ネコの寿命を延長する方法
標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えることによって、ネコの寿命を延長する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年４月２９日出願の米国仮出願Ｎｏ．６０／６７６，６２４、及び２００５年６月２２日出願の米国仮出願Ｎｏ．６０／６９２，７８０（これらの開示事項は参照として本明細書に包含する）に関する優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、一般に、ネコの寿命を延長する方法に関し、特にネコの寿命を延長するために、タンパク質、リン、及びナトリウムの減少したレベルを有する餌料を用いることに関する。
【背景技術】
【０００３】
慢性腎不全（ＣＲＦ）は、中年〜老年のネコにおいてよく起こり、ＣＲＦが発生する頻度は明らかに上昇している。２０００年においては、１０歳以上のネコの間での腎不全の有病率は約２７％であり、１５歳以上のネコの間では約４９％もの高さである。
【０００４】
殆どの動物において、その一生の間に腎機能における進行的な低下が認められる。殆どの動物とは異なり、ネコは、その一生の間に腎機能における大きな低下は認められないが、その代わりに晩年における幾つかの時点でＣＦＲの徴候の急激な発症が認められる。ＣＲＦは、進行的な構造的病変を特徴としており、これにより、腎臓の排泄、生合成、及び調節機能の機能障害が引き起こされる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
食餌改善は、ネコにおける自発性ＣＲＦの外的徴候を最小にするための治療の中心である。しかしながら、明らかに、「腎臓餌料」、即ち自然発生的な腎不全を有するネコに適した食餌管理の長期間有効性、並びに特にネコの長寿性に対するかかる餌料の効果を評価する、無作為抽出され、マスクされ、制御された臨床試験は、報告されていない。したがって、ネコの腎不全及び腎臓病を治療し、したがってネコの寿命を延長するための新規な方法に対する必要性が存在する。
【０００６】
したがって、本発明の目的は、ネコの寿命を延長する方法を提供することである。
本発明の他の目的は、ネコの腎不全の発症を遅延する方法を提供することである。
本発明の更なる目的は、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させることである。
【０００７】
本発明の他の目的は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用な組成物及び器具の組み合わせを含むキットの形態の製品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
これらの及び他の目的は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるための新規な方法を用いて達成される。この方法は、ネコに、標準的な維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む。
【０００９】
本発明の他の及び更なる目的、特徴及び有利性は、当業者には容易に明らかとなるであろう。
「寿命を延長する」という用語は、自然の原因によるか、又は、動物の飼育者又は獣医師の判断で動物についての生活の質が大きく且つ不可逆的に悪化した際の安楽死によるその死亡時の動物の暦年齢を上昇させることを意味する。
【００１０】
「ネコ」という用語は、イエネコ（フェリス・ドメスティカス）及びそれらの野生及び野生化同種近縁種を含み、更に制限なしに他のネコ種の野生外来捕獲動物、例えばライオン、トラ、ヒョウなどを含み、科学的、教育的又は娯楽目的で飼育されているものを含む、任意のネコ種の動物を意味する。好ましくは、ネコは、飼いネコである。
【００１１】
「維持のための実質的に全ての栄養必要量」という用語は、本発明において規定するような餌料の減少したタンパク質レベルを前提として、少なくとも、ＮＲＣ（米国学術研究会議）及びＡＡＦＣＯ（アメリカ飼料検査官協会）のような機関によって発表され、時々更新されているガイドラインにしたがう、ネコに必要な主要栄養素（タンパク質、炭水化物、脂質、及び繊維）の維持量を意味する。場合によっては、餌料は、更に、本発明において規定する餌料の減少したリン及びナトリウムレベルを前提として、少なくとも維持量の１以上の主要栄養素、例えばビタミン、必須アミノ酸、必須脂肪酸、及びミネラルを含むが、主要栄養素は、更に又は代わりに、餌料を構成する１以上の餌料組成物の一部を形成しない１以上のサプリメントの形態で供給することができる。成猫の維持のための栄養必要量に関する更なる情報は、例えば、ＮＲＣ（２００３）イヌ及びネコの栄養必要量、ｐ．４３１〜４３４のような情報源において見出すことができる。
【００１２】
「ネコに餌料を与える」という用語は、ネコに、消費のために、標準量、例えば日常量の、ネコの維持のための実質的に全ての栄養必要量を一緒に満足する１以上の餌料組成物を与えることを意味する。餌料は、動物の維持のための実質的に全ての栄養必要量が満足され、餌料が本発明において規定するタンパク質、リン、及びナトリウムの減少したレベルを有する限りにおいて、かかる給餌の間に必ずしも一定ではない。例えば、ネコに対して、所望の度に、一つのブランドのキャットフードから他のものに、或いは湿潤組成物（例えば缶入りのキャットフード）から乾燥組成物（例えば顆粒状物）に、或いはその逆に切り替えることができる。
【００１３】
「腎臓薬」という用語は、腎不全又は腎臓病を予防又は治療するのに有用な任意の化合物、組成物、又は薬剤を意味する。
本発明は、本明細書において記載する特定の方法論、手順、及び試薬に限定されるものではなく、それらは変化してよい。更に、本明細書において用いる専門用語は、特定の態様のみを説明する目的のものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。本明細書及び特許請求の範囲において用いるように、単数形は、本明細書の記載が明確に他のものを示していない限り複数形も包含し、例えば「宿主細胞」は複数のかかる宿主細胞を包含する。
【００１４】
他に定義しない限りにおいて、本明細書において用いる全ての技術用語及び科学用語並びに任意の頭字語は、本発明の分野における当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと同様か又は等価の任意の方法及び材料を本発明の実施において用いることができるが、好ましい方法、装置、及び材料を本明細書において記載する。
【００１５】
本明細書において言及する全ての特許、特許出願、及び特許公開は、本発明と共に用いる可能性のあるそこで報告されている化合物及び方法論を記載且つ開示する目的で法律によって許される範囲まで、参照として本明細書中に包含する。しかしながら、このことは、先行発明のために本発明がかかる開示に先行する資格がないことを認めるものと解釈されるものではない。
【００１６】
種々の態様において、本発明は、（１）ネコの寿命を延長し、（２）ネコの腎不全の発症を遅延し、（３）ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少するための方法を提供する。本方法は、ネコに、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む。本発明は、ネコにタンパク質、リン、及びナトリウムが比較的低含量の餌料を与えることによってネコの腎機能を変化させることができ、腎機能を変化させることによって、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病の罹病率及び死亡率を減少することができるという新規な発見に基づく。
【００１７】
「標準的なネコの維持餌料」は、例えばここで引用する参考文献においてＮＲＣ又はＡＡＦＣＯによって示されている健康な成猫の維持のための栄養必要量を満足し、タンパク質、リン、又はナトリウムのいずれにおいても「高含量」でない餌料である。タンパク質において「高含量」であるネコ餌料は、乾燥物質で約５０％より高いタンパク質含量を有し、及び／又は、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約１０ｇより多いタンパク質を与えるものである。リンにおいて「高含量」であるネコ餌料は、乾燥物質で約１．２％より高いリン含量を有し、及び／又は、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約０．２５ｇより多いリンを与えるものである。ナトリウムにおいて「高含量」であるネコ餌料は、乾燥物質で約０．５％より高いナトリウム含量を有し、及び／又は、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約０．１ｇより多いナトリウムを与えるものである。タンパク質、リン、又はナトリウムにおいて「高含量」でない代表的な標準的ネコ維持餌料は、乾燥物質基準で、約４５％のタンパク質、約１％のリン、及び約０．４％のナトリウムを含み、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約９ｇのタンパク質、約０．２ｇのリン、及び約０．０８ｇのナトリウムを与える。
【００１８】
タンパク質、リン、及びナトリウムの「減少したレベル」を有するネコ餌料は、餌料を消費するネコが、延長した寿命、腎不全の発症の遅延、及び腎臓病に関係する罹病率及び死亡率の減少を経験するような、標準的なネコの維持餌料中のものよりも十分に低いレベルを有するものである。通常は、本発明の利益を達成するためには、餌料中のタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルは、標準的なネコの維持餌料中のものから少なくとも約１０％減少させる。
【００１９】
餌料中のリン及びナトリウムのそれぞれを標準的なネコの維持餌料と比較して少なくとも約１０％減少させる一態様においては、タンパク質は、約１２％〜約６０％、好ましくは約１８％〜約４８％、約２４％〜約４４％、又は約３０％〜約４０％減少させる。この態様による乾燥物質基準での餌料のタンパク質含量は、約１８％〜約４０％、好ましくは約２３％〜約３７％、約２５％〜約３４％、又は約２７％〜約３２％、例えば約２８％〜約３０％である。ＭＥ基準で表現して、餌料のタンパク質含量は、約３．６〜約７．９ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ、好ましくは約４．７〜約７．４、約５．０〜約６．８、又は約５．４〜約６．３ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥである。
【００２０】
餌料中のタンパク質及びナトリウムのそれぞれを標準的なネコの維持餌料と比較して少なくとも約１０％減少させる他の態様においては、リンは、約１５％〜約８０％、好ましくは約２０％〜約７５％、約３０％〜約６５％、約４０％〜約６０％、又は約４０％〜約５５％減少させる。この態様による乾燥物質基準での餌料のリン含量は、約０．２％〜約０．８５％、好ましくは約０．２５％〜約０．８％、約０．３５％〜約０．７％、約０．４％〜約０．６％、又は約０．４５％〜約０．６％である。ＭＥ基準で表現して、餌料のリン含量は、約０．０４〜約０．１７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ、好ましくは約０．０５〜約０．１６、約０．０７〜約０．１４、約０．０８〜約０．１２、又は約０．０９〜約０．１２ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥである。
【００２１】
餌料中のタンパク質及びリンのそれぞれを標準的なネコの維持餌料と比較して少なくとも約１０％減少させる他の態様においては、ナトリウムは、約１２％〜約９０％、好ましくは約１５％〜約８０％、約１８％〜約７０％、又は約２１％〜約６０％減少させる。この態様による乾燥物質基準での餌料のナトリウム含量は、約０．０４％〜約０．３５％、好ましくは約０．０８％〜約０．３４％、約０．１２％〜約０．３３％、又は約０．１６％〜約０．３２％である。一態様においては、ナトリウム含量は、乾燥物質基準で約０．２％〜約０．３５％である。ＭＥ基準で表現して、餌料のナトリウム含量は、約０．００８〜約０．０７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ、好ましくは約０．０１６〜約０．０７、約０．０２〜約０．０７、又は約０．０３〜約０．０６ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥである。
【００２２】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを本発明において規定するように減少させた缶入りネコ餌料の実例としては、制限なしに、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ ｗｉｔｈ Ｃｈｉｃｋｅｎ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｇ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｌ／ｄ、Ｐｕｒｉｎａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ ＮＦ、及びＲｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ Ｒｅｎａｌ ＬＰ２１が挙げられる。例えば、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ缶入り餌料は、給餌基準で８．４％、乾燥物質で２８．６％、６．６ｇ／１００ｋｃａｌのタンパク質；給餌基準で０．１０％、乾燥物質で０．３４％、０．０７８ｇ／１００ｋｃａｌのリン；給餌基準で０．０９％、乾燥物質で０．３１％、０．０７ｇ／１００ｋｃａｌのナトリウムを含む（平均栄養素含量）と提示されている。
【００２３】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを本発明において規定するように減少させた乾燥ネコ餌料の実例としては、制限なしに、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｇ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｌ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｓｃｅｉｅｎｃｅ Ｄｉｅｔ Ａｄｕｌｔ Ｏｃｅａｎ Ｆｉｓｈ ＆ Ｒｉｃｅ Ｒｅｃｉｐｅ、Ｐｕｒｉｎａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ ＮＦ、及びＲｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ Ｒｅｎａｌ ＬＰ２１が挙げられる。例えば、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ乾燥餌料は、給餌基準で２６．２％、乾燥物質で２８．３％、６．７ｇ／１００ｋｃａｌのタンパク質；給餌基準で０．４５％、乾燥物質で０．４９％、０．１１４ｇ／１００ｋｃａｌのリン；給餌基準で０．２３％、乾燥物質で０．２５％、０．０５８ｇ／１００ｋｃａｌのナトリウムを含む（平均栄養素含量）と提示されている。
【００２４】
本発明の餌料をネコに与えることは長期間の作業である。例えば、ネコに、本発明による餌料を、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約１年、少なくとも約２年、少なくとも約３年、或いは腎不全又は腎臓病の発症又は最初の診断後に開始してネコの寿命の実質的に残りの期間継続して与えることができる。本方法の長期性を前提として、タンパク質、リン、及びナトリウムのいずれかを、ネコの全般的な健康状態と整合する最小値以下のレベルに制限することは一般的に望ましくないことを理解すべきであろう。したがって、一態様によれば、タンパク質は、乾燥物質で約２５％以下、或いは約５ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ以下には減少させない。他の態様によれば、リンは、乾燥物質で約０．４５％以下、或いは約０．０９ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ以下には減少させない。他の態様によれば、ナトリウムは、乾燥物質で約０．０４％以下、或いは約０．００８ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ以下には減少させない。
【００２５】
一態様においては、餌料は、乾燥物質基準で、約２７％〜約３２％のタンパク質、約０．３６％〜約０．５４％のリン、及び約０．１５％〜約０．３２％のナトリウムを含む、かかる餌料は、通常、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり、約５．４〜約６．３ｇのタンパク質、約０．０８〜約０．１２ｇのリン、及び約０．０３〜約０．０６ｇのナトリウムを与える。腎臓病を有するネコにかる餌料量を与えることで、約４５％のタンパク質、約０．９％のリン、及び約０．４％のナトリウム（１００ｋｃａｌ ＭＥあたり、約９ｇのタンパク質、約０．２ｇのリン、及び約０．０８ｇのナトリウムを与える）を含む標準的なネコの維持餌料と比較して寿命を延長することによって本発明が実証される。本明細書において記載する餌料の寿命延長効果は、比較試料として用いる標準的な餌料それ自体がタンパク質、リン、又はナトリウムのいずれかにおいて上記に定義したような「高含量」ではないことを認識すると、特に驚くべきことである。
【００２６】
他の態様においては、餌料は、「給餌」基準で、約５％〜約４０％の量のタンパク質、約０．０１％〜約２％の量のリン、及び約０．０１％〜約２％の量のナトリウムを含む乾燥餌料を含む。この態様によれば、「給餌」基準で、乾燥餌料のタンパク質含量は、約１０％〜約３０％、又は約２４％〜約３０％であってよく；リン含量は、約０．０５％〜約１％、又は約０．２％〜約０．５％であってよく；及び／又は、ナトリウム含量は、約０．０５％〜約１％、又は約０．１５％〜約０．３５％であってよい。
【００２７】
他の態様においては、餌料は、「給餌」基準で、約４％〜約１２％の量のタンパク質、約０．０３％〜約０．２％の量のリン、及び約０．０３％〜約０．２％の量のナトリウムを含む湿潤餌料を含む。この態様によれば、「給餌」基準で、湿潤餌料のタンパク質含量は、約５％〜約１１％、又は約６％〜約９％であってよく；リン含量は、約０．０５％〜約０．１５％、又は約０．０８％〜約０．１％であってよく；及び／又は、ナトリウム含量は、約０．０５％〜約０．１５％、又は約０．０８％〜約０．１％であってよい。
【００２８】
場合によっては、餌料は、タンパク質、リン、及びナトリウム以外の栄養素に関して改変することができる。例えば、餌料に、ポリ不飽和脂肪酸、より好ましくはω−３脂肪酸、例えばドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）及び／又はエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を補給することができる。多くの他のかかる改変は、当業者に公知である。
【００２９】
栄養所要量は、例えばｇ／ＭＪ又はｇ／１００ｋｃａｌで、餌料の代謝エネルギー（ＭＥ）含量に関連して表現することができる。本明細書においては、タンパク質は、他に示さない限りにおいて、全粗タンパク質として表す。本明細書において、組成に関するパーセントは、他に特に示さない限りにおいて、「乾燥物質」基準で表す。
【００３０】
更なる方法は、所定の期間、ネコに対して１以上の腎臓薬を投与しながら、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えることを含む。通常、健康管理の専門家、例えば医師及び獣医師が、ネコの腎臓病を診断し、疾病を治療するための腎臓薬（ネコの腎臓病を予防又は治療するのに有用な任意の薬剤）を処方する。症状が治まり、疾病が治癒されたと認められるまでネコに腎臓薬を投与するか、或いは慢性腎臓病に関しては投与を無期限に継続する。本発明においては、タンパク質、リン、及びナトリウムの減少したレベルを有する餌料をネコに与え、ネコに対して疾病を治療するための腎臓薬を投与する。本発明において有用な腎臓薬は、腎臓病と闘うのに有用であることが当業者に公知の任意の腎臓薬である。好ましい薬剤としては、米国特許６，５８９，７４８に記載されているもののようなリソソーム活性化化合物、米国特許６，７８４，１５９に記載されているもののようなトリテルペンサポニン、米国特許６，５５９，８７６及び米国特許出願２００２００２８７６２に記載されているもののようなアクチビン阻害薬、米国特許６，４９２，３２５に記載されているもののようなインテグリン受容体阻害薬及びＴＧＦ阻害薬、米国特許６，４５８，７６７に記載されているもののようなＴＧＦ活性化阻害薬、及び米国特許５，７２３，４４１に記載されているインスリン様成長因子（ＩＧＦ）が挙げられる。最も好ましい薬剤としては、変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンドロゲン、エリスロポイテン、及びカルシトリオールが挙げられる。アンギオテンシン及びエンドセリンは、進行性腎損傷に寄与する特異的な腎臓内効果を有する強力な全身血管収縮剤である。これらの血管収縮剤の効果を緩和するために種々の腎臓薬を用いる。アンギオテンシン変換酵素阻害薬（エナラプリル−Ｅｎａｃａｒｄ及びＶａｓｏｔｅｃ、並びにベナゼプリル−Ｌｏｔｅｎｓｉｎ）は、タンパク尿症の重篤度を低め、腎不全の進行を遅延するために用いられてきた。ＡＣＥ阻害薬であるエナラプリル（Ｅｎａｃａｒｄ、Ｖａｓｏｔｅｃ）は、糸球体及び全身高血圧症、タンパク尿症、並びに、糸球体及び尿細管質病変を抑止する。アンギオテンシン遮断薬及びエンドセリン阻害薬は、腎臓病において有益な効果を有する。血管ペプチド阻害薬は、ＡＣＥと、ナトリウム利尿性ペプチド、アドレノメデュリン、及びブラジキニンの分解に関係する酵素である中性エンドペプチダーゼの両方を阻害する薬剤である。これらの腎臓薬は、アンギオテンシンＩＩの生成を減少し、血管拡張剤の蓄積を増加させる。全身高血圧症を有する腎臓病患者は、アムロジピン（Ｎｏｒｖａｓｃ）のようなカルシウムチャンネル遮断薬に反応する。尿毒症性胃炎（食道炎、胃炎、胃潰瘍、及び胃出血）は、Ｈ２受容体拮抗薬（シメチジン−Ｔａｇａｍｅｔ、ファモチジン−Ｐｅｐｃｉｄ）、プロトンポンプ遮断薬（オメプラゾール−Ｐｒｉｌｏｓｅｃ）、細胞保護薬（ミソプロストール−Ｃｙｔｏｔｅｃ）、及び嘔吐中枢に作用する制吐薬（クロルプロマジン−Ｔｈｏｒａｚｉｎｅ、ペルクロルペラジン−Ｃｏｍｐａｚｉｎｅ、メトクロプラミド−Ｒｅｇｌａｎ）によって治療する。アンドロゲン又はタンパク同化ステロイド（Ｓｔａｎｏｚｏｌ、Ｗｉｎｓｔｒｏｌ−Ｖ）は、慢性腎不全に関係する貧血症の治療において用いられている。組み換えヒト（又は他の種）エリスロポイテン（Ｅｐｏｅｔｉｎ−α、Ｅｐｏｇｅｎ、Ｐｒｏｃｒｉｔ）を用いるホルモン補給療法は、腎不全に関係する重度の貧血症に対する最適の治療である。リン酸塩過剰血症及び二次性腎上皮小体機能亢進症を抑えるために、リン酸塩吸着薬（水酸化アルミニウム−Ａｍｐｈｏｊｅｌ、炭酸アルミニウム−Ｂａｓａｌｊｅｌ）が用いられている。カルシトリオール（１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール）（Ｒｏｃａｌｔｒｏｌ）及びビタミンＤ類似体は、カルシウム独立性の上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）の抑制を引き起こす。リン酸塩吸着薬、カルシトリオール、及び関連する化合物の投与は、慢性腎不全において、ＰＴＨに起因する多臓器毒性を抑制するのに推奨されてきた。カリウム欠乏症及び低カリウム血症は、慢性腎不全を有するネコにおいて通常見られる。カリウムのグルコネート又はサイトレートの形態のカリウムの経口補給が推奨されている。全体的な腎臓薬及び組成物もまた、本発明に包含される。好ましい全体的腎臓薬としては、クランベリーエキス及びマンノースが挙げられる。クランベリーエキスは、腎機能の長期衰退に関する一般的な危険因子である尿路感染症の有病率を減少させると主張されている。腎臓薬としては、通常の小分子薬剤、低分子タンパク質、高分子タンパク質及び高分子、並びに抗体が挙げられ、更に腎臓病を予防するように設計されたワクチンも挙げられる。抗体としては、ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体、並びに、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２のような免疫グロブリンフラグメント、或いは抗原と相互作用して天然の抗体と同じ生物学的機能を行う他の抗原結合性抗体サブシーケンスが挙げられる。腎臓薬は、腎臓薬に関して適当な任意の方法を用いて、腎臓病を治療又は予防するのに十分であることが当業者に知られている量で、ネコに投与する。
【００３１】
更なる態様においては、本発明は、単一の包装内の別々の容器内に、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに餌料を与えるのに好適な餌料組成物、及び１以上の腎臓薬を含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用なキットを提供する。
【００３２】
他の態様においては、このキットは、別の包装内に、ネコにおいて腎機能を測定し腎臓病の存在及び重篤度を診断するための１以上の腎臓診断具を更に含む。本発明において有用な腎臓診断具としては、ネコにおいて腎機能を測定し腎臓病の存在及び重篤度を診断するのに好適な任意の器具が挙げられる。好ましい診断方法としては、血清尿素窒素（ＳＵＮ）、クレアチニンレベル、尿比重、及びＤＮＡ損傷、例えば米国特許６，５８９，７４８、米国特許６，４４７，９８９、及び米国特許出願２００５００２６２２５に記載されているもののようなアルブミンに関する尿分析、及びコメット痕跡分析が挙げられる。診断方法は、（１）上昇した血中尿素窒素濃度、上昇した血清クレアチニン濃度、高ホスファターゼ血症、高カリウム血症又は低カリウム血症、代謝性アシドーシス、及び低アルブミン血症のような血液マーカー、（２）尿濃縮能障害、タンパク尿症、円柱尿、腎性血尿症、不適切な尿ｐＨ、不適切な尿グルコース濃度、及びシスチン尿症のような尿マーカー、（３）寸法、形状、局在部位、及び密度のような身体的、造影的、及び診断的マーカー、（４）ＷＯ ２００４１１３５７０−Ａ２において開示されているもののような一塩基変異多型（ＳＮＰ）、（５）腎臓病の指標である遺伝子プロファイル、（６）腎臓病の指標であるプロテオームプロファイル、及び（７）腎臓病の指標である代謝プロファイルをはじめとする公知の技術に基づく。これらの診断方法及びかかる方法に基づく器具（例えば、試験片、ＥＬＩＳＡ分析、コメット分析）は、通常、科学者及び健康管理の専門家のような当業者が利用することができ、多くのものは消費者が利用することができる。例えば、Ｈｅｓｋａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｆｏｒｔ Ｃｏｌｌｉｎｓ Ｃｏｌｏｒａｄｏ）のＥ．Ｒ．Ｄ．−ＨｅａｌｔｈＳｃｒｅｅｎ Ｕｒｉｎｅ Ｔｅｓｔｓは尿中の少量のアルブミン（微量アルブミン尿）を検出する。
【００３３】
一態様においては、腎臓病の存在又は進行に関して定期的な診断評価を行う。かかる診断評価の結果に基づいて、餌料及び／又は腎臓薬の投与量又は処方計画を調節することができる。診断評価は、血液マーカー（例えば、上昇した血清尿素窒素濃度、上昇した血清クレアチニン濃度、高ホスファターゼ血症、高カリウム血症、低カリウム血症、代謝性アシドーシス、低アルブミン血症など）、尿マーカー（例えば、尿濃縮能障害、タンパク尿症、円柱尿、腎性血尿症、不適切な尿ｐＨ、不適切な尿グルコース濃度、シスチン尿症など）、身体的観察及び測定、造影、ＳＮＰ、遺伝子プロファイル、プロテオームプロファイル、及び代謝プロファイルから独立して選択される１以上の基準に基づくことができ、１以上の腎臓診断具を用いて測定することができる。
【００３４】
更なる態様においては、本発明は、単一の包装内の別々の容器内に、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えるのに好適な餌料組成物、及び１以上の腎臓診断具を含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用なキットを提供する。
【００３５】
このキットは、更に、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、又はネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるために、本発明の方法及びキットを使用することに関する情報又はそのための指示を含む。
【００３６】
他の態様においては、本発明は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、及びネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるために、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を用いることに関する情報又はそのための指示を伝達するための手段を提供する。他の態様においては、本発明は、更に、腎臓病を予防又は治療するための腎臓薬と組み合わせて餌料を用いることに関する情報又はそのための指示を提供する。他の態様においては、本発明は、更に、本発明の腎臓診断具を用いることに関する情報又はそのための指示を提供する。伝達手段は、情報又は指示を含む文書、デジタル保存媒体、光学保存媒体、音声表示、又は画像表示を含む。好ましくは、伝達手段は、かかる情報又は指示を含む、表示されたウエブサイト又はカタログ、製品ラベル、添付文書、広告、又は画像表示である。有用な情報としては、（１）餌料と腎臓薬とを組み合わせるための方法及び技術、（２）腎臓診断具を用いるための情報、（３）存在する場合には本発明を他の薬剤と組み合わせて用いることに起因する副作用に関する詳細、（４）ネコの飼い主が本発明及びその使用に関する疑問を持っている場合にはネコの飼い主が使用するための連絡先情報の１以上が挙げられる。有用な指示としては、用量、投与量及び頻度、並びに投与経路が挙げられる。伝達手段は、本発明を用いることの利益をネコの飼い主に説明するのに有用である。
【００３７】
この方法及びキットは、腎不全又は腎臓病に罹病しやすいか又はそれを患っているネコに関する罹病率及び死亡率を減少し、したがってネコの寿命を延長するのに有用である。
【実施例】
【００３８】
本発明は、その好ましい態様の以下の実施例によって更に説明することができるが、これらの実施例は例示の目的のためのみに包含されるものであり、他に特に示さない限りにおいて本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００３９】
実施例１
軽度〜中等度の自発性ＣＲＦを有するネコにおける尿毒症の発症率及び死亡率を最小にすることにおいて、腎臓餌料（タンパク質、リン、及びナトリウムの組成を改変した）と成猫の維持餌料とを比較するために研究を行った。尿毒症クリーゼの発現、死亡率及び腎不全の進行に対する食餌療法の効果を調べるために、ＣＲＦを治療するために通常推奨されている食餌改善の組み合わせを含ませた。このタイプのデザインの研究によって、おそらく、個々の餌料成分の治療効力を単独に研究する一連の臨床試験よりも、より有益で有効な評価が与えられるであろう。更に、食餌の改善の組み合わせを研究することは、種々の餌料成分の総合的な相互作用の評価を包含する。本実施例において、「餌料」という用語は、成猫に対して給餌する餌料を意味し、ネコによって消費される餌料の全体を必ずしも表すものではない。
【００４０】
材料及び方法
ネコの選択：地域の獣医師に研究の説明を送付して照会を求めることによって、ミネアポリスのセントポール地域から４５匹のネコを募集した。また、医療記録の調査及び飼い主への直接の接触を用いて、ミネソタ大学獣医医療センターの患者集団からもネコを募集した。ネコは、１歳よりも大きく、少なくとも４週間の期間の腎臓病に相応する病歴を有している場合に、登録を検討した。最初のスクリーニング往診の間に、規定の病歴、身体検査、間接血圧測定、及び血清クレアチニン濃度の測定によって患者を診断した。血清クレアチニン濃度が２．１〜４．５ｍｇ／ｄＬであり、腎前性窒素血症の徴候がない場合に、患者を７〜２１日後に再診断した。この時点で、血清クレアチニン濃度が最初の値から＞２０％増加又は減少しておらず、２．１〜４．５ｍｇ／ｄＬで維持されていた場合に、患者を研究のために仮登録した。
【００４１】
仮採用の後、ネコを、病歴、身体検査、全血球計算、血清生化学プロファイル、尿検査、間接血圧測定、腹部Ｘ線調査、血清Ｔ４濃度、及びネコ白血病ウィルス（ＦｅＬＶ）及びネコ免疫不全ウィルス（ＦＩＶ）に関するＥＬＩＳＡ試験の結果に基づいて再診断した。次に、表１に示す全ての試験対象／非対象基準を満足するネコに、表２に示す配合餌料を６週間給餌した。
【００４２】
【表１】
【００４３】
【表２】
【００４４】
６週間の終了時において、７品種（３０匹のドメスティック・ショートヘア、７匹のドメスティック・ロングヘア、４匹のシャム、１匹のメイン・クーン、１匹のバーマン、１匹のヒマラヤン）で２．４７〜７．６５ｋｇ（平均４．２７（１．０８ｋｇ））の範囲の体重の４５匹のネコが、全ての試験対象／非対象基準を満足した。これらに対して、無作為に腎臓餌料又は維持餌料を割り当てた。
【００４５】
餌料：本研究は、表３に示すように、通常の成猫の乾燥及び湿潤維持餌料を、特にネコの慢性腎臓病の治療のために設計した乾燥及び湿潤餌料（腎臓餌料）と比較するようにデザインした。
【００４６】
【表３】
【００４７】
いずれの餌料も、ＡＡＦＣＯ給餌試験（腎臓餌料）によって実証されるように、又は成猫に関する最小のＡＡＦＣＯ栄養素プロファイル（維持餌料）を超えることによって、成猫の維持のために完全でバランスのとれた栄養素を与えた。それぞれの餌料の消化率は、成分消化率試験に基づいた。タンパク質の消化率は、腎臓餌料に関しては７８．８％（乾燥）及び７７．３％（湿潤）であり、維持餌料に関しては８３．４％（乾燥）及び８２．５％（湿潤）であった。腎臓餌料の主要な特徴は、維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムの量であった。腎臓餌料にはω−３ポリ不飽和脂肪酸を補給し、一方、維持餌料には補給しなかった。
【００４８】
給餌プロトコル：研究のための資格を与えた後、全てのネコを、腎臓餌料及び維持餌料の平均の栄養素を示すように配合した配合餌料（表２）に６週間順応させた。目標は、標準的な餌料の消費量を徐々に減少し、一方、配合餌料の量を増加して、ネコが、研究餌料に無作為に割り当てられる前に３週間の間少なくとも８０％の配合餌料を消費するようにすることであった。ネコにこの配合餌料を給餌して、この研究に参加する前に飼い主によって給餌されていた異なる餌料の消費に関係する変動性を最小にした。また、この方法は、腎臓餌料又は維持餌料の群に無作為に分ける時点での餌料成分における突然の変化を最小にするためにも選択された。研究を通して、飼い主に、研究に参加する前に用いていた給餌方法（自由摂食又は周期給餌）を継続するように求めた。飼い主に、体重及び身体検査の経時的診断に基づく最適の栄養素を維持するのに十分な量の餌料を与えるように指示した。自由摂食給餌は、式：１．５（３０×ＢＷ（ｋｇ）＋７０）＝ＣＲ（ｋｃａｌ／日）（式中、ＢＷは体重であり、ＣＲはカロリー必要量である）によって決定される一日のカロリー必要量に基づく所定の餌料量に制限した。
【００４９】
印刷物を用いて、飼い主に、消費した研究餌料の量を監視し、消費した全ての他の餌料の量及び種類を記録することを求めた。飼い主に、体重が減少した場合には、患者に与える餌料の量を増加するように求めた。一部のネコにおいては、餌料を加温することによるか、或いは香味添加剤（希釈チキンブロス、希釈マグロ体液等）を用いることによって、餌料の摂取量を向上させた。
【００５０】
研究計画：無作為抽出二重盲式比較臨床試験を行った。全ての対象／非対象基準を満足するネコの飼い主に、インフォームド・コンセントの書類を精査してサインすることを求めた。次に、６週間かけて全てのネコを配合餌料に順応させた。６週間の後であって、維持餌料又は腎臓餌料に無作為に割り当てる直前に、表４に示す、規定の病経過、身体検査、ボディ・コンディション・スコア、拡張血清生化学パネル（即ち、血清尿素窒素、クレアチニン、グルコース、無機リン、カルシウム、ナトリウム、カリウム、塩化物、全ＣＯ２、アルブミン、全ビリルビン及び全タンパク質濃度、並びに血清アミラーゼ、アラニントランスアミナーゼ及びアルカリ性ホスファターゼ活性）、全血球計算、静脈血ガス、尿検査、好気性菌に関する定量的尿培養、間接血圧測定、血清イオン化カルシウム及び血清上皮小体ホルモン濃度を用いることによって、それぞれのネコを診断した。これらの分析物の全てを臨床試験を通して診断したが、腎不全に関係する分析物（血清クレアチニン、尿素窒素、リン、全カルシウム、イオン化カルシウム、上皮小体ホルモン、全ＣＯ２、及びアルブミン濃度）のみを、二つの餌料群の間で比較した。
【００５１】
【表４】
【００５２】
１：１の比のブロック無作為化（８ブロック）を用いて、ネコを腎臓餌料又は維持餌料のいずれかに割り当てた。割り当ては、密封した連番付き封筒によって行った。コード化した同一の包装材料を用いることによって、研究の二重盲性を保持した。
【００５３】
腎臓餌料又は維持餌料のいずれかに割り当てた１月後、経過、身体検査、間接血圧、限られた血清生化学プロファイル（血清尿素窒素、クレアチニン、カリウム、及び全ＣＯ２濃度）、ＰＣＶ、及び全血漿固形分濃度の測定によって、それぞれのネコの状態を診断した。
【００５４】
３月の間隔、或いは尿毒症クリーゼを示す徴候が発現した際に、ネコを診断するように計画した。計画にない診断を、飼い主の要求によって行った。０月、６月、１２月、１８月、及び２４月での計画された往診の間に、規定の病経過、身体検査、眼底検査、ボディ・コンディション・スコア、拡張血清生化学パネル、血清イオン化カルシウム及び上皮小体ホルモン濃度、全血球計算、静脈血ガス、尿検査、好気性菌に関する定量的尿培養、並びに間接血圧測定によって、それぞれのネコを診断した。３月、９月、１５月、及び２１月においては、上記のプロトコルを行ったが、静脈血ガス分析、血清イオン化カルシウム及び血清上皮小体ホルモン濃度は診断しなかった。
【００５５】
コンプライアンスを高め、現地での診断が計画されていなかった時に医学的な問題がなかったかを突き止めるために、依頼人に対する電話での面談を月１回行った。同じ獣医学の専門家が全ての電話面談を行った。依頼人には、割り当てられた餌料に加えた全ての餌料を含む各日に摂取した餌料の量を記録するように求めた。
【００５６】
血液の採取及び分析
飼い主に、計画された診断の８〜１２時間前には餌料を控えるように指示した。それぞれの往診の間に、頸静脈穿刺によって血液試料を採取した。標準的な手順によって血清を３０分以内に回収した。生化学プロファイルのための血清を同じ日に処理できない場合には、遠心分離した血液から得た血清を４℃で保存して、次の日に診断した。０月、６月、１２月、１８月、及び２４月に計画された往診の間に、それぞれの採取からの血清のアリコートを凍結（−７０℃）し、ＰＴＨ及びイオン化カルシウム濃度の測定のために保存した。更に、静脈血のアリコートをヘパリン化血ガスシリンジ内に採取し、２０分以内にｐＨ及び重炭酸塩濃度に関して分析した。
【００５７】
尿の採取及び分析：膀胱穿刺によって尿を採取した。尿比重測定のための屈折計、化学的測定のための市販の試薬片、及び沈殿物評価のための標準的な技術を用いて、尿検査を行った。全ての尿試料について、好気性菌に関する定量的な尿培養を行った。尿タンパク質濃度は、クマシー・ブリリアントブルー染料沈殿及び分光測光法によって測定した。尿クレアチニン濃度は、自動分析装置に基づく動的ヤッフェ反応によって測定した。タンパク質及びクレアチニンの測定のための尿試料は４℃で保存し、採取の２４時間以内に分析した。
【００５８】
血圧測定：全ての血圧測定は、研究中に他の手順のために用いない専用の部屋で行った。標準的な方法を用いた超音波ドップラーモニターを用いることによって、収縮期血圧の測定値を得た。
【００５９】
患者の治療：餌料を除いて、慢性腎不全を治療するのに用いたプロトコルは、全てのネコに関して同じであった。同様に、非尿毒症性事象を治療するのに同じプロトコルを用いた。
【００６０】
低カリウム血症：本研究においては、９匹（２０％）のネコが、少なくとも一回の往診において低カリウム血症（血清カリウムが＜３．７ミリモル／Ｌ）であった。これらのネコの５匹（３匹は腎臓餌料、２匹は維持餌料）は、餌料の割り当て時においては軽度の低カリウム血症であった。治療を控え、餌料の割り当ての１月後に血清カリウム濃度を再診断して、新しい餌料がこれらのネコの血清カリウム濃度に影響を与えたかどうかを調べた。この時点において、５匹全てのネコにおいて低カリウム血症が軽快した。残りの４匹のネコのうちの２匹は、１２時間毎に４０〜７５ｍｇ／ｋｇの用量でクエン酸カリウムを経口投与し、必要に応じて継続して、それらの血清カリウムを≧３．７ミリモル／Ｌに維持することによって治療した。他の２匹のネコは、進行性新生物腫瘍に続発する栄養不良状態と同時に低カリウム血症を発現した。
【００６１】
高血圧症：７匹のネコ（５匹は腎臓餌料、２匹は維持餌料）が、２年の研究期間の間に高血圧症を発現した。本研究においては、治療的介入の目的で、ネコは、その収縮期血圧が２週間の期間の間の３回の連続する往診において＞１７５ｍｍＨｇであったか、高血圧性網膜症の徴候が＞１７５ｍｍＨｇの収縮期血圧に付随して起こったか、或いはその収縮期血圧が２００ｍｍＨｇを超えた場合に、高血圧症であると考察した。治療が必要な全てのネコを、一日一回の０．６２５ｍｇ／ネコのベシル酸アムロジピンの経口投与によって治療した。治療に対する反応を、治療の７日〜１４日後に調べた。全てのネコにおいて用量の調節は必要なかった。
【００６２】
尿路感染症：本研究の間に、腎臓餌料を給餌した２匹のネコのそれぞれにおいて尿路感染症（ＵＴＩ）が認められた。ＵＴＩの早期発現は、抗生物質感受性試験によって決定された適当な抗生物質を用いて２１日間治療した。尿検査及び定量的細菌尿培養によって、治療に対する反応を評価した。尿培養追試験によって再感染が認められ、これは適当な抗生物質を用いて最短で６週間治療した。
【００６３】
代謝アシドーシス：＜１１．０ミリモル／Ｌの血清ＴＣＯ２濃度を有する全てのネコは、静脈血ガス分析によって更に診断した。代謝アシドーシスを治療するかどうかの決断は、血中重炭酸塩濃度に基づいた。＜１５．０ミリモル／Ｌの静脈血中ＨＣＯ３濃度を有する１１匹のネコ（２匹が腎臓餌料、１０匹が維持餌料）は、血中ＨＣＯ３濃度を１５〜２４ミリモル／Ｌの間に維持することを目標として、クエン酸カリウム（１２時間毎に４０〜７５ｍｇ／ｋｇを経口投与）によって治療した。治療を開始して１０〜１４日後に静脈血中ＨＣＯ３濃度を測定することによって、治療に対する反応を調べた。
【００６４】
高リン血症：研究中に、５匹のネコ（２匹は腎臓餌料、３匹は維持餌料）において、高リン血症（血清リン濃度が＞６．０ｍｇ／ｄＬ）が認められた。これらの中で、１匹のネコ（維持餌料を給餌）は、餌料の割り当て時において上昇したリン濃度を有していた。経口リン結合薬によるこのネコの治療は控えて、割り当てられた餌料が血清リン濃度に影響を与えるかを調べた。餌料の割り当ての１月後に、血清リン濃度は通常の範囲に戻った。他の４匹のネコにおいては、血清リン濃度を＜６ｍｇ／ｄＬに維持するために、水酸化アルミニウムを経口投与（１２時間毎に５０〜９０ｍｇ／ｋｇを経口投与）した。
【００６５】
尿毒症クリーゼの診断：研究の主要評価項目である尿毒症の診断を、餌料の経過を知らず、患者の治療に携わっていない二人の臨床医学者によって行った。尿毒症クリーゼの診断は、以下の三つの基準の全てが明確であった場合に確定した。（１）運動低下、不活発、拒食、嘔吐、輸尿口臭、又は尿毒症性口内炎の徴候をはじめとする尿毒症に関係する少なくとも二つの臨床徴候を飼い主が観察すること、（２）患者に症状がない時点で所定値よりも少なくとも２０％大きい血清クレアチニン濃度、（３）病経過及び身体検査、血清化学プロファイル、全血球計算、尿検査、腹部Ｘ線検査、及び間接血圧測定によって測定されるこれらの臨床徴候に関するもっともな他の病症がないこと。
【００６６】
１匹のネコにおいて、腎外要因によって尿毒症の事象が誘発されたことが明白に認められた。このネコは、冬期の数日間、餌料又は水を与えられずに屋外に放置されていた。非経口で乳酸加リンゲル液を与えるによって脱水状態を治した後は、血清クレアチニン濃度はクリーゼ前のレベルに戻った。このネコは、研究に残した。
【００６７】
尿毒症クリーゼの後の患者の治療：研究の主要評価項目（例えば尿毒症クリーゼ）に到達したネコは、非経口液及び他の適当な医療ケアによって治療したが、研究には戻さなかった。しかしながら、維持餌料を予め給餌した全てのネコを含む、尿毒症クリーゼが発現した後の全てのネコに、市販の腎臓餌料を給餌した。２匹のネコは尿毒症クリーゼの発症の３０日以内に死亡し、３匹のネコは尿毒症クリーゼの後に３０日以上生存した。この臨床試験において用いた分析のタイプ（即ち包括解析）のために、全ての生存したネコは、死亡するまでか、或いは、それらが最初に無作為に割り当てられた餌料群に属するように研究が完了するまで、診断した。
【００６８】
罹病率又は死亡率の原因の確定：病経過、身体検査、実験室結果、尿毒症クリーゼを定義する客観的な基準（上記の「尿毒症クリーゼの診断」を参照）、及び入手できる場合には剖検結果に基づいて、死亡又は尿毒症クリーゼの原因を次のように分類した。（１）明らかに腎性ではない、（２）場合によっては腎性である、（３）おそらくは腎性である、（４）明らかに腎性である。カテゴリー１又は２に分類された患者の死亡又は尿毒症クリーゼは、腎臓に関係しない死亡とした。カテゴリー３又は４に分類された患者の死亡は、本研究の主要評価項目である腎臓に関係した死亡又は尿毒症クリーゼとした。
【００６９】
剖検に関する飼い主の承諾は、研究中に死亡した全てのネコについて求めた。全体的な解剖検査が完了した後に、組織試料を採取し、１０％ホルマリン中に保存した。パラフィン包埋した組織を４μｍの切片とし、ヘマトキシリン及びエオシンで染色し、光学顕微鏡によって検査した。
【００７０】
統計分析：マン・ホイットニーノンパラメトリック検定を用いることによって、臨床的な特徴を二つの食餌群の間で比較した。研究プロトコルによって患者を定期的な間隔で診断したので（全ての患者をそれぞれの間隔で測定してはいないが）、分散の被験者間／被験者内混合分析（ＡＮＯＶＡ）を用いて、時間又は餌料に関して大きな主作用があったか、及び二つの変数の間の相互作用（時間対餌料）が大きかったかを調べた。この分析は、また、分割実験型ＡＮＯＶＡとも称され、これによって、観察結果の間の相関を計上しながら、全てのデータを用いて依存性応答変数を評価することが可能になった。殆どの動物は１２月及び２４月の期間において応答を有していたので、反復測定ＡＮＯＶＡを用いて、１２月及び２４月の時間間隔についての、生化学的、生理学的、及び生活の質の測定値に関する餌料群の間の平均的な差を評価した。反復測定分析は、反復観察の間の相関を的確に計上する。全てのデータに関する統計的有意性は、Ｐ＜０．０５に設定した。
【００７１】
ログランク（マンテル・コックス）によるカプラン・メイヤー生存曲線を用いて、両方の群における尿毒症クリーゼの発現及び死亡の比率を比較した。更に、コックス比例ハザード回帰モデルを用いて、尿毒症クリーゼの発現の相対危険率（ＲＲ）に対する餌料の効果を評価した。同じモデルを用いて、腎臓餌料群対維持餌料群での尿毒症クリーゼの発現に対する共変量（収縮期血圧、尿タンパク質：クレアチニン比及び血清クレアチニン、リン、全ＣＯ２濃度）の効果を評価した。相対危険率減少（ＲＲＲ）は、［１−ＲＲ］×１００％をコンピュータで算出することによって算出した。
【００７２】
患者の臨床的特徴：４５匹のネコは、全ての適格性基準を満足しており、研究のために容認された。２２匹のネコから構成される治療群に腎臓餌料を給餌し、一方、２３匹のネコから構成される対照群に維持餌料を給餌した。１４匹の去勢されたオスは維持餌料群に属し、８匹は腎臓餌料群に属した。９匹の卵巣除去されたメスは維持餌料群に属し、１４匹は腎臓餌料群に属した。
【００７３】
餌料の割り当て時においては、表５ａに示すように、二つの群の全臨床的特徴（年齢、体重、ボディ・コンディション・スコア、収縮期血圧）又は血液学的特徴における統計的な差はなかった。
【００７４】
【表５ａ】
【００７５】
全血球計算（ＣＢＣ）及び血清生化学分析に関する平均値は、血清尿素窒素、クレアチニン、血中ＨＣＯ３、血液ｐＨ、及び血清上皮小体ホルモン濃度を除いて、それぞれの群について、ミネソタ大学獣医医療センターの基準範囲内であった。二つの例外を除き、血清、尿、及び血液の生化学測定値において、二つの餌料群の間に大きな差はなかった。腎臓餌料群においては、維持餌料群（Ｐ＝０．００７）と比較して極めて高い血中ＨＣＯ３濃度が観察された。しかしながら、両方の群における平均血中ＨＣＯ３濃度は、基準範囲内であった。維持餌料群においては、腎臓餌料群（Ｐ＝０．００９）と比較して極めて高い血清尿素窒素濃度が観察された。しかしながら、両方の群における平均血清クレアチニン濃度の上昇度合いにおいては、差はなかった。
【００７６】
ＦＩＶ及びＦｅＬＶに関するＥＬＩＳＡ試験の結果は、餌料の割り当て時においては４５匹のネコ全てに関して陰性であった。同様に、血清甲状腺ホルモン濃度に関するＲＩＡ試験の結果は、餌料の割り当て時においては４５匹のネコ全てに関して通常範囲（２〜４μｇ／ｄＬ）内であった。
【００７７】
餌料と血清生化学値との間の関連性：二つの群の生化学的及び臨床的特徴（収縮期血圧、体重、及びボディ・コンディション・スコア）を、餌料の割り当ての３、６、９、１２、１５、１８、２１、及び２４月後において比較し、一つにまとめて、それぞれ表５ｂ及び５ｃに示すように、１２月まで及び１２〜２４月の期間中の全体平均値を誘導した。
【００７８】
【表５ｂ】
【００７９】
【表５ｃ】
【００８０】
１２月及び２４月の期間中、腎臓餌料群においては、血清尿素窒素濃度は非常により低く、血中重炭酸塩濃度は非常により高かった。１２月及び２４月の期間中、腎臓餌料群においては、血清塩化物及び全タンパク質濃度は非常により低かったが、それぞれの群に関する実験室基準範囲内にとどまった。１２月の期間中、腎臓餌料群においては血清リン濃度は非常により低かったが、２４月の期間中においては二つの群の間に差はなかった。血清クレアチニン、アルブミン、コレステロール、ナトリウム、カリウム、カルシウム、イオン化カルシウム、又はＰＴＨ濃度においては、大きな差は認められなかった。同様に、収縮期血圧、体重、又は尿タンパク質クレアチニン比には差はなかった。
【００８１】
餌料と尿毒症クリーゼとの間の関連性：本研究の終了時において、腎臓餌料群のネコのいずれも、維持餌料群のネコの２２％（５匹）と比較して、尿毒症クリーゼを発現しなかった（表６）。腎臓餌料を給餌することが、維持餌料を給餌することと比較して、９９．９％のＲＲＲと関係していた。尿毒症クリーゼの発現に対する共変数（血圧、血清クレアチニン濃度）の影響を調節することによって、腎臓餌料群におけるＲＲが維持餌料群と比較して大きく減少したままであったことが示された。
【００８２】
【表６】
【００８３】
尿毒症クリーゼを有する５匹のネコの中で、２匹は治療に殆ど反応せず、飼い主の要求によりクリーゼの発症の数日以内に安楽死させた。残りの３匹のネコは、クリーゼの１０、１１、及び２０月後に安楽死させた。
【００８４】
餌料と死亡との間の関連性：カプラン・メイヤー分析によって、腎臓に関係する死亡率及び全ての原因からの死亡率における、腎臓餌料群及び維持餌料群の間の大きな差が示された（表６）。腎臓病に関係する死亡率に対する餌料を影響を評価すると、腎臓餌料群においては、維持餌料群と比較して９９．９％のＲＲＲが認められた。本研究の終了時において、維持餌料群におけるネコの１７．４％（４匹）が腎臓の原因によって死亡し、腎臓餌料群においては腎臓による死亡はなかった。腎臓餌料群における死亡又は安楽死の腎臓以外の原因には、ネコ伝染性腹膜炎（１匹）、車に轢かれる（１匹）、及び腎臓癌肉腫（１匹）が含まれていた。維持餌料群においては、腎臓以外の死亡の原因には、脾臓円形細胞新生物腫瘍／汎血球減少症（１匹）、全身性肥満細胞腫瘍（１匹）、リンパ肉腫（２匹）、及び断定されず（１匹）が含まれていた。死亡の腎臓以外の原因は、腎臓餌料群（１３．６％）と維持餌料群（２１．７％）との間で大きくは異なっていなかった。
【００８５】
コックス比例ハザードモデルを用いることによって全ての原因による死亡に対する餌料の影響を評価すると、腎臓餌料群においては、維持餌料群と比較して４５．０％のＲＲＲが認められた。本研究の終了時までに、腎臓餌料群のネコの１３．６％（３匹）が死亡した。同じ期間中において、維持餌料群に割り当てられたネコの３９．１％（９匹）が死亡した。
【００８６】
２年の研究期間の間に死亡した１２匹（腎臓餌料３匹、維持餌料９匹）のネコの８匹（腎臓餌料１匹、維持餌料７匹）に関して剖検結果を入手することができた。剖検結果を入手することができた腎臓餌料を給餌した１匹のネコは、腎臓組織の殆どを破壊した転移性腎臓癌肉腫のために安楽死させた。維持餌料を給餌したネコに関して入手することができた７つの剖検結果の中で、３つは尿毒症クリーゼを発現したネコからのものであった。この３匹のネコの全てにおいて、腎臓の顕微鏡観察によって、著しい間質性線維症を伴う著しいリンパ形質細胞性腎炎が認められた。剖検報告を入手することができた維持餌料を給餌した他の４匹のネコの腎臓においても、同様の損傷が認められた。これらの４匹のネコは全て、進行した新生物腫瘍のために安楽死させた。
【００８７】
慢性腎臓病の進行：血清クレアチニン濃度は研究の開始時においては大きく異なってはおらず、維持餌料群における血清クレアチニンの相互減少の大きさは、腎臓餌料群のものとは大きくは異なっていなかった。
【００８８】
議論：本試験の結果は、腎不全の治療用に特に設計された餌料（腎臓餌料）を給餌することは、非タンパク質性で非高血圧性で高窒素血症性の自発性ＣＲＦを有するネコにおける尿毒症の発現率及び死亡率を最小にする上で、成猫の維持餌料（維持餌料）よりも優れているという結論を支持する。維持餌料を給餌した２３匹のネコにおいては５匹の尿毒症の発症（２１．７％）及び４匹の腎臓に関係する死亡（１７．４％）があったのに対して、腎臓餌料を給餌した２２匹のネコにおいては尿毒症の発症又は腎臓に関係する死亡は起こらなかった。本発明者らの研究において観察された腎臓餌料の有益な効果は、自発性ＣＲＦを有するネコの他の食餌臨床試験において報告されたものと同様である。これまでに報告した研究においては、タンパク質及びリンを制限した餌料を給餌した２９匹のネコにおける腎臓に関係する死亡率は、制限しない餌料を給餌した２１匹のネコにおける５２％の死亡率と比較して、約３３％であった。
【００８９】
自発性ＣＲＦを有するネコにおける食餌療法介入の時期に関する基準は、これまでは経験的観察に基づいていた。現在のところ、尿毒症の臨床的徴候が高窒素血症を伴って起こった場合に、タンパク質及びリンの制限などの食餌の改善が有益であることは、殆ど議論されていない。しかしながら、臨床的に安定なＣＲＦを有するネコにおいて食餌療法介入がいつ必要であるかについては、一般的な意見の一致はない。
【００９０】
本研究の結果は、腎臓餌料が、早期のネコＣＲＦ（血清クレアチニン濃度が＞２．０ｍｇ／ｄＬ）の治療に有益であったことを示す。本明細書において示すデータは、血清クレアチニン濃度が２．０ｍｇ／ｄＬを超えた際に食餌療法介入を行うことを支持している。
【００９１】
血清クレアチニン濃度における漸増によって示される糸球体濾過率（ＧＦＲ）の緩徐進行性低下は、本研究のネコにおいては特徴的な所見ではなかった。尿毒症クリーゼを発現した５匹のネコにおいては、３〜２１月の期間の安定な血清クレアチニン濃度の後に、血清クレアチニン濃度における急激な上昇（４３〜３７１％）が起こった。５匹の全てのネコにおいて、血清クレアチニン濃度における急激な上昇は、尿毒症に特有の臨床的徴候（即ち、嘔吐、拒食、脱水、及び運動低下）の出現と同時期に起こっていた。尿毒症クリーゼを発現した５匹のネコの病経過、身体検査、ＣＢＣ、尿検査、及び血清生化学プロファイルの計画された３月ごとの診断中に得られた結果のレトロスペクティブ分析によれば、尿毒症クリーゼを発現しなかった４０匹のネコの３月ごとの診断中に得られた結果との差は示されなかった。本発明者らの研究の結果は、腎臓餌料によって尿毒症クリーゼ及び死亡が予防又は遅延されたことを示しているので、軽度のＣＲＦ（血清クレアチニン濃度が＞２．０ｍｇ／ｄＬ）を有する全てのネコに腎臓餌料を開始することが推奨される。
【００９２】
尿毒症クリーゼを発現した維持餌料群の５匹のネコを除いて、研究に参加させてから１８〜２４月の間には、腎臓餌料又は維持餌料を給餌したネコの血清クレアチニン濃度における大きな差は観察されなかった。維持餌料を給餌した１８匹のネコは研究の１８〜２４月の期間の間に尿毒症クリーゼを発現しなかったので、代わりの選択肢は、尿毒症クリーゼを発症した後に腎臓餌料による治療を開始するというものであろう。しかしながら、尿毒症クリーゼを発現した維持餌料群の５匹のネコのうちの３匹しか生存しなかった。更に、尿毒症クリーゼの発症に続いて血清クレアチニン濃度における持続的な上昇が起こった。更に、これらの３匹のネコを研究から外した後、体液、電解質、及び酸−塩基の欠乏及び過剰を最小にするために、経口でのリン酸塩結合剤、クエン酸カリウム、非経口液体、及び製造した腎臓餌料による長期間の支持療法が必要であった。これらの観察結果は、尿毒症クリーゼを発症する前に腎臓餌料によるＣＲＦの治療を開始することが推奨されることを支持する。この研究結果により、尿毒症クリーゼが発現するまでＣＲＦのネコに対して腎臓餌料を控えることは、劣った潤滑作用によってエンジンに対する元に戻せない損傷を引き起こす時点までオイルの品質が低下した後に自動車にモーターオイルを補給することに似ていることが示される。
【００９３】
血清クレアチニン濃度は、通常、ＧＦＲの粗指標として用いられている。単一の血清クレアチニン測定は腎機能の正確な評価を与えないことが示唆されているが、同じ動物において連続的に行われた測定はＧＦＲにおける傾向を定めるのに有用である。尿毒症クリーゼの発症の前に腎臓餌料及び維持餌料のネコにおけるクレアチニンの血清濃度において検出可能な差がないことを、腎機能における変化が起こらなかったことの動かぬ証拠と判断すべきではない。血清クレアチニン濃度とＧＦＲとの間には相互関係が存在し、ＧＦＲが５０％減少すると血清クレアチニン濃度が１００％上昇する。ＧＦＲにおける大きな変化が血清クレアチニン濃度における小さな変化と関連している場合には、血清クレアチニン濃度は、ＣＲＦの早期におけるＧＦＲの減少の特に感受性の低い指標である。例えば、ＧＦＲが５０％減少すると、血清クレアチニン濃度は１．０ｍｇ／ｄＬから２．０ｍｇ／ｄＬにしか上昇しない。ＧＦＲが更に５０％減少すると、血清クレアチニン濃度は２．０から４．０ｍｇ／ｄＬに上昇する。イヌリン・クリアランスの研究を用いてＧＦＲを評価すれば、本研究における二つの餌料群の間の腎機能における差を認めることができた可能性がある。しかしながら、ネコを所有する飼い主に対するイヌリン・クリアランスの研究を行うために必要な技術的困難性、時間、及び血清の容量のために、その使用は本研究からは除外した。
【００９４】
餌料の割り当て時においては、維持餌料群（平均＝１７．４５±３．０７ミリモル／Ｌ）と比較して腎臓餌料群（平均＝１９．７２±２．０３ミリモル／Ｌ）において非常に高い血中重炭酸塩濃度が観察された。アシドーシスは、病態生理学においてネコ、イヌ、及びヒトにおける尿毒症の要因と考えられている。しかしながら、本研究においては、両方の群における平均血中重炭酸塩濃度は、ミネソタ大学獣医医療センターの基準範囲内であった。その後に尿毒症クリーゼを発現した５匹のネコを分析から外した時点においても、二つの群の平均血中重炭酸塩濃度の間の差はベースラインにおいて大きなままであった。
【００９５】
実施例の概要：腎臓餌料（タンパク質、リン、ナトリウム、及び脂質の組成を変更）が、軽度〜中等度の慢性腎不全を有するネコにおける尿毒症の発症率及び死亡率を最小にする点で、成猫の維持餌料よりも優れているかどうかを見出すために、二重マスク化比較無作為臨床試験を設計した。
【００９６】
４５匹の飼い主が所有するネコを、維持餌料又は腎臓餌料に無作為に割り当てて、２４月まで３月毎に診断した。カプラン・メイヤー生存分析を用いて、尿毒症、腎臓に関係する死亡率、及び全ての原因の死亡率を最小にする点で、維持餌料と比較した腎臓餌料の有効性を評価した。
【００９７】
【表７】
【００９８】
１２月及び２４月の間隔の間において、腎臓餌料を給餌した群においては、ベースラインにおいて、血清尿素窒素濃度は非常により低く、血中重炭酸塩濃度は非常により高かった。維持餌料を給餌したネコは、腎臓餌料を給餌したネコ（０％）と比較して、非常に大きな数の尿毒症の発症数（２２％）を有していた。腎臓餌料を給餌したネコにおいては、腎臓に関係する死亡率において大きな減少が観察された。
【００９９】
本研究において評価した腎臓餌料は、軽度〜中等度の自発性慢性腎不全を有するネコにおける尿毒症の発症率及び死亡率を最小にする点で、成猫の維持餌料よりも優れていた。したがって、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延させるのに有用である。
【０１００】
本明細書においては、本発明の代表的な好ましい態様を開示し、特定の用語を用いたが、これらは一般的且つ説明的な意味のみで用いており、特許請求の範囲において示す本発明の範囲を限定する目的で用いてはいない。明らかに、上記の教示事項を考慮して本発明の多くの修正及び変更が可能である。したがって、特許請求の範囲内において、本発明は、特に記載したものとは異なる他の方法で実施することができると理解すべきである。
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年４月２９日出願の米国仮出願Ｎｏ．６０／６７６，６２４、及び２００５年６月２２日出願の米国仮出願Ｎｏ．６０／６９２，７８０（これらの開示事項は参照として本明細書に包含する）に関する優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、一般に、ネコの寿命を延長する方法に関し、特にネコの寿命を延長するために、タンパク質、リン、及びナトリウムの減少したレベルを有する餌料を用いることに関する。
【背景技術】
【０００３】
慢性腎不全（ＣＲＦ）は、中年〜老年のネコにおいてよく起こり、ＣＲＦが発生する頻度は明らかに上昇している。２０００年においては、１０歳以上のネコの間での腎不全の有病率は約２７％であり、１５歳以上のネコの間では約４９％もの高さである。
【０００４】
殆どの動物において、その一生の間に腎機能における進行的な低下が認められる。殆どの動物とは異なり、ネコは、その一生の間に腎機能における大きな低下は認められないが、その代わりに晩年における幾つかの時点でＣＦＲの徴候の急激な発症が認められる。ＣＲＦは、進行的な構造的病変を特徴としており、これにより、腎臓の排泄、生合成、及び調節機能の機能障害が引き起こされる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
食餌改善は、ネコにおける自発性ＣＲＦの外的徴候を最小にするための治療の中心である。しかしながら、明らかに、「腎臓餌料」、即ち自然発生的な腎不全を有するネコに適した食餌管理の長期間有効性、並びに特にネコの長寿性に対するかかる餌料の効果を評価する、無作為抽出され、マスクされ、制御された臨床試験は、報告されていない。したがって、ネコの腎不全及び腎臓病を治療し、したがってネコの寿命を延長するための新規な方法に対する必要性が存在する。
【０００６】
したがって、本発明の目的は、ネコの寿命を延長する方法を提供することである。
本発明の他の目的は、ネコの腎不全の発症を遅延する方法を提供することである。
本発明の更なる目的は、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させることである。
【０００７】
本発明の他の目的は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用な組成物及び器具の組み合わせを含むキットの形態の製品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
これらの及び他の目的は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるための新規な方法を用いて達成される。この方法は、ネコに、標準的な維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む。
【０００９】
本発明の他の及び更なる目的、特徴及び有利性は、当業者には容易に明らかとなるであろう。
「寿命を延長する」という用語は、自然の原因によるか、又は、動物の飼育者又は獣医師の判断で動物についての生活の質が大きく且つ不可逆的に悪化した際の安楽死によるその死亡時の動物の暦年齢を上昇させることを意味する。
【００１０】
「ネコ」という用語は、イエネコ（フェリス・ドメスティカス）及びそれらの野生及び野生化同種近縁種を含み、更に制限なしに他のネコ種の野生外来捕獲動物、例えばライオン、トラ、ヒョウなどを含み、科学的、教育的又は娯楽目的で飼育されているものを含む、任意のネコ種の動物を意味する。好ましくは、ネコは、飼いネコである。
【００１１】
「維持のための実質的に全ての栄養必要量」という用語は、本発明において規定するような餌料の減少したタンパク質レベルを前提として、少なくとも、ＮＲＣ（米国学術研究会議）及びＡＡＦＣＯ（アメリカ飼料検査官協会）のような機関によって発表され、時々更新されているガイドラインにしたがう、ネコに必要な主要栄養素（タンパク質、炭水化物、脂質、及び繊維）の維持量を意味する。場合によっては、餌料は、更に、本発明において規定する餌料の減少したリン及びナトリウムレベルを前提として、少なくとも維持量の１以上の主要栄養素、例えばビタミン、必須アミノ酸、必須脂肪酸、及びミネラルを含むが、主要栄養素は、更に又は代わりに、餌料を構成する１以上の餌料組成物の一部を形成しない１以上のサプリメントの形態で供給することができる。成猫の維持のための栄養必要量に関する更なる情報は、例えば、ＮＲＣ（２００３）イヌ及びネコの栄養必要量、ｐ．４３１〜４３４のような情報源において見出すことができる。
【００１２】
「ネコに餌料を与える」という用語は、ネコに、消費のために、標準量、例えば日常量の、ネコの維持のための実質的に全ての栄養必要量を一緒に満足する１以上の餌料組成物を与えることを意味する。餌料は、動物の維持のための実質的に全ての栄養必要量が満足され、餌料が本発明において規定するタンパク質、リン、及びナトリウムの減少したレベルを有する限りにおいて、かかる給餌の間に必ずしも一定ではない。例えば、ネコに対して、所望の度に、一つのブランドのキャットフードから他のものに、或いは湿潤組成物（例えば缶入りのキャットフード）から乾燥組成物（例えば顆粒状物）に、或いはその逆に切り替えることができる。
【００１３】
「腎臓薬」という用語は、腎不全又は腎臓病を予防又は治療するのに有用な任意の化合物、組成物、又は薬剤を意味する。
本発明は、本明細書において記載する特定の方法論、手順、及び試薬に限定されるものではなく、それらは変化してよい。更に、本明細書において用いる専門用語は、特定の態様のみを説明する目的のものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。本明細書及び特許請求の範囲において用いるように、単数形は、本明細書の記載が明確に他のものを示していない限り複数形も包含し、例えば「宿主細胞」は複数のかかる宿主細胞を包含する。
【００１４】
他に定義しない限りにおいて、本明細書において用いる全ての技術用語及び科学用語並びに任意の頭字語は、本発明の分野における当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと同様か又は等価の任意の方法及び材料を本発明の実施において用いることができるが、好ましい方法、装置、及び材料を本明細書において記載する。
【００１５】
本明細書において言及する全ての特許、特許出願、及び特許公開は、本発明と共に用いる可能性のあるそこで報告されている化合物及び方法論を記載且つ開示する目的で法律によって許される範囲まで、参照として本明細書中に包含する。しかしながら、このことは、先行発明のために本発明がかかる開示に先行する資格がないことを認めるものと解釈されるものではない。
【００１６】
種々の態様において、本発明は、（１）ネコの寿命を延長し、（２）ネコの腎不全の発症を遅延し、（３）ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少するための方法を提供する。本方法は、ネコに、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む。本発明は、ネコにタンパク質、リン、及びナトリウムが比較的低含量の餌料を与えることによってネコの腎機能を変化させることができ、腎機能を変化させることによって、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病の罹病率及び死亡率を減少することができるという新規な発見に基づく。
【００１７】
「標準的なネコの維持餌料」は、例えばここで引用する参考文献においてＮＲＣ又はＡＡＦＣＯによって示されている健康な成猫の維持のための栄養必要量を満足し、タンパク質、リン、又はナトリウムのいずれにおいても「高含量」でない餌料である。タンパク質において「高含量」であるネコ餌料は、乾燥物質で約５０％より高いタンパク質含量を有し、及び／又は、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約１０ｇより多いタンパク質を与えるものである。リンにおいて「高含量」であるネコ餌料は、乾燥物質で約１．２％より高いリン含量を有し、及び／又は、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約０．２５ｇより多いリンを与えるものである。ナトリウムにおいて「高含量」であるネコ餌料は、乾燥物質で約０．５％より高いナトリウム含量を有し、及び／又は、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約０．１ｇより多いナトリウムを与えるものである。タンパク質、リン、又はナトリウムにおいて「高含量」でない代表的な標準的ネコ維持餌料は、乾燥物質基準で、約４５％のタンパク質、約１％のリン、及び約０．４％のナトリウムを含み、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり約９ｇのタンパク質、約０．２ｇのリン、及び約０．０８ｇのナトリウムを与える。
【００１８】
タンパク質、リン、及びナトリウムの「減少したレベル」を有するネコ餌料は、餌料を消費するネコが、延長した寿命、腎不全の発症の遅延、及び腎臓病に関係する罹病率及び死亡率の減少を経験するような、標準的なネコの維持餌料中のものよりも十分に低いレベルを有するものである。通常は、本発明の利益を達成するためには、餌料中のタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルは、標準的なネコの維持餌料中のものから少なくとも約１０％減少させる。
【００１９】
餌料中のリン及びナトリウムのそれぞれを標準的なネコの維持餌料と比較して少なくとも約１０％減少させる一態様においては、タンパク質は、約１２％〜約６０％、好ましくは約１８％〜約４８％、約２４％〜約４４％、又は約３０％〜約４０％減少させる。この態様による乾燥物質基準での餌料のタンパク質含量は、約１８％〜約４０％、好ましくは約２３％〜約３７％、約２５％〜約３４％、又は約２７％〜約３２％、例えば約２８％〜約３０％である。ＭＥ基準で表現して、餌料のタンパク質含量は、約３．６〜約７．９ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ、好ましくは約４．７〜約７．４、約５．０〜約６．８、又は約５．４〜約６．３ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥである。
【００２０】
餌料中のタンパク質及びナトリウムのそれぞれを標準的なネコの維持餌料と比較して少なくとも約１０％減少させる他の態様においては、リンは、約１５％〜約８０％、好ましくは約２０％〜約７５％、約３０％〜約６５％、約４０％〜約６０％、又は約４０％〜約５５％減少させる。この態様による乾燥物質基準での餌料のリン含量は、約０．２％〜約０．８５％、好ましくは約０．２５％〜約０．８％、約０．３５％〜約０．７％、約０．４％〜約０．６％、又は約０．４５％〜約０．６％である。ＭＥ基準で表現して、餌料のリン含量は、約０．０４〜約０．１７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ、好ましくは約０．０５〜約０．１６、約０．０７〜約０．１４、約０．０８〜約０．１２、又は約０．０９〜約０．１２ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥである。
【００２１】
餌料中のタンパク質及びリンのそれぞれを標準的なネコの維持餌料と比較して少なくとも約１０％減少させる他の態様においては、ナトリウムは、約１２％〜約９０％、好ましくは約１５％〜約８０％、約１８％〜約７０％、又は約２１％〜約６０％減少させる。この態様による乾燥物質基準での餌料のナトリウム含量は、約０．０４％〜約０．３５％、好ましくは約０．０８％〜約０．３４％、約０．１２％〜約０．３３％、又は約０．１６％〜約０．３２％である。一態様においては、ナトリウム含量は、乾燥物質基準で約０．２％〜約０．３５％である。ＭＥ基準で表現して、餌料のナトリウム含量は、約０．００８〜約０．０７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ、好ましくは約０．０１６〜約０．０７、約０．０２〜約０．０７、又は約０．０３〜約０．０６ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥである。
【００２２】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを本発明において規定するように減少させた缶入りネコ餌料の実例としては、制限なしに、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ ｗｉｔｈ Ｃｈｉｃｋｅｎ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｇ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｌ／ｄ、Ｐｕｒｉｎａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ ＮＦ、及びＲｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ Ｒｅｎａｌ ＬＰ２１が挙げられる。例えば、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ缶入り餌料は、給餌基準で８．４％、乾燥物質で２８．６％、６．６ｇ／１００ｋｃａｌのタンパク質；給餌基準で０．１０％、乾燥物質で０．３４％、０．０７８ｇ／１００ｋｃａｌのリン；給餌基準で０．０９％、乾燥物質で０．３１％、０．０７ｇ／１００ｋｃａｌのナトリウムを含む（平均栄養素含量）と提示されている。
【００２３】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを本発明において規定するように減少させた乾燥ネコ餌料の実例としては、制限なしに、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｇ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｌ／ｄ、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｓｃｅｉｅｎｃｅ Ｄｉｅｔ Ａｄｕｌｔ Ｏｃｅａｎ Ｆｉｓｈ ＆ Ｒｉｃｅ Ｒｅｃｉｐｅ、Ｐｕｒｉｎａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ ＮＦ、及びＲｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｉｅｔ Ｒｅｎａｌ ＬＰ２１が挙げられる。例えば、Ｈｉｌｌ’ｓ Ｆｅｌｉｎｅ ｋ／ｄ乾燥餌料は、給餌基準で２６．２％、乾燥物質で２８．３％、６．７ｇ／１００ｋｃａｌのタンパク質；給餌基準で０．４５％、乾燥物質で０．４９％、０．１１４ｇ／１００ｋｃａｌのリン；給餌基準で０．２３％、乾燥物質で０．２５％、０．０５８ｇ／１００ｋｃａｌのナトリウムを含む（平均栄養素含量）と提示されている。
【００２４】
本発明の餌料をネコに与えることは長期間の作業である。例えば、ネコに、本発明による餌料を、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約１年、少なくとも約２年、少なくとも約３年、或いは腎不全又は腎臓病の発症又は最初の診断後に開始してネコの寿命の実質的に残りの期間継続して与えることができる。本方法の長期性を前提として、タンパク質、リン、及びナトリウムのいずれかを、ネコの全般的な健康状態と整合する最小値以下のレベルに制限することは一般的に望ましくないことを理解すべきであろう。したがって、一態様によれば、タンパク質は、乾燥物質で約２５％以下、或いは約５ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ以下には減少させない。他の態様によれば、リンは、乾燥物質で約０．４５％以下、或いは約０．０９ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ以下には減少させない。他の態様によれば、ナトリウムは、乾燥物質で約０．０４％以下、或いは約０．００８ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥ以下には減少させない。
【００２５】
一態様においては、餌料は、乾燥物質基準で、約２７％〜約３２％のタンパク質、約０．３６％〜約０．５４％のリン、及び約０．１５％〜約０．３２％のナトリウムを含む、かかる餌料は、通常、１００ｋｃａｌ ＭＥあたり、約５．４〜約６．３ｇのタンパク質、約０．０８〜約０．１２ｇのリン、及び約０．０３〜約０．０６ｇのナトリウムを与える。腎臓病を有するネコにかる餌料量を与えることで、約４５％のタンパク質、約０．９％のリン、及び約０．４％のナトリウム（１００ｋｃａｌ ＭＥあたり、約９ｇのタンパク質、約０．２ｇのリン、及び約０．０８ｇのナトリウムを与える）を含む標準的なネコの維持餌料と比較して寿命を延長することによって本発明が実証される。本明細書において記載する餌料の寿命延長効果は、比較試料として用いる標準的な餌料それ自体がタンパク質、リン、又はナトリウムのいずれかにおいて上記に定義したような「高含量」ではないことを認識すると、特に驚くべきことである。
【００２６】
他の態様においては、餌料は、「給餌」基準で、約５％〜約４０％の量のタンパク質、約０．０１％〜約２％の量のリン、及び約０．０１％〜約２％の量のナトリウムを含む乾燥餌料を含む。この態様によれば、「給餌」基準で、乾燥餌料のタンパク質含量は、約１０％〜約３０％、又は約２４％〜約３０％であってよく；リン含量は、約０．０５％〜約１％、又は約０．２％〜約０．５％であってよく；及び／又は、ナトリウム含量は、約０．０５％〜約１％、又は約０．１５％〜約０．３５％であってよい。
【００２７】
他の態様においては、餌料は、「給餌」基準で、約４％〜約１２％の量のタンパク質、約０．０３％〜約０．２％の量のリン、及び約０．０３％〜約０．２％の量のナトリウムを含む湿潤餌料を含む。この態様によれば、「給餌」基準で、湿潤餌料のタンパク質含量は、約５％〜約１１％、又は約６％〜約９％であってよく；リン含量は、約０．０５％〜約０．１５％、又は約０．０８％〜約０．１％であってよく；及び／又は、ナトリウム含量は、約０．０５％〜約０．１５％、又は約０．０８％〜約０．１％であってよい。
【００２８】
場合によっては、餌料は、タンパク質、リン、及びナトリウム以外の栄養素に関して改変することができる。例えば、餌料に、ポリ不飽和脂肪酸、より好ましくはω−３脂肪酸、例えばドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）及び／又はエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を補給することができる。多くの他のかかる改変は、当業者に公知である。
【００２９】
栄養所要量は、例えばｇ／ＭＪ又はｇ／１００ｋｃａｌで、餌料の代謝エネルギー（ＭＥ）含量に関連して表現することができる。本明細書においては、タンパク質は、他に示さない限りにおいて、全粗タンパク質として表す。本明細書において、組成に関するパーセントは、他に特に示さない限りにおいて、「乾燥物質」基準で表す。
【００３０】
更なる方法は、所定の期間、ネコに対して１以上の腎臓薬を投与しながら、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えることを含む。通常、健康管理の専門家、例えば医師及び獣医師が、ネコの腎臓病を診断し、疾病を治療するための腎臓薬（ネコの腎臓病を予防又は治療するのに有用な任意の薬剤）を処方する。症状が治まり、疾病が治癒されたと認められるまでネコに腎臓薬を投与するか、或いは慢性腎臓病に関しては投与を無期限に継続する。本発明においては、タンパク質、リン、及びナトリウムの減少したレベルを有する餌料をネコに与え、ネコに対して疾病を治療するための腎臓薬を投与する。本発明において有用な腎臓薬は、腎臓病と闘うのに有用であることが当業者に公知の任意の腎臓薬である。好ましい薬剤としては、米国特許６，５８９，７４８に記載されているもののようなリソソーム活性化化合物、米国特許６，７８４，１５９に記載されているもののようなトリテルペンサポニン、米国特許６，５５９，８７６及び米国特許出願２００２００２８７６２に記載されているもののようなアクチビン阻害薬、米国特許６，４９２，３２５に記載されているもののようなインテグリン受容体阻害薬及びＴＧＦ阻害薬、米国特許６，４５８，７６７に記載されているもののようなＴＧＦ活性化阻害薬、及び米国特許５，７２３，４４１に記載されているインスリン様成長因子（ＩＧＦ）が挙げられる。最も好ましい薬剤としては、変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンドロゲン、エリスロポイテン、及びカルシトリオールが挙げられる。アンギオテンシン及びエンドセリンは、進行性腎損傷に寄与する特異的な腎臓内効果を有する強力な全身血管収縮剤である。これらの血管収縮剤の効果を緩和するために種々の腎臓薬を用いる。アンギオテンシン変換酵素阻害薬（エナラプリル−Ｅｎａｃａｒｄ及びＶａｓｏｔｅｃ、並びにベナゼプリル−Ｌｏｔｅｎｓｉｎ）は、タンパク尿症の重篤度を低め、腎不全の進行を遅延するために用いられてきた。ＡＣＥ阻害薬であるエナラプリル（Ｅｎａｃａｒｄ、Ｖａｓｏｔｅｃ）は、糸球体及び全身高血圧症、タンパク尿症、並びに、糸球体及び尿細管質病変を抑止する。アンギオテンシン遮断薬及びエンドセリン阻害薬は、腎臓病において有益な効果を有する。血管ペプチド阻害薬は、ＡＣＥと、ナトリウム利尿性ペプチド、アドレノメデュリン、及びブラジキニンの分解に関係する酵素である中性エンドペプチダーゼの両方を阻害する薬剤である。これらの腎臓薬は、アンギオテンシンＩＩの生成を減少し、血管拡張剤の蓄積を増加させる。全身高血圧症を有する腎臓病患者は、アムロジピン（Ｎｏｒｖａｓｃ）のようなカルシウムチャンネル遮断薬に反応する。尿毒症性胃炎（食道炎、胃炎、胃潰瘍、及び胃出血）は、Ｈ２受容体拮抗薬（シメチジン−Ｔａｇａｍｅｔ、ファモチジン−Ｐｅｐｃｉｄ）、プロトンポンプ遮断薬（オメプラゾール−Ｐｒｉｌｏｓｅｃ）、細胞保護薬（ミソプロストール−Ｃｙｔｏｔｅｃ）、及び嘔吐中枢に作用する制吐薬（クロルプロマジン−Ｔｈｏｒａｚｉｎｅ、ペルクロルペラジン−Ｃｏｍｐａｚｉｎｅ、メトクロプラミド−Ｒｅｇｌａｎ）によって治療する。アンドロゲン又はタンパク同化ステロイド（Ｓｔａｎｏｚｏｌ、Ｗｉｎｓｔｒｏｌ−Ｖ）は、慢性腎不全に関係する貧血症の治療において用いられている。組み換えヒト（又は他の種）エリスロポイテン（Ｅｐｏｅｔｉｎ−α、Ｅｐｏｇｅｎ、Ｐｒｏｃｒｉｔ）を用いるホルモン補給療法は、腎不全に関係する重度の貧血症に対する最適の治療である。リン酸塩過剰血症及び二次性腎上皮小体機能亢進症を抑えるために、リン酸塩吸着薬（水酸化アルミニウム−Ａｍｐｈｏｊｅｌ、炭酸アルミニウム−Ｂａｓａｌｊｅｌ）が用いられている。カルシトリオール（１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール）（Ｒｏｃａｌｔｒｏｌ）及びビタミンＤ類似体は、カルシウム独立性の上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）の抑制を引き起こす。リン酸塩吸着薬、カルシトリオール、及び関連する化合物の投与は、慢性腎不全において、ＰＴＨに起因する多臓器毒性を抑制するのに推奨されてきた。カリウム欠乏症及び低カリウム血症は、慢性腎不全を有するネコにおいて通常見られる。カリウムのグルコネート又はサイトレートの形態のカリウムの経口補給が推奨されている。全体的な腎臓薬及び組成物もまた、本発明に包含される。好ましい全体的腎臓薬としては、クランベリーエキス及びマンノースが挙げられる。クランベリーエキスは、腎機能の長期衰退に関する一般的な危険因子である尿路感染症の有病率を減少させると主張されている。腎臓薬としては、通常の小分子薬剤、低分子タンパク質、高分子タンパク質及び高分子、並びに抗体が挙げられ、更に腎臓病を予防するように設計されたワクチンも挙げられる。抗体としては、ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体、並びに、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２のような免疫グロブリンフラグメント、或いは抗原と相互作用して天然の抗体と同じ生物学的機能を行う他の抗原結合性抗体サブシーケンスが挙げられる。腎臓薬は、腎臓薬に関して適当な任意の方法を用いて、腎臓病を治療又は予防するのに十分であることが当業者に知られている量で、ネコに投与する。
【００３１】
更なる態様においては、本発明は、単一の包装内の別々の容器内に、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに餌料を与えるのに好適な餌料組成物、及び１以上の腎臓薬を含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用なキットを提供する。
【００３２】
他の態様においては、このキットは、別の包装内に、ネコにおいて腎機能を測定し腎臓病の存在及び重篤度を診断するための１以上の腎臓診断具を更に含む。本発明において有用な腎臓診断具としては、ネコにおいて腎機能を測定し腎臓病の存在及び重篤度を診断するのに好適な任意の器具が挙げられる。好ましい診断方法としては、血清尿素窒素（ＳＵＮ）、クレアチニンレベル、尿比重、及びＤＮＡ損傷、例えば米国特許６，５８９，７４８、米国特許６，４４７，９８９、及び米国特許出願２００５００２６２２５に記載されているもののようなアルブミンに関する尿分析、及びコメット痕跡分析が挙げられる。診断方法は、（１）上昇した血中尿素窒素濃度、上昇した血清クレアチニン濃度、高ホスファターゼ血症、高カリウム血症又は低カリウム血症、代謝性アシドーシス、及び低アルブミン血症のような血液マーカー、（２）尿濃縮能障害、タンパク尿症、円柱尿、腎性血尿症、不適切な尿ｐＨ、不適切な尿グルコース濃度、及びシスチン尿症のような尿マーカー、（３）寸法、形状、局在部位、及び密度のような身体的、造影的、及び診断的マーカー、（４）ＷＯ ２００４１１３５７０−Ａ２において開示されているもののような一塩基変異多型（ＳＮＰ）、（５）腎臓病の指標である遺伝子プロファイル、（６）腎臓病の指標であるプロテオームプロファイル、及び（７）腎臓病の指標である代謝プロファイルをはじめとする公知の技術に基づく。これらの診断方法及びかかる方法に基づく器具（例えば、試験片、ＥＬＩＳＡ分析、コメット分析）は、通常、科学者及び健康管理の専門家のような当業者が利用することができ、多くのものは消費者が利用することができる。例えば、Ｈｅｓｋａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｆｏｒｔ Ｃｏｌｌｉｎｓ Ｃｏｌｏｒａｄｏ）のＥ．Ｒ．Ｄ．−ＨｅａｌｔｈＳｃｒｅｅｎ Ｕｒｉｎｅ Ｔｅｓｔｓは尿中の少量のアルブミン（微量アルブミン尿）を検出する。
【００３３】
一態様においては、腎臓病の存在又は進行に関して定期的な診断評価を行う。かかる診断評価の結果に基づいて、餌料及び／又は腎臓薬の投与量又は処方計画を調節することができる。診断評価は、血液マーカー（例えば、上昇した血清尿素窒素濃度、上昇した血清クレアチニン濃度、高ホスファターゼ血症、高カリウム血症、低カリウム血症、代謝性アシドーシス、低アルブミン血症など）、尿マーカー（例えば、尿濃縮能障害、タンパク尿症、円柱尿、腎性血尿症、不適切な尿ｐＨ、不適切な尿グルコース濃度、シスチン尿症など）、身体的観察及び測定、造影、ＳＮＰ、遺伝子プロファイル、プロテオームプロファイル、及び代謝プロファイルから独立して選択される１以上の基準に基づくことができ、１以上の腎臓診断具を用いて測定することができる。
【００３４】
更なる態様においては、本発明は、単一の包装内の別々の容器内に、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えるのに好適な餌料組成物、及び１以上の腎臓診断具を含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用なキットを提供する。
【００３５】
このキットは、更に、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、又はネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるために、本発明の方法及びキットを使用することに関する情報又はそのための指示を含む。
【００３６】
他の態様においては、本発明は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、及びネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるために、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を用いることに関する情報又はそのための指示を伝達するための手段を提供する。他の態様においては、本発明は、更に、腎臓病を予防又は治療するための腎臓薬と組み合わせて餌料を用いることに関する情報又はそのための指示を提供する。他の態様においては、本発明は、更に、本発明の腎臓診断具を用いることに関する情報又はそのための指示を提供する。伝達手段は、情報又は指示を含む文書、デジタル保存媒体、光学保存媒体、音声表示、又は画像表示を含む。好ましくは、伝達手段は、かかる情報又は指示を含む、表示されたウエブサイト又はカタログ、製品ラベル、添付文書、広告、又は画像表示である。有用な情報としては、（１）餌料と腎臓薬とを組み合わせるための方法及び技術、（２）腎臓診断具を用いるための情報、（３）存在する場合には本発明を他の薬剤と組み合わせて用いることに起因する副作用に関する詳細、（４）ネコの飼い主が本発明及びその使用に関する疑問を持っている場合にはネコの飼い主が使用するための連絡先情報の１以上が挙げられる。有用な指示としては、用量、投与量及び頻度、並びに投与経路が挙げられる。伝達手段は、本発明を用いることの利益をネコの飼い主に説明するのに有用である。
【００３７】
この方法及びキットは、腎不全又は腎臓病に罹病しやすいか又はそれを患っているネコに関する罹病率及び死亡率を減少し、したがってネコの寿命を延長するのに有用である。
【実施例】
【００３８】
本発明は、その好ましい態様の以下の実施例によって更に説明することができるが、これらの実施例は例示の目的のためのみに包含されるものであり、他に特に示さない限りにおいて本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００３９】
実施例１
軽度〜中等度の自発性ＣＲＦを有するネコにおける尿毒症の発症率及び死亡率を最小にすることにおいて、腎臓餌料（タンパク質、リン、及びナトリウムの組成を改変した）と成猫の維持餌料とを比較するために研究を行った。尿毒症クリーゼの発現、死亡率及び腎不全の進行に対する食餌療法の効果を調べるために、ＣＲＦを治療するために通常推奨されている食餌改善の組み合わせを含ませた。このタイプのデザインの研究によって、おそらく、個々の餌料成分の治療効力を単独に研究する一連の臨床試験よりも、より有益で有効な評価が与えられるであろう。更に、食餌の改善の組み合わせを研究することは、種々の餌料成分の総合的な相互作用の評価を包含する。本実施例において、「餌料」という用語は、成猫に対して給餌する餌料を意味し、ネコによって消費される餌料の全体を必ずしも表すものではない。
【００４０】
材料及び方法
ネコの選択：地域の獣医師に研究の説明を送付して照会を求めることによって、ミネアポリスのセントポール地域から４５匹のネコを募集した。また、医療記録の調査及び飼い主への直接の接触を用いて、ミネソタ大学獣医医療センターの患者集団からもネコを募集した。ネコは、１歳よりも大きく、少なくとも４週間の期間の腎臓病に相応する病歴を有している場合に、登録を検討した。最初のスクリーニング往診の間に、規定の病歴、身体検査、間接血圧測定、及び血清クレアチニン濃度の測定によって患者を診断した。血清クレアチニン濃度が２．１〜４．５ｍｇ／ｄＬであり、腎前性窒素血症の徴候がない場合に、患者を７〜２１日後に再診断した。この時点で、血清クレアチニン濃度が最初の値から＞２０％増加又は減少しておらず、２．１〜４．５ｍｇ／ｄＬで維持されていた場合に、患者を研究のために仮登録した。
【００４１】
仮採用の後、ネコを、病歴、身体検査、全血球計算、血清生化学プロファイル、尿検査、間接血圧測定、腹部Ｘ線調査、血清Ｔ４濃度、及びネコ白血病ウィルス（ＦｅＬＶ）及びネコ免疫不全ウィルス（ＦＩＶ）に関するＥＬＩＳＡ試験の結果に基づいて再診断した。次に、表１に示す全ての試験対象／非対象基準を満足するネコに、表２に示す配合餌料を６週間給餌した。
【００４２】
【表１】
【００４３】
【表２】
【００４４】
６週間の終了時において、７品種（３０匹のドメスティック・ショートヘア、７匹のドメスティック・ロングヘア、４匹のシャム、１匹のメイン・クーン、１匹のバーマン、１匹のヒマラヤン）で２．４７〜７．６５ｋｇ（平均４．２７（１．０８ｋｇ））の範囲の体重の４５匹のネコが、全ての試験対象／非対象基準を満足した。これらに対して、無作為に腎臓餌料又は維持餌料を割り当てた。
【００４５】
餌料：本研究は、表３に示すように、通常の成猫の乾燥及び湿潤維持餌料を、特にネコの慢性腎臓病の治療のために設計した乾燥及び湿潤餌料（腎臓餌料）と比較するようにデザインした。
【００４６】
【表３】
【００４７】
いずれの餌料も、ＡＡＦＣＯ給餌試験（腎臓餌料）によって実証されるように、又は成猫に関する最小のＡＡＦＣＯ栄養素プロファイル（維持餌料）を超えることによって、成猫の維持のために完全でバランスのとれた栄養素を与えた。それぞれの餌料の消化率は、成分消化率試験に基づいた。タンパク質の消化率は、腎臓餌料に関しては７８．８％（乾燥）及び７７．３％（湿潤）であり、維持餌料に関しては８３．４％（乾燥）及び８２．５％（湿潤）であった。腎臓餌料の主要な特徴は、維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムの量であった。腎臓餌料にはω−３ポリ不飽和脂肪酸を補給し、一方、維持餌料には補給しなかった。
【００４８】
給餌プロトコル：研究のための資格を与えた後、全てのネコを、腎臓餌料及び維持餌料の平均の栄養素を示すように配合した配合餌料（表２）に６週間順応させた。目標は、標準的な餌料の消費量を徐々に減少し、一方、配合餌料の量を増加して、ネコが、研究餌料に無作為に割り当てられる前に３週間の間少なくとも８０％の配合餌料を消費するようにすることであった。ネコにこの配合餌料を給餌して、この研究に参加する前に飼い主によって給餌されていた異なる餌料の消費に関係する変動性を最小にした。また、この方法は、腎臓餌料又は維持餌料の群に無作為に分ける時点での餌料成分における突然の変化を最小にするためにも選択された。研究を通して、飼い主に、研究に参加する前に用いていた給餌方法（自由摂食又は周期給餌）を継続するように求めた。飼い主に、体重及び身体検査の経時的診断に基づく最適の栄養素を維持するのに十分な量の餌料を与えるように指示した。自由摂食給餌は、式：１．５（３０×ＢＷ（ｋｇ）＋７０）＝ＣＲ（ｋｃａｌ／日）（式中、ＢＷは体重であり、ＣＲはカロリー必要量である）によって決定される一日のカロリー必要量に基づく所定の餌料量に制限した。
【００４９】
印刷物を用いて、飼い主に、消費した研究餌料の量を監視し、消費した全ての他の餌料の量及び種類を記録することを求めた。飼い主に、体重が減少した場合には、患者に与える餌料の量を増加するように求めた。一部のネコにおいては、餌料を加温することによるか、或いは香味添加剤（希釈チキンブロス、希釈マグロ体液等）を用いることによって、餌料の摂取量を向上させた。
【００５０】
研究計画：無作為抽出二重盲式比較臨床試験を行った。全ての対象／非対象基準を満足するネコの飼い主に、インフォームド・コンセントの書類を精査してサインすることを求めた。次に、６週間かけて全てのネコを配合餌料に順応させた。６週間の後であって、維持餌料又は腎臓餌料に無作為に割り当てる直前に、表４に示す、規定の病経過、身体検査、ボディ・コンディション・スコア、拡張血清生化学パネル（即ち、血清尿素窒素、クレアチニン、グルコース、無機リン、カルシウム、ナトリウム、カリウム、塩化物、全ＣＯ２、アルブミン、全ビリルビン及び全タンパク質濃度、並びに血清アミラーゼ、アラニントランスアミナーゼ及びアルカリ性ホスファターゼ活性）、全血球計算、静脈血ガス、尿検査、好気性菌に関する定量的尿培養、間接血圧測定、血清イオン化カルシウム及び血清上皮小体ホルモン濃度を用いることによって、それぞれのネコを診断した。これらの分析物の全てを臨床試験を通して診断したが、腎不全に関係する分析物（血清クレアチニン、尿素窒素、リン、全カルシウム、イオン化カルシウム、上皮小体ホルモン、全ＣＯ２、及びアルブミン濃度）のみを、二つの餌料群の間で比較した。
【００５１】
【表４】
【００５２】
１：１の比のブロック無作為化（８ブロック）を用いて、ネコを腎臓餌料又は維持餌料のいずれかに割り当てた。割り当ては、密封した連番付き封筒によって行った。コード化した同一の包装材料を用いることによって、研究の二重盲性を保持した。
【００５３】
腎臓餌料又は維持餌料のいずれかに割り当てた１月後、経過、身体検査、間接血圧、限られた血清生化学プロファイル（血清尿素窒素、クレアチニン、カリウム、及び全ＣＯ２濃度）、ＰＣＶ、及び全血漿固形分濃度の測定によって、それぞれのネコの状態を診断した。
【００５４】
３月の間隔、或いは尿毒症クリーゼを示す徴候が発現した際に、ネコを診断するように計画した。計画にない診断を、飼い主の要求によって行った。０月、６月、１２月、１８月、及び２４月での計画された往診の間に、規定の病経過、身体検査、眼底検査、ボディ・コンディション・スコア、拡張血清生化学パネル、血清イオン化カルシウム及び上皮小体ホルモン濃度、全血球計算、静脈血ガス、尿検査、好気性菌に関する定量的尿培養、並びに間接血圧測定によって、それぞれのネコを診断した。３月、９月、１５月、及び２１月においては、上記のプロトコルを行ったが、静脈血ガス分析、血清イオン化カルシウム及び血清上皮小体ホルモン濃度は診断しなかった。
【００５５】
コンプライアンスを高め、現地での診断が計画されていなかった時に医学的な問題がなかったかを突き止めるために、依頼人に対する電話での面談を月１回行った。同じ獣医学の専門家が全ての電話面談を行った。依頼人には、割り当てられた餌料に加えた全ての餌料を含む各日に摂取した餌料の量を記録するように求めた。
【００５６】
血液の採取及び分析
飼い主に、計画された診断の８〜１２時間前には餌料を控えるように指示した。それぞれの往診の間に、頸静脈穿刺によって血液試料を採取した。標準的な手順によって血清を３０分以内に回収した。生化学プロファイルのための血清を同じ日に処理できない場合には、遠心分離した血液から得た血清を４℃で保存して、次の日に診断した。０月、６月、１２月、１８月、及び２４月に計画された往診の間に、それぞれの採取からの血清のアリコートを凍結（−７０℃）し、ＰＴＨ及びイオン化カルシウム濃度の測定のために保存した。更に、静脈血のアリコートをヘパリン化血ガスシリンジ内に採取し、２０分以内にｐＨ及び重炭酸塩濃度に関して分析した。
【００５７】
尿の採取及び分析：膀胱穿刺によって尿を採取した。尿比重測定のための屈折計、化学的測定のための市販の試薬片、及び沈殿物評価のための標準的な技術を用いて、尿検査を行った。全ての尿試料について、好気性菌に関する定量的な尿培養を行った。尿タンパク質濃度は、クマシー・ブリリアントブルー染料沈殿及び分光測光法によって測定した。尿クレアチニン濃度は、自動分析装置に基づく動的ヤッフェ反応によって測定した。タンパク質及びクレアチニンの測定のための尿試料は４℃で保存し、採取の２４時間以内に分析した。
【００５８】
血圧測定：全ての血圧測定は、研究中に他の手順のために用いない専用の部屋で行った。標準的な方法を用いた超音波ドップラーモニターを用いることによって、収縮期血圧の測定値を得た。
【００５９】
患者の治療：餌料を除いて、慢性腎不全を治療するのに用いたプロトコルは、全てのネコに関して同じであった。同様に、非尿毒症性事象を治療するのに同じプロトコルを用いた。
【００６０】
低カリウム血症：本研究においては、９匹（２０％）のネコが、少なくとも一回の往診において低カリウム血症（血清カリウムが＜３．７ミリモル／Ｌ）であった。これらのネコの５匹（３匹は腎臓餌料、２匹は維持餌料）は、餌料の割り当て時においては軽度の低カリウム血症であった。治療を控え、餌料の割り当ての１月後に血清カリウム濃度を再診断して、新しい餌料がこれらのネコの血清カリウム濃度に影響を与えたかどうかを調べた。この時点において、５匹全てのネコにおいて低カリウム血症が軽快した。残りの４匹のネコのうちの２匹は、１２時間毎に４０〜７５ｍｇ／ｋｇの用量でクエン酸カリウムを経口投与し、必要に応じて継続して、それらの血清カリウムを≧３．７ミリモル／Ｌに維持することによって治療した。他の２匹のネコは、進行性新生物腫瘍に続発する栄養不良状態と同時に低カリウム血症を発現した。
【００６１】
高血圧症：７匹のネコ（５匹は腎臓餌料、２匹は維持餌料）が、２年の研究期間の間に高血圧症を発現した。本研究においては、治療的介入の目的で、ネコは、その収縮期血圧が２週間の期間の間の３回の連続する往診において＞１７５ｍｍＨｇであったか、高血圧性網膜症の徴候が＞１７５ｍｍＨｇの収縮期血圧に付随して起こったか、或いはその収縮期血圧が２００ｍｍＨｇを超えた場合に、高血圧症であると考察した。治療が必要な全てのネコを、一日一回の０．６２５ｍｇ／ネコのベシル酸アムロジピンの経口投与によって治療した。治療に対する反応を、治療の７日〜１４日後に調べた。全てのネコにおいて用量の調節は必要なかった。
【００６２】
尿路感染症：本研究の間に、腎臓餌料を給餌した２匹のネコのそれぞれにおいて尿路感染症（ＵＴＩ）が認められた。ＵＴＩの早期発現は、抗生物質感受性試験によって決定された適当な抗生物質を用いて２１日間治療した。尿検査及び定量的細菌尿培養によって、治療に対する反応を評価した。尿培養追試験によって再感染が認められ、これは適当な抗生物質を用いて最短で６週間治療した。
【００６３】
代謝アシドーシス：＜１１．０ミリモル／Ｌの血清ＴＣＯ２濃度を有する全てのネコは、静脈血ガス分析によって更に診断した。代謝アシドーシスを治療するかどうかの決断は、血中重炭酸塩濃度に基づいた。＜１５．０ミリモル／Ｌの静脈血中ＨＣＯ３濃度を有する１１匹のネコ（２匹が腎臓餌料、１０匹が維持餌料）は、血中ＨＣＯ３濃度を１５〜２４ミリモル／Ｌの間に維持することを目標として、クエン酸カリウム（１２時間毎に４０〜７５ｍｇ／ｋｇを経口投与）によって治療した。治療を開始して１０〜１４日後に静脈血中ＨＣＯ３濃度を測定することによって、治療に対する反応を調べた。
【００６４】
高リン血症：研究中に、５匹のネコ（２匹は腎臓餌料、３匹は維持餌料）において、高リン血症（血清リン濃度が＞６．０ｍｇ／ｄＬ）が認められた。これらの中で、１匹のネコ（維持餌料を給餌）は、餌料の割り当て時において上昇したリン濃度を有していた。経口リン結合薬によるこのネコの治療は控えて、割り当てられた餌料が血清リン濃度に影響を与えるかを調べた。餌料の割り当ての１月後に、血清リン濃度は通常の範囲に戻った。他の４匹のネコにおいては、血清リン濃度を＜６ｍｇ／ｄＬに維持するために、水酸化アルミニウムを経口投与（１２時間毎に５０〜９０ｍｇ／ｋｇを経口投与）した。
【００６５】
尿毒症クリーゼの診断：研究の主要評価項目である尿毒症の診断を、餌料の経過を知らず、患者の治療に携わっていない二人の臨床医学者によって行った。尿毒症クリーゼの診断は、以下の三つの基準の全てが明確であった場合に確定した。（１）運動低下、不活発、拒食、嘔吐、輸尿口臭、又は尿毒症性口内炎の徴候をはじめとする尿毒症に関係する少なくとも二つの臨床徴候を飼い主が観察すること、（２）患者に症状がない時点で所定値よりも少なくとも２０％大きい血清クレアチニン濃度、（３）病経過及び身体検査、血清化学プロファイル、全血球計算、尿検査、腹部Ｘ線検査、及び間接血圧測定によって測定されるこれらの臨床徴候に関するもっともな他の病症がないこと。
【００６６】
１匹のネコにおいて、腎外要因によって尿毒症の事象が誘発されたことが明白に認められた。このネコは、冬期の数日間、餌料又は水を与えられずに屋外に放置されていた。非経口で乳酸加リンゲル液を与えるによって脱水状態を治した後は、血清クレアチニン濃度はクリーゼ前のレベルに戻った。このネコは、研究に残した。
【００６７】
尿毒症クリーゼの後の患者の治療：研究の主要評価項目（例えば尿毒症クリーゼ）に到達したネコは、非経口液及び他の適当な医療ケアによって治療したが、研究には戻さなかった。しかしながら、維持餌料を予め給餌した全てのネコを含む、尿毒症クリーゼが発現した後の全てのネコに、市販の腎臓餌料を給餌した。２匹のネコは尿毒症クリーゼの発症の３０日以内に死亡し、３匹のネコは尿毒症クリーゼの後に３０日以上生存した。この臨床試験において用いた分析のタイプ（即ち包括解析）のために、全ての生存したネコは、死亡するまでか、或いは、それらが最初に無作為に割り当てられた餌料群に属するように研究が完了するまで、診断した。
【００６８】
罹病率又は死亡率の原因の確定：病経過、身体検査、実験室結果、尿毒症クリーゼを定義する客観的な基準（上記の「尿毒症クリーゼの診断」を参照）、及び入手できる場合には剖検結果に基づいて、死亡又は尿毒症クリーゼの原因を次のように分類した。（１）明らかに腎性ではない、（２）場合によっては腎性である、（３）おそらくは腎性である、（４）明らかに腎性である。カテゴリー１又は２に分類された患者の死亡又は尿毒症クリーゼは、腎臓に関係しない死亡とした。カテゴリー３又は４に分類された患者の死亡は、本研究の主要評価項目である腎臓に関係した死亡又は尿毒症クリーゼとした。
【００６９】
剖検に関する飼い主の承諾は、研究中に死亡した全てのネコについて求めた。全体的な解剖検査が完了した後に、組織試料を採取し、１０％ホルマリン中に保存した。パラフィン包埋した組織を４μｍの切片とし、ヘマトキシリン及びエオシンで染色し、光学顕微鏡によって検査した。
【００７０】
統計分析：マン・ホイットニーノンパラメトリック検定を用いることによって、臨床的な特徴を二つの食餌群の間で比較した。研究プロトコルによって患者を定期的な間隔で診断したので（全ての患者をそれぞれの間隔で測定してはいないが）、分散の被験者間／被験者内混合分析（ＡＮＯＶＡ）を用いて、時間又は餌料に関して大きな主作用があったか、及び二つの変数の間の相互作用（時間対餌料）が大きかったかを調べた。この分析は、また、分割実験型ＡＮＯＶＡとも称され、これによって、観察結果の間の相関を計上しながら、全てのデータを用いて依存性応答変数を評価することが可能になった。殆どの動物は１２月及び２４月の期間において応答を有していたので、反復測定ＡＮＯＶＡを用いて、１２月及び２４月の時間間隔についての、生化学的、生理学的、及び生活の質の測定値に関する餌料群の間の平均的な差を評価した。反復測定分析は、反復観察の間の相関を的確に計上する。全てのデータに関する統計的有意性は、Ｐ＜０．０５に設定した。
【００７１】
ログランク（マンテル・コックス）によるカプラン・メイヤー生存曲線を用いて、両方の群における尿毒症クリーゼの発現及び死亡の比率を比較した。更に、コックス比例ハザード回帰モデルを用いて、尿毒症クリーゼの発現の相対危険率（ＲＲ）に対する餌料の効果を評価した。同じモデルを用いて、腎臓餌料群対維持餌料群での尿毒症クリーゼの発現に対する共変量（収縮期血圧、尿タンパク質：クレアチニン比及び血清クレアチニン、リン、全ＣＯ２濃度）の効果を評価した。相対危険率減少（ＲＲＲ）は、［１−ＲＲ］×１００％をコンピュータで算出することによって算出した。
【００７２】
患者の臨床的特徴：４５匹のネコは、全ての適格性基準を満足しており、研究のために容認された。２２匹のネコから構成される治療群に腎臓餌料を給餌し、一方、２３匹のネコから構成される対照群に維持餌料を給餌した。１４匹の去勢されたオスは維持餌料群に属し、８匹は腎臓餌料群に属した。９匹の卵巣除去されたメスは維持餌料群に属し、１４匹は腎臓餌料群に属した。
【００７３】
餌料の割り当て時においては、表５ａに示すように、二つの群の全臨床的特徴（年齢、体重、ボディ・コンディション・スコア、収縮期血圧）又は血液学的特徴における統計的な差はなかった。
【００７４】
【表５ａ】
【００７５】
全血球計算（ＣＢＣ）及び血清生化学分析に関する平均値は、血清尿素窒素、クレアチニン、血中ＨＣＯ３、血液ｐＨ、及び血清上皮小体ホルモン濃度を除いて、それぞれの群について、ミネソタ大学獣医医療センターの基準範囲内であった。二つの例外を除き、血清、尿、及び血液の生化学測定値において、二つの餌料群の間に大きな差はなかった。腎臓餌料群においては、維持餌料群（Ｐ＝０．００７）と比較して極めて高い血中ＨＣＯ３濃度が観察された。しかしながら、両方の群における平均血中ＨＣＯ３濃度は、基準範囲内であった。維持餌料群においては、腎臓餌料群（Ｐ＝０．００９）と比較して極めて高い血清尿素窒素濃度が観察された。しかしながら、両方の群における平均血清クレアチニン濃度の上昇度合いにおいては、差はなかった。
【００７６】
ＦＩＶ及びＦｅＬＶに関するＥＬＩＳＡ試験の結果は、餌料の割り当て時においては４５匹のネコ全てに関して陰性であった。同様に、血清甲状腺ホルモン濃度に関するＲＩＡ試験の結果は、餌料の割り当て時においては４５匹のネコ全てに関して通常範囲（２〜４μｇ／ｄＬ）内であった。
【００７７】
餌料と血清生化学値との間の関連性：二つの群の生化学的及び臨床的特徴（収縮期血圧、体重、及びボディ・コンディション・スコア）を、餌料の割り当ての３、６、９、１２、１５、１８、２１、及び２４月後において比較し、一つにまとめて、それぞれ表５ｂ及び５ｃに示すように、１２月まで及び１２〜２４月の期間中の全体平均値を誘導した。
【００７８】
【表５ｂ】
【００７９】
【表５ｃ】
【００８０】
１２月及び２４月の期間中、腎臓餌料群においては、血清尿素窒素濃度は非常により低く、血中重炭酸塩濃度は非常により高かった。１２月及び２４月の期間中、腎臓餌料群においては、血清塩化物及び全タンパク質濃度は非常により低かったが、それぞれの群に関する実験室基準範囲内にとどまった。１２月の期間中、腎臓餌料群においては血清リン濃度は非常により低かったが、２４月の期間中においては二つの群の間に差はなかった。血清クレアチニン、アルブミン、コレステロール、ナトリウム、カリウム、カルシウム、イオン化カルシウム、又はＰＴＨ濃度においては、大きな差は認められなかった。同様に、収縮期血圧、体重、又は尿タンパク質クレアチニン比には差はなかった。
【００８１】
餌料と尿毒症クリーゼとの間の関連性：本研究の終了時において、腎臓餌料群のネコのいずれも、維持餌料群のネコの２２％（５匹）と比較して、尿毒症クリーゼを発現しなかった（表６）。腎臓餌料を給餌することが、維持餌料を給餌することと比較して、９９．９％のＲＲＲと関係していた。尿毒症クリーゼの発現に対する共変数（血圧、血清クレアチニン濃度）の影響を調節することによって、腎臓餌料群におけるＲＲが維持餌料群と比較して大きく減少したままであったことが示された。
【００８２】
【表６】
【００８３】
尿毒症クリーゼを有する５匹のネコの中で、２匹は治療に殆ど反応せず、飼い主の要求によりクリーゼの発症の数日以内に安楽死させた。残りの３匹のネコは、クリーゼの１０、１１、及び２０月後に安楽死させた。
【００８４】
餌料と死亡との間の関連性：カプラン・メイヤー分析によって、腎臓に関係する死亡率及び全ての原因からの死亡率における、腎臓餌料群及び維持餌料群の間の大きな差が示された（表６）。腎臓病に関係する死亡率に対する餌料を影響を評価すると、腎臓餌料群においては、維持餌料群と比較して９９．９％のＲＲＲが認められた。本研究の終了時において、維持餌料群におけるネコの１７．４％（４匹）が腎臓の原因によって死亡し、腎臓餌料群においては腎臓による死亡はなかった。腎臓餌料群における死亡又は安楽死の腎臓以外の原因には、ネコ伝染性腹膜炎（１匹）、車に轢かれる（１匹）、及び腎臓癌肉腫（１匹）が含まれていた。維持餌料群においては、腎臓以外の死亡の原因には、脾臓円形細胞新生物腫瘍／汎血球減少症（１匹）、全身性肥満細胞腫瘍（１匹）、リンパ肉腫（２匹）、及び断定されず（１匹）が含まれていた。死亡の腎臓以外の原因は、腎臓餌料群（１３．６％）と維持餌料群（２１．７％）との間で大きくは異なっていなかった。
【００８５】
コックス比例ハザードモデルを用いることによって全ての原因による死亡に対する餌料の影響を評価すると、腎臓餌料群においては、維持餌料群と比較して４５．０％のＲＲＲが認められた。本研究の終了時までに、腎臓餌料群のネコの１３．６％（３匹）が死亡した。同じ期間中において、維持餌料群に割り当てられたネコの３９．１％（９匹）が死亡した。
【００８６】
２年の研究期間の間に死亡した１２匹（腎臓餌料３匹、維持餌料９匹）のネコの８匹（腎臓餌料１匹、維持餌料７匹）に関して剖検結果を入手することができた。剖検結果を入手することができた腎臓餌料を給餌した１匹のネコは、腎臓組織の殆どを破壊した転移性腎臓癌肉腫のために安楽死させた。維持餌料を給餌したネコに関して入手することができた７つの剖検結果の中で、３つは尿毒症クリーゼを発現したネコからのものであった。この３匹のネコの全てにおいて、腎臓の顕微鏡観察によって、著しい間質性線維症を伴う著しいリンパ形質細胞性腎炎が認められた。剖検報告を入手することができた維持餌料を給餌した他の４匹のネコの腎臓においても、同様の損傷が認められた。これらの４匹のネコは全て、進行した新生物腫瘍のために安楽死させた。
【００８７】
慢性腎臓病の進行：血清クレアチニン濃度は研究の開始時においては大きく異なってはおらず、維持餌料群における血清クレアチニンの相互減少の大きさは、腎臓餌料群のものとは大きくは異なっていなかった。
【００８８】
議論：本試験の結果は、腎不全の治療用に特に設計された餌料（腎臓餌料）を給餌することは、非タンパク質性で非高血圧性で高窒素血症性の自発性ＣＲＦを有するネコにおける尿毒症の発現率及び死亡率を最小にする上で、成猫の維持餌料（維持餌料）よりも優れているという結論を支持する。維持餌料を給餌した２３匹のネコにおいては５匹の尿毒症の発症（２１．７％）及び４匹の腎臓に関係する死亡（１７．４％）があったのに対して、腎臓餌料を給餌した２２匹のネコにおいては尿毒症の発症又は腎臓に関係する死亡は起こらなかった。本発明者らの研究において観察された腎臓餌料の有益な効果は、自発性ＣＲＦを有するネコの他の食餌臨床試験において報告されたものと同様である。これまでに報告した研究においては、タンパク質及びリンを制限した餌料を給餌した２９匹のネコにおける腎臓に関係する死亡率は、制限しない餌料を給餌した２１匹のネコにおける５２％の死亡率と比較して、約３３％であった。
【００８９】
自発性ＣＲＦを有するネコにおける食餌療法介入の時期に関する基準は、これまでは経験的観察に基づいていた。現在のところ、尿毒症の臨床的徴候が高窒素血症を伴って起こった場合に、タンパク質及びリンの制限などの食餌の改善が有益であることは、殆ど議論されていない。しかしながら、臨床的に安定なＣＲＦを有するネコにおいて食餌療法介入がいつ必要であるかについては、一般的な意見の一致はない。
【００９０】
本研究の結果は、腎臓餌料が、早期のネコＣＲＦ（血清クレアチニン濃度が＞２．０ｍｇ／ｄＬ）の治療に有益であったことを示す。本明細書において示すデータは、血清クレアチニン濃度が２．０ｍｇ／ｄＬを超えた際に食餌療法介入を行うことを支持している。
【００９１】
血清クレアチニン濃度における漸増によって示される糸球体濾過率（ＧＦＲ）の緩徐進行性低下は、本研究のネコにおいては特徴的な所見ではなかった。尿毒症クリーゼを発現した５匹のネコにおいては、３〜２１月の期間の安定な血清クレアチニン濃度の後に、血清クレアチニン濃度における急激な上昇（４３〜３７１％）が起こった。５匹の全てのネコにおいて、血清クレアチニン濃度における急激な上昇は、尿毒症に特有の臨床的徴候（即ち、嘔吐、拒食、脱水、及び運動低下）の出現と同時期に起こっていた。尿毒症クリーゼを発現した５匹のネコの病経過、身体検査、ＣＢＣ、尿検査、及び血清生化学プロファイルの計画された３月ごとの診断中に得られた結果のレトロスペクティブ分析によれば、尿毒症クリーゼを発現しなかった４０匹のネコの３月ごとの診断中に得られた結果との差は示されなかった。本発明者らの研究の結果は、腎臓餌料によって尿毒症クリーゼ及び死亡が予防又は遅延されたことを示しているので、軽度のＣＲＦ（血清クレアチニン濃度が＞２．０ｍｇ／ｄＬ）を有する全てのネコに腎臓餌料を開始することが推奨される。
【００９２】
尿毒症クリーゼを発現した維持餌料群の５匹のネコを除いて、研究に参加させてから１８〜２４月の間には、腎臓餌料又は維持餌料を給餌したネコの血清クレアチニン濃度における大きな差は観察されなかった。維持餌料を給餌した１８匹のネコは研究の１８〜２４月の期間の間に尿毒症クリーゼを発現しなかったので、代わりの選択肢は、尿毒症クリーゼを発症した後に腎臓餌料による治療を開始するというものであろう。しかしながら、尿毒症クリーゼを発現した維持餌料群の５匹のネコのうちの３匹しか生存しなかった。更に、尿毒症クリーゼの発症に続いて血清クレアチニン濃度における持続的な上昇が起こった。更に、これらの３匹のネコを研究から外した後、体液、電解質、及び酸−塩基の欠乏及び過剰を最小にするために、経口でのリン酸塩結合剤、クエン酸カリウム、非経口液体、及び製造した腎臓餌料による長期間の支持療法が必要であった。これらの観察結果は、尿毒症クリーゼを発症する前に腎臓餌料によるＣＲＦの治療を開始することが推奨されることを支持する。この研究結果により、尿毒症クリーゼが発現するまでＣＲＦのネコに対して腎臓餌料を控えることは、劣った潤滑作用によってエンジンに対する元に戻せない損傷を引き起こす時点までオイルの品質が低下した後に自動車にモーターオイルを補給することに似ていることが示される。
【００９３】
血清クレアチニン濃度は、通常、ＧＦＲの粗指標として用いられている。単一の血清クレアチニン測定は腎機能の正確な評価を与えないことが示唆されているが、同じ動物において連続的に行われた測定はＧＦＲにおける傾向を定めるのに有用である。尿毒症クリーゼの発症の前に腎臓餌料及び維持餌料のネコにおけるクレアチニンの血清濃度において検出可能な差がないことを、腎機能における変化が起こらなかったことの動かぬ証拠と判断すべきではない。血清クレアチニン濃度とＧＦＲとの間には相互関係が存在し、ＧＦＲが５０％減少すると血清クレアチニン濃度が１００％上昇する。ＧＦＲにおける大きな変化が血清クレアチニン濃度における小さな変化と関連している場合には、血清クレアチニン濃度は、ＣＲＦの早期におけるＧＦＲの減少の特に感受性の低い指標である。例えば、ＧＦＲが５０％減少すると、血清クレアチニン濃度は１．０ｍｇ／ｄＬから２．０ｍｇ／ｄＬにしか上昇しない。ＧＦＲが更に５０％減少すると、血清クレアチニン濃度は２．０から４．０ｍｇ／ｄＬに上昇する。イヌリン・クリアランスの研究を用いてＧＦＲを評価すれば、本研究における二つの餌料群の間の腎機能における差を認めることができた可能性がある。しかしながら、ネコを所有する飼い主に対するイヌリン・クリアランスの研究を行うために必要な技術的困難性、時間、及び血清の容量のために、その使用は本研究からは除外した。
【００９４】
餌料の割り当て時においては、維持餌料群（平均＝１７．４５±３．０７ミリモル／Ｌ）と比較して腎臓餌料群（平均＝１９．７２±２．０３ミリモル／Ｌ）において非常に高い血中重炭酸塩濃度が観察された。アシドーシスは、病態生理学においてネコ、イヌ、及びヒトにおける尿毒症の要因と考えられている。しかしながら、本研究においては、両方の群における平均血中重炭酸塩濃度は、ミネソタ大学獣医医療センターの基準範囲内であった。その後に尿毒症クリーゼを発現した５匹のネコを分析から外した時点においても、二つの群の平均血中重炭酸塩濃度の間の差はベースラインにおいて大きなままであった。
【００９５】
実施例の概要：腎臓餌料（タンパク質、リン、ナトリウム、及び脂質の組成を変更）が、軽度〜中等度の慢性腎不全を有するネコにおける尿毒症の発症率及び死亡率を最小にする点で、成猫の維持餌料よりも優れているかどうかを見出すために、二重マスク化比較無作為臨床試験を設計した。
【００９６】
４５匹の飼い主が所有するネコを、維持餌料又は腎臓餌料に無作為に割り当てて、２４月まで３月毎に診断した。カプラン・メイヤー生存分析を用いて、尿毒症、腎臓に関係する死亡率、及び全ての原因の死亡率を最小にする点で、維持餌料と比較した腎臓餌料の有効性を評価した。
【００９７】
【表７】
【００９８】
１２月及び２４月の間隔の間において、腎臓餌料を給餌した群においては、ベースラインにおいて、血清尿素窒素濃度は非常により低く、血中重炭酸塩濃度は非常により高かった。維持餌料を給餌したネコは、腎臓餌料を給餌したネコ（０％）と比較して、非常に大きな数の尿毒症の発症数（２２％）を有していた。腎臓餌料を給餌したネコにおいては、腎臓に関係する死亡率において大きな減少が観察された。
【００９９】
本研究において評価した腎臓餌料は、軽度〜中等度の自発性慢性腎不全を有するネコにおける尿毒症の発症率及び死亡率を最小にする点で、成猫の維持餌料よりも優れていた。したがって、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料は、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延させるのに有用である。
【０１００】
本明細書においては、本発明の代表的な好ましい態様を開示し、特定の用語を用いたが、これらは一般的且つ説明的な意味のみで用いており、特許請求の範囲において示す本発明の範囲を限定する目的で用いてはいない。明らかに、上記の教示事項を考慮して本発明の多くの修正及び変更が可能である。したがって、特許請求の範囲内において、本発明は、特に記載したものとは異なる他の方法で実施することができると理解すべきである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ネコに、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む、ネコの寿命を延長する方法。
【請求項２】
タンパク質、リン、及びナトリウムを、それぞれ少なくとも約１０％減少させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
餌料が、乾燥物質基準で、約１８％〜約４０％のタンパク質、約０．２％〜約０．８５％のリン、及び約０．０４％〜約０．３５％のナトリウムを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
餌料が、約３．６〜約７．９ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥのタンパク質、約０．０４〜約０．１７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥのリン、及び約０．００８〜約０．０７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥのナトリウムを与える、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
餌料が、「給餌」基準で、約５％〜約４０％の量のタンパク質、約０．０１％〜約２％の量のリン、及び約０．０１％〜約２％の量のナトリウムを含む乾燥餌料を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
餌料が、「給餌」基準で、約４％〜約１２％の量のタンパク質、約０．０３％〜約０．２％の量のリン、及び約０．０３％〜約０．２％の量のナトリウムを含む湿潤餌料を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
餌料に１以上のω−３脂肪酸が補給されている、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
ネコに、餌料を少なくとも約６月間与える、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
腎臓病の発症又は最初の診断の後から開始して実質的にネコの寿命の残りの間継続してネコに餌料を与える、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ネコに１以上の腎臓薬を投与することを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
少なくとも一つの腎臓薬が、ＡＣＥ阻害薬、エンドセリン阻害薬、血管ペプチド阻害薬、カルシウムチャンネル遮断薬、Ｈ２レセプター拮抗薬、プロトンポンプ阻害薬、細胞保護薬、制吐薬、アンドロジェン、エリスロポエチン、リン酸塩吸着薬、カルシトリオール、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
腎臓病の存在又は進行に関する定期的な診断評価を行い、診断評価の結果に基づいて餌料及び腎臓薬の用量又は処方計画を調節することを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
診断評価が、血液マーカー、尿マーカー、身体観察及び測定、造影、ＳＮＰ、遺伝子プロファイル、プロテオームプロファイル、及び代謝プロファイルからなる群から選択される１以上の基準に基づく、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
該診断評価が、少なくとも部分的に、上昇した血中尿素窒素濃度、上昇した血清クレアチニン濃度、高ホスファターゼ血症、高カリウム血症、低カリウム血症、代謝性アシドーシス、及び低アルブミン血症からなる群から選択される１以上の血液マーカーに基づく、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
該診断評価が、少なくとも部分的に、尿濃縮能障害、タンパク尿症、円柱尿、腎性血尿症、不適切な尿ｐＨ、不適切な尿グルコース濃度、及びシスチン尿症からなる群から選択される１以上の尿マーカーに基づく、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
ネコに、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む、ネコの腎不全の発症を遅延する方法。
【請求項１７】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを少なくとも約１０％減少させる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
単一の包装内の別々の容器内に、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えるのに好適な餌料組成物、及び（１）１以上の腎臓薬、及び（２）１以上の腎臓診断具の少なくとも一つを含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用なキット。
【請求項１９】
餌料が、「給餌」基準で、約５％〜約４０％の量のタンパク質、約０．０１％〜約２％の量のリン、及び約０．０１％〜約２％の量のナトリウムを含む乾燥餌料、並びに、「給餌」基準で、約４％〜約１２％の量のタンパク質、約０．０３％〜約０．２％の量のリン、及び約０．０３％〜約０．２％の量のナトリウムを含む湿潤餌料からなる群から選択される、請求項１８に記載のキット。
【請求項２０】
標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えることを含む、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させる方法。
【請求項２１】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを少なくとも約１０％減少させる、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
情報又は指示を含む書類、デジタル保存媒体、光学保存媒体、音声表示、又は画像表示を含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるために、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を用いることに関する情報又はそのための指示を伝達するための手段。
【請求項２３】
ラベル、カタログ、広告、添付文書、コンピューター可読媒体、音声表示、画像表示、ウエブサイトページ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２２に記載の伝達手段。
【請求項２４】
腎臓病を予防又は治療するための腎臓薬と組み合わせて餌料を用いることに関する情報又はそのための指示、並びに、ネコにおいて腎臓機能を測定し腎臓病の存在及び重篤度を診断するための腎臓診断具を用いることに関する情報及びそのための指示の少なくとも一つを更に含む、請求項２２に記載の手段。
【請求項１】
ネコに、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む、ネコの寿命を延長する方法。
【請求項２】
タンパク質、リン、及びナトリウムを、それぞれ少なくとも約１０％減少させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
餌料が、乾燥物質基準で、約１８％〜約４０％のタンパク質、約０．２％〜約０．８５％のリン、及び約０．０４％〜約０．３５％のナトリウムを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
餌料が、約３．６〜約７．９ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥのタンパク質、約０．０４〜約０．１７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥのリン、及び約０．００８〜約０．０７ｇ／１００ｋｃａｌ ＭＥのナトリウムを与える、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
餌料が、「給餌」基準で、約５％〜約４０％の量のタンパク質、約０．０１％〜約２％の量のリン、及び約０．０１％〜約２％の量のナトリウムを含む乾燥餌料を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
餌料が、「給餌」基準で、約４％〜約１２％の量のタンパク質、約０．０３％〜約０．２％の量のリン、及び約０．０３％〜約０．２％の量のナトリウムを含む湿潤餌料を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
餌料に１以上のω−３脂肪酸が補給されている、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
ネコに、餌料を少なくとも約６月間与える、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
腎臓病の発症又は最初の診断の後から開始して実質的にネコの寿命の残りの間継続してネコに餌料を与える、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ネコに１以上の腎臓薬を投与することを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
少なくとも一つの腎臓薬が、ＡＣＥ阻害薬、エンドセリン阻害薬、血管ペプチド阻害薬、カルシウムチャンネル遮断薬、Ｈ２レセプター拮抗薬、プロトンポンプ阻害薬、細胞保護薬、制吐薬、アンドロジェン、エリスロポエチン、リン酸塩吸着薬、カルシトリオール、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
腎臓病の存在又は進行に関する定期的な診断評価を行い、診断評価の結果に基づいて餌料及び腎臓薬の用量又は処方計画を調節することを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
診断評価が、血液マーカー、尿マーカー、身体観察及び測定、造影、ＳＮＰ、遺伝子プロファイル、プロテオームプロファイル、及び代謝プロファイルからなる群から選択される１以上の基準に基づく、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
該診断評価が、少なくとも部分的に、上昇した血中尿素窒素濃度、上昇した血清クレアチニン濃度、高ホスファターゼ血症、高カリウム血症、低カリウム血症、代謝性アシドーシス、及び低アルブミン血症からなる群から選択される１以上の血液マーカーに基づく、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
該診断評価が、少なくとも部分的に、尿濃縮能障害、タンパク尿症、円柱尿、腎性血尿症、不適切な尿ｐＨ、不適切な尿グルコース濃度、及びシスチン尿症からなる群から選択される１以上の尿マーカーに基づく、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
ネコに、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を与えることを含む、ネコの腎不全の発症を遅延する方法。
【請求項１７】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを少なくとも約１０％減少させる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
単一の包装内の別々の容器内に、標準的なネコの餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えるのに好適な餌料組成物、及び（１）１以上の腎臓薬、及び（２）１以上の腎臓診断具の少なくとも一つを含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるのに有用なキット。
【請求項１９】
餌料が、「給餌」基準で、約５％〜約４０％の量のタンパク質、約０．０１％〜約２％の量のリン、及び約０．０１％〜約２％の量のナトリウムを含む乾燥餌料、並びに、「給餌」基準で、約４％〜約１２％の量のタンパク質、約０．０３％〜約０．２％の量のリン、及び約０．０３％〜約０．２％の量のナトリウムを含む湿潤餌料からなる群から選択される、請求項１８に記載のキット。
【請求項２０】
標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料をネコに与えることを含む、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させる方法。
【請求項２１】
タンパク質、リン、及びナトリウムのそれぞれを少なくとも約１０％減少させる、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
情報又は指示を含む書類、デジタル保存媒体、光学保存媒体、音声表示、又は画像表示を含む、ネコの寿命を延長し、ネコの腎不全の発症を遅延し、ネコの腎臓病に起因する罹病率及び死亡率を減少させるために、標準的なネコの維持餌料と比較して減少したタンパク質、リン、及びナトリウムのレベルを有する餌料を用いることに関する情報又はそのための指示を伝達するための手段。
【請求項２３】
ラベル、カタログ、広告、添付文書、コンピューター可読媒体、音声表示、画像表示、ウエブサイトページ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２２に記載の伝達手段。
【請求項２４】
腎臓病を予防又は治療するための腎臓薬と組み合わせて餌料を用いることに関する情報又はそのための指示、並びに、ネコにおいて腎臓機能を測定し腎臓病の存在及び重篤度を診断するための腎臓診断具を用いることに関する情報及びそのための指示の少なくとも一つを更に含む、請求項２２に記載の手段。
【公表番号】特表２００８−５３９２７４（Ｐ２００８−５３９２７４Ａ）
【公表日】平成２０年１１月１３日（２００８．１１．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５０９１８４（Ｐ２００８−５０９１８４）
【出願日】平成１８年４月２８日（２００６．４．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１６３２６
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１１９０４９
【国際公開日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【出願人】（５０２３２９２２３）ヒルズ・ペット・ニュートリシャン・インコーポレーテッド (138)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年１１月１３日（２００８．１１．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年４月２８日（２００６．４．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１６３２６
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１１９０４９
【国際公開日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【出願人】（５０２３２９２２３）ヒルズ・ペット・ニュートリシャン・インコーポレーテッド (138)
【Ｆターム（参考）】
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