ヌクレオチドアナログ組成物および合成方法
【課題】抗ウイルス化合物を提供すること。
【解決手段】本発明は、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡおよびフマル酸（１：１）を含む組成物を提供する。この組成物は、抗ウイルス化合物の調製のための中間体として有用であるかあるいは、抗ウイルス治療または予防法のために患者に投与するために有用である。この組成物は特に、経口で投与する場合に有用である。本発明はまた、ＰＭＰＡおよびＰＭＰＡ合成における中間体を生成するための方法を提供する。実施態様は、ＤＭＦのような有機溶媒中の、リチウムｔ−ブトキシド、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンおよびジエチルｐ−トルエンスルホニルメトキシ−ホスホネートを含む。反応により、先行の方法によって生成されたジエチルＰＭＰＡと比較して改良された副生成物特性を含む、ジエチルＰＭＰＡ調製物を得る。
【解決手段】本発明は、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡおよびフマル酸（１：１）を含む組成物を提供する。この組成物は、抗ウイルス化合物の調製のための中間体として有用であるかあるいは、抗ウイルス治療または予防法のために患者に投与するために有用である。この組成物は特に、経口で投与する場合に有用である。本発明はまた、ＰＭＰＡおよびＰＭＰＡ合成における中間体を生成するための方法を提供する。実施態様は、ＤＭＦのような有機溶媒中の、リチウムｔ−ブトキシド、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンおよびジエチルｐ−トルエンスルホニルメトキシ−ホスホネートを含む。反応により、先行の方法によって生成されたジエチルＰＭＰＡと比較して改良された副生成物特性を含む、ジエチルＰＭＰＡ調製物を得る。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
本発明は、９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン（「ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ」）、および抗ウイルス剤として使用するための、（Ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニン（「ＰＭＰＡ」）のヒトまたは動物への経口送達のために適切な組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホスホノメトキシヌクレオチドアナログは、公知であり、そして経口送達のための多様な技術が公知である。例えば、米国特許出願番号０８／６８６，８３８、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０、特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６、特許文献１７、特許文献１８、特許文献１９、特許文献２０、特許文献２１および特許文献２２、非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５、および非特許文献６を参照のこと。ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡは、特許文献２３中に開示される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第５，２０８，２２１号明細書
【特許文献２】米国特許第５，１２４，０５１号明細書
【特許文献３】国際公開第９１／１９７２１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第９４／０３４６７号パンフレット
【特許文献５】国際公開第９４／０３４６６号パンフレット
【特許文献６】国際公開第９２／１３８６９号パンフレット
【特許文献７】独国特許出願公開第４１ ３８ ５８４ Ａ１号明細書
【特許文献８】国際公開第９４／１０５３９号パンフレット
【特許文献９】国際公開第９４／１０４６７号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第９６／１８６０５号パンフレット
【特許文献１１】国際公開第９５／０７９２０号パンフレット
【特許文献１２】国際公開第９５／７９／０７９１９号パンフレット
【特許文献１３】国際公開第９２／０９６１１号パンフレット
【特許文献１４】国際公開第９２／０１６９８号パンフレット
【特許文献１５】国際公開第９１／１９７２１号パンフレット
【特許文献１６】国際公開第８８／０５４３８号パンフレット
【特許文献１７】欧州特許第０ ６３２ ０４８号明細書
【特許文献１８】欧州特許第０ ４８１ ２１４号明細書
【特許文献１９】欧州特許第０ ３６９ ４０９号明細書
【特許文献２０】欧州特許第０ ２６９ ９４７号明細書
【特許文献２１】米国特許第３，５２４，８４６号明細書
【特許文献２２】米国特許第５，３８６，０３０号明細書
【特許文献２３】国際公開第９８／０４５６９号パンフレット
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｅｎｇｅｌ Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．７７：３４９−３６７ １９７７
【非特許文献２】Ｆａｒｑｕｈａｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７２：３２４−３２５ １９８３
【非特許文献３】Ｓｔａｒｒｅｔｔら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．１９：２６７−２７３ １９９２
【非特許文献４】Ｓａｆａｄｉら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １０（９）：１３５０−１３５５ １９９３
【非特許文献５】Ｓａｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３２（６）：２２４１−２２４８ １９８４
【非特許文献６】Ｄａｖｉｄｓｅｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７（２６）：４４２３−４４２９ １９９４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
発明の要旨
本発明は、９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィ
ノイル］メトキシ］プロピル］−アデニン・フマル酸（１：１）（「ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレート」または「ＢＰＰＦ」）を含む、式（１）の組成物を提供し、
【０００６】
【化１】
ここで、Ｂは、アデニン−９−イルであり、Ｒは独立して−Ｈまたは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２で
あるが、少なくとも１つのＲは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である。
【０００７】
本発明の他の実施態様は、ウイルスに感染したかまたはウイルス感染の危険のある患者への、治療的に有効量の式（１）の組成物の経口投与を含む。
【０００８】
別の実施態様においては、式（１）の化合物の調製方法は、フマル酸をビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡと接触する工程を包含する。
【０００９】
他の実施態様は、リチウムアルコキシドと９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液とを接触させる工程を包含する。
【００１０】
特定の実施態様は、約２．７〜３．５のｐＨで（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液を含む組成物を含有し、ここで、溶液は、約０．１ ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、そしてここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡは（Ｒ）立体配置である。
【００１１】
本願発明は、さらに以下を提供する。
（項目１）以下の式（１）の組成物であって、
【００１２】
【化２】
ここで、Ｂは、アデニン−９−イルであり、Ｒは独立して−Ｈまたは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２であるが、少なくとも１つのＲは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である、組成物。
（項目２）両方のＲが−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である、項目１に記載の組成物。
（項目３）前記組成物が結晶性固体である、項目１に記載の組成物。
（項目４）前記化合物が、炭素原子キラル中心（＊）で富化されるかまたは分割される、項目１に記載の組成物。
（項目５）約２５．０の２θ（度）で表される、Ｃｕ−Ｋα照射を使用するＸ−線粉末回折スペクトルピークを有する、項目１に記載の組成物。
（項目６）項目１に記載の組成物および受容可能な賦形剤を含む、組成物。
（項目７）リチウムアルコキシドおよび９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液を含む、組成物。
（項目８）約２．７〜３．５のｐＨで（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液を含む組成物であって、ここで、該溶液は、約０．１ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、そしてここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡは（Ｒ）立体配置である、組成物。
（項目９）ウイルスに感染したかまたはウイルス感染の危険のある患者へ、治療的に有効量の項目１に記載の組成物を、経口投与する工程を含む方法。
（項目１０）ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡをフマル酸と接触する工程を含む、項目１に記載の組成物を生成するための方法。
（項目１１）フマル酸が２−プロパノール中に溶解される、項目１０に記載の方法。
（項目１２）項目７に記載の組成物を生成するための方法であって、リチウムアルコキシドを９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液と混合する工程を含む、方法。
（項目１３）前記リチウムアルコキシドが、メトキシド、エトキシド、ｎ−プロポキシド、ｉ−プロポキシド、ｎ−ブトキシド、ｉ−ブトキシド、ｔ−ブトキシド、ネオペントキシド、ｎ−ペントキシド、ｉ−ペントキシドまたはｎ−ヘキソキシド、ｎ−ヘプトキシド、２−ヘプトキシド、ｎ−オクトキシド、２−オクトキシド、典型的にはｔ−ブトキシドまたはｉ−プロポキシドからなる群より選択されるアルコキシドである、項目１２に記載の方法。
（項目１４）前記リチウムアルコキシドが、リチウムｔ−ブトキシドまたはリチウムｉ−プロポキシドである、項目１３に記載の方法。
（項目１５）約０．０８ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを含む溶液のｐＨを約２．７〜３．５に調節する工程を含む方法であって、ここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡが（Ｒ）立体配置である、方法。
（項目１６）９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）、前ゼラチン化デンプン、クロスカルメロースナトリウム、ラクトース一水和物およびステアリン酸マグネシウムを含む錠剤を含有する、組成物。
（項目１７）前記９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）が結晶性である、項目１６に記載の組成物。
（項目１８）前記錠剤が、７５ｍｇの９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）、１１ｍｇの前ゼラチン化デンプン、８．８ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、１２３．６ｍｇのラクトース一水和物および２．２ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含む、項目１６に記載の組成物。
（項目１９）液体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む混合物から、湿った顆粒を調製するプロセスによって生成される、９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）を含む生成物。
（項目２０）前記液体が水であり、そして前記プロセスが必要に応じてさらに湿った顆粒を乾燥させる工程を包含する、項目１９に記載の生成物。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、ＢＰＰＦ結晶Ｘ線粉末回折パターンである。
【図２】図２は、ＢＰＰＦ結晶の示差走査熱量測定によって得られたサーモグラムを示す。
【図３】図３は、ＢＰＰＦ結晶のフーリエ変換赤外線吸収スペクトルを示す。
【図４】図４は、光学顕微鏡による１００倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。
【図５】図５は、光学顕微鏡による１００倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。
【図６】図６は、光学顕微鏡による２００倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。
【図７】図７は、光学顕微鏡による４０倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。図４〜７は、１３２％に拡大して作製された、写真のコピーである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
発明の詳細な説明
本明細書中で使用される「アルキル」は、反対の記述が無ければ、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２の第一級、第二級、第三級または環状構造を含む炭化水素である。その例は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロプロピルメチル、シクロペンチル、シクロブチルメチル、１−シクロプロピル−１−エチル、２−シクロプロピル−１−エチル、シクロヘキシル、シクロペンチルメチル、１−シクロブチル−１−エチル、２−シクロブチル−１−エチル、１−シクロプロピル−１−プロピル、２−シクロプロピル−１−プロピル、３−シクロプロピル−１−プロピル、２−シクロプロピル−２−プロピル、および１−シクロプロピル−２−プロピル、である。
【００１５】
本明細書中で使用される「アルコキシド」は、反対の記述が無ければ、酸素原子に結合されるアルキルについて本明細書中で定義される、１、２、３、４、５または６個の炭素原子を含む炭化水素である。その例は、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣ（ＣＨ３）３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）３ＣＨ３、−ＯＣ（ＣＨ３）２（ＣＨ２）２ＣＨ３、−ＯＣＨ（Ｃ２Ｈ５）（ＣＨ２）２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）３ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）３、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）２ＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、である。
【００１６】
他に明白にまたは文脈によって特定されなければ、量のパーセンテージを重量％（ｗ／ｗ）として表す。従って、１％未満の水を含むＢＰＰＦ調製物は、１％ｗ／ｗ未満の水を含む調製物である。
【００１７】
本明細書中で使用され、そして他に記述されなければ、変数または成分（例えばアルコキシド）を定義するための置換基（例えば、メトキシド、エトキシド、ｎ−プロポキシド、ｉ−プロポキシドまたはｔ−ブトキシド）のリストを提供する場合にはいつでも、変数または成分は、列挙された置換基の任意のおよび全ての可能な組み合わせ含むことを明確に意味する（例えば、アルコキシドはメトキシド、エトキシドまたはｎ−プロポキシドを意味し、そしてアルコキシドはｉ−プロポキシドまたはｔ−ブトキシドを意味する）。同様に、１−メチル−２−ピロリジノン、トリアルキルアミン（Ｃ１−３アルキル）、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、Ｃ１−６アルカノール、ピリジン、アセトン、トルエン、ＣＨ２Ｃｌ２、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、またはキシレンを含むと定義された有機溶媒のリストは、アセトン、キシレンまたは両方をリストから除外し得る。従って、変数または成分を定義している置換基の与えられたリストは、リスト中の置換基の任意の組み合わせを含むかまたは排除することを明確に意図する。ただし、与えられた定義が、変数または成分が存在し得ないと記述しなければ、全ての可能な置換基が除外され、かつ定義された変数が排除されるのではない。
【００１８】
本発明の化合物は、この部分での（Ｒ）立体配置を有する最適な抗ウイルス活性に関連して先に見出されているものに従って、必要に応じて炭素原子のキラル中心（＊）で富化される（ｅｎｒｉｃｈｅｄ）かまたは分割される。（＊）によって示される、炭素原子のキラル中心は、必要に応じて（Ｒ）または（Ｓ）立体配置であり、そして富化され得るかまたは実質的に等しい割合で見出され得る。典型的には、ＰＭＰＡおよびビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ中でキラル中心（＊）に結合されるメチル基は、（Ｒ）立体配置である。本発明の複合体は、示される様式に関わらず、構成成分の互変異性型を含む。
【００１９】
式（１）の化合物は、少量の、典型的には３％未満の、通常１％未満のモノ（ＰＯＭ）ＰＭＰＡ（すなわち、式（１）の化合物であって、ここでＲの１つは−Ｈであり、そして他のＲは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である）を有するＢＰＰＦを含み得る。
【００２０】
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートの物理的および化学的特性
結晶性ＢＰＰＦは、遊離の塩基および他の塩と比較して、予想外に優れた物理−化学の特性の組み合わせを有する。結晶性ＢＰＰＦは、高融点を有し、非吸湿性であり、優れた固体状態安定性を有し、そして良好な水溶性および安定性を有する。これらの特性は、製造あるいはヒトおよび動物における優れた経口バイオアベイラビリティー特性の寄与のために有用である。これらの特性は、生体流体（例えば、血漿または細胞原形質）へのＢＰＰＦまたはＰＭＰＡの効率的な送達を可能とする。例えば、ヒトにおいて一日一回投与される、７５ｍｇの結晶性ＢＰＰＦの経口バイオアベイラビリティーは、約３０〜４０％である。
【００２１】
ＢＰＰＦは、結晶性形態であっても良いしそうでなくても良い。本発明者らは、Ｘ線粉末回折および融点を含むいくつかの方法によって特徴づけて、ＢＰＰＦ（「ｃＢＰＰＦ」）の結晶性形
態を得た。研究者は通常、結晶性組成物の特徴づけまたは同定のために、Ｘ線粉末回折を使用する（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ， 第２３巻， １９９５， 方法９４１， １８４３−１８４５頁， Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ； Ｓｔｏｕｔら， Ｘ−Ｒａｙ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ； Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ，ＭａｃＭｉｌｌａｎ Ｃｏ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｎ．Ｙ． １９６８を参照のこと）。結晶性
化合物から得られる回折パターンは、しばしば、与えられた結晶形態の診断用であるが、結晶の連続的なバッチから得られる回折パターンの複製として、弱いまたは非常に弱い回折ピークが必ず表れ得るわけではない。これは、他の結晶性組成物が、感知可能な量のサンプル中に存在する場合に、特定のものである。バンドの相対的な強度、特に、低角のＸ線入射の値（低２θ）は、好ましい配向効果、結晶成長の方向、粒子サイズおよび測定の他の条件に従って変化し得る。従って、回折ピークの相対強度は、結論的に、問題の結晶形態の診断用とならない。代わりに、ＢＰＰＦ結晶の同一性を決定するために、正確な振幅よりもむしろ、相対的な間隔および一般的なパターンを必要に応じて含む、ピークの位置を見るべきである。さらに、高純度の参照サンプルで観察された全てのバンドを同定に使用する必要は無い；単一のバンドでさえ与えられた結晶形態を診断し得る（例えば、ｃＢＰＰＦについて２５．０）。
【００２２】
結晶性ＢＰＰＦ同定のために必要に応じて使用し得るさらなる診断技術には、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）および赤外線吸収分光法（ＩＲ）が挙げられる。ＤＳＣは、結晶構造が変化した場合に結晶が熱を吸収する、熱量吸収転移温度を測定する。ＤＳＣは、異なった吸収温度に基づいて、異なった結晶組成物間で区別するための代替手段を提供する。ＩＲは、分子中で光に応じて振動する基に関連した特定の化学結合の存在によって引き起こされる、赤外光の吸収を測定する。ＤＳＣおよび／またはＩＲは従って、ＢＰＰＦ結晶を説明するために使用し得る
、物理的情報を提供し得る。
【００２３】
ｃＢＰＰＦ Ｘ線粉末回折パターンは、通常約２５．０に、典型的には約２５．０および約２０．０に、またはより典型的には約２５．０、約２０．０および約３０．１に、および通常少なくとも約２５．０、約２０．０、約３０．１および約２１．９に、ピークを示す。ｃＢＰＰＦスペクトルは通常約４．９、約１０．２、約１０．５、約１８．２、約２０．０、約２１．９、約２４．０、約２５．０、約２５．５、約２７．８、約３０．１および約３０．４にピークを有する。ｃＢＰＰＦＸ線粉末回折パターンは通常、約２０．０および／または２１．９および／または２５．０および／または３０．１の任意の１つ（または組み合わせ）にピークを示す。
【００２４】
ｃＢＰＰＦ結晶は、約１１６℃の開始点を有する、ＤＳＣ吸収ピークを約１１８℃に示し、ＩＲスペクトルは、約３２２４、３１０７−３０５２、２９８６−２９３９、１７５９、１６７８、１６２０、１２６９および１１０２に、センチメートルの逆数で表された特徴的なバンドを示す。異なったｃＢＰＰＦ結晶調製物は、約０．１５−０．３０ｇ／ｍＬ、通常約０．２−０．２５ ｇ／ｍＬのバルク密度を有する。これらは、典型的には本質的に溶媒が無く、結晶化槽から適切に回収された場合１％未満の溶媒を含み、そして一般に検出可能な格子が同調された溶媒分子を含まない。
【００２５】
ＢＰＰＦ結晶は、典型的には、無水物および非吸湿性であり、検出可能な水をほとんどまたは全く含まない。一般に、ＢＰＰＦ結晶は通常約１％未満の、典型的には約０．５％未満の水を含む。さらに、ＢＰＰＦ結晶は通常、約１０％未満の、典型的には約５％未満の、しばしば約１％未満の、および通常約０．５％未満のアモルファスＢＰＰＦを含む。
【００２６】
ＢＰＰＦ結晶は、乾燥した場合、通常不透明な白色またはオフホワイトの結晶性粉末として現れる。与えられた調製物から得られる結晶は、通常サイズが多分散であり、そして針、プレート、不規則な錠剤および、針、プレートまたは錠剤の凝集体を含む形状の範囲を有する。ＢＰＰＦ結晶は典型的には、与えられた調製物において、ほとんどの個々の結晶の最も大きな寸法に沿って、約１μｍ〜約５００μｍ、典型的には約５〜１７０μｍ、通常約１０〜１１０μｍの、最も長い寸法に沿ったサイズの範囲である。これらの結晶は破砕されたかまたは角のふちを有し得る。図４〜７の写真は、錠剤、ロッド、針、プレートおよび凝集体を含む、多様な形状を有するｃＢＰＰＦを示す。
【００２７】
有用性
ＰＭＰＡおよびビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡは、特にレトロウイルス、ＨＩＶ、ＳＩＶおよびＧＡＬＶ、およびヘパドナウイルス（例えば、ＨＢＶ）を含む、ヒトまたは動物における１つ以上のウイルス感染の、処置または予防法において有用であることが公知である。ＰＭＰＡを用いて処理されるべき他の感染は、ＭＳＶ、ＲＳＶ、ＦＩＶ、ＭｕＬＶ、および齧歯類および他の動物の他のレトロウイルス感染を含む。先行技術は、ＰＭＰＡの抗ウイルス特異性を記述し、そして本発明の化合物はこの特異性を有する。
【００２８】
感染部位を最良に攻撃するための投薬および適切な投与経路は、ＰＭＰＡに関する当該技術分野において周知である。ＢＰＰＦの適切な用量の決定は、臨床医にとって簡単な事項であり、本発明の複合体の分子量および、経口で投与する場合には、動物においてまたはヒトでの臨床的試行における推論としてのこれらのバイオアベイラビリティー、ならびに当業者に周知の他の因子を考慮する。
【００２９】
ＢＰＰＦを含む本発明の組成物は、処理されるべき状態に適切な任意の経路によって投与され、適切な経路には、経口、直腸、経鼻、肺、局所的（経皮、眼、頬側、および舌下を含む）、膣および非経口（皮下、筋内、静脈内、皮内、くも膜下腔内および硬膜外を含む）が挙げられる。一般に、本発明の組成物は経口で投与されるが、ＢＰＰＦを含む組成物は、任意の他の上記の経路によって投与され得る。ヒトについての抗ウイルス治療のための、本発明の化合物の経口用量は、約０．０１〜２０ｍｇ／Ｋｇ／日、典型的には約０．３〜５ｍｇ／Ｋｇ／日の範囲である。７５ｍｇのｃＢＰＰＦを含む錠剤の、ヒトへの１日１回の経口投与の結果、絶食したヒトで約１７から３８％の、および摂食したヒトで約２７〜６０％の１日目でのＰＭＰＡの経口バイオアベイラビリティーとなった。
【００３０】
ＢＰＰＦは、純粋な化合物として投与されることは可能であるが、薬学的処方物として存在することが好ましい。本発明の処方物は、１以上の薬学的に受容可能な賦形剤またはキャリア（「受容可能な賦形剤」）および必要に応じて他の治療成分と共に、ＢＰＰＦを含む。このキャリアは、処方物の他の成分との適合および患者に有害でないという意味で「受容可能」でなければならない。
【００３１】
処方物は、局所的または全身性の投与のために適切な処方物を含み、局所的または全身性の投与には、経口、直腸、経皮、肺、経鼻、頬側、舌下、膣または非経口（皮下、筋内、静脈内、皮内、くも膜下腔内および硬膜外を含む）の投与が挙げられる。処方物は、単位用量形態であり、そして薬学の分野で周知の任意の方法によって調製される。このような方法は、活性成分と、１以上の付属的な成分からなるキャリアまたは賦形剤とを組み合わせる工程を含む。一般に、処方物は、活性成分と、液体キャリアまたは最終的に分割される固体キャリアまたは両方とを均一にかつ親密に組み合わせるようにする。次いで、必要ならば、生成物を乾燥または成形する。
【００３２】
経口投与のために適切な本発明の処方物は、個々の単位（例えば、袋、カプセル、または錠剤）として存在し得、それぞれは；粉末または顆粒として；水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として；または水中油乳濁液または油中水乳濁液として、所定の量の活性成分を含む。活性成分はまた、巨丸剤、舐剤またはペーストとしても存在し得る。
【００３３】
錠剤は、圧縮または成形によって、典型的には１以上の付属的な成分または賦形剤を用いて作成され得る。錠剤は、典型的には錠剤１つあたり約１０〜３００ｍｇの、通常約１０〜１００ｍｇ（例えば約７５ｍｇ）のＢＰＰＦを含む。通常、ＢＰＰＦは固体処方物中にｃＢＰＰＦとして存在する。圧縮された錠剤は、フリー−フロー形態（例えば、粉末または顆粒）中で、必要に応じて結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性または分散剤と混合して、ＢＰＰＦを適切な機械の中で圧縮することによって調製され得る。成型された錠剤は、液体希釈剤、典型的には不活性希釈剤で湿らせた粉末ＢＰＰＦの混合物を、適切な機械の中で成型することによって調製される。錠剤は、必要に応じてコートされ、そしてペイントされ、エンボス加工されるかまたは印が付けられ得、そしてその中で活性成分の緩やかなまたは制御された放出を提供するように処方され得る。典型的な錠剤成分は、１以上の結合剤、希釈剤、崩壊剤または潤滑剤を含み、これは、錠剤の製造または摂取後の錠剤の崩壊を促進する。錠剤は、必要に応じて１以上の賦形剤のＢＰＰＦとの湿式顆粒化、乾燥およびミル（ｍｉｌｌｉｎｇ）によって作製される。アルファ化デンプンのような結合剤は、必要に応じて約１〜１０％のレベルで存在する。架橋したセルロースのような崩壊剤は、必要に応じて約０．５〜５％のレベルで存在して、錠剤の溶解を促進する。単糖類または二糖類のような希釈剤は、必要に応じて約５０〜６０％のレベルで含まれて、ＢＰＰＦの物理的特性をマスクするかまたは錠剤の溶解を促進する。潤滑剤は、必要に応じて約０．２５〜５％のレベルで含まれて、製造の間の錠剤の駆出を促進する。実施態様には、ＢＰＰＦおよび受容可能な賦形剤を含む混合物を圧縮するプロセスによって生成される生成物が挙げられる。
【００３４】
眼または他の外部組織（例えば口および皮膚）の感染のために、処方物は好ましくは、例えば０．０１〜１０％ｗ／ｗ（０．１％と５％との間の範囲で０．１％ｗ／ｗ（例えば、０．６％ｗ／ｗ、０．７％ｗ／ｗなど）の増加量で、活性成分を含む）、好ましくは０．２〜３％ｗ／ｗ、そして最も好ましくは０．５〜２％ｗ／ｗの量で活性成分を含む、局所軟膏またはクリームとして適用される。軟膏中に処方した場合、活性成分は、パラフィン性のまたは水混和性の軟膏ベースのいずれかと共に使用され得る。あるいは、活性成分は、水中油クリームベースを用いたクリーム中で処方され得る。
【００３５】
所望の場合、クリームベースの水相は、例えば、少なくとも３０％ｗ／ｗの多価アルコール、すなわち、２以上の水酸基を有するアルコール（例えば、プロピレングリコール、ブタン１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）およびそれらの混合物）を含み得る。局所的な処方物は望ましくは、皮膚または他の病気に冒された領域を通る活性成分の吸収または透過を増強する化合物を含み得る。このような皮膚透過エンハンサーには、ジメチルスルホキシドおよび関連のアナログが挙げられる。
【００３６】
本発明の乳濁物の油性の相は、公知の様式で、公知の成分から構成され得る。相は単に乳化剤（そうでなければ排出促進剤として公知である）を含み得るが、望ましくは、少なくとも１つの乳化剤と、脂肪またはオイルとの、あるいは脂肪およびオイルの両方との混合物を含む。好ましくは、親水性の乳化剤が、安定剤として作用する親油性の乳化剤と共に含まれる。安定剤を用いてまたは安定剤なしで、乳化剤は乳化ワックスを作成し、そしてワックスは、オイルまたは脂肪と共に、乳化軟膏ベースを作成し、これは、クリーム処方物の油性の分散した相を形成する。
【００３７】
本発明の処方物中で使用するために適切な、排出促進剤および乳化安定剤には、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリル（ｃｅｔｏｓｔｅａｒｙｌ）アルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。
【００３８】
処方物のための適切なオイルまたは脂肪の選択は、所望の美容（ｃｏｓｍｅｔｉｃ）特性の達成に基づく。従って、クリームは好ましくは、管または他の容器からの漏出を回避するために適切なコンシステンシーを有する、グリースなし、染色なしおよび洗浄可能な生成物であるべきである。直鎖または分枝鎖の一塩基性または二塩基性のアルキルエステル（例えば、ジイソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテートまたはＣｒｏｄａｍｏｌＣＡＰとして公知の分枝鎖エステルのブレンド）が、使用され得、最後の３つが好ましいエステルである。これらは必要とされる特性に従って単独でまたは組み合わせて使用され得る。あるいは、白色ソフトパラフィンおよび／または液体パラフィンのような高融点脂質または他の鉱油が使用され得る。
【００３９】
眼への局所的投与に適切な処方物はまた、点眼を含み、ここで、活性成分は適切なキャリア、特に活性成分のための水性溶媒中に溶解されるかまたは懸濁される。活性成分はこのような処方物中に、０．０１〜２０％の濃度で、いくつかの実施態様では０．１〜１０％の濃度で、そしてその他では約１．０％ｗ／ｗの濃度で適切に存在する。
【００４０】
口中での局所的な投与のために適切な処方物には、味をつけた基剤（通常ショ糖およびアカシアまたはトラガント）中に活性成分を含むトローチ剤；ゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアカシアのような不活性基剤中に、活性成分を含む香剤；および適切な液体キャリア中に活性成分を含むうがい薬が挙げられる。
【００４１】
直腸投与のための処方物は、例えばカカオバターまたはサリチラートを含む適切なベースを有する坐薬として存在され得る。
【００４２】
キャリアが固体である、経鼻または吸入性の投与のために適切な処方物には、例えば１〜５００ミクロン（２０ミクロンと５００ミクロンとの間の範囲で５ミクロンの増分（例えば３０ミクロン、３５ミクロンなど）の粒子サイズを含む）の範囲の粒子サイズを有する粉末が挙げられる。キャリアが液体である、例えば経鼻スプレーまたは点鼻の投与のために適切な処方物には、活性成分の水性または油性の溶液が挙げられる。エアロゾル投与のために適切な処方物は、従来の方法に従って調製され得、他の治療薬を用いて送達され得る。吸引性の治療法は、計量された用量吸入器によって容易に投与され得る。
【００４３】
膣投与のために適切な処方物は、活性成分に加えて、適切な、当該技術分野で公知のようなキャリアを含む、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体またはスプレー処方物として存在され得る。
【００４４】
非経口投与のために適切な処方物は滅菌され、そして、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤および意図されたレシピエントの血液と等張性の処方物を与える溶質を含み得る、水性および非水性の注射溶液；ならびに、懸濁剤および濃厚剤を含み得る、水性および非水性の滅菌懸濁液が挙げられる。処方物は、単位用量または多用量容器（例えば、密封されたアンプルおよびエラストマーストッパーを有するバイアル）中に入れられ得、使用の直前に滅菌液体キャリア（例えば注射のための水）の添加のみを必要とする、凍結乾燥条件下で貯蔵され得る。即席の注射溶液および懸濁液は、前述の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。好ましい、単位用量処方物は、上述のように１日量または単位日副用量を含む処方物であるかまたは、ＢＰＰＦの処方物の適切な画分である。
【００４５】
特に上述の成分に加えて、本発明の処方物は、当該技術分野において、目的の処方物のタイプであるとみなされている慣習的な他の薬剤（例えば、香味料を含み得る、経口投与のために適切な薬剤）を含み得る。
【００４６】
本発明はさらに、上記で定義した少なくとも１つの活性成分を、そのための獣医学キャリアとともに含む、獣医学組成物を提供する。
【００４７】
獣医学キャリアは、ネコ、イヌ、ウマ、ウサギおよび他の動物へ組成物を投与する目的のために有用な物質であって、固体、液体またはガス状の物質であり得、そうでなければ、獣医学技術において不活性であるかまたは受容可能であり、そして活性成分と適合可能である。これらの獣医学組成物は、経口、非経口または任意の他の所望される経路によって投与され得る。
【００４８】
本発明の組成物は、マトリックスまたは吸収物質、および活性成分として１以上の本発明の化合物を含む、放出を制御された薬学的処方物を提供するために使用され得る。ここで、活性成分の放出は制御されかつ調整され得て、投薬の頻度をより少なくさせるかまたは化合物の薬物動態学的もしくは毒性の性質を改良する。個々の単位がＢＰＰＦを含む、経口投与のために適応される放出を制御された処方物は、従来の方法に従って調製され得る。
【００４９】
合成方法
ＢＰＰＦは、フマル酸とＰＭＰＡとの間に複合体または塩を形成することによって調製される。ＰＭＰＡは、公知の方法によるかまたは以下の手順によって調製される、公知の化合物である。
【００５０】
【化３】
ＢＰＰＦ合成
ＰＭＰＡを、（ＣＨ３）２ＣＨＯＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌを用いてエステル化し、以下の方法を使用してフマル酸と複合体化する。
【００５１】
【化４】
プロセスの要旨
ＰＭＰＡ調製方法について：（Ｓ）−グリシドール（Ｇｌｙｃｉｄｏｌ）を、接触水素化によって（Ｒ）−１，２−プロパンジオールに還元し、次いでこれをジエチルカーボネートと反応させて（Ｒ）−１，２−プロピレンカーボネートとする。このカーボネートを、アデニンおよび触媒量の塩基（例えば、水酸化ナトリウム）と反応させて、（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニンを得、これを、単離することなく、リチウムアルコキシドおよびジエチルｐ−トルエンスルホニル−オキシメチルホスホネート（ジエチルホスファイトとパラホルムアルデヒドとを反応させ、生成物をインサイチュでトシル化させることによって調製する）と反応させる。得られる（Ｒ）−９−［２−ジエチルホスホノメトキシプロピル］アデニンを、ブロモトリメチルシランで脱エステル化して、粗ＰＭＰＡを得、次いでこれを、ｐＨを調節した水からの沈殿によって精製する。生成物をさらに水からの再結晶によって精製してＰＭＰＡ一水和物とする。
【００５２】
このプロセスは、工程１において少量のＮａＯＨのような塩基を使用し、これは、塩基を使用しない同様の反応と比較して、反応速度を約１０倍増加させる。工程１はまた、インサイチュで水素を発生させるＨＣＯ２ＮＨ４のような試薬を使用する代わりに、水素ガスを使用する。このプロセスは、工程４ｂにおいてリチウムアルコキシドを使用し、これは、反応混合物への添加の際に穏やかな発熱性である。ＮａＨのような高反応性の塩基を使用することによって、発熱反応となり、反応系中に制御が困難な水素ガスを発生する。従って、ＮａＨの使用は、リチウムアルコキシドよりもより労力および注意を要する。リチウムアルコキシド塩基はまた、ＮａＨを使用して得られる生成物と比較して、副生成物特性が改善された生成物を生じる。例えば、少量の出発物質または過剰アルキル化（ｏｖｅｒａｌｋｙｌａｔｅｄ）生成物は通常リチウムアルコキシドの使用から得られる。
【００５３】
スキームおよびプロセス工程は（Ｒ）−ＰＭＰＡおよび（Ｒ）−ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの合成を示す。（Ｒ，Ｓ）−グリシドールのようなキラル的に不純な出発物質を使用してこの方法を実施して、中間体のキラル混合物（例えば、１，２−プロピレンカーボネートのキラル混合物、ＰＭＰＡまたはビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ）を得ることができる。
【００５４】
工程１．（Ｒ）−１，２−プロパンジオール： （Ｓ）−グリシドール（１．０ｋｇ、１３．５モル）を、（ｉ）不活性な（例えば窒素）雰囲気および（ｉｉ）２モル％水酸化ナトリウムを含む変性エチルアルコール中（ＥｔＯＨ７．８５ｋｇおよび１６．７％ ＮａＯＨ溶液 ５４ｇ）の活性炭素（５０％湿った）触媒（１００ｇ）上の５％パラジウムの攪拌懸濁物、を含む反応器に添加する。触媒およびエタノール溶液を含む不活性な反応器の含有物を、（Ｓ）−グリシドールを添加する前に、通常約０℃まで（通常約−５〜５℃）冷却する。次いで、２０ｐｓｉを超えない程度に、水素ガスを、２５℃を超えない温度で反応物を含む不活性な反応容器に導入する。この混合物を、水素の消費が終わるまで約４〜５時間攪拌する。反応の完了をＴＬＣによってモニターする（（Ｓ）−グリシドールは微量に残留するかまたは残留しない）。次いで、混合物を濾過し（例えば、珪藻土（約１５０ｇ））、固体を除去し、そして濾液を、揮発性の回収が停止するかまたは非常にゆっくりになるまで、５０℃を超えないで減圧で濃縮し、粗生成物を含む油状物を得る。粗生成物を、次の工程に直接使用する。表題化合物の収率は約１００％である。
【００５５】
工程２．（Ｒ）−１，２−プロピレンカーボネート： ジエチルカーボネート（１．７８ｋｇ、１５．１モル）および、変性エチルアルコール中のナトリウムエトキシド（エタノール中２１０ｇの２１％ｗ／ｗ ナトリウムエトキシド）を、（Ｒ）−１，２−プロパンジオール（上記工程１で使用した（Ｓ）−グリシドールの量に理論的に基づいて、１．０ｋｇ）に添加し、そして溶液を８０〜１５０℃まで加熱してエタノールを蒸留除去する。必要ならば、反応を完了させるために、反応混合物にさらにジエチルカーボネート（０．１６ｋｇ）を添加し、次いで蒸留してエタノールを除去する。反応の完了をＴＬＣによってモニターし、検出可能な（Ｒ）−１，２−プロパンジオールは微量であるかまたは無いことを示す。残渣を、１２０℃および１０〜１７ｍｍＨｇで分留し、表題化合物を無色の液体として得る。生成物の純度は、ＧＣ分析によって、典型的には９６％以上の純度である。
【００５６】
工程３．ジエチル ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート：
不活性雰囲気（例えば、窒素）を含む反応器中、トルエン（０．１１ｋｇ）中のジエチルホスファイト（０．８０ｋｇ）、パラホルムアルデヒド（０．２２ｋｇ）、およびトリエチルアミン（０．０６ｋｇ）の混合物を８７℃で約２時間加熱し、次いで、ＴＬＣでモニターしたときに検出可能なジエチルホスファイトを微量に示すかまたは示さないように、反応が完了するまで、約１時間還流する。反応の間、不活性雰囲気を維持する。トルエンは、反応を緩和するために使用し、そうでなければ制御不能となり得る。反応の完了を、任意に１ＨＮＭＲ（δ ８．４〜８．６ｐｐｍのジエチルホスファイトのピークはもはや検出されない）によって確認する。溶液を約１℃まで（典型的には約−２〜４℃）冷却し、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（１．０ｋｇ）を添加し、次いで約５℃でトリエチルアミン（０．８２ｋｇ）をゆっくり添加し（発熱性の添加）、この間温度を約１０℃を超えないように維持する（典型的には０〜１０℃）。得られる混合物を２２℃まで加温し、そして反応の完了がＴＬＣによって示される（ｐ−トルエンスルホニルクロリドが微量に検出されるかまたは検出されない）まで少なくとも約５時間攪拌し（典型的には約４．５〜６．０時間）、そして任意に１ＨＮＭＲ（δ ７．９ｐｐｍのｐ−トルエンスルホニルクロリドの二重線のピークはもはや検出されない）によって確認する。固体を濾過によって除去し、トルエン（０．３４ｋｇ）で洗浄する。合わせた洗浄液および濾液を、水で２回（洗浄１回あたり１．１５ｋｇ）、または必要に応じて水（１．１５ｋｇ）、５％炭酸ナトリウム水溶液（３．３８ｋｇ）、次いで水で２回（洗浄１回あたり１．１５ｋｇ）の順序のいずれかで洗浄する。各洗浄の後に、反応器の含有物を短時間攪拌し、固体を沈降させ、下方の水層を廃棄する。反応物が乳濁物になる場合、ブライン（０．０８ｋｇのＮａＣｌを含む０．２３ｋｇの水）を第１の有機／水混合物に添加し得、続いて、反応器含有物を攪拌し、固体を沈降させ、下方の水層を廃棄し、１．１５ｋｇの水を添加し、攪拌し、固体を沈降させ、再び下方の水層を廃棄する。５０℃を超えない有機相を減圧で蒸留し（１１０℃で１０％を超えないＬＯＤ、およびＫＦ滴定により０．３％を超えない含水量まで）、収率約６０〜７０％の表題化合物を、純度約８５〜９５％のオイルとして、トルエンを含まずに、得る。
【００５７】
工程４．（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニン： この化合物を、リチウムアルコキシドおよび９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンを含む組成物を使用して調製する。合成の間に、典型的には約０〜５０℃の、通常約２０〜４５℃の温度で、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンをリチウムアルコキシドと接触させる。これらの組成物および方法中の９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンは、典型的には有機溶液中に存在する。有機溶液は典型的には有機溶媒（例えば，ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、ＣＨ２Ｃｌ２、またはＣ１−６アルカノール、通常ジメチルホルムアミドまたはトルエン）を含む。これらの組成物は必要に応じてさらにｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートまたはアデニンを含み、これは、もし存在するならば、低レベルであり、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンと比較して、典型的には約１５％未満、通常約１０％未満である。これらの組成物および方法は、典型的にはリチウムｔ−ブトキシドまたはリチウムｉ−プロポキシドを使用する。これらはまた一般に、約０．９〜３．０モル等量の（工程４ａで使用するアデニン塩基に対して）、典型的には約１．２〜１．８モル等量のｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートを、リチウムアルコキシドおよび９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンとの反応物として使用する。実施態様は、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンとリチウムアルコキシドとを接触させるプロセスによって生成される生成物を含有する。これらの実施態様において、反応物は典型的には、ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートもまた含む有機溶液中に存在する。
【００５８】
１実施態様においては、上記工程４に示される（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニンは以下のように記述される。不活性雰囲気（例えば、窒素）を含む反応器中で、アデニン（１．０ｋｇ）、水酸化ナトリウム（１１．８ｇ）、（Ｒ）−１，２−プロピレンカーボネート（０．８３ｋｇ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６．５ｋｇ）の混合物を、必要に応じて面積標準化（ａｒｅａｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによってモニターして残りのアデニンが約０．５％を超えないことを示すように反応が完了するまで、約１８〜３０時間、約１３０℃まで（典型的には約１２５から１３８℃）加熱する。得られる混合物を約２５℃まで、典型的には約２０〜３０℃まで冷却し、そして段階Ｉの中間体、（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンを含み、これは、ここで沈殿し得る。冷却後、テトラヒドロフラン中２．０Ｍのリチウムｔ−ブトキシド（３．６２ｋｇ）を、穏やかな発熱性の添加で段階Ｉの中間体に添加して、（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンのリチウム塩を生成する。このスラリーを、ジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（１．１９ｋｇ）で処理し、混合物を約３２℃、典型的には約３０〜４５℃の温度まで加熱し、少なくとも約２時間（典型的には約２〜３時間）攪拌してこの間に混合物は均一になる。さらにジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（１．４３ｋｇ）を添加し、そして混合物を約３２℃（典型的には約３０〜４５℃）の温度で、少なくとも約２時間（典型的には約２〜３時間）攪拌する。さらにテトラヒドロフラン中２．０Ｍのリチウムｔ−ブトキシド（０．６６ｋｇ）およびジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（添加１回あたり０．４８ｋｇ）をもう２回添加し、各回に続いて、混合物を約３２℃の温度で、少なくとも約２時間攪拌する。反応の完了を、面積標準化（ａｒｅａｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによって必要に応じてモニターし、段階Ｉの中間体が約１０％を超えては残っていないことを示す。反応が完了していない場合、さらにテトラヒドロフラン中２．０Ｍのリチウムｔ−ブトキシド（０．３３ｋｇ）およびジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（０．２４ｋｇ）を添加し、反応混合物を約３２℃の温度で、少なくとも約２時間維持して、反応を完了させる。次いでこの混合物を約２５℃（典型的には約２０〜４０℃）まで冷却し、次いで氷酢酸（０．５ｋｇ）を添加する。得られる混合物を減圧で濃縮し、このときの最終的な最高の混合物温度は約８０℃、約２９Ｈｇ 減圧下（２９ ｉｎ Ｈｇ ｖａｃｕｕｍ）である。残渣を約５０℃（典型的には約４０〜６０℃）まで冷却し、水（１．８ｋｇ）を添加し、そして反応物をさらなる水（１．８ｋｇ）ですすぐ。この溶液を連続的にジクロロメタン（約３５ｋｇ）で１２〜４８時間抽出し、この間約５時間後に水相に氷酢酸（０．２ｋｇ）を１回添加し、そして続く抽出時間の約１０時間後にさらに１回添加する。抽出の完了を、面積標準化（ａｒｅａｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによって、水相中に残留する（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニンが約７％を超えないと示されることを、必要に応じて確認する。合わせたジクロロメタン抽出液を、まず大気圧で、次いで減圧で、約８０℃を超えない抽出温度で濃縮し、表題化合物を粘性のあるオレンジ色のオイルとして得る。表題化合物の収率は、重量標準化（ｗｅｉｇｈｔｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによって約４０〜４５％、かつ純度は面積標準化ＨＰＬＣによって典型的には６０〜６５％である。濃縮した後の表題化合物の実際の重量は、理論的な重量の約１．６倍である。観測される重量増加分は、不純物および／または連続的な抽出および濃縮の後に残留する溶媒に起因する。
【００５９】
工程５．粗（Ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニン：
粗（Ｒ）−ＰＭＰＡを、（Ｒ）−ＰＭＰＡジエチルエステルを遊離酸に転換することによって調製する。（Ｒ）−ＰＭＰＡ約９０〜９４％および（Ｓ）−ＰＭＰＡ約６〜１０％を含む混合物中の（Ｒ）−異性体の割合は、（Ｒ）−ＰＭＰＡ約９７〜９９％まで増
加し得る。（Ｒ）−異性体の濃縮は、約２．７〜３．５のｐＨで、（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを含む組成物からＰＭＰＡを沈殿させることによって達成され、ここで、溶液は約０．１ｇ／ｍＬ未満の、一般的には約０．０８ｇ／ｍＬ未満の、典型的には約０．０７ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、ここで、（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液は約１０〜２５℃、典型的には約１５〜２２℃の温度である。このような（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液中の約４０〜５５℃での（Ｒ）−ＰＭＰＡ異性体の濃縮は、ｐＨを約２．４〜３．５に調節し、必要に応じて続いて溶液温度を約１０〜２５℃として、次いで必要に応じてｐＨを約２．７〜３．５に調節することによって達成し得る。
【００６０】
１実施態様においては、上記工程５に示される粗（Ｒ）−ＰＭＰＡの合成は以下のように記述される。ブロモトリメチルシラン（１．５６ｋｇ）を、粗（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニン（上記工程４で記述したアデニンインプットに基づいて計算し、１．０ｋｇ）およびアセトニトリル（０．９ｋｇ）の混合物を含む反応器に、温度を約５０℃を超えないで維持するように冷却しながら添加する。ライン（ｌｉｎｅｓ）をアセトニトリル（０．３ｋｇ）ですすぎ、そして混合物を、反応器の含有物が跳ねるのを回避するように中程度の攪拌をしながら約６０〜７５℃で約２〜４時間還流する。反応の完了を、面積標準化ＨＰＬＣによってモニターしてモノエチルＰＭＰＡおよびジエチルＰＭＰＡの総残留量が約３％を超えないことを示す。反応が完了していない場合、さらにブロモトリメチルシラン（０．０４ｋｇ）を反応器に充填し、反応物を、中程度の攪拌をしながら少なくとも約１時間還流する。含有物を７０℃を越えないまでに加熱して、初めは大気圧で、次いで減圧（約２４〜２７Ｈｇ）で約７０℃を越えない蒸留によって揮発物質を除去する。次いで、反応器含有物を約２０℃まで（典型的には約１５〜２５℃まで）冷却し、そして含有物の温度を約５０℃を越えないように維持しながらこの残渣に水（１．９ｋｇ）を添加する（発熱性添加）。この混合物を２０℃まで冷却し、ジクロロメタン（１．７ｋｇ）を用いて約３０分間攪拌することによって洗浄する。次いで、分離した水相を、１μｍカートリッジフィルターを通して濾過し、水（３．２ｋｇ）で希釈し、約４０℃（典型的には約３５〜５０℃）まで加熱し、水酸化ナトリウム水溶液（５０％溶液として約０．１５ｋｇのＮａＯＨ）を用いてｐＨを約１．１（典型的には約０．９〜１．３）に調節し、この間温度を約４５℃に維持する。ＰＭＰＡの種結晶を、混合物に添加し、そして５０％水酸化ナトリウム水溶液（約０．１５ｋｇのＮａＯＨ）を用いてｐＨを約２．８（典型的には約２．６〜３．０）に調節し、この間温度を約４５℃（典型的には約３５〜５０℃）に維持する。溶液を、含有物が跳ねるのを回避するようにゆっくりから中程度の攪拌をしながら約３〜２０時間にわたって約２２℃（典型的には約１５〜２５℃）まで冷却し、この間、生成物は約３５℃で沈殿を始めるであろう。必要ならば、通常５０％水酸化ナトリウム水溶液または濃塩酸を使用して、スラリーのｐＨを約３．２（典型的には約３．１〜３．３）に調節する。このスラリーを約５℃まで、典型的には約０〜１０℃まで冷却し、この温度範囲で少なくとも約３時間ゆっくりと攪拌する。固体を濾過によって回収して、冷水（０．３５ｋｇ）およびアセトン（０．３ｋｇ）で連続的に洗浄して、粗ＰＭＰＡを、典型的には純度約９７％の湿った固体として得る。生成物を約５０℃まで加熱し、そして水の含量が１０％未満になるまで減圧で乾燥する。ジエチルＰＭＰＡの量を、先の合成工程中（収率１００％と仮定して）で使用したアデニンの量から計算し、他の化合物を含み得る粗ジエチルＰＭＰＡの正味の重量からは計算しない。
【００６１】
工程６．純（Ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニン： 粗ＰＭＰＡ（水含量について訂正した１．００ｋｇ）（工程５の生成物）の水中懸濁液を、全ての固体が溶解するまで中程度から高速で攪拌しながら約１００℃（典型的には約９５〜１１０℃）まで加熱し、得られる溶液を、熱いうち濾過することによって浄化し、さらなる熱水（１ｋｇ、約９５〜１１０℃）を使用してすすぐ。濾液を１００℃まで加熱し、次いでまず約３０℃（典型的には約２０〜２５℃）に約３〜５時間にわたってゆっくり攪拌しながら冷却し、次いで、約１０℃（典型的には約５〜１５℃）まで冷却を続ける。少なくとも約３時間、約１０℃で保持した後に、固体を濾過によって回収し、冷水（１．５ｋｇ、約０〜１０℃）次いでアセトン（１ｋｇ）を用いて連続的に洗浄する。湿った固まりを約５０℃（典型的には約４０〜６０℃）で減圧で乾燥して、約５．９％（典型的には約３．９〜７．９％）の水含有量とし、純粋なＰＭＰＡ一水和物となる。生成物の純度は、面積標準化および重量標準化ＨＰＬＣの両方によって、典型的には９８％以上である。化学純度に不満足な場合、生成物はこの工程の反復によって再度精製し得る。
【００６２】
必要に応じた再結晶： ＰＭＰＡ（０．７５ｇ）を、Ｈ２Ｏ（１１．３ｍＬ、重量比１５：１）から、懸濁物を９５〜１００℃まで加熱することによって再結晶する。室温まで冷却する際に、結晶化したＰＭＰＡを冷蔵庫で冷却する。３時間後、結晶を、ＴｙｖｅｋＴＭを備えた粗フリット（ｃｏａｒｓｅｆｒｉｔ）上で濾過し、濾過ケーキを氷冷Ｈ２Ｏおよびアセトンですすぎ、そして重量が一定になるまで風乾して、ふわふわした白色固体（調製物Ｂ）を得る。回収は約０．６４ｇ（８５．３％）。ＨＰＬＣは、典型的には９８．５〜９８．９％純粋なＰＭＰＡを示す。
【００６３】
調製物ＢＰＭＰＡを、必要に応じて、９５〜１００℃まで加熱したＨ２Ｏ（９．６ｍＬ、重量比１５：１）から再結晶する。室温まで冷却する際に、結晶化したＰＭＰＡを冷蔵庫で一晩冷却する。ＰＭＰＡを、ＴｙｖｅｋＴＭを備えた粗フリット（ｃｏａｒｓｅｆｒｉｔ）上で濾過し、濾過ケーキを氷冷Ｈ２Ｏおよびアセトンですすぎ、次いで重量が一定になるまで吸引乾燥してふわふわした白色固体（調製物Ｃ）を得る。ＰＭＰＡの回収は典型的には約０．５２ｇ（８１．３％）であり、純度は約９９．３〜９９．５％である。
【００６４】
調製物ＣＰＭＰＡ（０．５０ｇ）を、必要に応じて、沸騰Ｈ２Ｏ（約７．５ｍＬ、重量比１５：１）から再結晶する。室温まで冷却する際に、ＰＭＰＡを、ＴｙｖｅｋＴＭを備えた粗フリット（ｃｏａｒｓｅｆｒｉｔ）上で濾過する。濾過ケーキを氷冷Ｈ２Ｏおよびアセトンですすぎ、次いで乾燥するまで吸引して、ふわふわした白色固体を得る。濾液を、必要に応じてまた濃縮して、白色固体を得る。１以上の再結晶から調製されたＰＭＰＡを、必要に応じてＰＭＰＡ誘導体の生成に使用する。
【００６５】
工程７．ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレート： ＮＭＰのような適切な溶媒中のＰＭＰＡ、トリアルキルアミン（ＴＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン）のような塩基およびクロロメチル−２−プロピルカルボネートの反応は、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡを生じる。約５５〜８０℃の反応温度での、約１〜６時間の、反応物の中程度の攪拌は、典型的には、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの良好な収量を生じる。このビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ合成反応は、これらの時間および温度範囲での種々の条件下で良好な結果を与える。例えば、この反応は、短時間（約３０〜１２０分）の初期高温（約７０〜８０℃であるが、８０℃を超えない）反応に続く、より低い温度（約５５〜６５℃）反応の場合に、良好な結果を与える。例示的な反応は、（１）８０℃で３０分、続いて、６０〜６５℃で２時間の反応、（２）６０℃で約４時間、そして（３）７０〜７２℃で２時間である。
【００６６】
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ合成反応が完了した後に、必要に応じて濾過を使用して、反応混合物から固体を除去し、続いて、アルキルアセテート、通常Ｃ１−４アルキル部分のアセテート（例えば、ｎ−ブチルアセテート、ｎ−プロピルアセテート、イソプロピルアセテートまたは酢酸エチル）を用いて洗浄する。次に、最初の反応体積の約３０％まで、減圧で蒸留して、有機溶媒を除去する。フマル酸の添加は、固体ＢＰＰＦを形成させ、これは、通常ｃＢＰＰＦとして沈殿する。ＢＰＰＦまたはｃＢＰＰＦは、少量の、通常１％未満（約０．２〜０．４％）の水または有機溶媒（例えば、１−メチル−２−ピロリジノン、トリアルキルアミン（例えば、Ｃ１−３アルキル（例えば、トリエチルアミン、メチルジエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、またはプロピルジエチルアミン））、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、イソプロピルアセテート、Ｃ１−６アルカノール、ピリジン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトン、ＣＨ２Ｃｌ２、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、トルエン、キシレン、メチルエチルケトン、１，２−ジクロロエタンまたはＣＨＣｌ３）を含み得る。典型的には、フマル酸をＣ１−６アルカノール（例えば、ｎ−ヘキサノール、ｎ−ペンタノール、ｎ−ブタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、エタノールまたはメタノール）に溶解する。
【００６７】
ＢＰＰＦまたはｃＢＰＰＦを生成するために使用される方法および組成物は、反応剤として接触されるビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡおよびフマル酸を使用する。一般に、約３〜４３０ｍｇ／ｍＬ、通常約４〜１００ｍｇ／ｍＬのビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡを含む溶液を使用する。一般に、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ：フマル酸のモル比が約０．６：１〜１．４：１、通常約０．９：１．１または約１：１のものを使用する。一般に、使用する溶液は有機溶媒（例えば、アルキルアセテート、１−メチル−２−ピロリジノン、トリアルキルアミン、Ｃ１−６アルカノール、ピリジン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトン、ＣＨ２Ｃｌ２、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、トルエン、キシレン、メチルエチルケトン、１，２−ジクロロエタンまたはＣＨＣｌ３）を含む。
【００６８】
１実施態様においては、フマル酸を用いたビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの合成および結晶化は、ＢＰＰＦを形成し、上記の工程７に示され、以下に記述される。不活性雰囲気（例えば窒素）を有する反応器中で、１−メチル−２−ピロリジノン（４．１２ｋｇ）、ＰＭＰＡ一水和物（１．００ｋｇ）、およびトリエチルアミン（０．９９６ｋｇ）の混合物を約１５〜４５分間、典型的には約３０分間攪拌し、次いでクロロメチル−２−プロピルカーボネート（２．５０ｋｇ）を添加し、混合物を約５５〜６５℃まで、典型的には約６０℃まで加熱し、そして約３〜６時間、典型的には約４時間、反応が完了したと必要に応じてＨＰＬＣによって示される（モノ（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの存在が１５％を越えない）まで、含有物を跳ねることなく攪拌する。混合物をイソプロピルアセテート（１０．７２ｋｇ）で希釈し、できるだけ素早く、約１５〜３０℃、典型的には約２５℃まで冷却し、この間、反応器の含有物を約１５〜３０℃、典型的には約２５℃に保持し、混合物を約２０〜６０分、典型的には約３０分攪拌する。固体を濾過によって除去し、イソプロピルアセテート（４．４４ｋｇ）で洗浄する。合わせた有機相を、約１５〜３０℃、典型的には約２５℃で、約１〜１０分の中程度の攪拌を使用して水（洗浄一回あたり３．２８ｋｇ）で２回抽出して、乳濁物の形成を回避し、続いて、相を分離する。合わせた水相を、イソプロピルアセテート（洗浄１回あたり３．５６ｋｇ）で２回逆抽出（ｂａｃｋ−ｅｘｔｒａｃｔｅｄ）（約１５〜３０℃、典型的には約２５℃）する。全ての有機相を合わせ、約１〜１０分の中程度の攪拌を使用して水（２．２０ｋｇ）（約１５〜３０℃、典型的には約２５℃）で洗浄して、乳濁物の形成を回避する。合わせた有機相を、約２５〜４３℃であるが４５℃を越えないで最初の体積（約１０〜１２Ｌ／ｋｇＰＭＰＡ一水和物）の約３０％まで、減圧（約２６．５〜２８” Ｈｇ）で濃縮する。インライン（ｉｎ−ｌｉｎｅ）１μｍフィルターを使用する研磨濾過（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）の後、淡黄色のオイルが残留するまで、減圧（約２８” Ｈｇ）で、約２０〜３８℃であるが４０℃を越えないようにして、有機相を再び濃縮する。オイルを、固体が溶解するまで、約０．５〜２．０時間、激しく攪拌しながら、２−プロパノール（６．２４ｋｇ）中のフマル酸（０．３８ｋｇ）の温溶液（約４５〜５５℃、典型的には約５０℃）中に溶解する。次いで、温溶液を、必要に応じて、インライン１μｍフィルターを使用して濾過し、この間溶液を最小限に冷却する。約３４〜５０℃、典型的には約４０℃の濾液を、必要とされる最小限の攪拌を使用して攪拌して、均一な溶液を得る。得られる溶液を約３０〜３３℃、典型的には約３２℃まで、約３０分にわたって、最小限に攪拌しながら冷却し、必要に応じて、少量のビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレート（約１００ｍｇ）で種播し、約１２〜１８℃、典型的には約１５℃まで、約１〜２時間、典型的には約１時間にわたって冷却する。種結晶を添加する前に結晶の形成が開始した場合は、種結晶は必要とされないかもしれない。溶液を冷却したときに、約１２〜３３℃の範囲にわたって結晶が形成する。結晶の形成が開始したときに、攪拌を停止する。混合物を約１５℃で少なくとも約１２時間、典型的には約１２〜３０時間静置する。得られるスラリーを濾過し（ＴｙｖｅｋＴＭ）、濾過ケーキを、予め混合しておいたブチルエーテル（２．４４ｋｇ）中イソプロピルアセテート（０．７０ｋｇ）（１：４ｖ／ｖ）溶液で洗浄する。濾過ケーキを、４０℃を超えないで、約１〜１０日間、減圧で乾燥し、そして乾燥した生成物は必要に応じて粉砕（ｍｉｌｌ）され（０．０５０インチスクリーンを備えたＦｉｔｚｍｉｌｌＮ５Ａ）、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートを、純度約９７．０〜９９．５％の白色の、微粉末様結晶として得る。ＢＰＰＦを、所望であれば、必要に応じて、基本的に本明細書で記載したように再結晶して、生成物の純度を向上させる。
【００６９】
実施態様には、方法の工程または操作を行うときに一過性に起こる組成物を含む。例えば、リチウムアルコキシドを、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液と混合した場合、混合の開始時の組成物は極少量のリチウムアルコキシドを含む。この組成物は、溶液を混合するために十分に攪拌する前には一般に不均一混合物として存在する。このような組成物は通常極少量の反応生成物を含み、かつ主に反応物を含む。同様に、反応が進行するにつれて、反応物、生成物および副生成物の割合は互いに関連して変化する。これらの一過性の組成物は、プロセス工程を行う場合に発生する中間体であり、これらは本発明の実施態様として明確に含まれる。
【００７０】
本明細書中に見出される全ての引用は、特異性を有する参照として援用される。
【００７１】
以下の実施例はさらに本発明を例示するが限定しない。
【実施例】
【００７２】
実施例
実施例１
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートの物理特性。ｃＢＰＰＦのＸ−線粉末回折パターンを、Ｇｅｎｅｒａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｍｏｄｅｌ ＸＲＤ−５ Ｘ−線回折計およびＳｉｅｍｅｎｓ ＳｏｆｔｗａｒｅＳｙｓｔｅｍｓインターフェースを使用して、公表された手順（Ｕ．Ｓ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２３巻、１９９５、方法９４１、Ｕ．Ｓ．Ｐ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ）に従って、１分あたり２度（ｄｅｇｒｅｅ）の２シータ（２θ）のスキャン速度で決定した。グラファイトモノクロメータ（ＥＳＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）およびシンチレーション検出器を有する標準焦点銅Ｘ−線管（Ｖａｒｉｃａｎ ＣＡ−８）を使用して、４０ＫＶおよび−２０ｍＡで操作したＸ−線発生装置に曝することによって、ＢＰＰＦ結晶を、４と３５度との間の２θで走査した。計算に使用したＸ−線波長の重み付き平均値は、ＣｕＫα１．５４１８３８Åであった。ＢＰＰＦは、約４．９、１０．２、１０．５、１８．２、２０．０、２１．９、２４．０、２５．０、２５．５、２７．８、３０．１および３０．４の２θ（度）で表される、特徴的なＸ−線粉末回折ピークを示す。例示的なＸ−線粉末回折パターンを以下に示す。
【００７３】
ＢＰＰＦ結晶はまた、示差走査熱量測定によっても分析され、約１１８．３度（約１１６．１度で開始する）に特徴的なピークを有するサーモグラムを示した。サーモグラムを、窒素雰囲気下で１分あたり１０℃の走査速度を使用して得た。熱量測定の走査を、示差走査熱量計（モデル２２００コントローラを有する、モデルＤＳＣ２９１０、ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して得た。約５ｍｇのＢＰＰＦ結晶を使用してサーモグラムを得た。示差走査熱量測定については記述されている（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２３巻、１９９５、方法８９１、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤを参照のこと）。
【００７４】
ＢＰＰＦの融点（その温度で試験サンプルが全体的に液体になる）を、公表された手順（Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２２巻、１９９４、方法７４１、方法 Ｉａ、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ）に従って、ＦＰ９０中央処理装置が備えられているＭｅｔｔｌｅｒ ＦＰ８１測定セルを使用して決定した。毛細ガラス管の底部を、ＢＰＰＦ微粉末で充填した。硬い面上で毛細管をたたくことによって、ＢＰＰＦを４〜６ｍｍに詰めた。毛細管をサンプルスロット中に導入し、温度を、１分あたり１℃の速度で上昇させた。融点である１１４．２〜１１４．６℃は、サンプルの融解が完了した時点の温度に基づいた。
【００７５】
ＢＰＰＦを、公表された手順（Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２３巻、１９９５、方法９２１、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）および製造者のＣｏｕｌｏｍｅｔｅｒ取り扱い説明書に従って、Ｍｅｔｒｏｈｍ ６８４ ＫＦ Ｃｏｕｌｏｍｅｔｅｒを使用するＫａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ滴定によって、水含有量について試験した。このアッセイに使用したＢＰＰＦの量、すなわち約５０〜１００ｍｇを、５点（ｆｉｖｅｐｌａｃｅ）化学天秤（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ， Ｍｏｄｅｌ ＲＣ２１０Ｄ、または同等のもの）を使用して測定した。典型的なバッチは１．０％ｗ／ｗ未満の水を含んでいた。
【００７６】
ＢＰＰＦ結晶を、製造者の取り扱い説明書に従って、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒｍｏｄｅｌ １６５０ ＦＴ−ＩＲ 分光計を使用する赤外線分光光度法によって、分析した。ＫＢｒ（Ａｌｄｒｉｃｈ， ＩＲ 等級）を、使用前に減圧下６０℃で１晩乾燥した。約１０重量％（約５ｍｇ）のＢＰＰＦ結晶および約９０重量％（約５０ｍｇ）の乾燥したＫＢｒを含む半透明のペレットを、二つの粉末を共に粉砕して微粉末を得ることによって調製した。ＩＲ分光法については記述されている（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２２巻、１９９４、方法１９７、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｒ．Ｔ．ら、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第３版、Ａｌｌｙｎ ａｎｄ Ｂａｃｏｎ， Ｉｎｃ．， Ｂｏｓｔｏｎ， ４０５−４１２頁、１９７３）。分光光度計サンプルチャンバーを、サンプルを用いた走査の前に、バックグラウンド走査において、約６ｐ．ｓ．ｉ．の高純度窒素ガスで少なくとも５分間パージして、二酸化炭素の吸収の影響を≦３％まで減少させた。ＢＰＰＦ結晶は、約３２２４（Ｏ−Ｈ）、３１０７−３０５２（Ｎ−Ｈ、Ｃ＝Ｃ−Ｈ）、２９８６−２９３９（脂肪族Ｃ−Ｈ）、１７５９（アルキルエステルＣ＝Ｏ）、１６７８（芳香族Ｃ＝Ｎ）、１６２０（芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２６９（ホスホネートＰ＝Ｏ）および１１０２（Ｃ−Ｏ−Ｃ）ｃｍ−１（ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｃｅｎｔｉｍｅｔｅｒｓ）に現れた特徴的なバンドを有する、臭化カリウム中の赤外線吸
収スペクトルを示した。
【００７７】
異なった溶媒中でのＢＰＰＦの溶解度を試験した。ＢＰＰＦは、一般に、極性溶媒において最も溶解性であると見出し、これを、本発明の方法および実施態様で典型的に使用する。ジメチルホルムアミド中でのＢＰＰＦの溶解度は、４２８ｍｇ／ｍＬであり、イソプロピルアセテート：水（１：１ｖ／ｖ）、メタノール、エタノール、イソプロパノール、０．１Ｎ ＨＣｌおよびアセトン中でのＢＰＰＦの溶解度は、約１５〜１００ｍｇ／ｍＬであった。アセトニトリル、イソプロピルアセテートおよび脱イオン水（ｐＨ３．３）でのＢＰＰＦの溶解度は、約３〜１５ｍｇ／ｍＬであった。ＣＨ２Ｃｌ２、ジエチルーテルおよびヘキサン中ではＢＰＰＦは低い溶解度を有した。
【００７８】
ＢＰＰＦ結晶を、製造者の取り扱い説明書に従って、Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄｍｏｄｅｌ ８４２５Ａダイオードアレイ分光光度計を使用する紫外線分光光度法によって、分析した。このアッセイに使用したＢＰＰＦの量、すなわち約２５ｍｇを、５点（ｆｉｖｅｐｌａｃｅ）化学天秤（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ， Ｍｏｄｅｌ ＲＣ２１０Ｄ、または同等のもの）およびＨＰＬＣまたは分光光度法等級の溶液を使用して測定した。０．０１Ｍリン酸カリウム緩衝液中のｐＨ６．０での１０μｇ／ｍＬのＢＰＰＦのモル吸光度は１４９３０Ｍ−１ｃｍ−１であり、そして０．０１ＮＨＣｌ中のｐＨ２．０での１５μｇ／ｍＬのＢＰＰＦでは、１５０１０Ｍ−１ｃｍ−１であった。メタノール中のＢＰＰＦ（１０μｇ／ｍＬ）は、約２６０ｎｍにλｍａｘを有した。
【００７９】
ＢＰＰＦ結晶は、９２％の相対湿度および室温で保持した場合、３７日間まで吸湿性ではなかった。ＢＰＰＦ結晶は、電位差滴定によって測定したように、ｐＫａ３．８を有した。
【００８０】
実施例２
（Ｒ）−ＰＭＰＡのキラル濃縮。（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ・Ｈ２Ｏ（２．５ｇ、約９３％ Ｒ異性体）を、水（１００ｍＬ）を含むフラスコ中で懸濁し、必要ならばＨＣｌまたはＮａＯＨを使用して、ｐＨを７．１２に調節した。溶液を４０℃まで加温し、ｐＨを約５．０に調節した。次いで、ｐＨを３．１に調節し、溶液に（Ｒ）−ＰＭＰＡを種播した。溶液を室温にまで冷却し、約２時間置いた。固体を、粗ガラスフリット焼結ガラス漏斗上で収集し、氷冷水（１０ｍＬ）で洗浄し、次いでアセトン（１０ｍＬ）で洗浄した。得られるＰＭＰＡは、９８．３％の（Ｒ）異性体からなった。２．５ｇの（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ（約９３％（Ｒ）異性体）および２５ｍＬの水を使用して同様の手順を行った場合、（Ｒ）異性体のキラル濃縮は観察されなかった。０．７６６ｇの（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ（約９３％（Ｒ）異性体）および１０ｍＬの水を使用して同様の手順を行った場合、９９．６％（Ｒ）異性体までの（Ｒ）異性体のキラル濃縮が観察された。
【００８１】
実施例３
ｃＢＰＰＦおよびビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ・クエン酸塩の、固体状態化学安定性を、各化合物を異なった条件下で貯蔵した後の分析によって比較した。その結果、ＢＰＰＦ粉末は予想外に、高温および相対湿度において貯蔵に対してより安定であることを示した。
【００８２】
【化５】
＊ 日、 ＊＊ 相対湿度、 ＊＊＊ モノ（ＰＯＣ）ＰＭＰＡシトレートに加えて他の生成物が生成した
実施例４
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートの処方物。結晶性ＢＰＰＦを、いくつかの以下の賦形剤を用いて
処方した。
【００８３】
【化６】
処方物において、前ゼラチン化デンプンＮＦを、錠剤の圧縮のために適切な結合剤および崩壊剤として使用した。内部架橋したナトリウムカルボキシメチルセルロースである、クロスカルメロース（Ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ）ナトリウムＮＦを、錠剤の分解および溶解を促進するために使用した。ラクトース一水和物ＮＦを、製造を補助し、かつ錠剤の溶解を促進するための希釈剤として使用した。ステアリン酸マグネシウムＮＦを、錠剤圧縮プロセスからの錠剤の排出を促進するための潤滑剤として使用した。
【００８４】
ＢＰＰＦを含む錠剤を、ブレンダー内で、前ゼラチン化デンプン、クロスカルメロースナトリウムおよびラクトース一水和物をブレンドすることによって生成する。適切に湿った顆粒化物が形成されるまで水を添加する。湿った顆粒化物を粉砕し、流動床乾燥機中で乾燥して、乾燥の際の水分含量の損失が３％を超えないようにし、そして乾燥した顆粒をミルに通す。粉砕された顆粒を、顆粒外部賦形剤、クロスカルメロースナトリウムおよびラクトース一水和物と合わせ、そしてミキサー中でブレンドして粉末状のブレンドを得る。次いで、粉末状のブレンドをステアリン酸マグネシウムとブレンドし、次いで錠剤へと圧縮する。錠剤を、ポリエステル繊維充填材料と共に、そして必要に応じてシリカゲル乾燥剤と共に、高密度ポリエチレンまたはガラス瓶に充填する。
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
本発明は、９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン（「ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ」）、および抗ウイルス剤として使用するための、（Ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニン（「ＰＭＰＡ」）のヒトまたは動物への経口送達のために適切な組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホスホノメトキシヌクレオチドアナログは、公知であり、そして経口送達のための多様な技術が公知である。例えば、米国特許出願番号０８／６８６，８３８、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０、特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６、特許文献１７、特許文献１８、特許文献１９、特許文献２０、特許文献２１および特許文献２２、非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５、および非特許文献６を参照のこと。ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡは、特許文献２３中に開示される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第５，２０８，２２１号明細書
【特許文献２】米国特許第５，１２４，０５１号明細書
【特許文献３】国際公開第９１／１９７２１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第９４／０３４６７号パンフレット
【特許文献５】国際公開第９４／０３４６６号パンフレット
【特許文献６】国際公開第９２／１３８６９号パンフレット
【特許文献７】独国特許出願公開第４１ ３８ ５８４ Ａ１号明細書
【特許文献８】国際公開第９４／１０５３９号パンフレット
【特許文献９】国際公開第９４／１０４６７号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第９６／１８６０５号パンフレット
【特許文献１１】国際公開第９５／０７９２０号パンフレット
【特許文献１２】国際公開第９５／７９／０７９１９号パンフレット
【特許文献１３】国際公開第９２／０９６１１号パンフレット
【特許文献１４】国際公開第９２／０１６９８号パンフレット
【特許文献１５】国際公開第９１／１９７２１号パンフレット
【特許文献１６】国際公開第８８／０５４３８号パンフレット
【特許文献１７】欧州特許第０ ６３２ ０４８号明細書
【特許文献１８】欧州特許第０ ４８１ ２１４号明細書
【特許文献１９】欧州特許第０ ３６９ ４０９号明細書
【特許文献２０】欧州特許第０ ２６９ ９４７号明細書
【特許文献２１】米国特許第３，５２４，８４６号明細書
【特許文献２２】米国特許第５，３８６，０３０号明細書
【特許文献２３】国際公開第９８／０４５６９号パンフレット
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｅｎｇｅｌ Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．７７：３４９−３６７ １９７７
【非特許文献２】Ｆａｒｑｕｈａｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７２：３２４−３２５ １９８３
【非特許文献３】Ｓｔａｒｒｅｔｔら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．１９：２６７−２７３ １９９２
【非特許文献４】Ｓａｆａｄｉら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １０（９）：１３５０−１３５５ １９９３
【非特許文献５】Ｓａｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３２（６）：２２４１−２２４８ １９８４
【非特許文献６】Ｄａｖｉｄｓｅｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７（２６）：４４２３−４４２９ １９９４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
発明の要旨
本発明は、９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィ
ノイル］メトキシ］プロピル］−アデニン・フマル酸（１：１）（「ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレート」または「ＢＰＰＦ」）を含む、式（１）の組成物を提供し、
【０００６】
【化１】
ここで、Ｂは、アデニン−９−イルであり、Ｒは独立して−Ｈまたは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２で
あるが、少なくとも１つのＲは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である。
【０００７】
本発明の他の実施態様は、ウイルスに感染したかまたはウイルス感染の危険のある患者への、治療的に有効量の式（１）の組成物の経口投与を含む。
【０００８】
別の実施態様においては、式（１）の化合物の調製方法は、フマル酸をビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡと接触する工程を包含する。
【０００９】
他の実施態様は、リチウムアルコキシドと９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液とを接触させる工程を包含する。
【００１０】
特定の実施態様は、約２．７〜３．５のｐＨで（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液を含む組成物を含有し、ここで、溶液は、約０．１ ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、そしてここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡは（Ｒ）立体配置である。
【００１１】
本願発明は、さらに以下を提供する。
（項目１）以下の式（１）の組成物であって、
【００１２】
【化２】
ここで、Ｂは、アデニン−９−イルであり、Ｒは独立して−Ｈまたは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２であるが、少なくとも１つのＲは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である、組成物。
（項目２）両方のＲが−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である、項目１に記載の組成物。
（項目３）前記組成物が結晶性固体である、項目１に記載の組成物。
（項目４）前記化合物が、炭素原子キラル中心（＊）で富化されるかまたは分割される、項目１に記載の組成物。
（項目５）約２５．０の２θ（度）で表される、Ｃｕ−Ｋα照射を使用するＸ−線粉末回折スペクトルピークを有する、項目１に記載の組成物。
（項目６）項目１に記載の組成物および受容可能な賦形剤を含む、組成物。
（項目７）リチウムアルコキシドおよび９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液を含む、組成物。
（項目８）約２．７〜３．５のｐＨで（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液を含む組成物であって、ここで、該溶液は、約０．１ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、そしてここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡは（Ｒ）立体配置である、組成物。
（項目９）ウイルスに感染したかまたはウイルス感染の危険のある患者へ、治療的に有効量の項目１に記載の組成物を、経口投与する工程を含む方法。
（項目１０）ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡをフマル酸と接触する工程を含む、項目１に記載の組成物を生成するための方法。
（項目１１）フマル酸が２−プロパノール中に溶解される、項目１０に記載の方法。
（項目１２）項目７に記載の組成物を生成するための方法であって、リチウムアルコキシドを９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液と混合する工程を含む、方法。
（項目１３）前記リチウムアルコキシドが、メトキシド、エトキシド、ｎ−プロポキシド、ｉ−プロポキシド、ｎ−ブトキシド、ｉ−ブトキシド、ｔ−ブトキシド、ネオペントキシド、ｎ−ペントキシド、ｉ−ペントキシドまたはｎ−ヘキソキシド、ｎ−ヘプトキシド、２−ヘプトキシド、ｎ−オクトキシド、２−オクトキシド、典型的にはｔ−ブトキシドまたはｉ−プロポキシドからなる群より選択されるアルコキシドである、項目１２に記載の方法。
（項目１４）前記リチウムアルコキシドが、リチウムｔ−ブトキシドまたはリチウムｉ−プロポキシドである、項目１３に記載の方法。
（項目１５）約０．０８ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを含む溶液のｐＨを約２．７〜３．５に調節する工程を含む方法であって、ここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡが（Ｒ）立体配置である、方法。
（項目１６）９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）、前ゼラチン化デンプン、クロスカルメロースナトリウム、ラクトース一水和物およびステアリン酸マグネシウムを含む錠剤を含有する、組成物。
（項目１７）前記９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）が結晶性である、項目１６に記載の組成物。
（項目１８）前記錠剤が、７５ｍｇの９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）、１１ｍｇの前ゼラチン化デンプン、８．８ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、１２３．６ｍｇのラクトース一水和物および２．２ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含む、項目１６に記載の組成物。
（項目１９）液体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む混合物から、湿った顆粒を調製するプロセスによって生成される、９−［２−（Ｒ）−［［ビス［［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］メトキシ］ホスフィノイル］メトキシ］プロピル］アデニン・フマル酸（１：１）を含む生成物。
（項目２０）前記液体が水であり、そして前記プロセスが必要に応じてさらに湿った顆粒を乾燥させる工程を包含する、項目１９に記載の生成物。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、ＢＰＰＦ結晶Ｘ線粉末回折パターンである。
【図２】図２は、ＢＰＰＦ結晶の示差走査熱量測定によって得られたサーモグラムを示す。
【図３】図３は、ＢＰＰＦ結晶のフーリエ変換赤外線吸収スペクトルを示す。
【図４】図４は、光学顕微鏡による１００倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。
【図５】図５は、光学顕微鏡による１００倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。
【図６】図６は、光学顕微鏡による２００倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。
【図７】図７は、光学顕微鏡による４０倍の倍率でのＢＰＰＦ結晶の実施態様を示す写真の絵である。図４〜７は、１３２％に拡大して作製された、写真のコピーである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
発明の詳細な説明
本明細書中で使用される「アルキル」は、反対の記述が無ければ、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２の第一級、第二級、第三級または環状構造を含む炭化水素である。その例は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロプロピルメチル、シクロペンチル、シクロブチルメチル、１−シクロプロピル−１−エチル、２−シクロプロピル−１−エチル、シクロヘキシル、シクロペンチルメチル、１−シクロブチル−１−エチル、２−シクロブチル−１−エチル、１−シクロプロピル−１−プロピル、２−シクロプロピル−１−プロピル、３−シクロプロピル−１−プロピル、２−シクロプロピル−２−プロピル、および１−シクロプロピル−２−プロピル、である。
【００１５】
本明細書中で使用される「アルコキシド」は、反対の記述が無ければ、酸素原子に結合されるアルキルについて本明細書中で定義される、１、２、３、４、５または６個の炭素原子を含む炭化水素である。その例は、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣ（ＣＨ３）３、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）３ＣＨ３、−ＯＣ（ＣＨ３）２（ＣＨ２）２ＣＨ３、−ＯＣＨ（Ｃ２Ｈ５）（ＣＨ２）２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）３ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）３、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）２ＣＨ３、および−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、である。
【００１６】
他に明白にまたは文脈によって特定されなければ、量のパーセンテージを重量％（ｗ／ｗ）として表す。従って、１％未満の水を含むＢＰＰＦ調製物は、１％ｗ／ｗ未満の水を含む調製物である。
【００１７】
本明細書中で使用され、そして他に記述されなければ、変数または成分（例えばアルコキシド）を定義するための置換基（例えば、メトキシド、エトキシド、ｎ−プロポキシド、ｉ−プロポキシドまたはｔ−ブトキシド）のリストを提供する場合にはいつでも、変数または成分は、列挙された置換基の任意のおよび全ての可能な組み合わせ含むことを明確に意味する（例えば、アルコキシドはメトキシド、エトキシドまたはｎ−プロポキシドを意味し、そしてアルコキシドはｉ−プロポキシドまたはｔ−ブトキシドを意味する）。同様に、１−メチル−２−ピロリジノン、トリアルキルアミン（Ｃ１−３アルキル）、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、Ｃ１−６アルカノール、ピリジン、アセトン、トルエン、ＣＨ２Ｃｌ２、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、またはキシレンを含むと定義された有機溶媒のリストは、アセトン、キシレンまたは両方をリストから除外し得る。従って、変数または成分を定義している置換基の与えられたリストは、リスト中の置換基の任意の組み合わせを含むかまたは排除することを明確に意図する。ただし、与えられた定義が、変数または成分が存在し得ないと記述しなければ、全ての可能な置換基が除外され、かつ定義された変数が排除されるのではない。
【００１８】
本発明の化合物は、この部分での（Ｒ）立体配置を有する最適な抗ウイルス活性に関連して先に見出されているものに従って、必要に応じて炭素原子のキラル中心（＊）で富化される（ｅｎｒｉｃｈｅｄ）かまたは分割される。（＊）によって示される、炭素原子のキラル中心は、必要に応じて（Ｒ）または（Ｓ）立体配置であり、そして富化され得るかまたは実質的に等しい割合で見出され得る。典型的には、ＰＭＰＡおよびビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ中でキラル中心（＊）に結合されるメチル基は、（Ｒ）立体配置である。本発明の複合体は、示される様式に関わらず、構成成分の互変異性型を含む。
【００１９】
式（１）の化合物は、少量の、典型的には３％未満の、通常１％未満のモノ（ＰＯＭ）ＰＭＰＡ（すなわち、式（１）の化合物であって、ここでＲの１つは−Ｈであり、そして他のＲは−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）２である）を有するＢＰＰＦを含み得る。
【００２０】
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートの物理的および化学的特性
結晶性ＢＰＰＦは、遊離の塩基および他の塩と比較して、予想外に優れた物理−化学の特性の組み合わせを有する。結晶性ＢＰＰＦは、高融点を有し、非吸湿性であり、優れた固体状態安定性を有し、そして良好な水溶性および安定性を有する。これらの特性は、製造あるいはヒトおよび動物における優れた経口バイオアベイラビリティー特性の寄与のために有用である。これらの特性は、生体流体（例えば、血漿または細胞原形質）へのＢＰＰＦまたはＰＭＰＡの効率的な送達を可能とする。例えば、ヒトにおいて一日一回投与される、７５ｍｇの結晶性ＢＰＰＦの経口バイオアベイラビリティーは、約３０〜４０％である。
【００２１】
ＢＰＰＦは、結晶性形態であっても良いしそうでなくても良い。本発明者らは、Ｘ線粉末回折および融点を含むいくつかの方法によって特徴づけて、ＢＰＰＦ（「ｃＢＰＰＦ」）の結晶性形
態を得た。研究者は通常、結晶性組成物の特徴づけまたは同定のために、Ｘ線粉末回折を使用する（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ， 第２３巻， １９９５， 方法９４１， １８４３−１８４５頁， Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ； Ｓｔｏｕｔら， Ｘ−Ｒａｙ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ； Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ，ＭａｃＭｉｌｌａｎ Ｃｏ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｎ．Ｙ． １９６８を参照のこと）。結晶性
化合物から得られる回折パターンは、しばしば、与えられた結晶形態の診断用であるが、結晶の連続的なバッチから得られる回折パターンの複製として、弱いまたは非常に弱い回折ピークが必ず表れ得るわけではない。これは、他の結晶性組成物が、感知可能な量のサンプル中に存在する場合に、特定のものである。バンドの相対的な強度、特に、低角のＸ線入射の値（低２θ）は、好ましい配向効果、結晶成長の方向、粒子サイズおよび測定の他の条件に従って変化し得る。従って、回折ピークの相対強度は、結論的に、問題の結晶形態の診断用とならない。代わりに、ＢＰＰＦ結晶の同一性を決定するために、正確な振幅よりもむしろ、相対的な間隔および一般的なパターンを必要に応じて含む、ピークの位置を見るべきである。さらに、高純度の参照サンプルで観察された全てのバンドを同定に使用する必要は無い；単一のバンドでさえ与えられた結晶形態を診断し得る（例えば、ｃＢＰＰＦについて２５．０）。
【００２２】
結晶性ＢＰＰＦ同定のために必要に応じて使用し得るさらなる診断技術には、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）および赤外線吸収分光法（ＩＲ）が挙げられる。ＤＳＣは、結晶構造が変化した場合に結晶が熱を吸収する、熱量吸収転移温度を測定する。ＤＳＣは、異なった吸収温度に基づいて、異なった結晶組成物間で区別するための代替手段を提供する。ＩＲは、分子中で光に応じて振動する基に関連した特定の化学結合の存在によって引き起こされる、赤外光の吸収を測定する。ＤＳＣおよび／またはＩＲは従って、ＢＰＰＦ結晶を説明するために使用し得る
、物理的情報を提供し得る。
【００２３】
ｃＢＰＰＦ Ｘ線粉末回折パターンは、通常約２５．０に、典型的には約２５．０および約２０．０に、またはより典型的には約２５．０、約２０．０および約３０．１に、および通常少なくとも約２５．０、約２０．０、約３０．１および約２１．９に、ピークを示す。ｃＢＰＰＦスペクトルは通常約４．９、約１０．２、約１０．５、約１８．２、約２０．０、約２１．９、約２４．０、約２５．０、約２５．５、約２７．８、約３０．１および約３０．４にピークを有する。ｃＢＰＰＦＸ線粉末回折パターンは通常、約２０．０および／または２１．９および／または２５．０および／または３０．１の任意の１つ（または組み合わせ）にピークを示す。
【００２４】
ｃＢＰＰＦ結晶は、約１１６℃の開始点を有する、ＤＳＣ吸収ピークを約１１８℃に示し、ＩＲスペクトルは、約３２２４、３１０７−３０５２、２９８６−２９３９、１７５９、１６７８、１６２０、１２６９および１１０２に、センチメートルの逆数で表された特徴的なバンドを示す。異なったｃＢＰＰＦ結晶調製物は、約０．１５−０．３０ｇ／ｍＬ、通常約０．２−０．２５ ｇ／ｍＬのバルク密度を有する。これらは、典型的には本質的に溶媒が無く、結晶化槽から適切に回収された場合１％未満の溶媒を含み、そして一般に検出可能な格子が同調された溶媒分子を含まない。
【００２５】
ＢＰＰＦ結晶は、典型的には、無水物および非吸湿性であり、検出可能な水をほとんどまたは全く含まない。一般に、ＢＰＰＦ結晶は通常約１％未満の、典型的には約０．５％未満の水を含む。さらに、ＢＰＰＦ結晶は通常、約１０％未満の、典型的には約５％未満の、しばしば約１％未満の、および通常約０．５％未満のアモルファスＢＰＰＦを含む。
【００２６】
ＢＰＰＦ結晶は、乾燥した場合、通常不透明な白色またはオフホワイトの結晶性粉末として現れる。与えられた調製物から得られる結晶は、通常サイズが多分散であり、そして針、プレート、不規則な錠剤および、針、プレートまたは錠剤の凝集体を含む形状の範囲を有する。ＢＰＰＦ結晶は典型的には、与えられた調製物において、ほとんどの個々の結晶の最も大きな寸法に沿って、約１μｍ〜約５００μｍ、典型的には約５〜１７０μｍ、通常約１０〜１１０μｍの、最も長い寸法に沿ったサイズの範囲である。これらの結晶は破砕されたかまたは角のふちを有し得る。図４〜７の写真は、錠剤、ロッド、針、プレートおよび凝集体を含む、多様な形状を有するｃＢＰＰＦを示す。
【００２７】
有用性
ＰＭＰＡおよびビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡは、特にレトロウイルス、ＨＩＶ、ＳＩＶおよびＧＡＬＶ、およびヘパドナウイルス（例えば、ＨＢＶ）を含む、ヒトまたは動物における１つ以上のウイルス感染の、処置または予防法において有用であることが公知である。ＰＭＰＡを用いて処理されるべき他の感染は、ＭＳＶ、ＲＳＶ、ＦＩＶ、ＭｕＬＶ、および齧歯類および他の動物の他のレトロウイルス感染を含む。先行技術は、ＰＭＰＡの抗ウイルス特異性を記述し、そして本発明の化合物はこの特異性を有する。
【００２８】
感染部位を最良に攻撃するための投薬および適切な投与経路は、ＰＭＰＡに関する当該技術分野において周知である。ＢＰＰＦの適切な用量の決定は、臨床医にとって簡単な事項であり、本発明の複合体の分子量および、経口で投与する場合には、動物においてまたはヒトでの臨床的試行における推論としてのこれらのバイオアベイラビリティー、ならびに当業者に周知の他の因子を考慮する。
【００２９】
ＢＰＰＦを含む本発明の組成物は、処理されるべき状態に適切な任意の経路によって投与され、適切な経路には、経口、直腸、経鼻、肺、局所的（経皮、眼、頬側、および舌下を含む）、膣および非経口（皮下、筋内、静脈内、皮内、くも膜下腔内および硬膜外を含む）が挙げられる。一般に、本発明の組成物は経口で投与されるが、ＢＰＰＦを含む組成物は、任意の他の上記の経路によって投与され得る。ヒトについての抗ウイルス治療のための、本発明の化合物の経口用量は、約０．０１〜２０ｍｇ／Ｋｇ／日、典型的には約０．３〜５ｍｇ／Ｋｇ／日の範囲である。７５ｍｇのｃＢＰＰＦを含む錠剤の、ヒトへの１日１回の経口投与の結果、絶食したヒトで約１７から３８％の、および摂食したヒトで約２７〜６０％の１日目でのＰＭＰＡの経口バイオアベイラビリティーとなった。
【００３０】
ＢＰＰＦは、純粋な化合物として投与されることは可能であるが、薬学的処方物として存在することが好ましい。本発明の処方物は、１以上の薬学的に受容可能な賦形剤またはキャリア（「受容可能な賦形剤」）および必要に応じて他の治療成分と共に、ＢＰＰＦを含む。このキャリアは、処方物の他の成分との適合および患者に有害でないという意味で「受容可能」でなければならない。
【００３１】
処方物は、局所的または全身性の投与のために適切な処方物を含み、局所的または全身性の投与には、経口、直腸、経皮、肺、経鼻、頬側、舌下、膣または非経口（皮下、筋内、静脈内、皮内、くも膜下腔内および硬膜外を含む）の投与が挙げられる。処方物は、単位用量形態であり、そして薬学の分野で周知の任意の方法によって調製される。このような方法は、活性成分と、１以上の付属的な成分からなるキャリアまたは賦形剤とを組み合わせる工程を含む。一般に、処方物は、活性成分と、液体キャリアまたは最終的に分割される固体キャリアまたは両方とを均一にかつ親密に組み合わせるようにする。次いで、必要ならば、生成物を乾燥または成形する。
【００３２】
経口投与のために適切な本発明の処方物は、個々の単位（例えば、袋、カプセル、または錠剤）として存在し得、それぞれは；粉末または顆粒として；水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として；または水中油乳濁液または油中水乳濁液として、所定の量の活性成分を含む。活性成分はまた、巨丸剤、舐剤またはペーストとしても存在し得る。
【００３３】
錠剤は、圧縮または成形によって、典型的には１以上の付属的な成分または賦形剤を用いて作成され得る。錠剤は、典型的には錠剤１つあたり約１０〜３００ｍｇの、通常約１０〜１００ｍｇ（例えば約７５ｍｇ）のＢＰＰＦを含む。通常、ＢＰＰＦは固体処方物中にｃＢＰＰＦとして存在する。圧縮された錠剤は、フリー−フロー形態（例えば、粉末または顆粒）中で、必要に応じて結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性または分散剤と混合して、ＢＰＰＦを適切な機械の中で圧縮することによって調製され得る。成型された錠剤は、液体希釈剤、典型的には不活性希釈剤で湿らせた粉末ＢＰＰＦの混合物を、適切な機械の中で成型することによって調製される。錠剤は、必要に応じてコートされ、そしてペイントされ、エンボス加工されるかまたは印が付けられ得、そしてその中で活性成分の緩やかなまたは制御された放出を提供するように処方され得る。典型的な錠剤成分は、１以上の結合剤、希釈剤、崩壊剤または潤滑剤を含み、これは、錠剤の製造または摂取後の錠剤の崩壊を促進する。錠剤は、必要に応じて１以上の賦形剤のＢＰＰＦとの湿式顆粒化、乾燥およびミル（ｍｉｌｌｉｎｇ）によって作製される。アルファ化デンプンのような結合剤は、必要に応じて約１〜１０％のレベルで存在する。架橋したセルロースのような崩壊剤は、必要に応じて約０．５〜５％のレベルで存在して、錠剤の溶解を促進する。単糖類または二糖類のような希釈剤は、必要に応じて約５０〜６０％のレベルで含まれて、ＢＰＰＦの物理的特性をマスクするかまたは錠剤の溶解を促進する。潤滑剤は、必要に応じて約０．２５〜５％のレベルで含まれて、製造の間の錠剤の駆出を促進する。実施態様には、ＢＰＰＦおよび受容可能な賦形剤を含む混合物を圧縮するプロセスによって生成される生成物が挙げられる。
【００３４】
眼または他の外部組織（例えば口および皮膚）の感染のために、処方物は好ましくは、例えば０．０１〜１０％ｗ／ｗ（０．１％と５％との間の範囲で０．１％ｗ／ｗ（例えば、０．６％ｗ／ｗ、０．７％ｗ／ｗなど）の増加量で、活性成分を含む）、好ましくは０．２〜３％ｗ／ｗ、そして最も好ましくは０．５〜２％ｗ／ｗの量で活性成分を含む、局所軟膏またはクリームとして適用される。軟膏中に処方した場合、活性成分は、パラフィン性のまたは水混和性の軟膏ベースのいずれかと共に使用され得る。あるいは、活性成分は、水中油クリームベースを用いたクリーム中で処方され得る。
【００３５】
所望の場合、クリームベースの水相は、例えば、少なくとも３０％ｗ／ｗの多価アルコール、すなわち、２以上の水酸基を有するアルコール（例えば、プロピレングリコール、ブタン１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）およびそれらの混合物）を含み得る。局所的な処方物は望ましくは、皮膚または他の病気に冒された領域を通る活性成分の吸収または透過を増強する化合物を含み得る。このような皮膚透過エンハンサーには、ジメチルスルホキシドおよび関連のアナログが挙げられる。
【００３６】
本発明の乳濁物の油性の相は、公知の様式で、公知の成分から構成され得る。相は単に乳化剤（そうでなければ排出促進剤として公知である）を含み得るが、望ましくは、少なくとも１つの乳化剤と、脂肪またはオイルとの、あるいは脂肪およびオイルの両方との混合物を含む。好ましくは、親水性の乳化剤が、安定剤として作用する親油性の乳化剤と共に含まれる。安定剤を用いてまたは安定剤なしで、乳化剤は乳化ワックスを作成し、そしてワックスは、オイルまたは脂肪と共に、乳化軟膏ベースを作成し、これは、クリーム処方物の油性の分散した相を形成する。
【００３７】
本発明の処方物中で使用するために適切な、排出促進剤および乳化安定剤には、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリル（ｃｅｔｏｓｔｅａｒｙｌ）アルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。
【００３８】
処方物のための適切なオイルまたは脂肪の選択は、所望の美容（ｃｏｓｍｅｔｉｃ）特性の達成に基づく。従って、クリームは好ましくは、管または他の容器からの漏出を回避するために適切なコンシステンシーを有する、グリースなし、染色なしおよび洗浄可能な生成物であるべきである。直鎖または分枝鎖の一塩基性または二塩基性のアルキルエステル（例えば、ジイソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテートまたはＣｒｏｄａｍｏｌＣＡＰとして公知の分枝鎖エステルのブレンド）が、使用され得、最後の３つが好ましいエステルである。これらは必要とされる特性に従って単独でまたは組み合わせて使用され得る。あるいは、白色ソフトパラフィンおよび／または液体パラフィンのような高融点脂質または他の鉱油が使用され得る。
【００３９】
眼への局所的投与に適切な処方物はまた、点眼を含み、ここで、活性成分は適切なキャリア、特に活性成分のための水性溶媒中に溶解されるかまたは懸濁される。活性成分はこのような処方物中に、０．０１〜２０％の濃度で、いくつかの実施態様では０．１〜１０％の濃度で、そしてその他では約１．０％ｗ／ｗの濃度で適切に存在する。
【００４０】
口中での局所的な投与のために適切な処方物には、味をつけた基剤（通常ショ糖およびアカシアまたはトラガント）中に活性成分を含むトローチ剤；ゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアカシアのような不活性基剤中に、活性成分を含む香剤；および適切な液体キャリア中に活性成分を含むうがい薬が挙げられる。
【００４１】
直腸投与のための処方物は、例えばカカオバターまたはサリチラートを含む適切なベースを有する坐薬として存在され得る。
【００４２】
キャリアが固体である、経鼻または吸入性の投与のために適切な処方物には、例えば１〜５００ミクロン（２０ミクロンと５００ミクロンとの間の範囲で５ミクロンの増分（例えば３０ミクロン、３５ミクロンなど）の粒子サイズを含む）の範囲の粒子サイズを有する粉末が挙げられる。キャリアが液体である、例えば経鼻スプレーまたは点鼻の投与のために適切な処方物には、活性成分の水性または油性の溶液が挙げられる。エアロゾル投与のために適切な処方物は、従来の方法に従って調製され得、他の治療薬を用いて送達され得る。吸引性の治療法は、計量された用量吸入器によって容易に投与され得る。
【００４３】
膣投与のために適切な処方物は、活性成分に加えて、適切な、当該技術分野で公知のようなキャリアを含む、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体またはスプレー処方物として存在され得る。
【００４４】
非経口投与のために適切な処方物は滅菌され、そして、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤および意図されたレシピエントの血液と等張性の処方物を与える溶質を含み得る、水性および非水性の注射溶液；ならびに、懸濁剤および濃厚剤を含み得る、水性および非水性の滅菌懸濁液が挙げられる。処方物は、単位用量または多用量容器（例えば、密封されたアンプルおよびエラストマーストッパーを有するバイアル）中に入れられ得、使用の直前に滅菌液体キャリア（例えば注射のための水）の添加のみを必要とする、凍結乾燥条件下で貯蔵され得る。即席の注射溶液および懸濁液は、前述の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。好ましい、単位用量処方物は、上述のように１日量または単位日副用量を含む処方物であるかまたは、ＢＰＰＦの処方物の適切な画分である。
【００４５】
特に上述の成分に加えて、本発明の処方物は、当該技術分野において、目的の処方物のタイプであるとみなされている慣習的な他の薬剤（例えば、香味料を含み得る、経口投与のために適切な薬剤）を含み得る。
【００４６】
本発明はさらに、上記で定義した少なくとも１つの活性成分を、そのための獣医学キャリアとともに含む、獣医学組成物を提供する。
【００４７】
獣医学キャリアは、ネコ、イヌ、ウマ、ウサギおよび他の動物へ組成物を投与する目的のために有用な物質であって、固体、液体またはガス状の物質であり得、そうでなければ、獣医学技術において不活性であるかまたは受容可能であり、そして活性成分と適合可能である。これらの獣医学組成物は、経口、非経口または任意の他の所望される経路によって投与され得る。
【００４８】
本発明の組成物は、マトリックスまたは吸収物質、および活性成分として１以上の本発明の化合物を含む、放出を制御された薬学的処方物を提供するために使用され得る。ここで、活性成分の放出は制御されかつ調整され得て、投薬の頻度をより少なくさせるかまたは化合物の薬物動態学的もしくは毒性の性質を改良する。個々の単位がＢＰＰＦを含む、経口投与のために適応される放出を制御された処方物は、従来の方法に従って調製され得る。
【００４９】
合成方法
ＢＰＰＦは、フマル酸とＰＭＰＡとの間に複合体または塩を形成することによって調製される。ＰＭＰＡは、公知の方法によるかまたは以下の手順によって調製される、公知の化合物である。
【００５０】
【化３】
ＢＰＰＦ合成
ＰＭＰＡを、（ＣＨ３）２ＣＨＯＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌを用いてエステル化し、以下の方法を使用してフマル酸と複合体化する。
【００５１】
【化４】
プロセスの要旨
ＰＭＰＡ調製方法について：（Ｓ）−グリシドール（Ｇｌｙｃｉｄｏｌ）を、接触水素化によって（Ｒ）−１，２−プロパンジオールに還元し、次いでこれをジエチルカーボネートと反応させて（Ｒ）−１，２−プロピレンカーボネートとする。このカーボネートを、アデニンおよび触媒量の塩基（例えば、水酸化ナトリウム）と反応させて、（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニンを得、これを、単離することなく、リチウムアルコキシドおよびジエチルｐ−トルエンスルホニル−オキシメチルホスホネート（ジエチルホスファイトとパラホルムアルデヒドとを反応させ、生成物をインサイチュでトシル化させることによって調製する）と反応させる。得られる（Ｒ）−９−［２−ジエチルホスホノメトキシプロピル］アデニンを、ブロモトリメチルシランで脱エステル化して、粗ＰＭＰＡを得、次いでこれを、ｐＨを調節した水からの沈殿によって精製する。生成物をさらに水からの再結晶によって精製してＰＭＰＡ一水和物とする。
【００５２】
このプロセスは、工程１において少量のＮａＯＨのような塩基を使用し、これは、塩基を使用しない同様の反応と比較して、反応速度を約１０倍増加させる。工程１はまた、インサイチュで水素を発生させるＨＣＯ２ＮＨ４のような試薬を使用する代わりに、水素ガスを使用する。このプロセスは、工程４ｂにおいてリチウムアルコキシドを使用し、これは、反応混合物への添加の際に穏やかな発熱性である。ＮａＨのような高反応性の塩基を使用することによって、発熱反応となり、反応系中に制御が困難な水素ガスを発生する。従って、ＮａＨの使用は、リチウムアルコキシドよりもより労力および注意を要する。リチウムアルコキシド塩基はまた、ＮａＨを使用して得られる生成物と比較して、副生成物特性が改善された生成物を生じる。例えば、少量の出発物質または過剰アルキル化（ｏｖｅｒａｌｋｙｌａｔｅｄ）生成物は通常リチウムアルコキシドの使用から得られる。
【００５３】
スキームおよびプロセス工程は（Ｒ）−ＰＭＰＡおよび（Ｒ）−ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの合成を示す。（Ｒ，Ｓ）−グリシドールのようなキラル的に不純な出発物質を使用してこの方法を実施して、中間体のキラル混合物（例えば、１，２−プロピレンカーボネートのキラル混合物、ＰＭＰＡまたはビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ）を得ることができる。
【００５４】
工程１．（Ｒ）−１，２−プロパンジオール： （Ｓ）−グリシドール（１．０ｋｇ、１３．５モル）を、（ｉ）不活性な（例えば窒素）雰囲気および（ｉｉ）２モル％水酸化ナトリウムを含む変性エチルアルコール中（ＥｔＯＨ７．８５ｋｇおよび１６．７％ ＮａＯＨ溶液 ５４ｇ）の活性炭素（５０％湿った）触媒（１００ｇ）上の５％パラジウムの攪拌懸濁物、を含む反応器に添加する。触媒およびエタノール溶液を含む不活性な反応器の含有物を、（Ｓ）−グリシドールを添加する前に、通常約０℃まで（通常約−５〜５℃）冷却する。次いで、２０ｐｓｉを超えない程度に、水素ガスを、２５℃を超えない温度で反応物を含む不活性な反応容器に導入する。この混合物を、水素の消費が終わるまで約４〜５時間攪拌する。反応の完了をＴＬＣによってモニターする（（Ｓ）−グリシドールは微量に残留するかまたは残留しない）。次いで、混合物を濾過し（例えば、珪藻土（約１５０ｇ））、固体を除去し、そして濾液を、揮発性の回収が停止するかまたは非常にゆっくりになるまで、５０℃を超えないで減圧で濃縮し、粗生成物を含む油状物を得る。粗生成物を、次の工程に直接使用する。表題化合物の収率は約１００％である。
【００５５】
工程２．（Ｒ）−１，２−プロピレンカーボネート： ジエチルカーボネート（１．７８ｋｇ、１５．１モル）および、変性エチルアルコール中のナトリウムエトキシド（エタノール中２１０ｇの２１％ｗ／ｗ ナトリウムエトキシド）を、（Ｒ）−１，２−プロパンジオール（上記工程１で使用した（Ｓ）−グリシドールの量に理論的に基づいて、１．０ｋｇ）に添加し、そして溶液を８０〜１５０℃まで加熱してエタノールを蒸留除去する。必要ならば、反応を完了させるために、反応混合物にさらにジエチルカーボネート（０．１６ｋｇ）を添加し、次いで蒸留してエタノールを除去する。反応の完了をＴＬＣによってモニターし、検出可能な（Ｒ）−１，２−プロパンジオールは微量であるかまたは無いことを示す。残渣を、１２０℃および１０〜１７ｍｍＨｇで分留し、表題化合物を無色の液体として得る。生成物の純度は、ＧＣ分析によって、典型的には９６％以上の純度である。
【００５６】
工程３．ジエチル ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート：
不活性雰囲気（例えば、窒素）を含む反応器中、トルエン（０．１１ｋｇ）中のジエチルホスファイト（０．８０ｋｇ）、パラホルムアルデヒド（０．２２ｋｇ）、およびトリエチルアミン（０．０６ｋｇ）の混合物を８７℃で約２時間加熱し、次いで、ＴＬＣでモニターしたときに検出可能なジエチルホスファイトを微量に示すかまたは示さないように、反応が完了するまで、約１時間還流する。反応の間、不活性雰囲気を維持する。トルエンは、反応を緩和するために使用し、そうでなければ制御不能となり得る。反応の完了を、任意に１ＨＮＭＲ（δ ８．４〜８．６ｐｐｍのジエチルホスファイトのピークはもはや検出されない）によって確認する。溶液を約１℃まで（典型的には約−２〜４℃）冷却し、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（１．０ｋｇ）を添加し、次いで約５℃でトリエチルアミン（０．８２ｋｇ）をゆっくり添加し（発熱性の添加）、この間温度を約１０℃を超えないように維持する（典型的には０〜１０℃）。得られる混合物を２２℃まで加温し、そして反応の完了がＴＬＣによって示される（ｐ−トルエンスルホニルクロリドが微量に検出されるかまたは検出されない）まで少なくとも約５時間攪拌し（典型的には約４．５〜６．０時間）、そして任意に１ＨＮＭＲ（δ ７．９ｐｐｍのｐ−トルエンスルホニルクロリドの二重線のピークはもはや検出されない）によって確認する。固体を濾過によって除去し、トルエン（０．３４ｋｇ）で洗浄する。合わせた洗浄液および濾液を、水で２回（洗浄１回あたり１．１５ｋｇ）、または必要に応じて水（１．１５ｋｇ）、５％炭酸ナトリウム水溶液（３．３８ｋｇ）、次いで水で２回（洗浄１回あたり１．１５ｋｇ）の順序のいずれかで洗浄する。各洗浄の後に、反応器の含有物を短時間攪拌し、固体を沈降させ、下方の水層を廃棄する。反応物が乳濁物になる場合、ブライン（０．０８ｋｇのＮａＣｌを含む０．２３ｋｇの水）を第１の有機／水混合物に添加し得、続いて、反応器含有物を攪拌し、固体を沈降させ、下方の水層を廃棄し、１．１５ｋｇの水を添加し、攪拌し、固体を沈降させ、再び下方の水層を廃棄する。５０℃を超えない有機相を減圧で蒸留し（１１０℃で１０％を超えないＬＯＤ、およびＫＦ滴定により０．３％を超えない含水量まで）、収率約６０〜７０％の表題化合物を、純度約８５〜９５％のオイルとして、トルエンを含まずに、得る。
【００５７】
工程４．（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニン： この化合物を、リチウムアルコキシドおよび９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンを含む組成物を使用して調製する。合成の間に、典型的には約０〜５０℃の、通常約２０〜４５℃の温度で、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンをリチウムアルコキシドと接触させる。これらの組成物および方法中の９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンは、典型的には有機溶液中に存在する。有機溶液は典型的には有機溶媒（例えば，ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、ＣＨ２Ｃｌ２、またはＣ１−６アルカノール、通常ジメチルホルムアミドまたはトルエン）を含む。これらの組成物は必要に応じてさらにｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートまたはアデニンを含み、これは、もし存在するならば、低レベルであり、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンと比較して、典型的には約１５％未満、通常約１０％未満である。これらの組成物および方法は、典型的にはリチウムｔ−ブトキシドまたはリチウムｉ−プロポキシドを使用する。これらはまた一般に、約０．９〜３．０モル等量の（工程４ａで使用するアデニン塩基に対して）、典型的には約１．２〜１．８モル等量のｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートを、リチウムアルコキシドおよび９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンとの反応物として使用する。実施態様は、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンとリチウムアルコキシドとを接触させるプロセスによって生成される生成物を含有する。これらの実施態様において、反応物は典型的には、ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートもまた含む有機溶液中に存在する。
【００５８】
１実施態様においては、上記工程４に示される（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニンは以下のように記述される。不活性雰囲気（例えば、窒素）を含む反応器中で、アデニン（１．０ｋｇ）、水酸化ナトリウム（１１．８ｇ）、（Ｒ）−１，２−プロピレンカーボネート（０．８３ｋｇ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６．５ｋｇ）の混合物を、必要に応じて面積標準化（ａｒｅａｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによってモニターして残りのアデニンが約０．５％を超えないことを示すように反応が完了するまで、約１８〜３０時間、約１３０℃まで（典型的には約１２５から１３８℃）加熱する。得られる混合物を約２５℃まで、典型的には約２０〜３０℃まで冷却し、そして段階Ｉの中間体、（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンを含み、これは、ここで沈殿し得る。冷却後、テトラヒドロフラン中２．０Ｍのリチウムｔ−ブトキシド（３．６２ｋｇ）を、穏やかな発熱性の添加で段階Ｉの中間体に添加して、（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニンのリチウム塩を生成する。このスラリーを、ジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（１．１９ｋｇ）で処理し、混合物を約３２℃、典型的には約３０〜４５℃の温度まで加熱し、少なくとも約２時間（典型的には約２〜３時間）攪拌してこの間に混合物は均一になる。さらにジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（１．４３ｋｇ）を添加し、そして混合物を約３２℃（典型的には約３０〜４５℃）の温度で、少なくとも約２時間（典型的には約２〜３時間）攪拌する。さらにテトラヒドロフラン中２．０Ｍのリチウムｔ−ブトキシド（０．６６ｋｇ）およびジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（添加１回あたり０．４８ｋｇ）をもう２回添加し、各回に続いて、混合物を約３２℃の温度で、少なくとも約２時間攪拌する。反応の完了を、面積標準化（ａｒｅａｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによって必要に応じてモニターし、段階Ｉの中間体が約１０％を超えては残っていないことを示す。反応が完了していない場合、さらにテトラヒドロフラン中２．０Ｍのリチウムｔ−ブトキシド（０．３３ｋｇ）およびジエチルｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（０．２４ｋｇ）を添加し、反応混合物を約３２℃の温度で、少なくとも約２時間維持して、反応を完了させる。次いでこの混合物を約２５℃（典型的には約２０〜４０℃）まで冷却し、次いで氷酢酸（０．５ｋｇ）を添加する。得られる混合物を減圧で濃縮し、このときの最終的な最高の混合物温度は約８０℃、約２９Ｈｇ 減圧下（２９ ｉｎ Ｈｇ ｖａｃｕｕｍ）である。残渣を約５０℃（典型的には約４０〜６０℃）まで冷却し、水（１．８ｋｇ）を添加し、そして反応物をさらなる水（１．８ｋｇ）ですすぐ。この溶液を連続的にジクロロメタン（約３５ｋｇ）で１２〜４８時間抽出し、この間約５時間後に水相に氷酢酸（０．２ｋｇ）を１回添加し、そして続く抽出時間の約１０時間後にさらに１回添加する。抽出の完了を、面積標準化（ａｒｅａｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによって、水相中に残留する（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニンが約７％を超えないと示されることを、必要に応じて確認する。合わせたジクロロメタン抽出液を、まず大気圧で、次いで減圧で、約８０℃を超えない抽出温度で濃縮し、表題化合物を粘性のあるオレンジ色のオイルとして得る。表題化合物の収率は、重量標準化（ｗｅｉｇｈｔｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ）ＨＰＬＣによって約４０〜４５％、かつ純度は面積標準化ＨＰＬＣによって典型的には６０〜６５％である。濃縮した後の表題化合物の実際の重量は、理論的な重量の約１．６倍である。観測される重量増加分は、不純物および／または連続的な抽出および濃縮の後に残留する溶媒に起因する。
【００５９】
工程５．粗（Ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニン：
粗（Ｒ）−ＰＭＰＡを、（Ｒ）−ＰＭＰＡジエチルエステルを遊離酸に転換することによって調製する。（Ｒ）−ＰＭＰＡ約９０〜９４％および（Ｓ）−ＰＭＰＡ約６〜１０％を含む混合物中の（Ｒ）−異性体の割合は、（Ｒ）−ＰＭＰＡ約９７〜９９％まで増
加し得る。（Ｒ）−異性体の濃縮は、約２．７〜３．５のｐＨで、（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを含む組成物からＰＭＰＡを沈殿させることによって達成され、ここで、溶液は約０．１ｇ／ｍＬ未満の、一般的には約０．０８ｇ／ｍＬ未満の、典型的には約０．０７ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、ここで、（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液は約１０〜２５℃、典型的には約１５〜２２℃の温度である。このような（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液中の約４０〜５５℃での（Ｒ）−ＰＭＰＡ異性体の濃縮は、ｐＨを約２．４〜３．５に調節し、必要に応じて続いて溶液温度を約１０〜２５℃として、次いで必要に応じてｐＨを約２．７〜３．５に調節することによって達成し得る。
【００６０】
１実施態様においては、上記工程５に示される粗（Ｒ）−ＰＭＰＡの合成は以下のように記述される。ブロモトリメチルシラン（１．５６ｋｇ）を、粗（Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニン（上記工程４で記述したアデニンインプットに基づいて計算し、１．０ｋｇ）およびアセトニトリル（０．９ｋｇ）の混合物を含む反応器に、温度を約５０℃を超えないで維持するように冷却しながら添加する。ライン（ｌｉｎｅｓ）をアセトニトリル（０．３ｋｇ）ですすぎ、そして混合物を、反応器の含有物が跳ねるのを回避するように中程度の攪拌をしながら約６０〜７５℃で約２〜４時間還流する。反応の完了を、面積標準化ＨＰＬＣによってモニターしてモノエチルＰＭＰＡおよびジエチルＰＭＰＡの総残留量が約３％を超えないことを示す。反応が完了していない場合、さらにブロモトリメチルシラン（０．０４ｋｇ）を反応器に充填し、反応物を、中程度の攪拌をしながら少なくとも約１時間還流する。含有物を７０℃を越えないまでに加熱して、初めは大気圧で、次いで減圧（約２４〜２７Ｈｇ）で約７０℃を越えない蒸留によって揮発物質を除去する。次いで、反応器含有物を約２０℃まで（典型的には約１５〜２５℃まで）冷却し、そして含有物の温度を約５０℃を越えないように維持しながらこの残渣に水（１．９ｋｇ）を添加する（発熱性添加）。この混合物を２０℃まで冷却し、ジクロロメタン（１．７ｋｇ）を用いて約３０分間攪拌することによって洗浄する。次いで、分離した水相を、１μｍカートリッジフィルターを通して濾過し、水（３．２ｋｇ）で希釈し、約４０℃（典型的には約３５〜５０℃）まで加熱し、水酸化ナトリウム水溶液（５０％溶液として約０．１５ｋｇのＮａＯＨ）を用いてｐＨを約１．１（典型的には約０．９〜１．３）に調節し、この間温度を約４５℃に維持する。ＰＭＰＡの種結晶を、混合物に添加し、そして５０％水酸化ナトリウム水溶液（約０．１５ｋｇのＮａＯＨ）を用いてｐＨを約２．８（典型的には約２．６〜３．０）に調節し、この間温度を約４５℃（典型的には約３５〜５０℃）に維持する。溶液を、含有物が跳ねるのを回避するようにゆっくりから中程度の攪拌をしながら約３〜２０時間にわたって約２２℃（典型的には約１５〜２５℃）まで冷却し、この間、生成物は約３５℃で沈殿を始めるであろう。必要ならば、通常５０％水酸化ナトリウム水溶液または濃塩酸を使用して、スラリーのｐＨを約３．２（典型的には約３．１〜３．３）に調節する。このスラリーを約５℃まで、典型的には約０〜１０℃まで冷却し、この温度範囲で少なくとも約３時間ゆっくりと攪拌する。固体を濾過によって回収して、冷水（０．３５ｋｇ）およびアセトン（０．３ｋｇ）で連続的に洗浄して、粗ＰＭＰＡを、典型的には純度約９７％の湿った固体として得る。生成物を約５０℃まで加熱し、そして水の含量が１０％未満になるまで減圧で乾燥する。ジエチルＰＭＰＡの量を、先の合成工程中（収率１００％と仮定して）で使用したアデニンの量から計算し、他の化合物を含み得る粗ジエチルＰＭＰＡの正味の重量からは計算しない。
【００６１】
工程６．純（Ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニン： 粗ＰＭＰＡ（水含量について訂正した１．００ｋｇ）（工程５の生成物）の水中懸濁液を、全ての固体が溶解するまで中程度から高速で攪拌しながら約１００℃（典型的には約９５〜１１０℃）まで加熱し、得られる溶液を、熱いうち濾過することによって浄化し、さらなる熱水（１ｋｇ、約９５〜１１０℃）を使用してすすぐ。濾液を１００℃まで加熱し、次いでまず約３０℃（典型的には約２０〜２５℃）に約３〜５時間にわたってゆっくり攪拌しながら冷却し、次いで、約１０℃（典型的には約５〜１５℃）まで冷却を続ける。少なくとも約３時間、約１０℃で保持した後に、固体を濾過によって回収し、冷水（１．５ｋｇ、約０〜１０℃）次いでアセトン（１ｋｇ）を用いて連続的に洗浄する。湿った固まりを約５０℃（典型的には約４０〜６０℃）で減圧で乾燥して、約５．９％（典型的には約３．９〜７．９％）の水含有量とし、純粋なＰＭＰＡ一水和物となる。生成物の純度は、面積標準化および重量標準化ＨＰＬＣの両方によって、典型的には９８％以上である。化学純度に不満足な場合、生成物はこの工程の反復によって再度精製し得る。
【００６２】
必要に応じた再結晶： ＰＭＰＡ（０．７５ｇ）を、Ｈ２Ｏ（１１．３ｍＬ、重量比１５：１）から、懸濁物を９５〜１００℃まで加熱することによって再結晶する。室温まで冷却する際に、結晶化したＰＭＰＡを冷蔵庫で冷却する。３時間後、結晶を、ＴｙｖｅｋＴＭを備えた粗フリット（ｃｏａｒｓｅｆｒｉｔ）上で濾過し、濾過ケーキを氷冷Ｈ２Ｏおよびアセトンですすぎ、そして重量が一定になるまで風乾して、ふわふわした白色固体（調製物Ｂ）を得る。回収は約０．６４ｇ（８５．３％）。ＨＰＬＣは、典型的には９８．５〜９８．９％純粋なＰＭＰＡを示す。
【００６３】
調製物ＢＰＭＰＡを、必要に応じて、９５〜１００℃まで加熱したＨ２Ｏ（９．６ｍＬ、重量比１５：１）から再結晶する。室温まで冷却する際に、結晶化したＰＭＰＡを冷蔵庫で一晩冷却する。ＰＭＰＡを、ＴｙｖｅｋＴＭを備えた粗フリット（ｃｏａｒｓｅｆｒｉｔ）上で濾過し、濾過ケーキを氷冷Ｈ２Ｏおよびアセトンですすぎ、次いで重量が一定になるまで吸引乾燥してふわふわした白色固体（調製物Ｃ）を得る。ＰＭＰＡの回収は典型的には約０．５２ｇ（８１．３％）であり、純度は約９９．３〜９９．５％である。
【００６４】
調製物ＣＰＭＰＡ（０．５０ｇ）を、必要に応じて、沸騰Ｈ２Ｏ（約７．５ｍＬ、重量比１５：１）から再結晶する。室温まで冷却する際に、ＰＭＰＡを、ＴｙｖｅｋＴＭを備えた粗フリット（ｃｏａｒｓｅｆｒｉｔ）上で濾過する。濾過ケーキを氷冷Ｈ２Ｏおよびアセトンですすぎ、次いで乾燥するまで吸引して、ふわふわした白色固体を得る。濾液を、必要に応じてまた濃縮して、白色固体を得る。１以上の再結晶から調製されたＰＭＰＡを、必要に応じてＰＭＰＡ誘導体の生成に使用する。
【００６５】
工程７．ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレート： ＮＭＰのような適切な溶媒中のＰＭＰＡ、トリアルキルアミン（ＴＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン）のような塩基およびクロロメチル−２−プロピルカルボネートの反応は、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡを生じる。約５５〜８０℃の反応温度での、約１〜６時間の、反応物の中程度の攪拌は、典型的には、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの良好な収量を生じる。このビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ合成反応は、これらの時間および温度範囲での種々の条件下で良好な結果を与える。例えば、この反応は、短時間（約３０〜１２０分）の初期高温（約７０〜８０℃であるが、８０℃を超えない）反応に続く、より低い温度（約５５〜６５℃）反応の場合に、良好な結果を与える。例示的な反応は、（１）８０℃で３０分、続いて、６０〜６５℃で２時間の反応、（２）６０℃で約４時間、そして（３）７０〜７２℃で２時間である。
【００６６】
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ合成反応が完了した後に、必要に応じて濾過を使用して、反応混合物から固体を除去し、続いて、アルキルアセテート、通常Ｃ１−４アルキル部分のアセテート（例えば、ｎ−ブチルアセテート、ｎ−プロピルアセテート、イソプロピルアセテートまたは酢酸エチル）を用いて洗浄する。次に、最初の反応体積の約３０％まで、減圧で蒸留して、有機溶媒を除去する。フマル酸の添加は、固体ＢＰＰＦを形成させ、これは、通常ｃＢＰＰＦとして沈殿する。ＢＰＰＦまたはｃＢＰＰＦは、少量の、通常１％未満（約０．２〜０．４％）の水または有機溶媒（例えば、１−メチル−２−ピロリジノン、トリアルキルアミン（例えば、Ｃ１−３アルキル（例えば、トリエチルアミン、メチルジエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、またはプロピルジエチルアミン））、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、イソプロピルアセテート、Ｃ１−６アルカノール、ピリジン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトン、ＣＨ２Ｃｌ２、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、トルエン、キシレン、メチルエチルケトン、１，２−ジクロロエタンまたはＣＨＣｌ３）を含み得る。典型的には、フマル酸をＣ１−６アルカノール（例えば、ｎ−ヘキサノール、ｎ−ペンタノール、ｎ−ブタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、エタノールまたはメタノール）に溶解する。
【００６７】
ＢＰＰＦまたはｃＢＰＰＦを生成するために使用される方法および組成物は、反応剤として接触されるビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡおよびフマル酸を使用する。一般に、約３〜４３０ｍｇ／ｍＬ、通常約４〜１００ｍｇ／ｍＬのビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡを含む溶液を使用する。一般に、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ：フマル酸のモル比が約０．６：１〜１．４：１、通常約０．９：１．１または約１：１のものを使用する。一般に、使用する溶液は有機溶媒（例えば、アルキルアセテート、１−メチル−２−ピロリジノン、トリアルキルアミン、Ｃ１−６アルカノール、ピリジン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトン、ＣＨ２Ｃｌ２、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、トルエン、キシレン、メチルエチルケトン、１，２−ジクロロエタンまたはＣＨＣｌ３）を含む。
【００６８】
１実施態様においては、フマル酸を用いたビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの合成および結晶化は、ＢＰＰＦを形成し、上記の工程７に示され、以下に記述される。不活性雰囲気（例えば窒素）を有する反応器中で、１−メチル−２−ピロリジノン（４．１２ｋｇ）、ＰＭＰＡ一水和物（１．００ｋｇ）、およびトリエチルアミン（０．９９６ｋｇ）の混合物を約１５〜４５分間、典型的には約３０分間攪拌し、次いでクロロメチル−２−プロピルカーボネート（２．５０ｋｇ）を添加し、混合物を約５５〜６５℃まで、典型的には約６０℃まで加熱し、そして約３〜６時間、典型的には約４時間、反応が完了したと必要に応じてＨＰＬＣによって示される（モノ（ＰＯＣ）ＰＭＰＡの存在が１５％を越えない）まで、含有物を跳ねることなく攪拌する。混合物をイソプロピルアセテート（１０．７２ｋｇ）で希釈し、できるだけ素早く、約１５〜３０℃、典型的には約２５℃まで冷却し、この間、反応器の含有物を約１５〜３０℃、典型的には約２５℃に保持し、混合物を約２０〜６０分、典型的には約３０分攪拌する。固体を濾過によって除去し、イソプロピルアセテート（４．４４ｋｇ）で洗浄する。合わせた有機相を、約１５〜３０℃、典型的には約２５℃で、約１〜１０分の中程度の攪拌を使用して水（洗浄一回あたり３．２８ｋｇ）で２回抽出して、乳濁物の形成を回避し、続いて、相を分離する。合わせた水相を、イソプロピルアセテート（洗浄１回あたり３．５６ｋｇ）で２回逆抽出（ｂａｃｋ−ｅｘｔｒａｃｔｅｄ）（約１５〜３０℃、典型的には約２５℃）する。全ての有機相を合わせ、約１〜１０分の中程度の攪拌を使用して水（２．２０ｋｇ）（約１５〜３０℃、典型的には約２５℃）で洗浄して、乳濁物の形成を回避する。合わせた有機相を、約２５〜４３℃であるが４５℃を越えないで最初の体積（約１０〜１２Ｌ／ｋｇＰＭＰＡ一水和物）の約３０％まで、減圧（約２６．５〜２８” Ｈｇ）で濃縮する。インライン（ｉｎ−ｌｉｎｅ）１μｍフィルターを使用する研磨濾過（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）の後、淡黄色のオイルが残留するまで、減圧（約２８” Ｈｇ）で、約２０〜３８℃であるが４０℃を越えないようにして、有機相を再び濃縮する。オイルを、固体が溶解するまで、約０．５〜２．０時間、激しく攪拌しながら、２−プロパノール（６．２４ｋｇ）中のフマル酸（０．３８ｋｇ）の温溶液（約４５〜５５℃、典型的には約５０℃）中に溶解する。次いで、温溶液を、必要に応じて、インライン１μｍフィルターを使用して濾過し、この間溶液を最小限に冷却する。約３４〜５０℃、典型的には約４０℃の濾液を、必要とされる最小限の攪拌を使用して攪拌して、均一な溶液を得る。得られる溶液を約３０〜３３℃、典型的には約３２℃まで、約３０分にわたって、最小限に攪拌しながら冷却し、必要に応じて、少量のビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレート（約１００ｍｇ）で種播し、約１２〜１８℃、典型的には約１５℃まで、約１〜２時間、典型的には約１時間にわたって冷却する。種結晶を添加する前に結晶の形成が開始した場合は、種結晶は必要とされないかもしれない。溶液を冷却したときに、約１２〜３３℃の範囲にわたって結晶が形成する。結晶の形成が開始したときに、攪拌を停止する。混合物を約１５℃で少なくとも約１２時間、典型的には約１２〜３０時間静置する。得られるスラリーを濾過し（ＴｙｖｅｋＴＭ）、濾過ケーキを、予め混合しておいたブチルエーテル（２．４４ｋｇ）中イソプロピルアセテート（０．７０ｋｇ）（１：４ｖ／ｖ）溶液で洗浄する。濾過ケーキを、４０℃を超えないで、約１〜１０日間、減圧で乾燥し、そして乾燥した生成物は必要に応じて粉砕（ｍｉｌｌ）され（０．０５０インチスクリーンを備えたＦｉｔｚｍｉｌｌＮ５Ａ）、ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートを、純度約９７．０〜９９．５％の白色の、微粉末様結晶として得る。ＢＰＰＦを、所望であれば、必要に応じて、基本的に本明細書で記載したように再結晶して、生成物の純度を向上させる。
【００６９】
実施態様には、方法の工程または操作を行うときに一過性に起こる組成物を含む。例えば、リチウムアルコキシドを、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン溶液と混合した場合、混合の開始時の組成物は極少量のリチウムアルコキシドを含む。この組成物は、溶液を混合するために十分に攪拌する前には一般に不均一混合物として存在する。このような組成物は通常極少量の反応生成物を含み、かつ主に反応物を含む。同様に、反応が進行するにつれて、反応物、生成物および副生成物の割合は互いに関連して変化する。これらの一過性の組成物は、プロセス工程を行う場合に発生する中間体であり、これらは本発明の実施態様として明確に含まれる。
【００７０】
本明細書中に見出される全ての引用は、特異性を有する参照として援用される。
【００７１】
以下の実施例はさらに本発明を例示するが限定しない。
【実施例】
【００７２】
実施例
実施例１
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートの物理特性。ｃＢＰＰＦのＸ−線粉末回折パターンを、Ｇｅｎｅｒａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｍｏｄｅｌ ＸＲＤ−５ Ｘ−線回折計およびＳｉｅｍｅｎｓ ＳｏｆｔｗａｒｅＳｙｓｔｅｍｓインターフェースを使用して、公表された手順（Ｕ．Ｓ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２３巻、１９９５、方法９４１、Ｕ．Ｓ．Ｐ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ）に従って、１分あたり２度（ｄｅｇｒｅｅ）の２シータ（２θ）のスキャン速度で決定した。グラファイトモノクロメータ（ＥＳＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）およびシンチレーション検出器を有する標準焦点銅Ｘ−線管（Ｖａｒｉｃａｎ ＣＡ−８）を使用して、４０ＫＶおよび−２０ｍＡで操作したＸ−線発生装置に曝することによって、ＢＰＰＦ結晶を、４と３５度との間の２θで走査した。計算に使用したＸ−線波長の重み付き平均値は、ＣｕＫα１．５４１８３８Åであった。ＢＰＰＦは、約４．９、１０．２、１０．５、１８．２、２０．０、２１．９、２４．０、２５．０、２５．５、２７．８、３０．１および３０．４の２θ（度）で表される、特徴的なＸ−線粉末回折ピークを示す。例示的なＸ−線粉末回折パターンを以下に示す。
【００７３】
ＢＰＰＦ結晶はまた、示差走査熱量測定によっても分析され、約１１８．３度（約１１６．１度で開始する）に特徴的なピークを有するサーモグラムを示した。サーモグラムを、窒素雰囲気下で１分あたり１０℃の走査速度を使用して得た。熱量測定の走査を、示差走査熱量計（モデル２２００コントローラを有する、モデルＤＳＣ２９１０、ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して得た。約５ｍｇのＢＰＰＦ結晶を使用してサーモグラムを得た。示差走査熱量測定については記述されている（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２３巻、１９９５、方法８９１、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤを参照のこと）。
【００７４】
ＢＰＰＦの融点（その温度で試験サンプルが全体的に液体になる）を、公表された手順（Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２２巻、１９９４、方法７４１、方法 Ｉａ、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ）に従って、ＦＰ９０中央処理装置が備えられているＭｅｔｔｌｅｒ ＦＰ８１測定セルを使用して決定した。毛細ガラス管の底部を、ＢＰＰＦ微粉末で充填した。硬い面上で毛細管をたたくことによって、ＢＰＰＦを４〜６ｍｍに詰めた。毛細管をサンプルスロット中に導入し、温度を、１分あたり１℃の速度で上昇させた。融点である１１４．２〜１１４．６℃は、サンプルの融解が完了した時点の温度に基づいた。
【００７５】
ＢＰＰＦを、公表された手順（Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２３巻、１９９５、方法９２１、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）および製造者のＣｏｕｌｏｍｅｔｅｒ取り扱い説明書に従って、Ｍｅｔｒｏｈｍ ６８４ ＫＦ Ｃｏｕｌｏｍｅｔｅｒを使用するＫａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ滴定によって、水含有量について試験した。このアッセイに使用したＢＰＰＦの量、すなわち約５０〜１００ｍｇを、５点（ｆｉｖｅｐｌａｃｅ）化学天秤（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ， Ｍｏｄｅｌ ＲＣ２１０Ｄ、または同等のもの）を使用して測定した。典型的なバッチは１．０％ｗ／ｗ未満の水を含んでいた。
【００７６】
ＢＰＰＦ結晶を、製造者の取り扱い説明書に従って、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒｍｏｄｅｌ １６５０ ＦＴ−ＩＲ 分光計を使用する赤外線分光光度法によって、分析した。ＫＢｒ（Ａｌｄｒｉｃｈ， ＩＲ 等級）を、使用前に減圧下６０℃で１晩乾燥した。約１０重量％（約５ｍｇ）のＢＰＰＦ結晶および約９０重量％（約５０ｍｇ）の乾燥したＫＢｒを含む半透明のペレットを、二つの粉末を共に粉砕して微粉末を得ることによって調製した。ＩＲ分光法については記述されている（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第２２巻、１９９４、方法１９７、Ｕ．Ｓ．Ｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｒ．Ｔ．ら、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第３版、Ａｌｌｙｎ ａｎｄ Ｂａｃｏｎ， Ｉｎｃ．， Ｂｏｓｔｏｎ， ４０５−４１２頁、１９７３）。分光光度計サンプルチャンバーを、サンプルを用いた走査の前に、バックグラウンド走査において、約６ｐ．ｓ．ｉ．の高純度窒素ガスで少なくとも５分間パージして、二酸化炭素の吸収の影響を≦３％まで減少させた。ＢＰＰＦ結晶は、約３２２４（Ｏ−Ｈ）、３１０７−３０５２（Ｎ−Ｈ、Ｃ＝Ｃ−Ｈ）、２９８６−２９３９（脂肪族Ｃ−Ｈ）、１７５９（アルキルエステルＣ＝Ｏ）、１６７８（芳香族Ｃ＝Ｎ）、１６２０（芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２６９（ホスホネートＰ＝Ｏ）および１１０２（Ｃ−Ｏ−Ｃ）ｃｍ−１（ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｃｅｎｔｉｍｅｔｅｒｓ）に現れた特徴的なバンドを有する、臭化カリウム中の赤外線吸
収スペクトルを示した。
【００７７】
異なった溶媒中でのＢＰＰＦの溶解度を試験した。ＢＰＰＦは、一般に、極性溶媒において最も溶解性であると見出し、これを、本発明の方法および実施態様で典型的に使用する。ジメチルホルムアミド中でのＢＰＰＦの溶解度は、４２８ｍｇ／ｍＬであり、イソプロピルアセテート：水（１：１ｖ／ｖ）、メタノール、エタノール、イソプロパノール、０．１Ｎ ＨＣｌおよびアセトン中でのＢＰＰＦの溶解度は、約１５〜１００ｍｇ／ｍＬであった。アセトニトリル、イソプロピルアセテートおよび脱イオン水（ｐＨ３．３）でのＢＰＰＦの溶解度は、約３〜１５ｍｇ／ｍＬであった。ＣＨ２Ｃｌ２、ジエチルーテルおよびヘキサン中ではＢＰＰＦは低い溶解度を有した。
【００７８】
ＢＰＰＦ結晶を、製造者の取り扱い説明書に従って、Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄｍｏｄｅｌ ８４２５Ａダイオードアレイ分光光度計を使用する紫外線分光光度法によって、分析した。このアッセイに使用したＢＰＰＦの量、すなわち約２５ｍｇを、５点（ｆｉｖｅｐｌａｃｅ）化学天秤（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ， Ｍｏｄｅｌ ＲＣ２１０Ｄ、または同等のもの）およびＨＰＬＣまたは分光光度法等級の溶液を使用して測定した。０．０１Ｍリン酸カリウム緩衝液中のｐＨ６．０での１０μｇ／ｍＬのＢＰＰＦのモル吸光度は１４９３０Ｍ−１ｃｍ−１であり、そして０．０１ＮＨＣｌ中のｐＨ２．０での１５μｇ／ｍＬのＢＰＰＦでは、１５０１０Ｍ−１ｃｍ−１であった。メタノール中のＢＰＰＦ（１０μｇ／ｍＬ）は、約２６０ｎｍにλｍａｘを有した。
【００７９】
ＢＰＰＦ結晶は、９２％の相対湿度および室温で保持した場合、３７日間まで吸湿性ではなかった。ＢＰＰＦ結晶は、電位差滴定によって測定したように、ｐＫａ３．８を有した。
【００８０】
実施例２
（Ｒ）−ＰＭＰＡのキラル濃縮。（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ・Ｈ２Ｏ（２．５ｇ、約９３％ Ｒ異性体）を、水（１００ｍＬ）を含むフラスコ中で懸濁し、必要ならばＨＣｌまたはＮａＯＨを使用して、ｐＨを７．１２に調節した。溶液を４０℃まで加温し、ｐＨを約５．０に調節した。次いで、ｐＨを３．１に調節し、溶液に（Ｒ）−ＰＭＰＡを種播した。溶液を室温にまで冷却し、約２時間置いた。固体を、粗ガラスフリット焼結ガラス漏斗上で収集し、氷冷水（１０ｍＬ）で洗浄し、次いでアセトン（１０ｍＬ）で洗浄した。得られるＰＭＰＡは、９８．３％の（Ｒ）異性体からなった。２．５ｇの（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ（約９３％（Ｒ）異性体）および２５ｍＬの水を使用して同様の手順を行った場合、（Ｒ）異性体のキラル濃縮は観察されなかった。０．７６６ｇの（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ（約９３％（Ｒ）異性体）および１０ｍＬの水を使用して同様の手順を行った場合、９９．６％（Ｒ）異性体までの（Ｒ）異性体のキラル濃縮が観察された。
【００８１】
実施例３
ｃＢＰＰＦおよびビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡ・クエン酸塩の、固体状態化学安定性を、各化合物を異なった条件下で貯蔵した後の分析によって比較した。その結果、ＢＰＰＦ粉末は予想外に、高温および相対湿度において貯蔵に対してより安定であることを示した。
【００８２】
【化５】
＊ 日、 ＊＊ 相対湿度、 ＊＊＊ モノ（ＰＯＣ）ＰＭＰＡシトレートに加えて他の生成物が生成した
実施例４
ビス（ＰＯＣ）ＰＭＰＡフマレートの処方物。結晶性ＢＰＰＦを、いくつかの以下の賦形剤を用いて
処方した。
【００８３】
【化６】
処方物において、前ゼラチン化デンプンＮＦを、錠剤の圧縮のために適切な結合剤および崩壊剤として使用した。内部架橋したナトリウムカルボキシメチルセルロースである、クロスカルメロース（Ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ）ナトリウムＮＦを、錠剤の分解および溶解を促進するために使用した。ラクトース一水和物ＮＦを、製造を補助し、かつ錠剤の溶解を促進するための希釈剤として使用した。ステアリン酸マグネシウムＮＦを、錠剤圧縮プロセスからの錠剤の排出を促進するための潤滑剤として使用した。
【００８４】
ＢＰＰＦを含む錠剤を、ブレンダー内で、前ゼラチン化デンプン、クロスカルメロースナトリウムおよびラクトース一水和物をブレンドすることによって生成する。適切に湿った顆粒化物が形成されるまで水を添加する。湿った顆粒化物を粉砕し、流動床乾燥機中で乾燥して、乾燥の際の水分含量の損失が３％を超えないようにし、そして乾燥した顆粒をミルに通す。粉砕された顆粒を、顆粒外部賦形剤、クロスカルメロースナトリウムおよびラクトース一水和物と合わせ、そしてミキサー中でブレンドして粉末状のブレンドを得る。次いで、粉末状のブレンドをステアリン酸マグネシウムとブレンドし、次いで錠剤へと圧縮する。錠剤を、ポリエステル繊維充填材料と共に、そして必要に応じてシリカゲル乾燥剤と共に、高密度ポリエチレンまたはガラス瓶に充填する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
約２．７〜３．５のｐＨで（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液を含む組成物であって、ここで、該溶液は、約０．１ ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、そしてここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡは（Ｒ）立体配置である、組成物。
【請求項２】
約０．０８ ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを含む溶液のｐＨを約２．７〜３．５に調節する工程を含む方法であって、ここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡが（Ｒ）立体配置である、方法。
【請求項３】
明細書中に記載の発明。
【請求項１】
約２．７〜３．５のｐＨで（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡ溶液を含む組成物であって、ここで、該溶液は、約０．１ ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを有し、そしてここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡは（Ｒ）立体配置である、組成物。
【請求項２】
約０．０８ ｇ／ｍＬ未満の（Ｒ，Ｓ）−ＰＭＰＡを含む溶液のｐＨを約２．７〜３．５に調節する工程を含む方法であって、ここで、約９０〜９４％のＰＭＰＡが（Ｒ）立体配置である、方法。
【請求項３】
明細書中に記載の発明。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２０１０−２８０６９４（Ｐ２０１０−２８０６９４Ａ）
【公開日】平成２２年１２月１６日（２０１０．１２．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１７５８０８（Ｐ２０１０−１７５８０８）
【出願日】平成２２年８月４日（２０１０．８．４）
【分割の表示】特願２００８−５８７９８（Ｐ２００８−５８７９８）の分割
【原出願日】平成１０年７月２３日（１９９８．７．２３）
【出願人】（５０００２９４２０）ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド (141)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１２月１６日（２０１０．１２．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年８月４日（２０１０．８．４）
【分割の表示】特願２００８−５８７９８（Ｐ２００８−５８７９８）の分割
【原出願日】平成１０年７月２３日（１９９８．７．２３）
【出願人】（５０００２９４２０）ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド (141)
【Ｆターム（参考）】
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