リン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物
【課題】ドライアイの予防および治療に有用な製剤を提供する。
【解決手段】メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンのホモ重合体、メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・２−ヒドロキシエチルメタクリレート共重合体等の、リン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物。
【解決手段】メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンのホモ重合体、メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・２−ヒドロキシエチルメタクリレート共重合体等の、リン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、眼科領域の医療に関連する組成物に関し、更に詳しくは、ドライアイの予防及び治療に有用な組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、眼が乾く、眼が疲れる等の症状を訴えるドライアイ患者が増加している。ドライアイには、涙液の分泌量が減少するものと、分泌量自体は変わらないものとがある。前者には、スティーブンス・ジョンソン症候群、シェーグレン症候群等の内因性疾患に伴うもの、後者には、パソコン等のＶＤＴ作業による瞬目回数の減少、エアコンの普及による室内湿度の低下等が挙げられる。また、β遮断剤等の薬剤の長期点眼による副作用、涙液の不安定化等も考えられる。さらに、コンタクトレンズ使用者においても、ドライアイの症状が増加傾向にあることは、よく知られている。
また、ドライアイの概念は非常に曖昧で、はっきりとした定義付けがなされていないが、ここで言うドライアイとは、涙液の質的または量的異常があり、角結膜上皮障害の有無は問わないものである(非特許文献１)。
ドライアイの治療法としては、人工涙液の点眼剤やメガネの両サイドにパネルを装着して涙の蒸発を防ぐモイスチャーエイドを用いる方法、涙の排出口である涙点を閉鎖することによって結膜嚢内に涙液を保持する涙点閉鎖法などがあるが、いずれの方法も満足できる状況ではない。
現在市販されている人工涙液には、無機成分のみを配合した単純なものと、人工涙液の結膜嚢内滞留時間の延長をはかるために増粘剤として、コンドロイチン硫酸又はヒアルロン酸を配合したものがある。しかし、無機成分のみを含有する人工涙液の場合、一時的な水分補給効果しか得られない。また、増粘剤を配合した人工涙液の場合、涙液の保持の点で若干の効果は認められるものの、高粘度のために、調製時、特にろ過過程で困難を伴うことがあったり、点眼時に違和感や不快感を生じることがあり、決して満足いくものではない。また、ヒアルロン酸は、鶏冠から抽出するか微生物を利用する方法で製造されているために製造コストが高く、広範な利用が妨げられている。
従って、ドライアイの治療に有効であり、製剤化が容易で、使用しやすく、かつ入手が容易な眼科用組成物の開発が望まれていた。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】山田昌和ら、日本眼科紀要43(11)1289−1293、1992
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意、研究を続けた結果、動植物界に広範に分布し、生体膜の主要成分であるグリセロリン脂質の親水性部分（コリンリン酸等）と類似の構造を有する、メタクリル酸誘導体をはじめとする誘導体を単量体成分とするリン脂質類似重合体が、眼刺激性が殆どなく低粘度で優れたドライアイ治療効果を示すことを見出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は、式（１）：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−Ｚ (Ｉ)
（式中、Ｘは水素、低級アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、又は−ＣＨ２ＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−；Ｙは−（ＣＨ２)ｎ−、−Ｐh−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２ＣＨ２−、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎ−(ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｙ−、−（ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｎ−（ＣＨ２−Ｏ)ｙ−、又は１位若しくは２位に脂肪酸を結合させたグリセリンエステル；ｎは１〜１２の整数；ｙは１〜２０の整数；Ｚはコリン、エタノールアミン又はセリンを表す）
で示される化合物を単量体成分とするリン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物を提供するものである。
【０００５】
本発明製剤には、上記の化合物(Ｉ)のホモ重合体を用いることができるが、該化合物Ｉ）と、他の親水性モノマーとの共重合体であってもよい。そのような親水性モノマーとして、式（II）：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ （II）
（式中、Ｘは水素又は低級アルキル；Ｙは水素、−(ＣＨ２)ｎＯＨ、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰhＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰＯ３Ｈ、又は糖類残基；ｎは１〜２０の整数を表す）
で示される化合物を挙げることができる。
なお、上記定義において、Ｍeはメチル基、Ｐhはフェニル基を表す。
また、低級アルキルとは、炭素原子数１〜６個のアルキル基を指し、例えば、メチル、エチル、ブチル、プロピル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】本発明の製剤の角膜上皮障害抑制効果を比較したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明の目的には、上記の式(Ｉ)で示される化合物又は該化合物(Ｉ)と式（II）で示される化合物との重合体は、ドライアイに有効である限り、すべて有用であるが、中でも、式(Ｉ)において、Ｘが水素又はメチル、Ｙがエチレン、プロピレン、ブチレン、Ｚがコリン、エタノールアミン、セリンである化合物が好ましく、Ｘがメチル、Ｙがエチレン、Ｚがコリン又はエタノールアミンである化合物（２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）又は２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥ）がより好ましい。
また、式（II）において、Ｘが水素又はメチル、Ｙが水素、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＰＯ３Ｈ、糖残基である化合物が好ましく、Ｘがメチル、Ｙが−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである化合物（２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ））がより好ましい。
【０００８】
本発明のリン脂質類似重合体の構成成分であるＭＰＣ又はＭＰＥのホモ重合体は、最初、仲矢らによって合成され（MPE；Nakai et al., Makromol.Chem., 178, 2963 (1977): MPC; Umeda et al., Makromol.Chem.Rapid Commun., 6, 285 (1985))化粧品やコンタクトレンズ等の素材としての用途が既に知られている。また、ＭＰＣおよびその類似重合体を含んだコンタクトレンズ用溶液が、レンズに親水性を付与させることで装用感を向上させ、レンズの汚れの付着を防ぐことは特開平７−１６６１５４号公報に示されている。しかしながら、それらがドライアイの予防及び治療において眼科的に有用であることは未だ知られていない。
【０００９】
本発明の眼科用組成物に含有される重合体は、化合物(Ｉ)単独のホモ重合体又は化合物 (Ｉ)と親水性の化合物（II）の共重合体であるが、後者の場合、共重合体中に化合物(Ｉ)が占める割合は、共重合体全量に対し、５〜１００モル％が好ましく、特に５０モル％以上であることが好ましい。この配合比が５モル％以下の場合は、十分なドライアイ治療効果が期待できない。ホモ重合体又は共重合体の分子量は、重合温度、重合開始剤の使用量、重合溶媒の種類、重合方法、重合度調節剤の使用等によっても異なるが、好ましくは平均分子量が５０００〜２００,０００の範囲、特に好ましくは１０,０００〜１５０,０００の範囲である。
【００１０】
本発明製剤に用いる化合物(Ｉ)及び化合物（II）は既知の化合物であるか、又は文献（例、特開昭５８−１５４５９１号公報、特開昭６０−１８４０９３号公報又は高分子論文集、Vol.35, 423−427, 1978）に記載の方法により既知の化合物から合成することができる。
ＭＰＣ又はＭＰＥ等を含有するホモ重合体又は共重合体は、高分子化学の分野で既知の方法に従い、要すれば適当な溶媒中で、重合開始剤の存在下、一定時間重合させることにより、製造することができる。
溶媒としては、使用する単量体化合物が可溶性のものであればよく、水、メタノール、エタノール、プロパノール、t−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム又はこれらの混合溶媒を用いることができる。
【００１１】
重合開始剤は通常のラジカル重合開始剤から任意に選択されるが、例えば、２,２'−アゾビスイソブチロニトリル（AIBN)、アゾビスマレノニトリル等の脂肪酸アゾ化合物、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル等の過酸化物、過硫酸カリウム等の過硫酸塩等を挙げることができる。その使用量は、原料全成分の０.０１〜１０重量％、特に０.１〜５重量％程度が好ましい。
重合は、温度３０〜８０℃、好ましくは４０〜７０℃において２〜７２時間重合させる。
必要に応じて用いられる溶媒としては、使用する単量体化合物が可溶性のものであればよく、水、メタノール、エタノール、プロパノール、t−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム又はこれらの混合溶媒を用いることができる。
【００１２】
本発明のリン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物は、点眼剤又は軟膏剤であることが好ましい。点眼剤である場合、該組成物は予め液剤の形にしておいてもよく、あるいは固形剤として使用時に溶解して用いるようにしてもよい。固形剤の場合、例えば精製水や生理食塩液などに適量を溶解、懸濁または乳化させるとよい。固形剤としては、錠剤、顆粒剤や散剤などが挙げられ、これらは公知の方法により適宜製造することができる。これらの製剤は、無菌濾過や加熱滅菌などの公知の方法により無菌とするのがよい。また、本発明のリン脂質類似重合体を含有する点眼剤は、コンタクトレンズの物性に影響を及ぼさないので、コンタクトレンズ装用中にも点眼できる。
【００１３】
本発明の組成物中のリン脂質類似重合体の含量は、最終濃度として、通常、通常０.０１〜１０％、好ましくは０.１〜５％、より好ましくは０.５〜３％である。
また、本発明の組成物が点眼剤である場合、ｐＨは、公知の方法によって、約６.５〜８.０に調整するのがよい。また、浸透圧は公知の方法によって０.５〜５圧比、好ましくは０.８〜２圧比に調整するのがよい。
【００１４】
本発明の組成物がコンタクトレンズ用点眼剤である場合、界面活性剤を配合することが好ましい。界面活性剤を配合することによって、リン脂質類似重合体のコンタクトレンズへの吸着を防止する効果が期待されるためである。この場合、界面活性剤の種類としてはポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー（ポロクサマー類）、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン置換エチレンジアミン（ポロキサミン類）、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリオキシエチレンステアレート等の非イオン界面活性剤やアルキルポリアミノエチルグリシン等の両性界面活性剤、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩等の陰イオン界面活性剤が挙げられるが、眼への安全性の面から非イオン性界面活性剤が最も好ましい。また、配合できる界面活性剤の量は０.００１〜５％が好ましく、０.０１〜１％がより好ましい。
【００１５】
本発明の製剤を点眼剤として用いる場合、本発明の目的に反しない限り、通常点眼剤に用いられる保存剤、緩衝剤、増粘剤、溶解補助剤、安定化剤、ｐＨ調製剤、等張化剤などの添加剤を適宜配合することができる。保存剤としては、クロロブタノール、デヒドロ酢酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジウム、フェネチルアルコール、アルキルポリアミノエチルグリシン、パラオキシ安息香酸メチル等のパラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンゼトニウム、ソルビン酸およびそれらの塩等が挙げられる。
緩衝剤としては、硼酸、硼砂、リン酸２水素カリウム、リン酸水素２カリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム等が挙げられる。
増粘剤としては、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、コンドロイチン硫酸等が挙げられる。
溶解補助剤としては、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンモノステアレート等、安定化剤としては、エデト酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム等が挙げられる。また、ｐＨ調製剤として水酸化ナトリウム・水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、塩酸、クエン酸、リン酸、酢酸等、等張化剤としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン等の多価アルコールなどが挙げられる。
【００１６】
本発明の点眼剤の用法及び用量は、患者の症状、年齢等により変動するが、通常、１日１〜６回、１回１〜２滴が点眼される。眼軟膏剤の場合には、通常１日１〜２回、結膜嚢内に適量を塗布して使用される。
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例】
【００１７】
製造例１ ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣホモ重合体）（化合物１）
（１）メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）の合成
２−クロロ−１,３,２−ジオキサホスホランと２−ヒドロキシエチルメタクリレートから合成した２−（メタクリロイルオキシ）エチル−２'−（トリメチルアンモニウム）エチルリン酸９.４４ｇ（０.０４モル）とトリメチルアミン１１.８ｇ（０.２モル）及びアセトニトリル８０mlを耐圧反応管に入れ、５０℃で１０時間振とう反応させた。反応後すぐに濃縮し、冷所で保存すれば白色結晶が得られる（粗収率約１００％）。
この粗結晶を脱水クロロホルムに溶かし、脱水アセトンで再沈殿させることにより、精製化合物（ＭＰＣ）を得た（収率９０〜９５％）。ｍｐ.１５℃。
ＩＲ（neat): 1720 (C＝O), 1630 (C＝C), 1240, 1080cm−１ (PO−O−)ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝1.85 (s: −Me, 3H), 3.15 (s: −Me, 9H), 3.45−3.85 (m: −CH２−, 2H), 3.85−4.35 (m: −CH２−, 6H), 5.68 (m: −CH＝, 1H), 6.13 ppm(s: −CH＝, 1H)
【００１８】
（２）ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣホモ重合体）（化合物１）の合成
重合管に上で合成したＭＰＣ５ｇ（０.０１６９モル）、開始剤としてＡＩＢＮ ０.０５５５ｇ（３.３８×１０−４モル）、重合溶媒としてメタノール２５mlを入れ、３回窒素置換を行った後、脱気し真空下で封管した。これを恒温槽中７０℃で１７時間振とうさせることにより重合した。反応後、開封し、メタノールを除去し、過剰のアセトンを加えて粗生成物を得た。これをエタノールに溶かし、アセトンで再沈殿させることにより、精製した化合物１を得た（収率６０〜７０％）。
ＩＲスペクトルは、単量体のメタクリル酸部の二重結合による吸収、1630cm−１の減少及び920cm−１の消失を示した。この重合体（化合物１）のＧＰＣ（クロマトグラフィー）による分子量の分析結果は約６５０００〜７００００であった。
【００１９】
製造例２ ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥホモ重合体）（化合物２）
（１）メタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥ）の合成
リン酸基をベンジル基で、アミノ基をトリチル基で保護した２−（メタクリロイルオキシ）エチル−２'−（トリチルアミノ）エチルベンジルリン酸９.２８ｇ（１６ミリモル）、乾燥ヨウ化ナトリウム２.８８ｇ（１９.２ミリモル）、及び脱水アセトン１２０mlを丸底フラスコに入れ、４.５時間還流した。反応後、フラスコを冷却し、トリエチルアミン１０.８mlを加え、室温に戻し、１６時間放置した。これを減圧濃縮後、脱水エーテルを加え、３日間還流した。溶液をろ過後、ろ液を３５℃以下で濃縮した。これに９０％酢酸３２０mlを加え、１５分間還流した。反応液は約７５mlまで濃縮し、４℃に冷却した。生じたトリフェニルカルビノールをろ取後、ろ液を１Ｌフラスコに入れ、ジエチルエーテルを約１Ｌ入れると白濁した。この容器に栓をして、容器をドライアイス−メタノール系（約−２０℃）に入れ、一夜放置した。析出する沈殿をろ取し、これを脱水メタノールに溶かし、脱水ジエチルエーテルで再沈殿させることにより、白色結晶であるＭＰＥを得た（
収率８０〜８５％）。ｍｐ.２０３℃。
ＩＲ（neat): 1720 (C＝O), 1630 (C＝C), 1240, 1080cm−１ (PO−O−)
【００２０】
（２）ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥホモ重合体）（化合物２）の合成
重合管に上で合成したＭＰＥ３０３mg（１.２０ミリモル）、開始剤としてＡＩＢＮ １４mg（０.０８５ミリモル）、重合溶媒としてメタノール１０mlを入れ、３回窒素置換を行った後、脱気し真空下で封管した。これを恒温槽中６５℃で１２時間振とうさせることにより重合した。反応後、生成物は白色結晶として析出し、沈殿をろ取した後、メタノール及びジエチルエーテルで洗浄して化合物２を得た（収率３０〜４０％）。
ＩＲスペクトルは、単量体のメタクリル酸部の二重結合による吸収、1630cm−１の減少及び920cm−１の消失を示した。この重合体（化合物２）のＧＰＣ（ゲルろ過クロマトグラフィー）による分子量の分析結果は約５５０００〜６００００であった。
【００２１】
製造例３ ポリ（メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ)）共重合体（化合物３）の合成
重合管にＭＰＣ１.７ｇ（５.７６×１０−３モル）、ＨＥＭＡ２.２４８ｇ（１７.３×１０−３モル）、開始剤としてＡＩＢＮ ０.０１８９ｇ（１.１５×１０−４モル）、重合溶媒としてメタノール６mlとＤＭＦ１４mlの混合溶媒を入れ、３回窒素置換を行った後、脱気し真空下で封管した。これを恒温槽中７５℃で２２時間振とうさせることにより重合した。反応後、開封し、混合溶媒を除去し、過剰のアセトンを加えて粗生成物を得た。
これをメタノールに溶かし、アセトンで再沈殿させることにより、精製した化合物３を得た（収率６０〜７０％）。
ＩＲスペクトルは、単量体のメタクリル酸部の二重結合による吸収、1630cm−１の減少及び920cm−１の消失を示した。この重合体（化合物３）のＧＰＣ（ゲルろ過クロマトグラフィー）による分子量の分析結果は約３００００〜４００００であった。
【００２２】
実施例１ 点眼剤
製造例１で調製した化合物１ ５.０ｇ
塩化ナトリウム ０.２５ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
ホウ酸 ０.３ｇ
ホウ砂 ０.０４５ｇ
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２３】
実施例２ 点眼剤
化合物１ ２.０ｇ
塩化ナトリウム ０.３３ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２８ｇ
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２４】
実施例３ 点眼剤
化合物１ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.９ｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２５】
実施例４ 点眼剤
製造例３で調製した化合物３ ２.０ｇ
塩化ナトリウム ０.４３ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２１ｇ
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２６】
実施例５ 点眼剤
化合物３ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.９ｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２７】
実施例６ 眼軟膏剤
化合物１ ２ｇ
流動パラフィン ５ｇ
眼科用白色ワセリン 適量
全 量 １００ｇ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して眼軟膏剤とする。
【００２８】
実施例７ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物１ ２.０ｇ
ポロクサマー４０７ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.５ｇ
ホウ酸 ０.７３ｇ
ホウ砂 ０.０５ｇ
ソルビン酸カリウム ０.２ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２９】
実施例８ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物１ ０.５ｇ
ポリソルベート８０ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.３３ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２８ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００３０】
実施例９ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物３ ２.０ｇ
ポリソルベート８０ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.５ｇ
ホウ酸 ０.７３ｇ
ホウ砂 ０.０５ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００３１】
実施例１０ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物３ ０.５ｇ
ポロクサマー４０７ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.４４ｇ
塩化カリウム ０.０８ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２１ｇ
アルキルポリアミノエチルグリシン ０.０１ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００３２】
試験例１ 強制開瞼ドライアイモデルにおけるリン脂質類似重合体の効果
リン脂質類似重合体含有眼科用組成物のドライアイ治療剤としての有用性を評価するため、ウサギ強制開瞼ドライアイモデルを用いて角膜上皮障害抑制効果を検討した。
［試験物質］
製造例１記載のＭＰＣホモ重合体（化合物１）を０.５％または２％含有する点眼液および製造例３記載のＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体（化合物３）を２％含有する点眼剤を被験物質とし、対照として生理食塩水を用いた。
［試験方法］
眼に異常のない日本白色種雄性ウサギ５匹に、全身麻酔を施し、両眼に開瞼器を装着して強制的に開瞼させ、開瞼直後から３０分間隔で６回（直後、30、60、90、120、150分後）、被験液および生理食塩液を１眼につき１５０μlずつ点眼投与した。開瞼１８０分後に１％メチレンブル―溶液を点眼して、強制開瞼により生じた角膜上皮障害部位を染色し、生理食塩液で洗眼した。麻酔致死後、角膜を切除し、ホルムアミド１mlにて一晩抽出し、翌日６６０nmにおける吸光度を測定した。生理食塩水についても、同様に処理した。
【００３３】
［試験結果］
２％化合物１含有点眼剤投与眼の吸光度は０.２７５±０.０４５である。これは、対照液投与眼の０.５５６±０.１３１（ｍｅａｎ±ｓ.ｅ. ｎ＝５）に比べて有意に低い（ｐ＜０.０５)。また、化合物３投与眼の吸光度は０.３４１±０.０２２であり、対照液投与眼の吸光度０.４２２±０.０６７に比較して明らかに低い。これらの結果は、ＭＰＣホモ重合体またはＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体含有点眼剤が、眼乾燥防止作用を有し、乾燥による角膜上皮障害を抑制することを示している。
図１は、これらリン脂質類似重合体の角膜上皮障害抑制効果を比較したものである。ＭＰＣホモ重合体含有点眼剤は、ＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体含有点眼剤に比べて高い抑制効果を示した。角膜上皮障害の抑制率は以下の式によって求めた。
抑制率＝100×(1−薬物投与眼の色素抽出量／生理食塩液投与眼の色素抽出量)
【００３４】
試験例２ 瞬目反応による眼刺激性試験
点眼剤の眼刺激性を鋭敏に検出できる瞬目反応法［田中ら、あたらしい眼科 2,1127(1985)］を用いて、本発明のリン脂質類似重合体含有眼科用組成物の眼刺激性を検討した。
［試験物質］
製造例１記載のＭＰＣホモ重合体（化合物１）又は製造例３記載のＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体（化合物３）を５％含有する点眼液を調製し、これを被験物質とした。対照として生理食塩液を用いた。
［試験方法］
眼に異常のない日本白色種雄性ウサギ（6匹）の片眼に被験液を、他眼に生理食塩液を、それぞれ５０μl点眼し、点眼後２分間の瞬目回数を数えた。
［試験結果］
５％化合物１含有点眼液投与眼の瞬目回数は2.83±0.70回であり、生理食塩液投与眼の2.25±0.49回とほぼ同じであった。
５％化合物３点眼液投与眼の瞬目回数は1.55±0.37回であり、生理食塩液投与眼の1.97±0.56回とほぼ同じであった。
従って、化合物１及び化合物３は、殆ど眼刺激性を示さない極めて安全性の高い物質であることが明らかとなった。
【００３５】
試験例３ コンタクトレンズに対する適合性試験
リン脂質類似重合体含有眼科用医薬組成物のコンタクトレンズ装用中の使用の可否を検討するため、コンタクトレンズの物性（サイズ、パワー、ベースカーブ）に対する影響を検討した。
［試験物質］
実施例２記載の２％化合物１含有点眼剤を調製した。
［試験方法］
試験には、ソフトコンタクトレンズ（ＳＣＬ）として商品名「メニコンソフトＭＡ」（メニコン）、「ブレスオー」（東レ）、「シード フリークエント」（シード）、「アキュビュー」（ジョンソン＆ジョンソン）の４種類、ハードコンタクトレンズ（ＨＣＬ）として商品名「シードヤング」（シード）、酸素透過性ハードコンタクトレンズ（ＲＧＰＣＬ）として商品名「メニコンスーパーＥＸ」（メニコン）、「ボシュロムＯ２」（ボシュロム）の２種類を用いた。まず、コンタクトレンズの試験前の初期物性を測定した。サイズの測定は、万能投影機Ｖ−１２Ａ（ニコン）を用いて、パワーの測定はオートレンズメーターＬＭ−８７０（ニデック）を用いて行った。またベースカーブの測定は、ＨＣＬ及びＲＧＰＣＬについてはオートレフ／ケラトメーターＡＲＫ−２００（ニデック）を、ＳＣＬについてはソフトメーターＳＭ−２０００（ナイツ）を用いて行った。
ガラスバイアル瓶に試験液１０ｍｌを入れレンズを１枚ずつ浸漬し、３４℃の水浴中で１２０回／ｍｉｎで２８０分間振とうした後、試験後の物性を同様に測定し、試験前の物性と比較した。
【００３６】
［試験結果］
試験前および試験後のサイズ、パワー、ベースカーブを比較し、その変化の有無を表１に示した。全種類のコンタクトレンズの全パラメータにおいて、ほとんど変化は認められなかった。
従って化合物１含有点眼剤は、コンタクトレンズに対してほとんど影響を与えないことが明らかになった。
【表１】
【００３７】
本発明の製剤は、眼の乾燥による角膜上皮障害を防止する上で優れた効果を示し、また眼刺激性をほとんど示さず極めて安全性が高く、しかも粘性が低く、使用に際して不快感も無いことから、ドライアイの予防および治療剤として有用である。また、コンタクトレンズの物性に影響を及ぼさないため、コンタクトレンズ装用中にも使用できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、眼科領域の医療に関連する組成物に関し、更に詳しくは、ドライアイの予防及び治療に有用な組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、眼が乾く、眼が疲れる等の症状を訴えるドライアイ患者が増加している。ドライアイには、涙液の分泌量が減少するものと、分泌量自体は変わらないものとがある。前者には、スティーブンス・ジョンソン症候群、シェーグレン症候群等の内因性疾患に伴うもの、後者には、パソコン等のＶＤＴ作業による瞬目回数の減少、エアコンの普及による室内湿度の低下等が挙げられる。また、β遮断剤等の薬剤の長期点眼による副作用、涙液の不安定化等も考えられる。さらに、コンタクトレンズ使用者においても、ドライアイの症状が増加傾向にあることは、よく知られている。
また、ドライアイの概念は非常に曖昧で、はっきりとした定義付けがなされていないが、ここで言うドライアイとは、涙液の質的または量的異常があり、角結膜上皮障害の有無は問わないものである(非特許文献１)。
ドライアイの治療法としては、人工涙液の点眼剤やメガネの両サイドにパネルを装着して涙の蒸発を防ぐモイスチャーエイドを用いる方法、涙の排出口である涙点を閉鎖することによって結膜嚢内に涙液を保持する涙点閉鎖法などがあるが、いずれの方法も満足できる状況ではない。
現在市販されている人工涙液には、無機成分のみを配合した単純なものと、人工涙液の結膜嚢内滞留時間の延長をはかるために増粘剤として、コンドロイチン硫酸又はヒアルロン酸を配合したものがある。しかし、無機成分のみを含有する人工涙液の場合、一時的な水分補給効果しか得られない。また、増粘剤を配合した人工涙液の場合、涙液の保持の点で若干の効果は認められるものの、高粘度のために、調製時、特にろ過過程で困難を伴うことがあったり、点眼時に違和感や不快感を生じることがあり、決して満足いくものではない。また、ヒアルロン酸は、鶏冠から抽出するか微生物を利用する方法で製造されているために製造コストが高く、広範な利用が妨げられている。
従って、ドライアイの治療に有効であり、製剤化が容易で、使用しやすく、かつ入手が容易な眼科用組成物の開発が望まれていた。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】山田昌和ら、日本眼科紀要43(11)1289−1293、1992
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意、研究を続けた結果、動植物界に広範に分布し、生体膜の主要成分であるグリセロリン脂質の親水性部分（コリンリン酸等）と類似の構造を有する、メタクリル酸誘導体をはじめとする誘導体を単量体成分とするリン脂質類似重合体が、眼刺激性が殆どなく低粘度で優れたドライアイ治療効果を示すことを見出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は、式（１）：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−Ｚ (Ｉ)
（式中、Ｘは水素、低級アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、又は−ＣＨ２ＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−；Ｙは−（ＣＨ２)ｎ−、−Ｐh−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２ＣＨ２−、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎ−(ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｙ−、−（ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｎ−（ＣＨ２−Ｏ)ｙ−、又は１位若しくは２位に脂肪酸を結合させたグリセリンエステル；ｎは１〜１２の整数；ｙは１〜２０の整数；Ｚはコリン、エタノールアミン又はセリンを表す）
で示される化合物を単量体成分とするリン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物を提供するものである。
【０００５】
本発明製剤には、上記の化合物(Ｉ)のホモ重合体を用いることができるが、該化合物Ｉ）と、他の親水性モノマーとの共重合体であってもよい。そのような親水性モノマーとして、式（II）：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ （II）
（式中、Ｘは水素又は低級アルキル；Ｙは水素、−(ＣＨ２)ｎＯＨ、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰhＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰＯ３Ｈ、又は糖類残基；ｎは１〜２０の整数を表す）
で示される化合物を挙げることができる。
なお、上記定義において、Ｍeはメチル基、Ｐhはフェニル基を表す。
また、低級アルキルとは、炭素原子数１〜６個のアルキル基を指し、例えば、メチル、エチル、ブチル、プロピル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】本発明の製剤の角膜上皮障害抑制効果を比較したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明の目的には、上記の式(Ｉ)で示される化合物又は該化合物(Ｉ)と式（II）で示される化合物との重合体は、ドライアイに有効である限り、すべて有用であるが、中でも、式(Ｉ)において、Ｘが水素又はメチル、Ｙがエチレン、プロピレン、ブチレン、Ｚがコリン、エタノールアミン、セリンである化合物が好ましく、Ｘがメチル、Ｙがエチレン、Ｚがコリン又はエタノールアミンである化合物（２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）又は２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥ）がより好ましい。
また、式（II）において、Ｘが水素又はメチル、Ｙが水素、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＰＯ３Ｈ、糖残基である化合物が好ましく、Ｘがメチル、Ｙが−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである化合物（２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ））がより好ましい。
【０００８】
本発明のリン脂質類似重合体の構成成分であるＭＰＣ又はＭＰＥのホモ重合体は、最初、仲矢らによって合成され（MPE；Nakai et al., Makromol.Chem., 178, 2963 (1977): MPC; Umeda et al., Makromol.Chem.Rapid Commun., 6, 285 (1985))化粧品やコンタクトレンズ等の素材としての用途が既に知られている。また、ＭＰＣおよびその類似重合体を含んだコンタクトレンズ用溶液が、レンズに親水性を付与させることで装用感を向上させ、レンズの汚れの付着を防ぐことは特開平７−１６６１５４号公報に示されている。しかしながら、それらがドライアイの予防及び治療において眼科的に有用であることは未だ知られていない。
【０００９】
本発明の眼科用組成物に含有される重合体は、化合物(Ｉ)単独のホモ重合体又は化合物 (Ｉ)と親水性の化合物（II）の共重合体であるが、後者の場合、共重合体中に化合物(Ｉ)が占める割合は、共重合体全量に対し、５〜１００モル％が好ましく、特に５０モル％以上であることが好ましい。この配合比が５モル％以下の場合は、十分なドライアイ治療効果が期待できない。ホモ重合体又は共重合体の分子量は、重合温度、重合開始剤の使用量、重合溶媒の種類、重合方法、重合度調節剤の使用等によっても異なるが、好ましくは平均分子量が５０００〜２００,０００の範囲、特に好ましくは１０,０００〜１５０,０００の範囲である。
【００１０】
本発明製剤に用いる化合物(Ｉ)及び化合物（II）は既知の化合物であるか、又は文献（例、特開昭５８−１５４５９１号公報、特開昭６０−１８４０９３号公報又は高分子論文集、Vol.35, 423−427, 1978）に記載の方法により既知の化合物から合成することができる。
ＭＰＣ又はＭＰＥ等を含有するホモ重合体又は共重合体は、高分子化学の分野で既知の方法に従い、要すれば適当な溶媒中で、重合開始剤の存在下、一定時間重合させることにより、製造することができる。
溶媒としては、使用する単量体化合物が可溶性のものであればよく、水、メタノール、エタノール、プロパノール、t−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム又はこれらの混合溶媒を用いることができる。
【００１１】
重合開始剤は通常のラジカル重合開始剤から任意に選択されるが、例えば、２,２'−アゾビスイソブチロニトリル（AIBN)、アゾビスマレノニトリル等の脂肪酸アゾ化合物、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル等の過酸化物、過硫酸カリウム等の過硫酸塩等を挙げることができる。その使用量は、原料全成分の０.０１〜１０重量％、特に０.１〜５重量％程度が好ましい。
重合は、温度３０〜８０℃、好ましくは４０〜７０℃において２〜７２時間重合させる。
必要に応じて用いられる溶媒としては、使用する単量体化合物が可溶性のものであればよく、水、メタノール、エタノール、プロパノール、t−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム又はこれらの混合溶媒を用いることができる。
【００１２】
本発明のリン脂質類似重合体を含有する眼科用医薬組成物は、点眼剤又は軟膏剤であることが好ましい。点眼剤である場合、該組成物は予め液剤の形にしておいてもよく、あるいは固形剤として使用時に溶解して用いるようにしてもよい。固形剤の場合、例えば精製水や生理食塩液などに適量を溶解、懸濁または乳化させるとよい。固形剤としては、錠剤、顆粒剤や散剤などが挙げられ、これらは公知の方法により適宜製造することができる。これらの製剤は、無菌濾過や加熱滅菌などの公知の方法により無菌とするのがよい。また、本発明のリン脂質類似重合体を含有する点眼剤は、コンタクトレンズの物性に影響を及ぼさないので、コンタクトレンズ装用中にも点眼できる。
【００１３】
本発明の組成物中のリン脂質類似重合体の含量は、最終濃度として、通常、通常０.０１〜１０％、好ましくは０.１〜５％、より好ましくは０.５〜３％である。
また、本発明の組成物が点眼剤である場合、ｐＨは、公知の方法によって、約６.５〜８.０に調整するのがよい。また、浸透圧は公知の方法によって０.５〜５圧比、好ましくは０.８〜２圧比に調整するのがよい。
【００１４】
本発明の組成物がコンタクトレンズ用点眼剤である場合、界面活性剤を配合することが好ましい。界面活性剤を配合することによって、リン脂質類似重合体のコンタクトレンズへの吸着を防止する効果が期待されるためである。この場合、界面活性剤の種類としてはポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー（ポロクサマー類）、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン置換エチレンジアミン（ポロキサミン類）、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリオキシエチレンステアレート等の非イオン界面活性剤やアルキルポリアミノエチルグリシン等の両性界面活性剤、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩等の陰イオン界面活性剤が挙げられるが、眼への安全性の面から非イオン性界面活性剤が最も好ましい。また、配合できる界面活性剤の量は０.００１〜５％が好ましく、０.０１〜１％がより好ましい。
【００１５】
本発明の製剤を点眼剤として用いる場合、本発明の目的に反しない限り、通常点眼剤に用いられる保存剤、緩衝剤、増粘剤、溶解補助剤、安定化剤、ｐＨ調製剤、等張化剤などの添加剤を適宜配合することができる。保存剤としては、クロロブタノール、デヒドロ酢酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジウム、フェネチルアルコール、アルキルポリアミノエチルグリシン、パラオキシ安息香酸メチル等のパラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンゼトニウム、ソルビン酸およびそれらの塩等が挙げられる。
緩衝剤としては、硼酸、硼砂、リン酸２水素カリウム、リン酸水素２カリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム等が挙げられる。
増粘剤としては、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、コンドロイチン硫酸等が挙げられる。
溶解補助剤としては、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンモノステアレート等、安定化剤としては、エデト酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム等が挙げられる。また、ｐＨ調製剤として水酸化ナトリウム・水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、塩酸、クエン酸、リン酸、酢酸等、等張化剤としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン等の多価アルコールなどが挙げられる。
【００１６】
本発明の点眼剤の用法及び用量は、患者の症状、年齢等により変動するが、通常、１日１〜６回、１回１〜２滴が点眼される。眼軟膏剤の場合には、通常１日１〜２回、結膜嚢内に適量を塗布して使用される。
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例】
【００１７】
製造例１ ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣホモ重合体）（化合物１）
（１）メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）の合成
２−クロロ−１,３,２−ジオキサホスホランと２−ヒドロキシエチルメタクリレートから合成した２−（メタクリロイルオキシ）エチル−２'−（トリメチルアンモニウム）エチルリン酸９.４４ｇ（０.０４モル）とトリメチルアミン１１.８ｇ（０.２モル）及びアセトニトリル８０mlを耐圧反応管に入れ、５０℃で１０時間振とう反応させた。反応後すぐに濃縮し、冷所で保存すれば白色結晶が得られる（粗収率約１００％）。
この粗結晶を脱水クロロホルムに溶かし、脱水アセトンで再沈殿させることにより、精製化合物（ＭＰＣ）を得た（収率９０〜９５％）。ｍｐ.１５℃。
ＩＲ（neat): 1720 (C＝O), 1630 (C＝C), 1240, 1080cm−１ (PO−O−)ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝1.85 (s: −Me, 3H), 3.15 (s: −Me, 9H), 3.45−3.85 (m: −CH２−, 2H), 3.85−4.35 (m: −CH２−, 6H), 5.68 (m: −CH＝, 1H), 6.13 ppm(s: −CH＝, 1H)
【００１８】
（２）ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣホモ重合体）（化合物１）の合成
重合管に上で合成したＭＰＣ５ｇ（０.０１６９モル）、開始剤としてＡＩＢＮ ０.０５５５ｇ（３.３８×１０−４モル）、重合溶媒としてメタノール２５mlを入れ、３回窒素置換を行った後、脱気し真空下で封管した。これを恒温槽中７０℃で１７時間振とうさせることにより重合した。反応後、開封し、メタノールを除去し、過剰のアセトンを加えて粗生成物を得た。これをエタノールに溶かし、アセトンで再沈殿させることにより、精製した化合物１を得た（収率６０〜７０％）。
ＩＲスペクトルは、単量体のメタクリル酸部の二重結合による吸収、1630cm−１の減少及び920cm−１の消失を示した。この重合体（化合物１）のＧＰＣ（クロマトグラフィー）による分子量の分析結果は約６５０００〜７００００であった。
【００１９】
製造例２ ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥホモ重合体）（化合物２）
（１）メタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥ）の合成
リン酸基をベンジル基で、アミノ基をトリチル基で保護した２−（メタクリロイルオキシ）エチル−２'−（トリチルアミノ）エチルベンジルリン酸９.２８ｇ（１６ミリモル）、乾燥ヨウ化ナトリウム２.８８ｇ（１９.２ミリモル）、及び脱水アセトン１２０mlを丸底フラスコに入れ、４.５時間還流した。反応後、フラスコを冷却し、トリエチルアミン１０.８mlを加え、室温に戻し、１６時間放置した。これを減圧濃縮後、脱水エーテルを加え、３日間還流した。溶液をろ過後、ろ液を３５℃以下で濃縮した。これに９０％酢酸３２０mlを加え、１５分間還流した。反応液は約７５mlまで濃縮し、４℃に冷却した。生じたトリフェニルカルビノールをろ取後、ろ液を１Ｌフラスコに入れ、ジエチルエーテルを約１Ｌ入れると白濁した。この容器に栓をして、容器をドライアイス−メタノール系（約−２０℃）に入れ、一夜放置した。析出する沈殿をろ取し、これを脱水メタノールに溶かし、脱水ジエチルエーテルで再沈殿させることにより、白色結晶であるＭＰＥを得た（
収率８０〜８５％）。ｍｐ.２０３℃。
ＩＲ（neat): 1720 (C＝O), 1630 (C＝C), 1240, 1080cm−１ (PO−O−)
【００２０】
（２）ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルエタノールアミン（ＭＰＥホモ重合体）（化合物２）の合成
重合管に上で合成したＭＰＥ３０３mg（１.２０ミリモル）、開始剤としてＡＩＢＮ １４mg（０.０８５ミリモル）、重合溶媒としてメタノール１０mlを入れ、３回窒素置換を行った後、脱気し真空下で封管した。これを恒温槽中６５℃で１２時間振とうさせることにより重合した。反応後、生成物は白色結晶として析出し、沈殿をろ取した後、メタノール及びジエチルエーテルで洗浄して化合物２を得た（収率３０〜４０％）。
ＩＲスペクトルは、単量体のメタクリル酸部の二重結合による吸収、1630cm−１の減少及び920cm−１の消失を示した。この重合体（化合物２）のＧＰＣ（ゲルろ過クロマトグラフィー）による分子量の分析結果は約５５０００〜６００００であった。
【００２１】
製造例３ ポリ（メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ)）共重合体（化合物３）の合成
重合管にＭＰＣ１.７ｇ（５.７６×１０−３モル）、ＨＥＭＡ２.２４８ｇ（１７.３×１０−３モル）、開始剤としてＡＩＢＮ ０.０１８９ｇ（１.１５×１０−４モル）、重合溶媒としてメタノール６mlとＤＭＦ１４mlの混合溶媒を入れ、３回窒素置換を行った後、脱気し真空下で封管した。これを恒温槽中７５℃で２２時間振とうさせることにより重合した。反応後、開封し、混合溶媒を除去し、過剰のアセトンを加えて粗生成物を得た。
これをメタノールに溶かし、アセトンで再沈殿させることにより、精製した化合物３を得た（収率６０〜７０％）。
ＩＲスペクトルは、単量体のメタクリル酸部の二重結合による吸収、1630cm−１の減少及び920cm−１の消失を示した。この重合体（化合物３）のＧＰＣ（ゲルろ過クロマトグラフィー）による分子量の分析結果は約３００００〜４００００であった。
【００２２】
実施例１ 点眼剤
製造例１で調製した化合物１ ５.０ｇ
塩化ナトリウム ０.２５ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
ホウ酸 ０.３ｇ
ホウ砂 ０.０４５ｇ
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２３】
実施例２ 点眼剤
化合物１ ２.０ｇ
塩化ナトリウム ０.３３ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２８ｇ
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２４】
実施例３ 点眼剤
化合物１ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.９ｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２５】
実施例４ 点眼剤
製造例３で調製した化合物３ ２.０ｇ
塩化ナトリウム ０.４３ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２１ｇ
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２６】
実施例５ 点眼剤
化合物３ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.９ｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
精製水 適量
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して点眼剤とする。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２７】
実施例６ 眼軟膏剤
化合物１ ２ｇ
流動パラフィン ５ｇ
眼科用白色ワセリン 適量
全 量 １００ｇ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製して眼軟膏剤とする。
【００２８】
実施例７ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物１ ２.０ｇ
ポロクサマー４０７ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.５ｇ
ホウ酸 ０.７３ｇ
ホウ砂 ０.０５ｇ
ソルビン酸カリウム ０.２ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００２９】
実施例８ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物１ ０.５ｇ
ポリソルベート８０ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.３３ｇ
塩化カリウム ０.１５ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２８ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００３０】
実施例９ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物３ ２.０ｇ
ポリソルベート８０ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.５ｇ
ホウ酸 ０.７３ｇ
ホウ砂 ０.０５ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００３１】
実施例１０ コンタクトレンズ用点眼剤
化合物３ ０.５ｇ
ポロクサマー４０７ ０.１ｇ
塩化ナトリウム ０.４４ｇ
塩化カリウム ０.０８ｇ
リン酸２水素ナトリウム ０.２ｇ
ホウ砂 ０.２１ｇ
アルキルポリアミノエチルグリシン ０.０１ｇ
全量 １００ｍｌ
上記の成分を用い、公知の方法により無菌製剤を調製してコンタクトレンズ用点眼剤を得る。ｐＨ７、浸透圧比１。
【００３２】
試験例１ 強制開瞼ドライアイモデルにおけるリン脂質類似重合体の効果
リン脂質類似重合体含有眼科用組成物のドライアイ治療剤としての有用性を評価するため、ウサギ強制開瞼ドライアイモデルを用いて角膜上皮障害抑制効果を検討した。
［試験物質］
製造例１記載のＭＰＣホモ重合体（化合物１）を０.５％または２％含有する点眼液および製造例３記載のＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体（化合物３）を２％含有する点眼剤を被験物質とし、対照として生理食塩水を用いた。
［試験方法］
眼に異常のない日本白色種雄性ウサギ５匹に、全身麻酔を施し、両眼に開瞼器を装着して強制的に開瞼させ、開瞼直後から３０分間隔で６回（直後、30、60、90、120、150分後）、被験液および生理食塩液を１眼につき１５０μlずつ点眼投与した。開瞼１８０分後に１％メチレンブル―溶液を点眼して、強制開瞼により生じた角膜上皮障害部位を染色し、生理食塩液で洗眼した。麻酔致死後、角膜を切除し、ホルムアミド１mlにて一晩抽出し、翌日６６０nmにおける吸光度を測定した。生理食塩水についても、同様に処理した。
【００３３】
［試験結果］
２％化合物１含有点眼剤投与眼の吸光度は０.２７５±０.０４５である。これは、対照液投与眼の０.５５６±０.１３１（ｍｅａｎ±ｓ.ｅ. ｎ＝５）に比べて有意に低い（ｐ＜０.０５)。また、化合物３投与眼の吸光度は０.３４１±０.０２２であり、対照液投与眼の吸光度０.４２２±０.０６７に比較して明らかに低い。これらの結果は、ＭＰＣホモ重合体またはＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体含有点眼剤が、眼乾燥防止作用を有し、乾燥による角膜上皮障害を抑制することを示している。
図１は、これらリン脂質類似重合体の角膜上皮障害抑制効果を比較したものである。ＭＰＣホモ重合体含有点眼剤は、ＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体含有点眼剤に比べて高い抑制効果を示した。角膜上皮障害の抑制率は以下の式によって求めた。
抑制率＝100×(1−薬物投与眼の色素抽出量／生理食塩液投与眼の色素抽出量)
【００３４】
試験例２ 瞬目反応による眼刺激性試験
点眼剤の眼刺激性を鋭敏に検出できる瞬目反応法［田中ら、あたらしい眼科 2,1127(1985)］を用いて、本発明のリン脂質類似重合体含有眼科用組成物の眼刺激性を検討した。
［試験物質］
製造例１記載のＭＰＣホモ重合体（化合物１）又は製造例３記載のＭＰＣ・ＨＥＭＡ共重合体（化合物３）を５％含有する点眼液を調製し、これを被験物質とした。対照として生理食塩液を用いた。
［試験方法］
眼に異常のない日本白色種雄性ウサギ（6匹）の片眼に被験液を、他眼に生理食塩液を、それぞれ５０μl点眼し、点眼後２分間の瞬目回数を数えた。
［試験結果］
５％化合物１含有点眼液投与眼の瞬目回数は2.83±0.70回であり、生理食塩液投与眼の2.25±0.49回とほぼ同じであった。
５％化合物３点眼液投与眼の瞬目回数は1.55±0.37回であり、生理食塩液投与眼の1.97±0.56回とほぼ同じであった。
従って、化合物１及び化合物３は、殆ど眼刺激性を示さない極めて安全性の高い物質であることが明らかとなった。
【００３５】
試験例３ コンタクトレンズに対する適合性試験
リン脂質類似重合体含有眼科用医薬組成物のコンタクトレンズ装用中の使用の可否を検討するため、コンタクトレンズの物性（サイズ、パワー、ベースカーブ）に対する影響を検討した。
［試験物質］
実施例２記載の２％化合物１含有点眼剤を調製した。
［試験方法］
試験には、ソフトコンタクトレンズ（ＳＣＬ）として商品名「メニコンソフトＭＡ」（メニコン）、「ブレスオー」（東レ）、「シード フリークエント」（シード）、「アキュビュー」（ジョンソン＆ジョンソン）の４種類、ハードコンタクトレンズ（ＨＣＬ）として商品名「シードヤング」（シード）、酸素透過性ハードコンタクトレンズ（ＲＧＰＣＬ）として商品名「メニコンスーパーＥＸ」（メニコン）、「ボシュロムＯ２」（ボシュロム）の２種類を用いた。まず、コンタクトレンズの試験前の初期物性を測定した。サイズの測定は、万能投影機Ｖ−１２Ａ（ニコン）を用いて、パワーの測定はオートレンズメーターＬＭ−８７０（ニデック）を用いて行った。またベースカーブの測定は、ＨＣＬ及びＲＧＰＣＬについてはオートレフ／ケラトメーターＡＲＫ−２００（ニデック）を、ＳＣＬについてはソフトメーターＳＭ−２０００（ナイツ）を用いて行った。
ガラスバイアル瓶に試験液１０ｍｌを入れレンズを１枚ずつ浸漬し、３４℃の水浴中で１２０回／ｍｉｎで２８０分間振とうした後、試験後の物性を同様に測定し、試験前の物性と比較した。
【００３６】
［試験結果］
試験前および試験後のサイズ、パワー、ベースカーブを比較し、その変化の有無を表１に示した。全種類のコンタクトレンズの全パラメータにおいて、ほとんど変化は認められなかった。
従って化合物１含有点眼剤は、コンタクトレンズに対してほとんど影響を与えないことが明らかになった。
【表１】
【００３７】
本発明の製剤は、眼の乾燥による角膜上皮障害を防止する上で優れた効果を示し、また眼刺激性をほとんど示さず極めて安全性が高く、しかも粘性が低く、使用に際して不快感も無いことから、ドライアイの予防および治療剤として有用である。また、コンタクトレンズの物性に影響を及ぼさないため、コンタクトレンズ装用中にも使用できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−Ｚ (Ｉ)
（式中、Ｘは水素、低級アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、又は−ＣＨ２ＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−Ｚ；Ｙは−（ＣＨ２）ｎ−、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎ−（ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｙ−、−（ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｎ−（ＣＨ２−Ｏ)ｙ−、又は１位若しくは２位に脂肪酸を結合させたグリセリンエステル；ｎは１〜２０の整数；ｙは１〜２０の整数；Ｚはコリン、エタノールアミン又はセリンを表す）で示される化合物を単量体成分とするリン脂質類似重合体を含有する、角膜上皮障害を予防および/または治療するための眼科用医薬組成物。
【請求項２】
リン脂質類似重合体が式(Ｉ)で示される化合物のホモ重合体である、請求項１に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項３】
リン脂質類似重合体が、式（Ｉ）で示される化合物と、式（II）：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ （II）
（式中、Ｘは水素、低級アルキル；Ｙは水素、−(ＣＨ２)ｎＯＨ、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰhＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰＯ３Ｈ、又は糖類残基；ｎは１〜２０の整数を表す）
で示される親水性化合物との共重合体である、請求項１記載の眼科用医薬組成物。
【請求項４】
式(Ｉ)で示される化合物と、式（II）で示される化合物との構成比が１００：１〜１：１００の範囲である、請求項３記載の眼科用医薬組成物。
【請求項５】
式(Ｉ)におけるＸがメチル、Ｙがエチレン、Ｚがコリン又はエタノールアミンである、請求項１〜４のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項６】
式（II）におけるＸがメチル、Ｙが−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである、請求項３〜５のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項７】
角膜上皮障害が、シェーグレン症候群またはスティーブンス・ジョンソン症候群によるものである、請求項１〜６のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項８】
浸透圧が、０．５〜５圧比である、請求項１〜７のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項９】
ｐＨが、６．５〜８．０である、請求項１〜８のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１０】
さらに、保存剤、緩衝剤、溶解補助剤、ｐＨ調整剤または等張化剤を含有する、請求項１〜９のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１１】
点眼剤又は眼軟膏である、請求項１〜１０のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１２】
コンタクトレンズ用点眼剤である、請求項１〜１１のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１３】
界面活性剤を含有することを特徴とする、請求項１２記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１４】
界面活性剤が、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー（ポロクサマー類）、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン置換エチレンジアミン（ポロキサミン類）、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０及びポリオキシエチレンステアレートからなる群より選択される一種以上である、請求項１３記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１】
式(Ｉ)：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−Ｚ (Ｉ)
（式中、Ｘは水素、低級アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、又は−ＣＨ２ＣＯ２−Ｙ−ＯＰＯ３−Ｚ；Ｙは−（ＣＨ２）ｎ−、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２−Ｏ)ｎ−（ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｙ−、−（ＣＨＭeＣＨ２Ｏ)ｎ−（ＣＨ２−Ｏ)ｙ−、又は１位若しくは２位に脂肪酸を結合させたグリセリンエステル；ｎは１〜２０の整数；ｙは１〜２０の整数；Ｚはコリン、エタノールアミン又はセリンを表す）で示される化合物を単量体成分とするリン脂質類似重合体を含有する、角膜上皮障害を予防および/または治療するための眼科用医薬組成物。
【請求項２】
リン脂質類似重合体が式(Ｉ)で示される化合物のホモ重合体である、請求項１に記載の眼科用医薬組成物。
【請求項３】
リン脂質類似重合体が、式（Ｉ）で示される化合物と、式（II）：
Ｈ２Ｃ＝ＣＸＣＯ２−Ｙ （II）
（式中、Ｘは水素、低級アルキル；Ｙは水素、−(ＣＨ２)ｎＯＨ、−(ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰhＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ)ｎＨ、−ＰＯ３Ｈ、又は糖類残基；ｎは１〜２０の整数を表す）
で示される親水性化合物との共重合体である、請求項１記載の眼科用医薬組成物。
【請求項４】
式(Ｉ)で示される化合物と、式（II）で示される化合物との構成比が１００：１〜１：１００の範囲である、請求項３記載の眼科用医薬組成物。
【請求項５】
式(Ｉ)におけるＸがメチル、Ｙがエチレン、Ｚがコリン又はエタノールアミンである、請求項１〜４のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項６】
式（II）におけるＸがメチル、Ｙが−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである、請求項３〜５のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項７】
角膜上皮障害が、シェーグレン症候群またはスティーブンス・ジョンソン症候群によるものである、請求項１〜６のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項８】
浸透圧が、０．５〜５圧比である、請求項１〜７のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項９】
ｐＨが、６．５〜８．０である、請求項１〜８のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１０】
さらに、保存剤、緩衝剤、溶解補助剤、ｐＨ調整剤または等張化剤を含有する、請求項１〜９のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１１】
点眼剤又は眼軟膏である、請求項１〜１０のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１２】
コンタクトレンズ用点眼剤である、請求項１〜１１のいずれかに記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１３】
界面活性剤を含有することを特徴とする、請求項１２記載の眼科用医薬組成物。
【請求項１４】
界面活性剤が、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー（ポロクサマー類）、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン置換エチレンジアミン（ポロキサミン類）、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０及びポリオキシエチレンステアレートからなる群より選択される一種以上である、請求項１３記載の眼科用医薬組成物。
【図１】
【公開番号】特開２０１２−４１３４３（Ｐ２０１２−４１３４３Ａ）
【公開日】平成２４年３月１日（２０１２．３．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１８６１１８（Ｐ２０１１−１８６１１８）
【出願日】平成２３年８月２９日（２０１１．８．２９）
【分割の表示】特願２００８−２９０６（Ｐ２００８−２９０６）の分割
【原出願日】平成９年８月１８日（１９９７．８．１８）
【出願人】（０００１１５９９１）ロート製薬株式会社 (366)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年３月１日（２０１２．３．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年８月２９日（２０１１．８．２９）
【分割の表示】特願２００８−２９０６（Ｐ２００８−２９０６）の分割
【原出願日】平成９年８月１８日（１９９７．８．１８）
【出願人】（０００１１５９９１）ロート製薬株式会社 (366)
【Ｆターム（参考）】
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