抗炎症剤
【課題】青銭柳の抽出物を含有する抗炎症剤の提供。
【解決手段】青銭柳（クルミ科、別名；ゼニガタ、キクロカーヤ）の抽出物は、炎症誘起時に於いて、上昇するＧＬＵＴ１に対して、優れた上昇抑制効果を有し、安定であった。更に、青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤は、安全性が高く、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れ等の生体組織の炎症症状に対して、優れた抗炎症作用を示した。本発明の抽出物は、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品等に用いることができる。
【解決手段】青銭柳（クルミ科、別名；ゼニガタ、キクロカーヤ）の抽出物は、炎症誘起時に於いて、上昇するＧＬＵＴ１に対して、優れた上昇抑制効果を有し、安定であった。更に、青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤は、安全性が高く、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れ等の生体組織の炎症症状に対して、優れた抗炎症作用を示した。本発明の抽出物は、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品等に用いることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症とは異物の侵入や組織の傷害といった生体組織にとって好ましくない刺激が発生した時に免疫系が引き起こす防御反応であり、生体にとっての非自己の排除を助ける作用である。しかし、一方で自己である生体そのものにも一定の損傷や苦痛を引き起こす性質も持つ。生体の引き起こした炎症が過剰に人体を傷つけている例としてアレルギー疾患、慢性関節リウマチ、炎症性腸疾患等が知られている。これらの疾患を緩和するためには、炎症を抑制する必要があると考えられる。
【０００３】
このような、炎症反応を抑える抗炎症剤としては、従来からステロイド系抗炎症剤、例えばシクロオキシゲナーゼ（以下、ＣＯＸと記載することもある）阻害剤等が使用されている。これらの抗炎症剤は、プロスタグランジンの生合成につながるアラキドン酸カスケードでのＣＯＸとアラキドン酸との結合を阻害することにより、抗炎症活性を示す。このように、シクロオキシゲナーゼ活性を阻害することにより、患部での炎症や痛みは抑えることができる。しかし、反面、ＣＯＸ活性が阻害されることにより、胃や肝臓では血流が減少してしまい、胃潰瘍や腎機能に悪い影響を及ぼすことが指摘されている（特許文献１）。これらの事実から、より安全で効果の高い新しい抗炎症剤が求められている。
【０００４】
一方、青銭柳については、その抽出物を含有する皮膚外用剤が、安全で安定であり、老化防止及び美白作用に優れていることが報告されている（特許文献２）。しかしながら、これらに含まれる成分を生体組織の炎症の抑制のために用いた例はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−６９１１１
【特許文献２】特開２００８−２５５０４３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、炎症を予防又は改善する抗炎症剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、表皮細胞におけるＧＬＵＣＯＳＥ ＴＲＡＮＳＰＯＲＴＥＲ ＭＥＭＢＥＲ １（以下、ＧＬＵＴ１とも言う）の発現に着目し、ＧＬＵＴ１と炎症の関係を検討したところ、ＧＬＵＴ１の発現を抑制すれば、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れ等の生体組織の炎症症状を防止できることを見出した。
【０００８】
このような事情により、本発明者らは鋭意検討した結果、青銭柳の抽出物が、炎症誘起
時に於けるＧＬＵＴ１の上昇を抑制することで、優れた抗炎症効果を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の抗炎症剤を使用すれば、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れ等の生体組織の炎症による症状を予防又は改善できる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の青銭柳（クルミ科、別名；ゼニガタ、キクロカーヤ）は、学名がＣｙｃｌｏｃａｒｙａ ｐａｌｉｕｒｕｓ（シクロカリヤ パリウラス）で中国が原産である。甘味のあるお茶として飲用されており、市販されているものを入手して、使用することができる。
【００１２】
すなわち、本発明によれば、青銭柳の抽出物とは、植物体の葉、茎、樹皮、花、実、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものである。好ましくは、植物体の葉から抽出して得られるものが良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。
【００１３】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００１４】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１５】
本発明におけるＧＬＵＴ１は、細胞のエネルギー源となるグルコースの能動輸送に関与するタンパク質であり、細胞膜上に存在し、細胞外から細胞内へ取り込む輸送担体として働いている。ＧＬＵＴ１は、殆んどの生体細胞に於いて発現しているが、乾癬等の炎症性部位に非常に高発現することが報告されている。
【００１６】
本発明の抗炎症剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、医薬品又は食品として用いることができる。経口投与される医薬品及び食品の製造にあたっては、必要に応じて賦形剤、結合剤、滑沢剤、矯味剤、安定剤、ビタミン、ミネラル、香料等の医薬品及び食品の技術分野で通常使用されている補助剤を用いることができる。又、必要に応じて、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することができる。
【００１７】
本発明の抗炎症剤は、医薬品の形態としては、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、内服液剤、懸濁剤、シロップ剤が挙げられる。食品の形態としては、上述の医薬品的な形態に加え、ビスケット、クッキー、キャンディー、チョコレート等の菓子、食酢、醤油、ドレッシング等の調味料、ハム、ベーコン、ソーセージ等の食肉製品、かまぼこ、はんぺい等の魚肉練り製品、果汁飲料、清涼飲料、アルコール飲料等の飲料、パン、麺、ジャム等にすることができる。これらの医薬品及び食品は、摂取量を調整しやすい錠剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、内服液剤及び飲料がより好ましい。又、外用剤にも用いることができ、その剤型としては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚に適用されるものが挙げられる。
【００１８】
本発明における青銭柳抽出物の投与量は、通常１０ｍｇ〜５，０００ｍｇ／日、好ましくは２５ｍｇ〜１，０００ｍｇ／日、より好ましくは５０ｍｇ〜１００ｍｇ／日である。
【００１９】
以下、具体例を挙げて、本発明を更に具体的に説明する。尚、本発明はこれにより限定されるものではない。
【実施例１】
【００２０】
製造例１ 青銭柳の熱水抽出物
青銭柳の葉の乾燥物３０ｇに精製水９００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して青銭柳の熱水抽出物を３．３ｇ得た。
【００２１】
製造例２ 青銭柳のエタノール抽出物
青銭柳の葉の乾燥物１００ｇにエタノール１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、青銭柳のエタノール抽出物を９．５ｇ得た。
【００２２】
製造例３ 青銭柳の５０％１，３−ブチレングリコール抽出物
青銭柳の葉及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｇ及び１，３−ブチレングリコール２００ｇを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、青銭柳の５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３６０ｇ得た。
【実施例２】
【００２３】
処方例１ カプセル剤
処方 配合量（ｇ）
１．青銭柳の熱水抽出物（製造例１） ５．０
２．微結晶セルロース ６０．０
３．トウモロコシデンプン １５．０
４．乳糖 １８．０
５．ポリビニルピロリドン ２．０
全量 １００．０
［製造方法］成分１〜５を混合して顆粒化した後、２号硬カプセルに２５０ｍｇ充填してカプセル剤を得る。当該カプセル剤を１日６個摂取することで、青銭柳の熱水抽出物を７５ｍｇ／日摂取できる。
【００２４】
比較例１
処方例１に於いて、青銭柳の熱水抽出物を微結晶セルロースに置き換えたものを従来のカプセル剤とした。
【００２５】
処方例２ 散剤
処方 配合量（ｇ）
１．青銭柳の熱水抽出物（製造例１） ５．０
２．微結晶セルロース ４０．０
３．トウモロコシデンプン ５５．０
全量 １００．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、常法により散剤を得る。当該顆粒を１日１ｇ摂取することで、青銭柳の熱水抽出物を５０ｍｇ／日摂取できる。
【００２６】
処方例３ クリーム
処方 配合量（ｇ）
１．青銭柳のエタノール抽出物（製造例２） ０．０５
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．１，３−ブチレングリコール ８．５
１４．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【実施例３】
【００２７】
実験例１ 正常ヒト表皮株化細胞（ＨａＣａＴ）におけるＧＬＵＴ１遺伝子の発現変化
ＨａＣａＴを６０ｍｍ ｄｉｓｈに１×１０５個播種した。そこに、炎症を誘導するサイトカインであるインターロイキン１α（ＩＬ１α）を１００nｇ／ｍｌの濃度で添加した後、青銭柳熱水抽出物の最終濃度を調整し、培地に添加した。６時間培養した後、総ＲＮＡの抽出を行った。細胞からの総ＲＮＡの抽出はＴＲＩＺＯＬ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて行い、総ＲＮＡ量は分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ）を用いて２６０ｎｍにおける吸光度により求めた。ｍＲＮＡ発現量の測定は、細胞から抽出した総ＲＮＡを基にしてリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法には、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＩＩＩ Ｐｌａｔｉｎｕｍ Ｔｗｏ−Ｓｔｅｐ ｑＲＴ−ＰＣＲ Ｋｉｔ ｗｉｔｈ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いた。すなわち、５００ｎｇの総ＲＮＡを逆転写反応後、ＰＣＲ反応（９５℃:１５秒間、６０℃：３０秒間、４０ｃｙｃｌｅｓ）を行った。使用したプライマーを以下に示す。その他の操作は定められた方法に従い、ｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。
【００２８】
ＧＬＵＴ１用のプライマーセット
ＴＴＧＧＡＴＧＧＡＧＴＧＡＧＡＣＡＧＡＡＧ（配列番号１）
ＧＣＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＴＧＡＴＧＡＧＡＧＧＴＡ（配列番号２）
ＧＡＰＤＨ用のプライマーセット
ＴＧＡＡＣＧＧＧＡＡＧＣＴＣＡＣＴＧＧ（配列番号３）
ＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡ（配列番号４）
【００２９】
その結果を表１に示す。ＨａＣａＴにＩＬ１αを添加すると、ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡの発現量は増加したが、青銭柳はこの増加を抑制した。従って、青銭柳は、炎症の原因となるＧＬＵＴ１の増加を抑制する作用があることが示された。
【００３０】
【表１】
【００３１】
実験例２ 使用試験
処方例１のカプセル、比較例１のカプセルを用いて、関節の痛みを持つ男性２０人（１８〜５１才）、女性２０人（２６〜４５才）、アレルギーを持つ男性２０人（２１〜４８才）、女性２０人（１９〜４６才）、肌荒れ症状を持つ男性２０人（２２〜５３才）、女性２０人（２０〜４３才）を対象に、３ヶ月間の飲用試験を行った。尚、摂取量は、１日６個摂取することとした。その後、生体内の炎症反応が関与する症状である、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れに関するアンケートを行い、効果を判定した。
【００３２】
これらの試験結果を表２に示した。青銭柳の抽出物を含有するカプセルは、生体内の炎症が関与する症状に関して、優れた改善作用を示した。尚、飲用試験に使用したカプセルによる、トラブルは一人もなく、安全性に於いても問題なかった。又、処方成分の劣化についても問題なかった。
【００３３】
【表２】
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明により、青銭柳抽出物を含有することを特徴とする抗炎症組成物及び該組
成物を含有する飲食品、医薬品又は外用剤を提供することが可能となる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症とは異物の侵入や組織の傷害といった生体組織にとって好ましくない刺激が発生した時に免疫系が引き起こす防御反応であり、生体にとっての非自己の排除を助ける作用である。しかし、一方で自己である生体そのものにも一定の損傷や苦痛を引き起こす性質も持つ。生体の引き起こした炎症が過剰に人体を傷つけている例としてアレルギー疾患、慢性関節リウマチ、炎症性腸疾患等が知られている。これらの疾患を緩和するためには、炎症を抑制する必要があると考えられる。
【０００３】
このような、炎症反応を抑える抗炎症剤としては、従来からステロイド系抗炎症剤、例えばシクロオキシゲナーゼ（以下、ＣＯＸと記載することもある）阻害剤等が使用されている。これらの抗炎症剤は、プロスタグランジンの生合成につながるアラキドン酸カスケードでのＣＯＸとアラキドン酸との結合を阻害することにより、抗炎症活性を示す。このように、シクロオキシゲナーゼ活性を阻害することにより、患部での炎症や痛みは抑えることができる。しかし、反面、ＣＯＸ活性が阻害されることにより、胃や肝臓では血流が減少してしまい、胃潰瘍や腎機能に悪い影響を及ぼすことが指摘されている（特許文献１）。これらの事実から、より安全で効果の高い新しい抗炎症剤が求められている。
【０００４】
一方、青銭柳については、その抽出物を含有する皮膚外用剤が、安全で安定であり、老化防止及び美白作用に優れていることが報告されている（特許文献２）。しかしながら、これらに含まれる成分を生体組織の炎症の抑制のために用いた例はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−６９１１１
【特許文献２】特開２００８−２５５０４３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、炎症を予防又は改善する抗炎症剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、表皮細胞におけるＧＬＵＣＯＳＥ ＴＲＡＮＳＰＯＲＴＥＲ ＭＥＭＢＥＲ １（以下、ＧＬＵＴ１とも言う）の発現に着目し、ＧＬＵＴ１と炎症の関係を検討したところ、ＧＬＵＴ１の発現を抑制すれば、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れ等の生体組織の炎症症状を防止できることを見出した。
【０００８】
このような事情により、本発明者らは鋭意検討した結果、青銭柳の抽出物が、炎症誘起
時に於けるＧＬＵＴ１の上昇を抑制することで、優れた抗炎症効果を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の抗炎症剤を使用すれば、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れ等の生体組織の炎症による症状を予防又は改善できる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の青銭柳（クルミ科、別名；ゼニガタ、キクロカーヤ）は、学名がＣｙｃｌｏｃａｒｙａ ｐａｌｉｕｒｕｓ（シクロカリヤ パリウラス）で中国が原産である。甘味のあるお茶として飲用されており、市販されているものを入手して、使用することができる。
【００１２】
すなわち、本発明によれば、青銭柳の抽出物とは、植物体の葉、茎、樹皮、花、実、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものである。好ましくは、植物体の葉から抽出して得られるものが良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。
【００１３】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００１４】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１５】
本発明におけるＧＬＵＴ１は、細胞のエネルギー源となるグルコースの能動輸送に関与するタンパク質であり、細胞膜上に存在し、細胞外から細胞内へ取り込む輸送担体として働いている。ＧＬＵＴ１は、殆んどの生体細胞に於いて発現しているが、乾癬等の炎症性部位に非常に高発現することが報告されている。
【００１６】
本発明の抗炎症剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、医薬品又は食品として用いることができる。経口投与される医薬品及び食品の製造にあたっては、必要に応じて賦形剤、結合剤、滑沢剤、矯味剤、安定剤、ビタミン、ミネラル、香料等の医薬品及び食品の技術分野で通常使用されている補助剤を用いることができる。又、必要に応じて、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することができる。
【００１７】
本発明の抗炎症剤は、医薬品の形態としては、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、内服液剤、懸濁剤、シロップ剤が挙げられる。食品の形態としては、上述の医薬品的な形態に加え、ビスケット、クッキー、キャンディー、チョコレート等の菓子、食酢、醤油、ドレッシング等の調味料、ハム、ベーコン、ソーセージ等の食肉製品、かまぼこ、はんぺい等の魚肉練り製品、果汁飲料、清涼飲料、アルコール飲料等の飲料、パン、麺、ジャム等にすることができる。これらの医薬品及び食品は、摂取量を調整しやすい錠剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、内服液剤及び飲料がより好ましい。又、外用剤にも用いることができ、その剤型としては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚に適用されるものが挙げられる。
【００１８】
本発明における青銭柳抽出物の投与量は、通常１０ｍｇ〜５，０００ｍｇ／日、好ましくは２５ｍｇ〜１，０００ｍｇ／日、より好ましくは５０ｍｇ〜１００ｍｇ／日である。
【００１９】
以下、具体例を挙げて、本発明を更に具体的に説明する。尚、本発明はこれにより限定されるものではない。
【実施例１】
【００２０】
製造例１ 青銭柳の熱水抽出物
青銭柳の葉の乾燥物３０ｇに精製水９００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して青銭柳の熱水抽出物を３．３ｇ得た。
【００２１】
製造例２ 青銭柳のエタノール抽出物
青銭柳の葉の乾燥物１００ｇにエタノール１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、青銭柳のエタノール抽出物を９．５ｇ得た。
【００２２】
製造例３ 青銭柳の５０％１，３−ブチレングリコール抽出物
青銭柳の葉及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｇ及び１，３−ブチレングリコール２００ｇを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、青銭柳の５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３６０ｇ得た。
【実施例２】
【００２３】
処方例１ カプセル剤
処方 配合量（ｇ）
１．青銭柳の熱水抽出物（製造例１） ５．０
２．微結晶セルロース ６０．０
３．トウモロコシデンプン １５．０
４．乳糖 １８．０
５．ポリビニルピロリドン ２．０
全量 １００．０
［製造方法］成分１〜５を混合して顆粒化した後、２号硬カプセルに２５０ｍｇ充填してカプセル剤を得る。当該カプセル剤を１日６個摂取することで、青銭柳の熱水抽出物を７５ｍｇ／日摂取できる。
【００２４】
比較例１
処方例１に於いて、青銭柳の熱水抽出物を微結晶セルロースに置き換えたものを従来のカプセル剤とした。
【００２５】
処方例２ 散剤
処方 配合量（ｇ）
１．青銭柳の熱水抽出物（製造例１） ５．０
２．微結晶セルロース ４０．０
３．トウモロコシデンプン ５５．０
全量 １００．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、常法により散剤を得る。当該顆粒を１日１ｇ摂取することで、青銭柳の熱水抽出物を５０ｍｇ／日摂取できる。
【００２６】
処方例３ クリーム
処方 配合量（ｇ）
１．青銭柳のエタノール抽出物（製造例２） ０．０５
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．１，３−ブチレングリコール ８．５
１４．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【実施例３】
【００２７】
実験例１ 正常ヒト表皮株化細胞（ＨａＣａＴ）におけるＧＬＵＴ１遺伝子の発現変化
ＨａＣａＴを６０ｍｍ ｄｉｓｈに１×１０５個播種した。そこに、炎症を誘導するサイトカインであるインターロイキン１α（ＩＬ１α）を１００nｇ／ｍｌの濃度で添加した後、青銭柳熱水抽出物の最終濃度を調整し、培地に添加した。６時間培養した後、総ＲＮＡの抽出を行った。細胞からの総ＲＮＡの抽出はＴＲＩＺＯＬ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて行い、総ＲＮＡ量は分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ）を用いて２６０ｎｍにおける吸光度により求めた。ｍＲＮＡ発現量の測定は、細胞から抽出した総ＲＮＡを基にしてリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法には、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＩＩＩ Ｐｌａｔｉｎｕｍ Ｔｗｏ−Ｓｔｅｐ ｑＲＴ−ＰＣＲ Ｋｉｔ ｗｉｔｈ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いた。すなわち、５００ｎｇの総ＲＮＡを逆転写反応後、ＰＣＲ反応（９５℃:１５秒間、６０℃：３０秒間、４０ｃｙｃｌｅｓ）を行った。使用したプライマーを以下に示す。その他の操作は定められた方法に従い、ｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。
【００２８】
ＧＬＵＴ１用のプライマーセット
ＴＴＧＧＡＴＧＧＡＧＴＧＡＧＡＣＡＧＡＡＧ（配列番号１）
ＧＣＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＴＧＡＴＧＡＧＡＧＧＴＡ（配列番号２）
ＧＡＰＤＨ用のプライマーセット
ＴＧＡＡＣＧＧＧＡＡＧＣＴＣＡＣＴＧＧ（配列番号３）
ＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡ（配列番号４）
【００２９】
その結果を表１に示す。ＨａＣａＴにＩＬ１αを添加すると、ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡの発現量は増加したが、青銭柳はこの増加を抑制した。従って、青銭柳は、炎症の原因となるＧＬＵＴ１の増加を抑制する作用があることが示された。
【００３０】
【表１】
【００３１】
実験例２ 使用試験
処方例１のカプセル、比較例１のカプセルを用いて、関節の痛みを持つ男性２０人（１８〜５１才）、女性２０人（２６〜４５才）、アレルギーを持つ男性２０人（２１〜４８才）、女性２０人（１９〜４６才）、肌荒れ症状を持つ男性２０人（２２〜５３才）、女性２０人（２０〜４３才）を対象に、３ヶ月間の飲用試験を行った。尚、摂取量は、１日６個摂取することとした。その後、生体内の炎症反応が関与する症状である、関節の痛み、アレルギー症状、肌荒れに関するアンケートを行い、効果を判定した。
【００３２】
これらの試験結果を表２に示した。青銭柳の抽出物を含有するカプセルは、生体内の炎症が関与する症状に関して、優れた改善作用を示した。尚、飲用試験に使用したカプセルによる、トラブルは一人もなく、安全性に於いても問題なかった。又、処方成分の劣化についても問題なかった。
【００３３】
【表２】
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明により、青銭柳抽出物を含有することを特徴とする抗炎症組成物及び該組
成物を含有する飲食品、医薬品又は外用剤を提供することが可能となる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤。
【請求項１】
青銭柳の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤。
【公開番号】特開２０１１−２０１７８８（Ｐ２０１１−２０１７８８Ａ）
【公開日】平成２３年１０月１３日（２０１１．１０．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−６８２０４（Ｐ２０１０−６８２０４）
【出願日】平成２２年３月２４日（２０１０．３．２４）
【出願人】（５９２２６２５４３）日本メナード化粧品株式会社 (223)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１０月１３日（２０１１．１０．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年３月２４日（２０１０．３．２４）
【出願人】（５９２２６２５４３）日本メナード化粧品株式会社 (223)
【Ｆターム（参考）】
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