トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸
以下の式の化合物であって、
遊離酸として、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸と称される化合物、またはその薬学的に受容可能な塩、水和物、および結晶形態の水和物；医薬組成物；ならびに使用方法が開示される。
遊離酸として、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸と称される化合物、またはその薬学的に受容可能な塩、水和物、および結晶形態の水和物；医薬組成物；ならびに使用方法が開示される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、この化合物の薬学的に受容可能な塩および結晶形態ならびにそれらの調製およびその化合物を使用する治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂質異常症は、循環器疾患（ＣＤ）の主要危険因子である。低密度コレステロール（ＬＤＬ−ｃ）の正常値または上昇値のいずれかを伴う高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−ｃ）の低い血漿中濃度は、アテローム性動脈硬化症および関連する冠動脈疾患の発症の重大な危険因子である。コレステリル（またはコレステロール）エステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）は、ＨＤＬ中のコレステリルエステルを高トリグリセリドリポタンパク質中のトリグリセリドに交換することを促進する糖タンパク質である。ＣＥＴＰ活性の最終結果は、ＨＤＬコレステロールの低下およびＬＤＬコレステロールの増加である。リポタンパク質プロファイルへのこの影響は、ＣＨＤリスク上昇を示す脂質プロファイルを有する対象者において特にアテローム生成誘発性（ｐｒｏ−ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ）であると考えられている。
【０００３】
特許文献１は、循環器疾患の治療に有用なＲ１−Ｒ６が記載された以下の構造を有する特定の化合物を開示している。
【化１】
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第０６／００２３４２号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上述の開示があるにも関わらず、アテローム性動脈硬化症および／または脂質異常症を含む循環器疾患を治療するのに有用な効果的化合物に対する必要性が多く存在する。
【０００６】
経口投与を介して循環器疾患を治療するのに有効であり、酸性環境（例えば、胃の中）において安定な化合物を提供する必要がある。更に、より効果的な治療のためには、化合物は、一旦投与された場合、十分に高いバイオアベイラビリティおよび／または経口曝露を示す必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、これらの必要性に対処し、循環器疾患（例えば、限定されないが、脂質異常症およびアテローム性動脈硬化症）の治療に適した化合物を提供する。本発明は、特に有利でかつ予期せぬ特性を示す化合物を提供する。本発明の特許請求された化合物の物理的特性および薬理学的特性は、当該化合物を経口投与用の錠剤に製剤化するのに特に適している。特に有利な特性としては、とりわけ、より高い安定性、溶解性、および／またはバイオアベイラビリティが挙げられる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明は、以下に例示した式Ｉの構造を有するトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ Ｉｎｄｅｘ Ｎａｍｅに従って特定された（本願明細書においてＢＣＣＡと称される）である化合物、および、この化合物の薬学的に受容可能な塩を提供する。
【化２】
【０００９】
化合物（ＢＣＣＡ）は、溶媒和物（本願明細書においてＢＣＣＡ・溶媒和物と称される）および水和物（本願明細書においてＢＣＣＡ・水和物と称される）として、遊離酸（本願明細書においてＢＣＣＡ遊離酸と称される）またはその薬学的に受容可能な塩であり得る。溶媒和物分子としては、水（水和物として）、メタノール、エタノール、ギ酸、酢酸、およびイソプロパノールが挙げられる。
【００１０】
本発明は、ＢＣＣＡである化合物、その薬学的に受容可能な塩、またはその水和物もしくは溶媒和物を提供する。一つの形態において、ＢＣＣＡ化合物は、遊離酸として提供される。他の形態において、ＢＣＣＡは、結晶形態のＢＣＣＡ・水和物またはＢＣＣＡ（遊離酸または塩のいずれかとして）・溶媒和物として提供される。更に他の形態において、本発明は、ＢＣＣＡ・水和物またはＢＣＣＡ・溶媒和物から無定形の固体形態までのＢＣＣＡを提供する。
【００１１】
本発明は、（ａ）２θにて７．５、９．２、１０．７、および１５．５＋／−０．２；（ｂ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１５．０、１５．５、および１９．５＋／−０．２；または（ｃ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１１．３、１５．０、１５．５、１７．７、１９．５、および２５．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・水和物である化合物を提供する。
【００１２】
別の形態において、本発明は、（ａ）１７５．６、１６８．０、６１．１、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；（ｂ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、６１．１、４５．０、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；または（ｃ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、１３９．９、１３６．３、６１．１、５３．０、４９．８、４５．０、２１．２、および１８．２＋／−０．２ｐｐｍにてアダマンタン（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照標準とするピークを含む固相ＮＭＲスペクトルにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・水和物である化合物を提供する。
【００１３】
更に他の形態において、ＢＣＣＡは、（ａ）２θにて７．５、９．２、１０．７、および１５．５±０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターン、または、（ｂ）１７５．６、１６８．０、６１．１、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍにてアダマンタイン（ａｄａｍａｎｔｉｎｅ）（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照基準とするピークを含む固相ＮＭＲスペクトル、のうちの少なくとも１つにより特定された結晶形態のＢＣＣＡ・水和物として提供される。
【００１４】
本発明は、（ａ）２θにて５．５、９．０、１４．３、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または（ｂ）２θにて５．５、９．０、１４．３、１７．５、１８．２、１９．４、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または（ｃ）２θにて５．５、９．０、１３．２、１３．６、１４．３、１５．２、１７．５、１８．２、１９．４、１９．８、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・ヘミ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・ヘミエタノール溶媒和物である化合物を提供する。
【００１５】
本発明は、（ａ）２θにて１５．４、１６．９、１８．２、および１８．６＋／−０．２；または（ｂ）２θにて１５．４、１５．７、１６．９、１８．２、１８．６、１９．５、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２；または（ｃ）２θにて１３．０、１３．９、１５．４、１５．７、１６．９、１６．４、１８．２、１８．６、１９．５、２０．８、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・ギ酸溶媒和物である化合物を提供する。
【００１６】
本発明は、（ａ）２θにて１２．９、１５．１、１８．４、１９．４、および２０．８＋／−０．２；または（ｂ）２θにて１２．９、１３．８、１５．１、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、および２０．８＋／−０．２；または（ｃ）２θにて１１．００、１２．９、１３．８、１５．１、１５．６、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、２０．８、および２１．７＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・酢酸溶媒和物である化合物を提供する。
【００１７】
本発明は、（ａ）２θにて５．６、１１．３、１２．６、および１７．９＋／−０．２；または（ｂ）２θにて５．６、８．０、１１．３、１２．６、１７．９、２０．４、および２４．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡｔｅｒｔブチルアミン塩・イソプロパノール溶媒和物である化合物を提供する。
【００１８】
別の形態において、本発明は、水（水和物とも称される）、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ギ酸、及び酢酸から選択される溶媒和物として、ＢＣＣＡ、またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。ＢＣＣＡ対溶媒和物のモル比は、約１：０．３から約１：１まで、より好ましくは、約１：０．５から約１：１＋／−０．２（ＢＣＣＡまたは塩：溶媒和物）までの間であり得る。好ましい溶媒和物としては、水、イソプロパノールおよびエタノールが挙げられる。
【００１９】
別の形態において、本発明は、薬学的に受容可能な塩としてＢＣＣＡを提供する。この薬学的に受容可能な塩に好ましいカチオンは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、及びｔｅｒｔ−ブチルアミン（及びｔｅｒｔ−ブチルアンモニウム）から選択され得る。より好ましいカチオンは、ナトリウム、カルシウムおよびｔｅｒｔ−ブチルアミンである。
【００２０】
本発明は、ＢＣＣＡ遊離酸として実質的に純粋なＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩、ＢＣＣＡ・水和物、ＢＣＣＡ・溶媒和物（またはＢＣＣＡ・水和物）および結晶形態のＢＣＣＡ塩・溶媒和物（個々に「参照ＢＣＣＡ形態（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｄ ＢＣＣＡ ｆｏｒｍ）」）を提供する。本願明細書において使用する場合、用語「実質的に純粋な」とは、８０％ｗ／ｗより多い参照ＢＣＣＡ形態を含む組成物、好ましくは９５％ｗ／ｗより多い参照ＢＣＣＡ形態を含む組成物、および更により好ましくは９８％ｗ／ｗより多い参照ＢＣＣＡ形態を含む組成物をいう。特に好ましい態様において、本発明は、実質的に純粋な結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を提供する。
【００２１】
本発明は、ＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤のうちの少なくとも１つを含む、医薬組成物を提供する。選択された形態において、この医薬組成物は、ＢＣＣＡ遊離酸として実質的に純粋なＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩、ＢＣＣＡ・溶媒和物、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物または結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を含む。特に好ましい態様において、この医薬組成物は、実質的に純粋な結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を含む。
【００２２】
本発明はまた、循環器疾患の患者を治療する方法であって、この患者に治して有効量のＢＣＣＡを投与することを含む方法を提供する。好ましい形態において、この方法は、ＢＣＣＡ・水和物としてＢＣＣＡを投与することを含む。更に他の形態において、この方法は、結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物または結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を投与することを含む。
【００２３】
本発明は、循環器疾患（例えば、限定されないが脂質異常症およびアテローム性動脈硬化症）を治療するための医薬を製造するための本発明に従うＢＣＣＡ（ＢＣＣＡ遊離酸またはその薬学的に受容可能な塩、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物、ＢＣＣＡ・水和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・水和物として）の使用を提供する。
【００２４】
本発明は、医薬としてＢＣＣＡ（本発明に従うＢＣＣＡ遊離酸；ＢＣＣＡ塩・溶媒和物、ＢＣＣＡ・水和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物として）を提供する。本発明はまた、治療に使用するためのＢＣＣＡ（本発明に従うＢＣＣＡ遊離酸；またはＢＣＣＡ塩・溶媒和物、ＢＣＣＡ・水和物、結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物）を提供する。
【００２５】
本発明は、循環器疾患（例えば、限定されないが脂質異常症およびアテローム性動脈硬化症）の治療における使用のためのＢＣＣＡ（本発明に従うＢＣＣＡ遊離酸；またはＢＣＣＡ・水和物、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物として）を提供する。
【００２６】
本発明はまた、式Ｉの化合物、またはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、以下に示した構造
【化３】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を有する化合物を提供する。好ましいＲ基としては、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルが挙げられる。特に好ましいＲ基としては、メチル、エチル、フェニルおよびベンジルが挙げられる。
【００２７】
本願明細書において言及される、用語Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−５アルキルは、１〜４個の炭素原子または１〜５個の炭素原子をそれぞれ有する直鎖または分枝状のアルキル鎖を含む。用語ハロアルキルは、１つ以上の炭素原子に結合した１つ以上のハロゲンを有するアルキル基をいう。上述のとおり、アルキル基は、直鎖または分枝状の鎖であり得る。好ましいハロゲンは、フッ素、塩素、および臭素である。フッ素が特に好ましい。
【００２８】
更に別の形態において、本発明は、下式の化合物
【化４】
またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。
【００２９】
本発明は、ＢＣＣＡを調製する方法を提供する。この方法は、ＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、式Ｉの化合物、またはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、以下の式ＩＩの化合物
【化５】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、及びＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を脱エステル化することを含む。好ましいＲ基としては、Ｃ１−４アルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルが挙げられる。特に好ましいＲ基としては、メチル、エチル、フェニルおよびベンジルが挙げられる。
【００３０】
この方法はまた、シクロヘキシル基上の保護カルボン酸置換基を脱保護することを含み得る。種々の酸を保護する官能性の例として、保護酸を調製する方法およびこの酸を脱保護する方法については、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，３ｒｄ Ｅｄ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．，Ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９９に見出され得る。当業者は、カルボン酸および保護カルボン酸に加えて、カルボン酸に容易に置換され得る他の官能基が、カルボン酸または保護酸の適当な位置に使用され得ることを理解する。このような官能基、調製、および、これらの基のカルボン酸への転換については、Ｌａｒｏｃｋ．Ｒ．Ｃ，Ｗｉｌｅｙ ＶＣＨ，１９９９による「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ：Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ」および「Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．，ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，６ｔｈ Ｅｄ．２００７に見出され得る。
【００３１】
更に別の形態において、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、以下の式ＩＩＩの化合物
【化６】
を
【化７】
（式中、Ｒは上述した通りである）と縮合することを更に含む、上記の方法を提供する。上述したように、カルボン酸、エステルまたは真上の構造においてＣＯ２Ｒとして示した保護酸は、カルボン酸または保護酸へと変換され得る官能基と置換され得る。
【００３２】
好ましくは、有効なＣＥＴＰ阻害剤化合物は、化学的および熱的の両方において安定であるべきであり、投与および製剤化をしやすくするために十分な溶解性を示すべきであり、十分な活性を維持するべきである。更に、化合物は、インビボにおける有効な治療のための化合物量を提供するために、十分に高いバイオアベイラビリティを示すべきである。ＢＣＣＡにより示されるこれらの特性は、従来技術によって考えられるものでも予測できるものでもない。
【００３３】
ＢＣＣＡ・水和物は、小規模または非常に少ない分解を伴う周囲温度にて保管され得る。化合物、すなわち結晶形態のＢＣＣＡ・水和物は、示差走査熱量測定により測定される場合、標準的な工業プロセス（例えば、フライス（ｍｉｌｌｉｎｇ））に受容可能である、約５０℃よりも高い脱溶媒和および／または溶解の発現を有する。更に、ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・イソプロパノール溶媒和物、ＢＣＣＡヘミｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・ヘミエタノール溶媒和物および結晶形態のＢＣＣＡ・水和物は、周囲温度にて保管される場合、非吸湿性である。加えて、薬学的に受容可能な塩（例えば、カルシウムおよび亜鉛塩）は、周囲温度にて保管される場合、基本的に非吸湿性である。
【００３４】
遊離酸、塩、溶媒和物または結晶形態の水和物としてのＢＣＣＡは、以下のスキーム１、２、３および４において一般的に示され、以下の調製例および実施例においてより詳細に記述される、以下の手順に従って調製され得る。
【００３５】
以下の略語が本願明細書において使用される。ＡＣＮはアセトニトリルを意味し；ＡｃＯＨは酢酸を意味し；（Ｓ）−ＢＩＮＡＰはＳ−（−）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチルを意味し；ＣＢＺ−Ｃｌはクロロギ酸ベンジルを意味し；ｃｐｄは化合物を意味し；Ｂｎはベンジルを意味し；ＤＭＦはジメチルホルムアミドを意味し；Δは熱の適用を意味し；ＤＩ水は脱イオン水を意味し；ｅｑは当量を意味し；エルブミンはｔｅｒｔ−ブチルアミン（またはｔｅｒｔ−ブチルアンモニウム塩）、２，２−ジメチルエチルアミンまたは２−メチル−２−プロパンアミンを意味し；ＩＰＡはイソプロピルアルコールを意味し；Ｍはモル／リットルを意味し；ｍｏｌはモル（ｍｏｌｅｓ）を意味し；ＭＴＢＥはメチルｔｅｒｔブチルエーテルを意味し；Ｎは標準溶液を意味し；ＰＰＴＳはピリジニウムｐ−トルエンスルホネートを意味し；ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を意味し；ＴＨＦはテトラヒドロフランを意味し；ＲＴは室温を意味する。反対に示さない限り、本願明細書において例示される化合物は、ＣＨＥＭＤＲＡＷ ＵＬＴＲＡ ＡＵＴＯＮＯＭ ｖｅｒｓｉｏｎ ７．０．１またはＳｙｍｙｘ（登録商標）Ｄｒａｗ ｖｅｒｓｉｏｎ ３．２を使用して名称付けおよび番号付けされる。
【化８】
【化９】
【００３６】
調製例
他に指定しない限り、全ての非水性反応を窒素の乾燥雰囲気下で実施した。反対に示さない限り、製造業者から受け取った場合、商業的な等級の試薬および無水溶媒を使用し、それらの成分をさらに精製または乾燥させることはしなかった。減圧下での溶媒の除去は、テフロン（登録商標）加工のＫＮＦ真空ポンプを使用して約２８ｍｍＨｇ圧力でＢｕｃｈｉロータリーエバポレーターを用いて行った。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌシリカゲル６０を使用して実施した。プロトンＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ３００ＭＨｚ核磁気共鳴分光法で得て、内部基準としてテトラメチルシランを使用して、ｐｐｍδ値で報告する。ＡＰＩ質量分光分析は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）を使用して、Ｆｉｎｎｅｇａｎ ＬＣＱ Ｄｕｏ Ｉｏｎ ＴｒａｐまたはＰＥＳｃｉｅｘ ＡＰＩ １５０ＥＸ質量分析計で実施した。ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８、５μｍ、ＷＡＴ０４６９８０、３．９×１５０ｍｍカラムを使用して実施した。溶出系は、１０分以上の９５：５（Ｈ２Ｏ中の０．１％ＴＦＡ）／（ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ）勾配溶出から０：１００（Ｈ２Ｏ中の０．１％ＴＦＡ）／（ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ）、続いて１５分間、ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ定組成溶出から構成した。流速は１ｍＬ／分であった。ＵＶ検出は２５４ｎｍまたは２２０ｎｍで実施した。調製例および実施例の上気の選択された物理的性質を同定および精製評価のための既知の試料と比較した。
【００３７】
調製例１
メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（３）
オーバーヘッド撹拌器、冷却器、加熱マンテル（ｈｅａｔｉｎｇ ｍａｎｔｅｌ）、５Ｌの添加漏斗およびＮ２パージを備えた２２Ｌのフラスコに、２−アミノ−３，５−ジメチル安息香酸（２）（７０５ｇ、４，２７ｍｏｌｅ、１．０当量、Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ Ｂｅｒｉｃｈｔｅ １９９２、１２５（４）、８４９−８５５に開示されている手順に実質的に従って調製した）および水酸化ナトリウム（８．０８ｋｇ、８．４６ｍｏｌｅ）を入れた。得られた暗溶液を撹拌しながら４５℃まで加熱する。１，４ジオキサン（２．７５Ｌ、２２．７ｍｏｌｅ）に溶解したジ−ｔ−ブチルジカルボネート（１．９２ｋｇ、９．０８ｍｏｌ）を添加漏斗に入れる。ジ−ｔ−ブチルジカルボネート溶液をフラスコに加え、反応温度を約４５℃に維持しながら一晩撹拌する。さらに５００ｍＬの１，４ジオキサンに溶解したジ−ｔ−ブチルジカルボネート（０．９６１ｋｇ、４．２７ｍｏｌｅ）を添加漏斗に入れ、撹拌し、約４５℃に反応温度を室温まで冷却しながら、その内容物をフラスコにゆっくりと加える。反応が完了した後、硫酸ジメチル（６０７．１ｍＬ、６．４０ｍｏｌｅ）を滴下して加え、反応温度を室温に維持しながら一晩撹拌する。得られたスラリーを濾過し、固体を回収し、水（２×２Ｌ）で洗浄する。真空（５０℃）中で乾燥させて、粗物質（７４８ｇ）として標題化合物を得る。
【００３８】
調製例２
メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（４−エトキシ−４−オキソブチル）アミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（４）
オーバーヘッド撹拌器、加熱マントル、冷却器およびＮ２パージを備えた２２Ｌのフラスコに、ＤＭＦ（１０Ｌ）、エチル−４−ブロモブチレート（１．０７ｋｇ、７８７．８ｍＬ、５．３２ｍｏｌｅ）、炭酸セシウム（２．９２ｋｇ、２２．５ｍｏｌｅ）、およびメチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（１，０００．０ｇ、３．５４ｍｏｌｅ）を入れる。得られた混合物を約５５℃まで加熱し、４８時間撹拌する。冷却し、固体を濾過し、ＭＴＢＥ（２×４Ｌ）で固体を洗浄する。濾液およびＭＴＢＥ洗浄物を５０Ｌのフラスコ中で合わせ、約５℃未満まで冷却する。水（６Ｌ）を加えて反応をクエンチする。層を分離する。水層をＭＴＢＥ（３Ｌ）で洗浄し、有機層を合わせ、得られた有機溶液をブライン（２×３Ｌ）で洗浄する。有機溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回収した固体をＭＴＢＥで洗浄して、１．５８２ｋｇの標題化合物を得る。
【００３９】
調製例３
ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１，４−ジカルボキシレート（５Ａ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピジン−１，４−ジカルボキシレート（５Ｂ）
オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、５Ｌの添加漏斗、窒素パージおよび冷却浴を備えた２２Ｌのフラスコに、ＴＨＦ（３．５Ｌ）に溶解したメチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（４−エトキシ−４−オキソブチル）アミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（７００ｇ、１．７８ｍｏｌｅ）を入れ、約５℃未満まで冷却する。ＴＨＦ（ＫＯｔ−Ｂｕ、３．５６ｍｏｌｅ、１Ｍ）中の１Ｍのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを添加漏斗に入れ、反応温度を約５℃に維持しながら、冷却したＴＨＦ溶液に滴下して加える。添加後、完了すれば、反応混合物を周囲温度まで加温する。反応が完了した後、混合物を１０℃未満まで冷却し、２．５ＭのＨＣｌをゆっくりと加えて、約３未満のｐＨを有する混合物を得る。ＭＴＢＥ（４Ｌ）を加え、撹拌し、次いで水層から有機層を分離する。水層をＭＴＢＥ（２Ｌ）で抽出する。有機層を合わせ、ブライン（２×３Ｌ）で連続して洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回収した固体をＭＴＢＥでリンスする。濾過溶液を合わせ、真空下で溶媒を除去して、橙色の油状物（６７０ｇ）として標題化合物の混合物を得る。
【００４０】
調製例４
７，９−ジメチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５（２Ｈ）−オン塩酸塩（６）
オーバーヘッドスターラー、加熱マントル、サーモカップル、窒素パージおよびテフロン（登録商標）トランスファーラインを備えた５Ｌのフラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１，４−ジカルボキシレートおよびＩＰＡ（２Ｌ）に溶解したｔｅｒｔ−ブチル４−メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１，４−ジカルボキシレート（１２８６ｇ、３．５６ｍｏｌｅ）の混合物を入れ、得られた混合物を５０℃まで加熱する。オーバーヘッドスターラー、加熱マントル、サーモカップル、およびスクラバーに対する窒素パージを備えた別の１２Ｌのフラスコに、５ＮのＮａＯＨ（１Ｌ）およびＨ２Ｏ（３Ｌ）を加える。その後、ＨＣｌ（濃縮物、１．８７Ｌ、２１．８ｍｏｌｅ）を１２Ｌのフラスコに加え、５０℃まで加熱する。反応物からオフガスを取り除くためにＮ２でフラッシュしながら、５Ｌのフラスコの内容物をトランスファーラインによって１２Ｌのフラスコに移す。添加後、得られた混合物を８０℃まで加温し、Ｎ２フラッシュを継続する。反応が完了した後、反応混合物を約２０℃未満まで冷却する。ＭＴＢＥ（４Ｌ）を加え、ＮａＯＨ水溶液を用いてｐＨを中性に調整する。得られた反応混合物を２２Ｌのフラスコに移し、層を分離する。ＭＴＢＥ（２×２Ｌ）で水層を洗浄する。有機洗浄物を合わせ、ブライン（２Ｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、ＭＴＢＥでリンスする。濾液を暗い油状物まで濃縮する。ＩＰＡ（８容積）に溶解し、オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、１Ｌの添加漏斗およびＮ２パージを備えた１２Ｌのフラスコに移す。ＨＣＬ（濃縮物、７６５ｍＬ）を添加漏斗に入れ、ＩＰＡ溶液に約１時間にわたって滴下して加える。約１〜２時間、得られたスラリーを撹拌し、濾過し、冷ＩＰＡ（３×５００ｍＬ）で固体をリンスし、約５０℃で固体を一晩乾燥させて、５６１ｇの標題化合物を得る。
【００４１】
調製例５
ベンジル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（７）
オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、３Ｌの添加漏斗、バッフル、冷却浴およびＮ２パージを備えた２２Ｌのフラスコに、７，９−ジメチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５（２Ｈ）−オン塩酸塩（１，０００ｇ、４．４３ｍｏｌｅ）を入れる。２−メチルテトラフドロフラン（６．４４ｋｇ、７．５Ｌ、７４．５ｍｏｌｅ）を加え、オフホワイトのスラリーを撹拌する。５〜１５℃まで冷却する。水２．５Ｌ、１３８．８ｍｏｌｅおよびＮａ２ＣＯ３（１．１２ｋｇ、３ｍｏｌｅ）を添加漏斗に加え、次いで約２５分にわたって速い滴下で反応混合物にゆっくりと加える。クロロギ酸ベンジル（９１．５９ｋｇ、８．８６ｍｏｌｅ）を２Ｌの添加漏斗に入れ、約１５℃以下に反応混合物を維持しながら、反応物に滴下して加える。冷却器を備えたフラスコに得られた混合物を移し、２５〜２５℃まで加熱し、約５０時間撹拌する。約１５℃まで冷却し、ＨＣｌ（５Ｍ、ｐＨは約５になるまで）を加える。層を分離する。メチルテトラヒドロフラン（４Ｌ）で水層を抽出し、有機層を合わせ、水（４ｌ）で洗浄する。約４０℃で有機層を濃縮する。ＩＰＡ（４Ｌ）を加え、次いで２Ｌまで濃縮する。オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、加熱マントル、冷却器、２Ｌの冷却器、２Ｌの添加漏斗およびＮ２パージを備えた１２Ｌのフラスコに移す。フラスコ内容物を約７０〜８０℃まで加熱し、ヘプタン（５Ｌ）を加える。ＲＴまで一晩ゆっくりと冷却し、必要であれば混合物を播種して、標題化合物の結晶化を誘導する。固体を冷却し、回収し、冷ヘプタンで固体をリンスし、５０℃にて真空中で乾燥させて、１，３１６ｇの標題化合物を得る。
【００４２】
調製例６
（Ｚ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（８Ａ）および（Ｅ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（８Ｂ）の混合物
オーバーヘッドスターラー、加熱マントル、サーモカップル、冷却器、ディーンスタークトラップ、およびＮ２パージを備えた１２Ｌのフラスコに、ベンジル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（９２０ｇ、２．８４ｍｏｌｅ）およびトルエン（４００ｍＬ）を入れる。トルエン（５００ｍＬ）をディーンスタークトラップに加え、撹拌を開始する。２−メチル−５−アミノテトラゾール（５６３．８ｇ、５．６９ｍｏｌｅ）およびＰＰＴＳ（３６４．８ｇ、０．５ｍｏｌｅ）を加え、得られた混合物を還流まで加熱する。冷水５Ｌを加え、混合物が酸性になるのを防ぐためにｐＨをモニタリングしながらＮａＨＣＯ４（８５０ｇ）溶液中に注ぐ。層を分離し、トルエン（４Ｌ）で水層を洗浄する。有機層を合わせ、水（２×４Ｌ）で洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させ、濾過し、トルエンで固体をリンスする。約５５℃にて真空中で濾液を濃縮して、１．１８６ｋｇの上記の標題化合物の混合物を得る。
【００４３】
調製例７
（Ｓ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（９）
（Ｚ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルイミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレートおよび（Ｅ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（４．０４ｇ、１０ｍｍｏｌｅ）、Ｓ−（−）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（（Ｓ）−ＢＩＮＡＰ、６０ｍｇ、９６．３μｍｏｌｅ）、ＫＩ（４１５ｍｇ、２４ｍｍｏｌｅ、所望の場合ＫＩは除かれてもよい）およびジクロロ−ビス（（１，２，５，６ｅｔａ）−１，５−シクロオクタジエン）ジイリジウム（Ｉｒ２Ｃｌ２（ＣＯＤ）２（９２７ｍｇ、４０．２μｍｏｌｅ）の混合物をオートクレーブに入れる。オートクレーブを窒素でパージする。無酸素環境を維持しながら、脱気したトルエン（５０ｍＬ、４７２．８ｍｍｏｌ）を加え、オートクレーブを密閉する。５００ｐｓｉ Ｈ２下で６６時間、１００℃まで加熱する。室温まで反応混合物を冷却し、通気する。固体を濾過し、有機混合物を回収する。有機混合物を水（２×２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過する。濾液を回収し、真空下で溶媒を除去して、標題化合物（３．９９ｇ、ＨＰＬＣにより８８．７％ｅｅ）を得る。
【００４４】
調製例８
（Ｓ）−ベンジル５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（１０）
（Ｓ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ、２４６μｍｏｌｅ）、ＮａＨ（２３ｍｇ、鉱油中に６０％、５７５．１μｍｏｌｅ）およびＴＨＦ（９．２ｍｌ、２４．６ｍｍｏｌｅ）をバイアルに入れる（代替として、ＤＭＦ中のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドをＮａＨおよびＴＨＦの代わりに使用できる）。反応混合物を室温で１０分間撹拌する。３，５ビス（トリフルオロメチル）ベンジルブロミド（１７３．８ｍｇ、５６６．２μｍｏｌｅ）を３０分にわたって滴下する。約１９時間後、ＮａＨ（１０ｍｇ、６０％鉱油）を加え、さらに１時間撹拌する。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とブライン（２×２５ｍＬ）との間に反応混合物を分配する。有機層を回収し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、次いで濾液を濃縮して、油状物を得る。その油状物をＡＣＮ（５０ｍＬ）とヘプタン（２×２５ｍＬ）との間に分配する。ＣＡＮ層を回収し、乾燥させて、標題化合物の油状物（１８９ｍｇ）を得る。
【００４５】
調製例９
（Ｓ）−Ｎ−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５−アミン（１１）
ＭｅＯＨ（３９１ｍＬ，９６６ｍｏｌｅ）に溶解したギ酸アンモニウム塩（３９．０ｇ、６１８．０ｍｍｏｌｅ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３．９１ｇ）および（Ｓ）−ベンジル５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（３９．１ｇ、６１．８ｍｍｏｌｅ）を１Ｌのフラスコに入れる。得られたスラリーを室温で撹拌し、ＨＰＬＣによりモニターする。反応が完了した後、濾過して固体を回収する。ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で固体をリンスする。濾過溶液と有機洗浄物を合わせ、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過して、乾燥するまで濃縮する。ＭｅＯＨ（９２ｍＬ）に溶解し、標題化合物の種晶を播種する。冷却し、一晩保存して、１４．０３ｇ、４５．５％の標題化合物を得る、ＨＰＬＣにより９９．９２％ｅｅ。
【００４６】
調製例１０
（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１２）
オーバーヘッドスターラー、温度プローブ、窒素入口を備えたフラスコに、（Ｓ）−Ｎ−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５−アミン（５ｇ、１０．０３ｍｍｏｌｅ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３．１９ｇ、１５．０５ｍｍｏｌｅ）およびアセトニトリル（４０ｍＬ）を入れる。氷浴にフラスコを浸して約５℃以下までスラリーを冷却し、次いで約５℃に、または約５℃以下に反応混合物を維持しながら、シリンジによりＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した（トランス）−メチル４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（２．９９ｇ、１７．５７ｍｍｏｌｅ、Ｈｏｕｐｉｓ、Ｉ．Ｎ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔ．１９９３、３４（１６）、２５９３−２５９６およびＪＰ４９０４８６３９における手順に従って実質的に調製した）を加える。反応物を室温まで加温し、一晩撹拌する。ＮＨ４Ｃｌ（２５ｍＬ、５０％飽和水溶液）を加え、有機層から水層を分離する。有機層のｐＨは約５．５になるはずである。有機層を約４５℃まで加温し、水（１６ｍＬ）を加える。標題化合物の種晶を加え、約３５℃まで冷却する。得られた固体を濾過により回収し、ＡＣＮでリンスする。乾燥させて５．８０ｇの標題化合物を得る。
【化１０】
【化１１】
【００４７】
調製例１２
メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート
工程１：３０００Ｌのグラスライニングリアクタを−０．０８ＭＰａ未満まで排気し、次いで標準圧力までＮ２を満たし、３回繰り返す。Ｎ２下で、撹拌しながら２，４−ジメチルアニリン（３００．０ｋｇ）およびトリエチルアミン（８７３．０ｋｇ）をリアクタに入れる。７０〜７５℃まで混合物を加温し、次いで７０〜７５℃の温度を維持しながら５００Ｌの添加容器により２０〜２５ｋｇ／時間の速度でエチル４−ブロモブチレート（６０４．０ｋｇ）を加える。混合物を７０〜７５℃で２時間撹拌し、次いでＧＣにより反応完了を検査する。２つの連続した試料の２，４−ジメチルアニリンの含有量が３％未満であり、不純物の（エチル４−（（２，４−ジメチルフェニル）（３−（プロピオニルオキシ）プロピル）アミノ）ブタノエート）の含有量が１０％未満である場合、反応が完了したとみなす。５６時間後、不純物の含有量が１０％未満であるが、２，４−ジメチルアニリンの含有量が依然として３％より高いので、過剰な４−ブロモブチレート（６．０ｋｇ）を混合物に加え、次いで１７．５時間後、２，４−ジメチルアニリンの含有量は依然として３％より高いが、反応をクエンチする。
【００４８】
反応物を１５〜２５℃まで冷却し、２つの５０００Ｌのグラスライニングリアクタに移す。各リアクタについて、水（１２００．０ｋｇ）およびトルエン（１０４４．０ｋｇ）を加える。混合物を１時間撹拌し、分離前に１時間保持する。２つのリアクタの有機相を合わせ、水（１２００．０ｋｇ×２）で２回洗浄する。トリエチルアミンが２３％未満であることを確実にするために有機相をサンプリングする。
【００４９】
画分が現れず、トリエチルアミンの重量％が０．１％未満になり、ＫＦが１％未満になるまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下）で５０〜６０℃にて有機相を濃縮する。混合物を２０〜３０℃まで冷却し、生成物（エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエート）を工程２において直接使用する。
【００５０】
ガスクロマトグラフ（ＧＣ）：カラム：ＨＰ−５、３０ｍ長さ×０．３２ｍｍＩＤ×０．２５μｍフィルムまたはカラム等価物；キャリアガス：ヘリウムガス；流速１．９０ｍＬ／分；ランタイム：２２．５分；プログラム：初期温度：５０℃（オン）および初期時間：２．００分；ランプ：１ レート：２０ 最終温度：２６０ 最終時間：１０．００；ランプ＃２：０．０（オフ）；注入温度２５０℃；検出温度：３００℃。
【００５１】
保持時間：１）（１３．５６分）エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエート；２）（１７．４０）エチル４−（（２，４−ジメチルフェニル）（３−（プロピオニルオキシ）プロピル）アミノ）ブタノエート；３）（８．３８分）２，４−ジメチルアニリン。
【００５２】
工程２：トルエン（７４２．０ｋｇ）およびエチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエート（１７１．０ｋｇ）を２０００Ｌのグラスライニングリアクタに入れる。混合物を撹拌し、炭酸ナトリウム（７７．０ｋｇ）を一部ずつ加える。２０〜２５℃に温度を維持し、１８ｋｇ／時間の速度でクロロギ酸メチル（９６．２ｋｇ）を加える。混合物を２０〜２５℃で撹拌し、ＧＣにより１時間後モニターする。エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエートの含有量が１％未満である場合、反応が完了したとみなす。５０００Ｌのグラスライニングリアクタに混合物を移し、トルエン（７５ｋｇ）で２０００Ｌをリンスする。２０〜２５℃に温度を維持しながら、３６０〜４００ｋｇ／時間の速度でＮａＯＨ（８７．２ｋｇ）、メタノール（９３４．０ｋｇ）および水（１４８２．０ｋｇ）の溶液を加える。次いで、５５〜６５℃まで混合物を加熱し、５５〜６０℃で撹拌する。１時間後、ＨＰＬＣにより試料を検査して、エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエートのレベルを定量する。２０〜３０℃まで混合物を冷却し、１時間保持し、次いで分離する。９２９ｋｇのメタノールが蒸留するまで減圧下（０．０９ＭＰａ以下）で４０〜５０℃にて水相を濃縮する。
【００５３】
１５〜２５℃まで混合物を冷却し、水（２５６．５ｋｇ）を加え、０．５時間撹拌し、ジクロロメタン（３４２．０ｋｇ×２）で抽出する。０〜５℃まで温度を下げ、維持し、４０〜５０ｋｇ／時間の速度で濃ＨＣｌ（２６９．０ｋｇ）を加えて、ｐＨを１〜２に調整する。１５〜２５℃まで混合物を加熱し、この温度を維持しながら１時間撹拌する。分離し、ジクロロメタン（６８４．０ｋｇ×２）で水相を抽出し、有機相を合わせる。０．５％ＨＣｌ（３４２．０ｋｇ×２）で有機相を２回、次いで濃ＨＣｌ（３．４×２ｋｇ）で２回洗浄する。画分が現れなくなるまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下；４０〜５０℃）で有機相を濃縮する。残留物（４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸）（調製例１１）にジクロロメタン（２５０．０ｋｇ）を加え、次の工程に直接使用する。１９０．０ｋｇ（４０７．４ｋｇ溶液）；収率：９８．５％；純度：９７．８％。
【００５４】
ＨＰＬＣ：カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８；４．６×１５０ｍｍ、３．５μｍ；２３０ｎｍ検出；１．０ｍｌ／分の流速；温度２５℃；アイソクラチック移動相：Ａ：ＡＣＮ；Ｂ：Ｈ２Ｏ＋０．１％Ｈ３ＰＯ４（ｖ／ｖ）。保持時間：（１３．８６分）４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸。
【００５５】
工程３：−０．０８ＭＰａ未満まで３０００Ｌのグラスライニングリアクタを排気し、標準圧力まで窒素ガスを満たし、３回繰り返す。ジクロロメタン（１９００．０ｋｇ）、４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸（１９０．０ｋｇ）およびＤＭＦ（１１．４ｋｇ）を入れ、撹拌する。−５〜０℃まで混合物を冷却し、この温度を維持しながら、１８ｋｇ／時間の速度で塩化チオニル（８５．３ｋｇ）を加える。−５〜０℃まで混合物を撹拌する。１時間後、ＨＰＬＣにより反応をモニターし、４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸の含有量が１％未満である場合、定量する。サンプリングのために、試料をメタノールに加え、ＨＰＬＣにより評価する。画分が観測されなくなるまで、標準圧力下で４０〜４５℃にて混合物を濃縮し、次いで１５〜２５℃まで冷却する。次いで、画分が観測されなくなるまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下）で４０〜４５℃にて濃縮する。ジクロロメタン（１０３１．０ｋｇ）で希釈する。３０〜３５℃にてジクロロメタン（１０３０．０ｋｇ）および無水塩化アルミニウム６水和物（２８７．２ｋｇ）の溶液を滴下して加える。その後、３５〜４５℃で２時間混合物を撹拌し、次いでメチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレートの含有量が８０％より高くなるまで、ＨＰＬＣによりモニターする（混合物を取り、それをメタノールに加え、ＨＰＬＣで検出するために送る）。その混合物を水（１１４０．０ｋｇ）および氷（５７０．０ｋｇ）の混合物でクエンチし、０〜１０℃に温度を維持し、１時間撹拌する。１５〜２５℃まで混合物を加温し、０．５時間撹拌し、０．５時間保持し、分離する。水（８１４．０ｋｇ×２）で有機相を洗浄する。シリカゲル（３８０．０ｋｇ）を有機相に加え、混合物を１時間撹拌する。混合物を濾過し、ジクロロメタン（３３９．０ｋｇ）でケーキをリンスし、濾液を合わせる。１５０〜２００Ｌの混合物が残るまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下）で４０〜４５℃にて濾液を濃縮する。
【００５６】
ヘプタン（１９０．０ｋｇ）を加え、再利用水で１５〜２０℃まで混合物を冷却し、次いでブラインで０〜５℃まで冷却する。この温度で混合物を撹拌して結晶化する。混合物を濾過し、乾燥室において３５〜４０℃でフィルタケーキを乾燥させて、８０．９ｋｇのオフホワイトの固体を得る。ＨＰＬＣ９７．９％。窒素の保護下で乾燥し、密閉した場所で保存する。
【００５７】
ＨＰＬＣ手順：上記の２つの工程と同様。保持時間（１４．７１分）メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート。
【００５８】
調製例１３
メチル５，５−ジメトキシ−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート
工程４：窒素のブランケット下で周囲温度にてオーバーヘッドスターラーを備えた、メタノール（２．５０Ｌ）中のメチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート（１０００ｇ；１．００当量；４．０４ｍｏｌｅ）およびトリメトキシメタン（９．１０ｍｏｌｅ；９９５．４２ｍＬ；９６５．５５ｇ）の溶液に、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（商標）１５（１００ｇ）を加える。５０℃まで反応混合物を加熱し、その温度を１時間維持する。１時間後、反応を完了する。
【００５９】
周囲温度まで反応混合物を冷却し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔビーズを濾過し、メタノール（５００ｍＬ）でリンスする。カニューレをセットし、オーバーヘッド撹拌しながら、その溶液を０．１ＭのＫＯＨ溶液（１Ｌ）に加え、続いてＨ２Ｏ（１５００ｍＬ）を加える。２０分間スラリーを撹拌し、次いでポリプロピレンパッドを備える３２ｃｍのセラミックフィルターを使用して濾過する。４×１Ｌの水でケーキを洗浄し、フィルター上に乾燥するまで置く。６０℃にて一晩真空オーブン中で乾燥させる。一晩後、大きな塊を壊し、６０℃にて一晩乾燥するまで継続する。乾燥後、粗物質を得る：１２３５ｇ。５容積のヘプタン（６Ｌ）に粗固体を溶解し、７０℃まで加熱し、７０℃にて１５分撹拌する。５５℃まで溶液を冷却し、その時点で反応物を播種する。ゆっくりと冷却を継続すると、約４５℃で生成物が現れ始める。室温までゆっくりと冷却を継続し、次いで一晩スラリーを撹拌する。生成物のスラリーをポリプロピレンパッドで濾過する。２×５００ｍＬのヘプタンでケーキをリンスする。フィルター上に乾燥するまで置き、次いで乾燥するまで（約４日）４５℃にて真空オーブンに入れる。７６６ｇ。ＨＰＬＣにより９９．９％純粋。
【００６０】
ＨＰＬＣ：Ｚｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ ５０×４．６ｍｍ、１．８μｍ；２ｍｌ／分、４０℃、１２分にわたって１０〜３０％のＡＣＮから１４分で９５％、２分保持、溶出液の再平衡バランスは１０ｍＭのＮＨ４アセテートである。保持時間＝１３．７７分。
【００６１】
調製例１４
メチル−（５Ｓ）−７，９−ジメチル−５−［（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート
工程５：１〜２時間、Ｎ２で乾燥させることにより水素リアクタを乾燥させることを確実にする。２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−アミン（５２．０ｇ）、メチル５，５−ジメトキシ−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート（１４０．０ｇ）、Ｉｒ２Ｃｌ２（ＣＯＤ）２（０．０８０ｇ）、ＴＢＡＩ（１．７６ｇ）、（１Ｓ）−（＋）−１０−カンファースルホン酸（２．２ｇ）、および（Ｓ）−ジフルオルホス（０．１６３ｇ）をリアクタに加える。リアクタに５ｐｓｉの窒素を入れる。カニューレ／窒素によって６００ｍＬのトルエン（７５分間、Ｎ２をスパージした）を加える。リアクタを２０ｐｓｉの窒素で２回パージし、圧力を５ｐｓｉ以下にさせない。リアクタに５００ｐｓｉの水素を入れ、１１５℃までゆっくりと加温する。この温度で一晩保持する。５０℃まで冷却し、ＨＰＬＣ分析のためにサンプリングする。キラルＨＰＬＣのために、トルエンで試料を希釈し、炭酸水素ナトリウムで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ヘプタン／エタノールで希釈する。
【００６２】
トルエン溶液を分液漏斗に注ぎ、１４０ｍＬの酢酸エチルを加えて、全てを分液漏斗に入れ、後処理の間、全てを溶液中に維持する。この溶液を４２０ｍＬの１ＭのＮａＯＨ溶液で洗浄する（有機層は濁り、水層は透明のように見える）。層を分離し、４２０ｍＬのＨ２Ｏで有機層を洗浄する。大気圧にて有機層を１．５容積のトルエンまで蒸留する（２．５容積の全溶液が残っている）。溶液を６０℃まで冷却し、７００ｍＬのヘプタン（約５Ｖ）を６０℃にて３分にわたってゆっくりと加え、得られた透明の溶液を６０℃にてオーバーヘッド撹拌（１５０ｒｐｍ）しながら一晩加熱する。１５分後、十分な固体が生じる。午前中に、スラリーを冷却し、濾過し、固体物質を回収し、６０℃にて３時間、真空オーブン中で乾燥させる。１２６．９７ｇ、ＨＰＬＣ：９９．４％純粋、キラルＨＰＬＣ：９４．６％ｅｅ。
【００６３】
ＨＰＬＣ：Ｚｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ ５０×４．６ｍｍ、１．８μｍ；２ｍｌ／分、４０℃、１２分にわたって１０〜３０％のＡＣＮから１４分で９５％、２分保持、溶出液の再平衡バランスは１０ｍＭのＮＨ４アセテートである。保持時間＝１１．３６分。
【００６４】
キラルＨＰＬＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡ ２５０×４．６分、２ｍｌ／分、４０℃、１１分間、５％のＩＰＡから１２分で５０％のＩＰＡ、１５分まで保持、１５．１分で５％のＩＰＡに戻す。２０分間保持。保持時間＝１１．４８分。
【００６５】
調製例１５
（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン
工程６：２５０ｍＬのテフロン（登録商標）フラスコ中で、オーバーヘッド撹拌しながら、メチル−（５Ｓ）−７，９−ジメチル−５−［（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート（２０．１ｇ）、ＮａＯＨ（１２．１０ｇ）、およびエタノール（８０ｍＬ）を合わせる。１０分間、窒素でスパージし、約５．５時間還流（８５℃）まで加熱する。冷水浴で室温まで冷却する。酢酸／水（１７．５ｍＬ／５３ｍＬ）を室温でゆっくりと加え、添加によってほぼ半分を５００ｍＬのフラスコに移す（添加について約３０分の合計時間）。約５ｍｇの（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミンを播種する。５０℃まで（約１５分でこの温度まで）加熱する。約３０分にわたって５４ｍＬの水を加える。次の日、氷浴で冷却し、濾過し、メタノール：水（１：１；２×３０ｍＬ）でリンスする。６０℃にて真空中で湿潤ケーキを乾燥させて、１３．９９ｇの（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミンを得る。ＨＰＬＣ分析：９９．４％、保持時間は４．８４分である。キラルＨＰＬＣ：９８．５％のキラル純度。
【００６６】
ＨＰＬＣ法：Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ−Ｃ８ ７５×４．６分、３．５μｍ、２ｍＬ／分、４０℃、２２５ｎｍ波長、２分間、５％のアセトニトリル（ＡＣＮ）から１０分で９５％のＡＣＮ、１分間保持。
【００６７】
キラルＨＰＬＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ １５０×４．６分、５μｍ、１ｍｌｌ／分、３０℃、ヘプタン中に均一濃度の５０％エタノール。
【００６８】
調製例１６
（５Ｓ）−Ｎ−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン
工程７：Ｎ２の水面下の添加によって各溶液を飽和することによって反応物に添加する前に全ての液体からガスを抜く。窒素入口を備えた２５０ｍＬのフラスコに、（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン（１８．３６ｍｍｏｌｅ；５．００ｇ）およびトルエン（１５．００ｍＬ）を加える。トルエン中の０．５Ｍの溶液としてヘキサメチルジシラザンカリウム（１９．２８ｍｍｏｌｅ；３８．５５ｍＬ）を３０分にわたって滴下して加える。発熱を２１．５℃まで観測する。反応混合物を３０分間撹拌する。トルエン中の１Ｍの溶液として１−（クロロメチル）−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゼン（２５．７１ｍｍｏｌｅ；２５．７ｍＬ）を３０分にわたって加える。発熱を２５．５℃まで観測する。室温にて１６時間、反応混合物を撹拌する。水（２×２０ｍＬ）で反応混合物を洗浄する。水層を合わせ、トルエン（１×２５ｍＬ）で逆抽出する。トルエン層を合わせ、乾燥するまで濃縮し、水中の９２ｍＬの６０％の１−プロパノールから残留物を再結晶する。０℃にて２時間、結晶化した生成物を撹拌し、濾過し、水中の１０ｍＬの５０％の１−プロパノールでリンスする。単離された生成物を４５℃にて真空中で乾燥させる。７．７３５ｇ。ＨＰＬＣは９８．３％純度を示し、保持時間＝１０．６２分である。
【００６９】
勾配ＨＰＬＣ：カラムはＺｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ ＲＰ５μｍ、４．６×１５０ｃｍである、流量＝２ｍｌ／分；波長＝２２５ｎｍ；カラム温度＝４０℃；溶媒Ａ＝水；溶媒Ｂ＝ＡＣＮ；時間０分 ８５％Ａ １５％Ｂ；１２分 １０％Ａ ９０％Ｂ；１３分 １０％Ａ ９０％Ｂ；１３．５分 ８５％Ａ １５％Ｂ。
【００７０】
調製例１７
メチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボキシレート
工程１２：（５Ｓ）−Ｎ−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン（３．４０ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）、ナトリウムトリアセトキシボロハイドレート（ｓｏｄｉｕｍ ｔｒｉａｃｅｔｏｘｙｂｏｒｏｈｙｄｒａｔｅ）（３．０１ｇ、１３．６４ｍｍｏｌ）、およびＡＣＮ（２８ｍＬ）の懸濁液を、氷／アセトン浴中で−１２℃〜−１０℃まで冷却し、シリンジポンプ（０．６６ｍＬ／分）によって３０分にわたってトルエン（１８．５ｍＬ）中の（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（２．０３ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）の溶液を加える。２時間、氷／アセトン浴中で反応物を撹拌し続ける。水中の４４ｍＬの１０％（重量で）ＮＨ４Ｃｌを反応物に加え、室温で３０分間撹拌する。撹拌を停止すると、２層が生じる。層を分離し、下にある有機層を１容積の溶媒に濃縮する。２４ｍＬのエタノールを加え、固体（または１容積）に濃縮する。２４ｍＬのエタノール、２ｍＬの水を加え、６０℃まで加熱する（依然として懸濁液である）。２ｍＬの水を滴下して加える。懸濁液を室温まで冷却し、室温で一晩撹拌する。室温で一晩撹拌した後、懸濁液を０．５時間、−１０℃まで冷却し、次いで濾過する。３ｍＬの−１０℃のＥｔＯＨ：水（４：１）で濾過した固体を洗浄する。５０℃にて真空オーブン中で一晩固体を乾燥させて、無色の固体として４．２４ｇのメチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボキシレートを得る。ＨＰＬＣは９９．７５％純粋を示す。
【００７１】
ＨＰＬＣ分析：Ｚｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ ＲＰ １５０ｍｍ×４．６ｍｍ、３．５μｍ、３０℃、２６０ｎｍ ＵＶ検出、流量：２．０ｍＬ／分、勾配：Ａ＝Ｈ２Ｏ中の０．０５％ＴＦＡ、Ｂ＝ＡＣＮ中の０．０５％ＴＦＡ；０分９５％Ａから３０分０％Ａから３０．５分９５％Ａから３５分９５％Ａ。２３．３３分でメチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボキシレートが溶出し、２３．０５分でｃｉｓ異性体が溶出する。
【００７２】
調製例１８
（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートの硫酸水素ナトリウムの付加
工程８：機械的撹拌器、ディスプレイを備えたサーモカップル、窒素入口、および乾燥管を備えた冷却管に１２Ｌの３つ口丸底フラスコをつける。（トランス）−４−メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸（４５０ｇ）をフラスコに入れる。ジクロロメタン（２．２５Ｌ）をフラスコに入れ、窒素下で撹拌する。塩化オキサリル（ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に３６４ｇを溶解した）を周囲温度で添加漏斗によりフラスコに加える。室温で１０分間、反応混合物を撹拌する。触媒量のＤＭＦ（ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に１．８２ｇを溶解した）を周囲温度で添加漏斗によりフラスコに加える。２０℃未満の温度で２時間、反応混合物を撹拌する。ＧＣ：［ＤＢＩ ３０ｍ×０．２５ｍｍ、０．５μ）により反応進行をモニターし、２０℃未満の温度で撹拌溶液の試料を除去する。（トランス）−４−クロロカルボニルシクロヘキサンカルボキシレートの保持時間（Ｒｔ）＝７．３分；（トランス）−４−メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸のＲｔ＝７．７５分。出発物質である（トランス）−４−メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸が３．０％未満になった場合、反応が完了したとみなす。
【００７３】
工程９：３５℃未満の温度にて減圧下で反応混合物を濃縮する。蒸留物と共に過剰の塩化オキサリルを回収し、腐食剤トラップを使用して酸性蒸気が真空系に侵入するのを防ぐ。ＴＨＦ（２×９００）と共に残留物を同時蒸発する。ＴＨＦ（４．５Ｌ）および２，６−ルチジン（３２１ｇ）で残留物を希釈する。水素化オートクレイ（ａｕｔｏ−ｃｌａｙ）リアクタに移す。活性炭上の５％Ｐｄ｛（ＴＨＦ（５００ｍＬ）中で４５ｇをスラリーにした）を反応混合物に入れる。２〜３回、窒素ガス（２０〜３０ｐｓｉ）でリアクタをパージする。２〜３回、水素ガス（２０〜３０ｐｓｉ）でパージする。３０〜３５℃で１５時間、水素雰囲気下（５０〜６０ｐｓｉ）で反応物を撹拌する。１５時間後、水素ガスを局所排気管に排出し、２〜３回、窒素ガス（２０〜３０ｐｓｉ）でリアクタをパージする。ＧＣにより反応物をモニターする。（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートのＲｔ＝６．４６分；（トランス）−４−クロロカルボニルシクロヘキサンカルボキシレートのＲｔ＝７．３分。（トランス）−４−クロロカルボニルシクロヘキサンカルボキシレートが１．０％未満になると、反応が完了したとみなす。
【００７４】
窒素下でセライトパッドを通して反応混合物を濾過する。３５℃未満の温度にて減圧下で大部分のＴＨＦ溶媒を濃縮する。ＭＴＢＥ（１．８Ｌ）で残留物を希釈し、分液漏斗に移す。水（２．２５Ｌ）で有機溶液を洗浄し、層を分離する。ＭＴＢＥ（２×１．８Ｌ）で水相を逆抽出し、全ての有機層を合わせる。０．５Ｎの塩酸水溶液（１×２．２５Ｌ）で洗浄する。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１×２．５Ｌ）で有機相を洗浄する。ブライン溶液（１×２．５Ｌ）で有機相を洗浄する。硫酸マグネシウムで有機相を乾燥させ、ガラスファイバーフィルターパッド上で混合物を濾過する。３５℃未満の浴温度にて減圧下で濾液を濃縮する。無色の油状物として粗物質を単離し、さらに精製せずに使用する。
【００７５】
工程１０：０．４９ｇの亜硫酸水素ナトリウムを含有するバイアルに１ｍＬの水を加える。バイアルを超音波処理器に入れて亜硫酸水素ナトリウムを溶解する。バイアルに５ｍＬのＴＨＦを加える（二相溶液が形成する−固体はなし）。このＴＨＦの二相溶液および亜硫酸水素ナトリウム水溶液を、（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（１ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）を含有する磁気撹拌器を備えた５０ｍＬのフラスコに加える（注意：（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートは約８０％のみ純粋である。この理由は０．８当量のＮａＨＳＯ３を使用するからである）。さらに５ｍＬのＴＨＦで、１分以内に溶液を希釈し、非常に薄い結晶の塊が形成する。この結晶の塊を還流まで加熱する。３×５ｍＬのＴＨＦで混合物を希釈する。結晶は非常に綿状である。数時間室温で撹拌し、次いで濾過し、２０ｍＬのＴＨＦでリンスし、１時間フィルター上で乾燥させる（１．２７ｇ）。４０℃にて真空オーブン中で一晩乾燥させて、無色の固体として（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートの１．１９ｇの亜硫酸水素ナトリウム付加物を得る。
【００７６】
調製例１９
（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート
工程１１：（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（３．９２ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）の亜硫酸ナトリウム付加物を、炭酸ナトリウム（５．０６ｇ、４７．７２ｍｍｏｌ）、トルエン（１７ｍＬ）および水（３３ｍＬ）の混合物に加え、室温で撹拌する。室温で１時間撹拌した後、層を分離し、１５ｍＬの水でトルエン層を洗浄する。工程１２における（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートを含有するこのトルエン溶液を使用する。
【実施例】
【００７７】
実施例１
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸の無定形固体
（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１４９ｍｇ）をフラスコに入れる。ＭｅＯＨ（６ｍＬ）および１．０ＮのＮａＯＨ（３．０ｍＬ）を加える。約６０℃まで得られた混合物を加熱する。ＴＬＣにより反応物をモニターする。約７時間後、または開始エステルが反応した場合、約０℃まで混合物を冷却し、１ＮのＨＣｌでクエンチする。ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で混合物を希釈する。水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で混合物を連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、濾液を濃縮する。ＣＨ２Ｃｌ２を用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。溶媒を除去して、白色固体として標題化合物（１２５ｍｇ）を得る。
【００７８】
実施例２
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸の無定形固体
機械的撹拌器、添加漏斗、およびサーモカップルを備えた５００ｍＬの３つ口フラスコに、水（２６５ｍＬ）を入れ、氷浴中で冷却する。第２のフラスコの４０ｍＬのアセトン中でＢＣＣＡ（２２．０ｇ）を溶解し、添加漏斗により混合物を３つ口フラスコに加える。さらに４ｍＬのアセトンでフラスコをリンスし、漏斗に加える。添加漏斗の内容物をフラスコに滴下して加え、約０〜１℃に温度を維持しながら、得られた混合物を撹拌する。得られた固体を回収し、水で２回洗浄し、次いで４０℃にて一晩乾燥させて、２２．３ｇの白色粉末を得る。
【００７９】
実施例３
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物
オーバーヘッドスターラー、温度プローブ、窒素入口を備えたフラスコを窒素でパージし、次いでフラスコ内で正の窒素雰囲気を維持しながら、（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１．０ｋｇ、１．５３ｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（１０Ｌ）、および２ＭのＮａＯＨ（１．５３Ｌ、３．０６ｍｏｌ）を加える。約６８℃の還流まで得られた混合物を加熱する。約４時間後、反応混合物を室温まで冷却し、一晩撹拌する。混合物を濾過し、濾液を回収する。ＭｅＯＨ：水の混合物（５００ｍｌ １：１ｖ／ｖ）を加え、次いで酢酸（２６０ｍＬ）をゆっくりと加えて沈殿を誘導する。ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ水和物およびＢＣＣＡ・メタノール溶媒和物の混合物として得られた固体を回収する。４０℃にてオーブン中で固体を乾燥させる。
【００８０】
冷却器、サーモカップル、加熱マントルおよび機械的撹拌器を備えた２Ｌのフラスコに、ＢＣＣＡ固体物質（１０９ｇｍ）、ＭｅＯＨ（９００ｍＬ）および水（１０ｍＬ）を入れる。得られたスラリーを窒素雰囲気下で還流まで加熱する。固体を全て溶解した後、熱を取り除き、周囲温度まで混合物を冷却する。所望の場合、結晶形態におけるＢＣＣＡ水和物の種晶を添加してもよい。固体物質を回収する。メタノール：水（９：１ｖ／ｖ、１００ｍＬ）および水（１Ｌ）で固体を連続して洗浄する。約４０℃にて真空中で固体を乾燥させて、１００ｇの白色固体を得る。その後、イソプロパノール：水（１：１ｖ／ｖ １Ｌ）で固体を再びスラリーにする。得られた固体を回収し、水（５００ｍＬ）でリンスし、約４０℃にて真空中で一晩乾燥させて、６０ｇの標題化合物を得る。Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ分析 ２．５３％の水、元素分析：Ｃ３１Ｈ３６Ｆ６Ｎ６Ｏ２Ｈ２Ｏ 理論値（％）Ｃ５６．７０、Ｈ５．８３、Ｎ１２．８０ 実測値（％）：Ｃ５６．５９、Ｈ５．２８、Ｎ１２．５５。
【００８１】
固相ＮＭＲ
１００．６２２ＭＨｚの炭素周波数で作動し、Ｂｒｕｋｅｒ ４ｍｍの二重共鳴プローブ（Ｋ２９９５５２）を備えたＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩ ４００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計を使用して、結晶形態における結晶性ＢＣＣＡ・水和物の１３Ｃ交差分極／マジック角スピニング（ＣＰ／ＭＡＳ）ＮＭＲ（固相ＮＭＲまたはＳＳＮＭＲ）スペクトルを得た。ＴＯＳＳ側波帯抑圧は、ＳＰＩＮＡＬ６４デカップリング（９５．４ワット）およびＲＡＭＰ１００形状Ｈ核ＣＰパルスを利用する交差分極と共に使用した。獲得パラメーターは以下の通りであった：２．５０μｓの９０°プロトンｒ．ｆ．パルス幅、接触時間は１．５ｍｓであり、２０ｓのパルス繰り返し時間、５ｋＨｚのＭＡＳ周波数、３０ｋＨｚのスペクトル幅、獲得時間は３４ｍｓであり、走査数は３，８４４であった。１３Ｃ ＳＳＮＭＲ ＢＣＣＡ・水和物からの代表的な共鳴としては、１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、１４３．５、１３９．９、１３６．３、１３２．８、１３２．１、１２９．２、１２７．３、１２６．２、１２２．７、１２１．０、６１．１、５３．０、４９．８、４５．０、４０．２、３８．７、３１．４、３０．４、２９．０、２７．８、２７．０、２１．２、１８．３、＋／−０．２ｐｐｍが含まれる。化学シフトは、別の実験においてアダマンタン（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照標準とした。
【００８２】
実施例４
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物および結晶形態におけるエタノール溶媒和物
（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１２．９５ｋｇ）、ＥｔＯＨ（１２９．５Ｌ）および２ＭのＮａＯＨ（９．９Ｌ、２当量）をフラスコに入れ、得られた混合物を約１０分間撹拌し、その後、６時間、約４０〜４５℃まで反応混合物を加熱する。ＨＰＬＣにより反応物をモニターする。その後、酢酸（３．７５ｋｇ）、続いて水（１５．５Ｌ）を加え、結晶形態においてＢＣＣＡ・水和物を播種する。約２時間撹拌した後、室温まで反応混合物を冷却し、さらに２時間撹拌する。得られた固体を回収し、ＥｔＯＨ：水（１：１、２×２６Ｌ）で固体を洗浄し、一晩乾燥させて、エタノール溶媒和物および水和物の混合物として１５．８７ｋｇ（湿潤）の標題化合物を得る。
【００８３】
実施例５
結晶形態におけるトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸（１５．８７ｋｇ）および水（１５８．８Ｌ）をフラスコに入れる。室温にて２時間、得られた混合物を撹拌する。その後、得られた混合物を濾過して、固体を回収する。その固体を一晩乾燥させる。得られた固体を、２時間、約６５〜７０℃に加熱したＭｅＯＨに溶解して、透明な溶液を得た。透明な溶液を濾過し、次いで約０〜５℃まで濾液を冷却して、結晶化を誘導する。得られた結晶を回収し、一晩乾燥させる。水（１５８．８Ｌ）に結晶性物質を懸濁して、室温にて約２時間撹拌する。結晶性固体を回収し、４０〜４５℃にて高真空下で乾燥させて、Ｋａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ法で測定した場合、２．７〜３．１の間の水分含有量を示す固体を得る。
【００８４】
実施例６
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物の結晶化
オーバーヘッドスターラーを備えた２５０ｍＬのフラスコに、エタノール（１００ｍＬ）、（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１０．０ｇ、１５．３２ｍｍｏｌｅ）およびＮａＯＨ（２Ｍ、１５．０ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌｅ）を入れる。得られた混合物を約４０℃まで加温し、約４時間、その温度で撹拌する。反応混合物を室温まで冷却する。酢酸（２．７ｍＬ、４５．４ｍｍｏｌｅ）を加え、４０℃まで加温する。２．５時間にわたって水（４０ｍＬ）をゆっくり加え、厚い白色のスラリーを得る。さらに１．５時間、加熱を続け、次いで室温までスラリーを冷却する。濾過により固体を回収し、エタノール：水（２０ｍＬ、１：１）、水（２０ｍＬ）で固体を連続して洗浄する。水（７０ｍＬ）に固体を懸濁し、濾過により固体を回収し、次いで水（２×２０ｍＬ）で固体を洗浄する。さらに２回、水スラリーに繰り返す。得られた固体を回収し、６０℃にて乾燥させて、白色固体（６．１ｇ）として標題化合物を得る。
【００８５】
実施例７
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物の結晶化
ＢＣＣＡ（６０ｍｇ）をシンチレーションバイアルに入れ、１．５ｍｌのＭｅＯＨを加える。約４５℃まで透明な溶液を加熱する。１００μＬの水中の１．５モル当量のギ酸を加えて、白色懸濁液を形成する。その白色懸濁液に０．５ｍＬのＭｅＯＨを加え、約５５℃まで穏やかに加熱する。数時間後、室温まで懸濁液を冷却し、真空濾過により白色の結晶性固体を回収し、その固体を空気乾燥させる。溶液ＮＭＲによりこの結晶性固体の分析は、存在するいかなるギ酸溶媒も示さない。示差熱／熱重量分析により結晶性形態をさらに特徴付けることができ、その結晶性形態は、３８〜１３３℃で２．６の割合の揮発性物質の含有物が損失することを示し、それはＴＧＳ−ＭＳにより水であると決定し、８１℃にて開始イベントを有する。
【００８６】
示差熱／熱重量分析
示差熱／熱重量分析は、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ ＤＴＡおよびＴＧＡユニット（モデルＴＧＡ／ＳＤＴＡ８５１）で実施する。５０ｍＬ／分の窒素パージを加えながら、ピンホールを開けた密閉したアルミニウムパン中で１０℃／分にて２５℃から３００〜３５０℃に試料を加熱する。ＴＧＡ温度はインジウム／アルミニウム標品、ＭＰ＝１５６．６℃および６６０．３℃で較正した。重量較正は、製造業者が供給している標品を用いて実施し、クエン酸ナトリウム脱水脱溶媒和に対して検証する。
【００８７】
ＸＲＤスペクトログラフ分析
ＸＲＤスペクトルを、ＣｕＫ線源（λ＝１．５４０５６、電力：４０ｋＶ、５０ｍＡ）およびＶａｎｔｅｃ検出器を利用するＢｒｕｋｅｒ−ＡＸＳ Ｄ４ Ｅｎｄｅａｖｏｒ Ｘ線回折計を使用して収集した。０．００９°２θのステップサイズおよび０．５秒のステップ当たりの時間を用いて４〜４０°２θの範囲にわたってデータを収集した。方法：ＵＳＰ２９＜９４１＞、変異誤差補正を内部標品の８．８５３°または１７．７５９°２θピークを用いて行った。
【００８８】
主要な２θピークのリストを以下の表１に与える。
【表１】
【００８９】
任意の所定の結晶形態に関して、回折ピークの相対強度が、結晶形態などの要因から生じる好適な配向に起因して変化し得ることは結晶学分野において周知である。好適な配向の影響が存在する場合、ピーク強度は変化するが、多形体の特性ピーク位置は変化しない。例えば、Ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ ＃２３、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ＃１８、１８４３−１８４４ページ、１９９５を参照のこと。さらに、任意の所定の結晶形態に関して、角ピーク位置はわずかに変化し得ることもまた、結晶学分野において周知である。例えば、ピーク位置は、試料が分析され、試料が置換される温度の変化、または内部標品の存在もしくは非存在に起因して変化し得る。この場合において、２θにおいて±０．２°のピーク位置の変化は、本発明の結晶塩の明確な同定を妨げずに、それらの潜在的変化を考慮に入れる。
【００９０】
文献中の結晶形態を検索するための周知で認容されている方法は、「Ｆｉｎｋ」法である。Ｆｉｎｋ法は初期の検索のために４つの最も強いラインを使用し、その後、次の４つの最も強いラインを使用する。
【００９１】
実施例８
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸メタノール溶媒和物
４ｍＬのメタノールにＢＣＣＡ（４グラム）を懸濁し、還流まで加熱する。約５０ｍＬ以上のメタノールを加えて、わずかな懸濁液を生成する。室温まで混合物を冷却し、１日間保持する。真空濾過により固体生成物を単離し、メタノールチャンバに保存して、この準安定結晶形態を水分から保護する。
【００９２】
実施例９
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸エタノール溶媒和物
数時間、１０ｍＬのエタノールにＢＣＣＡ（３グラム）を懸濁する。真空濾過により固体生成物を単離し、エタノールチャンバに保存して、この準安定結晶形態を水分から保護する。
【００９３】
実施例１０
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ギ酸溶媒和物
７ｍＬのイソプロパノールにＢＣＣＡを溶解する。その溶液にギ酸（３ｍＬ）を加える。室温にて曇り点（４ｍＬ）まで水を加える。６時間、７０℃まで懸濁液を加熱し、その後、室温まで冷却する。真空濾過により固体生成物を単離し、空気乾燥する。ＸＲＤスペクトルを実施例７に記載されるように収集した。以下の表２はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【００９４】
【表２−１】
【表２−２】
【００９５】
実施例１１
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸酢酸溶媒和物
１０ｍＬのヘプタンに、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸（１．５ｇ）を懸濁する。５０℃までその懸濁液を加熱する。１ｍＬの酢酸を加えると、懸濁液は透明になる。１０ｍｌ以上のヘプタンを加え、室温まで冷却する。真空濾過により固体生成物を単離し、空気乾燥する。ＸＲＤスペクトルを実施例７に記載されるように収集した。以下の表３はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【００９６】
【表３−１】
【表３−２】
【００９７】
実施例１２
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物（２０．１６ｇ）エタノールＳＤＡ ３Ａ（２００．９４ｍＬ）を５００ｍＬのボトルに加える。磁気撹拌バーを使用して撹拌し、１Ｎの水酸化ナトリウム（３１．９５ｇ）をゆっくりと加える。これは透明な溶液である。
【００９８】
噴霧乾燥：噴霧乾燥器（Ｎｉｒｏ ＳＤ Ｍｉｃｒｏ Ｓｐｒａｙ Ｄｒｙｅｒ）を使用し、３２．５ｋｇ／ｈｒまでの乾燥ガス流速、２．８ｂａｒ、２．０ｋｇ／ｈｒまでの噴霧ガス流速、０．３ｂａｒ、および入口温度（自動制御）１１５℃を使用する。入口温度が１１５℃になると、出口温度は安定化（１０９℃）し、噴霧器に対して８３：１７（ｗ／ｗ）のエタノール：水の流れが開始する。３．０のポンプ設定において、チャンバの壁／出口に液滴は当たらない。熱平衡−出口＝１０４℃に系を到達させる。エタノール：水（室温で）からエタノール／水の溶液中の乾燥サンプルに移す。噴霧乾燥後、１３．５１ｇを得る。
【００９９】
実施例１３
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸マグネシウム塩
５ｍＬのメタノールにトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩（２グラム）を溶解する。２０ｍＬの水に酢酸マグネシウム（３３５ｍｇ）を溶解する。強く撹拌しながら室温にて酢酸マグネシウム溶液を滴下して加え、続いて６５℃まで加熱する。沈殿が生じる。高温にて、さらに１０ｍＬの水を加える。室温まで懸濁液を冷却し、真空濾過により固体生成物を単離し、水でリンスする。室温にて真空オーブン中で生成物を乾燥させる。
【０１００】
ＢＣＣＡのカルシウムおよび亜鉛塩は、ＢＣＣＡマグネシウム塩の調製についてのものと類似の手順により調製できる。カリウム塩は、ＢＣＣＡナトリウム塩の調製についてのものと類似の手順により調製できる。
【０１０１】
実施例１４
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルアミンイソプロピルアルコール（１：１：１）溶媒和物
機械的撹拌器、サーモカップルコントローラー、添加漏斗、および加熱マントルを備えた１Ｌの３つ口丸底フラスコをセットする。トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物（５０ｇ）をヘプタン（５００ｍＬ）に懸濁する。６９．１℃までスラリーを加熱し、イソプロピルアルコール（７０ｍＬ）中の溶液としてｔｅｒｔ−ブチルアミン（５．５７ｇ）を加え、５ｍＬのさらなるイソプロピルアルコールでリンスする。添加後すぐに、溶液が形成する。添加の間、温度は６３℃まで下がるが、添加が完了すると、温度は６９℃まで戻る。トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル−シクロヘキサンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルアミンをスパチュラの先端で播種する。懸濁液が形成し始め、６９℃で撹拌を継続する。５５℃まで反応物を冷却し始める。約１時間で、厚いスラリーが形成する。４５℃まで冷却を継続する。約１時間で、スラリーの温度は３５℃まで下がる。約２時間で、熱源を取り除き、周囲温度まで冷却する。約３時間で、スラリー（ここで温度は２１℃である）を濾過し、１００ｍＬのヘプタンでリンスする。約１．５時間、真空を使用して乾燥させる。３３℃にて真空中で週末にわたって乾燥させる。これにより、５５．９ｇを得る。ＸＲＤスペクトルを、実施例７に記載されているように収集した。以下の表４はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【０１０２】
【表４−１】
【表４−２】
【０１０３】
実施例１５
結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ヘミｔｅｒｔ−ブチルアミン塩ヘミエタノール（２：１：１）溶媒和物
機械的にオーバーヘッド撹拌しながら、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物（５０．５ｇ）をヘプタン（４０４．００ｍＬ）に懸濁する。エタノール（２５．２５ｍＬ）を加え、５５℃まで加熱する。溶液が形成する。５５℃にてｔｅｒｔ−ブチルアミン（２．８１ｇ）を加える。トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ヘミｔｅｒｔ−ブチルアミンヘミエタノール（２：１：１）溶媒和物を播種し、種晶を持続する。温度を５０℃に維持する。６０℃まで発熱して数分以内でかなり厚いスラリーが形成する。撹拌を継続し、５０℃に戻すまで冷却する。約５．５時間後、加熱を止め、周囲温度まで冷却する。約３時間で、濾過し、母液の一部でフラスコの外でリンスし、次いで１００ｍＬのヘプタンでケーキをリンスする。４５℃にて真空中で一晩乾燥させる。５０．９ｇ。ＸＲＤスペクトルを、実施例７に記載されているように収集した。以下の表５はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【０１０４】
【表５−１】
【表５−２】
【０１０５】
実施例１６
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物
スキーム３の工程１３
室温にて、メチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボンキシレート（１２．９５ｋｇ）を２ＭのＮａＯＨ溶液（９．９Ｌ）に加え、反応物を１０分間撹拌する。４０℃〜４５℃にて６時間、反応物を撹拌する。ＨＰＬＣにより反応物をモニターする。混合物に酢酸（３．７５ｋｇ）、続いて水（１．２容積）を加え、ＢＣＣＡ・水和物を播種し、４０℃〜４５℃にて２時間撹拌する。反応混合物に水（２．８容積）を加え、４０℃〜４５℃にて２時間撹拌する。室温まで反応混合物を冷却し、２時間撹拌し、濾過する。固体を回収し、エタノール：Ｈ２Ｏ（１：１；２×２容積）で洗浄し、圧力フィルターで一晩乾燥させる。これにより、工程２において使用するための１５．８７ｋｇの固体物質を得る。
【０１０６】
工程１の固体物質にメタノールを加え、６５℃〜７０℃にて２時間撹拌して、透明な溶液を得る。光沢物をプレート圧力フィルターで二次リアクタに濾過し、濾液を０℃〜５℃にて２時間撹拌し、濾過し、圧力フィルターで一晩乾燥させる。室温にて２時間、水（１０容積）中で再結晶した固体を撹拌し、濾過し、圧力フィルターで乾燥させる。４０℃〜４５℃にて高真空下にてオーブン中で、Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ分析により約２．７〜３．１％の水まで乾燥させる。これにより、１１．８０ｋｇの物質を得る。
Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ分析＝３．１６％
ポジティブモードにおけるＥＳ−ＡＰＩによる質量分析＝６３９．３０；ネガティブモードにおいて６３７．２０。
【０１０７】
化学安定性
以下の表５は、ＢＣＣＡ遊離酸の化学安定性ならびに以下に化合物１３、１４、１５、および１６とそれぞれ番号を付け直した国際公開第０６／００２３４２号に開示されている選択された実施例３１、８９、１５３、および１７５のものを記載する。以下のデータは、化合物１３、１４、および１６に示すものより著しく高い水性の酸性媒質の増加した安定性を示すことにより、ＢＣＣＡ遊離酸が有益な特性を与えることを実証する。ＢＣＣＡ遊離酸についてのこの増加した酸安定性は教示されておらず、国際公開第０６／００２３４２号を考慮しても予測できない。
【０１０８】
【表６−１】
【表６−２】
【０１０９】
試料調製物
１）ＡＣＮ中に化合物ストック：０．９ｍｇ／ｍＬ；２）１００μＬストック＋７００μＬのＡＣＮ＋１ｍＬ培地（０．１ＮのＨＣｌ、５０ｍＭのＰＯ４、ｐＨ８、および０．３％のＨ２Ｏ２）；３）加熱した（４０℃）オートサンプラーにバイアルを入れ、１６または２４時間、４時間間隔で注入する。
【０１１０】
クロマトグラフィーオートサンプラー条件
カラム：Ａｌｌｔｅｃｈ Ａｌｌｔｉｍａ Ｐｈｅｎｙｌ、３μｍ、４．６×１５０ｍｍまたはＷａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ カラム温度：５０℃、注入量：１０μＬ。検出：２２６、２５４または２６６ｎｍ（化合物に応じて）におけるＵＶ。流速：１．５ｍＬ／分。移動相：５０％水／５０％ＡＣＮ中に０．１％ＴＦＡ（化合物ピーク保持時間約５分を維持するためにＡＣＮの％を調整するために必要であり得る）。最終試料濃度０．０５ｍｇ／ｍＬ；ＡＣＮ含有量４４％。
【０１１１】
比較のために、雄のＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットにおけるＣＥＴＰ阻害化合物のＩＶおよびＰＯ薬物動態の決定
以下に記載するのは、交差研究計画において、雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（ｎ＝４）に対する、化合物の単一の１ｍｇ／ｋｇの静脈内ボーラス投与または３ｍｇ／ｋｇの経口投与後の経口バイオアベイラビリティを含む、薬物動態パラメーターを決定することである。静脈内ビヒクルは、２０％のソルトール（ｓｏｌｕｔｏｌ）マイクロエマルション／８０％の純粋である。経口ビヒクルは、ポビドンＵＳＰ１０％／ＳＬＳ０．５％／ＱＳ純粋である。静脈内において、投与後、腕の血液試料を、０．０８、０．２５、０．５、１、２、５、８、１２、および２４時間に収集する。経口において、投与後、腕の血液試料を、０、０．２５、０．５、１、２、５、８、１２、および２４時間に収集する。遠心分離により血漿を得て、氷上に置き、生物学的分析のために、氷上で試料を、Ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（ＢＡＳｉ；Ｗｅｓｔ Ｌａｆａｙｅｔｔｅ，ＩＮ）に輸送するまで凍結させる。ＢＣＣＡの濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより定量し、有効なソフトウェアプログラム（Ｗａｔｓｏｎ、Ｖｅｒｓｉｏｎ７．１）を使用して薬物動態パラメーターを算出する。ＢＣＣＡのバイオアベイラビリティを評価するために、化合物の溶解を促進するために超音波処理を用いるか、または用いないで各々使用される、精製水中の１％ｗ／ｖのナトリウムカルボキシメチルセルロース、０．２５％ｗ／ｖのポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）および０．０５％ ０．０５％のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ａｎｔｉｆｏａｍ １５１０−ＵＳ、または精製水中の精製水中の１％ｗ／ｖのナトリウムカルボキシメチルセルロース、０．５％ｗ／ｖのラウリル硫酸ナトリウム、および０．０５％ ０．０５％のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ａｎｔｉｆｏａｍ １５１０−ＵＳを含む、他のビヒクルを使用してもよい。
【０１１２】
以下の表７のデータは、ＢＣＣＡ遊離酸が、化合物１５（国際公開第０６／００２３４２号における実施例１５３）によって示されるものより４倍高いバイオアベイラビリティを示す有益性を与えることを実証する。この増大したバイオアベイラビリティは教示されておらず、国際公開第０６／００２３４２号を考慮して予測できない。
【０１１３】
【表７】
【０１１４】
アッセイ
本発明の化合物および／または方法の有用性および効果を実証する以下のアッセイプロトコルおよびその結果（複数も含む）は、例示の目的のために与えられ、決して限定することを意図するものではない。
【０１１５】
インビトロでのＣＥＴＰ阻害アッセイ：ＳＰＡアッセイ
インビトロでのシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）を使用して、ＨＤＬとＬＤＬとの間の放射性標識したコレステロールエステルの移動を阻害する本発明の化合物の能力を評価する。このアッセイは、ＣＥＴＰ源によるＨＤＬ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）からビオチン化ＬＤＬ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）への［３Ｈ］コレステロールエステルの移動の阻害をモニターする。このアッセイについてのＣＥＴＰ源は、ヒトＣＥＴＰを発現するために作製されているＡＶ−１２細胞により産生され得る。放射性標識したコレステロールエステルを、ＨＥＰＥＳ−ＮａＣｌベースの緩衝液に移し、３０分のインキュベーション後、反応を停止させ、ビオチン化ＬＤＬをストレプトアビジン／シンチラントコーティングしたＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）に結合する。完全にオープンのウィンドウ設定でＰａｃｋａｒｄ ９６ウェルシンチレーションＴｏｐＣｏｕｎｔｅｒにおいて放射性シグナルを測定する。標準物と比べて、ＬＤＬからの放射性シグナルの低下は、ＣＥＴＰの活性を阻害する化合物の能力を示す。
【０１１６】
代替として、このアッセイにおいて、放射性標識したコレステロールエステルの移動を媒介するために他のＣＥＴＰ源を使用してもよい。例えば、ヒト血漿由来の内因性ＣＥＴＰ、ヒトＣＥＴＰを発現するマウス由来のＣＥＴＰ、およびハムスター由来の内因性ＣＥＴＰを、このアッセイにおけるＣＥＴＰ源として使用してもよい。
【０１１７】
このアッセイにおいて、ＨＥＰＥＳ−ＮａＣｌベースの緩衝液以外の緩衝液を使用してもよい。例えば、ヒト血漿、マウス血漿またはアルブミン中に多く存在するＴｒｉｓ緩衝液を使用してもよい。
【０１１８】
このアッセイにおいて、ＣＥＴＰ活性をトラックするために放射活性の他の源が使用されてもよいことは、当業者により理解されるだろう。
【０１１９】
さらに、このアッセイにおいて、放射性標識したＬＤＬが使用されてもよい。
【０１２０】
このアッセイによるＨＤＬとＬＤＬとの間の放射性標識したコレステロールエステルの移動を阻害するＢＣＣＡの能力を以下の表８に記載する。
【０１２１】
ＣＥＴＰ活性のインビボアッセイ
内因性ＣＥＴＰを発現する、Ｓｙｒｉａｎ Ｇｏｌｄｅｎハムスターを使用して、インビボでの化合物の活性を評価する。７９．５％のコーンオイル、２０％のオレイン酸、０．５％のＬｕｂｒａｆｉｌビヒクルにおいて３０ｍｐｋ用量で試験化合物を、ヒトＣＥＴＰを発現するトランスジェニックマウス（雌または雄のＣＥＴＰおよびＡｐｏ Ａ１ヘテロ接合体マウス、Ｔａｃｏｎｉｃ，Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）の系統に経口投与する。４時間〜４８時間の範囲の投与後の様々な時間において、血液／血漿を得ることができる。このアッセイにおいて、処置動物からの血漿をＣＥＴＰ源として使用する変更をして、インビトロでのＣＥＴＰ活性アッセイについての上記と同様の方法によってＣＥＴＰ活性を定量できる。
【０１２２】
このアッセイによるＢＣＣＡのインビボでの活性を以下の表８に記載する。
【０１２３】
血漿中脂質のインビボアッセイ
インビボでの本発明の化合物の活性は、所定量のＣＥＴＰ含有動物種における化合物による対照に対してＨＤＬコレステロールの上昇レベルを比較することによって評価できる。ＣＥＴＰ活性のインビボアッセイについての上記のように試験化合物を投与する。投与後、４時間〜２４時間の範囲の様々な時間において、血液を得る。血液を凝固させ、遠心分離により凝固血液から血清を得る。血清中のＨＤＬコレステロールレベルは、臨床化学分析器（Ｒｏｃｈｅ／Ｈｉｔａｃｈｉ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）と共にＨＤＬ−Ｃおよび試薬（Ｒｏｃｈｅ／Ｈｉｔａｃｈｉ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を使用する公知の手順により定量できる。さらなる血清脂質は酵素法により分析できる。沈殿またはサイズ排除クロマトグラフィー後、ＶＬＤＬ、ＬＤＬおよびＨＤＬ画分中の脂質を酵素法により分析する。非晶質ＢＣＣＡの投与後８時間におけるＨＤＬコレステロールレベルの上昇の例を以下の表８にまとめる。
【０１２４】
【表８】
【０１２５】
処置方法
本明細書で使用する場合、用語「有効量」とは、心臓血管疾患に起因する様々な病的状態の症状を軽減できる、本発明の化合物、すなわち非晶質ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ・溶媒和物、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物および／もしくは結晶形態におけるＢＣＣＡ・水和物またはそれらの組み合わせの量を意味する。心臓血管疾患の例としては、限定されないが、冠状動脈性心臓病、脳卒中、関節硬化症、脂質異常症、低い高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、高コレステロール血症、および末梢血管疾患が挙げられる。
【０１２６】
本発明に従って投与される化合物の特定の用量は、例えば、限定されないが、投与される化合物、投与経路、患者の状態、および担当医により決定される処置される病的状態を含む、事例に関する特定の状況により決定できる。典型的な日用量は、約１０ｍｇ〜約７５０ｍｇ／日の本発明の化合物を含む。好ましい日用量は、通常、約３０ｍｇ〜約６００ｍｇ／日、さらにより好ましくは約５０〜約３００ｍｇ／日である。
【０１２７】
本発明の化合物は様々な経路によって投与されてもよい。好ましくは、本発明の化合物は、錠剤、固体またはゲルが充填されたカプセル、粉末、溶液または懸濁液に製剤化される。
【０１２８】
本発明の医薬製剤は、周知および容易に入手可能な成分を使用して当該技術分野において公知の手順により調製できる。本明細書で使用する場合、用語「薬学的に受容可能」とは、製剤の他の成分と適合し、それらの受容者に有害でない、１つ以上の担体、希釈剤、賦形剤および塩を指す。医薬組成物およびそれらを調製するためのプロセスは当該技術分野において公知であり、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，「Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら，ｅｄｓ．第１９版，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．）において例が見出され得る。かかる製剤に適している薬学的に受容可能な担体、賦形剤、および希釈剤の非限定的な例としては、以下：デンプン、糖、マンニトール、およびシリカ誘導体；カルボキシメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、およびポリビニル−ピロリドンなどの結合剤；グリセロールなどの保湿剤；炭酸カルシウムおよび炭酸水素ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶解を遅らせるための剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；セチルアルコール、グリセロールモノステアレートなどの界面活性剤；カオリンおよびベントナイトなどの吸着性担体；ならびにタルク、カルシウム、およびステアリン酸マグネシウム、および固体ポリエチルグリコールなどの滑沢剤が挙げられる。一形態において、医薬製剤は、マンニトール、ラウリル硫酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、微結晶セルロースおよびステアリン酸マグネシウムを含み、さらに、約２〜約２１％ｗ／ｗの間の範囲で薬物物質、ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ遊離酸、ＢＣＣＡ水和物または結晶形態におけるＢＣＣＡ水和物を含んでもよい。
【０１２９】
従って、本発明の別の態様は、本発明によって提供される化合物の薬学的に受容可能な塩である。薬学的塩の例は、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊ．Ｐｈａｒ．Ｓｃｉ．，６６：１−１９（１９７７）および「Ａ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ」，Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｃ．Ｇ．およびＳｔａｈｌ，Ｐ．Ｈ．（ｅｄｓ．）Ｖｅｒｌａｇ Ｈｅｌｖｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ，２００２（それらは本明細書に組み込まれる）に見出され得る。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、この化合物の薬学的に受容可能な塩および結晶形態ならびにそれらの調製およびその化合物を使用する治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂質異常症は、循環器疾患（ＣＤ）の主要危険因子である。低密度コレステロール（ＬＤＬ−ｃ）の正常値または上昇値のいずれかを伴う高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−ｃ）の低い血漿中濃度は、アテローム性動脈硬化症および関連する冠動脈疾患の発症の重大な危険因子である。コレステリル（またはコレステロール）エステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）は、ＨＤＬ中のコレステリルエステルを高トリグリセリドリポタンパク質中のトリグリセリドに交換することを促進する糖タンパク質である。ＣＥＴＰ活性の最終結果は、ＨＤＬコレステロールの低下およびＬＤＬコレステロールの増加である。リポタンパク質プロファイルへのこの影響は、ＣＨＤリスク上昇を示す脂質プロファイルを有する対象者において特にアテローム生成誘発性（ｐｒｏ−ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ）であると考えられている。
【０００３】
特許文献１は、循環器疾患の治療に有用なＲ１−Ｒ６が記載された以下の構造を有する特定の化合物を開示している。
【化１】
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第０６／００２３４２号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上述の開示があるにも関わらず、アテローム性動脈硬化症および／または脂質異常症を含む循環器疾患を治療するのに有用な効果的化合物に対する必要性が多く存在する。
【０００６】
経口投与を介して循環器疾患を治療するのに有効であり、酸性環境（例えば、胃の中）において安定な化合物を提供する必要がある。更に、より効果的な治療のためには、化合物は、一旦投与された場合、十分に高いバイオアベイラビリティおよび／または経口曝露を示す必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、これらの必要性に対処し、循環器疾患（例えば、限定されないが、脂質異常症およびアテローム性動脈硬化症）の治療に適した化合物を提供する。本発明は、特に有利でかつ予期せぬ特性を示す化合物を提供する。本発明の特許請求された化合物の物理的特性および薬理学的特性は、当該化合物を経口投与用の錠剤に製剤化するのに特に適している。特に有利な特性としては、とりわけ、より高い安定性、溶解性、および／またはバイオアベイラビリティが挙げられる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明は、以下に例示した式Ｉの構造を有するトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ Ｉｎｄｅｘ Ｎａｍｅに従って特定された（本願明細書においてＢＣＣＡと称される）である化合物、および、この化合物の薬学的に受容可能な塩を提供する。
【化２】
【０００９】
化合物（ＢＣＣＡ）は、溶媒和物（本願明細書においてＢＣＣＡ・溶媒和物と称される）および水和物（本願明細書においてＢＣＣＡ・水和物と称される）として、遊離酸（本願明細書においてＢＣＣＡ遊離酸と称される）またはその薬学的に受容可能な塩であり得る。溶媒和物分子としては、水（水和物として）、メタノール、エタノール、ギ酸、酢酸、およびイソプロパノールが挙げられる。
【００１０】
本発明は、ＢＣＣＡである化合物、その薬学的に受容可能な塩、またはその水和物もしくは溶媒和物を提供する。一つの形態において、ＢＣＣＡ化合物は、遊離酸として提供される。他の形態において、ＢＣＣＡは、結晶形態のＢＣＣＡ・水和物またはＢＣＣＡ（遊離酸または塩のいずれかとして）・溶媒和物として提供される。更に他の形態において、本発明は、ＢＣＣＡ・水和物またはＢＣＣＡ・溶媒和物から無定形の固体形態までのＢＣＣＡを提供する。
【００１１】
本発明は、（ａ）２θにて７．５、９．２、１０．７、および１５．５＋／−０．２；（ｂ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１５．０、１５．５、および１９．５＋／−０．２；または（ｃ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１１．３、１５．０、１５．５、１７．７、１９．５、および２５．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・水和物である化合物を提供する。
【００１２】
別の形態において、本発明は、（ａ）１７５．６、１６８．０、６１．１、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；（ｂ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、６１．１、４５．０、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；または（ｃ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、１３９．９、１３６．３、６１．１、５３．０、４９．８、４５．０、２１．２、および１８．２＋／−０．２ｐｐｍにてアダマンタン（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照標準とするピークを含む固相ＮＭＲスペクトルにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・水和物である化合物を提供する。
【００１３】
更に他の形態において、ＢＣＣＡは、（ａ）２θにて７．５、９．２、１０．７、および１５．５±０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターン、または、（ｂ）１７５．６、１６８．０、６１．１、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍにてアダマンタイン（ａｄａｍａｎｔｉｎｅ）（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照基準とするピークを含む固相ＮＭＲスペクトル、のうちの少なくとも１つにより特定された結晶形態のＢＣＣＡ・水和物として提供される。
【００１４】
本発明は、（ａ）２θにて５．５、９．０、１４．３、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または（ｂ）２θにて５．５、９．０、１４．３、１７．５、１８．２、１９．４、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または（ｃ）２θにて５．５、９．０、１３．２、１３．６、１４．３、１５．２、１７．５、１８．２、１９．４、１９．８、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・ヘミ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・ヘミエタノール溶媒和物である化合物を提供する。
【００１５】
本発明は、（ａ）２θにて１５．４、１６．９、１８．２、および１８．６＋／−０．２；または（ｂ）２θにて１５．４、１５．７、１６．９、１８．２、１８．６、１９．５、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２；または（ｃ）２θにて１３．０、１３．９、１５．４、１５．７、１６．９、１６．４、１８．２、１８．６、１９．５、２０．８、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・ギ酸溶媒和物である化合物を提供する。
【００１６】
本発明は、（ａ）２θにて１２．９、１５．１、１８．４、１９．４、および２０．８＋／−０．２；または（ｂ）２θにて１２．９、１３．８、１５．１、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、および２０．８＋／−０．２；または（ｃ）２θにて１１．００、１２．９、１３．８、１５．１、１５．６、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、２０．８、および２１．７＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡ・酢酸溶媒和物である化合物を提供する。
【００１７】
本発明は、（ａ）２θにて５．６、１１．３、１２．６、および１７．９＋／−０．２；または（ｂ）２θにて５．６、８．０、１１．３、１２．６、１７．９、２０．４、および２４．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のＢＣＣＡｔｅｒｔブチルアミン塩・イソプロパノール溶媒和物である化合物を提供する。
【００１８】
別の形態において、本発明は、水（水和物とも称される）、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ギ酸、及び酢酸から選択される溶媒和物として、ＢＣＣＡ、またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。ＢＣＣＡ対溶媒和物のモル比は、約１：０．３から約１：１まで、より好ましくは、約１：０．５から約１：１＋／−０．２（ＢＣＣＡまたは塩：溶媒和物）までの間であり得る。好ましい溶媒和物としては、水、イソプロパノールおよびエタノールが挙げられる。
【００１９】
別の形態において、本発明は、薬学的に受容可能な塩としてＢＣＣＡを提供する。この薬学的に受容可能な塩に好ましいカチオンは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、及びｔｅｒｔ−ブチルアミン（及びｔｅｒｔ−ブチルアンモニウム）から選択され得る。より好ましいカチオンは、ナトリウム、カルシウムおよびｔｅｒｔ−ブチルアミンである。
【００２０】
本発明は、ＢＣＣＡ遊離酸として実質的に純粋なＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩、ＢＣＣＡ・水和物、ＢＣＣＡ・溶媒和物（またはＢＣＣＡ・水和物）および結晶形態のＢＣＣＡ塩・溶媒和物（個々に「参照ＢＣＣＡ形態（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｄ ＢＣＣＡ ｆｏｒｍ）」）を提供する。本願明細書において使用する場合、用語「実質的に純粋な」とは、８０％ｗ／ｗより多い参照ＢＣＣＡ形態を含む組成物、好ましくは９５％ｗ／ｗより多い参照ＢＣＣＡ形態を含む組成物、および更により好ましくは９８％ｗ／ｗより多い参照ＢＣＣＡ形態を含む組成物をいう。特に好ましい態様において、本発明は、実質的に純粋な結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を提供する。
【００２１】
本発明は、ＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能な担体、賦形剤、または希釈剤のうちの少なくとも１つを含む、医薬組成物を提供する。選択された形態において、この医薬組成物は、ＢＣＣＡ遊離酸として実質的に純粋なＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩、ＢＣＣＡ・溶媒和物、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物または結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を含む。特に好ましい態様において、この医薬組成物は、実質的に純粋な結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を含む。
【００２２】
本発明はまた、循環器疾患の患者を治療する方法であって、この患者に治して有効量のＢＣＣＡを投与することを含む方法を提供する。好ましい形態において、この方法は、ＢＣＣＡ・水和物としてＢＣＣＡを投与することを含む。更に他の形態において、この方法は、結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物または結晶形態のＢＣＣＡ・水和物を投与することを含む。
【００２３】
本発明は、循環器疾患（例えば、限定されないが脂質異常症およびアテローム性動脈硬化症）を治療するための医薬を製造するための本発明に従うＢＣＣＡ（ＢＣＣＡ遊離酸またはその薬学的に受容可能な塩、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物、ＢＣＣＡ・水和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・水和物として）の使用を提供する。
【００２４】
本発明は、医薬としてＢＣＣＡ（本発明に従うＢＣＣＡ遊離酸；ＢＣＣＡ塩・溶媒和物、ＢＣＣＡ・水和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物として）を提供する。本発明はまた、治療に使用するためのＢＣＣＡ（本発明に従うＢＣＣＡ遊離酸；またはＢＣＣＡ塩・溶媒和物、ＢＣＣＡ・水和物、結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物）を提供する。
【００２５】
本発明は、循環器疾患（例えば、限定されないが脂質異常症およびアテローム性動脈硬化症）の治療における使用のためのＢＣＣＡ（本発明に従うＢＣＣＡ遊離酸；またはＢＣＣＡ・水和物、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物、または結晶形態のＢＣＣＡ・溶媒和物として）を提供する。
【００２６】
本発明はまた、式Ｉの化合物、またはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、以下に示した構造
【化３】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を有する化合物を提供する。好ましいＲ基としては、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルが挙げられる。特に好ましいＲ基としては、メチル、エチル、フェニルおよびベンジルが挙げられる。
【００２７】
本願明細書において言及される、用語Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−５アルキルは、１〜４個の炭素原子または１〜５個の炭素原子をそれぞれ有する直鎖または分枝状のアルキル鎖を含む。用語ハロアルキルは、１つ以上の炭素原子に結合した１つ以上のハロゲンを有するアルキル基をいう。上述のとおり、アルキル基は、直鎖または分枝状の鎖であり得る。好ましいハロゲンは、フッ素、塩素、および臭素である。フッ素が特に好ましい。
【００２８】
更に別の形態において、本発明は、下式の化合物
【化４】
またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。
【００２９】
本発明は、ＢＣＣＡを調製する方法を提供する。この方法は、ＢＣＣＡまたはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、式Ｉの化合物、またはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、以下の式ＩＩの化合物
【化５】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、及びＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を脱エステル化することを含む。好ましいＲ基としては、Ｃ１−４アルキル、フェニル、およびＣ１−５アルキルフェニルが挙げられる。特に好ましいＲ基としては、メチル、エチル、フェニルおよびベンジルが挙げられる。
【００３０】
この方法はまた、シクロヘキシル基上の保護カルボン酸置換基を脱保護することを含み得る。種々の酸を保護する官能性の例として、保護酸を調製する方法およびこの酸を脱保護する方法については、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，３ｒｄ Ｅｄ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．，Ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９９に見出され得る。当業者は、カルボン酸および保護カルボン酸に加えて、カルボン酸に容易に置換され得る他の官能基が、カルボン酸または保護酸の適当な位置に使用され得ることを理解する。このような官能基、調製、および、これらの基のカルボン酸への転換については、Ｌａｒｏｃｋ．Ｒ．Ｃ，Ｗｉｌｅｙ ＶＣＨ，１９９９による「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ：Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ」および「Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．，ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，６ｔｈ Ｅｄ．２００７に見出され得る。
【００３１】
更に別の形態において、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供するために、以下の式ＩＩＩの化合物
【化６】
を
【化７】
（式中、Ｒは上述した通りである）と縮合することを更に含む、上記の方法を提供する。上述したように、カルボン酸、エステルまたは真上の構造においてＣＯ２Ｒとして示した保護酸は、カルボン酸または保護酸へと変換され得る官能基と置換され得る。
【００３２】
好ましくは、有効なＣＥＴＰ阻害剤化合物は、化学的および熱的の両方において安定であるべきであり、投与および製剤化をしやすくするために十分な溶解性を示すべきであり、十分な活性を維持するべきである。更に、化合物は、インビボにおける有効な治療のための化合物量を提供するために、十分に高いバイオアベイラビリティを示すべきである。ＢＣＣＡにより示されるこれらの特性は、従来技術によって考えられるものでも予測できるものでもない。
【００３３】
ＢＣＣＡ・水和物は、小規模または非常に少ない分解を伴う周囲温度にて保管され得る。化合物、すなわち結晶形態のＢＣＣＡ・水和物は、示差走査熱量測定により測定される場合、標準的な工業プロセス（例えば、フライス（ｍｉｌｌｉｎｇ））に受容可能である、約５０℃よりも高い脱溶媒和および／または溶解の発現を有する。更に、ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・イソプロパノール溶媒和物、ＢＣＣＡヘミｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・ヘミエタノール溶媒和物および結晶形態のＢＣＣＡ・水和物は、周囲温度にて保管される場合、非吸湿性である。加えて、薬学的に受容可能な塩（例えば、カルシウムおよび亜鉛塩）は、周囲温度にて保管される場合、基本的に非吸湿性である。
【００３４】
遊離酸、塩、溶媒和物または結晶形態の水和物としてのＢＣＣＡは、以下のスキーム１、２、３および４において一般的に示され、以下の調製例および実施例においてより詳細に記述される、以下の手順に従って調製され得る。
【００３５】
以下の略語が本願明細書において使用される。ＡＣＮはアセトニトリルを意味し；ＡｃＯＨは酢酸を意味し；（Ｓ）−ＢＩＮＡＰはＳ−（−）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチルを意味し；ＣＢＺ−Ｃｌはクロロギ酸ベンジルを意味し；ｃｐｄは化合物を意味し；Ｂｎはベンジルを意味し；ＤＭＦはジメチルホルムアミドを意味し；Δは熱の適用を意味し；ＤＩ水は脱イオン水を意味し；ｅｑは当量を意味し；エルブミンはｔｅｒｔ−ブチルアミン（またはｔｅｒｔ−ブチルアンモニウム塩）、２，２−ジメチルエチルアミンまたは２−メチル−２−プロパンアミンを意味し；ＩＰＡはイソプロピルアルコールを意味し；Ｍはモル／リットルを意味し；ｍｏｌはモル（ｍｏｌｅｓ）を意味し；ＭＴＢＥはメチルｔｅｒｔブチルエーテルを意味し；Ｎは標準溶液を意味し；ＰＰＴＳはピリジニウムｐ−トルエンスルホネートを意味し；ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を意味し；ＴＨＦはテトラヒドロフランを意味し；ＲＴは室温を意味する。反対に示さない限り、本願明細書において例示される化合物は、ＣＨＥＭＤＲＡＷ ＵＬＴＲＡ ＡＵＴＯＮＯＭ ｖｅｒｓｉｏｎ ７．０．１またはＳｙｍｙｘ（登録商標）Ｄｒａｗ ｖｅｒｓｉｏｎ ３．２を使用して名称付けおよび番号付けされる。
【化８】
【化９】
【００３６】
調製例
他に指定しない限り、全ての非水性反応を窒素の乾燥雰囲気下で実施した。反対に示さない限り、製造業者から受け取った場合、商業的な等級の試薬および無水溶媒を使用し、それらの成分をさらに精製または乾燥させることはしなかった。減圧下での溶媒の除去は、テフロン（登録商標）加工のＫＮＦ真空ポンプを使用して約２８ｍｍＨｇ圧力でＢｕｃｈｉロータリーエバポレーターを用いて行った。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌシリカゲル６０を使用して実施した。プロトンＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ３００ＭＨｚ核磁気共鳴分光法で得て、内部基準としてテトラメチルシランを使用して、ｐｐｍδ値で報告する。ＡＰＩ質量分光分析は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）を使用して、Ｆｉｎｎｅｇａｎ ＬＣＱ Ｄｕｏ Ｉｏｎ ＴｒａｐまたはＰＥＳｃｉｅｘ ＡＰＩ １５０ＥＸ質量分析計で実施した。ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８、５μｍ、ＷＡＴ０４６９８０、３．９×１５０ｍｍカラムを使用して実施した。溶出系は、１０分以上の９５：５（Ｈ２Ｏ中の０．１％ＴＦＡ）／（ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ）勾配溶出から０：１００（Ｈ２Ｏ中の０．１％ＴＦＡ）／（ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ）、続いて１５分間、ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ定組成溶出から構成した。流速は１ｍＬ／分であった。ＵＶ検出は２５４ｎｍまたは２２０ｎｍで実施した。調製例および実施例の上気の選択された物理的性質を同定および精製評価のための既知の試料と比較した。
【００３７】
調製例１
メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（３）
オーバーヘッド撹拌器、冷却器、加熱マンテル（ｈｅａｔｉｎｇ ｍａｎｔｅｌ）、５Ｌの添加漏斗およびＮ２パージを備えた２２Ｌのフラスコに、２−アミノ−３，５−ジメチル安息香酸（２）（７０５ｇ、４，２７ｍｏｌｅ、１．０当量、Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ Ｂｅｒｉｃｈｔｅ １９９２、１２５（４）、８４９−８５５に開示されている手順に実質的に従って調製した）および水酸化ナトリウム（８．０８ｋｇ、８．４６ｍｏｌｅ）を入れた。得られた暗溶液を撹拌しながら４５℃まで加熱する。１，４ジオキサン（２．７５Ｌ、２２．７ｍｏｌｅ）に溶解したジ−ｔ−ブチルジカルボネート（１．９２ｋｇ、９．０８ｍｏｌ）を添加漏斗に入れる。ジ−ｔ−ブチルジカルボネート溶液をフラスコに加え、反応温度を約４５℃に維持しながら一晩撹拌する。さらに５００ｍＬの１，４ジオキサンに溶解したジ−ｔ−ブチルジカルボネート（０．９６１ｋｇ、４．２７ｍｏｌｅ）を添加漏斗に入れ、撹拌し、約４５℃に反応温度を室温まで冷却しながら、その内容物をフラスコにゆっくりと加える。反応が完了した後、硫酸ジメチル（６０７．１ｍＬ、６．４０ｍｏｌｅ）を滴下して加え、反応温度を室温に維持しながら一晩撹拌する。得られたスラリーを濾過し、固体を回収し、水（２×２Ｌ）で洗浄する。真空（５０℃）中で乾燥させて、粗物質（７４８ｇ）として標題化合物を得る。
【００３８】
調製例２
メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（４−エトキシ−４−オキソブチル）アミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（４）
オーバーヘッド撹拌器、加熱マントル、冷却器およびＮ２パージを備えた２２Ｌのフラスコに、ＤＭＦ（１０Ｌ）、エチル−４−ブロモブチレート（１．０７ｋｇ、７８７．８ｍＬ、５．３２ｍｏｌｅ）、炭酸セシウム（２．９２ｋｇ、２２．５ｍｏｌｅ）、およびメチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（１，０００．０ｇ、３．５４ｍｏｌｅ）を入れる。得られた混合物を約５５℃まで加熱し、４８時間撹拌する。冷却し、固体を濾過し、ＭＴＢＥ（２×４Ｌ）で固体を洗浄する。濾液およびＭＴＢＥ洗浄物を５０Ｌのフラスコ中で合わせ、約５℃未満まで冷却する。水（６Ｌ）を加えて反応をクエンチする。層を分離する。水層をＭＴＢＥ（３Ｌ）で洗浄し、有機層を合わせ、得られた有機溶液をブライン（２×３Ｌ）で洗浄する。有機溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回収した固体をＭＴＢＥで洗浄して、１．５８２ｋｇの標題化合物を得る。
【００３９】
調製例３
ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１，４−ジカルボキシレート（５Ａ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピジン−１，４−ジカルボキシレート（５Ｂ）
オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、５Ｌの添加漏斗、窒素パージおよび冷却浴を備えた２２Ｌのフラスコに、ＴＨＦ（３．５Ｌ）に溶解したメチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（４−エトキシ−４−オキソブチル）アミノ）−３，５−ジメチルベンゾエート（７００ｇ、１．７８ｍｏｌｅ）を入れ、約５℃未満まで冷却する。ＴＨＦ（ＫＯｔ−Ｂｕ、３．５６ｍｏｌｅ、１Ｍ）中の１Ｍのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを添加漏斗に入れ、反応温度を約５℃に維持しながら、冷却したＴＨＦ溶液に滴下して加える。添加後、完了すれば、反応混合物を周囲温度まで加温する。反応が完了した後、混合物を１０℃未満まで冷却し、２．５ＭのＨＣｌをゆっくりと加えて、約３未満のｐＨを有する混合物を得る。ＭＴＢＥ（４Ｌ）を加え、撹拌し、次いで水層から有機層を分離する。水層をＭＴＢＥ（２Ｌ）で抽出する。有機層を合わせ、ブライン（２×３Ｌ）で連続して洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回収した固体をＭＴＢＥでリンスする。濾過溶液を合わせ、真空下で溶媒を除去して、橙色の油状物（６７０ｇ）として標題化合物の混合物を得る。
【００４０】
調製例４
７，９−ジメチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５（２Ｈ）−オン塩酸塩（６）
オーバーヘッドスターラー、加熱マントル、サーモカップル、窒素パージおよびテフロン（登録商標）トランスファーラインを備えた５Ｌのフラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル４−エチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１，４−ジカルボキシレートおよびＩＰＡ（２Ｌ）に溶解したｔｅｒｔ−ブチル４−メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１，４−ジカルボキシレート（１２８６ｇ、３．５６ｍｏｌｅ）の混合物を入れ、得られた混合物を５０℃まで加熱する。オーバーヘッドスターラー、加熱マントル、サーモカップル、およびスクラバーに対する窒素パージを備えた別の１２Ｌのフラスコに、５ＮのＮａＯＨ（１Ｌ）およびＨ２Ｏ（３Ｌ）を加える。その後、ＨＣｌ（濃縮物、１．８７Ｌ、２１．８ｍｏｌｅ）を１２Ｌのフラスコに加え、５０℃まで加熱する。反応物からオフガスを取り除くためにＮ２でフラッシュしながら、５Ｌのフラスコの内容物をトランスファーラインによって１２Ｌのフラスコに移す。添加後、得られた混合物を８０℃まで加温し、Ｎ２フラッシュを継続する。反応が完了した後、反応混合物を約２０℃未満まで冷却する。ＭＴＢＥ（４Ｌ）を加え、ＮａＯＨ水溶液を用いてｐＨを中性に調整する。得られた反応混合物を２２Ｌのフラスコに移し、層を分離する。ＭＴＢＥ（２×２Ｌ）で水層を洗浄する。有機洗浄物を合わせ、ブライン（２Ｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、ＭＴＢＥでリンスする。濾液を暗い油状物まで濃縮する。ＩＰＡ（８容積）に溶解し、オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、１Ｌの添加漏斗およびＮ２パージを備えた１２Ｌのフラスコに移す。ＨＣＬ（濃縮物、７６５ｍＬ）を添加漏斗に入れ、ＩＰＡ溶液に約１時間にわたって滴下して加える。約１〜２時間、得られたスラリーを撹拌し、濾過し、冷ＩＰＡ（３×５００ｍＬ）で固体をリンスし、約５０℃で固体を一晩乾燥させて、５６１ｇの標題化合物を得る。
【００４１】
調製例５
ベンジル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（７）
オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、３Ｌの添加漏斗、バッフル、冷却浴およびＮ２パージを備えた２２Ｌのフラスコに、７，９−ジメチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５（２Ｈ）−オン塩酸塩（１，０００ｇ、４．４３ｍｏｌｅ）を入れる。２−メチルテトラフドロフラン（６．４４ｋｇ、７．５Ｌ、７４．５ｍｏｌｅ）を加え、オフホワイトのスラリーを撹拌する。５〜１５℃まで冷却する。水２．５Ｌ、１３８．８ｍｏｌｅおよびＮａ２ＣＯ３（１．１２ｋｇ、３ｍｏｌｅ）を添加漏斗に加え、次いで約２５分にわたって速い滴下で反応混合物にゆっくりと加える。クロロギ酸ベンジル（９１．５９ｋｇ、８．８６ｍｏｌｅ）を２Ｌの添加漏斗に入れ、約１５℃以下に反応混合物を維持しながら、反応物に滴下して加える。冷却器を備えたフラスコに得られた混合物を移し、２５〜２５℃まで加熱し、約５０時間撹拌する。約１５℃まで冷却し、ＨＣｌ（５Ｍ、ｐＨは約５になるまで）を加える。層を分離する。メチルテトラヒドロフラン（４Ｌ）で水層を抽出し、有機層を合わせ、水（４ｌ）で洗浄する。約４０℃で有機層を濃縮する。ＩＰＡ（４Ｌ）を加え、次いで２Ｌまで濃縮する。オーバーヘッドスターラー、サーモカップル、加熱マントル、冷却器、２Ｌの冷却器、２Ｌの添加漏斗およびＮ２パージを備えた１２Ｌのフラスコに移す。フラスコ内容物を約７０〜８０℃まで加熱し、ヘプタン（５Ｌ）を加える。ＲＴまで一晩ゆっくりと冷却し、必要であれば混合物を播種して、標題化合物の結晶化を誘導する。固体を冷却し、回収し、冷ヘプタンで固体をリンスし、５０℃にて真空中で乾燥させて、１，３１６ｇの標題化合物を得る。
【００４２】
調製例６
（Ｚ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（８Ａ）および（Ｅ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（８Ｂ）の混合物
オーバーヘッドスターラー、加熱マントル、サーモカップル、冷却器、ディーンスタークトラップ、およびＮ２パージを備えた１２Ｌのフラスコに、ベンジル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（９２０ｇ、２．８４ｍｏｌｅ）およびトルエン（４００ｍＬ）を入れる。トルエン（５００ｍＬ）をディーンスタークトラップに加え、撹拌を開始する。２−メチル−５−アミノテトラゾール（５６３．８ｇ、５．６９ｍｏｌｅ）およびＰＰＴＳ（３６４．８ｇ、０．５ｍｏｌｅ）を加え、得られた混合物を還流まで加熱する。冷水５Ｌを加え、混合物が酸性になるのを防ぐためにｐＨをモニタリングしながらＮａＨＣＯ４（８５０ｇ）溶液中に注ぐ。層を分離し、トルエン（４Ｌ）で水層を洗浄する。有機層を合わせ、水（２×４Ｌ）で洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させ、濾過し、トルエンで固体をリンスする。約５５℃にて真空中で濾液を濃縮して、１．１８６ｋｇの上記の標題化合物の混合物を得る。
【００４３】
調製例７
（Ｓ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（９）
（Ｚ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルイミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレートおよび（Ｅ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（４．０４ｇ、１０ｍｍｏｌｅ）、Ｓ−（−）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（（Ｓ）−ＢＩＮＡＰ、６０ｍｇ、９６．３μｍｏｌｅ）、ＫＩ（４１５ｍｇ、２４ｍｍｏｌｅ、所望の場合ＫＩは除かれてもよい）およびジクロロ−ビス（（１，２，５，６ｅｔａ）−１，５−シクロオクタジエン）ジイリジウム（Ｉｒ２Ｃｌ２（ＣＯＤ）２（９２７ｍｇ、４０．２μｍｏｌｅ）の混合物をオートクレーブに入れる。オートクレーブを窒素でパージする。無酸素環境を維持しながら、脱気したトルエン（５０ｍＬ、４７２．８ｍｍｏｌ）を加え、オートクレーブを密閉する。５００ｐｓｉ Ｈ２下で６６時間、１００℃まで加熱する。室温まで反応混合物を冷却し、通気する。固体を濾過し、有機混合物を回収する。有機混合物を水（２×２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過する。濾液を回収し、真空下で溶媒を除去して、標題化合物（３．９９ｇ、ＨＰＬＣにより８８．７％ｅｅ）を得る。
【００４４】
調製例８
（Ｓ）−ベンジル５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（１０）
（Ｓ）−ベンジル７，９−ジメチル−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルアミノ）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ、２４６μｍｏｌｅ）、ＮａＨ（２３ｍｇ、鉱油中に６０％、５７５．１μｍｏｌｅ）およびＴＨＦ（９．２ｍｌ、２４．６ｍｍｏｌｅ）をバイアルに入れる（代替として、ＤＭＦ中のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドをＮａＨおよびＴＨＦの代わりに使用できる）。反応混合物を室温で１０分間撹拌する。３，５ビス（トリフルオロメチル）ベンジルブロミド（１７３．８ｍｇ、５６６．２μｍｏｌｅ）を３０分にわたって滴下する。約１９時間後、ＮａＨ（１０ｍｇ、６０％鉱油）を加え、さらに１時間撹拌する。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とブライン（２×２５ｍＬ）との間に反応混合物を分配する。有機層を回収し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、次いで濾液を濃縮して、油状物を得る。その油状物をＡＣＮ（５０ｍＬ）とヘプタン（２×２５ｍＬ）との間に分配する。ＣＡＮ層を回収し、乾燥させて、標題化合物の油状物（１８９ｍｇ）を得る。
【００４５】
調製例９
（Ｓ）−Ｎ−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５−アミン（１１）
ＭｅＯＨ（３９１ｍＬ，９６６ｍｏｌｅ）に溶解したギ酸アンモニウム塩（３９．０ｇ、６１８．０ｍｍｏｌｅ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３．９１ｇ）および（Ｓ）−ベンジル５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−カルボキシレート（３９．１ｇ、６１．８ｍｍｏｌｅ）を１Ｌのフラスコに入れる。得られたスラリーを室温で撹拌し、ＨＰＬＣによりモニターする。反応が完了した後、濾過して固体を回収する。ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で固体をリンスする。濾過溶液と有機洗浄物を合わせ、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過して、乾燥するまで濃縮する。ＭｅＯＨ（９２ｍＬ）に溶解し、標題化合物の種晶を播種する。冷却し、一晩保存して、１４．０３ｇ、４５．５％の標題化合物を得る、ＨＰＬＣにより９９．９２％ｅｅ。
【００４６】
調製例１０
（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１２）
オーバーヘッドスターラー、温度プローブ、窒素入口を備えたフラスコに、（Ｓ）−Ｎ−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−５−アミン（５ｇ、１０．０３ｍｍｏｌｅ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３．１９ｇ、１５．０５ｍｍｏｌｅ）およびアセトニトリル（４０ｍＬ）を入れる。氷浴にフラスコを浸して約５℃以下までスラリーを冷却し、次いで約５℃に、または約５℃以下に反応混合物を維持しながら、シリンジによりＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した（トランス）−メチル４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（２．９９ｇ、１７．５７ｍｍｏｌｅ、Ｈｏｕｐｉｓ、Ｉ．Ｎ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔ．１９９３、３４（１６）、２５９３−２５９６およびＪＰ４９０４８６３９における手順に従って実質的に調製した）を加える。反応物を室温まで加温し、一晩撹拌する。ＮＨ４Ｃｌ（２５ｍＬ、５０％飽和水溶液）を加え、有機層から水層を分離する。有機層のｐＨは約５．５になるはずである。有機層を約４５℃まで加温し、水（１６ｍＬ）を加える。標題化合物の種晶を加え、約３５℃まで冷却する。得られた固体を濾過により回収し、ＡＣＮでリンスする。乾燥させて５．８０ｇの標題化合物を得る。
【化１０】
【化１１】
【００４７】
調製例１２
メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート
工程１：３０００Ｌのグラスライニングリアクタを−０．０８ＭＰａ未満まで排気し、次いで標準圧力までＮ２を満たし、３回繰り返す。Ｎ２下で、撹拌しながら２，４−ジメチルアニリン（３００．０ｋｇ）およびトリエチルアミン（８７３．０ｋｇ）をリアクタに入れる。７０〜７５℃まで混合物を加温し、次いで７０〜７５℃の温度を維持しながら５００Ｌの添加容器により２０〜２５ｋｇ／時間の速度でエチル４−ブロモブチレート（６０４．０ｋｇ）を加える。混合物を７０〜７５℃で２時間撹拌し、次いでＧＣにより反応完了を検査する。２つの連続した試料の２，４−ジメチルアニリンの含有量が３％未満であり、不純物の（エチル４−（（２，４−ジメチルフェニル）（３−（プロピオニルオキシ）プロピル）アミノ）ブタノエート）の含有量が１０％未満である場合、反応が完了したとみなす。５６時間後、不純物の含有量が１０％未満であるが、２，４−ジメチルアニリンの含有量が依然として３％より高いので、過剰な４−ブロモブチレート（６．０ｋｇ）を混合物に加え、次いで１７．５時間後、２，４−ジメチルアニリンの含有量は依然として３％より高いが、反応をクエンチする。
【００４８】
反応物を１５〜２５℃まで冷却し、２つの５０００Ｌのグラスライニングリアクタに移す。各リアクタについて、水（１２００．０ｋｇ）およびトルエン（１０４４．０ｋｇ）を加える。混合物を１時間撹拌し、分離前に１時間保持する。２つのリアクタの有機相を合わせ、水（１２００．０ｋｇ×２）で２回洗浄する。トリエチルアミンが２３％未満であることを確実にするために有機相をサンプリングする。
【００４９】
画分が現れず、トリエチルアミンの重量％が０．１％未満になり、ＫＦが１％未満になるまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下）で５０〜６０℃にて有機相を濃縮する。混合物を２０〜３０℃まで冷却し、生成物（エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエート）を工程２において直接使用する。
【００５０】
ガスクロマトグラフ（ＧＣ）：カラム：ＨＰ−５、３０ｍ長さ×０．３２ｍｍＩＤ×０．２５μｍフィルムまたはカラム等価物；キャリアガス：ヘリウムガス；流速１．９０ｍＬ／分；ランタイム：２２．５分；プログラム：初期温度：５０℃（オン）および初期時間：２．００分；ランプ：１ レート：２０ 最終温度：２６０ 最終時間：１０．００；ランプ＃２：０．０（オフ）；注入温度２５０℃；検出温度：３００℃。
【００５１】
保持時間：１）（１３．５６分）エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエート；２）（１７．４０）エチル４−（（２，４−ジメチルフェニル）（３−（プロピオニルオキシ）プロピル）アミノ）ブタノエート；３）（８．３８分）２，４−ジメチルアニリン。
【００５２】
工程２：トルエン（７４２．０ｋｇ）およびエチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエート（１７１．０ｋｇ）を２０００Ｌのグラスライニングリアクタに入れる。混合物を撹拌し、炭酸ナトリウム（７７．０ｋｇ）を一部ずつ加える。２０〜２５℃に温度を維持し、１８ｋｇ／時間の速度でクロロギ酸メチル（９６．２ｋｇ）を加える。混合物を２０〜２５℃で撹拌し、ＧＣにより１時間後モニターする。エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエートの含有量が１％未満である場合、反応が完了したとみなす。５０００Ｌのグラスライニングリアクタに混合物を移し、トルエン（７５ｋｇ）で２０００Ｌをリンスする。２０〜２５℃に温度を維持しながら、３６０〜４００ｋｇ／時間の速度でＮａＯＨ（８７．２ｋｇ）、メタノール（９３４．０ｋｇ）および水（１４８２．０ｋｇ）の溶液を加える。次いで、５５〜６５℃まで混合物を加熱し、５５〜６０℃で撹拌する。１時間後、ＨＰＬＣにより試料を検査して、エチル４［（２，４ジメチルフェニル）アミノ］ブタノエートのレベルを定量する。２０〜３０℃まで混合物を冷却し、１時間保持し、次いで分離する。９２９ｋｇのメタノールが蒸留するまで減圧下（０．０９ＭＰａ以下）で４０〜５０℃にて水相を濃縮する。
【００５３】
１５〜２５℃まで混合物を冷却し、水（２５６．５ｋｇ）を加え、０．５時間撹拌し、ジクロロメタン（３４２．０ｋｇ×２）で抽出する。０〜５℃まで温度を下げ、維持し、４０〜５０ｋｇ／時間の速度で濃ＨＣｌ（２６９．０ｋｇ）を加えて、ｐＨを１〜２に調整する。１５〜２５℃まで混合物を加熱し、この温度を維持しながら１時間撹拌する。分離し、ジクロロメタン（６８４．０ｋｇ×２）で水相を抽出し、有機相を合わせる。０．５％ＨＣｌ（３４２．０ｋｇ×２）で有機相を２回、次いで濃ＨＣｌ（３．４×２ｋｇ）で２回洗浄する。画分が現れなくなるまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下；４０〜５０℃）で有機相を濃縮する。残留物（４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸）（調製例１１）にジクロロメタン（２５０．０ｋｇ）を加え、次の工程に直接使用する。１９０．０ｋｇ（４０７．４ｋｇ溶液）；収率：９８．５％；純度：９７．８％。
【００５４】
ＨＰＬＣ：カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８；４．６×１５０ｍｍ、３．５μｍ；２３０ｎｍ検出；１．０ｍｌ／分の流速；温度２５℃；アイソクラチック移動相：Ａ：ＡＣＮ；Ｂ：Ｈ２Ｏ＋０．１％Ｈ３ＰＯ４（ｖ／ｖ）。保持時間：（１３．８６分）４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸。
【００５５】
工程３：−０．０８ＭＰａ未満まで３０００Ｌのグラスライニングリアクタを排気し、標準圧力まで窒素ガスを満たし、３回繰り返す。ジクロロメタン（１９００．０ｋｇ）、４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸（１９０．０ｋｇ）およびＤＭＦ（１１．４ｋｇ）を入れ、撹拌する。−５〜０℃まで混合物を冷却し、この温度を維持しながら、１８ｋｇ／時間の速度で塩化チオニル（８５．３ｋｇ）を加える。−５〜０℃まで混合物を撹拌する。１時間後、ＨＰＬＣにより反応をモニターし、４−［（２，４−ジメチルフェニル）−メトキシカルボニル−アミノ］ブタン酸の含有量が１％未満である場合、定量する。サンプリングのために、試料をメタノールに加え、ＨＰＬＣにより評価する。画分が観測されなくなるまで、標準圧力下で４０〜４５℃にて混合物を濃縮し、次いで１５〜２５℃まで冷却する。次いで、画分が観測されなくなるまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下）で４０〜４５℃にて濃縮する。ジクロロメタン（１０３１．０ｋｇ）で希釈する。３０〜３５℃にてジクロロメタン（１０３０．０ｋｇ）および無水塩化アルミニウム６水和物（２８７．２ｋｇ）の溶液を滴下して加える。その後、３５〜４５℃で２時間混合物を撹拌し、次いでメチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレートの含有量が８０％より高くなるまで、ＨＰＬＣによりモニターする（混合物を取り、それをメタノールに加え、ＨＰＬＣで検出するために送る）。その混合物を水（１１４０．０ｋｇ）および氷（５７０．０ｋｇ）の混合物でクエンチし、０〜１０℃に温度を維持し、１時間撹拌する。１５〜２５℃まで混合物を加温し、０．５時間撹拌し、０．５時間保持し、分離する。水（８１４．０ｋｇ×２）で有機相を洗浄する。シリカゲル（３８０．０ｋｇ）を有機相に加え、混合物を１時間撹拌する。混合物を濾過し、ジクロロメタン（３３９．０ｋｇ）でケーキをリンスし、濾液を合わせる。１５０〜２００Ｌの混合物が残るまで、減圧下（−０．０８ＭＰａ以下）で４０〜４５℃にて濾液を濃縮する。
【００５６】
ヘプタン（１９０．０ｋｇ）を加え、再利用水で１５〜２０℃まで混合物を冷却し、次いでブラインで０〜５℃まで冷却する。この温度で混合物を撹拌して結晶化する。混合物を濾過し、乾燥室において３５〜４０℃でフィルタケーキを乾燥させて、８０．９ｋｇのオフホワイトの固体を得る。ＨＰＬＣ９７．９％。窒素の保護下で乾燥し、密閉した場所で保存する。
【００５７】
ＨＰＬＣ手順：上記の２つの工程と同様。保持時間（１４．７１分）メチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート。
【００５８】
調製例１３
メチル５，５−ジメトキシ−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート
工程４：窒素のブランケット下で周囲温度にてオーバーヘッドスターラーを備えた、メタノール（２．５０Ｌ）中のメチル７，９−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート（１０００ｇ；１．００当量；４．０４ｍｏｌｅ）およびトリメトキシメタン（９．１０ｍｏｌｅ；９９５．４２ｍＬ；９６５．５５ｇ）の溶液に、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ（商標）１５（１００ｇ）を加える。５０℃まで反応混合物を加熱し、その温度を１時間維持する。１時間後、反応を完了する。
【００５９】
周囲温度まで反応混合物を冷却し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔビーズを濾過し、メタノール（５００ｍＬ）でリンスする。カニューレをセットし、オーバーヘッド撹拌しながら、その溶液を０．１ＭのＫＯＨ溶液（１Ｌ）に加え、続いてＨ２Ｏ（１５００ｍＬ）を加える。２０分間スラリーを撹拌し、次いでポリプロピレンパッドを備える３２ｃｍのセラミックフィルターを使用して濾過する。４×１Ｌの水でケーキを洗浄し、フィルター上に乾燥するまで置く。６０℃にて一晩真空オーブン中で乾燥させる。一晩後、大きな塊を壊し、６０℃にて一晩乾燥するまで継続する。乾燥後、粗物質を得る：１２３５ｇ。５容積のヘプタン（６Ｌ）に粗固体を溶解し、７０℃まで加熱し、７０℃にて１５分撹拌する。５５℃まで溶液を冷却し、その時点で反応物を播種する。ゆっくりと冷却を継続すると、約４５℃で生成物が現れ始める。室温までゆっくりと冷却を継続し、次いで一晩スラリーを撹拌する。生成物のスラリーをポリプロピレンパッドで濾過する。２×５００ｍＬのヘプタンでケーキをリンスする。フィルター上に乾燥するまで置き、次いで乾燥するまで（約４日）４５℃にて真空オーブンに入れる。７６６ｇ。ＨＰＬＣにより９９．９％純粋。
【００６０】
ＨＰＬＣ：Ｚｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ ５０×４．６ｍｍ、１．８μｍ；２ｍｌ／分、４０℃、１２分にわたって１０〜３０％のＡＣＮから１４分で９５％、２分保持、溶出液の再平衡バランスは１０ｍＭのＮＨ４アセテートである。保持時間＝１３．７７分。
【００６１】
調製例１４
メチル−（５Ｓ）−７，９−ジメチル−５−［（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート
工程５：１〜２時間、Ｎ２で乾燥させることにより水素リアクタを乾燥させることを確実にする。２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−アミン（５２．０ｇ）、メチル５，５−ジメトキシ−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート（１４０．０ｇ）、Ｉｒ２Ｃｌ２（ＣＯＤ）２（０．０８０ｇ）、ＴＢＡＩ（１．７６ｇ）、（１Ｓ）−（＋）−１０−カンファースルホン酸（２．２ｇ）、および（Ｓ）−ジフルオルホス（０．１６３ｇ）をリアクタに加える。リアクタに５ｐｓｉの窒素を入れる。カニューレ／窒素によって６００ｍＬのトルエン（７５分間、Ｎ２をスパージした）を加える。リアクタを２０ｐｓｉの窒素で２回パージし、圧力を５ｐｓｉ以下にさせない。リアクタに５００ｐｓｉの水素を入れ、１１５℃までゆっくりと加温する。この温度で一晩保持する。５０℃まで冷却し、ＨＰＬＣ分析のためにサンプリングする。キラルＨＰＬＣのために、トルエンで試料を希釈し、炭酸水素ナトリウムで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ヘプタン／エタノールで希釈する。
【００６２】
トルエン溶液を分液漏斗に注ぎ、１４０ｍＬの酢酸エチルを加えて、全てを分液漏斗に入れ、後処理の間、全てを溶液中に維持する。この溶液を４２０ｍＬの１ＭのＮａＯＨ溶液で洗浄する（有機層は濁り、水層は透明のように見える）。層を分離し、４２０ｍＬのＨ２Ｏで有機層を洗浄する。大気圧にて有機層を１．５容積のトルエンまで蒸留する（２．５容積の全溶液が残っている）。溶液を６０℃まで冷却し、７００ｍＬのヘプタン（約５Ｖ）を６０℃にて３分にわたってゆっくりと加え、得られた透明の溶液を６０℃にてオーバーヘッド撹拌（１５０ｒｐｍ）しながら一晩加熱する。１５分後、十分な固体が生じる。午前中に、スラリーを冷却し、濾過し、固体物質を回収し、６０℃にて３時間、真空オーブン中で乾燥させる。１２６．９７ｇ、ＨＰＬＣ：９９．４％純粋、キラルＨＰＬＣ：９４．６％ｅｅ。
【００６３】
ＨＰＬＣ：Ｚｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ ５０×４．６ｍｍ、１．８μｍ；２ｍｌ／分、４０℃、１２分にわたって１０〜３０％のＡＣＮから１４分で９５％、２分保持、溶出液の再平衡バランスは１０ｍＭのＮＨ４アセテートである。保持時間＝１１．３６分。
【００６４】
キラルＨＰＬＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡ ２５０×４．６分、２ｍｌ／分、４０℃、１１分間、５％のＩＰＡから１２分で５０％のＩＰＡ、１５分まで保持、１５．１分で５％のＩＰＡに戻す。２０分間保持。保持時間＝１１．４８分。
【００６５】
調製例１５
（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン
工程６：２５０ｍＬのテフロン（登録商標）フラスコ中で、オーバーヘッド撹拌しながら、メチル−（５Ｓ）−７，９−ジメチル−５−［（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−カルボキシレート（２０．１ｇ）、ＮａＯＨ（１２．１０ｇ）、およびエタノール（８０ｍＬ）を合わせる。１０分間、窒素でスパージし、約５．５時間還流（８５℃）まで加熱する。冷水浴で室温まで冷却する。酢酸／水（１７．５ｍＬ／５３ｍＬ）を室温でゆっくりと加え、添加によってほぼ半分を５００ｍＬのフラスコに移す（添加について約３０分の合計時間）。約５ｍｇの（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミンを播種する。５０℃まで（約１５分でこの温度まで）加熱する。約３０分にわたって５４ｍＬの水を加える。次の日、氷浴で冷却し、濾過し、メタノール：水（１：１；２×３０ｍＬ）でリンスする。６０℃にて真空中で湿潤ケーキを乾燥させて、１３．９９ｇの（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミンを得る。ＨＰＬＣ分析：９９．４％、保持時間は４．８４分である。キラルＨＰＬＣ：９８．５％のキラル純度。
【００６６】
ＨＰＬＣ法：Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ−Ｃ８ ７５×４．６分、３．５μｍ、２ｍＬ／分、４０℃、２２５ｎｍ波長、２分間、５％のアセトニトリル（ＡＣＮ）から１０分で９５％のＡＣＮ、１分間保持。
【００６７】
キラルＨＰＬＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ １５０×４．６分、５μｍ、１ｍｌｌ／分、３０℃、ヘプタン中に均一濃度の５０％エタノール。
【００６８】
調製例１６
（５Ｓ）−Ｎ−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン
工程７：Ｎ２の水面下の添加によって各溶液を飽和することによって反応物に添加する前に全ての液体からガスを抜く。窒素入口を備えた２５０ｍＬのフラスコに、（５Ｓ）−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチルテトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン（１８．３６ｍｍｏｌｅ；５．００ｇ）およびトルエン（１５．００ｍＬ）を加える。トルエン中の０．５Ｍの溶液としてヘキサメチルジシラザンカリウム（１９．２８ｍｍｏｌｅ；３８．５５ｍＬ）を３０分にわたって滴下して加える。発熱を２１．５℃まで観測する。反応混合物を３０分間撹拌する。トルエン中の１Ｍの溶液として１−（クロロメチル）−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゼン（２５．７１ｍｍｏｌｅ；２５．７ｍＬ）を３０分にわたって加える。発熱を２５．５℃まで観測する。室温にて１６時間、反応混合物を撹拌する。水（２×２０ｍＬ）で反応混合物を洗浄する。水層を合わせ、トルエン（１×２５ｍＬ）で逆抽出する。トルエン層を合わせ、乾燥するまで濃縮し、水中の９２ｍＬの６０％の１−プロパノールから残留物を再結晶する。０℃にて２時間、結晶化した生成物を撹拌し、濾過し、水中の１０ｍＬの５０％の１−プロパノールでリンスする。単離された生成物を４５℃にて真空中で乾燥させる。７．７３５ｇ。ＨＰＬＣは９８．３％純度を示し、保持時間＝１０．６２分である。
【００６９】
勾配ＨＰＬＣ：カラムはＺｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ ＲＰ５μｍ、４．６×１５０ｃｍである、流量＝２ｍｌ／分；波長＝２２５ｎｍ；カラム温度＝４０℃；溶媒Ａ＝水；溶媒Ｂ＝ＡＣＮ；時間０分 ８５％Ａ １５％Ｂ；１２分 １０％Ａ ９０％Ｂ；１３分 １０％Ａ ９０％Ｂ；１３．５分 ８５％Ａ １５％Ｂ。
【００７０】
調製例１７
メチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボキシレート
工程１２：（５Ｓ）−Ｎ−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−７，９−ジメチル−Ｎ−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−５−アミン（３．４０ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）、ナトリウムトリアセトキシボロハイドレート（ｓｏｄｉｕｍ ｔｒｉａｃｅｔｏｘｙｂｏｒｏｈｙｄｒａｔｅ）（３．０１ｇ、１３．６４ｍｍｏｌ）、およびＡＣＮ（２８ｍＬ）の懸濁液を、氷／アセトン浴中で−１２℃〜−１０℃まで冷却し、シリンジポンプ（０．６６ｍＬ／分）によって３０分にわたってトルエン（１８．５ｍＬ）中の（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（２．０３ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）の溶液を加える。２時間、氷／アセトン浴中で反応物を撹拌し続ける。水中の４４ｍＬの１０％（重量で）ＮＨ４Ｃｌを反応物に加え、室温で３０分間撹拌する。撹拌を停止すると、２層が生じる。層を分離し、下にある有機層を１容積の溶媒に濃縮する。２４ｍＬのエタノールを加え、固体（または１容積）に濃縮する。２４ｍＬのエタノール、２ｍＬの水を加え、６０℃まで加熱する（依然として懸濁液である）。２ｍＬの水を滴下して加える。懸濁液を室温まで冷却し、室温で一晩撹拌する。室温で一晩撹拌した後、懸濁液を０．５時間、−１０℃まで冷却し、次いで濾過する。３ｍＬの−１０℃のＥｔＯＨ：水（４：１）で濾過した固体を洗浄する。５０℃にて真空オーブン中で一晩固体を乾燥させて、無色の固体として４．２４ｇのメチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボキシレートを得る。ＨＰＬＣは９９．７５％純粋を示す。
【００７１】
ＨＰＬＣ分析：Ｚｏｒｂａｘ Ｂｏｎｕｓ ＲＰ １５０ｍｍ×４．６ｍｍ、３．５μｍ、３０℃、２６０ｎｍ ＵＶ検出、流量：２．０ｍＬ／分、勾配：Ａ＝Ｈ２Ｏ中の０．０５％ＴＦＡ、Ｂ＝ＡＣＮ中の０．０５％ＴＦＡ；０分９５％Ａから３０分０％Ａから３０．５分９５％Ａから３５分９５％Ａ。２３．３３分でメチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボキシレートが溶出し、２３．０５分でｃｉｓ異性体が溶出する。
【００７２】
調製例１８
（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートの硫酸水素ナトリウムの付加
工程８：機械的撹拌器、ディスプレイを備えたサーモカップル、窒素入口、および乾燥管を備えた冷却管に１２Ｌの３つ口丸底フラスコをつける。（トランス）−４−メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸（４５０ｇ）をフラスコに入れる。ジクロロメタン（２．２５Ｌ）をフラスコに入れ、窒素下で撹拌する。塩化オキサリル（ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に３６４ｇを溶解した）を周囲温度で添加漏斗によりフラスコに加える。室温で１０分間、反応混合物を撹拌する。触媒量のＤＭＦ（ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に１．８２ｇを溶解した）を周囲温度で添加漏斗によりフラスコに加える。２０℃未満の温度で２時間、反応混合物を撹拌する。ＧＣ：［ＤＢＩ ３０ｍ×０．２５ｍｍ、０．５μ）により反応進行をモニターし、２０℃未満の温度で撹拌溶液の試料を除去する。（トランス）−４−クロロカルボニルシクロヘキサンカルボキシレートの保持時間（Ｒｔ）＝７．３分；（トランス）−４−メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸のＲｔ＝７．７５分。出発物質である（トランス）−４−メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸が３．０％未満になった場合、反応が完了したとみなす。
【００７３】
工程９：３５℃未満の温度にて減圧下で反応混合物を濃縮する。蒸留物と共に過剰の塩化オキサリルを回収し、腐食剤トラップを使用して酸性蒸気が真空系に侵入するのを防ぐ。ＴＨＦ（２×９００）と共に残留物を同時蒸発する。ＴＨＦ（４．５Ｌ）および２，６−ルチジン（３２１ｇ）で残留物を希釈する。水素化オートクレイ（ａｕｔｏ−ｃｌａｙ）リアクタに移す。活性炭上の５％Ｐｄ｛（ＴＨＦ（５００ｍＬ）中で４５ｇをスラリーにした）を反応混合物に入れる。２〜３回、窒素ガス（２０〜３０ｐｓｉ）でリアクタをパージする。２〜３回、水素ガス（２０〜３０ｐｓｉ）でパージする。３０〜３５℃で１５時間、水素雰囲気下（５０〜６０ｐｓｉ）で反応物を撹拌する。１５時間後、水素ガスを局所排気管に排出し、２〜３回、窒素ガス（２０〜３０ｐｓｉ）でリアクタをパージする。ＧＣにより反応物をモニターする。（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートのＲｔ＝６．４６分；（トランス）−４−クロロカルボニルシクロヘキサンカルボキシレートのＲｔ＝７．３分。（トランス）−４−クロロカルボニルシクロヘキサンカルボキシレートが１．０％未満になると、反応が完了したとみなす。
【００７４】
窒素下でセライトパッドを通して反応混合物を濾過する。３５℃未満の温度にて減圧下で大部分のＴＨＦ溶媒を濃縮する。ＭＴＢＥ（１．８Ｌ）で残留物を希釈し、分液漏斗に移す。水（２．２５Ｌ）で有機溶液を洗浄し、層を分離する。ＭＴＢＥ（２×１．８Ｌ）で水相を逆抽出し、全ての有機層を合わせる。０．５Ｎの塩酸水溶液（１×２．２５Ｌ）で洗浄する。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１×２．５Ｌ）で有機相を洗浄する。ブライン溶液（１×２．５Ｌ）で有機相を洗浄する。硫酸マグネシウムで有機相を乾燥させ、ガラスファイバーフィルターパッド上で混合物を濾過する。３５℃未満の浴温度にて減圧下で濾液を濃縮する。無色の油状物として粗物質を単離し、さらに精製せずに使用する。
【００７５】
工程１０：０．４９ｇの亜硫酸水素ナトリウムを含有するバイアルに１ｍＬの水を加える。バイアルを超音波処理器に入れて亜硫酸水素ナトリウムを溶解する。バイアルに５ｍＬのＴＨＦを加える（二相溶液が形成する−固体はなし）。このＴＨＦの二相溶液および亜硫酸水素ナトリウム水溶液を、（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（１ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）を含有する磁気撹拌器を備えた５０ｍＬのフラスコに加える（注意：（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートは約８０％のみ純粋である。この理由は０．８当量のＮａＨＳＯ３を使用するからである）。さらに５ｍＬのＴＨＦで、１分以内に溶液を希釈し、非常に薄い結晶の塊が形成する。この結晶の塊を還流まで加熱する。３×５ｍＬのＴＨＦで混合物を希釈する。結晶は非常に綿状である。数時間室温で撹拌し、次いで濾過し、２０ｍＬのＴＨＦでリンスし、１時間フィルター上で乾燥させる（１．２７ｇ）。４０℃にて真空オーブン中で一晩乾燥させて、無色の固体として（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートの１．１９ｇの亜硫酸水素ナトリウム付加物を得る。
【００７６】
調製例１９
（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート
工程１１：（トランス）−メチル−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレート（３．９２ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）の亜硫酸ナトリウム付加物を、炭酸ナトリウム（５．０６ｇ、４７．７２ｍｍｏｌ）、トルエン（１７ｍＬ）および水（３３ｍＬ）の混合物に加え、室温で撹拌する。室温で１時間撹拌した後、層を分離し、１５ｍＬの水でトルエン層を洗浄する。工程１２における（トランス）−４−ホルミルシクロヘキサンカルボキシレートを含有するこのトルエン溶液を使用する。
【実施例】
【００７７】
実施例１
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸の無定形固体
（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１４９ｍｇ）をフラスコに入れる。ＭｅＯＨ（６ｍＬ）および１．０ＮのＮａＯＨ（３．０ｍＬ）を加える。約６０℃まで得られた混合物を加熱する。ＴＬＣにより反応物をモニターする。約７時間後、または開始エステルが反応した場合、約０℃まで混合物を冷却し、１ＮのＨＣｌでクエンチする。ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で混合物を希釈する。水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で混合物を連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過し、濾液を濃縮する。ＣＨ２Ｃｌ２を用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。溶媒を除去して、白色固体として標題化合物（１２５ｍｇ）を得る。
【００７８】
実施例２
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸の無定形固体
機械的撹拌器、添加漏斗、およびサーモカップルを備えた５００ｍＬの３つ口フラスコに、水（２６５ｍＬ）を入れ、氷浴中で冷却する。第２のフラスコの４０ｍＬのアセトン中でＢＣＣＡ（２２．０ｇ）を溶解し、添加漏斗により混合物を３つ口フラスコに加える。さらに４ｍＬのアセトンでフラスコをリンスし、漏斗に加える。添加漏斗の内容物をフラスコに滴下して加え、約０〜１℃に温度を維持しながら、得られた混合物を撹拌する。得られた固体を回収し、水で２回洗浄し、次いで４０℃にて一晩乾燥させて、２２．３ｇの白色粉末を得る。
【００７９】
実施例３
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物
オーバーヘッドスターラー、温度プローブ、窒素入口を備えたフラスコを窒素でパージし、次いでフラスコ内で正の窒素雰囲気を維持しながら、（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１．０ｋｇ、１．５３ｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（１０Ｌ）、および２ＭのＮａＯＨ（１．５３Ｌ、３．０６ｍｏｌ）を加える。約６８℃の還流まで得られた混合物を加熱する。約４時間後、反応混合物を室温まで冷却し、一晩撹拌する。混合物を濾過し、濾液を回収する。ＭｅＯＨ：水の混合物（５００ｍｌ １：１ｖ／ｖ）を加え、次いで酢酸（２６０ｍＬ）をゆっくりと加えて沈殿を誘導する。ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ水和物およびＢＣＣＡ・メタノール溶媒和物の混合物として得られた固体を回収する。４０℃にてオーブン中で固体を乾燥させる。
【００８０】
冷却器、サーモカップル、加熱マントルおよび機械的撹拌器を備えた２Ｌのフラスコに、ＢＣＣＡ固体物質（１０９ｇｍ）、ＭｅＯＨ（９００ｍＬ）および水（１０ｍＬ）を入れる。得られたスラリーを窒素雰囲気下で還流まで加熱する。固体を全て溶解した後、熱を取り除き、周囲温度まで混合物を冷却する。所望の場合、結晶形態におけるＢＣＣＡ水和物の種晶を添加してもよい。固体物質を回収する。メタノール：水（９：１ｖ／ｖ、１００ｍＬ）および水（１Ｌ）で固体を連続して洗浄する。約４０℃にて真空中で固体を乾燥させて、１００ｇの白色固体を得る。その後、イソプロパノール：水（１：１ｖ／ｖ １Ｌ）で固体を再びスラリーにする。得られた固体を回収し、水（５００ｍＬ）でリンスし、約４０℃にて真空中で一晩乾燥させて、６０ｇの標題化合物を得る。Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ分析 ２．５３％の水、元素分析：Ｃ３１Ｈ３６Ｆ６Ｎ６Ｏ２Ｈ２Ｏ 理論値（％）Ｃ５６．７０、Ｈ５．８３、Ｎ１２．８０ 実測値（％）：Ｃ５６．５９、Ｈ５．２８、Ｎ１２．５５。
【００８１】
固相ＮＭＲ
１００．６２２ＭＨｚの炭素周波数で作動し、Ｂｒｕｋｅｒ ４ｍｍの二重共鳴プローブ（Ｋ２９９５５２）を備えたＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩ ４００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計を使用して、結晶形態における結晶性ＢＣＣＡ・水和物の１３Ｃ交差分極／マジック角スピニング（ＣＰ／ＭＡＳ）ＮＭＲ（固相ＮＭＲまたはＳＳＮＭＲ）スペクトルを得た。ＴＯＳＳ側波帯抑圧は、ＳＰＩＮＡＬ６４デカップリング（９５．４ワット）およびＲＡＭＰ１００形状Ｈ核ＣＰパルスを利用する交差分極と共に使用した。獲得パラメーターは以下の通りであった：２．５０μｓの９０°プロトンｒ．ｆ．パルス幅、接触時間は１．５ｍｓであり、２０ｓのパルス繰り返し時間、５ｋＨｚのＭＡＳ周波数、３０ｋＨｚのスペクトル幅、獲得時間は３４ｍｓであり、走査数は３，８４４であった。１３Ｃ ＳＳＮＭＲ ＢＣＣＡ・水和物からの代表的な共鳴としては、１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、１４３．５、１３９．９、１３６．３、１３２．８、１３２．１、１２９．２、１２７．３、１２６．２、１２２．７、１２１．０、６１．１、５３．０、４９．８、４５．０、４０．２、３８．７、３１．４、３０．４、２９．０、２７．８、２７．０、２１．２、１８．３、＋／−０．２ｐｐｍが含まれる。化学シフトは、別の実験においてアダマンタン（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照標準とした。
【００８２】
実施例４
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物および結晶形態におけるエタノール溶媒和物
（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１２．９５ｋｇ）、ＥｔＯＨ（１２９．５Ｌ）および２ＭのＮａＯＨ（９．９Ｌ、２当量）をフラスコに入れ、得られた混合物を約１０分間撹拌し、その後、６時間、約４０〜４５℃まで反応混合物を加熱する。ＨＰＬＣにより反応物をモニターする。その後、酢酸（３．７５ｋｇ）、続いて水（１５．５Ｌ）を加え、結晶形態においてＢＣＣＡ・水和物を播種する。約２時間撹拌した後、室温まで反応混合物を冷却し、さらに２時間撹拌する。得られた固体を回収し、ＥｔＯＨ：水（１：１、２×２６Ｌ）で固体を洗浄し、一晩乾燥させて、エタノール溶媒和物および水和物の混合物として１５．８７ｋｇ（湿潤）の標題化合物を得る。
【００８３】
実施例５
結晶形態におけるトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸（１５．８７ｋｇ）および水（１５８．８Ｌ）をフラスコに入れる。室温にて２時間、得られた混合物を撹拌する。その後、得られた混合物を濾過して、固体を回収する。その固体を一晩乾燥させる。得られた固体を、２時間、約６５〜７０℃に加熱したＭｅＯＨに溶解して、透明な溶液を得た。透明な溶液を濾過し、次いで約０〜５℃まで濾液を冷却して、結晶化を誘導する。得られた結晶を回収し、一晩乾燥させる。水（１５８．８Ｌ）に結晶性物質を懸濁して、室温にて約２時間撹拌する。結晶性固体を回収し、４０〜４５℃にて高真空下で乾燥させて、Ｋａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ法で測定した場合、２．７〜３．１の間の水分含有量を示す固体を得る。
【００８４】
実施例６
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物の結晶化
オーバーヘッドスターラーを備えた２５０ｍＬのフラスコに、エタノール（１００ｍＬ）、（トランス）−メチル４−（（（Ｓ）−５−（（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ）−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−１−イル）メチル）シクロヘキサンカルボキシレート（１０．０ｇ、１５．３２ｍｍｏｌｅ）およびＮａＯＨ（２Ｍ、１５．０ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌｅ）を入れる。得られた混合物を約４０℃まで加温し、約４時間、その温度で撹拌する。反応混合物を室温まで冷却する。酢酸（２．７ｍＬ、４５．４ｍｍｏｌｅ）を加え、４０℃まで加温する。２．５時間にわたって水（４０ｍＬ）をゆっくり加え、厚い白色のスラリーを得る。さらに１．５時間、加熱を続け、次いで室温までスラリーを冷却する。濾過により固体を回収し、エタノール：水（２０ｍＬ、１：１）、水（２０ｍＬ）で固体を連続して洗浄する。水（７０ｍＬ）に固体を懸濁し、濾過により固体を回収し、次いで水（２×２０ｍＬ）で固体を洗浄する。さらに２回、水スラリーに繰り返す。得られた固体を回収し、６０℃にて乾燥させて、白色固体（６．１ｇ）として標題化合物を得る。
【００８５】
実施例７
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物の結晶化
ＢＣＣＡ（６０ｍｇ）をシンチレーションバイアルに入れ、１．５ｍｌのＭｅＯＨを加える。約４５℃まで透明な溶液を加熱する。１００μＬの水中の１．５モル当量のギ酸を加えて、白色懸濁液を形成する。その白色懸濁液に０．５ｍＬのＭｅＯＨを加え、約５５℃まで穏やかに加熱する。数時間後、室温まで懸濁液を冷却し、真空濾過により白色の結晶性固体を回収し、その固体を空気乾燥させる。溶液ＮＭＲによりこの結晶性固体の分析は、存在するいかなるギ酸溶媒も示さない。示差熱／熱重量分析により結晶性形態をさらに特徴付けることができ、その結晶性形態は、３８〜１３３℃で２．６の割合の揮発性物質の含有物が損失することを示し、それはＴＧＳ−ＭＳにより水であると決定し、８１℃にて開始イベントを有する。
【００８６】
示差熱／熱重量分析
示差熱／熱重量分析は、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ ＤＴＡおよびＴＧＡユニット（モデルＴＧＡ／ＳＤＴＡ８５１）で実施する。５０ｍＬ／分の窒素パージを加えながら、ピンホールを開けた密閉したアルミニウムパン中で１０℃／分にて２５℃から３００〜３５０℃に試料を加熱する。ＴＧＡ温度はインジウム／アルミニウム標品、ＭＰ＝１５６．６℃および６６０．３℃で較正した。重量較正は、製造業者が供給している標品を用いて実施し、クエン酸ナトリウム脱水脱溶媒和に対して検証する。
【００８７】
ＸＲＤスペクトログラフ分析
ＸＲＤスペクトルを、ＣｕＫ線源（λ＝１．５４０５６、電力：４０ｋＶ、５０ｍＡ）およびＶａｎｔｅｃ検出器を利用するＢｒｕｋｅｒ−ＡＸＳ Ｄ４ Ｅｎｄｅａｖｏｒ Ｘ線回折計を使用して収集した。０．００９°２θのステップサイズおよび０．５秒のステップ当たりの時間を用いて４〜４０°２θの範囲にわたってデータを収集した。方法：ＵＳＰ２９＜９４１＞、変異誤差補正を内部標品の８．８５３°または１７．７５９°２θピークを用いて行った。
【００８８】
主要な２θピークのリストを以下の表１に与える。
【表１】
【００８９】
任意の所定の結晶形態に関して、回折ピークの相対強度が、結晶形態などの要因から生じる好適な配向に起因して変化し得ることは結晶学分野において周知である。好適な配向の影響が存在する場合、ピーク強度は変化するが、多形体の特性ピーク位置は変化しない。例えば、Ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ ＃２３、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ＃１８、１８４３−１８４４ページ、１９９５を参照のこと。さらに、任意の所定の結晶形態に関して、角ピーク位置はわずかに変化し得ることもまた、結晶学分野において周知である。例えば、ピーク位置は、試料が分析され、試料が置換される温度の変化、または内部標品の存在もしくは非存在に起因して変化し得る。この場合において、２θにおいて±０．２°のピーク位置の変化は、本発明の結晶塩の明確な同定を妨げずに、それらの潜在的変化を考慮に入れる。
【００９０】
文献中の結晶形態を検索するための周知で認容されている方法は、「Ｆｉｎｋ」法である。Ｆｉｎｋ法は初期の検索のために４つの最も強いラインを使用し、その後、次の４つの最も強いラインを使用する。
【００９１】
実施例８
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸メタノール溶媒和物
４ｍＬのメタノールにＢＣＣＡ（４グラム）を懸濁し、還流まで加熱する。約５０ｍＬ以上のメタノールを加えて、わずかな懸濁液を生成する。室温まで混合物を冷却し、１日間保持する。真空濾過により固体生成物を単離し、メタノールチャンバに保存して、この準安定結晶形態を水分から保護する。
【００９２】
実施例９
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸エタノール溶媒和物
数時間、１０ｍＬのエタノールにＢＣＣＡ（３グラム）を懸濁する。真空濾過により固体生成物を単離し、エタノールチャンバに保存して、この準安定結晶形態を水分から保護する。
【００９３】
実施例１０
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ギ酸溶媒和物
７ｍＬのイソプロパノールにＢＣＣＡを溶解する。その溶液にギ酸（３ｍＬ）を加える。室温にて曇り点（４ｍＬ）まで水を加える。６時間、７０℃まで懸濁液を加熱し、その後、室温まで冷却する。真空濾過により固体生成物を単離し、空気乾燥する。ＸＲＤスペクトルを実施例７に記載されるように収集した。以下の表２はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【００９４】
【表２−１】
【表２−２】
【００９５】
実施例１１
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸酢酸溶媒和物
１０ｍＬのヘプタンに、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸（１．５ｇ）を懸濁する。５０℃までその懸濁液を加熱する。１ｍＬの酢酸を加えると、懸濁液は透明になる。１０ｍｌ以上のヘプタンを加え、室温まで冷却する。真空濾過により固体生成物を単離し、空気乾燥する。ＸＲＤスペクトルを実施例７に記載されるように収集した。以下の表３はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【００９６】
【表３−１】
【表３−２】
【００９７】
実施例１２
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物（２０．１６ｇ）エタノールＳＤＡ ３Ａ（２００．９４ｍＬ）を５００ｍＬのボトルに加える。磁気撹拌バーを使用して撹拌し、１Ｎの水酸化ナトリウム（３１．９５ｇ）をゆっくりと加える。これは透明な溶液である。
【００９８】
噴霧乾燥：噴霧乾燥器（Ｎｉｒｏ ＳＤ Ｍｉｃｒｏ Ｓｐｒａｙ Ｄｒｙｅｒ）を使用し、３２．５ｋｇ／ｈｒまでの乾燥ガス流速、２．８ｂａｒ、２．０ｋｇ／ｈｒまでの噴霧ガス流速、０．３ｂａｒ、および入口温度（自動制御）１１５℃を使用する。入口温度が１１５℃になると、出口温度は安定化（１０９℃）し、噴霧器に対して８３：１７（ｗ／ｗ）のエタノール：水の流れが開始する。３．０のポンプ設定において、チャンバの壁／出口に液滴は当たらない。熱平衡−出口＝１０４℃に系を到達させる。エタノール：水（室温で）からエタノール／水の溶液中の乾燥サンプルに移す。噴霧乾燥後、１３．５１ｇを得る。
【００９９】
実施例１３
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸マグネシウム塩
５ｍＬのメタノールにトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩（２グラム）を溶解する。２０ｍＬの水に酢酸マグネシウム（３３５ｍｇ）を溶解する。強く撹拌しながら室温にて酢酸マグネシウム溶液を滴下して加え、続いて６５℃まで加熱する。沈殿が生じる。高温にて、さらに１０ｍＬの水を加える。室温まで懸濁液を冷却し、真空濾過により固体生成物を単離し、水でリンスする。室温にて真空オーブン中で生成物を乾燥させる。
【０１００】
ＢＣＣＡのカルシウムおよび亜鉛塩は、ＢＣＣＡマグネシウム塩の調製についてのものと類似の手順により調製できる。カリウム塩は、ＢＣＣＡナトリウム塩の調製についてのものと類似の手順により調製できる。
【０１０１】
実施例１４
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルアミンイソプロピルアルコール（１：１：１）溶媒和物
機械的撹拌器、サーモカップルコントローラー、添加漏斗、および加熱マントルを備えた１Ｌの３つ口丸底フラスコをセットする。トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物（５０ｇ）をヘプタン（５００ｍＬ）に懸濁する。６９．１℃までスラリーを加熱し、イソプロピルアルコール（７０ｍＬ）中の溶液としてｔｅｒｔ−ブチルアミン（５．５７ｇ）を加え、５ｍＬのさらなるイソプロピルアルコールでリンスする。添加後すぐに、溶液が形成する。添加の間、温度は６３℃まで下がるが、添加が完了すると、温度は６９℃まで戻る。トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル−シクロヘキサンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルアミンをスパチュラの先端で播種する。懸濁液が形成し始め、６９℃で撹拌を継続する。５５℃まで反応物を冷却し始める。約１時間で、厚いスラリーが形成する。４５℃まで冷却を継続する。約１時間で、スラリーの温度は３５℃まで下がる。約２時間で、熱源を取り除き、周囲温度まで冷却する。約３時間で、スラリー（ここで温度は２１℃である）を濾過し、１００ｍＬのヘプタンでリンスする。約１．５時間、真空を使用して乾燥させる。３３℃にて真空中で週末にわたって乾燥させる。これにより、５５．９ｇを得る。ＸＲＤスペクトルを、実施例７に記載されているように収集した。以下の表４はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【０１０２】
【表４−１】
【表４−２】
【０１０３】
実施例１５
結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ヘミｔｅｒｔ−ブチルアミン塩ヘミエタノール（２：１：１）溶媒和物
機械的にオーバーヘッド撹拌しながら、トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸水和物（５０．５ｇ）をヘプタン（４０４．００ｍＬ）に懸濁する。エタノール（２５．２５ｍＬ）を加え、５５℃まで加熱する。溶液が形成する。５５℃にてｔｅｒｔ−ブチルアミン（２．８１ｇ）を加える。トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸ヘミｔｅｒｔ−ブチルアミンヘミエタノール（２：１：１）溶媒和物を播種し、種晶を持続する。温度を５０℃に維持する。６０℃まで発熱して数分以内でかなり厚いスラリーが形成する。撹拌を継続し、５０℃に戻すまで冷却する。約５．５時間後、加熱を止め、周囲温度まで冷却する。約３時間で、濾過し、母液の一部でフラスコの外でリンスし、次いで１００ｍＬのヘプタンでケーキをリンスする。４５℃にて真空中で一晩乾燥させる。５０．９ｇ。ＸＲＤスペクトルを、実施例７に記載されているように収集した。以下の表５はＸＲＤスペクトルから得たピークを記載する。
【０１０４】
【表５−１】
【表５−２】
【０１０５】
実施例１６
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物
スキーム３の工程１３
室温にて、メチル−トランス−４−｛［（５Ｓ）−５−｛［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ｝−７，９−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル｝シクロヘキサンカルボンキシレート（１２．９５ｋｇ）を２ＭのＮａＯＨ溶液（９．９Ｌ）に加え、反応物を１０分間撹拌する。４０℃〜４５℃にて６時間、反応物を撹拌する。ＨＰＬＣにより反応物をモニターする。混合物に酢酸（３．７５ｋｇ）、続いて水（１．２容積）を加え、ＢＣＣＡ・水和物を播種し、４０℃〜４５℃にて２時間撹拌する。反応混合物に水（２．８容積）を加え、４０℃〜４５℃にて２時間撹拌する。室温まで反応混合物を冷却し、２時間撹拌し、濾過する。固体を回収し、エタノール：Ｈ２Ｏ（１：１；２×２容積）で洗浄し、圧力フィルターで一晩乾燥させる。これにより、工程２において使用するための１５．８７ｋｇの固体物質を得る。
【０１０６】
工程１の固体物質にメタノールを加え、６５℃〜７０℃にて２時間撹拌して、透明な溶液を得る。光沢物をプレート圧力フィルターで二次リアクタに濾過し、濾液を０℃〜５℃にて２時間撹拌し、濾過し、圧力フィルターで一晩乾燥させる。室温にて２時間、水（１０容積）中で再結晶した固体を撹拌し、濾過し、圧力フィルターで乾燥させる。４０℃〜４５℃にて高真空下にてオーブン中で、Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ分析により約２．７〜３．１％の水まで乾燥させる。これにより、１１．８０ｋｇの物質を得る。
Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ分析＝３．１６％
ポジティブモードにおけるＥＳ−ＡＰＩによる質量分析＝６３９．３０；ネガティブモードにおいて６３７．２０。
【０１０７】
化学安定性
以下の表５は、ＢＣＣＡ遊離酸の化学安定性ならびに以下に化合物１３、１４、１５、および１６とそれぞれ番号を付け直した国際公開第０６／００２３４２号に開示されている選択された実施例３１、８９、１５３、および１７５のものを記載する。以下のデータは、化合物１３、１４、および１６に示すものより著しく高い水性の酸性媒質の増加した安定性を示すことにより、ＢＣＣＡ遊離酸が有益な特性を与えることを実証する。ＢＣＣＡ遊離酸についてのこの増加した酸安定性は教示されておらず、国際公開第０６／００２３４２号を考慮しても予測できない。
【０１０８】
【表６−１】
【表６−２】
【０１０９】
試料調製物
１）ＡＣＮ中に化合物ストック：０．９ｍｇ／ｍＬ；２）１００μＬストック＋７００μＬのＡＣＮ＋１ｍＬ培地（０．１ＮのＨＣｌ、５０ｍＭのＰＯ４、ｐＨ８、および０．３％のＨ２Ｏ２）；３）加熱した（４０℃）オートサンプラーにバイアルを入れ、１６または２４時間、４時間間隔で注入する。
【０１１０】
クロマトグラフィーオートサンプラー条件
カラム：Ａｌｌｔｅｃｈ Ａｌｌｔｉｍａ Ｐｈｅｎｙｌ、３μｍ、４．６×１５０ｍｍまたはＷａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ カラム温度：５０℃、注入量：１０μＬ。検出：２２６、２５４または２６６ｎｍ（化合物に応じて）におけるＵＶ。流速：１．５ｍＬ／分。移動相：５０％水／５０％ＡＣＮ中に０．１％ＴＦＡ（化合物ピーク保持時間約５分を維持するためにＡＣＮの％を調整するために必要であり得る）。最終試料濃度０．０５ｍｇ／ｍＬ；ＡＣＮ含有量４４％。
【０１１１】
比較のために、雄のＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットにおけるＣＥＴＰ阻害化合物のＩＶおよびＰＯ薬物動態の決定
以下に記載するのは、交差研究計画において、雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（ｎ＝４）に対する、化合物の単一の１ｍｇ／ｋｇの静脈内ボーラス投与または３ｍｇ／ｋｇの経口投与後の経口バイオアベイラビリティを含む、薬物動態パラメーターを決定することである。静脈内ビヒクルは、２０％のソルトール（ｓｏｌｕｔｏｌ）マイクロエマルション／８０％の純粋である。経口ビヒクルは、ポビドンＵＳＰ１０％／ＳＬＳ０．５％／ＱＳ純粋である。静脈内において、投与後、腕の血液試料を、０．０８、０．２５、０．５、１、２、５、８、１２、および２４時間に収集する。経口において、投与後、腕の血液試料を、０、０．２５、０．５、１、２、５、８、１２、および２４時間に収集する。遠心分離により血漿を得て、氷上に置き、生物学的分析のために、氷上で試料を、Ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（ＢＡＳｉ；Ｗｅｓｔ Ｌａｆａｙｅｔｔｅ，ＩＮ）に輸送するまで凍結させる。ＢＣＣＡの濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより定量し、有効なソフトウェアプログラム（Ｗａｔｓｏｎ、Ｖｅｒｓｉｏｎ７．１）を使用して薬物動態パラメーターを算出する。ＢＣＣＡのバイオアベイラビリティを評価するために、化合物の溶解を促進するために超音波処理を用いるか、または用いないで各々使用される、精製水中の１％ｗ／ｖのナトリウムカルボキシメチルセルロース、０．２５％ｗ／ｖのポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）および０．０５％ ０．０５％のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ａｎｔｉｆｏａｍ １５１０−ＵＳ、または精製水中の精製水中の１％ｗ／ｖのナトリウムカルボキシメチルセルロース、０．５％ｗ／ｖのラウリル硫酸ナトリウム、および０．０５％ ０．０５％のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ａｎｔｉｆｏａｍ １５１０−ＵＳを含む、他のビヒクルを使用してもよい。
【０１１２】
以下の表７のデータは、ＢＣＣＡ遊離酸が、化合物１５（国際公開第０６／００２３４２号における実施例１５３）によって示されるものより４倍高いバイオアベイラビリティを示す有益性を与えることを実証する。この増大したバイオアベイラビリティは教示されておらず、国際公開第０６／００２３４２号を考慮して予測できない。
【０１１３】
【表７】
【０１１４】
アッセイ
本発明の化合物および／または方法の有用性および効果を実証する以下のアッセイプロトコルおよびその結果（複数も含む）は、例示の目的のために与えられ、決して限定することを意図するものではない。
【０１１５】
インビトロでのＣＥＴＰ阻害アッセイ：ＳＰＡアッセイ
インビトロでのシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）を使用して、ＨＤＬとＬＤＬとの間の放射性標識したコレステロールエステルの移動を阻害する本発明の化合物の能力を評価する。このアッセイは、ＣＥＴＰ源によるＨＤＬ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）からビオチン化ＬＤＬ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）への［３Ｈ］コレステロールエステルの移動の阻害をモニターする。このアッセイについてのＣＥＴＰ源は、ヒトＣＥＴＰを発現するために作製されているＡＶ−１２細胞により産生され得る。放射性標識したコレステロールエステルを、ＨＥＰＥＳ−ＮａＣｌベースの緩衝液に移し、３０分のインキュベーション後、反応を停止させ、ビオチン化ＬＤＬをストレプトアビジン／シンチラントコーティングしたＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）に結合する。完全にオープンのウィンドウ設定でＰａｃｋａｒｄ ９６ウェルシンチレーションＴｏｐＣｏｕｎｔｅｒにおいて放射性シグナルを測定する。標準物と比べて、ＬＤＬからの放射性シグナルの低下は、ＣＥＴＰの活性を阻害する化合物の能力を示す。
【０１１６】
代替として、このアッセイにおいて、放射性標識したコレステロールエステルの移動を媒介するために他のＣＥＴＰ源を使用してもよい。例えば、ヒト血漿由来の内因性ＣＥＴＰ、ヒトＣＥＴＰを発現するマウス由来のＣＥＴＰ、およびハムスター由来の内因性ＣＥＴＰを、このアッセイにおけるＣＥＴＰ源として使用してもよい。
【０１１７】
このアッセイにおいて、ＨＥＰＥＳ−ＮａＣｌベースの緩衝液以外の緩衝液を使用してもよい。例えば、ヒト血漿、マウス血漿またはアルブミン中に多く存在するＴｒｉｓ緩衝液を使用してもよい。
【０１１８】
このアッセイにおいて、ＣＥＴＰ活性をトラックするために放射活性の他の源が使用されてもよいことは、当業者により理解されるだろう。
【０１１９】
さらに、このアッセイにおいて、放射性標識したＬＤＬが使用されてもよい。
【０１２０】
このアッセイによるＨＤＬとＬＤＬとの間の放射性標識したコレステロールエステルの移動を阻害するＢＣＣＡの能力を以下の表８に記載する。
【０１２１】
ＣＥＴＰ活性のインビボアッセイ
内因性ＣＥＴＰを発現する、Ｓｙｒｉａｎ Ｇｏｌｄｅｎハムスターを使用して、インビボでの化合物の活性を評価する。７９．５％のコーンオイル、２０％のオレイン酸、０．５％のＬｕｂｒａｆｉｌビヒクルにおいて３０ｍｐｋ用量で試験化合物を、ヒトＣＥＴＰを発現するトランスジェニックマウス（雌または雄のＣＥＴＰおよびＡｐｏ Ａ１ヘテロ接合体マウス、Ｔａｃｏｎｉｃ，Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）の系統に経口投与する。４時間〜４８時間の範囲の投与後の様々な時間において、血液／血漿を得ることができる。このアッセイにおいて、処置動物からの血漿をＣＥＴＰ源として使用する変更をして、インビトロでのＣＥＴＰ活性アッセイについての上記と同様の方法によってＣＥＴＰ活性を定量できる。
【０１２２】
このアッセイによるＢＣＣＡのインビボでの活性を以下の表８に記載する。
【０１２３】
血漿中脂質のインビボアッセイ
インビボでの本発明の化合物の活性は、所定量のＣＥＴＰ含有動物種における化合物による対照に対してＨＤＬコレステロールの上昇レベルを比較することによって評価できる。ＣＥＴＰ活性のインビボアッセイについての上記のように試験化合物を投与する。投与後、４時間〜２４時間の範囲の様々な時間において、血液を得る。血液を凝固させ、遠心分離により凝固血液から血清を得る。血清中のＨＤＬコレステロールレベルは、臨床化学分析器（Ｒｏｃｈｅ／Ｈｉｔａｃｈｉ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）と共にＨＤＬ−Ｃおよび試薬（Ｒｏｃｈｅ／Ｈｉｔａｃｈｉ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を使用する公知の手順により定量できる。さらなる血清脂質は酵素法により分析できる。沈殿またはサイズ排除クロマトグラフィー後、ＶＬＤＬ、ＬＤＬおよびＨＤＬ画分中の脂質を酵素法により分析する。非晶質ＢＣＣＡの投与後８時間におけるＨＤＬコレステロールレベルの上昇の例を以下の表８にまとめる。
【０１２４】
【表８】
【０１２５】
処置方法
本明細書で使用する場合、用語「有効量」とは、心臓血管疾患に起因する様々な病的状態の症状を軽減できる、本発明の化合物、すなわち非晶質ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ・溶媒和物、ＢＣＣＡ塩・溶媒和物および／もしくは結晶形態におけるＢＣＣＡ・水和物またはそれらの組み合わせの量を意味する。心臓血管疾患の例としては、限定されないが、冠状動脈性心臓病、脳卒中、関節硬化症、脂質異常症、低い高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、高コレステロール血症、および末梢血管疾患が挙げられる。
【０１２６】
本発明に従って投与される化合物の特定の用量は、例えば、限定されないが、投与される化合物、投与経路、患者の状態、および担当医により決定される処置される病的状態を含む、事例に関する特定の状況により決定できる。典型的な日用量は、約１０ｍｇ〜約７５０ｍｇ／日の本発明の化合物を含む。好ましい日用量は、通常、約３０ｍｇ〜約６００ｍｇ／日、さらにより好ましくは約５０〜約３００ｍｇ／日である。
【０１２７】
本発明の化合物は様々な経路によって投与されてもよい。好ましくは、本発明の化合物は、錠剤、固体またはゲルが充填されたカプセル、粉末、溶液または懸濁液に製剤化される。
【０１２８】
本発明の医薬製剤は、周知および容易に入手可能な成分を使用して当該技術分野において公知の手順により調製できる。本明細書で使用する場合、用語「薬学的に受容可能」とは、製剤の他の成分と適合し、それらの受容者に有害でない、１つ以上の担体、希釈剤、賦形剤および塩を指す。医薬組成物およびそれらを調製するためのプロセスは当該技術分野において公知であり、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，「Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら，ｅｄｓ．第１９版，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．）において例が見出され得る。かかる製剤に適している薬学的に受容可能な担体、賦形剤、および希釈剤の非限定的な例としては、以下：デンプン、糖、マンニトール、およびシリカ誘導体；カルボキシメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、およびポリビニル−ピロリドンなどの結合剤；グリセロールなどの保湿剤；炭酸カルシウムおよび炭酸水素ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶解を遅らせるための剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；セチルアルコール、グリセロールモノステアレートなどの界面活性剤；カオリンおよびベントナイトなどの吸着性担体；ならびにタルク、カルシウム、およびステアリン酸マグネシウム、および固体ポリエチルグリコールなどの滑沢剤が挙げられる。一形態において、医薬製剤は、マンニトール、ラウリル硫酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、微結晶セルロースおよびステアリン酸マグネシウムを含み、さらに、約２〜約２１％ｗ／ｗの間の範囲で薬物物質、ＢＣＣＡ、ＢＣＣＡ遊離酸、ＢＣＣＡ水和物または結晶形態におけるＢＣＣＡ水和物を含んでもよい。
【０１２９】
従って、本発明の別の態様は、本発明によって提供される化合物の薬学的に受容可能な塩である。薬学的塩の例は、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊ．Ｐｈａｒ．Ｓｃｉ．，６６：１−１９（１９７７）および「Ａ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ」，Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｃ．Ｇ．およびＳｔａｈｌ，Ｐ．Ｈ．（ｅｄｓ．）Ｖｅｒｌａｇ Ｈｅｌｖｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ，２００２（それらは本明細書に組み込まれる）に見出され得る。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸である化合物もしくは組成物、水和物、または前記化合物の薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
（ａ）２θにて７．５、９．２、１０．７、および１５．５＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１５．０、１５．５、および１９．５＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１１．３、１５．０、１５．５、１７．７、１９．５、および２５．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物である請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
（ａ）１７５．６、１６８．０、６１．１、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；または
（ｂ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、６１．１、４５．０、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；または
（ｃ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、１３９．９、１３６．３、６１．１、５３．０、４９．８、４５．０、２１．２、および１８．２＋／−０．２ｐｐｍにてアダマンタン（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照標準とするピークを含む固相ＮＭＲスペクトルにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物である請求項１または２に記載の組成物。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか一項に記載の実質的に純粋なトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、水和物、または結晶形態の水和物を含む組成物。
【請求項６】
実質的に純粋な結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
約８０％よりも多い結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、またはその薬学的に受容可能な塩；および
水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ギ酸、及び酢酸から選択される溶媒和物を含む組成物。
【請求項９】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、またはその薬学的に受容可能な塩、および溶媒和物が、約１：０．３から約１：１＋／−０．２（酸または塩：溶媒和物）の間のモル比にある、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
（ａ）２θにて５．５、９．０、１４．３、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて５．５、９．０、１４．３、１７．５、１８．２、１９．４、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて５．５、９．０、１３．２、１３．６、１４．３、１５．２、１７．５、１８．２、１９．４、１９．８、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・ヘミ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・ヘミエタノール溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
（ａ）２θにて１５．４、１６．９、１８．２、および１８．６＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて１５．４、１５．７、１６．９、１８．２、１８．６、１９．５、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて１３．０、１３．９、１５．４、１５．７、１６．９、１６．４、１８．２、１８．６、１９．５、２０．８、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・ギ酸溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
（ａ）２θにて１２．９、１５．１、１８．４、１９．４、および２０．８＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて１２．９、１３．８、１５．１、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、および２０．８＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて１１．０、１２．９、１３．８、１５．１、１５．６、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、２０．８、および２１．７＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・酢酸溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１３】
（ａ）２θにて５．６、１１．３、１２．６、および１７．９＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて５．６、８．０、１１．３、１２．６、１７．９、２０．４、および２４．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・イソプロパノール溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１４】
該薬学的に受容可能な塩についてのカチオンは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、及びｔｅｒｔ−ブチルアンモニウムから選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
請求項１から１４のいずれか一項に記載の化合物または組成物、および、薬学的に受容可能な担体、賦形剤または希釈剤のうちの少なくとも１つを含む、医薬組成物。
【請求項１６】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項１５および１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
循環器疾患を治療する必要のある患者においてその循環器疾患を治療する方法であって、請求項１５から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項１９】
医薬として使用するための請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物または組成物。
【請求項２０】
治療において使用するための請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物または組成物。
【請求項２１】
循環器疾患の治療に使用するための請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物または組成物。
【請求項２２】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、またはその薬学的に受容可能な塩を調製する方法であって、該方法は、式ＩＩの化合物
【化１】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、及びＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を脱エステル化して、式Ｉの化合物
【化２】
またはその薬学的に受容可能な塩を得ることを含む、方法。
【請求項２３】
式ＩＩＩの化合物
【化３】
を
【化４】
と縮合して、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を得ることを更に含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
以下に示した構造
【化５】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、及びＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を有する化合物。
【請求項２５】
以下に示した構造
【化６】
を有する化合物。
【請求項１】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸である化合物もしくは組成物、水和物、または前記化合物の薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
（ａ）２θにて７．５、９．２、１０．７、および１５．５＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１５．０、１５．５、および１９．５＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて７．５、９．２、１０．７、１３．８、１１．３、１５．０、１５．５、１７．７、１９．５、および２５．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物である請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
（ａ）１７５．６、１６８．０、６１．１、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；または
（ｂ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、６１．１、４５．０、２１．２、および１８．３＋／−０．２ｐｐｍ；または
（ｃ）１７５．６、１６８．０、１４５．６、１４４．８、１３９．９、１３６．３、６１．１、５３．０、４９．８、４５．０、２１．２、および１８．２＋／−０．２ｐｐｍにてアダマンタン（δ＝２９．５ｐｐｍ）を参照標準とするピークを含む固相ＮＭＲスペクトルにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物である請求項１または２に記載の組成物。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか一項に記載の実質的に純粋なトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、水和物、または結晶形態の水和物を含む組成物。
【請求項６】
実質的に純粋な結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
約８０％よりも多い結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、またはその薬学的に受容可能な塩；および
水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ギ酸、及び酢酸から選択される溶媒和物を含む組成物。
【請求項９】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、またはその薬学的に受容可能な塩、および溶媒和物が、約１：０．３から約１：１＋／−０．２（酸または塩：溶媒和物）の間のモル比にある、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
（ａ）２θにて５．５、９．０、１４．３、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて５．５、９．０、１４．３、１７．５、１８．２、１９．４、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて５．５、９．０、１３．２、１３．６、１４．３、１５．２、１７．５、１８．２、１９．４、１９．８、２０．６、２２．０、および２２．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・ヘミ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・ヘミエタノール溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
（ａ）２θにて１５．４、１６．９、１８．２、および１８．６＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて１５．４、１５．７、１６．９、１８．２、１８．６、１９．５、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて１３．０、１３．９、１５．４、１５．７、１６．９、１６．４、１８．２、１８．６、１９．５、２０．８、２２．８、２５．７、および２５．５＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・ギ酸溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
（ａ）２θにて１２．９、１５．１、１８．４、１９．４、および２０．８＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて１２．９、１３．８、１５．１、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、および２０．８＋／−０．２；または
（ｃ）２θにて１１．０、１２．９、１３．８、１５．１、１５．６、１６．４、１７．８、１８．４、１９．４、２０．１、２０．８、および２１．７＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・酢酸溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１３】
（ａ）２θにて５．６、１１．３、１２．６、および１７．９＋／−０．２；または
（ｂ）２θにて５．６、８．０、１１．３、１２．６、１７．９、２０．４、および２４．１＋／−０．２におけるピークを含むＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）から得られた粉末Ｘ線回折パターンにより特定される、結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・ｔｅｒｔ−ブチルアミン塩・イソプロパノール溶媒和物である請求項８に記載の組成物。
【請求項１４】
該薬学的に受容可能な塩についてのカチオンは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、及びｔｅｒｔ−ブチルアンモニウムから選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
請求項１から１４のいずれか一項に記載の化合物または組成物、および、薬学的に受容可能な担体、賦形剤または希釈剤のうちの少なくとも１つを含む、医薬組成物。
【請求項１６】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
結晶形態のトランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸・水和物を含む請求項１５および１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
循環器疾患を治療する必要のある患者においてその循環器疾患を治療する方法であって、請求項１５から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項１９】
医薬として使用するための請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物または組成物。
【請求項２０】
治療において使用するための請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物または組成物。
【請求項２１】
循環器疾患の治療に使用するための請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物または組成物。
【請求項２２】
トランス−４−［［（５Ｓ）−５−［［［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミノ］−２，３，４，５−テトラヒドロ−７，９−ジメチル−１Ｈ−１−ベンゾアゼピン−１−イル］メチル］−シクロヘキサンカルボン酸、またはその薬学的に受容可能な塩を調製する方法であって、該方法は、式ＩＩの化合物
【化１】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、及びＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を脱エステル化して、式Ｉの化合物
【化２】
またはその薬学的に受容可能な塩を得ることを含む、方法。
【請求項２３】
式ＩＩＩの化合物
【化３】
を
【化４】
と縮合して、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を得ることを更に含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
以下に示した構造
【化５】
（式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、及びＣ１−５アルキルフェニルから選択される）を有する化合物。
【請求項２５】
以下に示した構造
【化６】
を有する化合物。
【公表番号】特表２０１２−５３２１０６（Ｐ２０１２−５３２１０６Ａ）
【公表日】平成２４年１２月１３日（２０１２．１２．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５１７８１４（Ｐ２０１２−５１７８１４）
【出願日】平成２２年６月２８日（２０１０．６．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４０１２５
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／００２６９６
【国際公開日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１２月１３日（２０１２．１２．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年６月２８日（２０１０．６．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４０１２５
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／００２６９６
【国際公開日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
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