フェニルアルキル−イミダゾール−ビスホスホネート化合物
(非置換または置換フェニル)−アルキル−置換[(イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン、ならびにその製造方法もしくは工程、医薬製剤の製造におけるそれらの使用、疾患の処置におけるそれらの使用、疾患の処置におけるそれらの使用方法、それらを含む医薬製剤および／または疾患の処置において使用するための該化合物が開示される。該化合物は過剰なまたは不適切な骨吸収を阻止できる。該化合物は、式Ｉ
のものであり、ここで、Ｒ１およびＲ２は明細書に記載の通りであり、遊離形、エステルの形、および／または塩の形であり得る。
のものであり、ここで、Ｒ１およびＲ２は明細書に記載の通りであり、遊離形、エステルの形、および／または塩の形であり得る。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規(非置換または置換フェニル)−アルキル−置換[(イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸類、ならびにその製造方法もしくは工程、医薬製剤の製造におけるそれらの使用、疾患の処置におけるそれらの使用、疾患の処置におけるそれらの使用方法、それらを含む医薬製剤および／または疾患の処置において使用するための該化合物(ここで、疾患は特に以下に記載する通りである)に関する。本化合物は、過剰なまたは不適切な骨吸収を阻止できる。
【発明の概要】
【０００２】
本発明は、第一の面において、特に式Ｉ
【化１】
〔式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であり、他方は非置換または置換フェニル−アルキルである。〕
の化合物、またはそのエステルおよび／または塩に関する。
【０００３】
上記および下記において使用する一般的表現は、好ましくは以下の意味を有し、各一般的な表現を、互いに独立して、個々に置き換えてよく、または２個以上または特に全てをより具体的な定義に置き換えてよく、それにより、本発明のより好ましい態様を規定する：
【０００４】
低級アルキルは、例えばＣ１−Ｃ５アルキル、例えばメチル、エチル、プロピルまたはブチル、およびまたイソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチル、またはペンチル、例えばｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチルまたはｔｅｒｔ−ペンチルである。
【０００５】
置換または非置換であるフェニル−アルキルは、好ましくはフェニル−Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、より好ましくはフェニル−低級アルキル、さらに好ましくはフェニル−Ｃ２−Ｃ６−アルキルであり、ここで、アルキルは分枝鎖または直鎖であり、そしてフェニルは非置換であるか、または好ましくはＣ１−Ｃ７−アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、ハロ、アミノ、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、Ｃ１−Ｃ７−アルカノイル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニルおよび／またはＣ１−Ｃ７アルカンスルホニル)−アミノ、カルボキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−スルファモイルおよびシアノから成る群から独立して選択される１個以上、例えば５個まで、より好ましくは３個までの置換基で置換されている(置換フェニルとして)。
【０００６】
フェニル−低級アルキルは、例えばフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、例えばベンジルであるか、または式ＩにおけるＲ１およびＲ２の場合、好ましくはフェニル−エチル、フェニルプロピル、フェニルブチルまたはフェニルペンチルであり、ここで、プロピル、ブチルまたはペンチルは分枝鎖でも直鎖でもよく、または式IIIにおけるＲの場合、好ましくはベンジルである。
【０００７】
ハロ(ゲノ)(およびまたハロゲニド)は、好ましくはフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードである。
“約”は、好ましくは記載した数字が、その記載した値から最大±２０％、より好ましくは最大±１０％、最も好ましくは±５％まで逸脱し得ることを意味する。
【０００８】
式Ｉの化合物の塩は、特に薬学的に許容される塩基との塩(薬学的に許容される塩)、例えば、Ｉａ族、Ｉｂ族、IIａ族およびIIｂ族の金属由来の非毒性金属塩、例えばアルカリ金属塩、好ましくはリチウム塩またはより好ましくはナトリウム塩またはカリウム塩、アルカリ土類金属塩、好ましくはカルシウム塩またはマグネシウム塩、銅、アルミニウム塩または亜鉛塩、およびまたアンモニアまたは有機アミン類または第４級アンモニウム塩基、例えば遊離またはＣ−ヒドロキシル化脂肪族アミン類、好ましくはモノ−、ジ−またはトリ−低級アルキルアミン類、例えばメチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミンまたはジエチルアミン、モノ−、ジ−またはトリ−(ヒドロキシ−低級アルキル)アミン類、例えばエタノールアミン、ジエタノールアミンまたはトリエタノールアミン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンまたは２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、またはＮ−(ヒドロキシ−低級アルキル)−Ｎ,Ｎ−ジ−低級アルキルアミン類またはＮ−(ポリヒドロキシ−低級アルキル)−Ｎ−低級アルキルアミン類、例えば２−(ジメチルアミノ)エタノールまたはＤ−グルカミン、または第４級脂肪族水酸化アンモニウム類、例えばテトラブチル水酸化アンモニウムとのアンモニウム塩である。
【０００９】
式Ｉの化合物およびその塩は、価値ある薬理学的特性を有する。特に、それらは細胞内のメバロン酸経路を阻害し、温血動物のカルシウム代謝に対し著しい制御作用を有する。
【００１０】
最も具体的に、それらは、Hornby et al. Calcified Tiss Int 2003; 72: 519-527 and Gasser et al. J Bone Miner Res 2008; 23: 544-551に記載されている実験方法で証明できる、約１〜５００μg／kgの用量で静脈内または皮下投与後、エストロゲン欠乏ラットにおける骨吸収の著しい阻害をもたらす。腫瘍関連骨溶解も、同様に、Peyruchaud et al. J Bone Miner Res 2001; 16: 2027-2034の方法を使用して、約１〜５００μg／kgの用量範囲の静脈内または皮下投与後に阻止される。加えて、 Newbould, Brit. J. Pharmacology 21, 127 (1963)およびRordorf et al. Int J Tissue React. 1987; 9(4): 341-7に従う実験方法で同様に投与したとき、式Ｉの化合物およびその塩は、それぞれアジュバントおよびコラーゲン関節炎を有する齧歯類の関節炎状態の進行の著しい阻害をもたらす。
【００１１】
新規ビスホスホネート類は、特に１種以上の疾患(この用語は状態または障害を含む)の処置におけるヒトおよび獣医使用のための薬剤として有用であり、特に過剰なまたは不適切な骨吸収、特に骨および関節の疾患、例えば
− 良性状態、例えば骨粗鬆症、骨減少症、骨髄炎、骨関節症、リウマチ性関節炎、骨髄浮腫、骨痛、反射性交感神経性ジストロフィー、強直性脊椎炎(別名ベヒテレフ病)、骨のパジェット病または歯周病、
− 悪性状態、例えば悪性腫瘍の高カルシウム血症、固形腫瘍および血液系腫瘍に関連する骨転移、
− 整形外科的状態、例えば人工関節の緩み、人工関節移動、インプラント固定、インプラントコーティング、骨折治癒、仮骨延長法、脊椎固定術、無血管性骨壊死、移植骨、骨代用材、
または、かかる状態の２種以上の任意の組合せと関連する過剰なまたは不適切な骨吸収を阻止できる。
【００１２】
非エンドサイトーシス細胞にビスホスホネートが入ることを必要とする疾患に対するビスホスホネート類の効果は、かかる細胞による一般的ビスホスホネート類の取り込みが極めて低いため、極めて制限されている。これは、イバンドロネートでは−３.３およびゾレドロネートでは−３.０と計算されるその低いオクタノール／水分配係数(ｃｌｏｇＰ)から明らかとなるその高い親水性によるものである。対照的に、ここに記載するフェニルアルキル−イミダゾールビスホスホネート化合物は、０に近いまたは０を超えるｃｌｏｇＰ値を有する。これは親水性低下および親油性上昇を意味し、これは非エンドサイトーシス細胞への取り込みのために有益である。細胞透過性の増加は、破骨細胞以外の細胞、マクロファージまたは他のエンドサイトーシス細胞におけるメバロン酸経路の完全なまたは部分的な阻害が望まれる疾患の処置を容易にする。エンドサイトーシスは、細胞が、細胞の外部由来の物質を、細胞膜から形成された小胞と共に貪食することにより吸収する過程である。
【００１３】
ビスホスホネート類(ゾレドロン酸)をスタチン類(プラバスタチン)と組み合わせることにより優れた効果が細胞実験ならびにヒト早老、例えばハッチンソン・ギルフォード・プロジェリア症候群のマウスモデルで示されている(Nature Medicine (2008) 14, 767-772)。本発明の化合物を用いて、高い親油性および低い骨への結合により細胞膜を容易に通過できるために、これらのモデルにおける効力または有効性が高まることが期待される。去力である本発明の化合物は、これらのモデルで、スタチンの非存在下でさえ活性であることが予測される。
【００１４】
一般に、高い親油性により、本発明の化合物は、破骨細胞以外の細胞、マクロファージまたは他のエンドサイトーシス細胞におけるメバロン酸経路を阻害すべき疾患の処置のためにより強力であるか、または効率的であることが期待される。これは、以下のものを含み、それらに限定されない：
− 閉経前乳癌における内分泌療法でゾレドロン酸について先に証明されたビスホスホネート類での直接抗腫瘍(Gnant et al. (2009) N Engl J Med 360, 679-91)。
【００１５】
− ＦＰＰＳおよびＨＭＧ ＣｏＡレダクターゼが両方ともメバロン酸経路の酵素であるための、コレステロール低下剤としての本発明の化合物の使用。実際、ゾレドロン酸で処置した骨髄腫患者では血清コレステロールレベルが低いことが報告されているが(Gozzetti, A. et al. (2008) Calcif Tissue Int 82, 258-62)、本発明のビスホスホネート類の効果は、高い細胞透過性のためにより顕著である可能性がある。
【００１６】
− 抗寄生虫剤としての本発明の化合物の使用。ビスホスホネート類は、リーシュマニア症、マラリア、クリプトスポリジウム症およびシャーガス病を起こす寄生原虫に対して有効であることが示されているが(Docampo, R. & Moreno, S. N. (2001) Current Drug Targets: Infectious Disorders 1, 51-61により総括)、本発明の化合物は、親油性増加のためより適している可能性がある。
【００１７】
以下の刊行物(その各々は、特に以下に記載するアッセイまたは方法に関する記載に関して、引用により本明細書に包含させる)は、式Ｉの化合物の有利な生物学的プロファイルを確認するために使用できる種々のアッセイおよび方法を記載する：
Calcif. Tissue Int. (2003) 72, 519-527に記載の通り(１)骨ターンオーバーおよび大腿骨密度(ＢＭＤ)の生化学マーカーの一過性の変化を解明するため、(２)静的および動的組織形態計測的パラメータ、骨微小構造および機械的強度の変化を測定するため、および(３)これらのパラメータに対する式Ｉの化合物での慢性処置の予防効果を評価するための、閉経後骨粗鬆症のためのモデルとしての成熟、卵巣摘出(ＯＶＸ)ラットへの一回ｉ.ｖ.投与の効果を証明できる。高活性を、ここで見ることができる。
【００１８】
ARTHRITIS & RHEUMATISM (2004), 50(7), 2338-2346に示す通り、ラットにおける、コラーゲン誘発関節炎(ＣＩＡ)のエフェクター相中の滑膜炎症、構造的関節損傷、および骨代謝に対する、式Ｉの化合物の効果を証明できる。
【００１９】
J. Bone Joint Surg. (2005), 87-B, 416-420に記載の通り、骨内殖に対する式Ｉの化合物の効果を、イヌの尺骨内に多孔性タンタルインプラントを両側性に置いた動物モデルにおいて試験できる。
【００２０】
J. Natl. Cancer. Inst. (2007), 99, 322 - 30に記載された方法に従って、マウスモデルにおける骨格腫瘍増殖の阻害を証明できる。
【００２１】
Nat. Medicine (2008), 14, 767-772に記載の通り、プラバスタチンと組み合わせたゾレドロン酸の有利な効果が、細胞実験ならびにハッチンソン・ギルフォード・プロジェリア症候群のマウスモデルにおいて証明されている。本発明の化合物を用いて、それらが細胞膜をより容易に通過できるため、効果の増強が期待される。
【００２２】
ファルネシルピロリン酸シンターゼに結合したときの式Ｉの化合物のｘ線構造は、Chem. Med. Chem. (2006), 1, 267 - 273に記載された方法により、またはそれに準じて得ることができる。４１kDaサブユニットのホモ二量体酵素であるヒトＦＰＰＳは、Ｃ５イソプレノイド類ジメチルアリルピロリン酸(ＤＭＡＰＰ)およびイソペンテニルピロリン酸からＣ１５代謝物ファルネシルピロリン酸(ＦＰＰ)の二段階合成を触媒する。ＦＰＰは、必須ＧＴＰａｓｅシグナリングタンパク質、例えばＲａｓおよびＲｈｏの翻訳後プレニル化のために必要であり、またコレステロール、ドリコール、およびユビキノンの合成前駆体でもある。
【００２３】
例えば、無細胞インビトロアッセイにおいて、既知化合物より式Ｉの化合物が優れていることを示すことができる。簡単に言うと、反応を酵素および式Ｉの阻害剤の存在下で進行させ、反応産物(ファルネシルピロリン酸)をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量する。
詳細には、阻害剤および酵素を基質添加前にプレインキュベートする。
【００２４】
本アッセイは、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳに基づく、ファルネシルピロリン酸シンターゼ(ＦＰＰＳ)の無標識アッセイである。この方法は、インビトロで非標識ファルネシルピロリン酸(ＦＰＰ)を定量し、ＦＰＰＳの阻害剤を発見するためのハイスループットシステム(ＨＴＳ)および候補化合物のＩＣ５０値の決定に適する。分析時間は２.０分間であり、総サイクル時間は２.５分間である。本分析は、３８４ウェルプレート用に構築でき、プレートあたりの分析時間１６時間となる。
【００２５】
試薬：
ペンタノール、メタノール、およびイソプロピルアルコールはＨＰＬＣグレートであり、Fisher Scientificから得る。ＤＭＩＰＡはSigma-Aldrichからである。水は、社内Milli-Qシステムからである。アッセイ緩衝液(２０mM ＨＥＰＥＳ、５mM ＭｇＣｌ２および１mM ＣａＣｌ２)は、Sigma-Aldrichから得た１mM原液の希釈により調製する。ゲラニルピロリン酸(ＧＰＰ)、イソプレニルピロリン酸(ＦＰＰ)、およびファルネシルＳ−チオロピロリン酸(ＦＳＰＰ)はEchelon Biosciences(Salt Lake City, UT)からである。ヒトファルネシルピロリン酸シンターゼ(FPPS, Swissprot ID: P14324)(１３.８mg／mL)をRondeau et al (ChemMedChem 2006, 1, 267-273)に記載の通り製造する。
【００２６】
アッセイ：
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析を、Agilent 1100 binary LC pump Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA)と連動したMicromass Quattro Microタンデム四重極質量分析器(Waters Corp., Milford, MA, USA)で行う。CTC Analyticsオートサンプラー(Leap Technologies Inc., Carrboro, NC, USA)を用いて、２.５μLの注入ループサイズを使用して注入する。クロマトグラフィーを、ガードカラムホルダー(P/N 186000262)に入れられたWaters ２.１×２０mm Xterra MS C18 ５μmガードカラム(P/N 186000652)(Waters Corp., Milford, MA, USA)で、０.１％ＤＭＩＰＡ／メタノールを溶媒Ａとして、および０.１％ＤＭＩＰＡ／水を溶媒Ｂとして使用して行う(ＤＭＩＰＡはジメチルイソプロピルアミンである)。勾配は、５％Ａを０.００〜０.３０分間、５０％Ａを０.３１分目、８０％Ａを１.００分目、および５％Ａを１.０１〜２.００分間である。流速は０.３mL／分であり、この流れを０.００〜０.５０分間および１.２０〜２.００分間に再び迂回させて廃棄する。
【００２７】
モニターする多重反応モニタリング(ＭＲＭ)遷移は、２２eVの衝突エネルギーおよびＡｒの２.１×１０−３mbarの衝突セル圧力で、ＦＰＰについて３８１−＞７９−およびＦ
ＳＰＰについて３９７−＞１５９−である。遷移あたりの滞留時間は、０.４Daのスパンで４００ミリ秒である。チャネル間遅延およびスキャン間(interscan)遅延はいずれも０.０２秒である。他の質量分光学操作パラメータは：キャピラリー、２.０kV；コーン、３５Ｖ；エキストラクター、２.０Ｖ、熱源温度、１００℃；脱溶媒和ガス温度、２５０℃；脱溶媒和ガス流、６５０Ｌ／時間；コーンガス流、２５Ｌ／時間；乗算器、６５０Ｖ。
【００２８】
サンプルあたりの総サイクル時間は２.５分間である。分析が３８４ウェルプレート用に構築されているため、プレートを１６時間で分析する。クロマトグラムをQuanlynxソフトウェアで処理し、それは、各ＦＰＰピーク面積をＦＳＰＰピーク面積(内部標準)で割る。得られた値を、対応するサンプルウェルについての相対的応答として報告する。
【００２９】
ＦＰＰＳアッセイ方法
３８４ウェルプレートの各ウェルに、２０％ＤＭＳＯ／水中５μLの化合物を入れる。１０μLのＦＰＰＳ(アッセイ緩衝液で１対８００００に希釈)を各ウェルに添加し、化合物と５分間プレインキュベートさせる。その時点で、２５μLのＧＰＰ／ＩＰＰ(アッセイ緩衝液中各５μM)を添加して、反応を開始させる。３０分間後、２％ＤＭＩＰＡ／ＩＰＡ中１０μLの２μM ＦＳＰＰの添加により反応を停止させる。反応混合物を、ボルテックス混合を使用して５０μLのｎ−ペンタノールで抽出する。相分離後、２５μLの上部(ｎ−ペンタノール)層を新しい３８４ウェルプレートに移し、ペンタノールを真空遠心を使用して蒸発させる。乾燥させた残留物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法で分析するために、５０μLの０.１％ＤＭＩＰＡ／水に再構成する。
【００３０】
ＦＳＰＰを、マススペクトルの内部標準として使用する。リン酸基は、スペクトル内の基準ピークとして(Ｍ−Ｈ)−イオンを生じる。
【００３１】
本発明の化合物は、好ましくは、この試験系で、０.８〜１０nMの範囲のＩＣ５０を有し、好ましいものは、好ましくは１.２〜３.６nMの範囲のＩＣ５０を有する。特に、それらは、先行文献の化合物、例えば[２−(５−フェニル−プロピル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸を超える驚くほどの優位性を示す。これらの化合物の優位性は、オクタノール／水分配係数(ｃｌｏｇＰ)から判断してこれらの化合物の親水性が低下していることを考慮すると、さらに驚くことである。
【００３２】
ＩＣ５０決定のためのこのアッセイの有用性は、既知のビスホスホネートＦＰＰＳ阻害剤であるゾレドロン酸を使用して確認される。
【００３３】
本発明は、特に、Ｒ１が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピルまたはフェニル−イソプロピルまたはさらにフェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルであり(ここで、置換フェニルは好ましくは上に定義した通り、特にトリル(＝メチルフェニル)、例えばｐ−トリルである)、そしてＲ２が水素である式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩に関する。
【００３４】
本発明は、特に、また、Ｒ１が水素であり、そしてＲ２が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピル、フェニル−イソプロピルまたはトリルプロピル、特にｐ−トリルプロピル、またはさらにフェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルである式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩に関する。
【００３５】
好ましいのは、Ｒ１が水素であり、そしてＲ２が非置換または置換フェニル−プロピル、特に非置換または置換３−フェニル−プロピルである(ここで、置換フェニルは、好ましくは上に定義した通りである)式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩である。
【００３６】
より好ましいのは、Ｒ１が非置換または置換フェニル−プロピル、特に非置換または置換３−フェニル−プロピルであり(ここで、置換フェニルは、好ましくは上に定義した通りである)、そしてＲ２が水素である式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩である。
【００３７】
最も好ましいのは、Ｒ１がフェニル−プロピル、特に３−フェニル−プロピルである式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩である。
【００３８】
本発明の化合物は、別の化合物については当分野で既知である方法に従い製造できる。例えば、少なくとも得られる新規生成物および／または用いる新規遊離体に基づき、新規方法は、好ましくは、式II
【化２】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は式Ｉの化合物について定義した通りである。〕
のカルボン酸化合物と、オキシハロゲン化リンを反応させて式Ｉの化合物、またはその塩を得て、
必要であれば、得られる遊離の式Ｉの化合物をその塩に変換し、得られる式Ｉの化合物の塩を遊離化合物に変換しおよび／または得られる式Ｉの化合物の塩をその異なる塩に変換することを含む。
【００３９】
オキシハロゲン化リンとして、オキシ塩化リン(ＰＯＣｌ３)が特に好ましい。本反応は、好ましくは一般的な溶媒または溶媒混合物中、例えば芳香族性炭化水素、例えばトルエン中、好ましくは高温で、例えば５０℃から反応混合物の還流温度で、例えば(約)８０〜(約)１２０℃で、Ｈ３ＰＯ３の存在下に行う。
【００４０】
遊離の式Ｉの化合物を、上に記載した塩基の一つを用いる部分的なまたは完全な中和により塩基性塩に変換できる。
【００４１】
塩を、それ自体既知の方法で、例えば酸試薬、例えば鉱酸での処理により、遊離化合物に変換できる。
【００４２】
本化合物は、その塩を含み、水和物の形で得ることもでき、または結晶構造内に結晶化に使用した溶媒を含み得る。
【００４３】
遊離形の新規化合物とその塩の形態の密接な関係から、本明細書中の遊離化合物およびその塩に関する記載は、同様に対応する塩および遊離化合物にも適用される。
【００４４】
本発明はまた、本方法の任意の段階で中間体として得られる化合物を出発物質として使用して、残りの工程を行うか、または出発物質をその塩の形で、または、好ましくは、その反応条件下に形成させる、方法の態様にも関する。
【００４５】
出発物質は、例えば、好ましくは、式III
【化３】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は式Ｉの化合物について定義した通りであり、そしてＲは非置換または置換アルキル、特に低級アルキルまたはフェニル−低級アルキルである。〕
の化合物を、適当な酸、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩酸の存在下、好ましくは水性溶媒、例えば水の存在下、好ましくは高温で、例えば(約)５０〜(約)１００℃、例えば８０〜１００℃の範囲で鹸化して、式IIの化合物、またはその塩を得ることにより得ることができる。
【００４６】
式IIIの化合物は、例えば、好ましくは、式IV
【化４】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は式Ｉの化合物について定義した通りである。〕
のイミダゾール化合物と、式Ｖ
【化５】
〔式中、Ｒは式IIIの化合物について定義した通りであり、そしてＸはハロゲン、特にフルオロ、クロロ、ヨードまたは特にブロモ、低級アルカンスルホニルオキシまたはトルエンスルホニルオキシである。〕
のエステルを、好ましくは強塩基、例えばアルカリ金属アルコラート、特にカリウムｔｅｒｔ−ブチラート(ＫＯｔＢｕ)の存在下、適当な溶媒または溶媒混合物、例えば環状エーテル、例えばテトラヒドロフラン中、好ましくは(約)−１０〜(約)８０℃、例えば２０〜３０℃の温度で反応させることにより、得ることができる。必要であれば、得られた式IIIの化合物の混合物(一方の化合物では、Ｒ１が非置換または置換フェニル−アルキルであり、そしてＲ２が水素であり、他方の化合物では、Ｒ２が非置換または置換フェニル−アルキルであり、そしてＲ１が水素である)を、例えばクロマトグラフィー法、差示的結晶化などにより分割できる。
【００４７】
式IVおよびＶの出発物質、ならびに今まで記載しなかった全ての他の出発物質は、当分野で既知の方法により、またはその方法に準じて得ることができ、市販されておりおよび／または本明細書に、特に実施例に記載する方法に準じて製造できる。
【００４８】
本発明はまた、全ての新規方法工程または方法工程の組合せ、ならびに全ての新規出発物質または中間体、またはその塩にも関する。
【００４９】
式Ｉの化合物のエステルは、例えば、類似化合物について先行文献に記載された方法に準じて製造できる。
【００５０】
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される非毒性塩を含む医薬組成物は、温血動物への経腸投与、例えば経口投与、または直腸投与、および非経腸投与用であり、薬理学的活性成分は単独でまたは薬学的に適切な担体と共に存在する。
【００５１】
新規医薬組成物は、例えば約０.０００１〜８０％、好ましくは約０.００１〜１０％の活性成分を含む。経腸または非経腸投与用医薬組成物は、例えば投与単位形態、例えば糖衣錠、錠剤、カプセルまたは坐薬、ならびにアンプル、バイアル、予充填シリンジのものである。これらの医薬組成物は、それ自体既知の方法で、例えば慣用の混合、造粒、糖衣、溶解または凍結乾燥法により製造する。例えば、経口投与用医薬組成物は、活性成分と固体担体を合わせ、場合により得られた混合物を造粒し、混合物または顆粒を、望むならばまたは必要であれば、適当な賦形剤の添加後、錠剤または糖衣錠コアに加工することにより得ることができる。
【００５２】
適当な担体は、特に増量剤、例えば糖、例えばラクトース、サッカロース、マンニトールまたはソルビトール、セルロース製剤および／またはリン酸カルシウム類、例えばリン酸三カルシウムまたはリン酸二水素カルシウム、およびまた結合剤、例えばデンプンペースト、例えばメイズ、コーン、米またはジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン、および／または、所望により、崩壊剤、例えば上記デンプン類、さらにカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸またはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムである。賦形剤は、特に流動促進剤および滑剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸またはその塩、例えばステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウム、および／またはポリエチレングリコールである。糖衣錠コアは、とりわけ、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタンを含み得る濃縮糖溶液、適当な有機溶媒または溶媒混合物中のシェラック溶液、または、胃液に抵抗性のコーティングを製造するために、アセチルセルロースフタラートまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラートのような適当なセルロース製剤の溶液を使用して、胃液に抵抗性であり得る適当なコーティングを施す。例えば、同定するため、または異なる量の活性成分を示すために、染料または色素を錠剤または糖衣錠コアに添加できる。
【００５３】
経口投与用のさらなる医薬組成物は、ゼラチンまたはヒプロメロース製の乾燥充填カプセルおよびまたゼラチンおよび可塑剤、例えばグリセロールまたはソルビトールから成る軟密閉カプセルである。乾燥充填カプセルは、例えば増量剤、例えばラクトース、結合剤、例えばデンプン類、および／または流動促進剤、例えばタルクまたはステアリン酸マグネシウム、および場合により安定化剤と混合された、活性成分を顆粒の形で含み得る。軟カプセルにおいて、活性成分は、好ましくは適当な液体、例えば脂肪油、パラフィン油または液体ポリエチレングリコールに溶解または懸濁されており、それに添加剤も添加できる。
【００５４】
直腸投与用の適当な医薬組成物は、例えば坐薬であり、これは活性成分と坐薬基剤の組合せから成る。適当な坐薬基剤の例は、天然または合成トリグリセライド類、パラフィン炭化水素類、ポリエチレングリコール類および高級アルカノール類である。活性成分と基剤物質の組合せを含むゼラチン直腸カプセルの使用も可能である。適当な基剤物質は、例えば液体トリグリセライド類、ポリエチレングリコール類およびパラフィン炭化水素類である。
【００５５】
非経腸投与(これは特に好ましい)のための特に適当な投与形態は、水可溶性形態、例えば水可溶性塩の活性成分の水溶液である。本溶液を、無機酸または有機酸類または塩基類を用いて約４−９または最も好ましくは約５.５−７.５のｐＨの生理学的に許容されるｐＨ値に調節し得る。本溶液は、さらに無機塩、例えば塩化ナトリウム、または有機化合物、例えば糖類、糖アルコール類、またはアミノ酸類を用いて、最も好ましくはマンニトールまたはグリセロールを用いて等張にし得る。適当な組成物はまた、活性成分の懸濁液、例えば適当な親油性溶媒または媒体、例えば脂肪油類、例えばゴマ油、または合成脂肪酸エステル類、例えばオレイン酸エチルまたはトリグリセライド類が使用される対応する油性注射懸濁液、または粘度を上げる物質、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールおよび／またはデキストラン、および場合によりまた安定化剤を含む水性注射懸濁液である。
【００５６】
本発明はまた、好ましくは炎症性状態、主としてカルシウム代謝の障害に関連する疾患、例えばリウマチ性疾患、および、特に、骨粗鬆症の処置のための式Ｉの化合物およびその塩の使用にも関する。
【００５７】
０.１μg／体重kg未満の非経腸投与量は、硬組織代謝に僅かしか影響を与えない。長期毒性副作用は１０００μg／体重kgを超える投与量で起こり得る。式Ｉの化合物およびその塩は経口、ならびに皮下、筋肉内または静脈内に、等張または高張溶液で投与できる。好ましい１日投与量は、経口投与で、約１〜１００mg／kgの範囲、静脈内、皮下および筋肉内投与で約２０〜５００μg／kgの範囲である。
【００５８】
式Ｉの化合物およびその塩の投与量は、しかしながら、不定であり、各状態、例えば病気の性質および重症度、処置期間および各化合物による。非経腸投与、例えば静脈内投与用投与単位形態は、例えば１０〜３００μg／体重kg、好ましくは１５〜１５０μg／体重kgを含み；そして経口投与単位形態は例えば０.１〜５mg、好ましくは０.１５〜３mg／体重kgを含む。経口投与のための好ましい一用量は、１０〜２００mgであり、静脈内投与のために、１〜１０mgである。吸収に限度があるため、経口投与のために高容量が必要である。長期処置において、投与量は、通常最初の高投与量の後、所望の効果を維持するために低用量に減らすことができる。非経腸(例えば静脈内または皮下)投与を、年間１〜５２回の一定間隔で間欠的に投与し得る。経口投与を、毎日、毎週、毎月または年４回の投与レジメンで投与し得る。
【００５９】
本発明はまた、動物、特にヒトの処置方法であって、処置を必要とする動物、特にヒトに、上に記載した疾患の処置に十分な量の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法にも関する。
【００６０】
本発明はまた、式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または塩、および少なくとも１種の薬学的に許容される担体物質を含む医薬製剤、特に輸液または注射用溶液にも関する。
【００６１】
以下の非限定的実施例は、その範囲を限定することなく本発明を説明する。
特にことわらない限り、温度は摂氏度(℃)で示す。温度が記載されていないとき、その反応または他の工程は室温で行う。
【００６２】
略語：
【表１】
【００６３】
５−(３−フェニル−プロピル)−１Ｈ−イミダゾールと、４−ベンジルイミダゾール以外の全ての他のイミダゾール誘導体は、D. Horne et al., Heterocycles, 1994, Vol. 39, No. 1, p.139-153に従って製造する。４−ベンジルイミダゾールは文献法に従って製造する(Chadwick et al., Tetrahedron, 1986, Vol. 42, No. 8, p.2351-2358)。
【００６４】
実施例１：{１−ヒドロキシ−２−[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−１−ホスホノ−エチル}−ホスホン酸
１.５ｇ(５.３mmol)の[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸を５８mlのトルエンにｒｔで窒素下溶解する。１.３３ｇ(１６.０mmol)のＨ３ＰＯ３を添加し、混合物を８０℃に加熱する。１.４７ml(１６.０mmol)のＰＯＣｌ３を滴下する。得られた混合物を１２０℃に加熱し、一夜撹拌する。溶媒を傾捨し、３５mlの６Ｎ ＨＣｌを添加し、混合物を３時間、加熱還流する。得られた薄黄色溶液を真空で濃縮する。アセトン(４０ml)で希釈後、混合物を、灰色固体が形成するまでアセトン(４×３５ml)と激しく撹拌する。灰色固体を高真空で乾燥させ、ＥｔＯＨ／水から結晶化して、表題化合物を得る。
HPLC-MS: t = 2.35分, (M-H)- = 389; 1H-NMR (D2O/NaOD): δ = 1.81 (m, 2H), 2.55-2.66 (m, 4H), 4.27-4.33 (m, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.07-7.1 (m, 1H), 7.15-7.22 (m, 4H), 7.90 (s, 1H)
31P-NMR (d6-DMSO): δ = 16.50 ppm。
【００６５】
合成概略図：
【化６】
【００６６】
出発物質を次の通り製造する：
ａ)[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルおよび[４−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステル
２０.２ｇ(９７mmol)の５−(３−フェニル−プロピル)−１Ｈ−イミダゾールを１００mlのＴＨＦにｒｔで窒素下溶解する。１１.５ｇ(１０２mmol)のＫＯｔＢｕを添加し、反応を２時間、ｒｔで撹拌する。１１.９ml(１０７mmol)のブロモ酢酸エチルを４５分間にわたり滴下し、得られた混合物をｒｔで、２.５時間撹拌する。８５mlのＨ２Ｏおよび２７５mlのＡｃＯＥｔを添加し、有機層を分離し、水層を再び３回２５０mlのＡｃＯＥｔで洗浄する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮する。反応をクロマトグラフィー(Chiralpak AD 1101、ヘプタン／イソプロパノール)で精製して、それぞれ[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルおよび[４−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルを得る。
【００６７】
[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステル：HPLC-MS: t = 1.83分; 100面積%, MH+ = 273; 1H-NMR (d6-DMSO) δ = 1.16 (t, 3H), 1.76-1.84 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 2.60 (t, 2H), 4.10 (q, 2 H), 4.83 (s, 2H), 6.66 (s, 1H), 7.19 (m, 3H), 7.26 (m, 2H), 7.50 (s, 1H)
[４−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステル：HPLC-MS : t = 1.83分, 100面積%, MH+ = 273; 1H-NMR (d6-DMSO): δ = 1.19 (t, 3H), 1.82 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 2.58 (t, 2H), 4.13 (q, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.84 (s, 1H), 7.14-7.19 (m, 3H), 7.26 (m, 2 H), 7.46 (m, 1H)
【００６８】
ｂ) [５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸
１.０９ｇ(４mmol)の[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルを１５ml(６０mmol)の４Ｎ ＨＣｌに溶解し、混合物を加熱還流する。１.５時間後、混合物をｒｔに冷却し、溶媒を真空で除去する。得られた生成物を、ベージュ色固体が形成されるまでアセトン(１５ml)と撹拌する。固体を濾取し、高真空で乾燥させ、さらに精製せずに使用する。
MS: MH+ = 245, 1H-NMR (DMSO): δ = 1.86 (m, 2H), 2.61 (m, 4H), 5.10 (s, 2H), 7.15-7.21 (m, 3H). 7.25-7.29 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 9.05 (s, 1H)
【００６９】
上に記載した方法に準じて、以下の実施例化合物を製造する：
実施例２：[２−(４−ベンジル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
【化７】
HPLC-MS: t = 1.63分, (M -H+)- 333
1H-NMR (NaOD/D2O): δ = 3.64 (s, 2H), 4.21 (broad t, 2H), 6.82 (s, 1H), 7.01-7.07 (m, 1H), 7.08-8.17 (m, 4H), 7.45 (s, 1H)
31P-NMR (NaOD/D2O): δ = 16.87 ppm
【００７０】
実施例３：[１−ヒドロキシ−２−(４−フェネチル−イミダゾール−１−イル)−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
【化８】
HPLC-MS: t = 1.63分, ES- = 375;
1H-NMR (d6-DMSO): δ = 2.80 (d, 2H), 4.49 (m, 2H), 7.16-7.29 (m, 5H), 8.83 (s, 1H)
31P-NMR (d6-DMSO): δ = 15.58 ppm
【００７１】
実施例４：[１−ヒドロキシ−２−(５−フェネチル−イミダゾール−１−イル)−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
【化９】
HPLC-MS: t = 1.47分, ES- = 375;
1H-NMR (d6-DMSO): δ = 2.88 (t, 2H), 3.05 (t, 2H), 4.48 (t, 2H), 7.11-7.27 (m, 5H), 8.83 (s, 1H)
31P-NMR (d6-DMSO): δ = 15.63 ppm
【００７２】
実施例５：{１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−２−[５−(３−ｐ−トリル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−エチル}−ホスホン酸
【化１０】
HPLC-MS: t = 1.25分, ES- = 403.1;
1H-NMR (D2O): δ = 1.85 (q, 2H), 2.24 (st, 3H), 2.62 (t, 3H), 2.70 (t, 2H), 4.41 (t, 2H), 6.62 (s, 1H), 7.15 (m, 4H), 7.9 (s, 1H)
31P-NMR (d6-D2O): δ = 17.0 ppm
【００７３】
実施例６：注射または輸液用溶液：
０.２％注射または輸液用溶液を、例えば次の通り製造できる：
活性成分、例えば実施例１または２の化合物、またはその塩、水酸化ナトリウム、塩化ナトリウム、および注射用水を混合して、２５００.０mlとする。
２２.０ｇの塩化ナトリウムを、約２０００mLの注射用水に溶解する。活性成分を添加し、ｐＨを、例えばｐＨ６.５に調節する。注射用水を添加して、２５００mlとする。溶液を、滅菌グレードのフィルター(例えば孔径０.２μmのもの)を通して濾過する。単位投与形態を製造するために、１.０または２.５mlの溶液を、滅菌し、脱パイロジェン化(depyrogenized)したガラスアンプルまたはバイアルに入れる(各々２.０mgまたは５.０mgの活性成分を含む)。バイアルを、滅菌し、脱パイロジェン化したゴム栓で閉じる。ストッパーをアルミニウムクリンプキャップで固定する。
同様の方法で、実施例３〜１０で得た他の式Ｉの化合物の溶液も製造でき、該化合物はまた、塩基との塩、例えばナトリウム塩であってもよい。後者の場合、溶液を所望のｐＨ値に、酸、例えば希塩酸を用いて調節する。
【００７４】
実施例７：実施例１〜５の化合物の阻害データ
上に記載したＦＰＰＳアッセイ方法で、実施例１〜５の化合物は次のＩＣ５０値を示す：
【表２】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規(非置換または置換フェニル)−アルキル−置換[(イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸類、ならびにその製造方法もしくは工程、医薬製剤の製造におけるそれらの使用、疾患の処置におけるそれらの使用、疾患の処置におけるそれらの使用方法、それらを含む医薬製剤および／または疾患の処置において使用するための該化合物(ここで、疾患は特に以下に記載する通りである)に関する。本化合物は、過剰なまたは不適切な骨吸収を阻止できる。
【発明の概要】
【０００２】
本発明は、第一の面において、特に式Ｉ
【化１】
〔式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であり、他方は非置換または置換フェニル−アルキルである。〕
の化合物、またはそのエステルおよび／または塩に関する。
【０００３】
上記および下記において使用する一般的表現は、好ましくは以下の意味を有し、各一般的な表現を、互いに独立して、個々に置き換えてよく、または２個以上または特に全てをより具体的な定義に置き換えてよく、それにより、本発明のより好ましい態様を規定する：
【０００４】
低級アルキルは、例えばＣ１−Ｃ５アルキル、例えばメチル、エチル、プロピルまたはブチル、およびまたイソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチル、またはペンチル、例えばｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチルまたはｔｅｒｔ−ペンチルである。
【０００５】
置換または非置換であるフェニル−アルキルは、好ましくはフェニル−Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、より好ましくはフェニル−低級アルキル、さらに好ましくはフェニル−Ｃ２−Ｃ６−アルキルであり、ここで、アルキルは分枝鎖または直鎖であり、そしてフェニルは非置換であるか、または好ましくはＣ１−Ｃ７−アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、ハロ、アミノ、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、Ｃ１−Ｃ７−アルカノイル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニルおよび／またはＣ１−Ｃ７アルカンスルホニル)−アミノ、カルボキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−スルファモイルおよびシアノから成る群から独立して選択される１個以上、例えば５個まで、より好ましくは３個までの置換基で置換されている(置換フェニルとして)。
【０００６】
フェニル−低級アルキルは、例えばフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、例えばベンジルであるか、または式ＩにおけるＲ１およびＲ２の場合、好ましくはフェニル−エチル、フェニルプロピル、フェニルブチルまたはフェニルペンチルであり、ここで、プロピル、ブチルまたはペンチルは分枝鎖でも直鎖でもよく、または式IIIにおけるＲの場合、好ましくはベンジルである。
【０００７】
ハロ(ゲノ)(およびまたハロゲニド)は、好ましくはフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードである。
“約”は、好ましくは記載した数字が、その記載した値から最大±２０％、より好ましくは最大±１０％、最も好ましくは±５％まで逸脱し得ることを意味する。
【０００８】
式Ｉの化合物の塩は、特に薬学的に許容される塩基との塩(薬学的に許容される塩)、例えば、Ｉａ族、Ｉｂ族、IIａ族およびIIｂ族の金属由来の非毒性金属塩、例えばアルカリ金属塩、好ましくはリチウム塩またはより好ましくはナトリウム塩またはカリウム塩、アルカリ土類金属塩、好ましくはカルシウム塩またはマグネシウム塩、銅、アルミニウム塩または亜鉛塩、およびまたアンモニアまたは有機アミン類または第４級アンモニウム塩基、例えば遊離またはＣ−ヒドロキシル化脂肪族アミン類、好ましくはモノ−、ジ−またはトリ−低級アルキルアミン類、例えばメチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミンまたはジエチルアミン、モノ−、ジ−またはトリ−(ヒドロキシ−低級アルキル)アミン類、例えばエタノールアミン、ジエタノールアミンまたはトリエタノールアミン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンまたは２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、またはＮ−(ヒドロキシ−低級アルキル)−Ｎ,Ｎ−ジ−低級アルキルアミン類またはＮ−(ポリヒドロキシ−低級アルキル)−Ｎ−低級アルキルアミン類、例えば２−(ジメチルアミノ)エタノールまたはＤ−グルカミン、または第４級脂肪族水酸化アンモニウム類、例えばテトラブチル水酸化アンモニウムとのアンモニウム塩である。
【０００９】
式Ｉの化合物およびその塩は、価値ある薬理学的特性を有する。特に、それらは細胞内のメバロン酸経路を阻害し、温血動物のカルシウム代謝に対し著しい制御作用を有する。
【００１０】
最も具体的に、それらは、Hornby et al. Calcified Tiss Int 2003; 72: 519-527 and Gasser et al. J Bone Miner Res 2008; 23: 544-551に記載されている実験方法で証明できる、約１〜５００μg／kgの用量で静脈内または皮下投与後、エストロゲン欠乏ラットにおける骨吸収の著しい阻害をもたらす。腫瘍関連骨溶解も、同様に、Peyruchaud et al. J Bone Miner Res 2001; 16: 2027-2034の方法を使用して、約１〜５００μg／kgの用量範囲の静脈内または皮下投与後に阻止される。加えて、 Newbould, Brit. J. Pharmacology 21, 127 (1963)およびRordorf et al. Int J Tissue React. 1987; 9(4): 341-7に従う実験方法で同様に投与したとき、式Ｉの化合物およびその塩は、それぞれアジュバントおよびコラーゲン関節炎を有する齧歯類の関節炎状態の進行の著しい阻害をもたらす。
【００１１】
新規ビスホスホネート類は、特に１種以上の疾患(この用語は状態または障害を含む)の処置におけるヒトおよび獣医使用のための薬剤として有用であり、特に過剰なまたは不適切な骨吸収、特に骨および関節の疾患、例えば
− 良性状態、例えば骨粗鬆症、骨減少症、骨髄炎、骨関節症、リウマチ性関節炎、骨髄浮腫、骨痛、反射性交感神経性ジストロフィー、強直性脊椎炎(別名ベヒテレフ病)、骨のパジェット病または歯周病、
− 悪性状態、例えば悪性腫瘍の高カルシウム血症、固形腫瘍および血液系腫瘍に関連する骨転移、
− 整形外科的状態、例えば人工関節の緩み、人工関節移動、インプラント固定、インプラントコーティング、骨折治癒、仮骨延長法、脊椎固定術、無血管性骨壊死、移植骨、骨代用材、
または、かかる状態の２種以上の任意の組合せと関連する過剰なまたは不適切な骨吸収を阻止できる。
【００１２】
非エンドサイトーシス細胞にビスホスホネートが入ることを必要とする疾患に対するビスホスホネート類の効果は、かかる細胞による一般的ビスホスホネート類の取り込みが極めて低いため、極めて制限されている。これは、イバンドロネートでは−３.３およびゾレドロネートでは−３.０と計算されるその低いオクタノール／水分配係数(ｃｌｏｇＰ)から明らかとなるその高い親水性によるものである。対照的に、ここに記載するフェニルアルキル−イミダゾールビスホスホネート化合物は、０に近いまたは０を超えるｃｌｏｇＰ値を有する。これは親水性低下および親油性上昇を意味し、これは非エンドサイトーシス細胞への取り込みのために有益である。細胞透過性の増加は、破骨細胞以外の細胞、マクロファージまたは他のエンドサイトーシス細胞におけるメバロン酸経路の完全なまたは部分的な阻害が望まれる疾患の処置を容易にする。エンドサイトーシスは、細胞が、細胞の外部由来の物質を、細胞膜から形成された小胞と共に貪食することにより吸収する過程である。
【００１３】
ビスホスホネート類(ゾレドロン酸)をスタチン類(プラバスタチン)と組み合わせることにより優れた効果が細胞実験ならびにヒト早老、例えばハッチンソン・ギルフォード・プロジェリア症候群のマウスモデルで示されている(Nature Medicine (2008) 14, 767-772)。本発明の化合物を用いて、高い親油性および低い骨への結合により細胞膜を容易に通過できるために、これらのモデルにおける効力または有効性が高まることが期待される。去力である本発明の化合物は、これらのモデルで、スタチンの非存在下でさえ活性であることが予測される。
【００１４】
一般に、高い親油性により、本発明の化合物は、破骨細胞以外の細胞、マクロファージまたは他のエンドサイトーシス細胞におけるメバロン酸経路を阻害すべき疾患の処置のためにより強力であるか、または効率的であることが期待される。これは、以下のものを含み、それらに限定されない：
− 閉経前乳癌における内分泌療法でゾレドロン酸について先に証明されたビスホスホネート類での直接抗腫瘍(Gnant et al. (2009) N Engl J Med 360, 679-91)。
【００１５】
− ＦＰＰＳおよびＨＭＧ ＣｏＡレダクターゼが両方ともメバロン酸経路の酵素であるための、コレステロール低下剤としての本発明の化合物の使用。実際、ゾレドロン酸で処置した骨髄腫患者では血清コレステロールレベルが低いことが報告されているが(Gozzetti, A. et al. (2008) Calcif Tissue Int 82, 258-62)、本発明のビスホスホネート類の効果は、高い細胞透過性のためにより顕著である可能性がある。
【００１６】
− 抗寄生虫剤としての本発明の化合物の使用。ビスホスホネート類は、リーシュマニア症、マラリア、クリプトスポリジウム症およびシャーガス病を起こす寄生原虫に対して有効であることが示されているが(Docampo, R. & Moreno, S. N. (2001) Current Drug Targets: Infectious Disorders 1, 51-61により総括)、本発明の化合物は、親油性増加のためより適している可能性がある。
【００１７】
以下の刊行物(その各々は、特に以下に記載するアッセイまたは方法に関する記載に関して、引用により本明細書に包含させる)は、式Ｉの化合物の有利な生物学的プロファイルを確認するために使用できる種々のアッセイおよび方法を記載する：
Calcif. Tissue Int. (2003) 72, 519-527に記載の通り(１)骨ターンオーバーおよび大腿骨密度(ＢＭＤ)の生化学マーカーの一過性の変化を解明するため、(２)静的および動的組織形態計測的パラメータ、骨微小構造および機械的強度の変化を測定するため、および(３)これらのパラメータに対する式Ｉの化合物での慢性処置の予防効果を評価するための、閉経後骨粗鬆症のためのモデルとしての成熟、卵巣摘出(ＯＶＸ)ラットへの一回ｉ.ｖ.投与の効果を証明できる。高活性を、ここで見ることができる。
【００１８】
ARTHRITIS & RHEUMATISM (2004), 50(7), 2338-2346に示す通り、ラットにおける、コラーゲン誘発関節炎(ＣＩＡ)のエフェクター相中の滑膜炎症、構造的関節損傷、および骨代謝に対する、式Ｉの化合物の効果を証明できる。
【００１９】
J. Bone Joint Surg. (2005), 87-B, 416-420に記載の通り、骨内殖に対する式Ｉの化合物の効果を、イヌの尺骨内に多孔性タンタルインプラントを両側性に置いた動物モデルにおいて試験できる。
【００２０】
J. Natl. Cancer. Inst. (2007), 99, 322 - 30に記載された方法に従って、マウスモデルにおける骨格腫瘍増殖の阻害を証明できる。
【００２１】
Nat. Medicine (2008), 14, 767-772に記載の通り、プラバスタチンと組み合わせたゾレドロン酸の有利な効果が、細胞実験ならびにハッチンソン・ギルフォード・プロジェリア症候群のマウスモデルにおいて証明されている。本発明の化合物を用いて、それらが細胞膜をより容易に通過できるため、効果の増強が期待される。
【００２２】
ファルネシルピロリン酸シンターゼに結合したときの式Ｉの化合物のｘ線構造は、Chem. Med. Chem. (2006), 1, 267 - 273に記載された方法により、またはそれに準じて得ることができる。４１kDaサブユニットのホモ二量体酵素であるヒトＦＰＰＳは、Ｃ５イソプレノイド類ジメチルアリルピロリン酸(ＤＭＡＰＰ)およびイソペンテニルピロリン酸からＣ１５代謝物ファルネシルピロリン酸(ＦＰＰ)の二段階合成を触媒する。ＦＰＰは、必須ＧＴＰａｓｅシグナリングタンパク質、例えばＲａｓおよびＲｈｏの翻訳後プレニル化のために必要であり、またコレステロール、ドリコール、およびユビキノンの合成前駆体でもある。
【００２３】
例えば、無細胞インビトロアッセイにおいて、既知化合物より式Ｉの化合物が優れていることを示すことができる。簡単に言うと、反応を酵素および式Ｉの阻害剤の存在下で進行させ、反応産物(ファルネシルピロリン酸)をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量する。
詳細には、阻害剤および酵素を基質添加前にプレインキュベートする。
【００２４】
本アッセイは、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳに基づく、ファルネシルピロリン酸シンターゼ(ＦＰＰＳ)の無標識アッセイである。この方法は、インビトロで非標識ファルネシルピロリン酸(ＦＰＰ)を定量し、ＦＰＰＳの阻害剤を発見するためのハイスループットシステム(ＨＴＳ)および候補化合物のＩＣ５０値の決定に適する。分析時間は２.０分間であり、総サイクル時間は２.５分間である。本分析は、３８４ウェルプレート用に構築でき、プレートあたりの分析時間１６時間となる。
【００２５】
試薬：
ペンタノール、メタノール、およびイソプロピルアルコールはＨＰＬＣグレートであり、Fisher Scientificから得る。ＤＭＩＰＡはSigma-Aldrichからである。水は、社内Milli-Qシステムからである。アッセイ緩衝液(２０mM ＨＥＰＥＳ、５mM ＭｇＣｌ２および１mM ＣａＣｌ２)は、Sigma-Aldrichから得た１mM原液の希釈により調製する。ゲラニルピロリン酸(ＧＰＰ)、イソプレニルピロリン酸(ＦＰＰ)、およびファルネシルＳ−チオロピロリン酸(ＦＳＰＰ)はEchelon Biosciences(Salt Lake City, UT)からである。ヒトファルネシルピロリン酸シンターゼ(FPPS, Swissprot ID: P14324)(１３.８mg／mL)をRondeau et al (ChemMedChem 2006, 1, 267-273)に記載の通り製造する。
【００２６】
アッセイ：
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析を、Agilent 1100 binary LC pump Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA)と連動したMicromass Quattro Microタンデム四重極質量分析器(Waters Corp., Milford, MA, USA)で行う。CTC Analyticsオートサンプラー(Leap Technologies Inc., Carrboro, NC, USA)を用いて、２.５μLの注入ループサイズを使用して注入する。クロマトグラフィーを、ガードカラムホルダー(P/N 186000262)に入れられたWaters ２.１×２０mm Xterra MS C18 ５μmガードカラム(P/N 186000652)(Waters Corp., Milford, MA, USA)で、０.１％ＤＭＩＰＡ／メタノールを溶媒Ａとして、および０.１％ＤＭＩＰＡ／水を溶媒Ｂとして使用して行う(ＤＭＩＰＡはジメチルイソプロピルアミンである)。勾配は、５％Ａを０.００〜０.３０分間、５０％Ａを０.３１分目、８０％Ａを１.００分目、および５％Ａを１.０１〜２.００分間である。流速は０.３mL／分であり、この流れを０.００〜０.５０分間および１.２０〜２.００分間に再び迂回させて廃棄する。
【００２７】
モニターする多重反応モニタリング(ＭＲＭ)遷移は、２２eVの衝突エネルギーおよびＡｒの２.１×１０−３mbarの衝突セル圧力で、ＦＰＰについて３８１−＞７９−およびＦ
ＳＰＰについて３９７−＞１５９−である。遷移あたりの滞留時間は、０.４Daのスパンで４００ミリ秒である。チャネル間遅延およびスキャン間(interscan)遅延はいずれも０.０２秒である。他の質量分光学操作パラメータは：キャピラリー、２.０kV；コーン、３５Ｖ；エキストラクター、２.０Ｖ、熱源温度、１００℃；脱溶媒和ガス温度、２５０℃；脱溶媒和ガス流、６５０Ｌ／時間；コーンガス流、２５Ｌ／時間；乗算器、６５０Ｖ。
【００２８】
サンプルあたりの総サイクル時間は２.５分間である。分析が３８４ウェルプレート用に構築されているため、プレートを１６時間で分析する。クロマトグラムをQuanlynxソフトウェアで処理し、それは、各ＦＰＰピーク面積をＦＳＰＰピーク面積(内部標準)で割る。得られた値を、対応するサンプルウェルについての相対的応答として報告する。
【００２９】
ＦＰＰＳアッセイ方法
３８４ウェルプレートの各ウェルに、２０％ＤＭＳＯ／水中５μLの化合物を入れる。１０μLのＦＰＰＳ(アッセイ緩衝液で１対８００００に希釈)を各ウェルに添加し、化合物と５分間プレインキュベートさせる。その時点で、２５μLのＧＰＰ／ＩＰＰ(アッセイ緩衝液中各５μM)を添加して、反応を開始させる。３０分間後、２％ＤＭＩＰＡ／ＩＰＡ中１０μLの２μM ＦＳＰＰの添加により反応を停止させる。反応混合物を、ボルテックス混合を使用して５０μLのｎ−ペンタノールで抽出する。相分離後、２５μLの上部(ｎ−ペンタノール)層を新しい３８４ウェルプレートに移し、ペンタノールを真空遠心を使用して蒸発させる。乾燥させた残留物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法で分析するために、５０μLの０.１％ＤＭＩＰＡ／水に再構成する。
【００３０】
ＦＳＰＰを、マススペクトルの内部標準として使用する。リン酸基は、スペクトル内の基準ピークとして(Ｍ−Ｈ)−イオンを生じる。
【００３１】
本発明の化合物は、好ましくは、この試験系で、０.８〜１０nMの範囲のＩＣ５０を有し、好ましいものは、好ましくは１.２〜３.６nMの範囲のＩＣ５０を有する。特に、それらは、先行文献の化合物、例えば[２−(５−フェニル−プロピル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸を超える驚くほどの優位性を示す。これらの化合物の優位性は、オクタノール／水分配係数(ｃｌｏｇＰ)から判断してこれらの化合物の親水性が低下していることを考慮すると、さらに驚くことである。
【００３２】
ＩＣ５０決定のためのこのアッセイの有用性は、既知のビスホスホネートＦＰＰＳ阻害剤であるゾレドロン酸を使用して確認される。
【００３３】
本発明は、特に、Ｒ１が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピルまたはフェニル−イソプロピルまたはさらにフェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルであり(ここで、置換フェニルは好ましくは上に定義した通り、特にトリル(＝メチルフェニル)、例えばｐ−トリルである)、そしてＲ２が水素である式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩に関する。
【００３４】
本発明は、特に、また、Ｒ１が水素であり、そしてＲ２が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピル、フェニル−イソプロピルまたはトリルプロピル、特にｐ−トリルプロピル、またはさらにフェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルである式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩に関する。
【００３５】
好ましいのは、Ｒ１が水素であり、そしてＲ２が非置換または置換フェニル−プロピル、特に非置換または置換３−フェニル−プロピルである(ここで、置換フェニルは、好ましくは上に定義した通りである)式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩である。
【００３６】
より好ましいのは、Ｒ１が非置換または置換フェニル−プロピル、特に非置換または置換３−フェニル−プロピルであり(ここで、置換フェニルは、好ましくは上に定義した通りである)、そしてＲ２が水素である式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩である。
【００３７】
最も好ましいのは、Ｒ１がフェニル−プロピル、特に３−フェニル−プロピルである式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩である。
【００３８】
本発明の化合物は、別の化合物については当分野で既知である方法に従い製造できる。例えば、少なくとも得られる新規生成物および／または用いる新規遊離体に基づき、新規方法は、好ましくは、式II
【化２】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は式Ｉの化合物について定義した通りである。〕
のカルボン酸化合物と、オキシハロゲン化リンを反応させて式Ｉの化合物、またはその塩を得て、
必要であれば、得られる遊離の式Ｉの化合物をその塩に変換し、得られる式Ｉの化合物の塩を遊離化合物に変換しおよび／または得られる式Ｉの化合物の塩をその異なる塩に変換することを含む。
【００３９】
オキシハロゲン化リンとして、オキシ塩化リン(ＰＯＣｌ３)が特に好ましい。本反応は、好ましくは一般的な溶媒または溶媒混合物中、例えば芳香族性炭化水素、例えばトルエン中、好ましくは高温で、例えば５０℃から反応混合物の還流温度で、例えば(約)８０〜(約)１２０℃で、Ｈ３ＰＯ３の存在下に行う。
【００４０】
遊離の式Ｉの化合物を、上に記載した塩基の一つを用いる部分的なまたは完全な中和により塩基性塩に変換できる。
【００４１】
塩を、それ自体既知の方法で、例えば酸試薬、例えば鉱酸での処理により、遊離化合物に変換できる。
【００４２】
本化合物は、その塩を含み、水和物の形で得ることもでき、または結晶構造内に結晶化に使用した溶媒を含み得る。
【００４３】
遊離形の新規化合物とその塩の形態の密接な関係から、本明細書中の遊離化合物およびその塩に関する記載は、同様に対応する塩および遊離化合物にも適用される。
【００４４】
本発明はまた、本方法の任意の段階で中間体として得られる化合物を出発物質として使用して、残りの工程を行うか、または出発物質をその塩の形で、または、好ましくは、その反応条件下に形成させる、方法の態様にも関する。
【００４５】
出発物質は、例えば、好ましくは、式III
【化３】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は式Ｉの化合物について定義した通りであり、そしてＲは非置換または置換アルキル、特に低級アルキルまたはフェニル−低級アルキルである。〕
の化合物を、適当な酸、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩酸の存在下、好ましくは水性溶媒、例えば水の存在下、好ましくは高温で、例えば(約)５０〜(約)１００℃、例えば８０〜１００℃の範囲で鹸化して、式IIの化合物、またはその塩を得ることにより得ることができる。
【００４６】
式IIIの化合物は、例えば、好ましくは、式IV
【化４】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は式Ｉの化合物について定義した通りである。〕
のイミダゾール化合物と、式Ｖ
【化５】
〔式中、Ｒは式IIIの化合物について定義した通りであり、そしてＸはハロゲン、特にフルオロ、クロロ、ヨードまたは特にブロモ、低級アルカンスルホニルオキシまたはトルエンスルホニルオキシである。〕
のエステルを、好ましくは強塩基、例えばアルカリ金属アルコラート、特にカリウムｔｅｒｔ−ブチラート(ＫＯｔＢｕ)の存在下、適当な溶媒または溶媒混合物、例えば環状エーテル、例えばテトラヒドロフラン中、好ましくは(約)−１０〜(約)８０℃、例えば２０〜３０℃の温度で反応させることにより、得ることができる。必要であれば、得られた式IIIの化合物の混合物(一方の化合物では、Ｒ１が非置換または置換フェニル−アルキルであり、そしてＲ２が水素であり、他方の化合物では、Ｒ２が非置換または置換フェニル−アルキルであり、そしてＲ１が水素である)を、例えばクロマトグラフィー法、差示的結晶化などにより分割できる。
【００４７】
式IVおよびＶの出発物質、ならびに今まで記載しなかった全ての他の出発物質は、当分野で既知の方法により、またはその方法に準じて得ることができ、市販されておりおよび／または本明細書に、特に実施例に記載する方法に準じて製造できる。
【００４８】
本発明はまた、全ての新規方法工程または方法工程の組合せ、ならびに全ての新規出発物質または中間体、またはその塩にも関する。
【００４９】
式Ｉの化合物のエステルは、例えば、類似化合物について先行文献に記載された方法に準じて製造できる。
【００５０】
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される非毒性塩を含む医薬組成物は、温血動物への経腸投与、例えば経口投与、または直腸投与、および非経腸投与用であり、薬理学的活性成分は単独でまたは薬学的に適切な担体と共に存在する。
【００５１】
新規医薬組成物は、例えば約０.０００１〜８０％、好ましくは約０.００１〜１０％の活性成分を含む。経腸または非経腸投与用医薬組成物は、例えば投与単位形態、例えば糖衣錠、錠剤、カプセルまたは坐薬、ならびにアンプル、バイアル、予充填シリンジのものである。これらの医薬組成物は、それ自体既知の方法で、例えば慣用の混合、造粒、糖衣、溶解または凍結乾燥法により製造する。例えば、経口投与用医薬組成物は、活性成分と固体担体を合わせ、場合により得られた混合物を造粒し、混合物または顆粒を、望むならばまたは必要であれば、適当な賦形剤の添加後、錠剤または糖衣錠コアに加工することにより得ることができる。
【００５２】
適当な担体は、特に増量剤、例えば糖、例えばラクトース、サッカロース、マンニトールまたはソルビトール、セルロース製剤および／またはリン酸カルシウム類、例えばリン酸三カルシウムまたはリン酸二水素カルシウム、およびまた結合剤、例えばデンプンペースト、例えばメイズ、コーン、米またはジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン、および／または、所望により、崩壊剤、例えば上記デンプン類、さらにカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸またはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムである。賦形剤は、特に流動促進剤および滑剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸またはその塩、例えばステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウム、および／またはポリエチレングリコールである。糖衣錠コアは、とりわけ、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタンを含み得る濃縮糖溶液、適当な有機溶媒または溶媒混合物中のシェラック溶液、または、胃液に抵抗性のコーティングを製造するために、アセチルセルロースフタラートまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラートのような適当なセルロース製剤の溶液を使用して、胃液に抵抗性であり得る適当なコーティングを施す。例えば、同定するため、または異なる量の活性成分を示すために、染料または色素を錠剤または糖衣錠コアに添加できる。
【００５３】
経口投与用のさらなる医薬組成物は、ゼラチンまたはヒプロメロース製の乾燥充填カプセルおよびまたゼラチンおよび可塑剤、例えばグリセロールまたはソルビトールから成る軟密閉カプセルである。乾燥充填カプセルは、例えば増量剤、例えばラクトース、結合剤、例えばデンプン類、および／または流動促進剤、例えばタルクまたはステアリン酸マグネシウム、および場合により安定化剤と混合された、活性成分を顆粒の形で含み得る。軟カプセルにおいて、活性成分は、好ましくは適当な液体、例えば脂肪油、パラフィン油または液体ポリエチレングリコールに溶解または懸濁されており、それに添加剤も添加できる。
【００５４】
直腸投与用の適当な医薬組成物は、例えば坐薬であり、これは活性成分と坐薬基剤の組合せから成る。適当な坐薬基剤の例は、天然または合成トリグリセライド類、パラフィン炭化水素類、ポリエチレングリコール類および高級アルカノール類である。活性成分と基剤物質の組合せを含むゼラチン直腸カプセルの使用も可能である。適当な基剤物質は、例えば液体トリグリセライド類、ポリエチレングリコール類およびパラフィン炭化水素類である。
【００５５】
非経腸投与(これは特に好ましい)のための特に適当な投与形態は、水可溶性形態、例えば水可溶性塩の活性成分の水溶液である。本溶液を、無機酸または有機酸類または塩基類を用いて約４−９または最も好ましくは約５.５−７.５のｐＨの生理学的に許容されるｐＨ値に調節し得る。本溶液は、さらに無機塩、例えば塩化ナトリウム、または有機化合物、例えば糖類、糖アルコール類、またはアミノ酸類を用いて、最も好ましくはマンニトールまたはグリセロールを用いて等張にし得る。適当な組成物はまた、活性成分の懸濁液、例えば適当な親油性溶媒または媒体、例えば脂肪油類、例えばゴマ油、または合成脂肪酸エステル類、例えばオレイン酸エチルまたはトリグリセライド類が使用される対応する油性注射懸濁液、または粘度を上げる物質、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールおよび／またはデキストラン、および場合によりまた安定化剤を含む水性注射懸濁液である。
【００５６】
本発明はまた、好ましくは炎症性状態、主としてカルシウム代謝の障害に関連する疾患、例えばリウマチ性疾患、および、特に、骨粗鬆症の処置のための式Ｉの化合物およびその塩の使用にも関する。
【００５７】
０.１μg／体重kg未満の非経腸投与量は、硬組織代謝に僅かしか影響を与えない。長期毒性副作用は１０００μg／体重kgを超える投与量で起こり得る。式Ｉの化合物およびその塩は経口、ならびに皮下、筋肉内または静脈内に、等張または高張溶液で投与できる。好ましい１日投与量は、経口投与で、約１〜１００mg／kgの範囲、静脈内、皮下および筋肉内投与で約２０〜５００μg／kgの範囲である。
【００５８】
式Ｉの化合物およびその塩の投与量は、しかしながら、不定であり、各状態、例えば病気の性質および重症度、処置期間および各化合物による。非経腸投与、例えば静脈内投与用投与単位形態は、例えば１０〜３００μg／体重kg、好ましくは１５〜１５０μg／体重kgを含み；そして経口投与単位形態は例えば０.１〜５mg、好ましくは０.１５〜３mg／体重kgを含む。経口投与のための好ましい一用量は、１０〜２００mgであり、静脈内投与のために、１〜１０mgである。吸収に限度があるため、経口投与のために高容量が必要である。長期処置において、投与量は、通常最初の高投与量の後、所望の効果を維持するために低用量に減らすことができる。非経腸(例えば静脈内または皮下)投与を、年間１〜５２回の一定間隔で間欠的に投与し得る。経口投与を、毎日、毎週、毎月または年４回の投与レジメンで投与し得る。
【００５９】
本発明はまた、動物、特にヒトの処置方法であって、処置を必要とする動物、特にヒトに、上に記載した疾患の処置に十分な量の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法にも関する。
【００６０】
本発明はまた、式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または塩、および少なくとも１種の薬学的に許容される担体物質を含む医薬製剤、特に輸液または注射用溶液にも関する。
【００６１】
以下の非限定的実施例は、その範囲を限定することなく本発明を説明する。
特にことわらない限り、温度は摂氏度(℃)で示す。温度が記載されていないとき、その反応または他の工程は室温で行う。
【００６２】
略語：
【表１】
【００６３】
５−(３−フェニル−プロピル)−１Ｈ−イミダゾールと、４−ベンジルイミダゾール以外の全ての他のイミダゾール誘導体は、D. Horne et al., Heterocycles, 1994, Vol. 39, No. 1, p.139-153に従って製造する。４−ベンジルイミダゾールは文献法に従って製造する(Chadwick et al., Tetrahedron, 1986, Vol. 42, No. 8, p.2351-2358)。
【００６４】
実施例１：{１−ヒドロキシ−２−[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−１−ホスホノ−エチル}−ホスホン酸
１.５ｇ(５.３mmol)の[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸を５８mlのトルエンにｒｔで窒素下溶解する。１.３３ｇ(１６.０mmol)のＨ３ＰＯ３を添加し、混合物を８０℃に加熱する。１.４７ml(１６.０mmol)のＰＯＣｌ３を滴下する。得られた混合物を１２０℃に加熱し、一夜撹拌する。溶媒を傾捨し、３５mlの６Ｎ ＨＣｌを添加し、混合物を３時間、加熱還流する。得られた薄黄色溶液を真空で濃縮する。アセトン(４０ml)で希釈後、混合物を、灰色固体が形成するまでアセトン(４×３５ml)と激しく撹拌する。灰色固体を高真空で乾燥させ、ＥｔＯＨ／水から結晶化して、表題化合物を得る。
HPLC-MS: t = 2.35分, (M-H)- = 389; 1H-NMR (D2O/NaOD): δ = 1.81 (m, 2H), 2.55-2.66 (m, 4H), 4.27-4.33 (m, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.07-7.1 (m, 1H), 7.15-7.22 (m, 4H), 7.90 (s, 1H)
31P-NMR (d6-DMSO): δ = 16.50 ppm。
【００６５】
合成概略図：
【化６】
【００６６】
出発物質を次の通り製造する：
ａ)[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルおよび[４−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステル
２０.２ｇ(９７mmol)の５−(３−フェニル−プロピル)−１Ｈ−イミダゾールを１００mlのＴＨＦにｒｔで窒素下溶解する。１１.５ｇ(１０２mmol)のＫＯｔＢｕを添加し、反応を２時間、ｒｔで撹拌する。１１.９ml(１０７mmol)のブロモ酢酸エチルを４５分間にわたり滴下し、得られた混合物をｒｔで、２.５時間撹拌する。８５mlのＨ２Ｏおよび２７５mlのＡｃＯＥｔを添加し、有機層を分離し、水層を再び３回２５０mlのＡｃＯＥｔで洗浄する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮する。反応をクロマトグラフィー(Chiralpak AD 1101、ヘプタン／イソプロパノール)で精製して、それぞれ[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルおよび[４−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルを得る。
【００６７】
[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステル：HPLC-MS: t = 1.83分; 100面積%, MH+ = 273; 1H-NMR (d6-DMSO) δ = 1.16 (t, 3H), 1.76-1.84 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 2.60 (t, 2H), 4.10 (q, 2 H), 4.83 (s, 2H), 6.66 (s, 1H), 7.19 (m, 3H), 7.26 (m, 2H), 7.50 (s, 1H)
[４−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステル：HPLC-MS : t = 1.83分, 100面積%, MH+ = 273; 1H-NMR (d6-DMSO): δ = 1.19 (t, 3H), 1.82 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 2.58 (t, 2H), 4.13 (q, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.84 (s, 1H), 7.14-7.19 (m, 3H), 7.26 (m, 2 H), 7.46 (m, 1H)
【００６８】
ｂ) [５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸
１.０９ｇ(４mmol)の[５−(３−フェニル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−酢酸エチルエステルを１５ml(６０mmol)の４Ｎ ＨＣｌに溶解し、混合物を加熱還流する。１.５時間後、混合物をｒｔに冷却し、溶媒を真空で除去する。得られた生成物を、ベージュ色固体が形成されるまでアセトン(１５ml)と撹拌する。固体を濾取し、高真空で乾燥させ、さらに精製せずに使用する。
MS: MH+ = 245, 1H-NMR (DMSO): δ = 1.86 (m, 2H), 2.61 (m, 4H), 5.10 (s, 2H), 7.15-7.21 (m, 3H). 7.25-7.29 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 9.05 (s, 1H)
【００６９】
上に記載した方法に準じて、以下の実施例化合物を製造する：
実施例２：[２−(４−ベンジル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
【化７】
HPLC-MS: t = 1.63分, (M -H+)- 333
1H-NMR (NaOD/D2O): δ = 3.64 (s, 2H), 4.21 (broad t, 2H), 6.82 (s, 1H), 7.01-7.07 (m, 1H), 7.08-8.17 (m, 4H), 7.45 (s, 1H)
31P-NMR (NaOD/D2O): δ = 16.87 ppm
【００７０】
実施例３：[１−ヒドロキシ−２−(４−フェネチル−イミダゾール−１−イル)−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
【化８】
HPLC-MS: t = 1.63分, ES- = 375;
1H-NMR (d6-DMSO): δ = 2.80 (d, 2H), 4.49 (m, 2H), 7.16-7.29 (m, 5H), 8.83 (s, 1H)
31P-NMR (d6-DMSO): δ = 15.58 ppm
【００７１】
実施例４：[１−ヒドロキシ−２−(５−フェネチル−イミダゾール−１−イル)−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
【化９】
HPLC-MS: t = 1.47分, ES- = 375;
1H-NMR (d6-DMSO): δ = 2.88 (t, 2H), 3.05 (t, 2H), 4.48 (t, 2H), 7.11-7.27 (m, 5H), 8.83 (s, 1H)
31P-NMR (d6-DMSO): δ = 15.63 ppm
【００７２】
実施例５：{１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−２−[５−(３−ｐ−トリル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−エチル}−ホスホン酸
【化１０】
HPLC-MS: t = 1.25分, ES- = 403.1;
1H-NMR (D2O): δ = 1.85 (q, 2H), 2.24 (st, 3H), 2.62 (t, 3H), 2.70 (t, 2H), 4.41 (t, 2H), 6.62 (s, 1H), 7.15 (m, 4H), 7.9 (s, 1H)
31P-NMR (d6-D2O): δ = 17.0 ppm
【００７３】
実施例６：注射または輸液用溶液：
０.２％注射または輸液用溶液を、例えば次の通り製造できる：
活性成分、例えば実施例１または２の化合物、またはその塩、水酸化ナトリウム、塩化ナトリウム、および注射用水を混合して、２５００.０mlとする。
２２.０ｇの塩化ナトリウムを、約２０００mLの注射用水に溶解する。活性成分を添加し、ｐＨを、例えばｐＨ６.５に調節する。注射用水を添加して、２５００mlとする。溶液を、滅菌グレードのフィルター(例えば孔径０.２μmのもの)を通して濾過する。単位投与形態を製造するために、１.０または２.５mlの溶液を、滅菌し、脱パイロジェン化(depyrogenized)したガラスアンプルまたはバイアルに入れる(各々２.０mgまたは５.０mgの活性成分を含む)。バイアルを、滅菌し、脱パイロジェン化したゴム栓で閉じる。ストッパーをアルミニウムクリンプキャップで固定する。
同様の方法で、実施例３〜１０で得た他の式Ｉの化合物の溶液も製造でき、該化合物はまた、塩基との塩、例えばナトリウム塩であってもよい。後者の場合、溶液を所望のｐＨ値に、酸、例えば希塩酸を用いて調節する。
【００７４】
実施例７：実施例１〜５の化合物の阻害データ
上に記載したＦＰＰＳアッセイ方法で、実施例１〜５の化合物は次のＩＣ５０値を示す：
【表２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
〔式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であり、他方は非置換または置換フェニル−アルキルである。〕
の化合物、またはそのエステル、および／または塩。
【請求項２】
Ｒ１が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピル、フェニル−イソプロピル、フェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルであり(ここで、置換フェニルは、Ｃ１−Ｃ７−アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、ハロ、アミノ、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、Ｃ１−Ｃ７−アルカノイル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニルおよび／またはＣ１−Ｃ７アルカンスルホニル)−アミノ、カルボキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−スルファモイルおよびシアノから成る群から選択される１個以上の置換基により置換されているフェニルである)、そして
Ｒ２が水素である、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項３】
Ｒ１が水素であり、そして
Ｒ２が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピル、フェニル−イソプロピル、フェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルである(ここで、置換フェニルは、Ｃ１−Ｃ７−アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、ハロ、アミノ、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、Ｃ１−Ｃ７−アルカノイル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニルおよび／またはＣ１−Ｃ７アルカンスルホニル)−アミノ、カルボキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−スルファモイルおよびシアノ、特にフェニル−プロピルから成る群から独立して選択される１個以上の置換基で置換されているフェニルである)、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項４】
Ｒ１が水素であり、そして
Ｒ２が３−フェニル−プロピルである、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項５】
Ｒ１が３−フェニル−プロピルであり、そして
Ｒ２が水素である、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項６】
動物、特にヒトの診断的および／または治療的処置に使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩。
【請求項７】
過剰なまたは不適切な骨吸収の処置に使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項９】
動物、特にヒトの処置方法であって、処置を必要とする動物、特にヒトに、過剰なまたは不適切な骨吸収の処置に十分な量の請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
動物、特にヒトの処置方法であって、処置を必要とする動物、特にヒトに、早老症の処置に十分な量の請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１１】
過剰なまたは不適切な骨吸収の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１２】
早老症の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１３】
過剰なまたは不適切な骨吸収の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１４】
早老症の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１５】
請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または塩の製造方法であって、式II
【化２】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物について定義した通りである。〕
のカルボン酸化合物と、オキシハロゲン化リンと反応させて、式Ｉの化合物、またはその塩を得て、
必要であれば、得られる遊離の式Ｉの化合物をその塩に変換し、得られる式Ｉの化合物の塩を遊離化合物に変換しおよび／または得られる式Ｉの化合物の塩をその異なる塩に変換する
ことを含む、方法。
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
〔式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であり、他方は非置換または置換フェニル−アルキルである。〕
の化合物、またはそのエステル、および／または塩。
【請求項２】
Ｒ１が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピル、フェニル−イソプロピル、フェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルであり(ここで、置換フェニルは、Ｃ１−Ｃ７−アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、ハロ、アミノ、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、Ｃ１−Ｃ７−アルカノイル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニルおよび／またはＣ１−Ｃ７アルカンスルホニル)−アミノ、カルボキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−スルファモイルおよびシアノから成る群から選択される１個以上の置換基により置換されているフェニルである)、そして
Ｒ２が水素である、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項３】
Ｒ１が水素であり、そして
Ｒ２が非置換または置換フェニル−Ｃ２−Ｃ７−アルキル、特にフェニル−エチル、フェニル−プロピル、フェニル−イソプロピル、フェニル−ｎ−ブチル、フェニル−ｓｅｃ−ブチル、フェニル−ｔｅｒｔ−ブチルまたはフェニル−イソブチルである(ここで、置換フェニルは、Ｃ１−Ｃ７−アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ、ハロ、アミノ、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキル、フェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル、Ｃ１−Ｃ７−アルカノイル、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシ−カルボニルおよび／またはＣ１−Ｃ７アルカンスルホニル)−アミノ、カルボキシ、Ｃ１−Ｃ７−アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−カルバモイル、スルファモイル、Ｎ−モノ−またはＮ,Ｎ−ジ−(Ｃ１−Ｃ７−アルキルおよび／またはフェニル−Ｃ１−Ｃ７−アルキル)−スルファモイルおよびシアノ、特にフェニル−プロピルから成る群から独立して選択される１個以上の置換基で置換されているフェニルである)、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項４】
Ｒ１が水素であり、そして
Ｒ２が３−フェニル−プロピルである、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項５】
Ｒ１が３−フェニル−プロピルであり、そして
Ｒ２が水素である、
請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはそのエステル、および／または(特に薬学的に許容される)その塩。
【請求項６】
動物、特にヒトの診断的および／または治療的処置に使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩。
【請求項７】
過剰なまたは不適切な骨吸収の処置に使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項９】
動物、特にヒトの処置方法であって、処置を必要とする動物、特にヒトに、過剰なまたは不適切な骨吸収の処置に十分な量の請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
動物、特にヒトの処置方法であって、処置を必要とする動物、特にヒトに、早老症の処置に十分な量の請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１１】
過剰なまたは不適切な骨吸収の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１２】
早老症の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１３】
過剰なまたは不適切な骨吸収の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１４】
早老症の処置における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１５】
請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物、そのエステルおよび／または塩の製造方法であって、式II
【化２】
〔式中、Ｒ１およびＲ２は請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物について定義した通りである。〕
のカルボン酸化合物と、オキシハロゲン化リンと反応させて、式Ｉの化合物、またはその塩を得て、
必要であれば、得られる遊離の式Ｉの化合物をその塩に変換し、得られる式Ｉの化合物の塩を遊離化合物に変換しおよび／または得られる式Ｉの化合物の塩をその異なる塩に変換する
ことを含む、方法。
【公表番号】特表２０１２−５１３４４３（Ｐ２０１２−５１３４４３Ａ）
【公表日】平成２４年６月１４日（２０１２．６．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４２８０７（Ｐ２０１１−５４２８０７）
【出願日】平成２１年１２月２１日（２００９．１２．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６７６７９
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０７６２５８
【国際公開日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス アーゲー (806)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年６月１４日（２０１２．６．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月２１日（２００９．１２．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６７６７９
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０７６２５８
【国際公開日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス アーゲー (806)
【Ｆターム（参考）】
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