リボフラノシルピリミジンヌクレオシドの調製
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼの強力な阻害剤である式ＩＶの４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの改良された製造方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、合衆国を除く全ての国の指定に対する出願人として合衆国法人ファーマセット・インクとスイス国法人エフ・ホフマン・ラ−ロシュ・アーゲーの名義で、合衆国の指定に対してのみの出願人として、スティーブン・ディー．アクスト（合衆国国民）；ケシャブ・サルマ（合衆国国民）；ジャスティン・ヴィターレ（合衆国国民）；ジャン・ジュ（カナダ国国民）；ブルース・ロス（合衆国国民）；スグナ・ラチャコンダ（インド国国民）；キンウー・ジン（中華人民共和国国民）；及びビョン−クォン・チュン（大韓民国国民）の名義で、ＰＣＴ国際特許出願として２００７年１０月５日に出願されたもので、１００６年１０月１０日出願の米国仮特許出願第６０／８５０９６２号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼの強力な阻害剤である式
の４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの改良された製造方法に関する。
ＰＣＴ公開公報ＷＯ２００６／０１２４４０は以下のスキームに従う方法を開示している。該方法はアノマー１４及び１６の面倒な分離を必要としている。
【０００３】
本発明の目的は、従来から知られている不具合がない、式
の４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの改良された大規模化可能な方法を提供することである。
本発明の方法は、
ａ）式ＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、式ＩＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルに転換させ、
ｂ）式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、式Ｉ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルであり、Ｂｚはベンゾイルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルに転換させ、
ｃ）式Ｉの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルを加水分解して、式ＩＶの４−アミノ−ｌ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを得ること
を含む。
【０００４】
ここで使用される（アリール）アルカン酸なる用語は、基ＲＣＯ２Ｈ（該式中、Ｒはここで定義されるようなアルキル又はアリールである）を意味する。従って、（アリール）アルカンエステルなる用語は、基ＲＣＯ２Ｒ’（該式中、Ｒはアルキル又はアリールである）を意味する。最も典型的には、Ｒ’はリボース環の３’及び／又は５’位である。「（アリール）アルカノイル」及び「（アリール）アルカノイルオキシ」なる用語は、それぞれ基ＲＣＯ−及びＲＣＯＯ−（ここで、Ｒは先に記載の通り）を意味する。「（アリール）アルカノイルオキシメチル」基なる用語は、基ＲＣＯＯＣＨ２−（ここで、Ｒは先に記載の通り）を意味する。
【０００５】
ここで使用される「アルキル」なる用語は、１から１０の炭素原子を含む未分岐又は分岐鎖で飽和の一価炭化水素残基を意味する。
ここで使用される「アリール」なる用語はフェニル基を意味する。
本発明の好ましい実施態様では、Ｒはフェニルの意味を持つ。
【０００６】
一般に、この出願において使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ系命名法の生成のためのＢｅｉｌｓｔｅｉｎ ＩｎｓｔｉｔｕｔｅコンピュータシステムであるＡＵＴＯＮＯＭTMｖ．４．０に基づいている。示した構造とその構造に与えた名前の間に矛盾がある場合には、示した構造に重みが置かれる。また、構造又は構造の一部の化学量論が、例えば太字又は破線で示されていない場合、構造又は構造の一部はその全ての立体異性体を包含するものと解されなければならない。
工程ａ）における転換は還元剤の存在下での還元と続く塩素化剤の存在下での塩素化を含む。
【０００７】
適切な還元剤は、トルエン溶液として商品名ＲｅｄＡｌ（登録商標）の下で商業的に入手できる水素化ビス−（２−メトキシエトキシ）（２，２，２−トリフルオロエトキシ）アルミニウムナトリウムである。
還元は通常０℃以下、好ましくは−５℃以下の反応温度で、ジクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素におけるような有機溶媒中で起こる。
還元の完了後に反応混合物に塩素化反応を施す。
【０００８】
塩素化剤は、通例、塩化スルフリル、塩化チオニル又はオキシ塩化リンから選択される。
好ましくは、触媒量の臭化テトラブチルアンモニウムの存在下で塩化スルフリルが使用される。
塩素化は適切には０℃と４０℃の間の温度で実施される。
【０００９】
式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルは、当業者に知られた技術を適用して反応混合物から分離することができる。
工程ｂ）における転換は、式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、ルイス酸の存在下でＯ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンと反応させることを含む。
Ｏ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンは、Ｎ−ベンゾイルシトシンを、還流条件下でクロロベンゼン中の硫酸アンモニウムの存在下でヘキサメチルジシラザンと反応させることによってインサイツで調製することができる。
【００１０】
当該分野で知られている一般的なルイ酸が工程ｂ）における転換に適している。良好な結果は塩化第二スズで達成された。
反応は、通常、カップリングが完了するまで、例えば７０℃のような高い温度で実施される。
このようにして得られた式Ｉの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルは、当業者に知られた技術を適用して反応混合物から分離することができる。
工程ｃ）における加水分解は塩基の存在下で実施される。
【００１１】
適切な塩基はアルカリ金属アルコキシドのような有機塩基である。好ましくは溶媒としてメタノール中のナトリウムメトキシドが使用される。
反応は、通常、加水分解が完了するまで、例えば５０℃のような高い温度で実施される。
式ＩＶの４−アミノ−ｌ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンは、当業者に知られている方法に従って分離することができる。
【００１２】
本発明の更なる実施態様では、出発生成物、つまり、式ＩＩ
（上式中、Ｒはフェニルである）の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルの製造方法を開発した。
【００１３】
該方法は、次の工程
ａ１）式Ｖの（Ｅ）−３−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２−メチル−アクリル酸エチルエステル
を、式ＶＩ
の（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチルプロピオン酸エチルエステルに転換させ、
ｂ１）式ＶＩの（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステルを式ＶＩＩ
のサルファイトに転換させ
ｃ１）式ＶＩＩのサルファイトを式ＶＩＩＩ
のサルフェートに更に反応させ
ｄ１）式ＶＩＩＩのサルフェートを式ＩＸ
のフルオロヒドリンサルフェートに転換させ、
ｅ１）式ＩＸのフルオロヒドリンサルフェートを式Ｘ
のラクトンに分解させ、最後に
ｆ１）式Ｘのラクトンをアシル化して、Ｒがフェニルである式ＩＩの最終産物を形成することを含む。
【００１４】
本方法は以下のスキームＡを用いて記述することができる：
（ａ１）アセトン−ＮａＭｎＯ４（水性），エチレングリコール，ＮａＨＣＯ３，−１０から０℃；水性ＮａＨＳＯ３（急冷）；（ｂ１）ｉ−ＰｒＯＡｃ，ＭｅＣＮ，ＴＥＡ，ＳＯＣｌ２；（ｃｌ）ｉ−ＰｒＯＡｃ，ＭｅＣＮ，ＮａＯＣｌ；（ｄ１）ＴＥＡ−３ＨＦ，ＴＥＡ；（ｅ１）ＨＣｌ（ａｑ）−ＢａＣｌ２−ａｑ；（ｆ１）（ＰｈＣＯ）２Ｏ，ＤＭＡＰ，ＭｅＣＮ。
【００１５】
工程ａ１）における非対称のヒドロキシル化は、−２０から０℃の温度でエチレングリコールの存在下での過マンガン酸ナトリウム、アセトン中の重炭酸ナトリウムで実施するのが最も良いことが発見され、パイロットプラント規模で６０−６４％のジオールをもたらした。出発化合物（Ｖ）は、（１Ｓ，２Ｓ）−ｌ，２−ビス−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−エタン−１，２−ジオール（Ｃ．Ｒ．Ｓｃｈｍｉｄ及びＪ．Ｄ．Ｂｒｙａｎｔ，Ｊｅｒｒｙ Ｄ．，Ｏｒｇ．Ｓｙｎ．１９９５ ７２：６−１３）から、ジオールを酸化的切断し、得られたアルデヒドを２−（トリフェニル−λ５−ホスファニリデン）−プロピオン酸エチルエステルで処理することによって得ることができる。
【００１６】
環状サルフェート（ＶＩＩＩ）は、工程ｂ１）において例えば塩化チオニルを用いて隣接ジオールを環化し、工程ｃ１）において得られた環状サルファイト（ＶＩＩ）をＭｅＣＮの存在下で酸化して対応するサルフェート（ＶＩＩＩ）に酸化することによって調製することができる。環状サルフェートは、環状サルフェートに対して２−１０モル％でＴＥＡ又はＤＩＰＥＡのようなトリアルキルアミンを添加することによってプロセシングの間、安定化させることができることが見出された。示差走査熱量測定（ＤＳＣ）は、３．５モル％のＤＩＰＥＡを（ＶＩＩＩ）に添加したときおよそ１１０から１８０℃で分解開始にシフトした。工程ｄ１）において（ＶＩＩＩ）をトリエチルアミン−トリハイドロフルオライド／ＴＥＡに接触させることにより、水の存在下でフルオロヒリン(fluorohyrin)（Ｘ）を生じる硫酸化フルオロヒドリン（ＩＸ）を生じる。（Ｘ）の改良された収量は、工程ｄ１）において、ＢａＣｌ２を反応混合物に導入して遊離のサルフェートを除く場合に得ることができる。酸性条件下では、アセトニトリルの同時に起こる加水分解が、γ−ラクトン（Ｘ）に自然に環化するトリオールを遊離させる。工程ｆ１）において安息香酸無水物及びＤＭＡＰと（Ｘ）を接触させると、グリコシル化工程で使用されるラクトンのジベンゾエート（ＩＩｂ）が得られる。
【００１７】
ベンゾイル保護基（Ｒ＝フェニル）が好ましいが、メトキシメチル、メトキシエチル、ベンジルオキシメチル、エトキシメチル、トリチル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、アシル、例えばアセチル、ピバロイル、ベンゾイル、トルオイル、４−フェニルベンゾイル、２−，３−，又は４−ニトロベンゾイル，２−，３−，又は４−クロロベンゾイル、他の置換ベンゾイルから選択される他の潜在的な保護基を適用してもよい。工程ｆ１）に対して使用される塩基は、限定されないが、次のリストを含む：イミダゾール、ピリジン、ＤＭＡＰ，ＴＥＡ，ＤＩＰＥＡ，ｌ，４−ジアザビシクロ［２，２，２］オクタン。工程ｆ１）に対して使用される溶媒は、限定されないが、アセトニトリル、ピリジン、ＤＣＭ、クロロホルム、ＤＣＥ、ＴＨＦを含む。
【実施例】
【００１８】
使用される略語は次のものを含む：１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ），ジクロロメタン（ＤＣＭ），ジ−イソ−プロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ），Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ），４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ），エタノール（ＥｔＯＨ），酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ），メタノール（ＭｅＯＨ），メチル（Ｍｅ），エチル（Ｅｔ），イソプロパノール（ＩＰＡ），アセトニトリル５（ＭｅＣＮ），フェニル（Ｐｈ），室温（ｒｔ又はＲＴ），トリエチルアミン（ＴＥＡ又はＥｔ３Ｎ），テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）。
【００１９】
実施例１
３−ベンゾイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−ｌ−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチル安息香酸エステル（１４）
トリフルオロエタノール（４．０８ｋｇ）を、反応温度を−１０℃以下に維持しながらＲＥＤ−ＡＬ(登録商標)溶液（１２．５３ｋｇ）及びトルエン（２１．３ｋｇ）の冷溶液（−１５℃）にゆっくりと加える。室温（約２０℃）まで温めた後、改変されたＲＥＤ−ＡＬ試薬混合物（調製した３７．６ｋｇから３０．１ｋｇ）を、反応温度を−１０℃以下に維持しながら、ＤＣＭ（９４．７ｋｇ）中のフルオロラクトンジベンゾエート１０（１０ｋｇ）の予め冷却された溶液（−１５℃）にゆっくりと加える。ラクトンの還元後（インプロセスＨＰＬＣによりモニター）、触媒量の臭化テトラブチルアンモニウム（９０ｇ）を反応混合物に加える。ついで、塩化スルフリル（１１．８６ｋｇ）を、反応温度を０℃以下に維持しながら加える。ついで、反応混合物を、塩化物の生成が完了するまで（約４時間）４０℃まで加熱し、又は室温（２０−２５°Ｃ）まで温め、一晩にわたって（約１６時間）攪拌した。反応混合物を約０℃まで冷却し、反応温度を１５℃以下に維持しながら水（１００Ｌ）を注意深く添加する。ついで、反応混合物を約１時間室温で攪拌して過剰の塩化スルフリルの加水分解を生じさせ、相を分離させる。有機層をクエン酸の希釈溶液（８５Ｌの水に１５．５ｋｇのクエン酸を溶解することによって調製）で洗浄し、ついで希ＫＯＨ溶液（１００Ｌの水に５０％ＫＯＨを１５ｋｇ溶解させることによって調製）で洗浄する。ついで、有機相を濃縮し、溶媒を大気圧置換蒸留を介してクロロベンゼン（２×１５０ｋｇ）で置換する。３０を含む得られた溶液を共沸的に乾燥させる。
【００２０】
クロロベンゼン（５２．４ｋｇ）中のＮ−ベンゾイルシトシン（８．８５ｋｇ）、硫酸アンモニウム（０．０７ｋｇ）及びヘキサメチルジシラザン（６．６ｋｇ）の懸濁液を、還流温度（約１３５℃）まで加熱し、混合物が透明な溶液になるまで攪拌した（約１時間）。ついで、反応混合物を真空下で濃縮してＯ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンをシロップ液として得た。クロロベンゼン中の３０の無水液（調製したまま）と塩化第一スズ（２８．２ｋｇ）をこの濃縮物に加える。反応混合物を、所望のカップリング反応がインプロセスＨＰＬＣによって測定して完了するまで（約１０時間）約７０℃に維持する。完了したところで、反応混合物を室温まで冷却しＤＣＭ（１２１ｋｇ）で希釈する。この溶液をＤＣＭ（１００．６ｋｇ）中の固形ＮａＨＣＯ３（４７ｋｇ）及びＣＥＬＩＴＥ(登録商標)（９．４ｋｇ）の懸濁液に添加する。得られたスラリーを１０−１５℃まで冷却し、水（８．４ｋｇ）をゆっくり加えて反応混合物をクエンチする。得られた懸濁液を還流（約４５℃）まで非常にゆっくり（注意：ガスが発生）加熱し、約３０分間維持する。ついで、スラリーを約１５℃まで冷却し濾過する。フィルターケーキをＤＣＭ（４×１００Ｌ）中で繰り返して再びスラリー化し、濾過する。組み合わせた濾液を、バッチ温度が約９０℃に上昇するまで大気圧下で濃縮し（該プロセスで集めた蒸留液はフィルターケーキを再スラリー化するために使用される）、ついで約−５℃までゆっくりと冷却させる。得られたスラリーを−５℃で少なくとも２時間寝かせる。沈殿した生成物を濾過し、ＩＰＡ（３０ｋｇ＋２０ｋｇ）で洗浄し、約７０℃で真空下でオーブン乾燥させ、９９．３％の純度で、８．８ｋｇ（５７．３％）のｌ−（２−デオキシ−２−フルオロ−２−メチル−３−５−Ｏジベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル）−Ｎ−４−ベンゾイルシトシン（１４，ＣＡＳ登録番号８１７２０４−３２−３）を得た。
【００２１】
実施例２
４−アミノ−ｌ−（３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（１８）
ＭｅＯＨ（９２．６ｋｇ）中の１４（１４．７ｋｇ）のスラリーを触媒量のメタノール性ナトリウムメトキシド（０．２７５ｋｇ）で処理した。反応混合物を約５０℃まで加熱し、加水分解が完了するまで寝かせる（約１時間）。反応混合物を、イソ酪酸（０．１１５ｋｇ）の添加によりクエンチする。得られた溶液を中程度の真空下で濃縮し、ついで残った溶媒をＩＰＡ（８０ｋｇ）で置換する。該バッチを約５０Ｌの容積まで蒸留する。得られたスラリーを約８０℃まで加熱し、ついで約５℃まで冷却し、寝かせる（約２時間）。沈殿した生成物を濾過によって分離し、ＩＰＡ（１６．８ｋｇ）で洗浄し、真空下で７０℃にてオーブン中で乾燥させ、アッセイの結果９９．４３％の純度であった６．２６ｋｇ（８８．９％）の１８を得た。
【００２２】
実施例３
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（４Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル］−２，３−ジヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル（２４）
２２（１０ｋｇ，ＣＡＳ登録番号８１９９７−７６−４）、エチレングリコール（１１．６ｋｇ）、固形ＮａＨＣＯ３（１１．８ｋｇ）及びアセトン（１５０Ｌ）の懸濁液を約−１５℃まで冷却する。３６％のＮａＭｎＯ４（１９．５ｋｇ）水溶液を、反応温度を−１０℃以下に維持して懸濁液にゆっくりと（４時間かけて）充填する。−１０℃で０．５時間攪拌後、反応混合物のアリコート（約５ｍＬ）を、２５％の水性亜硫酸水素ナトリウム（約１５ｍＬ）を用いてクエンチする。得られたスラリーの一部を濾過し、ＧＣ分析を施して反応の進行をチェックする。反応が完了したところで、冷却した（約０℃）２５％の水性ＮａＨＳＯ３（６０Ｌ）をゆっくり（４０分かけて）添加してクエンチする。反応混合物の温度をクエンチの間４℃に達するようにする。ついで、ＣＥＬＩＴＥ(登録商標)（約２．５ｋｇ）をアセトン（８ｋｇ）中でスラリーにし、暗褐色の反応混合物に加える。得られたスラリーを室温で寝かせて淡い黄褐色のスラリーを得る。スラリーを濾過し、フィルターケーキをアセトン（３×３９ｋｇ）で洗浄する。組み合わせた濾液を真空蒸留（真空は約２４インチのＨｇ（約８１０ｍｂａｒ）；最大ポット温度は３２℃である）によって濃縮してアセトンを除去する。水性濃縮物をＥｔＯＡｃ（３×２７ｋｇ）で抽出し、組み合わせた有機抽出物を水（２５Ｌ）で洗浄した。ついで有機相を大気圧蒸留によって濃縮し、ＥｔＯＡｃをトルエンで置き換える。バッチの容積は約２０Ｌに調整する。ヘプタン（６２ｋｇ）を加え、バッチを約２７℃に冷却して結晶化を開始させる。ついで、バッチを−１０℃に冷却する。−１０℃で一晩寝かせた後、生成物を濾過し、ヘプタン中の１０％トルエンで洗浄し、真空下で５０℃で乾燥させて、６．９１ｋｇ（５９．５％）の２４（ＣＡ ＲＮ８１９９７−７６−４）を白色結晶性固形物として得た。
【００２３】
実施例４
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（１０）
工程１及び２− 乾燥させられた清浄な容器に２４（６．０ｋｇ）、酢酸イソプロピル（２８．０ｋｇ）、ＭｅＣＮ（３．８ｋｇ）及びＴＥＡ（５．４ｋｇ）を充填した。混合物を５−１０℃まで冷却し、塩化チオニル１０（３．２ｋｇ）を、溶液を冷却して２０℃以下に温度を維持しながら、ゆっくりと加えた。混合物を、出発材料が残らなくなるまで（ＧＣ分析）攪拌した。反応は典型的には添加の完了後３０分以内に完了した。混合物に水（９ｋｇ）を加え、攪拌後、混合物を沈殿させた。水性相を破棄し、有機相を水（８ｋｇ）と飽和ＮａＨＣＯ３（４ｋｇ）溶液の混合物で洗浄した。３６を含む残った有機相にＭｅＣＮ（２．５ｋｇ）と固形ＮａＨＣＯ３（３．１ｋｇ）を加えた。得られたスラリーを約１０℃まで冷却した。ブリーチ（ＮａＯＣｌ溶液，６．８９重量％水溶液，５２．４ｋｇ，２当量）を、冷却して温度を２５℃以下に維持しながらゆっくりと加えた。混合物を、反応が完了するまで（ＧＣ分析）、２０−２５℃で９０−１２０分かけて攪拌しながら寝かせた。反応の完了後、混合物を約１０℃まで冷却し、ついで冷却して温度を２０℃以下に維持しながらＮａ２ＳＯ３水溶液（１５．１％ｗ／ｗ，２１ｋｇ）でクエンチさせた。クエンチした反応混合物をカートリッジフィルターで濾過して無機固形物を除去した。濾液を寝かせ、相を分離し、水性相を捨てた。有機層を最初に水（１１ｋｇ）と飽和ＮａＨＣＯ３溶液（４．７ｋｇ）の混合物で、ついで飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５．１ｋｇ）で洗浄した。ＤＩＰＥＡ（２２０ｍＬ）を有機相に加え、得られた溶液をＣＥＬＩＴＥ(登録商標)（バグフィルター）でクリーンなドラム中に濾過した。反応器を酢酸イソプロピル（７ｋｇ）ですすぎ、リンスをドラムに移した。ついで、有機相を、反応器ジャケット温度を４５−５０℃に維持しながら約８５０−９５０ｍｂａｒの真空下で濃縮し２６を油（〜１０Ｌ）として得た。更なるＤＩＰＥＡ（２８０ｍＬ）を加え、減圧蒸留を（ジャケット温度５０−５５℃）、蒸留液を集められなくなるまで継続した（バッチ容積約７Ｌ）。
【００２４】
工程３− ２６を含む工程２からの濃縮油に５とＴＥＡ（２．３４ｋｇ）及びＴＥＡ−トリハイドロフルオライド（１．６３ｋｇ）を加えた。混合物を８５℃まで２時間加熱した。バッチをサンプリングしてＧＣにより反応の進行をモニターした。反応の完了後、濃ＨＣｌ（２．３５ｋｇ）を混合物に加え、得られた混合物を約９０℃まで加熱した（少量の蒸留液を集めた）。反応混合物を約９０℃で３０分間攪拌し、ついで飽和ＢａＣｌ２水溶液（１８．８ｋｇ）を加えた。得られた懸濁液を約９０℃で４時間攪拌した。ついで、得られた混合物を、共沸混合物を蒸留しながら（内部バッチ温度：約８５−９０℃）ゆっくりｎ−プロパノール（１１９ｋｇ）を加えることによって真空下で（Ｈｇの９−１０インチ）共沸混合的に乾燥させた。残った懸濁液にトルエン（３３ｋｇ）を加え、真空蒸留を継続して残留ｎ−プロパノール（及び微量の水）を蒸留して最小容積にして２８を得た。
【００２５】
工程４− ２８を含む工程３からの残留物にＭｅＣＮ（３５ｋｇ）を加え、約１５Ｌを大気圧下で蒸留した。反応混合物を約１０℃まで冷却し、ついで塩化ベンゾイル（８．２７ｋｇ）とＤＭＡＰ（０．１４ｋｇ）を加える。ＴＥＡ（５．８４ｋｇ）を、冷却して温度を４０℃以下に維持しながら反応混合物にゆっくりと加えた。バッチを約２０℃で寝かせ、ベンゾイル化の進行をＨＰＬＣによってモニターする。
【００２６】
反応の完了後、ＥｔＯＡｃ（３０ｋｇ）を混合物に加え、得られた懸濁液を約３０分攪拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ(登録商標)パッド（ｎｕｔｓｃｈｅフィルターを使用）を通して濾過して無機塩を除去した。固形ケーキをＥｔＯＡｃ（３８ｋｇ）で洗浄した。組み合わせた濾液と洗浄液を連続して水（３８ｋｇ）、飽和ＮａＨＣ０３溶液（４０ｋｇ）及び飽和ブライン（４４ｋｇ）で洗浄した。有機相をポリッシュ濾過（カートリッジフィルターを通して）し、中程度の真空下で最小容積まで濃縮した。ＩＰＡ（７７ｋｇ）を濃縮液に加え、約２５Ｌの蒸留液を中程度の真空下で集め、内部バッチ温度を蒸留の終わりに約７５℃に達せさせた。残りの溶液をついで５時間かけて約５℃に冷却し、場合によっては一晩寝かせた。沈殿物を濾過し、冷（約５℃）ＩＰＡ（２４ｋｇ）で洗浄した。生成物を６０−７０℃で真空下で乾燥させ、ＨＰＬＣによって９８．２％の純度であった６．６３ｋｇ（７０．７％理論値）の１０を得た。
【技術分野】
【０００１】
この出願は、合衆国を除く全ての国の指定に対する出願人として合衆国法人ファーマセット・インクとスイス国法人エフ・ホフマン・ラ−ロシュ・アーゲーの名義で、合衆国の指定に対してのみの出願人として、スティーブン・ディー．アクスト（合衆国国民）；ケシャブ・サルマ（合衆国国民）；ジャスティン・ヴィターレ（合衆国国民）；ジャン・ジュ（カナダ国国民）；ブルース・ロス（合衆国国民）；スグナ・ラチャコンダ（インド国国民）；キンウー・ジン（中華人民共和国国民）；及びビョン−クォン・チュン（大韓民国国民）の名義で、ＰＣＴ国際特許出願として２００７年１０月５日に出願されたもので、１００６年１０月１０日出願の米国仮特許出願第６０／８５０９６２号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂポリメラーゼの強力な阻害剤である式
の４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの改良された製造方法に関する。
ＰＣＴ公開公報ＷＯ２００６／０１２４４０は以下のスキームに従う方法を開示している。該方法はアノマー１４及び１６の面倒な分離を必要としている。
【０００３】
本発明の目的は、従来から知られている不具合がない、式
の４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの改良された大規模化可能な方法を提供することである。
本発明の方法は、
ａ）式ＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、式ＩＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルに転換させ、
ｂ）式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、式Ｉ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルであり、Ｂｚはベンゾイルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルに転換させ、
ｃ）式Ｉの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルを加水分解して、式ＩＶの４−アミノ−ｌ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを得ること
を含む。
【０００４】
ここで使用される（アリール）アルカン酸なる用語は、基ＲＣＯ２Ｈ（該式中、Ｒはここで定義されるようなアルキル又はアリールである）を意味する。従って、（アリール）アルカンエステルなる用語は、基ＲＣＯ２Ｒ’（該式中、Ｒはアルキル又はアリールである）を意味する。最も典型的には、Ｒ’はリボース環の３’及び／又は５’位である。「（アリール）アルカノイル」及び「（アリール）アルカノイルオキシ」なる用語は、それぞれ基ＲＣＯ−及びＲＣＯＯ−（ここで、Ｒは先に記載の通り）を意味する。「（アリール）アルカノイルオキシメチル」基なる用語は、基ＲＣＯＯＣＨ２−（ここで、Ｒは先に記載の通り）を意味する。
【０００５】
ここで使用される「アルキル」なる用語は、１から１０の炭素原子を含む未分岐又は分岐鎖で飽和の一価炭化水素残基を意味する。
ここで使用される「アリール」なる用語はフェニル基を意味する。
本発明の好ましい実施態様では、Ｒはフェニルの意味を持つ。
【０００６】
一般に、この出願において使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ系命名法の生成のためのＢｅｉｌｓｔｅｉｎ ＩｎｓｔｉｔｕｔｅコンピュータシステムであるＡＵＴＯＮＯＭTMｖ．４．０に基づいている。示した構造とその構造に与えた名前の間に矛盾がある場合には、示した構造に重みが置かれる。また、構造又は構造の一部の化学量論が、例えば太字又は破線で示されていない場合、構造又は構造の一部はその全ての立体異性体を包含するものと解されなければならない。
工程ａ）における転換は還元剤の存在下での還元と続く塩素化剤の存在下での塩素化を含む。
【０００７】
適切な還元剤は、トルエン溶液として商品名ＲｅｄＡｌ（登録商標）の下で商業的に入手できる水素化ビス−（２−メトキシエトキシ）（２，２，２−トリフルオロエトキシ）アルミニウムナトリウムである。
還元は通常０℃以下、好ましくは−５℃以下の反応温度で、ジクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素におけるような有機溶媒中で起こる。
還元の完了後に反応混合物に塩素化反応を施す。
【０００８】
塩素化剤は、通例、塩化スルフリル、塩化チオニル又はオキシ塩化リンから選択される。
好ましくは、触媒量の臭化テトラブチルアンモニウムの存在下で塩化スルフリルが使用される。
塩素化は適切には０℃と４０℃の間の温度で実施される。
【０００９】
式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルは、当業者に知られた技術を適用して反応混合物から分離することができる。
工程ｂ）における転換は、式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、ルイス酸の存在下でＯ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンと反応させることを含む。
Ｏ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンは、Ｎ−ベンゾイルシトシンを、還流条件下でクロロベンゼン中の硫酸アンモニウムの存在下でヘキサメチルジシラザンと反応させることによってインサイツで調製することができる。
【００１０】
当該分野で知られている一般的なルイ酸が工程ｂ）における転換に適している。良好な結果は塩化第二スズで達成された。
反応は、通常、カップリングが完了するまで、例えば７０℃のような高い温度で実施される。
このようにして得られた式Ｉの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルは、当業者に知られた技術を適用して反応混合物から分離することができる。
工程ｃ）における加水分解は塩基の存在下で実施される。
【００１１】
適切な塩基はアルカリ金属アルコキシドのような有機塩基である。好ましくは溶媒としてメタノール中のナトリウムメトキシドが使用される。
反応は、通常、加水分解が完了するまで、例えば５０℃のような高い温度で実施される。
式ＩＶの４−アミノ−ｌ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンは、当業者に知られている方法に従って分離することができる。
【００１２】
本発明の更なる実施態様では、出発生成物、つまり、式ＩＩ
（上式中、Ｒはフェニルである）の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルの製造方法を開発した。
【００１３】
該方法は、次の工程
ａ１）式Ｖの（Ｅ）−３−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２−メチル−アクリル酸エチルエステル
を、式ＶＩ
の（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチルプロピオン酸エチルエステルに転換させ、
ｂ１）式ＶＩの（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステルを式ＶＩＩ
のサルファイトに転換させ
ｃ１）式ＶＩＩのサルファイトを式ＶＩＩＩ
のサルフェートに更に反応させ
ｄ１）式ＶＩＩＩのサルフェートを式ＩＸ
のフルオロヒドリンサルフェートに転換させ、
ｅ１）式ＩＸのフルオロヒドリンサルフェートを式Ｘ
のラクトンに分解させ、最後に
ｆ１）式Ｘのラクトンをアシル化して、Ｒがフェニルである式ＩＩの最終産物を形成することを含む。
【００１４】
本方法は以下のスキームＡを用いて記述することができる：
（ａ１）アセトン−ＮａＭｎＯ４（水性），エチレングリコール，ＮａＨＣＯ３，−１０から０℃；水性ＮａＨＳＯ３（急冷）；（ｂ１）ｉ−ＰｒＯＡｃ，ＭｅＣＮ，ＴＥＡ，ＳＯＣｌ２；（ｃｌ）ｉ−ＰｒＯＡｃ，ＭｅＣＮ，ＮａＯＣｌ；（ｄ１）ＴＥＡ−３ＨＦ，ＴＥＡ；（ｅ１）ＨＣｌ（ａｑ）−ＢａＣｌ２−ａｑ；（ｆ１）（ＰｈＣＯ）２Ｏ，ＤＭＡＰ，ＭｅＣＮ。
【００１５】
工程ａ１）における非対称のヒドロキシル化は、−２０から０℃の温度でエチレングリコールの存在下での過マンガン酸ナトリウム、アセトン中の重炭酸ナトリウムで実施するのが最も良いことが発見され、パイロットプラント規模で６０−６４％のジオールをもたらした。出発化合物（Ｖ）は、（１Ｓ，２Ｓ）−ｌ，２−ビス−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−エタン−１，２−ジオール（Ｃ．Ｒ．Ｓｃｈｍｉｄ及びＪ．Ｄ．Ｂｒｙａｎｔ，Ｊｅｒｒｙ Ｄ．，Ｏｒｇ．Ｓｙｎ．１９９５ ７２：６−１３）から、ジオールを酸化的切断し、得られたアルデヒドを２−（トリフェニル−λ５−ホスファニリデン）−プロピオン酸エチルエステルで処理することによって得ることができる。
【００１６】
環状サルフェート（ＶＩＩＩ）は、工程ｂ１）において例えば塩化チオニルを用いて隣接ジオールを環化し、工程ｃ１）において得られた環状サルファイト（ＶＩＩ）をＭｅＣＮの存在下で酸化して対応するサルフェート（ＶＩＩＩ）に酸化することによって調製することができる。環状サルフェートは、環状サルフェートに対して２−１０モル％でＴＥＡ又はＤＩＰＥＡのようなトリアルキルアミンを添加することによってプロセシングの間、安定化させることができることが見出された。示差走査熱量測定（ＤＳＣ）は、３．５モル％のＤＩＰＥＡを（ＶＩＩＩ）に添加したときおよそ１１０から１８０℃で分解開始にシフトした。工程ｄ１）において（ＶＩＩＩ）をトリエチルアミン−トリハイドロフルオライド／ＴＥＡに接触させることにより、水の存在下でフルオロヒリン(fluorohyrin)（Ｘ）を生じる硫酸化フルオロヒドリン（ＩＸ）を生じる。（Ｘ）の改良された収量は、工程ｄ１）において、ＢａＣｌ２を反応混合物に導入して遊離のサルフェートを除く場合に得ることができる。酸性条件下では、アセトニトリルの同時に起こる加水分解が、γ−ラクトン（Ｘ）に自然に環化するトリオールを遊離させる。工程ｆ１）において安息香酸無水物及びＤＭＡＰと（Ｘ）を接触させると、グリコシル化工程で使用されるラクトンのジベンゾエート（ＩＩｂ）が得られる。
【００１７】
ベンゾイル保護基（Ｒ＝フェニル）が好ましいが、メトキシメチル、メトキシエチル、ベンジルオキシメチル、エトキシメチル、トリチル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、アシル、例えばアセチル、ピバロイル、ベンゾイル、トルオイル、４−フェニルベンゾイル、２−，３−，又は４−ニトロベンゾイル，２−，３−，又は４−クロロベンゾイル、他の置換ベンゾイルから選択される他の潜在的な保護基を適用してもよい。工程ｆ１）に対して使用される塩基は、限定されないが、次のリストを含む：イミダゾール、ピリジン、ＤＭＡＰ，ＴＥＡ，ＤＩＰＥＡ，ｌ，４−ジアザビシクロ［２，２，２］オクタン。工程ｆ１）に対して使用される溶媒は、限定されないが、アセトニトリル、ピリジン、ＤＣＭ、クロロホルム、ＤＣＥ、ＴＨＦを含む。
【実施例】
【００１８】
使用される略語は次のものを含む：１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ），ジクロロメタン（ＤＣＭ），ジ−イソ−プロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ），Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ），４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ），エタノール（ＥｔＯＨ），酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ），メタノール（ＭｅＯＨ），メチル（Ｍｅ），エチル（Ｅｔ），イソプロパノール（ＩＰＡ），アセトニトリル５（ＭｅＣＮ），フェニル（Ｐｈ），室温（ｒｔ又はＲＴ），トリエチルアミン（ＴＥＡ又はＥｔ３Ｎ），テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）。
【００１９】
実施例１
３−ベンゾイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−ｌ−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチル安息香酸エステル（１４）
トリフルオロエタノール（４．０８ｋｇ）を、反応温度を−１０℃以下に維持しながらＲＥＤ−ＡＬ(登録商標)溶液（１２．５３ｋｇ）及びトルエン（２１．３ｋｇ）の冷溶液（−１５℃）にゆっくりと加える。室温（約２０℃）まで温めた後、改変されたＲＥＤ−ＡＬ試薬混合物（調製した３７．６ｋｇから３０．１ｋｇ）を、反応温度を−１０℃以下に維持しながら、ＤＣＭ（９４．７ｋｇ）中のフルオロラクトンジベンゾエート１０（１０ｋｇ）の予め冷却された溶液（−１５℃）にゆっくりと加える。ラクトンの還元後（インプロセスＨＰＬＣによりモニター）、触媒量の臭化テトラブチルアンモニウム（９０ｇ）を反応混合物に加える。ついで、塩化スルフリル（１１．８６ｋｇ）を、反応温度を０℃以下に維持しながら加える。ついで、反応混合物を、塩化物の生成が完了するまで（約４時間）４０℃まで加熱し、又は室温（２０−２５°Ｃ）まで温め、一晩にわたって（約１６時間）攪拌した。反応混合物を約０℃まで冷却し、反応温度を１５℃以下に維持しながら水（１００Ｌ）を注意深く添加する。ついで、反応混合物を約１時間室温で攪拌して過剰の塩化スルフリルの加水分解を生じさせ、相を分離させる。有機層をクエン酸の希釈溶液（８５Ｌの水に１５．５ｋｇのクエン酸を溶解することによって調製）で洗浄し、ついで希ＫＯＨ溶液（１００Ｌの水に５０％ＫＯＨを１５ｋｇ溶解させることによって調製）で洗浄する。ついで、有機相を濃縮し、溶媒を大気圧置換蒸留を介してクロロベンゼン（２×１５０ｋｇ）で置換する。３０を含む得られた溶液を共沸的に乾燥させる。
【００２０】
クロロベンゼン（５２．４ｋｇ）中のＮ−ベンゾイルシトシン（８．８５ｋｇ）、硫酸アンモニウム（０．０７ｋｇ）及びヘキサメチルジシラザン（６．６ｋｇ）の懸濁液を、還流温度（約１３５℃）まで加熱し、混合物が透明な溶液になるまで攪拌した（約１時間）。ついで、反応混合物を真空下で濃縮してＯ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンをシロップ液として得た。クロロベンゼン中の３０の無水液（調製したまま）と塩化第一スズ（２８．２ｋｇ）をこの濃縮物に加える。反応混合物を、所望のカップリング反応がインプロセスＨＰＬＣによって測定して完了するまで（約１０時間）約７０℃に維持する。完了したところで、反応混合物を室温まで冷却しＤＣＭ（１２１ｋｇ）で希釈する。この溶液をＤＣＭ（１００．６ｋｇ）中の固形ＮａＨＣＯ３（４７ｋｇ）及びＣＥＬＩＴＥ(登録商標)（９．４ｋｇ）の懸濁液に添加する。得られたスラリーを１０−１５℃まで冷却し、水（８．４ｋｇ）をゆっくり加えて反応混合物をクエンチする。得られた懸濁液を還流（約４５℃）まで非常にゆっくり（注意：ガスが発生）加熱し、約３０分間維持する。ついで、スラリーを約１５℃まで冷却し濾過する。フィルターケーキをＤＣＭ（４×１００Ｌ）中で繰り返して再びスラリー化し、濾過する。組み合わせた濾液を、バッチ温度が約９０℃に上昇するまで大気圧下で濃縮し（該プロセスで集めた蒸留液はフィルターケーキを再スラリー化するために使用される）、ついで約−５℃までゆっくりと冷却させる。得られたスラリーを−５℃で少なくとも２時間寝かせる。沈殿した生成物を濾過し、ＩＰＡ（３０ｋｇ＋２０ｋｇ）で洗浄し、約７０℃で真空下でオーブン乾燥させ、９９．３％の純度で、８．８ｋｇ（５７．３％）のｌ−（２−デオキシ−２−フルオロ−２−メチル−３−５−Ｏジベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル）−Ｎ−４−ベンゾイルシトシン（１４，ＣＡＳ登録番号８１７２０４−３２−３）を得た。
【００２１】
実施例２
４−アミノ−ｌ−（３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（１８）
ＭｅＯＨ（９２．６ｋｇ）中の１４（１４．７ｋｇ）のスラリーを触媒量のメタノール性ナトリウムメトキシド（０．２７５ｋｇ）で処理した。反応混合物を約５０℃まで加熱し、加水分解が完了するまで寝かせる（約１時間）。反応混合物を、イソ酪酸（０．１１５ｋｇ）の添加によりクエンチする。得られた溶液を中程度の真空下で濃縮し、ついで残った溶媒をＩＰＡ（８０ｋｇ）で置換する。該バッチを約５０Ｌの容積まで蒸留する。得られたスラリーを約８０℃まで加熱し、ついで約５℃まで冷却し、寝かせる（約２時間）。沈殿した生成物を濾過によって分離し、ＩＰＡ（１６．８ｋｇ）で洗浄し、真空下で７０℃にてオーブン中で乾燥させ、アッセイの結果９９．４３％の純度であった６．２６ｋｇ（８８．９％）の１８を得た。
【００２２】
実施例３
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（４Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル］−２，３−ジヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル（２４）
２２（１０ｋｇ，ＣＡＳ登録番号８１９９７−７６−４）、エチレングリコール（１１．６ｋｇ）、固形ＮａＨＣＯ３（１１．８ｋｇ）及びアセトン（１５０Ｌ）の懸濁液を約−１５℃まで冷却する。３６％のＮａＭｎＯ４（１９．５ｋｇ）水溶液を、反応温度を−１０℃以下に維持して懸濁液にゆっくりと（４時間かけて）充填する。−１０℃で０．５時間攪拌後、反応混合物のアリコート（約５ｍＬ）を、２５％の水性亜硫酸水素ナトリウム（約１５ｍＬ）を用いてクエンチする。得られたスラリーの一部を濾過し、ＧＣ分析を施して反応の進行をチェックする。反応が完了したところで、冷却した（約０℃）２５％の水性ＮａＨＳＯ３（６０Ｌ）をゆっくり（４０分かけて）添加してクエンチする。反応混合物の温度をクエンチの間４℃に達するようにする。ついで、ＣＥＬＩＴＥ(登録商標)（約２．５ｋｇ）をアセトン（８ｋｇ）中でスラリーにし、暗褐色の反応混合物に加える。得られたスラリーを室温で寝かせて淡い黄褐色のスラリーを得る。スラリーを濾過し、フィルターケーキをアセトン（３×３９ｋｇ）で洗浄する。組み合わせた濾液を真空蒸留（真空は約２４インチのＨｇ（約８１０ｍｂａｒ）；最大ポット温度は３２℃である）によって濃縮してアセトンを除去する。水性濃縮物をＥｔＯＡｃ（３×２７ｋｇ）で抽出し、組み合わせた有機抽出物を水（２５Ｌ）で洗浄した。ついで有機相を大気圧蒸留によって濃縮し、ＥｔＯＡｃをトルエンで置き換える。バッチの容積は約２０Ｌに調整する。ヘプタン（６２ｋｇ）を加え、バッチを約２７℃に冷却して結晶化を開始させる。ついで、バッチを−１０℃に冷却する。−１０℃で一晩寝かせた後、生成物を濾過し、ヘプタン中の１０％トルエンで洗浄し、真空下で５０℃で乾燥させて、６．９１ｋｇ（５９．５％）の２４（ＣＡ ＲＮ８１９９７−７６−４）を白色結晶性固形物として得た。
【００２３】
実施例４
（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（１０）
工程１及び２− 乾燥させられた清浄な容器に２４（６．０ｋｇ）、酢酸イソプロピル（２８．０ｋｇ）、ＭｅＣＮ（３．８ｋｇ）及びＴＥＡ（５．４ｋｇ）を充填した。混合物を５−１０℃まで冷却し、塩化チオニル１０（３．２ｋｇ）を、溶液を冷却して２０℃以下に温度を維持しながら、ゆっくりと加えた。混合物を、出発材料が残らなくなるまで（ＧＣ分析）攪拌した。反応は典型的には添加の完了後３０分以内に完了した。混合物に水（９ｋｇ）を加え、攪拌後、混合物を沈殿させた。水性相を破棄し、有機相を水（８ｋｇ）と飽和ＮａＨＣＯ３（４ｋｇ）溶液の混合物で洗浄した。３６を含む残った有機相にＭｅＣＮ（２．５ｋｇ）と固形ＮａＨＣＯ３（３．１ｋｇ）を加えた。得られたスラリーを約１０℃まで冷却した。ブリーチ（ＮａＯＣｌ溶液，６．８９重量％水溶液，５２．４ｋｇ，２当量）を、冷却して温度を２５℃以下に維持しながらゆっくりと加えた。混合物を、反応が完了するまで（ＧＣ分析）、２０−２５℃で９０−１２０分かけて攪拌しながら寝かせた。反応の完了後、混合物を約１０℃まで冷却し、ついで冷却して温度を２０℃以下に維持しながらＮａ２ＳＯ３水溶液（１５．１％ｗ／ｗ，２１ｋｇ）でクエンチさせた。クエンチした反応混合物をカートリッジフィルターで濾過して無機固形物を除去した。濾液を寝かせ、相を分離し、水性相を捨てた。有機層を最初に水（１１ｋｇ）と飽和ＮａＨＣＯ３溶液（４．７ｋｇ）の混合物で、ついで飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５．１ｋｇ）で洗浄した。ＤＩＰＥＡ（２２０ｍＬ）を有機相に加え、得られた溶液をＣＥＬＩＴＥ(登録商標)（バグフィルター）でクリーンなドラム中に濾過した。反応器を酢酸イソプロピル（７ｋｇ）ですすぎ、リンスをドラムに移した。ついで、有機相を、反応器ジャケット温度を４５−５０℃に維持しながら約８５０−９５０ｍｂａｒの真空下で濃縮し２６を油（〜１０Ｌ）として得た。更なるＤＩＰＥＡ（２８０ｍＬ）を加え、減圧蒸留を（ジャケット温度５０−５５℃）、蒸留液を集められなくなるまで継続した（バッチ容積約７Ｌ）。
【００２４】
工程３− ２６を含む工程２からの濃縮油に５とＴＥＡ（２．３４ｋｇ）及びＴＥＡ−トリハイドロフルオライド（１．６３ｋｇ）を加えた。混合物を８５℃まで２時間加熱した。バッチをサンプリングしてＧＣにより反応の進行をモニターした。反応の完了後、濃ＨＣｌ（２．３５ｋｇ）を混合物に加え、得られた混合物を約９０℃まで加熱した（少量の蒸留液を集めた）。反応混合物を約９０℃で３０分間攪拌し、ついで飽和ＢａＣｌ２水溶液（１８．８ｋｇ）を加えた。得られた懸濁液を約９０℃で４時間攪拌した。ついで、得られた混合物を、共沸混合物を蒸留しながら（内部バッチ温度：約８５−９０℃）ゆっくりｎ−プロパノール（１１９ｋｇ）を加えることによって真空下で（Ｈｇの９−１０インチ）共沸混合的に乾燥させた。残った懸濁液にトルエン（３３ｋｇ）を加え、真空蒸留を継続して残留ｎ−プロパノール（及び微量の水）を蒸留して最小容積にして２８を得た。
【００２５】
工程４− ２８を含む工程３からの残留物にＭｅＣＮ（３５ｋｇ）を加え、約１５Ｌを大気圧下で蒸留した。反応混合物を約１０℃まで冷却し、ついで塩化ベンゾイル（８．２７ｋｇ）とＤＭＡＰ（０．１４ｋｇ）を加える。ＴＥＡ（５．８４ｋｇ）を、冷却して温度を４０℃以下に維持しながら反応混合物にゆっくりと加えた。バッチを約２０℃で寝かせ、ベンゾイル化の進行をＨＰＬＣによってモニターする。
【００２６】
反応の完了後、ＥｔＯＡｃ（３０ｋｇ）を混合物に加え、得られた懸濁液を約３０分攪拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ(登録商標)パッド（ｎｕｔｓｃｈｅフィルターを使用）を通して濾過して無機塩を除去した。固形ケーキをＥｔＯＡｃ（３８ｋｇ）で洗浄した。組み合わせた濾液と洗浄液を連続して水（３８ｋｇ）、飽和ＮａＨＣ０３溶液（４０ｋｇ）及び飽和ブライン（４４ｋｇ）で洗浄した。有機相をポリッシュ濾過（カートリッジフィルターを通して）し、中程度の真空下で最小容積まで濃縮した。ＩＰＡ（７７ｋｇ）を濃縮液に加え、約２５Ｌの蒸留液を中程度の真空下で集め、内部バッチ温度を蒸留の終わりに約７５℃に達せさせた。残りの溶液をついで５時間かけて約５℃に冷却し、場合によっては一晩寝かせた。沈殿物を濾過し、冷（約５℃）ＩＰＡ（２４ｋｇ）で洗浄した。生成物を６０−７０℃で真空下で乾燥させ、ＨＰＬＣによって９８．２％の純度であった６．６３ｋｇ（７０．７％理論値）の１０を得た。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
の４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−ｙ１）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの製造方法において、
ａ）式ＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、式ＩＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルに転換させ、
ｂ）式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを式Ｉ
（上式中、Ｒがアリール又はアルキルでありＢｚがベンゾイルである）の
（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−ｌ−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルに転換させ、
ｃ）式Ｉの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−ｌ−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルを加水分解して、式ＩＶの４−アミノ−ｌ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを得る
ことを含む方法。
【請求項２】
Ｒがフェニルの意味であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
工程ａ）における転換が、還元剤の存在下での還元と、続く塩素化剤の存在下での塩素化を含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
還元剤が水酸化ビス−（２−メトキシエトキシ）（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）アルミニウムナトリウムであることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
塩素化剤が塩化スルフリル、塩化チオニル又はオキシ塩化リンから選択されることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項６】
塩素化剤が、触媒量の臭化テトラブチルアンモニウムの存在下での塩化スルフリルであることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
工程ｂ）における転換が、ルイス酸の存在下で式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルをＯ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンと反応させることを含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項８】
工程ｃ）の加水分解が塩基の存在下で実施されることを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項９】
ａ１）式Ｖの（Ｅ）−３−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２−メチル−アクリル酸エチルエステル
を、式ＶＩ
の（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチルプロピオン酸エチルエステルに転換させ、
ｂ１）式ＶＩの（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステルを式ＶＩＩ
のサルファイトに転換させ
ｃ１）式ＶＩＩのサルファイトを式ＶＩＩＩ
のサルフェートに更に反応させ
ｄ１）式ＶＩＩＩのサルフェートを式ＩＸ
のフルオロヒドリンサルフェートに転換させ、
ｅ１）式ＩＸのフルオロヒドリンサルフェートを式Ｘ
のラクトンに分解させ、最後に
ｆ１）式Ｘのラクトンをアシル化して、Ｒがフェニルである式ＩＩの最終産物を形成することを含む、式ＩＩ
（上式中、Ｒはフェニルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルの調製を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
工程ａ１）における転換が重炭酸ナトリウム及びエチレングリコールの存在下での過マンガン酸ナトリウムを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
工程ｂ１）における転換が塩化チオニルを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
工程ｃ１）における転換が水酸化ナトリウムを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
工程ｄ１）における転換がトリアルキルアミンを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
トリエチルアミン−トリハイドロフロライドと共にトリエチルアミンが使用されることを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
工程ｅ１）における分解が、塩化バリウム水を用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
工程ｆ１）におけるアシル化５が安息香酸無水物を用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
明細書に記載された方法。
【請求項１】
式
の４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−ｙ１）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンの製造方法において、
ａ）式ＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを、式ＩＩＩ
（上式中、Ｒはアリール又はアルキルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルに転換させ、
ｂ）式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルを式Ｉ
（上式中、Ｒがアリール又はアルキルでありＢｚがベンゾイルである）の
（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−ｌ−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルに転換させ、
ｃ）式Ｉの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−（アリール）アルカノイルオキシ−５−（４−ベンゾイルアミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−ｌ−イル）−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−２−イルメチルエステルを加水分解して、式ＩＶの４−アミノ−ｌ−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロフラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを得る
ことを含む方法。
【請求項２】
Ｒがフェニルの意味であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
工程ａ）における転換が、還元剤の存在下での還元と、続く塩素化剤の存在下での塩素化を含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
還元剤が水酸化ビス−（２−メトキシエトキシ）（２，２，２−トリフルオロ−エトキシ）アルミニウムナトリウムであることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
塩素化剤が塩化スルフリル、塩化チオニル又はオキシ塩化リンから選択されることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項６】
塩素化剤が、触媒量の臭化テトラブチルアンモニウムの存在下での塩化スルフリルであることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
工程ｂ）における転換が、ルイス酸の存在下で式ＩＩＩの（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−５−クロロ−４−フルオロ−４−メチル−テトラヒドロフラン−３−イルエステルをＯ−トリメチルシリル−Ｎ４−ベンゾイルシトシンと反応させることを含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項８】
工程ｃ）の加水分解が塩基の存在下で実施されることを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項９】
ａ１）式Ｖの（Ｅ）−３−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２−メチル−アクリル酸エチルエステル
を、式ＶＩ
の（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチルプロピオン酸エチルエステルに転換させ、
ｂ１）式ＶＩの（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−２，３−ジヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステルを式ＶＩＩ
のサルファイトに転換させ
ｃ１）式ＶＩＩのサルファイトを式ＶＩＩＩ
のサルフェートに更に反応させ
ｄ１）式ＶＩＩＩのサルフェートを式ＩＸ
のフルオロヒドリンサルフェートに転換させ、
ｅ１）式ＩＸのフルオロヒドリンサルフェートを式Ｘ
のラクトンに分解させ、最後に
ｆ１）式Ｘのラクトンをアシル化して、Ｒがフェニルである式ＩＩの最終産物を形成することを含む、式ＩＩ
（上式中、Ｒはフェニルである）
の（アリール）アルカン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（アリール）アルカノイルオキシメチル−４−フルオロ−４−メチル−５−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イルエステルの調製を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
工程ａ１）における転換が重炭酸ナトリウム及びエチレングリコールの存在下での過マンガン酸ナトリウムを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
工程ｂ１）における転換が塩化チオニルを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
工程ｃ１）における転換が水酸化ナトリウムを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
工程ｄ１）における転換がトリアルキルアミンを用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
トリエチルアミン−トリハイドロフロライドと共にトリエチルアミンが使用されることを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
工程ｅ１）における分解が、塩化バリウム水を用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
工程ｆ１）におけるアシル化５が安息香酸無水物を用いて実施されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
明細書に記載された方法。
【公表番号】特表２０１０−５０５９５４（Ｐ２０１０−５０５９５４Ａ）
【公表日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５３２３７２（Ｐ２００９−５３２３７２）
【出願日】平成１９年１０月５日（２００７．１０．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２１５４８
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０４５４１９
【国際公開日】平成２０年４月１７日（２００８．４．１７）
【出願人】（５０５４４２８４２）ファーマセット，インク． (20)
【出願人】（５０９１０３２４４）エフ． ホフマン ラ−ロシュ アーゲー (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１０月５日（２００７．１０．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２１５４８
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０４５４１９
【国際公開日】平成２０年４月１７日（２００８．４．１７）
【出願人】（５０５４４２８４２）ファーマセット，インク． (20)
【出願人】（５０９１０３２４４）エフ． ホフマン ラ−ロシュ アーゲー (1)
【Ｆターム（参考）】
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