デスフェリチオシンポリエーテル類似体
比較的非毒性のデスアザデスフェリチオシン類似体であって、式（Ｉ）：
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてもよく、およびこれらはＨ、１４個までの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルであることができ、例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチルであるか、またはアリールアルキルであってここでアリール部分はヒドロカルビルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、前記アリールアルキル基は１４個までの炭素原子を有し、Ｒ２は任意に１４個までの炭素原子を有するアルコキシであり；Ｒ３は、［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｘ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｙ−アルキルであり；ｎは、独立して、１〜８の整数であり；ｘは、１〜８の整数であり；ｙは、０〜８の整数であり、および、Ｒ３Ｏは、フェニル環上の４位以外の任意の位置を占めてよい、
で表される、前記類似体、またはその塩、水和物もしくは溶媒和物；および、三価金属すなわち鉄の過剰の効果を処置するための、方法および組成物。
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてもよく、およびこれらはＨ、１４個までの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルであることができ、例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチルであるか、またはアリールアルキルであってここでアリール部分はヒドロカルビルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、前記アリールアルキル基は１４個までの炭素原子を有し、Ｒ２は任意に１４個までの炭素原子を有するアルコキシであり；Ｒ３は、［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｘ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｙ−アルキルであり；ｎは、独立して、１〜８の整数であり；ｘは、１〜８の整数であり；ｙは、０〜８の整数であり、および、Ｒ３Ｏは、フェニル環上の４位以外の任意の位置を占めてよい、
で表される、前記類似体、またはその塩、水和物もしくは溶媒和物；および、三価金属すなわち鉄の過剰の効果を処置するための、方法および組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
政府支援
本発明は、その全体または一部について、米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）の国立糖尿病・消化器病・腎臓病研究所（ＮＩＤＤＫ）からの助成金No. DK49108の支援を受けた。政府は本発明について一定の権利を有する。
【０００２】
関連出願
本出願は、２００７年３月１５日に出願された仮出願第60/966,539号の優先権を主張する。該仮出願の全内容および開示、ならびに本明細書に引用される各特許、特許出願、参考文献、テキスト、原稿、記事または他の資料の開示は、本明細書に参照として組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
ヒトは、毎日約１ｍｇの金属を吸収および排泄する、高度に効率的な鉄分管理系を進化させてきた；過剰な鉄分を排出するメカニズムは存在しない［Brittenham, G. M. Disorders of Iron Metabolism: Iron Deficiency and Overload. In Hematology: Basic Principles and Practice; 3rd ed.; Hoffman, R., Benz, E. J., Shattil, S. J., Furie, B., Cohen, H. J. et al., Eds.; Churchill Livingstone: New York, 2000; pp 397-428］。
【０００４】
輸血の赤血球由来であるか［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739-761; Vichinsky, E. P. Current Issues with Blood Transfusions in Sickle Cell Disease. Semin. Hematol. 2001,38,14-22; Kersten, M. J., Lange, R., Smeets, M. E., Vreugdenhil, G., Roozendaal, K. J., Lameijer, W. and Goudsmit, R. Long-Term Treatment of Transfusional Iron Overload with the Oral Iron Chelator Deferiprone (Ll): A Dutch Multicenter Trial. Ann. Hematol. 1996,73,247-252］、または食事性の鉄分吸収の増加によるか［Conrad, M. E.; Umbreit, J. N.; Moore, E. G. Iron Absorption and Transport. Am. J. Med. Sci. 1999,318,213-229; Lieu, P. T.; Heiskala, M.; Peterson, P. A; Yang, Y. The Roles of Iron in Health and Disease, MoI. Aspects Med. 2001,22, 1- 87］に関わらず、効果的な処置なくしては、体内の鉄分は次第に増加して、肝臓、心臓、膵臓および他の部分に沈着する。鉄蓄積は最終的には次のものをもたらす：
【０００５】
（ｉ）肝硬変に進行し得る肝疾患［Angelucci, E.; Brittenham, G. M.; McLaren, C. E.; Ripalti, M.; Baronciani, D.; Giardini, C; Galimberti, M.; Polchi, P.; Lucarelli, G. Hepatic Iron Concentration and Total Body Iron Stores in Thalassemia Major. N. Engl. J. Med. 2000,343,327-331; Bonkovsky, H. L.; Lambrecht, R. W. Iron-Induced Liver Injury. Clin. Liver Dis. 2000, 4, 409429, vi-vii; Pietrangelo, A Mechanism of Iron Toxicity. Adv. Exp. Med. Biol. 2002, 509, 19-43］、（ｉｉ）鉄誘発性の膵β細胞分泌の減少と、肝臓のインスリン抵抗性の増加の両方に関連する、糖尿病［Cario, H.; HoIl, R. W.; Debatin, K. M.; Kohne, E. Insulin Sensitivity and p-Cell Secretion in Thalassaemia Major with Secondary Haemochromatosis: Assessment by Oral Glucose Tolerance Test. Eur. J. Pediatr. 2003, 162, 139-146; Wojcik, J. P.; Speechley, M. R.; Kertesz, A E.; Chakrabarti, S.; Adams, P. C. Natural History of C282Y Homozygotes for Hemochromatosis. Can. J. Gastroenterol. 2002, 16,297-302］、および（ｉｉｉ）サラセミアメジャーおよび輸血による鉄過剰の関連形態において現在でも第１の死因である、心疾患［Brittenham, G. M. Disorders of Iron Metabolism: Iron Deficiency and Overload. In Hematology: Basic Principles and Practice; 3rd ed.; Hoffman, R., Benz, E. J., Shattil, S. J., Furie, B., Cohen, H .J. et al., Eds.; Churchill Livingstone: New York, 2000; pp 397-428; Brittenham, G. M.; Griffith, P. M.; Nienhuis, A W.; McLaren, C. E.; Young, N. S.; Tucker, E. E.; Allen, C. J.; Farrell, D. E.; Harris, J. W. Efficacy of Deferoxamine in Preventing Complications of Iron Overload in Patients with Thalassemia Major. N. Engl. J. Med. 1994,331,567-573; Zurlo, M. G.; De Stefano, P.; Borgna-Pignatti, C; Di Palma, A.; Piga, A.; Melevendi, C; Di Gregorio, F.; Burattini, M. G.; Terzoli, S. Survival and Causes of Death in Thalassaemia Major. Lancet 1989,2,27-30］。
【０００６】
鉄は地殻の５％を構成しているが、生体はこの重要な微量栄養素にアクセスし、管理するのに多大の困難を有している。Ｆｅ（ＩＩＩ）水酸化物の低溶解性（Ｋｓｐ＝１×１０−３９）［Raymond, K. N.; Carrano, C. J. Coordination Chemistry and Microbial Iron Transport. Ace. Chem. Res. 1979,12, 183-190］は、これがこの金属の生物圏における主たる形態であるため、自然界に巧妙な鉄の貯蔵および輸送システムの発達をもたらした。微生物は、低分子量の、実質的に第二鉄特異的リガンドであるシデロフォアを利用する［Byers, B. R; Arceneaux, J. E. Microbial Iron Transport: Iron Acquisition by Pathogenic Microorganisms. Met. Ions Biol. Syst. 1998,35,37-66; Kalinowski, D. S.; Richardson, D. R. The Evolution of Iron Chelators for the Treatment of Iron Overload Disease and Cancer. Pharmacol Rev. 2005, 57, 547-583］；高等な真核生物は、鉄を輸送および貯蔵するためにタンパク質を用いる傾向がある（例えば、それぞれトランスフェリンおよびフェリチン）［Bergeron, R. J. Iron: A Controlling Nutrient in Proliferative Processes. Trends Biochem. Sci. 1986, 1 1 , 133-136; Theil, E. c; Huynh, B. H. Ferritin Mineralization: Ferroxidation and Beyond. J. Inorg. Biochem. 1997, 67, 30; Ponka, P.; Beaumont, c; Richardson, D. R. Function and Regulation of Transferrin and Ferritin, Semin. Hematol. 1998, 35, 35-54］。ヒトにおいては、循環系における金属の不均一なプールである、非トランスフェリン結合血漿鉄、非管理の鉄分が、鉄媒介性の臓器障害の主要な源となっているようである。
【０００７】
過剰な鉄分に関連する毒性は、全身性または限局性の問題のどちらであっても、反応性酸素種、例えば内因性の過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）とのその相互作用から生じる［Graf, E.; Mahoney, J. R; Bryant, R. G.; Eaton, J. W. Iron-Catalyzed Hydroxyl Radical Formation. Stringent Requirement for Free Iron Coordination Site. J. Biol. Chem. 1984, 259, 36203624; Halliwell, B. Free Radicals and Antioxidants: A Personal View. Nutr. Rev. 1994,52,253-265; Halliwell, B. Iron, Oxidative Damage, and Chelating Agents. In The Development of Iron Chelators for Clinical Use; Bergeron, R. J., Brittenham, G. M., Eds.; CRC: Boca Raton, 1994; pp 3356; Koppenol, W. Kinetics and Mechanism of the Fenton Reaction: Implications for Iron Toxicity. In Iron Chelators: New Development Strategies; Badman, D. G., Bergeron, R. J., Brittenham, G. M., Eds.; Saratoga: Ponte Vedra Beach, FL, 2000; pp 3-10］。Ｆｅ（ＩＩ）の存在下において、Ｈ２Ｏ２は非常に高反応性の種であるヒドロキシル・ラジカル（ＨＯ・）とＨＯ−に還元され、これは、フェントン反応として知られているプロセスである。遊離されたＦｅ（ＩＩＩ）は、種々の生物学的還元剤（例えばアスコルビン酸塩）を介してＦｅ（ＩＩ）に再度還元され得るが、これは問題のあるサイクルである。
【０００８】
ヒドロキシル・ラジカルは種々の細胞成分と非常に迅速に反応して、ＤＮＡおよび膜を損傷する遊離ラジカルおよびラジカル媒介性の連鎖過程を開始することができ、発癌物質を産生する［Halliwell, B. Free Radicals and Antioxidants: A Personal View. Nutr. Rev. 1994,52,253-265; Babbs, C. F. Oxygen Radicals in Ulcerative Colitis. Free Radic. Biol. Med. 1992,13,169-181 ; Hazen, S. L.; d'Avignon, A; Anderson, M. M.; Hsu, F. F.; Heinecke, J. W. Human Neutrophils Employ the Myeloperoxidase- Hydrogen Peroxide-Chloride System to Oxidize a- Amino Acids to a Family of Reactive Aldehydes. Mechanistic Studies Identifying Labile Intermediates along the Reaction Pathway. J. Biol. Chem. 1998,273,4997-5005］。この問題への解決は、管理されていない過剰な鉄を除去することである［Bergeron, R. J.; McManis, J. S.; Weimar, W. R; Wiegand, J.; Eiler-McManis, E. Iron Chelators and Therapeutic Uses. In Burger's Medicinal Chemistry; 6th ed.; Abraham, D. A, Ed.; Wiley: New York, 2003; pp 479- 561］。
【０００９】
サラセミアメジャーおよび輸血依存性の難治性貧血患者の大部分においては、貧血の重篤度のため、鉄の毒性蓄積物を除去する手段として瀉血治療を用いることができない。鉄を封鎖しこれを身体から排出可能とするキレート剤による処置は、ただ１つの利用可能な治療アプローチである。現在使用されているか、または臨床試験に付されている鉄キレート剤は［Brittenham, G. M. Iron Chelators and Iron Toxicity. Alcohol 2003, 30, 151-158］、以下を含む：デスフェリオキサミンＢメシレート（ＤＦＯａ）、１，２−ジメチル−３−ヒドロキシピリジン−４−オン（デフェリプロン、Ｌ１）、４−［３，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）−１，２，４−トリアゾール−１−イル］安息香酸（デフェラシロックス、ＩＣＬ６７０Ａ）、およびデスフェリチオシン（ＤＦＴ）類似体、（Ｓ）−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［デフェリトリン、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ、１；表１］。Streptomyces pilosusにより産生される六配位ヒドロキサム酸鉄キレート剤である、デスフェリオキサミンＢ（ＤＦＯ）の皮下（ｓｃ）注入［Bickel, H., Hall, G. E., Keller-Schierlein, W., Prelog, V., Vischer, E. and Wettstein, A. Metabolic Products of Actinomycetes. XXVII. Constitutional Formula of Ferrioxamine B. HeIv. Chim. Acta 1960,43,2129-2138］は、現在でも輸血による鉄過剰に対する信頼できる処置とみなされている［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739-761 ; Giardina, P. J. and Grady, R. W. Chelation Therapy in [beta]-Thalassemia: An Optimistic Update. Semin. Hematol. 2001,38,360- 366］。
【００１０】
ＤＦＯは経口的に活性ではなく、ｓｃで投与された場合に、身体で非常に短い半減期を有し、したがって長期にわたり連続的注入によって与える必要がある［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739-761 ; Pippard, M. J. Desferrioxamine-Induced Iron Excretion in Humans. Bailliere's Clin. Haematol. 1989,2,323-343］。これらの理由から、患者のコンプライアンスが大きな問題となる［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739- 761; Giardina, P. J. and Grady, R. W. Chelation Therapy in [beta]-Thalassemia: An Optimistic Update. Semin. Hematol. 2001,38,360-366］。経口的に活性な二座のキレート剤であるデフェリプロンは、ヨーロッパおよび他の国々において、ＤＦＯにつぐ第２選択の治療法として認可されている［Hoffbrand, A V.; Al-Refaie, F.; Davis, B.; Siritanakatkul, N.; Jackson, B. F. A; Cochrane, J.; Prescott, E.; Wonke, B. Long-term Trial of Deferiprone in 51 Transfusion-Dependent Iron Overloaded Patients. Blood 1998, 91, 295-300; Olivieri, N. F. Long-term Therapy with Deferiprone. Acta Haematoi. 1996,95,37-48; Olivieri, N. F.; Brittenham, G. M.; McLaren, C. E.; Templeton, D. M.; Cameron, R. G.; McClelland, R. A; Burt, A D.; Fleming, K. A Long-Term Safety and Effectiveness of Iron-Chelation Therapy with Deferiprone for Thalassemia Major. N. Engi. J. Med. 1998,339,417-423; Richardson, D. R. The Controversial Role of Deferiprone in the Treatment of Thalassemia. J. Lab. Clin. Med. 2001,137,324-329］。
【００１１】
残念なことには、これは経口的に活性ではあるが、ｓｃによるＤＦＯより、鉄分除去の効率が低い。一方経口的に活性な三座のキレート剤であるデフェラシロックスは、現在ＦＤＡにより承認され、これはＤＦＯに対して劣等ではない。また、デフェラシロックスは明らかにいくらか狭い治療窓を有するが、その理由は、前臨床毒性試験中に動物において指摘された、その潜在的腎毒性のためである［Nisbet-Brown, E.; Olivieri, N. F.; Giardina, P. J.; Grady, R. W.; Neufeld, E. J.; Sechaud, R; Krebs-Brown, A J.; Anderson, J. R; Alberti, D.; Sizer, K. c; Nathan, D. G. Effectiveness and Safety of ICL670 in Iron-Loaded Patients with Thalassaemia: a Randomised, Double-Blind, Placebo-Controlled, Dose-Escalation Trial. Lancet 2003,361,1597-1602; Galanello, R; Piga, A; Alberti, D.; Rouan, M.-C; Bigler, H.; Sechaud, R. Safety, Tolerability, and Pharmacokinetics of ICL670, a New Orally Active lron-Chelating Agent in Patients with Transfusion-Dependent Iron Overload Due to Thalassemia. J. Clin. Pharmacol. 2003,43,565-572; Cappellini, M. D. Iron-chelating therapy with the new oral agent ICL670 (Exjade). Best Pract Res Clin Haematol 2005, 18, 289-298］。
【００１２】
さらに、Novartisは最近（２００７年４月）、デフェラシロックスについての処方情報を訂正した：「急性腎不全、場合によっては致命的な結果が、Exjade（登録商標）（デフェラシロックス）の市場前での使用により報告された。ほとんどの死亡例は、複数の共存症の患者であって、その血液疾患において進行期にあるものに生じた」［Exjade処方情報：http://www.pharma.us.novartis.com/product/pi/pdf/exjade.pdf（２００７年５月にアクセス）］。最後に、リガンド１は経口的に活性な三座のＤＦＴ類似体であり、現在患者での第Ｉ／ＩＩ相試験中である。１の前臨床毒性プロファイルは比較的良性であり、すなわち、非遺伝性または非生殖性の毒性であって、高用量においてのみ軽度の腎毒性を有したが、臨床結果の解明が待たれる。
本発明の目的は、哺乳類における鉄過剰とこれに関連する疾患の処置に有用な、新規なデスフェリチオシン類似体を提供することである。
【発明の概要】
【００１３】
上記および他の目的は本発明により実現され、その１つの態様は、比較的非毒性のデスアザデスフェリチオシン類似体であって、式：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてもよく、およびこれらはＨ、１４個までの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル（例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチル）、またはアリールアルキル（ここでアリール部分はヒドロカルビルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、前記アリールアルキル基は１４個までの炭素原子を有する）であってもよく、Ｒ２は任意に１４個までの炭素原子を有するアルコキシであり；
Ｒ３は、［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｘ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｙ−アルキルであり；
ｎは、独立して、１〜８の整数であり；
ｘは、１〜８の整数であり；
ｙは、０〜８の整数であり、および
Ｒ３Ｏは、フェニル環上の４位以外の任意の位置を占めてよい、
で表される、前記デスアザデスフェリチオシン類似体、またはその塩、水和物もしくは溶媒和物に関する。
【００１４】
本発明の他の態様は、対象における、三価金属のキレート化または金属イオン封鎖（sequestration）に応答する病的状態を処置するための方法であって、該対象に、上記の類似体の治療有効量を投与することを含む、前記方法に関する。
本発明のさらなる態様は、三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病的状態を処置するための医薬組成物であって、上記の少なくとも１種の類似体および、これのための薬学的に許容し得る担体の治療有効量を含む、前記組成物に関する。
本発明の他の態様は、包装材料および該包装材料内に含有される医薬剤を含む製品であって、ここで該医薬剤が、三価金属の過剰を患う対象の処置に有効であり、ここで該包装材料が、該医薬剤を三価金属の過剰に関連する症状の緩和のために使用可能であることを示すラベルを含み、またここで、該医薬剤が上記の類似体である、前記製品に関する。
【００１５】
本発明のより重要な特徴について、続く詳細な説明がよりよく理解されるように、また本発明の当分野への寄与がより評価されるように、やや広範囲に概説する。当然ながら本発明の追加の特徴も存在し、これは以下にさらに記載される。実際、前述の一般的な説明および以下の詳細な説明は例示であり、解説的であり、クレームされた本発明のさらなる説明の提供を意図していることが理解されるべきである。
この点に関し、本発明の少なくとも１つの態様を詳細に説明する前に、本発明は、その応用が、以下の記載または図面の説明に述べられた構成の詳細に、および構成成分の配置に限定されないことが理解されるべきである。本発明は他の態様も可能であり、種々の方法において実践および実施可能である。また、本明細書に用いられる表現および用語は説明のためであり、限定とみなされるべきではないことが、理解されるべきである。
【００１６】
したがって、当業者は本開示が基づくところの概念は、本発明のいくつかの目的を実行するための、他の構造、方法、およびシステムの設計のベースとして容易に利用できることを理解する。したがって、重要であるのは、本発明の精神および範囲から逸脱しない限り、均等な構造物も本発明に含まれることである。
添付の図面は本発明のさらなる理解を提供するために含まれており、本明細書に組み込まれてその一部を構成し、本発明のいくつかの態様を説明し、本記載と一緒になって、本発明の主要部を説明する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関を示す図である。
【図２】図２は（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ｉＰｒＥ（１２）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関を示す図である。
【図３】図３はＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｐｏで与えられて処置されたラットの胆汁鉄動態を示すグラフである。
【図４】図４はＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｓｃで与えられて処置されたラットの組織内分布を示すグラフである。
【図５】図５は（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成を示すスキームである。
【図６】図６は（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥおよび（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥの合成を示すスキームである。
【００１８】
図１．（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関；ＮＯＥパーセントは点線の隣に示す。
図２．（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ｉＰｒＥ（１２）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関；ＮＯＥパーセントは点線の隣に示す。
図３．ＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｐｏで与えられて処置されたラットの胆汁鉄動態。鉄クリアランス（ｙ軸）は、体重１ｋｇ当たりの鉄μｇとして記す。
図４．ＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｓｃで与えられて処置されたラットの、血漿、腎臓、肝臓、心臓および膵臓における組織内分布。濃度（ｙ軸）は、μＭ（血漿）または組織１ｇ当たりの化合物ｎｍｏｌとして記す。全時点においてｎ＝３。
図５−スキーム１．（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成。
図６−スキーム１＆２．それぞれ（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ］および［（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ］の合成。
【００１９】
発明の詳細な説明
本発明は、上述のデスアザデスフェリチオシン類似体が、哺乳類における、非常に有効で比較的非毒性の、三価金属、特に鉄に対するキレート剤であるとの発見に基づく。
より具体的には、本発明は、デスアザデスフェリチオシン（ＤＡＤＦＴ）芳香環の種々の位置にポリエーテル基を導入すると、鉄クリアランスおよび、得られた類似体の器官での分布特性を大幅に増強するとの発見に基づく。３種のＤＡＤＦＴポリエーテルを評価する：（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、６］、および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］。げっ歯類および霊長類における鉄除去効率（ＩＣＥ）は、どの位置の異性体を評価するかに非常に感受性が高いことが示され、げっ歯類における器官分布も同様である。前記ポリエーテルは一律に、げっ歯類においてそれぞれの対応する親リガンドより高いＩＣＥを有し、これは、in vivoでのリガンド−血清アルブミン結合試験と整合する。リガンド９は、げっ歯類において最も活発なポリエーテル類似体であり、これはまた霊長類においても非常に有効であり、ヒトにおける高い成功を示唆する。さらに、この類似体はまた、他のキレート剤より、霊長類の尿中の鉄をより多く除去することが示されている。この傾向が患者においても観察されれば、臨床の場での鉄バランス試験の性能はより良くなるであろう。
【００２０】
リガンド１は、現在患者において第Ｉ／ＩＩ相の試験に付されている、経口的に活性な三座ＤＦＴ類似体である。１の予備臨床毒性プロファイルは比較的良性であり、すなわち遺伝毒性または生殖毒性がなく、高用量において軽い腎毒性のみがあるが、臨床結果の解明が待たれている。以前の研究により、デスフェリチオシン類似体のファミリー内で、より親油性のキレート剤がより優れた鉄除去効率を有することが明らかにされ、すなわち、化合物のｌｏｇＰａｐｐ値が大きいほど、鉄除去効率（ＩＣＥ）が高い［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。いくらか気がかりであるが第２の関係も存在する：すべてのリガンドのセットにおいて、より親油性のキレート剤は、常により毒性が高い［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Vinson, J. R. T.; Yao, H.; Bharti, N.; Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro- 2-(2- hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２１】
前の検討では、鉄除去効率を維持しつつ、親油性／毒性関係をバランスさせるリガンドの設計に焦点が当てられた。研究は、４’−メチルエーテルである（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（２−ヒドロキシ−４−（メトキシフェニル）−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ，２］が、げっ歯類および霊長類両方において優れた鉄除去効率を有するとの観察から開始された；しかし、この化合物は承認不能なほど毒性が強かった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy- 4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477］。それにも関わらず、これによって、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）の４’−（ＨＯ）官能性のアルキル化は、鉄除去機能と適合性であることが示された。これらの観察に基づき、２より親油性が低く、より水溶性のリガンドを組み立てた：ポリエーテル（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ，３］［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２２】
１が４’−メトキシル化されて２を供給する場合、げっ歯類モデルにおける経口（ｐｏ）投与後のＩＣＥは１．１±０．８％から６．６±２．８％（ｐ＜０．０２）へと、顕著に増加した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。３，６，９−トリオキサデシル基が１の４’−（ＨＯ）に結合したポリエーテル（３）も優れて機能し、ｐｏ投与の場合、ＩＣＥは５．５±１．９％（ｐ＜０．００３ｖｓ１））であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy- 4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。鉄を負荷した霊長類へのｐｏ投与した１の効率は、１６．８±７．２％であり［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］、一方、４’−（ＣＨ３Ｏ）類似体（２）のｐｏ投与のＩＣＥは、２４．４±１０．８％であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477］。対応するポリエーテル（３）のｐｏ投与は霊長類において優れて機能し、効率は２５．４±７．４％であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2- hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２３】
げっ歯類で行われた前の研究では、ポリエーテル（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）は、対応する（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ類似体（２）または親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）より腎毒性が低いことが明白に実証された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。毒性におけるこの差を理解する試みにおいて、キレート剤の３００μｍｏｌ／ｋｇの単一用量をｓｃ投与したげっ歯類の、肝臓、腎臓、膵臓および心臓における３および１の組織レベルを、暴露後２、４、６および８ｈ後に測定した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。２つの注目すべき観察がある。各時点において、肝臓におけるポリエーテル３のレベルは、親薬剤１のレベルよりはるかに高かった。腎臓において、ポリエーテル濃度は２ｈ時点で親薬剤濃度よりも低く、それより遅い時点においては類似していた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。これは、腎毒性の減少と整合するように見える。
【００２４】
さらに、１および３をラットに対して、２３７μｍｏｌ／ｋｇの用量で１日２回（４７４μｍｏｌ／ｋｇ／日）、７日間ｐｏ投与した実験において［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］、光学顕微鏡のもとで、ポリエーテル（３）で処置したげっ歯類からの腎臓の近位尿細管は、対照動物のそれらと区別できなかった；遠位尿細管は、ところどころ空胞変性を伴ったが、それ以外は正常であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。しかし、１で処置した動物は、近位尿細管において局所的に中程度から重篤な空胞変性、刷子縁の欠如、および細胞内壁への尿細管の突出を示した；遠位尿細管は、中程度から重篤な空胞変性を示した。これらの所見およびポリエーテル３のＩＣＥの増加から、追加のポリエーテル類についてさらなる研究を行うこと、および追加の（より早い）時点での薬物組織濃度の評価を行うこととなった。
【００２５】
デスフェリチオシン、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（３−ヒドロキシ−２−ピリジニル）−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（ＤＦＴ）は、３座の親鉄剤であり［Naegeli, H.- D.; Zahner, H. Metabolites of Microorganisms. Part 193. Ferrithiocin. HeIv. Chim. Acta 1980, 63, 1400-1406］、Ｆｅ（ＩＩＩ）と安定な２：１複合体を形成する；累積形成定数（cumulative formation constant）は４×１０２９Ｍ−１である［Hahn, F. E.; McMurry, T. J.; Hugi, A; Raymond, K. N. Coordination Chemistry of Microbial Iron Transport. 42. Structural and Spectroscopic Characterization of Diastereomeric Cr(Hl) and Co(IU) Complexes of Desferriferrithiocin. J. Am. Chem. Soc. 1990, 112, 1854-1860; Anderegg, G.; Raber, M. Metal Complex Formation of a New Siderophore Desferrithiocin and of Three Related Ligands. J. Chern. Soc. Chern. Cornrnun. 1990, 1194-1196］。これは経口（ｐｏ）投与した場合に、胆管にカニューレ挿入したげっ歯類モデル（ＩＣＥ、５．５％）［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; Dionis, J. B.; Egli-Karmakka, M.; Frei, J.; Huxley-Tencer, A.; Peter, H. H. Evaluation of Desferrithiocin and Its Synthetic Analogues as Orally Effective Iron Chelators. J. Med. Chern. 1991,34,2072-2078］と、鉄を過負荷したフサオマキザル（Cebus apella）霊長類（ＩＣＥ、１６％）［Bergeron, R. J.; Streiff, R. R; Creary, E. A; Daniels, R. D., Jr.; King, W.; Luchetta, G.; Wiegand, J.; Moerker, T.; Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with DFO in a Cebus Monkey Model. Blood 1993, 81, 21662173; Bergeron, R. J.; Streiff, R. R; Wiegand, J.; Vinson, J. R. T.; Luchetta, G.; Evans, K. M.; Peter, H.; Jenny, H. -B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990, 612, 378-393］の両方において、作用が優れていた。
【００２６】
残念なことには、ＤＦＴは非常に腎毒性が強い［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King,W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferrioxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173］。しかし、極めて優れた経口活性のために、経口的に活性で安全なＤＦＴ類似体を同定するための構造活性研究が行われた。初期の目的は、ｐｏ投与での鉄クリアランスと適合的な、最小構造プラットフォーム（minimal structural platform）を規定することであった［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferrioxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81 ,2166-2173]'[Bergeron, R. J., Wiegand, J., Dionis, J. B., Egli-Karmakka, M., Frei, J., Huxley-Tencer, A. and Peter, H. H. Evaluation of Desferrithiocin and Its Synthetic Analogues as Orally Effective Iron Chelators. J. Med. Chem. 1991,34,2072- 2078］。
【００２７】
続いて、一連の構造活性研究が、良好な経口での鉄除去活性と許容し得る毒性プロファイルを有するＤＦＴ類似体を開発することを目的として行われた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., McCosar, B. H., Weimar, W. R., Brittenham, G. M. and Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999,42,2432-2440］。結果は（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）であり、現在臨床試験中である。しかし、動物試験により、この系においてさえ、用量を制限する毒性は腎毒性である可能性が高い［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。我々は次に、ポリエーテルを４’位に結合することにより、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）が腎毒性を大幅に低減することを発見した。近位尿細管損傷の低減は、親リガンド１の２ｈ時点と比べての、腎臓での３のレベルの低下と整合するように見えた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２８】
ポリエーテル断片が果たす役割を、位置的異性体の観点からよりよく理解することにした；設計の戦略は、比較問題に基づく。３つの問題に取り組む：芳香環でのポリエーテルの位置を変化させると、（１）げっ歯類における鉄除去効率、（２）霊長類における鉄除去効率、および（３）げっ歯類での組織内分布にどのように影響を及ぼすか。この情報により、どのようにして、げっ歯類においてさらなる持続的な毒性試験を行えるかを決定する。
【００２９】
プラットフォームである、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（２−ヒドロキシフェニル）−４−メチル−チアゾールカルボン酸（ＤＡＤＦＴ）をこの研究で評価する。それぞれの場合、単一の置換基、ヒドロキシ、メトキシ、または３，６，９−トリオキサデシルオキシを、芳香環の３’（７−９）、４’（１−３）または５’（４−６）位に付加する。それぞれの場合において、鉄クリアランスデータは、げっ歯類および霊長類の両方で、ｌｏｇＰａｐｐ値と共に示す（表１および２）。履歴データも含まれる［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Vinson, J. R. T.; Yao, H.; Bharti, N.; Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro- 2-(2- hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; McCosar, B. H.; Weimar, W. R; Brittenham, G. M.; Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999, 42, 2432- 2440; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Bussenius, J.; Smith, R. E.; Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Weimar, W. R; Park, J.-H.; Eiler-McManis, E.; Bergeron, J.; Brittenham, G. M. Partition- Variant Desferrithiocin Analogues: Organ Targeting and Increased Iron Clearance. J. Med. Chem. 2005,48,821-831］。げっ歯類でのリガンドの器官分布についての議論は、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および３種のトリオキサデシルオキシ化合物３、６、および９に限定する（図４）。非ポリエーテル２、４および５についての器官分布データは、前の刊行物に見出すことができる［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043］。支持する情報が利用可能である：合成化合物についての成分分析データ。
【００３０】
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、６］および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）］の合成を、初めに（Ｓ）−２−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ、４］および（Ｓ）−２−（２，３−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ、７］を、それぞれ、それらのイソプロピルエステル１０およびエチルエステル１１に変換することにより行った（スキーム１）。（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（４）をそのイソプロピルエステル１０に、定量的収率で、ＤＭＦ中の２−ヨードプロパン（１．８当量）を用いたＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．８当量）の存在下でのアルキル化により、変換した。（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴのエチルエステル１１は、７を、ＤＭＦ中のヨードエタン（１．８当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．８当量）を用いてアルキル化することにより、アクセスした。次に化合物１０および１１を、等モル量のトリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルを用いて、ミツノブ条件下［ＴＨＦ中、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１．１９当量）およびトリフェニルホスフィン（１．２３当量）］にて、それぞれ５’−ヒドロキシルおよび３’−ヒドロキシルにおいてアルキル化し、（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ｉＰｒＥ（１２）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ＥＥ（１３）を、それぞれ５２％と２５％の収率で得た。イソプロピルおよびエチルエステルをメタノール中５０％のＮａＯＨで加水分解し、続いて２ＮのＨＣｌで酸性化して、（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６、９７％）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）を６０％収率で得た。
【００３１】
９のポリエーテル鎖がその２’−ヒドロキシルではなく、実際に３’位に結合していることを示すために、プロトン核オーバーハウザー効果（ＮＯＥ）差スペクトルを得て、結果を図１に示す。芳香残基に最も近接するポリエーテルのメチレン（ｇ）のプロトンに割り当てられた、４．２８ｐｐｍでの共鳴の低出力飽和が、３．９４ｐｐｍでの隣接するメチレン（ｅ）のシグナルを６％増強し、一方、７．３０ｐｐｍ（ｉ）での単一の芳香シグナルも、１１％という顕著な増強を示した。これらの観察は、９の構造と整合する。
【００３２】
プロトンＮＯＥ差分光分析法を用いて、１２においてポリエーテル鎖のアルキル化が５’位で起こり、より立体障害された２’−ヒドロキシルにおいてではないことを確認した；これらの結果を図２に示す。ポリエーテル鎖のメチレン（ｈ）に割り当てられた、４．１０ｐｐｍにおけるシグナルの照射は、隣接の３．８４ｐｐｍにおけるメチレン（ｆ）共鳴を６％増強し、６．９４ｐｐｍ（ｊ）および７．０１ｐｐｍ（ｋ）における２つの芳香シグナルは、それぞれ１３％および７％の顕著な増強を示した。これらの増強は、１２の構造は示されたとおりで正確であり、得られた加水分解産物は確かに６であることを示す。
【００３３】
鉄を過負荷していない（鉄非過負荷）げっ歯類におけるキレート剤誘発性の鉄クリアランス。我々は前に、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系、すなわち（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）、（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（２）、および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）において、メトキシリガンド（２；ＩＣＥ６．６±２．８％）およびポリエーテル（３；ＩＣＥ５．５±１．９％）の両方が、親リガンド１よりも効率的な鉄キレート剤であることを示した；それぞれ、ＩＣＥ１．１±０．８％（２に対してｐ＜０．０２、およびに３に対してｐ＜０．００３）（表１）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。鉄除去効率（ＩＣＥ）が、百分率で表された（純鉄排泄）／（キレート剤の総鉄結合能力）として定義されていることを想起せよ。化合物１および２の相対的なＩＣＥ値は、それらのｌｏｇＰａｐｐ値と調和していた：親油性が強いほど、ｌｏｇＰａｐｐ値は大きくなり、キレート剤はより効率的である。これは、ポリエーテル類似体３の場合とは異なる；３は、そのｌｏｇＰａｐｐ値から予想されるよりも遥かに活性であった。しかしＩＣＥの傾向は、胆汁の鉄動態（図３）およびキレート剤の肝臓濃度、例えば３＞１と調和していた（図４）。
【００３４】
（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系（表１）、すなわち（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（４）、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（２−ヒドロキシ−５−メトキシフェニル）−４−メチル−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ、５］、および（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）について、メトキシ類似体５（ＩＣＥ６．３±１．２％）およびポリエーテル６（ＩＣＥ８．０±１．８％）の両方は、親リガンド４（ＩＣＥ１．０±０．９％、それぞれ、５に対してｐ＜０．００１、および６に対してｐ＜０．００５）よりも効率的な鉄キレート剤であった。再度、５に対する４の相対的なＩＣＥは、ｌｏｇＰａｐｐ値および肝濃度と調和していた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。肝臓濃度（図４）は、ポリエーテル６の、４に相対的なＩＣＥの良好な指標であるが［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］、ｌｏｇＰａｐｐ値はそうではない。（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴおよび（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系の両方において、対応するＨＯ−、ＣＨ３Ｏ−およびポリエーテルリガンドは、類似のＩＣＥ値ならびに、尿および胆汁において類似の鉄クリアランスの分布を有することは注目すべきである（表１）。
【００３５】
（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴセットの化合物７〜９のＩＣＥは、４’−（ＨＯ）および５’−（ＨＯ）系と大きく異なる。リガンドは、ファミリーとして、鉄を除去するのにより効率的である（表１）。再度、相対的な鉄除去効率は、３’−（ＨＯ）および３’−（ＣＨ３Ｏ）化合物についてのｌｏｇＰａｐｐ値により推定されるが、３’−ポリエーテル（９）についてのＩＣＥはそうではない。この例において最も関連するのは、３’−ポリエーテル（９）と４’−ポリエーテル（３）の間の根本的な違いである；３’−リガンド（９）はほぼ２００％より効果的である（１０．６±４．４％対５．５±１．９％、ｐ＜０．０５）。９のＩＣＥはまた、５’−ポリエーテル６のそれよりも高いが（それぞれ、１０．６±４．４％対８．０±１．８％）、増加の程度は有意とするより小さい（ｐ＝０．０６）。尿対胆汁での鉄排泄の様式は似ている。
【００３６】
親１および３種のポリエーテル３、６および９の胆汁鉄動態（図３）は、リガンド１の鉄クリアランス（μｇ／ｋｇ）が薬剤投与後３ｈでピークとなり、６８μｇ／ｋｇを超えることはないことを示す。４’−および５’−ポリエーテル（３および６）により誘発される鉄排泄も、３ｈにおいて、ただしより高いレベルにおいてピークとなり、それぞれ１８３および３８８μｇ／ｋｇである（１対３または１対６についてｐ＜０．００１）。３’−ポリエーテル９で処置した動物の胆汁の鉄含量は、６ｈにおいて最大であり、２８７μｇ／ｋｇである。さらに、１、３および６についての胆汁での鉄クリアランスは、１５ｈで基底レベルに戻ったが、３’−ポリエーテル９については、＞３０ｈまでこれよりかなり上に留まっている（データ示されず）。９の鉄排泄におけるピークの遅延および活性の持続時間は、以下で議論される組織内分布研究においても反映されている（図４）。
【００３７】
鉄を過負荷されたフサオマキザル霊長類におけるキレート剤誘発性の鉄クリアランス。全３セットのリガンドについての鉄クリアランスデータを示す（表２）。霊長類における（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系の場合、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（２）についての平均ＩＣＥ値はｌｏｇＰａｐｐ値との相関を示唆し、例えば、より親油性の類似体２のＩＣＥ（２４．４±１０．８％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477］は＞１（１６．８±７．２％）であり［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., McCosar, B. H., Weimar, W. R., Brittenham, G. M. and Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999,42,2432-2440］、しかしその増加は有意ではない。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）は１〜３系の中で最も親油性の低いキレート剤であるが、これも類似体２と同じくらい効率的であり（ＩＣＥ、２５．４±７．４％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］、親１よりわずかにより効果的であるが、ただし、その増加は全く有意ではない（ｐ＝０．０６）。
【００３８】
（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ類似体４〜６の場合、リガンドのＩＣＥの傾向は、ｌｏｇＰａｐｐ値とよく相関する。最も親油性の高いリガンド５のＩＣＥ（１８．９±２．３％）は、最も親油性の低い類似体６（ＩＣＥ８．１±２．８％、ｐ＜０．００１）より２倍以上効率的である；５もまた、キレート剤４より効率的であり、ＩＣＥ１２．６±３．０％（ｐ＜０．００１）である［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ類似体７〜９について、ｌｏｇＰａｐｐ値には明確な差があるが、この３種のリガンドのＩＣＥは全て、互いの誤差範囲内である（表２）。
【００３９】
ポリエーテルリガンドについての比較の最後の注目点は、胆汁対尿中の金属排泄に関する。げっ歯類モデルにおいて、数値は一般に類似しており、ほとんど全ての鉄は胆汁中に排泄される（表１）。これは霊長類においては観察されない；より多量の鉄の断片が尿中に見出される（表２）。最も注目すべきケースは、霊長類における、（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）の５６／４４の糞便／尿中比率および、（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の７２／２８の糞便／尿中比率である。げっ歯類では、これらの数値はそれぞれ９８／２および９５／５である。
【００４０】
霊長類対げっ歯類における鉄クリアランス性能比。性能比（ＰＲ）は平均のＩＣＥ霊長類／ＩＣＥげっ歯類として定義されるが、これは注目に値する（表３）。一見して、リガンドが、鉄過負荷の霊長類において、鉄が非過負荷であるラットにおけるよりも一律により良好に働くことは、驚くことではないように見える（表１および２）。霊長類群の平均ＩＣＥを、げっ歯類群の平均ＩＣＥと比較することができる（表３）。２つの種での標準偏差は１〜５および７〜９について同等ではないが、これは関係なく、なぜならば、平均を含む間隔が相互干渉しないからである。これは、２つの種におけるＩＣＥが実質的に同じである５’−ポリエーテル（６）の場合では異なる。性能比における最大の差は、親リガンド１、４、および７で見られる。しかし、比がセット内でこれほど大きく変化するという事実（例えば、１対２と３、４対５と６、および７対８と９）は、霊長類対げっ歯類でのＩＣＥの差は、サルが鉄過負荷であり、げっ歯類はそうでないとの事実に完全に基づくわけではないことを示唆する。
【００４１】
リガンド−アルブミン結合のＩＣＥへの影響の可能性。親リガンド１、４および７とそれらの類似体との間の、げっ歯類モデルにおけるＩＣＥの差を理解するために、リガンド−アルブミン結合に焦点を当てた一連の実験を行った。ゲンザイムと共に臨床試験中である薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）に焦点を当てた。対応するポリエーテル（３）はげっ歯類において顕著に優れていたことを想起せよ（３および１についてそれぞれＩＣＥ５．５±１．９％対１．１±０．８％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）を、血清アルブミン結合部位から置き換えることに焦点を当てた、ラットにおける一連の比較実験を実施した。
【００４２】
安息香酸は、ヒト血清アルブミンの両方の部位から薬剤を置き換えるリガンドとして、良好に確立されている［Ostergaard, J., Schou, C, Larsen, C. and Heegaard, N. H. Evaluation of capillary electrophoresis-frontal analysis for the study of low molecular weight drug-human serum albumin interactions. Electrophoresis 2002,23,2842-2853］。胆管にカニューレ挿管したげっ歯類を、安息香酸ナトリウムで処置して、SudlowタイプＩおよびＩＩアルブミン結合部位に潜在的に結合する任意のキレート剤を置き換えることの影響を評価した［Ostergaard, J., Schou, C, Larsen, C. and Heegaard, N. H. Evaluation of capillary electrophoresis-frontal analysis for the study of low molecular weight drug-human serum albumin interactions. Electrophoresis 2002,23,2842-2853］。５つの実験を行った（表４）。げっ歯類に以下を与えた：（ｉ）蒸留水に溶解した安息香酸ナトリウム２５０ｍｇ／ｋｇ／用量を、ｓｃで６回、（ｉｉ）（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）をｐｏにて３００μｍｏｌ／ｋｇ、（ｉｉｉ）１をｐｏで３００μｍｏｌ／ｋｇに加えて、安息香酸ナトリウム（２５０ｍｇ／ｋｇ／用量）。安息香酸ナトリウムは、１の投与の０．５ｈ前に与え、その後毎時間、５回の追加用量を与えた、
【００４３】
（ｉｖ）（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）をｐｏにて３００μｍｏｌ／ｋｇ、または（ｖ）３をｐｏにて３００μｍｏｌ／ｋｇの用量に加えて、安息香酸ナトリウム（２５０ｍｇ／ｋｇ／用量）。安息香酸ナトリウムは、ここでも３の投与の０．５ｈ前に与え、その後毎時間、５回の追加用量を与えた。結果（表４）は、安息香酸ナトリウムそれ自体のｓｃ投与は、いかなる鉄のクリアランスも誘発しないことを示す。しかし、安息香酸ナトリウムを上記のように１に加えてげっ歯類に投与すると、ＩＣＥにおける１０．９倍の増加、すなわち１．１±０．８％から１２．０±２．６％（ｐ＜０．００１）への増加がみられる。同じ条件下で、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）のＩＣＥも増加したが、しかしその度合いははるかに小さく、５．５±１．９％から８．８±２．４％（ｐ＜０．０５）であり、１．６倍の増加である。安息香酸ナトリウムのより低い用量は、１のＩＣＥの増加に対してより少ない効果を有していた（データ示さず）。これらのデータは、げっ歯類のＩＣＥにおける、親リガントと対応するポリエーテル類の間の差が、リガンド−アルブミン結合の差に依存するとのアイディアと整合的である。データはまた、霊長類対げっ歯類での性能比の差とも整合し、すなわち、リガンドはげっ歯類のアルブミンに対するより、霊長類のアルブミンに対して一律によりゆるく結合している可能性がある。
【００４４】
げっ歯類におけるキレート剤の組織内分布。２つの組織において、３，６，９−トリオキサデシルオキシ（ポリエーテル）基のＤＡＤＦＴ芳香環周りの移動について―ＩＣＥへの影響および組織内分布への効果について、検討した。これらの評価は、もし存在するとするならば、追加のＤＡＤＦＴポリエーテル類のどれを、げっ歯類における持続的毒性試験に進めるべきかを識別する最初のステップとなる。
本研究は、ポリエーテルをＤＡＤＦＴの芳香環の４’−から３’−または５’位へと移動させることは、得られたリガンドのＩＣＥ（表１および２）および組織内分布（図４）に対して重大な効果を有し得ることを、明白に示す。腎臓において（図４）、０．５ｈ時点で、５’−ポリエーテル（６）は最大濃度を達成し（６４３±９２ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）、続いて４’−ポリエーテル（３；３６８±７４ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量、ｐ＜０．０１、６に対して）および３’−ポリエーテル（９；２８０±２６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量、ｐ＜０．０１、６に対して）であった。興味深いことには、この時点において、４’−ポリエーテル（３）と親（１；３６１±５６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）の濃度はほとんど同じであった（ｐ＞０．０５）。１ｈ時点において、再度、５’−リガンド（６）が最も濃度が高く（４３５±１１１ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）、３’−キレート剤（９）および４’−キレート剤（３）は非常によく似た濃度を達成した（それぞれ２５９±３５および２５２±１０ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）。親薬剤１は最も濃度が低かった（１７９±４ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）。
【００４５】
２ｈ時点において、相対的な腎臓での濃度は大きく異なっている。再度、５’−リガンド（６）が最も濃度が高かった（３２１±２０ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）＞＞９；１４５±２７ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量＞＞３；４１±３ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量（６対９または３について、ｐ＜０．００１）。
【数１】
前の研究で、４’−ポリエーテル（３）が親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）よりはるかに腎毒性が低いことが実証されたことを想起せよ［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。これは、２ｈ時点での相対的組織濃度と整合した：４’−ポリエーテル濃度３は親１より顕著に低かった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。しかし、２ｈより前の時点から得た腎臓での濃度データについては、親（１）に対して相対的に低い４’−ポリエーテル（３）の腎毒性は、単純に腎臓でのキレート剤濃度が低いことによって説明できるとのアイディアと整合しない。
【００４６】
０．５ｈにおいて、３種のポリエーテルリガンドの肝臓濃度（図４）は、腎臓において観察されたのと同じ相対的な順序である：６（４８３±８５ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）＞３（３３９±３５ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）＞９（２４２±３８ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）。１ｈにおいて、全３種のポリエーテル類似体の濃度は、肝臓において類似である
【数２】
。
興味深いことには、１ｈ時点において、３’−ポリエーテル（９）の濃度は２４２±３８ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量から３１８±４６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量へと顕著に増加し（ｐ＜０．０５）、一方６および３の濃度はそれぞれ３６％と６％減少した。２ｈおよび４ｈ時点において、３’−リガンド（９）は肝臓で最も濃度が高く、次に５’−類似体（６）および４’−類似体（３）である。親１の肝臓濃度は、全ての時点においてポリエーテル類より低い（図４）。
【００４７】
心臓において、０．５ｈ時点で（図４）、ポリエーテル類の相対的な濃度（６＞３＞９）は、同じ時点での腎臓および肝臓での濃度と同様の傾向である。しかし、実際のレベルは大幅に低く、＜９０ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量である。心臓での濃度の順序は、１および２ｈ時点でも同じである。４ｈ時点でも、５’−リガンド（６）はまだ最も濃度の高いキレート剤である。親薬剤１は９よりも０．５ｈ時点では高いが、他の全時点において、最も濃度の低いリガンドである（図４）。
膵臓において（図４）、ポリエーテル類の相対的な濃度は全時点で６＞３＞９である。３および９の組織含量は、０．５ｈから１ｈ時点で増加する（図４）。２ｈ時点で、３および６のレベルは類似である
【数３】
。
一方９の濃度は１６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量である。親薬剤（１）の濃度は０．５ｈで３および９より高く、１ｈでは同じである（図４）。２ｈ時点で、１は最も濃度の低いリガンドであり、４ｈでは検出不能である。
【００４８】
キレート剤の血漿濃度データ（図４）は、リガンドが迅速に除去されるとのアイディアと整合する。０．５ｈ時点で、リガンドの血漿濃度［６（３２４±２０μＭ）＞３（１９４±６０μＭ）＞９（６２±２４μＭ）］は、肝臓、腎臓、膵臓および心臓で生じている現象を反映する。１ｈ時点では、順序は同じであるが、６は３９％減少し、３は２８％減少し、そして９は２６％減少した。２ｈ時点で、６は５４％低下し、３は９２％低下し、そして９は６１％低下した。４ｈ時点で、６は８２％低下し、３は９７％低下し、そして９は７９％低下した。リガンド３の血漿濃度の低下は、６または９の消失よりかなり早い。しかし９は、３および６が達成した血漿濃度に達することはない。親薬剤１の濃度は０．５ｈにおいて９より高いのみである；他の全てのリガンドより、他の全時点において、濃度は低い（図４）。キレート剤の肝臓濃度と比較したこの観察は、１および９の効率的な初回通過クリアランスを示唆する。３’−ポリエーテル（９）の良好なＩＣＥおよびその適度な腎臓濃度のために、このリガンドを、前臨床毒性試験に進める。このリガンドについて特に興味深いことは、げっ歯類と霊長類の両方において良好に作用することであり、ヒトにおける成功の高い指標を示唆する。
【００４９】
初期の研究において、ポリエーテル（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）が、対応する（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（２）または親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）よりも、げっ歯類において大幅に腎毒性が低いことが明白に実証された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。ポリエーテル（３）はまた、霊長類において優れた鉄除去効率を有することが示された。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）で処置されたラットの腎臓の組織病理により、親リガンド１に暴露されたげっ歯類から収集した組織で見られるよりも顕著に少ない、近位尿細管における構造的変化が示された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００５０】
４’−ポリエーテル（３）で処置された動物から２ｈ時点で収集した、最初の腎臓組織濃度測定は、組織病理結果と整合するように見えた；腎臓においては、親薬剤よりも少ないポリエーテルが存在し、腎毒性も低かった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。４’−ポリエーテル（３）で観察される、げっ歯類および霊長類の両方におけるＩＣＥおよび毒性の不在により、３，６，９−ポリエーテル鎖をＤＡＤＦＴの芳香環に４’―炭素以外の位置で結合した場合の、ＩＣＥとリガンドの組織内分布に対する影響を検討することとした。２つの系が選択された：（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）および（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）（表１および２）。
【００５１】
２つのリガンドの組み立てにおける鍵となるステップ（スキーム１）には、２，５−ジヒドロキシイソプロピルエステル（１０）または２，３−ジヒドロキシエチルエステル（１１）どちらかの、ミツノブ条件下における、トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルによるアルキル化が関与する。このアルキル化は、次に、エステル加水分解が続く。ミツノブアルキル化は５’または３’に高度に特異的で、おそらく立体的な理由により、２’−（ＨＯ）は関与しない。反応の位置選択性は、ポリエーテル９および１２両方の核オーバーハウザー効果の差スペクトル（図１および２）と整合した。
【００５２】
ｌｏｇＰａｐｐ値は、げっ歯類におけるメトキシル化類似体対それらの対応する親（１対２）、（４対５）および（７対８）、ならびに霊長類における５’−置換リガンド４〜６の場合のＩＣＥの予測因子であったが、親対ポリエーテルについては有用なツールではなかった。げっ歯類での化合物の各セットにおいて、ポリエーテルのＩＣＥは親リガンドのそれよりも顕著に大きかった（１対３、５００％、ｐ＜０．００３；４対６、８００％、ｐ＜０．００５；および７対９、２３０％、ｐ＜０．０５；表１）。これは、ＩＣＥを制御するリガンド−金属アクセスを超える追加のパラメータの存在、例えば、ｃＭＯＡＴなどの種々の有機アニオン輸送を介した金属錯体輸送の効率、金属錯体それ自体のｌｏｇＰａｐｐ値、およびリガンド−アルブミン結合などの可能性を示唆する。
【００５３】
げっ歯類における、親とポリエーテル、例えば（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）と（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）の間のＩＣＥの差は、リガンド−アルブミン結合の差と平行することが示された（表３）。SudlowタイプＩおよびＩＩアルブミン結合部位からのリガンドを置き換えることが知られている化合物である、安息香酸ナトリウムを、１または３と共にげっ歯類に与えた。安息香酸ナトリウムのｓｃ投与は、１のＩＣＥを１０．９倍に増加させた（ｐ＜０．００１）。リガンド３と安息香酸ナトリウムを与えた動物のＩＣＥも増加したが、１．６倍の増加のみであった（ｐ＜０．０５）。これは究極的には、少なくとも部分的に、霊長類対げっ歯類でのリガンドＩＣＥにおける差を説明することができる。キレート剤は霊長類のアルブミンに均一により弱く結合することができる。霊長類において、親のＩＣＥ（１２．６±３．０％）が対応するポリエーテル６（８．１±２．８％、ｐ＜０．０５）のそれよりも大きい４対６の場合を除いて、リガンドＩＣＥの差は大きくはなく、一般に実験誤差の範囲内であった（表２）。
【００５４】
ポリエーテルの位置を変更することの、リガンド−組織濃度への影響は大きい（図４）。肝臓を除く全ての組織濃度での傾向は、一般に（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）＞（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）＞（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）である。肝臓では０．５ｈにおいて、濃度は６＞３＞９＞１であり、１ｈにおいて
【数４】
である。しかし、この時点を越えると、９は最高濃度を達成し、この濃度に留まる。データで最も重要であるのは、２ｈより早い時点での、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）の腎臓リガンド濃度と関連する。前の研究により、４’−ポリエーテル（３）は、親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）よりはるかに腎毒性が低いことが明白に示された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。これは、２ｈ時点での腎臓組織濃度（１＞３）と整合した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。しかし本研究では、１および３は０．５ｈで類似の濃度を有することが見出された；リガンド３は実際、１ｈにおいて１よりわずかに高い。したがって、ポリエーテル３の親１より低い毒性は、単純に腎臓キレート剤濃度によっては説明できない。
【００５５】
最後に、リガンド３、６および９の性能比（ＩＣＥ霊長類／ＩＣＥげっ歯類）（表３）は、全て≦４．６であり、２つの種の間で同程度の鉄クリアランスを示唆する。リガンド６は、霊長類とげっ歯類において実質的に同一のＩＣＥを有するが（ＰＲ＝１．０）、霊長類では３種のポリエーテルのうち最も非効率的であるため（ＩＣＥ８．１±２．８％）、さらには検討しない。一方３’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（８）は霊長類で最も有効なキレート剤であり（１２．４±３．５％）、霊長類で良好に作用し（２２．５±７．１％）、４’−および５’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴリガンド２［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］および５［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ- Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］と類似する毒性プロファイル（腎毒性）を有することが予想され、これ以上検討しない。（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）は霊長類（２４．５±７．６％）およびラット（１０．６±４．４％）の両方で良好に作用し、ＰＲ２．３であり、第３の種であるヒトにおいてより高い成功の指標を示唆する。さらに、サルの尿中に排泄される鉄の比較的大きな部分が、患者の尿中でも見出される場合は、鉄バランス研究の性能が促進されるであろう。このキレート剤は、げっ歯類での前臨床毒性評価に進められる。
【００５６】
例において：フサオマキザルはWorld Wide Primates (Miami, FL)から入手した。雄のSprague-Dawleyラットは、Harlan Sprague-Dawley (Indianapolis, IN)から入手した。Cremophor RH-40は、BASF (Parsippany, NJ)から得た。超高純度の塩は、Johnson Matthey Electronics (Royston, U.K.)から購入した。全ての血液学的および生化学的検査［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferoxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173］はAntech Diagnostics (Tampa, FL)で実施した。原子吸収（ＡＡ）測定は、Perkin-Elmer model 5100 PC (Norwalk, CT)で行った。組織病理学分析は、Florida Vet Path (Bushnell, FL)により行った。
【００５７】
鉄非過負荷ラットの胆管カニューレ挿入については前に記載した。カニューレ挿入については前に記載した。胆汁試料は、雄のSprague-Dawleyラット（４００〜４５０ｇ）から３ｈ間隔で４８ｈまで収集した。尿試料（単数または複数）は、２４ｈ間隔で採取した。試料の収集および取扱いは、前に記載した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferoxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173; Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Vinson, J. R. T., Luchetta, G., Evans, K. M., Peter, H. and Jenny, H. -B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990,612,378-393］。
【００５８】
サル（３．５〜４ｋｇ）は、前の刊行物中に明記されているようにして、静脈内のデキストラン鉄により鉄を過負荷させ、約５００ｍｇの鉄／体重１ｋｇを供給した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Luchetta, G., Creary, E. A. and Peter, H. H. A Comparison of the Iron-Clearing Properties of l,2-Dimethyl-3-hydroxypyrid-4-one, l,2-Diethyl-3-hydroxypyrid-4-one, and Deferoxamine. Blood 1992,79,1882-1890］；血清のトランスフェリン鉄飽和は、７０〜８０％の間に上昇した。少なくとも２０半減期である６０ｄ［Wood, J. K., Milner, P. F. and Pathak, U. N. The Metabolism of Iron-dextran Given as a Total-dose Infusion to Iron Deficient Jamaican Subjects. Br. J. Haematol. 1968,14,119-129］が経過した後に、任意の動物を鉄キレート剤の評価実験に用いた。
【００５９】
糞便および尿試料を２４時間間隔で収集し、前に記載のようにして処理した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferoxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173; Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Vinson, J. R. T., Luchetta, G., Evans, K. M., Peter, H. and Jenny, H. -B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990,612,378-393; Bergeron, R. J., Wiegand, J. and Brittenham, G. M. HBED: A Potential Alternative to Deferoxamine for Iron-Chelating Therapy. Blood 1998,91,1446-1452］。簡潔に述べると、収集は、試験薬剤の投与の４ｄ前に開始し、薬剤投与後さらに５ｄ続けた。鉄濃度は、他の刊行物に示されているように、フレーム原子吸光分析により決定した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Vinson, J. R. T., Luchetta, G., Evans, K. M., Peter, H. and Jenny, H.-B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990,612,378-393; Bergeron, R. J., Wiegand, J., Wollenweber, M., McManis, J. S., Algee, S. E. and Ratliff-Thompson, K. Synthesis and Biological Evaluation of Naphthyldesferrithiocin Iron Chelators. J. Med. Chem. 1996,39,1575-1581］。
【００６０】
鉄除去実験において、ラットには薬剤１〜９の単回の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量を経口（ｐｏ）で与えた。化合物は、（１）水中の溶液（３）、または（２）目的化合物の単ナトリウム塩（１当量のＮａＯＨを蒸留水中の遊離酸の懸濁物に加えて調製（１〜２、４〜９））、として投与した。薬剤は、サルに対してはｐｏで７５μｍｏｌ／ｋｇ（６、９）または１５０μｍｏｌ／ｋｇ（１〜５、７〜８）の用量で与えた。薬剤はラットに対してと同様に調製したが、ただし２および７〜８については、４０％のCremophor RH-40／水に溶解して調製した。
【００６１】
キレート剤の理論的鉄排出は、２：１錯体に基づいて作成した。ラットおよびサルにおける効率は、別に記載のようにして計算した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., McCosar, B. H., Weimar, W. R., Brittenham, G. M. and Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999,42,2432-2440］。データは平均±平均の標準誤差として表した；ｐ値はスチューデント片側ｔ検定により作成し、ここで、分散の不均衡を仮定した；ｐ値＜０．０５を有意とした。
【００６２】
げっ歯類からの組織内分布試料の収集：雄のSprague-Dawleyラット（２５０〜３５０ｇ）に、上記のようにして調製した６および９の単ナトリウム塩を、３００μｍｏｌ／ｋｇ用量で単回のｓｃ注射で与えた。投与後０．５、１、２、および４ｈ（各時点ｎ＝３ラット）、動物をＣＯ２ガスに暴露して麻酔した。血液は、心穿刺によりクエン酸ナトリウムを含有するバキュテイナ（vacutainer）に得た。血液を遠心分離し、血漿を分析のために分離した。肝臓、心臓、腎臓、および膵臓を次に動物から取り出した。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）で処置した動物の組織試料は、前に記載のようにしてＨＰＬＣ解析用に調製した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００６３】
本研究において、（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）および（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）で処置したラットからの組織を、ＨＰＬＣ解析用に、これらを０．５ＮのＨＣｌＯ４中に１：３（ｗ／ｖ）の比率で均質化することにより調製した。次に、すすぎとして、ＣＨ３ＯＨを１：３（ｗ／ｖ）の比率で加え、混合物を−２０℃で３０分間保管した。この均質物を遠心分離した。上清を移動相Ａ（９５％緩衝液［２５ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、ｐＨ３．０］／５％ＣＨ３ＣＮ）で希釈し、撹拌し、および０．２μｍ膜でろ過した。分析的分離を、３１０ｎｍでのＵＶ検出で前に記載のようにしてDiscovery RP Amide C16ＨＰＬＣシステムで行った［Bergeron, R. J., Wiegand, J., Weimar, W. R., McManis, J. S., Smith, R. E. and Abboud, K. A. Iron Chelation Promoted by Desazadesferrithiocin Analogues: An Enantioselective Barrier. Chirality 2003,15,593-599; Bergeron, R. J., Wiegand, J., Ratliff-Thompson, K. and Weimar, W. R. The Origin of the Differences in (R)- and (S)- Desmethyldesferrithiocin: Iron-Clearing Properties. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1998,850,202-216］。
【００６４】
移動相およびクロマトグラフィ条件は以下である：溶媒Ａ、５％ＣＨ３ＣＮ／９５％緩衝液；溶媒Ｂ、６０％ＣＨ３ＣＮ／４０％緩衝液。濃度は、較正曲線にあわせたピーク面積から、重み付けなし最小二乗直線回帰により、Rainin Dynamax HPLC Method Managerソフトウェア（Rainin Instrument Co.）を用いて計算した。この方法は、０．２５μＭの検出限界を有し、再現可能であり、１〜１０００μＭ範囲で線形であった。組織内分布データは平均値で表す；ｐ値はスチューデント片側ｔ検定にて生成し、この検定においては、分散の不均衡を仮定し、ｐ値＜０．０５を有意とした。
【００６５】
化合物４および７は前に公開された方法を用いて合成した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Weimar, W. R., Park, J. -H., Eiler-McManis, E., Bergeron, J. and Brittenham, G. M. Partition-Variant Desferrithiocin Analogues: Organ Targeting and Increased Iron Clearance. J. Med. Chem. 2005,48,821-831］。試薬はAldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI)より購入し、Fisher Optimaグレードの溶媒を日常的に用いた。ＤＭＦは不活性雰囲気下で蒸留し、ＴＨＦはナトリウムおよびベンゾフェノンから蒸留した。反応は窒素雰囲気下で行い、有機抽出物は硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した。SiliCycle, Inc.からのシリカゲル４０−６３を、フラッシュカラムクロマトグラフィに用いた。
【００６６】
逆相カラムクロマトグラフィ用のＣ−１８は、Sigma Chemical Coから入手した。旋光度は、５８９ｎｍ（ナトリウムＤ線）でPerkin-Elmer 341偏光計を用いて行い、ｃはクロロホルム中の１００ｍＬ溶液における化合物のグラム数で表した濃度である。１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚで記録し、化学シフト（δ）は、ＣＤＣｌ３のテトラメチルシラン（示されず）またはＤ２Ｏの３−（トリメチルシリル）プロピオネート−２，２，３，３−ｄ４からのダウンフィールドの１００万分の一として表す。１３Ｃスペクトルは、１００ＭＨｚで実施し、化学シフト（δ）はＣＤＣｌ３（δ７７．１６）の残留溶媒共鳴を参照した１００万分の一として表す。結合定数（Ｊ）はヘルツ単位であり、基準ピークはＥＳＩ−ＦＴＩＣＲ質量スペクトルについて記録する。元素分析はAtlantic Microlabs (Norcross, GA)により行った。ＮＯＥ差スペクトルは５００ＭＨｚで得、試料は脱気せず、回転させず、プローブ温度は２７℃に調節した。１２については、濃度はＣＤＣｌ３中１５ｍｇ／０．６ｍＬであり、９については濃度は５ｍｇ／ｍＬのＤ２Ｏであった。
【００６７】
核オーバーハウサー効果（ＮＯＥ）を検討するための分離スペクトルを、低出力照射オフ共鳴（low-power irradiation off-resonance）と、次にメチレン水素についての共鳴で、３秒の前飽和期間、４５°パルス、および３秒の取得時間により得た。典型的には、１００〜３００回の取得を自由誘導減衰の各対について蓄積し、指数関数拡大（exponential line broadening）およびフーリエ変換により処理した。
ＮＯＥ差スペクトルを、照射オフ共鳴のスペクトルをオン共鳴前飽和によるスペクトルから差し引くことにより、表した。これらの差スペクトルを次に関連シグナルの積分により解析した。２つの水素標識ｇ（図１）およびｈ（図２）についての逆メチレン共鳴を−２００％の積分値に割り当て、次に、種々の他の共鳴の正のシグナル増強についての積分を、それらの親シグナルの増強パーセントとした。結果は、それぞれの差スペクトルの３または４つの複製からの平均の増強として報告する。
【００６８】
例１
２−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸イソプロピル（１０）
２−ヨードプロパン（８．９５ｇ、５２．６５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６．７９ｇ、５２．６５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（９０ｍＬ）中の４（７．４０ｇ、２９．２５ｍｍｏｌ）に続けて加え、溶液をｒｔで７２ｈ撹拌した。hivacでの溶媒除去後、残留物を１：１の０．５Ｍクエン酸／飽和ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ、２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、１％ＮａＨＳＯ３、Ｈ２Ｏ、および飽和ＮａＣｌの５０ｍＬ部分で洗浄し、溶液を蒸発させた。トルエン中２０％ＥｔＯＡｃを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによる精製により、７．９４ｇの１０（９２％）を黄色油として得た：
【表１】
【００６９】
例２
２−（２，３−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸エチル（１１）
ヨードエタン（８．６１ｇ、５５．２０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７．１３ｇ、５５．２０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の７（７．３６ｇ、２９．０６ｍｍｏｌ）に続けて加え、溶液をｒｔで４８ｈ撹拌した。hivacでの溶媒除去後、残留物を１：１の０．５Ｍクエン酸／飽和ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ、２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、１％ＮａＨＳＯ３、Ｈ２Ｏ、および飽和ＮａＣｌの１５０ｍＬ部分で洗浄し、溶媒を蒸発させた。ＤＣＭ中１０％ＥｔＯＡｃを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによる精製により、８．０１ｇの１１（９８％）を黄色油として得た：
【表２】
【００７０】
例３
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸イソプロピル（１２）
トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテル（３．１９ｇ、１９．４０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアゾジカルボキシレート（４．７３ｇ、２３．３９ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＨＦ（１２０ｍＬ）中の１０（５．６２ｇ、１９．０２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（５．９３ｇ、２２．６３ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴冷却しつつ続けて加えた。溶液を室温で５ｈ撹拌し、５℃に１６ｈ維持した。溶媒を回転蒸発により除去し、４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１００ｍＬ）を加えた。溶液を５℃で１２ｈ維持した；形成された固体をろ過した。ろ液を真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィ（５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）で精製して、４．３６ｇの１２（５２％）を黄色油として得た：
【表３】
【００７１】
例４
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（６）
ＣＨ３ＯＨ（３４ｍＬ）中の５０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（３．３４ｍＬ、９４ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（７０ｍＬ）中の１２（２．１４ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）に、氷浴で冷却しつつ加えた。反応混合物を室温で１８ｈ撹拌し、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を希釈ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で処理し、エーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。塩基性水相を氷中で冷却し、２ＮのＨＣｌでｐＨ＝２まで酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄した後、３ＮのＨＣｌに予め１５分間浸漬したガラス容器をこれ以降用いた。溶媒を回転蒸発で除去した後、１．８８ｇの６（９７％）をオレンジ色油として得た：
【表４】
【００７２】
例５
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸エチル（１３）
トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテル（１．７０ｇ、１０．３６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２．５３ｇ、１２．５０ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＨＦ（６０ｍＬ）中の１１（３．０ｇ、１０．１６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（３．１７ｇ、１２．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴冷却しつつ続けて加えた。溶液を室温で８ｈ撹拌し、５℃に４０ｈ維持した。溶媒を回転蒸発により除去し、４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（５０ｍＬ）を加えた。溶液を５℃で１２ｈ維持した；形成された固体をろ過した。ろ液を真空で濃縮し、５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルで溶出するカラムクロマトグラフィにより精製して、１．０８ｇの１３（２５％）をオレンジ色の油として得た。分析試料は、Ｃ−１８逆相カラムで、等容積の５０％水性ＭｅＯＨおよび４０％の水性ＭｅＯＨでそれぞれ溶出して精製した：
【表５】
【００７３】
例６
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（９）
ＣＨ３ＯＨ（１２０ｍＬ）中の５０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（１３．８８ｍＬ、２６６．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（２８０ｍＬ）中の１３（８．８９ｇ、２０．８０ｍｍｏｌ）に、氷浴で冷却しつつ加えた。反応混合物を室温で６ｈ撹拌し、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を希釈ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で処理し、塩基性水相を氷中で冷却し、２ＮのＨＣｌでｐＨ＝２まで酸性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１５０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を飽和ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で洗浄した後、３ＮのＨＣｌに１５分間予め浸漬したガラス容器をこれ以降用いた。溶媒を回転蒸発で除去した後、Ｃ−１８逆相カラムにより５０％水性メタノール溶出して精製し、凍結乾燥して、４．９８ｇの９（６０％）をオレンジ色油として得た：
【表６】
【００７４】
表１．げっ歯類に経口投与された場合のデスフェリチオシン類似体の鉄除去活性、および化合物の分配係数
【表７】
【００７５】
ａ．げっ歯類において［ｎ＝３（６）、４（２、４、５、７、９）、５（３、８）、または８（１）］、用量は３００μｍｏｌ／ｋｇであった。化合物は蒸留水に溶解するか（３）、または、蒸留水中の遊離酸の懸濁液に１当量のＮａＯＨを添加して調製したそれらの単ナトリウム塩として（１、２、４〜９）与えた。各化合物の効率は、対照動物の鉄排泄を、処置した動物の鉄排泄から差し引くことにより計算した。数字は次に、理論的排出で割って、結果をパーセントで表す。胆汁および尿中に排泄された鉄の相対的百分率は、カッコ内に示す。
【００７６】
ｂ．データは、オクタノール層の部分のｌｏｇとして表す（ｌｏｇＰａｐｐ）；測定はＴＲＩＳ緩衝液、ｐＨ７．４中で、「振とうフラスコ」直接法を用いて行った。化合物１および２に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2003, 46, 1470-1477からのものである；化合物３に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである；化合物４および５に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043からのものである；化合物７および８に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2005, 45, 821-831からのものである。
ｃ．データは参考文献Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである。
ｄ．データは参考文献Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043からのものである。
ｅ．ＩＣＥは４８ｈの試料収集時点に基づく。
【００７７】
表２．フサオマキザル霊長類に経口投与された場合のデスフェリチオシン類似体の鉄除去活性、および化合物の分配係数
【表８】
【００７８】
ａ．サルにおいて［ｎ＝４（３〜７）、５（８）、６（１）、または７（２、９）］、薬剤はｐｏで７５μｍｏｌ／ｋｇ（６、９）または１５０μｍｏｌ／ｋｇ（１〜５、７〜８）の用量で与えた。化合物は蒸留水に溶解するか（３）、４０％Cremophorに溶解するか（２、７、８）、または蒸留水中の遊離酸の懸濁液に１当量のＮａＯＨを添加して調製したそれらの単ナトリウム塩として（１、４〜６、９）与えた。各化合物の効率は、薬剤投与前の４日間の鉄排出を平均し、これらの数値を、薬剤投与後の２日間の鉄クリアランスから差し引き、次に、理論的排出で割ることにより、計算した；結果をパーセントで表す。糞便および尿中に排泄された鉄の相対的百分率は、カッコ内に示す。
【００７９】
ｂ．データは、オクタノール層の部分のｌｏｇとして表す（ｌｏｇＰａｐｐ）；測定はＴＲＩＳ緩衝液、ｐＨ７．４中で、「振とうフラスコ」直接法を用いて行った。化合物１および２に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2003, 46, 1470-1477からのものである；化合物３に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである；化合物４および５に対して得た値は、Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ- Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043からのものである；化合物７および８に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2005, 48, 821-831からのものである。
ｃ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 1999, 42, 2432-2440からのものである。
ｄ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2003, 46, 1470-1477からのものである。
ｅ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである。
ｆ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043からのものである。
ｇ．用量は７５μｍｏｌ／ｋｇである。
ｈ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2005, 48, 821-831からのものである。
【００８０】
表３．デスフェリチオシンの鉄除去効率性能比
霊長類対げっ歯類における類似体
【表９】
【００８１】
表４．安息香酸ナトリウムで処置したげっ歯類ａにおけるリガンド−アルブミン結合
【表１０】
【００８２】
ａ．リガンド１は、ｐｏにより、その単ナトリウム塩として、蒸留水中の遊離酸の懸濁液に１当量のＮａＯＨを加えることにより調製して投与した。リガンド３は、蒸留水に溶解し、ｐｏにより投与した。安息香酸ナトリウムは、蒸留水に溶解し、ｓｃにて２５０ｍｇ／ｋｇ／用量で６用量与えた。安息香酸ナトリウムの初回用量は、キレート剤の０．５ｈ前に与えた；追加の用量は、その後の続く５ｈに、毎時間毎に与えた。
ｂ．非安息香酸塩１で処置した動物に対しｐ＜０．００１。
ｃ．非安息香酸塩３で処置した動物に対しｐ＜０．０５。
【００８３】
本発明はまた、上の式で表される化合物の鏡像異性体および鏡像異性体の混合物（例えばラセミ混合物）ならびにそれらの塩（例えば薬学的に許容し得る塩）、溶媒和物および水和物を含む。本発明の化合物は、平面偏光の平面を回転させる能力を有する、光学活性形態で存在することができる。光学活性化合物を記載する場合、接頭辞ＤとＬまたはＲとＳは、分子のそのキラル中心（単数または複数）についての絶対配置を示すのに用いる。接頭辞ｄとｌまたは（＋）と（−）は、化合物による平面偏光の回転の符号を表すのに用い、（−）またはｌは、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄの接頭辞の化合物は、右旋性である。与えられた化学構造について、立体異性体と呼ばれるこれらの化合物は、１または２以上のキラル炭素が互いに重ね合わせ不能な鏡像であることを除いて、同一である。他の異性体の正確な鏡像である特定の立体異性体はまた、鏡像異性体とも呼ぶことができ、かかる異性体の混合物はしばしば鏡像異性体混合物と呼ばれる。鏡像異性体の５０：５０の混合物を、ラセミ混合物と呼ぶ。
【００８４】
本明細書に記載された化合物の多くは、１または２以上のキラル中心を有することができ、したがって異なる鏡像異性形態で存在することができる。必要に応じて、キラル炭素はアスタリスク（＊）で示すことができる。本出願において、チアゾリンまたはチアゾリジン環の４位におけるキラル炭素をアスタリスクで示すことができるが、それはこの炭素の構造が特に興味深いためである。キラル炭素への結合が本発明の式において直線で示される場合、各キラル炭素の（Ｒ）と（Ｓ）構造の両方、およびしたがって、両鏡像異性体およびそれらの混合物が、式に包含されると理解される。当分野で用いられるように、キラル炭素についての絶対構造を特定することが望まれる場合、キラル炭素への結合は、くさび（平面の上の原子への結合）として示すことができ、その他は一連の短い平行線またはくさび（平面の下の原子への結合）として示すことができる。Cahn-Ingold-Prelogシステムを用いて、キラル炭素の（Ｒ）または（Ｓ）構造を割り当てることができる。チアゾリンまたはチアゾリジン環の４位におけるキラル炭素は、好ましくは（Ｓ）構造を有する。
【００８５】
本発明の化合物が１つのキラル中心を有する場合、不斉合成により調製されない化合物は、２つの鏡像異性形態で存在し、本発明はその鏡像異性体のどちらかまたは両方および鏡像異性体の混合物、例えばラセミ混合物と呼ばれる特定の５０：５０混合物を含む。鏡像異性体は、当業者に知られた方法により分解できる：例えば結晶化などによって分離できるジアステレオ異性体塩の形成（CRC Handbook of Optical Resolutions via Diastereomeric Salt Formation by David Kozma (CRC Press, 2001)を参照）；例えば結晶化、ガス液体または液体クロマトグラフィにより分解可能な、ジアステレオ異性誘導体または錯体の形成；１つの鏡像異性体の、鏡像異性体特異的試薬による選択反応、例えば酵素エステル化；または、キラル環境における、例えばキラル支持体上（例えば、結合キラルリガンドを有するシリカ）もしくはキラル溶媒の存在下での、ガス−液体または液体クロマトグラフィ。所望の鏡像異性体を、上述の分離手順の１つにより他の化学的実体へと変換する場合、所望の鏡像異性形態を遊離させるために、さらなるステップが必要とされることが理解されるであろう。
【００８６】
代替的に、特定の鏡像異性体を、光学活性試薬、基質、触媒または溶媒を用いる不斉合成により、または１つの鏡像異性体を他に不斉変換することにより、合成してもよい。
本発明の化合物のキラル炭素において特定の絶対構造を指定することは、化合物の指定された鏡像異性形態が、鏡像体過剰（ｅｅ）であるか、言い換えると、実質的に他の鏡像異性体がないことを意味すると理解される。例えば、化合物の「Ｒ」形態は、化合物の「Ｓ」形態を実質的に有さず、したがって、「Ｓ」形態の鏡像体過剰である。逆に、化合物の「Ｓ」形態は、化合物の「Ｒ」形態を実質的に有さず、したがって、「Ｒ」形態の鏡像体過剰である。
【００８７】
本明細書において、鏡像体過剰とは、特定の鏡像異性体が、鏡像異性体混合物中に５０％より多く存在することである。例えば、混合物が第１の鏡像異性体を８０％、および第２の鏡像異性体を２０％有する場合、第１の鏡像異性体の鏡像体過剰率は６０％である。本発明において、鏡像体過剰率は約２０％以上、特に約４０％以上、より特に約６０％以上、例えば７０％以上、例えば約８０％以上、例えば約９０％以上であることができる。特定の態様において、特定の絶対構造が指定される場合、示された化合物の鏡像体過剰率は少なくとも約９０％である。さらに特定の態様において、化合物の鏡像体過剰率は少なくとも約９５％、例えば少なくとも約９７．５％であり、例えば少なくとも約９９％の鏡像体過剰率である。
【００８８】
本発明の化合物が２または３以上のキラル炭素を有し、ここでＲ４およびＲ５は同一ではない場合、２つより多い光学異性体を有することができ、ジアステレオマー形態で存在可能である。例えば、２つのキラル炭素がある場合、化合物は４個までの光学異性体および２対の鏡像異性体（（Ｓ，Ｓ）／（Ｒ，Ｒ）および（Ｒ，Ｓ）／（Ｓ，Ｒ））を有することができる。鏡像異性体の対（例えば（Ｓ，Ｓ）／（Ｒ，Ｒ））は、互いに立体異性体の鏡像である。鏡像ではない立体異性体（例えば（Ｓ，Ｓ）および（Ｒ，Ｓ））は、ジアステレオマーである。ジアステレオマー対は当業者に知られた方法により分離することができ、例えば、クロマトグラフィまたは結晶化であり、各対のなかの個々の鏡像異性体は、上述のように分離することができる。本発明は、かかる化合物の各ジアステレオマーおよびその混合物を含む。
【００８９】
アルキル基は、分子内の飽和炭化水素であって、その炭素原子の１つからの単一の共有結合で該分子内の他の基に結合しているものである。アルキル基は環式または非環式、分枝または非分枝（直鎖）であることができる。アルキル基は典型的には、１個〜約１４個の炭素原子を有し、例えば１〜約６個の炭素原子、または１〜約４個の炭素原子である。低級アルキル基は１〜４個の炭素原子を有し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを含む。
環式の場合、アルキル基は典型的には約３〜約１０個の炭素原子を含み、例えば、約３〜約８個の炭素原子であり、例えばシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、またはシクロオクチル基である。
【００９０】
アリール基は、炭素環式芳香族基、例えばフェニル、ｐ−トリル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントラシル、および２−アントラシルなどを含む。アリール基はまた、以下などの複素環式芳香族基を含む：Ｎ−イミダゾリル、２−イミダゾリル、２−チエニル、３−チエニル、２−フラニル、３−フラニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、２−ピラニル、３−ピラニル、３−ピラゾリル、４−ピラゾリル、５−ピラゾリル、２−ピラジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリルおよび５−オキサゾリル。
アリール基はまた、融合多環芳香族環系であって、この中で炭素環、脂環、または芳香環または複素アリール環が、１または２以上の他の複素アリールもしくはアリール環に融合しているものを含む。例としては、２−ベンゾチエニル、３−ベンゾチエニル、２−ベンゾフラニル、３−ベンゾフラニル、２−インドリル、３−インドリル、２−キノリニル、３−キノリニル、２−ベンゾチアゾリル、２−ベンズオキサゾリル、２−ベンズイミダゾリル、１−イソキノリニル、３−イソキノリニル、１−イソインドリルおよび３−イソインドリルが挙げられる。
【００９１】
さらに本発明に含まれるのは、本明細書に記載の化合物の、塩および薬学的に許容し得る塩である。十分酸性の官能基、十分塩基性の官能基、またはその両方を有する、本明細書に開示された化合物は、多数の有機または無機塩基、および無機および有機酸類と反応して、塩を形成する。酸性の基は、１または２以上の上記の金属、およびアルカリ金属およびアルカリ土類金属（例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム）と共に、塩を形成することができる。さらに、酸性基はアミンと共に塩を形成することができる。本発明の化合物は、遷移金属塩、ランタニド金属塩、アクチニド金属塩、または主族金属塩として供給することができる。例えば塩は化合物のＧａ（ＩＩＩ）塩であり得る。遷移金属塩、ランタニド金属塩、アクチニド金属塩、または主族金属塩として、本発明の化合物は、金属と錯体を形成する傾向がある。例えば本発明の化合物が三座であり、これと塩を形成する金属が６個の配位部位を有する場合、金属錯体に対する２対１化合物が形成される。化合物の金属に対する比率は、金属のdenticityおよび金属上の配位部位により変化する（各配位部位が、本発明の化合物により充足されるのが好ましいが、ただし配位部位は、水酸化物、ハロゲン化物またはカルボン酸塩などの他のアニオンで充足されることもできる）。
【００９２】
代替的に、化合物は実質的に金属を含まない（例えば鉄非含有）塩でもよい。金属非含有塩は、特にアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩を包含することを意図しない。金属非含有塩は、例えば金属の過剰状態を患っている対象、または毒性金属暴露もしくは金属の限局性の濃度に苦しむ個人であって、そのため望ましくない効果が生じている前記個人に対して、有効に投与される。
【００９３】
塩基性基を有する化合物から酸性付加塩を形成するために一般に用いられる酸は、無機酸類、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸など、および有機酸類、例えばｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニル−スルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸などである。かかる塩の例は、以下を含む：水酸化物、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素、リン酸二水素、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオラート、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１、４−ジオエート（dioate）、ヘキシン−１、６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ガンマ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、マンデル酸塩など。
【００９４】
本明細書に開示された化合物は、それらの水和物、例えば半水和物、一水和物、二水和物、三水和物、四水和物など、および溶媒和物の形態において調製することができる。
三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病態を患う対象を、本発明の化合物または医薬化合物の治療的または予防的有効量で処置することができる。三価金属のキレート化に応答する病態の、１つの具体的な種類は、三価金属過剰状態（例えば、鉄過剰状態、アルミニウム過剰状態、クロム過剰状態）である。三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病態の他の種類は、三価金属の量が上昇した場合であり（例えば、血清または細胞中で）、例えば三価金属の貯蔵容量が不十分であるか、または金属貯蔵システムの異常により金属放出が生じる場合などである。
【００９５】
鉄過剰の状態または疾患は、全体的な鉄過剰または限局性の鉄過剰を特徴とする。全体的な鉄過剰状態は一般に、複数組織における鉄の過剰、または１個の生物を通しての過剰な鉄の存在が関与する。全体的な鉄過剰状態は、例えば食事性の鉄または輸血からの、対象による鉄の過剰な取込み、鉄の過剰な貯蔵および／または保持から生じ得る。全体的な鉄過剰状態の１つは原発性ヘモクロマトーシスであり、これは一般に遺伝病である。第２の全体的な鉄過剰状態は、続発性ヘモクロマトーシスであり、これは一般に複数回（慢性）の輸血から生じる。輸血は、サラセミアまたは鎌状赤血球貧血の対象に頻繁に必要とされる。食事性の鉄過剰の１種は、バンツー鉄沈着症と呼ばれ、これには高い鉄含量の自家醸造ビールの消化が関連する。
【００９６】
限局性の鉄過剰状態においては、過剰な鉄は、１または数種の細胞型または組織または特定器官に限定される。あるいは、過剰な鉄に関連する症状は、分離された器官、例えば心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓または脳などに限定される。限局性の鉄過剰は、神経障害または神経変性疾患、例えばパーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、神経フェリチン症（neuroferritinopathy）、筋萎縮性軸策硬化症および多発性硬化症などを誘発する可能性があると考えられている。金属キレート化または金属イオン封鎖から利益を受ける病態は、しばしば対象の組織における金属沈着と関連する。沈着は、上述のように、全体的または限局的に生じ得る。
【００９７】
酸化ストレスの低下を必要とする対象は、１または２以上の以下の状態を有し得る：還元剤のレベルの低下、活性酸素種のレベルの増加、抗酸化酵素（例えば、Ｃｕ／Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼ、Ｍｎスーパーオキシドジスムターゼ、グルタチオンレダクターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、チオレドキシン、チオレドキシンペルオキシダーゼ、ＤＴ−ジアフォラーゼ）における変異またはそのレベルの低下、金属結合タンパク質（例えば、トランスフェリン、フェリチン、セルロプラスミン、アルブミン、メタロチオネイン）における変異またはそのレベルの低下、スーパーオキシドを産生可能な突然変異酵素または過活動酵素（例えば、一酸化窒素シンターゼ、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼ、ＮＡＤＨオキシダーゼ、アルデヒドオキシダーゼ、ジヒドロオロテートデヒドロゲナーゼ、チトクロームｃオキシダーゼ）、および放射線傷害。還元剤、活性酸素種、およびタンパク質のレベルの増加または低下は、健康なヒトにおいて一般に見出されるかかる物質の量に対して決定される。
【００９８】
酸化ストレスの低下を必要とする対象は、虚血症状を患っている可能性がある。虚血症状は、例えば動脈狭窄または動脈の破損などから、血液の供給に機械的な障害がある場合に起こり得る。狭心症および心筋梗塞を起こし得る心筋虚血は、通常は冠動脈疾患による、心筋への不適当な血液循環から起こる。２４時間以内に回復した脳での虚血症状は、一過性虚血発作と呼ばれる。より長く持続した虚血症状である脳卒中は、不可逆的脳損傷を伴い、症状の種類および重篤度は、血液循環が絶たれた脳組織の位置および程度に依存する。虚血症状を患うリスクのある対象は一般に、アテローム性動脈硬化症、他の血管疾患、血液凝固傾向の増加、または心疾患を患っている。本発明の化合物は、これらの疾患の処置に用いることができる。
【００９９】
酸化ストレスの低下を必要とする対象は、炎症に苦しむものであることができる。炎症は、基本的な病的過程であって、外傷または、物理的、化学的もしくは生物的剤により生じる異常な刺激への応答において、血管および隣接組織に起きる細胞学的および化学的反応の複合体からなる。炎症性疾患は、延長された期間持続する炎症（すなわち慢性炎症）または組織を損傷する炎症を特徴とする。かかる炎症性疾患は、広範囲の組織、例えば気道、関節、腸管、および軟組織などに影響を与える。本発明の化合物は、これらの疾患の処置に用いることができる。
【０１００】
理論に結びついてはいないが、本発明の化合物は、その酸化ストレスを低下する能力を、様々なメカニズムを通して得ていると考えられる。１つのメカニズムにおいて、本化合物は金属に、特に酸化還元活性金属（例えば鉄）に結合し、該金属の全ての配位部位を充足する。金属の全ての配位部位が充足されると、酸化および／または還元剤は、該金属と相互作用して酸化還元サイクルを引き起こす能力が減少すると考えられる。他のメカニズムにおいては、本化合物は特定の酸化状態における金属を安定化させて、酸化還元サイクルに入りにくくする。さらに他のメカニズムにおいては、本化合物それ自体が抗酸化活性を有する（例えば、フリーラジカル捕捉、活性酸素種または窒素種の捕捉）。２００４年３月４日公開の米国出願公開第2004/0044220号、および２００４年７月８日公開の米国出願公開第2004/0132789号、および２００４年３月４日公開のＰＣＴ出願第W02004/017959号、２００３年１２月２５日公開の米国出願公開第2003/0236417号、および米国特許第6,083,966号、第6,559,315号、第6,525,080号、第6,521 ,652号に記載されているように、デスフェリチオシンおよびその誘導体および類似体は、固有の抗酸化活性を有することが知られており、これら出版物の内容は本明細書に参照として組み込まれる。
【０１０１】
ヒトにおける鉄過剰の減少は、癌の増殖の予防または制御を支援し得ることも報告されている［Ozaki, et al, JAMA, February 14, 2007-Vol. 297, No.6, pp 603-610; Kalinowski et al, "The evolution of iron chelators for the treatment of iron overload disease and cancer", Pharmacological Reviews, vol 57,4 pgs 547-83 (2005); Taetle et al, "Combination Iron Depletion Therapy", J. Nat. Cancer Inst., 81 , 1229-1235 (1989); Bergeron et al, "Influence of Iron on in vivo Proliferation and Lethality of L1210 Cells", J. Nutr., 115, 369-374 (1985)］。実際、Ozakiらは、鉄の蓄積は、鉄が触媒するフリーラジカル媒介性の臨界的生体分子への損傷を通して、および、確実な生化学的根拠に基づく細胞機能の改変を通して、疾患リスクに寄与するという仮説を報告している。しかし彼らはまた、鉄と疾患の関係は、不整合な知見のため基本的にまだ解明されていないことも報告している。最後に、Osakiらは、ヒトにおいて正常レベルに低下した鉄と関連する顕著な「全死因死亡疾患」の知見を支持するデータを報告している。
【０１０２】
「対象」は典型的にはヒトであるが、処置の必要な動物であってもよく、例えばコンパニオン・アニマル（例えばイヌ、ネコなど）、家畜（例えばウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギなど）および実験動物（例えばラット、マウス、モルモット、非ヒト霊長類など）であってよい。
本発明の化合物および医薬組成物は、適切な経路により投与することができる。好適な投与経路としては、経口、腹腔内、皮下、筋肉内、経皮、直腸内、舌下、静脈内、口腔または吸入を介するものが挙げられるが、これに限定されない。好ましくは、本発明の化合物および医薬組成物は、経口投与される。
【０１０３】
本発明の医薬組成物は、好ましくは、薬学的に許容し得る担体または希釈剤であって、化合物または混合物を、経口的、非経口的、静脈内、皮内、筋肉内、または皮下的、直腸内、吸入を介して、または口腔投与を介して、または経皮的に投与可能とするのに好適な、前記担体または希釈剤を含有する。
【０１０４】
活性成分は、従来の薬学的に許容し得る担体または希釈剤と混合または調合することができる。当業者は、投与の様式、従来用いられているビヒクルまたは担体、および活性剤についてどれが不活性であるかを、本発明の医薬組成物の調製および投与に利用できることを理解する。かかる方法、ビヒクルおよび担体の例は、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (1990)に記載されており、この文献は本明細書に参照として組み込まれる。
【０１０５】
対象において用いられる本発明の製剤は、剤を、このための１または２以上の許容し得る担体または希釈剤、および任意に他の治療成分と共に含む。担体または希釈剤は、製剤の他の成分と適合的であり、その受容個体に対して有害でないという意味において「許容し得る」ものでなければない。製剤は、単位剤形の形態で便利に提供することができ、薬学分野でよく知られた任意の方法で調製することができる。全ての方法は、剤を、１または２以上の補助成分を構成する担体または希釈剤と関連させるステップを含む。一般に製剤は、剤を担体と均一かつ緊密に関連させ、次に、必要に応じて、生成物をその単位用量に分割することにより、調製する。
【０１０６】
経口投与に好適な形態としては、当分野で認識されている手順により調製される、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、オブラート、チューインガムなどが挙げられる。かかる治療的に有用な組成物または調製物の活性化合物の量は、好適な投与量が得られるような量である。
【０１０７】
シロップ製剤は、一般に、化合物または塩の、例えばエタノール、グリセリンまたは水などの液体担体中の懸濁液または溶液および、香味料または着色剤からなる。組成物が錠剤形態の場合、固体製剤の調製に日常的に用いられている１または２以上の薬学的担体を用いることができる。かかる担体の例としては、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、ラクトースおよびスクロースが挙げられる。組成物がカプセル形態の場合、日常的に用いられている封入成形を用いることが一般に好適であり、例えば前述の担体を硬質ゼラチンカプセル殻内に用いる。組成物が軟質ゼラチン殻カプセルの形態の場合、分散物または懸濁液に日常的に用いる薬学的担体、例えば水性ゴム、セルロース、ケイ酸塩、または油が考えられ、これらを軟質ゼラチンカプセル殻に組み込む。
【０１０８】
経口投与に好適な製剤は従来、剤の無菌の水性調製物であって、好ましくは受容個体の血液と等張性であるものを含む。好適な担体溶液は、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、水、乳酸化リンガー溶液またはデキストロース（水中５％）を含む。かかる製剤は、剤を水と混合して溶液または懸濁液を生成し、これを無菌の容器に充填し、細菌汚染に抗して封入することにより、便利に調製することができる。好ましくは、無菌材料を、無菌の製造条件下で用いて、最終的な殺菌の必要性を除外する。
【０１０９】
かかる製剤は、任意に、１または２以上の追加成分であって、ヒドロキシ安息香酸メチル、クロロクレゾール、メタクレゾール、フェノールおよび塩化ベンズアルコニウムなどの保存剤を含む前記成分を含むことができる。かかる物質は、製剤が複数用量の容器内で供給される場合に特に有用である。緩衝液も、製剤に好適なｐＨ値を与えるために含むことができる。
【０１１０】
好適な緩衝物質は、リン酸ナトリウムおよび酢酸ナトリウムを含む。塩化ナトリウムまたはグリセリンは、製剤を血液と等張性にするために用いることができる。
必要に応じて、製剤を窒素などの不活性雰囲気下で容器に充填することができ、例えば封入アンプル内などに、単位用量または複数用量形態で便利に提供することができる。
【０１１１】
当業者は、本発明の方法に従って対象に投与される、本発明の組成物の種々の成分の量は、上述の要因に依存することを認識する。
典型的な座剤製剤は、この方法で投与された場合に活性である化合物またはその薬学的に許容し得る塩と、結合剤および／または湿潤剤、例えば高分子グリセロール、ゼラチン、カカオバター、または他の低溶解性植物ろうもしくは脂質を含む。
【０１１２】
典型的な経皮製剤は、従来の水性または非水性のビヒクル、例えばクリーム、軟膏、ローション、もしくはペーストなどを含むか、または薬用のプラスチック、パッチもしくは膜の形態である。
吸入用の典型的な組成物は、ジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンなどの従来の噴霧剤を用いたエアロゾルの形態で投与可能な、溶液、懸濁液または乳濁液の形態である。
【０１１３】
本発明の化合物または医薬組成物の治療有効量は、各々の場合、いくつかの要因に、例えば処置すべき対象の健康、年齢、性別、寸法および状態、投与の意図される様式、および対象の意図された用量形態を取り入れる能力などに特に依存する。活性剤の治療有効量とは、処置される状態に対する所望の影響を有するのに十分な量である。金属イオンのキレート化または封鎖により処置可能な状態を有する対象を処置する方法において、活性剤の治療有効量は、例えば、対象での金属の負荷量を低下させるのに、金属イオンに関連する症状を低減するのに、または金属の存在と関連する症状の発症および／または重篤度を予防、阻害または遅延させるのに十分な量である。その処置が必要な対象において酸化ストレスを低下させる方法において、活性剤の治療有効量は、例えば、酸化ストレスに関連する症状を低減するのに、または酸化ストレスに関連する症状の発症および／または重篤度を予防、阻害または遅延させるのに十分な量である。対象に投与する、本発明の化合物の典型的な１日の総用量は（体重７０ｋｇの対象を仮定すると）、約１０ｍｇ〜１．０ｇである。
【０１１４】
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］、および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］両方の合成の、代替的アプローチを以下に記載する。
【０１１５】
別の場所に記載された方法において［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］の合成が実施されている；（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）を、そのイソプロピルエステルに９９％の収率で変換した。４’−ヒドロキシルの、トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルを用いたミツノブ条件下（ＴＨＦ中のジイソプロピルアゾジカルボキシレートおよびトリフェニルホスフィン）でのアルキル化、ろ過、およびクロマトグラフィにより、３のイソプロピルエステルを、７６％の収率で得た。エステルの鹸化により、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）を９５％の収率で得て、全体で７１％の収率であった。
【０１１６】
代替的に、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１４）のエチルエステルの選択的アルキル化を、アセトン中のトリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルのトシレート（１５、１．０当量）および炭酸カリウム（２．０当量）を加熱することにより実現して、マスクしたキレート剤１６を８２％収率で得た（図６；スキーム１）。前述のようなエチルエステル１６の切断により、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）を９５％の収率で得た。リガンド３への新しい経路は、７１％より高い、全体での収率７８％を与えた；さらに、スキーム１におけるポリエーテル鎖の結合は、安価な試薬を用いており、酸化トリフェニルホスフィンと１，２−ヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピルの形成がなく、精製を単純化する。
【０１１７】
上記の合成において、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］の合成を実施する：適切なニトリルによるアミノ酸環化から８８％の収率で作られた、（Ｓ）−２−（２，３−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸を、そのエチルエステルに９８％の収率で変換した。しかし、キレート剤９への残りの２つのステップは、１５％のみの収率であった。ポリエーテル鎖をミツノブ条件下で３’−ヒドロキシルに付加し、９のエチルエステルを２５％の収率で生成した。逆相カラム上での精製後、エステルの加水分解により９を６０％の収率で得て、全体で１３％の収率を得た。
【０１１８】
より効率的な（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成を、図６；スキーム２に示す。より妨害されていない２，３−ジヒドロキシベンゾニトリル（１７）のフェノール基［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Weimar, W. R., Park, J. -H., Eiler-McManis, E., Bergeron, J. and Brittenham, G. M. Partition- Variant Desferrithiocin Analogues: Organ Targeting and Increased Iron Clearance. J. Med. Chem. 2005,48,821-831］を、ＤＭＳＯ中のトシレート１５（１．３当量）および水素化ナトリウム（２．１当量）を用いて室温でアルキル化し、１８を７０％のクロマトグラフィの収率で生成した。したがって、トリエーテル鎖は、ミツノブ結合に比べてほぼ３倍の収率で結合し、一方やっかいな副産物は避けることができた。ｐＨ６にて緩衝された水性ＣＨ３ＯＨ中の（Ｓ）−α−メチルシステイン（１９）によるニトリル１８の環化縮合により、（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成を９０％の収率で完了した。異常なアミノ酸１９が、スキーム２の最終ステップまで導入されないため、カルボキシル基は保護を必要としない。９の全体の収率は６３％であり、前の経路からよりはるかに高い。
【０１１９】
例７
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（３）
ＣＨ３ＯＨ（９０ｍＬ）中の５０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（１０．４１ｍＬ、１９９．５ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（２００ｍＬ）中の１６（６．５４ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）に、氷浴冷却しつつ加えた。反応混合物を室温で１６ｈ撹拌し、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を希釈ＮａＣｌ（１５０ｍＬ）で処理し、エーテル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。塩基性水相を氷で冷却し、２ＮのＨＣｌで
【数５】
に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を飽和ＮａＣｌ（２００ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。高真空下での乾燥により、５．６７ｇの３をオレンジ色の油として得た（９２％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］：
【表１１】
【０１２０】
例８
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（９）
化合物１８（７．６３ｇ、２７．１ｍｍｏｌ）、脱気した０．１Ｍ、ｐＨ５．９５のリン酸緩衝液（２００ｍＬ）、１９（６．９８ｇ、４０．７ｍｍｏｌ）、およびＮａＨＣＯ３（４．３３ｇ、５１．５ｍｍｏｌ、部分づつ）を、順番に、蒸留した脱気ＣＨ３ＯＨ（２００ｍＬ）に加えた。ｐＨ６．２〜６．６の反応混合物を、７０℃で７２ｈ加熱した。室温に冷却後、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を８％ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）に溶解し、ＣＨＣｌ３（３×１００ｍＬ）で抽出した。水性部分を氷水浴中で冷却し、５ＮのＨＣｌで
【数６】
に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を飽和ＮａＣｌで洗浄し、真空で濃縮した。高真空下での乾燥により、９．７４ｇの９（９０％）をオレンジ色の油として得た：
【表１２】
【０１２１】
例９
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸エチル（１６）
フレーム（flame）活性化Ｋ２ＣＯ３（５．０５ｇ、３６．６ｍｍｏｌ）と続いてアセトン（５０ｍＬ）中の１５（１１．１１ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）を、アセトン（３００ｍＬ）中の１４（９．３５ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物を還流で３日間加熱した。追加のＫ２ＣＯ３（４．５９ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）およびアセトン（５ｍＬ）中の１５（２．１２ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を還流で１日加熱した。室温に冷却後、固体をろ過し、溶媒を回転蒸発で除去した。残留物を１：１の０．５Ｍクエン酸／飽和ＮａＣｌ（３２０ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を蒸留Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２００ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルで抽出するフラッシュカラムクロマトグラフィによる精製により、１２．０ｇの１６（８４％）を油として得た：
【表１３】
【０１２２】
例１０
２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）ベンゾニトリル（１８）
化合物１７（５．３ｇ、３９．２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＳＯ（６０ｍＬ）中の６０％ＮａＨ（３．１３ｇ、７８．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、オーブン乾燥ガラス容器を用いて加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した後、ＤＭＳＯ（２５ｍＬ）中の１５（１２．４９ｇ、３９．２２ｍｍｏｌ）を導入した。室温で２４ｈ攪拌後、反応混合物を撹拌しつつ冷水（１００ｍＬ）に注ぎ、ＣＨＣｌ３（３×１００ｍＬ）で抽出した。水相を６ＮのＨＣｌで
【数７】
に酸性化し、ＣＨＣｌ３（５×６０ｍＬ）で抽出した。後者のＣＨＣｌ３抽出物を真空で濃縮した。１０％ＣＨ３ＯＨ／ＣＨＣｌ３で溶出する重力によるカラムクロマトグラフィを用いた精製により、７．８４ｇの１８（７０％）を油として得た：
【表１４】
【０１２３】
本明細書における発明の記載は、３，６，９−トリオキサデシルオキシ基をデスアザデスフェリチオシン（ＤＡＤＦＴ）芳香環の種々の位置に導入することの、鉄クリアランスへの影響を実証し、および器官分布について記載する。３種のＤＡＤＦＴポリエーテルを評価する：（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、６］、および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］。げっ歯類および霊長類における鉄除去効率（ＩＣＥ）は、どの位置の異性体を評価するかに非常に感受性が高いことが示され、げっ歯類における器官分布も同様である。前記ポリエーテルは一律に、げっ歯類においてそれぞれの対応する親リガンドより高いＩＣＥを有し、これは、in vivoでのリガンド−血清アルブミン結合試験と整合する。リガンド９は、げっ歯類において最も活発なポリエーテル類似体であり、これはまた霊長類においても非常に有効であり、ヒトにおける高い成功を示唆する。さらに、この類似体はまた、他のキレート剤より、霊長類の尿中の鉄をより多く排出することが示されている。
【０１２４】
本発明のいくつかの態様をここに説明したが、当業者には、前述は単に説明であり、例示としてのみ提供されており、限定的ではないことが明らかである。多数の改変および他の態様が当業者の範囲内であり、本発明の範囲およびその任意の均等物に包含されることが意図される。本発明に対する変更は、当業者に容易に明らかであり、本発明はそれらの変更も含むことが意図される。さらに、多数の改変が当業者には容易に可能であるため、本発明を例示され説明された正確な構成および操作に限定することは意図されず、したがって全ての好適な改変および均等物は、本発明の範囲内に包含されるものである。
【技術分野】
【０００１】
政府支援
本発明は、その全体または一部について、米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）の国立糖尿病・消化器病・腎臓病研究所（ＮＩＤＤＫ）からの助成金No. DK49108の支援を受けた。政府は本発明について一定の権利を有する。
【０００２】
関連出願
本出願は、２００７年３月１５日に出願された仮出願第60/966,539号の優先権を主張する。該仮出願の全内容および開示、ならびに本明細書に引用される各特許、特許出願、参考文献、テキスト、原稿、記事または他の資料の開示は、本明細書に参照として組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
ヒトは、毎日約１ｍｇの金属を吸収および排泄する、高度に効率的な鉄分管理系を進化させてきた；過剰な鉄分を排出するメカニズムは存在しない［Brittenham, G. M. Disorders of Iron Metabolism: Iron Deficiency and Overload. In Hematology: Basic Principles and Practice; 3rd ed.; Hoffman, R., Benz, E. J., Shattil, S. J., Furie, B., Cohen, H. J. et al., Eds.; Churchill Livingstone: New York, 2000; pp 397-428］。
【０００４】
輸血の赤血球由来であるか［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739-761; Vichinsky, E. P. Current Issues with Blood Transfusions in Sickle Cell Disease. Semin. Hematol. 2001,38,14-22; Kersten, M. J., Lange, R., Smeets, M. E., Vreugdenhil, G., Roozendaal, K. J., Lameijer, W. and Goudsmit, R. Long-Term Treatment of Transfusional Iron Overload with the Oral Iron Chelator Deferiprone (Ll): A Dutch Multicenter Trial. Ann. Hematol. 1996,73,247-252］、または食事性の鉄分吸収の増加によるか［Conrad, M. E.; Umbreit, J. N.; Moore, E. G. Iron Absorption and Transport. Am. J. Med. Sci. 1999,318,213-229; Lieu, P. T.; Heiskala, M.; Peterson, P. A; Yang, Y. The Roles of Iron in Health and Disease, MoI. Aspects Med. 2001,22, 1- 87］に関わらず、効果的な処置なくしては、体内の鉄分は次第に増加して、肝臓、心臓、膵臓および他の部分に沈着する。鉄蓄積は最終的には次のものをもたらす：
【０００５】
（ｉ）肝硬変に進行し得る肝疾患［Angelucci, E.; Brittenham, G. M.; McLaren, C. E.; Ripalti, M.; Baronciani, D.; Giardini, C; Galimberti, M.; Polchi, P.; Lucarelli, G. Hepatic Iron Concentration and Total Body Iron Stores in Thalassemia Major. N. Engl. J. Med. 2000,343,327-331; Bonkovsky, H. L.; Lambrecht, R. W. Iron-Induced Liver Injury. Clin. Liver Dis. 2000, 4, 409429, vi-vii; Pietrangelo, A Mechanism of Iron Toxicity. Adv. Exp. Med. Biol. 2002, 509, 19-43］、（ｉｉ）鉄誘発性の膵β細胞分泌の減少と、肝臓のインスリン抵抗性の増加の両方に関連する、糖尿病［Cario, H.; HoIl, R. W.; Debatin, K. M.; Kohne, E. Insulin Sensitivity and p-Cell Secretion in Thalassaemia Major with Secondary Haemochromatosis: Assessment by Oral Glucose Tolerance Test. Eur. J. Pediatr. 2003, 162, 139-146; Wojcik, J. P.; Speechley, M. R.; Kertesz, A E.; Chakrabarti, S.; Adams, P. C. Natural History of C282Y Homozygotes for Hemochromatosis. Can. J. Gastroenterol. 2002, 16,297-302］、および（ｉｉｉ）サラセミアメジャーおよび輸血による鉄過剰の関連形態において現在でも第１の死因である、心疾患［Brittenham, G. M. Disorders of Iron Metabolism: Iron Deficiency and Overload. In Hematology: Basic Principles and Practice; 3rd ed.; Hoffman, R., Benz, E. J., Shattil, S. J., Furie, B., Cohen, H .J. et al., Eds.; Churchill Livingstone: New York, 2000; pp 397-428; Brittenham, G. M.; Griffith, P. M.; Nienhuis, A W.; McLaren, C. E.; Young, N. S.; Tucker, E. E.; Allen, C. J.; Farrell, D. E.; Harris, J. W. Efficacy of Deferoxamine in Preventing Complications of Iron Overload in Patients with Thalassemia Major. N. Engl. J. Med. 1994,331,567-573; Zurlo, M. G.; De Stefano, P.; Borgna-Pignatti, C; Di Palma, A.; Piga, A.; Melevendi, C; Di Gregorio, F.; Burattini, M. G.; Terzoli, S. Survival and Causes of Death in Thalassaemia Major. Lancet 1989,2,27-30］。
【０００６】
鉄は地殻の５％を構成しているが、生体はこの重要な微量栄養素にアクセスし、管理するのに多大の困難を有している。Ｆｅ（ＩＩＩ）水酸化物の低溶解性（Ｋｓｐ＝１×１０−３９）［Raymond, K. N.; Carrano, C. J. Coordination Chemistry and Microbial Iron Transport. Ace. Chem. Res. 1979,12, 183-190］は、これがこの金属の生物圏における主たる形態であるため、自然界に巧妙な鉄の貯蔵および輸送システムの発達をもたらした。微生物は、低分子量の、実質的に第二鉄特異的リガンドであるシデロフォアを利用する［Byers, B. R; Arceneaux, J. E. Microbial Iron Transport: Iron Acquisition by Pathogenic Microorganisms. Met. Ions Biol. Syst. 1998,35,37-66; Kalinowski, D. S.; Richardson, D. R. The Evolution of Iron Chelators for the Treatment of Iron Overload Disease and Cancer. Pharmacol Rev. 2005, 57, 547-583］；高等な真核生物は、鉄を輸送および貯蔵するためにタンパク質を用いる傾向がある（例えば、それぞれトランスフェリンおよびフェリチン）［Bergeron, R. J. Iron: A Controlling Nutrient in Proliferative Processes. Trends Biochem. Sci. 1986, 1 1 , 133-136; Theil, E. c; Huynh, B. H. Ferritin Mineralization: Ferroxidation and Beyond. J. Inorg. Biochem. 1997, 67, 30; Ponka, P.; Beaumont, c; Richardson, D. R. Function and Regulation of Transferrin and Ferritin, Semin. Hematol. 1998, 35, 35-54］。ヒトにおいては、循環系における金属の不均一なプールである、非トランスフェリン結合血漿鉄、非管理の鉄分が、鉄媒介性の臓器障害の主要な源となっているようである。
【０００７】
過剰な鉄分に関連する毒性は、全身性または限局性の問題のどちらであっても、反応性酸素種、例えば内因性の過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）とのその相互作用から生じる［Graf, E.; Mahoney, J. R; Bryant, R. G.; Eaton, J. W. Iron-Catalyzed Hydroxyl Radical Formation. Stringent Requirement for Free Iron Coordination Site. J. Biol. Chem. 1984, 259, 36203624; Halliwell, B. Free Radicals and Antioxidants: A Personal View. Nutr. Rev. 1994,52,253-265; Halliwell, B. Iron, Oxidative Damage, and Chelating Agents. In The Development of Iron Chelators for Clinical Use; Bergeron, R. J., Brittenham, G. M., Eds.; CRC: Boca Raton, 1994; pp 3356; Koppenol, W. Kinetics and Mechanism of the Fenton Reaction: Implications for Iron Toxicity. In Iron Chelators: New Development Strategies; Badman, D. G., Bergeron, R. J., Brittenham, G. M., Eds.; Saratoga: Ponte Vedra Beach, FL, 2000; pp 3-10］。Ｆｅ（ＩＩ）の存在下において、Ｈ２Ｏ２は非常に高反応性の種であるヒドロキシル・ラジカル（ＨＯ・）とＨＯ−に還元され、これは、フェントン反応として知られているプロセスである。遊離されたＦｅ（ＩＩＩ）は、種々の生物学的還元剤（例えばアスコルビン酸塩）を介してＦｅ（ＩＩ）に再度還元され得るが、これは問題のあるサイクルである。
【０００８】
ヒドロキシル・ラジカルは種々の細胞成分と非常に迅速に反応して、ＤＮＡおよび膜を損傷する遊離ラジカルおよびラジカル媒介性の連鎖過程を開始することができ、発癌物質を産生する［Halliwell, B. Free Radicals and Antioxidants: A Personal View. Nutr. Rev. 1994,52,253-265; Babbs, C. F. Oxygen Radicals in Ulcerative Colitis. Free Radic. Biol. Med. 1992,13,169-181 ; Hazen, S. L.; d'Avignon, A; Anderson, M. M.; Hsu, F. F.; Heinecke, J. W. Human Neutrophils Employ the Myeloperoxidase- Hydrogen Peroxide-Chloride System to Oxidize a- Amino Acids to a Family of Reactive Aldehydes. Mechanistic Studies Identifying Labile Intermediates along the Reaction Pathway. J. Biol. Chem. 1998,273,4997-5005］。この問題への解決は、管理されていない過剰な鉄を除去することである［Bergeron, R. J.; McManis, J. S.; Weimar, W. R; Wiegand, J.; Eiler-McManis, E. Iron Chelators and Therapeutic Uses. In Burger's Medicinal Chemistry; 6th ed.; Abraham, D. A, Ed.; Wiley: New York, 2003; pp 479- 561］。
【０００９】
サラセミアメジャーおよび輸血依存性の難治性貧血患者の大部分においては、貧血の重篤度のため、鉄の毒性蓄積物を除去する手段として瀉血治療を用いることができない。鉄を封鎖しこれを身体から排出可能とするキレート剤による処置は、ただ１つの利用可能な治療アプローチである。現在使用されているか、または臨床試験に付されている鉄キレート剤は［Brittenham, G. M. Iron Chelators and Iron Toxicity. Alcohol 2003, 30, 151-158］、以下を含む：デスフェリオキサミンＢメシレート（ＤＦＯａ）、１，２−ジメチル−３−ヒドロキシピリジン−４−オン（デフェリプロン、Ｌ１）、４−［３，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）−１，２，４−トリアゾール−１−イル］安息香酸（デフェラシロックス、ＩＣＬ６７０Ａ）、およびデスフェリチオシン（ＤＦＴ）類似体、（Ｓ）−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［デフェリトリン、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ、１；表１］。Streptomyces pilosusにより産生される六配位ヒドロキサム酸鉄キレート剤である、デスフェリオキサミンＢ（ＤＦＯ）の皮下（ｓｃ）注入［Bickel, H., Hall, G. E., Keller-Schierlein, W., Prelog, V., Vischer, E. and Wettstein, A. Metabolic Products of Actinomycetes. XXVII. Constitutional Formula of Ferrioxamine B. HeIv. Chim. Acta 1960,43,2129-2138］は、現在でも輸血による鉄過剰に対する信頼できる処置とみなされている［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739-761 ; Giardina, P. J. and Grady, R. W. Chelation Therapy in [beta]-Thalassemia: An Optimistic Update. Semin. Hematol. 2001,38,360- 366］。
【００１０】
ＤＦＯは経口的に活性ではなく、ｓｃで投与された場合に、身体で非常に短い半減期を有し、したがって長期にわたり連続的注入によって与える必要がある［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739-761 ; Pippard, M. J. Desferrioxamine-Induced Iron Excretion in Humans. Bailliere's Clin. Haematol. 1989,2,323-343］。これらの理由から、患者のコンプライアンスが大きな問題となる［Olivieri, N. F. and Brittenham, G. M. Iron-chelating Therapy and the Treatment of Thalassemia. Blood 1997,89,739- 761; Giardina, P. J. and Grady, R. W. Chelation Therapy in [beta]-Thalassemia: An Optimistic Update. Semin. Hematol. 2001,38,360-366］。経口的に活性な二座のキレート剤であるデフェリプロンは、ヨーロッパおよび他の国々において、ＤＦＯにつぐ第２選択の治療法として認可されている［Hoffbrand, A V.; Al-Refaie, F.; Davis, B.; Siritanakatkul, N.; Jackson, B. F. A; Cochrane, J.; Prescott, E.; Wonke, B. Long-term Trial of Deferiprone in 51 Transfusion-Dependent Iron Overloaded Patients. Blood 1998, 91, 295-300; Olivieri, N. F. Long-term Therapy with Deferiprone. Acta Haematoi. 1996,95,37-48; Olivieri, N. F.; Brittenham, G. M.; McLaren, C. E.; Templeton, D. M.; Cameron, R. G.; McClelland, R. A; Burt, A D.; Fleming, K. A Long-Term Safety and Effectiveness of Iron-Chelation Therapy with Deferiprone for Thalassemia Major. N. Engi. J. Med. 1998,339,417-423; Richardson, D. R. The Controversial Role of Deferiprone in the Treatment of Thalassemia. J. Lab. Clin. Med. 2001,137,324-329］。
【００１１】
残念なことには、これは経口的に活性ではあるが、ｓｃによるＤＦＯより、鉄分除去の効率が低い。一方経口的に活性な三座のキレート剤であるデフェラシロックスは、現在ＦＤＡにより承認され、これはＤＦＯに対して劣等ではない。また、デフェラシロックスは明らかにいくらか狭い治療窓を有するが、その理由は、前臨床毒性試験中に動物において指摘された、その潜在的腎毒性のためである［Nisbet-Brown, E.; Olivieri, N. F.; Giardina, P. J.; Grady, R. W.; Neufeld, E. J.; Sechaud, R; Krebs-Brown, A J.; Anderson, J. R; Alberti, D.; Sizer, K. c; Nathan, D. G. Effectiveness and Safety of ICL670 in Iron-Loaded Patients with Thalassaemia: a Randomised, Double-Blind, Placebo-Controlled, Dose-Escalation Trial. Lancet 2003,361,1597-1602; Galanello, R; Piga, A; Alberti, D.; Rouan, M.-C; Bigler, H.; Sechaud, R. Safety, Tolerability, and Pharmacokinetics of ICL670, a New Orally Active lron-Chelating Agent in Patients with Transfusion-Dependent Iron Overload Due to Thalassemia. J. Clin. Pharmacol. 2003,43,565-572; Cappellini, M. D. Iron-chelating therapy with the new oral agent ICL670 (Exjade). Best Pract Res Clin Haematol 2005, 18, 289-298］。
【００１２】
さらに、Novartisは最近（２００７年４月）、デフェラシロックスについての処方情報を訂正した：「急性腎不全、場合によっては致命的な結果が、Exjade（登録商標）（デフェラシロックス）の市場前での使用により報告された。ほとんどの死亡例は、複数の共存症の患者であって、その血液疾患において進行期にあるものに生じた」［Exjade処方情報：http://www.pharma.us.novartis.com/product/pi/pdf/exjade.pdf（２００７年５月にアクセス）］。最後に、リガンド１は経口的に活性な三座のＤＦＴ類似体であり、現在患者での第Ｉ／ＩＩ相試験中である。１の前臨床毒性プロファイルは比較的良性であり、すなわち、非遺伝性または非生殖性の毒性であって、高用量においてのみ軽度の腎毒性を有したが、臨床結果の解明が待たれる。
本発明の目的は、哺乳類における鉄過剰とこれに関連する疾患の処置に有用な、新規なデスフェリチオシン類似体を提供することである。
【発明の概要】
【００１３】
上記および他の目的は本発明により実現され、その１つの態様は、比較的非毒性のデスアザデスフェリチオシン類似体であって、式：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてもよく、およびこれらはＨ、１４個までの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル（例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチル）、またはアリールアルキル（ここでアリール部分はヒドロカルビルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、前記アリールアルキル基は１４個までの炭素原子を有する）であってもよく、Ｒ２は任意に１４個までの炭素原子を有するアルコキシであり；
Ｒ３は、［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｘ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｙ−アルキルであり；
ｎは、独立して、１〜８の整数であり；
ｘは、１〜８の整数であり；
ｙは、０〜８の整数であり、および
Ｒ３Ｏは、フェニル環上の４位以外の任意の位置を占めてよい、
で表される、前記デスアザデスフェリチオシン類似体、またはその塩、水和物もしくは溶媒和物に関する。
【００１４】
本発明の他の態様は、対象における、三価金属のキレート化または金属イオン封鎖（sequestration）に応答する病的状態を処置するための方法であって、該対象に、上記の類似体の治療有効量を投与することを含む、前記方法に関する。
本発明のさらなる態様は、三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病的状態を処置するための医薬組成物であって、上記の少なくとも１種の類似体および、これのための薬学的に許容し得る担体の治療有効量を含む、前記組成物に関する。
本発明の他の態様は、包装材料および該包装材料内に含有される医薬剤を含む製品であって、ここで該医薬剤が、三価金属の過剰を患う対象の処置に有効であり、ここで該包装材料が、該医薬剤を三価金属の過剰に関連する症状の緩和のために使用可能であることを示すラベルを含み、またここで、該医薬剤が上記の類似体である、前記製品に関する。
【００１５】
本発明のより重要な特徴について、続く詳細な説明がよりよく理解されるように、また本発明の当分野への寄与がより評価されるように、やや広範囲に概説する。当然ながら本発明の追加の特徴も存在し、これは以下にさらに記載される。実際、前述の一般的な説明および以下の詳細な説明は例示であり、解説的であり、クレームされた本発明のさらなる説明の提供を意図していることが理解されるべきである。
この点に関し、本発明の少なくとも１つの態様を詳細に説明する前に、本発明は、その応用が、以下の記載または図面の説明に述べられた構成の詳細に、および構成成分の配置に限定されないことが理解されるべきである。本発明は他の態様も可能であり、種々の方法において実践および実施可能である。また、本明細書に用いられる表現および用語は説明のためであり、限定とみなされるべきではないことが、理解されるべきである。
【００１６】
したがって、当業者は本開示が基づくところの概念は、本発明のいくつかの目的を実行するための、他の構造、方法、およびシステムの設計のベースとして容易に利用できることを理解する。したがって、重要であるのは、本発明の精神および範囲から逸脱しない限り、均等な構造物も本発明に含まれることである。
添付の図面は本発明のさらなる理解を提供するために含まれており、本明細書に組み込まれてその一部を構成し、本発明のいくつかの態様を説明し、本記載と一緒になって、本発明の主要部を説明する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関を示す図である。
【図２】図２は（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ｉＰｒＥ（１２）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関を示す図である。
【図３】図３はＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｐｏで与えられて処置されたラットの胆汁鉄動態を示すグラフである。
【図４】図４はＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｓｃで与えられて処置されたラットの組織内分布を示すグラフである。
【図５】図５は（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成を示すスキームである。
【図６】図６は（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥおよび（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥの合成を示すスキームである。
【００１８】
図１．（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関；ＮＯＥパーセントは点線の隣に示す。
図２．（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ｉＰｒＥ（１２）の１Ｈ共鳴および関連する等核ＮＯＥ相関；ＮＯＥパーセントは点線の隣に示す。
図３．ＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｐｏで与えられて処置されたラットの胆汁鉄動態。鉄クリアランス（ｙ軸）は、体重１ｋｇ当たりの鉄μｇとして記す。
図４．ＤＡＤＦＴ類似体１、３、６および９の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量をｓｃで与えられて処置されたラットの、血漿、腎臓、肝臓、心臓および膵臓における組織内分布。濃度（ｙ軸）は、μＭ（血漿）または組織１ｇ当たりの化合物ｎｍｏｌとして記す。全時点においてｎ＝３。
図５−スキーム１．（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成。
図６−スキーム１＆２．それぞれ（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ］および［（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ］の合成。
【００１９】
発明の詳細な説明
本発明は、上述のデスアザデスフェリチオシン類似体が、哺乳類における、非常に有効で比較的非毒性の、三価金属、特に鉄に対するキレート剤であるとの発見に基づく。
より具体的には、本発明は、デスアザデスフェリチオシン（ＤＡＤＦＴ）芳香環の種々の位置にポリエーテル基を導入すると、鉄クリアランスおよび、得られた類似体の器官での分布特性を大幅に増強するとの発見に基づく。３種のＤＡＤＦＴポリエーテルを評価する：（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、６］、および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］。げっ歯類および霊長類における鉄除去効率（ＩＣＥ）は、どの位置の異性体を評価するかに非常に感受性が高いことが示され、げっ歯類における器官分布も同様である。前記ポリエーテルは一律に、げっ歯類においてそれぞれの対応する親リガンドより高いＩＣＥを有し、これは、in vivoでのリガンド−血清アルブミン結合試験と整合する。リガンド９は、げっ歯類において最も活発なポリエーテル類似体であり、これはまた霊長類においても非常に有効であり、ヒトにおける高い成功を示唆する。さらに、この類似体はまた、他のキレート剤より、霊長類の尿中の鉄をより多く除去することが示されている。この傾向が患者においても観察されれば、臨床の場での鉄バランス試験の性能はより良くなるであろう。
【００２０】
リガンド１は、現在患者において第Ｉ／ＩＩ相の試験に付されている、経口的に活性な三座ＤＦＴ類似体である。１の予備臨床毒性プロファイルは比較的良性であり、すなわち遺伝毒性または生殖毒性がなく、高用量において軽い腎毒性のみがあるが、臨床結果の解明が待たれている。以前の研究により、デスフェリチオシン類似体のファミリー内で、より親油性のキレート剤がより優れた鉄除去効率を有することが明らかにされ、すなわち、化合物のｌｏｇＰａｐｐ値が大きいほど、鉄除去効率（ＩＣＥ）が高い［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。いくらか気がかりであるが第２の関係も存在する：すべてのリガンドのセットにおいて、より親油性のキレート剤は、常により毒性が高い［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Vinson, J. R. T.; Yao, H.; Bharti, N.; Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro- 2-(2- hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２１】
前の検討では、鉄除去効率を維持しつつ、親油性／毒性関係をバランスさせるリガンドの設計に焦点が当てられた。研究は、４’−メチルエーテルである（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（２−ヒドロキシ−４−（メトキシフェニル）−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ，２］が、げっ歯類および霊長類両方において優れた鉄除去効率を有するとの観察から開始された；しかし、この化合物は承認不能なほど毒性が強かった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy- 4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477］。それにも関わらず、これによって、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）の４’−（ＨＯ）官能性のアルキル化は、鉄除去機能と適合性であることが示された。これらの観察に基づき、２より親油性が低く、より水溶性のリガンドを組み立てた：ポリエーテル（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ，３］［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２２】
１が４’−メトキシル化されて２を供給する場合、げっ歯類モデルにおける経口（ｐｏ）投与後のＩＣＥは１．１±０．８％から６．６±２．８％（ｐ＜０．０２）へと、顕著に増加した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。３，６，９−トリオキサデシル基が１の４’−（ＨＯ）に結合したポリエーテル（３）も優れて機能し、ｐｏ投与の場合、ＩＣＥは５．５±１．９％（ｐ＜０．００３ｖｓ１））であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy- 4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。鉄を負荷した霊長類へのｐｏ投与した１の効率は、１６．８±７．２％であり［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］、一方、４’−（ＣＨ３Ｏ）類似体（２）のｐｏ投与のＩＣＥは、２４．４±１０．８％であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477］。対応するポリエーテル（３）のｐｏ投与は霊長類において優れて機能し、効率は２５．４±７．４％であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2- hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２３】
げっ歯類で行われた前の研究では、ポリエーテル（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）は、対応する（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ類似体（２）または親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）より腎毒性が低いことが明白に実証された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。毒性におけるこの差を理解する試みにおいて、キレート剤の３００μｍｏｌ／ｋｇの単一用量をｓｃ投与したげっ歯類の、肝臓、腎臓、膵臓および心臓における３および１の組織レベルを、暴露後２、４、６および８ｈ後に測定した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。２つの注目すべき観察がある。各時点において、肝臓におけるポリエーテル３のレベルは、親薬剤１のレベルよりはるかに高かった。腎臓において、ポリエーテル濃度は２ｈ時点で親薬剤濃度よりも低く、それより遅い時点においては類似していた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。これは、腎毒性の減少と整合するように見える。
【００２４】
さらに、１および３をラットに対して、２３７μｍｏｌ／ｋｇの用量で１日２回（４７４μｍｏｌ／ｋｇ／日）、７日間ｐｏ投与した実験において［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］、光学顕微鏡のもとで、ポリエーテル（３）で処置したげっ歯類からの腎臓の近位尿細管は、対照動物のそれらと区別できなかった；遠位尿細管は、ところどころ空胞変性を伴ったが、それ以外は正常であった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。しかし、１で処置した動物は、近位尿細管において局所的に中程度から重篤な空胞変性、刷子縁の欠如、および細胞内壁への尿細管の突出を示した；遠位尿細管は、中程度から重篤な空胞変性を示した。これらの所見およびポリエーテル３のＩＣＥの増加から、追加のポリエーテル類についてさらなる研究を行うこと、および追加の（より早い）時点での薬物組織濃度の評価を行うこととなった。
【００２５】
デスフェリチオシン、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（３−ヒドロキシ−２−ピリジニル）−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（ＤＦＴ）は、３座の親鉄剤であり［Naegeli, H.- D.; Zahner, H. Metabolites of Microorganisms. Part 193. Ferrithiocin. HeIv. Chim. Acta 1980, 63, 1400-1406］、Ｆｅ（ＩＩＩ）と安定な２：１複合体を形成する；累積形成定数（cumulative formation constant）は４×１０２９Ｍ−１である［Hahn, F. E.; McMurry, T. J.; Hugi, A; Raymond, K. N. Coordination Chemistry of Microbial Iron Transport. 42. Structural and Spectroscopic Characterization of Diastereomeric Cr(Hl) and Co(IU) Complexes of Desferriferrithiocin. J. Am. Chem. Soc. 1990, 112, 1854-1860; Anderegg, G.; Raber, M. Metal Complex Formation of a New Siderophore Desferrithiocin and of Three Related Ligands. J. Chern. Soc. Chern. Cornrnun. 1990, 1194-1196］。これは経口（ｐｏ）投与した場合に、胆管にカニューレ挿入したげっ歯類モデル（ＩＣＥ、５．５％）［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; Dionis, J. B.; Egli-Karmakka, M.; Frei, J.; Huxley-Tencer, A.; Peter, H. H. Evaluation of Desferrithiocin and Its Synthetic Analogues as Orally Effective Iron Chelators. J. Med. Chern. 1991,34,2072-2078］と、鉄を過負荷したフサオマキザル（Cebus apella）霊長類（ＩＣＥ、１６％）［Bergeron, R. J.; Streiff, R. R; Creary, E. A; Daniels, R. D., Jr.; King, W.; Luchetta, G.; Wiegand, J.; Moerker, T.; Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with DFO in a Cebus Monkey Model. Blood 1993, 81, 21662173; Bergeron, R. J.; Streiff, R. R; Wiegand, J.; Vinson, J. R. T.; Luchetta, G.; Evans, K. M.; Peter, H.; Jenny, H. -B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990, 612, 378-393］の両方において、作用が優れていた。
【００２６】
残念なことには、ＤＦＴは非常に腎毒性が強い［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King,W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferrioxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173］。しかし、極めて優れた経口活性のために、経口的に活性で安全なＤＦＴ類似体を同定するための構造活性研究が行われた。初期の目的は、ｐｏ投与での鉄クリアランスと適合的な、最小構造プラットフォーム（minimal structural platform）を規定することであった［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferrioxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81 ,2166-2173]'[Bergeron, R. J., Wiegand, J., Dionis, J. B., Egli-Karmakka, M., Frei, J., Huxley-Tencer, A. and Peter, H. H. Evaluation of Desferrithiocin and Its Synthetic Analogues as Orally Effective Iron Chelators. J. Med. Chem. 1991,34,2072- 2078］。
【００２７】
続いて、一連の構造活性研究が、良好な経口での鉄除去活性と許容し得る毒性プロファイルを有するＤＦＴ類似体を開発することを目的として行われた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., McCosar, B. H., Weimar, W. R., Brittenham, G. M. and Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999,42,2432-2440］。結果は（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）であり、現在臨床試験中である。しかし、動物試験により、この系においてさえ、用量を制限する毒性は腎毒性である可能性が高い［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。我々は次に、ポリエーテルを４’位に結合することにより、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）が腎毒性を大幅に低減することを発見した。近位尿細管損傷の低減は、親リガンド１の２ｈ時点と比べての、腎臓での３のレベルの低下と整合するように見えた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００２８】
ポリエーテル断片が果たす役割を、位置的異性体の観点からよりよく理解することにした；設計の戦略は、比較問題に基づく。３つの問題に取り組む：芳香環でのポリエーテルの位置を変化させると、（１）げっ歯類における鉄除去効率、（２）霊長類における鉄除去効率、および（３）げっ歯類での組織内分布にどのように影響を及ぼすか。この情報により、どのようにして、げっ歯類においてさらなる持続的な毒性試験を行えるかを決定する。
【００２９】
プラットフォームである、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（２−ヒドロキシフェニル）−４−メチル−チアゾールカルボン酸（ＤＡＤＦＴ）をこの研究で評価する。それぞれの場合、単一の置換基、ヒドロキシ、メトキシ、または３，６，９−トリオキサデシルオキシを、芳香環の３’（７−９）、４’（１−３）または５’（４−６）位に付加する。それぞれの場合において、鉄クリアランスデータは、げっ歯類および霊長類の両方で、ｌｏｇＰａｐｐ値と共に示す（表１および２）。履歴データも含まれる［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Vinson, J. R. T.; Yao, H.; Bharti, N.; Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro- 2-(2- hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; McCosar, B. H.; Weimar, W. R; Brittenham, G. M.; Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999, 42, 2432- 2440; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Bussenius, J.; Smith, R. E.; Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477; Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Weimar, W. R; Park, J.-H.; Eiler-McManis, E.; Bergeron, J.; Brittenham, G. M. Partition- Variant Desferrithiocin Analogues: Organ Targeting and Increased Iron Clearance. J. Med. Chem. 2005,48,821-831］。げっ歯類でのリガンドの器官分布についての議論は、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および３種のトリオキサデシルオキシ化合物３、６、および９に限定する（図４）。非ポリエーテル２、４および５についての器官分布データは、前の刊行物に見出すことができる［Bergeron, R. J.; Wiegand, J.; McManis, J. S.; Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043］。支持する情報が利用可能である：合成化合物についての成分分析データ。
【００３０】
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、６］および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）］の合成を、初めに（Ｓ）−２−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ、４］および（Ｓ）−２−（２，３−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ、７］を、それぞれ、それらのイソプロピルエステル１０およびエチルエステル１１に変換することにより行った（スキーム１）。（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（４）をそのイソプロピルエステル１０に、定量的収率で、ＤＭＦ中の２−ヨードプロパン（１．８当量）を用いたＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．８当量）の存在下でのアルキル化により、変換した。（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴのエチルエステル１１は、７を、ＤＭＦ中のヨードエタン（１．８当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．８当量）を用いてアルキル化することにより、アクセスした。次に化合物１０および１１を、等モル量のトリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルを用いて、ミツノブ条件下［ＴＨＦ中、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１．１９当量）およびトリフェニルホスフィン（１．２３当量）］にて、それぞれ５’−ヒドロキシルおよび３’−ヒドロキシルにおいてアルキル化し、（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ｉＰｒＥ（１２）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ−ＥＥ（１３）を、それぞれ５２％と２５％の収率で得た。イソプロピルおよびエチルエステルをメタノール中５０％のＮａＯＨで加水分解し、続いて２ＮのＨＣｌで酸性化して、（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６、９７％）および（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）を６０％収率で得た。
【００３１】
９のポリエーテル鎖がその２’−ヒドロキシルではなく、実際に３’位に結合していることを示すために、プロトン核オーバーハウザー効果（ＮＯＥ）差スペクトルを得て、結果を図１に示す。芳香残基に最も近接するポリエーテルのメチレン（ｇ）のプロトンに割り当てられた、４．２８ｐｐｍでの共鳴の低出力飽和が、３．９４ｐｐｍでの隣接するメチレン（ｅ）のシグナルを６％増強し、一方、７．３０ｐｐｍ（ｉ）での単一の芳香シグナルも、１１％という顕著な増強を示した。これらの観察は、９の構造と整合する。
【００３２】
プロトンＮＯＥ差分光分析法を用いて、１２においてポリエーテル鎖のアルキル化が５’位で起こり、より立体障害された２’−ヒドロキシルにおいてではないことを確認した；これらの結果を図２に示す。ポリエーテル鎖のメチレン（ｈ）に割り当てられた、４．１０ｐｐｍにおけるシグナルの照射は、隣接の３．８４ｐｐｍにおけるメチレン（ｆ）共鳴を６％増強し、６．９４ｐｐｍ（ｊ）および７．０１ｐｐｍ（ｋ）における２つの芳香シグナルは、それぞれ１３％および７％の顕著な増強を示した。これらの増強は、１２の構造は示されたとおりで正確であり、得られた加水分解産物は確かに６であることを示す。
【００３３】
鉄を過負荷していない（鉄非過負荷）げっ歯類におけるキレート剤誘発性の鉄クリアランス。我々は前に、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系、すなわち（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）、（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（２）、および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）において、メトキシリガンド（２；ＩＣＥ６．６±２．８％）およびポリエーテル（３；ＩＣＥ５．５±１．９％）の両方が、親リガンド１よりも効率的な鉄キレート剤であることを示した；それぞれ、ＩＣＥ１．１±０．８％（２に対してｐ＜０．０２、およびに３に対してｐ＜０．００３）（表１）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。鉄除去効率（ＩＣＥ）が、百分率で表された（純鉄排泄）／（キレート剤の総鉄結合能力）として定義されていることを想起せよ。化合物１および２の相対的なＩＣＥ値は、それらのｌｏｇＰａｐｐ値と調和していた：親油性が強いほど、ｌｏｇＰａｐｐ値は大きくなり、キレート剤はより効率的である。これは、ポリエーテル類似体３の場合とは異なる；３は、そのｌｏｇＰａｐｐ値から予想されるよりも遥かに活性であった。しかしＩＣＥの傾向は、胆汁の鉄動態（図３）およびキレート剤の肝臓濃度、例えば３＞１と調和していた（図４）。
【００３４】
（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系（表１）、すなわち（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（４）、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−（２−ヒドロキシ−５−メトキシフェニル）−４−メチル−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ、５］、および（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）について、メトキシ類似体５（ＩＣＥ６．３±１．２％）およびポリエーテル６（ＩＣＥ８．０±１．８％）の両方は、親リガンド４（ＩＣＥ１．０±０．９％、それぞれ、５に対してｐ＜０．００１、および６に対してｐ＜０．００５）よりも効率的な鉄キレート剤であった。再度、５に対する４の相対的なＩＣＥは、ｌｏｇＰａｐｐ値および肝濃度と調和していた［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。肝臓濃度（図４）は、ポリエーテル６の、４に相対的なＩＣＥの良好な指標であるが［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］、ｌｏｇＰａｐｐ値はそうではない。（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴおよび（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系の両方において、対応するＨＯ−、ＣＨ３Ｏ−およびポリエーテルリガンドは、類似のＩＣＥ値ならびに、尿および胆汁において類似の鉄クリアランスの分布を有することは注目すべきである（表１）。
【００３５】
（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴセットの化合物７〜９のＩＣＥは、４’−（ＨＯ）および５’−（ＨＯ）系と大きく異なる。リガンドは、ファミリーとして、鉄を除去するのにより効率的である（表１）。再度、相対的な鉄除去効率は、３’−（ＨＯ）および３’−（ＣＨ３Ｏ）化合物についてのｌｏｇＰａｐｐ値により推定されるが、３’−ポリエーテル（９）についてのＩＣＥはそうではない。この例において最も関連するのは、３’−ポリエーテル（９）と４’−ポリエーテル（３）の間の根本的な違いである；３’−リガンド（９）はほぼ２００％より効果的である（１０．６±４．４％対５．５±１．９％、ｐ＜０．０５）。９のＩＣＥはまた、５’−ポリエーテル６のそれよりも高いが（それぞれ、１０．６±４．４％対８．０±１．８％）、増加の程度は有意とするより小さい（ｐ＝０．０６）。尿対胆汁での鉄排泄の様式は似ている。
【００３６】
親１および３種のポリエーテル３、６および９の胆汁鉄動態（図３）は、リガンド１の鉄クリアランス（μｇ／ｋｇ）が薬剤投与後３ｈでピークとなり、６８μｇ／ｋｇを超えることはないことを示す。４’−および５’−ポリエーテル（３および６）により誘発される鉄排泄も、３ｈにおいて、ただしより高いレベルにおいてピークとなり、それぞれ１８３および３８８μｇ／ｋｇである（１対３または１対６についてｐ＜０．００１）。３’−ポリエーテル９で処置した動物の胆汁の鉄含量は、６ｈにおいて最大であり、２８７μｇ／ｋｇである。さらに、１、３および６についての胆汁での鉄クリアランスは、１５ｈで基底レベルに戻ったが、３’−ポリエーテル９については、＞３０ｈまでこれよりかなり上に留まっている（データ示されず）。９の鉄排泄におけるピークの遅延および活性の持続時間は、以下で議論される組織内分布研究においても反映されている（図４）。
【００３７】
鉄を過負荷されたフサオマキザル霊長類におけるキレート剤誘発性の鉄クリアランス。全３セットのリガンドについての鉄クリアランスデータを示す（表２）。霊長類における（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系の場合、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（２）についての平均ＩＣＥ値はｌｏｇＰａｐｐ値との相関を示唆し、例えば、より親油性の類似体２のＩＣＥ（２４．４±１０．８％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Bussenius, J., Smith, R. E. and Weimar, W. R. Methoxylation of Desazadesferrithiocin Analogues: Enhanced Iron Clearing Efficiency. J. Med. Chem. 2003,46,1470-1477］は＞１（１６．８±７．２％）であり［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., McCosar, B. H., Weimar, W. R., Brittenham, G. M. and Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999,42,2432-2440］、しかしその増加は有意ではない。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）は１〜３系の中で最も親油性の低いキレート剤であるが、これも類似体２と同じくらい効率的であり（ＩＣＥ、２５．４±７．４％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］、親１よりわずかにより効果的であるが、ただし、その増加は全く有意ではない（ｐ＝０．０６）。
【００３８】
（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ類似体４〜６の場合、リガンドのＩＣＥの傾向は、ｌｏｇＰａｐｐ値とよく相関する。最も親油性の高いリガンド５のＩＣＥ（１８．９±２．３％）は、最も親油性の低い類似体６（ＩＣＥ８．１±２．８％、ｐ＜０．００１）より２倍以上効率的である；５もまた、キレート剤４より効率的であり、ＩＣＥ１２．６±３．０％（ｐ＜０．００１）である［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］。（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ類似体７〜９について、ｌｏｇＰａｐｐ値には明確な差があるが、この３種のリガンドのＩＣＥは全て、互いの誤差範囲内である（表２）。
【００３９】
ポリエーテルリガンドについての比較の最後の注目点は、胆汁対尿中の金属排泄に関する。げっ歯類モデルにおいて、数値は一般に類似しており、ほとんど全ての鉄は胆汁中に排泄される（表１）。これは霊長類においては観察されない；より多量の鉄の断片が尿中に見出される（表２）。最も注目すべきケースは、霊長類における、（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）の５６／４４の糞便／尿中比率および、（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の７２／２８の糞便／尿中比率である。げっ歯類では、これらの数値はそれぞれ９８／２および９５／５である。
【００４０】
霊長類対げっ歯類における鉄クリアランス性能比。性能比（ＰＲ）は平均のＩＣＥ霊長類／ＩＣＥげっ歯類として定義されるが、これは注目に値する（表３）。一見して、リガンドが、鉄過負荷の霊長類において、鉄が非過負荷であるラットにおけるよりも一律により良好に働くことは、驚くことではないように見える（表１および２）。霊長類群の平均ＩＣＥを、げっ歯類群の平均ＩＣＥと比較することができる（表３）。２つの種での標準偏差は１〜５および７〜９について同等ではないが、これは関係なく、なぜならば、平均を含む間隔が相互干渉しないからである。これは、２つの種におけるＩＣＥが実質的に同じである５’−ポリエーテル（６）の場合では異なる。性能比における最大の差は、親リガンド１、４、および７で見られる。しかし、比がセット内でこれほど大きく変化するという事実（例えば、１対２と３、４対５と６、および７対８と９）は、霊長類対げっ歯類でのＩＣＥの差は、サルが鉄過負荷であり、げっ歯類はそうでないとの事実に完全に基づくわけではないことを示唆する。
【００４１】
リガンド−アルブミン結合のＩＣＥへの影響の可能性。親リガンド１、４および７とそれらの類似体との間の、げっ歯類モデルにおけるＩＣＥの差を理解するために、リガンド−アルブミン結合に焦点を当てた一連の実験を行った。ゲンザイムと共に臨床試験中である薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）に焦点を当てた。対応するポリエーテル（３）はげっ歯類において顕著に優れていたことを想起せよ（３および１についてそれぞれＩＣＥ５．５±１．９％対１．１±０．８％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）を、血清アルブミン結合部位から置き換えることに焦点を当てた、ラットにおける一連の比較実験を実施した。
【００４２】
安息香酸は、ヒト血清アルブミンの両方の部位から薬剤を置き換えるリガンドとして、良好に確立されている［Ostergaard, J., Schou, C, Larsen, C. and Heegaard, N. H. Evaluation of capillary electrophoresis-frontal analysis for the study of low molecular weight drug-human serum albumin interactions. Electrophoresis 2002,23,2842-2853］。胆管にカニューレ挿管したげっ歯類を、安息香酸ナトリウムで処置して、SudlowタイプＩおよびＩＩアルブミン結合部位に潜在的に結合する任意のキレート剤を置き換えることの影響を評価した［Ostergaard, J., Schou, C, Larsen, C. and Heegaard, N. H. Evaluation of capillary electrophoresis-frontal analysis for the study of low molecular weight drug-human serum albumin interactions. Electrophoresis 2002,23,2842-2853］。５つの実験を行った（表４）。げっ歯類に以下を与えた：（ｉ）蒸留水に溶解した安息香酸ナトリウム２５０ｍｇ／ｋｇ／用量を、ｓｃで６回、（ｉｉ）（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）をｐｏにて３００μｍｏｌ／ｋｇ、（ｉｉｉ）１をｐｏで３００μｍｏｌ／ｋｇに加えて、安息香酸ナトリウム（２５０ｍｇ／ｋｇ／用量）。安息香酸ナトリウムは、１の投与の０．５ｈ前に与え、その後毎時間、５回の追加用量を与えた、
【００４３】
（ｉｖ）（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）をｐｏにて３００μｍｏｌ／ｋｇ、または（ｖ）３をｐｏにて３００μｍｏｌ／ｋｇの用量に加えて、安息香酸ナトリウム（２５０ｍｇ／ｋｇ／用量）。安息香酸ナトリウムは、ここでも３の投与の０．５ｈ前に与え、その後毎時間、５回の追加用量を与えた。結果（表４）は、安息香酸ナトリウムそれ自体のｓｃ投与は、いかなる鉄のクリアランスも誘発しないことを示す。しかし、安息香酸ナトリウムを上記のように１に加えてげっ歯類に投与すると、ＩＣＥにおける１０．９倍の増加、すなわち１．１±０．８％から１２．０±２．６％（ｐ＜０．００１）への増加がみられる。同じ条件下で、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）のＩＣＥも増加したが、しかしその度合いははるかに小さく、５．５±１．９％から８．８±２．４％（ｐ＜０．０５）であり、１．６倍の増加である。安息香酸ナトリウムのより低い用量は、１のＩＣＥの増加に対してより少ない効果を有していた（データ示さず）。これらのデータは、げっ歯類のＩＣＥにおける、親リガントと対応するポリエーテル類の間の差が、リガンド−アルブミン結合の差に依存するとのアイディアと整合的である。データはまた、霊長類対げっ歯類での性能比の差とも整合し、すなわち、リガンドはげっ歯類のアルブミンに対するより、霊長類のアルブミンに対して一律によりゆるく結合している可能性がある。
【００４４】
げっ歯類におけるキレート剤の組織内分布。２つの組織において、３，６，９−トリオキサデシルオキシ（ポリエーテル）基のＤＡＤＦＴ芳香環周りの移動について―ＩＣＥへの影響および組織内分布への効果について、検討した。これらの評価は、もし存在するとするならば、追加のＤＡＤＦＴポリエーテル類のどれを、げっ歯類における持続的毒性試験に進めるべきかを識別する最初のステップとなる。
本研究は、ポリエーテルをＤＡＤＦＴの芳香環の４’−から３’−または５’位へと移動させることは、得られたリガンドのＩＣＥ（表１および２）および組織内分布（図４）に対して重大な効果を有し得ることを、明白に示す。腎臓において（図４）、０．５ｈ時点で、５’−ポリエーテル（６）は最大濃度を達成し（６４３±９２ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）、続いて４’−ポリエーテル（３；３６８±７４ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量、ｐ＜０．０１、６に対して）および３’−ポリエーテル（９；２８０±２６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量、ｐ＜０．０１、６に対して）であった。興味深いことには、この時点において、４’−ポリエーテル（３）と親（１；３６１±５６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）の濃度はほとんど同じであった（ｐ＞０．０５）。１ｈ時点において、再度、５’−リガンド（６）が最も濃度が高く（４３５±１１１ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）、３’−キレート剤（９）および４’−キレート剤（３）は非常によく似た濃度を達成した（それぞれ２５９±３５および２５２±１０ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）。親薬剤１は最も濃度が低かった（１７９±４ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）。
【００４５】
２ｈ時点において、相対的な腎臓での濃度は大きく異なっている。再度、５’−リガンド（６）が最も濃度が高かった（３２１±２０ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）＞＞９；１４５±２７ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量＞＞３；４１±３ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量（６対９または３について、ｐ＜０．００１）。
【数１】
前の研究で、４’−ポリエーテル（３）が親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）よりはるかに腎毒性が低いことが実証されたことを想起せよ［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。これは、２ｈ時点での相対的組織濃度と整合した：４’−ポリエーテル濃度３は親１より顕著に低かった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。しかし、２ｈより前の時点から得た腎臓での濃度データについては、親（１）に対して相対的に低い４’−ポリエーテル（３）の腎毒性は、単純に腎臓でのキレート剤濃度が低いことによって説明できるとのアイディアと整合しない。
【００４６】
０．５ｈにおいて、３種のポリエーテルリガンドの肝臓濃度（図４）は、腎臓において観察されたのと同じ相対的な順序である：６（４８３±８５ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）＞３（３３９±３５ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）＞９（２４２±３８ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量）。１ｈにおいて、全３種のポリエーテル類似体の濃度は、肝臓において類似である
【数２】
。
興味深いことには、１ｈ時点において、３’−ポリエーテル（９）の濃度は２４２±３８ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量から３１８±４６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量へと顕著に増加し（ｐ＜０．０５）、一方６および３の濃度はそれぞれ３６％と６％減少した。２ｈおよび４ｈ時点において、３’−リガンド（９）は肝臓で最も濃度が高く、次に５’−類似体（６）および４’−類似体（３）である。親１の肝臓濃度は、全ての時点においてポリエーテル類より低い（図４）。
【００４７】
心臓において、０．５ｈ時点で（図４）、ポリエーテル類の相対的な濃度（６＞３＞９）は、同じ時点での腎臓および肝臓での濃度と同様の傾向である。しかし、実際のレベルは大幅に低く、＜９０ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量である。心臓での濃度の順序は、１および２ｈ時点でも同じである。４ｈ時点でも、５’−リガンド（６）はまだ最も濃度の高いキレート剤である。親薬剤１は９よりも０．５ｈ時点では高いが、他の全時点において、最も濃度の低いリガンドである（図４）。
膵臓において（図４）、ポリエーテル類の相対的な濃度は全時点で６＞３＞９である。３および９の組織含量は、０．５ｈから１ｈ時点で増加する（図４）。２ｈ時点で、３および６のレベルは類似である
【数３】
。
一方９の濃度は１６ｎｍｏｌ／ｇ湿潤重量である。親薬剤（１）の濃度は０．５ｈで３および９より高く、１ｈでは同じである（図４）。２ｈ時点で、１は最も濃度の低いリガンドであり、４ｈでは検出不能である。
【００４８】
キレート剤の血漿濃度データ（図４）は、リガンドが迅速に除去されるとのアイディアと整合する。０．５ｈ時点で、リガンドの血漿濃度［６（３２４±２０μＭ）＞３（１９４±６０μＭ）＞９（６２±２４μＭ）］は、肝臓、腎臓、膵臓および心臓で生じている現象を反映する。１ｈ時点では、順序は同じであるが、６は３９％減少し、３は２８％減少し、そして９は２６％減少した。２ｈ時点で、６は５４％低下し、３は９２％低下し、そして９は６１％低下した。４ｈ時点で、６は８２％低下し、３は９７％低下し、そして９は７９％低下した。リガンド３の血漿濃度の低下は、６または９の消失よりかなり早い。しかし９は、３および６が達成した血漿濃度に達することはない。親薬剤１の濃度は０．５ｈにおいて９より高いのみである；他の全てのリガンドより、他の全時点において、濃度は低い（図４）。キレート剤の肝臓濃度と比較したこの観察は、１および９の効率的な初回通過クリアランスを示唆する。３’−ポリエーテル（９）の良好なＩＣＥおよびその適度な腎臓濃度のために、このリガンドを、前臨床毒性試験に進める。このリガンドについて特に興味深いことは、げっ歯類と霊長類の両方において良好に作用することであり、ヒトにおける成功の高い指標を示唆する。
【００４９】
初期の研究において、ポリエーテル（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）が、対応する（Ｓ）−４’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（２）または親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）よりも、げっ歯類において大幅に腎毒性が低いことが明白に実証された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。ポリエーテル（３）はまた、霊長類において優れた鉄除去効率を有することが示された。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）で処置されたラットの腎臓の組織病理により、親リガンド１に暴露されたげっ歯類から収集した組織で見られるよりも顕著に少ない、近位尿細管における構造的変化が示された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００５０】
４’−ポリエーテル（３）で処置された動物から２ｈ時点で収集した、最初の腎臓組織濃度測定は、組織病理結果と整合するように見えた；腎臓においては、親薬剤よりも少ないポリエーテルが存在し、腎毒性も低かった［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。４’−ポリエーテル（３）で観察される、げっ歯類および霊長類の両方におけるＩＣＥおよび毒性の不在により、３，６，９−ポリエーテル鎖をＤＡＤＦＴの芳香環に４’―炭素以外の位置で結合した場合の、ＩＣＥとリガンドの組織内分布に対する影響を検討することとした。２つの系が選択された：（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）および（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）（表１および２）。
【００５１】
２つのリガンドの組み立てにおける鍵となるステップ（スキーム１）には、２，５−ジヒドロキシイソプロピルエステル（１０）または２，３−ジヒドロキシエチルエステル（１１）どちらかの、ミツノブ条件下における、トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルによるアルキル化が関与する。このアルキル化は、次に、エステル加水分解が続く。ミツノブアルキル化は５’または３’に高度に特異的で、おそらく立体的な理由により、２’−（ＨＯ）は関与しない。反応の位置選択性は、ポリエーテル９および１２両方の核オーバーハウザー効果の差スペクトル（図１および２）と整合した。
【００５２】
ｌｏｇＰａｐｐ値は、げっ歯類におけるメトキシル化類似体対それらの対応する親（１対２）、（４対５）および（７対８）、ならびに霊長類における５’−置換リガンド４〜６の場合のＩＣＥの予測因子であったが、親対ポリエーテルについては有用なツールではなかった。げっ歯類での化合物の各セットにおいて、ポリエーテルのＩＣＥは親リガンドのそれよりも顕著に大きかった（１対３、５００％、ｐ＜０．００３；４対６、８００％、ｐ＜０．００５；および７対９、２３０％、ｐ＜０．０５；表１）。これは、ＩＣＥを制御するリガンド−金属アクセスを超える追加のパラメータの存在、例えば、ｃＭＯＡＴなどの種々の有機アニオン輸送を介した金属錯体輸送の効率、金属錯体それ自体のｌｏｇＰａｐｐ値、およびリガンド−アルブミン結合などの可能性を示唆する。
【００５３】
げっ歯類における、親とポリエーテル、例えば（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）と（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）の間のＩＣＥの差は、リガンド−アルブミン結合の差と平行することが示された（表３）。SudlowタイプＩおよびＩＩアルブミン結合部位からのリガンドを置き換えることが知られている化合物である、安息香酸ナトリウムを、１または３と共にげっ歯類に与えた。安息香酸ナトリウムのｓｃ投与は、１のＩＣＥを１０．９倍に増加させた（ｐ＜０．００１）。リガンド３と安息香酸ナトリウムを与えた動物のＩＣＥも増加したが、１．６倍の増加のみであった（ｐ＜０．０５）。これは究極的には、少なくとも部分的に、霊長類対げっ歯類でのリガンドＩＣＥにおける差を説明することができる。キレート剤は霊長類のアルブミンに均一により弱く結合することができる。霊長類において、親のＩＣＥ（１２．６±３．０％）が対応するポリエーテル６（８．１±２．８％、ｐ＜０．０５）のそれよりも大きい４対６の場合を除いて、リガンドＩＣＥの差は大きくはなく、一般に実験誤差の範囲内であった（表２）。
【００５４】
ポリエーテルの位置を変更することの、リガンド−組織濃度への影響は大きい（図４）。肝臓を除く全ての組織濃度での傾向は、一般に（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）＞（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）＞（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）である。肝臓では０．５ｈにおいて、濃度は６＞３＞９＞１であり、１ｈにおいて
【数４】
である。しかし、この時点を越えると、９は最高濃度を達成し、この濃度に留まる。データで最も重要であるのは、２ｈより早い時点での、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）の腎臓リガンド濃度と関連する。前の研究により、４’−ポリエーテル（３）は、親薬剤（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）よりはるかに腎毒性が低いことが明白に示された［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (5)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。これは、２ｈ時点での腎臓組織濃度（１＞３）と整合した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。しかし本研究では、１および３は０．５ｈで類似の濃度を有することが見出された；リガンド３は実際、１ｈにおいて１よりわずかに高い。したがって、ポリエーテル３の親１より低い毒性は、単純に腎臓キレート剤濃度によっては説明できない。
【００５５】
最後に、リガンド３、６および９の性能比（ＩＣＥ霊長類／ＩＣＥげっ歯類）（表３）は、全て≦４．６であり、２つの種の間で同程度の鉄クリアランスを示唆する。リガンド６は、霊長類とげっ歯類において実質的に同一のＩＣＥを有するが（ＰＲ＝１．０）、霊長類では３種のポリエーテルのうち最も非効率的であるため（ＩＣＥ８．１±２．８％）、さらには検討しない。一方３’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴ（８）は霊長類で最も有効なキレート剤であり（１２．４±３．５％）、霊長類で良好に作用し（２２．５±７．１％）、４’−および５’−（ＣＨ３Ｏ）−ＤＡＤＦＴリガンド２［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4- hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］および５［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ- Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043］と類似する毒性プロファイル（腎毒性）を有することが予想され、これ以上検討しない。（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）は霊長類（２４．５±７．６％）およびラット（１０．６±４．４％）の両方で良好に作用し、ＰＲ２．３であり、第３の種であるヒトにおいてより高い成功の指標を示唆する。さらに、サルの尿中に排泄される鉄の比較的大きな部分が、患者の尿中でも見出される場合は、鉄バランス研究の性能が促進されるであろう。このキレート剤は、げっ歯類での前臨床毒性評価に進められる。
【００５６】
例において：フサオマキザルはWorld Wide Primates (Miami, FL)から入手した。雄のSprague-Dawleyラットは、Harlan Sprague-Dawley (Indianapolis, IN)から入手した。Cremophor RH-40は、BASF (Parsippany, NJ)から得た。超高純度の塩は、Johnson Matthey Electronics (Royston, U.K.)から購入した。全ての血液学的および生化学的検査［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferoxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173］はAntech Diagnostics (Tampa, FL)で実施した。原子吸収（ＡＡ）測定は、Perkin-Elmer model 5100 PC (Norwalk, CT)で行った。組織病理学分析は、Florida Vet Path (Bushnell, FL)により行った。
【００５７】
鉄非過負荷ラットの胆管カニューレ挿入については前に記載した。カニューレ挿入については前に記載した。胆汁試料は、雄のSprague-Dawleyラット（４００〜４５０ｇ）から３ｈ間隔で４８ｈまで収集した。尿試料（単数または複数）は、２４ｈ間隔で採取した。試料の収集および取扱いは、前に記載した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferoxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173; Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Vinson, J. R. T., Luchetta, G., Evans, K. M., Peter, H. and Jenny, H. -B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990,612,378-393］。
【００５８】
サル（３．５〜４ｋｇ）は、前の刊行物中に明記されているようにして、静脈内のデキストラン鉄により鉄を過負荷させ、約５００ｍｇの鉄／体重１ｋｇを供給した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Luchetta, G., Creary, E. A. and Peter, H. H. A Comparison of the Iron-Clearing Properties of l,2-Dimethyl-3-hydroxypyrid-4-one, l,2-Diethyl-3-hydroxypyrid-4-one, and Deferoxamine. Blood 1992,79,1882-1890］；血清のトランスフェリン鉄飽和は、７０〜８０％の間に上昇した。少なくとも２０半減期である６０ｄ［Wood, J. K., Milner, P. F. and Pathak, U. N. The Metabolism of Iron-dextran Given as a Total-dose Infusion to Iron Deficient Jamaican Subjects. Br. J. Haematol. 1968,14,119-129］が経過した後に、任意の動物を鉄キレート剤の評価実験に用いた。
【００５９】
糞便および尿試料を２４時間間隔で収集し、前に記載のようにして処理した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Creary, E. A., Daniels, R. D., Jr., King, W., Luchetta, G., Wiegand, J., Moerker, T. and Peter, H. H. A Comparative Study of the Iron-Clearing Properties of Desferrithiocin Analogues with Desferoxamine B in a Cebus Monkey Model. Blood 1993,81,2166-2173; Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Vinson, J. R. T., Luchetta, G., Evans, K. M., Peter, H. and Jenny, H. -B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990,612,378-393; Bergeron, R. J., Wiegand, J. and Brittenham, G. M. HBED: A Potential Alternative to Deferoxamine for Iron-Chelating Therapy. Blood 1998,91,1446-1452］。簡潔に述べると、収集は、試験薬剤の投与の４ｄ前に開始し、薬剤投与後さらに５ｄ続けた。鉄濃度は、他の刊行物に示されているように、フレーム原子吸光分析により決定した［Bergeron, R. J., Streiff, R. R., Wiegand, J., Vinson, J. R. T., Luchetta, G., Evans, K. M., Peter, H. and Jenny, H.-B. A Comparative Evaluation of Iron Clearance Models. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1990,612,378-393; Bergeron, R. J., Wiegand, J., Wollenweber, M., McManis, J. S., Algee, S. E. and Ratliff-Thompson, K. Synthesis and Biological Evaluation of Naphthyldesferrithiocin Iron Chelators. J. Med. Chem. 1996,39,1575-1581］。
【００６０】
鉄除去実験において、ラットには薬剤１〜９の単回の３００μｍｏｌ／ｋｇ用量を経口（ｐｏ）で与えた。化合物は、（１）水中の溶液（３）、または（２）目的化合物の単ナトリウム塩（１当量のＮａＯＨを蒸留水中の遊離酸の懸濁物に加えて調製（１〜２、４〜９））、として投与した。薬剤は、サルに対してはｐｏで７５μｍｏｌ／ｋｇ（６、９）または１５０μｍｏｌ／ｋｇ（１〜５、７〜８）の用量で与えた。薬剤はラットに対してと同様に調製したが、ただし２および７〜８については、４０％のCremophor RH-40／水に溶解して調製した。
【００６１】
キレート剤の理論的鉄排出は、２：１錯体に基づいて作成した。ラットおよびサルにおける効率は、別に記載のようにして計算した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., McCosar, B. H., Weimar, W. R., Brittenham, G. M. and Smith, R. E. Effects of C-4 Stereochemistry and C-4' Hydroxylation on the Iron Clearing Efficiency and Toxicity of Desferrithiocin Analogues. J. Med. Chem. 1999,42,2432-2440］。データは平均±平均の標準誤差として表した；ｐ値はスチューデント片側ｔ検定により作成し、ここで、分散の不均衡を仮定した；ｐ値＜０．０５を有意とした。
【００６２】
げっ歯類からの組織内分布試料の収集：雄のSprague-Dawleyラット（２５０〜３５０ｇ）に、上記のようにして調製した６および９の単ナトリウム塩を、３００μｍｏｌ／ｋｇ用量で単回のｓｃ注射で与えた。投与後０．５、１、２、および４ｈ（各時点ｎ＝３ラット）、動物をＣＯ２ガスに暴露して麻酔した。血液は、心穿刺によりクエン酸ナトリウムを含有するバキュテイナ（vacutainer）に得た。血液を遠心分離し、血漿を分析のために分離した。肝臓、心臓、腎臓、および膵臓を次に動物から取り出した。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）で処置した動物の組織試料は、前に記載のようにしてＨＰＬＣ解析用に調製した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4- thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］。
【００６３】
本研究において、（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）および（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（６）で処置したラットからの組織を、ＨＰＬＣ解析用に、これらを０．５ＮのＨＣｌＯ４中に１：３（ｗ／ｖ）の比率で均質化することにより調製した。次に、すすぎとして、ＣＨ３ＯＨを１：３（ｗ／ｖ）の比率で加え、混合物を−２０℃で３０分間保管した。この均質物を遠心分離した。上清を移動相Ａ（９５％緩衝液［２５ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、ｐＨ３．０］／５％ＣＨ３ＣＮ）で希釈し、撹拌し、および０．２μｍ膜でろ過した。分析的分離を、３１０ｎｍでのＵＶ検出で前に記載のようにしてDiscovery RP Amide C16ＨＰＬＣシステムで行った［Bergeron, R. J., Wiegand, J., Weimar, W. R., McManis, J. S., Smith, R. E. and Abboud, K. A. Iron Chelation Promoted by Desazadesferrithiocin Analogues: An Enantioselective Barrier. Chirality 2003,15,593-599; Bergeron, R. J., Wiegand, J., Ratliff-Thompson, K. and Weimar, W. R. The Origin of the Differences in (R)- and (S)- Desmethyldesferrithiocin: Iron-Clearing Properties. Ann. N. Y. Acad. Sci. 1998,850,202-216］。
【００６４】
移動相およびクロマトグラフィ条件は以下である：溶媒Ａ、５％ＣＨ３ＣＮ／９５％緩衝液；溶媒Ｂ、６０％ＣＨ３ＣＮ／４０％緩衝液。濃度は、較正曲線にあわせたピーク面積から、重み付けなし最小二乗直線回帰により、Rainin Dynamax HPLC Method Managerソフトウェア（Rainin Instrument Co.）を用いて計算した。この方法は、０．２５μＭの検出限界を有し、再現可能であり、１〜１０００μＭ範囲で線形であった。組織内分布データは平均値で表す；ｐ値はスチューデント片側ｔ検定にて生成し、この検定においては、分散の不均衡を仮定し、ｐ値＜０．０５を有意とした。
【００６５】
化合物４および７は前に公開された方法を用いて合成した［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ-Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043; Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Weimar, W. R., Park, J. -H., Eiler-McManis, E., Bergeron, J. and Brittenham, G. M. Partition-Variant Desferrithiocin Analogues: Organ Targeting and Increased Iron Clearance. J. Med. Chem. 2005,48,821-831］。試薬はAldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI)より購入し、Fisher Optimaグレードの溶媒を日常的に用いた。ＤＭＦは不活性雰囲気下で蒸留し、ＴＨＦはナトリウムおよびベンゾフェノンから蒸留した。反応は窒素雰囲気下で行い、有機抽出物は硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した。SiliCycle, Inc.からのシリカゲル４０−６３を、フラッシュカラムクロマトグラフィに用いた。
【００６６】
逆相カラムクロマトグラフィ用のＣ−１８は、Sigma Chemical Coから入手した。旋光度は、５８９ｎｍ（ナトリウムＤ線）でPerkin-Elmer 341偏光計を用いて行い、ｃはクロロホルム中の１００ｍＬ溶液における化合物のグラム数で表した濃度である。１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚで記録し、化学シフト（δ）は、ＣＤＣｌ３のテトラメチルシラン（示されず）またはＤ２Ｏの３−（トリメチルシリル）プロピオネート−２，２，３，３−ｄ４からのダウンフィールドの１００万分の一として表す。１３Ｃスペクトルは、１００ＭＨｚで実施し、化学シフト（δ）はＣＤＣｌ３（δ７７．１６）の残留溶媒共鳴を参照した１００万分の一として表す。結合定数（Ｊ）はヘルツ単位であり、基準ピークはＥＳＩ−ＦＴＩＣＲ質量スペクトルについて記録する。元素分析はAtlantic Microlabs (Norcross, GA)により行った。ＮＯＥ差スペクトルは５００ＭＨｚで得、試料は脱気せず、回転させず、プローブ温度は２７℃に調節した。１２については、濃度はＣＤＣｌ３中１５ｍｇ／０．６ｍＬであり、９については濃度は５ｍｇ／ｍＬのＤ２Ｏであった。
【００６７】
核オーバーハウサー効果（ＮＯＥ）を検討するための分離スペクトルを、低出力照射オフ共鳴（low-power irradiation off-resonance）と、次にメチレン水素についての共鳴で、３秒の前飽和期間、４５°パルス、および３秒の取得時間により得た。典型的には、１００〜３００回の取得を自由誘導減衰の各対について蓄積し、指数関数拡大（exponential line broadening）およびフーリエ変換により処理した。
ＮＯＥ差スペクトルを、照射オフ共鳴のスペクトルをオン共鳴前飽和によるスペクトルから差し引くことにより、表した。これらの差スペクトルを次に関連シグナルの積分により解析した。２つの水素標識ｇ（図１）およびｈ（図２）についての逆メチレン共鳴を−２００％の積分値に割り当て、次に、種々の他の共鳴の正のシグナル増強についての積分を、それらの親シグナルの増強パーセントとした。結果は、それぞれの差スペクトルの３または４つの複製からの平均の増強として報告する。
【００６８】
例１
２−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸イソプロピル（１０）
２−ヨードプロパン（８．９５ｇ、５２．６５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６．７９ｇ、５２．６５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（９０ｍＬ）中の４（７．４０ｇ、２９．２５ｍｍｏｌ）に続けて加え、溶液をｒｔで７２ｈ撹拌した。hivacでの溶媒除去後、残留物を１：１の０．５Ｍクエン酸／飽和ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ、２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、１％ＮａＨＳＯ３、Ｈ２Ｏ、および飽和ＮａＣｌの５０ｍＬ部分で洗浄し、溶液を蒸発させた。トルエン中２０％ＥｔＯＡｃを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによる精製により、７．９４ｇの１０（９２％）を黄色油として得た：
【表１】
【００６９】
例２
２−（２，３−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸エチル（１１）
ヨードエタン（８．６１ｇ、５５．２０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７．１３ｇ、５５．２０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の７（７．３６ｇ、２９．０６ｍｍｏｌ）に続けて加え、溶液をｒｔで４８ｈ撹拌した。hivacでの溶媒除去後、残留物を１：１の０．５Ｍクエン酸／飽和ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ、２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、１％ＮａＨＳＯ３、Ｈ２Ｏ、および飽和ＮａＣｌの１５０ｍＬ部分で洗浄し、溶媒を蒸発させた。ＤＣＭ中１０％ＥｔＯＡｃを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによる精製により、８．０１ｇの１１（９８％）を黄色油として得た：
【表２】
【００７０】
例３
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸イソプロピル（１２）
トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテル（３．１９ｇ、１９．４０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアゾジカルボキシレート（４．７３ｇ、２３．３９ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＨＦ（１２０ｍＬ）中の１０（５．６２ｇ、１９．０２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（５．９３ｇ、２２．６３ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴冷却しつつ続けて加えた。溶液を室温で５ｈ撹拌し、５℃に１６ｈ維持した。溶媒を回転蒸発により除去し、４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１００ｍＬ）を加えた。溶液を５℃で１２ｈ維持した；形成された固体をろ過した。ろ液を真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィ（５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）で精製して、４．３６ｇの１２（５２％）を黄色油として得た：
【表３】
【００７１】
例４
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（６）
ＣＨ３ＯＨ（３４ｍＬ）中の５０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（３．３４ｍＬ、９４ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（７０ｍＬ）中の１２（２．１４ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）に、氷浴で冷却しつつ加えた。反応混合物を室温で１８ｈ撹拌し、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を希釈ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で処理し、エーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。塩基性水相を氷中で冷却し、２ＮのＨＣｌでｐＨ＝２まで酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄した後、３ＮのＨＣｌに予め１５分間浸漬したガラス容器をこれ以降用いた。溶媒を回転蒸発で除去した後、１．８８ｇの６（９７％）をオレンジ色油として得た：
【表４】
【００７２】
例５
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸エチル（１３）
トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテル（１．７０ｇ、１０．３６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２．５３ｇ、１２．５０ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＨＦ（６０ｍＬ）中の１１（３．０ｇ、１０．１６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（３．１７ｇ、１２．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴冷却しつつ続けて加えた。溶液を室温で８ｈ撹拌し、５℃に４０ｈ維持した。溶媒を回転蒸発により除去し、４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（５０ｍＬ）を加えた。溶液を５℃で１２ｈ維持した；形成された固体をろ過した。ろ液を真空で濃縮し、５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルで溶出するカラムクロマトグラフィにより精製して、１．０８ｇの１３（２５％）をオレンジ色の油として得た。分析試料は、Ｃ−１８逆相カラムで、等容積の５０％水性ＭｅＯＨおよび４０％の水性ＭｅＯＨでそれぞれ溶出して精製した：
【表５】
【００７３】
例６
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（９）
ＣＨ３ＯＨ（１２０ｍＬ）中の５０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（１３．８８ｍＬ、２６６．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（２８０ｍＬ）中の１３（８．８９ｇ、２０．８０ｍｍｏｌ）に、氷浴で冷却しつつ加えた。反応混合物を室温で６ｈ撹拌し、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を希釈ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で処理し、塩基性水相を氷中で冷却し、２ＮのＨＣｌでｐＨ＝２まで酸性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１５０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を飽和ＮａＣｌ（３００ｍＬ）で洗浄した後、３ＮのＨＣｌに１５分間予め浸漬したガラス容器をこれ以降用いた。溶媒を回転蒸発で除去した後、Ｃ−１８逆相カラムにより５０％水性メタノール溶出して精製し、凍結乾燥して、４．９８ｇの９（６０％）をオレンジ色油として得た：
【表６】
【００７４】
表１．げっ歯類に経口投与された場合のデスフェリチオシン類似体の鉄除去活性、および化合物の分配係数
【表７】
【００７５】
ａ．げっ歯類において［ｎ＝３（６）、４（２、４、５、７、９）、５（３、８）、または８（１）］、用量は３００μｍｏｌ／ｋｇであった。化合物は蒸留水に溶解するか（３）、または、蒸留水中の遊離酸の懸濁液に１当量のＮａＯＨを添加して調製したそれらの単ナトリウム塩として（１、２、４〜９）与えた。各化合物の効率は、対照動物の鉄排泄を、処置した動物の鉄排泄から差し引くことにより計算した。数字は次に、理論的排出で割って、結果をパーセントで表す。胆汁および尿中に排泄された鉄の相対的百分率は、カッコ内に示す。
【００７６】
ｂ．データは、オクタノール層の部分のｌｏｇとして表す（ｌｏｇＰａｐｐ）；測定はＴＲＩＳ緩衝液、ｐＨ７．４中で、「振とうフラスコ」直接法を用いて行った。化合物１および２に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2003, 46, 1470-1477からのものである；化合物３に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである；化合物４および５に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043からのものである；化合物７および８に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2005, 45, 821-831からのものである。
ｃ．データは参考文献Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである。
ｄ．データは参考文献Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043からのものである。
ｅ．ＩＣＥは４８ｈの試料収集時点に基づく。
【００７７】
表２．フサオマキザル霊長類に経口投与された場合のデスフェリチオシン類似体の鉄除去活性、および化合物の分配係数
【表８】
【００７８】
ａ．サルにおいて［ｎ＝４（３〜７）、５（８）、６（１）、または７（２、９）］、薬剤はｐｏで７５μｍｏｌ／ｋｇ（６、９）または１５０μｍｏｌ／ｋｇ（１〜５、７〜８）の用量で与えた。化合物は蒸留水に溶解するか（３）、４０％Cremophorに溶解するか（２、７、８）、または蒸留水中の遊離酸の懸濁液に１当量のＮａＯＨを添加して調製したそれらの単ナトリウム塩として（１、４〜６、９）与えた。各化合物の効率は、薬剤投与前の４日間の鉄排出を平均し、これらの数値を、薬剤投与後の２日間の鉄クリアランスから差し引き、次に、理論的排出で割ることにより、計算した；結果をパーセントで表す。糞便および尿中に排泄された鉄の相対的百分率は、カッコ内に示す。
【００７９】
ｂ．データは、オクタノール層の部分のｌｏｇとして表す（ｌｏｇＰａｐｐ）；測定はＴＲＩＳ緩衝液、ｐＨ７．４中で、「振とうフラスコ」直接法を用いて行った。化合物１および２に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2003, 46, 1470-1477からのものである；化合物３に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである；化合物４および５に対して得た値は、Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S. and Bharti, N. The Design, Synthesis, and Evaluation of Organ- Specific Iron Chelators. J. Med. Chem. 2006,49,7032-7043からのものである；化合物７および８に対して得た値は、Bergeron et al, J. Med. Chem. 2005, 48, 821-831からのものである。
ｃ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 1999, 42, 2432-2440からのものである。
ｄ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2003, 46, 1470-1477からのものである。
ｅ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 2772-2783からのものである。
ｆ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2006, 49, 7032-7043からのものである。
ｇ．用量は７５μｍｏｌ／ｋｇである。
ｈ．データはBergeron et al, J. Med. Chem. 2005, 48, 821-831からのものである。
【００８０】
表３．デスフェリチオシンの鉄除去効率性能比
霊長類対げっ歯類における類似体
【表９】
【００８１】
表４．安息香酸ナトリウムで処置したげっ歯類ａにおけるリガンド−アルブミン結合
【表１０】
【００８２】
ａ．リガンド１は、ｐｏにより、その単ナトリウム塩として、蒸留水中の遊離酸の懸濁液に１当量のＮａＯＨを加えることにより調製して投与した。リガンド３は、蒸留水に溶解し、ｐｏにより投与した。安息香酸ナトリウムは、蒸留水に溶解し、ｓｃにて２５０ｍｇ／ｋｇ／用量で６用量与えた。安息香酸ナトリウムの初回用量は、キレート剤の０．５ｈ前に与えた；追加の用量は、その後の続く５ｈに、毎時間毎に与えた。
ｂ．非安息香酸塩１で処置した動物に対しｐ＜０．００１。
ｃ．非安息香酸塩３で処置した動物に対しｐ＜０．０５。
【００８３】
本発明はまた、上の式で表される化合物の鏡像異性体および鏡像異性体の混合物（例えばラセミ混合物）ならびにそれらの塩（例えば薬学的に許容し得る塩）、溶媒和物および水和物を含む。本発明の化合物は、平面偏光の平面を回転させる能力を有する、光学活性形態で存在することができる。光学活性化合物を記載する場合、接頭辞ＤとＬまたはＲとＳは、分子のそのキラル中心（単数または複数）についての絶対配置を示すのに用いる。接頭辞ｄとｌまたは（＋）と（−）は、化合物による平面偏光の回転の符号を表すのに用い、（−）またはｌは、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄの接頭辞の化合物は、右旋性である。与えられた化学構造について、立体異性体と呼ばれるこれらの化合物は、１または２以上のキラル炭素が互いに重ね合わせ不能な鏡像であることを除いて、同一である。他の異性体の正確な鏡像である特定の立体異性体はまた、鏡像異性体とも呼ぶことができ、かかる異性体の混合物はしばしば鏡像異性体混合物と呼ばれる。鏡像異性体の５０：５０の混合物を、ラセミ混合物と呼ぶ。
【００８４】
本明細書に記載された化合物の多くは、１または２以上のキラル中心を有することができ、したがって異なる鏡像異性形態で存在することができる。必要に応じて、キラル炭素はアスタリスク（＊）で示すことができる。本出願において、チアゾリンまたはチアゾリジン環の４位におけるキラル炭素をアスタリスクで示すことができるが、それはこの炭素の構造が特に興味深いためである。キラル炭素への結合が本発明の式において直線で示される場合、各キラル炭素の（Ｒ）と（Ｓ）構造の両方、およびしたがって、両鏡像異性体およびそれらの混合物が、式に包含されると理解される。当分野で用いられるように、キラル炭素についての絶対構造を特定することが望まれる場合、キラル炭素への結合は、くさび（平面の上の原子への結合）として示すことができ、その他は一連の短い平行線またはくさび（平面の下の原子への結合）として示すことができる。Cahn-Ingold-Prelogシステムを用いて、キラル炭素の（Ｒ）または（Ｓ）構造を割り当てることができる。チアゾリンまたはチアゾリジン環の４位におけるキラル炭素は、好ましくは（Ｓ）構造を有する。
【００８５】
本発明の化合物が１つのキラル中心を有する場合、不斉合成により調製されない化合物は、２つの鏡像異性形態で存在し、本発明はその鏡像異性体のどちらかまたは両方および鏡像異性体の混合物、例えばラセミ混合物と呼ばれる特定の５０：５０混合物を含む。鏡像異性体は、当業者に知られた方法により分解できる：例えば結晶化などによって分離できるジアステレオ異性体塩の形成（CRC Handbook of Optical Resolutions via Diastereomeric Salt Formation by David Kozma (CRC Press, 2001)を参照）；例えば結晶化、ガス液体または液体クロマトグラフィにより分解可能な、ジアステレオ異性誘導体または錯体の形成；１つの鏡像異性体の、鏡像異性体特異的試薬による選択反応、例えば酵素エステル化；または、キラル環境における、例えばキラル支持体上（例えば、結合キラルリガンドを有するシリカ）もしくはキラル溶媒の存在下での、ガス−液体または液体クロマトグラフィ。所望の鏡像異性体を、上述の分離手順の１つにより他の化学的実体へと変換する場合、所望の鏡像異性形態を遊離させるために、さらなるステップが必要とされることが理解されるであろう。
【００８６】
代替的に、特定の鏡像異性体を、光学活性試薬、基質、触媒または溶媒を用いる不斉合成により、または１つの鏡像異性体を他に不斉変換することにより、合成してもよい。
本発明の化合物のキラル炭素において特定の絶対構造を指定することは、化合物の指定された鏡像異性形態が、鏡像体過剰（ｅｅ）であるか、言い換えると、実質的に他の鏡像異性体がないことを意味すると理解される。例えば、化合物の「Ｒ」形態は、化合物の「Ｓ」形態を実質的に有さず、したがって、「Ｓ」形態の鏡像体過剰である。逆に、化合物の「Ｓ」形態は、化合物の「Ｒ」形態を実質的に有さず、したがって、「Ｒ」形態の鏡像体過剰である。
【００８７】
本明細書において、鏡像体過剰とは、特定の鏡像異性体が、鏡像異性体混合物中に５０％より多く存在することである。例えば、混合物が第１の鏡像異性体を８０％、および第２の鏡像異性体を２０％有する場合、第１の鏡像異性体の鏡像体過剰率は６０％である。本発明において、鏡像体過剰率は約２０％以上、特に約４０％以上、より特に約６０％以上、例えば７０％以上、例えば約８０％以上、例えば約９０％以上であることができる。特定の態様において、特定の絶対構造が指定される場合、示された化合物の鏡像体過剰率は少なくとも約９０％である。さらに特定の態様において、化合物の鏡像体過剰率は少なくとも約９５％、例えば少なくとも約９７．５％であり、例えば少なくとも約９９％の鏡像体過剰率である。
【００８８】
本発明の化合物が２または３以上のキラル炭素を有し、ここでＲ４およびＲ５は同一ではない場合、２つより多い光学異性体を有することができ、ジアステレオマー形態で存在可能である。例えば、２つのキラル炭素がある場合、化合物は４個までの光学異性体および２対の鏡像異性体（（Ｓ，Ｓ）／（Ｒ，Ｒ）および（Ｒ，Ｓ）／（Ｓ，Ｒ））を有することができる。鏡像異性体の対（例えば（Ｓ，Ｓ）／（Ｒ，Ｒ））は、互いに立体異性体の鏡像である。鏡像ではない立体異性体（例えば（Ｓ，Ｓ）および（Ｒ，Ｓ））は、ジアステレオマーである。ジアステレオマー対は当業者に知られた方法により分離することができ、例えば、クロマトグラフィまたは結晶化であり、各対のなかの個々の鏡像異性体は、上述のように分離することができる。本発明は、かかる化合物の各ジアステレオマーおよびその混合物を含む。
【００８９】
アルキル基は、分子内の飽和炭化水素であって、その炭素原子の１つからの単一の共有結合で該分子内の他の基に結合しているものである。アルキル基は環式または非環式、分枝または非分枝（直鎖）であることができる。アルキル基は典型的には、１個〜約１４個の炭素原子を有し、例えば１〜約６個の炭素原子、または１〜約４個の炭素原子である。低級アルキル基は１〜４個の炭素原子を有し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを含む。
環式の場合、アルキル基は典型的には約３〜約１０個の炭素原子を含み、例えば、約３〜約８個の炭素原子であり、例えばシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、またはシクロオクチル基である。
【００９０】
アリール基は、炭素環式芳香族基、例えばフェニル、ｐ−トリル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントラシル、および２−アントラシルなどを含む。アリール基はまた、以下などの複素環式芳香族基を含む：Ｎ−イミダゾリル、２−イミダゾリル、２−チエニル、３−チエニル、２−フラニル、３−フラニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、２−ピラニル、３−ピラニル、３−ピラゾリル、４−ピラゾリル、５−ピラゾリル、２−ピラジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリルおよび５−オキサゾリル。
アリール基はまた、融合多環芳香族環系であって、この中で炭素環、脂環、または芳香環または複素アリール環が、１または２以上の他の複素アリールもしくはアリール環に融合しているものを含む。例としては、２−ベンゾチエニル、３−ベンゾチエニル、２−ベンゾフラニル、３−ベンゾフラニル、２−インドリル、３−インドリル、２−キノリニル、３−キノリニル、２−ベンゾチアゾリル、２−ベンズオキサゾリル、２−ベンズイミダゾリル、１−イソキノリニル、３−イソキノリニル、１−イソインドリルおよび３−イソインドリルが挙げられる。
【００９１】
さらに本発明に含まれるのは、本明細書に記載の化合物の、塩および薬学的に許容し得る塩である。十分酸性の官能基、十分塩基性の官能基、またはその両方を有する、本明細書に開示された化合物は、多数の有機または無機塩基、および無機および有機酸類と反応して、塩を形成する。酸性の基は、１または２以上の上記の金属、およびアルカリ金属およびアルカリ土類金属（例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム）と共に、塩を形成することができる。さらに、酸性基はアミンと共に塩を形成することができる。本発明の化合物は、遷移金属塩、ランタニド金属塩、アクチニド金属塩、または主族金属塩として供給することができる。例えば塩は化合物のＧａ（ＩＩＩ）塩であり得る。遷移金属塩、ランタニド金属塩、アクチニド金属塩、または主族金属塩として、本発明の化合物は、金属と錯体を形成する傾向がある。例えば本発明の化合物が三座であり、これと塩を形成する金属が６個の配位部位を有する場合、金属錯体に対する２対１化合物が形成される。化合物の金属に対する比率は、金属のdenticityおよび金属上の配位部位により変化する（各配位部位が、本発明の化合物により充足されるのが好ましいが、ただし配位部位は、水酸化物、ハロゲン化物またはカルボン酸塩などの他のアニオンで充足されることもできる）。
【００９２】
代替的に、化合物は実質的に金属を含まない（例えば鉄非含有）塩でもよい。金属非含有塩は、特にアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩を包含することを意図しない。金属非含有塩は、例えば金属の過剰状態を患っている対象、または毒性金属暴露もしくは金属の限局性の濃度に苦しむ個人であって、そのため望ましくない効果が生じている前記個人に対して、有効に投与される。
【００９３】
塩基性基を有する化合物から酸性付加塩を形成するために一般に用いられる酸は、無機酸類、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸など、および有機酸類、例えばｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニル−スルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸などである。かかる塩の例は、以下を含む：水酸化物、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素、リン酸二水素、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオラート、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１、４−ジオエート（dioate）、ヘキシン−１、６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ガンマ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、マンデル酸塩など。
【００９４】
本明細書に開示された化合物は、それらの水和物、例えば半水和物、一水和物、二水和物、三水和物、四水和物など、および溶媒和物の形態において調製することができる。
三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病態を患う対象を、本発明の化合物または医薬化合物の治療的または予防的有効量で処置することができる。三価金属のキレート化に応答する病態の、１つの具体的な種類は、三価金属過剰状態（例えば、鉄過剰状態、アルミニウム過剰状態、クロム過剰状態）である。三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病態の他の種類は、三価金属の量が上昇した場合であり（例えば、血清または細胞中で）、例えば三価金属の貯蔵容量が不十分であるか、または金属貯蔵システムの異常により金属放出が生じる場合などである。
【００９５】
鉄過剰の状態または疾患は、全体的な鉄過剰または限局性の鉄過剰を特徴とする。全体的な鉄過剰状態は一般に、複数組織における鉄の過剰、または１個の生物を通しての過剰な鉄の存在が関与する。全体的な鉄過剰状態は、例えば食事性の鉄または輸血からの、対象による鉄の過剰な取込み、鉄の過剰な貯蔵および／または保持から生じ得る。全体的な鉄過剰状態の１つは原発性ヘモクロマトーシスであり、これは一般に遺伝病である。第２の全体的な鉄過剰状態は、続発性ヘモクロマトーシスであり、これは一般に複数回（慢性）の輸血から生じる。輸血は、サラセミアまたは鎌状赤血球貧血の対象に頻繁に必要とされる。食事性の鉄過剰の１種は、バンツー鉄沈着症と呼ばれ、これには高い鉄含量の自家醸造ビールの消化が関連する。
【００９６】
限局性の鉄過剰状態においては、過剰な鉄は、１または数種の細胞型または組織または特定器官に限定される。あるいは、過剰な鉄に関連する症状は、分離された器官、例えば心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓または脳などに限定される。限局性の鉄過剰は、神経障害または神経変性疾患、例えばパーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、神経フェリチン症（neuroferritinopathy）、筋萎縮性軸策硬化症および多発性硬化症などを誘発する可能性があると考えられている。金属キレート化または金属イオン封鎖から利益を受ける病態は、しばしば対象の組織における金属沈着と関連する。沈着は、上述のように、全体的または限局的に生じ得る。
【００９７】
酸化ストレスの低下を必要とする対象は、１または２以上の以下の状態を有し得る：還元剤のレベルの低下、活性酸素種のレベルの増加、抗酸化酵素（例えば、Ｃｕ／Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼ、Ｍｎスーパーオキシドジスムターゼ、グルタチオンレダクターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、チオレドキシン、チオレドキシンペルオキシダーゼ、ＤＴ−ジアフォラーゼ）における変異またはそのレベルの低下、金属結合タンパク質（例えば、トランスフェリン、フェリチン、セルロプラスミン、アルブミン、メタロチオネイン）における変異またはそのレベルの低下、スーパーオキシドを産生可能な突然変異酵素または過活動酵素（例えば、一酸化窒素シンターゼ、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼ、ＮＡＤＨオキシダーゼ、アルデヒドオキシダーゼ、ジヒドロオロテートデヒドロゲナーゼ、チトクロームｃオキシダーゼ）、および放射線傷害。還元剤、活性酸素種、およびタンパク質のレベルの増加または低下は、健康なヒトにおいて一般に見出されるかかる物質の量に対して決定される。
【００９８】
酸化ストレスの低下を必要とする対象は、虚血症状を患っている可能性がある。虚血症状は、例えば動脈狭窄または動脈の破損などから、血液の供給に機械的な障害がある場合に起こり得る。狭心症および心筋梗塞を起こし得る心筋虚血は、通常は冠動脈疾患による、心筋への不適当な血液循環から起こる。２４時間以内に回復した脳での虚血症状は、一過性虚血発作と呼ばれる。より長く持続した虚血症状である脳卒中は、不可逆的脳損傷を伴い、症状の種類および重篤度は、血液循環が絶たれた脳組織の位置および程度に依存する。虚血症状を患うリスクのある対象は一般に、アテローム性動脈硬化症、他の血管疾患、血液凝固傾向の増加、または心疾患を患っている。本発明の化合物は、これらの疾患の処置に用いることができる。
【００９９】
酸化ストレスの低下を必要とする対象は、炎症に苦しむものであることができる。炎症は、基本的な病的過程であって、外傷または、物理的、化学的もしくは生物的剤により生じる異常な刺激への応答において、血管および隣接組織に起きる細胞学的および化学的反応の複合体からなる。炎症性疾患は、延長された期間持続する炎症（すなわち慢性炎症）または組織を損傷する炎症を特徴とする。かかる炎症性疾患は、広範囲の組織、例えば気道、関節、腸管、および軟組織などに影響を与える。本発明の化合物は、これらの疾患の処置に用いることができる。
【０１００】
理論に結びついてはいないが、本発明の化合物は、その酸化ストレスを低下する能力を、様々なメカニズムを通して得ていると考えられる。１つのメカニズムにおいて、本化合物は金属に、特に酸化還元活性金属（例えば鉄）に結合し、該金属の全ての配位部位を充足する。金属の全ての配位部位が充足されると、酸化および／または還元剤は、該金属と相互作用して酸化還元サイクルを引き起こす能力が減少すると考えられる。他のメカニズムにおいては、本化合物は特定の酸化状態における金属を安定化させて、酸化還元サイクルに入りにくくする。さらに他のメカニズムにおいては、本化合物それ自体が抗酸化活性を有する（例えば、フリーラジカル捕捉、活性酸素種または窒素種の捕捉）。２００４年３月４日公開の米国出願公開第2004/0044220号、および２００４年７月８日公開の米国出願公開第2004/0132789号、および２００４年３月４日公開のＰＣＴ出願第W02004/017959号、２００３年１２月２５日公開の米国出願公開第2003/0236417号、および米国特許第6,083,966号、第6,559,315号、第6,525,080号、第6,521 ,652号に記載されているように、デスフェリチオシンおよびその誘導体および類似体は、固有の抗酸化活性を有することが知られており、これら出版物の内容は本明細書に参照として組み込まれる。
【０１０１】
ヒトにおける鉄過剰の減少は、癌の増殖の予防または制御を支援し得ることも報告されている［Ozaki, et al, JAMA, February 14, 2007-Vol. 297, No.6, pp 603-610; Kalinowski et al, "The evolution of iron chelators for the treatment of iron overload disease and cancer", Pharmacological Reviews, vol 57,4 pgs 547-83 (2005); Taetle et al, "Combination Iron Depletion Therapy", J. Nat. Cancer Inst., 81 , 1229-1235 (1989); Bergeron et al, "Influence of Iron on in vivo Proliferation and Lethality of L1210 Cells", J. Nutr., 115, 369-374 (1985)］。実際、Ozakiらは、鉄の蓄積は、鉄が触媒するフリーラジカル媒介性の臨界的生体分子への損傷を通して、および、確実な生化学的根拠に基づく細胞機能の改変を通して、疾患リスクに寄与するという仮説を報告している。しかし彼らはまた、鉄と疾患の関係は、不整合な知見のため基本的にまだ解明されていないことも報告している。最後に、Osakiらは、ヒトにおいて正常レベルに低下した鉄と関連する顕著な「全死因死亡疾患」の知見を支持するデータを報告している。
【０１０２】
「対象」は典型的にはヒトであるが、処置の必要な動物であってもよく、例えばコンパニオン・アニマル（例えばイヌ、ネコなど）、家畜（例えばウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギなど）および実験動物（例えばラット、マウス、モルモット、非ヒト霊長類など）であってよい。
本発明の化合物および医薬組成物は、適切な経路により投与することができる。好適な投与経路としては、経口、腹腔内、皮下、筋肉内、経皮、直腸内、舌下、静脈内、口腔または吸入を介するものが挙げられるが、これに限定されない。好ましくは、本発明の化合物および医薬組成物は、経口投与される。
【０１０３】
本発明の医薬組成物は、好ましくは、薬学的に許容し得る担体または希釈剤であって、化合物または混合物を、経口的、非経口的、静脈内、皮内、筋肉内、または皮下的、直腸内、吸入を介して、または口腔投与を介して、または経皮的に投与可能とするのに好適な、前記担体または希釈剤を含有する。
【０１０４】
活性成分は、従来の薬学的に許容し得る担体または希釈剤と混合または調合することができる。当業者は、投与の様式、従来用いられているビヒクルまたは担体、および活性剤についてどれが不活性であるかを、本発明の医薬組成物の調製および投与に利用できることを理解する。かかる方法、ビヒクルおよび担体の例は、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (1990)に記載されており、この文献は本明細書に参照として組み込まれる。
【０１０５】
対象において用いられる本発明の製剤は、剤を、このための１または２以上の許容し得る担体または希釈剤、および任意に他の治療成分と共に含む。担体または希釈剤は、製剤の他の成分と適合的であり、その受容個体に対して有害でないという意味において「許容し得る」ものでなければない。製剤は、単位剤形の形態で便利に提供することができ、薬学分野でよく知られた任意の方法で調製することができる。全ての方法は、剤を、１または２以上の補助成分を構成する担体または希釈剤と関連させるステップを含む。一般に製剤は、剤を担体と均一かつ緊密に関連させ、次に、必要に応じて、生成物をその単位用量に分割することにより、調製する。
【０１０６】
経口投与に好適な形態としては、当分野で認識されている手順により調製される、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、オブラート、チューインガムなどが挙げられる。かかる治療的に有用な組成物または調製物の活性化合物の量は、好適な投与量が得られるような量である。
【０１０７】
シロップ製剤は、一般に、化合物または塩の、例えばエタノール、グリセリンまたは水などの液体担体中の懸濁液または溶液および、香味料または着色剤からなる。組成物が錠剤形態の場合、固体製剤の調製に日常的に用いられている１または２以上の薬学的担体を用いることができる。かかる担体の例としては、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、ラクトースおよびスクロースが挙げられる。組成物がカプセル形態の場合、日常的に用いられている封入成形を用いることが一般に好適であり、例えば前述の担体を硬質ゼラチンカプセル殻内に用いる。組成物が軟質ゼラチン殻カプセルの形態の場合、分散物または懸濁液に日常的に用いる薬学的担体、例えば水性ゴム、セルロース、ケイ酸塩、または油が考えられ、これらを軟質ゼラチンカプセル殻に組み込む。
【０１０８】
経口投与に好適な製剤は従来、剤の無菌の水性調製物であって、好ましくは受容個体の血液と等張性であるものを含む。好適な担体溶液は、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、水、乳酸化リンガー溶液またはデキストロース（水中５％）を含む。かかる製剤は、剤を水と混合して溶液または懸濁液を生成し、これを無菌の容器に充填し、細菌汚染に抗して封入することにより、便利に調製することができる。好ましくは、無菌材料を、無菌の製造条件下で用いて、最終的な殺菌の必要性を除外する。
【０１０９】
かかる製剤は、任意に、１または２以上の追加成分であって、ヒドロキシ安息香酸メチル、クロロクレゾール、メタクレゾール、フェノールおよび塩化ベンズアルコニウムなどの保存剤を含む前記成分を含むことができる。かかる物質は、製剤が複数用量の容器内で供給される場合に特に有用である。緩衝液も、製剤に好適なｐＨ値を与えるために含むことができる。
【０１１０】
好適な緩衝物質は、リン酸ナトリウムおよび酢酸ナトリウムを含む。塩化ナトリウムまたはグリセリンは、製剤を血液と等張性にするために用いることができる。
必要に応じて、製剤を窒素などの不活性雰囲気下で容器に充填することができ、例えば封入アンプル内などに、単位用量または複数用量形態で便利に提供することができる。
【０１１１】
当業者は、本発明の方法に従って対象に投与される、本発明の組成物の種々の成分の量は、上述の要因に依存することを認識する。
典型的な座剤製剤は、この方法で投与された場合に活性である化合物またはその薬学的に許容し得る塩と、結合剤および／または湿潤剤、例えば高分子グリセロール、ゼラチン、カカオバター、または他の低溶解性植物ろうもしくは脂質を含む。
【０１１２】
典型的な経皮製剤は、従来の水性または非水性のビヒクル、例えばクリーム、軟膏、ローション、もしくはペーストなどを含むか、または薬用のプラスチック、パッチもしくは膜の形態である。
吸入用の典型的な組成物は、ジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンなどの従来の噴霧剤を用いたエアロゾルの形態で投与可能な、溶液、懸濁液または乳濁液の形態である。
【０１１３】
本発明の化合物または医薬組成物の治療有効量は、各々の場合、いくつかの要因に、例えば処置すべき対象の健康、年齢、性別、寸法および状態、投与の意図される様式、および対象の意図された用量形態を取り入れる能力などに特に依存する。活性剤の治療有効量とは、処置される状態に対する所望の影響を有するのに十分な量である。金属イオンのキレート化または封鎖により処置可能な状態を有する対象を処置する方法において、活性剤の治療有効量は、例えば、対象での金属の負荷量を低下させるのに、金属イオンに関連する症状を低減するのに、または金属の存在と関連する症状の発症および／または重篤度を予防、阻害または遅延させるのに十分な量である。その処置が必要な対象において酸化ストレスを低下させる方法において、活性剤の治療有効量は、例えば、酸化ストレスに関連する症状を低減するのに、または酸化ストレスに関連する症状の発症および／または重篤度を予防、阻害または遅延させるのに十分な量である。対象に投与する、本発明の化合物の典型的な１日の総用量は（体重７０ｋｇの対象を仮定すると）、約１０ｍｇ〜１．０ｇである。
【０１１４】
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］、および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］両方の合成の、代替的アプローチを以下に記載する。
【０１１５】
別の場所に記載された方法において［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5- Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］の合成が実施されている；（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１）を、そのイソプロピルエステルに９９％の収率で変換した。４’−ヒドロキシルの、トリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルを用いたミツノブ条件下（ＴＨＦ中のジイソプロピルアゾジカルボキシレートおよびトリフェニルホスフィン）でのアルキル化、ろ過、およびクロマトグラフィにより、３のイソプロピルエステルを、７６％の収率で得た。エステルの鹸化により、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）を９５％の収率で得て、全体で７１％の収率であった。
【０１１６】
代替的に、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１４）のエチルエステルの選択的アルキル化を、アセトン中のトリ（エチレングリコール）モノメチルエーテルのトシレート（１５、１．０当量）および炭酸カリウム（２．０当量）を加熱することにより実現して、マスクしたキレート剤１６を８２％収率で得た（図６；スキーム１）。前述のようなエチルエステル１６の切断により、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（３）を９５％の収率で得た。リガンド３への新しい経路は、７１％より高い、全体での収率７８％を与えた；さらに、スキーム１におけるポリエーテル鎖の結合は、安価な試薬を用いており、酸化トリフェニルホスフィンと１，２−ヒドラジンジカルボン酸ジイソプロピルの形成がなく、精製を単純化する。
【０１１７】
上記の合成において、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］の合成を実施する：適切なニトリルによるアミノ酸環化から８８％の収率で作られた、（Ｓ）−２−（２，３−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸を、そのエチルエステルに９８％の収率で変換した。しかし、キレート剤９への残りの２つのステップは、１５％のみの収率であった。ポリエーテル鎖をミツノブ条件下で３’−ヒドロキシルに付加し、９のエチルエステルを２５％の収率で生成した。逆相カラム上での精製後、エステルの加水分解により９を６０％の収率で得て、全体で１３％の収率を得た。
【０１１８】
より効率的な（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成を、図６；スキーム２に示す。より妨害されていない２，３−ジヒドロキシベンゾニトリル（１７）のフェノール基［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Weimar, W. R., Park, J. -H., Eiler-McManis, E., Bergeron, J. and Brittenham, G. M. Partition- Variant Desferrithiocin Analogues: Organ Targeting and Increased Iron Clearance. J. Med. Chem. 2005,48,821-831］を、ＤＭＳＯ中のトシレート１５（１．３当量）および水素化ナトリウム（２．１当量）を用いて室温でアルキル化し、１８を７０％のクロマトグラフィの収率で生成した。したがって、トリエーテル鎖は、ミツノブ結合に比べてほぼ３倍の収率で結合し、一方やっかいな副産物は避けることができた。ｐＨ６にて緩衝された水性ＣＨ３ＯＨ中の（Ｓ）−α−メチルシステイン（１９）によるニトリル１８の環化縮合により、（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ（９）の合成を９０％の収率で完了した。異常なアミノ酸１９が、スキーム２の最終ステップまで導入されないため、カルボキシル基は保護を必要としない。９の全体の収率は６３％であり、前の経路からよりはるかに高い。
【０１１９】
例７
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（３）
ＣＨ３ＯＨ（９０ｍＬ）中の５０％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（１０．４１ｍＬ、１９９．５ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（２００ｍＬ）中の１６（６．５４ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）に、氷浴冷却しつつ加えた。反応混合物を室温で１６ｈ撹拌し、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を希釈ＮａＣｌ（１５０ｍＬ）で処理し、エーテル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。塩基性水相を氷で冷却し、２ＮのＨＣｌで
【数５】
に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を飽和ＮａＣｌ（２００ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。高真空下での乾燥により、５．６７ｇの３をオレンジ色の油として得た（９２％）［Bergeron, R. J., Wiegand, J., McManis, J. S., Vinson, J. R. T., Yao, H., Bharti, N. and Rocca, J. R. (S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4- methyl-4-thiazolecarboxylic Acid Polyethers: A Solution to Nephrotoxicity. J. Med. Chem. 2006,49,2772-2783］：
【表１１】
【０１２０】
例８
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸（９）
化合物１８（７．６３ｇ、２７．１ｍｍｏｌ）、脱気した０．１Ｍ、ｐＨ５．９５のリン酸緩衝液（２００ｍＬ）、１９（６．９８ｇ、４０．７ｍｍｏｌ）、およびＮａＨＣＯ３（４．３３ｇ、５１．５ｍｍｏｌ、部分づつ）を、順番に、蒸留した脱気ＣＨ３ＯＨ（２００ｍＬ）に加えた。ｐＨ６．２〜６．６の反応混合物を、７０℃で７２ｈ加熱した。室温に冷却後、溶媒の大部分を回転蒸発で除去した。残留物を８％ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）に溶解し、ＣＨＣｌ３（３×１００ｍＬ）で抽出した。水性部分を氷水浴中で冷却し、５ＮのＨＣｌで
【数６】
に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を飽和ＮａＣｌで洗浄し、真空で濃縮した。高真空下での乾燥により、９．７４ｇの９（９０％）をオレンジ色の油として得た：
【表１２】
【０１２１】
例９
（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸エチル（１６）
フレーム（flame）活性化Ｋ２ＣＯ３（５．０５ｇ、３６．６ｍｍｏｌ）と続いてアセトン（５０ｍＬ）中の１５（１１．１１ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）を、アセトン（３００ｍＬ）中の１４（９．３５ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物を還流で３日間加熱した。追加のＫ２ＣＯ３（４．５９ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）およびアセトン（５ｍＬ）中の１５（２．１２ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を還流で１日加熱した。室温に冷却後、固体をろ過し、溶媒を回転蒸発で除去した。残留物を１：１の０．５Ｍクエン酸／飽和ＮａＣｌ（３２０ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を蒸留Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２００ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルで抽出するフラッシュカラムクロマトグラフィによる精製により、１２．０ｇの１６（８４％）を油として得た：
【表１３】
【０１２２】
例１０
２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）ベンゾニトリル（１８）
化合物１７（５．３ｇ、３９．２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＳＯ（６０ｍＬ）中の６０％ＮａＨ（３．１３ｇ、７８．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、オーブン乾燥ガラス容器を用いて加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した後、ＤＭＳＯ（２５ｍＬ）中の１５（１２．４９ｇ、３９．２２ｍｍｏｌ）を導入した。室温で２４ｈ攪拌後、反応混合物を撹拌しつつ冷水（１００ｍＬ）に注ぎ、ＣＨＣｌ３（３×１００ｍＬ）で抽出した。水相を６ＮのＨＣｌで
【数７】
に酸性化し、ＣＨＣｌ３（５×６０ｍＬ）で抽出した。後者のＣＨＣｌ３抽出物を真空で濃縮した。１０％ＣＨ３ＯＨ／ＣＨＣｌ３で溶出する重力によるカラムクロマトグラフィを用いた精製により、７．８４ｇの１８（７０％）を油として得た：
【表１４】
【０１２３】
本明細書における発明の記載は、３，６，９−トリオキサデシルオキシ基をデスアザデスフェリチオシン（ＤＡＤＦＴ）芳香環の種々の位置に導入することの、鉄クリアランスへの影響を実証し、および器官分布について記載する。３種のＤＡＤＦＴポリエーテルを評価する：（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、３］、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−５−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−５’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、６］、および（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−３−（３，６，９−トリオキサデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸［（Ｓ）−３’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ−ＰＥ、９］。げっ歯類および霊長類における鉄除去効率（ＩＣＥ）は、どの位置の異性体を評価するかに非常に感受性が高いことが示され、げっ歯類における器官分布も同様である。前記ポリエーテルは一律に、げっ歯類においてそれぞれの対応する親リガンドより高いＩＣＥを有し、これは、in vivoでのリガンド−血清アルブミン結合試験と整合する。リガンド９は、げっ歯類において最も活発なポリエーテル類似体であり、これはまた霊長類においても非常に有効であり、ヒトにおける高い成功を示唆する。さらに、この類似体はまた、他のキレート剤より、霊長類の尿中の鉄をより多く排出することが示されている。
【０１２４】
本発明のいくつかの態様をここに説明したが、当業者には、前述は単に説明であり、例示としてのみ提供されており、限定的ではないことが明らかである。多数の改変および他の態様が当業者の範囲内であり、本発明の範囲およびその任意の均等物に包含されることが意図される。本発明に対する変更は、当業者に容易に明らかであり、本発明はそれらの変更も含むことが意図される。さらに、多数の改変が当業者には容易に可能であるため、本発明を例示され説明された正確な構成および操作に限定することは意図されず、したがって全ての好適な改変および均等物は、本発明の範囲内に包含されるものである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてもよく、およびこれらはＨ、１４個までの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル（例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチル）、またはアリールアルキル（ここでアリール部分はヒドロカルビルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、前記アリールアルキル基は１４個までの炭素原子を有する）であってもよく、Ｒ２は任意に１４個までの炭素原子を有するアルコキシであり；
Ｒ３は、［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｘ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｙ−アルキルであり；
ｎは、独立して、１〜８の整数であり；
ｘは、１〜８の整数であり；
ｙは、０〜８の整数であり、および
Ｒ３Ｏは、フェニル環上の４位以外の任意の位置を占めてよい、
で表される、比較的非毒性のデスアザデスフェリチオシン類似体、またはその塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ１が、ＨまたはＣＨ３である、請求項１に記載の類似体。
【請求項３】
Ｒ２が、ＨまたはＣＨ３Ｏである、請求項１に記載の類似体。
【請求項４】
Ｒ３−Ｏが、Ｏ−［（ＣＨ２）２−Ｏ］３−ＣＨ３である、請求項１に記載の類似体。
【請求項５】
式：
【化２】
で表される、請求項１に記載の類似体。
【請求項６】
式：
【化３】
で表される、請求項１に記載の類似体。
【請求項７】
対象における、三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病的状態を処置するための方法であって、該対象に、請求項１に記載の類似体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項８】
三価金属が、鉄である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
病的状態が、鉄過剰である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
病的状態が、糖尿病である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
病的状態が、肝疾患である、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
病的状態が、フリードライヒ失調症（ＦＲＤＡ）である、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
病的状態が、心疾患である、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
病的状態が、癌である、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ１が、ＨまたはＣＨ３である、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ２が、ＨまたはＣＨ３Ｏである、請求項８に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ３−Ｏが、Ｏ−［（ＣＨ２）２−Ｏ］３−ＣＨ３である、請求項８に記載の方法。
【請求項１８】
類似体が、式：
【化４】
で表される、請求項８に記載の方法。
【請求項１９】
類似体が、式：
【化５】
で表される、請求項８に記載の方法。
【請求項２０】
三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病的状態を処置するための医薬組成物であって、請求項１に記載の少なくとも１種の類似体および、これのための薬学的に許容し得る担体の治療有効量を含む、前記組成物。
【請求項２１】
三価金属が、鉄である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
病的状態が、鉄過剰である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
病的状態が、糖尿病である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２４】
病的状態が、肝疾患である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２５】
病的状態が、フリードライヒ失調症（ＦＲＤＡ）である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２６】
病的状態が、心疾患である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２７】
病的状態が、癌である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２８】
Ｒ１が、ＨまたはＣＨ３である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２９】
Ｒ２が、ＨまたはＣＨ３Ｏである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３０】
Ｒ３−Ｏが、Ｏ−［（ＣＨ２）２−Ｏ］３−ＣＨ３である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３１】
類似体が、式：
【化６】
で表される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３２】
類似体が、式：
【化７】
で表される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３３】
包装材料および該包装材料内に含有される医薬剤を含む製品であって、ここで該医薬剤が、三価金属の過剰を患う対象の処置に有効であり、ここで該包装材料が、該医薬剤を三価金属の過剰に関連する症状の緩和のために使用可能であることを示すラベルを含み、またここで、該医薬剤が、請求項１に記載の類似体である、前記製品。
【請求項１】
式：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてもよく、およびこれらはＨ、１４個までの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル（例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチル）、またはアリールアルキル（ここでアリール部分はヒドロカルビルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、前記アリールアルキル基は１４個までの炭素原子を有する）であってもよく、Ｒ２は任意に１４個までの炭素原子を有するアルコキシであり；
Ｒ３は、［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｘ−［（ＣＨ２）ｎ−Ｏ］ｙ−アルキルであり；
ｎは、独立して、１〜８の整数であり；
ｘは、１〜８の整数であり；
ｙは、０〜８の整数であり、および
Ｒ３Ｏは、フェニル環上の４位以外の任意の位置を占めてよい、
で表される、比較的非毒性のデスアザデスフェリチオシン類似体、またはその塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ１が、ＨまたはＣＨ３である、請求項１に記載の類似体。
【請求項３】
Ｒ２が、ＨまたはＣＨ３Ｏである、請求項１に記載の類似体。
【請求項４】
Ｒ３−Ｏが、Ｏ−［（ＣＨ２）２−Ｏ］３−ＣＨ３である、請求項１に記載の類似体。
【請求項５】
式：
【化２】
で表される、請求項１に記載の類似体。
【請求項６】
式：
【化３】
で表される、請求項１に記載の類似体。
【請求項７】
対象における、三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病的状態を処置するための方法であって、該対象に、請求項１に記載の類似体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項８】
三価金属が、鉄である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
病的状態が、鉄過剰である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
病的状態が、糖尿病である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
病的状態が、肝疾患である、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
病的状態が、フリードライヒ失調症（ＦＲＤＡ）である、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
病的状態が、心疾患である、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
病的状態が、癌である、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ１が、ＨまたはＣＨ３である、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ２が、ＨまたはＣＨ３Ｏである、請求項８に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ３−Ｏが、Ｏ−［（ＣＨ２）２−Ｏ］３−ＣＨ３である、請求項８に記載の方法。
【請求項１８】
類似体が、式：
【化４】
で表される、請求項８に記載の方法。
【請求項１９】
類似体が、式：
【化５】
で表される、請求項８に記載の方法。
【請求項２０】
三価金属のキレート化または金属イオン封鎖に応答する病的状態を処置するための医薬組成物であって、請求項１に記載の少なくとも１種の類似体および、これのための薬学的に許容し得る担体の治療有効量を含む、前記組成物。
【請求項２１】
三価金属が、鉄である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
病的状態が、鉄過剰である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
病的状態が、糖尿病である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２４】
病的状態が、肝疾患である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２５】
病的状態が、フリードライヒ失調症（ＦＲＤＡ）である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２６】
病的状態が、心疾患である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２７】
病的状態が、癌である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２８】
Ｒ１が、ＨまたはＣＨ３である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２９】
Ｒ２が、ＨまたはＣＨ３Ｏである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３０】
Ｒ３−Ｏが、Ｏ−［（ＣＨ２）２−Ｏ］３−ＣＨ３である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３１】
類似体が、式：
【化６】
で表される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３２】
類似体が、式：
【化７】
で表される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項３３】
包装材料および該包装材料内に含有される医薬剤を含む製品であって、ここで該医薬剤が、三価金属の過剰を患う対象の処置に有効であり、ここで該包装材料が、該医薬剤を三価金属の過剰に関連する症状の緩和のために使用可能であることを示すラベルを含み、またここで、該医薬剤が、請求項１に記載の類似体である、前記製品。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公表番号】特表２０１０−５２１４７１（Ｐ２０１０−５２１４７１Ａ）
【公表日】平成２２年６月２４日（２０１０．６．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５５３６４５（Ｐ２００９−５５３６４５）
【出願日】平成２０年３月１４日（２００８．３．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００３４３３
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１１５４３３
【国際公開日】平成２０年９月２５日（２００８．９．２５）
【出願人】（５０１４５３３０７）ユニバーシティー オブ フロリダ リサーチ ファンデーション， インク． (2)
【住所又は居所原語表記】２２３ Ｇｒｉｎｔｅｒ Ｈａｌｌ Ｐ．Ｏ． Ｂｏｘ １１５５００ Ｇａｉｎｅｓｖｉｌｌｅ， Ｆｌｏｒｉｄａ ３２６０６ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年６月２４日（２０１０．６．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月１４日（２００８．３．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００３４３３
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１１５４３３
【国際公開日】平成２０年９月２５日（２００８．９．２５）
【出願人】（５０１４５３３０７）ユニバーシティー オブ フロリダ リサーチ ファンデーション， インク． (2)
【住所又は居所原語表記】２２３ Ｇｒｉｎｔｅｒ Ｈａｌｌ Ｐ．Ｏ． Ｂｏｘ １１５５００ Ｇａｉｎｅｓｖｉｌｌｅ， Ｆｌｏｒｉｄａ ３２６０６ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ
【Ｆターム（参考）】
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