ムスカリン性アセチルコリン受容体アンタゴニスト
ムスカリン性アセチルコリン受容体アンタゴニストおよびそれらの使用方法が提供される。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンの新規誘導体、医薬組成物、それらの調製方法、ならびにＭ３ムスカリン性アセチルコリン受容体介在疾患の処置におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
（背景技術）
末梢および中枢神経系においてコリン作動性神経から放出されるアセチルコリンは、２つの主要な類のアセチルコリン受容体−ニコチン性およびムスカリン性アセチルコリン受容体との相互作用を介して多数の異なる生物学的過程に作用する。ムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲｓ）は、７回膜貫通型ドメインを有するＧ−蛋白質共役型受容体のスーパーファミリーに属する。ｍＡＣｈＲｓにはＭ１−Ｍ５と呼ばれる５つのサブタイプがあり、それぞれ別個の遺伝子の産物である。これらの５つのサブタイプのそれぞれは、特有の薬理学的性質を示す。ムスカリン性アセチルコリン受容体は、脊椎動物の器官に広く分布し、そして、これらの受容体は、阻害性および興奮性の両方の作用を仲介し得る。例えば、気道、膀胱および胃腸管内に見られる平滑筋において、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓは収縮反応を仲介する。報文については、{Brown 1989 247 /id}を参照のこと。
【０００３】
ムスカリン性アセチルコリン受容体の機能不全は、多種多様の病態生理学的な状態において注目されてきた。例えば、喘息および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）において、炎症状態は、肺平滑筋を満たす副交感神経での阻害性Ｍ２ムスカリン性アセチルコリン自己受容体機能の損失をもたらし、迷走神経の刺激後にアセチルコリンの放出増大を惹起する。このｍＡＣｈＲの機能不全は、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激の増大により介される気道の反応亢進をもたらす{Costello, Evans, et al. 1999 72 /id}{Minette, Lammers, et al. 1989 248 /id}。同様に、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）における胃腸管の炎症は、Ｍ３ｍＡＣｈＲが介する運動過剰をもたらす{Oprins, Meijer, et al. 2000 245 /id}。膀胱の過収縮に起因する失禁は、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激の増大により介されることも示されている{Hegde & Eglen 1999 251 /id}。故に、サブタイプ−選択的ｍＡＣｈＲアンタゴニストの同定は、これらのｍＡＣｈＲ介在疾患の治療として有用であるかもしれない。
【０００４】
様々な疾患状態を処置するために抗−ムスカリン性受容体療法を用いることを支持する数多くの一連の証拠があるにも関わらず、臨床において用いられている抗−ムスカリン性化合物は相対的にほとんどない。故に、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓでの阻害を惹起し得る新規化合物が依然必要とされている。Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激増大に関連する状態、例えば、喘息、ＣＯＰＤ、ＩＢＤおよび尿失禁は、ｍＡＣｈＲ結合の阻害剤である化合物によって恩恵を得るだろう。
【０００５】
（発明の概要）
本発明は、ムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲ）介在疾患であり、アセチルコリンがＭ３ｍＡＣｈＲに結合する疾患の処置方法であって、有効量の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【０００６】
本発明は、アセチルコリンとその受容体の結合を阻害する必要のある哺乳類においてアセチルコリンとその受容体の結合を阻害する方法であって、有効量の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物をその哺乳類に投与することを含む方法にも関する。
【０００７】
本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の新規化合物ならびに式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物および医薬担体または希釈剤を含む医薬組成物も提供する。
【０００８】
本発明において有用な式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、構造式：
【化１】
（Ｉ） （ＩＩ）
［式中：
Ｒ１−は、Ｎ原子の正電荷に結合したアニオンである。Ｒ１−は、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、ベンゼンスルホナートおよびトルエンスルホナートであってもよいが、これらに限定されない。
【０００９】
Ｒ２は、５ないし６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、６ないし１０個の炭素原子を有するシクロアルキル−アルキル、５ないし６個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル、６ないし１０個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル−アルキル、アリール、所望により置換されていてもよいアリール、ヘテロアリールおよび所望により置換されていてもよいヘテロアリール；ならびに
Ｚは、単結合または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである］
で表される。
【００１０】
適当な医薬上許容される塩は、当業者によく知られており、かつ無機および有機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、リンゴ酸、洒石酸、クエン酸、乳酸、蓚酸、琥珀酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸およびマンデル酸の塩基性塩を含む。加えて、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の医薬上許容される塩は、医薬上許容されるカチオンを用いて形成されてもよい。適当な医薬上許容されるカチオンは、当業者によく知られており、かつアルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよび第四アンモニウムカチオンを含む。
【００１１】
本明細書用いるように、以下の用語：
・「ハロ」は、全てのハロゲン、すなわち、塩素、臭素およびヨウ素を言い、
・「Ｃ１−１０アルキル」または「アルキル」は、鎖長を特に限定しない限り、１ないし１０個の炭素原子の直鎖および分岐鎖部分の両方を言い、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソーブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−フェニルなどを含むが、これらに限定されず、
【００１２】
・本明細書中用いられる「シクロアルキル」は、好ましくは、３ないし８個の炭素の環状部分を意味し、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含むが、これらに限定されず、
【００１３】
・本明細書中用いられる「アルケニル」は、鎖長を特に限定しない限り、全ての場合において、２−１０個の炭素原子の直鎖または分岐鎖部分を意味し、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニルなどを含むが、これらに限定されず、
【００１４】
・「アリール」は、フェニルおよびナフチルを言い、
【００１５】
・「ヘテロアリール」（それ自体または「ヘテロアリールオキシ」もしくは「ヘテロアリールアルキル」などの任意の組み合わせにおいて）は、５−１０員芳香環系を言い、ここで、１またはそれ以上の環は、Ｎ、ＯまたはＳからなる群より選択される１またはそれ以上のヘテロ原子を含み、例えば、ピロール、ピラゾール、フラン、チオフェン、キノリン、イソキノリン、キナゾリニル、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、テトラゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾールまたはベンゾイミダゾールが挙げられるが、これらに限定されず、
【００１６】
・「複素環」（それ自体または「複素環アルキル」などの任意の組み合わせにおいて）は、飽和または部分的に飽和された４−１０員環系を言い、ここで、１またはそれ以上の環は、Ｎ、Ｏ、またはＳからなる群より選択される１またはそれ以上のヘテロ原子を含み、例えば、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロピラン、チオモルホリンまたはイミダゾリジンが挙げられるが、これらに限定されず、さらに、所望により、硫黄はスルホンまたはスルホキシドに酸化されてもよく、
【００１７】
・本明細書中用いられる「アリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキル」または「複素環アルキル」は、上記したように、別に述べない限り、本明細書中にて定義されるアリール、ヘテロアリールまたは複素環部分に結合されたＣ１−１０−アルキルを意味する。
【００１８】
本発明において有用な好ましい化合物は：
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール；
２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オール；
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノール；
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
を含む。
【００１９】
本発明において有用なより好ましい化合物は：
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
を含む。
【００２０】
（調製方法）
調製
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、幾つかの合成手順を適用することにより得られてもよく、その一部を以下のスキームで示す。これらのスキームにて提供される合成は、反応性を有する多種多様なＲ１およびＲ２を有し、本明細書中に記載の反応との適合性を達成するのに、適宜保護されている置換基を利用する、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物を製造するために適用できる。これらの場合においては、その後に脱保護を行い、一般的に開示された性質の化合物を得る。幾つかのスキームは式（ＩＩ）の化合物についてのみ示しているが、これは単に説明を目的としている。
【００２１】
一般的な調製方法をスキーム１に示す。合成は化合物１を出発とする。当業者によく知られている適当な試薬Ｒ２−Ｚ−Ｍ、例えば、Ｒ２−Ｚ−ＭｇＢｒ、Ｒ２−Ｚ−ＬｉおよびＲ２−Ｚ−Ｚｎ（１／２）を用いる反応により、アルコール２を得、これは、適切な反応試薬（例えば、ＭｅＩおよびＭｅＢｒ）との反応により第四アンモニウムに容易に変換される。
【００２２】
スキームＩ．
【化２】
【００２３】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物をもたらす、より具体的な調製方法をスキームＩＩに示す。エステル１にＰｈＣＨ２ＭｇＢｒを添加することにより、アルコール４を得、これは、ＭｅＩとの反応により対応する第四アンモニウム塩に容易に変換される。
スキームＩＩ．
【化３】
【００２４】
合成実施例
以下の実施例は本発明の説明として提供されるが、これらに決して限定されない：
【００２５】
実施例１
【化４】
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−酢酸メチルエステル（２００ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、２−チエニルリチウム（２．０２ｍＬ，ＴＨＦ中１．０Ｍ，２．０２ｍｍｏｌ）と混合した。混合物を一晩室温で攪拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。次いで、フラッシュクロマトグラフィー（９０％ ＣＨ２Ｃｌ２，８％ ＣＨ３ＯＨ，２％ ＮＨ４ＯＨ）に付し、標記化合物を得た（１３２ｍｇ，３９％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３３２（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ１．３５（ｍ，１Ｈ），１．６１（ｍ，１Ｈ），１．８１（ｍ，１Ｈ），１．９５（ｍ，１Ｈ），２．１２（ｍ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），３．０３（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｍ，１Ｈ），３．３２（ｓ，１Ｈ），６．１５（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｍ，４Ｈ），７．３０（ｍ，２Ｈ）．
【００２６】
実施例２
【化５】
２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オール
標記化合物を、（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−酢酸メチルエステルおよび塩化ベンジルマグネシウムから、実施例１の実験手順に従って調製した（収率３１％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３４８（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ０．９０（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｍ，１Ｈ），１．６１（ｍ，１Ｈ），１．８１（ｍ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，２Ｈ），３．０８（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｓ，２Ｈ），５．２４（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｍ，１０Ｈ）．
【００２７】
実施例３
【化６】
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノール
標記化合物を、（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−酢酸メチルエステルおよび塩化フェニルマグネシウムから、実施例１の実験手順に従って調製した（収率４４％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３２０（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２０（ｍ，１Ｈ），１．５４（ｍ，１Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），１．７７（ｍ，１Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｍ，１Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），２．７１（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，１Ｈ），３．１９（ｍ，１Ｈ），６．１４（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｍ，４Ｈ），７．４５（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｍ，２Ｈ）．
【００２８】
実施例４
【化７】
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
ＣＨ３ＣＮ（１ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）中の２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール（１０ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）の溶液を、ヨウ化メチル（０．０３８ｍＬ，０．６ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．１ｇ，０．７ｍｍｏｌ）と混合した。混合物を室温で一晩攪拌し、濾過した。逆相ＨＰＬＣにより分離し、標記化合物を得た（１０ｍｇ，９６％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３４６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２８（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），２．２９（ｍ，１Ｈ），２．５１（ｍ，２Ｈ），２．６４（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｓ，６Ｈ），４．０７（ｍ，１Ｈ），４．３８（ｍ，１Ｈ），５．９３（ｓ，１Ｈ），６．６２（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｍ，１Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｍ，１Ｈ），７．１１（ｍ，１Ｈ），７．４６（ｍ，１Ｈ）．
【００２９】
実施例５
【化８】
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
標記化合物を、２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オールおよびヨウ化メチルから、実施例４の実験手順に従って調製した（収率８５％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３４６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ０．８０（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｍ，１Ｈ），１．９９（ｍ，１Ｈ），２．０９（ｍ，２Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．９５（ｍ，５Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｍ，１Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｍ，１０Ｈ）．
【００３０】
実施例６
【化９】
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
標記化合物を、２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノールおよびヨウ化メチルから、実施例４の手順に従って調製した（収率６７％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３３４（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．５０（ｍ，１Ｈ），１．９８（ｍ，１Ｈ），２．１１（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｍ，２Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｍ，１Ｈ），３．２３（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｍ，８Ｈ），７．４９（ｍ，２Ｈ）．
【００３１】
生物学的実施例
本発明のＭ３ｍＡＣｈＲにおける化合物の阻害効果を、以下のインビトロおよびインビボアッセイにより決定する。
【００３２】
カルシウム動員による受容体活性化の阻害分析：
ＣＨＯ細胞で発現されるｍＡＣｈＲｓの刺激を、以前記載したように１０、受容体に活性化されたカルシウム動員をモニタリングすることにより分析した。安定してＭ３ｍＡＣｈＲｓを発現するＣＨＯ細胞を、９６ウェルブラックウォール／クリアーボトムプレートに蒔く。１８ないし２４時間後、培地を吸引し、１００μｌのローディング培地（Ｅａｒｌ’ｓ塩、０．１％のＲＩＡ−グレードＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ ＭＯ）および４μＭのＦｌｕｏ−３−アセトキシメチルエステル蛍光指示色素（Ｆｌｕｏ−３ ＡＭ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を加えたＥＭＥＭ）と交換し、３７℃で１時間インキュベーションした。次いで、色素を含有する培地を吸引し、新鮮な培地（Ｆｌｕｏ−３ ＡＭなし）と交換し、細胞を３７℃で１０分間インキュベーションした。次いで、細胞を３回洗浄し、１００μｌのアッセイバッファー（０．１％ ゼラチン（Ｓｉｇｍａ）、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、４．６ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、２５ｍＭ ＮａＨＣＯ３、１．０ｍＭ ＣａＣｌ２、１．１ｍＭ ＭｇＣｌ２、１１ｍＭ グルコース、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４））中、３７℃で１０分間インキュベーションした。５０μｌの化合物（アッセイ中、１×１０−１１−最終１×１０−５Ｍ）を加え、プレートを３７℃で１０分間インキュベーションした。次いで、プレートを蛍光強度プレートリーダー（ＦＬＩＰＲ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）にセットし、そこで、色素をローディングした細胞を、６ワットのアルゴンレーザーからの励起光（４８８ｎｍ）に曝した。０．１％のＢＳＡを含有するバッファー中で調製した５０μｌのアセチルコリン（０．１−最終１０ｎＭ）を５０μｌ／秒の速度で加えることにより、細胞を活性化させた。サイトゾルのカルシウム濃度における変化としてモニターされるカルシウム動員を、５６６ｎｍの発光強度における変化として測定した。発光強度における変化はサイトゾルのカルシウムレベルに直接的に関連付けられる１１。冷却ＣＣＤカメラを用いて、全９６ウェルから放出された蛍光を同時に測定する。データポイントを毎秒集める。次いで、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いて、このデータをプロットし、解析する。
【００３３】
メタコリンが誘導する気管支収縮
覚醒、無拘束のＢａｌｂＣマウス（各群ｎ＝６）において、メタコリンに対する気道反応性を調べた。圧プレスチモグラフィを用いて、メタコリンでの気管支の攻撃の間に生じる気道抵抗の変化と相関関係にあることが分かっている、ポウズの増大（Ｐｅｎｈ）、すなわち、単位のない尺度を測定した12。５０μｌのビヒクル（１０％のＤＭＳＯ）中の５０μｌの化合物（０．００３−１０μｇ／マウス）を用いてマウスの鼻腔内を予め処置し、次いで、マウスをプレスチモグラフィチャンバー内に置いた。そのチャンバー内で、一旦、マウスを１０分間平衡状態とし、その後、５分間のベースラインＰｅｎｈ測定を行った。次いで、メタコリン（１０ｍｇ／ｍｌ）のエアロゾルを用いて２分間マウスを攻撃した。メタコリンエアロゾルの攻撃開始から７分間連続してＰｅｎｈを記録し、その後５分間攻撃を続けた。ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いて、各マウスについてのデータを解析し、プロットした。
【００３４】
本明細書中に引用した特許、特許出願を含め全ての文献は、出典明示によりその全てを本明細書の一部となす。
【００３５】
上記記載は、その好ましい実施態様を含む本発明を十分に開示する。本明細書中特に開示された実施態様の修飾および改良は、添付の特許請求の範囲の範囲内である。さらなる記載がなくとも、当業者は上記記載を用いて本発明を最大限に利用し得ると考えられる。故に、本明細書中の実施例は、単なる説明と解釈されるべきであり、本発明の範囲を決して限定しない。独占的な特性または特権が主張される本発明の実施態様は添付の特許請求の範囲にて定義される。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンの新規誘導体、医薬組成物、それらの調製方法、ならびにＭ３ムスカリン性アセチルコリン受容体介在疾患の処置におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
（背景技術）
末梢および中枢神経系においてコリン作動性神経から放出されるアセチルコリンは、２つの主要な類のアセチルコリン受容体−ニコチン性およびムスカリン性アセチルコリン受容体との相互作用を介して多数の異なる生物学的過程に作用する。ムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲｓ）は、７回膜貫通型ドメインを有するＧ−蛋白質共役型受容体のスーパーファミリーに属する。ｍＡＣｈＲｓにはＭ１−Ｍ５と呼ばれる５つのサブタイプがあり、それぞれ別個の遺伝子の産物である。これらの５つのサブタイプのそれぞれは、特有の薬理学的性質を示す。ムスカリン性アセチルコリン受容体は、脊椎動物の器官に広く分布し、そして、これらの受容体は、阻害性および興奮性の両方の作用を仲介し得る。例えば、気道、膀胱および胃腸管内に見られる平滑筋において、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓは収縮反応を仲介する。報文については、{Brown 1989 247 /id}を参照のこと。
【０００３】
ムスカリン性アセチルコリン受容体の機能不全は、多種多様の病態生理学的な状態において注目されてきた。例えば、喘息および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）において、炎症状態は、肺平滑筋を満たす副交感神経での阻害性Ｍ２ムスカリン性アセチルコリン自己受容体機能の損失をもたらし、迷走神経の刺激後にアセチルコリンの放出増大を惹起する。このｍＡＣｈＲの機能不全は、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激の増大により介される気道の反応亢進をもたらす{Costello, Evans, et al. 1999 72 /id}{Minette, Lammers, et al. 1989 248 /id}。同様に、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）における胃腸管の炎症は、Ｍ３ｍＡＣｈＲが介する運動過剰をもたらす{Oprins, Meijer, et al. 2000 245 /id}。膀胱の過収縮に起因する失禁は、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激の増大により介されることも示されている{Hegde & Eglen 1999 251 /id}。故に、サブタイプ−選択的ｍＡＣｈＲアンタゴニストの同定は、これらのｍＡＣｈＲ介在疾患の治療として有用であるかもしれない。
【０００４】
様々な疾患状態を処置するために抗−ムスカリン性受容体療法を用いることを支持する数多くの一連の証拠があるにも関わらず、臨床において用いられている抗−ムスカリン性化合物は相対的にほとんどない。故に、Ｍ３ｍＡＣｈＲｓでの阻害を惹起し得る新規化合物が依然必要とされている。Ｍ３ｍＡＣｈＲｓの刺激増大に関連する状態、例えば、喘息、ＣＯＰＤ、ＩＢＤおよび尿失禁は、ｍＡＣｈＲ結合の阻害剤である化合物によって恩恵を得るだろう。
【０００５】
（発明の概要）
本発明は、ムスカリン性アセチルコリン受容体（ｍＡＣｈＲ）介在疾患であり、アセチルコリンがＭ３ｍＡＣｈＲに結合する疾患の処置方法であって、有効量の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物またはそれらの医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【０００６】
本発明は、アセチルコリンとその受容体の結合を阻害する必要のある哺乳類においてアセチルコリンとその受容体の結合を阻害する方法であって、有効量の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物をその哺乳類に投与することを含む方法にも関する。
【０００７】
本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の新規化合物ならびに式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物および医薬担体または希釈剤を含む医薬組成物も提供する。
【０００８】
本発明において有用な式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、構造式：
【化１】
（Ｉ） （ＩＩ）
［式中：
Ｒ１−は、Ｎ原子の正電荷に結合したアニオンである。Ｒ１−は、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、ベンゼンスルホナートおよびトルエンスルホナートであってもよいが、これらに限定されない。
【０００９】
Ｒ２は、５ないし６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、６ないし１０個の炭素原子を有するシクロアルキル−アルキル、５ないし６個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル、６ないし１０個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル−アルキル、アリール、所望により置換されていてもよいアリール、ヘテロアリールおよび所望により置換されていてもよいヘテロアリール；ならびに
Ｚは、単結合または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである］
で表される。
【００１０】
適当な医薬上許容される塩は、当業者によく知られており、かつ無機および有機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、リンゴ酸、洒石酸、クエン酸、乳酸、蓚酸、琥珀酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸およびマンデル酸の塩基性塩を含む。加えて、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の医薬上許容される塩は、医薬上許容されるカチオンを用いて形成されてもよい。適当な医薬上許容されるカチオンは、当業者によく知られており、かつアルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよび第四アンモニウムカチオンを含む。
【００１１】
本明細書用いるように、以下の用語：
・「ハロ」は、全てのハロゲン、すなわち、塩素、臭素およびヨウ素を言い、
・「Ｃ１−１０アルキル」または「アルキル」は、鎖長を特に限定しない限り、１ないし１０個の炭素原子の直鎖および分岐鎖部分の両方を言い、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソーブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−フェニルなどを含むが、これらに限定されず、
【００１２】
・本明細書中用いられる「シクロアルキル」は、好ましくは、３ないし８個の炭素の環状部分を意味し、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含むが、これらに限定されず、
【００１３】
・本明細書中用いられる「アルケニル」は、鎖長を特に限定しない限り、全ての場合において、２−１０個の炭素原子の直鎖または分岐鎖部分を意味し、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニルなどを含むが、これらに限定されず、
【００１４】
・「アリール」は、フェニルおよびナフチルを言い、
【００１５】
・「ヘテロアリール」（それ自体または「ヘテロアリールオキシ」もしくは「ヘテロアリールアルキル」などの任意の組み合わせにおいて）は、５−１０員芳香環系を言い、ここで、１またはそれ以上の環は、Ｎ、ＯまたはＳからなる群より選択される１またはそれ以上のヘテロ原子を含み、例えば、ピロール、ピラゾール、フラン、チオフェン、キノリン、イソキノリン、キナゾリニル、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、テトラゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾールまたはベンゾイミダゾールが挙げられるが、これらに限定されず、
【００１６】
・「複素環」（それ自体または「複素環アルキル」などの任意の組み合わせにおいて）は、飽和または部分的に飽和された４−１０員環系を言い、ここで、１またはそれ以上の環は、Ｎ、Ｏ、またはＳからなる群より選択される１またはそれ以上のヘテロ原子を含み、例えば、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロピラン、チオモルホリンまたはイミダゾリジンが挙げられるが、これらに限定されず、さらに、所望により、硫黄はスルホンまたはスルホキシドに酸化されてもよく、
【００１７】
・本明細書中用いられる「アリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキル」または「複素環アルキル」は、上記したように、別に述べない限り、本明細書中にて定義されるアリール、ヘテロアリールまたは複素環部分に結合されたＣ１−１０−アルキルを意味する。
【００１８】
本発明において有用な好ましい化合物は：
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール；
２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オール；
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノール；
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
を含む。
【００１９】
本発明において有用なより好ましい化合物は：
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
を含む。
【００２０】
（調製方法）
調製
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、幾つかの合成手順を適用することにより得られてもよく、その一部を以下のスキームで示す。これらのスキームにて提供される合成は、反応性を有する多種多様なＲ１およびＲ２を有し、本明細書中に記載の反応との適合性を達成するのに、適宜保護されている置換基を利用する、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物を製造するために適用できる。これらの場合においては、その後に脱保護を行い、一般的に開示された性質の化合物を得る。幾つかのスキームは式（ＩＩ）の化合物についてのみ示しているが、これは単に説明を目的としている。
【００２１】
一般的な調製方法をスキーム１に示す。合成は化合物１を出発とする。当業者によく知られている適当な試薬Ｒ２−Ｚ−Ｍ、例えば、Ｒ２−Ｚ−ＭｇＢｒ、Ｒ２−Ｚ−ＬｉおよびＲ２−Ｚ−Ｚｎ（１／２）を用いる反応により、アルコール２を得、これは、適切な反応試薬（例えば、ＭｅＩおよびＭｅＢｒ）との反応により第四アンモニウムに容易に変換される。
【００２２】
スキームＩ．
【化２】
【００２３】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物をもたらす、より具体的な調製方法をスキームＩＩに示す。エステル１にＰｈＣＨ２ＭｇＢｒを添加することにより、アルコール４を得、これは、ＭｅＩとの反応により対応する第四アンモニウム塩に容易に変換される。
スキームＩＩ．
【化３】
【００２４】
合成実施例
以下の実施例は本発明の説明として提供されるが、これらに決して限定されない：
【００２５】
実施例１
【化４】
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−酢酸メチルエステル（２００ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、２−チエニルリチウム（２．０２ｍＬ，ＴＨＦ中１．０Ｍ，２．０２ｍｍｏｌ）と混合した。混合物を一晩室温で攪拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。次いで、フラッシュクロマトグラフィー（９０％ ＣＨ２Ｃｌ２，８％ ＣＨ３ＯＨ，２％ ＮＨ４ＯＨ）に付し、標記化合物を得た（１３２ｍｇ，３９％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３３２（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ１．３５（ｍ，１Ｈ），１．６１（ｍ，１Ｈ），１．８１（ｍ，１Ｈ），１．９５（ｍ，１Ｈ），２．１２（ｍ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），３．０３（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｍ，１Ｈ），３．３２（ｓ，１Ｈ），６．１５（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｍ，４Ｈ），７．３０（ｍ，２Ｈ）．
【００２６】
実施例２
【化５】
２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オール
標記化合物を、（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−酢酸メチルエステルおよび塩化ベンジルマグネシウムから、実施例１の実験手順に従って調製した（収率３１％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３４８（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ０．９０（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｍ，１Ｈ），１．６１（ｍ，１Ｈ），１．８１（ｍ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，２Ｈ），３．０８（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｓ，２Ｈ），５．２４（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｍ，１０Ｈ）．
【００２７】
実施例３
【化６】
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノール
標記化合物を、（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−酢酸メチルエステルおよび塩化フェニルマグネシウムから、実施例１の実験手順に従って調製した（収率４４％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３２０（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２０（ｍ，１Ｈ），１．５４（ｍ，１Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），１．７７（ｍ，１Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｍ，１Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），２．７１（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，１Ｈ），３．１９（ｍ，１Ｈ），６．１４（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｍ，４Ｈ），７．４５（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｍ，２Ｈ）．
【００２８】
実施例４
【化７】
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
ＣＨ３ＣＮ（１ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）中の２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール（１０ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）の溶液を、ヨウ化メチル（０．０３８ｍＬ，０．６ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．１ｇ，０．７ｍｍｏｌ）と混合した。混合物を室温で一晩攪拌し、濾過した。逆相ＨＰＬＣにより分離し、標記化合物を得た（１０ｍｇ，９６％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３４６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２８（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），２．２９（ｍ，１Ｈ），２．５１（ｍ，２Ｈ），２．６４（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｓ，６Ｈ），４．０７（ｍ，１Ｈ），４．３８（ｍ，１Ｈ），５．９３（ｓ，１Ｈ），６．６２（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｍ，１Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｍ，１Ｈ），７．１１（ｍ，１Ｈ），７．４６（ｍ，１Ｈ）．
【００２９】
実施例５
【化８】
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
標記化合物を、２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オールおよびヨウ化メチルから、実施例４の実験手順に従って調製した（収率８５％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３４６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ０．８０（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｍ，１Ｈ），１．９９（ｍ，１Ｈ），２．０９（ｍ，２Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．９５（ｍ，５Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｍ，１Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｍ，１０Ｈ）．
【００３０】
実施例６
【化９】
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン
標記化合物を、２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノールおよびヨウ化メチルから、実施例４の手順に従って調製した（収率６７％）：ＬＣＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３３４（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．５０（ｍ，１Ｈ），１．９８（ｍ，１Ｈ），２．１１（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｍ，２Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｍ，１Ｈ），３．２３（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｍ，８Ｈ），７．４９（ｍ，２Ｈ）．
【００３１】
生物学的実施例
本発明のＭ３ｍＡＣｈＲにおける化合物の阻害効果を、以下のインビトロおよびインビボアッセイにより決定する。
【００３２】
カルシウム動員による受容体活性化の阻害分析：
ＣＨＯ細胞で発現されるｍＡＣｈＲｓの刺激を、以前記載したように１０、受容体に活性化されたカルシウム動員をモニタリングすることにより分析した。安定してＭ３ｍＡＣｈＲｓを発現するＣＨＯ細胞を、９６ウェルブラックウォール／クリアーボトムプレートに蒔く。１８ないし２４時間後、培地を吸引し、１００μｌのローディング培地（Ｅａｒｌ’ｓ塩、０．１％のＲＩＡ−グレードＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ ＭＯ）および４μＭのＦｌｕｏ−３−アセトキシメチルエステル蛍光指示色素（Ｆｌｕｏ−３ ＡＭ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を加えたＥＭＥＭ）と交換し、３７℃で１時間インキュベーションした。次いで、色素を含有する培地を吸引し、新鮮な培地（Ｆｌｕｏ−３ ＡＭなし）と交換し、細胞を３７℃で１０分間インキュベーションした。次いで、細胞を３回洗浄し、１００μｌのアッセイバッファー（０．１％ ゼラチン（Ｓｉｇｍａ）、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、４．６ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、２５ｍＭ ＮａＨＣＯ３、１．０ｍＭ ＣａＣｌ２、１．１ｍＭ ＭｇＣｌ２、１１ｍＭ グルコース、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４））中、３７℃で１０分間インキュベーションした。５０μｌの化合物（アッセイ中、１×１０−１１−最終１×１０−５Ｍ）を加え、プレートを３７℃で１０分間インキュベーションした。次いで、プレートを蛍光強度プレートリーダー（ＦＬＩＰＲ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）にセットし、そこで、色素をローディングした細胞を、６ワットのアルゴンレーザーからの励起光（４８８ｎｍ）に曝した。０．１％のＢＳＡを含有するバッファー中で調製した５０μｌのアセチルコリン（０．１−最終１０ｎＭ）を５０μｌ／秒の速度で加えることにより、細胞を活性化させた。サイトゾルのカルシウム濃度における変化としてモニターされるカルシウム動員を、５６６ｎｍの発光強度における変化として測定した。発光強度における変化はサイトゾルのカルシウムレベルに直接的に関連付けられる１１。冷却ＣＣＤカメラを用いて、全９６ウェルから放出された蛍光を同時に測定する。データポイントを毎秒集める。次いで、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いて、このデータをプロットし、解析する。
【００３３】
メタコリンが誘導する気管支収縮
覚醒、無拘束のＢａｌｂＣマウス（各群ｎ＝６）において、メタコリンに対する気道反応性を調べた。圧プレスチモグラフィを用いて、メタコリンでの気管支の攻撃の間に生じる気道抵抗の変化と相関関係にあることが分かっている、ポウズの増大（Ｐｅｎｈ）、すなわち、単位のない尺度を測定した12。５０μｌのビヒクル（１０％のＤＭＳＯ）中の５０μｌの化合物（０．００３−１０μｇ／マウス）を用いてマウスの鼻腔内を予め処置し、次いで、マウスをプレスチモグラフィチャンバー内に置いた。そのチャンバー内で、一旦、マウスを１０分間平衡状態とし、その後、５分間のベースラインＰｅｎｈ測定を行った。次いで、メタコリン（１０ｍｇ／ｍｌ）のエアロゾルを用いて２分間マウスを攻撃した。メタコリンエアロゾルの攻撃開始から７分間連続してＰｅｎｈを記録し、その後５分間攻撃を続けた。ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いて、各マウスについてのデータを解析し、プロットした。
【００３４】
本明細書中に引用した特許、特許出願を含め全ての文献は、出典明示によりその全てを本明細書の一部となす。
【００３５】
上記記載は、その好ましい実施態様を含む本発明を十分に開示する。本明細書中特に開示された実施態様の修飾および改良は、添付の特許請求の範囲の範囲内である。さらなる記載がなくとも、当業者は上記記載を用いて本発明を最大限に利用し得ると考えられる。故に、本明細書中の実施例は、単なる説明と解釈されるべきであり、本発明の範囲を決して限定しない。独占的な特性または特権が主張される本発明の実施態様は添付の特許請求の範囲にて定義される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下に示す構造式ＩまたはＩＩ：
【化１】
（Ｉ） （ＩＩ）
［式中：
Ｒ１−は、Ｎ原子の正電荷に結合したアニオンであり；
Ｒ２は、５ないし６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、６ないし１０個の炭素原子を有するシクロアルキル−アルキル、５ないし６個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル、６ないし１０個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル−アルキル、アリール、置換されていてもよいアリール、ヘテロアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選択され；および
Ｚは、単結合または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである］
を有する化合物。
【請求項２】
Ｒ１−が、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、ベンゼンスルホナートおよびトルエンスルホナートからなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール；
２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オール；
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノール；
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン：
からなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン：
からなる群より選択される、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
ムスカリン性アセチルコリン受容体介在疾患を処置するための医薬組成物であって、請求項１記載の化合物およびそれらの医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項６】
アセチルコリンとその受容体の結合を阻害する必要のある哺乳類においてアセチルコリンとその受容体の結合を阻害する方法であって、安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項７】
ムスカリン性アセチルコリン受容体介在疾患であり、アセチルコリンが該受容体に結合する疾患の処置方法であって、安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項８】
疾患が、慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎、喘息、慢性呼吸器閉塞、肺線維症、肺気腫およびアレルギー性鼻炎からなる群より選択される、請求項７記載の方法。
【請求項９】
経口または経鼻吸入により投与される、請求項７記載の方法。
【請求項１０】
リザーバードライパウダー吸入器、複数回使用ドライパウダー吸入器または一定用量吸入器から選択される医薬用ディスペンサーを介して投与される、請求項７記載の方法。
【請求項１１】
化合物がヒトに投与され、かつ用量１ｍｇにつき１２時間またはそれ以上の作用時間を有する、請求項８記載の方法。
【請求項１２】
化合物が２４時間またはそれ以上の作用時間を有する、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
化合物が３６時間またはそれ以上の作用時間を有する、請求項１２記載の方法。
【請求項１】
以下に示す構造式ＩまたはＩＩ：
【化１】
（Ｉ） （ＩＩ）
［式中：
Ｒ１−は、Ｎ原子の正電荷に結合したアニオンであり；
Ｒ２は、５ないし６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、６ないし１０個の炭素原子を有するシクロアルキル−アルキル、５ないし６個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル、６ないし１０個の炭素原子およびヘテロ原子としてＮまたはＯを有するヘテロシクロアルキル−アルキル、アリール、置換されていてもよいアリール、ヘテロアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群より選択され；および
Ｚは、単結合または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである］
を有する化合物。
【請求項２】
Ｒ１−が、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、ベンゼンスルホナートおよびトルエンスルホナートからなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジ−チオフェン−２−イル−エタノール；
２−ベンジル−１−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−３−フェニル−プロパン−２−オール；
２−（８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イリデン）−１，１−ジフェニル−エタノール；
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン：
からなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
ヨウ化３−（２−ベンジル−２−ヒドロキシ−３−フェニル−プロピリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン；および
ヨウ化３−（２−ヒドロキシ−２，２−ジフェニル−エチリデン）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン：
からなる群より選択される、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
ムスカリン性アセチルコリン受容体介在疾患を処置するための医薬組成物であって、請求項１記載の化合物およびそれらの医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項６】
アセチルコリンとその受容体の結合を阻害する必要のある哺乳類においてアセチルコリンとその受容体の結合を阻害する方法であって、安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項７】
ムスカリン性アセチルコリン受容体介在疾患であり、アセチルコリンが該受容体に結合する疾患の処置方法であって、安全かつ有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項８】
疾患が、慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎、喘息、慢性呼吸器閉塞、肺線維症、肺気腫およびアレルギー性鼻炎からなる群より選択される、請求項７記載の方法。
【請求項９】
経口または経鼻吸入により投与される、請求項７記載の方法。
【請求項１０】
リザーバードライパウダー吸入器、複数回使用ドライパウダー吸入器または一定用量吸入器から選択される医薬用ディスペンサーを介して投与される、請求項７記載の方法。
【請求項１１】
化合物がヒトに投与され、かつ用量１ｍｇにつき１２時間またはそれ以上の作用時間を有する、請求項８記載の方法。
【請求項１２】
化合物が２４時間またはそれ以上の作用時間を有する、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
化合物が３６時間またはそれ以上の作用時間を有する、請求項１２記載の方法。
【公表番号】特表２００７−５０９０６１（Ｐ２００７−５０９０６１Ａ）
【公表日】平成１９年４月１２日（２００７．４．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５３５３８４（Ｐ２００６−５３５３８４）
【出願日】平成１６年１０月１５日（２００４．１０．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３４２３４
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３７２２４
【国際公開日】平成１７年４月２８日（２００５．４．２８）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ グループ リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ ＧＲＯＵＰ ＬＩＭＩＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｈｏｕｓｅ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ Ａｖｅｎｕｅ Ｇｒｅｅｎｆｏｒｄ，Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ ＵＢ６ ０ＮＮ，Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年４月１２日（２００７．４．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年１０月１５日（２００４．１０．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３４２３４
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３７２２４
【国際公開日】平成１７年４月２８日（２００５．４．２８）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ グループ リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ ＧＲＯＵＰ ＬＩＭＩＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｈｏｕｓｅ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ Ａｖｅｎｕｅ Ｇｒｅｅｎｆｏｒｄ，Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ ＵＢ６ ０ＮＮ，Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ
【Ｆターム（参考）】
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