新規な受容体のヘテロ二量体／ヘテロオリゴマー
少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなる、ヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなるヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質は、細胞内において単独で機能するわけではなく、安定的な、あるいは一時的な複合体として機能し、タンパク質間相互作用がタンパク質の機能の重要な決定因子となっている（非特許文献１参照）。更にタンパク質及びタンパク質複合体は、ＤＮＡ、ＲＮＡ及び小分子のような他の細胞の構成成分と相互作用を行う。これらの相互作用に関与する個々のタンパク質及びそれらの相互作用を理解することは、生物学的プロセスをより深く理解するうえで重要である。
【０００３】
アレンら（非特許文献２参照）により報告されたケモカインリガンド（ＣＣＬ）の主要な生理学的機能とは、「通常の免疫監視機構、炎症及び発生における細胞遊走」の調節である。ＣＣＬは、炎症性サイトカインに応じて放出され、ケモカインに対する生理学的応答を媒介するＧタンパク質共役受容体の大きなファミリーと選択的に結合する。ケモカインは当初は走化性サイトカインと呼ばれていた。
【０００４】
ケモカインシステムがヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の感染及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の発症において重要な役割を担っていることが発見されて以来、有効な介入戦略を立てるために関与する基礎となる発症機序を理解すべく多大な努力がなされてきた（非特許文献３参照）。更に、喘息などの特定の状態にともなうあらゆる有害な免疫応答は、ほとんどといってよいくらいに機能不全に陥ったケモカインシステムによるものである。アテローム性動脈硬化症の発症にもケモカインシグナル伝達経路が関与しており、動脈病変部へのマクロファージの浸潤がこの異常炎症性疾患に直接寄与していることも示されている（非特許文献４参照）。
【０００５】
レニン−アンジオテンシン系（ＲＡＳ）は、交感神経系及び体液恒常性において重要な役割を果たしている。レニンは、グロブリン前駆体であるアンジオテンシノーゲンからのアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩ）の形成を媒介する、腎臓によって分泌されるタンパク質分解酵素である（非特許文献５参照）。ＡｎｇＩ自体は、該ＡｎｇＩを、高い活性を有するアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）に変換する第２の酵素であるアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）の基質となる以外には生理学的重要性はほとんどないものと考えられている。しかしながら、ＡｎｇＩＩは、別のＡＣＥとは独立した機序によっても生成されうる点には注意を要する。次いでＡｎｇＩＩは、ＡｎｇＩＩＩによってアミノペプチダーゼに代謝されうる。
【０００６】
ＡｎｇＩＩは、極めて強力な血管収縮物質であり、このため心疾患及び高血圧の発症との関連において広く研究されている（非特許文献６参照）。高血圧の患者におけるＡｎｇＩＩの有害な血管収縮作用を抑えるため、ＡｎｇＩＩのシグナル伝達の段階で介入する治療策が確立されている。詳細には、ＡＣＥの活性を阻害してＡｎｇＩのＡｎｇＩＩへの変換を妨げる化合物、及びアンジオテンシン受容体（ＡＴＲ）の活性を特異的に阻害する化合物がこうした状態の治療に使用されてきた（非特許文献７参照）。
【０００７】
上記の考察は、あくまで本発明の理解を助けるためのものに過ぎず、本発明の以下の説明の範囲又は用途をいかなる意味においても限定するものとして解釈されるべきではなく、また、考察される情報のいずれかが、優先日における当該技術分野における当業者の通常の一般的知識の範囲内にあったことを容認するものとして解釈されるべきでもない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ａｕｅｒｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．， （２００２）， Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ ２：６１１−６２３
【非特許文献２】Ａｌｌｅｎ， Ｓ． ｅｔ ａｌ． （２００７） Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ： Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ． Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２５：７８７−８２０
【非特許文献３】Ｌｕｓｓｏ， Ｐ． （２００６） ＨＩＶ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｓｙｓｔｅｍ： １０ ｙｅａｒｓ ｌａｔｅｒ． ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ ２５：４４７−４５６
【非特許文献４】Ｂｏｉｓｖｅｒｔ， Ｗ． （２００４） Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｔｈｅｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ． Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １４：１６１−１６５
【非特許文献５】Ｒａｎｇ， Ｈ．Ｐ．， ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ： ３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， １９９５， Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ， Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ， ＵＫ．
【非特許文献６】Ｒａｍａｓｕｂｂｕ， Ｋ． （２００７） Ａｎｔｉ−ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ Ｔｈｅｒａｐｙ： Ｎｅｗ Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ． Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ Ｃｌｉｎｉｃｓ ２５：５７３−５８０
【非特許文献７】Ｍａｔｃｈａｒ， Ｄ．Ｂ． （２００８） Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗ： Ｃｏｍａｐｒａｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−Ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｂｌｏｃｋｅｒｓ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｉｎｇ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １４８：１６−２９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者らは、アンジオテンシン受容体とケモカイン受容体とが会合することを見出した。このことは、いずれかの受容体に関連した病気の治療に関して重要な意味合いを有するものである。
【００１０】
最近の研究によって、ＧＰＣＲは、モノマーとして機能するばかりでなく、リガンド結合、シグナル伝達、及びエンドサイトーシスに変化を引き起こすホモ二量体及びヘテロ二量体としても機能している可能性が示されている（Ｒｉｏｓ ｅｔ ａｌ． （２０００） Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｔｈｅｒ． ９２：７１−８７）。したがって、特定の受容体のアゴニスト又はアンタゴニストとして機能する薬物の作用は、この受容体の結合相手によって決まる。ある薬物の作用を、特定の受容体二量体によって媒介される細胞反応に限定することが望ましい場合がある。ミリガンの観察によれば（Ｍｉｌｌｉｇａｎ Ｇ． （２００６）， Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ １１：５４１−５４９）、創薬産業におけるホモ二量体化及びホモオリゴマー化の意義は限定的なものであるが、「ＧＣＰＲのヘテロ二量体及びヘテロオリゴマーの薬理作用、機能、及び調節における差異は、異なる組織のＧＰＣＲを選択的に標的化するための手段を示唆するものであり、幾つかの薬物の機能の機序は、単一のＧＰＣＲの異種発現に頼った単純なリガンドスクリーニングプログラムから予想される機序とは生体内では異なりうることを示唆している」としている。
【００１１】
「ケモカイン受容体」なる語句は、ＣＣケモカイン受容体１（ＣＣＲ１）、ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）、ＣＣケモカイン受容体３（ＣＣＲ３）、ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）、ＣＣケモカイン受容体５（ＣＣＲ５）、ＣＣケモカイン受容体６（ＣＣＲ６）、ＣＣケモカイン受容体７（ＣＣＲ７）、ＣＣケモカイン受容体８（ＣＣＲ８）、ＣＣケモカイン受容体９（ＣＣＲ９）、ＣＣケモカイン受容体１０（ＣＣＲ１０）などのＧタンパク質共役ＣＣケモカイン受容体（ＣＣＲ）を少なくとも含むものとして理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、ＣＸＣケモカイン受容体１（ＣＸＣＲ１）、ＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ２）、ＣＸＣケモカイン受容体３（ＣＸＣＲ３）、ＣＸＣケモカイン受容体４（ＣＸＣＲ４）、ＣＸＣケモカイン受容体５（ＣＸＣＲ５）、ＣＸＣケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）及びＣＸＣケモカイン受容体７（ＣＸＣＲ７）などのＧタンパク質共役ＣＸＣケモカイン受容体（ＣＸＣＲ）を含むものとしても理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＸＣケモカイン受容体１（ＸＣＲ１）を意味するものとしても理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＣＸ３ケモカイン受容体（ＣＸ３ＣＲ１）を含むものとして理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＣＣＸ−ＣＫＲケモカイン受容体（ＣＣＸ−ＣＫＲ）を含むものとして理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役Ｄ６ケモカイン受容体（Ｄ６）を意味するものとしても理解される。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＤＡＲＣ／Ｄｕｆｆｙケモカイン受容体（ＤＡＲＣ）を含むものとして理解されるべきである。このケモカイン受容体のリストは、アレンによる概説（Ａｌｌｅｎ， Ｓ． ｅｔ ａｌ． （２００７） Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ： Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ． Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２５：７８７−８２０）から編集したものである。最後に、「ケモカイン受容体」なる語句は更に、新たに発見されたあらゆるＣＣＲ／ＣＸＣＲ／ＸＣＲ／ＣＸ３ＣＲ／ＣＣＸ−ＣＫＲ／Ｄ６／ＤＡＲＣファミリーのメンバーを含むものとして理解されるべきである。
【００１２】
「アンジオテンシン受容体」又は「ＡＴＲ」なる語句は、ポレロらによって述べられる（Ｐｏｒｅｌｌｏ， Ｅ．Ｒ． （２００８） Ｔｈｅ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ Ｔｙｐｅ ２ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ： Ａｎ Ｅｎｉｇｍａ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ． Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ． Ｉｎ Ｐｒｅｓｓ）、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）及び／又はアンジオテンシンＩＩＩ（ＡｎｇＩＩＩ）によって活性化されるものと類似したＧタンパク質共役受容体であるアンジオテンシン受容体１（ＡＴ１Ｒ；ＡＴ１Ｒ）又はアンジオテンシン受容体２（ＡＴ２Ｒ；ＡＴ２Ｒ）のいずれかを意味するものとして理解されるべきである。「アンジオテンシン受容体」又は「ＡＴＲ」は、新たに発見されたアンジオテンシン受容体ファミリーのメンバーを含むものとして理解されるべきである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の第１の態様では、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなるヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体が提供される。
【００１４】
本発明の第２の態様では、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００１５】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的である。
【００１６】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン関連化合物と同時投与することができる。
【００１７】
本発明の第３の態様では、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００１８】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である。
【００１９】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体関連化合物と同時投与することができる。
【００２０】
本発明の第４の態様では、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量の使用を含む、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が提供される。
【００２１】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有してもよい。
【００２２】
本発明の第５の態様では、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量の使用を含む、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が提供される。
【００２３】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有してもよい。
【００２４】
本発明の第６の態様では、ケモカインに選択的な結合物質、又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００２５】
本発明の第７の態様では、アンタゴニストに選択的な結合物質、又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００２６】
本発明の第８の態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することを含む、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００２７】
本発明の第９の態様では、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造における、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の使用が提供される。
【００２８】
本発明の第１０の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記ケモカイン受容体の活性と比較して前記ケモカイン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が提供される。
【００２９】
本発明の第１１の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記アンジオテンシン受容体の活性と比較して前記アンジオテンシン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記ケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が提供される。
【００３０】
本発明の第１２の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度と比較して、前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３１】
本発明の第１３の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度と比較して、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３２】
本発明の第１４の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３３】
本発明の第１５の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３４】
本発明の第１６の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３５】
本発明の第１７の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対する逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３６】
本発明の第１８の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３７】
本発明の第１９の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３８】
本発明の上記の方法においては、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する工程、並びに／又は、前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する工程は、本出願人らによる同時係属中の国際特許出願第ＰＣＴ／ＡＵ２００７／００１７２２号「検出システム及びその使用」（Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｆｏｒ）（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレットとして公開）に述べられる１以上の方法によって実施することができる。
【００３９】
本発明の第２０の態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト及び／又は選択的アンタゴニスト及び／又は選択的逆アゴニスト及び／又は選択的アロステリック調節因子が提供される。
【００４０】
本発明の第２１の態様では、ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方を過剰発現している細胞、又は細胞の画分が提供される。
【００４１】
本発明の第２２の態様では、ケモカイン受容体を過剰発現し、アンジオテンシン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が提供される。
【００４２】
本発明の第２３の態様では、アンジオテンシン受容体を過剰発現し、ケモカイン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】図１は、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との会合を検出した方法を説明する図である。図１は、分子の会合を検出するためのシステムの基礎をなす物質の構成を示す。すなわち、第１の物質は第１のレポーター要素と結合された第１の相互作用基からなり、第２の物質は第２のレポーター要素と結合された第２の相互作用基からなり、第３の物質は第３の相互作用基からなる。
【００４４】
【図２】図２は、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との会合を検出した方法を説明する図である。図２は、調節因子の投与が第２の相互作用基の第３の相互作用基との会合を、好ましくは第３の相互作用基と、単独で、又は第１の相互作用基と同時に相互作用することによって調節する様子を示したものである。
【００４５】
【図３】図３は、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との会合を検出した方法を説明する図である。図３は、第１の相互作用基と第３の相互作用基とが会合する場合、第２の相互作用基と第３の相互作用基との会合が調節されると第１のレポーター要素と第２のレポーター要素との近接が結果的に調節されることによって、検出器によって検出可能なシグナルが調節されることを示している。したがって、第１のレポーター要素と第２のレポーター要素とが近接することによって発生するシグナルを検出器によって監視することは、第１の物質と第３の物質との会合を監視することである。第１の相互作用基と第３の相互作用基とが会合していない場合には、第１のレポーター要素と第２のレポーター要素とは空間的に離間したままであり、検出可能なシグナルは発生しにくい。
【００４６】
【図４】図４は、ＩＧ１としてＣＣケモカイン受容体５（ＣＣＲ５）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてヘマグルチニンエピトープでタグ標識されたＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）を示している。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍのマクロファージ炎症性タンパク質１β（ＭＩＰ１β）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれか一方のみ、又はＭＩＰ１β及びＡｎｇＩＩの両方によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現しているＨＥＫＦＴ２９３細胞を、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。
【００４７】
【図５】図５は、ＩＧ１としてＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ２）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてヘマグルチニンエピトープでタグ標識されたＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）を示している。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍのインターロイキン８（ＩＬ８）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれか一方のみ、又はＩＬ８及びＡｎｇＩＩの両方によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現しているＨＥＫＦＴ２９３細胞を、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。
【００４８】
【図６】図６は、ＩＧ１としてＣＸＣケモカイン受容体４（ＣＸＣＲ４）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてヘマグルチニンエピトープでタグ標識されたＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）を示している。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍの間質細胞由来因子−１α（ＳＤＦ１α）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれか一方のみ、又はＳＤＦ１α及びＡｎｇＩＩの両方によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現しているＨＥＫＦＴ２９３細胞を、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。
【００４９】
【図７】図７は、ＩＧ１としてアンジオテンシン受容体１（ＡＴ１Ｒ）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）を示している。ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれかによって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞から、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）による処理の後、ｅＢＲＥＴシグナルを測定した。
【００５０】
【図８】図８は、ＩＧ１としてアンジオテンシン受容体２（ＡＴ２Ｒ）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）を示している。ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれかによって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞から、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれかによる処理の後、ｅＢＲＥＴシグナルを測定した。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
略語の表記
ＡＣＥ アンジオテンシン変換酵素
ＡＩＤＳ 後天性免疫不全症候群
ＡｎｇＩ アンジオテンシンＩペプチド
ＡｎｇＩＩ アンジオテンシンＩＩペプチド
ＡｎｇＩＩＩ アンジオテンシンＩＩＩペプチド
ＡＴ１Ｒ アンジオテンシン１型受容体
ＡＴ２Ｒ アンジオテンシン２型受容体
ｂａｒｒ β−アレスチン
ＢＰ 血圧
ＢＲＥＴ 生物発光共鳴エネルギー移動
ＣＢ カンナビノイド受容体
ＣＣＬ ケモカインリガンド
ＣＣＲ ＣＣケモカイン受容体
ＣＸＣＲ ＣＸＣケモカイン受容体
ＣＳＦ 脳脊髄液
ＤＯＰ δオピオイド
ｅＢＲＥＴ 長期ＢＲＥＴ：長時間にわたって監視されたＢＲＥＴ
ＥＣＦＰ オワンクラゲ（Ａｅｑｕｏｒｅａ ｖｉｃｔｏｒｉａ）緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）の変異体である強化シアン蛍光タンパク質
ＥＧＦＰ 強化緑色蛍光タンパク質が、野生型ＧＦＰの赤方に偏移した変異体
ＥＹＦＰ 強化黄色蛍光タンパク質
ＦＲＥＴ 蛍光共鳴エネルギー移動
ＧＰＣＲ Ｇタンパク質共役受容体
ＨＡ ヘマグルチニンエピトープタグ
Ｈｉｓ（６） ６個の連続したヒスチジン残基からなるヒスチジンタグ
ＨＩＶ ヒト免疫不全ウイルス
ＨＰＡ 視床下部−下垂体−副腎軸
ＩＧ 相互作用基
ＫＯＰ κオピオイド
ＬＰＯ 視床下部外側視索前野
ｍＲＦＰ１ 単量体型の赤色蛍光タンパク質
ＭＣＰ１ 単球走化性タンパク質１
ＮＰＹ ニューロペプチドＹ
ＯＲ オピオイド受容体
ＰＢＳ リン酸緩衝食塩水
ｐｃＤＮＡ３ 真核細胞発現ベクター
ＰＶＮ 室傍核
ＲＣ レポーター要素
ＲＥＭ 急速眼球運動
ＲＥＴ 共鳴エネルギー移動
Ｒｌｕｃ ウミシイタケルシフェラーゼ
Ｒｌｕｃ８ 改良ウミシイタケルシフェラーゼ
ＳＷＳ 徐波睡眠
ＴＹＦＰ トパーズ黄色蛍光タンパク質
Ｖｅｎｕｓ 改良黄色蛍光タンパク質
ＷＴ 野生型
【００５２】
（発明を実施するための最良の態様）
総論
本明細書に引用する特許及び特許出願を含むすべての刊行物は、前出又は後出によらず、その全容を本明細書に援用するものである。しかしながら、本明細書で触れる刊行物は、当該刊行物において報告され、本発明に関連して使用することが可能なプロトコール、試薬、及びベクターを説明、開示する目的で引用するものである。本明細書の一切の記載内容は、先行の発明のために本発明がこうした開示に先行するものとはならないことを容認するものとして解釈されてはならない。
【００５３】
更に、特に断らないかぎり本発明の実施においては、当業者の技術の範囲内にある従来の分子生物学、化学及び蛍光法を用いている。こうした技術は当業者には周知のものであり、文献に詳細に説明されている。例えば、蛍光法については、
Ｃｏｌｉｇａｎ， Ｄｕｎｎ， Ｐｌｏｅｇｈ， Ｓｐｅｉｃｈｅｒ ａｎｄ Ｗｉｎｇｆｉｅｌｄ “Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ” （１９９９） Ｖｏｌｕｍｅ Ｉ ａｎｄ ＩＩ （Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ．）； 及びＢａｉｌｅｙ， Ｊ．Ｅ． ａｎｄ Ｏｌｌｉｓ， Ｄ．Ｆ．， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ， ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｂｏｏｋ Ｃｏｍｐａｎｙ， ＮＹ， １９８６； Ｌａｋｏｗｉｃｚ， Ｊ． Ｒ． Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ： Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ （１９８３） を参照されたい。
【００５４】
本明細書及び付属の特許請求の範囲において用いるところの単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、特に文脈において明確に規定されないかぎりは複数のものを含む。したがって例えば、「ａ ｐｒｏｔｅｉｎ」といった場合には複数のこうしたタンパク質を含むものであり、「ａｎ ａｎａｌｙｔｅ」といった場合には１以上の検体を指す、といった要領である。
【００５５】
特に定義されないかぎりは、本明細書において用いる技術的及び科学的用語はすべて、本発明が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有するものである。本明細書において述べるものと同様又は同等のあらゆる材料及び方法を本発明を実施又は試験するうえで使用することができるが、好ましい材料及び方法については以下に述べる。
【００５６】
本明細書で述べる発明には１以上の値の範囲が含まれうる（例えば、サイズ、濃度など）。ある値の範囲は、その範囲を規定する値、及びその範囲の境界を規定する値のごく近傍の値と同じか又は実質的に同じ結果をもたらすその範囲の近傍の値を含む、その範囲内のすべての値を含むものとして理解される。
【００５７】
本明細書の全体を通じて、文脈上特に必要とされないかぎりは、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」なる単語、又は「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」若しくは「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」などのその変化形は、記載される整数又は整数群を含むことを示唆するものとして理解されるが、他の任意の整数又は整数群を除外することを示唆するものではない。
【００５８】
各論
上記の本発明の概要より明らかであるように、本発明は、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなるヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体に関する。本明細書で用いるところの「ヘテロ二量体」及び「ヘテロオリゴマー」なる用語、並びに「ヘテロ二量体の」及び「ヘテロオリゴマーの」といったその変化形は、少なくとも１個のケモカイン受容体が少なくとも１個のアンジオテンシン受容体と会合したもののことを指す。
【００５９】
本明細書で用いるところの「会合した」なる語句は、任意の公知の直接的若しくは間接的な、安定化をもたらす原子若しくは分子レベルの相互作用又はそれらの任意の組み合わせを介した結合のことを指すものであり、こうした相互作用としては、これらに限定されるものではないが、共有結合、イオン結合、水素結合、配位結合若しくは他の任意の分子結合相互作用などの結合相互作用、静電相互作用、極性若しくは疎水性相互作用、又は他の任意の古典力学的若しくは量子力学的な安定化をもたらす原子若しくは分子相互作用が挙げられる。
【００６０】
ヘテロ二量体の異なるレパートリーを有する異なる組織の例がこれまでに報告されている。例えば、よく知られたＫＯＰ受容体リガンドの類似体である６’−グアニジノアルトリンドールが、脊髄選択的な鎮痛剤としての薬効を有するＤＯＰ−ＫＯＰヘテロ二量体に選択的なアゴニストとして同定されており、ＤＯＰ−ＫＯＰヘテロ二量体が脊髄において発現されるが、脳では発現されないという結論が導かれている（Ｗａｌｄｈｏｅｒ， Ｍ． ｅｔ ａｌ． （２００５） Ａ ｈｅｔｅｒｏ−ｄｉｍｅｒ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｇｏｎｉｓｔ ｓｈｏｗｓ ｉｎ ｖｉｖｏ ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｏｆ Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｉｍｅｒｓ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １０２：９０５０−９０５５）。したがって、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合したヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体は新規な標的薬物を代表するものである。
【００６１】
６’−グアニジノアルトリンドールの場合におけるように、既知のリガンドがヘテロ二量体受容体を活性化させる異なる能力を示す場合があり、これにより既存の分子の新たな用途が見出される可能性がある。
−ヒライレットら（Ｈｉｌａｉｒｅｔ Ｓ． ｅｔ ａｌ． ２００３ （Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７８：２３７３１−２３７３７））により、ＣＢ１アンタゴニストがＣＢ１／ＯｘＲ１のヘテロ二量体のペアによって作用することにより食欲を抑制することが最近になって示されている。
−ソマトスタチンＳＳＴＲ５受容体がドーパミンＤ２受容体と二量体化することが示されている（Ｒｏｃｈｅｖｉｌｌｅ Ｍ． ｅｔ ａｌ． （２０００） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８８：１５４−１５７）。
【００６２】
以下の例から明らかとなるように、本発明者らは本明細書においてケモカイン受容体のアンジオテンシン受容体との分子会合を特定及び特性決定したものである。
【００６３】
ケモカイン受容体のアンジオテンシン受容体との会合は、一方の受容体のリガンド（アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニスト）を含む（ただしこれらに限定されない）一方の受容体に関連した化合物を、他方の受容体に関連した疾患の治療に使用することを可能とするものであることは当業者にとっては明らかであろう。
【００６４】
したがって、本発明には、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによるアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【００６５】
「ケモカイン受容体関連化合物」なる語句は、ケモカインを含むがこれに限定されない、ケモカイン受容体と相互作用する化合物、又はケモカイン受容体と相互作用する化合物と結合する化合物のことを意味するものとして理解されるべきである。
【００６６】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アンタゴニスト又はアンタゴニストである。
【００６７】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアロステリック調節因子である。
【００６８】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン結合性物質、又はそのケモカイン結合性フラグメントである。
【００６９】
一実施形態では、前記ケモカイン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００７０】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して少なくとも１０倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して少なくとも１００倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して少なくとも１，０００倍選択的である。
【００７１】
ケモカイン結合性物質又はそのケモカイン結合性フラグメントであるケモカイン受容体関連化合物との関連において、「アンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的」なる語句は、ケモカイン結合性物質又はそのケモカイン結合性フラグメントがアンジオテンシンと比較してケモカインと選択的に結合することを意味するものとして理解されるべきである。
【００７２】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体関連化合物と同時投与される。
【００７３】
「アンジオテンシン受容体関連化合物」なる語句は、アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物、アンジオテンシンを含むがこれに限定されない、アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物と結合する化合物、又はアンジオテンシンを含むがこれに限定されない、アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物の産生を調節する化合物を意味するものとして理解されるべきである。
【００７４】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト、又はアンタゴニストである。
【００７５】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアロステリック調節因子である。
【００７６】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はアンジオテンシンの産生を調節する。
【００７７】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントである。
【００７８】
一実施形態では、前記アンジオテンシン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００７９】
本発明には更に、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【００８０】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００８１】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアロステリック調節因子である。
【００８２】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシンの産生を調節する化合物である。
【００８３】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントである。
【００８４】
一実施形態では、前記アンジオテンシン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００８５】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である。
【００８６】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して少なくとも１０倍選択的である。本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して少なくとも１００倍選択的である。本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して少なくとも１，０００倍選択的である。
【００８７】
アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物の産生を調節するアンジオテンシン受容体関連化合物との関連において、「ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である」なる語句は、当該化合物が、ケモカインの産生を調節するよりも大きな程度でアンジオテンシン受容体と相互作用する化合物の産生を調節することを意味するものとして理解されるべきである。
【００８８】
アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントであるアンジオテンシン受容体関連化合物との関連において、「ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である」なる語句は、アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントが、ケモカインと比較してアンジオテンシンと選択的に結合することを意味するものとして理解されるべきである。
【００８９】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体関連化合物と同時投与される。
【００９０】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００９１】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアロステリック調節因子である。
【００９２】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン結合性物質又はそのケモカイン受容体結合性フラグメントである。
【００９３】
一実施形態では、前記ケモカイン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００９４】
本発明には更に、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【００９５】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００９６】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有する。
【００９７】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００９８】
本発明には更に、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン受容体関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【００９９】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１００】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有する。
【０１０１】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１０２】
したがって、本発明には、ケモカイン選択的結合性物質又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療法が含まれる。
【０１０３】
前記ケモカイン選択結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体であってよい。
【０１０４】
本発明には更に、アンジオテンシン選択結合性物質又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１０５】
前記アンジオテンシン選択結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体であってよい。
【０１０６】
本発明には更に、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１０７】
本発明には更に、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造における、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量の使用が含まれる。
【０１０８】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト、又は、アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して少なくとも１０倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、逆アゴニスト、部分アゴニスト、アンタゴニスト、又は、アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する分子は、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して少なくとも１００倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、逆アゴニスト、部分アゴニスト、アンタゴニスト、又は、アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する分子は、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して少なくとも１，０００倍選択的である。
【０１０９】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１１０】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、ケモカイン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１１】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１２】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、アンジオテンシン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１３】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１４】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１１５】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、ケモカイン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１６】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１７】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、アンジオテンシン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１８】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシンアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１９】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストの治療上の有効量の使用を含む、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２０】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量の使用を含む、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２１】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシンアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２２】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２３】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストの治療上の有効量の使用を含む、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２４】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量の使用を含む、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２５】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２６】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２７】
ケモカイン関連疾患には、ケモカインの産生の増加又は減少、及び／又はケモカインに対する細胞の応答性の増加又は減少に関連する疾患が含まれる。ケモカイン関連疾患とは更に、ケモカイン受容体が異常特性を示すか、ケモカイン受容体が特定の病原体の標的となるか、あるいはケモカイン受容体が薬理学的介入の標的となるような状態のことも意味するものとして理解されるべきである。以下に列記するものは、ケモカイン関連疾患の幾つかの例を示すものである。
−ＨＩＶ感染及びＡＩＤＳ発症
−虚血再潅流傷害
−アテローム発生
−慢性閉塞性肺疾患
−喘息及びアレルギー
−腎疾患
−リウマチ性関節炎
【０１２８】
しかしながら「ケモカイン関連介入」なる語句、及び「ケモカイン関連疾患」なる語句はこれらに限定されるものではない点は理解されるべきである。
【０１２９】
公知のＣＣケモカイン受容体関連化合物としては、ＣＣケモカインリガンド１（ＣＣＬ１）、ＣＣケモカインリガンド２（ＣＣＬ２；単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド３（ＣＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−１α（ＭＩＰ−１α）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド４（ＣＣＬ４；マクロファージ炎症性タンパク質−１β（ＭＩＰ−１β）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド５（ＣＣＬ５；ＲＡＮＴＥＳとしても知られる）、ＣＣケモカインリガンド６（ＣＣＬ６）、ＣＣケモカインリガンド７（ＣＣＬ７；単球走化性タンパク質−３（ＭＣＰ−３）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド８（ＣＣＬ８；単球走化性タンパク質−２（ＭＣＰ−２）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド９（ＣＣＬ９；マクロファージ炎症性タンパク質−１γ（ＭＩＰ−１γ）又はＣＣＬ１０としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１１（ＣＣＬ１１；エオタキシン−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１２（ＣＣＬ１２；単球走化性タンパク質−５（ＭＣＰ−５）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１３（ＣＣＬ１３）、ＣＣケモカインリガンド１４（ＣＣＬ１４；ＨＣＣ−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１５（ＣＣＬ１５；マクロファージ炎症性タンパク質−５（ＭＩＰ−５）、又はＨＣＣ−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１６（ＣＣＬ１６；肝臓発現ケモカイン（ＬＥＣ）、又はモノタクチン−１（ＭＴＮ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１７（ＣＣＬ１７；胸腺及び活性化調節ケモカイン（ＴＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１８（ＣＣＬ１８；肺及び活性化調節ケモカイン（ＰＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１９（ＣＣＬ１９；マクロファージ炎症性タンパク質−３β（ＭＩＰ−３β）又はＥＢ／１リガンドケモカイン（ＥＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２０（ＣＣＬ２０；マクロファージ炎症性タンパク質−３α（ＭＩＰ−３α）、又は肝臓活性化調節ケモカイン（ＬＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２１（ＣＣＬ２１；６Ｃカイン、又はエクソダス−２、又は二次リンパ組織ケモカイン（ＳＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２２（ＣＣＬ２２）、ＣＣケモカインリガンド２３（ＣＣＬ２３；マクロファージ炎症性タンパク質−３（ＭＩＰ−３）、又は骨髄前駆細胞阻害因子−１（ＭＰＩＦ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２４（ＣＣＬ２４；骨髄前駆細胞阻害因子−２（ＭＰＩＦ−２）、又はエオタキシン−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２５（ＣＣＬ２５；胸腺発現ケモカイン（ＴＥＣＫ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２６（ＣＣＬ２６；マクロファージ炎症性タンパク質−４α（ＭＩＰ−４α）、又はエオタキシン−３、又は（ＩＭＡＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２７（ＣＣＬ２７；ＩＬ−１１Ｒ−α−ローカスケモカイン（ＩＬＣ）、又はスキンカイン、又はエスカイン、又は皮膚Ｔ細胞誘引ケモカイン（ＣＴＡＣＫ）としても知られる）、及びＣＣケモカインリガンド２８（ＣＣＬ２８；粘膜関連上皮ケモカイン（ＭＥＣ）、又はＣＣＫ１、又はＳＣＹＡ２８としても知られる）、マラビロク（ＣＣＲ５）、アプラビロク（ＣＣＲ５）、ビクリビロク（ＣＣＲ５）が挙げられる。
【０１３０】
公知のＣＸＣケモカイン受容体関連化合物としては、ＣＸＣケモカインリガンド１（ＣＸＣＬ１；好中球活性化タンパク質−３（ＮＡＰ−３）、又はメラノーマ増殖刺激活性−α（ＭＳＧＡ−α）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド２（ＣＸＣＬ２；マクロファージ炎症性タンパク質−２α（ＭＩＰ−２α）、又は増殖調節タンパク質β（Ｇｒｏ−β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド３（ＣＸＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−２β（ＭＩＰ−２β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド４（ＣＸＣＬ４；血小板因子−４（ＰＦ４）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド５（ＣＸＣＬ５；上皮由来好中球活性化ペプチド−７８（ＥＮＡ−７８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド６（ＣＸＣＬ６；顆粒球走化性タンパク質−２（ＧＣＰ−２）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド７（ＣＸＣＬ７；血小板前駆体塩基性タンパク質（ＰＰＢＰ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド８（ＣＸＣＬ８；インターロイキン−８（ＩＬ−８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド９（ＣＸＣＬ９；ＩＦＮγ誘導性モノカイン（ＭＩＧ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１０（ＣＸＣＬ１０；１０ｋＤａ ＩＦＮγ誘導性モノカイン（γ−ＩＰ１０）又はＩＰ−１０としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１１（ＣＸＣＬ１１；ＩＦＮ誘導性Ｔ細胞αケモアトラクタント（Ｉ−ＴＡＣ）、又はＩＦＮγ誘導性タンパク質−９（ＩＰ−９）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１２（ＣＸＣＬ１２；間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ−１）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１３（ＣＸＣＬ１３；Ｂリンパ球ケモアトラクタント（ＢＬＣ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１４（ＣＸＣＬ１４；乳房及び腎臓発現ケモカイン（ＢＲＡＫ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１５（ＣＸＣＬ１５；ラングカインとしても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１６（ＣＸＣＬ１６）、ＣＸＣケモカインリガンド１７（ＣＸＣＬ１７；ＶＥＧＦ同時調節ケモカイン−１（ＶＣＣ−１）、又は樹状細胞及び単球誘引ケモカイン様タンパク質（ＤＭＣ）としても知られる）が挙げられる。ＣＸ３ケモカインリガンド１（ＣＸ３ＣＬ１；フラクタルカイン又はニューロタクチンとしても知られる）。ＸＣケモカインリガンド１（ＸＣＬ１：リンフォタクチンとしても知られる）、及びＸＣケモカインリガンド２（ＸＣＬ２）。
【０１３１】
ケモカイン受容体の公知のアンタゴニストとしては、レパタキシン（Ｒｅｐｅｒｔａｘｉｎ）（ＣＸＣＲ２）、ＴＡＫ−７７９（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−２２０（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−６５２（ＣＣＲ５）、ＡＫ６９２（ＣＣＲ５）、ＣＭＰＤ１６７（ＣＣＲ５）、ＢＸ−４７１（ＣＣＲ１）、ＡＭＤ３１００（ＣＸＣＲ４）、ＡＭＤ１１０７０（ＣＸＣＲ４）、ＦＣ１３１（ＣＸＣＲ４）、ＭＬＮ３８９７（ＣＣＲ１）、ＣＰ−４８１７１５（ＣＣＲ１）、ＧＷ−８７３１４０（ＣＣＲ５）、プロパゲルマニウム（ＧＥ−１３２）（ＣＣＲ２）、レスベラトロール（ＣＣＲ２）、ＢＭＳ ＣＣＲ２２２（ＣＣＲ２）、ＲＳ １０２８９５（ＣＣＲ２）、ＲＳ ５０４３９３（ＣＣＲ２）、ＳＢ ２２５００２（ＣＸＣＲ２）及びＳＢ ２６５６１０（ＣＸＣＲ２）が挙げられる。
【０１３２】
アンジオテンシン関連疾患としては、アンジオテンシンの産生の増加又は減少、及び／又はアンジオテンシンに対する細胞の応答性の増加又は減少に関連する疾患が含まれる。以下に列記するものは、アンジオテンシンシステムの調節不全に起因するものとして提唱されているか、あるいはアンジオテンシンに基づいた介入を用いて治療することが可能と考えられる多くの状態である。
−慢性心不全、
−アテローム性動脈硬化／虚血
−高血圧
−高カリウム血症
−子癇前症
−糖尿病
−糖尿病性網膜症
−サルコイドーシス
−アルツハイマー病
【０１３３】
しかしながら、アンジオテンシン関連疾患なる語句はこれらに限定されるものではない点は理解されるべきである。
【０１３４】
公知のアンジオテンシン受容体関連化合物としては、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）及びアンジオテンシンＩＩＩ（ＡｎｇＩＩＩ）が挙げられる。公知のＡＴＲのアンタゴニストとしては、ＣＧＰ−４２１１２Ａ（ＡＴ２Ｒアンタゴニスト；シグマ社（Ｓｉｇｍａ）＃Ｃ−１６０）、エプロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｔｅｖｅｔｅｎ（登録商標）、アボット・ラボラトリーズ・ユー・エス・エー社（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＵＳＡ））、ロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｃｏｚａａｒ（登録商標）、メルク社（Ｍｅｒｋ ＆ Ｃｏ））、バルサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｄｉｏｖａｎ（登録商標）、ノバルティス社（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、テルミサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｍｉｃａｒｄｉｓ（登録商標）、ベーリンガー・インゲルハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ））、イルベサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ａｖａｐｒｏ（登録商標）、サノフィ・アベンティス社（Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ））、オルメサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｂｅｎｉｃａｒ（登録商標）、第一三共株式会社）、ＰＤ１２３３１９（ＡＴ２Ｒ；Ｔｏｃｒｉｓ）、ＺＤ−７１１５（ＡＴ１Ｒ）、サララシン（（Ｓａｒ１−Ａｌａ８）ＡｎｇＩＩ）、サルスラン（（Ｓａｒ１−Ｔｈｒ８）ＡｎｇＩＩ）、及びＤｕＰ７５３（ＡＴ１Ｒ）が挙げられる。
【０１３５】
本発明の新規なヘテロ二量体の発見は、特定の実験的観察に一定の解釈を与えるものである。
【０１３６】
ＡｎｇＩＩがラットの糸球体内皮細胞にケモカインの発現を誘導する能力が、腎疾患の発症に関して研究されている（Ｗｏｌｆ ｅｔ ａｌ． （１９９７） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ＲＡＮＴＥＳ ｉｎ ｒａｔ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ． Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｔｙｐｅ ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １００：１０４７−１０５８）。ＡｎｇＩＩ処理によって、ケモカインＲＡＮＴＥＳのｍＲＮＡ及びタンパク質の発現が増大し、これにともなって単球の動員が増大した。これらの作用は、ＡｎｇＩＩとともにＡＴ２Ｒ特異的アンタゴニストを投与した場合に抑制され、この受容体サブタイプが報告された観察結果を媒介したことを示唆している。同様に、腎細胞及び単球のＡｎｇＩＩＩ処理により、ＭＣＰ−１のｍＲＮＡ及びタンパク質の発現が増大し、培養細胞からの上清においてもマクロファージによる走化性反応が認められた（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ， Ｍ． （２０００） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩＩ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ＭＣＰ−１ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＮＦ−ｋａｐｐａＢ ａｎｄ ＡＰ−１ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ａｎｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ． Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ５７：２２８５−２２９８）。更にＡｎｇＩＩＩは、ＭＣＰ−１の発現の上昇に必要とされる転写因子ＮＦ−κＢを活性化した。ＡｎｇＩＩＩ処理の３日後、ラットは、腎臓におけるＴＮＦα及びＭＣＰ−１の発現が増大し、これもやはりＮＦ−κＢ活性及び腎組織へのマクロファージの動員の増大との相関が認められた（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ， Ｍ． （２００２） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｋｉｄｎｅｙ． Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ： １２−２２）。
【０１３７】
最後に、腎傷害の発生に対するＣＣＲ２ｂの寄与について、高血圧の塩感受性ＡｎｇＩＩモデルにおいて評価を行った（Ｅｌｍａｒａｋｂｙ， Ａ． （２００７） Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ｂ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｐｒｏｖｉｄｅｓ Ｒｅｎａｌ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ Ｓａｌｔ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ５０：１０６９−１０７６）。ＡｎｇＩＩ及び高塩濃度の食餌を投与した高感受性の動物は、更にＣＣＲ２ｂアンタゴニスト（ＲＳ１０２８９５）で処理した動物と同等の血圧を示したが、マクロファージの浸潤の増大をともなう大幅に高いＮＦ−κＢ及びＴＮＤαの発現レベルを示した。著者は、ＣＣＲ２ｂアンタゴニストは炎症反応を低減させることによって高血圧において腎臓を保護すると結論づけている。
【０１３８】
高血圧及びアテローム性動脈硬化症の発症に関し、研究者によってＣＣＲ２受容体を欠いたマウス系統（ＣＣＲ２−／−）を用いてマクロファージの浸潤の媒介におけるこの受容体の役割の評価が行われている（Ｂｕｓｈ， Ｅ． （２０００） ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ ｉｎ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ３６：３６０−３６３）。高血圧を誘導するためにＡｎｇＩＩ処理を行った７日後、ＣＣＲ２−／−マウスでは、野生型の動物と比較してマクロファージの動員が大幅に低く、血管肥大が低いことが判明した。ヒトにおけるアテローム性動脈硬化症の表現型を反映したアポリポタンパク質Ｅ欠損マウスモデルを用い、アテローム性動脈硬化症の治療におけるＡＴ１Ｒアンタゴニストの有用な作用をもたらす機序が調べられている（Ｄｏｌ， Ｆ． （２００１） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＡＴ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ｉｒｂｅｓａｒｔａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｌｅｓｉｏｎ ｓｉｚｅ， ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ， ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ． Ｊｏｕｒｎａｌ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３８：３９５−４０５）。アンタゴニストで処理した動物では１２週後に病変部のサイズが縮小し、更にＭＣＰ−１及びＭＩＰ−１αのｍＲＮＡの発現レベルが大幅に低下していた。
【０１３９】
ケモカインの放出、ＮＦ−κβ活性、及びＡＴ１Ｒの発現に対するＡＣＥ阻害剤ラミプリラートの影響がＡｎｇＩＩ処理した単球において測定されている（Ｓｃｈｍｅｉｓｓｅｒ， Ａ． （２００４） ＡＣＥ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｌｏｗｅｒｓ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＮＦ−ｋａｐｐａＢ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＡＴ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ． Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ３２５：５３２−５４０）。ＡｎｇＩＩによって媒介されるＭＩＰ−１及びインターロイキン−８ケモカインのアップレギュレーションは、ＡＴ１Ｒ特異的アンタゴニスト（ロサルタン）によって阻害されたが、ＡＴ２Ｒアンタゴニストによっては阻害されなかった。これに対してラミプリラートはＡｎｇＩＩによって誘導されるＭＩＰ−１のアップレギュレーションも抑制し、ＮＦ−κＢ活性のダウンレギュレーション及びそれにともなうＡＴ１Ｒの発現の低下との相関が認められた。更に、ＡｎｇＩＩに応じてマクロファージの浸潤を阻害するＣＸＣＲ２アンタゴニストの能力は、アテローム性動脈硬化症との関連においても示されている（Ａｂｕ Ｎａｂａｈ， Ｙ． （２００７） ＣＸＣＲ２ ｂｌｏｃｋａｄｅ ｉｍｐａｉｒｓ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ−ｉｎｄｕｃｅｄ ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ． Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ ２７：２３７０−２３７６）。ＡｎｇＩＩの腹腔内投与によって、ＣＣ及びＣＸＣケモカインレベルが上昇した後、白血球の浸潤が認められたが、ＣＸＣＲ２アンタゴニストの存在下では抑制された。白血球の浸潤はロサルタンによっても阻害され、ＡｎｇＩＩの作用がＡＴ１Ｒによって媒介されることが示された。
【０１４０】
一実施形態において、本発明は、これらに限定されるものではないが、ＣＣケモカインリガンド１（ＣＣＬ１）、ＣＣケモカインリガンド２（ＣＣＬ２；単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド３（ＣＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−１α（ＭＩＰ−１α）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド４（ＣＣＬ４；マクロファージ炎症性タンパク質−１β（ＭＩＰ−１β）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド５（ＣＣＬ５；ＲＡＮＴＥＳとしても知られる）、ＣＣケモカインリガンド６（ＣＣＬ６）、ＣＣケモカインリガンド７（ＣＣＬ７；単球走化性タンパク質−３（ＭＣＰ−３）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド８（ＣＣＬ８；単球走化性タンパク質−２（ＭＣＰ−２）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド９（ＣＣＬ９；マクロファージ炎症性タンパク質−１γ（ＭＩＰ−１γ）又はＣＣＬ１０としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１１（ＣＣＬ１１；エオタキシン−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１２（ＣＣＬ１２；単球走化性タンパク質−５（ＭＣＰ−５）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１３（ＣＣＬ１３）、ＣＣケモカインリガンド１４（ＣＣＬ１４；ＨＣＣ−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１５（ＣＣＬ１５；マクロファージ炎症性タンパク質−５（ＭＩＰ−５）、又はＨＣＣ−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１６（ＣＣＬ１６；肝臓発現ケモカイン（ＬＥＣ）、又はモノタクチン−１（ＭＴＮ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１７（ＣＣＬ１７；胸腺及び活性化調節ケモカイン（ＴＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１８（ＣＣＬ１８；肺及び活性化調節ケモカイン（ＰＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１９（ＣＣＬ１９；マクロファージ炎症性タンパク質−３β（ＭＩＰ−３β）又はＥＢ／１リガンドケモカイン（ＥＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２０（ＣＣＬ２０；マクロファージ炎症性タンパク質−３α（ＭＩＰ−３α）、又は肝臓活性化調節ケモカイン（ＬＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２１（ＣＣＬ２１；６Ｃカイン、又はエクソダス−２、又は二次リンパ組織ケモカイン（ＳＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２２（ＣＣＬ２２）、ＣＣケモカインリガンド２３（ＣＣＬ２３；マクロファージ炎症性タンパク質−３（ＭＩＰ−３）、又は骨髄前駆細胞阻害因子−１（ＭＰＩＦ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２４（ＣＣＬ２４；骨髄前駆細胞阻害因子−２（ＭＰＩＦ−２）、又はエオタキシン−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２５（ＣＣＬ２５；胸腺発現ケモカイン（ＴＥＣＫ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２６（ＣＣＬ２６；マクロファージ炎症性タンパク質−４α（ＭＩＰ−４α）、又はエオタキシン−３、又は（ＩＭＡＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２７（ＣＣＬ２７；ＩＬ−１１Ｒ−α−ローカスケモカイン（ＩＬＣ）、又はスキンカイン、又はエスカイン、又は皮膚Ｔ細胞誘引ケモカイン（ＣＴＡＣＫ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２８（ＣＣＬ２８；粘膜関連上皮ケモカイン（ＭＥＣ）、又はＣＣＫ１、又はＳＣＹＡ２８としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１（ＣＸＣＬ１；好中球活性化タンパク質−３（ＮＡＰ−３）、又はメラノーマ増殖刺激活性−α（ＭＳＧＡ−α）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド２（ＣＸＣＬ２；マクロファージ炎症性タンパク質−２α（ＭＩＰ−２α）、又は増殖調節タンパク質β（Ｇｒｏ−β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド３（ＣＸＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−２β（ＭＩＰ−２β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド４（ＣＸＣＬ４；血小板因子−４（ＰＦ４）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド５（ＣＸＣＬ５；上皮由来好中球活性化ペプチド−７８（ＥＮＡ−７８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド６（ＣＸＣＬ６；顆粒球走化性タンパク質−２（ＧＣＰ−２）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド７（ＣＸＣＬ７；血小板前駆体塩基性タンパク質（ＰＰＢＰ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド８（ＣＸＣＬ８；インターロイキン−８（ＩＬ−８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド９（ＣＸＣＬ９；ＩＦＮγ誘導性モノカイン（ＭＩＧ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１０（ＣＸＣＬ１０；１０ｋＤａ ＩＦＮγ誘導性モノカイン（γ−ＩＰ１０）又はＩＰ−１０としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１１（ＣＸＣＬ１１；ＩＦＮ誘導性Ｔ細胞αケモアトラクタント（Ｉ−ＴＡＣ）、又はＩＦＮγ誘導性タンパク質−９（ＩＰ−９）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１２（ＣＸＣＬ１２；間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ−１）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１３（ＣＸＣＬ１３；Ｂリンパ球ケモアトラクタント（ＢＬＣ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１４（ＣＸＣＬ１４；乳房及び腎臓発現ケモカイン（ＢＲＡＫ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１５（ＣＸＣＬ１５；ラングカインとしても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１６（ＣＸＣＬ１６）、ＣＸＣケモカインリガンド１７（ＣＸＣＬ１７；ＶＥＧＦ同時調節ケモカイン−１（ＶＣＣ−１）、又は樹状細胞及び単球誘引ケモカイン様タンパク質（ＤＭＣ）としても知られる）、ＣＸ３ケモカインリガンド１（ＣＸ３ＣＬ１；フラクタルカイン又はニューロタクチンとしても知られる）、ＸＣケモカインリガンド１（ＸＣＬ１：リンフォタクチンとしても知られる）、ＸＣケモカインリガンド２（ＸＣＬ２）、レパタキシン（ＣＸＣＲ２）、マラビロク（ＣＣＲ５）、アプラビロク（ＣＣＲ５）、ビクリビロク（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−７７９（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−２２０（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−６５２（ＣＣＲ５）、ＡＫ６９２（ＣＣＲ５）、ＣＭＰＤ１６７（ＣＣＲ５）、ＢＸ−４７１（ＣＣＲ１）、ＡＭＤ３１００（ＣＸＣＲ４）、ＡＭＤ１１０７０（ＣＸＣＲ４）、ＦＣ１３１（ＣＸＣＲ４）、ＭＬＮ３８９７（ＣＣＲ１）、ＣＰ−４８１７１５（ＣＣＲ１）及びＧＷ−８７３１４０（ＣＣＲ５）、プロパゲルマニウム（ＧＥ−１３２）（ＣＣＲ２）、レスベラトロール（ＣＣＲ２）、ＢＭＳ ＣＣＲ２２２（ＣＣＲ２）、ＲＳ１０２８９５（ＣＣＲ２）、ＲＳ５０４３９３（ＣＣＲ２）、ＳＢ２２５００２（ＣＸＣＲ２）及びＳＢ２６５６１０（ＣＸＣＲ２）からなる群から選択されるケモカイン関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法を提供する。
【０１４１】
一実施形態では、本発明は、これらに限定されるものではないが、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）、アンジオテンシンＩＩＩ（ＡｎｇＩＩＩ）、ＣＧＰ−４２１１２Ａ（ＡＴ２Ｒアンタゴニスト；シグマ社（Ｓｉｇｍａ）＃Ｃ−１６０）、エプロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｔｅｖｅｔｅｎ（登録商標）、アボット・ラボラトリーズ・ユー・エス・エー社（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＵＳＡ））、ロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｃｏｚａａｒ（登録商標）、メルク社（Ｍｅｒｋ ＆ Ｃｏ））、バルサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｄｉｏｖａｎ（登録商標）、ノバルティス社（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、テルミサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｍｉｃａｒｄｉｓ（登録商標）、ベーリンガー・インゲルハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ））、イルベサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ａｖａｐｒｏ（登録商標）、サノフィ・アベンティス社（Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ））、オルメサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｂｅｎｉｃａｒ（登録商標）、第一三共株式会社）、カンデサルタン（市販名：Ａｔａｃａｎｄ（登録商標）、アストラゼネカ社（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））、ＰＤ１２３３１９（ＡＴ２Ｒ；Ｔｏｃｒｉｓ）、ＺＤ−７１１５（ＡＴ１Ｒ）、サララシン（（Ｓａｒ１−Ａｌａ８）ＡｎｇＩＩ）、サルスラン（（Ｓａｒ１−Ｔｈｒ８）ＡｎｇＩＩ）、及びＤｕＰ７５３（ＡＴ１Ｒ）からなる群から選択されるアンジオテンシン関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法を提供する。
【０１４２】
本発明には更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記ケモカイン受容体の活性と比較して前記ケモカイン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４３】
本発明には更に、アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記ケモカイン受容体の活性が調節される程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４４】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１４５】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
ケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
ケモカイン受容体活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１４６】
ケモカイン受容体の活性が調節される程度を評価する方法、及び受容体活性の変化を検出可能な検出器は当業者には周知のものである。
【０１４７】
本発明には更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記アンジオテンシン受容体の活性と比較して前記アンジオテンシン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記ケモカイン受容体関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４８】
本発明には更に、ケモカイン受容体関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記アンジオテンシン受容体の活性が調節される程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４９】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１５０】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１５１】
アンジオテンシン受容体の活性が調節される程度を評価する方法、及び受容体活性の変化を検出可能な検出器は当業者には周知のものである。
【０１５２】
本発明には、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が含まれる。
【０１５３】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用した場合に、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が含まれる。
【０１５４】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１５５】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１５６】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用した場合に、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が含まれる。
【０１５７】
本発明は更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度と比較して、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法を提供する。
【０１５８】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１５９】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１６０】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は部分作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性又は部分作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６１】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６２】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１６３】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１６４】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は部分作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性又は部分作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６５】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６６】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１６７】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１６８】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ｂ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６９】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１７０】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１７１】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１７２】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーへの逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１７３】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーへの逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１７４】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１７５】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１７６】
本発明は更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法を提供する。
【０１７７】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１７８】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１７９】
本発明は更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法を提供する。
【０１８０】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１８１】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１８２】
本発明の好ましい一実施形態では、ケモカイン受容体がアンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物がケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程、並びに／若しくは、アンジオテンシン受容体がケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物がアンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程は、本出願人らによる同時係属中の国際特許出願「検出システム及びその使用」（Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｆｏｒ）（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレットとして公開）に述べられる方法によって実施される。
【０１８３】
しかしながら、説明を明確にするため、本発明の方法は、アンジオテンシン受容体がケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物がアンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程、並びに／又は、ケモカイン受容体がアンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物がケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程が、本出願人らによる同時係属中の国際特許出願「検出システム及びその使用」（Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｆｏｒ）（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレットとして公開）に述べられる方法によって実施されるような方法に限定されない点は理解されるべきである。
【０１８４】
アンジオテンシン受容体がケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物がアンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する前記工程、並びに／又は、ケモカイン受容体がアンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物がケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定するための代替的な方法としては、Ｇタンパク質の利用率の変化などのシグナル伝達経路との共役における変化を観察するアッセイ、リガンド結合アッセイ、Ｃａ２＋、イノシトールリン酸、環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）、細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）及び／又は分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を監視するアッセイなどのシグナリングアッセイ、受容体トラフィッキングアッセイ、βアレスチン移行アッセイ、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、並びに受容体のヘテロ二量体化にともなう受容体の機能の変化を検出することが可能な他の任意のアッセイが挙げられる。
【０１８５】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、及び／又はアンタゴニスト、及び／又は逆アゴニストが含まれる。
【０１８６】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、及び／又は選択的アンタゴニスト、及び／又は選択的逆アゴニスト、及び／又は選択的アロステリック調節因子が含まれる。
【０１８７】
本発明には、ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方が過剰発現している細胞、又は細胞の画分が含まれる。
【０１８８】
本発明には、ケモカイン受容体が過剰発現し、アンジオテンシン受容体が内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が含まれる。
【０１８９】
本発明には、アンジオテンシン受容体が過剰発現し、ケモカイン受容体が内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が含まれる。
【０１９０】
本明細書の全体を通じて、文脈上特に必要とされないかぎり、「細胞の画分」なる語句には、これに限定されるものではないが、細胞膜の調製物が含まれる。当業者によれば理解されるように、細胞膜調製物は結合アッセイにおいて有用であり、あるいは抗体治療を含む抗体を誘導する抗原として有用である。
【０１９１】
本発明には、ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方が過剰発現している細胞が含まれる。
【０１９２】
本発明には、ケモカイン受容体が過剰発現し、アンジオテンシン受容体が内因的に発現している細胞が含まれる。
【０１９３】
本発明には、アンジオテンシン受容体が過剰発現し、ケモカイン受容体が内因的に発現している細胞が含まれる。
【０１９４】
本明細書において受容体との関連で用いる「過剰発現している」なる語句は、自然の発現レベルと比較した場合の、細胞内の受容体の異常な発現レベルのことを指す。これには、生理学的範囲に含まれると考えられる発現レベルであるが、その受容体を通常は発現しない細胞において発現されるものが含まれる。これには、生理学的範囲に含まれると考えられる発現レベルであるが、他のタンパク質との融合又は免疫標識の付加などの任意の方法によって改変された受容体を通常は発現しない細胞において発現されるものも含まれる。受容体を過剰発現している細胞は、当該技術分野では周知の標準的なアッセイ法によって特定することができる。
【０１９５】
本明細書において用いるところの「患者」なる用語は、１以上のアンジオテンシン関連疾患又はケモカイン関連疾患を罹患している可能性のあるあらゆる動物のことを指す。最も好ましくは、動物は哺乳動物である。この用語は、例えば、ヒト、家畜（すなわちウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、及びブタ）、家庭のペット（すなわちネコ及びイヌ）などを含むものとして理解される。
【０１９６】
本明細書において用いるところの「治療上の有効量」なる語句は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子とアンジオテンシン受容体との、又はケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子とケモカイン受容体との、又はアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに特異的なアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子とアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーとの相互作用にともなう生物学的活性を調節するうえで充分な量のことを指す。
【０１９７】
これらに限定されるものではないがケモカインのアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子などのケモカイン受容体関連化合物、及びこれらに限定されるものではないがアンジオテンシンのアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子などのアンジオテンシン受容体関連化合物の両方が組み合わせて投与される本明細書の態様との関連において、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量とアンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量とを合わせた量は、ケモカイン受容体関連化合物が単独で投与される場合の治療上の有効量よりも低くなりうる。すなわち、ケモカイン受容体関連化合物及びアンジオテンシン受容体関連化合物を組み合わせて投与することによって、いずれか一方の治療上の用量よりも少ない用量で所定の治療効果を生じうるものである。
【０１９８】
異なる態様における本発明の薬剤は注射によって投与するか、又は経口、経肺、経鼻若しくは他の任意の投与形態用に調製することができる。薬剤は例えば、静脈内投与、皮下投与、筋内投与、眼窩内投与、眼内投与、心室内投与、頭蓋内投与、関節嚢内投与、髄腔内投与、大槽内投与、腹腔内投与、口腔内投与、直腸投与、膣内投与、鼻腔内投与又はエアロゾール投与によって投与されることが好ましい。
【０１９９】
一態様では、投与方法は、薬剤が調製された形態に少なくとも適したものである。一態様では、最も効果的な反応が得られる投与方法は経験的に決定されるものであり、後述する投与手段は例として与えられるものであって本発明の組成物の投与方法をいかなる意味においても限定するものではない。上記の製剤はいずれも医薬品業界では一般的に用いられているものであり、適当な資格を有する医師には一般的に知られているものである。
【０２００】
特定の態様では、本発明の薬剤は、薬学的に許容される無害な賦形剤及び担体を含んでよく、皮下注射、静脈内注射及び腹腔内注射などの任意の非経口的方法によって投与することができる。更に、本製剤は場合に応じて１以上のアジュバントを含んでもよい。
【０２０１】
注射用途に適した薬剤の剤形には、場合に応じて、滅菌注射溶液又は分散液の即時調製用の滅菌水溶液（水溶性の場合）又は分散液及び滅菌粉末が含まれる。また、特定の実施形態では、細胞膜を通過する輸送を助けるために本発明の化合物をリポソームに封入して注射溶液として投与してもよい。これに代えるかあるいはこれに加えて、こうした製剤は、細胞膜を通過する輸送を促進するために自己組織化型の小孔構造の成分を含む。異なる態様において、担体は、例えば、水、エタノール、多価アルコール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、これらの適当な混合物及び植物油を含む溶媒又は分散媒である。例えば、これらに限定されるものではないが、レシチンなどのコーティングの使用により、分散液の場合には必要な粒径の維持により、また、界面活性剤の使用により、適切な流動性を維持する。特定の態様では、組成物中に例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンなどの吸収を遅らせる物質を使用することによって注射組成物を長期にわたって吸収させる。
【０２０２】
滅菌注射溶液は、必要な量の活性化合物を適当な溶媒に、必要に応じて上記に示した各種の他の成分とともに加えてから、フィルター滅菌することによって調製される。一般的に、分散液は、各種の滅菌活性成分を、ベースとなる分散媒及び上記に示したものから選ばれた必要な他の成分を含んだ滅菌溶媒に加えることによって調製される。滅菌注射溶液の調製用の滅菌粉末の場合では、特定の態様における調製法には、これに限定されるものではないが、予め滅菌フィルター処理した溶液から活性成分及び任意の更なる所望の成分の粉末を生成する真空乾燥法及び凍結乾燥法が含まれる。
【０２０３】
本明細書における使用が考えられるものとしては、参照によって本明細書に援用するＭａｒｔｉｎ， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （１８ｔｈ Ｅｄ． （１９９０ Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ． Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ １８０４２） ａｔ Ｃｈａｐｔｅｒ ８９）に一般的に述べられる経口固体剤形がある。固体剤形としては、錠剤、カプセル剤、丸剤、トローチ剤若しくはロゼンジ剤、カシェ剤、又はペレット剤が挙げられる。また、リポソーム又はプロテイノイドによる封入を用いて（例えば、米国特許第４，９２５，６７３号に報告されるプロテイノイドマイクロスフェアのように）本発明の組成物を製剤化することもできる。リポソームによる封入を用い、こうしたリポソームを各種のポリマーによって誘導体化することができる（例えば、米国特許第５，０１３，５５６号）。治療薬において使用することが可能な固体剤形についての記載が、参照によって本明細書に援用するＭａｒｓｈａｌｌ， Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ， Ｃｈａｐｔｅｒ １０， Ｂａｎｋｅｒ ａｎｄ Ｒｈｏｄｅｓ ｅｄ．， （１９７９）に示されている。一般的にこうした製剤は、本発明の一部として述べられる化合物（又はその化学的に修飾された形態）及び、胃内の環境に対する保護を与え、腸内で生物学的活性物質を放出させる不活性成分を含む。
【０２０４】
本発明のケモカイン受容体関連化合物又はアンジオテンシン受容体関連化合物の放出部位は、胃、小腸（十二指腸、空腸、又は回腸）、又は大腸でありうる。当業者であれば、胃の中では溶解せずに、十二指腸又は腸内の他の部位で物質を放出する製剤を入手可能である。一態様では、こうした放出において、組成物を保護するか、あるいは腸などの胃内環境を超えた部位において化合物を放出することによって胃内環境の悪影響を回避する。
【０２０５】
胃からの保護を完全なものとするには、少なくともｐＨ５．０で不透過性のコーティングが用いられる。腸溶コーティングとして用いられるより一般的な不活性成分の例としては、酢酸トリメリット酸セルロース（ＣＡＴ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ５０、ＨＰＭＣＰ５５、ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ３０Ｄ、Ａｑｕａｔｅｒｉｃ、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｓ、及びセラックがある。これらのコーティングは混合フィルムとして使用することもできる。
【０２０６】
胃に対する保護を目的としたものではないコーティング又はコーティングの混合物を錠剤に用いることもできる。こうしたコーティングとしては、これらに限定されるものではないが、糖衣、又は錠剤を飲み込みやすくするコーティングが挙げられる。代表的なカプセル剤は、乾燥治療薬（すなわち粉末）の投与用のハードシェル（ゼラチンなど）からなるものであり、液体の剤形ではソフトゼラチンシェルを使用することもできる。特定の態様におけるカシェ剤のシェル材料は、厚いデンプン又は他の可食紙である。丸剤、ロゼンジ剤、成形錠剤又は粉薬錠剤では、これに限定されるものではないが湿式塊化法（ｍｏｉｓｔ ｍａｓｓｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）の使用も考えられる。
【０２０７】
特定の態様では、治療薬を粒径約１ｍｍの顆粒又はペレットの形態で微細な多重粒子として製剤中に含有させる。特定の態様では、カプセル投与用の材料の製剤は、粉末、軽く圧縮したプラグ、又は更には錠剤である。一態様では、治療薬は圧縮によって調製することができる。
【０２０８】
場合に応じて着色料及び香味料をすべて添加する。例えば、化合物を製剤化（これらに限定されるものではないが、リポソーム又はマイクロスフェアへの封入などにより）した後、着色料及び香味料を含んだ冷蔵飲料などの食品に更に含有させることができる。
【０２０９】
一態様では、治療薬の体積を不活性物質によって希釈又は増大させる。こうした希釈剤としては、炭水化物、特にマンニトール、α−ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾デキストリン類及びデンプンが挙げられる。場合に応じて、三リン酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、炭酸マグネシウム及び塩化ナトリウムなどの特定の無機塩類を充填剤として使用することもできる。市販の希釈剤としてはＦａｓｔ−Ｆｌｏ、Ｅｍｄｅｘ、ＳＴＡ−Ｒｘ１５００、Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ及びＡｖｉｃｅｌｌがある。
【０２１０】
他の実施形態では、治療薬の製剤に崩壊剤を添加して固体剤形とする。崩壊剤として用いられる材料としては、これらに限定されるものではないが、市販のデンプンベースの崩壊剤であるＥｘｐｌｏｔａｂなどのデンプンが挙げられる。グリコール酸デンプンナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン（ｕｌｔｒａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ）、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸カルボキシメチルセルロース、天然スポンジ及びベントナイトの使用も考えられる。崩壊剤の別の形態として、不溶性カチオン交換樹脂がある。場合に応じて粉末化したガムを崩壊剤として、また結合剤として用いるが、こうした粉末化ガムとしてはこれらに限定されるものではないが、寒天、カラヤガム又はトラガカントガムなどの粉末化ガムが挙げられる。アルギン酸及びそのナトリウム塩も崩壊剤として有用である。
【０２１１】
治療化合物を互いに結着して硬質の錠剤を形成するための結合剤の使用も考えられ、これらに限定されるものではないが、アカシアガム、トラガカントガム、デンプン及びゼラチンなどの天然物由来の材料が挙げられる。他の結合剤としては、これらに限定されるものではないが、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）及びカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）が挙げられる。治療薬を造粒するためにアルコール溶液中にポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）及びヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を使用することも考えられる。
【０２１２】
製剤化プロセスの際のくっつきを防止するために場合に応じて減摩剤を治療薬の製剤に添加する。場合に応じて治療薬と金型壁との間に層として潤滑剤を用いるが、こうした潤滑剤としては、これらに限定されるものではないが、マグネシウム塩及びカルシウム塩を含むステアリン酸、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、流動パラフィン、植物油及び蝋などが挙げられる。代表的な可溶性潤滑剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、分子量の異なるポリエチレングリコール、Ｃａｒｂｏｗａｘ４０００及び６０００が挙げられる。
【０２１３】
場合に応じて、製剤化の際の化合物の流動性を向上させ、圧縮時の再配置を助けるための滑剤を添加する。こうした滑剤としては、これらに限定されるものではないが、デンプン、デンプン、タルク、焼成シリカ及び水和シリコアルミネートが挙げられる。
【０２１４】
水性環境中への治療薬の溶解を助けるため、特定の実施形態では湿潤剤として界面活性剤を添加する。界面活性剤の例としては、これらに限定されるものではないが、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム及びスルホン酸ジオクチルナトリウムなどのアニオン性洗剤が挙げられる。場合に応じてカチオン性界面活性剤が用いられるが、こうしたカチオン性界面活性剤としては、これらに限定されるものではないが、塩化ベンザルコニウム又は塩化ベンゼトニウムが挙げられる。製剤中で界面活性剤としての使用が考えられる潜在的な非イオン性洗剤を列記すると、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０及びポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、モノステアリン酸グリセリン、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５及びポリソルベート８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース並びにカルボキシメチルセルロースがある。これらの界面活性剤が使用される場合、化合物の製剤中に単独で、又は異なる比の混合物として添加される。
【０２１５】
化合物の吸収を助ける可能性のある添加剤の例としては、これらに限定されるものではないが、オレイン酸、リノール酸、及びリノレン酸などの脂肪酸がある。
【０２１６】
徐放性製剤の使用も考えられる。特定の態様では、拡散又は滲出機構による放出を可能とする不活性基質（ガム類）に化合物を取り込ませる。特定の態様では、徐々に溶解する基質を製剤中に取り込ませてもよい。この治療薬の別の徐放形態として、Ｏｒｏｓ治療システム（アルザ社（Ａｌｚａ Ｃｏｒｐ．））に基づいた方法があるが、これは、水を流入させ、薬物を１個の小開口部から浸透圧効果によって押し出すような半透膜に薬物を封入するというものである。腸溶コーティングのなかには徐放効果を有するものもある。
【０２１７】
他の態様では、最適なフィルムコーティングを与えるために材料の混合物を用いる。フィルムコーティングは、これらに限定されるものではないが、例えば、パンコーター若しくは流動床中、又は圧縮コーティングによって行われる。
【０２１８】
本明細書においては、化合物の肺投与も考えられる。こうした態様では化合物は吸入によって哺乳動物の肺に投与され、肺の上皮内層を通過して血流に入る。
【０２１９】
本発明の実施においては、これらに限定されるものではないが、ネブライザー、定量吸入器、及び粉剤吸入器などのいずれも当業者にはよく知られた治療薬製品の肺投与用に設計された様々な機械的装置の使用が考えられる。
【０２２０】
本発明の実施に適した市販の装置の幾つかの具体例としては、これらに限定されるものではないが、例えば、マリンクロット社（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ， Ｉｎｃ．）（ミズーリ州セントルイス）の製造するＵｌｔｒａｖｅｎｔネブライザー、マルクエスト・メディカル・プロダクツ社（Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）（コロラド州イングルウッド）の製造するＡｃｏｒｎＩＩネブライザー、グラクソ社（Ｇｌａｘｏ Ｉｎｃ．）（ノースカロライナ州リサーチトライアングルパーク）の製造するＶｅｎｔｏｌｉｎ定量吸入器、及び、ファイソンズ社（Ｆｉｓｏｎｓ Ｃｏｒｐ．）（マサチューセッツ州ベッドフォード）の製造するＳｐｉｎｈａｌｅｒ粉剤吸入器がある。
【０２２１】
こうした装置はいずれも、化合物の投薬に適した製剤の使用を必要とする。一般的に各製剤は使用される装置の種類に固有のものであり、治療に有用な通常の希釈剤、アジュバント及び／又は担体以外に適切な推進材料を使用する。リポソーム、マイクロカプセル若しくはマイクロスフェア、包接複合体、又は他の種類の担体の使用も考えられる。
【０２２２】
場合に応じて、噴霧式又は超音波式を問わず、ネブライザーとの使用に適した製剤には化合物を水に懸濁したものからなる。一態様では、こうした製剤は、緩衝剤及び単糖（例えば、タンパク質の安定化及び浸透圧の調節のため）を更に含む。一実施形態では、ネブライザー製剤は、エアロゾールを形成する際に溶液の霧化によって引き起こされる表面で誘発される化合物の凝集を低減又は防止するための界面活性剤を更に含む。
【０２２３】
一態様では、定量吸入装置と使用するための製剤は、界面活性剤によって推進剤中に懸濁された化合物を含有する微粉末からなる。推進剤は、これらに限定されるものではないが、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール及び１，１，１，２−テトラフルオロエタンなどの、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン若しくは炭化水素、又はこれらの組み合わせなどのこの目的で使用される任意の従来の材料である。好適な界面活性剤としては、これらに限定されるものではないが、トリオレイン酸ソルビタン及び大豆レシチンが挙げられる。特定の態様では、界面活性剤としてオレイン酸の使用も考えられる。
【０２２４】
粉剤吸入装置から投薬するための製剤は、化合物を含有する微細な乾燥粉末からなるものであり、場合により、これらに限定されるものではないがラクトース、ソルビトール、スクロース、又はマンニトールなどの増量剤を、装置からの粉末の分散を助ける量、例えば、製剤の５０重量％〜９０重量％の量で含む。特定の実施形態では、化合物は、肺末梢部に最も効果的に投与されるように平均粒径が１０ミクロン未満、最も好ましくは０．５ミクロン〜５ミクロンである粒子状に調製される。
【０２２５】
化合物の鼻腔内投与も考えられる。鼻腔内投与は、肺内に治療薬製品を蓄積させる必要なくして治療薬製品を鼻腔に投与した直後に血流にタンパク質を通過させることができる。鼻腔内投与用の製剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、デキストラン又はシクロデキストランを含むものが挙げられる。
【０２２６】
特定の態様では、本発明の薬剤は、単回投与スケジュール又は複数回投与スケジュールで投与される点は認識されるであろう。複数回投与スケジュールとは、例えば、１回〜１０回の別々の投与による最初の投与期間の後、場合に応じて治療効果を維持又は強化するうえで必要な間隔で他の用量を引き続き投与するというものである。この投与計画は、患者のニーズ及び医師の判断に少なくとも一部基づいて決定される。
【０２２７】
本発明を以下の非限定的な実施例を参照してあくまで参考として以下により詳しく説明する。しかしながら、以下の実施例はあくまで説明的なものとして理解されるべきものであり、上記に述べた本発明の一般性をいかなる意味においても限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０２２８】
一般的方法
図１〜３を参照して簡単に述べると、２種類の受容体（ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体）の形で相互作用基（ＩＧ）が与えられる。２種類のうちの一方はレポーター要素（ＲＣ）に結合させられる（ＩＧ１−ＲＣ１，ＩＧ３）。第２のＩＧ（ＩＧ２−ＲＣ２）は、リガンドの結合時に受容体と相互作用する分子（例えば、β−アレスチン又はその突然変異体）から誘導される。検出システムは、ケモカイン受容体−アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体の形成を検出するばかりでなく、リガンド又は薬物が受容体ヘテロ二量体においてアゴニスト、部分アゴニスト、アンタゴニスト、逆アゴニスト又は部分逆アゴニストのいずれとして作用するかを区別することができる。
【０２２９】
ＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を約６３０，０００細胞／ウェルの密度で６穴プレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２下で１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ；ギブコ社（Ｇｉｂｃｏ））を添加した完全培地（０．３ｍｇ／ｍｌのグルタミン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン及び１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（ギブコ社（Ｇｉｂｃｏ））を含有するＤＭＥＭ）中で維持した。ＧｅｎｅＪｕｉｃｅ（ノバジェン社（Ｎｏｖａｇｅｎ））を製造者の指示にしたがって用い、播種２４時間後に一過性トランスフェクションを行った。トランスフェクションの２４時間後、細胞をＰＢＳで洗い、０．０５％トリプシン／０．５３ｍＭ ＥＤＴＡを用いて剥離させ、５％ＦＣＳを含む、ＨＥＰＥＳにて緩衝したフェノールレッドを含まない完全培地中に再懸濁し、ポリ−Ｌ−リシンでコーティングした白色の９６穴マイクロプレート（ヌンク社（Ｎｕｎｃ））に加えた。トランスフェクションの４８時間後、細胞を、３７℃、５％ＣＯ２下で最終濃度３０μＭのＥｎｄｕＲｅｎ（登録商標）（プロメガ社（Ｐｒｏｍｅｇａ））と予めインキュベートしてからｅＢＲＥＴアッセイを行った。Ｗａｌｌａｃ１４２０ソフトウェア（パーキン・エルマー社（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ））を用いたＶｉｃｔｏｒ Ｌｉｇｈｔプレートリーダーを使用して３７℃でＢＲＥＴ測定値を測定した。次に、フィルター処理した発光量を「供与体波長範囲（４００ｎｍ〜４７５ｎｍ）」及び「受容体波長範囲（５２０ｎｍ〜５４０ｎｍ）」のそれぞれにおいて２秒間測定した。
【０２３０】
相互作用するタンパク質間で観測されたＢＲＥＴシグナルは、バックグラウンドＢＲＥＴ比を差し引くことによって正規化される。これは、次の２つの方法のいずれかによって行うことができる（Ｐｆｌｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌ １８：１６６４−１６７０； Ｐｆｌｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｎａｔ Ｐｒｏｔｏｃ １：３３６−３４４）： １）。すなわち、１）ドナー構築体のみを含む細胞試料について４００ｎｍ〜４７５ｎｍの発光量に対する５２０ｎｍ〜５４０ｎｍの発光量の比を、互いに相互作用する受容体と供与体の融合タンパク質を含む試料の同様の比から差し引くか、２）溶媒で処理した細胞試料について４００ｎｍ〜４７５ｎｍの発光量に対する５２０ｎｍ〜５４０ｎｍの発光量の比を、リガンドで処理した同じ細胞試料の第２のアリコートの同様の比から差し引く。以下の実施例では第２の計算法を用い、シグナルは「リガンド誘導ＢＲＥＴ比」として述べる。
【実施例１】
【０２３１】
実施例１ ＣＣＲ５−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２３２】
ここで図４を参照すると、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍのマクロファージ炎症性タンパク質１β（ＭＩＰ１β）若しくは１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方のみ、又はＭＩＰ１β及びＡｎｇＩＩの両方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２３３】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＭＩＰ１β処理した場合には、約０．０８のピークに達するｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞のＡｎｇＩＩ処理後にも観測された。このシグナルは約０．０４に達した。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＭＩＰ１β及びＡｎｇＩＩの両方で処理した場合には約０．１７のピークシグナルが生じ、これはＭＩＰ１β又はＡｎｇＩＩ単独の添加後に観測されたシグナルよりも大幅に高かった。
【０２３４】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、ＣＣケモカイン受容体５（ＣＣＲ５）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ヘマグルチニンエピトープタグ標識ＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＡｎｇＩＩ）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２３５】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２３６】
本実施例はまた、ＩＧ１リガンド（ＭＩＰ１β）及びＩＧ３リガンド（ＡｎｇＩＩ；調節因子）の組み合わせによる処理では、これらを加え合わせた効果よりも効果が高くなることを示している。このような相加効果よりも高い効果は、ＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合に加えてＩＧ１−ＩＧ２が会合する結果、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、このことはケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す根拠を与える。理論によって束縛されることを望むものではないが、このような相加効果よりも高い効果は、恐らくはＲＣ１とＲＣ２が更に近接することを可能とするか、あるいはＲＣ１とＲＣ２とのより有利な相対的配向を可能とするような、シグナル発生により有利にはたらく活性ＩＧコンホメーション（アゴニストに結合したコンホメーション）にも一部起因しているものと考えられる。
【０２３７】
本実施例はまた、ヘマグルチニン（ＨＡ）エピトープタグを付加することなどによってＩＧ３をタグ標識することができるが、こうしたタグはレポーター要素を構成するものではなく、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するシグナルを妨害したり、かつ／又はこうしたシグナルに寄与するものではないことを示している。このようなタグ標識は、ＩＧ３の相対的な発現レベルなどの更なる情報の確認を可能とするものである。
【実施例２】
【０２３８】
実施例２ ＣＸＣＲ２−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２３９】
次に図５を参照すると、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍのインターロイキン８（ＩＬ８）若しくは１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方のみ、又はＩＬ８及びＡｎｇＩＩの両方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２４０】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＩＬ８処理した場合には、約０．１０のピークに達するｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞のＡｎｇＩＩ処理後にも観測された。このシグナルは約０．０９に達した。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＩＬ８及びＡｎｇＩＩの両方で処理した場合には約０．１９のピークシグナルを生じ、これはＩＬ８又はＡｎｇＩＩ単独の添加後に観測されたシグナルよりも大幅に高かった。
【０２４１】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、ＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ２）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ヘマグルチニンエピトープタグ標識ＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＡｎｇＩＩ）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２４２】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２４３】
本実施例はまた、ＩＧ１リガンド（ＩＬ８）及びＩＧ３リガンド（ＡｎｇＩＩ；調節因子）の組み合わせによる処理では、これらを加え合わせた効果が生ずることを示している。このような相加的効果は、ＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合に加えてＩＧ１−ＩＧ２が会合する結果、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、このことはケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す根拠を与える。理論によって束縛されることを望むものではないが、このような相加的効果は、ＩＧ１リガンドがＩＧ３に対するアロステリック効果を介してＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する調節因子として作用していることにも一部起因していると考えられる。更に、この相加的効果は、恐らくはＲＣ１とＲＣ２が更に近接することを可能とするか、あるいはＲＣ１とＲＣ２とのより有利な相対的配向を可能とするような、シグナル発生により有利にはたらく活性ＩＧコンホメーション（アゴニストに結合したコンホメーション）にも一部起因しているものと考えられる。
【０２４４】
本実施例はまた、ヘマグルチニン（ＨＡ）エピトープタグを付加することなどによってＩＧ３をタグ標識することができるが、こうしたタグはレポーター要素を構成するものではなく、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するシグナルを妨害したり、かつ／又はこうしたシグナルに寄与するものではないことを示している。このようなタグ標識は、ＩＧ３の相対的な発現レベルなどの更なる情報の確認を可能とするものである。
【実施例３】
【０２４５】
実施例３ ＣＸＣＲ４−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２４６】
次に図６を参照すると、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ１α）若しくは１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方のみ、又はＳＤＦ１α及びＡｎｇＩＩの両方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２４７】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＳＤＦ１α処理した場合には、約０．０１のピークに達する一過性のｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞のＡｎｇＩＩ処理後にも観測された。このシグナルは約０．０６に達した。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＳＤＦ１α及びＡｎｇＩＩの両方で処理した場合には約０．０８のピークシグナルを生じ、これはＳＤＦ１α又はＡｎｇＩＩ単独の添加後に観測されたシグナルよりも大幅に高かった。
【０２４８】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、ＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ４）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ヘマグルチニンエピトープタグ標識ＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＡｎｇＩＩ）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２４９】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２５０】
本実施例はまた、ＩＧ１リガンド（ＳＤＦ１α）及びＩＧ３リガンド（ＡｎｇＩＩ；調節因子）の組み合わせによる処理では、これらを加え合わせた効果よりも効果が高くなることを示している。このような、相加効果よりも高い効果は、ＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合に加えてＩＧ１−ＩＧ２が会合する結果、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、このことはケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す根拠を与える。理論によって束縛されることを望むものではないが、このような相加効果よりも高い効果は、ＩＧ１リガンドがＩＧ３に対するアロステリック効果を介してＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する調節因子として作用していることにも一部起因していると考えられる。更に、このような相加効果よりも高い効果は、恐らくはＲＣ１とＲＣ２が更に近接することを可能とするか、あるいはＲＣ１とＲＣ２とのより有利な相対的配向を可能とするような、シグナル発生により有利にはたらく活性ＩＧコンホメーション（アゴニストに結合したコンホメーション）にも一部起因しているものと考えられる。
【０２５１】
本実施例はまた、ヘマグルチニン（ＨＡ）エピトープタグを付加することなどによってＩＧ３をタグ標識することができるが、こうしたタグはレポーター要素を構成するものではなく、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するシグナルを妨害したり、かつ／又はこうしたシグナルに寄与するものではないことを示している。このようなタグ標識は、ＩＧ３の相対的な発現レベルなどの更なる情報の確認を可能とするものである。
【実施例４】
【０２５２】
実施例４ ＣＣＲ２−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２５３】
次に図７を参照すると、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２５４】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＭＣＰ１処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、約０．０７のピークに達するｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞のＭＣＰ１処理後にも観測された。このシグナルは約０．０５に達した。
【０２５５】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、アンジオテンシン受容体１（ＡＴ１Ｒ）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＭＣＰ１）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２５６】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【実施例５】
【０２５７】
実施例５ ＣＣＲ２−ＡＴ２Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２５８】
次に図８を参照すると、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２５９】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＭＣＰ１処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。更に、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合にも、ＡＴ２Ｒがｂａｒｒ２と相互作用しないことと一致するリガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は認められなかった（Ｔｕｒｕ， Ｇ． ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｂｅｔａ−ａｒｒｅｓｔｉｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ＡＴ１ ａｎｄ ＡＴ２ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ． ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ５８０：４１−４５）。同様に、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。しかしながら、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞のＭＣＰ１処理後にはシグナルが観測された。このシグナルは約５０分間後に約０．１６に達した。
【０２６０】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、アンジオテンシン受容体２（ＡＴ２Ｒ）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＭＣＰ１）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２６１】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２６２】
本実施例は更に、ＩＧ１がＩＧ２と相互作用しない場合に検出可能なシグナルが発生しうることを示している。ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合に図８で観測されるシグナルが見られないことは、この物質の組み合わせをＭＣＰ１で処理した場合に観測されるシグナルがＩＧ１−ＩＧ２の会合によるものではないことを証明するものである。
【０２６３】
したがって、ＩＧ１がＩＧ２と相互作用しないことは、ＩＧ１−ＩＧ２の会合ではなくＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合の結果としてＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、本実施例はケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す更なる根拠となるものである。
【０２６４】
更に本実施例は、シグナルがＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合によって発生するものであり、ＩＧ３の活性化がＩＧ１のトランス活性化を引き起こし、このＩＧ１がＩＧ２と会合することによって、ＩＧ２とＩＧ３とが会合せずにＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するものではないことを示している。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなるヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質は、細胞内において単独で機能するわけではなく、安定的な、あるいは一時的な複合体として機能し、タンパク質間相互作用がタンパク質の機能の重要な決定因子となっている（非特許文献１参照）。更にタンパク質及びタンパク質複合体は、ＤＮＡ、ＲＮＡ及び小分子のような他の細胞の構成成分と相互作用を行う。これらの相互作用に関与する個々のタンパク質及びそれらの相互作用を理解することは、生物学的プロセスをより深く理解するうえで重要である。
【０００３】
アレンら（非特許文献２参照）により報告されたケモカインリガンド（ＣＣＬ）の主要な生理学的機能とは、「通常の免疫監視機構、炎症及び発生における細胞遊走」の調節である。ＣＣＬは、炎症性サイトカインに応じて放出され、ケモカインに対する生理学的応答を媒介するＧタンパク質共役受容体の大きなファミリーと選択的に結合する。ケモカインは当初は走化性サイトカインと呼ばれていた。
【０００４】
ケモカインシステムがヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の感染及び後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の発症において重要な役割を担っていることが発見されて以来、有効な介入戦略を立てるために関与する基礎となる発症機序を理解すべく多大な努力がなされてきた（非特許文献３参照）。更に、喘息などの特定の状態にともなうあらゆる有害な免疫応答は、ほとんどといってよいくらいに機能不全に陥ったケモカインシステムによるものである。アテローム性動脈硬化症の発症にもケモカインシグナル伝達経路が関与しており、動脈病変部へのマクロファージの浸潤がこの異常炎症性疾患に直接寄与していることも示されている（非特許文献４参照）。
【０００５】
レニン−アンジオテンシン系（ＲＡＳ）は、交感神経系及び体液恒常性において重要な役割を果たしている。レニンは、グロブリン前駆体であるアンジオテンシノーゲンからのアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩ）の形成を媒介する、腎臓によって分泌されるタンパク質分解酵素である（非特許文献５参照）。ＡｎｇＩ自体は、該ＡｎｇＩを、高い活性を有するアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）に変換する第２の酵素であるアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）の基質となる以外には生理学的重要性はほとんどないものと考えられている。しかしながら、ＡｎｇＩＩは、別のＡＣＥとは独立した機序によっても生成されうる点には注意を要する。次いでＡｎｇＩＩは、ＡｎｇＩＩＩによってアミノペプチダーゼに代謝されうる。
【０００６】
ＡｎｇＩＩは、極めて強力な血管収縮物質であり、このため心疾患及び高血圧の発症との関連において広く研究されている（非特許文献６参照）。高血圧の患者におけるＡｎｇＩＩの有害な血管収縮作用を抑えるため、ＡｎｇＩＩのシグナル伝達の段階で介入する治療策が確立されている。詳細には、ＡＣＥの活性を阻害してＡｎｇＩのＡｎｇＩＩへの変換を妨げる化合物、及びアンジオテンシン受容体（ＡＴＲ）の活性を特異的に阻害する化合物がこうした状態の治療に使用されてきた（非特許文献７参照）。
【０００７】
上記の考察は、あくまで本発明の理解を助けるためのものに過ぎず、本発明の以下の説明の範囲又は用途をいかなる意味においても限定するものとして解釈されるべきではなく、また、考察される情報のいずれかが、優先日における当該技術分野における当業者の通常の一般的知識の範囲内にあったことを容認するものとして解釈されるべきでもない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ａｕｅｒｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．， （２００２）， Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ ２：６１１−６２３
【非特許文献２】Ａｌｌｅｎ， Ｓ． ｅｔ ａｌ． （２００７） Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ： Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ． Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２５：７８７−８２０
【非特許文献３】Ｌｕｓｓｏ， Ｐ． （２００６） ＨＩＶ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｓｙｓｔｅｍ： １０ ｙｅａｒｓ ｌａｔｅｒ． ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ ２５：４４７−４５６
【非特許文献４】Ｂｏｉｓｖｅｒｔ， Ｗ． （２００４） Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｔｈｅｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ． Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １４：１６１−１６５
【非特許文献５】Ｒａｎｇ， Ｈ．Ｐ．， ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ： ３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， １９９５， Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ， Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ， ＵＫ．
【非特許文献６】Ｒａｍａｓｕｂｂｕ， Ｋ． （２００７） Ａｎｔｉ−ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ Ｔｈｅｒａｐｙ： Ｎｅｗ Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ． Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ Ｃｌｉｎｉｃｓ ２５：５７３−５８０
【非特許文献７】Ｍａｔｃｈａｒ， Ｄ．Ｂ． （２００８） Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗ： Ｃｏｍａｐｒａｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ−Ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｂｌｏｃｋｅｒｓ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｉｎｇ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １４８：１６−２９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者らは、アンジオテンシン受容体とケモカイン受容体とが会合することを見出した。このことは、いずれかの受容体に関連した病気の治療に関して重要な意味合いを有するものである。
【００１０】
最近の研究によって、ＧＰＣＲは、モノマーとして機能するばかりでなく、リガンド結合、シグナル伝達、及びエンドサイトーシスに変化を引き起こすホモ二量体及びヘテロ二量体としても機能している可能性が示されている（Ｒｉｏｓ ｅｔ ａｌ． （２０００） Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｔｈｅｒ． ９２：７１−８７）。したがって、特定の受容体のアゴニスト又はアンタゴニストとして機能する薬物の作用は、この受容体の結合相手によって決まる。ある薬物の作用を、特定の受容体二量体によって媒介される細胞反応に限定することが望ましい場合がある。ミリガンの観察によれば（Ｍｉｌｌｉｇａｎ Ｇ． （２００６）， Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ １１：５４１−５４９）、創薬産業におけるホモ二量体化及びホモオリゴマー化の意義は限定的なものであるが、「ＧＣＰＲのヘテロ二量体及びヘテロオリゴマーの薬理作用、機能、及び調節における差異は、異なる組織のＧＰＣＲを選択的に標的化するための手段を示唆するものであり、幾つかの薬物の機能の機序は、単一のＧＰＣＲの異種発現に頼った単純なリガンドスクリーニングプログラムから予想される機序とは生体内では異なりうることを示唆している」としている。
【００１１】
「ケモカイン受容体」なる語句は、ＣＣケモカイン受容体１（ＣＣＲ１）、ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）、ＣＣケモカイン受容体３（ＣＣＲ３）、ＣＣケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）、ＣＣケモカイン受容体５（ＣＣＲ５）、ＣＣケモカイン受容体６（ＣＣＲ６）、ＣＣケモカイン受容体７（ＣＣＲ７）、ＣＣケモカイン受容体８（ＣＣＲ８）、ＣＣケモカイン受容体９（ＣＣＲ９）、ＣＣケモカイン受容体１０（ＣＣＲ１０）などのＧタンパク質共役ＣＣケモカイン受容体（ＣＣＲ）を少なくとも含むものとして理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、ＣＸＣケモカイン受容体１（ＣＸＣＲ１）、ＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ２）、ＣＸＣケモカイン受容体３（ＣＸＣＲ３）、ＣＸＣケモカイン受容体４（ＣＸＣＲ４）、ＣＸＣケモカイン受容体５（ＣＸＣＲ５）、ＣＸＣケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）及びＣＸＣケモカイン受容体７（ＣＸＣＲ７）などのＧタンパク質共役ＣＸＣケモカイン受容体（ＣＸＣＲ）を含むものとしても理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＸＣケモカイン受容体１（ＸＣＲ１）を意味するものとしても理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＣＸ３ケモカイン受容体（ＣＸ３ＣＲ１）を含むものとして理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＣＣＸ−ＣＫＲケモカイン受容体（ＣＣＸ−ＣＫＲ）を含むものとして理解されるべきである。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役Ｄ６ケモカイン受容体（Ｄ６）を意味するものとしても理解される。「ケモカイン受容体」なる語句は更に、Ｇタンパク質共役ＤＡＲＣ／Ｄｕｆｆｙケモカイン受容体（ＤＡＲＣ）を含むものとして理解されるべきである。このケモカイン受容体のリストは、アレンによる概説（Ａｌｌｅｎ， Ｓ． ｅｔ ａｌ． （２００７） Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ： Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ． Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２５：７８７−８２０）から編集したものである。最後に、「ケモカイン受容体」なる語句は更に、新たに発見されたあらゆるＣＣＲ／ＣＸＣＲ／ＸＣＲ／ＣＸ３ＣＲ／ＣＣＸ−ＣＫＲ／Ｄ６／ＤＡＲＣファミリーのメンバーを含むものとして理解されるべきである。
【００１２】
「アンジオテンシン受容体」又は「ＡＴＲ」なる語句は、ポレロらによって述べられる（Ｐｏｒｅｌｌｏ， Ｅ．Ｒ． （２００８） Ｔｈｅ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ Ｔｙｐｅ ２ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ： Ａｎ Ｅｎｉｇｍａ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ． Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ． Ｉｎ Ｐｒｅｓｓ）、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）及び／又はアンジオテンシンＩＩＩ（ＡｎｇＩＩＩ）によって活性化されるものと類似したＧタンパク質共役受容体であるアンジオテンシン受容体１（ＡＴ１Ｒ；ＡＴ１Ｒ）又はアンジオテンシン受容体２（ＡＴ２Ｒ；ＡＴ２Ｒ）のいずれかを意味するものとして理解されるべきである。「アンジオテンシン受容体」又は「ＡＴＲ」は、新たに発見されたアンジオテンシン受容体ファミリーのメンバーを含むものとして理解されるべきである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の第１の態様では、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなるヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体が提供される。
【００１４】
本発明の第２の態様では、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００１５】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的である。
【００１６】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン関連化合物と同時投与することができる。
【００１７】
本発明の第３の態様では、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００１８】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である。
【００１９】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体関連化合物と同時投与することができる。
【００２０】
本発明の第４の態様では、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量の使用を含む、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が提供される。
【００２１】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有してもよい。
【００２２】
本発明の第５の態様では、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量の使用を含む、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が提供される。
【００２３】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有してもよい。
【００２４】
本発明の第６の態様では、ケモカインに選択的な結合物質、又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００２５】
本発明の第７の態様では、アンタゴニストに選択的な結合物質、又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００２６】
本発明の第８の態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することを含む、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が提供される。
【００２７】
本発明の第９の態様では、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造における、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の使用が提供される。
【００２８】
本発明の第１０の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記ケモカイン受容体の活性と比較して前記ケモカイン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が提供される。
【００２９】
本発明の第１１の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記アンジオテンシン受容体の活性と比較して前記アンジオテンシン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記ケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が提供される。
【００３０】
本発明の第１２の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度と比較して、前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３１】
本発明の第１３の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度と比較して、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３２】
本発明の第１４の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３３】
本発明の第１５の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３４】
本発明の第１６の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３５】
本発明の第１７の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対する逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３６】
本発明の第１８の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３７】
本発明の第１９の態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【００３８】
本発明の上記の方法においては、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する工程、並びに／又は、前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する工程は、本出願人らによる同時係属中の国際特許出願第ＰＣＴ／ＡＵ２００７／００１７２２号「検出システム及びその使用」（Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｆｏｒ）（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレットとして公開）に述べられる１以上の方法によって実施することができる。
【００３９】
本発明の第２０の態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト及び／又は選択的アンタゴニスト及び／又は選択的逆アゴニスト及び／又は選択的アロステリック調節因子が提供される。
【００４０】
本発明の第２１の態様では、ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方を過剰発現している細胞、又は細胞の画分が提供される。
【００４１】
本発明の第２２の態様では、ケモカイン受容体を過剰発現し、アンジオテンシン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が提供される。
【００４２】
本発明の第２３の態様では、アンジオテンシン受容体を過剰発現し、ケモカイン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】図１は、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との会合を検出した方法を説明する図である。図１は、分子の会合を検出するためのシステムの基礎をなす物質の構成を示す。すなわち、第１の物質は第１のレポーター要素と結合された第１の相互作用基からなり、第２の物質は第２のレポーター要素と結合された第２の相互作用基からなり、第３の物質は第３の相互作用基からなる。
【００４４】
【図２】図２は、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との会合を検出した方法を説明する図である。図２は、調節因子の投与が第２の相互作用基の第３の相互作用基との会合を、好ましくは第３の相互作用基と、単独で、又は第１の相互作用基と同時に相互作用することによって調節する様子を示したものである。
【００４５】
【図３】図３は、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との会合を検出した方法を説明する図である。図３は、第１の相互作用基と第３の相互作用基とが会合する場合、第２の相互作用基と第３の相互作用基との会合が調節されると第１のレポーター要素と第２のレポーター要素との近接が結果的に調節されることによって、検出器によって検出可能なシグナルが調節されることを示している。したがって、第１のレポーター要素と第２のレポーター要素とが近接することによって発生するシグナルを検出器によって監視することは、第１の物質と第３の物質との会合を監視することである。第１の相互作用基と第３の相互作用基とが会合していない場合には、第１のレポーター要素と第２のレポーター要素とは空間的に離間したままであり、検出可能なシグナルは発生しにくい。
【００４６】
【図４】図４は、ＩＧ１としてＣＣケモカイン受容体５（ＣＣＲ５）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてヘマグルチニンエピトープでタグ標識されたＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）を示している。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍのマクロファージ炎症性タンパク質１β（ＭＩＰ１β）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれか一方のみ、又はＭＩＰ１β及びＡｎｇＩＩの両方によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現しているＨＥＫＦＴ２９３細胞を、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。
【００４７】
【図５】図５は、ＩＧ１としてＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ２）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてヘマグルチニンエピトープでタグ標識されたＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）を示している。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍのインターロイキン８（ＩＬ８）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれか一方のみ、又はＩＬ８及びＡｎｇＩＩの両方によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現しているＨＥＫＦＴ２９３細胞を、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。
【００４８】
【図６】図６は、ＩＧ１としてＣＸＣケモカイン受容体４（ＣＸＣＲ４）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてヘマグルチニンエピトープでタグ標識されたＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）を示している。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍの間質細胞由来因子−１α（ＳＤＦ１α）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれか一方のみ、又はＳＤＦ１α及びＡｎｇＩＩの両方によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現しているＨＥＫＦＴ２９３細胞を、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）によって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。
【００４９】
【図７】図７は、ＩＧ１としてアンジオテンシン受容体１（ＡＴ１Ｒ）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）を示している。ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれかによって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞から、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）による処理の後、ｅＢＲＥＴシグナルを測定した。
【００５０】
【図８】図８は、ＩＧ１としてアンジオテンシン受容体２（ＡＴ２Ｒ）、ＲＣ１としてＲｌｕｃ８、ＩＧ２としてβ−アレスチン（ｂａｒｒ２）、ＲＣ２としてのＶｅｎｕｓ、及びＩＧ３としてＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）を示している。ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現しているＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれかによって処理した後、３７℃におけるｅＢＲＥＴを測定した。これと並行して、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞から、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）のいずれかによる処理の後、ｅＢＲＥＴシグナルを測定した。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
略語の表記
ＡＣＥ アンジオテンシン変換酵素
ＡＩＤＳ 後天性免疫不全症候群
ＡｎｇＩ アンジオテンシンＩペプチド
ＡｎｇＩＩ アンジオテンシンＩＩペプチド
ＡｎｇＩＩＩ アンジオテンシンＩＩＩペプチド
ＡＴ１Ｒ アンジオテンシン１型受容体
ＡＴ２Ｒ アンジオテンシン２型受容体
ｂａｒｒ β−アレスチン
ＢＰ 血圧
ＢＲＥＴ 生物発光共鳴エネルギー移動
ＣＢ カンナビノイド受容体
ＣＣＬ ケモカインリガンド
ＣＣＲ ＣＣケモカイン受容体
ＣＸＣＲ ＣＸＣケモカイン受容体
ＣＳＦ 脳脊髄液
ＤＯＰ δオピオイド
ｅＢＲＥＴ 長期ＢＲＥＴ：長時間にわたって監視されたＢＲＥＴ
ＥＣＦＰ オワンクラゲ（Ａｅｑｕｏｒｅａ ｖｉｃｔｏｒｉａ）緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）の変異体である強化シアン蛍光タンパク質
ＥＧＦＰ 強化緑色蛍光タンパク質が、野生型ＧＦＰの赤方に偏移した変異体
ＥＹＦＰ 強化黄色蛍光タンパク質
ＦＲＥＴ 蛍光共鳴エネルギー移動
ＧＰＣＲ Ｇタンパク質共役受容体
ＨＡ ヘマグルチニンエピトープタグ
Ｈｉｓ（６） ６個の連続したヒスチジン残基からなるヒスチジンタグ
ＨＩＶ ヒト免疫不全ウイルス
ＨＰＡ 視床下部−下垂体−副腎軸
ＩＧ 相互作用基
ＫＯＰ κオピオイド
ＬＰＯ 視床下部外側視索前野
ｍＲＦＰ１ 単量体型の赤色蛍光タンパク質
ＭＣＰ１ 単球走化性タンパク質１
ＮＰＹ ニューロペプチドＹ
ＯＲ オピオイド受容体
ＰＢＳ リン酸緩衝食塩水
ｐｃＤＮＡ３ 真核細胞発現ベクター
ＰＶＮ 室傍核
ＲＣ レポーター要素
ＲＥＭ 急速眼球運動
ＲＥＴ 共鳴エネルギー移動
Ｒｌｕｃ ウミシイタケルシフェラーゼ
Ｒｌｕｃ８ 改良ウミシイタケルシフェラーゼ
ＳＷＳ 徐波睡眠
ＴＹＦＰ トパーズ黄色蛍光タンパク質
Ｖｅｎｕｓ 改良黄色蛍光タンパク質
ＷＴ 野生型
【００５２】
（発明を実施するための最良の態様）
総論
本明細書に引用する特許及び特許出願を含むすべての刊行物は、前出又は後出によらず、その全容を本明細書に援用するものである。しかしながら、本明細書で触れる刊行物は、当該刊行物において報告され、本発明に関連して使用することが可能なプロトコール、試薬、及びベクターを説明、開示する目的で引用するものである。本明細書の一切の記載内容は、先行の発明のために本発明がこうした開示に先行するものとはならないことを容認するものとして解釈されてはならない。
【００５３】
更に、特に断らないかぎり本発明の実施においては、当業者の技術の範囲内にある従来の分子生物学、化学及び蛍光法を用いている。こうした技術は当業者には周知のものであり、文献に詳細に説明されている。例えば、蛍光法については、
Ｃｏｌｉｇａｎ， Ｄｕｎｎ， Ｐｌｏｅｇｈ， Ｓｐｅｉｃｈｅｒ ａｎｄ Ｗｉｎｇｆｉｅｌｄ “Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ” （１９９９） Ｖｏｌｕｍｅ Ｉ ａｎｄ ＩＩ （Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ．）； 及びＢａｉｌｅｙ， Ｊ．Ｅ． ａｎｄ Ｏｌｌｉｓ， Ｄ．Ｆ．， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ， ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｂｏｏｋ Ｃｏｍｐａｎｙ， ＮＹ， １９８６； Ｌａｋｏｗｉｃｚ， Ｊ． Ｒ． Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ： Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ （１９８３） を参照されたい。
【００５４】
本明細書及び付属の特許請求の範囲において用いるところの単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、特に文脈において明確に規定されないかぎりは複数のものを含む。したがって例えば、「ａ ｐｒｏｔｅｉｎ」といった場合には複数のこうしたタンパク質を含むものであり、「ａｎ ａｎａｌｙｔｅ」といった場合には１以上の検体を指す、といった要領である。
【００５５】
特に定義されないかぎりは、本明細書において用いる技術的及び科学的用語はすべて、本発明が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有するものである。本明細書において述べるものと同様又は同等のあらゆる材料及び方法を本発明を実施又は試験するうえで使用することができるが、好ましい材料及び方法については以下に述べる。
【００５６】
本明細書で述べる発明には１以上の値の範囲が含まれうる（例えば、サイズ、濃度など）。ある値の範囲は、その範囲を規定する値、及びその範囲の境界を規定する値のごく近傍の値と同じか又は実質的に同じ結果をもたらすその範囲の近傍の値を含む、その範囲内のすべての値を含むものとして理解される。
【００５７】
本明細書の全体を通じて、文脈上特に必要とされないかぎりは、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」なる単語、又は「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」若しくは「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」などのその変化形は、記載される整数又は整数群を含むことを示唆するものとして理解されるが、他の任意の整数又は整数群を除外することを示唆するものではない。
【００５８】
各論
上記の本発明の概要より明らかであるように、本発明は、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなるヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体に関する。本明細書で用いるところの「ヘテロ二量体」及び「ヘテロオリゴマー」なる用語、並びに「ヘテロ二量体の」及び「ヘテロオリゴマーの」といったその変化形は、少なくとも１個のケモカイン受容体が少なくとも１個のアンジオテンシン受容体と会合したもののことを指す。
【００５９】
本明細書で用いるところの「会合した」なる語句は、任意の公知の直接的若しくは間接的な、安定化をもたらす原子若しくは分子レベルの相互作用又はそれらの任意の組み合わせを介した結合のことを指すものであり、こうした相互作用としては、これらに限定されるものではないが、共有結合、イオン結合、水素結合、配位結合若しくは他の任意の分子結合相互作用などの結合相互作用、静電相互作用、極性若しくは疎水性相互作用、又は他の任意の古典力学的若しくは量子力学的な安定化をもたらす原子若しくは分子相互作用が挙げられる。
【００６０】
ヘテロ二量体の異なるレパートリーを有する異なる組織の例がこれまでに報告されている。例えば、よく知られたＫＯＰ受容体リガンドの類似体である６’−グアニジノアルトリンドールが、脊髄選択的な鎮痛剤としての薬効を有するＤＯＰ−ＫＯＰヘテロ二量体に選択的なアゴニストとして同定されており、ＤＯＰ−ＫＯＰヘテロ二量体が脊髄において発現されるが、脳では発現されないという結論が導かれている（Ｗａｌｄｈｏｅｒ， Ｍ． ｅｔ ａｌ． （２００５） Ａ ｈｅｔｅｒｏ−ｄｉｍｅｒ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｇｏｎｉｓｔ ｓｈｏｗｓ ｉｎ ｖｉｖｏ ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｏｆ Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｉｍｅｒｓ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １０２：９０５０−９０５５）。したがって、少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合したヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体は新規な標的薬物を代表するものである。
【００６１】
６’−グアニジノアルトリンドールの場合におけるように、既知のリガンドがヘテロ二量体受容体を活性化させる異なる能力を示す場合があり、これにより既存の分子の新たな用途が見出される可能性がある。
−ヒライレットら（Ｈｉｌａｉｒｅｔ Ｓ． ｅｔ ａｌ． ２００３ （Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７８：２３７３１−２３７３７））により、ＣＢ１アンタゴニストがＣＢ１／ＯｘＲ１のヘテロ二量体のペアによって作用することにより食欲を抑制することが最近になって示されている。
−ソマトスタチンＳＳＴＲ５受容体がドーパミンＤ２受容体と二量体化することが示されている（Ｒｏｃｈｅｖｉｌｌｅ Ｍ． ｅｔ ａｌ． （２０００） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８８：１５４−１５７）。
【００６２】
以下の例から明らかとなるように、本発明者らは本明細書においてケモカイン受容体のアンジオテンシン受容体との分子会合を特定及び特性決定したものである。
【００６３】
ケモカイン受容体のアンジオテンシン受容体との会合は、一方の受容体のリガンド（アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニスト）を含む（ただしこれらに限定されない）一方の受容体に関連した化合物を、他方の受容体に関連した疾患の治療に使用することを可能とするものであることは当業者にとっては明らかであろう。
【００６４】
したがって、本発明には、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによるアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【００６５】
「ケモカイン受容体関連化合物」なる語句は、ケモカインを含むがこれに限定されない、ケモカイン受容体と相互作用する化合物、又はケモカイン受容体と相互作用する化合物と結合する化合物のことを意味するものとして理解されるべきである。
【００６６】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アンタゴニスト又はアンタゴニストである。
【００６７】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアロステリック調節因子である。
【００６８】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン結合性物質、又はそのケモカイン結合性フラグメントである。
【００６９】
一実施形態では、前記ケモカイン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００７０】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して少なくとも１０倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して少なくとも１００倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して少なくとも１，０００倍選択的である。
【００７１】
ケモカイン結合性物質又はそのケモカイン結合性フラグメントであるケモカイン受容体関連化合物との関連において、「アンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的」なる語句は、ケモカイン結合性物質又はそのケモカイン結合性フラグメントがアンジオテンシンと比較してケモカインと選択的に結合することを意味するものとして理解されるべきである。
【００７２】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物はアンジオテンシン受容体関連化合物と同時投与される。
【００７３】
「アンジオテンシン受容体関連化合物」なる語句は、アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物、アンジオテンシンを含むがこれに限定されない、アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物と結合する化合物、又はアンジオテンシンを含むがこれに限定されない、アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物の産生を調節する化合物を意味するものとして理解されるべきである。
【００７４】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト、又はアンタゴニストである。
【００７５】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアロステリック調節因子である。
【００７６】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はアンジオテンシンの産生を調節する。
【００７７】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントである。
【００７８】
一実施形態では、前記アンジオテンシン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００７９】
本発明には更に、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【００８０】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００８１】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアロステリック調節因子である。
【００８２】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシンの産生を調節する化合物である。
【００８３】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントである。
【００８４】
一実施形態では、前記アンジオテンシン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００８５】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である。
【００８６】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して少なくとも１０倍選択的である。本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して少なくとも１００倍選択的である。本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して少なくとも１，０００倍選択的である。
【００８７】
アンジオテンシン受容体と相互作用する化合物の産生を調節するアンジオテンシン受容体関連化合物との関連において、「ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である」なる語句は、当該化合物が、ケモカインの産生を調節するよりも大きな程度でアンジオテンシン受容体と相互作用する化合物の産生を調節することを意味するものとして理解されるべきである。
【００８８】
アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントであるアンジオテンシン受容体関連化合物との関連において、「ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である」なる語句は、アンジオテンシン結合性物質又はそのアンジオテンシン結合性フラグメントが、ケモカインと比較してアンジオテンシンと選択的に結合することを意味するものとして理解されるべきである。
【００８９】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物はケモカイン受容体関連化合物と同時投与される。
【００９０】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００９１】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアロステリック調節因子である。
【００９２】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン結合性物質又はそのケモカイン受容体結合性フラグメントである。
【００９３】
一実施形態では、前記ケモカイン結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体である。
【００９４】
本発明には更に、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【００９５】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００９６】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有する。
【００９７】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【００９８】
本発明には更に、アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン受容体関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【００９９】
本発明の一形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１００】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有する。
【０１０１】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１０２】
したがって、本発明には、ケモカイン選択的結合性物質又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療法が含まれる。
【０１０３】
前記ケモカイン選択結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体であってよい。
【０１０４】
本発明には更に、アンジオテンシン選択結合性物質又はそのフラグメントの治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１０５】
前記アンジオテンシン選択結合性物質は、ヒト化抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、及び／又は抗イディオタイプ抗体を含む抗体であってよい。
【０１０６】
本発明には更に、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１０７】
本発明には更に、ケモカイン関連疾患又はアンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造における、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量の使用が含まれる。
【０１０８】
本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト、又は、アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して少なくとも１０倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、逆アゴニスト、部分アゴニスト、アンタゴニスト、又は、アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する分子は、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して少なくとも１００倍選択的である。本発明の一形態では、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、逆アゴニスト、部分アゴニスト、アンタゴニスト、又は、アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する分子は、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して少なくとも１，０００倍選択的である。
【０１０９】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１１０】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、ケモカイン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１１】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１２】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、アンジオテンシン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１３】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１４】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法が含まれる。
【０１１５】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、ケモカイン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１６】
一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１７】
一実施形態では、前記選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子は、アンジオテンシン受容体関連化合物と同時投与される。
【０１１８】
一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシンアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１１９】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストの治療上の有効量の使用を含む、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２０】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量の使用を含む、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２１】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、アンジオテンシンアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２２】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２３】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストの治療上の有効量の使用を含む、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２４】
本発明には更に、選択的なアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニスト、選択的逆アゴニスト、選択的部分アゴニスト、選択的アンタゴニスト、又は選択的アロステリック調節因子などの前記ヘテロ二量体／オリゴマーと選択的に相互作用する他の分子の治療上の有効量の使用を含む、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療用の薬剤の製造方法が含まれる。
【０１２５】
一実施形態では、前記薬剤はアンジオテンシン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記アンジオテンシン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２６】
一実施形態では、前記薬剤はケモカイン受容体関連化合物を含有する。一実施形態では、前記ケモカイン受容体関連化合物は、ケモカイン受容体アゴニスト、逆アゴニスト又はアンタゴニストである。
【０１２７】
ケモカイン関連疾患には、ケモカインの産生の増加又は減少、及び／又はケモカインに対する細胞の応答性の増加又は減少に関連する疾患が含まれる。ケモカイン関連疾患とは更に、ケモカイン受容体が異常特性を示すか、ケモカイン受容体が特定の病原体の標的となるか、あるいはケモカイン受容体が薬理学的介入の標的となるような状態のことも意味するものとして理解されるべきである。以下に列記するものは、ケモカイン関連疾患の幾つかの例を示すものである。
−ＨＩＶ感染及びＡＩＤＳ発症
−虚血再潅流傷害
−アテローム発生
−慢性閉塞性肺疾患
−喘息及びアレルギー
−腎疾患
−リウマチ性関節炎
【０１２８】
しかしながら「ケモカイン関連介入」なる語句、及び「ケモカイン関連疾患」なる語句はこれらに限定されるものではない点は理解されるべきである。
【０１２９】
公知のＣＣケモカイン受容体関連化合物としては、ＣＣケモカインリガンド１（ＣＣＬ１）、ＣＣケモカインリガンド２（ＣＣＬ２；単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド３（ＣＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−１α（ＭＩＰ−１α）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド４（ＣＣＬ４；マクロファージ炎症性タンパク質−１β（ＭＩＰ−１β）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド５（ＣＣＬ５；ＲＡＮＴＥＳとしても知られる）、ＣＣケモカインリガンド６（ＣＣＬ６）、ＣＣケモカインリガンド７（ＣＣＬ７；単球走化性タンパク質−３（ＭＣＰ−３）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド８（ＣＣＬ８；単球走化性タンパク質−２（ＭＣＰ−２）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド９（ＣＣＬ９；マクロファージ炎症性タンパク質−１γ（ＭＩＰ−１γ）又はＣＣＬ１０としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１１（ＣＣＬ１１；エオタキシン−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１２（ＣＣＬ１２；単球走化性タンパク質−５（ＭＣＰ−５）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１３（ＣＣＬ１３）、ＣＣケモカインリガンド１４（ＣＣＬ１４；ＨＣＣ−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１５（ＣＣＬ１５；マクロファージ炎症性タンパク質−５（ＭＩＰ−５）、又はＨＣＣ−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１６（ＣＣＬ１６；肝臓発現ケモカイン（ＬＥＣ）、又はモノタクチン−１（ＭＴＮ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１７（ＣＣＬ１７；胸腺及び活性化調節ケモカイン（ＴＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１８（ＣＣＬ１８；肺及び活性化調節ケモカイン（ＰＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１９（ＣＣＬ１９；マクロファージ炎症性タンパク質−３β（ＭＩＰ−３β）又はＥＢ／１リガンドケモカイン（ＥＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２０（ＣＣＬ２０；マクロファージ炎症性タンパク質−３α（ＭＩＰ−３α）、又は肝臓活性化調節ケモカイン（ＬＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２１（ＣＣＬ２１；６Ｃカイン、又はエクソダス−２、又は二次リンパ組織ケモカイン（ＳＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２２（ＣＣＬ２２）、ＣＣケモカインリガンド２３（ＣＣＬ２３；マクロファージ炎症性タンパク質−３（ＭＩＰ−３）、又は骨髄前駆細胞阻害因子−１（ＭＰＩＦ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２４（ＣＣＬ２４；骨髄前駆細胞阻害因子−２（ＭＰＩＦ−２）、又はエオタキシン−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２５（ＣＣＬ２５；胸腺発現ケモカイン（ＴＥＣＫ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２６（ＣＣＬ２６；マクロファージ炎症性タンパク質−４α（ＭＩＰ−４α）、又はエオタキシン−３、又は（ＩＭＡＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２７（ＣＣＬ２７；ＩＬ−１１Ｒ−α−ローカスケモカイン（ＩＬＣ）、又はスキンカイン、又はエスカイン、又は皮膚Ｔ細胞誘引ケモカイン（ＣＴＡＣＫ）としても知られる）、及びＣＣケモカインリガンド２８（ＣＣＬ２８；粘膜関連上皮ケモカイン（ＭＥＣ）、又はＣＣＫ１、又はＳＣＹＡ２８としても知られる）、マラビロク（ＣＣＲ５）、アプラビロク（ＣＣＲ５）、ビクリビロク（ＣＣＲ５）が挙げられる。
【０１３０】
公知のＣＸＣケモカイン受容体関連化合物としては、ＣＸＣケモカインリガンド１（ＣＸＣＬ１；好中球活性化タンパク質−３（ＮＡＰ−３）、又はメラノーマ増殖刺激活性−α（ＭＳＧＡ−α）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド２（ＣＸＣＬ２；マクロファージ炎症性タンパク質−２α（ＭＩＰ−２α）、又は増殖調節タンパク質β（Ｇｒｏ−β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド３（ＣＸＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−２β（ＭＩＰ−２β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド４（ＣＸＣＬ４；血小板因子−４（ＰＦ４）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド５（ＣＸＣＬ５；上皮由来好中球活性化ペプチド−７８（ＥＮＡ−７８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド６（ＣＸＣＬ６；顆粒球走化性タンパク質−２（ＧＣＰ−２）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド７（ＣＸＣＬ７；血小板前駆体塩基性タンパク質（ＰＰＢＰ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド８（ＣＸＣＬ８；インターロイキン−８（ＩＬ−８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド９（ＣＸＣＬ９；ＩＦＮγ誘導性モノカイン（ＭＩＧ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１０（ＣＸＣＬ１０；１０ｋＤａ ＩＦＮγ誘導性モノカイン（γ−ＩＰ１０）又はＩＰ−１０としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１１（ＣＸＣＬ１１；ＩＦＮ誘導性Ｔ細胞αケモアトラクタント（Ｉ−ＴＡＣ）、又はＩＦＮγ誘導性タンパク質−９（ＩＰ−９）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１２（ＣＸＣＬ１２；間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ−１）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１３（ＣＸＣＬ１３；Ｂリンパ球ケモアトラクタント（ＢＬＣ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１４（ＣＸＣＬ１４；乳房及び腎臓発現ケモカイン（ＢＲＡＫ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１５（ＣＸＣＬ１５；ラングカインとしても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１６（ＣＸＣＬ１６）、ＣＸＣケモカインリガンド１７（ＣＸＣＬ１７；ＶＥＧＦ同時調節ケモカイン−１（ＶＣＣ−１）、又は樹状細胞及び単球誘引ケモカイン様タンパク質（ＤＭＣ）としても知られる）が挙げられる。ＣＸ３ケモカインリガンド１（ＣＸ３ＣＬ１；フラクタルカイン又はニューロタクチンとしても知られる）。ＸＣケモカインリガンド１（ＸＣＬ１：リンフォタクチンとしても知られる）、及びＸＣケモカインリガンド２（ＸＣＬ２）。
【０１３１】
ケモカイン受容体の公知のアンタゴニストとしては、レパタキシン（Ｒｅｐｅｒｔａｘｉｎ）（ＣＸＣＲ２）、ＴＡＫ−７７９（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−２２０（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−６５２（ＣＣＲ５）、ＡＫ６９２（ＣＣＲ５）、ＣＭＰＤ１６７（ＣＣＲ５）、ＢＸ−４７１（ＣＣＲ１）、ＡＭＤ３１００（ＣＸＣＲ４）、ＡＭＤ１１０７０（ＣＸＣＲ４）、ＦＣ１３１（ＣＸＣＲ４）、ＭＬＮ３８９７（ＣＣＲ１）、ＣＰ−４８１７１５（ＣＣＲ１）、ＧＷ−８７３１４０（ＣＣＲ５）、プロパゲルマニウム（ＧＥ−１３２）（ＣＣＲ２）、レスベラトロール（ＣＣＲ２）、ＢＭＳ ＣＣＲ２２２（ＣＣＲ２）、ＲＳ １０２８９５（ＣＣＲ２）、ＲＳ ５０４３９３（ＣＣＲ２）、ＳＢ ２２５００２（ＣＸＣＲ２）及びＳＢ ２６５６１０（ＣＸＣＲ２）が挙げられる。
【０１３２】
アンジオテンシン関連疾患としては、アンジオテンシンの産生の増加又は減少、及び／又はアンジオテンシンに対する細胞の応答性の増加又は減少に関連する疾患が含まれる。以下に列記するものは、アンジオテンシンシステムの調節不全に起因するものとして提唱されているか、あるいはアンジオテンシンに基づいた介入を用いて治療することが可能と考えられる多くの状態である。
−慢性心不全、
−アテローム性動脈硬化／虚血
−高血圧
−高カリウム血症
−子癇前症
−糖尿病
−糖尿病性網膜症
−サルコイドーシス
−アルツハイマー病
【０１３３】
しかしながら、アンジオテンシン関連疾患なる語句はこれらに限定されるものではない点は理解されるべきである。
【０１３４】
公知のアンジオテンシン受容体関連化合物としては、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）及びアンジオテンシンＩＩＩ（ＡｎｇＩＩＩ）が挙げられる。公知のＡＴＲのアンタゴニストとしては、ＣＧＰ−４２１１２Ａ（ＡＴ２Ｒアンタゴニスト；シグマ社（Ｓｉｇｍａ）＃Ｃ−１６０）、エプロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｔｅｖｅｔｅｎ（登録商標）、アボット・ラボラトリーズ・ユー・エス・エー社（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＵＳＡ））、ロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｃｏｚａａｒ（登録商標）、メルク社（Ｍｅｒｋ ＆ Ｃｏ））、バルサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｄｉｏｖａｎ（登録商標）、ノバルティス社（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、テルミサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｍｉｃａｒｄｉｓ（登録商標）、ベーリンガー・インゲルハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ））、イルベサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ａｖａｐｒｏ（登録商標）、サノフィ・アベンティス社（Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ））、オルメサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｂｅｎｉｃａｒ（登録商標）、第一三共株式会社）、ＰＤ１２３３１９（ＡＴ２Ｒ；Ｔｏｃｒｉｓ）、ＺＤ−７１１５（ＡＴ１Ｒ）、サララシン（（Ｓａｒ１−Ａｌａ８）ＡｎｇＩＩ）、サルスラン（（Ｓａｒ１−Ｔｈｒ８）ＡｎｇＩＩ）、及びＤｕＰ７５３（ＡＴ１Ｒ）が挙げられる。
【０１３５】
本発明の新規なヘテロ二量体の発見は、特定の実験的観察に一定の解釈を与えるものである。
【０１３６】
ＡｎｇＩＩがラットの糸球体内皮細胞にケモカインの発現を誘導する能力が、腎疾患の発症に関して研究されている（Ｗｏｌｆ ｅｔ ａｌ． （１９９７） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ＲＡＮＴＥＳ ｉｎ ｒａｔ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ． Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｔｙｐｅ ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １００：１０４７−１０５８）。ＡｎｇＩＩ処理によって、ケモカインＲＡＮＴＥＳのｍＲＮＡ及びタンパク質の発現が増大し、これにともなって単球の動員が増大した。これらの作用は、ＡｎｇＩＩとともにＡＴ２Ｒ特異的アンタゴニストを投与した場合に抑制され、この受容体サブタイプが報告された観察結果を媒介したことを示唆している。同様に、腎細胞及び単球のＡｎｇＩＩＩ処理により、ＭＣＰ−１のｍＲＮＡ及びタンパク質の発現が増大し、培養細胞からの上清においてもマクロファージによる走化性反応が認められた（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ， Ｍ． （２０００） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩＩ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ＭＣＰ−１ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＮＦ−ｋａｐｐａＢ ａｎｄ ＡＰ−１ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ａｎｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ． Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ５７：２２８５−２２９８）。更にＡｎｇＩＩＩは、ＭＣＰ−１の発現の上昇に必要とされる転写因子ＮＦ−κＢを活性化した。ＡｎｇＩＩＩ処理の３日後、ラットは、腎臓におけるＴＮＦα及びＭＣＰ−１の発現が増大し、これもやはりＮＦ−κＢ活性及び腎組織へのマクロファージの動員の増大との相関が認められた（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ， Ｍ． （２００２） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｋｉｄｎｅｙ． Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ： １２−２２）。
【０１３７】
最後に、腎傷害の発生に対するＣＣＲ２ｂの寄与について、高血圧の塩感受性ＡｎｇＩＩモデルにおいて評価を行った（Ｅｌｍａｒａｋｂｙ， Ａ． （２００７） Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ｂ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｐｒｏｖｉｄｅｓ Ｒｅｎａｌ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ Ｓａｌｔ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ５０：１０６９−１０７６）。ＡｎｇＩＩ及び高塩濃度の食餌を投与した高感受性の動物は、更にＣＣＲ２ｂアンタゴニスト（ＲＳ１０２８９５）で処理した動物と同等の血圧を示したが、マクロファージの浸潤の増大をともなう大幅に高いＮＦ−κＢ及びＴＮＤαの発現レベルを示した。著者は、ＣＣＲ２ｂアンタゴニストは炎症反応を低減させることによって高血圧において腎臓を保護すると結論づけている。
【０１３８】
高血圧及びアテローム性動脈硬化症の発症に関し、研究者によってＣＣＲ２受容体を欠いたマウス系統（ＣＣＲ２−／−）を用いてマクロファージの浸潤の媒介におけるこの受容体の役割の評価が行われている（Ｂｕｓｈ， Ｅ． （２０００） ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ ｉｎ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ３６：３６０−３６３）。高血圧を誘導するためにＡｎｇＩＩ処理を行った７日後、ＣＣＲ２−／−マウスでは、野生型の動物と比較してマクロファージの動員が大幅に低く、血管肥大が低いことが判明した。ヒトにおけるアテローム性動脈硬化症の表現型を反映したアポリポタンパク質Ｅ欠損マウスモデルを用い、アテローム性動脈硬化症の治療におけるＡＴ１Ｒアンタゴニストの有用な作用をもたらす機序が調べられている（Ｄｏｌ， Ｆ． （２００１） Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＡＴ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ｉｒｂｅｓａｒｔａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｌｅｓｉｏｎ ｓｉｚｅ， ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ， ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ． Ｊｏｕｒｎａｌ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３８：３９５−４０５）。アンタゴニストで処理した動物では１２週後に病変部のサイズが縮小し、更にＭＣＰ−１及びＭＩＰ−１αのｍＲＮＡの発現レベルが大幅に低下していた。
【０１３９】
ケモカインの放出、ＮＦ−κβ活性、及びＡＴ１Ｒの発現に対するＡＣＥ阻害剤ラミプリラートの影響がＡｎｇＩＩ処理した単球において測定されている（Ｓｃｈｍｅｉｓｓｅｒ， Ａ． （２００４） ＡＣＥ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｌｏｗｅｒｓ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＮＦ−ｋａｐｐａＢ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＡＴ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ． Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ３２５：５３２−５４０）。ＡｎｇＩＩによって媒介されるＭＩＰ−１及びインターロイキン−８ケモカインのアップレギュレーションは、ＡＴ１Ｒ特異的アンタゴニスト（ロサルタン）によって阻害されたが、ＡＴ２Ｒアンタゴニストによっては阻害されなかった。これに対してラミプリラートはＡｎｇＩＩによって誘導されるＭＩＰ−１のアップレギュレーションも抑制し、ＮＦ−κＢ活性のダウンレギュレーション及びそれにともなうＡＴ１Ｒの発現の低下との相関が認められた。更に、ＡｎｇＩＩに応じてマクロファージの浸潤を阻害するＣＸＣＲ２アンタゴニストの能力は、アテローム性動脈硬化症との関連においても示されている（Ａｂｕ Ｎａｂａｈ， Ｙ． （２００７） ＣＸＣＲ２ ｂｌｏｃｋａｄｅ ｉｍｐａｉｒｓ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ−ｉｎｄｕｃｅｄ ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ． Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ ２７：２３７０−２３７６）。ＡｎｇＩＩの腹腔内投与によって、ＣＣ及びＣＸＣケモカインレベルが上昇した後、白血球の浸潤が認められたが、ＣＸＣＲ２アンタゴニストの存在下では抑制された。白血球の浸潤はロサルタンによっても阻害され、ＡｎｇＩＩの作用がＡＴ１Ｒによって媒介されることが示された。
【０１４０】
一実施形態において、本発明は、これらに限定されるものではないが、ＣＣケモカインリガンド１（ＣＣＬ１）、ＣＣケモカインリガンド２（ＣＣＬ２；単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド３（ＣＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−１α（ＭＩＰ−１α）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド４（ＣＣＬ４；マクロファージ炎症性タンパク質−１β（ＭＩＰ−１β）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド５（ＣＣＬ５；ＲＡＮＴＥＳとしても知られる）、ＣＣケモカインリガンド６（ＣＣＬ６）、ＣＣケモカインリガンド７（ＣＣＬ７；単球走化性タンパク質−３（ＭＣＰ−３）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド８（ＣＣＬ８；単球走化性タンパク質−２（ＭＣＰ−２）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド９（ＣＣＬ９；マクロファージ炎症性タンパク質−１γ（ＭＩＰ−１γ）又はＣＣＬ１０としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１１（ＣＣＬ１１；エオタキシン−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１２（ＣＣＬ１２；単球走化性タンパク質−５（ＭＣＰ−５）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１３（ＣＣＬ１３）、ＣＣケモカインリガンド１４（ＣＣＬ１４；ＨＣＣ−１としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１５（ＣＣＬ１５；マクロファージ炎症性タンパク質−５（ＭＩＰ−５）、又はＨＣＣ−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１６（ＣＣＬ１６；肝臓発現ケモカイン（ＬＥＣ）、又はモノタクチン−１（ＭＴＮ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１７（ＣＣＬ１７；胸腺及び活性化調節ケモカイン（ＴＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１８（ＣＣＬ１８；肺及び活性化調節ケモカイン（ＰＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド１９（ＣＣＬ１９；マクロファージ炎症性タンパク質−３β（ＭＩＰ−３β）又はＥＢ／１リガンドケモカイン（ＥＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２０（ＣＣＬ２０；マクロファージ炎症性タンパク質−３α（ＭＩＰ−３α）、又は肝臓活性化調節ケモカイン（ＬＡＲＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２１（ＣＣＬ２１；６Ｃカイン、又はエクソダス−２、又は二次リンパ組織ケモカイン（ＳＬＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２２（ＣＣＬ２２）、ＣＣケモカインリガンド２３（ＣＣＬ２３；マクロファージ炎症性タンパク質−３（ＭＩＰ−３）、又は骨髄前駆細胞阻害因子−１（ＭＰＩＦ−１）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２４（ＣＣＬ２４；骨髄前駆細胞阻害因子−２（ＭＰＩＦ−２）、又はエオタキシン−２としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２５（ＣＣＬ２５；胸腺発現ケモカイン（ＴＥＣＫ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２６（ＣＣＬ２６；マクロファージ炎症性タンパク質−４α（ＭＩＰ−４α）、又はエオタキシン−３、又は（ＩＭＡＣ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２７（ＣＣＬ２７；ＩＬ−１１Ｒ−α−ローカスケモカイン（ＩＬＣ）、又はスキンカイン、又はエスカイン、又は皮膚Ｔ細胞誘引ケモカイン（ＣＴＡＣＫ）としても知られる）、ＣＣケモカインリガンド２８（ＣＣＬ２８；粘膜関連上皮ケモカイン（ＭＥＣ）、又はＣＣＫ１、又はＳＣＹＡ２８としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１（ＣＸＣＬ１；好中球活性化タンパク質−３（ＮＡＰ−３）、又はメラノーマ増殖刺激活性−α（ＭＳＧＡ−α）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド２（ＣＸＣＬ２；マクロファージ炎症性タンパク質−２α（ＭＩＰ−２α）、又は増殖調節タンパク質β（Ｇｒｏ−β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド３（ＣＸＣＬ３；マクロファージ炎症性タンパク質−２β（ＭＩＰ−２β）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド４（ＣＸＣＬ４；血小板因子−４（ＰＦ４）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド５（ＣＸＣＬ５；上皮由来好中球活性化ペプチド−７８（ＥＮＡ−７８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド６（ＣＸＣＬ６；顆粒球走化性タンパク質−２（ＧＣＰ−２）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド７（ＣＸＣＬ７；血小板前駆体塩基性タンパク質（ＰＰＢＰ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド８（ＣＸＣＬ８；インターロイキン−８（ＩＬ−８）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド９（ＣＸＣＬ９；ＩＦＮγ誘導性モノカイン（ＭＩＧ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１０（ＣＸＣＬ１０；１０ｋＤａ ＩＦＮγ誘導性モノカイン（γ−ＩＰ１０）又はＩＰ−１０としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１１（ＣＸＣＬ１１；ＩＦＮ誘導性Ｔ細胞αケモアトラクタント（Ｉ−ＴＡＣ）、又はＩＦＮγ誘導性タンパク質−９（ＩＰ−９）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１２（ＣＸＣＬ１２；間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ−１）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１３（ＣＸＣＬ１３；Ｂリンパ球ケモアトラクタント（ＢＬＣ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１４（ＣＸＣＬ１４；乳房及び腎臓発現ケモカイン（ＢＲＡＫ）としても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１５（ＣＸＣＬ１５；ラングカインとしても知られる）、ＣＸＣケモカインリガンド１６（ＣＸＣＬ１６）、ＣＸＣケモカインリガンド１７（ＣＸＣＬ１７；ＶＥＧＦ同時調節ケモカイン−１（ＶＣＣ−１）、又は樹状細胞及び単球誘引ケモカイン様タンパク質（ＤＭＣ）としても知られる）、ＣＸ３ケモカインリガンド１（ＣＸ３ＣＬ１；フラクタルカイン又はニューロタクチンとしても知られる）、ＸＣケモカインリガンド１（ＸＣＬ１：リンフォタクチンとしても知られる）、ＸＣケモカインリガンド２（ＸＣＬ２）、レパタキシン（ＣＸＣＲ２）、マラビロク（ＣＣＲ５）、アプラビロク（ＣＣＲ５）、ビクリビロク（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−７７９（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−２２０（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ−６５２（ＣＣＲ５）、ＡＫ６９２（ＣＣＲ５）、ＣＭＰＤ１６７（ＣＣＲ５）、ＢＸ−４７１（ＣＣＲ１）、ＡＭＤ３１００（ＣＸＣＲ４）、ＡＭＤ１１０７０（ＣＸＣＲ４）、ＦＣ１３１（ＣＸＣＲ４）、ＭＬＮ３８９７（ＣＣＲ１）、ＣＰ−４８１７１５（ＣＣＲ１）及びＧＷ−８７３１４０（ＣＣＲ５）、プロパゲルマニウム（ＧＥ−１３２）（ＣＣＲ２）、レスベラトロール（ＣＣＲ２）、ＢＭＳ ＣＣＲ２２２（ＣＣＲ２）、ＲＳ１０２８９５（ＣＣＲ２）、ＲＳ５０４３９３（ＣＣＲ２）、ＳＢ２２５００２（ＣＸＣＲ２）及びＳＢ２６５６１０（ＣＸＣＲ２）からなる群から選択されるケモカイン関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法を提供する。
【０１４１】
一実施形態では、本発明は、これらに限定されるものではないが、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）、アンジオテンシンＩＩＩ（ＡｎｇＩＩＩ）、ＣＧＰ−４２１１２Ａ（ＡＴ２Ｒアンタゴニスト；シグマ社（Ｓｉｇｍａ）＃Ｃ−１６０）、エプロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｔｅｖｅｔｅｎ（登録商標）、アボット・ラボラトリーズ・ユー・エス・エー社（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＵＳＡ））、ロサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｃｏｚａａｒ（登録商標）、メルク社（Ｍｅｒｋ ＆ Ｃｏ））、バルサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｄｉｏｖａｎ（登録商標）、ノバルティス社（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、テルミサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｍｉｃａｒｄｉｓ（登録商標）、ベーリンガー・インゲルハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ））、イルベサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ａｖａｐｒｏ（登録商標）、サノフィ・アベンティス社（Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ））、オルメサルタン（ＡＴ１Ｒ；市販名：Ｂｅｎｉｃａｒ（登録商標）、第一三共株式会社）、カンデサルタン（市販名：Ａｔａｃａｎｄ（登録商標）、アストラゼネカ社（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））、ＰＤ１２３３１９（ＡＴ２Ｒ；Ｔｏｃｒｉｓ）、ＺＤ−７１１５（ＡＴ１Ｒ）、サララシン（（Ｓａｒ１−Ａｌａ８）ＡｎｇＩＩ）、サルスラン（（Ｓａｒ１−Ｔｈｒ８）ＡｎｇＩＩ）、及びＤｕＰ７５３（ＡＴ１Ｒ）からなる群から選択されるアンジオテンシン関連化合物の治療上の有効量を投与することによる、ケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法を提供する。
【０１４２】
本発明には更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記ケモカイン受容体の活性と比較して前記ケモカイン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４３】
本発明には更に、アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記ケモカイン受容体の活性が調節される程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４４】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１４５】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
ケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
ケモカイン受容体活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１４６】
ケモカイン受容体の活性が調節される程度を評価する方法、及び受容体活性の変化を検出可能な検出器は当業者には周知のものである。
【０１４７】
本発明には更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記アンジオテンシン受容体の活性と比較して前記アンジオテンシン受容体の活性が調節されているか否か、及び／又はその程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記ケモカイン受容体関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４８】
本発明には更に、ケモカイン受容体関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記アンジオテンシン受容体の活性が調節される程度を評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものである方法が含まれる。
【０１４９】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１５０】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１５１】
アンジオテンシン受容体の活性が調節される程度を評価する方法、及び受容体活性の変化を検出可能な検出器は当業者には周知のものである。
【０１５２】
本発明には、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が含まれる。
【０１５３】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用した場合に、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が含まれる。
【０１５４】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１５５】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１５６】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用した場合に、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が含まれる。
【０１５７】
本発明は更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度と比較して、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する工程を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性及び／又は効力及び／又は薬効を示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法を提供する。
【０１５８】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１５９】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１６０】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は部分作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性又は部分作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６１】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６２】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１６３】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１６４】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は部分作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト又は部分アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト又は部分アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性又は部分作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６５】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６６】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１６７】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１６８】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ｂ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１６９】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１７０】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１７１】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１７２】
本発明の一態様では、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーへの逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、
ｃ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであった場合、前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１７３】
本発明の一態様では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーへの逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法が提供される。
【０１７４】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１７５】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１７６】
本発明は更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法を提供する。
【０１７７】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１７８】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１７９】
本発明は更に、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度の判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになる、方法を提供する。
【０１８０】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
前記試験化合物を動物に投与する工程を含む。
【０１８１】
一実施形態では、受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための前記方法は、
アンジオテンシン受容体及びケモカイン受容体を発現している細胞を前記試験化合物と接触させる工程と、
アンジオテンシン受容体又はケモカイン受容体の活性の変化を検出する工程と、を含む。
【０１８２】
本発明の好ましい一実施形態では、ケモカイン受容体がアンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物がケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程、並びに／若しくは、アンジオテンシン受容体がケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物がアンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程は、本出願人らによる同時係属中の国際特許出願「検出システム及びその使用」（Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｆｏｒ）（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレットとして公開）に述べられる方法によって実施される。
【０１８３】
しかしながら、説明を明確にするため、本発明の方法は、アンジオテンシン受容体がケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物がアンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程、並びに／又は、ケモカイン受容体がアンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物がケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／若しくはその程度を判定する前記工程が、本出願人らによる同時係属中の国際特許出願「検出システム及びその使用」（Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｆｏｒ）（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレットとして公開）に述べられる方法によって実施されるような方法に限定されない点は理解されるべきである。
【０１８４】
アンジオテンシン受容体がケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物がアンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定する前記工程、並びに／又は、ケモカイン受容体がアンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物がケモカイン受容体と相互作用するか否か、及び／又はその程度を判定するための代替的な方法としては、Ｇタンパク質の利用率の変化などのシグナル伝達経路との共役における変化を観察するアッセイ、リガンド結合アッセイ、Ｃａ２＋、イノシトールリン酸、環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）、細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）及び／又は分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を監視するアッセイなどのシグナリングアッセイ、受容体トラフィッキングアッセイ、βアレスチン移行アッセイ、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、並びに受容体のヘテロ二量体化にともなう受容体の機能の変化を検出することが可能な他の任意のアッセイが挙げられる。
【０１８５】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、及び／又はアンタゴニスト、及び／又は逆アゴニストが含まれる。
【０１８６】
本発明には、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、及び／又は選択的アンタゴニスト、及び／又は選択的逆アゴニスト、及び／又は選択的アロステリック調節因子が含まれる。
【０１８７】
本発明には、ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方が過剰発現している細胞、又は細胞の画分が含まれる。
【０１８８】
本発明には、ケモカイン受容体が過剰発現し、アンジオテンシン受容体が内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が含まれる。
【０１８９】
本発明には、アンジオテンシン受容体が過剰発現し、ケモカイン受容体が内因的に発現している細胞、又は細胞の画分が含まれる。
【０１９０】
本明細書の全体を通じて、文脈上特に必要とされないかぎり、「細胞の画分」なる語句には、これに限定されるものではないが、細胞膜の調製物が含まれる。当業者によれば理解されるように、細胞膜調製物は結合アッセイにおいて有用であり、あるいは抗体治療を含む抗体を誘導する抗原として有用である。
【０１９１】
本発明には、ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方が過剰発現している細胞が含まれる。
【０１９２】
本発明には、ケモカイン受容体が過剰発現し、アンジオテンシン受容体が内因的に発現している細胞が含まれる。
【０１９３】
本発明には、アンジオテンシン受容体が過剰発現し、ケモカイン受容体が内因的に発現している細胞が含まれる。
【０１９４】
本明細書において受容体との関連で用いる「過剰発現している」なる語句は、自然の発現レベルと比較した場合の、細胞内の受容体の異常な発現レベルのことを指す。これには、生理学的範囲に含まれると考えられる発現レベルであるが、その受容体を通常は発現しない細胞において発現されるものが含まれる。これには、生理学的範囲に含まれると考えられる発現レベルであるが、他のタンパク質との融合又は免疫標識の付加などの任意の方法によって改変された受容体を通常は発現しない細胞において発現されるものも含まれる。受容体を過剰発現している細胞は、当該技術分野では周知の標準的なアッセイ法によって特定することができる。
【０１９５】
本明細書において用いるところの「患者」なる用語は、１以上のアンジオテンシン関連疾患又はケモカイン関連疾患を罹患している可能性のあるあらゆる動物のことを指す。最も好ましくは、動物は哺乳動物である。この用語は、例えば、ヒト、家畜（すなわちウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、及びブタ）、家庭のペット（すなわちネコ及びイヌ）などを含むものとして理解される。
【０１９６】
本明細書において用いるところの「治療上の有効量」なる語句は、アンジオテンシン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子とアンジオテンシン受容体との、又はケモカイン受容体のアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子とケモカイン受容体との、又はアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに特異的なアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子とアンジオテンシン受容体／ケモカイン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーとの相互作用にともなう生物学的活性を調節するうえで充分な量のことを指す。
【０１９７】
これらに限定されるものではないがケモカインのアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子などのケモカイン受容体関連化合物、及びこれらに限定されるものではないがアンジオテンシンのアゴニスト、逆アゴニスト、アンタゴニスト又はアロステリック調節因子などのアンジオテンシン受容体関連化合物の両方が組み合わせて投与される本明細書の態様との関連において、ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量とアンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量とを合わせた量は、ケモカイン受容体関連化合物が単独で投与される場合の治療上の有効量よりも低くなりうる。すなわち、ケモカイン受容体関連化合物及びアンジオテンシン受容体関連化合物を組み合わせて投与することによって、いずれか一方の治療上の用量よりも少ない用量で所定の治療効果を生じうるものである。
【０１９８】
異なる態様における本発明の薬剤は注射によって投与するか、又は経口、経肺、経鼻若しくは他の任意の投与形態用に調製することができる。薬剤は例えば、静脈内投与、皮下投与、筋内投与、眼窩内投与、眼内投与、心室内投与、頭蓋内投与、関節嚢内投与、髄腔内投与、大槽内投与、腹腔内投与、口腔内投与、直腸投与、膣内投与、鼻腔内投与又はエアロゾール投与によって投与されることが好ましい。
【０１９９】
一態様では、投与方法は、薬剤が調製された形態に少なくとも適したものである。一態様では、最も効果的な反応が得られる投与方法は経験的に決定されるものであり、後述する投与手段は例として与えられるものであって本発明の組成物の投与方法をいかなる意味においても限定するものではない。上記の製剤はいずれも医薬品業界では一般的に用いられているものであり、適当な資格を有する医師には一般的に知られているものである。
【０２００】
特定の態様では、本発明の薬剤は、薬学的に許容される無害な賦形剤及び担体を含んでよく、皮下注射、静脈内注射及び腹腔内注射などの任意の非経口的方法によって投与することができる。更に、本製剤は場合に応じて１以上のアジュバントを含んでもよい。
【０２０１】
注射用途に適した薬剤の剤形には、場合に応じて、滅菌注射溶液又は分散液の即時調製用の滅菌水溶液（水溶性の場合）又は分散液及び滅菌粉末が含まれる。また、特定の実施形態では、細胞膜を通過する輸送を助けるために本発明の化合物をリポソームに封入して注射溶液として投与してもよい。これに代えるかあるいはこれに加えて、こうした製剤は、細胞膜を通過する輸送を促進するために自己組織化型の小孔構造の成分を含む。異なる態様において、担体は、例えば、水、エタノール、多価アルコール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、これらの適当な混合物及び植物油を含む溶媒又は分散媒である。例えば、これらに限定されるものではないが、レシチンなどのコーティングの使用により、分散液の場合には必要な粒径の維持により、また、界面活性剤の使用により、適切な流動性を維持する。特定の態様では、組成物中に例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンなどの吸収を遅らせる物質を使用することによって注射組成物を長期にわたって吸収させる。
【０２０２】
滅菌注射溶液は、必要な量の活性化合物を適当な溶媒に、必要に応じて上記に示した各種の他の成分とともに加えてから、フィルター滅菌することによって調製される。一般的に、分散液は、各種の滅菌活性成分を、ベースとなる分散媒及び上記に示したものから選ばれた必要な他の成分を含んだ滅菌溶媒に加えることによって調製される。滅菌注射溶液の調製用の滅菌粉末の場合では、特定の態様における調製法には、これに限定されるものではないが、予め滅菌フィルター処理した溶液から活性成分及び任意の更なる所望の成分の粉末を生成する真空乾燥法及び凍結乾燥法が含まれる。
【０２０３】
本明細書における使用が考えられるものとしては、参照によって本明細書に援用するＭａｒｔｉｎ， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （１８ｔｈ Ｅｄ． （１９９０ Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ． Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ １８０４２） ａｔ Ｃｈａｐｔｅｒ ８９）に一般的に述べられる経口固体剤形がある。固体剤形としては、錠剤、カプセル剤、丸剤、トローチ剤若しくはロゼンジ剤、カシェ剤、又はペレット剤が挙げられる。また、リポソーム又はプロテイノイドによる封入を用いて（例えば、米国特許第４，９２５，６７３号に報告されるプロテイノイドマイクロスフェアのように）本発明の組成物を製剤化することもできる。リポソームによる封入を用い、こうしたリポソームを各種のポリマーによって誘導体化することができる（例えば、米国特許第５，０１３，５５６号）。治療薬において使用することが可能な固体剤形についての記載が、参照によって本明細書に援用するＭａｒｓｈａｌｌ， Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ， Ｃｈａｐｔｅｒ １０， Ｂａｎｋｅｒ ａｎｄ Ｒｈｏｄｅｓ ｅｄ．， （１９７９）に示されている。一般的にこうした製剤は、本発明の一部として述べられる化合物（又はその化学的に修飾された形態）及び、胃内の環境に対する保護を与え、腸内で生物学的活性物質を放出させる不活性成分を含む。
【０２０４】
本発明のケモカイン受容体関連化合物又はアンジオテンシン受容体関連化合物の放出部位は、胃、小腸（十二指腸、空腸、又は回腸）、又は大腸でありうる。当業者であれば、胃の中では溶解せずに、十二指腸又は腸内の他の部位で物質を放出する製剤を入手可能である。一態様では、こうした放出において、組成物を保護するか、あるいは腸などの胃内環境を超えた部位において化合物を放出することによって胃内環境の悪影響を回避する。
【０２０５】
胃からの保護を完全なものとするには、少なくともｐＨ５．０で不透過性のコーティングが用いられる。腸溶コーティングとして用いられるより一般的な不活性成分の例としては、酢酸トリメリット酸セルロース（ＣＡＴ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ５０、ＨＰＭＣＰ５５、ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ３０Ｄ、Ａｑｕａｔｅｒｉｃ、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｓ、及びセラックがある。これらのコーティングは混合フィルムとして使用することもできる。
【０２０６】
胃に対する保護を目的としたものではないコーティング又はコーティングの混合物を錠剤に用いることもできる。こうしたコーティングとしては、これらに限定されるものではないが、糖衣、又は錠剤を飲み込みやすくするコーティングが挙げられる。代表的なカプセル剤は、乾燥治療薬（すなわち粉末）の投与用のハードシェル（ゼラチンなど）からなるものであり、液体の剤形ではソフトゼラチンシェルを使用することもできる。特定の態様におけるカシェ剤のシェル材料は、厚いデンプン又は他の可食紙である。丸剤、ロゼンジ剤、成形錠剤又は粉薬錠剤では、これに限定されるものではないが湿式塊化法（ｍｏｉｓｔ ｍａｓｓｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）の使用も考えられる。
【０２０７】
特定の態様では、治療薬を粒径約１ｍｍの顆粒又はペレットの形態で微細な多重粒子として製剤中に含有させる。特定の態様では、カプセル投与用の材料の製剤は、粉末、軽く圧縮したプラグ、又は更には錠剤である。一態様では、治療薬は圧縮によって調製することができる。
【０２０８】
場合に応じて着色料及び香味料をすべて添加する。例えば、化合物を製剤化（これらに限定されるものではないが、リポソーム又はマイクロスフェアへの封入などにより）した後、着色料及び香味料を含んだ冷蔵飲料などの食品に更に含有させることができる。
【０２０９】
一態様では、治療薬の体積を不活性物質によって希釈又は増大させる。こうした希釈剤としては、炭水化物、特にマンニトール、α−ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾デキストリン類及びデンプンが挙げられる。場合に応じて、三リン酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、炭酸マグネシウム及び塩化ナトリウムなどの特定の無機塩類を充填剤として使用することもできる。市販の希釈剤としてはＦａｓｔ−Ｆｌｏ、Ｅｍｄｅｘ、ＳＴＡ−Ｒｘ１５００、Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ及びＡｖｉｃｅｌｌがある。
【０２１０】
他の実施形態では、治療薬の製剤に崩壊剤を添加して固体剤形とする。崩壊剤として用いられる材料としては、これらに限定されるものではないが、市販のデンプンベースの崩壊剤であるＥｘｐｌｏｔａｂなどのデンプンが挙げられる。グリコール酸デンプンナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン（ｕｌｔｒａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ）、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸カルボキシメチルセルロース、天然スポンジ及びベントナイトの使用も考えられる。崩壊剤の別の形態として、不溶性カチオン交換樹脂がある。場合に応じて粉末化したガムを崩壊剤として、また結合剤として用いるが、こうした粉末化ガムとしてはこれらに限定されるものではないが、寒天、カラヤガム又はトラガカントガムなどの粉末化ガムが挙げられる。アルギン酸及びそのナトリウム塩も崩壊剤として有用である。
【０２１１】
治療化合物を互いに結着して硬質の錠剤を形成するための結合剤の使用も考えられ、これらに限定されるものではないが、アカシアガム、トラガカントガム、デンプン及びゼラチンなどの天然物由来の材料が挙げられる。他の結合剤としては、これらに限定されるものではないが、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）及びカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）が挙げられる。治療薬を造粒するためにアルコール溶液中にポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）及びヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を使用することも考えられる。
【０２１２】
製剤化プロセスの際のくっつきを防止するために場合に応じて減摩剤を治療薬の製剤に添加する。場合に応じて治療薬と金型壁との間に層として潤滑剤を用いるが、こうした潤滑剤としては、これらに限定されるものではないが、マグネシウム塩及びカルシウム塩を含むステアリン酸、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、流動パラフィン、植物油及び蝋などが挙げられる。代表的な可溶性潤滑剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、分子量の異なるポリエチレングリコール、Ｃａｒｂｏｗａｘ４０００及び６０００が挙げられる。
【０２１３】
場合に応じて、製剤化の際の化合物の流動性を向上させ、圧縮時の再配置を助けるための滑剤を添加する。こうした滑剤としては、これらに限定されるものではないが、デンプン、デンプン、タルク、焼成シリカ及び水和シリコアルミネートが挙げられる。
【０２１４】
水性環境中への治療薬の溶解を助けるため、特定の実施形態では湿潤剤として界面活性剤を添加する。界面活性剤の例としては、これらに限定されるものではないが、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム及びスルホン酸ジオクチルナトリウムなどのアニオン性洗剤が挙げられる。場合に応じてカチオン性界面活性剤が用いられるが、こうしたカチオン性界面活性剤としては、これらに限定されるものではないが、塩化ベンザルコニウム又は塩化ベンゼトニウムが挙げられる。製剤中で界面活性剤としての使用が考えられる潜在的な非イオン性洗剤を列記すると、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０及びポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、モノステアリン酸グリセリン、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５及びポリソルベート８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース並びにカルボキシメチルセルロースがある。これらの界面活性剤が使用される場合、化合物の製剤中に単独で、又は異なる比の混合物として添加される。
【０２１５】
化合物の吸収を助ける可能性のある添加剤の例としては、これらに限定されるものではないが、オレイン酸、リノール酸、及びリノレン酸などの脂肪酸がある。
【０２１６】
徐放性製剤の使用も考えられる。特定の態様では、拡散又は滲出機構による放出を可能とする不活性基質（ガム類）に化合物を取り込ませる。特定の態様では、徐々に溶解する基質を製剤中に取り込ませてもよい。この治療薬の別の徐放形態として、Ｏｒｏｓ治療システム（アルザ社（Ａｌｚａ Ｃｏｒｐ．））に基づいた方法があるが、これは、水を流入させ、薬物を１個の小開口部から浸透圧効果によって押し出すような半透膜に薬物を封入するというものである。腸溶コーティングのなかには徐放効果を有するものもある。
【０２１７】
他の態様では、最適なフィルムコーティングを与えるために材料の混合物を用いる。フィルムコーティングは、これらに限定されるものではないが、例えば、パンコーター若しくは流動床中、又は圧縮コーティングによって行われる。
【０２１８】
本明細書においては、化合物の肺投与も考えられる。こうした態様では化合物は吸入によって哺乳動物の肺に投与され、肺の上皮内層を通過して血流に入る。
【０２１９】
本発明の実施においては、これらに限定されるものではないが、ネブライザー、定量吸入器、及び粉剤吸入器などのいずれも当業者にはよく知られた治療薬製品の肺投与用に設計された様々な機械的装置の使用が考えられる。
【０２２０】
本発明の実施に適した市販の装置の幾つかの具体例としては、これらに限定されるものではないが、例えば、マリンクロット社（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ， Ｉｎｃ．）（ミズーリ州セントルイス）の製造するＵｌｔｒａｖｅｎｔネブライザー、マルクエスト・メディカル・プロダクツ社（Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）（コロラド州イングルウッド）の製造するＡｃｏｒｎＩＩネブライザー、グラクソ社（Ｇｌａｘｏ Ｉｎｃ．）（ノースカロライナ州リサーチトライアングルパーク）の製造するＶｅｎｔｏｌｉｎ定量吸入器、及び、ファイソンズ社（Ｆｉｓｏｎｓ Ｃｏｒｐ．）（マサチューセッツ州ベッドフォード）の製造するＳｐｉｎｈａｌｅｒ粉剤吸入器がある。
【０２２１】
こうした装置はいずれも、化合物の投薬に適した製剤の使用を必要とする。一般的に各製剤は使用される装置の種類に固有のものであり、治療に有用な通常の希釈剤、アジュバント及び／又は担体以外に適切な推進材料を使用する。リポソーム、マイクロカプセル若しくはマイクロスフェア、包接複合体、又は他の種類の担体の使用も考えられる。
【０２２２】
場合に応じて、噴霧式又は超音波式を問わず、ネブライザーとの使用に適した製剤には化合物を水に懸濁したものからなる。一態様では、こうした製剤は、緩衝剤及び単糖（例えば、タンパク質の安定化及び浸透圧の調節のため）を更に含む。一実施形態では、ネブライザー製剤は、エアロゾールを形成する際に溶液の霧化によって引き起こされる表面で誘発される化合物の凝集を低減又は防止するための界面活性剤を更に含む。
【０２２３】
一態様では、定量吸入装置と使用するための製剤は、界面活性剤によって推進剤中に懸濁された化合物を含有する微粉末からなる。推進剤は、これらに限定されるものではないが、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール及び１，１，１，２−テトラフルオロエタンなどの、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン若しくは炭化水素、又はこれらの組み合わせなどのこの目的で使用される任意の従来の材料である。好適な界面活性剤としては、これらに限定されるものではないが、トリオレイン酸ソルビタン及び大豆レシチンが挙げられる。特定の態様では、界面活性剤としてオレイン酸の使用も考えられる。
【０２２４】
粉剤吸入装置から投薬するための製剤は、化合物を含有する微細な乾燥粉末からなるものであり、場合により、これらに限定されるものではないがラクトース、ソルビトール、スクロース、又はマンニトールなどの増量剤を、装置からの粉末の分散を助ける量、例えば、製剤の５０重量％〜９０重量％の量で含む。特定の実施形態では、化合物は、肺末梢部に最も効果的に投与されるように平均粒径が１０ミクロン未満、最も好ましくは０．５ミクロン〜５ミクロンである粒子状に調製される。
【０２２５】
化合物の鼻腔内投与も考えられる。鼻腔内投与は、肺内に治療薬製品を蓄積させる必要なくして治療薬製品を鼻腔に投与した直後に血流にタンパク質を通過させることができる。鼻腔内投与用の製剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、デキストラン又はシクロデキストランを含むものが挙げられる。
【０２２６】
特定の態様では、本発明の薬剤は、単回投与スケジュール又は複数回投与スケジュールで投与される点は認識されるであろう。複数回投与スケジュールとは、例えば、１回〜１０回の別々の投与による最初の投与期間の後、場合に応じて治療効果を維持又は強化するうえで必要な間隔で他の用量を引き続き投与するというものである。この投与計画は、患者のニーズ及び医師の判断に少なくとも一部基づいて決定される。
【０２２７】
本発明を以下の非限定的な実施例を参照してあくまで参考として以下により詳しく説明する。しかしながら、以下の実施例はあくまで説明的なものとして理解されるべきものであり、上記に述べた本発明の一般性をいかなる意味においても限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０２２８】
一般的方法
図１〜３を参照して簡単に述べると、２種類の受容体（ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体）の形で相互作用基（ＩＧ）が与えられる。２種類のうちの一方はレポーター要素（ＲＣ）に結合させられる（ＩＧ１−ＲＣ１，ＩＧ３）。第２のＩＧ（ＩＧ２−ＲＣ２）は、リガンドの結合時に受容体と相互作用する分子（例えば、β−アレスチン又はその突然変異体）から誘導される。検出システムは、ケモカイン受容体−アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体の形成を検出するばかりでなく、リガンド又は薬物が受容体ヘテロ二量体においてアゴニスト、部分アゴニスト、アンタゴニスト、逆アゴニスト又は部分逆アゴニストのいずれとして作用するかを区別することができる。
【０２２９】
ＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を約６３０，０００細胞／ウェルの密度で６穴プレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２下で１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ；ギブコ社（Ｇｉｂｃｏ））を添加した完全培地（０．３ｍｇ／ｍｌのグルタミン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン及び１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（ギブコ社（Ｇｉｂｃｏ））を含有するＤＭＥＭ）中で維持した。ＧｅｎｅＪｕｉｃｅ（ノバジェン社（Ｎｏｖａｇｅｎ））を製造者の指示にしたがって用い、播種２４時間後に一過性トランスフェクションを行った。トランスフェクションの２４時間後、細胞をＰＢＳで洗い、０．０５％トリプシン／０．５３ｍＭ ＥＤＴＡを用いて剥離させ、５％ＦＣＳを含む、ＨＥＰＥＳにて緩衝したフェノールレッドを含まない完全培地中に再懸濁し、ポリ−Ｌ−リシンでコーティングした白色の９６穴マイクロプレート（ヌンク社（Ｎｕｎｃ））に加えた。トランスフェクションの４８時間後、細胞を、３７℃、５％ＣＯ２下で最終濃度３０μＭのＥｎｄｕＲｅｎ（登録商標）（プロメガ社（Ｐｒｏｍｅｇａ））と予めインキュベートしてからｅＢＲＥＴアッセイを行った。Ｗａｌｌａｃ１４２０ソフトウェア（パーキン・エルマー社（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ））を用いたＶｉｃｔｏｒ Ｌｉｇｈｔプレートリーダーを使用して３７℃でＢＲＥＴ測定値を測定した。次に、フィルター処理した発光量を「供与体波長範囲（４００ｎｍ〜４７５ｎｍ）」及び「受容体波長範囲（５２０ｎｍ〜５４０ｎｍ）」のそれぞれにおいて２秒間測定した。
【０２３０】
相互作用するタンパク質間で観測されたＢＲＥＴシグナルは、バックグラウンドＢＲＥＴ比を差し引くことによって正規化される。これは、次の２つの方法のいずれかによって行うことができる（Ｐｆｌｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌ １８：１６６４−１６７０； Ｐｆｌｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｎａｔ Ｐｒｏｔｏｃ １：３３６−３４４）： １）。すなわち、１）ドナー構築体のみを含む細胞試料について４００ｎｍ〜４７５ｎｍの発光量に対する５２０ｎｍ〜５４０ｎｍの発光量の比を、互いに相互作用する受容体と供与体の融合タンパク質を含む試料の同様の比から差し引くか、２）溶媒で処理した細胞試料について４００ｎｍ〜４７５ｎｍの発光量に対する５２０ｎｍ〜５４０ｎｍの発光量の比を、リガンドで処理した同じ細胞試料の第２のアリコートの同様の比から差し引く。以下の実施例では第２の計算法を用い、シグナルは「リガンド誘導ＢＲＥＴ比」として述べる。
【実施例１】
【０２３１】
実施例１ ＣＣＲ５−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２３２】
ここで図４を参照すると、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍのマクロファージ炎症性タンパク質１β（ＭＩＰ１β）若しくは１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方のみ、又はＭＩＰ１β及びＡｎｇＩＩの両方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２３３】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＭＩＰ１β処理した場合には、約０．０８のピークに達するｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞のＡｎｇＩＩ処理後にも観測された。このシグナルは約０．０４に達した。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＭＩＰ１β及びＡｎｇＩＩの両方で処理した場合には約０．１７のピークシグナルが生じ、これはＭＩＰ１β又はＡｎｇＩＩ単独の添加後に観測されたシグナルよりも大幅に高かった。
【０２３４】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、ＣＣケモカイン受容体５（ＣＣＲ５）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ヘマグルチニンエピトープタグ標識ＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＡｎｇＩＩ）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２３５】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２３６】
本実施例はまた、ＩＧ１リガンド（ＭＩＰ１β）及びＩＧ３リガンド（ＡｎｇＩＩ；調節因子）の組み合わせによる処理では、これらを加え合わせた効果よりも効果が高くなることを示している。このような相加効果よりも高い効果は、ＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合に加えてＩＧ１−ＩＧ２が会合する結果、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、このことはケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す根拠を与える。理論によって束縛されることを望むものではないが、このような相加効果よりも高い効果は、恐らくはＲＣ１とＲＣ２が更に近接することを可能とするか、あるいはＲＣ１とＲＣ２とのより有利な相対的配向を可能とするような、シグナル発生により有利にはたらく活性ＩＧコンホメーション（アゴニストに結合したコンホメーション）にも一部起因しているものと考えられる。
【０２３７】
本実施例はまた、ヘマグルチニン（ＨＡ）エピトープタグを付加することなどによってＩＧ３をタグ標識することができるが、こうしたタグはレポーター要素を構成するものではなく、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するシグナルを妨害したり、かつ／又はこうしたシグナルに寄与するものではないことを示している。このようなタグ標識は、ＩＧ３の相対的な発現レベルなどの更なる情報の確認を可能とするものである。
【実施例２】
【０２３８】
実施例２ ＣＸＣＲ２−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２３９】
次に図５を参照すると、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍのインターロイキン８（ＩＬ８）若しくは１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方のみ、又はＩＬ８及びＡｎｇＩＩの両方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２４０】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＩＬ８処理した場合には、約０．１０のピークに達するｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞のＡｎｇＩＩ処理後にも観測された。このシグナルは約０．０９に達した。ＣＸＣＲ２／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＩＬ８及びＡｎｇＩＩの両方で処理した場合には約０．１９のピークシグナルを生じ、これはＩＬ８又はＡｎｇＩＩ単独の添加後に観測されたシグナルよりも大幅に高かった。
【０２４１】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、ＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ２）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ヘマグルチニンエピトープタグ標識ＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＡｎｇＩＩ）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２４２】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２４３】
本実施例はまた、ＩＧ１リガンド（ＩＬ８）及びＩＧ３リガンド（ＡｎｇＩＩ；調節因子）の組み合わせによる処理では、これらを加え合わせた効果が生ずることを示している。このような相加的効果は、ＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合に加えてＩＧ１−ＩＧ２が会合する結果、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、このことはケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す根拠を与える。理論によって束縛されることを望むものではないが、このような相加的効果は、ＩＧ１リガンドがＩＧ３に対するアロステリック効果を介してＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する調節因子として作用していることにも一部起因していると考えられる。更に、この相加的効果は、恐らくはＲＣ１とＲＣ２が更に近接することを可能とするか、あるいはＲＣ１とＲＣ２とのより有利な相対的配向を可能とするような、シグナル発生により有利にはたらく活性ＩＧコンホメーション（アゴニストに結合したコンホメーション）にも一部起因しているものと考えられる。
【０２４４】
本実施例はまた、ヘマグルチニン（ＨＡ）エピトープタグを付加することなどによってＩＧ３をタグ標識することができるが、こうしたタグはレポーター要素を構成するものではなく、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するシグナルを妨害したり、かつ／又はこうしたシグナルに寄与するものではないことを示している。このようなタグ標識は、ＩＧ３の相対的な発現レベルなどの更なる情報の確認を可能とするものである。
【実施例３】
【０２４５】
実施例３ ＣＸＣＲ４−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２４６】
次に図６を参照すると、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＨＡ−ＡＴ１Ｒとともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの間質細胞由来因子−１（ＳＤＦ１α）若しくは１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方のみ、又はＳＤＦ１α及びＡｎｇＩＩの両方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２４７】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＳＤＦ１α処理した場合には、約０．０１のピークに達する一過性のｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞のＡｎｇＩＩ処理後にも観測された。このシグナルは約０．０６に達した。ＣＸＣＲ４／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＨＡ−ＡＴ１Ｒを同時発現している細胞をＳＤＦ１α及びＡｎｇＩＩの両方で処理した場合には約０．０８のピークシグナルを生じ、これはＳＤＦ１α又はＡｎｇＩＩ単独の添加後に観測されたシグナルよりも大幅に高かった。
【０２４８】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、ＣＸＣケモカイン受容体２（ＣＸＣＲ４）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ヘマグルチニンエピトープタグ標識ＡＴ１Ｒ（ＨＡ−ＡＴ１Ｒ）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＡｎｇＩＩ）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２４９】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２５０】
本実施例はまた、ＩＧ１リガンド（ＳＤＦ１α）及びＩＧ３リガンド（ＡｎｇＩＩ；調節因子）の組み合わせによる処理では、これらを加え合わせた効果よりも効果が高くなることを示している。このような、相加効果よりも高い効果は、ＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合に加えてＩＧ１−ＩＧ２が会合する結果、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、このことはケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す根拠を与える。理論によって束縛されることを望むものではないが、このような相加効果よりも高い効果は、ＩＧ１リガンドがＩＧ３に対するアロステリック効果を介してＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する調節因子として作用していることにも一部起因していると考えられる。更に、このような相加効果よりも高い効果は、恐らくはＲＣ１とＲＣ２が更に近接することを可能とするか、あるいはＲＣ１とＲＣ２とのより有利な相対的配向を可能とするような、シグナル発生により有利にはたらく活性ＩＧコンホメーション（アゴニストに結合したコンホメーション）にも一部起因しているものと考えられる。
【０２５１】
本実施例はまた、ヘマグルチニン（ＨＡ）エピトープタグを付加することなどによってＩＧ３をタグ標識することができるが、こうしたタグはレポーター要素を構成するものではなく、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するシグナルを妨害したり、かつ／又はこうしたシグナルに寄与するものではないことを示している。このようなタグ標識は、ＩＧ３の相対的な発現レベルなどの更なる情報の確認を可能とするものである。
【実施例４】
【０２５２】
実施例４ ＣＣＲ２−ＡＴ１Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２５３】
次に図７を参照すると、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２５４】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＭＣＰ１処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、約０．０７のピークに達するｅＢＲＥＴシグナルを生じた。シグナルは、ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞のＭＣＰ１処理後にも観測された。このシグナルは約０．０５に達した。
【０２５５】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、アンジオテンシン受容体１（ＡＴ１Ｒ）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＭＣＰ１）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２５６】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【実施例５】
【０２５７】
実施例５ ＣＣＲ２−ＡＴ２Ｒヘテロ二量体を一例として用いた、ケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を示す検出可能なシグナルの測定
【０２５８】
次に図８を参照すると、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをＣＣＲ２とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。これと並行して、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに一過性に発現している細胞からは、１０−７Ｍの単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ１）又は１０−６ＭのアンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の一方による処理後にｅＢＲＥＴシグナルが測定された。
【０２５９】
リガンド処理（０分に添加）に先立って、それぞれの組み合わせについてベースラインのｅＢＲＥＴシグナルを記録した。ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＭＣＰ１処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。更に、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びｂａｒｒ２／ＶｅｎｕｓをｐｃＤＮＡ３とともに発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合にも、ＡＴ２Ｒがｂａｒｒ２と相互作用しないことと一致するリガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は認められなかった（Ｔｕｒｕ， Ｇ． ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｂｅｔａ−ａｒｒｅｓｔｉｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ＡＴ１ ａｎｄ ＡＴ２ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ． ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ５８０：４１−４５）。同様に、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合には、リガンド誘導ＢＲＥＴ比の増大は見られなかった。しかしながら、ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞のＭＣＰ１処理後にはシグナルが観測された。このシグナルは約５０分間後に約０．１６に達した。
【０２６０】
本実施例は、ＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって生じるシグナルが、アンジオテンシン受容体２（ＡＴ２Ｒ）がＩＧ１であり、Ｒｌｕｃ８がＲＣ１であり、β−アレスチン２（ｂａｒｒ２）がＩＧ２であり、ＶｅｎｕｓがＲＣ２であり、ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）がＩＧ３であるような組み合わせにおいて、調節因子（この場合ＭＣＰ１）がＩＧ３と特異的に相互作用することによってＩＧ２とＩＧ３との会合を調節する場合に特異的に検出されることを示している。
【０２６１】
本実施例は、本発明者らがケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合を特定したことを示すものである。
【０２６２】
本実施例は更に、ＩＧ１がＩＧ２と相互作用しない場合に検出可能なシグナルが発生しうることを示している。ＡＴ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８、ｂａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ及びＣＣＲ２を同時発現している細胞をＡｎｇＩＩ処理した場合に図８で観測されるシグナルが見られないことは、この物質の組み合わせをＭＣＰ１で処理した場合に観測されるシグナルがＩＧ１−ＩＧ２の会合によるものではないことを証明するものである。
【０２６３】
したがって、ＩＧ１がＩＧ２と相互作用しないことは、ＩＧ１−ＩＧ２の会合ではなくＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合の結果としてＲＣ１とＲＣ２とが近接することを示していることから、本実施例はケモカイン受容体とアンジオテンシン受容体との分子会合の更なる明確な根拠を与えるものである。このことは、シグナルがＩＧ１特異的リガンドの非存在下におけるＩＧ１とＩＧ２の非特異的会合に起因するものではないことを示す更なる根拠となるものである。
【０２６４】
更に本実施例は、シグナルがＩＧ２−ＩＧ３−ＩＧ１の会合によって発生するものであり、ＩＧ３の活性化がＩＧ１のトランス活性化を引き起こし、このＩＧ１がＩＧ２と会合することによって、ＩＧ２とＩＧ３とが会合せずにＲＣ１とＲＣ２とが近接することによって発生するものではないことを示している。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなることを特徴とするヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体。
【請求項２】
ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することを特徴とする、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法。
【請求項３】
ケモカイン受容体関連化合物が、アンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的であることを特徴とする請求項２に記載の治療方法。
【請求項４】
アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することを特徴とするケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法。
【請求項５】
アンジオテンシン受容体関連化合物が、ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である請求項４に記載の治療方法。
【請求項６】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記ケモカイン受容体の活性と比較して前記ケモカイン受容体の活性が調節されているか否か、又はその程度の少なくともいずれかを評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものであることを特徴とする方法。
【請求項７】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記アンジオテンシン受容体の活性と比較して前記アンジオテンシン受容体の活性が調節されているか否か、又はその程度の少なくともいずれかを評価する工程と、を含み、
前記調節が前記ケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものであることを特徴とする方法。
【請求項８】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかと比較して、前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性、効力、及び薬効の少なくともいずれかを示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項９】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかと比較して、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性、効力、及び薬効の少なくともいずれかを示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１０】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１１】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１２】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１３】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対する逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１４】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１５】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１６】
ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的アンタゴニスト、選択的逆アゴニスト、及び／又は選択的アロステリック調節因子。
【請求項１７】
ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方を過剰発現している細胞、又は細胞の画分。
【請求項１８】
ケモカイン受容体を過剰発現し、アンジオテンシン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分。
【請求項１９】
アンジオテンシン受容体を過剰発現し、ケモカイン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分。
【請求項１】
少なくとも１個のケモカイン受容体サブユニットが少なくとも１個のアンジオテンシン受容体サブユニットと会合してなることを特徴とするヘテロ二量体又はヘテロオリゴマー受容体。
【請求項２】
ケモカイン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することを特徴とする、アンジオテンシン関連疾患を有する患者の治療方法。
【請求項３】
ケモカイン受容体関連化合物が、アンジオテンシン受容体と比較してケモカイン受容体に対して選択的であることを特徴とする請求項２に記載の治療方法。
【請求項４】
アンジオテンシン受容体関連化合物の治療上の有効量を投与することを特徴とするケモカイン関連疾患を有する患者の治療方法。
【請求項５】
アンジオテンシン受容体関連化合物が、ケモカイン受容体と比較してアンジオテンシン受容体に対して選択的である請求項４に記載の治療方法。
【請求項６】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてアンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をケモカイン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記ケモカイン受容体の活性と比較して前記ケモカイン受容体の活性が調節されているか否か、又はその程度の少なくともいずれかを評価する工程と、を含み、
前記調節が前記アンジオテンシン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものであることを特徴とする方法。
【請求項７】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）前記試験化合物をアンジオテンシン受容体に曝露する工程と、
ｂ）前記試験化合物の非存在下における前記アンジオテンシン受容体の活性と比較して前記アンジオテンシン受容体の活性が調節されているか否か、又はその程度の少なくともいずれかを評価する工程と、を含み、
前記調節が前記ケモカイン関連疾患に対する潜在的治療活性を示すものであることを特徴とする方法。
【請求項８】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記ケモカイン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかと比較して、前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記アンジオテンシン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程を含み、
前記アンジオテンシン受容体が前記ケモカイン受容体と会合した状態で前記アンジオテンシン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性、効力、及び薬効の少なくともいずれかを示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項９】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な活性について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかと比較して、前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記試験化合物が前記ケモカイン受容体と相互作用するか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程を含み、
前記ケモカイン受容体が前記アンジオテンシン受容体と会合した状態で前記ケモカイン受容体と相互作用する場合に、より高い親和性、効力、及び薬効の少なくともいずれかを示す試験化合物が、ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１０】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用又は選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１１】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な拮抗作用、選択的な部分作動作用又は選択的な負のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体のアンタゴニスト、部分アゴニスト又は負のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い拮抗特性、部分作動特性又は負のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１２】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な逆作動作用について試験化合物をスクリーニングための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するケモカイン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１３】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対する逆作動作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）構成的な活性を有するアンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの逆アゴニストであるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの低下を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の逆アゴニストであるか否か、又はその程度を判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い逆作動特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１４】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記アンジオテンシン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記ケモカイン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とケモカイン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、及び／又はその程度を判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１５】
受容体活性の変化を検出可能な検出器を用いてケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに選択的な正のアロステリック調節作用について試験化合物をスクリーニングするための方法であって、
ａ）
ｉ）第１のレポーター要素と結合された前記ケモカイン受容体を含む第１の物質と、
ｉｉ）第２のレポーター要素と結合された相互作用基を含む第２の物質と、
ｉｉｉ）前記アンジオテンシン受容体を含む第３の物質と、
ｉｖ）前記アンジオテンシン受容体、前記ケモカイン受容体、及び／又は前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーのアゴニストと、を含むシステムであって、前記第１及び第２のレポーター要素が近接するとシグナルを発生し、調節因子が前記相互作用基とアンジオテンシン受容体との会合を調節するシステムと前記試験化合物とを接触させることによって、前記試験化合物が、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、
ｂ）前記試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかの判定結果として前記シグナルの増大を検出する工程と、更に場合により、
ｃ）前記試験化合物が、前記アンジオテンシン受容体の非存在下で前記ケモカイン受容体の、また、前記ケモカイン受容体の非存在下で前記アンジオテンシン受容体の正のアロステリック調節因子であるか否か、又はその程度の少なくともいずれかを判定する工程と、を含み、前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーと相互作用する場合に、より高い正のアロステリック調節特性を示す試験化合物が前記ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーに対して選択的であることになることを特徴とする方法。
【請求項１６】
ケモカイン受容体／アンジオテンシン受容体のヘテロ二量体／オリゴマーの選択的アゴニスト、選択的アンタゴニスト、選択的逆アゴニスト、及び／又は選択的アロステリック調節因子。
【請求項１７】
ケモカイン受容体及びアンジオテンシン受容体の両方を過剰発現している細胞、又は細胞の画分。
【請求項１８】
ケモカイン受容体を過剰発現し、アンジオテンシン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分。
【請求項１９】
アンジオテンシン受容体を過剰発現し、ケモカイン受容体を内因的に発現している細胞、又は細胞の画分。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公表番号】特表２０１２−５２１９６７（Ｐ２０１２−５２１９６７Ａ）
【公表日】平成２４年９月２０日（２０１２．９．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０１０８３（Ｐ２０１２−５０１０８３）
【出願日】平成２２年３月２６日（２０１０．３．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＡＵ２０１０／０００３５５
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１０８２３２
【国際公開日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【出願人】（５１１２３３８８７）ディメリックス バイオサイエンス ピーティーワイ リミテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年９月２０日（２０１２．９．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年３月２６日（２０１０．３．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＡＵ２０１０／０００３５５
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１０８２３２
【国際公開日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【出願人】（５１１２３３８８７）ディメリックス バイオサイエンス ピーティーワイ リミテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
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