捕獲化合物、その収集物、ならびにプロテオームおよび複合組成物の分析方法
【課題】工業的プロセスの特徴を備えた工業的レベルへのスケールアップを可能にする、プロテオームの分析技術を開発すること。
【解決手段】複数の捕獲化合物を含む捕獲化合物の収集物を提供し、ここで各捕獲化合物は以下を含む:反応性官能基部分X; Xによる結合の選択性を高める部分Y;収集物中の捕獲化合物の分離または固定化を可能にする部分Q;および、X、YおよびQを提示する部分Z。
【解決手段】複数の捕獲化合物を含む捕獲化合物の収集物を提供し、ここで各捕獲化合物は以下を含む:反応性官能基部分X; Xによる結合の選択性を高める部分Y;収集物中の捕獲化合物の分離または固定化を可能にする部分Q;および、X、YおよびQを提示する部分Z。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数の捕獲化合物を含む捕獲化合物の収集物、ここで、収集物中の各個々の捕獲化合物は以下を含む:
生体分子に共有結合する部分 X;
捕獲化合物が部分 Yが存在する場合にそれが存在しない場合よりも少ない生体分子と結合するように捕獲化合物による結合の選択性を高める部分Y、ここで部分 Yは、捕獲化合物の親和性、立体的特性および電子的特性のうちの１以上を修飾する;
収集物中の捕獲化合物の分離または固定化を可能とする部分 Q、ここでQは蛍光部分またはビオチンを含む;
部分 X、YおよびQを提示する部分 Z、ここでZは50より少ない原子数を有する。
【請求項２】
収集物中の捕獲化合物が、捕獲化合物の溶解性に影響を及ぼす溶解性官能基 Wをさらに含む請求項 1の捕獲化合物の収集物。
【請求項３】
捕獲化合物が固体支持体上に提供されている請求項 1または請求項 2の収集物。
【請求項４】
捕獲化合物が固体支持体にQを介して結合している請求項 3の収集物。
【請求項５】
固体支持体がビーズである請求項 3または請求項 4の収集物。
【請求項６】
固体支持体が、ガラス、シリコン、金属、プラスチック、複合材料、シリカゲル、制御された細孔性ガラス、磁性ビーズ、またはセルロースビーズである請求項3-5のいずれかの収集物。
【請求項７】
Qがビオチンを含み、固体支持体がストレプトアビジンを含む請求項3-6のいずれかの収集物。
【請求項８】
Zがアミノ酸である請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項９】
Zは、直鎖または分枝鎖 アルキレン、直鎖または分枝鎖 アルケニレン、直鎖または分枝鎖 アルキニレン、直鎖または分枝鎖 アルキレンオキシ、直鎖または分枝鎖 アルキレンチオ、直鎖または分枝鎖 アルキレンカルボニル、直鎖または分枝鎖 アルキレンアミノ、シクロアルキレン、シクロアルケニレン、シクロアルキニレン、シクロアルキレンオキシ、シクロアルキレンチオ、シクロアルキレンカルボニル、シクロアルキレンアミノ、ヘテロシクリレン、アリーレン、アリーレンオキシ、アリーレンチオ、アリーレンカルボニル、アリーレンアミノ、ヘテロアリーレン、ヘテロアリーレンオキシ、ヘテロアリーレンチオ、ヘテロアリーレンカルボニル、ヘテロアリーレンアミノ、アミノ、アミド、ホスフィノ、ホスフィンオキシド、ホスホルアミダート、ホスフィンアミダート、スルホンアミド、カルバマート、ウレイド、およびこれらの組合せから選択され、非置換または R15からそれぞれ独立に選択される１以上の置換基により置換されており;そして
各R15は独立に、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アリールアルキル、直鎖または分枝鎖 アリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 アリールアルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキニル、ハロ、直鎖または分枝鎖 ハロアルキル、シュードハロ、アジド、シアノ、ニトロ、OR60、NR60R61、COOR60、C(O)R60、C(O)NR60R61、S(O)qR60、S(O)qOR60、S(O)qNR60R61、NR60C(O)R61、NR60C(O)NR60R61、NR60S(O)qR60、SiR60R61R62、P(R60)2、P(O)(R60)2、P(OR60)2、P(O)(OR60)2、P(O)(OR60)(R61)およびP(O)NR60R61から選択される一価の基であり;
qは、0から2の整数であり;
各R60、R61 および R62 は、独立に、水素、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アラルキル、直鎖または分枝鎖 アラルケニル、直鎖または分枝鎖 アラルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニルまたは直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニルである、
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１０】
Zは、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、-(C(R15)2)d-、-(CH2)d-、-(CH2)dO-、-(CH2)dS-、>N(R15)、 -(C(R15)2)dO-、-C(R15)2)dS(O)u-、-O(C(R15)2)d-、-S(O)u(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)dO(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)dS(O)u(C(R15)2)d-、-N(R15)(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)dNR15-、-(C(R15)2)dN(R15)(C(R15)2)d-、-(S(R15)(Ou)w-、-(C(R15)2)d-、- (C(R15)2)dO(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)d(C(O)O)w(C(R15)2)d-、-(C(O)O)w(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)d(C(O)O)w-、-(C(S)(R15)w-、-(C(O))w(CR152)d-、-(CR15)d(C(O))w(CR15)d-、-(C(R15)2)d(C(O))w-、-N(R15)(C(R15)2)w-、-OC(R15)2C(O)-、-O((R15)2C(O)N(R15)-、-(C(R15)2)wN(R15)(C(R15)2)w-、-(C(R15)2)wN(R15)-、>P(O)v(R15)x、>P(O)u(R15)3、>P(O)u(C(R15)2)d、>Si(R15)2および これらの基のいずれかの組合せから選択され、ここで:
u、v およびxはそれぞれ独立に 0から5であり;
各dは独立に1〜20、または1〜12、または1-6、または1〜3の整数であり;
各wは独立に1〜6、または1〜3、または1〜2から選択される整数であり;そして、
各R15は独立に、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アリールアルキル、直鎖または分枝鎖 アリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 アリールアルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキニル、直鎖または分枝鎖 ハロアルキル、シュードハロ、OR60、NR60R61、COOR60、C(O)R60、C(O)NR60R61、S(O)qR60、S(O)qOR60、S(O)qNR60R61、NR60C(O)R61、NR60C(O)NR60R61、NR60S(O)qR60、SiR60R61R62、P(R60)2、P(O)(R60)2、P(OR60)2、P(O)(OR60)2、P(O)(OR60)(R61)および P(O)NR60R61から選択される一価の基であり;
qは0から2の整数であり;
各R60、R61および R62は、独立に、水素、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アラルキル、直鎖または分枝鎖 アラルケニル、直鎖または分枝鎖 アラルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニルまたは直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニルである、
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１１】
Zは１つの水素がないと三価となる以下の二価の部分から選択され: アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、>C(R15)2、-C(R15)=C(R15)-、>C=C(R23)(R24)、>C(R23)(R24)、-C≡C-、-O-、>S(A)u、>P(D)v(R15)、>P(D)v(ER15)、>N(R15)、N+(R23)(R24)、>Si(R15)2および>C(E);ここでuは0、1または2; vは0、1、2または3; Aは-O- または-NR15; Dは-S-または-O-;および Eは-S-、-O-または-NR15; それらの群はいずれの順序で組み合わされていてもよく;
各R15 は、水素 およびV-R18から独立に選択される一価の基であり;
各Vは、直接結合、アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、>C(R17)2、-C(R17)=C(R17)-、>C=C(R23)(R24)、>C(R23)(R24)、-C≡C-、-O-、>S(A)u、>P(D)v(R17)、>P(D)v(ER17)、>N(R17)、>N(COR17)、N+(R23)(R24)、>Si(R17)2 および>C(E) から独立に選択される二価の基であり; ここでuは0、1または2; vは0、1、2または3; Aは-O-または-NR17; Dは-S-または-O-;およびEは-S-、-O-または-NR17であり;
R17およびR18はそれぞれ、水素、SiR27R28R25、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20-から独立に選択され;
R19およびR20はそれぞれ、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキルおよびヘテロシクリルから独立に選択され;
R23およびR24 は以下の(i)または(ii)から選択され:
(i) R23およびR24 は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから独立に選択されるか;または、
(ii) R23および R24は、一緒になってアルキレン、アルケニレンまたはシクロアルキレンを形成し;
R25、R27およびR28は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20から選択される一価の基であり;
R15、R17、R18、R19、R20、R23、R24、R25、R27およびR28は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヒドロキシ、-S(O)h,R35（hは0、1 または2である）、-NR35R36、-COOR35、-COR35、-CONR35R36、N(R35)COR36、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アルコキシカルボニル、カルバモイル、チオカルバモイル、アルコキシカルボニル、カルボキシアリール、ハロ、シュードハロ、ハロアルキルおよびカルボキサミドからそれぞれ独立に選択される１以上の置換基によって置換されていてもよく;
R35 およびR36 はそれぞれ、水素、ハロ、シュードハロ、シアノ、アジド、ニトロ、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アミノ、アミド、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルアリールアミノ、ジアリールアミノおよびアリールアミノから独立に選択される、
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１２】
Z は、-(S1)t-M(R15)a-(S2)b-であり、ここで:
S1およびS2は、スペーサー部分であり;
tおよびbは、それぞれ独立に 0または1であり;
Mは、２以上の結合点を有する中心部分であり;
aは、1から4の整数であり;
各R15は、水素およびV-R18からなる群から独立に選択される一価の基であり;
各Vは、直接結合、アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、>C(R17)2、-C(R17)=C(R17)-、>C=C(R23)(R24)、>C(R23)(R24)、-C≡C-、-O-、>S(A)u、>P(D)v(R17)、>P(D)v(ER17)、>N(R17)、>N(COR17)、N+(R23)(R24)、>Si(R17)2および>C(E) から独立に選択される二価の基であり; ここで uは0、1または2; vは0、1、2または3; Aは-O-または-NR17; Dは-S-または-O-;およびEは-S-、-O-または-NR17であり;
R17およびR18は、それぞれ水素、SiR27R28R25、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20-から独立に選択され;
R19およびR20は、それぞれ水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキルおよびヘテロシクリルから独立に選択され;
R23およびR24は、以下の(i)または(ii)から選択され:
(i) R23およびR24は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから独立に選択されるか;または
(ii) R23および R24は、一緒になってアルキレン、アルケニレンまたはシクロアルキレンを形成する;
R25、R27およびR28は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20から選択される一価の基であり;
R15、R17、R18、R19、R20、R23、R24、R25、R27および R28は、それぞれ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、-S(O)h,R35（hは0、1 または2）、-NR35R36、-COOR35、-COR35、-CONR35R36、N(R35)COR36、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アルコキシカルボニル、カルバモイル、チオカルバモイル、アルコキシカルボニル、カルボキシアリール、ハロアルキルおよびカルボキサミドから独立に選択される１以上の置換基によって置換されていてもよく;
R35およびR36は、それぞれ、水素、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アミノ、アミド、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルアリールアミノ、ジアリールアミノおよびアリールアミノから独立に選択される;
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１３】
Zが-(S1)t-M(R15)a-(S2)b-L-となるように分析の前または最中に切断可能な結合を形成するLをさらにZが含む請求項 12の収集物。
【請求項１４】
L が、ジスルフィド部分、光切断可能な基、酸により切断可能な基、アルカリにより切断可能な基、酸化により切断可能な基、還元により切断可能な基、トリチルエーテル、オルトニトロ置換アリール基、o-ニトロベンジル、フェナシル、およびニトロフェニルスルフェニル基から選択される請求項 13の収集物。
【請求項１５】
M が、アルキレン、フェニレン、ビフェニレン、トリチル誘導体、-(CH2)r-、-(CH2O)r-、-(CH2CH2-O)r-、-(NH-(CH2)r-C(=O))s-、-(NH CH(R52)-C(=O))r-、-(O-(CH)r-C(=O))s-、
【化１】
から選択され、ここでrおよびsはそれぞれ独立に1から10の整数であり; R52は天然 α-アミノ酸の側鎖であり;およびzは1から4の整数である、
請求項12-14のいずれかの収集物。
【請求項１６】
S1およびS2が、それぞれ、-(CH2)r-、-(CH2O)-、- (CH2CH2-O)r-、-(NH-(CH2)r-C(=O))s-、-(NH-CH(R52)-C(=O))s-、-(O-(CH)r-C(=O))s-、
【化２】
から独立に選択され、rおよびsがそれぞれ独立に1から10の整数であり;
R52 が天然 α-アミノ酸の側鎖であり; そして
yが、0から4の整数である、
請求項12-15のいずれかの収集物。
【請求項１７】
少なくとも１０種の異なる捕獲化合物を含む請求項1-16のいずれかの収集物。
【請求項１８】
少なくとも５０種の異なる捕獲化合物を含む請求項1-17のいずれかの収集物。
【請求項１９】
少なくとも１００種の異なる捕獲化合物を含む請求項1-18のいずれかの収集物。
【請求項２０】
固定化された捕獲化合物が固体支持体上のアドレス可能位置に提示されている請求項3-7のいずれかの収集物。
【請求項２１】
溶解性官能基 Wが、ポリエチレングリコール、スルフェート、ポリスルフェート、ホスフェート、スルホネート、ポリスルホネート、炭水化物、デキストリン、ポリホスフェート、ポリ-カルボン酸、トリエタノールアミン、アルコール、水溶性ポリマー、アルキルおよびアリールカルボン酸の塩、グリコール、両親媒性化合物、四級アンモニウム塩、ベタイン、コリン、スピンゴミエリン、テトラメチル アルキル アンモニウム塩、テトラブチル アルキル アンモニウム塩、陽イオン性テンシド、イオン性テンシド、中性テンシド、スルホネート、化合物をより水溶性にするために用いることができる極性官能基、疎水性基、アルキル基、tert-ブチル、tert-アミル、イソアミル、イソプロピル、n-ヘキシル、sec-ヘキシル、イソヘキシル、n-ブチル、sec-ブチル、イソ-ブチル、n-アミル、アリール基、フェニル、およびナフチルから選択される請求項 2の収集物。
【請求項２２】
X が、活性エステル、活性ハロ部分、アミノ酸 側鎖-特異的官能基、金属錯体、α-ハロ エーテル、α-ハロ カルボニル基、マレイミド、金錯体、水銀錯体、エポキシド、イソチオシアネート、 -C(=O)O-Ph-pNO2、-C(=O)O-C6F5、-C(=O)-O-(N-スクシンイミジル)、-OCH2-I、-OCH2-Br、-OCH2-Cl、-C(O)CH2I、-C(O)CH2Br および-C(O)CH2Clから選択される請求項1-21のいずれかの収集物。
【請求項２３】
Y が、 受容体リガンド、酵素基質、ATP 類似体、酵素阻害剤、薬剤、遷移状態類似体、接着ペプチド、ペプチド類似体およびスタチンから選択される請求項1-22のいずれかの収集物。
【請求項２４】
Yが、配列番号1 から配列番号149に示すペプチドリガンドから選択されるペプチドリガンドである請求項1-22のいずれかの収集物。
【請求項２５】
Y が、図17a-17hhhhに示すものから選択される請求項1-22のいずれかの収集物。
【請求項２６】
Yが、発光、蛍光、リン光、化学発光、生物発光または比色官能基である請求項1-25のいずれかの収集物。
【請求項２７】
X が、図16a-bに示すものから選択される請求項1-26のいずれかの収集物。
【請求項２８】
Zが、光切断可能、酸切断可能、アルカリ切断可能、酸化的に切断可能、または還元的に切断可能な基である請求項1-27のいずれかの収集物。
【請求項２９】
収集物中の各捕獲化合物が同じX 部分を含むが、Y 部分において異なるものである請求項1-28のいずれかの収集物。
【請求項３０】
収集物中の各捕獲化合物が異なるXおよびY 部分を含む請求項1-28のいずれかの収集物。
【請求項３１】
以下の工程を含む生体分子の分析方法:
a)生体分子を含むサンプル組成物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物を接触させ、捕獲化合物-生体分子複合体を形成させる工程;および
b)結合した生体分子を同定または検出する工程。
【請求項３２】
生体分子がタンパク質である請求項 31の方法。
【請求項３３】
捕獲化合物がアドレス可能なアレイにおいて存在し; そして
アレイにおける各位置が異なる捕獲化合物を含む、
請求項 31または請求項 32の方法。
【請求項３４】
同定または検出が、捕獲化合物に結合した生体分子の質量分析によって行われる請求項31-33のいずれかの方法。
【請求項３５】
質量分析の前に生体分子-捕獲化合物 複合体の化学的または酵素的処理を行い、その部分を除去または切断することをさらに含む請求項 34の方法 。
【請求項３６】
捕獲化合物に結合した生体分子が、質量分析の前にプロテアーゼで処理される請求項 35の方法。
【請求項３７】
質量分析の形式が、マトリックス支援レーザー脱離イオン化-飛行時間型(MALDI-TOF) 質量分析、直交飛行時間型 (O-TOF) 質量分析またはエレクトロスプレー (ES) 質量分析である請求項34-36のいずれかの方法。
【請求項３８】
生体分子がタンパク質であり; そして、
工程 a)が捕獲化合物の部分 Yとタンパク質との相互作用の選択性が速度支配下にあるような条件下で行われる、
請求項 31の方法。
【請求項３９】
以下の工程を含むタンパク質 配座異性体を分離する方法:
生体分子を含むサンプル組成物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させる工程;
収集物のメンバーを分離する工程;および
混合物から結合したタンパク質を同定する工程、ここで各配座異性体は、収集物のメンバーに対して異なる結合特異性を有する。
【請求項４０】
同定が質量分析によって行われる請求項 39の方法。
【請求項４１】
少なくとも１つの 配座異性体が疾患と関係している請求項 39または請求項 40の方法。
【請求項４２】
サンプル組成物が細胞溶解物である請求項31-41のいずれかの方法。
【請求項４３】
以下の工程を含む生体分子の複雑な混合物の多様性を減少させる方法:
混合物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させ、生体分子と結合した捕獲化合物を形成させる工程; そして該接触させる工程の後に、
生体分子が結合した捕獲化合物を分離する工程。
【請求項４４】
生体分子の混合物が細胞溶解物である請求項 43の方法。
【請求項４５】
溶解物が作られる細胞が同調化されているかまたはある代謝状態で凍結されている請求項 42 および 44のいずれかの方法。
【請求項４６】
以下の工程を含む表現型特異的 生体分子の同定方法:
所定の表現型によって単一の対象からの細胞を選別して、少なくとも２つの別々の細胞のセットを作成する工程;
選別された細胞の各セットからの生体分子の混合物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させる工程;および、
捕獲化合物に結合した各セットからの生体分子の結合パターンを比較し、各セットについて異なる生体分子を同定し、それによって表現型特異的 生体分子を同定する工程。
【請求項４７】
選別前および/または選別後に細胞を同調化するかまたはある代謝状態で凍結する請求項 46の方法。
【請求項４８】
生体分子がタンパク質を含む請求項 46または請求項 47の方法。
【請求項４９】
結合した生体分子が質量分析によって同定される請求項 46または請求項 47の方法。
【請求項５０】
表現型が疾患表現型および健康表現型である請求項 46-49のいずれかの方法。
【請求項５１】
疾患表現型が腫瘍であり、健康 表現型が非腫瘍である請求項 50の方法。
【請求項５２】
接触させる工程が水性媒体中で行われ、生体分子が親水性である請求項 31-51のいずれかの方法。
【請求項５３】
接触させる工程が疎水性媒体中で行われ、生体分子が疎水性である請求項 31-51のいずれかの方法。
【請求項５４】
Qが化合物の固体支持体への結合を可能とし;そして、方法がさらに、接触させる工程の前、最中または後に、捕獲化合物を固体支持体に結合させる工程を含む請求項 31-53のいずれかの方法。
【請求項５５】
Qが固体支持体上での化合物の整列を可能とし;そして、方法がさらに、接触させる工程の前、最中または後に、捕獲化合物を固体支持体上に整列させる工程を含み、ここで:結果として得られる生体分子-捕獲化合物 複合体が固体支持体上の分離したスポットにある、請求項 31-53のいずれかの方法。
【請求項５６】
固体支持体が、ガラス、シリコン、金属、プラスチック、複合材料、シリカゲル、制御された細孔性ガラス、磁性ビーズ、またはセルロース ビーズである請求項 54または請求項 55の方法。
【請求項５７】
以下の工程を含む生体分子の分析方法:
(a)生体分子の第一の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の混合物を形成させる工程、ここで、第一の混合物を含む捕獲化合物は第一の質量改変タグを有する;
(b) 生体分子の第二の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の第二の混合物を形成させる工程、ここで、捕獲化合物が結合した分子の第二の混合物を含む化合物は、(i)質量改変タグを有さないか;または (ii)第二の質量改変タグを有する;
(c)工程 (a)および(b)の生成物をプールして、その混合物を作る工程;
(d)工程 c) の混合物中の異なるようにタグ付加された捕獲化合物が結合した生体分子を、Q 部分によって選別し、選別された複合体のアレイを作る工程; および
(e)各位置における複合体を分析する工程。
【請求項５８】
以下の工程を含む生体分子の分析方法:
(a)生体分子の第一の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の混合物を形成させる工程、ここで、第一の混合物を含む捕獲化合物は第一の質量改変タグを有し、Q部分を介して固体支持体上に固定化されている;
(b) 生体分子の第二の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の第二の混合物を形成させる工程、ここで、捕獲化合物が結合した分子の第二の混合物を含む化合物は、 (i)質量改変タグを有さないか;または (ii)第二の質量改変タグを有し、Q 部分を介して固体支持体上に固定化されている;
(c)工程 (a) および (b) の生成物をプールして、その混合物を作る工程; および、
(d)結合した化合物を質量分析により分析する工程。
【請求項５９】
以下の工程を含む生体分子 相互作用の分析方法:
a)生体分子の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させて、捕獲化合物が結合した生体分子 複合体を形成させる工程、ここで、複合体は、マトリックス支援レーザー脱離イオン化-飛行時間型(MALDI-TOF) 質量分析条件に対して安定である;
b)捕獲化合物が結合した生体分子 複合体と、生体分子の混合物または小分子の混合物から選択される化合物を含む混合物とを接触させる工程、ここで、混合物中の化合物は、捕獲化合物に結合した生体分子に結合する;
c)工程 a)、工程 b)、または工程 d)の前に、捕獲化合物の各セットのQ部分を介して捕獲化合物を固体支持体上に固定化させる工程;
d)結合した化合物を質量分析により分析する工程。
【請求項６０】
小分子が薬剤候補であり、有機小分子、ペプチド、ペプチド類似体、抗体、抗体の断片および組換えまたは合成抗体およびその断片からなる群から選択され;方法が生体分子に結合する薬剤候補を同定するための方法である請求項 59の方法。
【請求項６１】
工程 a)において形成された捕獲化合物-生体分子 複合体が工程 b)において生体分子の混合物と接触され、生体分子 複合体または生化学的経路の成分が同定される、請求項 59 または請求項 60の方法。
【請求項６２】
生体分子がタンパク質である請求項 59-61のいずれかの方法。
【請求項６３】
生体分子の混合物がタンパク質 混合物を含み; そして、方法が生体分子-タンパク質または生体分子-小分子 相互作用を判定するためのものである、請求項 59の方法。
【請求項６４】
以下を含む生体分子の混合物の分析のためのシステム:
請求項1-30のいずれかの収集物;
収集物を用いる生体分子の分析を制御および実行するための指示がプログラムされたコンピュータ;
質量分析計; および
質量分析計によって生じるデータを分析するためのソフトウェア。
【請求項６５】
自動化されたシステムである請求項 64のシステム。
【請求項６６】
液体クロマトグラフィー装置をさらに含む請求項 64または請求項 65のシステム。
【請求項６７】
以下の工程を含む請求項 34-37のいずれかの方法によって得られた質量分析データを処理する方法:
(a)バックグラウンドを差し引く工程;
(b)ノイズを低下させる工程;
(c)分子量を較正する工程;および、
(d)ピークをリファインする工程。
【請求項６８】
工程 (d)がピーク積分を含む請求項 67の方法。
【請求項６９】
さらに以下の工程を含む請求項 67または請求項 68の方法:
(e)処理されたデータを既存のタンパク質 データベースまたはオープンリーディングフレーム を含むDNA データベースと比較し、タンパク質が既知のものであるかどうかを判定する工程、および
(f)タンパク質が既知であれば、修飾を同定する工程。
【請求項７０】
さらに、健康個体および疾患個体の組織からのデータ、または異なる 生理的または発生的段階からのデータ、または、組織の異なる部分からのデータを比較する工程を含む請求項 67-69のいずれかの方法:
【請求項１】
複数の捕獲化合物を含む捕獲化合物の収集物、ここで、収集物中の各個々の捕獲化合物は以下を含む:
生体分子に共有結合する部分 X;
捕獲化合物が部分 Yが存在する場合にそれが存在しない場合よりも少ない生体分子と結合するように捕獲化合物による結合の選択性を高める部分Y、ここで部分 Yは、捕獲化合物の親和性、立体的特性および電子的特性のうちの１以上を修飾する;
収集物中の捕獲化合物の分離または固定化を可能とする部分 Q、ここでQは蛍光部分またはビオチンを含む;
部分 X、YおよびQを提示する部分 Z、ここでZは50より少ない原子数を有する。
【請求項２】
収集物中の捕獲化合物が、捕獲化合物の溶解性に影響を及ぼす溶解性官能基 Wをさらに含む請求項 1の捕獲化合物の収集物。
【請求項３】
捕獲化合物が固体支持体上に提供されている請求項 1または請求項 2の収集物。
【請求項４】
捕獲化合物が固体支持体にQを介して結合している請求項 3の収集物。
【請求項５】
固体支持体がビーズである請求項 3または請求項 4の収集物。
【請求項６】
固体支持体が、ガラス、シリコン、金属、プラスチック、複合材料、シリカゲル、制御された細孔性ガラス、磁性ビーズ、またはセルロースビーズである請求項3-5のいずれかの収集物。
【請求項７】
Qがビオチンを含み、固体支持体がストレプトアビジンを含む請求項3-6のいずれかの収集物。
【請求項８】
Zがアミノ酸である請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項９】
Zは、直鎖または分枝鎖 アルキレン、直鎖または分枝鎖 アルケニレン、直鎖または分枝鎖 アルキニレン、直鎖または分枝鎖 アルキレンオキシ、直鎖または分枝鎖 アルキレンチオ、直鎖または分枝鎖 アルキレンカルボニル、直鎖または分枝鎖 アルキレンアミノ、シクロアルキレン、シクロアルケニレン、シクロアルキニレン、シクロアルキレンオキシ、シクロアルキレンチオ、シクロアルキレンカルボニル、シクロアルキレンアミノ、ヘテロシクリレン、アリーレン、アリーレンオキシ、アリーレンチオ、アリーレンカルボニル、アリーレンアミノ、ヘテロアリーレン、ヘテロアリーレンオキシ、ヘテロアリーレンチオ、ヘテロアリーレンカルボニル、ヘテロアリーレンアミノ、アミノ、アミド、ホスフィノ、ホスフィンオキシド、ホスホルアミダート、ホスフィンアミダート、スルホンアミド、カルバマート、ウレイド、およびこれらの組合せから選択され、非置換または R15からそれぞれ独立に選択される１以上の置換基により置換されており;そして
各R15は独立に、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アリールアルキル、直鎖または分枝鎖 アリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 アリールアルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキニル、ハロ、直鎖または分枝鎖 ハロアルキル、シュードハロ、アジド、シアノ、ニトロ、OR60、NR60R61、COOR60、C(O)R60、C(O)NR60R61、S(O)qR60、S(O)qOR60、S(O)qNR60R61、NR60C(O)R61、NR60C(O)NR60R61、NR60S(O)qR60、SiR60R61R62、P(R60)2、P(O)(R60)2、P(OR60)2、P(O)(OR60)2、P(O)(OR60)(R61)およびP(O)NR60R61から選択される一価の基であり;
qは、0から2の整数であり;
各R60、R61 および R62 は、独立に、水素、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アラルキル、直鎖または分枝鎖 アラルケニル、直鎖または分枝鎖 アラルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニルまたは直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニルである、
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１０】
Zは、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、-(C(R15)2)d-、-(CH2)d-、-(CH2)dO-、-(CH2)dS-、>N(R15)、 -(C(R15)2)dO-、-C(R15)2)dS(O)u-、-O(C(R15)2)d-、-S(O)u(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)dO(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)dS(O)u(C(R15)2)d-、-N(R15)(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)dNR15-、-(C(R15)2)dN(R15)(C(R15)2)d-、-(S(R15)(Ou)w-、-(C(R15)2)d-、- (C(R15)2)dO(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)d(C(O)O)w(C(R15)2)d-、-(C(O)O)w(C(R15)2)d-、-(C(R15)2)d(C(O)O)w-、-(C(S)(R15)w-、-(C(O))w(CR152)d-、-(CR15)d(C(O))w(CR15)d-、-(C(R15)2)d(C(O))w-、-N(R15)(C(R15)2)w-、-OC(R15)2C(O)-、-O((R15)2C(O)N(R15)-、-(C(R15)2)wN(R15)(C(R15)2)w-、-(C(R15)2)wN(R15)-、>P(O)v(R15)x、>P(O)u(R15)3、>P(O)u(C(R15)2)d、>Si(R15)2および これらの基のいずれかの組合せから選択され、ここで:
u、v およびxはそれぞれ独立に 0から5であり;
各dは独立に1〜20、または1〜12、または1-6、または1〜3の整数であり;
各wは独立に1〜6、または1〜3、または1〜2から選択される整数であり;そして、
各R15は独立に、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アリールアルキル、直鎖または分枝鎖 アリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 アリールアルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアリールアルキニル、直鎖または分枝鎖 ハロアルキル、シュードハロ、OR60、NR60R61、COOR60、C(O)R60、C(O)NR60R61、S(O)qR60、S(O)qOR60、S(O)qNR60R61、NR60C(O)R61、NR60C(O)NR60R61、NR60S(O)qR60、SiR60R61R62、P(R60)2、P(O)(R60)2、P(OR60)2、P(O)(OR60)2、P(O)(OR60)(R61)および P(O)NR60R61から選択される一価の基であり;
qは0から2の整数であり;
各R60、R61および R62は、独立に、水素、直鎖または分枝鎖 アルキル、直鎖または分枝鎖 アルケニル、直鎖または分枝鎖 アルキニル、アリール、直鎖または分枝鎖 アラルキル、直鎖または分枝鎖 アラルケニル、直鎖または分枝鎖 アラルキニル、ヘテロアリール、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルケニル、直鎖または分枝鎖 ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキル、直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルケニルまたは直鎖または分枝鎖 ヘテロシクリルアルキニルである、
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１１】
Zは１つの水素がないと三価となる以下の二価の部分から選択され: アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、>C(R15)2、-C(R15)=C(R15)-、>C=C(R23)(R24)、>C(R23)(R24)、-C≡C-、-O-、>S(A)u、>P(D)v(R15)、>P(D)v(ER15)、>N(R15)、N+(R23)(R24)、>Si(R15)2および>C(E);ここでuは0、1または2; vは0、1、2または3; Aは-O- または-NR15; Dは-S-または-O-;および Eは-S-、-O-または-NR15; それらの群はいずれの順序で組み合わされていてもよく;
各R15 は、水素 およびV-R18から独立に選択される一価の基であり;
各Vは、直接結合、アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、>C(R17)2、-C(R17)=C(R17)-、>C=C(R23)(R24)、>C(R23)(R24)、-C≡C-、-O-、>S(A)u、>P(D)v(R17)、>P(D)v(ER17)、>N(R17)、>N(COR17)、N+(R23)(R24)、>Si(R17)2 および>C(E) から独立に選択される二価の基であり; ここでuは0、1または2; vは0、1、2または3; Aは-O-または-NR17; Dは-S-または-O-;およびEは-S-、-O-または-NR17であり;
R17およびR18はそれぞれ、水素、SiR27R28R25、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20-から独立に選択され;
R19およびR20はそれぞれ、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキルおよびヘテロシクリルから独立に選択され;
R23およびR24 は以下の(i)または(ii)から選択され:
(i) R23およびR24 は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから独立に選択されるか;または、
(ii) R23および R24は、一緒になってアルキレン、アルケニレンまたはシクロアルキレンを形成し;
R25、R27およびR28は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20から選択される一価の基であり;
R15、R17、R18、R19、R20、R23、R24、R25、R27およびR28は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヒドロキシ、-S(O)h,R35（hは0、1 または2である）、-NR35R36、-COOR35、-COR35、-CONR35R36、N(R35)COR36、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アルコキシカルボニル、カルバモイル、チオカルバモイル、アルコキシカルボニル、カルボキシアリール、ハロ、シュードハロ、ハロアルキルおよびカルボキサミドからそれぞれ独立に選択される１以上の置換基によって置換されていてもよく;
R35 およびR36 はそれぞれ、水素、ハロ、シュードハロ、シアノ、アジド、ニトロ、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アミノ、アミド、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルアリールアミノ、ジアリールアミノおよびアリールアミノから独立に選択される、
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１２】
Z は、-(S1)t-M(R15)a-(S2)b-であり、ここで:
S1およびS2は、スペーサー部分であり;
tおよびbは、それぞれ独立に 0または1であり;
Mは、２以上の結合点を有する中心部分であり;
aは、1から4の整数であり;
各R15は、水素およびV-R18からなる群から独立に選択される一価の基であり;
各Vは、直接結合、アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、>C(R17)2、-C(R17)=C(R17)-、>C=C(R23)(R24)、>C(R23)(R24)、-C≡C-、-O-、>S(A)u、>P(D)v(R17)、>P(D)v(ER17)、>N(R17)、>N(COR17)、N+(R23)(R24)、>Si(R17)2および>C(E) から独立に選択される二価の基であり; ここで uは0、1または2; vは0、1、2または3; Aは-O-または-NR17; Dは-S-または-O-;およびEは-S-、-O-または-NR17であり;
R17およびR18は、それぞれ水素、SiR27R28R25、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20-から独立に選択され;
R19およびR20は、それぞれ水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキルおよびヘテロシクリルから独立に選択され;
R23およびR24は、以下の(i)または(ii)から選択され:
(i) R23およびR24は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから独立に選択されるか;または
(ii) R23および R24は、一緒になってアルキレン、アルケニレンまたはシクロアルキレンを形成する;
R25、R27およびR28は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシおよび-NR19R20から選択される一価の基であり;
R15、R17、R18、R19、R20、R23、R24、R25、R27および R28は、それぞれ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、-S(O)h,R35（hは0、1 または2）、-NR35R36、-COOR35、-COR35、-CONR35R36、N(R35)COR36、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アルコキシカルボニル、カルバモイル、チオカルバモイル、アルコキシカルボニル、カルボキシアリール、ハロアルキルおよびカルボキサミドから独立に選択される１以上の置換基によって置換されていてもよく;
R35およびR36は、それぞれ、水素、トリアルキルシリル、ジアルキルアリールシリル、アルキルジアリールシリル、トリアリールシリル、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアラルケニル、ヘテロアラルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、ヘテロアラルコキシ、アミノ、アミド、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルアリールアミノ、ジアリールアミノおよびアリールアミノから独立に選択される;
請求項1-7のいずれかの収集物。
【請求項１３】
Zが-(S1)t-M(R15)a-(S2)b-L-となるように分析の前または最中に切断可能な結合を形成するLをさらにZが含む請求項 12の収集物。
【請求項１４】
L が、ジスルフィド部分、光切断可能な基、酸により切断可能な基、アルカリにより切断可能な基、酸化により切断可能な基、還元により切断可能な基、トリチルエーテル、オルトニトロ置換アリール基、o-ニトロベンジル、フェナシル、およびニトロフェニルスルフェニル基から選択される請求項 13の収集物。
【請求項１５】
M が、アルキレン、フェニレン、ビフェニレン、トリチル誘導体、-(CH2)r-、-(CH2O)r-、-(CH2CH2-O)r-、-(NH-(CH2)r-C(=O))s-、-(NH CH(R52)-C(=O))r-、-(O-(CH)r-C(=O))s-、
【化１】
から選択され、ここでrおよびsはそれぞれ独立に1から10の整数であり; R52は天然 α-アミノ酸の側鎖であり;およびzは1から4の整数である、
請求項12-14のいずれかの収集物。
【請求項１６】
S1およびS2が、それぞれ、-(CH2)r-、-(CH2O)-、- (CH2CH2-O)r-、-(NH-(CH2)r-C(=O))s-、-(NH-CH(R52)-C(=O))s-、-(O-(CH)r-C(=O))s-、
【化２】
から独立に選択され、rおよびsがそれぞれ独立に1から10の整数であり;
R52 が天然 α-アミノ酸の側鎖であり; そして
yが、0から4の整数である、
請求項12-15のいずれかの収集物。
【請求項１７】
少なくとも１０種の異なる捕獲化合物を含む請求項1-16のいずれかの収集物。
【請求項１８】
少なくとも５０種の異なる捕獲化合物を含む請求項1-17のいずれかの収集物。
【請求項１９】
少なくとも１００種の異なる捕獲化合物を含む請求項1-18のいずれかの収集物。
【請求項２０】
固定化された捕獲化合物が固体支持体上のアドレス可能位置に提示されている請求項3-7のいずれかの収集物。
【請求項２１】
溶解性官能基 Wが、ポリエチレングリコール、スルフェート、ポリスルフェート、ホスフェート、スルホネート、ポリスルホネート、炭水化物、デキストリン、ポリホスフェート、ポリ-カルボン酸、トリエタノールアミン、アルコール、水溶性ポリマー、アルキルおよびアリールカルボン酸の塩、グリコール、両親媒性化合物、四級アンモニウム塩、ベタイン、コリン、スピンゴミエリン、テトラメチル アルキル アンモニウム塩、テトラブチル アルキル アンモニウム塩、陽イオン性テンシド、イオン性テンシド、中性テンシド、スルホネート、化合物をより水溶性にするために用いることができる極性官能基、疎水性基、アルキル基、tert-ブチル、tert-アミル、イソアミル、イソプロピル、n-ヘキシル、sec-ヘキシル、イソヘキシル、n-ブチル、sec-ブチル、イソ-ブチル、n-アミル、アリール基、フェニル、およびナフチルから選択される請求項 2の収集物。
【請求項２２】
X が、活性エステル、活性ハロ部分、アミノ酸 側鎖-特異的官能基、金属錯体、α-ハロ エーテル、α-ハロ カルボニル基、マレイミド、金錯体、水銀錯体、エポキシド、イソチオシアネート、 -C(=O)O-Ph-pNO2、-C(=O)O-C6F5、-C(=O)-O-(N-スクシンイミジル)、-OCH2-I、-OCH2-Br、-OCH2-Cl、-C(O)CH2I、-C(O)CH2Br および-C(O)CH2Clから選択される請求項1-21のいずれかの収集物。
【請求項２３】
Y が、 受容体リガンド、酵素基質、ATP 類似体、酵素阻害剤、薬剤、遷移状態類似体、接着ペプチド、ペプチド類似体およびスタチンから選択される請求項1-22のいずれかの収集物。
【請求項２４】
Yが、配列番号1 から配列番号149に示すペプチドリガンドから選択されるペプチドリガンドである請求項1-22のいずれかの収集物。
【請求項２５】
Y が、図17a-17hhhhに示すものから選択される請求項1-22のいずれかの収集物。
【請求項２６】
Yが、発光、蛍光、リン光、化学発光、生物発光または比色官能基である請求項1-25のいずれかの収集物。
【請求項２７】
X が、図16a-bに示すものから選択される請求項1-26のいずれかの収集物。
【請求項２８】
Zが、光切断可能、酸切断可能、アルカリ切断可能、酸化的に切断可能、または還元的に切断可能な基である請求項1-27のいずれかの収集物。
【請求項２９】
収集物中の各捕獲化合物が同じX 部分を含むが、Y 部分において異なるものである請求項1-28のいずれかの収集物。
【請求項３０】
収集物中の各捕獲化合物が異なるXおよびY 部分を含む請求項1-28のいずれかの収集物。
【請求項３１】
以下の工程を含む生体分子の分析方法:
a)生体分子を含むサンプル組成物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物を接触させ、捕獲化合物-生体分子複合体を形成させる工程;および
b)結合した生体分子を同定または検出する工程。
【請求項３２】
生体分子がタンパク質である請求項 31の方法。
【請求項３３】
捕獲化合物がアドレス可能なアレイにおいて存在し; そして
アレイにおける各位置が異なる捕獲化合物を含む、
請求項 31または請求項 32の方法。
【請求項３４】
同定または検出が、捕獲化合物に結合した生体分子の質量分析によって行われる請求項31-33のいずれかの方法。
【請求項３５】
質量分析の前に生体分子-捕獲化合物 複合体の化学的または酵素的処理を行い、その部分を除去または切断することをさらに含む請求項 34の方法 。
【請求項３６】
捕獲化合物に結合した生体分子が、質量分析の前にプロテアーゼで処理される請求項 35の方法。
【請求項３７】
質量分析の形式が、マトリックス支援レーザー脱離イオン化-飛行時間型(MALDI-TOF) 質量分析、直交飛行時間型 (O-TOF) 質量分析またはエレクトロスプレー (ES) 質量分析である請求項34-36のいずれかの方法。
【請求項３８】
生体分子がタンパク質であり; そして、
工程 a)が捕獲化合物の部分 Yとタンパク質との相互作用の選択性が速度支配下にあるような条件下で行われる、
請求項 31の方法。
【請求項３９】
以下の工程を含むタンパク質 配座異性体を分離する方法:
生体分子を含むサンプル組成物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させる工程;
収集物のメンバーを分離する工程;および
混合物から結合したタンパク質を同定する工程、ここで各配座異性体は、収集物のメンバーに対して異なる結合特異性を有する。
【請求項４０】
同定が質量分析によって行われる請求項 39の方法。
【請求項４１】
少なくとも１つの 配座異性体が疾患と関係している請求項 39または請求項 40の方法。
【請求項４２】
サンプル組成物が細胞溶解物である請求項31-41のいずれかの方法。
【請求項４３】
以下の工程を含む生体分子の複雑な混合物の多様性を減少させる方法:
混合物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させ、生体分子と結合した捕獲化合物を形成させる工程; そして該接触させる工程の後に、
生体分子が結合した捕獲化合物を分離する工程。
【請求項４４】
生体分子の混合物が細胞溶解物である請求項 43の方法。
【請求項４５】
溶解物が作られる細胞が同調化されているかまたはある代謝状態で凍結されている請求項 42 および 44のいずれかの方法。
【請求項４６】
以下の工程を含む表現型特異的 生体分子の同定方法:
所定の表現型によって単一の対象からの細胞を選別して、少なくとも２つの別々の細胞のセットを作成する工程;
選別された細胞の各セットからの生体分子の混合物と請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させる工程;および、
捕獲化合物に結合した各セットからの生体分子の結合パターンを比較し、各セットについて異なる生体分子を同定し、それによって表現型特異的 生体分子を同定する工程。
【請求項４７】
選別前および/または選別後に細胞を同調化するかまたはある代謝状態で凍結する請求項 46の方法。
【請求項４８】
生体分子がタンパク質を含む請求項 46または請求項 47の方法。
【請求項４９】
結合した生体分子が質量分析によって同定される請求項 46または請求項 47の方法。
【請求項５０】
表現型が疾患表現型および健康表現型である請求項 46-49のいずれかの方法。
【請求項５１】
疾患表現型が腫瘍であり、健康 表現型が非腫瘍である請求項 50の方法。
【請求項５２】
接触させる工程が水性媒体中で行われ、生体分子が親水性である請求項 31-51のいずれかの方法。
【請求項５３】
接触させる工程が疎水性媒体中で行われ、生体分子が疎水性である請求項 31-51のいずれかの方法。
【請求項５４】
Qが化合物の固体支持体への結合を可能とし;そして、方法がさらに、接触させる工程の前、最中または後に、捕獲化合物を固体支持体に結合させる工程を含む請求項 31-53のいずれかの方法。
【請求項５５】
Qが固体支持体上での化合物の整列を可能とし;そして、方法がさらに、接触させる工程の前、最中または後に、捕獲化合物を固体支持体上に整列させる工程を含み、ここで:結果として得られる生体分子-捕獲化合物 複合体が固体支持体上の分離したスポットにある、請求項 31-53のいずれかの方法。
【請求項５６】
固体支持体が、ガラス、シリコン、金属、プラスチック、複合材料、シリカゲル、制御された細孔性ガラス、磁性ビーズ、またはセルロース ビーズである請求項 54または請求項 55の方法。
【請求項５７】
以下の工程を含む生体分子の分析方法:
(a)生体分子の第一の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の混合物を形成させる工程、ここで、第一の混合物を含む捕獲化合物は第一の質量改変タグを有する;
(b) 生体分子の第二の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の第二の混合物を形成させる工程、ここで、捕獲化合物が結合した分子の第二の混合物を含む化合物は、(i)質量改変タグを有さないか;または (ii)第二の質量改変タグを有する;
(c)工程 (a)および(b)の生成物をプールして、その混合物を作る工程;
(d)工程 c) の混合物中の異なるようにタグ付加された捕獲化合物が結合した生体分子を、Q 部分によって選別し、選別された複合体のアレイを作る工程; および
(e)各位置における複合体を分析する工程。
【請求項５８】
以下の工程を含む生体分子の分析方法:
(a)生体分子の第一の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の混合物を形成させる工程、ここで、第一の混合物を含む捕獲化合物は第一の質量改変タグを有し、Q部分を介して固体支持体上に固定化されている;
(b) 生体分子の第二の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを反応させて、捕獲化合物が結合した生体分子の第二の混合物を形成させる工程、ここで、捕獲化合物が結合した分子の第二の混合物を含む化合物は、 (i)質量改変タグを有さないか;または (ii)第二の質量改変タグを有し、Q 部分を介して固体支持体上に固定化されている;
(c)工程 (a) および (b) の生成物をプールして、その混合物を作る工程; および、
(d)結合した化合物を質量分析により分析する工程。
【請求項５９】
以下の工程を含む生体分子 相互作用の分析方法:
a)生体分子の混合物と、請求項1-30のいずれかの捕獲化合物の収集物とを接触させて、捕獲化合物が結合した生体分子 複合体を形成させる工程、ここで、複合体は、マトリックス支援レーザー脱離イオン化-飛行時間型(MALDI-TOF) 質量分析条件に対して安定である;
b)捕獲化合物が結合した生体分子 複合体と、生体分子の混合物または小分子の混合物から選択される化合物を含む混合物とを接触させる工程、ここで、混合物中の化合物は、捕獲化合物に結合した生体分子に結合する;
c)工程 a)、工程 b)、または工程 d)の前に、捕獲化合物の各セットのQ部分を介して捕獲化合物を固体支持体上に固定化させる工程;
d)結合した化合物を質量分析により分析する工程。
【請求項６０】
小分子が薬剤候補であり、有機小分子、ペプチド、ペプチド類似体、抗体、抗体の断片および組換えまたは合成抗体およびその断片からなる群から選択され;方法が生体分子に結合する薬剤候補を同定するための方法である請求項 59の方法。
【請求項６１】
工程 a)において形成された捕獲化合物-生体分子 複合体が工程 b)において生体分子の混合物と接触され、生体分子 複合体または生化学的経路の成分が同定される、請求項 59 または請求項 60の方法。
【請求項６２】
生体分子がタンパク質である請求項 59-61のいずれかの方法。
【請求項６３】
生体分子の混合物がタンパク質 混合物を含み; そして、方法が生体分子-タンパク質または生体分子-小分子 相互作用を判定するためのものである、請求項 59の方法。
【請求項６４】
以下を含む生体分子の混合物の分析のためのシステム:
請求項1-30のいずれかの収集物;
収集物を用いる生体分子の分析を制御および実行するための指示がプログラムされたコンピュータ;
質量分析計; および
質量分析計によって生じるデータを分析するためのソフトウェア。
【請求項６５】
自動化されたシステムである請求項 64のシステム。
【請求項６６】
液体クロマトグラフィー装置をさらに含む請求項 64または請求項 65のシステム。
【請求項６７】
以下の工程を含む請求項 34-37のいずれかの方法によって得られた質量分析データを処理する方法:
(a)バックグラウンドを差し引く工程;
(b)ノイズを低下させる工程;
(c)分子量を較正する工程;および、
(d)ピークをリファインする工程。
【請求項６８】
工程 (d)がピーク積分を含む請求項 67の方法。
【請求項６９】
さらに以下の工程を含む請求項 67または請求項 68の方法:
(e)処理されたデータを既存のタンパク質 データベースまたはオープンリーディングフレーム を含むDNA データベースと比較し、タンパク質が既知のものであるかどうかを判定する工程、および
(f)タンパク質が既知であれば、修飾を同定する工程。
【請求項７０】
さらに、健康個体および疾患個体の組織からのデータ、または異なる 生理的または発生的段階からのデータ、または、組織の異なる部分からのデータを比較する工程を含む請求項 67-69のいずれかの方法:
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５ａ】
【図１５ｂ】
【図１６ａ】
【図１６ｂ】
【図１７ａ】
【図１７ｂ】
【図１７ｃ】
【図１７ｄ】
【図１７ｅ】
【図１７ｆ】
【図１７ｇ】
【図１７ｈ】
【図１７ｉ】
【図１７ｊ】
【図１７ｋ】
【図１７ｌ】
【図１７ｍ】
【図１７ｎ】
【図１７ｏ】
【図１７ｐ】
【図１７ｑ】
【図１７ｒ】
【図１７ｓ】
【図１７ｔ】
【図１７ｕ】
【図１７ｖ】
【図１７ｗ】
【図１７ｘ】
【図１７ｙ】
【図１７ｚ】
【図１７ａａ】
【図１７ｂｂ】
【図１７ｃｃ】
【図１７ｄｄ】
【図１７ｅｅ】
【図１７ｆｆ】
【図１７ｇｇ】
【図１７ｈｈ】
【図１７ｉｉ】
【図１７ｊｊ】
【図１７ｋｋ】
【図１７ｌｌ】
【図１７ｍｍ】
【図１７ｎｎ】
【図１７ｏｏ】
【図１７ｐｐ】
【図１７ｑｑ】
【図１７ｒｒ】
【図１７ｓｓ】
【図１７ｔｔ】
【図１７ｕｕ】
【図１７ｖｖ】
【図１７ｗｗ】
【図１７ｘｘ】
【図１７ｙｙ】
【図１７ｚｚ】
【図１７ａａａ】
【図１７ｂｂｂ】
【図１７ｃｃｃ】
【図１７ｄｄｄ】
【図１７ｅｅｅ】
【図１７ｆｆｆ】
【図１７ｇｇｇ】
【図１７ｈｈｈ】
【図１７ｉｉｉ】
【図１７ｊｊｊ】
【図１７ｋｋｋ】
【図１７ｌｌｌ】
【図１７ｍｍｍ】
【図１７ｎｎｎ】
【図１７ｏｏｏ】
【図１７ｐｐｐ】
【図１７ｑｑｑ】
【図１７ｒｒｒ】
【図１７ｓｓｓ】
【図１７ｔｔｔ】
【図１７ｕｕｕ】
【図１７ｖｖｖ】
【図１７ｗｗｗ】
【図１７ｘｘｘ】
【図１７ｙｙｙ】
【図１７ｚｚｚ】
【図１７ａａａａ】
【図１７ｂｂｂｂ】
【図１７ｃｃｃｃ】
【図１７ｄｄｄｄ】
【図１７ｅｅｅｅ】
【図１７ｆｆｆｆ】
【図１７ｇｇｇｇ】
【図１７ｈｈｈｈ】
【図１８】
【図１９ａ】
【図１９ｂ】
【図１９ｃ】
【図２０ａ】
【図２０ｂ】
【図２０ｃ】
【図２０ｄ】
【図２０ｅ】
【図２０ｆ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５ａ】
【図１５ｂ】
【図１６ａ】
【図１６ｂ】
【図１７ａ】
【図１７ｂ】
【図１７ｃ】
【図１７ｄ】
【図１７ｅ】
【図１７ｆ】
【図１７ｇ】
【図１７ｈ】
【図１７ｉ】
【図１７ｊ】
【図１７ｋ】
【図１７ｌ】
【図１７ｍ】
【図１７ｎ】
【図１７ｏ】
【図１７ｐ】
【図１７ｑ】
【図１７ｒ】
【図１７ｓ】
【図１７ｔ】
【図１７ｕ】
【図１７ｖ】
【図１７ｗ】
【図１７ｘ】
【図１７ｙ】
【図１７ｚ】
【図１７ａａ】
【図１７ｂｂ】
【図１７ｃｃ】
【図１７ｄｄ】
【図１７ｅｅ】
【図１７ｆｆ】
【図１７ｇｇ】
【図１７ｈｈ】
【図１７ｉｉ】
【図１７ｊｊ】
【図１７ｋｋ】
【図１７ｌｌ】
【図１７ｍｍ】
【図１７ｎｎ】
【図１７ｏｏ】
【図１７ｐｐ】
【図１７ｑｑ】
【図１７ｒｒ】
【図１７ｓｓ】
【図１７ｔｔ】
【図１７ｕｕ】
【図１７ｖｖ】
【図１７ｗｗ】
【図１７ｘｘ】
【図１７ｙｙ】
【図１７ｚｚ】
【図１７ａａａ】
【図１７ｂｂｂ】
【図１７ｃｃｃ】
【図１７ｄｄｄ】
【図１７ｅｅｅ】
【図１７ｆｆｆ】
【図１７ｇｇｇ】
【図１７ｈｈｈ】
【図１７ｉｉｉ】
【図１７ｊｊｊ】
【図１７ｋｋｋ】
【図１７ｌｌｌ】
【図１７ｍｍｍ】
【図１７ｎｎｎ】
【図１７ｏｏｏ】
【図１７ｐｐｐ】
【図１７ｑｑｑ】
【図１７ｒｒｒ】
【図１７ｓｓｓ】
【図１７ｔｔｔ】
【図１７ｕｕｕ】
【図１７ｖｖｖ】
【図１７ｗｗｗ】
【図１７ｘｘｘ】
【図１７ｙｙｙ】
【図１７ｚｚｚ】
【図１７ａａａａ】
【図１７ｂｂｂｂ】
【図１７ｃｃｃｃ】
【図１７ｄｄｄｄ】
【図１７ｅｅｅｅ】
【図１７ｆｆｆｆ】
【図１７ｇｇｇｇ】
【図１７ｈｈｈｈ】
【図１８】
【図１９ａ】
【図１９ｂ】
【図１９ｃ】
【図２０ａ】
【図２０ｂ】
【図２０ｃ】
【図２０ｄ】
【図２０ｅ】
【図２０ｆ】
【公開番号】特開２００９−１９２５４８（Ｐ２００９−１９２５４８Ａ）
【公開日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１３３１１４（Ｐ２００９−１３３１１４）
【出願日】平成２１年６月２日（２００９．６．２）
【分割の表示】特願２００６−２４０６１４（Ｐ２００６−２４０６１４）の分割
【原出願日】平成１４年７月１６日（２００２．７．１６）
【出願人】（５０８２１０７６７）カプロテック・バイオアナリティクス・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング (1)
【氏名又は名称原語表記】ｃａｐｒｏｔｅｃ ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃｓ ＧｍｂＨ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年６月２日（２００９．６．２）
【分割の表示】特願２００６−２４０６１４（Ｐ２００６−２４０６１４）の分割
【原出願日】平成１４年７月１６日（２００２．７．１６）
【出願人】（５０８２１０７６７）カプロテック・バイオアナリティクス・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング (1)
【氏名又は名称原語表記】ｃａｐｒｏｔｅｃ ｂｉｏａｎａｌｙｔｉｃｓ ＧｍｂＨ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]