病原体不活化のための脆い化合物
【課題】物質中の病原体を不活化するための化合物を提供すること。
【解決手段】物質中の病原体を不活化するための化合物および方法が述べられ、赤血球製剤および血漿のような生物学的物質における病原体の不活化のための組成物および方法を包含する。この化合物および方法は、臨床試験または輸血のようなインビトロまたはインビボでの使用を意図した物質の処置のために使用し得る。化合物は核酸に特異的に結合しおよび核酸と反応し、次いで分解して分解生成物を形成するように設計される。好ましくは、分解反応は核酸との反応よりも遅い。
【解決手段】物質中の病原体を不活化するための化合物および方法が述べられ、赤血球製剤および血漿のような生物学的物質における病原体の不活化のための組成物および方法を包含する。この化合物および方法は、臨床試験または輸血のようなインビトロまたはインビボでの使用を意図した物質の処置のために使用し得る。化合物は核酸に特異的に結合しおよび核酸と反応し、次いで分解して分解生成物を形成するように設計される。好ましくは、分解反応は核酸との反応よりも遅い。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の引用
本願は、米国仮出願番号第６０／０４３，６９６号（１９９７年４月１５日出願）の利益を請求し、この開示は本明細書中で参考として援用される。
【０００２】
本願はまた、米国特許出願番号第０８／７７９，８８５号の一部継続出願（１９９７年１月６日出願）であり；および米国特許出願番号第０８／７７９，８３０号の一部継続出願（１９９７年１月６日出願）であり、これらの開示は本明細書中で参考として援用される。
【０００３】
連邦委託研究のもとでなされた発明に対する権利の記載
本発明は、ＮＨＬＢＩのＧｒａｎｔ １−ＲＯ１−ＨＬ４１２２１のもと、米国政府の支援によってなされた。米国政府は本発明において特定の権利を有する。
【０００４】
技術分野
本発明は、物質（例えば、血液製剤）の病原体不活化に有用な化合物、およびこの化合物の使用法に関する。
【背景技術】
【０００５】
背景技術
血液製剤および他の生体物質による疾患の伝染は、重大な健康問題のままである。血液ドナーのスクリーニングおよび血液試験において有意な進歩が生じたが、Ｂ型肝炎（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）、およびヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、低レベルのウイルスまたはウイルス抗体により、試験の間、血液製剤における検出から逃れ得る。ウイルスの危険性に加え、輸液における使用が意図される、血液中の細菌および原生動物の存在をスクリーニングするための認可された試験は、現在ない。また、今までは未知の病原体が血液供給において流行し得、そして疾患伝染の恐れを示し得るという危険も存在し、これは実は、血液の輸液を介したＨＩＶ伝染の危険認識前に起こっていた。
【０００６】
検査室作業者の血液または他の体液に対する曝露もまた、健康被害を示す。疾患管理センター（ｔｈｅ Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）の推定（「Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ Ｖｉｒｕｓ ａｎｄ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ Ｖｉｒｕｓ ｔｏ Ｈｅａｌｔｈ−Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｐｕｂｌｉｃ−Ｓａｆｅｔｙ Ｗｏｒｋｅｒｓ」、Ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｗｅｅｋｌｙ Ｒｅｐｏｒｔ、第３８巻、第Ｓ−６号、１９８９年６月）によると１２，０００人のヘルスケア作業者（彼らの仕事には血液への曝露が含まれる）が毎年Ｂ型肝炎ウイルスに感染している。
【０００７】
ドナーのスクリーニングおよび血液試験を補完し、輸液による疾患の発生率を低下させるいくつかの方法が提案されている。血液製剤の臨床使用の前に病原体を不活化するために、化学薬剤の血液または血漿への導入が示唆されている。強力な殺ウイルス剤の研究で、ナイトロジェンマスタード（ＣＨ３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２）を血液成分に添加した。しかしながら、研究されたウイルスの１つを不活化するのに必要な濃度で、実質的な溶血が発生した。これはナイトロジェンマスタードが血液での使用に不適切であることを示している。非特許文献１。
【０００８】
ウイルスを不活化するための「溶媒／界面活性剤」（Ｓ／Ｄ）法が、非特許文献２および非特許文献３に記載されている。この方法は、１％トリ（ｎ−ブチル）ホスフェートおよび１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を、３０℃で４時間利用し、新鮮凍結血漿中のウイルスを不活化する。非特許文献４（１％トリ（ｎ−ブチル）ホスフェートおよび１％オクトキシノール−９を使用し、新鮮凍結血漿中のウイルスを不活化した）。血液中のウイルスを不活化する別の方法には、フェノールまたはホルムアルデヒドの血液への添加が挙げられる。特許文献１。しかしながら、溶媒／界面活性剤法およびフェノール／ホルムアルデヒド法は両方とも、血液製剤の臨床使用の前に化学添加剤の除去を必要とする。
【０００９】
光活性化剤を用いた血液製剤中の病原体の不活化もまた、記載されている；例えば、非特許文献５を参照のこと。しかしながら、いくつかの領域のヘモグロビンによる、紫外および可視スペクトルにおける吸光によって、光処理は、その適用において、赤血球を含む物質に限定される。赤血球の光処理には、いくつかの様式で細胞を変化させるいくらかの徴候もまた存在する；非特許文献６を参照のこと。
【００１０】
従って、血液、血液由来の製品、および他の生体物質を処理する化合物および方法（これは製品または物質中に存在する病原体を、製品または物質をそれらの意図される利用に不適切でないように、不活化する）が必要となっている。使用前に生体物質から除去される必要のない組成物が特に有用である。なぜなら、組成物を除去するのに必要な装置および供給品が除去され、生体物質の取扱いコストを減少させるからである。しかしながら、組成物が生体物質に残存する場合、生体物質を意図される目的に用いるときに危険の種となってはならないという点で、これは組成物にさらなる要件を生じる。例えば、血液サンプル中の病原体を不活化する高毒性化合物は、輸液目的の血液の使用を不可能にする（しかし、血液サンプルはまだ検査分析には適し得るが）。
【００１１】
本発明の１つの意図は、生体物質中の病原体を、物質を意図する目的に不適切でないように、不活化するための組成物および組成物の使用法を提供することである。これが達成され得る方法の例としては、以下のものが含まれるが、これらに限定されない：生体物質のエキソビボまたはインビトロ処理において化合物を使用し、次いで、物質の使用前に化合物を除去する工程；たとえ物質中に残存するとしても、物質を意図される使用に不適切なものにしない組成物の使用によって；あるいは、物質中の病原体不活化後に製品に分解する組成物の使用によって（ここで分解生成物は、物質をその意図する使用に不適切でないように、物質中に残存し得る）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許第４，８３３，１６５号明細書
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】ＬｏＧｒｉｐｐｏら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｉｘｔｈ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ， Ｂｉｂｌｉｏｔｈｅｃａ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ （Ｈｏｌｌａｎｄｅｒ編）， １９５８， ２２５−２３０頁
【非特許文献２】Ｈｏｒｏｗｉｔｚら、Ｂｌｏｏｄ ７９：８２６ （１９９２）
【非特許文献３】Ｈｏｒｏｗｉｔｚら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ２５：５１６ （１９８５）
【非特許文献４】Ｐｉｑｕｅｔら、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ ６３：２５１ （１９９２）
【非特許文献５】Ｗａｇｎｅｒら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ， ３４：５２１ （１９９４）
【非特許文献６】Ｗａｇｎｅｒら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ３３：３０ （１９９３）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
従って、本発明の目的は物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、ここでそのような化合物は以下を含有する：核酸結合部分；核酸との共有結合の形成を可能にする、エフェクター部分；そして核酸部分およびエフェクター部分を共有連結している（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｌｉｎｋｉｎｇ）脆い（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）リンカー。ここで、その物質を意図した目的に不適切にしない条件下で、もはや核酸結合部分およびエフェクター部分が共有連結しないように、脆いリンカーが分解する。
【００１５】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、その化合物の核酸結合部分はアクリジン、アクリジン誘導体、ソラレン、イソソラレンおよびソラレン誘導体からなる群より選択される。
【００１６】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、ここで、脆いリンカーが、本明細書中で定義される通りの順方向（ｆｏｒｗａｒｄ）エステル、逆方向（ｒｅｖｅｒｓｅ）エステル、順方向アミド、逆方向アミド、順方向チオエステル、逆方向チオエステル、順方向および逆方向チオノエステル、順方向および逆方向ジチオ酸、スルフェート、順方向および逆方向スルホネート、ホスフェートさらに順方向および逆方向ホスホネートの基からなる群から選択される官能性単位から構成される。
【００１７】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、その化合物のエフェクター基がアルキル化試薬の官能性単位を含む。
【００１８】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、ここで、エフェクター基が、マスタード（ｍｕｓｔａｒｄ）基、マスタード基等価物、エポキシド、アルデヒドおよびホルムアルデヒドシントンからなる群より選択される官能性単位を含む。
【００１９】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための以下の式の化合物ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を提供することである：
【００２０】
【化１】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の少なくとも１つが以下で定義される通りの−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００２１】
【化２】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇはそれぞれ独立して−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００２２】
本発明の他の目的は、以下の式の化合物ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を提供することである：
【００２３】
【化３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは独立して−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００２４】
【化４】
からなる群より独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００２５】
本発明の他の目的は、以下の式の化合物ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を提供することである：
【００２６】
【化５】
ここでＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８のうち少なくとも１つが−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００２７】
【化６】
からなる群より独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００２８】
本発明のさらに他の目的は、以下の式の化合物およびその全ての塩を提供することである：β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル；４−アミノ酪酸 Ｎ−［（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル；５−アミノ吉草酸 Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル；β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），３−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］プロピルエステル；β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル；β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，２−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］エチルエステル；［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテート；およびβ−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル。
【００２９】
生物学的な物質のような物質中の病原体を不活化するための方法が提供され、この方法は物質へ本発明の化合物を１つ以上添加する工程；および該物質をインキュベートする工程を包含する。その化合物が、例えば、１μＭと５００μＭとの間の濃度（または１つより多い化合物を使用する場合、全化合物の全濃度）を有する最終溶液の形態で物質へ添加され得る。処理され得る生物学的物質には、ヒト源または他の哺乳動物源または脊椎動物源に由来する血液、血液製剤、血漿、血小板製剤、赤血球、濃縮赤血球、血清、脳脊髄液、唾液、尿、汗、便、精液、乳、組織試料および均質化組織試料が挙げられる。
【００３０】
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）物質中の病原体を不活化するための化合物であって、以下を含有する化合物：
核酸結合部分；
核酸との共有結合の形成を可能にする、エフェクター部分；および
該核酸部分と該エフェクター部分とを共有連結している（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｌｉｎｋｉｎｇ）脆い（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）リンカー；
ここで、該物質をその意図した目的に不適切にしない条件下で、もはや該核酸結合部分および該エフェクター部分が共有連結しないように、該脆いリンカーが分解する。
【００３１】
（項目２）前記核酸結合部分が、アクリジン、アクリジン誘導体、ソラレン、イソソラレンおよびソラレン誘導体からなる群より選択される、項目１に記載の化合物。
【００３２】
（項目３）項目１に記載の化合物であって、ここで前記脆いリンカーが、順方向（ｆｏｒｗａｒｄ）エステル、逆方向（ｒｅｖｅｒｓｅ）エステル、順方向アミド、逆方向アミド、順方向チオエステル、逆方向チオエステル、順方向および逆方向チオノエステル、順方向および逆方向ジチオ酸、スルフェート、順方向および逆方向スルホネート、ホスフェート、および順方向および逆方向ホスホネートの基からなる群から選択される官能性単位から構成される、化合物。
【００３３】
（項目４）エフェクター基が、アルキル化試薬である官能性単位を含む、項目１に記載の化合物。
【００３４】
（項目５）項目１に記載の化合物であって、ここで前記エフェクター基が、マスタード（ｍｕｓｔａｒｄ）基、マスタード基等価物、エポキシド、アルデヒドおよびホルムアルデヒドシントンからなる群より選択される官能性単位を含む、化合物。
【００３５】
（項目６）以下の式を含有する化合物、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）：
【００３６】
【化５３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３，ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり、
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして、
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり、
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００３７】
【化５４】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは独立して−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００３８】
（項目７）以下の式を有する化合物、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）：
【００３９】
【化５５】
ここでＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８のうち少なくとも１つが−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００４０】
【化５６】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
（項目８）以下の式を有する化合物：
【００４１】
【化５７】
およびその全ての塩。
（項目９）以下の式を有する化合物：
【００４２】
【化５８】
およびその全ての塩。
（項目１０）以下の式を有する化合物：
【００４３】
【化５９】
およびその全ての塩。
（項目１１）以下の式を有する化合物：
【００４４】
【化６０】
およびその全ての塩。
（項目１２）以下の式を有する化合物：
【００４５】
【化６１】
およびその全ての塩。
（項目１３）以下の式を有する化合物：
【００４６】
【化６２】
およびその全ての塩。
（項目１４）以下の式を有する化合物：
【００４７】
【化６３】
およびその全ての塩。
（項目１５）以下の式を有する化合物：
【００４８】
【化６４】
およびその全ての塩。
（項目１６）物質中の病原体を不活化するための方法であって、該物質へ項目１に記載の化合物を添加する工程；および該物質をインキュベートする工程を包含する、方法。
（項目１７）前記化合物が１μＭと５００μＭとの間の濃度を有する最終溶液を形成するために前記物質へ添加される、項目１６に記載の方法。
（項目１８）前記物質が生物学的な物質である、項目１６に記載の方法。
（項目１９）項目１８に記載の方法であって、ここで前記生物学的な物質が以下からなる群から選択される組成物を含む、方法：血液、血液製剤、血漿、血小板製剤、赤血球、濃縮赤血球、血清、汗、脳脊髄液、唾液、尿、便、精液、乳、組織試料、均質化組織試料、細胞培養培地、細胞培養物、ウイルス培養物および生存している生物由来の物質を配合した培養物。
（項目２０）前記物質が血液製剤を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２１）前記物質が赤血球を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２２）項目１６に記載の方法であって、ここで該方法が、少なくとも約２ログ（２ ｌｏｇ ｏｆ）の前記物質中の病原体を不活性にするための有効量の前記化合物を前記物質へ添加する工程を包含する、方法。
（項目２３）インキュベーション時間が少なくとも約１〜４８時間である、項目１６に記載の方法。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
（発明の詳細な説明）
本発明は物質中に見出される病原体の不活化、特に血液または他の体液のような生体物質に見出される病原体の不活化に有用な化合物を提供する。本発明はまた、物質中の病原体を不活化するこのような化合物の使用法を提供する。本発明はまた、生物学的使用のための物質中または物質に見出される病原体を不活化する工程を提供する。この化合物はインビトロおよびエキソビボで用いられ得る。生体物質または生物学的使用のための物質は、インビトロ、インビボ、またはエキソビボでの使用が意図され得る。
【００５０】
本化合物は核酸との反応によって、病原体を不活化するために設計される。水溶液中、適切なｐＨ値において、本化合物は、核酸に結合し核酸と反応し得る間の活性期間を有する。この期間の後、化合物は製品に分解し、これはもはや核酸と結合し得ないしまた核酸と反応し得ない。
【００５１】
本化合物の化学的機構は、アンカー（脆いリンカーに共有結合した）として、広範に記載され得、これはエフェクターに共有結合している。「アンカー」は核酸生体高分子（ＤＮＡまたはＲＮＡ）に非共有結合的に結合する部分として定義される。「エフェクター」は、核酸との共有結合を形成する機構により、核酸と反応する部分として定義される。「脆いリンカー」は、アンカーとエフェクターとを共有連結するよう働き、特定の条件下で分解し、その結果、アンカーおよびエフェクターはもはや共有連結されない、部分として定義される。アンカー−脆いリンカー−エフェクター配列は、本化合物が核酸に特異的に（アンカーの結合能によって）結合することを可能にする。このことはエフェクターを核酸との反応に近づける。
【００５２】
本化合物は、物質中、特に血液および他の体液のような生体物質中に見出される病原体の不活化に有用である。細胞内および細胞外およびまたは他の病原体物質が不活化され得る。例えば、本発明の化合物を、病原体含有赤血球組成物と生理的ｐＨで組み合わせた場合、化合物のエフェクター部分は病原体核酸と反応する。核酸と反応しないエフェクター部分は次第に溶媒によって加水分解される。脆いリンカーの加水分解は、エフェクター−核酸反応およびエフェクター加水分解と同時に起こる。脆いリンカーが、物質中の病原体の不活化を可能にするのに十分な程、ゆっくりとした速度で分解するのが望ましい；つまり、脆いリンカーの分解速度は、化合物が核酸と反応する速度よりも遅い。十分な量の時間が経過した後、化合物はアンカー（これはまた、脆いリンカーのフラグメントを有し得る）およびエフェクター−核酸分解生成物（ここで、脆いリンカーのフラグメントはまた、エフェクターに結合したままであり得る）に分解されるか、またはアンカー（これはまた、脆いリンカーのフラグメントを有し得る）および加水分解されたエフェクター分解生成物（ここで、脆いリンカーのフラグメントはまた、エフェクターのいずれにも結合されたままであり得る）に分解される。脆いリンカーのさらなるフラグメントはまた、アンカーまたはエフェクターのいずれにも結合されたままでない化合物の分解時に、生成され得る。本発明の化合物の正確な実施態様は、アンカー分解生成物またはエフェクター分解生成物が脆いリンカーのフラグメントを有するか否か、あるいはアンカーまたはエフェクター分解生成物のいずれにも結合されたままでない、脆いリンカーのさらなるフラグメントが生成されるか否かを決定する。
【００５３】
本発明の好ましい実施態様は、脆いリンカーの切断時、低変異原性の分解生成物を生じる化合物を包含する。化合物の変異原性は、エフェクターの加水分解後、主にアンカー部分により、なぜなら、たとえエフェクター部分が加水分解された場合でも、アンカーは核酸と相互作用し、核酸複製物と干渉する可能性を有し得るからである。好ましくは、脆いリンカーの切断後、アンカーフラグメントは実質的に変異原性が低下している。
【００５４】
定義
「病原体」は、ヒト、他の哺乳動物、または脊椎動物に疾患を生じ得る、任意の核酸含有因子として定義され得る。例には、単細胞または多細胞微生物のような微生物が含まれる。病原体の例は、細菌、ウイルス、原生生物、真菌、酵母菌、カビ、および、マイコプラズマであり、これらはヒト、他の哺乳動物、または脊椎動物に疾患を生じる。病原体の遺伝物質は、ＤＮＡまたはＲＮＡであり得、そして遺伝物質は一重鎖または二重鎖核酸として存在し得る。病原体の核酸は、溶液中、細胞内、細胞外、または細胞に結合したものであり得る。表Ｉは、ウイルスの例を列挙しており、本発明を任意の様式に制限することを意図されない。
【００５５】
【表１−１】
【００５６】
【表１−２】
物質または化合物の「インビボ」使用は、物質または化合物の、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物への導入として定義される。
【００５７】
物質または化合物の「インビトロ」使用は、物質または化合物の、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物外での使用として定義され、ここで物質および化合物のいずれも、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物への再導入を意図されない。インビトロ使用の例としては、実験室の設備を用いた、血液サンプルの成分分析がある。
【００５８】
化合物の「エキソビボ」使用は、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物外での生体物質の処理に、化合物を用いることとして定義され、ここで処理された生体物質は、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物内での使用を意図される。例えば、ヒトからの血液の取り出し、および病原体を不活化するための化合物のその血液内への導入は、血液がそのヒトまたは別のヒトへの再導入を意図される場合、その化合物のエキソビボ使用として定義される。ヒト血液のそのヒトまたは別のヒトへの再導入は、血液のインビボ使用であり、これは化合物のエキソビボ使用と対照的である。ヒトへ化合物が再導入されたとき、血液中に化合物がまだ存在する場合、化合物はまた、そのエキソビボ使用に加え、インビボ導入される。
【００５９】
「生体物質」は、任意のタイプの生物学的有機体からもたらされる物質として定義される。生体物質の例としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：血液、血液製剤（例えば、血漿、血小板調製物、赤血球、濃縮赤血球、および血清）、脳脊髄液、唾液、尿、糞便、精液、汗、乳、組織サンプル、ホモジナイズされた組織サンプル、および生物学的有機体にその起源を有する任意の他の物質。生体物質にはまた、生物学的有機体にその起源を有する物質を取り込む合成物質が含まれる。これは例えば、ミョウバンから構成されるワクチン調製物および病原体（この病原体は、この場合、生物学的有機体にその起源を有する物質である）、分析のために調製されたサンプルであり、このサンプルは血液と、分析試薬、細胞培養培地、細胞培養物、ウイルス培養物、および他の生きた生物由来の培養物との混合物である。
【００６０】
「生物学的使用のための物質」は、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物と接触するか、またはそれらに導入される任意の物質として定義され、ここでこのような接触は、疾患または病原体を伝染する危険を有する。このような物質には以下のものが含まれるが、これらに限定されない：ペースメーカーおよび人工関節のような医療用インプラント；持続的薬物放出のために設計されたインプラント；注射針、静脈内ラインなど；歯科用ツール；歯冠のような歯科用材料；カテーテル；ならびに、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物と接触するか、または導入された場合に、疾患または病原体を伝染する危険を伴う、任意の他の物質。
【００６１】
「病原体の不活化」は、物質中の病原体が増殖することを不可能にすることによって、定義される。不活化は、残存する増殖しうる病原体の画分の負対数として表される。従って、特定の濃度の化合物が、物質中の９９％の病原体を増殖不可能にする場合、１％または１００分の１（０．０１）の病原体が増殖可能なままである。０．０１の負対数は２であり、そしてこの化合物の濃度は、２ｌｏｇによって表される不活化された病原体を有すると言われる。あるいは、この化合物は、この濃度において２ｌｏｇｓ殺生を有すると言われる。
【００６２】
本明細書中で用いられる「アルキル」は、環式、分枝、または直鎖の炭素および水素を含む化学基（例えば、メチル、ペンチル、およびアダマンチル）をいう。アルキル基は、非置換または１つ以上の置換基（例えば、ハロゲン、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、ヒドロキシル、チオール、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、または他の官能基）で置換されるかのいずれかであり得る。アルキル基は、１つまたはいくつかの位置で飽和または不飽和であり得る（例えば、−Ｃ＝Ｃ−または−Ｃ≡Ｃ−サブユニットを含む）。典型的には、アルキル基は、他に特定していない限り、１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜８個の炭素原子を含む。
【００６３】
本明細書中で用いられている「ヘテロアルキル」は、鎖に組み込まれた１個以上のＮ、Ｏ、Ｓ、またはＰのヘテロ原子を有するアルキル鎖である。ヘテロ原子は、上記の置換基を有さないか、１つ、または１つ以上有し得る。「ヘテロ原子」はまた、ヘテロ原子Ｎ、ＳおよびＰの酸化形態を含む。ヘテロアルキル基の例には以下のものが挙げられる（しかしこれらに限定されない）：メトキシ、エトキシ、および他のアルキルオキシ基；エーテル含有基；ポリペプチド鎖のようなアミド含有基；ピペリジニル、ラクタムおよびラクトンのような環系；ならびにヘテロ原子を炭素鎖に組み込んだ他の基。典型的には、ヘテロアルキル基は、ヘテロ原子に加えて、特に特定しない限り、１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜８個の炭素原子を含む。
【００６４】
「アリール」または「Ａｒ」は、単環（例えば、フェニル）または多重縮合環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する不飽和芳香族炭素環式基を意味し、これは必要に応じて、非置換であり得るか、またはアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、アルコキシ、ハロ、チオール、および他の置換基で置換され得る。
【００６５】
「ヘテロアリール」基は、単環（例えば、ピリジルまたはフリル）あるいは多重縮合環（例えば、アクリジニル、インドリル、またはベンゾチエニル）を有する、不飽和芳香族炭素環式基であり、これは少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、またはＳ）を少なくとも１つの環内に有する。環は、必要に応じて、非置換であり得るかまたは、アミノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロ、チオール、アシルオキシ、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、およびその他の置換基で置換され得る。
【００６６】
略語
以下の略語が用いられる：ＱＭ（キナクリンマスタード）；Ｈｃｔ（ヘマトクリット）；ＲＢＣ（赤血球）；ＬＢ（Ｌｕｒｉａブロス）；ｃｆｕ（コロニー形成単位）；ｐｆｕ（プラーク形成単位）；ＤＭＥＭ（Ｄｅｌｂｅｃｃｏ改変ｅａｇｌｅ培地）；ＦＢＳ（ウシ胎仔血清）；ＰＲＢＣ（濃縮赤血球）；ｒｐｍ（毎分の回転数）；ＴＣ（組織培養）；ＮＨＳＰ（正常ヒト血清プール）；ＮＣＳ（新生仔ウシ血清）；ＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）。
【００６７】
化合物の化学的構造
広範で多様な群が、アンカー、リンカー、およびエフェクターとしての使用に利用可能である。本化合物において使用し得るアンカー群の例には、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：インターカレーター、副溝バインダー、主溝バインダー、静電相互作用により結合する分子（例えば、ポリアミン）、および配列特異的相互作用により結合する分子。以下は、可能なアンカー群の、非限定的リストである：
アクリジン（およびアクリジン誘導体（例えば、プロフラビン、アクリフラビン、ジアクリジン、アクリドン、ベンゾアクリジン、キナクリジン））、アクチノマイシン、アントラサイクリノン、ロドマイシン、ダウノマイシン、チオキサンテノン（およびチオキサンテノン誘導体（例えば、ｍｉｒａｃｉｌ Ｄ））、アントラマイシン、ミトマイシン、エチノマイシン（キノマイシンＡ）、ｔｒｉｏｓｔｉｎ、エリプチシン（ならびにその二量体、三量体およびアナログ）、ノルフィリンＡ、フルオレン（および誘導体（例えば、フルオレノン、フルオレノジアミン））、フェナジン、フェナントリジン、フェノチアジン（例えば、クロルプロマジン）、フェノキサジン、ベンゾチアゾール、キサンテンおよびチオキサンテン、アントラキノン、アントラピラゾール、ベンゾチオピラノインドール、３，４−ベンゾピレン、１−ピレニルオキシラン、ベンゾアントラセン、ベンゾジピロン、キノリン（例えば、クロロキン、キニン、フェニルキノリンカルボキサミド）、フロクマリン（例えば、ソラレンおよびイソソラレン）、エチジウム、プロピジウム、コラリン（ｃｏｒａｌｙｎｅ）、ならびに多環式芳香族炭化水素およびそれらのオキシラン誘導体；
ジスタマイシン、ネトロプシン、他のレキシトロプシン、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８およびその他のＨｏｅｃｈｓｔ色素、ＤＡＰＩ（４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール）、ｂｅｒｅｎｉｌ、およびトリアリールメタン色素；
アフラトキシン；
スペルミン、スペルミジン、およびその他のポリアミン；ならびに
核酸、または三重らせん体、Ｄループ体、および一本鎖の標的への直接塩基対のような配列特異的相互作用により結合するアナログ。これらの化合物の誘導体はまた、アンカー群の非制限的例であり、ここで化合物の誘導体には、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：任意の位置で、任意のタイプの１個以上の置換基を有する化合物、この化合物の酸化生成物または還元生成物など。
【００６８】
本発明で用いられ得るリンカーの例は官能基を含む化合物であるが、これらに限定されない。この官能基は例えば、エステル（ここで、エステルのカルボニル炭素はアンカーとエステルのｓｐ３酸素との間にある；この配列はまた「順方向のエステル」と呼ばれる）、「逆方向のエステル」（ここで、エステルのｓｐ３酸素は、アンカーとエステルのカルボニル炭素との間にある）、チオエステル（ここで、チオエステルのカルボニル炭素は、アンカーとチオエステルの硫黄との間にあり、これはまた、「順方向のチオエステル」と呼ばれる）、逆方向のチオエステル（ここで、チオエステルの硫黄は、アンカーとチオエステルのカルボニル炭素との間にあり、これはまた、「逆方向のチオエステル」と呼ばれる）、順方向および逆方向のチオノエステル、順方向および逆方向のジチオ酸、スルフェート、順方向および逆方向のスルホネート、ホスフェート、ならびに順方向および逆方向のホスホネート基。「チオエステル」は、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−基を示し；「チオノエステル」は、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−基を示し、そして「ジチオ酸」は、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−基を示す。脆いリンカーはまた、アミドを含み得、ここでアミドのカルボニル炭素は、アンカーとアミドの窒素との間にある（これはまた「順方向のアミド」と呼ばれる）か、またはここでアミドの窒素は、アンカーとアミドのカルボニル炭素との間にある（これはまた「逆方向のアミド」と呼ばれる）。「順方向の」および「逆方向の」として示され得る基について、順方向の配向は、官能基の加水分解後、得られる酸性官能基がアンカー部分に共有連結され、そして得られるアルコールまたはチオール官能基がエフェクター部分に共有連結される、官能基の配向である。逆方向の配向は、官能基の加水分解後、得られる酸性官能基がエフェクター部分に共有連結され、そして得られるアルコールまたはチオール官能基がアンカー部分に共有連結される、官能基の配向である。
【００６９】
脆いリンカー（例えば、アミド部分）はまた、酵素分解の条件下、処理された生体物質における内在性酵素によるか、または物質に添加された酵素によって、分解可能であり得る。
【００７０】
本発明で用いられ得るエフェクターの例は、以下のものであるが、これらに限定されない：マスタード基、マスタード基等価体、エポキシド、アルデヒド、ホルムアルデヒドシントン、および他のアルキル化剤および架橋剤。マスタード基は、モノまたはビスハロエチルアミン基、およびモノハロエチルスルフィド基を含むものとして定義される。マスタード基等価体は、マスタードと同様な機構によって（つまり、アジリジニウム中間体の形成によって、またはアジリジン環（これは求核試薬と反応し得る）を有するかもしくは形成することによって）反応する基によって定義され、これは例えば、モノまたはビスメシルエチルアミン基、モノメシルエチルスルフィド基、モノまたはビストシルエチルアミン基、およびモノトシルエチルスルフィド基である。ホルムアルデヒドシントンは水溶液中でホルムアルデヒドに分解する任意の化合物として定義され、これにはヒドロキシメチルグリシンのようなヒドロキシメチルアミンが含まれる。ホルムアルデヒドシントンの例は、米国特許第４，３３７，２６９号および国際特許出願第ＷＯ ９７／０２０２８号に示される。本発明は任意の特定機構に制限されないが、エフェクター基（これは求電子基であるかまたは求電子基を形成し得る、例えばマスタード基）は、核酸と反応し、そして核酸と共有結合を形成すると考えられている。
【００７１】
本発明の化合物の３つの実施態様を、以下の一般式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩにより述べる。
【００７２】
一般式Ｉは、以下の式、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である：
【００７３】
【化７】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の少なくとも１つが以下で定義される通りの−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００７４】
【化８】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００７５】
一般式ＩＩは、以下の式、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である：
【００７６】
【化９】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００７７】
【化１０】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００７８】
一般式ＩＩＩは、以下の式、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である：
【００７９】
【化１１】
ここでＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８のうち少なくとも１つが−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００８０】
【化１２】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００８１】
上記の一般式Ｉにおいて、アクリジン核はアンカー部分であり、−Ｖ−Ｗ−Ｘ−基は脆いリンカーを含み、そしてＥ基はエフェクター基であることが認められる。同様に上記の一般式ＩＩＩにおいて、ソラレン核はアンカー部分であり、−Ｖ−Ｗ−Ｘ−基は脆いリンカーを含み、そしてＥ基はエフェクター基である。一般式ＩＩは、一般式Ｉのサブセットである。
【００８２】
本発明の典型的な化合物はＩＶとして示した下記の構造である：
【００８３】
【化１３】
ＩＶにおいて、２−カルボメトキシアクリジン環系は、インターカレーションを介してアンカー部分としての役割をする。ビス（クロロエチル）アミン基は、エフェクター部分としての役割をし、これは核酸をアルキル化し得る；核酸と反応しない場合は窒素マスタードが加水分解する。リンカーは、−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−である。生理的ｐＨでの水溶液では、このエステル含有リンカーは、数時間内に加水分解する。溶液のｐＨを変えると、リンカーが加水分解する速度が変化する；ＩＶの対応するアルコールアナログについて（ここでＩＶの−Ｃｌ原子は−ＯＨ基と置換される）、エステル連結の１％以下の加水分解がｐＨ３で１００分後３７℃で観測され；ｐＨ８でエステル連結の５０％以上の加水分解が１００分後、３７℃で観測される。得られたＩＶの加水分解生成物は、Ｎ−（２−カルボメトキシ−９−アクリジニル）−β−アラニンおよびトリエタノールアミンである：
【００８４】
【化１４】
ここで２−カルボメトキシアクリジンは、リンカーフラグメントとしてβ−アラニンを有し、そしてエフェクター分解生成物は、リンカーフラグメントとしてエタノール基を有する。
【００８５】
生理的ｐＨ値で、β−アラニンのカルボキシレートは負電荷であり、結合した２−カルボメトキシアクリジン基が、負電荷の核酸分子中にインターカレートする傾向を減少させる。これは９−アミノアクリジンに関して、Ｎ−（２−カルボメトキシ−９−アクリジニル）−β−アラニンの突然変異誘発力を低下させる。アンカーフラグメントの突然変異誘発力を低下させるこのポテンシャルは、脆いリンカーによって与えられた１つの利点を説明する。
【００８６】
ＩＶに類似した化合物における脆いリンカーの別の利点は、加水分解速度が９−アミノアクリジンアンカー部分とエステル官能基との間のリンカーアームの長さを変えることで調節され得ることである。下記の実施例７および表ＩＩＩおよび表ＩＶに記載のように、アミノアクリジンアンカー部分とエステル基との間のメチレン基の数の増加は、本発明の特定の化合物（ここでマスタードの−Ｃｌ原子は−ＯＨ基で置換される）のジオールアナログに関する、ｐＨ８、３７℃での水溶液に見られる加水分解の量の減少をもたらす。
【００８７】
本発明の化合物の例を以下に示すがこれは例示であり、本発明を制限するものではない。
【００８８】
【化１５】
【００８９】
【化１６】
【００９０】
【化１７】
【００９１】
【化１８】
用途
本発明の化合物の使用例は次のものを含むが、これらに制限されない：固体または溶液形態の本発明の化合物の生体物質への添加（生体物質中に存在する病原体を不活化するため）；本発明の化合物の溶液中での生物学的使用のための物質の浸漬または他の処理（物質の中または上に存在する病原体を不活化するため）；および標的リポソームにおける本発明の化合物の封入（それらの細胞の核酸を損傷させるために特定の細胞に化合物を向けるため）。
【００９２】
本発明の化合物は、特定の条件下で加水分解をするように設計されるが、それらは他の条件下では安定であることに留意すべきである。脆いリンカーおよびエフェクター基にとって保存に用いる特定の状況下で比較的安定であることが望ましい。化合物が保存され得る様式の例は、乾燥固体、少量の水分含有のオイル、凍結した水溶液、凍結した非水性溶液、懸濁液、および脆いリンカーまたはエフェクター基の加水分解を可能にしない溶液、例えば液体非水性溶液を包含するが、これらに制限されない。化合物は０℃以下の温度で（例えばフリーザー中で）、あるいは０℃を越える温度で（例えば、冷蔵庫中または周囲温度で）、貯蔵され得る。化合物は好ましくは、３日〜１年の間、１週間〜１年の間、１ヶ月〜１年の間、３ヶ月〜１年の間、６ヶ月〜１年の間、１週間〜６ヶ月の間、１ヶ月〜６ヶ月の間、３ヶ月〜６ヶ月の間、１週間〜３ヶ月の間、または１ヶ月〜３ヶ月の間の期間、保存条件下で安定である。化合物の安定性は、それらが保存される温度、およびそれらが保存される状態（例えば非水性溶液、乾燥固体）の両方によって決定される。
【００９３】
病原体不活化の条件
生体物質を病原体不活化化合物で処理するための条件は、選択された物質および不活化化合物に基づいて選択され得る。血液製剤のような生体物質の処理のための病原体不活化化合物の代表的な濃度は、約０．１μＭから５ｍＭのオーダーであり、例えば約５００μＭである。例えば、サンプル中に少なくとも約１ ｌｏｇ、または少なくとも約２ ｌｏｇ、または例えば少なくとも約３から６ ｌｏｇの病原体を不活化するのに充分な病原体不活化化合物の濃度が使用され得る。１つの実施態様では、病原体不活化化合物は約５００μＭ以下の濃度で、少なくとも１ ｌｏｇを殺傷し、より好ましくは５００μＭより大きくない濃度で、少なくとも３ ｌｏｇを殺傷する。他の制限のない実施例では、病原体不活化化合物は少なくとも１ ｌｏｇを殺傷し得、好ましくは約０．１μＭから約３ｍＭの濃度で少なくとも６ ｌｏｇを殺傷し得る。
【００９４】
病原体不活化化合物との血液製剤のインキュベーションは、例えば約５分から７２時間またはそれ以上、あるいは約１から４８時間、例えば約１から２４時間、あるいは例えば、約８から２０時間行われ得る。赤血球について、インキュベーションは代表的には約２℃から３７℃の温度で行われ、好ましくは約１８℃から２５℃である。血小板について、温度は好ましくは約２０℃から２４℃である。血漿について、温度は約０℃から６０℃であり得、代表的には約０〜２４℃である。処理されている物質のｐＨは、好ましくは約４から１０で、より好ましくは約６から８である。
【００９５】
本発明のひとつの実施態様は、血液または血液製剤中で病原体を不活化するのに使用する化合物および方法を包含し、そしてこの目的のための好適な一連の保存条件は、便利な保存および保存血での化合物の使用を可能にするそれらの条件である。
【００９６】
物質の中または上での病原体不活化に使用される条件下で、脆いリンカーおよびエフェクター基は加水分解または反応を受ける。脆いリンカーおよびエフェクター基の両方の加水分解は、好ましくは所望の量の病原体不活化が起こり得るのに充分に遅い。病原体不活化に必要な時間は、例えば約５分から７２時間であり得る。
【００９７】
赤血球の処理
好ましくは、病原体不活化化合物を伴う物質を含む赤血球の処理は処理後に赤血球の機能に損傷を与えないか、または赤血球を改変する。赤血球機能に対して実質的に損傷を与える効果の欠如は、赤血球機能の試験に関する当業者に公知の方法で測定され得る。例えば、細胞内ＡＴＰ（アデノシン５’−トリホスフェート）、細胞内２，３−ＤＰＧ（２，３−ジホスホグリセロール）、または細胞外カリウムのような指標のレベルが測定され得、そして未処理のコントロールと比較され得る。さらに、溶血、ｐＨ、ヘマトクリット、ヘモグロビン、浸透圧脆弱性、グルコース消費、および乳酸生成が測定され得る。
【００９８】
ＡＴＰ、２，３−ＤＰＧ、グルコース、ヘモグロビン、溶血、およびカリウムを決定する方法が当該分野で利用可能である。例えば、Ｄａｖｅｙら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，３２：５２５〜５２８（１９９２）を参照のこと（その開示内容は本明細書中で援用される）。赤血球機能を決定する方法はまた、Ｇｒｅｅｎｗａｌｔら、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ，５８：９４〜９９（１９９０）；Ｈｏｇｍａｎら、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ，６５：２７１〜２７８（１９９３）；およびＢｅｕｔｌｅｒら、Ｂｌｏｏｄ，５９巻（１９８２）（その開示内容は本明細書中で参考として援用される）にも記載される。細胞外のカリウムのレベルは、Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｍｏｄｅｌ ６１４Ｋ＋／Ｎａ＋ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）を使用して測定され得る。ｐＨは、Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｍｏｄｅｌ ２３８ Ｂｌｏｏｄ Ｇａｓ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）を用いて測定され得る。
【００９９】
ＩｇＧ、アルブミン、およびＩｇＭのような種の赤血球への結合もまた当該分野で利用可能な方法を使用して測定され得る。分子の赤血球への結合は、例えばアクリジンおよびＩｇＧに対する抗体を使用することで検出され得る。アッセイで使用される抗体は市販で入手され得、または例えばＨａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，「抗体、研究室マニュアル、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ研究所」１９８８年（その開示内容は本明細書中で援用される）に記載されるように、当該分野で利用可能な方法を使用して作製され得る。例えば、抗ＩｇＧはＣａｌｔａｇ，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ；Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯおよびＬａｍｐｉｒｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｐｉｐｅｒｓｖｅｌｌｅ，ＰＡから市販されている。
【０１００】
病原体不活化による赤血球を含む物質の処理方法において、好ましくは細胞外のカリウムのレベルは３倍以下であり、より好ましくは１日後に未処理のコントロールにおいて示される２倍以下の量である。別の実施態様において、好ましくは処理された赤血球の溶血は４℃での２８日の保存後で３％未満であり、より好ましくは４２日の保存後で２％未満であり、そして最も好ましくは４２日の保存後で約１％以下である。
【０１０１】
生体物質
種々の生体物質が病原体不活化化合物によって処理され得る。生体物質は、全血、濃縮赤血球、血小板、および新鮮なまたは凍結した血漿のような血液製剤を包含する。血液製剤はさらに血漿タンパク部分、抗血友病因子（第ＶＩＩＩ因子）、第ＩＸ因子、および第ＩＸ因子複合体、フィブリノーゲン、第ＸＩＩＩ因子、プロトロンビンおよびトロンビン、免疫グロブリン（例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥおよびＩｇＭならびにそれらのフラグメント）、アルブミン、インターフェロン、ならびにリンホカインを包含する。さらに合成血液製剤が考えられる。
【０１０２】
他の生体物質は、ワクチン、タンパク質を産生する組換えＤＮＡ、およびオリゴペプチドリガンドを包含する。また尿、汗、唾液、排泄物、髄液のような臨床サンプルも包含する。さらには合成血液または血液製剤保存媒体を包含する。
【０１０３】
処理後の物質における化合物の濃度の減少
血液製剤のような生体物質における病原体不活化化合物の濃度は処理後に減少され得る。使用され得る方法および装置は、ＰＣＴ ＵＳ９６／０９８４６；１９９７年１月６日に出願された米国出願番号第０８７７９，８３０；および同時出願された１９９８年１月６日出願の、出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／００５３１、代理人整理番号２０００４４０の「血液製剤由来の小有機化合物の還元に関する方法およびデバイス」（これらの各開示内容は本明細書中においてその全てが参考として援用される）に記載される。
【０１０４】
クエンチング（ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ）
別の実施態様では、本発明の化合物はクエンチャーと組み合わせて使用され得る。生体物質における病原体不活化化合物の所望でない副反応をクエンチングする方法は、同時出願された米国仮出願番号第６０／０７０５９７号、１９９８年１月６日出願、代理人整理番号２８２１７３０００６００、「生体物質における病原体不活剤をクエンチングする方法」（この開示内容は本明細書中で援用される）に記載される。同時出願で開示されたものは、求電子基または求電子基を形成し得る官能基を含む、病原体不活化化合物の所望でない副反応をクエンチングするための方法である。この実施態様では、物質は病原体不活化化合物およびクエンチャーによって処理され、ここでクエンチャーは求電子基と共有結合的に反応可能な求核性官能基を含む。好適なクエンチャーは、グルタチオンのようなチオールである。
【実施例】
【０１０５】
以下の特定の実施例には本発明の方法で有用である代表的な化合物の調製方法を例示し、当業者に有用である化合物に関する関連データを提供し、および化合物の有効性が決定される方法を例示するために示され、そしてこれは本発明の範囲を制限すると解釈されるべきものではない。別に記載されなければ、全てのＮＭＲスペクトルをＣＤＣｌ３中でＶａｒｉａｎ ２００ＭＨｚ装置で記録した；化学シフトをテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して報告する。ＩＲスペクトルをＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＦＴＩＲで記録した。ＨＰＬＣを移動相Ａとして５ｍＭのＨ３ＰＯ４水溶液、および移動相Ｂとして５ｍＭのＣＨ３ＣＮを用いるグラジエントモードでＹＭＣ Ｃ８カラムを使用して実施した。サンプルをＤＭＳＯまたはエタノール中で調製し、そして注入前に１５℃以下に保持した。
【０１０６】
表ＩＩは、種々の化合物に使用された化合物番号の命名を示す。
【０１０７】
【表２】
実施例１
β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物ＩＶ，）の合成
工程Ａ． β−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル
Ｎ２下、−１５℃で、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニン（２０．３ｇ，１０７ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（１３．０ｍＬ，１２．０ｇ，１１９ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）攪拌溶液にイソブチルクロロホルメート（１３．９ｍＬ，１４．６ｇ，１０７ｍｍｏｌ）を添加して直ちに白色沈澱物（４−メチルモルフォリン・ＨＣｌ）を生じた。反応混合物を−１５℃で５分間攪拌し、次に反応混合物を、トリエタノールアミン（４８．３ｇ，３２４ｍｍｏｌ）の−１５℃の乾燥ＴＨＦ（１５０ｍＬ）攪拌溶液を含むフラスコに移した。反応混合物を２３℃まで加温し、そしてさらに１．５時間攪拌し、次に減圧濾過によって沈澱物を取り除いた。次いでＴＨＦを減圧下で濾液から除去し、そして残留した粘性のある黄色の油状物を水（５００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５×１５０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下での溶媒の除去によって所望の生成物であるβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルを淡黄色の油状物として２５．８ｇ（７５％）得た。
【０１０８】
【化１９】
工程Ｂ． β−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル
Ｎ２下で、工程Ａからのβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル（２２．７ｇ，７０．９ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１１．１ｇ，１６３ｍｍｏｌ） のアセトニトリル（７０ｍＬ）攪拌溶液を０℃まで冷却した。次いで、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（５３４ｍｇ，３．５４ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物をさらに５分間、０℃で攪拌した。反応混合物を２３℃まで加温し、そして２時間攪拌し、次に得られた白色沈殿物（イミダゾール・ＨＣｌ）を減圧濾過で取り除いた。アセトニトリルを減圧下で濾液から除去し、そして残留した物質を飽和ブライン（６００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下での溶媒の除去によって所望の生成物であるβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステルを黄色の油状物として３５．２ｇ（９０％）得た。
【０１０９】
【化２０】
工程Ｃ． β−アラニン， ２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル
工程Ｂからのβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル（３．０１ｇ，５．４８ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、ニートなトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を添加し、ＣＯ２ガスの放出が起きた。反応混合物を５分間攪拌し、そしてトリフルオロ酢酸を減圧下で取り除いた。残留した物質を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下での溶媒の除去によって所望の生成物であるβ−アラニン， ２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステルを淡黄色の油状物として２．４５ｇ（１００％）得た。
【０１１０】
【化２１】
工程Ｄ． β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル
β−アラニン， ２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル（７３６ｍｇ，１．６４ｍｍｏｌ）をメチル９−メトキシアクリジン−２−カルボキシレート（６６９ｍｇ，２．５０ｍｍｏｌ）と室温で１２．５時間、１０ｍＬのＣＨＣｌ３中で攪拌することで反応させた。次いで沈澱物（アクリドン）を濾別し、そして濾液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）とＣＨＣｌ３（３×３５ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして減圧下での濃縮で１．６１ｇの粘性のある茶色の油状物を得た。得られたジオールの脱保護を、Ｎ２下で３．０ｍＬのＴＨＦに粗中間体を溶解し、そして０℃まで冷却し、ＨＦ／ピリジン（１．０ｍＬ）で処理することによって実施した。溶液を１時間攪拌しながら室温まで加温した。揮発物を減圧下で除去し、そして残留物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）とＣＨＣｌ３（３×３５ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層を乾燥させ、そして濃縮して６４９ｍｇの茶黄色の固体を得た。調製用のＴＣＬ（Ｃ−１８，ＣＨ３ＣＮ）で所望のジオール、β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル（ＨＰＬＣによる純度が＞８０％）を２０％の収率で得た。
【０１１１】
【化２２】
アミンおよびヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
【０１１２】
工程Ｅ β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド
β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルのジクロロ化合物への転換を、Ｐｅｃｋらの方法と同様の方法によって行った（Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９５９， ８１： ３９８４）。工程Ｄからの生成物（４１ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）のニートＳＯＣｌ２（６ｍｌ）中黄色の溶液を室温で２０時間撹拌した。次いでＳＯＣｌ２を減圧で除去し、黄色の固体（ジヒドロクロリド塩）を得た。次いでこの物質を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍｌ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を減圧で除去し、３５．４ｍｇのジクロロ化合物遊離塩基をオレンジ色のガム状で得た。
【０１１３】
【化２３】
他の炭素は観測されなかった。ＨＣｌ塩はエーテル中の１Ｍ ＨＣｌを加えることによってＣＨ２Ｃｌ２から沈澱させ、β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物ＩＶ）を黄色固体として得た（ＨＰＬＣによって８１％純粋であった）。
【０１１４】
β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物Ｖ）を同様の方法で調製した。このように、工程Ｄ中でメチル９−メトキシアクリジン−２−カルボキシレートの代わりに９−メトキシアクリジンを使用して、中間体ジオール（７．１％）を黄色のオイル状で得た（ＨＰＬＣによって７４％純粋であった）。
【０１１５】
【化２４】
アミンおよびヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
【０１１６】
中間体ジオール（３７．３ｍｇ、０．０７９３ｍｍｏｌ）の塩化チオニル（４．０ｍｌ）溶液を２３℃で７．５時間撹拌した。塩化チオニルを減圧で除去し、黄色のオイルを得た。この物質をエタノール（約４ｍＬ）に溶解し、そして溶媒を減圧で除去した。次いでこの物質をＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）に溶解し、そして溶媒を減圧で除去し；この工程を２回繰り返した。次いでこの物質をヘキサン（３×４ｍｌ）を用いて粉末化し、４０ｍｇの生成物（ＨＰＬＣによって４２％純粋であった）を黄色のヒドロスコピックな（ｈｙｄｒｏｓｃｏｐｉｃ）ガラス状固体として得た。飽和ＮａＨＣＯ３とＣＨ２Ｃｌ２との間の分配、続いて合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧で除去することにより、分析目的のために一部の物質を遊離アミンに転換した。
【０１１７】
【化２５】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１１８】
上記手順に従い、しかしＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニンをＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−アミノ酪酸に置き換えて、４−アミノ酪酸Ｎ−［（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＶＩ（ＨＰＬＣによって７８％純粋であった）を調製した。
【０１１９】
【化２６】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１２０】
実施例２
実施例１、工程Ａのトリエタノールアミンを３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）］アミノプロパノールで置換し、次いで工程Ｃから続け、β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシ−アクリジン−９−イル），３−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド、化合物ＶＩＩＩ（ＨＰＬＣによって６３％純粋であった）を調製した。
【０１２１】
【化２７】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１２２】
実施例３
実施例１で合成した化合物は以下の方法によっても調製され得る：
β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物Ｖ）の合成：方法ＩＩ
工程Ａ： β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），メチルエステルヒドロクロリド
９−クロロアクリジン（１１．７ｇ、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｃｏｌｌ． Ｖｏｌ ＩＩＩ， ５７頁）、β−アラニンメチルエステルヒドロクロリド（９．９ｇ）およびナトリウムメトキシド（３．２６ｇ）を混合し、６０ｍＬのメタノールを加えた。混合物をマグネチックスターラーで撹拌し、５．５時間還流した。熱源を取り除き、懸濁液を温時濾過した（≦３５℃）。固体の塩を約１０ｍＬの追加のメタノールですすぎ、合わせた濃緑色の濾液を濃縮し、２１ｇの湿った緑黄色固体を得た。
【０１２３】
固体を３５０ｍＬの沸騰している２−プロパノールに溶解し、室温で結晶化させた。得られた結晶を約１５ｍＬの２−プロパノールおよび１５ｍＬのヘキサンですすぎ、次いで風乾し、１５．５ｇの明るい黄色の生成物、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），メチルエステルヒドロクロリド（収率７８．５％）を得た。
【０１２４】
【化２８】
工程Ｂ： β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド
工程Ａからのβ−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），メチルエステルヒドロクロリド（５．００ｇ）をトルエン（７５０ｍＬ）、Ｎａ２ＣＯ３飽和水溶液（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）の間で分配した。水層をトルエン（３×２５０ｍＬ）を用いて再度抽出し、有機層を合わせ、そしてＮａ２ＣＯ３飽和水溶液（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。ロータリーエバポレーションによってトルエンの体積を約１００ｍＬにまで減じた。次いで、部分的に混和しない系を形成するために、トリエタノールアミン（３０ｍＬ）を加えた。次いでＮａＯＭｅ（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（２ｍＬ）溶液を加えた。室温で撹拌しながらのロータリーエバポレーションによって反応混合物から溶媒を素早く除去した。溶媒を除去した後、反応混合物をさらに１から１．５時間減圧下に置き、シロップ状の溶液を得た。
【０１２５】
粗混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）の間で分配し、過剰のトリエタノールアミンを除去した。ブライン層をＣＨ２Ｃｌ２（５×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで０．５Ｍ ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）で抽出した。酸性水層を合わせ、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）で洗浄した。酸性溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）存在下で粉末Ｋ２ＣＯ３（Ｓ）を用いて塩基性とした。有機層を分離し、水層を再びＣＨ２Ｃｌ２（５×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４（Ｓ）を用いて乾燥し、ストリップし、粗ジオール遊離アミン（５．０２ｇ）を粘着性の黄色のガム状で得た。この物質は、代わりの手順によって実施例１で調製されたものと、ＮＭＲによって同一であった。
【０１２６】
上記粗生成物の一部（０．４００ｇ）をイソプロパノール（１００ｍＬ）と激しく撹拌し、エーテル中１Ｍ ＨＣｌで酸性とした。スラリーを冷却し、最初の沈殿物を廃棄した。溶媒の半分を除去した後に、結晶の２番目の集合体、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリドを明るい黄色の結晶性固体として得た（０．２００ｇ）（ＨＰＬＣにより＞９５％純粋）。
【０１２７】
【化２９】
工程Ｃ： β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド
工程Ｂのβ−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（１１３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（０．５ｍＬ）中の撹拌懸濁液に、ＳＯＣｌ２（０．５ｍＬ）を加えた。生じた黄色の溶液を２３℃で１６時間撹拌し、続いて揮発性物質を減圧で除去した。残余オレンジオイルをＥｔＯＨ（約２ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＨを減圧で除去して黄色の固体を得た。次いでこの物質をヘキサン（２×３ｍＬ）を用いて粉末化した。残留溶媒を減圧で除去し、１２３ｍｇの所望の物質、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（ＨＰＬＣにより９３％純粋）を黄色固体として得た。
【０１２８】
【化３０】
実施例４
β−アラニン，Ｎ−（４−メトキシ−アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＩＸ
１．４ｇ（５．８４ｍｍｏｌ）の４，９−ジメトキシアクリジン、０．８９ｇ（６．４２ｍｍｏｌ）のβ−アラニンメチルエステルヒドロクロリドおよび２０ｍｌのメタノールを混合し、次いでＮ２下で１２時間加熱還流させることによって、β−アラニン，Ｎ−（４−メトキシ−アクリジン−９−イル）、メチルエステルを調製した。次いで反応物を減圧で濃縮し、ＣＨＣｌ３−イソプロパノール（５０ｍｌ、４：１ｖ／ｖ）に溶解し、５０％ＮＨ４ＯＨ（２×２５ｍｌ）およびブライン（１×２５ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、減圧で濃縮して１．２４ｇ（６８％）のメチルエステル（ＨＰＬＣにより＞７４％純粋）を黄色オイルとして得た；Ｒｆ（ＳｉＯ２， エチルアセテート）＝０．２５；ＩＲ（薄いフィルム）：
【０１２９】
【化３１】
これを、実施例３、工程Ｂで記述した条件下でジオールに変換し、６４７ｍｇの黄色オイルを得た。粗混合物のＨＰＬＣ分析により８５％の収率を示した（λ＝２７８ｎｍ）；Ｒｆ（ＳｉＯ２， ２０％メタノール−エチルアセテート）＝０．１７；ＩＲ（薄いフィルム）：
【０１３０】
【化３２】
これを、実施例３、工程Ｃで記述したように塩化チオニルを用いてβ−アラニン，Ｎ−（４−メトキシ−アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリドに変換した。粗生成物のエチルアセテート、続いて１０％メタノール−エチルアセテートを使用したフラッシュ濾過（ＳｉＯ２）により、一部の生成物の見かけのカラム上分解の後に５８ｍｇの黄色オイルを得た；Ｒｆ（ＳｉＯ２， エチルアセテート）＝０．２６；ＩＲ（薄いフィルム）：
【０１３１】
【化３３】
ジヒドロクロリド塩を、反応物を減圧で過剰の塩化チオニルの共沸除去（２×５ｍｌトルエン）を用いた濃縮によって粗生成物の形態で単離し得た。ＨＰＬＣ分析により出発物質の完全な消費および４−メトキシアクリドン（ＲＴ＝２２．３分）が主な不純物であることを示した。
【０１３２】
【化３４】
３−クロロ−９−メトキシ−４−メチルアクリジンからβ−アラニン，Ｎ−（３−クロロ−４−メチルアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物Ｘを同様に調製した。遊離塩基の１Ｈ ＮＭＲ：
【０１３３】
【化３５】
６−クロロ−２，９−ジメトキシアクリジンからβ−アラニン，Ｎ−（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩＩＩを同様に調製した。遊離塩基の１Ｈ ＮＭＲ：
【０１３４】
【化３６】
実施例５
β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩ。
工程Ａ β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル］ エチルエステル
アセトニトリル（１７５ｍＬ）中のβ−アラニンエチルエステルヒドロクロリド（１．９９ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（６．０ｇ、４３．４ｍｍｏｌ）およびヨードエチルトリイソプロピルシリルエーテル（９．４７ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）のスラリーを５〜７日還流した。溶媒の減圧エバポレーションの後、固体をＣＨ２Ｃｌ２を用いて粉末化した。有機層を希Ｎａ２ＣＯ３水溶液、次いでブラインを用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（１：４ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、５．６０ｇのオイル状でβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル］ エチルエステル（８３．１％）を得た。
【０１３５】
【化３７】
工程Ｂ β−アラニン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル
上記工程Ａのβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル］ エチルエステル（５．６０ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（０．５９ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）をエタノール中で撹拌し、３時間還流した。溶媒を除去し、粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２および希ＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層をブラインを用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップしてβ−アラニン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチルを淡黄色オイルとして得た（５．０３ｇ、収率９５．１％）。
【０１３６】
【化３８】
工程Ｃ β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル
上記工程Ｂのβ−アラニン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル（５１．０ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）をＮ２下でＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中で撹拌した。氷浴で冷却しながら、ＳＯＣｌ２（０．５ｍＬ）を滴下し、反応物を２．２５時間撹拌した。反応混合物をストリッピングして、過剰のＳＯＣｌ２を除去した後、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍｌ）を加え、Ｎ２下にしながら溶液を氷浴で冷却した。 ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中９−（３−ヒドロキシ）プロピルアミノ−６−クロロ−２−メトキシ−アクリジン（２９．０ｍｇ、９１．５ｍｍｏｌ）の冷却したスラリーを加えた。０．５時間後、この混合物をＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層をブラインを用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップした。得られたガム状物をヘキサンを用いて粉末化し、ヘキサン抽出物をストリップしてトリイソプロピルシリル保護出発物質および生成物の非常に粗な混合物（５３．５ｍｇ）を得た。
【０１３７】
トリイソプロピルシリル基を除去するために、粗保護ジオールの一部（３３．１ｍｇ）を氷冷ＴＨＦ（１ｍＬ）中で撹拌した。ＨＦ／ピリジン（０．５ｍＬ）の添加の後に、室温で、Ｎ２を充填した風船下で２．５時間混合物を撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配し、有機層を希ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて数回洗浄し、過剰のＨＦ／ピリジンを除去した。ブライン、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を用いた予備的な乾燥の後、溶媒をストリップオフし、粗ジオール（１３．１ｍｇ）を得た。
【０１３８】
これをさらなる粗ジオール（５．０ｍｇ）と混合し、９５ ＣＨ２Ｃｌ２／５ ｉＰＡ／１ ＴＦＡを溶離液として用いてＣ−１８分取ＴＬＣによって精製し、ジオールＴＦＡ塩を得た。塩をＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した後に、有機層をブライン、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップし、ジオールの遊離塩基、β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル（５．０ｍｇ）を得た。
【０１３９】
【化３９】
工程Ｄ β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩ。
【０１４０】
上記によるβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル（４．０ｍｇ、０．００７３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）に溶解し、氷／水浴中で冷却した。氷冷ＳＯＣｌ２（０．１ｍＬ）を加え、反応物を室温で４時間撹拌した。溶媒を除去するために反応混合物をストリップし、ヘキサンを用いて粉末化し、ＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層をブライン、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップした後に、ジクロロ−化合物を黄色のガム状で得た。
【０１４１】
【化４０】
遊離アミンを冷却ＣＨ２Ｃｌ２中で撹拌し、エーテル中１Ｍ ＨＣｌを用いて酸性化し、２、３滴のメタノールを用いてストリップし、所望の化合物、β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］、３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド（２．５ｍｇ）、（３．５ｍｇ、８１％）を黄色固体として得た。
【０１４２】
６−クロロ−９−（３−ヒドロキシ）プロピルアミノ−２−メトキシ−アクリジンの代わりに６−クロロ−９−（２−ヒドロキシ）エチルアミノ−２−メトキシ−アクリジンを使用する以外は上述の工程Ｃと同様の方法で類似のジオールを調製した。
【０１４３】
【化４１】
工程Ｄとの類似によってこれはβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］、２− ［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩＩに転換した。
【０１４４】
【化４２】
実施例６
［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテートヒドロクロリド、化合物ＸＩＶ
工程Ａ：［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテート
メチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテート（２５０ｍｇ、０．８３２ｍｍｏｌ）、トリエタノールアミン（１２ｍＬ）およびエーテル（２ｍＬ）中１Ｍ ＨＣｌのスラリーを１００℃で２時間撹拌した。得られた透明な褐色溶液を室温まで冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて数回すすいだ。無水Ｎａ２ＳＯ４を用いた乾燥の後、溶媒を減圧で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２および１Ｍ ＨＣｌ水溶液の間で分配した。水層をＣＨ２Ｃｌ２を用いて数回すすぎ、次いで有機溶媒の存在下でＫ２ＣＯ３（ｓ）を用いて塩基性とした。中性の生成物を含む有機層を水で数回すすぎ、次いで乾燥し、濃縮した。酸−塩基抽出手順を繰り返して所望の生成物をベージュの固体（８４．３ｍｇ、２４．３％）として得た：
【０１４５】
【化４３】
工程Ｂ：［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテートヒドロクロリド
ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中の上記ジオール（９．８ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）の氷冷混合物に塩化チオニル（０．２ｍＬ）を加え窒素下で室温で一晩撹拌した。得られたスラリーを濃縮し、次いでヘキサンを用いて粉末化し、所望の生成物（６．２ｍｇ、５３．９％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１４６】
【化４４】
実施例７
β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルアミド（化合物ＸＶ）
工程Ａ：２−［Ｎ’，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシエチル）］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチレンジアミン
０℃の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）中Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エタノールアミン（１．２１ｇ、７．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．５７ｍＬ、１．１ｇ、１１ｍｍｏｌ）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（０．６４ｍＬ、０．９５ｇ、８．３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応物を０℃で１時間撹拌し、２３℃まで温め、一晩撹拌した。揮発性物質を減圧で除去し、メシレートを白色固体として得た。ジエタノールアミン（７．２ｍＬ、７．９ｇ、７５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を撹拌しながら６時間７５℃に加熱した。粗反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）およびＣＨＣｌ３（４×２０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を減圧で除去し、１．２１ｇ（６５％）のジオールを濃厚な黄色のオイルとして得た。
【０１４７】
【化４５】
ヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
工程Ｂ：２−［Ｎ’，Ｎ’−ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチレンジアミン
０℃、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）中の工程Ａのジオール（１．２１ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）およびピリジン（１．５９ｍＬ、１．５５ｇ、１９．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（２．２１ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２３℃まで温め、２時間撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（３×２５ｍＬ）、次いでブライン（３×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４を用いて乾燥した。溶媒を減圧で除去し、２．２６ｇ（９７％）の淡黄色オイルを得た。
【０１４８】
【化４６】
工程Ｃ：２−［Ｎ，Ｎ−ビス（２，ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）］−エチレンジアミン
工程Ｂの保護アミン（４．２４ｇ、８．８９ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、２３℃で、５ｍＬのトリフルオロ酢酸を加えた。反応混合物を２３℃で１５分撹拌し、続いてトリフルオロ酢酸を減圧で除去した。粗生成物を２Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３×３５ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を減圧で除去し、１．７６ｇ（５３％）の黄色オイルを得た。
【０１４９】
【化４７】
工程Ｄ β−４アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルアミド
３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノプロパン酸（８２２．０ｍｇ、４．３４ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（４４２．０ｍｇ、４．３７ｍｍｏｌ）の１４ｍＬ乾燥ＴＨＦ溶液に−１５℃でイソブチルクロロホルメート（０．５３ｍＬ、０．５６ｇ、４．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１分間ー１５℃で撹拌し、続いて工程Ｃからのアミン（１．７２ｇ、４．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３℃に加温し、そして１時間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、沈殿物をＴＨＦ（５ｍＬ）で洗浄し、そして濾液を減圧濃縮した。残った物質を２Ｎ ＮａＯＨ（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して２．２５ｇの茶色がかった黄色のガムを得た。中圧液体クロマトグラフィー（シリカゲル、１：１のＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ）で粗生成物（２．２５ｇ）を精製し、淡黄色オイル６２７．０ｍｇ（２６％）を得た。
【０１５０】
【化４８】
アミドおよびカルバメートのプロトンは観察されなかった。
【０１５１】
工程Ｅ β−４アラニン，２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルアミド
工程Ｄ（６２７．０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）で生成した保護アミンを２３℃でトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を５分間（ＣＯ２の発生が終わるまで）撹拌し、続いて減圧下でトリフルオロ酢酸を除去した。残った物質を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧除去して淡黄色オイル２０３．４ｍｇ（４０％）を得た。
【０１５２】
工程Ｆ β−４アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルアミド
工程Ｅからの粗製アミン（２０３．４ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、９−メトキシアクリジン（９６．８ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）およびメタノール（１０ｍＬ）の混合物を４時間加熱還流した。反応混合物を２３℃に冷却し、そしてさらに２．５日間撹拌した。メタノールを減圧除去し、そして残った物質を２Ｎ ＮａＯＨ（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧除去して黄色オイル６９．６ｍｇを得た。ＴＬＣ（シリカゲル、１：１のＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ）で粗生成物（６９．６ｍｇ）を精製し、黄色オイル２３．４ｍｇ（８．３％）を得た。
【０１５３】
【化４９】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１５４】
【化５０】
工程Ｇ β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルアミド二塩酸塩
工程Ｆ（２２．０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）からのビス−保護基ジオールのイソプロパノール（１．０ｍＬ）撹拌溶液に５〜６Ｎ ＨＣｌ／イソプロパノール溶液（０．０５ｍＬ）を２３℃で添加した。反応混合物を２３℃で１７時間撹拌し、そして生じた黄色沈殿物を減圧濾過で集めた。この黄色固体を１．０ｍＬのイソプロパノールでさらにリンスした。残っているイソプロパノールを減圧除去（一晩）し、黄色固体としてジオール二塩酸塩１１．４ｍｇ（６９％）を得た。
【０１５５】
【化５１】
アミド、アミン、ヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
工程Ｈ β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルアミド二塩酸塩
工程Ｇ（１１．４ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）からのジオールのＣＨ３ＣＮ（１．０ｍＬ）撹拌懸濁液に２３℃でＳＯＣｌ２（０．１２ｍＬ、２００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３℃で１５分間撹拌し、そして溶液を５０℃まで３．５時間加熱した。生じた黄色沈殿物を減圧濾過で集め、ＣＨ３ＣＮ（３×１．０ｍＬ）でリンスし、減圧乾燥して、黄色粉末８．３ｍｇ（６７％）を得た（ＨＰＬＣにより９５％の純度）。
【０１５６】
【化５２】
アミドおよびアミンのプロトンは観測されなかった。
【０１５７】
実施例８
脆い化合物の加水分解
脆いリンカー中のエステル基（「順方向」および「逆方向」エステル）に組み込む脆い化合物について、モデル化合物をエステル加水分解の量を決定するために研究した。
【０１５８】
反応は、
ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ→ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ２Ｈ ＋ ＨＯ−Ｒ
（「順方向エステル」） （「アクリジン酸」）
ここでＡｃｒＮＨは、以下の表で示された置換基を有する９−アミノアクリジンを指し、そしてｎおよびＲは示されたものを研究した。表ＩＩＩはエステルの加水分解の速度増強を示し、エステル連結がアクリジン環とアルキルアミノ基との間に、近接して位置する。加水分解速度は、アクリジン部分がエステルの酸末端またはアルコール末端に位置しているかにかかわらず急速である。
【０１５９】
【表３】
以下の反応に関して
ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ→ ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ ＋ ＨＯＣ（＝Ｏ）−Ｒ
（「逆方向エステル」） （「アクリジンアルコール」）
ここで、ＡｃｒＮＨは、以下の表で示された置換基を有する９−アミノアクリジンを指し、そしてｎおよびＲは表に示され、以下の結果が得られた：
【０１６０】
【表４】
ｐＨ３において、表ＩＩＩおよび表ＩＶの全ての化合物が１００分における１％以下の加水分解を示した。
【０１６１】
マスタード化合物は、多数の分解経路が同時に起こるので、同じ様式で評価できない。それにもかかわらず、化合物ＶＩＩＩを表ＩＩＩおよび表ＩＶにおいて同じ条件下でインキュベートする場合、アクリジン酸は、長いインキュベーション時間後の主生成物（９５％以上）であり、そして４０％は１００分において形成される。これは、類似ジオール（１００分で５７％の加水分解）についての表の記述と比較して好ましい。
【０１６２】
エステル連結の加水分解速度は９−アミノアクリジン部分とエステル基との間のリンカーアームの長さに対して逆に変化する（表ＩＩＩおよび表ＩＶにおいて、ｎが増加するにつれて１００分における加水分解の量が減少する）ことが表ＩＩＩおよび表ＩＶのデータから理解される。これは、化合物の加水分解速度を調整する方法を提供する。リンカーの切断を調整するこの能力は、化合物の反応性を、所望されるような種々の用途について調整し得る。
【０１６３】
物質
以下の物質を以下の実施例で使用した：
Ａｄｓｏｌは、Ｂａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｃｏｒｐ．， Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ，ＩＬから市販されているが、ここでおよび以下の実験に使用されるＡｄｓｏｌは以下の混合物を滅菌濾過することによって作製した：蒸留水１リットル中の２２ｇグルコース、９ｇＮａＣｌ、７．５ｇマンニトール、および０．２７ｇアデニン。
【０１６４】
キナクリンマスタードをＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯから入手した。
【０１６５】
全ての血液をＳａｃｒａｍｅｎｔｏ Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ ＣＡ）から入手した。
【０１６６】
実施例９
水疱性口内炎ウィルス（ＶＳＶ）の不活性化
各化合物の保存溶液（代表的に１０〜３０ｍＭ）を、前もって２ｍＭ Ｈ３ＰＯ４で酸性化された血液貯蔵生理食塩水に適量の物質を溶解することによって調製し、次いで１ｍＬアリコート中ですばやく凍結した。使用する際、アリコートを１０℃以下まで加温し、そして１時間以内に使用した。
【０１６７】
濃縮赤血球（ＰＲＢＣ）の調製のために、全血を測定したＨｃｔとともに、６分間３８００ｒｐｍで遠心分離する。上清血漿を除去し、測定する。Ａｄｓｏｌを６０％ＨｃｔとともにＰＲＢＣを供給するために添加する。血漿濃度は１５〜２０％である。
【０１６８】
ＶＳＶ（保存溶液、約１０９ｐｆｕ／ｍＬをＡＴＣＣ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから得た）を組織培養培地（１０％ＮＣＳを有するＤＭＥＭ）で、または２ｍＬの滅菌したｏ−リングチューブにアリコートにした（ａｌｉｑｕｏｔｅｄ）（１ｍＬ）試験培地を提供するＰＢＲＣで、１：１０に希釈する。
【０１６９】
各チューブに、１０〜３００μＭの試験化合物濃度を提供するのに十分な試験化合物溶液を添加する。各サンプルを、混合物を数回十分にピペッティングすることによりすばやく混合する。懸濁液を４時間周囲温度でインキュベートする。ウィルスの力価をＢＨＫ（乳児（ｂａｂｙ）ハムスター腎臓）宿主細胞の処理した培地でのインキュベーションの後に確かめた。ＰＲＢＣは上清単独よりもむしろ直接使用した。ウィルスの死滅は細胞培養のプラークの出現に反比例した。処理していない試験培地の力価と処理した試験サンプルの力価との間の相違は、その濃度での化合物に対する死滅のｌｏｇを提供する。検出限界は１０１．４ｐｆｕ／ｍＬである。
【０１７０】
組織培養培地においてキナクリンマスタード（ＱＭ）、および化合物ＩＶ、ＶＩ、ＸＩ、ＶＩＩおよびはＶＩＩＩは、５０μＭより少ない試験化合物でＶＳＶの３ｌｏｇより大きく不活性化した。化合物ＸＩＩは、約２００μＭで２ｌｏｇを不活性化した。この化合物はエステル加水分解に関して特に不安定であると考えられる。実施例８、表ＩＶで最初の欄に記載されるように、相当するジオール化合物（β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，２−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］エチルエステル）は、１００分後、ｐＨ８、３７℃で９９％加水分解された。マスタード化合物はまた、急速な加水分解をうけた。これは、核酸に分子のエフェクター部分を向かわせるアンカー部分の重要性、およびこれらが実際の使用条件下で有効であるように９−アミノアクリジンクラスの化合物の反応性を調整することの重要性を例示する。記述された不活性化のプロトコルで、化合物ＸＩＩの加水分解は不活性化で競合的であると考えられる。
【０１７１】
ＰＲＢＣにおいて、ＱＭおよび化合物ＩＶ、ＶＩ、ＶＩＩＩ、Ｖ、およびＸＩＩＩは１５０μＭより少ない試験化合物でＶＳＶの２ｌｏｇより大きく不活性化した。
【０１７２】
実施例１０
Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの不活性化
ＰＲＢＣおよび保存溶液を実施例９のＶＳＶのように調製した。
【０１７３】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ（Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ，ＣＡ）を３７℃で一晩振盪器上でＬＢ−ブロス中で培養する。一部（１０ｍＬ）を１５ｍＬコニカルチューブ中で１０分間２５００ｒｐｍで遠心分離する。そのペレットを約１０９バクテリア／ｍＬを提供するようにＡｄｓｏｌ １ｍＬ中で再懸濁する。力価を測定するために、光学密度をＡｄｓｏｌで１：１００に希釈して測定した（１０８バクテリア／ｍＬでＯＤ６１０＝０．２）。次いで、細菌保存溶液を滅菌した２ｍＬのｏ−リングチューブにアリコートにした（１ｍＬ）試験培地を提供するために生理食塩水またはＰＲＢＣ中に１：１００に希釈する。
【０１７４】
各チューブに、１０〜３００μＭの試験化合物濃度を提供するのに十分な量の試験化合物溶液を添加する。各サンプルを、混合物を数回、十分にピペッティングすることによりすばやく混合する。次いで、それを２時間周囲温度でインキュベートし、次いで１０−１希釈から始めて、つづけて１０−８希釈まで１００μＬのサンプルで開始するＬＢ−アガー上にプレーティングする。プレートを３７℃で一晩インキュベートし、そしてコロニーをカウントする。処理していない試験培地の力価と処理したサンプルのものとの相違は、その濃度での化合物に関する死滅のｌｏｇを提供する。検出限界は１０バクテリア／ｍＬである。
【０１７５】
生理食塩水において、キナクリンマスタード（ＱＭ）および化合物ＩＶ、ＶＩ、ＶＩＩＩ、Ｖ、ＩＸ、およびＸは、２００μＭ以下の濃度でＹｅｒｓｉｎｉａを２ｌｏｇより強く不活性化する。
【０１７６】
実施例１１
本発明の化合物の導入後の血液機能アッセイ
本発明の化合物の１つの考えられる使用は、輸血を意図される血液または血液製剤に１つ以上の本発明の化合物の導入を含む。血液または血液製剤は化合物での処置後、輸血に適したままでなければならない。赤血球機能における化合物の効果を評価するために、化合物は以下の記述のように試験された。
【０１７７】
５０％ヘマトクリット（Ｈｃｔ）を有する濃縮赤血球を２５００ｒｐｍで６分間公知のＨｃｔと全血を遠心することによって調製する。上清を除去し、そして測定する。懸濁液を所望のＨｃｔを達成するために十分な量のＡｄｓｏｌで希釈する。
【０１７８】
１．５ｍＬのＰＲＢＣを各２ｍＬのｏ−リングチューブに入れ、そして十分な試験化合物の保存溶液を所望の濃度を達成するために添加する。サンプルを４時間周囲温度でインキュベートし、次いで４℃で一晩保存する。溶血はＨｏｇｍａｎら，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，３１：２６−２９（１９９１）の記述のように決定される。
【０１７９】
溶解標準を、２工程で水を用いてインキュベートした混合物１０μＭを希釈することによって各サンプルについてに調製し、最終的に１：４０００の希釈を与える。
【０１８０】
アッセイに関して、サンプルを４℃での保存から取り出し、そして１５分間未満加温した。簡単にボルテックスして混合した後、アリコートを取り除き、そして２分間１４０００ｒｐｍで遠心した。上清を除去し、そして１０分間１４０００ｒｐｍで遠心した。上清を除去し、そして水で必要とされるだけ希釈した。溶解標準および希釈した上清の４１４ｎｍでの吸収を、ブランクの水に対して読みとった。溶血のパーセントは以下のように算出された：
（１００％−５０％Ｈｃｔ）×（サンプルのＡ４１４×希釈因子）／（溶解標準のＡ４１４×４０００）
サンプルのＡ４１４は、本発明の化合物の存在によるいかなる吸収についても訂正されていない。その結果を表Ｖａに示す。
【０１８１】
【表５ａ】
＊ＢＢＳ＝血液保存生理食塩水
＊＊ＡＢＢＳ＝酸性血液保存生理食塩水
＊＊＊ＱＭ＝キナクリンマスタード。
【０１８２】
細胞外カリウムをＣｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｍｏｄｅｌ ６１４ Ｋ＋／Ｎａ＋ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）を用いて測定した。ＡＴＰをＳｉｇｍａ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ Ｎｏ．３６６（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を用いて測定した。
【０１８３】
表Ｖｂはその実験において未処理ＰＲＢＣサンプルのコントロール値に対する細胞外カリウムの相対値を示す。例えば、相対値１．０３は処理サンプルが未処理コントロールより３％高い細胞外カリウム濃度を有することを意味した。
【０１８４】
【表５ｂ】
＊［Ｋ＋］（処理）／［Ｋ＋］（未処理）。
【０１８５】
表Ｖｃはその実験において未処理ＰＲＢＣサンプルのコントロール値に対する相対的ＡＴＰ値を示す。例えば、相対値１．０３は処理サンプルが未処理コントロールより３％高いＡＴＰを有することを意味した。
【０１８６】
【表５ｃ】
＊［ＡＴＰ］（処理）／［ＡＴＰ］（未処理）。
【０１８７】
実施例１２
本発明の化合物によるＨＩＶの不活性化
ＴＣ培地中の細胞結合ＨＩＶ（Ｐｏｐｏｖｉｃら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２４：４９７（１９８４））：おおよそ１０６ｐｆｕ／ｍＬ以上の力価で懸濁液を提供するために、 Ｈ９−ＩＩＩｂ細胞をＴＣ培地中で懸濁する。１５ｍＬコニカルチューブ中の試験培地の２ｍＬのアリコートに、活性物質の所望の濃度を達成するために十分な量の試験化合物溶液を添加する。懸濁液を数回、十分にピペッティングすることによってすぐに混合し、次いで簡単にボルテックスする。サンプルを２〜４時間周囲温度でインキュベートし、次いで遠心分離する。ペレットを１ｍＬのプラークアッセイ希釈剤で再懸濁し、次いですばやく−８０℃で凍結し、そしてマイクロプラークアッセイによって滴定する。（Ｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏ．，２８：２０３０（１９９０））。
【０１８８】
化合物キナクリンマスタード、ＩＶおよびＶＩは、２５μＭ以下の試験化合物で３ｌｏｇより多いＨＩＶを不活性化した。
【０１８９】
ＰＲＢＣ中の細胞結合ＨＩＶ：ＰＲＢＣ中でアッセイするために、濃縮細胞をＶＳＶアッセイで記述したように調製する。ＨＩＶ９−ＩＩＩｂ細胞を遠心分離した細胞を希釈する前にＡｄｓｏｌに添加する。生じた懸濁液は全ての物質を十分ピペッティングすることによって混合する。試験化合物のインキュベーション終了後、サンプルを５μＬのヘパリンを含む３ｍＬの１：１の血漿：ＤＭＥＭ溶液で希釈する。次いで、感染した細胞をｆｙｃｏｌ−ｈｙｐａｑｕｅの勾配を用いて単離し、１ｍＬの希釈剤で再懸濁し、そして後の滴定のために凍結する。
【０１９０】
化合物キナクリンマスタード、ＶＩおよびＶは、２００μＭ以下の試験化合物で３ｌｏｇより多いＨＩＶを不活性化した。
【０１９１】
ＰＲＢＣ中の細胞フリーＨＩＶ：プロトコルは、調製後のＰＲＢＣに細胞フリーＨＩＶを直接的に加えること以外は上記と同様である。インキュベーション後、培地を遠心分離し、そして上清を後の滴定のために凍結する。
【０１９２】
化合物キナクリンマスタード、ＩＶ、ＶおよびＶＩは、１００μＭ以下の試験化合物で３ｌｏｇより多いＨＩＶを不活性化した。
【０１９３】
前述の発明は、明瞭性および理解するための例証および例示よっていくつか詳細に記載されたが、特定の変化および改変が実際的であり得ることが当業者に明白である。従って、記載および実施例は本発明の範囲を限定するように解釈されるべきではなく、添付の請求の範囲によって記述される。米国特許番号第５，５５９，２５０号および５，３９９，７１９号の全ては、本明細書において参考として援用される。本明細書で引用した他の全ての特許および文献は、本明細書中において参考として援用される。
【技術分野】
【０００１】
関連出願の引用
本願は、米国仮出願番号第６０／０４３，６９６号（１９９７年４月１５日出願）の利益を請求し、この開示は本明細書中で参考として援用される。
【０００２】
本願はまた、米国特許出願番号第０８／７７９，８８５号の一部継続出願（１９９７年１月６日出願）であり；および米国特許出願番号第０８／７７９，８３０号の一部継続出願（１９９７年１月６日出願）であり、これらの開示は本明細書中で参考として援用される。
【０００３】
連邦委託研究のもとでなされた発明に対する権利の記載
本発明は、ＮＨＬＢＩのＧｒａｎｔ １−ＲＯ１−ＨＬ４１２２１のもと、米国政府の支援によってなされた。米国政府は本発明において特定の権利を有する。
【０００４】
技術分野
本発明は、物質（例えば、血液製剤）の病原体不活化に有用な化合物、およびこの化合物の使用法に関する。
【背景技術】
【０００５】
背景技術
血液製剤および他の生体物質による疾患の伝染は、重大な健康問題のままである。血液ドナーのスクリーニングおよび血液試験において有意な進歩が生じたが、Ｂ型肝炎（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）、およびヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、低レベルのウイルスまたはウイルス抗体により、試験の間、血液製剤における検出から逃れ得る。ウイルスの危険性に加え、輸液における使用が意図される、血液中の細菌および原生動物の存在をスクリーニングするための認可された試験は、現在ない。また、今までは未知の病原体が血液供給において流行し得、そして疾患伝染の恐れを示し得るという危険も存在し、これは実は、血液の輸液を介したＨＩＶ伝染の危険認識前に起こっていた。
【０００６】
検査室作業者の血液または他の体液に対する曝露もまた、健康被害を示す。疾患管理センター（ｔｈｅ Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）の推定（「Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ Ｖｉｒｕｓ ａｎｄ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ Ｖｉｒｕｓ ｔｏ Ｈｅａｌｔｈ−Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｐｕｂｌｉｃ−Ｓａｆｅｔｙ Ｗｏｒｋｅｒｓ」、Ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｗｅｅｋｌｙ Ｒｅｐｏｒｔ、第３８巻、第Ｓ−６号、１９８９年６月）によると１２，０００人のヘルスケア作業者（彼らの仕事には血液への曝露が含まれる）が毎年Ｂ型肝炎ウイルスに感染している。
【０００７】
ドナーのスクリーニングおよび血液試験を補完し、輸液による疾患の発生率を低下させるいくつかの方法が提案されている。血液製剤の臨床使用の前に病原体を不活化するために、化学薬剤の血液または血漿への導入が示唆されている。強力な殺ウイルス剤の研究で、ナイトロジェンマスタード（ＣＨ３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２）を血液成分に添加した。しかしながら、研究されたウイルスの１つを不活化するのに必要な濃度で、実質的な溶血が発生した。これはナイトロジェンマスタードが血液での使用に不適切であることを示している。非特許文献１。
【０００８】
ウイルスを不活化するための「溶媒／界面活性剤」（Ｓ／Ｄ）法が、非特許文献２および非特許文献３に記載されている。この方法は、１％トリ（ｎ−ブチル）ホスフェートおよび１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を、３０℃で４時間利用し、新鮮凍結血漿中のウイルスを不活化する。非特許文献４（１％トリ（ｎ−ブチル）ホスフェートおよび１％オクトキシノール−９を使用し、新鮮凍結血漿中のウイルスを不活化した）。血液中のウイルスを不活化する別の方法には、フェノールまたはホルムアルデヒドの血液への添加が挙げられる。特許文献１。しかしながら、溶媒／界面活性剤法およびフェノール／ホルムアルデヒド法は両方とも、血液製剤の臨床使用の前に化学添加剤の除去を必要とする。
【０００９】
光活性化剤を用いた血液製剤中の病原体の不活化もまた、記載されている；例えば、非特許文献５を参照のこと。しかしながら、いくつかの領域のヘモグロビンによる、紫外および可視スペクトルにおける吸光によって、光処理は、その適用において、赤血球を含む物質に限定される。赤血球の光処理には、いくつかの様式で細胞を変化させるいくらかの徴候もまた存在する；非特許文献６を参照のこと。
【００１０】
従って、血液、血液由来の製品、および他の生体物質を処理する化合物および方法（これは製品または物質中に存在する病原体を、製品または物質をそれらの意図される利用に不適切でないように、不活化する）が必要となっている。使用前に生体物質から除去される必要のない組成物が特に有用である。なぜなら、組成物を除去するのに必要な装置および供給品が除去され、生体物質の取扱いコストを減少させるからである。しかしながら、組成物が生体物質に残存する場合、生体物質を意図される目的に用いるときに危険の種となってはならないという点で、これは組成物にさらなる要件を生じる。例えば、血液サンプル中の病原体を不活化する高毒性化合物は、輸液目的の血液の使用を不可能にする（しかし、血液サンプルはまだ検査分析には適し得るが）。
【００１１】
本発明の１つの意図は、生体物質中の病原体を、物質を意図する目的に不適切でないように、不活化するための組成物および組成物の使用法を提供することである。これが達成され得る方法の例としては、以下のものが含まれるが、これらに限定されない：生体物質のエキソビボまたはインビトロ処理において化合物を使用し、次いで、物質の使用前に化合物を除去する工程；たとえ物質中に残存するとしても、物質を意図される使用に不適切なものにしない組成物の使用によって；あるいは、物質中の病原体不活化後に製品に分解する組成物の使用によって（ここで分解生成物は、物質をその意図する使用に不適切でないように、物質中に残存し得る）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許第４，８３３，１６５号明細書
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】ＬｏＧｒｉｐｐｏら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｉｘｔｈ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ， Ｂｉｂｌｉｏｔｈｅｃａ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ （Ｈｏｌｌａｎｄｅｒ編）， １９５８， ２２５−２３０頁
【非特許文献２】Ｈｏｒｏｗｉｔｚら、Ｂｌｏｏｄ ７９：８２６ （１９９２）
【非特許文献３】Ｈｏｒｏｗｉｔｚら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ２５：５１６ （１９８５）
【非特許文献４】Ｐｉｑｕｅｔら、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ ６３：２５１ （１９９２）
【非特許文献５】Ｗａｇｎｅｒら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ， ３４：５２１ （１９９４）
【非特許文献６】Ｗａｇｎｅｒら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ３３：３０ （１９９３）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
従って、本発明の目的は物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、ここでそのような化合物は以下を含有する：核酸結合部分；核酸との共有結合の形成を可能にする、エフェクター部分；そして核酸部分およびエフェクター部分を共有連結している（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｌｉｎｋｉｎｇ）脆い（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）リンカー。ここで、その物質を意図した目的に不適切にしない条件下で、もはや核酸結合部分およびエフェクター部分が共有連結しないように、脆いリンカーが分解する。
【００１５】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、その化合物の核酸結合部分はアクリジン、アクリジン誘導体、ソラレン、イソソラレンおよびソラレン誘導体からなる群より選択される。
【００１６】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、ここで、脆いリンカーが、本明細書中で定義される通りの順方向（ｆｏｒｗａｒｄ）エステル、逆方向（ｒｅｖｅｒｓｅ）エステル、順方向アミド、逆方向アミド、順方向チオエステル、逆方向チオエステル、順方向および逆方向チオノエステル、順方向および逆方向ジチオ酸、スルフェート、順方向および逆方向スルホネート、ホスフェートさらに順方向および逆方向ホスホネートの基からなる群から選択される官能性単位から構成される。
【００１７】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、その化合物のエフェクター基がアルキル化試薬の官能性単位を含む。
【００１８】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための化合物を提供することであり、ここで、エフェクター基が、マスタード（ｍｕｓｔａｒｄ）基、マスタード基等価物、エポキシド、アルデヒドおよびホルムアルデヒドシントンからなる群より選択される官能性単位を含む。
【００１９】
本発明のさらなる目的は、物質中の病原体を不活化するための以下の式の化合物ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を提供することである：
【００２０】
【化１】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の少なくとも１つが以下で定義される通りの−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００２１】
【化２】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇはそれぞれ独立して−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００２２】
本発明の他の目的は、以下の式の化合物ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を提供することである：
【００２３】
【化３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは独立して−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００２４】
【化４】
からなる群より独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００２５】
本発明の他の目的は、以下の式の化合物ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を提供することである：
【００２６】
【化５】
ここでＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８のうち少なくとも１つが−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００２７】
【化６】
からなる群より独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００２８】
本発明のさらに他の目的は、以下の式の化合物およびその全ての塩を提供することである：β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル；４−アミノ酪酸 Ｎ−［（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル；５−アミノ吉草酸 Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル；β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），３−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］プロピルエステル；β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル；β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，２−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］エチルエステル；［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテート；およびβ−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル。
【００２９】
生物学的な物質のような物質中の病原体を不活化するための方法が提供され、この方法は物質へ本発明の化合物を１つ以上添加する工程；および該物質をインキュベートする工程を包含する。その化合物が、例えば、１μＭと５００μＭとの間の濃度（または１つより多い化合物を使用する場合、全化合物の全濃度）を有する最終溶液の形態で物質へ添加され得る。処理され得る生物学的物質には、ヒト源または他の哺乳動物源または脊椎動物源に由来する血液、血液製剤、血漿、血小板製剤、赤血球、濃縮赤血球、血清、脳脊髄液、唾液、尿、汗、便、精液、乳、組織試料および均質化組織試料が挙げられる。
【００３０】
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）物質中の病原体を不活化するための化合物であって、以下を含有する化合物：
核酸結合部分；
核酸との共有結合の形成を可能にする、エフェクター部分；および
該核酸部分と該エフェクター部分とを共有連結している（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｌｉｎｋｉｎｇ）脆い（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ）リンカー；
ここで、該物質をその意図した目的に不適切にしない条件下で、もはや該核酸結合部分および該エフェクター部分が共有連結しないように、該脆いリンカーが分解する。
【００３１】
（項目２）前記核酸結合部分が、アクリジン、アクリジン誘導体、ソラレン、イソソラレンおよびソラレン誘導体からなる群より選択される、項目１に記載の化合物。
【００３２】
（項目３）項目１に記載の化合物であって、ここで前記脆いリンカーが、順方向（ｆｏｒｗａｒｄ）エステル、逆方向（ｒｅｖｅｒｓｅ）エステル、順方向アミド、逆方向アミド、順方向チオエステル、逆方向チオエステル、順方向および逆方向チオノエステル、順方向および逆方向ジチオ酸、スルフェート、順方向および逆方向スルホネート、ホスフェート、および順方向および逆方向ホスホネートの基からなる群から選択される官能性単位から構成される、化合物。
【００３３】
（項目４）エフェクター基が、アルキル化試薬である官能性単位を含む、項目１に記載の化合物。
【００３４】
（項目５）項目１に記載の化合物であって、ここで前記エフェクター基が、マスタード（ｍｕｓｔａｒｄ）基、マスタード基等価物、エポキシド、アルデヒドおよびホルムアルデヒドシントンからなる群より選択される官能性単位を含む、化合物。
【００３５】
（項目６）以下の式を含有する化合物、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）：
【００３６】
【化５３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３，ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり、
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして、
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり、
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００３７】
【化５４】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは独立して−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００３８】
（項目７）以下の式を有する化合物、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）：
【００３９】
【化５５】
ここでＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８のうち少なくとも１つが−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００４０】
【化５６】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
（項目８）以下の式を有する化合物：
【００４１】
【化５７】
およびその全ての塩。
（項目９）以下の式を有する化合物：
【００４２】
【化５８】
およびその全ての塩。
（項目１０）以下の式を有する化合物：
【００４３】
【化５９】
およびその全ての塩。
（項目１１）以下の式を有する化合物：
【００４４】
【化６０】
およびその全ての塩。
（項目１２）以下の式を有する化合物：
【００４５】
【化６１】
およびその全ての塩。
（項目１３）以下の式を有する化合物：
【００４６】
【化６２】
およびその全ての塩。
（項目１４）以下の式を有する化合物：
【００４７】
【化６３】
およびその全ての塩。
（項目１５）以下の式を有する化合物：
【００４８】
【化６４】
およびその全ての塩。
（項目１６）物質中の病原体を不活化するための方法であって、該物質へ項目１に記載の化合物を添加する工程；および該物質をインキュベートする工程を包含する、方法。
（項目１７）前記化合物が１μＭと５００μＭとの間の濃度を有する最終溶液を形成するために前記物質へ添加される、項目１６に記載の方法。
（項目１８）前記物質が生物学的な物質である、項目１６に記載の方法。
（項目１９）項目１８に記載の方法であって、ここで前記生物学的な物質が以下からなる群から選択される組成物を含む、方法：血液、血液製剤、血漿、血小板製剤、赤血球、濃縮赤血球、血清、汗、脳脊髄液、唾液、尿、便、精液、乳、組織試料、均質化組織試料、細胞培養培地、細胞培養物、ウイルス培養物および生存している生物由来の物質を配合した培養物。
（項目２０）前記物質が血液製剤を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２１）前記物質が赤血球を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２２）項目１６に記載の方法であって、ここで該方法が、少なくとも約２ログ（２ ｌｏｇ ｏｆ）の前記物質中の病原体を不活性にするための有効量の前記化合物を前記物質へ添加する工程を包含する、方法。
（項目２３）インキュベーション時間が少なくとも約１〜４８時間である、項目１６に記載の方法。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
（発明の詳細な説明）
本発明は物質中に見出される病原体の不活化、特に血液または他の体液のような生体物質に見出される病原体の不活化に有用な化合物を提供する。本発明はまた、物質中の病原体を不活化するこのような化合物の使用法を提供する。本発明はまた、生物学的使用のための物質中または物質に見出される病原体を不活化する工程を提供する。この化合物はインビトロおよびエキソビボで用いられ得る。生体物質または生物学的使用のための物質は、インビトロ、インビボ、またはエキソビボでの使用が意図され得る。
【００５０】
本化合物は核酸との反応によって、病原体を不活化するために設計される。水溶液中、適切なｐＨ値において、本化合物は、核酸に結合し核酸と反応し得る間の活性期間を有する。この期間の後、化合物は製品に分解し、これはもはや核酸と結合し得ないしまた核酸と反応し得ない。
【００５１】
本化合物の化学的機構は、アンカー（脆いリンカーに共有結合した）として、広範に記載され得、これはエフェクターに共有結合している。「アンカー」は核酸生体高分子（ＤＮＡまたはＲＮＡ）に非共有結合的に結合する部分として定義される。「エフェクター」は、核酸との共有結合を形成する機構により、核酸と反応する部分として定義される。「脆いリンカー」は、アンカーとエフェクターとを共有連結するよう働き、特定の条件下で分解し、その結果、アンカーおよびエフェクターはもはや共有連結されない、部分として定義される。アンカー−脆いリンカー−エフェクター配列は、本化合物が核酸に特異的に（アンカーの結合能によって）結合することを可能にする。このことはエフェクターを核酸との反応に近づける。
【００５２】
本化合物は、物質中、特に血液および他の体液のような生体物質中に見出される病原体の不活化に有用である。細胞内および細胞外およびまたは他の病原体物質が不活化され得る。例えば、本発明の化合物を、病原体含有赤血球組成物と生理的ｐＨで組み合わせた場合、化合物のエフェクター部分は病原体核酸と反応する。核酸と反応しないエフェクター部分は次第に溶媒によって加水分解される。脆いリンカーの加水分解は、エフェクター−核酸反応およびエフェクター加水分解と同時に起こる。脆いリンカーが、物質中の病原体の不活化を可能にするのに十分な程、ゆっくりとした速度で分解するのが望ましい；つまり、脆いリンカーの分解速度は、化合物が核酸と反応する速度よりも遅い。十分な量の時間が経過した後、化合物はアンカー（これはまた、脆いリンカーのフラグメントを有し得る）およびエフェクター−核酸分解生成物（ここで、脆いリンカーのフラグメントはまた、エフェクターに結合したままであり得る）に分解されるか、またはアンカー（これはまた、脆いリンカーのフラグメントを有し得る）および加水分解されたエフェクター分解生成物（ここで、脆いリンカーのフラグメントはまた、エフェクターのいずれにも結合されたままであり得る）に分解される。脆いリンカーのさらなるフラグメントはまた、アンカーまたはエフェクターのいずれにも結合されたままでない化合物の分解時に、生成され得る。本発明の化合物の正確な実施態様は、アンカー分解生成物またはエフェクター分解生成物が脆いリンカーのフラグメントを有するか否か、あるいはアンカーまたはエフェクター分解生成物のいずれにも結合されたままでない、脆いリンカーのさらなるフラグメントが生成されるか否かを決定する。
【００５３】
本発明の好ましい実施態様は、脆いリンカーの切断時、低変異原性の分解生成物を生じる化合物を包含する。化合物の変異原性は、エフェクターの加水分解後、主にアンカー部分により、なぜなら、たとえエフェクター部分が加水分解された場合でも、アンカーは核酸と相互作用し、核酸複製物と干渉する可能性を有し得るからである。好ましくは、脆いリンカーの切断後、アンカーフラグメントは実質的に変異原性が低下している。
【００５４】
定義
「病原体」は、ヒト、他の哺乳動物、または脊椎動物に疾患を生じ得る、任意の核酸含有因子として定義され得る。例には、単細胞または多細胞微生物のような微生物が含まれる。病原体の例は、細菌、ウイルス、原生生物、真菌、酵母菌、カビ、および、マイコプラズマであり、これらはヒト、他の哺乳動物、または脊椎動物に疾患を生じる。病原体の遺伝物質は、ＤＮＡまたはＲＮＡであり得、そして遺伝物質は一重鎖または二重鎖核酸として存在し得る。病原体の核酸は、溶液中、細胞内、細胞外、または細胞に結合したものであり得る。表Ｉは、ウイルスの例を列挙しており、本発明を任意の様式に制限することを意図されない。
【００５５】
【表１−１】
【００５６】
【表１−２】
物質または化合物の「インビボ」使用は、物質または化合物の、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物への導入として定義される。
【００５７】
物質または化合物の「インビトロ」使用は、物質または化合物の、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物外での使用として定義され、ここで物質および化合物のいずれも、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物への再導入を意図されない。インビトロ使用の例としては、実験室の設備を用いた、血液サンプルの成分分析がある。
【００５８】
化合物の「エキソビボ」使用は、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物外での生体物質の処理に、化合物を用いることとして定義され、ここで処理された生体物質は、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物内での使用を意図される。例えば、ヒトからの血液の取り出し、および病原体を不活化するための化合物のその血液内への導入は、血液がそのヒトまたは別のヒトへの再導入を意図される場合、その化合物のエキソビボ使用として定義される。ヒト血液のそのヒトまたは別のヒトへの再導入は、血液のインビボ使用であり、これは化合物のエキソビボ使用と対照的である。ヒトへ化合物が再導入されたとき、血液中に化合物がまだ存在する場合、化合物はまた、そのエキソビボ使用に加え、インビボ導入される。
【００５９】
「生体物質」は、任意のタイプの生物学的有機体からもたらされる物質として定義される。生体物質の例としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：血液、血液製剤（例えば、血漿、血小板調製物、赤血球、濃縮赤血球、および血清）、脳脊髄液、唾液、尿、糞便、精液、汗、乳、組織サンプル、ホモジナイズされた組織サンプル、および生物学的有機体にその起源を有する任意の他の物質。生体物質にはまた、生物学的有機体にその起源を有する物質を取り込む合成物質が含まれる。これは例えば、ミョウバンから構成されるワクチン調製物および病原体（この病原体は、この場合、生物学的有機体にその起源を有する物質である）、分析のために調製されたサンプルであり、このサンプルは血液と、分析試薬、細胞培養培地、細胞培養物、ウイルス培養物、および他の生きた生物由来の培養物との混合物である。
【００６０】
「生物学的使用のための物質」は、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物と接触するか、またはそれらに導入される任意の物質として定義され、ここでこのような接触は、疾患または病原体を伝染する危険を有する。このような物質には以下のものが含まれるが、これらに限定されない：ペースメーカーおよび人工関節のような医療用インプラント；持続的薬物放出のために設計されたインプラント；注射針、静脈内ラインなど；歯科用ツール；歯冠のような歯科用材料；カテーテル；ならびに、生きたヒト、哺乳動物、または脊椎動物と接触するか、または導入された場合に、疾患または病原体を伝染する危険を伴う、任意の他の物質。
【００６１】
「病原体の不活化」は、物質中の病原体が増殖することを不可能にすることによって、定義される。不活化は、残存する増殖しうる病原体の画分の負対数として表される。従って、特定の濃度の化合物が、物質中の９９％の病原体を増殖不可能にする場合、１％または１００分の１（０．０１）の病原体が増殖可能なままである。０．０１の負対数は２であり、そしてこの化合物の濃度は、２ｌｏｇによって表される不活化された病原体を有すると言われる。あるいは、この化合物は、この濃度において２ｌｏｇｓ殺生を有すると言われる。
【００６２】
本明細書中で用いられる「アルキル」は、環式、分枝、または直鎖の炭素および水素を含む化学基（例えば、メチル、ペンチル、およびアダマンチル）をいう。アルキル基は、非置換または１つ以上の置換基（例えば、ハロゲン、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、ヒドロキシル、チオール、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、または他の官能基）で置換されるかのいずれかであり得る。アルキル基は、１つまたはいくつかの位置で飽和または不飽和であり得る（例えば、−Ｃ＝Ｃ−または−Ｃ≡Ｃ−サブユニットを含む）。典型的には、アルキル基は、他に特定していない限り、１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜８個の炭素原子を含む。
【００６３】
本明細書中で用いられている「ヘテロアルキル」は、鎖に組み込まれた１個以上のＮ、Ｏ、Ｓ、またはＰのヘテロ原子を有するアルキル鎖である。ヘテロ原子は、上記の置換基を有さないか、１つ、または１つ以上有し得る。「ヘテロ原子」はまた、ヘテロ原子Ｎ、ＳおよびＰの酸化形態を含む。ヘテロアルキル基の例には以下のものが挙げられる（しかしこれらに限定されない）：メトキシ、エトキシ、および他のアルキルオキシ基；エーテル含有基；ポリペプチド鎖のようなアミド含有基；ピペリジニル、ラクタムおよびラクトンのような環系；ならびにヘテロ原子を炭素鎖に組み込んだ他の基。典型的には、ヘテロアルキル基は、ヘテロ原子に加えて、特に特定しない限り、１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜８個の炭素原子を含む。
【００６４】
「アリール」または「Ａｒ」は、単環（例えば、フェニル）または多重縮合環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する不飽和芳香族炭素環式基を意味し、これは必要に応じて、非置換であり得るか、またはアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、アルコキシ、ハロ、チオール、および他の置換基で置換され得る。
【００６５】
「ヘテロアリール」基は、単環（例えば、ピリジルまたはフリル）あるいは多重縮合環（例えば、アクリジニル、インドリル、またはベンゾチエニル）を有する、不飽和芳香族炭素環式基であり、これは少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、またはＳ）を少なくとも１つの環内に有する。環は、必要に応じて、非置換であり得るかまたは、アミノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロ、チオール、アシルオキシ、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、およびその他の置換基で置換され得る。
【００６６】
略語
以下の略語が用いられる：ＱＭ（キナクリンマスタード）；Ｈｃｔ（ヘマトクリット）；ＲＢＣ（赤血球）；ＬＢ（Ｌｕｒｉａブロス）；ｃｆｕ（コロニー形成単位）；ｐｆｕ（プラーク形成単位）；ＤＭＥＭ（Ｄｅｌｂｅｃｃｏ改変ｅａｇｌｅ培地）；ＦＢＳ（ウシ胎仔血清）；ＰＲＢＣ（濃縮赤血球）；ｒｐｍ（毎分の回転数）；ＴＣ（組織培養）；ＮＨＳＰ（正常ヒト血清プール）；ＮＣＳ（新生仔ウシ血清）；ＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）。
【００６７】
化合物の化学的構造
広範で多様な群が、アンカー、リンカー、およびエフェクターとしての使用に利用可能である。本化合物において使用し得るアンカー群の例には、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：インターカレーター、副溝バインダー、主溝バインダー、静電相互作用により結合する分子（例えば、ポリアミン）、および配列特異的相互作用により結合する分子。以下は、可能なアンカー群の、非限定的リストである：
アクリジン（およびアクリジン誘導体（例えば、プロフラビン、アクリフラビン、ジアクリジン、アクリドン、ベンゾアクリジン、キナクリジン））、アクチノマイシン、アントラサイクリノン、ロドマイシン、ダウノマイシン、チオキサンテノン（およびチオキサンテノン誘導体（例えば、ｍｉｒａｃｉｌ Ｄ））、アントラマイシン、ミトマイシン、エチノマイシン（キノマイシンＡ）、ｔｒｉｏｓｔｉｎ、エリプチシン（ならびにその二量体、三量体およびアナログ）、ノルフィリンＡ、フルオレン（および誘導体（例えば、フルオレノン、フルオレノジアミン））、フェナジン、フェナントリジン、フェノチアジン（例えば、クロルプロマジン）、フェノキサジン、ベンゾチアゾール、キサンテンおよびチオキサンテン、アントラキノン、アントラピラゾール、ベンゾチオピラノインドール、３，４−ベンゾピレン、１−ピレニルオキシラン、ベンゾアントラセン、ベンゾジピロン、キノリン（例えば、クロロキン、キニン、フェニルキノリンカルボキサミド）、フロクマリン（例えば、ソラレンおよびイソソラレン）、エチジウム、プロピジウム、コラリン（ｃｏｒａｌｙｎｅ）、ならびに多環式芳香族炭化水素およびそれらのオキシラン誘導体；
ジスタマイシン、ネトロプシン、他のレキシトロプシン、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８およびその他のＨｏｅｃｈｓｔ色素、ＤＡＰＩ（４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール）、ｂｅｒｅｎｉｌ、およびトリアリールメタン色素；
アフラトキシン；
スペルミン、スペルミジン、およびその他のポリアミン；ならびに
核酸、または三重らせん体、Ｄループ体、および一本鎖の標的への直接塩基対のような配列特異的相互作用により結合するアナログ。これらの化合物の誘導体はまた、アンカー群の非制限的例であり、ここで化合物の誘導体には、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：任意の位置で、任意のタイプの１個以上の置換基を有する化合物、この化合物の酸化生成物または還元生成物など。
【００６８】
本発明で用いられ得るリンカーの例は官能基を含む化合物であるが、これらに限定されない。この官能基は例えば、エステル（ここで、エステルのカルボニル炭素はアンカーとエステルのｓｐ３酸素との間にある；この配列はまた「順方向のエステル」と呼ばれる）、「逆方向のエステル」（ここで、エステルのｓｐ３酸素は、アンカーとエステルのカルボニル炭素との間にある）、チオエステル（ここで、チオエステルのカルボニル炭素は、アンカーとチオエステルの硫黄との間にあり、これはまた、「順方向のチオエステル」と呼ばれる）、逆方向のチオエステル（ここで、チオエステルの硫黄は、アンカーとチオエステルのカルボニル炭素との間にあり、これはまた、「逆方向のチオエステル」と呼ばれる）、順方向および逆方向のチオノエステル、順方向および逆方向のジチオ酸、スルフェート、順方向および逆方向のスルホネート、ホスフェート、ならびに順方向および逆方向のホスホネート基。「チオエステル」は、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−基を示し；「チオノエステル」は、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−基を示し、そして「ジチオ酸」は、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−基を示す。脆いリンカーはまた、アミドを含み得、ここでアミドのカルボニル炭素は、アンカーとアミドの窒素との間にある（これはまた「順方向のアミド」と呼ばれる）か、またはここでアミドの窒素は、アンカーとアミドのカルボニル炭素との間にある（これはまた「逆方向のアミド」と呼ばれる）。「順方向の」および「逆方向の」として示され得る基について、順方向の配向は、官能基の加水分解後、得られる酸性官能基がアンカー部分に共有連結され、そして得られるアルコールまたはチオール官能基がエフェクター部分に共有連結される、官能基の配向である。逆方向の配向は、官能基の加水分解後、得られる酸性官能基がエフェクター部分に共有連結され、そして得られるアルコールまたはチオール官能基がアンカー部分に共有連結される、官能基の配向である。
【００６９】
脆いリンカー（例えば、アミド部分）はまた、酵素分解の条件下、処理された生体物質における内在性酵素によるか、または物質に添加された酵素によって、分解可能であり得る。
【００７０】
本発明で用いられ得るエフェクターの例は、以下のものであるが、これらに限定されない：マスタード基、マスタード基等価体、エポキシド、アルデヒド、ホルムアルデヒドシントン、および他のアルキル化剤および架橋剤。マスタード基は、モノまたはビスハロエチルアミン基、およびモノハロエチルスルフィド基を含むものとして定義される。マスタード基等価体は、マスタードと同様な機構によって（つまり、アジリジニウム中間体の形成によって、またはアジリジン環（これは求核試薬と反応し得る）を有するかもしくは形成することによって）反応する基によって定義され、これは例えば、モノまたはビスメシルエチルアミン基、モノメシルエチルスルフィド基、モノまたはビストシルエチルアミン基、およびモノトシルエチルスルフィド基である。ホルムアルデヒドシントンは水溶液中でホルムアルデヒドに分解する任意の化合物として定義され、これにはヒドロキシメチルグリシンのようなヒドロキシメチルアミンが含まれる。ホルムアルデヒドシントンの例は、米国特許第４，３３７，２６９号および国際特許出願第ＷＯ ９７／０２０２８号に示される。本発明は任意の特定機構に制限されないが、エフェクター基（これは求電子基であるかまたは求電子基を形成し得る、例えばマスタード基）は、核酸と反応し、そして核酸と共有結合を形成すると考えられている。
【００７１】
本発明の化合物の３つの実施態様を、以下の一般式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩにより述べる。
【００７２】
一般式Ｉは、以下の式、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である：
【００７３】
【化７】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の少なくとも１つが以下で定義される通りの−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００７４】
【化８】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００７５】
一般式ＩＩは、以下の式、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である：
【００７６】
【化９】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００７７】
【化１０】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００７８】
一般式ＩＩＩは、以下の式、ならびにその全ての塩および立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である：
【００７９】
【化１１】
ここでＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８のうち少なくとも１つが−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、そして余剰のＲ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ８が−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルであり；
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１−８アルキル−、−Ｃ１−８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−または−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル−であり；
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり；
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、
および
【００８０】
【化１２】
からなる群から独立して選択され；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり；
そしてここでＲ１３は、独立して、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール−、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルである。
【００８１】
上記の一般式Ｉにおいて、アクリジン核はアンカー部分であり、−Ｖ−Ｗ−Ｘ−基は脆いリンカーを含み、そしてＥ基はエフェクター基であることが認められる。同様に上記の一般式ＩＩＩにおいて、ソラレン核はアンカー部分であり、−Ｖ−Ｗ−Ｘ−基は脆いリンカーを含み、そしてＥ基はエフェクター基である。一般式ＩＩは、一般式Ｉのサブセットである。
【００８２】
本発明の典型的な化合物はＩＶとして示した下記の構造である：
【００８３】
【化１３】
ＩＶにおいて、２−カルボメトキシアクリジン環系は、インターカレーションを介してアンカー部分としての役割をする。ビス（クロロエチル）アミン基は、エフェクター部分としての役割をし、これは核酸をアルキル化し得る；核酸と反応しない場合は窒素マスタードが加水分解する。リンカーは、−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−である。生理的ｐＨでの水溶液では、このエステル含有リンカーは、数時間内に加水分解する。溶液のｐＨを変えると、リンカーが加水分解する速度が変化する；ＩＶの対応するアルコールアナログについて（ここでＩＶの−Ｃｌ原子は−ＯＨ基と置換される）、エステル連結の１％以下の加水分解がｐＨ３で１００分後３７℃で観測され；ｐＨ８でエステル連結の５０％以上の加水分解が１００分後、３７℃で観測される。得られたＩＶの加水分解生成物は、Ｎ−（２−カルボメトキシ−９−アクリジニル）−β−アラニンおよびトリエタノールアミンである：
【００８４】
【化１４】
ここで２−カルボメトキシアクリジンは、リンカーフラグメントとしてβ−アラニンを有し、そしてエフェクター分解生成物は、リンカーフラグメントとしてエタノール基を有する。
【００８５】
生理的ｐＨ値で、β−アラニンのカルボキシレートは負電荷であり、結合した２−カルボメトキシアクリジン基が、負電荷の核酸分子中にインターカレートする傾向を減少させる。これは９−アミノアクリジンに関して、Ｎ−（２−カルボメトキシ−９−アクリジニル）−β−アラニンの突然変異誘発力を低下させる。アンカーフラグメントの突然変異誘発力を低下させるこのポテンシャルは、脆いリンカーによって与えられた１つの利点を説明する。
【００８６】
ＩＶに類似した化合物における脆いリンカーの別の利点は、加水分解速度が９−アミノアクリジンアンカー部分とエステル官能基との間のリンカーアームの長さを変えることで調節され得ることである。下記の実施例７および表ＩＩＩおよび表ＩＶに記載のように、アミノアクリジンアンカー部分とエステル基との間のメチレン基の数の増加は、本発明の特定の化合物（ここでマスタードの−Ｃｌ原子は−ＯＨ基で置換される）のジオールアナログに関する、ｐＨ８、３７℃での水溶液に見られる加水分解の量の減少をもたらす。
【００８７】
本発明の化合物の例を以下に示すがこれは例示であり、本発明を制限するものではない。
【００８８】
【化１５】
【００８９】
【化１６】
【００９０】
【化１７】
【００９１】
【化１８】
用途
本発明の化合物の使用例は次のものを含むが、これらに制限されない：固体または溶液形態の本発明の化合物の生体物質への添加（生体物質中に存在する病原体を不活化するため）；本発明の化合物の溶液中での生物学的使用のための物質の浸漬または他の処理（物質の中または上に存在する病原体を不活化するため）；および標的リポソームにおける本発明の化合物の封入（それらの細胞の核酸を損傷させるために特定の細胞に化合物を向けるため）。
【００９２】
本発明の化合物は、特定の条件下で加水分解をするように設計されるが、それらは他の条件下では安定であることに留意すべきである。脆いリンカーおよびエフェクター基にとって保存に用いる特定の状況下で比較的安定であることが望ましい。化合物が保存され得る様式の例は、乾燥固体、少量の水分含有のオイル、凍結した水溶液、凍結した非水性溶液、懸濁液、および脆いリンカーまたはエフェクター基の加水分解を可能にしない溶液、例えば液体非水性溶液を包含するが、これらに制限されない。化合物は０℃以下の温度で（例えばフリーザー中で）、あるいは０℃を越える温度で（例えば、冷蔵庫中または周囲温度で）、貯蔵され得る。化合物は好ましくは、３日〜１年の間、１週間〜１年の間、１ヶ月〜１年の間、３ヶ月〜１年の間、６ヶ月〜１年の間、１週間〜６ヶ月の間、１ヶ月〜６ヶ月の間、３ヶ月〜６ヶ月の間、１週間〜３ヶ月の間、または１ヶ月〜３ヶ月の間の期間、保存条件下で安定である。化合物の安定性は、それらが保存される温度、およびそれらが保存される状態（例えば非水性溶液、乾燥固体）の両方によって決定される。
【００９３】
病原体不活化の条件
生体物質を病原体不活化化合物で処理するための条件は、選択された物質および不活化化合物に基づいて選択され得る。血液製剤のような生体物質の処理のための病原体不活化化合物の代表的な濃度は、約０．１μＭから５ｍＭのオーダーであり、例えば約５００μＭである。例えば、サンプル中に少なくとも約１ ｌｏｇ、または少なくとも約２ ｌｏｇ、または例えば少なくとも約３から６ ｌｏｇの病原体を不活化するのに充分な病原体不活化化合物の濃度が使用され得る。１つの実施態様では、病原体不活化化合物は約５００μＭ以下の濃度で、少なくとも１ ｌｏｇを殺傷し、より好ましくは５００μＭより大きくない濃度で、少なくとも３ ｌｏｇを殺傷する。他の制限のない実施例では、病原体不活化化合物は少なくとも１ ｌｏｇを殺傷し得、好ましくは約０．１μＭから約３ｍＭの濃度で少なくとも６ ｌｏｇを殺傷し得る。
【００９４】
病原体不活化化合物との血液製剤のインキュベーションは、例えば約５分から７２時間またはそれ以上、あるいは約１から４８時間、例えば約１から２４時間、あるいは例えば、約８から２０時間行われ得る。赤血球について、インキュベーションは代表的には約２℃から３７℃の温度で行われ、好ましくは約１８℃から２５℃である。血小板について、温度は好ましくは約２０℃から２４℃である。血漿について、温度は約０℃から６０℃であり得、代表的には約０〜２４℃である。処理されている物質のｐＨは、好ましくは約４から１０で、より好ましくは約６から８である。
【００９５】
本発明のひとつの実施態様は、血液または血液製剤中で病原体を不活化するのに使用する化合物および方法を包含し、そしてこの目的のための好適な一連の保存条件は、便利な保存および保存血での化合物の使用を可能にするそれらの条件である。
【００９６】
物質の中または上での病原体不活化に使用される条件下で、脆いリンカーおよびエフェクター基は加水分解または反応を受ける。脆いリンカーおよびエフェクター基の両方の加水分解は、好ましくは所望の量の病原体不活化が起こり得るのに充分に遅い。病原体不活化に必要な時間は、例えば約５分から７２時間であり得る。
【００９７】
赤血球の処理
好ましくは、病原体不活化化合物を伴う物質を含む赤血球の処理は処理後に赤血球の機能に損傷を与えないか、または赤血球を改変する。赤血球機能に対して実質的に損傷を与える効果の欠如は、赤血球機能の試験に関する当業者に公知の方法で測定され得る。例えば、細胞内ＡＴＰ（アデノシン５’−トリホスフェート）、細胞内２，３−ＤＰＧ（２，３−ジホスホグリセロール）、または細胞外カリウムのような指標のレベルが測定され得、そして未処理のコントロールと比較され得る。さらに、溶血、ｐＨ、ヘマトクリット、ヘモグロビン、浸透圧脆弱性、グルコース消費、および乳酸生成が測定され得る。
【００９８】
ＡＴＰ、２，３−ＤＰＧ、グルコース、ヘモグロビン、溶血、およびカリウムを決定する方法が当該分野で利用可能である。例えば、Ｄａｖｅｙら、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，３２：５２５〜５２８（１９９２）を参照のこと（その開示内容は本明細書中で援用される）。赤血球機能を決定する方法はまた、Ｇｒｅｅｎｗａｌｔら、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ，５８：９４〜９９（１９９０）；Ｈｏｇｍａｎら、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ，６５：２７１〜２７８（１９９３）；およびＢｅｕｔｌｅｒら、Ｂｌｏｏｄ，５９巻（１９８２）（その開示内容は本明細書中で参考として援用される）にも記載される。細胞外のカリウムのレベルは、Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｍｏｄｅｌ ６１４Ｋ＋／Ｎａ＋ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）を使用して測定され得る。ｐＨは、Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｍｏｄｅｌ ２３８ Ｂｌｏｏｄ Ｇａｓ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）を用いて測定され得る。
【００９９】
ＩｇＧ、アルブミン、およびＩｇＭのような種の赤血球への結合もまた当該分野で利用可能な方法を使用して測定され得る。分子の赤血球への結合は、例えばアクリジンおよびＩｇＧに対する抗体を使用することで検出され得る。アッセイで使用される抗体は市販で入手され得、または例えばＨａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，「抗体、研究室マニュアル、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ研究所」１９８８年（その開示内容は本明細書中で援用される）に記載されるように、当該分野で利用可能な方法を使用して作製され得る。例えば、抗ＩｇＧはＣａｌｔａｇ，Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ；Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯおよびＬａｍｐｉｒｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｐｉｐｅｒｓｖｅｌｌｅ，ＰＡから市販されている。
【０１００】
病原体不活化による赤血球を含む物質の処理方法において、好ましくは細胞外のカリウムのレベルは３倍以下であり、より好ましくは１日後に未処理のコントロールにおいて示される２倍以下の量である。別の実施態様において、好ましくは処理された赤血球の溶血は４℃での２８日の保存後で３％未満であり、より好ましくは４２日の保存後で２％未満であり、そして最も好ましくは４２日の保存後で約１％以下である。
【０１０１】
生体物質
種々の生体物質が病原体不活化化合物によって処理され得る。生体物質は、全血、濃縮赤血球、血小板、および新鮮なまたは凍結した血漿のような血液製剤を包含する。血液製剤はさらに血漿タンパク部分、抗血友病因子（第ＶＩＩＩ因子）、第ＩＸ因子、および第ＩＸ因子複合体、フィブリノーゲン、第ＸＩＩＩ因子、プロトロンビンおよびトロンビン、免疫グロブリン（例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥおよびＩｇＭならびにそれらのフラグメント）、アルブミン、インターフェロン、ならびにリンホカインを包含する。さらに合成血液製剤が考えられる。
【０１０２】
他の生体物質は、ワクチン、タンパク質を産生する組換えＤＮＡ、およびオリゴペプチドリガンドを包含する。また尿、汗、唾液、排泄物、髄液のような臨床サンプルも包含する。さらには合成血液または血液製剤保存媒体を包含する。
【０１０３】
処理後の物質における化合物の濃度の減少
血液製剤のような生体物質における病原体不活化化合物の濃度は処理後に減少され得る。使用され得る方法および装置は、ＰＣＴ ＵＳ９６／０９８４６；１９９７年１月６日に出願された米国出願番号第０８７７９，８３０；および同時出願された１９９８年１月６日出願の、出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／００５３１、代理人整理番号２０００４４０の「血液製剤由来の小有機化合物の還元に関する方法およびデバイス」（これらの各開示内容は本明細書中においてその全てが参考として援用される）に記載される。
【０１０４】
クエンチング（ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ）
別の実施態様では、本発明の化合物はクエンチャーと組み合わせて使用され得る。生体物質における病原体不活化化合物の所望でない副反応をクエンチングする方法は、同時出願された米国仮出願番号第６０／０７０５９７号、１９９８年１月６日出願、代理人整理番号２８２１７３０００６００、「生体物質における病原体不活剤をクエンチングする方法」（この開示内容は本明細書中で援用される）に記載される。同時出願で開示されたものは、求電子基または求電子基を形成し得る官能基を含む、病原体不活化化合物の所望でない副反応をクエンチングするための方法である。この実施態様では、物質は病原体不活化化合物およびクエンチャーによって処理され、ここでクエンチャーは求電子基と共有結合的に反応可能な求核性官能基を含む。好適なクエンチャーは、グルタチオンのようなチオールである。
【実施例】
【０１０５】
以下の特定の実施例には本発明の方法で有用である代表的な化合物の調製方法を例示し、当業者に有用である化合物に関する関連データを提供し、および化合物の有効性が決定される方法を例示するために示され、そしてこれは本発明の範囲を制限すると解釈されるべきものではない。別に記載されなければ、全てのＮＭＲスペクトルをＣＤＣｌ３中でＶａｒｉａｎ ２００ＭＨｚ装置で記録した；化学シフトをテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して報告する。ＩＲスペクトルをＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＦＴＩＲで記録した。ＨＰＬＣを移動相Ａとして５ｍＭのＨ３ＰＯ４水溶液、および移動相Ｂとして５ｍＭのＣＨ３ＣＮを用いるグラジエントモードでＹＭＣ Ｃ８カラムを使用して実施した。サンプルをＤＭＳＯまたはエタノール中で調製し、そして注入前に１５℃以下に保持した。
【０１０６】
表ＩＩは、種々の化合物に使用された化合物番号の命名を示す。
【０１０７】
【表２】
実施例１
β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物ＩＶ，）の合成
工程Ａ． β−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル
Ｎ２下、−１５℃で、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニン（２０．３ｇ，１０７ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（１３．０ｍＬ，１２．０ｇ，１１９ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）攪拌溶液にイソブチルクロロホルメート（１３．９ｍＬ，１４．６ｇ，１０７ｍｍｏｌ）を添加して直ちに白色沈澱物（４−メチルモルフォリン・ＨＣｌ）を生じた。反応混合物を−１５℃で５分間攪拌し、次に反応混合物を、トリエタノールアミン（４８．３ｇ，３２４ｍｍｏｌ）の−１５℃の乾燥ＴＨＦ（１５０ｍＬ）攪拌溶液を含むフラスコに移した。反応混合物を２３℃まで加温し、そしてさらに１．５時間攪拌し、次に減圧濾過によって沈澱物を取り除いた。次いでＴＨＦを減圧下で濾液から除去し、そして残留した粘性のある黄色の油状物を水（５００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５×１５０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下での溶媒の除去によって所望の生成物であるβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルを淡黄色の油状物として２５．８ｇ（７５％）得た。
【０１０８】
【化１９】
工程Ｂ． β−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル
Ｎ２下で、工程Ａからのβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル（２２．７ｇ，７０．９ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１１．１ｇ，１６３ｍｍｏｌ） のアセトニトリル（７０ｍＬ）攪拌溶液を０℃まで冷却した。次いで、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（５３４ｍｇ，３．５４ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物をさらに５分間、０℃で攪拌した。反応混合物を２３℃まで加温し、そして２時間攪拌し、次に得られた白色沈殿物（イミダゾール・ＨＣｌ）を減圧濾過で取り除いた。アセトニトリルを減圧下で濾液から除去し、そして残留した物質を飽和ブライン（６００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下での溶媒の除去によって所望の生成物であるβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステルを黄色の油状物として３５．２ｇ（９０％）得た。
【０１０９】
【化２０】
工程Ｃ． β−アラニン， ２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル
工程Ｂからのβ−アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル（３．０１ｇ，５．４８ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、ニートなトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を添加し、ＣＯ２ガスの放出が起きた。反応混合物を５分間攪拌し、そしてトリフルオロ酢酸を減圧下で取り除いた。残留した物質を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下での溶媒の除去によって所望の生成物であるβ−アラニン， ２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステルを淡黄色の油状物として２．４５ｇ（１００％）得た。
【０１１０】
【化２１】
工程Ｄ． β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル
β−アラニン， ２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルエステル（７３６ｍｇ，１．６４ｍｍｏｌ）をメチル９−メトキシアクリジン−２−カルボキシレート（６６９ｍｇ，２．５０ｍｍｏｌ）と室温で１２．５時間、１０ｍＬのＣＨＣｌ３中で攪拌することで反応させた。次いで沈澱物（アクリドン）を濾別し、そして濾液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）とＣＨＣｌ３（３×３５ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、そして減圧下での濃縮で１．６１ｇの粘性のある茶色の油状物を得た。得られたジオールの脱保護を、Ｎ２下で３．０ｍＬのＴＨＦに粗中間体を溶解し、そして０℃まで冷却し、ＨＦ／ピリジン（１．０ｍＬ）で処理することによって実施した。溶液を１時間攪拌しながら室温まで加温した。揮発物を減圧下で除去し、そして残留物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）とＣＨＣｌ３（３×３５ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層を乾燥させ、そして濃縮して６４９ｍｇの茶黄色の固体を得た。調製用のＴＣＬ（Ｃ−１８，ＣＨ３ＣＮ）で所望のジオール、β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステル（ＨＰＬＣによる純度が＞８０％）を２０％の収率で得た。
【０１１１】
【化２２】
アミンおよびヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
【０１１２】
工程Ｅ β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド
β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルのジクロロ化合物への転換を、Ｐｅｃｋらの方法と同様の方法によって行った（Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９５９， ８１： ３９８４）。工程Ｄからの生成物（４１ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）のニートＳＯＣｌ２（６ｍｌ）中黄色の溶液を室温で２０時間撹拌した。次いでＳＯＣｌ２を減圧で除去し、黄色の固体（ジヒドロクロリド塩）を得た。次いでこの物質を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍｌ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を減圧で除去し、３５．４ｍｇのジクロロ化合物遊離塩基をオレンジ色のガム状で得た。
【０１１３】
【化２３】
他の炭素は観測されなかった。ＨＣｌ塩はエーテル中の１Ｍ ＨＣｌを加えることによってＣＨ２Ｃｌ２から沈澱させ、β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物ＩＶ）を黄色固体として得た（ＨＰＬＣによって８１％純粋であった）。
【０１１４】
β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物Ｖ）を同様の方法で調製した。このように、工程Ｄ中でメチル９−メトキシアクリジン−２−カルボキシレートの代わりに９−メトキシアクリジンを使用して、中間体ジオール（７．１％）を黄色のオイル状で得た（ＨＰＬＣによって７４％純粋であった）。
【０１１５】
【化２４】
アミンおよびヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
【０１１６】
中間体ジオール（３７．３ｍｇ、０．０７９３ｍｍｏｌ）の塩化チオニル（４．０ｍｌ）溶液を２３℃で７．５時間撹拌した。塩化チオニルを減圧で除去し、黄色のオイルを得た。この物質をエタノール（約４ｍＬ）に溶解し、そして溶媒を減圧で除去した。次いでこの物質をＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）に溶解し、そして溶媒を減圧で除去し；この工程を２回繰り返した。次いでこの物質をヘキサン（３×４ｍｌ）を用いて粉末化し、４０ｍｇの生成物（ＨＰＬＣによって４２％純粋であった）を黄色のヒドロスコピックな（ｈｙｄｒｏｓｃｏｐｉｃ）ガラス状固体として得た。飽和ＮａＨＣＯ３とＣＨ２Ｃｌ２との間の分配、続いて合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧で除去することにより、分析目的のために一部の物質を遊離アミンに転換した。
【０１１７】
【化２５】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１１８】
上記手順に従い、しかしＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニンをＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−アミノ酪酸に置き換えて、４−アミノ酪酸Ｎ−［（２−カルボメトキシアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＶＩ（ＨＰＬＣによって７８％純粋であった）を調製した。
【０１１９】
【化２６】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１２０】
実施例２
実施例１、工程Ａのトリエタノールアミンを３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）］アミノプロパノールで置換し、次いで工程Ｃから続け、β−アラニン，Ｎ−（２−カルボメトキシ−アクリジン−９−イル），３−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド、化合物ＶＩＩＩ（ＨＰＬＣによって６３％純粋であった）を調製した。
【０１２１】
【化２７】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１２２】
実施例３
実施例１で合成した化合物は以下の方法によっても調製され得る：
β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（化合物Ｖ）の合成：方法ＩＩ
工程Ａ： β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），メチルエステルヒドロクロリド
９−クロロアクリジン（１１．７ｇ、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｃｏｌｌ． Ｖｏｌ ＩＩＩ， ５７頁）、β−アラニンメチルエステルヒドロクロリド（９．９ｇ）およびナトリウムメトキシド（３．２６ｇ）を混合し、６０ｍＬのメタノールを加えた。混合物をマグネチックスターラーで撹拌し、５．５時間還流した。熱源を取り除き、懸濁液を温時濾過した（≦３５℃）。固体の塩を約１０ｍＬの追加のメタノールですすぎ、合わせた濃緑色の濾液を濃縮し、２１ｇの湿った緑黄色固体を得た。
【０１２３】
固体を３５０ｍＬの沸騰している２−プロパノールに溶解し、室温で結晶化させた。得られた結晶を約１５ｍＬの２−プロパノールおよび１５ｍＬのヘキサンですすぎ、次いで風乾し、１５．５ｇの明るい黄色の生成物、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），メチルエステルヒドロクロリド（収率７８．５％）を得た。
【０１２４】
【化２８】
工程Ｂ： β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド
工程Ａからのβ−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），メチルエステルヒドロクロリド（５．００ｇ）をトルエン（７５０ｍＬ）、Ｎａ２ＣＯ３飽和水溶液（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）の間で分配した。水層をトルエン（３×２５０ｍＬ）を用いて再度抽出し、有機層を合わせ、そしてＮａ２ＣＯ３飽和水溶液（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。ロータリーエバポレーションによってトルエンの体積を約１００ｍＬにまで減じた。次いで、部分的に混和しない系を形成するために、トリエタノールアミン（３０ｍＬ）を加えた。次いでＮａＯＭｅ（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（２ｍＬ）溶液を加えた。室温で撹拌しながらのロータリーエバポレーションによって反応混合物から溶媒を素早く除去した。溶媒を除去した後、反応混合物をさらに１から１．５時間減圧下に置き、シロップ状の溶液を得た。
【０１２５】
粗混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）の間で分配し、過剰のトリエタノールアミンを除去した。ブライン層をＣＨ２Ｃｌ２（５×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで０．５Ｍ ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）で抽出した。酸性水層を合わせ、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）で洗浄した。酸性溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）存在下で粉末Ｋ２ＣＯ３（Ｓ）を用いて塩基性とした。有機層を分離し、水層を再びＣＨ２Ｃｌ２（５×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４（Ｓ）を用いて乾燥し、ストリップし、粗ジオール遊離アミン（５．０２ｇ）を粘着性の黄色のガム状で得た。この物質は、代わりの手順によって実施例１で調製されたものと、ＮＭＲによって同一であった。
【０１２６】
上記粗生成物の一部（０．４００ｇ）をイソプロパノール（１００ｍＬ）と激しく撹拌し、エーテル中１Ｍ ＨＣｌで酸性とした。スラリーを冷却し、最初の沈殿物を廃棄した。溶媒の半分を除去した後に、結晶の２番目の集合体、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリドを明るい黄色の結晶性固体として得た（０．２００ｇ）（ＨＰＬＣにより＞９５％純粋）。
【０１２７】
【化２９】
工程Ｃ： β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド
工程Ｂのβ−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（１１３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（０．５ｍＬ）中の撹拌懸濁液に、ＳＯＣｌ２（０．５ｍＬ）を加えた。生じた黄色の溶液を２３℃で１６時間撹拌し、続いて揮発性物質を減圧で除去した。残余オレンジオイルをＥｔＯＨ（約２ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＨを減圧で除去して黄色の固体を得た。次いでこの物質をヘキサン（２×３ｍＬ）を用いて粉末化した。残留溶媒を減圧で除去し、１２３ｍｇの所望の物質、β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド（ＨＰＬＣにより９３％純粋）を黄色固体として得た。
【０１２８】
【化３０】
実施例４
β−アラニン，Ｎ−（４−メトキシ−アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＩＸ
１．４ｇ（５．８４ｍｍｏｌ）の４，９−ジメトキシアクリジン、０．８９ｇ（６．４２ｍｍｏｌ）のβ−アラニンメチルエステルヒドロクロリドおよび２０ｍｌのメタノールを混合し、次いでＮ２下で１２時間加熱還流させることによって、β−アラニン，Ｎ−（４−メトキシ−アクリジン−９−イル）、メチルエステルを調製した。次いで反応物を減圧で濃縮し、ＣＨＣｌ３−イソプロパノール（５０ｍｌ、４：１ｖ／ｖ）に溶解し、５０％ＮＨ４ＯＨ（２×２５ｍｌ）およびブライン（１×２５ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、減圧で濃縮して１．２４ｇ（６８％）のメチルエステル（ＨＰＬＣにより＞７４％純粋）を黄色オイルとして得た；Ｒｆ（ＳｉＯ２， エチルアセテート）＝０．２５；ＩＲ（薄いフィルム）：
【０１２９】
【化３１】
これを、実施例３、工程Ｂで記述した条件下でジオールに変換し、６４７ｍｇの黄色オイルを得た。粗混合物のＨＰＬＣ分析により８５％の収率を示した（λ＝２７８ｎｍ）；Ｒｆ（ＳｉＯ２， ２０％メタノール−エチルアセテート）＝０．１７；ＩＲ（薄いフィルム）：
【０１３０】
【化３２】
これを、実施例３、工程Ｃで記述したように塩化チオニルを用いてβ−アラニン，Ｎ−（４−メトキシ−アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリドに変換した。粗生成物のエチルアセテート、続いて１０％メタノール−エチルアセテートを使用したフラッシュ濾過（ＳｉＯ２）により、一部の生成物の見かけのカラム上分解の後に５８ｍｇの黄色オイルを得た；Ｒｆ（ＳｉＯ２， エチルアセテート）＝０．２６；ＩＲ（薄いフィルム）：
【０１３１】
【化３３】
ジヒドロクロリド塩を、反応物を減圧で過剰の塩化チオニルの共沸除去（２×５ｍｌトルエン）を用いた濃縮によって粗生成物の形態で単離し得た。ＨＰＬＣ分析により出発物質の完全な消費および４−メトキシアクリドン（ＲＴ＝２２．３分）が主な不純物であることを示した。
【０１３２】
【化３４】
３−クロロ−９−メトキシ−４−メチルアクリジンからβ−アラニン，Ｎ−（３−クロロ−４−メチルアクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物Ｘを同様に調製した。遊離塩基の１Ｈ ＮＭＲ：
【０１３３】
【化３５】
６−クロロ−２，９−ジメトキシアクリジンからβ−アラニン，Ｎ−（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩＩＩを同様に調製した。遊離塩基の１Ｈ ＮＭＲ：
【０１３４】
【化３６】
実施例５
β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩ。
工程Ａ β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル］ エチルエステル
アセトニトリル（１７５ｍＬ）中のβ−アラニンエチルエステルヒドロクロリド（１．９９ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（６．０ｇ、４３．４ｍｍｏｌ）およびヨードエチルトリイソプロピルシリルエーテル（９．４７ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）のスラリーを５〜７日還流した。溶媒の減圧エバポレーションの後、固体をＣＨ２Ｃｌ２を用いて粉末化した。有機層を希Ｎａ２ＣＯ３水溶液、次いでブラインを用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（１：４ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、５．６０ｇのオイル状でβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル］ エチルエステル（８３．１％）を得た。
【０１３５】
【化３７】
工程Ｂ β−アラニン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル
上記工程Ａのβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル］ エチルエステル（５．６０ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（０．５９ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）をエタノール中で撹拌し、３時間還流した。溶媒を除去し、粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２および希ＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層をブラインを用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップしてβ−アラニン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチルを淡黄色オイルとして得た（５．０３ｇ、収率９５．１％）。
【０１３６】
【化３８】
工程Ｃ β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル
上記工程Ｂのβ−アラニン，Ｎ，Ｎ−ビス（２−トリイソプロピルシリルオキシ）エチル（５１．０ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）をＮ２下でＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中で撹拌した。氷浴で冷却しながら、ＳＯＣｌ２（０．５ｍＬ）を滴下し、反応物を２．２５時間撹拌した。反応混合物をストリッピングして、過剰のＳＯＣｌ２を除去した後、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍｌ）を加え、Ｎ２下にしながら溶液を氷浴で冷却した。 ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中９−（３−ヒドロキシ）プロピルアミノ−６−クロロ−２−メトキシ−アクリジン（２９．０ｍｇ、９１．５ｍｍｏｌ）の冷却したスラリーを加えた。０．５時間後、この混合物をＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層をブラインを用いて洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップした。得られたガム状物をヘキサンを用いて粉末化し、ヘキサン抽出物をストリップしてトリイソプロピルシリル保護出発物質および生成物の非常に粗な混合物（５３．５ｍｇ）を得た。
【０１３７】
トリイソプロピルシリル基を除去するために、粗保護ジオールの一部（３３．１ｍｇ）を氷冷ＴＨＦ（１ｍＬ）中で撹拌した。ＨＦ／ピリジン（０．５ｍＬ）の添加の後に、室温で、Ｎ２を充填した風船下で２．５時間混合物を撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配し、有機層を希ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて数回洗浄し、過剰のＨＦ／ピリジンを除去した。ブライン、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を用いた予備的な乾燥の後、溶媒をストリップオフし、粗ジオール（１３．１ｍｇ）を得た。
【０１３８】
これをさらなる粗ジオール（５．０ｍｇ）と混合し、９５ ＣＨ２Ｃｌ２／５ ｉＰＡ／１ ＴＦＡを溶離液として用いてＣ−１８分取ＴＬＣによって精製し、ジオールＴＦＡ塩を得た。塩をＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した後に、有機層をブライン、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップし、ジオールの遊離塩基、β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル（５．０ｍｇ）を得た。
【０１３９】
【化３９】
工程Ｄ β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩ。
【０１４０】
上記によるβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステル（４．０ｍｇ、０．００７３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）に溶解し、氷／水浴中で冷却した。氷冷ＳＯＣｌ２（０．１ｍＬ）を加え、反応物を室温で４時間撹拌した。溶媒を除去するために反応混合物をストリップし、ヘキサンを用いて粉末化し、ＣＨ２Ｃｌ２およびＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層をブライン、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、ストリップした後に、ジクロロ−化合物を黄色のガム状で得た。
【０１４１】
【化４０】
遊離アミンを冷却ＣＨ２Ｃｌ２中で撹拌し、エーテル中１Ｍ ＨＣｌを用いて酸性化し、２、３滴のメタノールを用いてストリップし、所望の化合物、β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］、３−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］プロピルエステルジヒドロクロリド（２．５ｍｇ）、（３．５ｍｇ、８１％）を黄色固体として得た。
【０１４２】
６−クロロ−９−（３−ヒドロキシ）プロピルアミノ−２−メトキシ−アクリジンの代わりに６−クロロ−９−（２−ヒドロキシ）エチルアミノ−２−メトキシ−アクリジンを使用する以外は上述の工程Ｃと同様の方法で類似のジオールを調製した。
【０１４３】
【化４１】
工程Ｄとの類似によってこれはβ−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］、２− ［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］エチルエステルジヒドロクロリド、化合物ＸＩＩに転換した。
【０１４４】
【化４２】
実施例６
［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテートヒドロクロリド、化合物ＸＩＶ
工程Ａ：［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテート
メチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテート（２５０ｍｇ、０．８３２ｍｍｏｌ）、トリエタノールアミン（１２ｍＬ）およびエーテル（２ｍＬ）中１Ｍ ＨＣｌのスラリーを１００℃で２時間撹拌した。得られた透明な褐色溶液を室温まで冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の間で分配した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて数回すすいだ。無水Ｎａ２ＳＯ４を用いた乾燥の後、溶媒を減圧で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２および１Ｍ ＨＣｌ水溶液の間で分配した。水層をＣＨ２Ｃｌ２を用いて数回すすぎ、次いで有機溶媒の存在下でＫ２ＣＯ３（ｓ）を用いて塩基性とした。中性の生成物を含む有機層を水で数回すすぎ、次いで乾燥し、濃縮した。酸−塩基抽出手順を繰り返して所望の生成物をベージュの固体（８４．３ｍｇ、２４．３％）として得た：
【０１４５】
【化４３】
工程Ｂ：［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）］−２−アミノエチル ４，５’，８−トリメチル−４’−ソラレンアセテートヒドロクロリド
ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中の上記ジオール（９．８ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）の氷冷混合物に塩化チオニル（０．２ｍＬ）を加え窒素下で室温で一晩撹拌した。得られたスラリーを濃縮し、次いでヘキサンを用いて粉末化し、所望の生成物（６．２ｍｇ、５３．９％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１４６】
【化４４】
実施例７
β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルアミド（化合物ＸＶ）
工程Ａ：２−［Ｎ’，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシエチル）］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチレンジアミン
０℃の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）中Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エタノールアミン（１．２１ｇ、７．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．５７ｍＬ、１．１ｇ、１１ｍｍｏｌ）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（０．６４ｍＬ、０．９５ｇ、８．３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応物を０℃で１時間撹拌し、２３℃まで温め、一晩撹拌した。揮発性物質を減圧で除去し、メシレートを白色固体として得た。ジエタノールアミン（７．２ｍＬ、７．９ｇ、７５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を撹拌しながら６時間７５℃に加熱した。粗反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）およびＣＨＣｌ３（４×２０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を減圧で除去し、１．２１ｇ（６５％）のジオールを濃厚な黄色のオイルとして得た。
【０１４７】
【化４５】
ヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
工程Ｂ：２−［Ｎ’，Ｎ’−ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチレンジアミン
０℃、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）中の工程Ａのジオール（１．２１ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）およびピリジン（１．５９ｍＬ、１．５５ｇ、１９．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（２．２１ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２３℃まで温め、２時間撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（３×２５ｍＬ）、次いでブライン（３×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４を用いて乾燥した。溶媒を減圧で除去し、２．２６ｇ（９７％）の淡黄色オイルを得た。
【０１４８】
【化４６】
工程Ｃ：２−［Ｎ，Ｎ−ビス（２，ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）］−エチレンジアミン
工程Ｂの保護アミン（４．２４ｇ、８．８９ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、２３℃で、５ｍＬのトリフルオロ酢酸を加えた。反応混合物を２３℃で１５分撹拌し、続いてトリフルオロ酢酸を減圧で除去した。粗生成物を２Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３×３５ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を減圧で除去し、１．７６ｇ（５３％）の黄色オイルを得た。
【０１４９】
【化４７】
工程Ｄ β−４アラニン，Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルアミド
３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノプロパン酸（８２２．０ｍｇ、４．３４ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（４４２．０ｍｇ、４．３７ｍｍｏｌ）の１４ｍＬ乾燥ＴＨＦ溶液に−１５℃でイソブチルクロロホルメート（０．５３ｍＬ、０．５６ｇ、４．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１分間ー１５℃で撹拌し、続いて工程Ｃからのアミン（１．７２ｇ、４．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３℃に加温し、そして１時間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、沈殿物をＴＨＦ（５ｍＬ）で洗浄し、そして濾液を減圧濃縮した。残った物質を２Ｎ ＮａＯＨ（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して２．２５ｇの茶色がかった黄色のガムを得た。中圧液体クロマトグラフィー（シリカゲル、１：１のＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ）で粗生成物（２．２５ｇ）を精製し、淡黄色オイル６２７．０ｍｇ（２６％）を得た。
【０１５０】
【化４８】
アミドおよびカルバメートのプロトンは観察されなかった。
【０１５１】
工程Ｅ β−４アラニン，２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルアミド
工程Ｄ（６２７．０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）で生成した保護アミンを２３℃でトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を５分間（ＣＯ２の発生が終わるまで）撹拌し、続いて減圧下でトリフルオロ酢酸を除去した。残った物質を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧除去して淡黄色オイル２０３．４ｍｇ（４０％）を得た。
【０１５２】
工程Ｆ β−４アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシエチル）アミノ］エチルアミド
工程Ｅからの粗製アミン（２０３．４ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、９−メトキシアクリジン（９６．８ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）およびメタノール（１０ｍＬ）の混合物を４時間加熱還流した。反応混合物を２３℃に冷却し、そしてさらに２．５日間撹拌した。メタノールを減圧除去し、そして残った物質を２Ｎ ＮａＯＨ（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、そして溶媒を減圧除去して黄色オイル６９．６ｍｇを得た。ＴＬＣ（シリカゲル、１：１のＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ）で粗生成物（６９．６ｍｇ）を精製し、黄色オイル２３．４ｍｇ（８．３％）を得た。
【０１５３】
【化４９】
アミンのプロトンは観測されなかった。
【０１５４】
【化５０】
工程Ｇ β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルアミド二塩酸塩
工程Ｆ（２２．０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）からのビス−保護基ジオールのイソプロパノール（１．０ｍＬ）撹拌溶液に５〜６Ｎ ＨＣｌ／イソプロパノール溶液（０．０５ｍＬ）を２３℃で添加した。反応混合物を２３℃で１７時間撹拌し、そして生じた黄色沈殿物を減圧濾過で集めた。この黄色固体を１．０ｍＬのイソプロパノールでさらにリンスした。残っているイソプロパノールを減圧除去（一晩）し、黄色固体としてジオール二塩酸塩１１．４ｍｇ（６９％）を得た。
【０１５５】
【化５１】
アミド、アミン、ヒドロキシルのプロトンは観測されなかった。
工程Ｈ β−アラニン，Ｎ−（アクリジン−９−イル），２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルアミド二塩酸塩
工程Ｇ（１１．４ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）からのジオールのＣＨ３ＣＮ（１．０ｍＬ）撹拌懸濁液に２３℃でＳＯＣｌ２（０．１２ｍＬ、２００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２３℃で１５分間撹拌し、そして溶液を５０℃まで３．５時間加熱した。生じた黄色沈殿物を減圧濾過で集め、ＣＨ３ＣＮ（３×１．０ｍＬ）でリンスし、減圧乾燥して、黄色粉末８．３ｍｇ（６７％）を得た（ＨＰＬＣにより９５％の純度）。
【０１５６】
【化５２】
アミドおよびアミンのプロトンは観測されなかった。
【０１５７】
実施例８
脆い化合物の加水分解
脆いリンカー中のエステル基（「順方向」および「逆方向」エステル）に組み込む脆い化合物について、モデル化合物をエステル加水分解の量を決定するために研究した。
【０１５８】
反応は、
ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ→ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ２Ｈ ＋ ＨＯ−Ｒ
（「順方向エステル」） （「アクリジン酸」）
ここでＡｃｒＮＨは、以下の表で示された置換基を有する９−アミノアクリジンを指し、そしてｎおよびＲは示されたものを研究した。表ＩＩＩはエステルの加水分解の速度増強を示し、エステル連結がアクリジン環とアルキルアミノ基との間に、近接して位置する。加水分解速度は、アクリジン部分がエステルの酸末端またはアルコール末端に位置しているかにかかわらず急速である。
【０１５９】
【表３】
以下の反応に関して
ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ→ ＡｃｒＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ ＋ ＨＯＣ（＝Ｏ）−Ｒ
（「逆方向エステル」） （「アクリジンアルコール」）
ここで、ＡｃｒＮＨは、以下の表で示された置換基を有する９−アミノアクリジンを指し、そしてｎおよびＲは表に示され、以下の結果が得られた：
【０１６０】
【表４】
ｐＨ３において、表ＩＩＩおよび表ＩＶの全ての化合物が１００分における１％以下の加水分解を示した。
【０１６１】
マスタード化合物は、多数の分解経路が同時に起こるので、同じ様式で評価できない。それにもかかわらず、化合物ＶＩＩＩを表ＩＩＩおよび表ＩＶにおいて同じ条件下でインキュベートする場合、アクリジン酸は、長いインキュベーション時間後の主生成物（９５％以上）であり、そして４０％は１００分において形成される。これは、類似ジオール（１００分で５７％の加水分解）についての表の記述と比較して好ましい。
【０１６２】
エステル連結の加水分解速度は９−アミノアクリジン部分とエステル基との間のリンカーアームの長さに対して逆に変化する（表ＩＩＩおよび表ＩＶにおいて、ｎが増加するにつれて１００分における加水分解の量が減少する）ことが表ＩＩＩおよび表ＩＶのデータから理解される。これは、化合物の加水分解速度を調整する方法を提供する。リンカーの切断を調整するこの能力は、化合物の反応性を、所望されるような種々の用途について調整し得る。
【０１６３】
物質
以下の物質を以下の実施例で使用した：
Ａｄｓｏｌは、Ｂａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｃｏｒｐ．， Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ，ＩＬから市販されているが、ここでおよび以下の実験に使用されるＡｄｓｏｌは以下の混合物を滅菌濾過することによって作製した：蒸留水１リットル中の２２ｇグルコース、９ｇＮａＣｌ、７．５ｇマンニトール、および０．２７ｇアデニン。
【０１６４】
キナクリンマスタードをＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯから入手した。
【０１６５】
全ての血液をＳａｃｒａｍｅｎｔｏ Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ ＣＡ）から入手した。
【０１６６】
実施例９
水疱性口内炎ウィルス（ＶＳＶ）の不活性化
各化合物の保存溶液（代表的に１０〜３０ｍＭ）を、前もって２ｍＭ Ｈ３ＰＯ４で酸性化された血液貯蔵生理食塩水に適量の物質を溶解することによって調製し、次いで１ｍＬアリコート中ですばやく凍結した。使用する際、アリコートを１０℃以下まで加温し、そして１時間以内に使用した。
【０１６７】
濃縮赤血球（ＰＲＢＣ）の調製のために、全血を測定したＨｃｔとともに、６分間３８００ｒｐｍで遠心分離する。上清血漿を除去し、測定する。Ａｄｓｏｌを６０％ＨｃｔとともにＰＲＢＣを供給するために添加する。血漿濃度は１５〜２０％である。
【０１６８】
ＶＳＶ（保存溶液、約１０９ｐｆｕ／ｍＬをＡＴＣＣ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから得た）を組織培養培地（１０％ＮＣＳを有するＤＭＥＭ）で、または２ｍＬの滅菌したｏ−リングチューブにアリコートにした（ａｌｉｑｕｏｔｅｄ）（１ｍＬ）試験培地を提供するＰＢＲＣで、１：１０に希釈する。
【０１６９】
各チューブに、１０〜３００μＭの試験化合物濃度を提供するのに十分な試験化合物溶液を添加する。各サンプルを、混合物を数回十分にピペッティングすることによりすばやく混合する。懸濁液を４時間周囲温度でインキュベートする。ウィルスの力価をＢＨＫ（乳児（ｂａｂｙ）ハムスター腎臓）宿主細胞の処理した培地でのインキュベーションの後に確かめた。ＰＲＢＣは上清単独よりもむしろ直接使用した。ウィルスの死滅は細胞培養のプラークの出現に反比例した。処理していない試験培地の力価と処理した試験サンプルの力価との間の相違は、その濃度での化合物に対する死滅のｌｏｇを提供する。検出限界は１０１．４ｐｆｕ／ｍＬである。
【０１７０】
組織培養培地においてキナクリンマスタード（ＱＭ）、および化合物ＩＶ、ＶＩ、ＸＩ、ＶＩＩおよびはＶＩＩＩは、５０μＭより少ない試験化合物でＶＳＶの３ｌｏｇより大きく不活性化した。化合物ＸＩＩは、約２００μＭで２ｌｏｇを不活性化した。この化合物はエステル加水分解に関して特に不安定であると考えられる。実施例８、表ＩＶで最初の欄に記載されるように、相当するジオール化合物（β−アラニン，［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）］，２−［（６−クロロ−２−メトキシアクリジン−９−イル）アミノ］エチルエステル）は、１００分後、ｐＨ８、３７℃で９９％加水分解された。マスタード化合物はまた、急速な加水分解をうけた。これは、核酸に分子のエフェクター部分を向かわせるアンカー部分の重要性、およびこれらが実際の使用条件下で有効であるように９−アミノアクリジンクラスの化合物の反応性を調整することの重要性を例示する。記述された不活性化のプロトコルで、化合物ＸＩＩの加水分解は不活性化で競合的であると考えられる。
【０１７１】
ＰＲＢＣにおいて、ＱＭおよび化合物ＩＶ、ＶＩ、ＶＩＩＩ、Ｖ、およびＸＩＩＩは１５０μＭより少ない試験化合物でＶＳＶの２ｌｏｇより大きく不活性化した。
【０１７２】
実施例１０
Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの不活性化
ＰＲＢＣおよび保存溶液を実施例９のＶＳＶのように調製した。
【０１７３】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ（Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ，ＣＡ）を３７℃で一晩振盪器上でＬＢ−ブロス中で培養する。一部（１０ｍＬ）を１５ｍＬコニカルチューブ中で１０分間２５００ｒｐｍで遠心分離する。そのペレットを約１０９バクテリア／ｍＬを提供するようにＡｄｓｏｌ １ｍＬ中で再懸濁する。力価を測定するために、光学密度をＡｄｓｏｌで１：１００に希釈して測定した（１０８バクテリア／ｍＬでＯＤ６１０＝０．２）。次いで、細菌保存溶液を滅菌した２ｍＬのｏ−リングチューブにアリコートにした（１ｍＬ）試験培地を提供するために生理食塩水またはＰＲＢＣ中に１：１００に希釈する。
【０１７４】
各チューブに、１０〜３００μＭの試験化合物濃度を提供するのに十分な量の試験化合物溶液を添加する。各サンプルを、混合物を数回、十分にピペッティングすることによりすばやく混合する。次いで、それを２時間周囲温度でインキュベートし、次いで１０−１希釈から始めて、つづけて１０−８希釈まで１００μＬのサンプルで開始するＬＢ−アガー上にプレーティングする。プレートを３７℃で一晩インキュベートし、そしてコロニーをカウントする。処理していない試験培地の力価と処理したサンプルのものとの相違は、その濃度での化合物に関する死滅のｌｏｇを提供する。検出限界は１０バクテリア／ｍＬである。
【０１７５】
生理食塩水において、キナクリンマスタード（ＱＭ）および化合物ＩＶ、ＶＩ、ＶＩＩＩ、Ｖ、ＩＸ、およびＸは、２００μＭ以下の濃度でＹｅｒｓｉｎｉａを２ｌｏｇより強く不活性化する。
【０１７６】
実施例１１
本発明の化合物の導入後の血液機能アッセイ
本発明の化合物の１つの考えられる使用は、輸血を意図される血液または血液製剤に１つ以上の本発明の化合物の導入を含む。血液または血液製剤は化合物での処置後、輸血に適したままでなければならない。赤血球機能における化合物の効果を評価するために、化合物は以下の記述のように試験された。
【０１７７】
５０％ヘマトクリット（Ｈｃｔ）を有する濃縮赤血球を２５００ｒｐｍで６分間公知のＨｃｔと全血を遠心することによって調製する。上清を除去し、そして測定する。懸濁液を所望のＨｃｔを達成するために十分な量のＡｄｓｏｌで希釈する。
【０１７８】
１．５ｍＬのＰＲＢＣを各２ｍＬのｏ−リングチューブに入れ、そして十分な試験化合物の保存溶液を所望の濃度を達成するために添加する。サンプルを４時間周囲温度でインキュベートし、次いで４℃で一晩保存する。溶血はＨｏｇｍａｎら，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，３１：２６−２９（１９９１）の記述のように決定される。
【０１７９】
溶解標準を、２工程で水を用いてインキュベートした混合物１０μＭを希釈することによって各サンプルについてに調製し、最終的に１：４０００の希釈を与える。
【０１８０】
アッセイに関して、サンプルを４℃での保存から取り出し、そして１５分間未満加温した。簡単にボルテックスして混合した後、アリコートを取り除き、そして２分間１４０００ｒｐｍで遠心した。上清を除去し、そして１０分間１４０００ｒｐｍで遠心した。上清を除去し、そして水で必要とされるだけ希釈した。溶解標準および希釈した上清の４１４ｎｍでの吸収を、ブランクの水に対して読みとった。溶血のパーセントは以下のように算出された：
（１００％−５０％Ｈｃｔ）×（サンプルのＡ４１４×希釈因子）／（溶解標準のＡ４１４×４０００）
サンプルのＡ４１４は、本発明の化合物の存在によるいかなる吸収についても訂正されていない。その結果を表Ｖａに示す。
【０１８１】
【表５ａ】
＊ＢＢＳ＝血液保存生理食塩水
＊＊ＡＢＢＳ＝酸性血液保存生理食塩水
＊＊＊ＱＭ＝キナクリンマスタード。
【０１８２】
細胞外カリウムをＣｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｍｏｄｅｌ ６１４ Ｋ＋／Ｎａ＋ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｉｂａ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）を用いて測定した。ＡＴＰをＳｉｇｍａ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ Ｎｏ．３６６（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を用いて測定した。
【０１８３】
表Ｖｂはその実験において未処理ＰＲＢＣサンプルのコントロール値に対する細胞外カリウムの相対値を示す。例えば、相対値１．０３は処理サンプルが未処理コントロールより３％高い細胞外カリウム濃度を有することを意味した。
【０１８４】
【表５ｂ】
＊［Ｋ＋］（処理）／［Ｋ＋］（未処理）。
【０１８５】
表Ｖｃはその実験において未処理ＰＲＢＣサンプルのコントロール値に対する相対的ＡＴＰ値を示す。例えば、相対値１．０３は処理サンプルが未処理コントロールより３％高いＡＴＰを有することを意味した。
【０１８６】
【表５ｃ】
＊［ＡＴＰ］（処理）／［ＡＴＰ］（未処理）。
【０１８７】
実施例１２
本発明の化合物によるＨＩＶの不活性化
ＴＣ培地中の細胞結合ＨＩＶ（Ｐｏｐｏｖｉｃら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２４：４９７（１９８４））：おおよそ１０６ｐｆｕ／ｍＬ以上の力価で懸濁液を提供するために、 Ｈ９−ＩＩＩｂ細胞をＴＣ培地中で懸濁する。１５ｍＬコニカルチューブ中の試験培地の２ｍＬのアリコートに、活性物質の所望の濃度を達成するために十分な量の試験化合物溶液を添加する。懸濁液を数回、十分にピペッティングすることによってすぐに混合し、次いで簡単にボルテックスする。サンプルを２〜４時間周囲温度でインキュベートし、次いで遠心分離する。ペレットを１ｍＬのプラークアッセイ希釈剤で再懸濁し、次いですばやく−８０℃で凍結し、そしてマイクロプラークアッセイによって滴定する。（Ｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏ．，２８：２０３０（１９９０））。
【０１８８】
化合物キナクリンマスタード、ＩＶおよびＶＩは、２５μＭ以下の試験化合物で３ｌｏｇより多いＨＩＶを不活性化した。
【０１８９】
ＰＲＢＣ中の細胞結合ＨＩＶ：ＰＲＢＣ中でアッセイするために、濃縮細胞をＶＳＶアッセイで記述したように調製する。ＨＩＶ９−ＩＩＩｂ細胞を遠心分離した細胞を希釈する前にＡｄｓｏｌに添加する。生じた懸濁液は全ての物質を十分ピペッティングすることによって混合する。試験化合物のインキュベーション終了後、サンプルを５μＬのヘパリンを含む３ｍＬの１：１の血漿：ＤＭＥＭ溶液で希釈する。次いで、感染した細胞をｆｙｃｏｌ−ｈｙｐａｑｕｅの勾配を用いて単離し、１ｍＬの希釈剤で再懸濁し、そして後の滴定のために凍結する。
【０１９０】
化合物キナクリンマスタード、ＶＩおよびＶは、２００μＭ以下の試験化合物で３ｌｏｇより多いＨＩＶを不活性化した。
【０１９１】
ＰＲＢＣ中の細胞フリーＨＩＶ：プロトコルは、調製後のＰＲＢＣに細胞フリーＨＩＶを直接的に加えること以外は上記と同様である。インキュベーション後、培地を遠心分離し、そして上清を後の滴定のために凍結する。
【０１９２】
化合物キナクリンマスタード、ＩＶ、ＶおよびＶＩは、１００μＭ以下の試験化合物で３ｌｏｇより多いＨＩＶを不活性化した。
【０１９３】
前述の発明は、明瞭性および理解するための例証および例示よっていくつか詳細に記載されたが、特定の変化および改変が実際的であり得ることが当業者に明白である。従って、記載および実施例は本発明の範囲を限定するように解釈されるべきではなく、添付の請求の範囲によって記述される。米国特許番号第５，５５９，２５０号および５，３９９，７１９号の全ては、本明細書において参考として援用される。本明細書で引用した他の全ての特許および文献は、本明細書中において参考として援用される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式を含有する化合物、またはその全ての塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）：
【化６５】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３，ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３，ヘテロアルキルであり、
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして、
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１は、−Ｃ１−８アルキル−であり、
Ｗは、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−であり、；
Ｘは、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２であり；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは−Ｃｌであり；
ただし、該化合物は以下の式の化合物を含まない：
【化６６】
【請求項２】
以下の式を有する請求項１に記載の化合物、またはその全ての塩もしくは立体異性体：
【化６７】
【化６８】
【請求項３】
以下の式を有する化合物または薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物。
【化６９】
【請求項１】
以下の式を含有する化合物、またはその全ての塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）：
【化６５】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群より独立して選択され、
ここで−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ１−８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１−３アルキル−アリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１−３アルキル、−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３アルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３アルキル、−Ｃ１−３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１−３ヘテロアルキル、−Ｃ１−３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３ヘテロアルキルまたは−Ｃ１−３，ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１−３，ヘテロアルキルであり、
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり；そして、
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで−Ｒ１１は、−Ｃ１−８アルキル−であり、
Ｗは、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−であり、；
Ｘは、−Ｒ１１−であり；そして
Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２であり；
ここで−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで各Ｇは−Ｃｌであり；
ただし、該化合物は以下の式の化合物を含まない：
【化６６】
【請求項２】
以下の式を有する請求項１に記載の化合物、またはその全ての塩もしくは立体異性体：
【化６７】
【化６８】
【請求項３】
以下の式を有する化合物または薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物。
【化６９】
【公開番号】特開２０１０−９５５２７（Ｐ２０１０−９５５２７Ａ）
【公開日】平成２２年４月３０日（２０１０．４．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２８６９９６（Ｐ２００９−２８６９９６）
【出願日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【分割の表示】特願平１０−５３１１９９の分割
【原出願日】平成１０年１月６日（１９９８．１．６）
【出願人】（５００２２６６３８）セラス コーポレーション (5)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年４月３０日（２０１０．４．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【分割の表示】特願平１０−５３１１９９の分割
【原出願日】平成１０年１月６日（１９９８．１．６）
【出願人】（５００２２６６３８）セラス コーポレーション (5)
【Ｆターム（参考）】
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