マクロファージエラスターゼの阻害剤としての５−［３−（４−ベンジルオキシフェニルチオ）−フラ−２−イル］−イミダゾリジン−２，４−ジオン及び類似体
マクロファージエラスターゼの阻害剤として有用な、５−〔３−（４−ベンジルオキシフェニルチオ）−フラ−２−イル〕−イミダゾリジン−２，４−ジオン及びその類似体が開示される。
【化１】
【化１】
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（関係する出願）
この出願は、２００４年８月１９日に出願された米国仮特許出願第６０／６０２，７３６号からの優先権を主張し、該出願の全部の内容が参照として本明細書中に明白に取り込まれる。
【０００２】
（発明の背景）
（１．発明の分野）
本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼに付随する病気の治療における、これら酵素の阻害剤として使用できる新規の化合物に向けられる。
【０００３】
（２．関係する技術の説明）
マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）は、近年においてその数が劇的に増加しているプロテアーゼのスーパーファミリーである。これらは、結合組織の制御されていない崩壊において重要であると考えられており、当該崩壊は、いくつかの疾病過程、例えば関節リウマチ、変形性関節症、胃潰瘍、ぜんそく、気腫及び腫瘍転移に関係する。従って、１以上のＭＭＰの阻害剤が、これらの病気において利点となり得る。
ヒトマクロファージエラスターゼ（ＭＭＰ−１２）は、他のＭＭＰの全ての特性を示すが、損傷又はリモデリングが起こっている組織に対して湿潤するマクロファージから優先的に生成され、細胞外マトリックスを分解する。気腫が発症している間のＭＭＰ−１２のレベルの増加の実証は、この酵素の重大な役割を示唆する。同様に、ＭＭＰ−１２ノックアウトマウスモデルは、たばこの煙に対する長期間にわたる曝露により、気腫が全く進行しないことも実証した（Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９７，２７７：２００２−２００４）。より最近では、ぜんそくのＭＭＰ−１２欠損モデルを使用して、本発明者が、慢性ぜんそくの進行において、ＭＭＰ−１２の関与を示唆した（ＦＡＳＥＢ，２００２，１６：Ａ５９０）。これらの結果は、ＭＭＰ−１２の阻害剤が、肺の病気、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気腫及びぜんそくの治療において非常に有用であろう事を暗示する。
【０００４】
ＭＭＰ−１２は、喫煙者の肺胞のマクロファージから（Ｓｈａｐｉｒｏ ｅｔ ａｌ，１９９３， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６８：２３８２４）、アテローム領域における泡沫細胞において（Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ，１９９８，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １５３：１０９）、及び腎炎のラットモデルにおいて (Ｙｏｓｈｉｋａｔｓｕ Ｋａｎｅｋｏ ｅｔ ａｌ，２００３ Ｊ Ｉｍｍｕｏｌ １７０：３３７７)分泌されることが見出されている。ＭＭＰ−１２が冠動脈疾患において役割を果たす事も示された（Ｓｏｆｉａ Ｊｏｒｍｓｊｏ ｅｔ ａｌ，２０００， Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，８６：９９８）。これら観察結果は、ＭＭＰ−１２がこれら病気の治療の標的となり得ることを示唆した。
【０００５】
多くの病気におけるＭＭＰ−１２の関与を考慮して、その阻害剤の調製が試みられてきた。多くのＭＭＰ−１２阻害剤が知られている（例えば公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ ００/４０５７７号；ＥＰ １ ２８８ １９９ Ａ１号，２００１，Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ＆ Ｃｏ． ＭＭＰ−１２ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ；米国特許第６，３５２，９７６１号及び 米国特許出願公開第２００４/００７２８７１号；公開された欧州特許出願第ＥＰ１３９４１５９号を参照されたい）。最近この分野において開示された、ＭＭＰ阻害剤の新規なクラスが存在する。公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ ０２／０９６４２６号は、以下の式のヒダントイン誘導体を記載し：
【化１】
ここで、置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7及びＲ11は、広く定義されている。該誘導体は、ＭＭＰ阻害剤として、特にＴＡＣＥ及びアグレカナーゼに対して活性であるが、実証された生物学的なデータは全く存在しなかった。これら誘導体の構造の特徴は、ヒダントイン環とその側鎖の間のスピロ結合である。
【０００６】
米国特許出願公開第２００４／００６７９９６号及び公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ２００４／１０８０８６号は、以下の式の同様のヒダントイン誘導体を記載し：
【化２】
ここで、Ｒ1、Ｒ4、Ｒ5及びＲ11は同様に広く定義された。これら２つの特許における誘導体は、大まかに言えば、メタロプロテアーゼの阻害剤、特にＴＡＣＥ及びアグレカナーゼに対する阻害剤であることが述べられている。やはり、実証された生物学的なデータは全く存在しなかった。
【０００７】
公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ０２／０７４７５２号は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤としてのヒダントイン誘導体の合成を記載する。これらは、以下の一般式を有するＭＭＰ阻害剤としての一連のヒダントイン誘導体の最初のものであり：
【化３】
ここでＹ１、Ｙ２、Ｒ６、Ｂ及びＧは充分に定義されている。これら化合物は、ＭＭＰ阻害活性を示し、及びこれらのいくつかはＭＭＰ−１２阻害剤の効能があることが発見されたと一般的に述べられたが、詳細に提供された生物学的なデータは全く存在しなかった。
【０００８】
他の公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ２００４／０２０４１５号は、以下の式のＭＭＰ−１２阻害剤の群を開示し：
【化４】
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｘ、Ｙ、Ｚ１、Ｚ２、Ｌ及びＧは充分に定義されている。いくつかの化合物のＩＣ５０値が提供されているが、詳細な選択性のデータは欠けている。
ヒダントイン誘導体は、ＭＭＰ阻害剤の新規なクラスである。向上した特異性、有効性及び薬理学的な特性を有する、このクラスのさらなる新規な化合物を発見することが望ましい。
【０００９】
（本発明の概要）
本発明において、我々は、以下の式（ＩＶ）のヒダントイン誘導体の新規の群を提供し：
【化５】
（ＩＶ）
ここでＲは以下を意味する：
フェニル−（ＩＶａ）、
４−ベンジルオキシフェニル−（ＩＶｂ）、
４−ビフェニル−（ＩＶｃ）、
４−メトキシフェニル−（ＩＶｄ）、
３−メトキシフェニル−（ＩＶｅ）、
２−メトキシフェニル−（ＩＶｆ）、
３，５−ジメトキシフェニル−（ＩＶｇ）、
４−クロロフェニル−（ＩＶｈ）、
３−クロロフェニル−（ＩＶｉ）、
２−クロロフェニル−（ＩＶｊ）、
４−メチルフェニル−（ＩＶｋ）、
３−メチルフェニル−（ＩＶｏ）、
２−メチルフェニル−（ＩＶｐ）、又は
３−トリフルオロメチルフェニル−（ＩＶｑ）。
【００１０】
式（ＩＶ）の化合物は、ＭＭＰ−１２阻害剤であり、かつＭＭＰ−１２により媒介される病気又は状態、例えばぜんそく、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、ガン、心臓疾患及び腎炎の治療において使用できる。
本発明を特徴付ける種々の新規の特性は、添付されかつ公開の一部分を形成する請求の範囲において、詳細に指摘される。本発明、それを実施することの利点、及びその使用により達成される明確な目標をよりよく理解するためには、本発明の好ましい態様が説明され及び記載された図面及び記述的事項を参照すべきである。
【００１１】
（現時点で好ましい態様の詳細な説明）
（本発明の化合物の調製）
化学薬品の入手可能性、及び反応条件の容易性に基づいて、本発明の化合物は、以下に及び図１に示される合成の一般的な図式に述べられる方法を用いて合成された。これらの方法は、本明細書において例示としてのみ表され、本発明を制限するために表されるものではない。
【００１２】
（一般的な手順）
1ＨＮＭＲが、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ３００器具に基づいて記録された。クロロホルム−ｄ（７．２７ｐｐｍ）及びジメチルスルホキシド−ｄ6（２．５０ｐｐｍ）が、内部基準として使用された。質量スペクトルが、Ｔｕｒｂｏ Ｉｏｎ Ｓｐｒａｙ質量分光計（Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００）により得られた。カラムクロマトグラフィーを、ＥＭＤシリカゲル６０を用いて行った。薄層クロマトグラフィーを、シリカゲル６０Ｆ２５４ｓ（調製用５００μｍ）及びＪ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ’ｓ Ｂａｋｅｒ−ｆｌｅｘシリカゲルＩＢ２−Ｆ（分析用）を用いて行った。化合物の純度を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＨＰＬＣシステムを用いて解析した。全ての試薬及び溶媒は実験室グレードであり、そのまま使用した。
【００１３】
３−ブロモフラン−２−カルボキシアルデヒド（Ｉ）の調製：
ＴＨＦ（４ｍｌ）中の新たに調製したＬＤＡ（６．８０ｍｍｏｌ）の溶液に対して、ＴＨＦ（５ｍｌ）中の３−ブロモフラン（１．００ｇ、６．８０ｍｍｏｌ）をゆっくりと−７８℃で添加した。１５分の攪拌後、ＴＨＦ（２ｍｌ）中のＤＭＦ（０．５６ｍｌ、７．２０ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。結果得られた混合物を、−７８℃で１時間攪拌し、次いで室温まで放置した。該反応を水を用いて急冷し、次いでＥｔＯＡｃ（２×５０ｍｌ）を用いて抽出した。合わせた有機抽出液を、Ｈ2Ｏ、塩水を用いて洗浄し、及び乾燥（ＭｇＳＯ4）した。減圧下で溶媒を除去した後、該残渣のカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２０：８０）が、油としての標記の化合物を与え（０．４９ｇ、４１％）、該油は冷却に伴い固形化するであろう。
ＭＳ： (Ｍ＋Ｈ)+＝１７５，１７７。
ＨＮＭＲ： ９．７４−９．７２（１Ｈ，ｄ），７．６４−７．６３（１Ｈ，ｍ），６．６７５−６．６６（１Ｈ，ｄ）。
【００１４】
３−（４−ヒドロキシフェニル）チオ−フラン−２−カルボキシアルデヒド（ＩＩ）の調製：
１００ｍｌのＴＨＦ中の４−メルカプトールフェノール（５ｇ、４０ｍｍｏｌ）の溶液に対して、水素化ナトリウム（２．５ｇ、１０４ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。該混合物を１０分間攪拌し、次いで４．４ｇ（２５ｍｍｏｌ）の３−ブロモフラン−２−カルボキシアルデヒドをゆっくりと添加した。該反応混合物を５時間攪拌し、次いで該生成物をＥｔＯＡｃを用いて抽出した。該抽出液をＭｇＳＯ4を用いて乾燥した。ＥｔＯＡｃをロータリーエバポレーターで除去した。該残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー、次いで結晶化により精製し、４．２ｇの標記の化合物を得た。
ＭＳ： (Ｍ＋Ｈ)+＝２２１。
ＨＮＭＲ： ９．７７−９．７５７（１Ｈ，Ｓ），７．４９５−７．４８５（１Ｈ，ｄ），７．４７−７．４１７（２Ｈ， ｍ），６．９２５−６．８２２（２Ｈ，ｍ），６．０８２−６．０６７（１Ｈ，ｄ），５．６−５．５（１Ｈ，ｓ）。
【００１５】
Ｒ−ＣＨ2−置換された３−（４−ヒドロキシフェニル）チオ−フラン−２−カルボキシアルデヒド（ＩＩＩ）の調製：
４０ｍｌのアセトニトリル中のＲＣＨ2Ｘ（５．１ｍｍｏｌ）、３−（４−ヒドロキシフェニル）チオ−フラン−２−カルボキシアルデヒド（６００ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．５ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）の混合物を、３−７時間還流し、生成物をＥｔＯＡｃを用いて抽出した。ＥｔＯＡｃを除去した後、該残渣を再結晶又はシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標記の化合物ＩＩＩを得た。
【００１６】
化合物ＩＶの調製：
閉管中のＩＩＩ（０．３ｍｍｏｌ）、２６０ｍｇの（ＮＨ4）2ＣＯ3、３３ｍｇのＫＣＮ、２ｍｌのＥｔＯＨ及び１ｍｌのＨ2Ｏの混合物を、６０−７０℃で２０時間加熱した。次いで、該反応混合物を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出した。ＥｔＯＡｃを除去した後、該残渣を薄層クロマトグラフィーにより精製し、次いで再結晶した。最終生成物は、全て右に示した分子量及びＮＭＲスペクトルを示した。
【００１７】
ＩＶａ、５−［３−（４−ベンゾオキシフェニルチオ）フラ−２−イル］イミダゾリン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ＋Ｈ)+＝３８１．５
ＨＮＭＲ： １１．０６−１０．９５（１Ｈ，ｓ），８．４４−８．３２（１Ｈ，ｓ），７．８３−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．５１−７．３０（５Ｈ，ｍ），７．３０−７．２０（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９２（２Ｈ，ｍ），６．５５−６．４５（１Ｈ，ｄ），５．５２−５．４２（１Ｈ，ｄ），５．１６−５．０１（２Ｈ，ｓ）。
【００１８】
ＩＶｂ、５−｛３−［４−（４−ベンジルオキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝４８５．８
ＨＮＭＲ： １１．０２−１１．００（１Ｈ，ｓ），８．３９−８．３６５（１Ｈ，ｄ），７．７９−７．７７５（１Ｈ，ｄ），７．４７−７．２４（８Ｈ ｍ），７．０４−６．９４（４Ｈ，ｍ），６．４９５−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．４７５−５．４６２（１Ｈ，ｄ），５．１２−５．０９（２Ｈ，ｓ），ａｎｄ５．０００−４．９７５（２Ｈ，ｓ）。
【００１９】
ＩＶｃ、５−｛３−［４−（４−ビフェニルメトキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４５５．０
ＨＮＭＲ： ５−｛３−［４−（４−ビフェニルメトキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン(ＱＰＳ０２１)，１１．０７−１０．９８(１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３６(１Ｈ，ｓ），７．８１−７．７７(１Ｈ，ｄ），７．７４−７．６２(４Ｈ，ｍ），７．５８−７．３２(５Ｈ，ｍ），７．３２−７．２５（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９５（２Ｈ，ｍ），６．５３−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４５（１Ｈ，ｄ），５．１７−５．１３（２Ｈ，ｓ）。
【００２０】
ＩＶｄ、５−｛３−［４−（４−メトキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４０９．０
ＨＮＭＲ： １１．０９−１０．９１（１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３６（１Ｈ，ｓ），７．７９−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．４２−７．２３（４Ｈ，ｍ），７．００−６．９０（４Ｈ，ｍ），６．５３−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５６−５．４１（１Ｈ，ｄ）５．０８−４．８８（２Ｈ，ｓ），３．８４−３．６２（３Ｈ，ｓ）。
【００２１】
ＩＶｅ、５−｛３−［４−（３−メトキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４０９．０
ＨＮＭＲ： １１．０３−１０．９８（１Ｈ，ｓ），８．４４−８．３１（１Ｈ，ｓ），７．８４−７．７４（１Ｈ，ｄ），７．３６−７．２１（３Ｈ，ｍ），７．０６−６．９３（４Ｈ，ｍ），６．９２−６．８５（１Ｈ，ｍ），６．５４−６．４６（１Ｈ，ｄ），５．５２−５．４３（１Ｈ，ｄ），５．１１−５．００（２Ｈ，ｓ），３．８１−３．６９（３Ｈ，ｓ）。
【００２２】
ＩＶｆ、５−｛３−［４−（２−メトキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４０９．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３６（１Ｈ，ｓ），７．８１−７．７７（１Ｈ，ｄ），７．４０−７．２４（４Ｈ，ｍ），７．０８−６．９２（４Ｈ，ｍ），６．５２−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４６（１Ｈ，ｄ），５．０５−５．０２。
【００２３】
ＩＶｇ、５−｛３−［４−（３，５−ジメトキシベンゾオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４３９．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９６（１Ｈ，ｓ），８．４１−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．３１−７．２２（２Ｈ，ｄ），７．０２−６．９２（２Ｈ，ｄ），６．６２−６．５４（２Ｈ，ｄ），６．５３−６．４６（１Ｈ，ｄ），６．４６−６．３９（１Ｈ，ｔ），５．５０−５．４４（１Ｈ，ｄ），５．０６−４．９７（２Ｈ，ｓ），３．８０−３．６６（６Ｈ，ｓ）。
【００２４】
ＩＶｈ、５−｛３−［４−（４−クロロベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４１３．０， ４１５．０
ＨＮＭＲ： １１．０９−１０．９５（１Ｈ，ｓ），８．４９−８．２７（１Ｈ，ｓ），７．８０−７．７８（１Ｈ，ｄ），７．４７−７．４２（４Ｈ，ｓ），７．３３−７．２３（２Ｈ，ｄ），７．００−６．９５（２Ｈ，ｄ），６．５３−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４５（１Ｈ，ｄ），５．１３−５．０８（２Ｈ，ｓ）。
【００２５】
ＩＶｉ、５−｛３−［４−（３−クロロベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４１３．０， ４１５．０
ＨＮＭＲ： １１．０５−１０．９４（１Ｈ，ｓ），８．４５−８．３１（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．５３−７．３５（４Ｈ，ｍ），７．３２−７．２２（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９３（２Ｈ．ｍ），６．５４−６．４４（１Ｈ，ｄ），５．５２−５．４２（１Ｈ，ｄ），５．１８−５．０３（２Ｈ，ｓ）。
【００２６】
ＩＶｊ、５−｛３−［４−（２−クロロベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝４１３．０， ４１５．０
ＨＮＭＲ： １１．０５−１０．９６（１Ｈ，ｓ），８．４２−８．３３（１Ｈ，ｓ），７．８４−７．７４（１Ｈ，ｄ），７．６３−７．３５（４Ｈ，ｍ），７．３３−７．２４（２Ｈ，ｍ），７．０６−６．９５（２Ｈ，ｍ），６．５４−６．４８（１Ｈ，ｄ），５，５１−５．４５（１Ｈ，ｄ），５．１８−５．０８（２Ｈ，ｓ）。
【００２７】
ＩＶｋ、５−｛３−［４−（４−メチルベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝３９３．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９６（１Ｈ，ｓ），８．８４−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７６（１Ｈ，ｄ），７．３６−７．１４（６Ｈ，ｍ），７．０２−６．９２（２Ｈ，ｍ），６．５１−６．４６（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４３（１Ｈ，ｄ），５．０６−４．９９（２Ｈ，ｓ），２．３４−２．２４（３Ｈ，ｓ）。
【００２８】
ＩＶｏ、５−｛３−［４−（３−メチル−ベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝３９３．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４１−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７６（１Ｈ，ｄ），７．３５−７．１０（６Ｈ，ｍ），７．０２−６．９３（２Ｈ，ｍ），６．５２−６．４６（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４４（１Ｈ，ｓ），５．０８−５．００（２Ｈ，ｓ），２．３４−２．２８（３Ｈ，ｓ）。
【００２９】
ＩＶｐ、５−｛３−［４−（２−メチル−ベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝３９３．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４３−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７６（１Ｈ，ｄ），７．４２−７．３４（１Ｈ，ｄ），７．３３−７．１５（５Ｈ，ｍ），７．０６−６．９７（２Ｈ，ｍ），６．５４−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５１−５．４４（１Ｈ，ｄ），５．１１−５．０２（２Ｈ，ｓ），２．３５−２．２７（３Ｈ，ｓ）。
【００３０】
ＩＶｑ、５−｛３−［４−（３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２．４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝４４７．０
ＨＮＭＲ： １１．０３−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３３（１Ｈ，ｔ），７．８５−７．５９（６Ｈ，ｍ），７．３４−７．２１（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９７（２Ｈ，ｍ），６．５１−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．４８−５．４６（１Ｈ，ｄ），５．３０−５．２４（１Ｈ，ｄ），５．２２−５．１６（２Ｈ，ｓ）。
【００３１】
上記列挙した全ての化合物は、異なる効力を有するＭＭＰ−１２阻害活性（全てのＩＣ５０が０．３μＭよりも低い）、及び以下に述べるようなＭＭＰアッセイにより決定された他のＭＭＰに対する選択性を示した。
【００３２】
（ＭＭＰ阻害アッセイ）
ＭＭＰの酵素活性が、製品の手順に従って検査された（Ｂｉｏｍｏｌ Ｒｅｓｅａｅｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．e-mail：ｉｎｆｏ＠ｂｉｏｍｏｌ．ｃｏｍ）。全ての酵素は、Ｅ．ｃｏｌｉ（Ｂｉｏｍｏｌ）からの組み換えヒト活性ドメインである。蛍光基質は、（７−メトキシクマリン−４−イル）アセチル−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｎ−３−（２，４−ジニトロフェニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ2．ＡｃＯＨの配列を有する。全てのアッセイは、室温で９６ウェル平底ブラックプレート （Ｎａｌｇｅ Ｎｕｎｃ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｃａｔａｌｏｇ ｎｕｍｂｅｒ， ４６５２００）を用いて行なわれた。簡単に述べると、８９μｌのアッセイバッファー（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１０ｍＭＣａＣｌ2、０．０５％ Ｂｒｉｊ３５、ｐＨ７．５）中における一定量の酵素を、阻害剤（一組あたり７濃度、１μｌ中のＤＭＳＯ、又は１μｌＤＭＳＯのみ）を用いて又は用いずに２０分間インキュベートした。次いで、酵素反応を、基質（１０μｌのアッセイバッファー中の４０μＭ及び最終的な基質の濃度は４μＭ）の添加により開始した。該活性は、Ｅｘ／Ｅｍ＝３２８ｎｍ／３９３ｎｍでの蛍光発光の測定により決定され、及び２時間の間直線状であった。該蛍光発光を、０及び２０又は４０分で読み取った。０時間で読み取られた数値は、バックグラウンドとして見なされ、最終的に読み取られた数値から引かれる。ＩＣ５０は、Ｐｒｉｓｍ ｓｏｆｔｗａｒｅを用いた各アッセイの阻害剤の濃度に対する蛍光発光をプロットすることにより得られた。得られたＩＣ５０は、０．００７μＭから０．２６μＭで変動する。メカニズムの研究は、阻害剤が競合的であることを明らかにする。競合的阻害剤のため：
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｓ］／Ｋｍ）。
【００３３】
アッセイ条件において、［Ｓ］（４μＭ）は、Ｋｍ（ＭＭＰ−１２に対して２０μＭ）よりもより小さい。従って、ＫｉはＩＣ５０／１．２に等しく、これはＩＣ５０よりもわずかに小さく、又はおおよそＩＣ５０に等しい。
以下の表に示すように、上記アッセイにおいて試験された全ての化合物は、望ましい活性及び好ましい選択性特性を示した。ＭＭＰ−１２に基づくＩＣ５０が、１−３００ｎＭの範囲に入り、従って、これらは全て活性であると考えられる。上記化合物のほとんどが、ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−７に対して１０μＭで阻害を示さなかった。ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９及びＭＭＰ−１３に対するＭＭＰ−１２のこれらの選択性は、５０から１０００倍で変動する。
【００３４】
【表１】
【００３５】
本発明は、例としてのみ表された上記の態様により制限されず、添付した特許請求の範囲により定義された保護の範囲内で、種々の方法において変更することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】図１は、本発明の化合物の合成に関する反応式を説明する。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（関係する出願）
この出願は、２００４年８月１９日に出願された米国仮特許出願第６０／６０２，７３６号からの優先権を主張し、該出願の全部の内容が参照として本明細書中に明白に取り込まれる。
【０００２】
（発明の背景）
（１．発明の分野）
本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼに付随する病気の治療における、これら酵素の阻害剤として使用できる新規の化合物に向けられる。
【０００３】
（２．関係する技術の説明）
マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）は、近年においてその数が劇的に増加しているプロテアーゼのスーパーファミリーである。これらは、結合組織の制御されていない崩壊において重要であると考えられており、当該崩壊は、いくつかの疾病過程、例えば関節リウマチ、変形性関節症、胃潰瘍、ぜんそく、気腫及び腫瘍転移に関係する。従って、１以上のＭＭＰの阻害剤が、これらの病気において利点となり得る。
ヒトマクロファージエラスターゼ（ＭＭＰ−１２）は、他のＭＭＰの全ての特性を示すが、損傷又はリモデリングが起こっている組織に対して湿潤するマクロファージから優先的に生成され、細胞外マトリックスを分解する。気腫が発症している間のＭＭＰ−１２のレベルの増加の実証は、この酵素の重大な役割を示唆する。同様に、ＭＭＰ−１２ノックアウトマウスモデルは、たばこの煙に対する長期間にわたる曝露により、気腫が全く進行しないことも実証した（Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９７，２７７：２００２−２００４）。より最近では、ぜんそくのＭＭＰ−１２欠損モデルを使用して、本発明者が、慢性ぜんそくの進行において、ＭＭＰ−１２の関与を示唆した（ＦＡＳＥＢ，２００２，１６：Ａ５９０）。これらの結果は、ＭＭＰ−１２の阻害剤が、肺の病気、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気腫及びぜんそくの治療において非常に有用であろう事を暗示する。
【０００４】
ＭＭＰ−１２は、喫煙者の肺胞のマクロファージから（Ｓｈａｐｉｒｏ ｅｔ ａｌ，１９９３， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６８：２３８２４）、アテローム領域における泡沫細胞において（Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ，１９９８，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １５３：１０９）、及び腎炎のラットモデルにおいて (Ｙｏｓｈｉｋａｔｓｕ Ｋａｎｅｋｏ ｅｔ ａｌ，２００３ Ｊ Ｉｍｍｕｏｌ １７０：３３７７)分泌されることが見出されている。ＭＭＰ−１２が冠動脈疾患において役割を果たす事も示された（Ｓｏｆｉａ Ｊｏｒｍｓｊｏ ｅｔ ａｌ，２０００， Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，８６：９９８）。これら観察結果は、ＭＭＰ−１２がこれら病気の治療の標的となり得ることを示唆した。
【０００５】
多くの病気におけるＭＭＰ−１２の関与を考慮して、その阻害剤の調製が試みられてきた。多くのＭＭＰ−１２阻害剤が知られている（例えば公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ ００/４０５７７号；ＥＰ １ ２８８ １９９ Ａ１号，２００１，Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ＆ Ｃｏ． ＭＭＰ−１２ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ；米国特許第６，３５２，９７６１号及び 米国特許出願公開第２００４/００７２８７１号；公開された欧州特許出願第ＥＰ１３９４１５９号を参照されたい）。最近この分野において開示された、ＭＭＰ阻害剤の新規なクラスが存在する。公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ ０２／０９６４２６号は、以下の式のヒダントイン誘導体を記載し：
【化１】
ここで、置換基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7及びＲ11は、広く定義されている。該誘導体は、ＭＭＰ阻害剤として、特にＴＡＣＥ及びアグレカナーゼに対して活性であるが、実証された生物学的なデータは全く存在しなかった。これら誘導体の構造の特徴は、ヒダントイン環とその側鎖の間のスピロ結合である。
【０００６】
米国特許出願公開第２００４／００６７９９６号及び公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ２００４／１０８０８６号は、以下の式の同様のヒダントイン誘導体を記載し：
【化２】
ここで、Ｒ1、Ｒ4、Ｒ5及びＲ11は同様に広く定義された。これら２つの特許における誘導体は、大まかに言えば、メタロプロテアーゼの阻害剤、特にＴＡＣＥ及びアグレカナーゼに対する阻害剤であることが述べられている。やはり、実証された生物学的なデータは全く存在しなかった。
【０００７】
公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ０２／０７４７５２号は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤としてのヒダントイン誘導体の合成を記載する。これらは、以下の一般式を有するＭＭＰ阻害剤としての一連のヒダントイン誘導体の最初のものであり：
【化３】
ここでＹ１、Ｙ２、Ｒ６、Ｂ及びＧは充分に定義されている。これら化合物は、ＭＭＰ阻害活性を示し、及びこれらのいくつかはＭＭＰ−１２阻害剤の効能があることが発見されたと一般的に述べられたが、詳細に提供された生物学的なデータは全く存在しなかった。
【０００８】
他の公開されたＰＣＴ特許出願第ＷＯ２００４／０２０４１５号は、以下の式のＭＭＰ−１２阻害剤の群を開示し：
【化４】
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｘ、Ｙ、Ｚ１、Ｚ２、Ｌ及びＧは充分に定義されている。いくつかの化合物のＩＣ５０値が提供されているが、詳細な選択性のデータは欠けている。
ヒダントイン誘導体は、ＭＭＰ阻害剤の新規なクラスである。向上した特異性、有効性及び薬理学的な特性を有する、このクラスのさらなる新規な化合物を発見することが望ましい。
【０００９】
（本発明の概要）
本発明において、我々は、以下の式（ＩＶ）のヒダントイン誘導体の新規の群を提供し：
【化５】
（ＩＶ）
ここでＲは以下を意味する：
フェニル−（ＩＶａ）、
４−ベンジルオキシフェニル−（ＩＶｂ）、
４−ビフェニル−（ＩＶｃ）、
４−メトキシフェニル−（ＩＶｄ）、
３−メトキシフェニル−（ＩＶｅ）、
２−メトキシフェニル−（ＩＶｆ）、
３，５−ジメトキシフェニル−（ＩＶｇ）、
４−クロロフェニル−（ＩＶｈ）、
３−クロロフェニル−（ＩＶｉ）、
２−クロロフェニル−（ＩＶｊ）、
４−メチルフェニル−（ＩＶｋ）、
３−メチルフェニル−（ＩＶｏ）、
２−メチルフェニル−（ＩＶｐ）、又は
３−トリフルオロメチルフェニル−（ＩＶｑ）。
【００１０】
式（ＩＶ）の化合物は、ＭＭＰ−１２阻害剤であり、かつＭＭＰ−１２により媒介される病気又は状態、例えばぜんそく、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、ガン、心臓疾患及び腎炎の治療において使用できる。
本発明を特徴付ける種々の新規の特性は、添付されかつ公開の一部分を形成する請求の範囲において、詳細に指摘される。本発明、それを実施することの利点、及びその使用により達成される明確な目標をよりよく理解するためには、本発明の好ましい態様が説明され及び記載された図面及び記述的事項を参照すべきである。
【００１１】
（現時点で好ましい態様の詳細な説明）
（本発明の化合物の調製）
化学薬品の入手可能性、及び反応条件の容易性に基づいて、本発明の化合物は、以下に及び図１に示される合成の一般的な図式に述べられる方法を用いて合成された。これらの方法は、本明細書において例示としてのみ表され、本発明を制限するために表されるものではない。
【００１２】
（一般的な手順）
1ＨＮＭＲが、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ３００器具に基づいて記録された。クロロホルム−ｄ（７．２７ｐｐｍ）及びジメチルスルホキシド−ｄ6（２．５０ｐｐｍ）が、内部基準として使用された。質量スペクトルが、Ｔｕｒｂｏ Ｉｏｎ Ｓｐｒａｙ質量分光計（Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００）により得られた。カラムクロマトグラフィーを、ＥＭＤシリカゲル６０を用いて行った。薄層クロマトグラフィーを、シリカゲル６０Ｆ２５４ｓ（調製用５００μｍ）及びＪ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ’ｓ Ｂａｋｅｒ−ｆｌｅｘシリカゲルＩＢ２−Ｆ（分析用）を用いて行った。化合物の純度を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＨＰＬＣシステムを用いて解析した。全ての試薬及び溶媒は実験室グレードであり、そのまま使用した。
【００１３】
３−ブロモフラン−２−カルボキシアルデヒド（Ｉ）の調製：
ＴＨＦ（４ｍｌ）中の新たに調製したＬＤＡ（６．８０ｍｍｏｌ）の溶液に対して、ＴＨＦ（５ｍｌ）中の３−ブロモフラン（１．００ｇ、６．８０ｍｍｏｌ）をゆっくりと−７８℃で添加した。１５分の攪拌後、ＴＨＦ（２ｍｌ）中のＤＭＦ（０．５６ｍｌ、７．２０ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。結果得られた混合物を、−７８℃で１時間攪拌し、次いで室温まで放置した。該反応を水を用いて急冷し、次いでＥｔＯＡｃ（２×５０ｍｌ）を用いて抽出した。合わせた有機抽出液を、Ｈ2Ｏ、塩水を用いて洗浄し、及び乾燥（ＭｇＳＯ4）した。減圧下で溶媒を除去した後、該残渣のカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２０：８０）が、油としての標記の化合物を与え（０．４９ｇ、４１％）、該油は冷却に伴い固形化するであろう。
ＭＳ： (Ｍ＋Ｈ)+＝１７５，１７７。
ＨＮＭＲ： ９．７４−９．７２（１Ｈ，ｄ），７．６４−７．６３（１Ｈ，ｍ），６．６７５−６．６６（１Ｈ，ｄ）。
【００１４】
３−（４−ヒドロキシフェニル）チオ−フラン−２−カルボキシアルデヒド（ＩＩ）の調製：
１００ｍｌのＴＨＦ中の４−メルカプトールフェノール（５ｇ、４０ｍｍｏｌ）の溶液に対して、水素化ナトリウム（２．５ｇ、１０４ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。該混合物を１０分間攪拌し、次いで４．４ｇ（２５ｍｍｏｌ）の３−ブロモフラン−２−カルボキシアルデヒドをゆっくりと添加した。該反応混合物を５時間攪拌し、次いで該生成物をＥｔＯＡｃを用いて抽出した。該抽出液をＭｇＳＯ4を用いて乾燥した。ＥｔＯＡｃをロータリーエバポレーターで除去した。該残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー、次いで結晶化により精製し、４．２ｇの標記の化合物を得た。
ＭＳ： (Ｍ＋Ｈ)+＝２２１。
ＨＮＭＲ： ９．７７−９．７５７（１Ｈ，Ｓ），７．４９５−７．４８５（１Ｈ，ｄ），７．４７−７．４１７（２Ｈ， ｍ），６．９２５−６．８２２（２Ｈ，ｍ），６．０８２−６．０６７（１Ｈ，ｄ），５．６−５．５（１Ｈ，ｓ）。
【００１５】
Ｒ−ＣＨ2−置換された３−（４−ヒドロキシフェニル）チオ−フラン−２−カルボキシアルデヒド（ＩＩＩ）の調製：
４０ｍｌのアセトニトリル中のＲＣＨ2Ｘ（５．１ｍｍｏｌ）、３−（４−ヒドロキシフェニル）チオ−フラン−２−カルボキシアルデヒド（６００ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．５ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）の混合物を、３−７時間還流し、生成物をＥｔＯＡｃを用いて抽出した。ＥｔＯＡｃを除去した後、該残渣を再結晶又はシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標記の化合物ＩＩＩを得た。
【００１６】
化合物ＩＶの調製：
閉管中のＩＩＩ（０．３ｍｍｏｌ）、２６０ｍｇの（ＮＨ4）2ＣＯ3、３３ｍｇのＫＣＮ、２ｍｌのＥｔＯＨ及び１ｍｌのＨ2Ｏの混合物を、６０−７０℃で２０時間加熱した。次いで、該反応混合物を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出した。ＥｔＯＡｃを除去した後、該残渣を薄層クロマトグラフィーにより精製し、次いで再結晶した。最終生成物は、全て右に示した分子量及びＮＭＲスペクトルを示した。
【００１７】
ＩＶａ、５−［３−（４−ベンゾオキシフェニルチオ）フラ−２−イル］イミダゾリン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ＋Ｈ)+＝３８１．５
ＨＮＭＲ： １１．０６−１０．９５（１Ｈ，ｓ），８．４４−８．３２（１Ｈ，ｓ），７．８３−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．５１−７．３０（５Ｈ，ｍ），７．３０−７．２０（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９２（２Ｈ，ｍ），６．５５−６．４５（１Ｈ，ｄ），５．５２−５．４２（１Ｈ，ｄ），５．１６−５．０１（２Ｈ，ｓ）。
【００１８】
ＩＶｂ、５−｛３−［４−（４−ベンジルオキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝４８５．８
ＨＮＭＲ： １１．０２−１１．００（１Ｈ，ｓ），８．３９−８．３６５（１Ｈ，ｄ），７．７９−７．７７５（１Ｈ，ｄ），７．４７−７．２４（８Ｈ ｍ），７．０４−６．９４（４Ｈ，ｍ），６．４９５−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．４７５−５．４６２（１Ｈ，ｄ），５．１２−５．０９（２Ｈ，ｓ），ａｎｄ５．０００−４．９７５（２Ｈ，ｓ）。
【００１９】
ＩＶｃ、５−｛３−［４−（４−ビフェニルメトキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４５５．０
ＨＮＭＲ： ５−｛３−［４−（４−ビフェニルメトキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン(ＱＰＳ０２１)，１１．０７−１０．９８(１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３６(１Ｈ，ｓ），７．８１−７．７７(１Ｈ，ｄ），７．７４−７．６２(４Ｈ，ｍ），７．５８−７．３２(５Ｈ，ｍ），７．３２−７．２５（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９５（２Ｈ，ｍ），６．５３−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４５（１Ｈ，ｄ），５．１７−５．１３（２Ｈ，ｓ）。
【００２０】
ＩＶｄ、５−｛３−［４−（４−メトキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４０９．０
ＨＮＭＲ： １１．０９−１０．９１（１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３６（１Ｈ，ｓ），７．７９−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．４２−７．２３（４Ｈ，ｍ），７．００−６．９０（４Ｈ，ｍ），６．５３−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５６−５．４１（１Ｈ，ｄ）５．０８−４．８８（２Ｈ，ｓ），３．８４−３．６２（３Ｈ，ｓ）。
【００２１】
ＩＶｅ、５−｛３−［４−（３−メトキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４０９．０
ＨＮＭＲ： １１．０３−１０．９８（１Ｈ，ｓ），８．４４−８．３１（１Ｈ，ｓ），７．８４−７．７４（１Ｈ，ｄ），７．３６−７．２１（３Ｈ，ｍ），７．０６−６．９３（４Ｈ，ｍ），６．９２−６．８５（１Ｈ，ｍ），６．５４−６．４６（１Ｈ，ｄ），５．５２−５．４３（１Ｈ，ｄ），５．１１−５．００（２Ｈ，ｓ），３．８１−３．６９（３Ｈ，ｓ）。
【００２２】
ＩＶｆ、５−｛３−［４−（２−メトキシベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４０９．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３６（１Ｈ，ｓ），７．８１−７．７７（１Ｈ，ｄ），７．４０−７．２４（４Ｈ，ｍ），７．０８−６．９２（４Ｈ，ｍ），６．５２−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４６（１Ｈ，ｄ），５．０５−５．０２。
【００２３】
ＩＶｇ、５−｛３−［４−（３，５−ジメトキシベンゾオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４３９．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９６（１Ｈ，ｓ），８．４１−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．３１−７．２２（２Ｈ，ｄ），７．０２−６．９２（２Ｈ，ｄ），６．６２−６．５４（２Ｈ，ｄ），６．５３−６．４６（１Ｈ，ｄ），６．４６−６．３９（１Ｈ，ｔ），５．５０−５．４４（１Ｈ，ｄ），５．０６−４．９７（２Ｈ，ｓ），３．８０−３．６６（６Ｈ，ｓ）。
【００２４】
ＩＶｈ、５−｛３−［４−（４−クロロベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４１３．０， ４１５．０
ＨＮＭＲ： １１．０９−１０．９５（１Ｈ，ｓ），８．４９−８．２７（１Ｈ，ｓ），７．８０−７．７８（１Ｈ，ｄ），７．４７−７．４２（４Ｈ，ｓ），７．３３−７．２３（２Ｈ，ｄ），７．００−６．９５（２Ｈ，ｄ），６．５３−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４５（１Ｈ，ｄ），５．１３−５．０８（２Ｈ，ｓ）。
【００２５】
ＩＶｉ、５−｛３−［４−（３−クロロベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝４１３．０， ４１５．０
ＨＮＭＲ： １１．０５−１０．９４（１Ｈ，ｓ），８．４５−８．３１（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．５３−７．３５（４Ｈ，ｍ），７．３２−７．２２（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９３（２Ｈ．ｍ），６．５４−６．４４（１Ｈ，ｄ），５．５２−５．４２（１Ｈ，ｄ），５．１８−５．０３（２Ｈ，ｓ）。
【００２６】
ＩＶｊ、５−｛３−［４−（２−クロロベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝４１３．０， ４１５．０
ＨＮＭＲ： １１．０５−１０．９６（１Ｈ，ｓ），８．４２−８．３３（１Ｈ，ｓ），７．８４−７．７４（１Ｈ，ｄ），７．６３−７．３５（４Ｈ，ｍ），７．３３−７．２４（２Ｈ，ｍ），７．０６−６．９５（２Ｈ，ｍ），６．５４−６．４８（１Ｈ，ｄ），５，５１−５．４５（１Ｈ，ｄ），５．１８−５．０８（２Ｈ，ｓ）。
【００２７】
ＩＶｋ、５−｛３−［４−（４−メチルベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝３９３．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９６（１Ｈ，ｓ），８．８４−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７６（１Ｈ，ｄ），７．３６−７．１４（６Ｈ，ｍ），７．０２−６．９２（２Ｈ，ｍ），６．５１−６．４６（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４３（１Ｈ，ｄ），５．０６−４．９９（２Ｈ，ｓ），２．３４−２．２４（３Ｈ，ｓ）。
【００２８】
ＩＶｏ、５−｛３−［４−（３−メチル−ベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： (Ｍ−Ｈ)-＝３９３．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４１−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７６（１Ｈ，ｄ），７．３５−７．１０（６Ｈ，ｍ），７．０２−６．９３（２Ｈ，ｍ），６．５２−６．４６（１Ｈ，ｄ），５．５０−５．４４（１Ｈ，ｓ），５．０８−５．００（２Ｈ，ｓ），２．３４−２．２８（３Ｈ，ｓ）。
【００２９】
ＩＶｐ、５−｛３−［４−（２−メチル−ベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２，４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝３９３．０
ＨＮＭＲ： １１．０４−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４３−８．３４（１Ｈ，ｓ），７．８２−７．７６（１Ｈ，ｄ），７．４２−７．３４（１Ｈ，ｄ），７．３３−７．１５（５Ｈ，ｍ），７．０６−６．９７（２Ｈ，ｍ），６．５４−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．５１−５．４４（１Ｈ，ｄ），５．１１−５．０２（２Ｈ，ｓ），２．３５−２．２７（３Ｈ，ｓ）。
【００３０】
ＩＶｑ、５−｛３−［４−（３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシ）フェニルチオ］フラ−２−イル｝イミダゾリジン−２．４−ジオン
ＭＳ： （Ｍ−Ｈ）-＝４４７．０
ＨＮＭＲ： １１．０３−１０．９７（１Ｈ，ｓ），８．４０−８．３３（１Ｈ，ｔ），７．８５−７．５９（６Ｈ，ｍ），７．３４−７．２１（２Ｈ，ｍ），７．０５−６．９７（２Ｈ，ｍ），６．５１−６．４８（１Ｈ，ｄ），５．４８−５．４６（１Ｈ，ｄ），５．３０−５．２４（１Ｈ，ｄ），５．２２−５．１６（２Ｈ，ｓ）。
【００３１】
上記列挙した全ての化合物は、異なる効力を有するＭＭＰ−１２阻害活性（全てのＩＣ５０が０．３μＭよりも低い）、及び以下に述べるようなＭＭＰアッセイにより決定された他のＭＭＰに対する選択性を示した。
【００３２】
（ＭＭＰ阻害アッセイ）
ＭＭＰの酵素活性が、製品の手順に従って検査された（Ｂｉｏｍｏｌ Ｒｅｓｅａｅｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．e-mail：ｉｎｆｏ＠ｂｉｏｍｏｌ．ｃｏｍ）。全ての酵素は、Ｅ．ｃｏｌｉ（Ｂｉｏｍｏｌ）からの組み換えヒト活性ドメインである。蛍光基質は、（７−メトキシクマリン−４−イル）アセチル−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｎ−３−（２，４−ジニトロフェニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオニル−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ2．ＡｃＯＨの配列を有する。全てのアッセイは、室温で９６ウェル平底ブラックプレート （Ｎａｌｇｅ Ｎｕｎｃ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｃａｔａｌｏｇ ｎｕｍｂｅｒ， ４６５２００）を用いて行なわれた。簡単に述べると、８９μｌのアッセイバッファー（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１０ｍＭＣａＣｌ2、０．０５％ Ｂｒｉｊ３５、ｐＨ７．５）中における一定量の酵素を、阻害剤（一組あたり７濃度、１μｌ中のＤＭＳＯ、又は１μｌＤＭＳＯのみ）を用いて又は用いずに２０分間インキュベートした。次いで、酵素反応を、基質（１０μｌのアッセイバッファー中の４０μＭ及び最終的な基質の濃度は４μＭ）の添加により開始した。該活性は、Ｅｘ／Ｅｍ＝３２８ｎｍ／３９３ｎｍでの蛍光発光の測定により決定され、及び２時間の間直線状であった。該蛍光発光を、０及び２０又は４０分で読み取った。０時間で読み取られた数値は、バックグラウンドとして見なされ、最終的に読み取られた数値から引かれる。ＩＣ５０は、Ｐｒｉｓｍ ｓｏｆｔｗａｒｅを用いた各アッセイの阻害剤の濃度に対する蛍光発光をプロットすることにより得られた。得られたＩＣ５０は、０．００７μＭから０．２６μＭで変動する。メカニズムの研究は、阻害剤が競合的であることを明らかにする。競合的阻害剤のため：
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｓ］／Ｋｍ）。
【００３３】
アッセイ条件において、［Ｓ］（４μＭ）は、Ｋｍ（ＭＭＰ−１２に対して２０μＭ）よりもより小さい。従って、ＫｉはＩＣ５０／１．２に等しく、これはＩＣ５０よりもわずかに小さく、又はおおよそＩＣ５０に等しい。
以下の表に示すように、上記アッセイにおいて試験された全ての化合物は、望ましい活性及び好ましい選択性特性を示した。ＭＭＰ−１２に基づくＩＣ５０が、１−３００ｎＭの範囲に入り、従って、これらは全て活性であると考えられる。上記化合物のほとんどが、ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−７に対して１０μＭで阻害を示さなかった。ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９及びＭＭＰ−１３に対するＭＭＰ−１２のこれらの選択性は、５０から１０００倍で変動する。
【００３４】
【表１】
【００３５】
本発明は、例としてのみ表された上記の態様により制限されず、添付した特許請求の範囲により定義された保護の範囲内で、種々の方法において変更することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】図１は、本発明の化合物の合成に関する反応式を説明する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（ＩＶ）の化合物、又はその医薬品として許容される塩；
【化１】
ＩＶ
ここで、Ｒは以下から成る群より選択される：フェニル、４−ベンジルオキシフェニル、４−ビフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニル及び３−トリフルオロメチルフェニル。
【請求項２】
Ｒが４−メトキシフェニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
以下の式（ＩＶ）の化合物又はその医薬品として許容される塩を含む医薬品組成物：
【化２】
ＩＶ
ここで、Ｒは以下から成る群より選択される置換基である：フェニル，４−ベンジルオキシフェニル、４−ビフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニル及び３−トリフルオロメチルフェニル。
【請求項４】
Ｒが４−メトキシフェニルである、請求項３に記載する組成物。
【請求項５】
以下の式（ＩＶ）の化合物又はその医薬品として許容される塩の治療効量を、患者に対して投与することを含む、ＭＭＰ−１２により媒介される病気又は状態の治療方法：
【化３】
ＩＶ
ここで、Ｒは以下から成る群より選択される置換基である：フェニル、４−ベンジルオキシフェニル、４−ビフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニル及び３−トリフルオロメチルフェニル。
【請求項６】
Ｒが４−メトキシフェニルである、請求項５に記載する方法。
【請求項１】
以下の式（ＩＶ）の化合物、又はその医薬品として許容される塩；
【化１】
ＩＶ
ここで、Ｒは以下から成る群より選択される：フェニル、４−ベンジルオキシフェニル、４−ビフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニル及び３−トリフルオロメチルフェニル。
【請求項２】
Ｒが４−メトキシフェニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
以下の式（ＩＶ）の化合物又はその医薬品として許容される塩を含む医薬品組成物：
【化２】
ＩＶ
ここで、Ｒは以下から成る群より選択される置換基である：フェニル，４−ベンジルオキシフェニル、４−ビフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニル及び３−トリフルオロメチルフェニル。
【請求項４】
Ｒが４−メトキシフェニルである、請求項３に記載する組成物。
【請求項５】
以下の式（ＩＶ）の化合物又はその医薬品として許容される塩の治療効量を、患者に対して投与することを含む、ＭＭＰ−１２により媒介される病気又は状態の治療方法：
【化３】
ＩＶ
ここで、Ｒは以下から成る群より選択される置換基である：フェニル、４−ベンジルオキシフェニル、４−ビフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニル及び３−トリフルオロメチルフェニル。
【請求項６】
Ｒが４−メトキシフェニルである、請求項５に記載する方法。
【図１】
【公表番号】特表２００８−５１０７０１（Ｐ２００８−５１０７０１Ａ）
【公表日】平成２０年４月１０日（２００８．４．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５２７９７５（Ｐ２００７−５２７９７５）
【出願日】平成１７年８月１７日（２００５．８．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２９２５９
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０２３５６２
【国際公開日】平成１８年３月２日（２００６．３．２）
【出願人】（５０７０４４４７９）クエスト ファーマシューティカル サーヴィシーズ (2)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年４月１０日（２００８．４．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年８月１７日（２００５．８．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２９２５９
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０２３５６２
【国際公開日】平成１８年３月２日（２００６．３．２）
【出願人】（５０７０４４４７９）クエスト ファーマシューティカル サーヴィシーズ (2)
【Ｆターム（参考）】
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