体脂肪の蓄積抑制または低減剤
【課題】 新規な体脂肪蓄積抑制または低減剤を提供すること。
【解決手段】 本発明の伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物を有効成分とする体脂肪の蓄積抑制または低減剤を提供する。本発明の伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物は、優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有し、より詳細には、白色脂肪細胞における脂肪分解促進作用や、リパーゼ阻害作用、血流改善作用等を有する。特に辛味を呈するトウガラシと違い、辛味を呈さないことから、様々な剤形に応用が可能であり、安全性も高い。
【解決手段】 本発明の伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物を有効成分とする体脂肪の蓄積抑制または低減剤を提供する。本発明の伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物は、優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有し、より詳細には、白色脂肪細胞における脂肪分解促進作用や、リパーゼ阻害作用、血流改善作用等を有する。特に辛味を呈するトウガラシと違い、辛味を呈さないことから、様々な剤形に応用が可能であり、安全性も高い。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、日本人の食生活が大きく変化して肉食中心の高脂肪食を摂取するようになったこと、ならびにストレスや運動不足により、中高年齢層だけでなく、青少年においても、肥満とこれに伴う体脂肪率の増加が問題となっている。
【０００３】
そもそも体脂肪は、摂取した脂質や糖質を脂肪として体内に蓄積したものであり、この脂肪は、主に脂肪細胞内に蓄積されたものである。この脂肪細胞は、主に褐色脂肪細胞と白色脂肪細胞に分類され、特に白色脂肪細胞は、皮下脂肪や内臓脂肪を構成する細胞であり、この白色脂肪細胞中に蓄積した脂肪を低減させるまたは白色脂肪細胞への脂肪の蓄積を抑制することが、体脂肪を効率よく減らす上で重要である。
【０００４】
これまでに、この脂肪細胞における脂質の分解を促進する様々な検討がされているが、十分な効果を得ることはできなかった（例えば特許文献１〜３を参照）。
【０００５】
また、トウガラシは、通常、辛味を呈する成分であるカプサイシンを含有しており、この効果として褐色脂肪細胞に対する脂肪分解促進効果によって、体熱産生が促進され、これによって基礎代謝を向上させて体脂肪を低減し得るとして食されているが、この辛味によって摂取量が制限され、十分な効果を得ることが難しいといった問題点がある。一方、辛味が少ない、すなわちカプサイシンをほとんど含有していない伏見甘長などのトウガラシの品種では、摂取はしやすいがこのような体熱産生促進効果および基礎代謝向上効果は得られておらず、体脂肪の低減効果が十分得られない。
【特許文献１】特開２００４−７５６５３号公報
【特許文献２】特開２００２−１５４９８７号公報
【特許文献３】特開２００２−２０３１２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、辛味が少ないトウガラシ、特に伏見甘長を加工して得られた新規な体脂肪蓄積抑制または低減剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、辛味が少ないトウガラシの一つである伏見甘長を発酵処理することによって得られた発酵物は優れた体脂肪低減効果を有することを見出し、本発明に至った。
【０００８】
すなわち本発明は、伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物を有効成分とする体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【０００９】
好ましい実施様態は、前記発酵処理が、乳酸菌を用いた発酵である体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【００１０】
より好ましい実施様態は、前記体脂肪蓄積抑制または低減剤が、白色脂肪細胞の脂質分解促進作用である、体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の伏見甘長を発酵処理することによって得られた発酵物は優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有する。より具体的には、腸管からの脂質の吸収を抑制および白色脂肪細胞内の脂質分解促進を行うことで、体脂肪の蓄積抑制または低減効果を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明の本発明の伏見甘長を発酵処理することによって得られた発酵物（以下、単に本発明の発酵物ということが有る）を有効成分とする体脂肪の蓄積抑制または低減剤を詳細に説明する。なお、本発明は、以下の記載のみに限定されず、当業者が理解し得る特許請求の記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１３】
（伏見甘長）
本発明の伏見甘長は、京都の伏見地区で作られた細長く、辛味が少ない品種のトウガラシであり、果長は１０〜１５ｃｍ程度の長さを有する野菜である。この伏見甘長は、京野菜として知られている。本発明では、この伏見甘長の果実全体またはその一部（たとえば種子など）を用いる。
【００１４】
なお、本発明の伏見甘長の他にも、辛味の少ない品種である、シシトウや万願寺を用いても良いが、果実が大ぶりである伏見甘長が好ましく用いられる。また、本発明に用いる伏見甘長には、この伏見甘長の交配種も包含する。
【００１５】
本発明に用いる伏見甘長は、そのまま後述する処理に供することも可能であるが、処理に供される植物体の表面積を増加させて、効率よく植物体を処理できる点で、予め植物体を破砕することが好ましい。例えば、植物体をスライサーまたはダイサーでカットした後に、マスコロイダー、ブレンダー、摩砕ミルなどで、破砕片の粒径が、好ましくは１００〜５０００μｍ、より好ましくは２００〜３０００μｍになるまで破砕する。必要に応じて、水、エタノールなどを適宜加えて破砕してもよい。
【００１６】
次いで、植物体またはその破砕物を発酵処理する。発酵処理は、伏見甘長またはその破砕物へ微生物を接触させることで行うことができ、処理を効率よく行い得るという点では、植物体または破砕物に、予め水を加えることが好ましい。加える水の量は、植物体または破砕物の全重量に対して、好ましくは等量〜５倍量、より好ましくは２〜３倍量である。水を加えることによって、菌の生育環境が好適になる。なお、発酵処理の前に殺菌や伏見甘長中の成分を溶出させるために加熱処理を行っても良い。加熱処理は、植物体またはその破砕物を、４０℃〜１２０℃の範囲の温度で３０分〜２４時間加熱することによって行われる。なお、伏見甘長自身を長時間加熱すると悪臭を生ずることがあるため、高い加熱温度で短時間で処理することが好ましい。例えば、４０℃〜６０℃にて３時間〜２４時間、または６０℃〜１２０℃にて３０分間〜３時間処理することが好ましい。
【００１７】
発酵処理は、有機酸を産生し得、微生物によって産生される有機酸などによるｐＨの変化や伏見甘長中の成分を微生物が資化することにより、伏見甘長中には見られない成分（例えば有機酸、アミノ酸などの有用成分）へ変換され得る。
【００１８】
なお、発酵処理を行う前に以下に述べる酵素処理または中和処理を行った後に発酵処理を行っても良い。
【００１９】
（酵素処理または中和処理）
伏見甘長またはその破砕物の発酵を促進する目的で、酵素による細胞壁分解処理または中和処理のうちの少なくとも１種で処理し得る。
【００２０】
酵素処理に用いられる酵素としては、アミラーゼ、ペクチナーゼ、エンドアラバナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラーゼ、β−グルコシダーゼなどが挙げられる。好ましくは、ペクチナーゼである。これらの酵素は混合して用いてもよい。特に好ましくは、ペクチナーゼと、アミラーゼ、エンドアラバナーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラナーゼ、およびβ−グルコシダーゼからなる群より選択される少なくとも１種の酵素との混合酵素である。これらの添加量は、酵素の種類によって異なるが、通常、酵素濃度が、０．０００１〜０．５質量／容量％、好ましくは０．０００５〜０．３質量／容量％となるように添加される。
【００２１】
酵素処理の条件は、処理する伏見甘長の形状、酵素の種類、酵素濃度に応じて適宜設定すればよい。通常、３０〜７５℃、好ましくは３５〜７０℃にて３０分間〜７２時間、好ましくは１〜４８時間程度で処理される。
【００２２】
酵素処理は、発酵の阻害要因（例えば、ペクチン等の細胞壁を構成する多糖類）を分解することによって、発酵を短時間で終了させることができる。さらに、例えば、多糖類が分解されると、多糖類の分解物（単糖類、オリゴ糖など）が生成される。これらが、得られる本発明の発酵物中の新たな成分となり得る。例えば、オリゴ糖は、整腸作用、発酵物の可溶化を促進するなどの様々な効果を有する。単糖類は、さらに微生物の増殖に必要な栄養素を供給して微生物の有用物質の産生を促進すると考えられる。
【００２３】
中和処理は、最適なｐＨで発酵するために行われ、伏見甘長またはその破砕物のｐＨを４．０〜７．５に調節する。ｐＨの調節は、当業者が用いる通常の方法を用いて行われる。例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、重曹、クエン酸ナトリウムなどのｐＨ調整剤；電解水；クエン酸緩衝液や酢酸緩衝液などを添加して調節され得る。
【００２４】
（発酵処理）
上記伏見甘長またはその破砕物、あるいは酵素処理または中和処理のうちの少なくとも１種で処理した後に（以下これらをまとめて、伏見甘長またはその破砕物等ということがある）、発酵処理によって本発明の発酵物を得る。本発明の発酵処理における伏見甘長またはその破砕物等に微生物を接触させる態様としては、例えば、伏見甘長またはその破砕物等に付着している微生物をそのまま利用することおよび伏見甘長またはその破砕物等に微生物を添加することが挙げられる。高い体脂肪蓄積抑制または低減効果を有する発酵処理物を得る観点から、伏見甘長またはその破砕物等に微生物を添加することが好ましい。伏見甘長またはその破砕物等に付着している微生物をそのまま利用する場合には、伏見甘長またはその破砕物が腐敗する恐れがあるため注意を要する。
【００２５】
発酵処理としては、乳酸発酵、クエン酸発酵、アルコール発酵、酢酸発酵、これらの組み合わせによる発酵などが挙げられる。発酵の種類に応じて、乳酸菌、酵母菌、酢酸菌などを伏見甘長またはその破砕物等と接触させる。これらの中でも、乳酸発酵が好ましい。これらの発酵を組み合わせてもよい。発酵処理の時間は、例えば、２４時間〜７２時間で終了することが好ましく、発酵の種類に応じては、乳酸菌、酵母菌、酢酸菌などが用いられる。酵母や酢酸菌は、耐酸性が強いため、特に好ましく用いられる。
【００２６】
乳酸発酵は、上記伏見甘長またはその破砕物等を乳酸菌と接触させることによって行われる。乳酸発酵は、得られる発酵物中に乳酸が含有されるため、発酵処理中の腐敗も防げる点で好ましい。好ましくは発酵物の乾燥質量１００ｇ当り、乳酸を乾燥質量換算で０．１ｍｇ（０．０００１質量％）以上、より好ましくは０．５ｍｇ（０．０００５質量％）以上、さらに好ましくは１ｍｇ（０．００１質量％）以上含有し得る。
【００２７】
乳酸菌としては、ロイコノストック・メセントロイデス、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・デルブロイキ、ラクトバチルス・ガッセリ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ストレプトコッカス・サーモフィラス、ストレプトコッカス・フェカリス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ラクティス、バチルス・メセンテリカス（Bacillus mesentericus）などが挙げられる。これらの乳酸菌は単独でまたは組み合わせて用いられる。特にこれらの微生物の中でも植物由来の成分を基に発酵を行う観点から、ラクトバチルス・プランタラムが好適に用いられる。
【００２８】
乳酸菌は、伏見甘長またはその破砕物等の１００質量部に対して、乾燥菌体質量で好ましくは０．００５〜１０質量部、さらに好ましくは０．０１〜５．０質量部添加される。
【００２９】
また、乳酸菌の優先的な生育のために、グルタミン酸またはその塩を加えてもよい。添加するグルタミン酸の量は、伏見甘長またはその破砕物等に対して０．０５〜１質量％程度、好ましくは０．２質量％程度である。
【００３０】
さらに乳酸菌の発酵を促進するために、乳酸菌代謝性の糖を添加してもよい。この糖の添加は、糖分含量が少ない植物（糖分含量が１質量％未満）を発酵させる場合に有用である。あるいは、発酵の促進および発酵物への甘味の付加という目的で糖を添加してもよい。添加される糖は、乳酸菌が生育および発酵に利用し得る糖であり、例えば、庶糖、ぶどう糖、果糖、麦芽糖などが挙げられるが、これらに限定されない。これらの糖は、糖分が伏見甘長の糖分と合わせて約１〜６質量％になるように加えることが好ましい。
【００３１】
乳酸発酵は、乳酸菌が優先的に増殖できる環境をつくるため、伏見甘長またはその破砕物等のｐＨを予め中和処理により調節しておくことが好ましい。例えば、ラクトバチルス・プランタラムを用いる場合は、中和処理によってｐＨを４．０〜７．０に調節してから発酵を開始すれば、短期間でその発酵を終了させることができる。
【００３２】
乳酸発酵は、効率よく発酵処理を行うために嫌気性条件下で行うことが好ましい。嫌気性条件は、発酵処理過程での通気を行わなければよく、例えば、伏見甘長またはその破砕物等を発酵槽に入れた後、発酵槽を密封する事によっても行うことができる。また、脱気や窒素、二酸化炭素などのガスで満たすか、減圧することにより、あるいはそれらを組み合わせることによっても行うことができる。また、嫌気条件下で発酵を行うことにより、得られる発酵物の風味も良くなる。
【００３３】
乳酸発酵の条件に特に制限はない。発酵温度は、通常、４℃〜５０℃で行われ得る。発酵時間は、発酵温度に応じて適宜設定すればよく、２０℃〜５０℃で発酵を行う場合、１２時間〜７２時間、好ましくは２４時間〜７２時間である。さらに、風味を高める目的で４℃〜１０℃の低温発酵を行う場合は、５日間〜１４日間で処理することが好ましい。
【００３４】
乳酸発酵は、糖を加えて発酵を停止させることができる。このような糖としては、糖アルコール（例えば、ソルビトール）、オリゴ糖（例えば、マルトオリゴ糖、キトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖）などが挙げられる。このようなオリゴ糖は、整腸作用、う蝕の予防などに効果があり、得られる発酵物に機能性を付与し得る。
【００３５】
乳酸発酵は、伏見甘長中の成分を資化して有機酸やオリゴ糖などの有用成分を産生するだけでなく、発酵物を低いｐＨに維持できるため、他の雑菌の繁殖を防ぐことも可能である。また、乳酸菌を添加するため、風味の改善や整腸作用、酵素阻害作用などの生理活性の高い伏見甘長発酵物を得ることができる。
【００３６】
クエン酸発酵は、一般的には、酵母を、上記伏見甘長またはその破砕物等と好気的条件下で接触させて培養することによって行われる。クエン酸発酵において、乳酸菌をさらに添加して発酵すると、酵母の増殖が促進されやすく、さらに得られる発酵物の嗜好性も高まるため好ましい。
【００３７】
酵母としては、清酒酵母、ワイン酵母、ビール酵母、パン酵母などが用いられる。例えば、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属などに属する酵母が用いられ、好ましくは、サッカロミセス・セレビシエ、サッカロミセス・パストリアヌス、シゾサッカロミセス・ポンベなどが挙げられる。特にアミノ酸やビタミンなどの有用物質を産生する点で、サッカロミセス・セレビシエおよびその単離株が好ましい。
【００３８】
酵母は、伏見甘長またはその破砕物等の１００質量部に対して、乾燥体質量で０．００１〜１５質量部、好ましくは０．０１〜１０質量部添加する。
【００３９】
クエン酸発酵は、伏見甘長またはその破砕物等と酵母とを発酵槽に入れ、通気攪拌しながら、４℃〜４０℃、好ましくは１０℃〜３５℃で２４時間〜１４日間行う。特に伏見甘長の果実は酸性であるため、酵母発酵により香気成分が高くなるため、より嗜好性の高い発酵物を得ることができる。
【００４０】
クエン酸発酵は、酵母を用いて行われるため、発酵物中に酵母が産生するアミノ酸、タンパク質、ビタミン類などが含まれ、栄養価が高く嗜好性に優れる点で好ましい。
【００４１】
アルコール発酵は、酵母を、伏見甘長またはその破砕物等と嫌気条件下で接触させて培養することによって行われる。アルコール発酵に用いられる酵母の種類および量は、上記クエン酸発酵の場合と同様である。発酵条件も、嫌気条件にすること以外は、上記クエン酸発酵の場合と同様である。こうしてアルコール発酵で得られた伏見甘長発酵物は、さらに以下で述べる酢酸発酵に供することが好ましい。
【００４２】
酢酸発酵は、伏見甘長またはその破砕物等にアルコールを加え、所定のアルコール濃度にした後、酢酸発酵し得る微生物（酢酸菌）を添加することによって行われる。あるいは上記のアルコール発酵によって得られた本発明の発酵物に酢酸菌を添加して二段発酵させてもよい。
【００４３】
アルコール濃度は、酢酸菌が生育できる濃度であれば、特に制限されず、発酵時間などに応じて適宜調整すればよい。好ましくは１０質量／容量％以下、より好ましくは１〜６質量／容量％である。
【００４４】
酢酸菌としては、アセトバクター属に属する微生物、例えば、アセトバクター・アセチ、アセトバクター・パステウリアヌス、アセトバクター・ハンセニなどが挙げられる。
【００４５】
酢酸菌は、適切な培地で１５℃〜４０℃、好ましくは２５℃〜３５℃にて６〜４８時間予備培養しておくことが好ましい。予備培養した酢酸菌は、例えば、次のようにして得られる。まず、ポテト２００ｇ、破砕酵母３０ｇ、肝臓エキス２５ｇ、肉エキス５ｇ、チオグリコール酸培地１０ｇ、グルコース５ｇ、グリセロール１５ｇ、および炭酸カルシウム１５ｇを含有する１Ｌの酢酸菌培地（ｐＨ７．０）に酢酸菌を添加して、１５℃〜４０℃にて２４時間予備培養する。次いで、得られた培養物を遠心分離し、回収した菌体を滅菌水で洗浄し、再度遠心分離して上清を除去することによって、予備培養した酢酸菌が得られる。
【００４６】
酢酸発酵は、攪拌培養、振盪培養、および静置培養のいずれでも行うことができる。発酵温度は１０℃〜４０℃、好ましくは２０℃〜３５℃で行われる。発酵時間は、酢酸菌の添加量に応じて適宜設定され、通常、１日〜１週間が好適である。
【００４７】
上記発酵処理後は、さらに必要に応じて、濃縮処理や加熱処理を行ってもよい。例えば、減圧濃縮、凍結乾燥などの濃縮方法や、加圧式殺菌、熱交換式殺菌、蒸煮殺菌、限外ろ過などの当業者が通常用いる加熱方法が用いられる。加熱処理の場合、例えば、６０℃〜１２０℃にて５秒間〜１２時間行われる。なお、加熱処理を行うことで、乳酸菌から有用成分が発酵物の液中に溶解し得るため、好ましい。
【００４８】
（本発明の発酵物）
このようにして得られた本発明の発酵物は、そのまま用いても良いが、必要に応じて、その後当業者が通常用いる処理方法によって種々の態様にして使用することもできる。このような態様としては、例えば、上記のように発酵物を固液分離して上清を回収することにより得られた発酵エキス、該発酵物または該発酵エキスを濃縮処理した発酵ペースト、該発酵物または該発酵エキスを乾燥・粉末化処理した発酵粉末または発酵エキス末などが挙げられる。これらは、すべて本発明の発酵物の一態様である。
【００４９】
上記の本発明の発酵物の１つの実施態様である発酵粉末または発酵エキス末は、具体的には、該発酵物または発酵エキスを、乾燥、粉末化することによって得られる。乾燥は、当業者が通常用いる種々の方法が採用されるが、凍結乾燥、噴霧乾燥が好ましく用いられる。噴霧乾燥は、必要に応じて、デキストリン、シクロデキストリン、デンプン、マルトースなどの賦形剤を添加して行われる。発酵物または発酵エキスと賦形剤との混合比は、発酵物を乾燥する場合、好ましくは質量比で１：５〜１０：１、発酵エキスを乾燥する場合、好ましくは質量比１：１０〜５：１である。上記混合比で乾燥することにより得られる発酵粉末または発酵エキス末の褐変を防ぐことができる。
【００５０】
本発明の発酵物は、辛味を呈するトウガラシと異なり、辛味が少なく、香りおよび風味がよく嗜好性に優れ、さらに発酵によって、伏見甘長が本来有しない新規な機能である体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有するため、辛味を呈するトウガラシに比べて、より摂取しやすく安全な体脂肪の蓄積抑制または低減剤として利用しえる。特に、本発明の発酵物は、白色脂肪細胞の脂肪の分解を促進し、腸管からの脂質の吸収も抑制し得ることから、白色脂肪細胞の脂質分解促進剤または脂質吸収抑制剤として利用し得る。さらに、本発明の発酵物は、褐色脂肪細胞に対して脂肪解促進効果も有することから、辛味がほとんどないにもかかわらず、基礎代謝向上剤として利用できるだけでなく、血流改善効果も得られる。これらの総合的な効果によって、体脂肪の蓄積抑制または低減効果が得られるものと考えられる。
【００５１】
本発明の組成物は、上述の作用を有するため、該作用を得ることを目的とした種々の形態で利用される。この組成物は、さらに香りがよく、辛味を呈するトウガラシのような刺激性を持つ物質をほとんど含有しないため、特別な処理を必要とすることなく種々の目的に利用される。例えば、食品、医薬品、医薬部外品などとして利用される。
【００５２】
なお、本発明の発酵物は、体脂肪の蓄積抑制または体脂肪の低減効果などを有し、これらの効果を得るための摂取量、配合量は特に制限はないが、摂取量については、成人一日あたりの摂取量が、例えば本発明の発酵物を発酵エキスとした場合は、１日当たりの摂取量の下限値は、乾燥質量換算で１ｍｇ以上、好ましくは１０ｍｇ以上、最も好ましくは１００ｍｇ以上であり、上限値は、２０００ｍｇ以下、好ましくは１０００ｍｇ以下である。また、食品中への配合量は、その剤形によっても異なるが、例えば、本発明の発酵物を発酵エキスとした場合における配合量の下限値は、乾燥質量換算で０．００００１質量％以上、好ましくは０．０００１質量％以上、最も好ましくは０．１質量％以上であり、配合量の上限値は、９０質量％以下、好ましくは６０質量％以下である。
【００５３】
また、発酵エキスとせずにそのまま用いる場合は、成人の１日当たりにおける摂取量の下限値は、乾燥質量換算で１０ｍｇ以上、好ましくは１００ｍｇ以上であり、上限値は、２００００ｍｇ以下、好ましくは１００００ｍｇ以下である。また、食品中への配合量は、その剤形によっても異なるが、発酵物をそのまま用いた場合における配合量の下限値は、乾燥質量換算で０．０００１質量％以上、好ましくは０．００１質量％以上、最も好ましくは０．１質量%以上であり、配合量の上限値は、９０質量％以下、好ましくは６０質量％以下である。
【００５４】
このような本発明の発酵物を例えば経口投与可能な剤形にする場合は、必要に応じて、例えば、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｂ１２、ナイアシン、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体等）、ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛等）、セレン、キチン、キトサン、レシチン、ポリフェノール（フラボノイド、これらの誘導体等）、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテイン等）、キサンチン誘導体（カフェイン等）、タンパク質またはペプチド（大豆タンパク、コラーゲン、エラスチン、シルクまたはこれらの分解物等）、ムコ多糖類（ヒアルロン酸、コンドロイチン、デルマタン、ヘパラン、ヘパリン、ケタラン、これらの誘導体等）、アミノ糖（グルコサミン、アセチルグルコサミン、ガラクトサミン、アセチルガラクトサミン、ノイラミン酸、アセチルノイラミン酸、ヘキソサミン、それらの塩等）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖等）、リン脂質（フォスファチジルコリン、フォスファチジルセリン等）、スフィンゴ脂質及びその誘導体（スフィンゴミエリン、セラミド等）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタン等）、リグナン類（セサミン等）、真珠粉末、α−リポ酸またはその誘導体、コエンザイムＱ１０、およびこれらを含有する動植物抽出物、根菜類（ショウガ等）などを添加して、加工食品とすることができる。このような中でも、以下に示す脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分、糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分と組み合わせることが好ましい。
【００５５】
（脂質吸収抑制成分、脂質代謝促進成分）
本発明における脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分の少なくともいずれかの成分の添加は、相乗的な脂質の蓄積抑制または体脂肪低減効果を得ることができる。
【００５６】
ここでいう脂質吸収抑制成分としては、例えば、キトサンおよびその誘導体、サイリウム、プロアントシアニジンなどの胆汁酸を排泄する作用を有する成分、ガロタンニン、ビワ葉等およびその抽出物などのリパーゼ阻害作用を有する成分が挙げられる。なお、例えば、松樹皮抽出物といったプロアントシアニジンを多く含む植物抽出物を、プロアントシアニジンとして用いることも可能である。
【００５７】
脂質代謝促進成分としては、リボフラビン類、茶カテキン類、異性化リノール酸、カフェイン、カプサイシン、カルニチン、コエンザイムＱ１０、α−リポ酸およびその誘導体、大豆ペプチド、分岐アミノ酸、フォスファチジルコリン、アリルスルフィド化合物、フォルスコリン、ベルゲニン、ケルセチン、アスチルビン、ヒドロキシクエン酸、およびこれらの塩などが挙げられる。もちろん、これら脂質代謝促進成分を含有する植物抽出物、例えば、茶、葛花、コレウスフォコリ、アカショウマ、黄杞、大豆、辛味を有するトウガラシ、ソバ、ニンニク、タマネギ、コーヒーなどの抽出物を、脂質代謝促進成分として用いることも可能である。
【００５８】
上記脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分は、目的に応じて適宜配合される。例えば、脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分のいずれかの成分のみを添加してもよく、脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分の両方を添加してもよい。もちろん、２種類以上の脂質吸収抑制成分を添加しても、２種類以上の脂質代謝促進成分を添加してもよい。
【００５９】
なお、本発明の発酵物と脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分との配合比は、特に制限はない。例えば、本発明の発酵物１００質量部に対して、脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の下限値は、１質量部以上、好ましくは５質量部以上とするのがよい。また、本発明の発酵物１００質量部に対して、脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の上限値は、５０００質量部以下、好ましくは２５００質量部以下とし、剤形に合わせて適宜調整すればよい。
【００６０】
（糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分）
また、本発明において、本発明の発酵物と共に糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分を少なくともいずれかの成分の配合は、脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分の少なくともいずれかの成分の添加と同様に、相乗的な効果が期待できる。糖の代謝促進成分を有する原料としては、例えば、チアミン類（例えばビタミンＢ１）、ピリドキシン類、アミノ酸（イソロイシン、ロイシン、バリン、セリン、プロリン、グリシン、アラニン、及びスレオニン等）、クエン酸、リンゴ酸、モリブデン、リン、イオウ、クロム、カリウム、マンガン、カプサイシノイド、甘藷茎葉に見られるトリカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸およびこれらの誘導体、ニンジンのサポニンなどの成分自体や、これら成分を有する原料、さらに、同様の作用を有するレイシ、黒酢、大豆、菊芋、ビール酵母などが挙げられる。これらを配合することにより、体内での糖の蓄積を抑制し、ひいては糖の吸収によって引き起こされる体脂肪が増加することを抑制し得る。
【００６１】
糖の消化吸収抑制成分を有する原料としては、例えば、α―アミラーゼ阻害剤、グルコシダーゼ阻害剤などの糖分解酵素の阻害作用を有する成分自身、そのような阻害作用を有する成分を有する原料、水溶性食物繊維などの糖吸収抑制効果がある成分自身、およびそのような糖吸収抑制効果がある成分を有する原料などが挙げられる。糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料の具体例としては、α−アミラーゼ阻害活性を有するタンパク質やタンニンが挙げられる。α−アミラーゼ阻害タンパク質は、小麦やライ麦等の中に含まれている。タンニンは、大麦、茶、グァバ、ビワ等に含まれている。
【００６２】
また、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料として、α−グルコシダーゼ阻害物質を用いてもよい。ここでいうα−グルコシダーゼ阻害物質としては、例えば、１−デオキシノジリマイシン、サラシノール、１−デオキシノジリマイシン、これらを含有すサラシア・レティキュラタや桑葉が挙げられる。また、α−グルコシダーゼ阻害物質の別の例としては、ボタンピ、カシュウ、ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモン、クダモノトケイソウおよびストレリチア、阿仙薬、サッサフラス、イエロードック、メドウスィートなどが挙げられる。さらに、別のα−グルコシダーゼ阻害物質としては、例えば、ウンシュウミカン、ダイダイ、ハッサク、ナツミカン、イヨカン、オレンジ、レモン、グレープフルーツ、ユズ、ライムなどの柑橘類に含まれるジヒドロカルコン化合物またはフラバノン配糖体、ウラジロガシ、オオボウシバナ、芍薬、チョウジ、ラフマ、ケイヒ、ユーカリ、エゾイシゲ、カモミール、シソ、ノイチゴ、トウチ、クローブ、ヒドロキシプロリンなどが挙げられる。
【００６３】
また、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料として、糖質消化酵素の阻害効果がある物質を用いることもできる。ここでいう糖質消化酵素の阻害効果がある物質としては、例えば、茶、グァバ、テンチャ、イチョウ葉、ブドウ種子や松樹皮抽出物等に含まれるポリフェノールや、マオウ、カリン、インゲン豆、ナンバンカラスウリ、カキ葉、プーアル茶、オトギリソウ、リンゴ、タラ、アカメガシワ、サンシュユ、訶子、トチュウ葉などが挙げられる。
【００６４】
また、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料としては、その糖質消化酵素阻害物質を含んでいる物質（植物・動物など）の粉末や抽出物等を用いることもできる。
【００６５】
さらに、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料としては、例えば、糖の吸収を阻害する成分、サポニン、コンズリトールＡ、グルマリン、及び食物繊維などが挙げられる。特に、ギムネマ・シルベスタ、ギムネマ・イノドラム、タラ、トンブリ等に含まれるサポニン、ギムネマ・シルベスタに含有されるコンズリトールＡ、グルマリンなどを、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料として用いてもよい。糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料としての食物繊維には、難消化性デキストリン、ガラクトマンナン、可溶性アルギン酸ナトリウム、イヌリンなどを、例として挙げることができる。食物繊維は、食餌をゲル化することにより、糖の腸管からの吸収を抑制すると考えられている。
【００６６】
なお、本発明の発酵物と糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分との配合比は、特に制限はない。例えば、本発明の発酵物１００質量部に対して、糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の下限値は、１質量部以上、好ましくは５質量部以上とするのがよい。また、本発明の発酵物１００質量部に対して、糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の上限値は、５０００質量部以下、好ましくは２５００質量部以下とし、剤形に合わせて適宜調整すればよい。
【００６７】
また、本発明の発酵物を添加する剤形は特に制限はない。例えば、ハードカプセル、ソフトカプセルなどのカプセル剤；錠剤；丸剤；粉末；顆粒；ティーバッグ、液剤などの当業者が食品あるいは医薬品として通常用いる形態で利用される。これらは、形状または好みに応じて、そのまま摂取してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて飲んでも良く、成分を浸出させたものを摂取しても良い。これらは、さらにその形態に応じて必要とされる成分を含有し得る。例えば、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料などの添加剤を含有し得る。
【００６８】
例えば、健康飲料として利用する場合は、液体状の発酵物をそのまま用いるか、粉末状の発酵物を水などに溶解した物、あるいは種々の調味料、例えば、グラニュー糖、蜂蜜、ソルビットなどの甘味料、アルコール、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸などの酸味料、香料、色素などを加えて、好みの味に調整して用いることができる。そして、このような発酵物は、他の発酵ジュースや野菜ジュースなど（例えば、人参ジュースあるいは混合野菜ジュース）と混合すれば、更に栄養価の高いジュースとすることができる。あるいは、寒天などに混合してゼリーとすることもでき、野菜または果物ジュース、乳製品などと組み合わせて、冷却・混練など当業者が通常行う方法によって、シャーベット、フローズンヨーグルト、アイスクリームなどの食品とすることもできる。また、本発明の発酵物を含有する飲料、および食品が、低ｐＨであれば、１２０℃、４分の完全殺菌をしなくても、１００℃以下の殺菌条件で殺菌できる。例えば、ｐＨが４．０以下の場合では、６５℃、１０分相当の殺菌条件で十分に殺菌できる。
【実施例】
【００６９】
以下、本発明の実施態様をより詳細に説明するが、本実施例に限定されないことはいうまでもない。
【００７０】
（実施例１：伏見甘長の発酵エキス末の調整）
伏見甘長をフードプロセッサで破砕して得られた破砕物１Ｋｇにイオン交換水１０Ｌを加えて攪拌した後に、ブドウ糖を０．１Ｋｇおよび乳酸菌（ラクトバチルス・プランタラム）を乾燥質量で１０ｇ添加して、攪拌した後に、３５℃で２４時間発酵処理した。発酵終了後に、得られた発酵物から遠心分離を行い、上清を回収して発酵エキスを得た。次いで、この発酵エキスを１００℃、２分間の加熱処理を行った後に、減圧濃縮乾固して０．４Ｋｇの発酵エキス末を得た。
【００７１】
（比較例１：伏見甘長の非発酵エキス末の調整）
実施例１で用いた伏見甘長を同様にフードプロセッサで破砕して得られた破砕物１Ｋｇにイオン交換水１０Ｌを加えて攪拌した後に、遠心分離を行い、上清を回収して非発酵エキスを得た。次いで、このエキスを１００℃、２分間の加熱処理を行った後に、減圧濃縮乾固して０．３Ｋｇの非発酵エキス末を得た。
【００７２】
（実施例３：リパーゼ阻害効果の検討）
上記にて得られた実施例１の発酵エキス末および比較例１の非発酵エキス末を用いて、以下の方法にてリパーゼ阻害作用を測定した。まず、各エキス末２０ｍｇを１ｍＬの精製水に溶解して得た試験液に、１０質量／容量％の炭酸ナトリウム（和光純薬株式会社）でｐＨ８．５に調整し、蒸留水で全量を２ｍＬに調整した。この溶液に、４ｍＬの基質液（牛乳を蒸留水で３倍希釈し、炭酸ナトリウムでｐＨ８．５に調整した溶液）および４質量／容量％の豚膵臓由来のリパーゼ（和光純薬株式会社）を添加した。この溶液のｐＨを直ちに測定し、さらに３７℃にて２０分間反応させた後に再度ｐＨを測定し、このｐＨの差（ΔＡとする）を求めた。対照として、上記試験液の代わりに、精製水を用いたこと以外は上記と同様に行い、ｐＨの差（ΔＢとする）を求めた。ΔＡおよびΔＢを用いて、以下の式（Ｉ）よりリパーゼ阻害率（％）を求めた。
【００７３】
【００７４】
結果を表１に示す。なお、表１の結果は三重測定の結果の平均値および標準偏差を示す。
【００７５】
【表１】
【００７６】
表１の結果から、本発明の発酵エキス末は、非発酵エキス末に比べ、リパーゼの活性阻害効果が上昇していることがわかる。すなわち、本発明の発酵物は、発酵処理によってリパーゼ阻害効果が増強されたことが分かる。この効果は、リパーゼの阻害によって、腸管からの脂質の吸収を抑制し得ることを示し、脂質吸収抑制剤として利用しえることが分かる。
【００７７】
（実施例２：白色脂肪細胞の脂肪分解促進効果の検討）
１３週齢の雄性ラットより精巣上体周囲の脂肪組織を採取し、実施例１の発酵エキス末または比較例１の非発酵エキス末をそれぞれ１ｍｇ／ｍＬならびに辛味を呈するトウガラシの成分であるカプサイシン（和光純薬工業株式会社）をそれぞれ１ｍｇ／ｍＬとなるようにＭ１９９培地へ溶解した各１ｍＬの培地に、採取した脂肪組織を０．５ｇずつ懸濁し、３７℃、３時間培養した。次いで、各培地上清を回収し、脂肪の分解によって上清中に生じる遊離のグリセロールをグリセロール測定キット（商品名：Ｆキットグリセロール、日本ロシュ株式会社製）を用いて測定した。結果を表２に示す。なお、表中の値は、三重測定にて得られた結果の平均値および標準偏差である。
【００７８】
【表２】
【００７９】
表２の結果から、発酵エキス末は、非発酵エキス末並びに辛味を呈するトウガラシの成分であるカプサイシンに比べ、優れた脂肪分解促進作用が得られることが分かる。すなわち、本発明の発酵物は、発酵によって優れた脂肪分解促進作用が得られ、脂肪分解促進剤として利用し得ることが分かる。
【００８０】
（実施例３：褐色脂肪細胞の脂肪分解促進効果の検討）
実施例１の発酵エキス末の効果を更に検証するために、褐色脂肪培養キット（株式会社ホクド）を用いて、褐色脂肪における脂肪分解促進効果について検証を行った。より具体的には、９６ウェルプレートに４×１０３細胞／ウェルとなるように該キットの未分化の褐色脂肪細胞を播種し、２４時間培養後、培地を該キットに付属している分化誘導用培地に置換し、４８時間培養後、実施例１の発酵エキス末、比較例１の非発酵エキス末並びに実施例３で使用したカプサイシンを１ｍｇ／ｍＬとなるように該キットに付属している維持培地へ溶解した培地に置換して（各１００μL／ウェルとなるように置換）、４日間培養した。なお、培養条件は、５容量％ＣＯ２雰囲気下で３７℃で行った。培養終了後、上清を回収し、実施例２と同様にして、遊離グリセロールを測定した。また、細胞は、０．２％ＴｒｉｔｏｎＸを含有するＰＢＳ（−）１００μＬに溶解した後に、蛋白質測定キット（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒａｐｉｄ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ ＷＡＫＯ、和光純薬工業株式会社）で蛋白質量を測定した。そして、蛋白質１ｍｇ当たりの遊離グリセロール量（ｍｇ）を算出した。結果を表３に示す。なお、表中の値は、三重測定にて得られた結果の平均値および標準偏差である。
【００８１】
【表３】
【００８２】
表３の結果から、発酵エキス末は、非発酵エキス末並びに辛味を呈するトウガラシの成分であるカプサイシンに比べ、褐色脂肪細胞においても優れた脂肪分解作用が得られることが分かる。これは、公知のカプサイシンによる体熱産生促進よりも優れた効果が得られることがわかり、辛味をほとんど有さないにもかかわらず、生体内の基礎代謝向上剤として利用し得ることが分かる。
【００８３】
なお、本発明の発酵物は、当然ながら辛味を有さないばかりか、本実施例３で行った試験では、カプサイシンを含有する培地で培養した褐色脂肪細胞に細胞毒性が見られたのに対し、本発明の発酵物は細胞毒性が見られなかったことから、辛味を呈するトウガラシよりも安全かつ摂取しやすい形態で食品や医薬品として利用し得ることが分かる。
【００８４】
（実施例５：体脂肪低減効果の検討）
さらに実施例１および比較例２の各エキス末を用いて体脂肪に対する効果を評価した。
【００８５】
まず、７週齢の雌性ＩＣＲ系マウス２４匹を標準飼料（ＭＦ飼料、オリエンタル酵母工業株式会社）で１週間馴化した。次いで、１群あたりの平均体重が均一となるようにしたこと以外はランダムに１群６匹の４群に群分けを行った。そして、この内の１群には１質量％の実施例１の発酵エキス末及び４０質量％の牛脂、９質量％のグラニュー糖を含有する試験飼料１を自由摂取させた。残りの群のうち、もう１群には試験飼料１の実施例１のエキス末の代わりに比較例１の非発酵エキス末を含有していること以外は同様の組成の試験飼料２を自由摂取させた。さらに、もう１群には、試験飼料１の実施例１のエキス末を含有しなかったこと以外は、同様の対照飼料を自由摂取させ、残りの１群には、標準飼料を自由摂取させた。
各群の自由摂取開始から２５日目に体重を測定した。測定後、下記式（ＩＩ）にて体重増加率（％）を測定した。
【００８６】
【００８７】
さらに、皮下脂肪を実験動物用Ｘ線ＣＴ（商品名：ＬＡＴｈｅａｔａ ＬＣＴ−１００Ａ、アロカ社製）にて測定した後に、解剖を行い、後腹膜脂肪および子宮周囲脂肪を摘出して合計の重量（内臓脂肪の重量）を測定し、体重１００ｇ当たりの重量を算出した。結果を表４に示す。なお、表中の値は、各群より得られた値の平均値および標準偏差である。
【００８８】
【表４】
【００８９】
表４の結果から、実施例１の発酵エキス末を含有する試験飼料１は、比較例１の非発酵エキス末を含有する試験飼料２並びに対照飼料に比べ、内臓脂肪が低下しており、標準飼料を摂取した群と同等程度の脂肪量であった。すなわち、本発明の発酵物は、発酵によって優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有することから、体脂肪の蓄積抑制または低減剤として利用し得ることが分かる。また、対照飼料を摂取した群の体重増加率が３４．７±３．４％（値は平均値±標準偏差）であったのに対し、本発明の発酵エキス末を含有する試験飼料１を摂取した群の体重は３０．９±１．６％（値は平均値±標準偏差）であり、標準飼料を摂取した群の体重が３１．７±１．２％（値は平均値±標準偏差）であったため、優れた体重の増加を抑制する効果も得られることが分かった。さらに、実験動物用Ｘ線ＣＴの結果から、皮下脂肪においても、脂肪の蓄積抑制または低減効果が得られていた。
【００９０】
（実施例６：血流改善効果の検証）
実施例１にて得られた発酵エキス末を用いて以下のようにして血流改善効果を測定した。まず、６名の健常人の被験者を集めた。次いで、精製水を準備し、精製水を摂取する前に各被験者の右手人差し指の先端から第一関節までの血流量を測定した。なお、血流量は、血流計（レーザー血流画像化装置ＰＩＭ II；ＳｗｅｄｅｎＰｅｒｍｉｅｄ社）を用いた。次いで、被験者に精製水１０ｍＬを摂取してもらい、摂取３０分後に再度同一の箇所の血流量を測定した。そして、得られた値から、下記の式（ＩＩＩ）により、血流増加率（％）を測定した。
【００９１】
【００９２】
翌日、同一の被験者等に参加してもらい、精製水の代わりに実施例１の発酵エキス末を２０ｍｇ／１０ｍＬで含有する飲料を１０ｍＬ摂取してもらったこと以外は同様にして試験を行い、血流増加率を測定した。結果を表５に示す。なお、表中の値は、各試験における被験者６名の測定値の平均値および標準偏差である。
【００９３】
【表５】
【００９４】
表５の結果から、精製水においては、血流量が低下する傾向が見られたが、本発明の発酵物は、辛味を呈さないにもかかわらず、血流の増加が見られたことから、血流改善効果が得られることが分かった。すなわち、本発明の発酵物は、血流改善剤としても利用し得ることが分かり、この効果は、基礎代謝の向上を促進するものと考えられた。
【産業上の利用可能性】
【００９５】
本発明の伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物は、優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有し、体脂肪の蓄積抑制または低減剤として利用できるため、有用である。より詳細には、本発明の発酵物は、白色脂肪細胞における脂肪分解促進作用や、リパーゼ阻害作用、血流改善作用等を有するため、これらの効果によって、伏見甘長の発酵前に比べ、優れた体脂肪蓄積抑制または低減効果を得ることができる。特に辛味を呈するトウガラシと違い、辛味を呈さないことから、様々な剤形に応用が可能であり、安全性も高い。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、日本人の食生活が大きく変化して肉食中心の高脂肪食を摂取するようになったこと、ならびにストレスや運動不足により、中高年齢層だけでなく、青少年においても、肥満とこれに伴う体脂肪率の増加が問題となっている。
【０００３】
そもそも体脂肪は、摂取した脂質や糖質を脂肪として体内に蓄積したものであり、この脂肪は、主に脂肪細胞内に蓄積されたものである。この脂肪細胞は、主に褐色脂肪細胞と白色脂肪細胞に分類され、特に白色脂肪細胞は、皮下脂肪や内臓脂肪を構成する細胞であり、この白色脂肪細胞中に蓄積した脂肪を低減させるまたは白色脂肪細胞への脂肪の蓄積を抑制することが、体脂肪を効率よく減らす上で重要である。
【０００４】
これまでに、この脂肪細胞における脂質の分解を促進する様々な検討がされているが、十分な効果を得ることはできなかった（例えば特許文献１〜３を参照）。
【０００５】
また、トウガラシは、通常、辛味を呈する成分であるカプサイシンを含有しており、この効果として褐色脂肪細胞に対する脂肪分解促進効果によって、体熱産生が促進され、これによって基礎代謝を向上させて体脂肪を低減し得るとして食されているが、この辛味によって摂取量が制限され、十分な効果を得ることが難しいといった問題点がある。一方、辛味が少ない、すなわちカプサイシンをほとんど含有していない伏見甘長などのトウガラシの品種では、摂取はしやすいがこのような体熱産生促進効果および基礎代謝向上効果は得られておらず、体脂肪の低減効果が十分得られない。
【特許文献１】特開２００４−７５６５３号公報
【特許文献２】特開２００２−１５４９８７号公報
【特許文献３】特開２００２−２０３１２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、辛味が少ないトウガラシ、特に伏見甘長を加工して得られた新規な体脂肪蓄積抑制または低減剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、辛味が少ないトウガラシの一つである伏見甘長を発酵処理することによって得られた発酵物は優れた体脂肪低減効果を有することを見出し、本発明に至った。
【０００８】
すなわち本発明は、伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物を有効成分とする体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【０００９】
好ましい実施様態は、前記発酵処理が、乳酸菌を用いた発酵である体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【００１０】
より好ましい実施様態は、前記体脂肪蓄積抑制または低減剤が、白色脂肪細胞の脂質分解促進作用である、体脂肪の蓄積抑制または低減剤に関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の伏見甘長を発酵処理することによって得られた発酵物は優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有する。より具体的には、腸管からの脂質の吸収を抑制および白色脂肪細胞内の脂質分解促進を行うことで、体脂肪の蓄積抑制または低減効果を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明の本発明の伏見甘長を発酵処理することによって得られた発酵物（以下、単に本発明の発酵物ということが有る）を有効成分とする体脂肪の蓄積抑制または低減剤を詳細に説明する。なお、本発明は、以下の記載のみに限定されず、当業者が理解し得る特許請求の記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１３】
（伏見甘長）
本発明の伏見甘長は、京都の伏見地区で作られた細長く、辛味が少ない品種のトウガラシであり、果長は１０〜１５ｃｍ程度の長さを有する野菜である。この伏見甘長は、京野菜として知られている。本発明では、この伏見甘長の果実全体またはその一部（たとえば種子など）を用いる。
【００１４】
なお、本発明の伏見甘長の他にも、辛味の少ない品種である、シシトウや万願寺を用いても良いが、果実が大ぶりである伏見甘長が好ましく用いられる。また、本発明に用いる伏見甘長には、この伏見甘長の交配種も包含する。
【００１５】
本発明に用いる伏見甘長は、そのまま後述する処理に供することも可能であるが、処理に供される植物体の表面積を増加させて、効率よく植物体を処理できる点で、予め植物体を破砕することが好ましい。例えば、植物体をスライサーまたはダイサーでカットした後に、マスコロイダー、ブレンダー、摩砕ミルなどで、破砕片の粒径が、好ましくは１００〜５０００μｍ、より好ましくは２００〜３０００μｍになるまで破砕する。必要に応じて、水、エタノールなどを適宜加えて破砕してもよい。
【００１６】
次いで、植物体またはその破砕物を発酵処理する。発酵処理は、伏見甘長またはその破砕物へ微生物を接触させることで行うことができ、処理を効率よく行い得るという点では、植物体または破砕物に、予め水を加えることが好ましい。加える水の量は、植物体または破砕物の全重量に対して、好ましくは等量〜５倍量、より好ましくは２〜３倍量である。水を加えることによって、菌の生育環境が好適になる。なお、発酵処理の前に殺菌や伏見甘長中の成分を溶出させるために加熱処理を行っても良い。加熱処理は、植物体またはその破砕物を、４０℃〜１２０℃の範囲の温度で３０分〜２４時間加熱することによって行われる。なお、伏見甘長自身を長時間加熱すると悪臭を生ずることがあるため、高い加熱温度で短時間で処理することが好ましい。例えば、４０℃〜６０℃にて３時間〜２４時間、または６０℃〜１２０℃にて３０分間〜３時間処理することが好ましい。
【００１７】
発酵処理は、有機酸を産生し得、微生物によって産生される有機酸などによるｐＨの変化や伏見甘長中の成分を微生物が資化することにより、伏見甘長中には見られない成分（例えば有機酸、アミノ酸などの有用成分）へ変換され得る。
【００１８】
なお、発酵処理を行う前に以下に述べる酵素処理または中和処理を行った後に発酵処理を行っても良い。
【００１９】
（酵素処理または中和処理）
伏見甘長またはその破砕物の発酵を促進する目的で、酵素による細胞壁分解処理または中和処理のうちの少なくとも１種で処理し得る。
【００２０】
酵素処理に用いられる酵素としては、アミラーゼ、ペクチナーゼ、エンドアラバナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラーゼ、β−グルコシダーゼなどが挙げられる。好ましくは、ペクチナーゼである。これらの酵素は混合して用いてもよい。特に好ましくは、ペクチナーゼと、アミラーゼ、エンドアラバナーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラナーゼ、およびβ−グルコシダーゼからなる群より選択される少なくとも１種の酵素との混合酵素である。これらの添加量は、酵素の種類によって異なるが、通常、酵素濃度が、０．０００１〜０．５質量／容量％、好ましくは０．０００５〜０．３質量／容量％となるように添加される。
【００２１】
酵素処理の条件は、処理する伏見甘長の形状、酵素の種類、酵素濃度に応じて適宜設定すればよい。通常、３０〜７５℃、好ましくは３５〜７０℃にて３０分間〜７２時間、好ましくは１〜４８時間程度で処理される。
【００２２】
酵素処理は、発酵の阻害要因（例えば、ペクチン等の細胞壁を構成する多糖類）を分解することによって、発酵を短時間で終了させることができる。さらに、例えば、多糖類が分解されると、多糖類の分解物（単糖類、オリゴ糖など）が生成される。これらが、得られる本発明の発酵物中の新たな成分となり得る。例えば、オリゴ糖は、整腸作用、発酵物の可溶化を促進するなどの様々な効果を有する。単糖類は、さらに微生物の増殖に必要な栄養素を供給して微生物の有用物質の産生を促進すると考えられる。
【００２３】
中和処理は、最適なｐＨで発酵するために行われ、伏見甘長またはその破砕物のｐＨを４．０〜７．５に調節する。ｐＨの調節は、当業者が用いる通常の方法を用いて行われる。例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、重曹、クエン酸ナトリウムなどのｐＨ調整剤；電解水；クエン酸緩衝液や酢酸緩衝液などを添加して調節され得る。
【００２４】
（発酵処理）
上記伏見甘長またはその破砕物、あるいは酵素処理または中和処理のうちの少なくとも１種で処理した後に（以下これらをまとめて、伏見甘長またはその破砕物等ということがある）、発酵処理によって本発明の発酵物を得る。本発明の発酵処理における伏見甘長またはその破砕物等に微生物を接触させる態様としては、例えば、伏見甘長またはその破砕物等に付着している微生物をそのまま利用することおよび伏見甘長またはその破砕物等に微生物を添加することが挙げられる。高い体脂肪蓄積抑制または低減効果を有する発酵処理物を得る観点から、伏見甘長またはその破砕物等に微生物を添加することが好ましい。伏見甘長またはその破砕物等に付着している微生物をそのまま利用する場合には、伏見甘長またはその破砕物が腐敗する恐れがあるため注意を要する。
【００２５】
発酵処理としては、乳酸発酵、クエン酸発酵、アルコール発酵、酢酸発酵、これらの組み合わせによる発酵などが挙げられる。発酵の種類に応じて、乳酸菌、酵母菌、酢酸菌などを伏見甘長またはその破砕物等と接触させる。これらの中でも、乳酸発酵が好ましい。これらの発酵を組み合わせてもよい。発酵処理の時間は、例えば、２４時間〜７２時間で終了することが好ましく、発酵の種類に応じては、乳酸菌、酵母菌、酢酸菌などが用いられる。酵母や酢酸菌は、耐酸性が強いため、特に好ましく用いられる。
【００２６】
乳酸発酵は、上記伏見甘長またはその破砕物等を乳酸菌と接触させることによって行われる。乳酸発酵は、得られる発酵物中に乳酸が含有されるため、発酵処理中の腐敗も防げる点で好ましい。好ましくは発酵物の乾燥質量１００ｇ当り、乳酸を乾燥質量換算で０．１ｍｇ（０．０００１質量％）以上、より好ましくは０．５ｍｇ（０．０００５質量％）以上、さらに好ましくは１ｍｇ（０．００１質量％）以上含有し得る。
【００２７】
乳酸菌としては、ロイコノストック・メセントロイデス、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・デルブロイキ、ラクトバチルス・ガッセリ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ストレプトコッカス・サーモフィラス、ストレプトコッカス・フェカリス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ラクティス、バチルス・メセンテリカス（Bacillus mesentericus）などが挙げられる。これらの乳酸菌は単独でまたは組み合わせて用いられる。特にこれらの微生物の中でも植物由来の成分を基に発酵を行う観点から、ラクトバチルス・プランタラムが好適に用いられる。
【００２８】
乳酸菌は、伏見甘長またはその破砕物等の１００質量部に対して、乾燥菌体質量で好ましくは０．００５〜１０質量部、さらに好ましくは０．０１〜５．０質量部添加される。
【００２９】
また、乳酸菌の優先的な生育のために、グルタミン酸またはその塩を加えてもよい。添加するグルタミン酸の量は、伏見甘長またはその破砕物等に対して０．０５〜１質量％程度、好ましくは０．２質量％程度である。
【００３０】
さらに乳酸菌の発酵を促進するために、乳酸菌代謝性の糖を添加してもよい。この糖の添加は、糖分含量が少ない植物（糖分含量が１質量％未満）を発酵させる場合に有用である。あるいは、発酵の促進および発酵物への甘味の付加という目的で糖を添加してもよい。添加される糖は、乳酸菌が生育および発酵に利用し得る糖であり、例えば、庶糖、ぶどう糖、果糖、麦芽糖などが挙げられるが、これらに限定されない。これらの糖は、糖分が伏見甘長の糖分と合わせて約１〜６質量％になるように加えることが好ましい。
【００３１】
乳酸発酵は、乳酸菌が優先的に増殖できる環境をつくるため、伏見甘長またはその破砕物等のｐＨを予め中和処理により調節しておくことが好ましい。例えば、ラクトバチルス・プランタラムを用いる場合は、中和処理によってｐＨを４．０〜７．０に調節してから発酵を開始すれば、短期間でその発酵を終了させることができる。
【００３２】
乳酸発酵は、効率よく発酵処理を行うために嫌気性条件下で行うことが好ましい。嫌気性条件は、発酵処理過程での通気を行わなければよく、例えば、伏見甘長またはその破砕物等を発酵槽に入れた後、発酵槽を密封する事によっても行うことができる。また、脱気や窒素、二酸化炭素などのガスで満たすか、減圧することにより、あるいはそれらを組み合わせることによっても行うことができる。また、嫌気条件下で発酵を行うことにより、得られる発酵物の風味も良くなる。
【００３３】
乳酸発酵の条件に特に制限はない。発酵温度は、通常、４℃〜５０℃で行われ得る。発酵時間は、発酵温度に応じて適宜設定すればよく、２０℃〜５０℃で発酵を行う場合、１２時間〜７２時間、好ましくは２４時間〜７２時間である。さらに、風味を高める目的で４℃〜１０℃の低温発酵を行う場合は、５日間〜１４日間で処理することが好ましい。
【００３４】
乳酸発酵は、糖を加えて発酵を停止させることができる。このような糖としては、糖アルコール（例えば、ソルビトール）、オリゴ糖（例えば、マルトオリゴ糖、キトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖）などが挙げられる。このようなオリゴ糖は、整腸作用、う蝕の予防などに効果があり、得られる発酵物に機能性を付与し得る。
【００３５】
乳酸発酵は、伏見甘長中の成分を資化して有機酸やオリゴ糖などの有用成分を産生するだけでなく、発酵物を低いｐＨに維持できるため、他の雑菌の繁殖を防ぐことも可能である。また、乳酸菌を添加するため、風味の改善や整腸作用、酵素阻害作用などの生理活性の高い伏見甘長発酵物を得ることができる。
【００３６】
クエン酸発酵は、一般的には、酵母を、上記伏見甘長またはその破砕物等と好気的条件下で接触させて培養することによって行われる。クエン酸発酵において、乳酸菌をさらに添加して発酵すると、酵母の増殖が促進されやすく、さらに得られる発酵物の嗜好性も高まるため好ましい。
【００３７】
酵母としては、清酒酵母、ワイン酵母、ビール酵母、パン酵母などが用いられる。例えば、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属などに属する酵母が用いられ、好ましくは、サッカロミセス・セレビシエ、サッカロミセス・パストリアヌス、シゾサッカロミセス・ポンベなどが挙げられる。特にアミノ酸やビタミンなどの有用物質を産生する点で、サッカロミセス・セレビシエおよびその単離株が好ましい。
【００３８】
酵母は、伏見甘長またはその破砕物等の１００質量部に対して、乾燥体質量で０．００１〜１５質量部、好ましくは０．０１〜１０質量部添加する。
【００３９】
クエン酸発酵は、伏見甘長またはその破砕物等と酵母とを発酵槽に入れ、通気攪拌しながら、４℃〜４０℃、好ましくは１０℃〜３５℃で２４時間〜１４日間行う。特に伏見甘長の果実は酸性であるため、酵母発酵により香気成分が高くなるため、より嗜好性の高い発酵物を得ることができる。
【００４０】
クエン酸発酵は、酵母を用いて行われるため、発酵物中に酵母が産生するアミノ酸、タンパク質、ビタミン類などが含まれ、栄養価が高く嗜好性に優れる点で好ましい。
【００４１】
アルコール発酵は、酵母を、伏見甘長またはその破砕物等と嫌気条件下で接触させて培養することによって行われる。アルコール発酵に用いられる酵母の種類および量は、上記クエン酸発酵の場合と同様である。発酵条件も、嫌気条件にすること以外は、上記クエン酸発酵の場合と同様である。こうしてアルコール発酵で得られた伏見甘長発酵物は、さらに以下で述べる酢酸発酵に供することが好ましい。
【００４２】
酢酸発酵は、伏見甘長またはその破砕物等にアルコールを加え、所定のアルコール濃度にした後、酢酸発酵し得る微生物（酢酸菌）を添加することによって行われる。あるいは上記のアルコール発酵によって得られた本発明の発酵物に酢酸菌を添加して二段発酵させてもよい。
【００４３】
アルコール濃度は、酢酸菌が生育できる濃度であれば、特に制限されず、発酵時間などに応じて適宜調整すればよい。好ましくは１０質量／容量％以下、より好ましくは１〜６質量／容量％である。
【００４４】
酢酸菌としては、アセトバクター属に属する微生物、例えば、アセトバクター・アセチ、アセトバクター・パステウリアヌス、アセトバクター・ハンセニなどが挙げられる。
【００４５】
酢酸菌は、適切な培地で１５℃〜４０℃、好ましくは２５℃〜３５℃にて６〜４８時間予備培養しておくことが好ましい。予備培養した酢酸菌は、例えば、次のようにして得られる。まず、ポテト２００ｇ、破砕酵母３０ｇ、肝臓エキス２５ｇ、肉エキス５ｇ、チオグリコール酸培地１０ｇ、グルコース５ｇ、グリセロール１５ｇ、および炭酸カルシウム１５ｇを含有する１Ｌの酢酸菌培地（ｐＨ７．０）に酢酸菌を添加して、１５℃〜４０℃にて２４時間予備培養する。次いで、得られた培養物を遠心分離し、回収した菌体を滅菌水で洗浄し、再度遠心分離して上清を除去することによって、予備培養した酢酸菌が得られる。
【００４６】
酢酸発酵は、攪拌培養、振盪培養、および静置培養のいずれでも行うことができる。発酵温度は１０℃〜４０℃、好ましくは２０℃〜３５℃で行われる。発酵時間は、酢酸菌の添加量に応じて適宜設定され、通常、１日〜１週間が好適である。
【００４７】
上記発酵処理後は、さらに必要に応じて、濃縮処理や加熱処理を行ってもよい。例えば、減圧濃縮、凍結乾燥などの濃縮方法や、加圧式殺菌、熱交換式殺菌、蒸煮殺菌、限外ろ過などの当業者が通常用いる加熱方法が用いられる。加熱処理の場合、例えば、６０℃〜１２０℃にて５秒間〜１２時間行われる。なお、加熱処理を行うことで、乳酸菌から有用成分が発酵物の液中に溶解し得るため、好ましい。
【００４８】
（本発明の発酵物）
このようにして得られた本発明の発酵物は、そのまま用いても良いが、必要に応じて、その後当業者が通常用いる処理方法によって種々の態様にして使用することもできる。このような態様としては、例えば、上記のように発酵物を固液分離して上清を回収することにより得られた発酵エキス、該発酵物または該発酵エキスを濃縮処理した発酵ペースト、該発酵物または該発酵エキスを乾燥・粉末化処理した発酵粉末または発酵エキス末などが挙げられる。これらは、すべて本発明の発酵物の一態様である。
【００４９】
上記の本発明の発酵物の１つの実施態様である発酵粉末または発酵エキス末は、具体的には、該発酵物または発酵エキスを、乾燥、粉末化することによって得られる。乾燥は、当業者が通常用いる種々の方法が採用されるが、凍結乾燥、噴霧乾燥が好ましく用いられる。噴霧乾燥は、必要に応じて、デキストリン、シクロデキストリン、デンプン、マルトースなどの賦形剤を添加して行われる。発酵物または発酵エキスと賦形剤との混合比は、発酵物を乾燥する場合、好ましくは質量比で１：５〜１０：１、発酵エキスを乾燥する場合、好ましくは質量比１：１０〜５：１である。上記混合比で乾燥することにより得られる発酵粉末または発酵エキス末の褐変を防ぐことができる。
【００５０】
本発明の発酵物は、辛味を呈するトウガラシと異なり、辛味が少なく、香りおよび風味がよく嗜好性に優れ、さらに発酵によって、伏見甘長が本来有しない新規な機能である体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有するため、辛味を呈するトウガラシに比べて、より摂取しやすく安全な体脂肪の蓄積抑制または低減剤として利用しえる。特に、本発明の発酵物は、白色脂肪細胞の脂肪の分解を促進し、腸管からの脂質の吸収も抑制し得ることから、白色脂肪細胞の脂質分解促進剤または脂質吸収抑制剤として利用し得る。さらに、本発明の発酵物は、褐色脂肪細胞に対して脂肪解促進効果も有することから、辛味がほとんどないにもかかわらず、基礎代謝向上剤として利用できるだけでなく、血流改善効果も得られる。これらの総合的な効果によって、体脂肪の蓄積抑制または低減効果が得られるものと考えられる。
【００５１】
本発明の組成物は、上述の作用を有するため、該作用を得ることを目的とした種々の形態で利用される。この組成物は、さらに香りがよく、辛味を呈するトウガラシのような刺激性を持つ物質をほとんど含有しないため、特別な処理を必要とすることなく種々の目的に利用される。例えば、食品、医薬品、医薬部外品などとして利用される。
【００５２】
なお、本発明の発酵物は、体脂肪の蓄積抑制または体脂肪の低減効果などを有し、これらの効果を得るための摂取量、配合量は特に制限はないが、摂取量については、成人一日あたりの摂取量が、例えば本発明の発酵物を発酵エキスとした場合は、１日当たりの摂取量の下限値は、乾燥質量換算で１ｍｇ以上、好ましくは１０ｍｇ以上、最も好ましくは１００ｍｇ以上であり、上限値は、２０００ｍｇ以下、好ましくは１０００ｍｇ以下である。また、食品中への配合量は、その剤形によっても異なるが、例えば、本発明の発酵物を発酵エキスとした場合における配合量の下限値は、乾燥質量換算で０．００００１質量％以上、好ましくは０．０００１質量％以上、最も好ましくは０．１質量％以上であり、配合量の上限値は、９０質量％以下、好ましくは６０質量％以下である。
【００５３】
また、発酵エキスとせずにそのまま用いる場合は、成人の１日当たりにおける摂取量の下限値は、乾燥質量換算で１０ｍｇ以上、好ましくは１００ｍｇ以上であり、上限値は、２００００ｍｇ以下、好ましくは１００００ｍｇ以下である。また、食品中への配合量は、その剤形によっても異なるが、発酵物をそのまま用いた場合における配合量の下限値は、乾燥質量換算で０．０００１質量％以上、好ましくは０．００１質量％以上、最も好ましくは０．１質量%以上であり、配合量の上限値は、９０質量％以下、好ましくは６０質量％以下である。
【００５４】
このような本発明の発酵物を例えば経口投与可能な剤形にする場合は、必要に応じて、例えば、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｂ１２、ナイアシン、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体等）、ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛等）、セレン、キチン、キトサン、レシチン、ポリフェノール（フラボノイド、これらの誘導体等）、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテイン等）、キサンチン誘導体（カフェイン等）、タンパク質またはペプチド（大豆タンパク、コラーゲン、エラスチン、シルクまたはこれらの分解物等）、ムコ多糖類（ヒアルロン酸、コンドロイチン、デルマタン、ヘパラン、ヘパリン、ケタラン、これらの誘導体等）、アミノ糖（グルコサミン、アセチルグルコサミン、ガラクトサミン、アセチルガラクトサミン、ノイラミン酸、アセチルノイラミン酸、ヘキソサミン、それらの塩等）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖等）、リン脂質（フォスファチジルコリン、フォスファチジルセリン等）、スフィンゴ脂質及びその誘導体（スフィンゴミエリン、セラミド等）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタン等）、リグナン類（セサミン等）、真珠粉末、α−リポ酸またはその誘導体、コエンザイムＱ１０、およびこれらを含有する動植物抽出物、根菜類（ショウガ等）などを添加して、加工食品とすることができる。このような中でも、以下に示す脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分、糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分と組み合わせることが好ましい。
【００５５】
（脂質吸収抑制成分、脂質代謝促進成分）
本発明における脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分の少なくともいずれかの成分の添加は、相乗的な脂質の蓄積抑制または体脂肪低減効果を得ることができる。
【００５６】
ここでいう脂質吸収抑制成分としては、例えば、キトサンおよびその誘導体、サイリウム、プロアントシアニジンなどの胆汁酸を排泄する作用を有する成分、ガロタンニン、ビワ葉等およびその抽出物などのリパーゼ阻害作用を有する成分が挙げられる。なお、例えば、松樹皮抽出物といったプロアントシアニジンを多く含む植物抽出物を、プロアントシアニジンとして用いることも可能である。
【００５７】
脂質代謝促進成分としては、リボフラビン類、茶カテキン類、異性化リノール酸、カフェイン、カプサイシン、カルニチン、コエンザイムＱ１０、α−リポ酸およびその誘導体、大豆ペプチド、分岐アミノ酸、フォスファチジルコリン、アリルスルフィド化合物、フォルスコリン、ベルゲニン、ケルセチン、アスチルビン、ヒドロキシクエン酸、およびこれらの塩などが挙げられる。もちろん、これら脂質代謝促進成分を含有する植物抽出物、例えば、茶、葛花、コレウスフォコリ、アカショウマ、黄杞、大豆、辛味を有するトウガラシ、ソバ、ニンニク、タマネギ、コーヒーなどの抽出物を、脂質代謝促進成分として用いることも可能である。
【００５８】
上記脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分は、目的に応じて適宜配合される。例えば、脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分のいずれかの成分のみを添加してもよく、脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分の両方を添加してもよい。もちろん、２種類以上の脂質吸収抑制成分を添加しても、２種類以上の脂質代謝促進成分を添加してもよい。
【００５９】
なお、本発明の発酵物と脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分との配合比は、特に制限はない。例えば、本発明の発酵物１００質量部に対して、脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の下限値は、１質量部以上、好ましくは５質量部以上とするのがよい。また、本発明の発酵物１００質量部に対して、脂質吸収抑制成分または脂質代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の上限値は、５０００質量部以下、好ましくは２５００質量部以下とし、剤形に合わせて適宜調整すればよい。
【００６０】
（糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分）
また、本発明において、本発明の発酵物と共に糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分を少なくともいずれかの成分の配合は、脂質吸収抑制成分および脂質代謝促進成分の少なくともいずれかの成分の添加と同様に、相乗的な効果が期待できる。糖の代謝促進成分を有する原料としては、例えば、チアミン類（例えばビタミンＢ１）、ピリドキシン類、アミノ酸（イソロイシン、ロイシン、バリン、セリン、プロリン、グリシン、アラニン、及びスレオニン等）、クエン酸、リンゴ酸、モリブデン、リン、イオウ、クロム、カリウム、マンガン、カプサイシノイド、甘藷茎葉に見られるトリカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸およびこれらの誘導体、ニンジンのサポニンなどの成分自体や、これら成分を有する原料、さらに、同様の作用を有するレイシ、黒酢、大豆、菊芋、ビール酵母などが挙げられる。これらを配合することにより、体内での糖の蓄積を抑制し、ひいては糖の吸収によって引き起こされる体脂肪が増加することを抑制し得る。
【００６１】
糖の消化吸収抑制成分を有する原料としては、例えば、α―アミラーゼ阻害剤、グルコシダーゼ阻害剤などの糖分解酵素の阻害作用を有する成分自身、そのような阻害作用を有する成分を有する原料、水溶性食物繊維などの糖吸収抑制効果がある成分自身、およびそのような糖吸収抑制効果がある成分を有する原料などが挙げられる。糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料の具体例としては、α−アミラーゼ阻害活性を有するタンパク質やタンニンが挙げられる。α−アミラーゼ阻害タンパク質は、小麦やライ麦等の中に含まれている。タンニンは、大麦、茶、グァバ、ビワ等に含まれている。
【００６２】
また、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料として、α−グルコシダーゼ阻害物質を用いてもよい。ここでいうα−グルコシダーゼ阻害物質としては、例えば、１−デオキシノジリマイシン、サラシノール、１−デオキシノジリマイシン、これらを含有すサラシア・レティキュラタや桑葉が挙げられる。また、α−グルコシダーゼ阻害物質の別の例としては、ボタンピ、カシュウ、ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモン、クダモノトケイソウおよびストレリチア、阿仙薬、サッサフラス、イエロードック、メドウスィートなどが挙げられる。さらに、別のα−グルコシダーゼ阻害物質としては、例えば、ウンシュウミカン、ダイダイ、ハッサク、ナツミカン、イヨカン、オレンジ、レモン、グレープフルーツ、ユズ、ライムなどの柑橘類に含まれるジヒドロカルコン化合物またはフラバノン配糖体、ウラジロガシ、オオボウシバナ、芍薬、チョウジ、ラフマ、ケイヒ、ユーカリ、エゾイシゲ、カモミール、シソ、ノイチゴ、トウチ、クローブ、ヒドロキシプロリンなどが挙げられる。
【００６３】
また、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料として、糖質消化酵素の阻害効果がある物質を用いることもできる。ここでいう糖質消化酵素の阻害効果がある物質としては、例えば、茶、グァバ、テンチャ、イチョウ葉、ブドウ種子や松樹皮抽出物等に含まれるポリフェノールや、マオウ、カリン、インゲン豆、ナンバンカラスウリ、カキ葉、プーアル茶、オトギリソウ、リンゴ、タラ、アカメガシワ、サンシュユ、訶子、トチュウ葉などが挙げられる。
【００６４】
また、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料としては、その糖質消化酵素阻害物質を含んでいる物質（植物・動物など）の粉末や抽出物等を用いることもできる。
【００６５】
さらに、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料としては、例えば、糖の吸収を阻害する成分、サポニン、コンズリトールＡ、グルマリン、及び食物繊維などが挙げられる。特に、ギムネマ・シルベスタ、ギムネマ・イノドラム、タラ、トンブリ等に含まれるサポニン、ギムネマ・シルベスタに含有されるコンズリトールＡ、グルマリンなどを、糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料として用いてもよい。糖の代謝促進成分または糖の消化吸収抑制成分を有する原料としての食物繊維には、難消化性デキストリン、ガラクトマンナン、可溶性アルギン酸ナトリウム、イヌリンなどを、例として挙げることができる。食物繊維は、食餌をゲル化することにより、糖の腸管からの吸収を抑制すると考えられている。
【００６６】
なお、本発明の発酵物と糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分との配合比は、特に制限はない。例えば、本発明の発酵物１００質量部に対して、糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の下限値は、１質量部以上、好ましくは５質量部以上とするのがよい。また、本発明の発酵物１００質量部に対して、糖吸収抑制成分または糖代謝促進成分（またはそれら成分を含有する原料）の上限値は、５０００質量部以下、好ましくは２５００質量部以下とし、剤形に合わせて適宜調整すればよい。
【００６７】
また、本発明の発酵物を添加する剤形は特に制限はない。例えば、ハードカプセル、ソフトカプセルなどのカプセル剤；錠剤；丸剤；粉末；顆粒；ティーバッグ、液剤などの当業者が食品あるいは医薬品として通常用いる形態で利用される。これらは、形状または好みに応じて、そのまま摂取してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて飲んでも良く、成分を浸出させたものを摂取しても良い。これらは、さらにその形態に応じて必要とされる成分を含有し得る。例えば、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料などの添加剤を含有し得る。
【００６８】
例えば、健康飲料として利用する場合は、液体状の発酵物をそのまま用いるか、粉末状の発酵物を水などに溶解した物、あるいは種々の調味料、例えば、グラニュー糖、蜂蜜、ソルビットなどの甘味料、アルコール、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸などの酸味料、香料、色素などを加えて、好みの味に調整して用いることができる。そして、このような発酵物は、他の発酵ジュースや野菜ジュースなど（例えば、人参ジュースあるいは混合野菜ジュース）と混合すれば、更に栄養価の高いジュースとすることができる。あるいは、寒天などに混合してゼリーとすることもでき、野菜または果物ジュース、乳製品などと組み合わせて、冷却・混練など当業者が通常行う方法によって、シャーベット、フローズンヨーグルト、アイスクリームなどの食品とすることもできる。また、本発明の発酵物を含有する飲料、および食品が、低ｐＨであれば、１２０℃、４分の完全殺菌をしなくても、１００℃以下の殺菌条件で殺菌できる。例えば、ｐＨが４．０以下の場合では、６５℃、１０分相当の殺菌条件で十分に殺菌できる。
【実施例】
【００６９】
以下、本発明の実施態様をより詳細に説明するが、本実施例に限定されないことはいうまでもない。
【００７０】
（実施例１：伏見甘長の発酵エキス末の調整）
伏見甘長をフードプロセッサで破砕して得られた破砕物１Ｋｇにイオン交換水１０Ｌを加えて攪拌した後に、ブドウ糖を０．１Ｋｇおよび乳酸菌（ラクトバチルス・プランタラム）を乾燥質量で１０ｇ添加して、攪拌した後に、３５℃で２４時間発酵処理した。発酵終了後に、得られた発酵物から遠心分離を行い、上清を回収して発酵エキスを得た。次いで、この発酵エキスを１００℃、２分間の加熱処理を行った後に、減圧濃縮乾固して０．４Ｋｇの発酵エキス末を得た。
【００７１】
（比較例１：伏見甘長の非発酵エキス末の調整）
実施例１で用いた伏見甘長を同様にフードプロセッサで破砕して得られた破砕物１Ｋｇにイオン交換水１０Ｌを加えて攪拌した後に、遠心分離を行い、上清を回収して非発酵エキスを得た。次いで、このエキスを１００℃、２分間の加熱処理を行った後に、減圧濃縮乾固して０．３Ｋｇの非発酵エキス末を得た。
【００７２】
（実施例３：リパーゼ阻害効果の検討）
上記にて得られた実施例１の発酵エキス末および比較例１の非発酵エキス末を用いて、以下の方法にてリパーゼ阻害作用を測定した。まず、各エキス末２０ｍｇを１ｍＬの精製水に溶解して得た試験液に、１０質量／容量％の炭酸ナトリウム（和光純薬株式会社）でｐＨ８．５に調整し、蒸留水で全量を２ｍＬに調整した。この溶液に、４ｍＬの基質液（牛乳を蒸留水で３倍希釈し、炭酸ナトリウムでｐＨ８．５に調整した溶液）および４質量／容量％の豚膵臓由来のリパーゼ（和光純薬株式会社）を添加した。この溶液のｐＨを直ちに測定し、さらに３７℃にて２０分間反応させた後に再度ｐＨを測定し、このｐＨの差（ΔＡとする）を求めた。対照として、上記試験液の代わりに、精製水を用いたこと以外は上記と同様に行い、ｐＨの差（ΔＢとする）を求めた。ΔＡおよびΔＢを用いて、以下の式（Ｉ）よりリパーゼ阻害率（％）を求めた。
【００７３】
【００７４】
結果を表１に示す。なお、表１の結果は三重測定の結果の平均値および標準偏差を示す。
【００７５】
【表１】
【００７６】
表１の結果から、本発明の発酵エキス末は、非発酵エキス末に比べ、リパーゼの活性阻害効果が上昇していることがわかる。すなわち、本発明の発酵物は、発酵処理によってリパーゼ阻害効果が増強されたことが分かる。この効果は、リパーゼの阻害によって、腸管からの脂質の吸収を抑制し得ることを示し、脂質吸収抑制剤として利用しえることが分かる。
【００７７】
（実施例２：白色脂肪細胞の脂肪分解促進効果の検討）
１３週齢の雄性ラットより精巣上体周囲の脂肪組織を採取し、実施例１の発酵エキス末または比較例１の非発酵エキス末をそれぞれ１ｍｇ／ｍＬならびに辛味を呈するトウガラシの成分であるカプサイシン（和光純薬工業株式会社）をそれぞれ１ｍｇ／ｍＬとなるようにＭ１９９培地へ溶解した各１ｍＬの培地に、採取した脂肪組織を０．５ｇずつ懸濁し、３７℃、３時間培養した。次いで、各培地上清を回収し、脂肪の分解によって上清中に生じる遊離のグリセロールをグリセロール測定キット（商品名：Ｆキットグリセロール、日本ロシュ株式会社製）を用いて測定した。結果を表２に示す。なお、表中の値は、三重測定にて得られた結果の平均値および標準偏差である。
【００７８】
【表２】
【００７９】
表２の結果から、発酵エキス末は、非発酵エキス末並びに辛味を呈するトウガラシの成分であるカプサイシンに比べ、優れた脂肪分解促進作用が得られることが分かる。すなわち、本発明の発酵物は、発酵によって優れた脂肪分解促進作用が得られ、脂肪分解促進剤として利用し得ることが分かる。
【００８０】
（実施例３：褐色脂肪細胞の脂肪分解促進効果の検討）
実施例１の発酵エキス末の効果を更に検証するために、褐色脂肪培養キット（株式会社ホクド）を用いて、褐色脂肪における脂肪分解促進効果について検証を行った。より具体的には、９６ウェルプレートに４×１０３細胞／ウェルとなるように該キットの未分化の褐色脂肪細胞を播種し、２４時間培養後、培地を該キットに付属している分化誘導用培地に置換し、４８時間培養後、実施例１の発酵エキス末、比較例１の非発酵エキス末並びに実施例３で使用したカプサイシンを１ｍｇ／ｍＬとなるように該キットに付属している維持培地へ溶解した培地に置換して（各１００μL／ウェルとなるように置換）、４日間培養した。なお、培養条件は、５容量％ＣＯ２雰囲気下で３７℃で行った。培養終了後、上清を回収し、実施例２と同様にして、遊離グリセロールを測定した。また、細胞は、０．２％ＴｒｉｔｏｎＸを含有するＰＢＳ（−）１００μＬに溶解した後に、蛋白質測定キット（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒａｐｉｄ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ ＷＡＫＯ、和光純薬工業株式会社）で蛋白質量を測定した。そして、蛋白質１ｍｇ当たりの遊離グリセロール量（ｍｇ）を算出した。結果を表３に示す。なお、表中の値は、三重測定にて得られた結果の平均値および標準偏差である。
【００８１】
【表３】
【００８２】
表３の結果から、発酵エキス末は、非発酵エキス末並びに辛味を呈するトウガラシの成分であるカプサイシンに比べ、褐色脂肪細胞においても優れた脂肪分解作用が得られることが分かる。これは、公知のカプサイシンによる体熱産生促進よりも優れた効果が得られることがわかり、辛味をほとんど有さないにもかかわらず、生体内の基礎代謝向上剤として利用し得ることが分かる。
【００８３】
なお、本発明の発酵物は、当然ながら辛味を有さないばかりか、本実施例３で行った試験では、カプサイシンを含有する培地で培養した褐色脂肪細胞に細胞毒性が見られたのに対し、本発明の発酵物は細胞毒性が見られなかったことから、辛味を呈するトウガラシよりも安全かつ摂取しやすい形態で食品や医薬品として利用し得ることが分かる。
【００８４】
（実施例５：体脂肪低減効果の検討）
さらに実施例１および比較例２の各エキス末を用いて体脂肪に対する効果を評価した。
【００８５】
まず、７週齢の雌性ＩＣＲ系マウス２４匹を標準飼料（ＭＦ飼料、オリエンタル酵母工業株式会社）で１週間馴化した。次いで、１群あたりの平均体重が均一となるようにしたこと以外はランダムに１群６匹の４群に群分けを行った。そして、この内の１群には１質量％の実施例１の発酵エキス末及び４０質量％の牛脂、９質量％のグラニュー糖を含有する試験飼料１を自由摂取させた。残りの群のうち、もう１群には試験飼料１の実施例１のエキス末の代わりに比較例１の非発酵エキス末を含有していること以外は同様の組成の試験飼料２を自由摂取させた。さらに、もう１群には、試験飼料１の実施例１のエキス末を含有しなかったこと以外は、同様の対照飼料を自由摂取させ、残りの１群には、標準飼料を自由摂取させた。
各群の自由摂取開始から２５日目に体重を測定した。測定後、下記式（ＩＩ）にて体重増加率（％）を測定した。
【００８６】
【００８７】
さらに、皮下脂肪を実験動物用Ｘ線ＣＴ（商品名：ＬＡＴｈｅａｔａ ＬＣＴ−１００Ａ、アロカ社製）にて測定した後に、解剖を行い、後腹膜脂肪および子宮周囲脂肪を摘出して合計の重量（内臓脂肪の重量）を測定し、体重１００ｇ当たりの重量を算出した。結果を表４に示す。なお、表中の値は、各群より得られた値の平均値および標準偏差である。
【００８８】
【表４】
【００８９】
表４の結果から、実施例１の発酵エキス末を含有する試験飼料１は、比較例１の非発酵エキス末を含有する試験飼料２並びに対照飼料に比べ、内臓脂肪が低下しており、標準飼料を摂取した群と同等程度の脂肪量であった。すなわち、本発明の発酵物は、発酵によって優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有することから、体脂肪の蓄積抑制または低減剤として利用し得ることが分かる。また、対照飼料を摂取した群の体重増加率が３４．７±３．４％（値は平均値±標準偏差）であったのに対し、本発明の発酵エキス末を含有する試験飼料１を摂取した群の体重は３０．９±１．６％（値は平均値±標準偏差）であり、標準飼料を摂取した群の体重が３１．７±１．２％（値は平均値±標準偏差）であったため、優れた体重の増加を抑制する効果も得られることが分かった。さらに、実験動物用Ｘ線ＣＴの結果から、皮下脂肪においても、脂肪の蓄積抑制または低減効果が得られていた。
【００９０】
（実施例６：血流改善効果の検証）
実施例１にて得られた発酵エキス末を用いて以下のようにして血流改善効果を測定した。まず、６名の健常人の被験者を集めた。次いで、精製水を準備し、精製水を摂取する前に各被験者の右手人差し指の先端から第一関節までの血流量を測定した。なお、血流量は、血流計（レーザー血流画像化装置ＰＩＭ II；ＳｗｅｄｅｎＰｅｒｍｉｅｄ社）を用いた。次いで、被験者に精製水１０ｍＬを摂取してもらい、摂取３０分後に再度同一の箇所の血流量を測定した。そして、得られた値から、下記の式（ＩＩＩ）により、血流増加率（％）を測定した。
【００９１】
【００９２】
翌日、同一の被験者等に参加してもらい、精製水の代わりに実施例１の発酵エキス末を２０ｍｇ／１０ｍＬで含有する飲料を１０ｍＬ摂取してもらったこと以外は同様にして試験を行い、血流増加率を測定した。結果を表５に示す。なお、表中の値は、各試験における被験者６名の測定値の平均値および標準偏差である。
【００９３】
【表５】
【００９４】
表５の結果から、精製水においては、血流量が低下する傾向が見られたが、本発明の発酵物は、辛味を呈さないにもかかわらず、血流の増加が見られたことから、血流改善効果が得られることが分かった。すなわち、本発明の発酵物は、血流改善剤としても利用し得ることが分かり、この効果は、基礎代謝の向上を促進するものと考えられた。
【産業上の利用可能性】
【００９５】
本発明の伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物は、優れた体脂肪の蓄積抑制または低減効果を有し、体脂肪の蓄積抑制または低減剤として利用できるため、有用である。より詳細には、本発明の発酵物は、白色脂肪細胞における脂肪分解促進作用や、リパーゼ阻害作用、血流改善作用等を有するため、これらの効果によって、伏見甘長の発酵前に比べ、優れた体脂肪蓄積抑制または低減効果を得ることができる。特に辛味を呈するトウガラシと違い、辛味を呈さないことから、様々な剤形に応用が可能であり、安全性も高い。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物を有効成分とする、体脂肪の蓄積抑制または低減剤。
【請求項２】
前記発酵処理が、乳酸菌を用いた発酵である請求項１に記載の体脂肪の蓄積抑制または低減剤。
【請求項３】
前記体脂肪蓄積抑制または低減剤が、白色脂肪細胞の脂質分解促進作用である、請求項１または２に記載の体脂肪の蓄積抑制または低減剤。
【請求項１】
伏見甘長を発酵処理して得られる発酵物を有効成分とする、体脂肪の蓄積抑制または低減剤。
【請求項２】
前記発酵処理が、乳酸菌を用いた発酵である請求項１に記載の体脂肪の蓄積抑制または低減剤。
【請求項３】
前記体脂肪蓄積抑制または低減剤が、白色脂肪細胞の脂質分解促進作用である、請求項１または２に記載の体脂肪の蓄積抑制または低減剤。
【公開番号】特開２００６−１８２６５４（Ｐ２００６−１８２６５４Ａ）
【公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−３７４５４１（Ｐ２００４−３７４５４１）
【出願日】平成１６年１２月２４日（２００４．１２．２４）
【出願人】（３９８０２８５０３）株式会社東洋新薬 (182)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年１２月２４日（２００４．１２．２４）
【出願人】（３９８０２８５０３）株式会社東洋新薬 (182)
【Ｆターム（参考）】
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