌクレオチドまたはそれより短い５’領域を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項４１】
一本鎖領域が、少なくとも２個のホスホロチオエート修飾を含む、請求項４０に記載の核酸分子。
【請求項４２】
ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含む単離された二本鎖核酸分子であって、ここで、前記ガイド鎖は、１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１６ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、およびここで、前記ガイド鎖は、５ヌクレオチドまたはそれより長い一本鎖３’領域を有し、パッセンジャー鎖は、９より長いＣ１７の付加された鎖を有するステロール型分子を有する、前記二本鎖核酸分子。
【請求項４３】
デュプレックスポリヌクレオチドであって、
第１のポリヌクレオチド、ここで、前記第１のポリヌクレオチドは、第２のポリヌクレオチドおよび標的遺伝子に対して相補的である；ならびに
第２のポリヌクレオチド、ここで前記第２のポリヌクレオチドは、前記第１のポリヌクレオチドよりも少なくとも６ヌクレオチド短い、
を含み、
ここで、前記第１のポリヌクレオチドは、４０〜９０％の疎水性塩基修飾、４０〜９０％のホスホロチオエートおよび４０〜９０％のリボース部分の修飾または任意のこれらの組み合わせからなる群より選択される修飾を含む一本鎖領域を含む、前記デュプレックスポリヌクレオチド。
【請求項４４】
デュプレックスポリヌクレオチドであって、
第１のポリヌクレオチド、ここで、前記第１のポリヌクレオチドは、第２のポリヌクレオチドおよび標的遺伝子に対して相補的である；ならびに
第２のポリヌクレオチド、ここで、前記第２のポリヌクレオチドは、前記第１のポリヌクレオチドよりも少なくとも６ヌクレオチド短い、
を含み、
ここで、前記デュプレックスポリヌクレオチドは、前記第１のポリヌクレオチド上のヌクレオチド９、１１、１２、１３または１４と、前記第２のポリヌクレオチド上の反対のヌクレオチドとの間にミスマッチを含む、前記デュプレックスポリヌクレオチド。
【請求項４５】
哺乳動物細胞において標的遺伝子の発現を阻害するための方法であって、哺乳動物細胞を、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された二本鎖核酸分子または請求項４３もしくは４４に記載のデュプレックスポリヌクレオチドと接触させることを含む、前記方法。
【請求項４６】
対象においてＲＮＡｉを誘導する方法であって、
対象に、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された二本鎖核酸分子または請求項４３もしくは４４に記載のデュプレックスポリヌクレオチドの、標的遺伝子のｍＲＮＡのＲＮＡｉを誘導するための有効量を投与すること
を含む、前記方法。
【請求項４７】
対象が、ヒトである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
標的遺伝子が、ＰＰＩＢである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
標的遺伝子が、ＭＡＰ４Ｋ４である、請求項４５に記載の方法。
【請求項５０】
標的遺伝子が、ＳＯＤ１である、請求項４５に記載の方法。
【請求項５１】
単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、
ポリヌクレオチド、ここで、前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡであって、疎水性分子に結合し、ここで、前記疎水性分子は、非末端のヌクレオチドの塩基、リボースまたは骨格に結合し、およびここで、前記単離された二本鎖核酸分子は、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含み、ここで、前記ガイド鎖は１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有する、
を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５２】
疎水性分子が、二本鎖ＲＮＡのガイド鎖に結合している、請求項５１に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５３】
請求項５１に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、ここで、前記ガイド鎖の３’末端の１０ヌクレオチドは、少なくとも２個のリン酸修飾を含み、およびここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、少なくとも１つの２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５４】
疎水性分子が、二本鎖ＲＮＡのパッセンジャー鎖に結合している、請求項５１に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５５】
単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、
非共有結合的に疎水性分子と複合体化したポリヌクレオチド、ここで、前記疎水性分子は、ポリカチオン性分子である、
を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５６】
ポリカチオン性分子が、プロタミン、アルギニンリッチペプチドおよびスペルミンからなる群より選択される、請求項５５に記載の単離された疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５７】
単離された疎水性修飾ポリヌクレオチドであって、
ポリヌクレオチド、ここで、前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡであって、疎水性分子にリンカーなしで直接的に複合体化し、ここで、疎水性分子はコレステロールではない。
を含む、前記疎水性修飾ポリヌクレオチド。
【請求項５８】
組成物であって、以下：
疎水性修飾ポリヌクレオチド、ここで、前記ポリヌクレオチドは二本鎖ＲＮＡであって、疎水性分子に結合し、ここで、前記二本鎖核酸分子は、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖を含み、ここで、前記ガイド鎖は１６〜２９ヌクレオチド長であって、標的遺伝子に対して実質的に相補性であり、ここで、前記パッセンジャー鎖は、８〜１４ヌクレオチド長であって、前記ガイド鎖に対して相補性を有し、ここで、ガイド鎖の１位は、５’リン酸化されているかまたは２’Ｏ−メチル修飾を有し、ここで、前記二本鎖核酸のヌクレオチドのうち少なくとも４０％は修飾されており、およびここで、前記二本鎖核酸分子は、平滑であるか、または１〜２ヌクレオチドの突出を含む一つの末端を有する；
中性脂質混合物；ならびに
任意に、カーゴ分子、
を含み、
ここで、前記疎水性修飾ポリヌクレオチドと前記中性脂質混合物は、ミセルを形成する、前記組成物。
【請求項５９】
パッセンジャー鎖の３’末端が、疎水性分子に結合している、請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】
組成物が、無菌である、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６１】
中性脂質混合物が、ＤＯＰＣ（ジオレオイルホスファチジルコリン）を含む、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６２】
中性脂質混合物がＤＳＰＣ（ジステアロイルホスファチジルコリン）を含む、請求項５８〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６３】
中性脂質混合物が、さらにコレステロールを含む、請求項５８〜６２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６４】
ステロールが、コレステロールである、請求項６２に記載の組成物。．
【請求項６５】
少なくとも２０％のＤＯＰＣおよび少なくとも２０％のコレステロールを含む、請求項５７〜５５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６６】
疎水性修飾ポリヌクレオチドの疎水性部分が、ステロールである、請求項５７〜６４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６７】
ステロールが、コレステロール、コレステリルまたは修飾コレステリル残基である、請求項６５に記載の組成物。
【請求項６８】
疎水性修飾ポリヌクレオチドの疎水性部分が、胆汁酸、コール酸またはタウロコール酸、デオキシコール酸、オレイルリトコール酸、オレオイルコレン酸、糖脂質、リン脂質、スフィンゴ脂質、イソプレノイド類、ビタミン類、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、脂肪酸エステル類、トリグリセリド、ピレン類、ポルフィリン類、テキサフィリン、アダマンタン、アクリジン類、ビオチン、クマリン、フルオレセイン、ローダミン、Texas-Red、ジゴキシゲニン、ジメトキシトリチル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、シアニン色素（例えば、Ｃｙ３またはＣｙ５）、Hoechst 33258色素、ソラレン、またはイブプロフェンからなる群より選択される、請求項５７〜６４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６９】
疎水性修飾ポリヌクレオチドの疎水性部分がポリカチオン性分子である、請求項５７〜６４または６７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７０】
ポリカチオン性分子が、プロタミン、アルギニンリッチペプチドおよびスペルミンからなる群より選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項７１】
カーゴ分子が、脂質、ペプチド、ビタミン、または小分子である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７２】
カーゴ分子が、非経口栄養からなる群より選択される多様な目的のために利用可能な市販の脂質乳液である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７３】
市販の脂質乳液が、イントラリピッド（intralipid）またはニュートラリピッド（nutralipid）である、請求項７１に記載の組成物。
【請求項７４】
カーゴ分子が、７４％を超えるリノール酸を含む脂肪酸混合物である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７５】
カーゴ分子が、少なくとも６％のカルジオリピンを含む脂肪酸混合物である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７６】
カーゴ分子が、少なくとも７４％のリノール酸および少なくとも６％のカルジオリピンを含む脂肪酸混合物である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７７】
ポリヌクレオチドのヌクレオチドのうちの少なくとも４０％が修飾されている、請求項５７〜７５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７８】
カーゴ分子が、膜融合性脂質であり、好ましくは少なくとも１０％の膜融合性脂質である、請求項５７〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７９】
膜融合性脂質が、ＤＯＰＥである、請求項７７に記載の組成物。
【請求項８０】
対象においてＲＮＡｉを誘導する方法であって、
対象に、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された二本鎖核酸分子、または請求項４３もしくは４４に記載のデュプレックスポリヌクレオチド、または請求項５７〜７８のいずれか一項に記載の組成物の、標的遺伝子のｍＲＮＡのＲＮＡｉを誘導するための有効量を投与すること
を含み、
ここで、前記ポリヌクレオチドは、少なくとも、前記標的遺伝子に対応する配列の領域を有し、ここで、投与の工程は、全身、静脈内、腹腔内、皮内、局所、鼻内、吸入、経口、粘膜内、局所注射、皮下、経口、気管または眼内である、前記方法。
【請求項８１】
投与が、全身である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８２】
投与が、静脈内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８３】
投与が、腹腔内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８４】
投与が、皮内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８５】
投与が、局所である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８６】
投与が、眼内である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８７】
対象が、ヒトである、請求項７９に記載の方法。
【請求項８８】
標的遺伝子が、ＰＰＩＢである、請求項７９に記載の方法。
【請求項８９】
標的遺伝子が、ＭＡＰ４Ｋ４である、請求項７９に記載の方法。
【請求項９０】
標的遺伝子が、ＳＯＤ１である、請求項７９に記載の方法。
【請求項９１】
単離された二本鎖核酸分子であって、
標的遺伝子に対して相補性を有する長さ１７〜２１ヌクレオチドのガイド鎖、
３’末端において親油性基に結合した長さ１０〜１７ヌクレオチドのパッセンジャー鎖、
を含み、
ここで、前記ガイド鎖および前記パッセンジャー鎖が、二本鎖領域および一本鎖領域を有する二本鎖核酸分子を形成し、ここで、前記ガイド鎖は、長さ５〜１１ヌクレオチドの３’一本鎖領域を有し、前記一本鎖領域内の少なくとも２個のヌクレオチドは、ホスホロチオエート修飾を有し、ここで、前記ガイド鎖は５’リン酸修飾を有し、およびここで、前記二本鎖領域中のＣおよびＵヌクレオチドのうち少なくとも５０％は、２’Ｏ−メチル修飾または２’−フルオロ修飾されている、前記二本鎖核酸分子。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４２】
【図４３】
【図４４】
【図４５】
【図４６】
【図４７】
【図４８】
【図４９】
【図５０】
【図５１】
【図５２】
【図５３】
【図５４】
【図５５】
【図５６】
【図５７】
【図５８】
【図５９】
【図６０】
【図６１】
【図６２】
【図６３】
【図６４】
【図６５】
【図６６】
【図６７】
【図６８】
【図６９】
【図７０】
【図７１】
【図７２】
【図７３】
【図７４】
【図７５】
【図７６】
【図７７】
【図７８】
【図７９】
【図８０】
【図８１】
【図８２】
【図８３】
【図８４】
【図８５】
【図８６】
【図８７】
【図８８】
【図８９】
【図９０】
【図９１】
【図９２】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
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【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４２】
【図４３】
【図４４】
【図４５】
【図４６】
【図４７】
【図４８】
【図４９】
【図５０】
【図５１】
【図５２】
【図５３】
【図５４】
【図５５】
【図５６】
【図５７】
【図５８】
【図５９】
【図６０】
【図６１】
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【図６３】
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【図６８】
【図６９】
【図７０】
【図７１】
【図７２】
【図７３】
【図７４】
【図７５】
【図７６】
【図７７】
【図７８】
【図７９】
【図８０】
【図８１】
【図８２】
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【図８５】
【図８６】
【図８７】
【図８８】
【図８９】
【図９０】
【図９１】
【図９２】
【公表番号】特表２０１２−５０２６５７（Ｐ２０１２−５０２６５７Ａ）
【公表日】平成２４年２月２日（２０１２．２．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５２７８２８（Ｐ２０１１−５２７８２８）
【出願日】平成２１年９月２２日（２００９．９．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００５２４７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０３３２４７
【国際公開日】平成２２年３月２５日（２０１０．３．２５）
【出願人】（３１１００１３７０）アールエックスアイ ファーマシューティカルズ コーポレーション (4)
【出願人】（３１１０１３５１３）
【出願人】（３１１０１３５２４）
【出願人】（３１１０１３５３５）
【出願人】（３１１０１３５４６）
【出願人】（３１１０１３５５７）
【出願人】（３１１０１４７９４）
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年２月２日（２０１２．２．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月２２日（２００９．９．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００５２４７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０３３２４７
【国際公開日】平成２２年３月２５日（２０１０．３．２５）
【出願人】（３１１００１３７０）アールエックスアイ ファーマシューティカルズ コーポレーション (4)
【出願人】（３１１０１３５１３）
【出願人】（３１１０１３５２４）
【出願人】（３１１０１３５３５）
【出願人】（３１１０１３５４６）
【出願人】（３１１０１３５５７）
【出願人】（３１１０１４７９４）
【Ｆターム（参考）】
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