治療剤
【課題】ウンシュウミカンの花部の抽出物は、ヒアルロン酸産生促進作用等を有することが知られている。本発明の課題は、これら以外の種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分として用いる治療剤の提供にある。
【解決手段】ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする高尿酸血症の予防または改善剤、抗骨粗鬆症剤、抗鬱・抗ストレス剤、コレステロール低下剤、血圧降下剤、皮膚外用剤、抗疲労剤、脂肪代謝抑制剤。
【解決手段】ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする高尿酸血症の予防または改善剤、抗骨粗鬆症剤、抗鬱・抗ストレス剤、コレステロール低下剤、血圧降下剤、皮膚外用剤、抗疲労剤、脂肪代謝抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウンシュウミカンの花部の抽出物は、ヒアルロン酸産生促進作用（特許文献１）等を有することが知られている。
しかしながら、ウンシュウミカンの花部の抽出物が、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、顕著な効果でもって有効であるとの見地はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０００−９６０５０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である各種治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
請求項１に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする高尿酸血症の予防または改善剤である。
請求項２に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗骨粗鬆症剤である。
請求項３に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗鬱・抗ストレス剤である。
請求項４に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とするコレステロール低下剤である。
請求項５に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする血圧降下剤である。
請求項６に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする皮膚外用剤である。
請求項７に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗疲労剤である。
請求項８に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする脂肪代謝抑制剤である。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である各種治療剤が提供される。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
以下、本発明をさらに詳しく説明する。
【０００８】
本発明で用いられるウンシュウミカンの花部とは、ミカン科ミカン属に属するウンシュウミカンCitrus unshiu (Swingle) S.Marcov. の花部である。また、花部とは、花弁、萼、おしべ、めしべ、芽、蕾等を指すが、好ましくは花弁である。
【０００９】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を調製する方法について説明する。
ウンシュウミカンの花部の抽出物を調製する前段階として、ウンシュウミカンの花部は、好ましくは、乾燥し、粉砕するのがよい。
続いてウンシュウミカンの花部は、溶剤と接触させ抽出物を得る。
【００１０】
用いる溶剤としては、例えば、水、有機溶剤、水と有機溶媒との混合液等が使用できる。有機溶媒としては例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、ブタノールに代表される低級アルコール類、、ジメチルエーテル、ジエチルエーテルに代表されるエーテル類、クロロホルム、四塩化炭素等に代表されるハロゲン化炭化水素、アセトニトリル、酢酸エチル、アセトン等が挙げられる。中でも、水、エタノール水溶液、ブタノール、酢酸エチルが好ましい。
【００１１】
得られた抽出物は、公知技術に従い、さらに精製することもできる。例えば公知の各種クロマトグラフ法を単独で、または組み合わせて採用することができる。
【００１２】
抽出時間は、抽出原料から十分に可溶性成分が抽出される時間であればよく、抽出温度などに応じて適宜設定すればよい。好ましくは３０分〜４８時間である。例えば、抽出温度が５０℃未満の場合は、６時間〜４８時間、５０℃以上の場合は、３０分〜２４時間が適当である。。
【００１３】
上記とは別に、ウンシュウミカンの花部から抽出物を得る方法として、超臨界流体抽出法が挙げられる。
超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素（笑気ガス）などが用いられ、二酸化炭素が好適である。
【００１４】
超臨界流体抽出法は、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程および目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程からなる。分離工程は、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤、吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。
【００１５】
抽出物は、必要に応じて濃縮して濃縮物としたり、凍結乾燥を行なって粉末化することもできる。
【００１６】
ウンシュウミカンの花部の抽出物の投与量は、患者の年令、体重、適応症状などによって異なるが、例えば、凍結乾燥粉末として、成人１日１〜数回、１日あたり約１ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは３ｍｇ〜１ｇ、さらに好ましくは５０ｍｇ〜１ｇ程度投与するのがよい。
【００１７】
また、ウンシュウミカンの花部の抽出物を皮膚外用剤として用いる場合は、皮膚外用剤中、凍結乾燥粉末として０．０００１〜１０質量％の割合で含まれるのが好ましい。
【００１８】
本発明の治療剤は、錠剤、ピル、カプセル、顆粒、粉末、散剤、液剤等の固形または溶液の形態（以下、製剤ともいう）に公知の方法により適宜調製することができる。即ち、本発明に有用な固形製剤または液状製剤は、従来充分に確立された公知の製剤製法を用いることにより製造される。添加剤としては、例えば賦形剤、ｐＨ調整剤、清涼化剤、懸濁化剤、希釈剤、消泡剤、粘稠剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、可塑剤または香料などが挙げられる。
【００１９】
また本発明の治療剤は、各種健康食品および機能性食品として摂取可能である。これらの例としては、各種のものをあげることができるが、健康食品および機能性食品の製造に関しては、通常用いられる、食品素材、食品添加物に加え、賦形剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、分散剤、保存剤、湿潤化剤、溶解補助剤、防腐剤、安定化材、カプセル基剤等の補助剤を用いた飲食品製剤形態で利用することができる。該補助剤の具体的な例示をすれば、乳糖、果糖、ブドウ糖、でん粉、ゼラチン、炭酸マグネシウム、合成ケイ酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、炭酸カルシウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはその塩、アラビアガム、ポリエチレングルコール、シロップ、ワセリン、グリセリン、エタノール、プロピレングリコール、クエン酸、塩化ナトリウム、亜硫酸ソーダ、リン酸ナトリウム、プルラン、カラギーナン、デキストリン、還元パラチノース、ソルビトール、キシリトール、ステビア、合成甘味料、クエン酸、アスコルビン酸、酸味料、重曹、ショ糖エステル、植物硬化油脂、塩化カリウム、サフラワー油、ミツロウ、大豆レシチン、香料等が配合できる。このような健康食品、機能性食品の製造に関しては、医薬品製剤の参考書、例えば「日本薬局方解説書（製剤総則）」（廣川書店）等を参考にすることができる。
【００２０】
上記以外にも本発明の治療剤は飲食品として摂取することができる。具体的には、納豆、厚揚げ、豆腐、こんにゃく、団子、漬物、佃煮、コロッケ、サンドイッチ、ピザ、ハンバーガー、餃子、シューマイ、サラダ等の各種総菜や、各種粉末（ビーフ、ポーク、チキン等畜産物、海老、帆立、蜆、昆布等水産物、野菜・果実類、植物、酵母、藻類等）や、プリン、クッキー、クラッカー、パン、ケーキ、チョコレート、ポテトチップス、ビスケット、ドーナツ、ゼリーなどの洋菓子、煎餅、羊羹、大福、おはぎ、その他の饅頭、カステラなどの和菓子、冷菓（飴等）、チューインガム等のパン・菓子類や、うどん、そば、きしめん等の麺類や、かまぼこ、ハム、魚肉ソーセージ等の魚肉練り製品や、ハム、ソーセージ、ハンバーグ、コーンビーフ等の畜肉製品や、塩、胡椒、みそ、しょう油、ソース、ドレッシング、マヨネーズ、ケチャップ、甘味料、辛味料等の調味類や、明石焼き、たこ焼き、もんじゃ焼き、お好み焼き、焼きそば、焼きうどん等の鉄板焼き食品や、チーズ、ハードタイプのヨーグルト等の乳製品や、油脂類・香料類（バニラ、柑橘類、かつお等）を粉末固形化したものや、粉末飲食品（インスタントコーヒー、インスタント紅ウンシュウミカン、インスタントミルク、インスタントスープ、味噌汁等）等の各種食品が挙げることができるが、これらに特に制限されない。
【００２１】
さらに本発明においては、例えば、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体等）、ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛等）、セレン、レシチン、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテイン等）、サポニン（ギムネマ酸、大豆サポニン、人参サポニン等）、脂肪酸、タンパク質（コラーゲン、エラスチン等）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖等）、リン脂質及びその誘導体（フォスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、セラミド等）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタン等）、糖アルコール、リグナン類（セサミン等）、これらを含有する動植物抽出物、根菜類（ウコン、ショウガ等）、などを併用することもできる。
【００２２】
また、ウンシュウミカンの花部の抽出物を皮膚外用剤として用いる場合は、皮膚外用剤として通常使用される公知の材料、例えば色素、香料、防腐剤、界面活性剤、顔料、抗酸化剤、保湿剤、紫外線吸収剤などを適宜配合することができる。
本発明の皮膚外用剤は、クリーム、乳液、化粧水、パック等、公知の形態で使用され得る。
【実施例】
【００２３】
以下、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。本発明の治療剤は、高尿酸血症の予防または改善剤、抗骨粗鬆症剤、抗鬱・抗ストレス剤、コレステロール低下剤、血圧降下剤、皮膚外用剤、抗疲労剤、脂肪代謝抑制剤としてきわめて有用である。また本発明の皮膚外用剤は、美白剤、にきび治療剤、育毛・養毛剤としてきわめて有用である。以下、上記各種薬効について実施例でもって説明する。
【００２４】
実施例１（高尿酸血症の改善効果）
乾燥したウンシュウミカンの花弁１ｋｇを粉砕し、これに約１０倍量の６０％エタノール水溶液（１０リットル）を加え、加熱還流下５時間抽出し、濾過し、濾液を採取した。濾液を濃縮し、さらに凍結乾燥し、ウンシュウミカンの花部（花弁）の抽出物の凍結乾燥の粉末１を得た。
【００２５】
実験方法
供試動物はWistar系ラット雌（８週令、体重約180g）を１群６匹で用いた。
試験飼料に0.75％の濃度でアデニンを加えてラットに給与し、腎臓からの尿中への尿酸排泄阻害を起こさせて高尿酸血症のモデル動物とした。
対照群は、上記の0.75％アデニン飼料のみ、薬剤投与群は、０．７５％アデニンと上記粉末１含有飼料とした。飼料は自由摂取としたが、薬剤投与群の試験飼料中の上記粉末１の濃度を、摂取量が１ｍｇ／ｋｇ体重となるように調整した。試験開始日及び24日目に血中の尿酸値を測定した。
その結果、対照群の試験開始日の血中尿酸濃度は、０．５７ｍｇ／ｍｌであり、２４日目が２．３３ｍｇ／ｍｌであったのに対し、薬剤投与群の２４日目の血中尿酸濃度は０．８２ｍｇ／ｍｌであった。
この結果から明らかなように、対照群では血中尿酸濃度が大幅に増加するのに対し、薬剤投与群ではいずれもその濃度は増加しなかった。したがって、ウンシュウミカンの花部の抽出物は、高尿酸血症の予防または改善剤として有用であることが示された。
【００２６】
実施例２（抗骨粗鬆症効果）
骨粗鬆症改善効果試験
ＳＤ系ラット（２２週齢）メスの卵巣を外科的に取り除き、骨粗鬆症のモデルラットを作成した。卵巣摘出ラットを７匹ずつ６群に分け、３５日間の試験期間中、１日置きに（計１７回）、前記実施例１の粉末１の摂取量が１回について１ｍｇ／ｋｇとなるように、生理食塩水溶解した液体を２ｍｌ経口投与した。飼料はオリエンタル酵母株式会社のマウス・ラット・ハムスター用固形飼料ＣＲＦ−１を用い、給餌および給水方法は自由摂取とした。試験期間中、各群間で、餌の摂取量に差は認められなかった。試験開始後３５日目にラットの体重を測定した後、大腿骨を取り出した。大腿骨は、接着組織および筋肉を取り除いて分析に使用した。大腿骨の体積を測定した後、エタノールで３回洗浄し、次にアセトンで３回洗浄したのち、一晩乾燥し、その後、重量を測定して大腿骨の乾燥重量を求めた。体積および乾燥重量から、骨密度（乾燥重量ｇ／体積ｍｍ3 ）を測定した。なお対照実験として、前記粉末１を含まない生理食塩水をラットに投与したこと以外は、上記実験を繰り返した例（比較例）も行なった。その結果、比較例の骨密度が１．０１１ｍｇ／ｍｍ３であったのに対し、実施例１の骨密度は１．０９９ｍｇ／ｍｍ３であった。
【００２７】
実施例３（抗鬱・抗ストレス効果）
上記実施例１の粉末１の治療効果を調べた。
マウス強制水泳試験による精神安定作用の評価
本発明の治療剤の評価は、１９７７年にPorsoltにより開発されたマウス強制水泳試験を採用した。本試験は鬱病の動物モデル実験として最も多用される方法のひとつである。本試験では、マウスをある限られたスペースの中で強制的に泳がせて「無動状態」を惹起させる。この無動状態は、ストレスを負荷された動物が水からの逃避を放棄した一種の「絶望状態」を反映するものと考えられ、ヒトにおける鬱状態、ストレス状態と関連づけられている。事実、抗鬱薬は特異的にこの状況下における無動状態の持続時間を短縮させることがわかっており、この短縮作用は臨床力価との間に有意な相関を有することが認められている。
【００２８】
本試験方法は次のとおりである。
２５℃の水を深さ１５ｃｍまで入れたプラスチック円筒中でマウスを強制水泳させる。５分間の強制水泳後、３０℃の乾燥機中で１５分間乾燥し、ホームケージに戻す。翌日マウスに試験試料を腹腔内投与して、その１時間後に再び５分間の強制水泳を課し、現れた無動状態の持続時間をストップウォッチを用いて測定する。マウスが水に浮かんで静止している状態を無動状態と判定する。無動状態持続時間については有意差検定を行い、統計学的に有意差を検定する。実験には雄のｄｄYマウスを使用し、１群６匹とする。なお、試験は全て午後１時から午後６時の間に行う。ポジティブコントロールとして抗鬱薬であるイミプラミンを用いた。
【００２９】
その結果、粉末１を３０ｍｇ／ｋｇ投与したマウスの無動状態持続時間は、１６８．４±５．７秒であった。コントロール（生理食塩水のみ）は２２０．０±２．２秒であった。ポジティブコントロール（３０ｍｇ／ｋｇ投与）のマウスの無動状態持続時間は、１７６．５±４．０秒であった。なお、粉末１を２〜３倍量使用しても、同様の結果を得た。
【００３０】
実施例４
（コレステロール低下作用）
体重２０ｇ前後のＩＣＲ系雄性マウス（１群５匹）に、高コレステロール−コール酸食餌（７１．９％標準餌、１５％ショ糖、２％食塩、１０％ココナッツオイル、０．６％コレステロール、０．２％コール酸、０．３％塩化コリン）を試験第１日目から第７日目まで給餌（自由摂取）した。試験第６日目と第７日目に、上記実施例１の粉末１の５ｍｇを蒸留水に溶解し、経口投与した。その後、２４時間の絶食を行い、試験第８日目にマウスから血液を採取し、血清を分離した。
【００３１】
また、採取した血清の一部にヘパリンを添加し沈降させ、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）としてヘパリン沈降リポタンパクを得た。血清中の総コレステロール値及びＬＤＬ中のコレステロール値を、シー・シー・アライン（Ｃ．Ｃ．Ａｌｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．）らの報告（クリニカル ケミストリイ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１９７４年、２０巻、４７０−４７５頁）に従って、測定した。
【００３２】
血清中の総コレステロール値からＬＤＬコレステロール値を引いた値を、高比重リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロール値として算出した。なお対照群は、上記粉末１を投与していない群である。
【００３３】
その結果を表１に示した。表１から明らかなように、血清中総コレステロールを低下させる明らかな作用が認められた。
【００３４】
【表１】
【００３５】
実施例５（血圧降下効果）
実施例１の粉末１を一般市販飼料（船橋農場製、船橋SP）に添加し、脳卒中易発症性高血圧自然発症ラット（SHR−SP）を用いて最高血圧値、体重の変化を比較した。対照区は、粉末１を添加しない一般試料を用いた。Ａ区を対照区、Ｂ区を本発明区とし、それぞれの飼料で５週齢の雄性SHR−SPを各区６匹ずつ７週間飼育し、12週齢に達した時の血圧値と体重の変化について調べた。表２に示すように血圧の変化においては、本発明区に有意な血圧上昇の抑制が認められた。なお、本発明区においては、１日あたりの粉末１の摂取量が、５０ｍｇ／ｋｇ体重となるように飼料中の粉末１の濃度を調整した。
【００３６】
【表２】
【００３７】
実施例６（メラニン抑制効果）
メラニンを生成する細胞として、マウス由来の培養B16メラノーマ細胞を用いてウシ胎児血清を終濃度10%になるように添加したイーグルＭＥＭ培地で培養し、該細胞を3×103cell/mlの濃度で6ウェルプレートの各ウェルに6ml播種し、5日間ＣＯ２インキュベーター内で培養後、実施例１の粉末１を添加した培地に交換し、さらに3日間同条件で培養する。細胞を洗浄後、細胞をスクレーパー処理により剥がし、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）により可溶化して475nm、260nmの吸光度を測定し、S475、S260とする。メラニン抑制率は被検試料を添加しない培地で培養した細胞の475nm、260nmにおける吸光度をC475、C260として式１により計算した。ポジティブコントロールとしてコウジ酸（Kojic acid）を用いた。
【００３８】
【数１】
【００３９】
その結果、ポジティブコントロール（培地中にコウジ酸３ｍＭ添加）のメラニン抑制率は約５６％であり、実施例１の粉末１を添加した被験試料（培地中に粉末１を５００μｇ／ｍｌ添加）のメラニン抑制率は約５５％であった。
【００４０】
実施例７
実施例１で得た粉末１を含有する下記組成のクリームを常法により調製した。
粉末１ １０重量部
グリセロールソルビタン脂肪酸エステル ６０重量部
微結晶性ワックス １０重量部
オリーブオイル ３０重量部
流動パラフィン １８０重量部
ステアリン酸マグネシウム １０重量部
プロピレングリコール ３７重量部
硫酸マグネシウム ７重量部
精製水 ６５５重量部
【００４１】
実施例８
（にきび治療効果）
乳 液：
以下に示す組成及び下記製法で乳液を調製し、にきび予防および改善効果を調べた。
【００４２】
【表３】
【００４３】
（ 製 法 ）
Ａ. 成分（１）〜（６）を加熱混合し、７０℃に保つ。
Ｂ. 成分（９）と（１１）の一部を加熱混合し、７０℃に保つ。
Ｃ. ＢにＡを加えて混合し、均一に乳化する。
Ｄ. Ｃを冷却後（１１）の残部に溶かした（７）、（８）、（１２）および（１０)に溶かした（１３）を加え、均一に混合して乳液を得た。
【００４４】
（試験方法）
被験乳液１品につき２２歳から４０歳の女性１５名をパネルとし、毎日、朝と夜の２回、洗顔後に被験乳液の適量を顔面に塗布した。１２週間塗布を行い、塗布によるにきび改善効果の有効性を、以下の３ランクで判断し、下記評価基準によって評価した。
【００４５】
（有効性ランク ）
有効 ： にきびが出来にくくなった。にきびが目立たなくなった。
やや有効： にきびがやや出来にくくなった。にきびがあまり目立たなくなった。
無 効： 使用前と変化なし。
【００４６】
その結果、パネラー全員が「有効」と評価した。
【００４７】
実施例９（養毛・育毛効果）
特許第４０４１４５１号公報に記載の実験手順に従い、粉末１の効果を検証した。
（１）マウスによる試験
Ｃ３Ｈマウス（８週齢、オス、平均体重３５ｇ）の背部皮膚（２ｃｍ×４ｃｍ）を電気バリカン及びシェーバーで刈り、翌日より実施例の試料を被験部皮膚に朝夕２回、一匹当り０．２ｍＬを二週間連用塗布した。一試料に対して動物一群１０匹使用した。塗布開始２２日目に被験部皮膚をビデオカメラに撮影し、画像解析装置にて毛刈り部及び発毛部の面積を測定した。養毛効果の判定は、下記に示す発毛率（％）を算出し、実施例の群の発毛率平均値を求めた。
発毛率（％）＝（発毛部の面積）／（毛刈り部の面積）×１００
【００４８】
（２）ヒトによる試験
男性型脱毛症患者である被験者１０名の耳上５ｃｍの位置にて、頭髪を左右２ヶ所直径５ｍｍの円形状に剃毛し、実施例の試料を左側の頭髪全体に毎日朝夕２回、約３ｍＬ塗布し、右側は何も塗布せずに、左右の比較を行った。毛成長速度の効果の判定は、試験開始後１ヶ月目に、左右の剃毛した部位の被験部毛髪２０本を抜毛し、下記式で求めた値で毛成長速度を評価した。
毛成長速度＝（左側毛髪２０本の長さの平均）／（右側毛髪２０本の長さの平均）
【００４９】
また、育毛効果、痒み防止効果、脱毛効果、ふけ防止効果の判定は、試験開始後３ヶ月目に各項に対し、右側の何も塗布していない被試部位と比較して、「産毛が剛毛化した或いは産毛が増加した」、「痒みをそれほど感じない」、「抜け毛が少なくなった」、「ふけが少なくなった」と回答した人数で示した。
【００５０】
表４に示す処方の養毛・育毛剤を常法に従って作成し、前記の諸試験を実施して評価を行った。なお、実施例１の粉末１の濃度は、表４に示されるとおりである。その結果を併せて表４に示す。
【００５１】
【表４】
【００５２】
なお本発明品の養毛・育毛剤の長期間の使用中及び使用後においても、皮膚の状態に特に異常は認められなかった。
【００５３】
実施例１０（抗疲労効果）
ＳＴＤ ＤＤＹ 雄性マウス（５週齢：各群ｎ＝３〜４）に対し、実施例１の粉末１を経口摂取させた。摂取量は、５０ｍｇ／ｋｇ体重である。摂取は、純水に実施例１の粉末１を溶解させた溶液を用いて行なった。なお、コントロール群のマウスには、純水のみを摂取させて試験を行った。
【００５４】
摂取から３０分後に、マウスを深さ８０センチの水槽に入れて、無動に至るまでの時間を計測した。各試験群のマウス（各群ｎ＝３〜４）の無動に至るまでの時間の平均値として、コントロール群は約１１２秒であったのに対し、実施例１の粉末１投与群は、約２３５秒であった。
【００５５】
実施例１１
２０時間絶食した７週齢の雄性ｄｄＹ系マウス（一群９匹）から眼窩採血を行い、１０ｍＬ／ｋｇのサラダ油を経口投与した後、直ちに１０ｍＬ／ｋｇの水、もしくは前記粉末１を溶解した滅菌水を経口投与した。前記粉末１の投与量は１０ｍｇ／ｋｇである。６０分、１２０分、１８０分後に再度眼窩採血を行い、血漿を分離して中性脂肪濃度を測定した。前記粉末１の投与により、サラダ油負荷後の血漿中性脂肪値上昇が顕著に抑制され、前記粉末１に中性脂肪分吸収抑制作用が認められた（表５）。
【００５６】
【表５】
【００５７】
なお、上記各例において、実施例１の粉末１の調製の際に、エタノール水溶液を用いずに、熱水を用いて抽出物を調製した場合においても、上記と同様の結果を得た。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウンシュウミカンの花部の抽出物は、ヒアルロン酸産生促進作用（特許文献１）等を有することが知られている。
しかしながら、ウンシュウミカンの花部の抽出物が、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、顕著な効果でもって有効であるとの見地はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０００−９６０５０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である各種治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
請求項１に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする高尿酸血症の予防または改善剤である。
請求項２に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗骨粗鬆症剤である。
請求項３に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗鬱・抗ストレス剤である。
請求項４に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とするコレステロール低下剤である。
請求項５に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする血圧降下剤である。
請求項６に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする皮膚外用剤である。
請求項７に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗疲労剤である。
請求項８に記載の発明は、ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする脂肪代謝抑制剤である。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である各種治療剤が提供される。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
以下、本発明をさらに詳しく説明する。
【０００８】
本発明で用いられるウンシュウミカンの花部とは、ミカン科ミカン属に属するウンシュウミカンCitrus unshiu (Swingle) S.Marcov. の花部である。また、花部とは、花弁、萼、おしべ、めしべ、芽、蕾等を指すが、好ましくは花弁である。
【０００９】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を調製する方法について説明する。
ウンシュウミカンの花部の抽出物を調製する前段階として、ウンシュウミカンの花部は、好ましくは、乾燥し、粉砕するのがよい。
続いてウンシュウミカンの花部は、溶剤と接触させ抽出物を得る。
【００１０】
用いる溶剤としては、例えば、水、有機溶剤、水と有機溶媒との混合液等が使用できる。有機溶媒としては例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、ブタノールに代表される低級アルコール類、、ジメチルエーテル、ジエチルエーテルに代表されるエーテル類、クロロホルム、四塩化炭素等に代表されるハロゲン化炭化水素、アセトニトリル、酢酸エチル、アセトン等が挙げられる。中でも、水、エタノール水溶液、ブタノール、酢酸エチルが好ましい。
【００１１】
得られた抽出物は、公知技術に従い、さらに精製することもできる。例えば公知の各種クロマトグラフ法を単独で、または組み合わせて採用することができる。
【００１２】
抽出時間は、抽出原料から十分に可溶性成分が抽出される時間であればよく、抽出温度などに応じて適宜設定すればよい。好ましくは３０分〜４８時間である。例えば、抽出温度が５０℃未満の場合は、６時間〜４８時間、５０℃以上の場合は、３０分〜２４時間が適当である。。
【００１３】
上記とは別に、ウンシュウミカンの花部から抽出物を得る方法として、超臨界流体抽出法が挙げられる。
超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素（笑気ガス）などが用いられ、二酸化炭素が好適である。
【００１４】
超臨界流体抽出法は、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程および目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程からなる。分離工程は、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤、吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。
【００１５】
抽出物は、必要に応じて濃縮して濃縮物としたり、凍結乾燥を行なって粉末化することもできる。
【００１６】
ウンシュウミカンの花部の抽出物の投与量は、患者の年令、体重、適応症状などによって異なるが、例えば、凍結乾燥粉末として、成人１日１〜数回、１日あたり約１ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは３ｍｇ〜１ｇ、さらに好ましくは５０ｍｇ〜１ｇ程度投与するのがよい。
【００１７】
また、ウンシュウミカンの花部の抽出物を皮膚外用剤として用いる場合は、皮膚外用剤中、凍結乾燥粉末として０．０００１〜１０質量％の割合で含まれるのが好ましい。
【００１８】
本発明の治療剤は、錠剤、ピル、カプセル、顆粒、粉末、散剤、液剤等の固形または溶液の形態（以下、製剤ともいう）に公知の方法により適宜調製することができる。即ち、本発明に有用な固形製剤または液状製剤は、従来充分に確立された公知の製剤製法を用いることにより製造される。添加剤としては、例えば賦形剤、ｐＨ調整剤、清涼化剤、懸濁化剤、希釈剤、消泡剤、粘稠剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、可塑剤または香料などが挙げられる。
【００１９】
また本発明の治療剤は、各種健康食品および機能性食品として摂取可能である。これらの例としては、各種のものをあげることができるが、健康食品および機能性食品の製造に関しては、通常用いられる、食品素材、食品添加物に加え、賦形剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、分散剤、保存剤、湿潤化剤、溶解補助剤、防腐剤、安定化材、カプセル基剤等の補助剤を用いた飲食品製剤形態で利用することができる。該補助剤の具体的な例示をすれば、乳糖、果糖、ブドウ糖、でん粉、ゼラチン、炭酸マグネシウム、合成ケイ酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、炭酸カルシウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはその塩、アラビアガム、ポリエチレングルコール、シロップ、ワセリン、グリセリン、エタノール、プロピレングリコール、クエン酸、塩化ナトリウム、亜硫酸ソーダ、リン酸ナトリウム、プルラン、カラギーナン、デキストリン、還元パラチノース、ソルビトール、キシリトール、ステビア、合成甘味料、クエン酸、アスコルビン酸、酸味料、重曹、ショ糖エステル、植物硬化油脂、塩化カリウム、サフラワー油、ミツロウ、大豆レシチン、香料等が配合できる。このような健康食品、機能性食品の製造に関しては、医薬品製剤の参考書、例えば「日本薬局方解説書（製剤総則）」（廣川書店）等を参考にすることができる。
【００２０】
上記以外にも本発明の治療剤は飲食品として摂取することができる。具体的には、納豆、厚揚げ、豆腐、こんにゃく、団子、漬物、佃煮、コロッケ、サンドイッチ、ピザ、ハンバーガー、餃子、シューマイ、サラダ等の各種総菜や、各種粉末（ビーフ、ポーク、チキン等畜産物、海老、帆立、蜆、昆布等水産物、野菜・果実類、植物、酵母、藻類等）や、プリン、クッキー、クラッカー、パン、ケーキ、チョコレート、ポテトチップス、ビスケット、ドーナツ、ゼリーなどの洋菓子、煎餅、羊羹、大福、おはぎ、その他の饅頭、カステラなどの和菓子、冷菓（飴等）、チューインガム等のパン・菓子類や、うどん、そば、きしめん等の麺類や、かまぼこ、ハム、魚肉ソーセージ等の魚肉練り製品や、ハム、ソーセージ、ハンバーグ、コーンビーフ等の畜肉製品や、塩、胡椒、みそ、しょう油、ソース、ドレッシング、マヨネーズ、ケチャップ、甘味料、辛味料等の調味類や、明石焼き、たこ焼き、もんじゃ焼き、お好み焼き、焼きそば、焼きうどん等の鉄板焼き食品や、チーズ、ハードタイプのヨーグルト等の乳製品や、油脂類・香料類（バニラ、柑橘類、かつお等）を粉末固形化したものや、粉末飲食品（インスタントコーヒー、インスタント紅ウンシュウミカン、インスタントミルク、インスタントスープ、味噌汁等）等の各種食品が挙げることができるが、これらに特に制限されない。
【００２１】
さらに本発明においては、例えば、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体等）、ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛等）、セレン、レシチン、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテイン等）、サポニン（ギムネマ酸、大豆サポニン、人参サポニン等）、脂肪酸、タンパク質（コラーゲン、エラスチン等）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖等）、リン脂質及びその誘導体（フォスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、セラミド等）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタン等）、糖アルコール、リグナン類（セサミン等）、これらを含有する動植物抽出物、根菜類（ウコン、ショウガ等）、などを併用することもできる。
【００２２】
また、ウンシュウミカンの花部の抽出物を皮膚外用剤として用いる場合は、皮膚外用剤として通常使用される公知の材料、例えば色素、香料、防腐剤、界面活性剤、顔料、抗酸化剤、保湿剤、紫外線吸収剤などを適宜配合することができる。
本発明の皮膚外用剤は、クリーム、乳液、化粧水、パック等、公知の形態で使用され得る。
【実施例】
【００２３】
以下、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。本発明の治療剤は、高尿酸血症の予防または改善剤、抗骨粗鬆症剤、抗鬱・抗ストレス剤、コレステロール低下剤、血圧降下剤、皮膚外用剤、抗疲労剤、脂肪代謝抑制剤としてきわめて有用である。また本発明の皮膚外用剤は、美白剤、にきび治療剤、育毛・養毛剤としてきわめて有用である。以下、上記各種薬効について実施例でもって説明する。
【００２４】
実施例１（高尿酸血症の改善効果）
乾燥したウンシュウミカンの花弁１ｋｇを粉砕し、これに約１０倍量の６０％エタノール水溶液（１０リットル）を加え、加熱還流下５時間抽出し、濾過し、濾液を採取した。濾液を濃縮し、さらに凍結乾燥し、ウンシュウミカンの花部（花弁）の抽出物の凍結乾燥の粉末１を得た。
【００２５】
実験方法
供試動物はWistar系ラット雌（８週令、体重約180g）を１群６匹で用いた。
試験飼料に0.75％の濃度でアデニンを加えてラットに給与し、腎臓からの尿中への尿酸排泄阻害を起こさせて高尿酸血症のモデル動物とした。
対照群は、上記の0.75％アデニン飼料のみ、薬剤投与群は、０．７５％アデニンと上記粉末１含有飼料とした。飼料は自由摂取としたが、薬剤投与群の試験飼料中の上記粉末１の濃度を、摂取量が１ｍｇ／ｋｇ体重となるように調整した。試験開始日及び24日目に血中の尿酸値を測定した。
その結果、対照群の試験開始日の血中尿酸濃度は、０．５７ｍｇ／ｍｌであり、２４日目が２．３３ｍｇ／ｍｌであったのに対し、薬剤投与群の２４日目の血中尿酸濃度は０．８２ｍｇ／ｍｌであった。
この結果から明らかなように、対照群では血中尿酸濃度が大幅に増加するのに対し、薬剤投与群ではいずれもその濃度は増加しなかった。したがって、ウンシュウミカンの花部の抽出物は、高尿酸血症の予防または改善剤として有用であることが示された。
【００２６】
実施例２（抗骨粗鬆症効果）
骨粗鬆症改善効果試験
ＳＤ系ラット（２２週齢）メスの卵巣を外科的に取り除き、骨粗鬆症のモデルラットを作成した。卵巣摘出ラットを７匹ずつ６群に分け、３５日間の試験期間中、１日置きに（計１７回）、前記実施例１の粉末１の摂取量が１回について１ｍｇ／ｋｇとなるように、生理食塩水溶解した液体を２ｍｌ経口投与した。飼料はオリエンタル酵母株式会社のマウス・ラット・ハムスター用固形飼料ＣＲＦ−１を用い、給餌および給水方法は自由摂取とした。試験期間中、各群間で、餌の摂取量に差は認められなかった。試験開始後３５日目にラットの体重を測定した後、大腿骨を取り出した。大腿骨は、接着組織および筋肉を取り除いて分析に使用した。大腿骨の体積を測定した後、エタノールで３回洗浄し、次にアセトンで３回洗浄したのち、一晩乾燥し、その後、重量を測定して大腿骨の乾燥重量を求めた。体積および乾燥重量から、骨密度（乾燥重量ｇ／体積ｍｍ3 ）を測定した。なお対照実験として、前記粉末１を含まない生理食塩水をラットに投与したこと以外は、上記実験を繰り返した例（比較例）も行なった。その結果、比較例の骨密度が１．０１１ｍｇ／ｍｍ３であったのに対し、実施例１の骨密度は１．０９９ｍｇ／ｍｍ３であった。
【００２７】
実施例３（抗鬱・抗ストレス効果）
上記実施例１の粉末１の治療効果を調べた。
マウス強制水泳試験による精神安定作用の評価
本発明の治療剤の評価は、１９７７年にPorsoltにより開発されたマウス強制水泳試験を採用した。本試験は鬱病の動物モデル実験として最も多用される方法のひとつである。本試験では、マウスをある限られたスペースの中で強制的に泳がせて「無動状態」を惹起させる。この無動状態は、ストレスを負荷された動物が水からの逃避を放棄した一種の「絶望状態」を反映するものと考えられ、ヒトにおける鬱状態、ストレス状態と関連づけられている。事実、抗鬱薬は特異的にこの状況下における無動状態の持続時間を短縮させることがわかっており、この短縮作用は臨床力価との間に有意な相関を有することが認められている。
【００２８】
本試験方法は次のとおりである。
２５℃の水を深さ１５ｃｍまで入れたプラスチック円筒中でマウスを強制水泳させる。５分間の強制水泳後、３０℃の乾燥機中で１５分間乾燥し、ホームケージに戻す。翌日マウスに試験試料を腹腔内投与して、その１時間後に再び５分間の強制水泳を課し、現れた無動状態の持続時間をストップウォッチを用いて測定する。マウスが水に浮かんで静止している状態を無動状態と判定する。無動状態持続時間については有意差検定を行い、統計学的に有意差を検定する。実験には雄のｄｄYマウスを使用し、１群６匹とする。なお、試験は全て午後１時から午後６時の間に行う。ポジティブコントロールとして抗鬱薬であるイミプラミンを用いた。
【００２９】
その結果、粉末１を３０ｍｇ／ｋｇ投与したマウスの無動状態持続時間は、１６８．４±５．７秒であった。コントロール（生理食塩水のみ）は２２０．０±２．２秒であった。ポジティブコントロール（３０ｍｇ／ｋｇ投与）のマウスの無動状態持続時間は、１７６．５±４．０秒であった。なお、粉末１を２〜３倍量使用しても、同様の結果を得た。
【００３０】
実施例４
（コレステロール低下作用）
体重２０ｇ前後のＩＣＲ系雄性マウス（１群５匹）に、高コレステロール−コール酸食餌（７１．９％標準餌、１５％ショ糖、２％食塩、１０％ココナッツオイル、０．６％コレステロール、０．２％コール酸、０．３％塩化コリン）を試験第１日目から第７日目まで給餌（自由摂取）した。試験第６日目と第７日目に、上記実施例１の粉末１の５ｍｇを蒸留水に溶解し、経口投与した。その後、２４時間の絶食を行い、試験第８日目にマウスから血液を採取し、血清を分離した。
【００３１】
また、採取した血清の一部にヘパリンを添加し沈降させ、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）としてヘパリン沈降リポタンパクを得た。血清中の総コレステロール値及びＬＤＬ中のコレステロール値を、シー・シー・アライン（Ｃ．Ｃ．Ａｌｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．）らの報告（クリニカル ケミストリイ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１９７４年、２０巻、４７０−４７５頁）に従って、測定した。
【００３２】
血清中の総コレステロール値からＬＤＬコレステロール値を引いた値を、高比重リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロール値として算出した。なお対照群は、上記粉末１を投与していない群である。
【００３３】
その結果を表１に示した。表１から明らかなように、血清中総コレステロールを低下させる明らかな作用が認められた。
【００３４】
【表１】
【００３５】
実施例５（血圧降下効果）
実施例１の粉末１を一般市販飼料（船橋農場製、船橋SP）に添加し、脳卒中易発症性高血圧自然発症ラット（SHR−SP）を用いて最高血圧値、体重の変化を比較した。対照区は、粉末１を添加しない一般試料を用いた。Ａ区を対照区、Ｂ区を本発明区とし、それぞれの飼料で５週齢の雄性SHR−SPを各区６匹ずつ７週間飼育し、12週齢に達した時の血圧値と体重の変化について調べた。表２に示すように血圧の変化においては、本発明区に有意な血圧上昇の抑制が認められた。なお、本発明区においては、１日あたりの粉末１の摂取量が、５０ｍｇ／ｋｇ体重となるように飼料中の粉末１の濃度を調整した。
【００３６】
【表２】
【００３７】
実施例６（メラニン抑制効果）
メラニンを生成する細胞として、マウス由来の培養B16メラノーマ細胞を用いてウシ胎児血清を終濃度10%になるように添加したイーグルＭＥＭ培地で培養し、該細胞を3×103cell/mlの濃度で6ウェルプレートの各ウェルに6ml播種し、5日間ＣＯ２インキュベーター内で培養後、実施例１の粉末１を添加した培地に交換し、さらに3日間同条件で培養する。細胞を洗浄後、細胞をスクレーパー処理により剥がし、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）により可溶化して475nm、260nmの吸光度を測定し、S475、S260とする。メラニン抑制率は被検試料を添加しない培地で培養した細胞の475nm、260nmにおける吸光度をC475、C260として式１により計算した。ポジティブコントロールとしてコウジ酸（Kojic acid）を用いた。
【００３８】
【数１】
【００３９】
その結果、ポジティブコントロール（培地中にコウジ酸３ｍＭ添加）のメラニン抑制率は約５６％であり、実施例１の粉末１を添加した被験試料（培地中に粉末１を５００μｇ／ｍｌ添加）のメラニン抑制率は約５５％であった。
【００４０】
実施例７
実施例１で得た粉末１を含有する下記組成のクリームを常法により調製した。
粉末１ １０重量部
グリセロールソルビタン脂肪酸エステル ６０重量部
微結晶性ワックス １０重量部
オリーブオイル ３０重量部
流動パラフィン １８０重量部
ステアリン酸マグネシウム １０重量部
プロピレングリコール ３７重量部
硫酸マグネシウム ７重量部
精製水 ６５５重量部
【００４１】
実施例８
（にきび治療効果）
乳 液：
以下に示す組成及び下記製法で乳液を調製し、にきび予防および改善効果を調べた。
【００４２】
【表３】
【００４３】
（ 製 法 ）
Ａ. 成分（１）〜（６）を加熱混合し、７０℃に保つ。
Ｂ. 成分（９）と（１１）の一部を加熱混合し、７０℃に保つ。
Ｃ. ＢにＡを加えて混合し、均一に乳化する。
Ｄ. Ｃを冷却後（１１）の残部に溶かした（７）、（８）、（１２）および（１０)に溶かした（１３）を加え、均一に混合して乳液を得た。
【００４４】
（試験方法）
被験乳液１品につき２２歳から４０歳の女性１５名をパネルとし、毎日、朝と夜の２回、洗顔後に被験乳液の適量を顔面に塗布した。１２週間塗布を行い、塗布によるにきび改善効果の有効性を、以下の３ランクで判断し、下記評価基準によって評価した。
【００４５】
（有効性ランク ）
有効 ： にきびが出来にくくなった。にきびが目立たなくなった。
やや有効： にきびがやや出来にくくなった。にきびがあまり目立たなくなった。
無 効： 使用前と変化なし。
【００４６】
その結果、パネラー全員が「有効」と評価した。
【００４７】
実施例９（養毛・育毛効果）
特許第４０４１４５１号公報に記載の実験手順に従い、粉末１の効果を検証した。
（１）マウスによる試験
Ｃ３Ｈマウス（８週齢、オス、平均体重３５ｇ）の背部皮膚（２ｃｍ×４ｃｍ）を電気バリカン及びシェーバーで刈り、翌日より実施例の試料を被験部皮膚に朝夕２回、一匹当り０．２ｍＬを二週間連用塗布した。一試料に対して動物一群１０匹使用した。塗布開始２２日目に被験部皮膚をビデオカメラに撮影し、画像解析装置にて毛刈り部及び発毛部の面積を測定した。養毛効果の判定は、下記に示す発毛率（％）を算出し、実施例の群の発毛率平均値を求めた。
発毛率（％）＝（発毛部の面積）／（毛刈り部の面積）×１００
【００４８】
（２）ヒトによる試験
男性型脱毛症患者である被験者１０名の耳上５ｃｍの位置にて、頭髪を左右２ヶ所直径５ｍｍの円形状に剃毛し、実施例の試料を左側の頭髪全体に毎日朝夕２回、約３ｍＬ塗布し、右側は何も塗布せずに、左右の比較を行った。毛成長速度の効果の判定は、試験開始後１ヶ月目に、左右の剃毛した部位の被験部毛髪２０本を抜毛し、下記式で求めた値で毛成長速度を評価した。
毛成長速度＝（左側毛髪２０本の長さの平均）／（右側毛髪２０本の長さの平均）
【００４９】
また、育毛効果、痒み防止効果、脱毛効果、ふけ防止効果の判定は、試験開始後３ヶ月目に各項に対し、右側の何も塗布していない被試部位と比較して、「産毛が剛毛化した或いは産毛が増加した」、「痒みをそれほど感じない」、「抜け毛が少なくなった」、「ふけが少なくなった」と回答した人数で示した。
【００５０】
表４に示す処方の養毛・育毛剤を常法に従って作成し、前記の諸試験を実施して評価を行った。なお、実施例１の粉末１の濃度は、表４に示されるとおりである。その結果を併せて表４に示す。
【００５１】
【表４】
【００５２】
なお本発明品の養毛・育毛剤の長期間の使用中及び使用後においても、皮膚の状態に特に異常は認められなかった。
【００５３】
実施例１０（抗疲労効果）
ＳＴＤ ＤＤＹ 雄性マウス（５週齢：各群ｎ＝３〜４）に対し、実施例１の粉末１を経口摂取させた。摂取量は、５０ｍｇ／ｋｇ体重である。摂取は、純水に実施例１の粉末１を溶解させた溶液を用いて行なった。なお、コントロール群のマウスには、純水のみを摂取させて試験を行った。
【００５４】
摂取から３０分後に、マウスを深さ８０センチの水槽に入れて、無動に至るまでの時間を計測した。各試験群のマウス（各群ｎ＝３〜４）の無動に至るまでの時間の平均値として、コントロール群は約１１２秒であったのに対し、実施例１の粉末１投与群は、約２３５秒であった。
【００５５】
実施例１１
２０時間絶食した７週齢の雄性ｄｄＹ系マウス（一群９匹）から眼窩採血を行い、１０ｍＬ／ｋｇのサラダ油を経口投与した後、直ちに１０ｍＬ／ｋｇの水、もしくは前記粉末１を溶解した滅菌水を経口投与した。前記粉末１の投与量は１０ｍｇ／ｋｇである。６０分、１２０分、１８０分後に再度眼窩採血を行い、血漿を分離して中性脂肪濃度を測定した。前記粉末１の投与により、サラダ油負荷後の血漿中性脂肪値上昇が顕著に抑制され、前記粉末１に中性脂肪分吸収抑制作用が認められた（表５）。
【００５６】
【表５】
【００５７】
なお、上記各例において、実施例１の粉末１の調製の際に、エタノール水溶液を用いずに、熱水を用いて抽出物を調製した場合においても、上記と同様の結果を得た。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする高尿酸血症の予防または改善剤。
【請求項２】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗骨粗鬆症剤。
【請求項３】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗鬱・抗ストレス剤。
【請求項４】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とするコレステロール低下剤。
【請求項５】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする血圧降下剤。
【請求項６】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする皮膚外用剤。
【請求項７】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗疲労剤。
【請求項８】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする脂肪代謝抑制剤。
【請求項１】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする高尿酸血症の予防または改善剤。
【請求項２】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗骨粗鬆症剤。
【請求項３】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗鬱・抗ストレス剤。
【請求項４】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とするコレステロール低下剤。
【請求項５】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする血圧降下剤。
【請求項６】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする皮膚外用剤。
【請求項７】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする抗疲労剤。
【請求項８】
ウンシュウミカンの花部の抽出物を有効成分とする脂肪代謝抑制剤。
【公開番号】特開２００９−１７３６８２（Ｐ２００９−１７３６８２Ａ）
【公開日】平成２１年８月６日（２００９．８．６）
【国際特許分類】
【公開請求】
【出願番号】特願２００９−１１５１１３（Ｐ２００９−１１５１１３）
【出願日】平成２１年５月１２日（２００９．５．１２）
【出願人】（７０７０００６９１）辻堂化学株式会社 (104)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年８月６日（２００９．８．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１１５１１３（Ｐ２００９−１１５１１３）
【出願日】平成２１年５月１２日（２００９．５．１２）
【出願人】（７０７０００６９１）辻堂化学株式会社 (104)
【Ｆターム（参考）】
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