目の表面及びその他の障害のための調剤薬及び治療方法
目において用いられるのに適した調剤薬であって、 （i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防する要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と、任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、構成要素（ii）及び（iii）中の前記要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものであることを特徴とする調剤薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドライアイ状態及びその他の目の表面の障害の治療及び／又は予防における調剤薬及びその使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
目の表面が完全な状態であることが、視力及び目の保護にとって非常に重要なことである。目の表面の障害は、健康な目の表面を保つメカニズムが機能しないことによる、種々の病気や障害のグループである。目の表面が、適切に機能しない単位である状態又は障害は、目の表面の障害である。
【０００３】
目の表面の障害は、栄養上のもの、外傷のもの、医原性のもの、増殖性のもの、まぶたの異常に次ぐもの、涙液膜の異常により生ずるもの、神経栄養のものであってもよい。外傷は物理的、化学的、熱的なものであってよい。目の表面の障害は、しばしば治療を受け付けない。目の表面の障害のいくつかのタイプは、ドライ又は非常にドライアイから生じる又はそれらを生じさせるものであり、乾性角結膜炎として知られている状態である。しかしながら、ドライアイ状態は、目の表面の障害から生じる又はそれらを生じさせなくても起きる。
【０００４】
一般に知られているドライアイ状態の２つの基本的なタイプは、ひとつは、「涙不足」ドライアイ、それは「蒸発」ドライアイとしても知られているもので、正常な目よりも涙の生成量が少ないものであり、もうひとつは、「涙が十分な」ドライアイであって、生成される涙量は正常又はほぼ正常であるが、涙の構成が機能が適切に働かないものであるものである。涙が十分なドライアイの最も一般的な原因は、マイボーム腺の病気である。マイボーム腺は脂質を分泌し、涙の表面張力に影響して、目の表面を濡らす能力に影響する。十分な及び／又は適切な脂質がなければ、涙はその機能を適切に実現しない。
【０００５】
涙不足のドライアイはシェーグレン（Ｓｊｏｅｇｒｅｎ）ドライアイ及び非シェーグレンドライアイのいずれも含む。シェーグレン症候群の場合、ドライアイは、しばしば深刻である。非シェーグレンドライアイは非常にありふれている。ドライアイ状態は、他の病理を伴っていない場合でさえ、非常に不快感と痛みを生じ、目が感染しやすくなり、まれには、角膜が溶解する。
【０００６】
目の表面の障害及びドライアイ状態のためには、さまざまな治療法が提案されている。そのような治療法には、局所療法、外科及び治療用のコンタクトレンズが含まれる。現在商業的に入手可能は涙代替療法のための製品は、目の潤滑剤であって、それは涙の体積と流体力学を改善する。それらは一般に電解質と水と薬剤からなり、目の表面の保持能力を高める。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、目に用いるのに適した調剤薬を提供するものであり、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防することができる要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、構成要素（ii）及び（iii）中の要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものである。
【０００８】
この調剤薬は、ここでは、「目の表面媒体」又は「ＯＳ媒体」と呼ぶ。
本発明の目の表面媒体は、
（iv）目の表面の病気、障害又は損傷の治療に用いられるのに適した１又は複数の薬剤
もまた有することができる。
そのような調剤薬をここでは、「治療上の目の表面媒体」又は「ＴＯＳ媒体」と呼ぶ。
【０００９】
構成要素（i）、（ii）及び（iii）を有する本発明の調剤薬は、さらに（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有することができ、前記要因及び薬剤は合成又は遺伝子組み換え又は薬事上の使用のために許可されているものである。
そのような調剤薬は、ここでは「輪部幹細胞媒体」又は「ＬＳＣ媒体」と呼ぶ。
【００１０】
本発明の輪部幹細胞媒体は、構成要素（i）、（ii）、（iii）及び（v）を有し、さらに（iv）目の表面の病気、障害又は損傷の治療に用いられるのに適した１又は複数の薬剤もまた有することができる。
そのような調剤薬は、ここでは「治療上の輪部幹細胞の媒体」又は「ＴＬＳＣ媒体」と呼ぶ。
【００１１】
他に明記しない限り、「本発明の調剤薬」とは、ここでは本発明のどのような調剤薬、すなわち、本発明の目の表面媒体、本発明の治療上の目の表面媒体、本発明の輪部幹細胞媒体、本発明の治療上の輪部幹細胞の媒体も示すように一般的に用いられる。
【００１２】
本発明は、本発明の調剤薬を薬として用いることもできる、例えば、ドライアイ又は目の表面の障害の治療又は予防に用いることが挙げられる。本発明の目の表面媒体又は治療上の目の表面媒体を用いることができる。
【００１３】
本発明はドライアイ又は目の表面の障害の治療又は予防を主題とする方法も提供することができる、その方法は、本発明の調剤薬を治療上効果的な量を冒された目に与えることを含む。本発明の目の表面媒体又は治療上の目の表面媒体を用いることができる。
【００１４】
本発明は、特に本発明の輪部幹細胞媒体、治療上の輪部幹細胞の媒体といった本発明の調剤薬を輪部幹細胞の欠乏又は不足の予防又は治療又は輪部幹細胞移植手術の前治療にも用いることが出来る。
【００１５】
本発明は、さらに目の輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態の治療又は予防に用いられる方法、輪部幹細胞移植手術の前治療の方法であって、本発明の調剤薬、例えば輪部幹細胞媒体、治療上の輪部幹細胞の媒体を治療上効果的な量を冒された目に与えることを含む方法を提供する。
【００１６】
本発明は、本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を眼科の薬成分の薬の媒体又はキャリヤとして用いることを提供する。
【００１７】
本発明は、治療薬剤、および薬の媒体又はキャリヤとして本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を含む眼科の薬成分も提供する。
【００１８】
本発明は、本発明の治療上効果的な量を与えること含む治療を必要とする目の表面の障害の治療方法も提供する。
【００１９】
好ましくは、目の表面の障害は、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい目の表面の障害、慢性の目の表面の病気、目の感染症又は炎症、目の腫瘍、目の外傷の中から選ばれる。
【００２０】
好ましくは、対象は哺乳類である。好ましくは、哺乳類は人間である。代わりに、哺乳動物は人間でない動物であってもよい。人間でない動物としては、食用、輸送用、皮革用、毛又は羊毛用の動物であって、例えば、牛、馬、羊、ヤギ、豚が挙げられる、薬学上有用な薬剤、例えば、遺伝子組み換えたんぱく質を生産するのに用いられる動物、種馬及び産むための動物、競走馬、コンパニオン アニマル、例えば猫、犬及び小動物である。
【００２１】
代わりに、前記対象は、鳥であってもよい、例えば食用の鳥またはコンパニオン アニマルとしての鳥である。
【００２２】
[定義]
ここで用いられる用語は、以下の意味を有する：
細胞付着：細胞付着とは、細胞が互いに癒着すること及び基底膜に癒着することをいう。
【００２３】
ドライアイ状態及びドライアイ：「ドライアイ状態」及び「ドライアイ」とは、ここでは涙の欠乏又は不足を特徴とする全ての状態をいう。そのような状態において、目の表面は水分が欠乏する。ドライアイは穏やかなものから激しいものまであり、目の表面の障害又はその他の病気の状態の一部であることもあり、そうでないこともある。目の表面の病気のいくつかのタイプはドライ又は非常にドライアイから生じるか又はそれらを生じ、乾性角結膜炎としても知られている、しかし、ドライアイ状態は、目の表面の障害を生じることがない、又は目の表面の障害から生じることがなくてもよい。
【００２４】
成長：「成長」とは、長期間にわたって継続する過程に用いられるときは、一般的に細胞の数に比例して全体の大きさ及び体積が増加することを意味する。短期間の場合、「成長」という言葉は、細胞数に変更なく細胞のサイズ（大きさや体積）が増加することを示すことができる。
【００２５】
成長要因：成長要因とは生合成、代謝又は触媒に加わらず、代わりに増殖を調節する非栄養物質をいう。
【００２６】
成長要件：成長要件とは、細胞の成長に効果のあるものであるものであれば、何でも示す。
【００２７】
健康：健康とは通常の特性及び細胞の機能を維持し、細胞の表現型をも維持することを意味する。
【００２８】
ホルモン：ホルモンは体の流体を通して伝えられる化学物質であって、それらを作り出す細胞から遠い標的細胞に影響を与える。
【００２９】
増殖：増殖とは細胞数の正味の増加を意味し、対応する全体の大きさ及び体積の増加を伴い、娘細胞は基本的に親細胞に一致する。
【００３０】
正常な細胞：正常な細胞は、健康で損なわれていない有機体中に見出される細胞と重要な点では相違しない。
【００３１】
正常な分化：正常な分化とは、正常な細胞終点への分化を意味する。
【００３２】
栄養：栄養とは、細胞内に取り入れられて生合成又はエネルギー代謝又はそれらの過程のうち１つの触媒として役立つ化学物質をいう。
【００３３】
目の表面の障害：目の表面が適切に機能しない構成単位であるいかなる状態又は障害も、目の表面の障害である。目の表面の障害は、種々の発病の病気や障害を含み、健康な目の表面を維持する機能の不全から生じる。目の表面の障害の原因は、栄養上の、医原性の、増殖性のものであり、二次的にまぶたの異常であり、又は神経栄養のものである。目の表面の障害は目の表面の損傷により生じるものであり、例えば、外科におけるもの、突発的な外傷であって、物理的、化学的及び熱的外傷を含むものによるもの、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）によるものが挙げられ、目の類天疱瘡も含む。目の表面の障害のいくつかのタイプはドライ又は非常にドライアイから生じるか又はそれらを生じる。
【００３４】
生存：「生存」は、特に生存能力を維持することをいう。多くの場合、生存は、成長に必要な全てのものが満たされているときに増殖によって応答する能力を保持することを意味する。
【００３５】
生存に必要とされるもの：生存に必要とされるものとは、細胞が十分に生存できるために提供されなくてはならない最小限の環境状態の組み合わせのどのような要素でも意味する。
【００３６】
合成及び遺伝子組み換え要因及び薬剤：合成及び遺伝子組み換え要因及び薬剤は、化学合成によって、又はＤＮＡ遺伝子組み換え技術によって生成された基質、すなわち自然源から得られたことがないものである。
【００３７】
涙中断時間（ＢＵＴ）：涙中断時間とは、完全なまばたきと角膜表面の最初の乾燥段階の現れの合間をいう。
【００３８】
本発明の調剤薬
上記に述べたように、本発明は、目に用いるのに適した調剤薬を提供するものであり、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防することができる要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤、及び任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、
構成要素（ii）及び（iii）中の要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものである。
【００３９】
本発明のこの態様は、「目の表面媒体」又は「ＯＳ媒体」と呼ぶ。好適なキャリヤ（i）及び成分（ii）及び（iii）で用いられる要因及び薬剤は、述べられ、以下の「本発明の調剤薬の成分」の項で例示する。
【００４０】
本発明の目の表面媒体は、（iv）成分（i）から（iii）に加えて目の表面の障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤もまた有することができる。目の表面の障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した薬剤は、例えば、散瞳薬、ステロイド、粘液溶解薬、血管形成阻害剤、抗繊維化剤、抗菌剤、目の表面において毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤などが挙げられる。成分（v）において用いられる薬剤の更なる例は、以下の「本発明の調剤薬の成分」の項で述べられる。
【００４１】
本発明の調剤薬は、成分（i）、（ii）及び（iii）を有し、さらに（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有することができる。
【００４２】
そのような調剤薬は、ここでは「輪部幹細胞媒体」又は「ＬＳＣ媒体」と呼ぶ。成分（v）に用いられるのに適した例は、「本発明の調剤薬の成分」として以下に示す。
【００４３】
本発明の輪部幹細胞媒体は、成分（i）、（ii）、（iii）及び（v）を有し、さらに（iv）目の表面の障害の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤もまた有することができる。
【００４４】
そのような調剤薬は、ここでは「治療上の輪部幹細胞の媒体」又は「ＴＬＳＣ媒体」と呼ぶ。
【００４５】
輪部幹細胞媒体は、角膜及び結膜の接合における角膜輪部組織及び／又は円蓋組織中に現れ、結膜及び角膜すなわち目の表面の上皮細胞の幹である。健康を維持するためのこれらの幹細胞が一部損傷していても、正常に分化した目の表面の上皮細胞は、目の表面に対し、深刻な結果となる。
【００４６】
本発明の調剤薬の成分
成分（i）：本発明の調剤薬の成分（i）は、目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤである。目における使用に適したキャリヤはよく知られ、ファーマコピア（ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａｅ）に載っている。それには、点眼液のための精製水、眼科用クリーム、ゲル及び軟膏基材が含まれる。例えば、カルボマーがしばしばゲルの基材として用いられ、パラフィン及び／又はラノリンが軟膏のために用いられる。キャリヤは、１又は複数の等張化剤、例えばグルコース、緩衝材例えばＨＥＰＥＳ又は重炭酸塩から選ばれる。
【００４７】
成分（ii）：本発明の全ての調剤薬は、上皮細胞の生存、健康、体内移行、細胞付着及び正常な分化及び任意に扁平上皮化生を予防することができる１又は複数を促進する要因及び薬剤を含む。
【００４８】
そのような薬剤は、炭素代謝源、アミノ酸、成長因子、ビタミン、抗酸化剤、ムチン置換体、バルクイオン、微量元素、たんぱく質、ホルモン、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤を提供する薬剤から選ぶことが出来る。
【００４９】
上記の様々なカテゴリーの中で、好ましい成分を以下に述べる。それぞれのカテゴリーから１又は複数の成分のいずれを選んで用いてもよく、成分のいかなる組み合わせも用いることができる。好ましくは、それぞれのカテゴリーから少なくとも１つの成分を選ぶことが好ましい。
【００５０】
[炭素代謝源]
グルコース、ピルビン酸塩、好ましくはグルコースである。
【００５１】
[アミノ酸]
好ましくは必須アミノ酸、及び任意に非必須アミノ酸、好ましくはＬ―アミノ酸である：
必須アミノ酸：アルギニン、システィン、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、バリン
非必須アミノ酸：アラニン、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、セリン、チロシン
【００５２】
[成長因子]
ＥＧＦ（上皮成長因子）、ＨＧＦ（肝細胞成長因子）、ＫＧＦ（ケラチノサイト成長因子）、ＮＧＦ（ニューロン成長因子）、グリア由来の神経と栄養の因子、ニューロトロフィン
【００５３】
[抗菌剤]
ラクトフェリン、リゾチーム、デフェンシン、分泌免疫グロブリンA
【００５４】
[ホルモン]
インスリン
【００５５】
[ビタミン]
ビタミンC（アスコルビン酸及びその塩）、任意にビオチン、葉酸、リポ酸、ナイアシンアミド、パントテン酸塩、ピリドキシン、リボフラビン、ビタミンB１２及びビタミンA。
【００５６】
[抗酸化剤]
チロシン及び／又はグルタチオン
【００５７】
[ムチン置換体]
合成ムチン置換体及び／又はヒアルロン酸
【００５８】
[電解質]
バルクイオンから選ばれる１又は複数の電解質、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、塩素、重炭酸塩、硝酸塩、サルフェート、マグネシウム及びリン酸塩のイオンの１又は複数、及び微量元素、例えば銅、鉄、マンガン、モリブデン、ニッケル、セレニウム、シリコン、スズ、バナジウム、亜鉛
【００５９】
[有機化合物]
アデニン、アラントイン、クロリン、i-イノシトール、リノール酸塩、プトレイシン、ピルビン酸塩、チミジンの１又は複数のいずれか。
【００６０】
[プロテアーゼ阻害剤]
マトリックスメタロプロテアーゼの組織阻害剤（TIMPs）、α１−アンチトリプシン、α２−マクログロブリン、インター−α−アンチトリプシン、及びα１−チモトリプシンの１又は複数のいずれか。
【００６１】
[付加要因]
フィブロネクチン
【００６２】
[細胞代謝の毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤]
キレーター、フリーラジカル捕捉剤
【００６３】
成分（ii）において、本発明の調剤薬は、一般に炭素の代謝源、好ましくはグルコースを含む。グルコースは、一般的に約２０から約１５００ｍｇ／ｌの濃度、好ましくは約２６ｍｇ／ｌの濃度で提供する。
【００６４】
ラクトフェリンは好ましくは存在し、例えば約０．２から約４ｍｇ／ｌの濃度で、例えば約１．５ｍｇ／ｌの濃度で存在する。
【００６５】
リゾチームは、さらに好ましい成分として約０．２から約７．０ｍｇ／ｍｌの濃度、より好ましくは約０．４から約３．５ｍｇ／ｍｌの濃度、例えば約１．５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００６６】
ビタミンCは、好ましくは存在し、例えば、目の表面媒体又は輪部表面媒体に対して約１００から約５００μｇ／ｍｌ、例えば、約１１７μｇ／ｍｌの濃度で、及び治療上の目の表面媒体に対して約５００μｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００６７】
ビタミンAは、一般的に存在する。目の表面媒体または輪部表面媒体に対しての濃度は、例えば約１０から約２０ｎｇ／ｍｌ、例えば、約１５ｎｇ／ｍｌの濃度である。治療上の目の表面媒体又は治療上の輪部表面媒体に対しては、濃度は好ましくはより高く、例えば約０．５ｍｇ／ｍｌの濃度が、アルカリによる傷害の治療のための治療媒体に用いられるのに適している。
【００６８】
表皮成長因子は好ましくは存在し、例えば、約０．１から２ｎｇ／ｍｌの濃度で、例えば１ｎｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００６９】
チロシンは好ましくは存在し、例えば約４０から約１００μモルの濃度で、好ましくは、６２μモルの濃度で存在する。
【００７０】
グルタチオンはチロシンに加えて又はチロシンに代えて、例えば約５０から約１１０μモルの濃度で好ましくは存在する。
【００７１】
ナトリウムイオンは好ましくは存在し、例えば約１４０から１５０ｍＥｑ／リットルの量で、例えば約１４５ｍＥｑ／リットルの量で存在する。
【００７２】
カリウムイオンは好ましくは存在し、例えば約２０から約３０ｍＥｑ／リットルの量で、例えば約２４から２５ｍＥｑ／リットルの量で存在する。
【００７３】
カルシウム、塩素、重炭酸塩、硝酸塩、リン酸塩、サルフェートのイオンが好ましくは存在し、カルシウムイオンは約１．０から約２．０ｍＭの濃度で、例えば１．５ｍＭの濃度で、塩素イオンは約１２０から約１３０ｍＭの濃度で、例えば約１２８ｍＭの濃度で、重炭酸塩イオンは約２０から３０ｍＭの濃度で、例えば２６ｍＭの濃度で、硝酸塩イオンは０．１から０．２ｍＭの濃度で、例えば約０．１３から０．１４ｍＭの濃度で、リン酸塩イオンは約０．１５から０．２５ｍＭの濃度で、例えば約０．２０から約０．２４ｍＭの濃度で、サルフェートイオンは、約０．３５から約０．４５ｍＭの濃度で、例えば約０．３８から約０．４０ｍＭの濃度で存在する。
【００７４】
この節に挙げられた全ての成分を有することは、本発明の調剤薬にとって望ましい、すなわち、グルコース、ラクトフェリン、リゾチーム、ＥＧＦ、チロシン、グルタチオン、ビタミンC、ビタミンA及びナトリウム、カリウム、カルシウム、重炭酸塩、硝酸塩、リン酸塩、サルフェートのイオンである。濃度は、好ましくは上記に述べたものである。
【００７５】
成分（iii）：本発明の調剤薬の成分（iii）は、涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤及び任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含む。
【００７６】
安定した涙液膜を形成し、保持することができる薬剤は知られており、様々な脂質を含み、好ましくは極性脂質である、例えばスフィンゴミエリン、ホスファチジルクロリブ（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｂｅ）、及びリポタンパク質、例えば、エタノールアミン及びホスホエタノールアミンである。その代わりに、又はそれに加えてマイボーム腺分泌物、又はその合成類似物、又は１又は複数のそれらの成分を用いることができる。マイボーム腺分泌物は、、涙液膜を形成し、保持することに含まれる薬剤であるタンパク質リポカリンを含む。
【００７７】
眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤は、公知のものであり、また例えばヒプロメロース（ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｅ）(ヒドロキシプロピルメチルセルロースとしても知られている)、半合成のセルロース誘導体、メチルセルロース、カルボマー（例えば、「カルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ）」のブランド名で販売されている）、カルメロース、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポビドン、デキストラン溶液、及び粘弾性薬剤、例えばヒアロン酸、ヒアロン酸ナトリウム及びコンドロイチン硫酸である。
【００７８】
本発明のある態様によると、成分（iii）は、好ましくは、本発明の一態様によると発明者によって非常に優れた潤滑特性を有することが示され、望ましい栄養特性、低毒性で保管に良好な安定性を示すヒプロメロースを含む。好ましくは、調剤薬においては０．２から０．４％のヒプロメロースを含む。
【００７９】
成分（iv）：本発明の調剤薬の任意の成分（iv）は、目の表面の病気、障害、損傷の治療又は予防に用いるのに適した１又は複数の薬剤を含む。そのような薬剤は、例えば、イソプロテレノール、コルチコステロイド、例えば、ヒドロコルチゾン及びデキサメタゾン、非ステロディアル（ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｄｉａｌ）反インフラメートリ（ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍａｔｏｒｙ）薬剤、粘液溶解薬剤、例えば、アセチルシステイン、血管形成阻害剤、例えばアンギオスタチン、アンジオテンシン及び抗ＶＥＧＦ、結合要因、例えばフィブロネクチン、抗線維化剤、例えば、抗ＴＧＦβ、抗菌剤、例えば、抗生物質、デフェンシン、殺菌剤、及び正常な涙中にある抗菌剤、例えば、リゾチーム、ラクトフェリン、ｓＩｇＡ、細胞代謝の毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤、例えばキレーター、フリーラジカル捕捉剤、及び抗酸化物質、プロテアーゼ阻害剤、例えばマトリックスメタロプロテアーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰｓ）、α１−アンチトリプシン、α２−マクログロブリン、インター−α−アンチトリプシン、及びα１−チモトリプシン、及びビタミンA。
【００８０】
本発明の調剤薬は、好ましくは防腐剤を含まない、特にベンズアルコニウムクロライド（ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を含まない、目の表面細胞に有毒だからである。抗菌剤の組み合わせは、例えば、ラクトフェリン、リゾチーム、デフェンシン及びsIgAの１又は複数は、薬を１ヶ月の間細菌の汚染なしで用いることができ、標準の衛生状態を保つ。防腐剤の入っていない薬は、冷蔵庫で約４℃で保存する。
【００８１】
成分（v）：成分（v）は、本発明の輪部幹細胞薬中に存在し、幹細胞特性の生存及び維持、幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を含むことができる。そのような薬剤としては、ＥＧＦ、基礎ＦＧＦ及びＮＧＦを含み、輪部幹細胞及びその親細胞の増殖を刺激する。
【００８２】
本発明の調剤薬の最適の量、濃度及び様々な成分の比は、生体外及び／又は生体内の試験を用いられる経験に従って、経験的に決定することができる。生体外で上皮細胞、例えば角膜及び結膜の上皮細胞を分離し、培養する方法は、よく知られている、例えばＷＯ９８／１６６２９を参照のこと。生体内での目の表面の細胞の成長及び分化を動物を用いて測定する方法もよく知られており、たとえばよく確立されたドライズ（Ｄｒａｉｚｅ）試験が挙げられる。倫理上の問題から、できる限り多くの検証は生体外で行うことが好ましい。
【００８３】
本発明の調剤薬に用いられるのに適した成分の詳細な説明及び適当な濃度及びその他の要因については、以下の実施例においてのべる。当業者であれば決まりきった生成物及び一般知識、例えば上記に述べたことを用いて、どのような特別な要求に従って、どのようなパラメータも変更することができる。
【００８４】
本発明の調剤薬は、人間又は非人間に対する投薬に適しており、特に人間への投薬に適している。非人間である動物には、食用、輸送用、皮革用、毛又は羊毛用の動物が含まれ、例えば、牛、馬、羊、ヤギ、豚、鳥が挙げられる、薬学上有用な薬剤を生成するのに用いられる動物としては、例えば、遺伝子組み換え蛋白質、種馬及び産むための動物、競走馬、及びコンパニオン アニマル、例えば、猫、犬、小動物及び鳥である。
【００８５】
人のための調剤薬又は獣医の使用のための規定の標準を満たすためには、調剤薬は、薬のための使用が許可されているものは除き、人間又は動物から得られた成分を含まないべきである、特に血液、臓器、腺から得られるものである。本発明の調剤薬成分は、合成又は遺伝子組み換え、又は薬事上用いられることが許可されるものである。好ましくは、調剤薬は、医療上の製品のための欧州連合感染性海綿状脳症（ＴＳＥ）必要条件の一般モノグラフ１４８３及び欧州ファーマコピア（Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉａ）の一般章５．２．８に従うべきである。
【００８６】
製剤
本発明の調剤薬は、目における使用に適した形態である、例えば溶液、クリーム、軟膏又はゲルが挙げられる。
【００８７】
目での使用に適したキャリヤはよく知られ、ファーマコピア中に述べられている。それらは、適切な点眼薬のための精製水、ゲルのためのカルボマー、軟膏のためのパラフィン及び／又はラノリンを含む。
【００８８】
調剤薬のｐＨは意図的な使用に適切である。例えば、点眼液は４．５から９．０の範囲のpHを有し、例えば６．０から９．０、好ましくは６．６から８．０、最も好ましくは約７．２である。ドライアイの治療又は予防のために、アルカリｐＨ、例えば約８．５以下が望ましい。点眼液の浸透圧は一般に１００から３５０ｍＯｓｍ、例えば、１２０から３２０ｍＯｓｍ、例えば１５０から３５０ｍＯｓｍ、例えば２９０から３２０ｍＯｓｍ、例えば約３０５ｍＯｓｍである。同じｐＨ及び浸透圧の範囲が一般にクリーム、ゲル及び軟膏に用いられる。
【００８９】
点眼液の表面張力は、好ましくは約４０ｄｙｎｅ／ｃｍから約８０ｄｙｎｅ／ｃｍで、例えば約６０ｄｙｎｅ／ｃｍである。
【００９０】
点眼液の接触角（ぬれ角）は、好ましくは約２０°から約５０°、例えば約３０°である。
【００９１】
点眼液の粘度は、好ましくは、約５ｃｐｓから約５０ｃｐｓ、例えば約１０ｃｐｓである。
【００９２】
本発明の調剤薬は、好ましくは臨床上重要な涙中断時間（ＢＵＴ）を作る。涙中断時間は、涙液膜の組成及び身体構造上の要因に依存する、例えば、眼瞼球不一致は個人間でさまざまである。一般のガイドとして、本発明の調剤薬は、典型的な投与の場合、例えば、５０μｌの点眼液は、ＢＵＴの延長を少なくとも２０分、好ましくは少なくとも４０分、例えば約５０分とする結果になる。
【００９３】
溶液の場合、本発明の調剤薬の成分は、キャリヤに溶解することができ、適切な容器を満たす。１回の投与量が提供される、例えば１回の投与量のプラスチック製のアンプルが挙げられる。他の形態の場合、例えば、ゲル、クリーム及び軟膏は、通常の薬事上の慣例に従って生成される。そのような形態は、１回の投与量の単位又は１回の投与量を投与することのできる容器によって提供される、例えば定量ポンプである。それは溶液に用いるのに有用である、特に治療上の薬剤が調剤薬の中に存在している場合、１回の投与量を溶液で与えることは、クリーム、ゲル又は軟膏で与えるよりも容易である。溶液の１滴は、約５０μｌである。
【発明の効果】
【００９４】
本発明の調剤薬の治療上の効用
上記に述べたとおり、本発明の調剤薬は様々な目の状態の治療又は予防に有用である。
【００９５】
目の表面の障害は、種々の病因の障害であり、健康な目の表面を保つためのメカニズムの故障によって生じるものである。障害の原因は、栄養上のもの、外傷のもの、医原性のもの、増殖性のもの、まぶたの異常に次ぐもの、涙液膜の異常により生ずるもの、神経栄養のものであってもよい。その欠陥は、しばしば治療を受け付けない。目の表面の障害のいくつかのタイプは、ドライ又は非常にドライアイから生じる。ドライアイの状態は、ひどくない場合は、一般に「ドライアイ」又は「ドライアイ状態」と呼ばれる。ひどいドライアイは、乾性角結膜炎として知られている状態である。しかしながら、ドライアイ状態は、目の表面の障害を生じることなく、又は目の表面の障害に起因することなく生じる可能性がある。シェーグレン症候群の場合、ドライアイは、しばしば深刻である。非シェーグレンドライアイ（「ドライアイ」）は非常にありふれている。ドライアイ状態は、他の病理を伴っていない場合でさえ、非常に不快感と痛みを生じ、目が感染しやすくなる。目の表面が適切に機能していない状態又は障害はいずれも、目の表面の障害である。そのような障害は、ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む。
【００９６】
輪部幹細胞媒体は、角膜及び結膜の接合における角膜輪部組織及び／又は円蓋組織中に現れ、結膜及び角膜すなわち目の表面の上皮細胞の幹である。健康を維持するためのこれらの幹細胞が一部損傷していても、正常に分化した目の表面の上皮細胞は、目の表面に対し、深刻な結果となる。
【００９７】
本発明の目の表面媒体は、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防する要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、構成要素（ii）及び（iii）中の前記要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものである。
【００９８】
目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進し、及び任意に安定な涙液膜を維持しながら、扁平上皮化生を予防することによって、本発明の目の表面媒体は、活発に正常で健康な目の表面を活性化し、ドライアイ状態及び目の表面の障害の治療及び／又は予防に用いることができる。ドライアイ状態は、ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群を含む。目の表面の障害は、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後、その他外傷後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む。
【００９９】
本発明の治療上の目の表面媒体は、成分（i）から（iii）に加えて、（iv）目の表面、障害、損傷の予防又は治療に用いられるのに適した１又は複数の薬剤を有し、目の表面の障害及びドライアイ状態であって、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態の治療又は予防に用いられる。さらなる例としては、手術後及び外傷後の状態、例えば持続性の上皮の不具合の経歴（ＰＥＤ）を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１００】
本発明の輪部幹細胞媒体は、成分（i）から（iii）に加えて、（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有する。本発明の輪部幹細胞媒体は、輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態の治療又は予防に用いられることが出来る。
【０１０１】
本発明の治療上の輪部幹細胞媒体は、成分（i）から（iii）及び（v）に加えて、上述した（iv）を有する。治療上の輪部幹細胞媒体は、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態が存する又はその状態である輪部幹細胞媒体状態の治療又は予防に用いられることができる。さらなる例としては、手術後及び外傷後の状態、例えば持続性の上皮の不具合の経歴（ＰＥＤ）を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１０２】
本発明は、薬として用いられる調剤薬を提供する。本発明は、上記に述べた様々な媒体を以下に述べるように特定の目的に使用することもまた提供する。
【０１０３】
ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後、その他外傷後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む目の表面の障害及びドライアイ状態の治療又は予防に用いられる本発明の目の表面媒体。
【０１０４】
ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後、その他外傷後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む目の表面の障害及びドライアイ状態であって、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態が存する目の表面の障害及びドライアイ状態の治療又は予防に用いられる本発明の治療上の目の表面媒体。さらなる例としては、手術後及び他の外傷後の状態、例えば持続性の上皮の不具合の経歴を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１０５】
輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態の治療又は予防に用いられることが出来る輪部幹細胞媒体。
【０１０６】
本発明の治療上の輪部幹細胞媒体は、輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態であって、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態が存する状態の治療又は予防に用いられることが出来る。さらなる例としては、手術後及び外傷後の状態、例えばＰＥＤの経歴を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１０７】
本発明は、上述した治療及び予防の様々な方法に用いられる薬の製造のための本発明の調剤薬の使用もまた提供する。
【０１０８】
本発明はさらに冒された目に適用するものを含む上述した様々な状態の治療及び予防の様々な方法を提供する、詳細は、課題を解決するための手段を参照。
【０１０９】
本発明の調剤薬は、目の表面の上皮細胞の生存、健康、成長、移染、細胞付着及び正常な分化を促進し、及び任意に扁平上皮化生を予防することができ、目の表面の障害及びドライアイ状態の治療に効果的である。以前提案されていた「人口涙」は、目の潤滑剤であり、涙の量と流体力学を改善することは可能であるが、目の表面の上皮細胞の生存、健康、成長、移染、細胞付着及び正常な分化を促進しない。以前提案されていた目の表面の障害及びドライアイ状態の治療であって、局所治療、手術及び治療的なコンタクトレンズを含むものは、満足なものではなかった。ドライアイ状態は、深刻なものでなくても、不快感、痛みを生じ、目を感染しやすくする。そのような状態はありふれたことである。本発明の調剤薬は、特に目の表面媒体及び治療上の目の表面媒体であり、そのような状態及びその他の目の表面の障害に単純で効果的な治療及び予防を提供する。
【０１１０】
本発明の輪部幹細胞媒体は、目の表面の上皮細胞の生存、健康、成長、移染、細胞付着及び／又は正常な分化を促進し、及び扁平上皮化生を予防することに加え、幹細胞特性の生存及び維持、及び／又は目の表面の幹細胞の成長、及び／又は幹細胞の子孫の生存、維持及び分化を促進する。輪部幹細胞媒体は、輪部細胞の再生及び上皮細胞への分化を促進し、幹細胞自体を育て、支え、その中に入る細胞を分化する。本発明の輪部幹細胞媒体は、輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態に対する単純で効果的な治療及び予防を提供する。
【０１１１】
[他の治療薬の媒体としての使用]
本発明の調剤薬は、治療薬特にドライアイ又は目の表面の状態に伴う状態の治療に有用な治療薬を含むことが可能である。
【０１１２】
さらに、本発明は、本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を薬事上の媒体又はキャリヤとして用いることを提供する。
【０１１３】
本発明は、治療薬を含み、治療媒体又はキャリヤとして、本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を含む眼科の薬剤組成物もまた提供する。そのような治療薬は、例えば抗生物質、抗菌剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤及び殺菌剤といった抗菌性薬、副腎皮質及び非ステロイド抗炎症剤といった抗炎症性薬、交感神経興奮剤、ベータブロッカー、プロスタグランジン類似体、副交感神経作用、炭素脱水酵素阻害剤といった眼球内の圧力を下げる抗緑内障薬、アセチルシスティンのような粘液溶解薬、抗ムスカリン剤及び交感神経興奮剤といった散瞳薬及び毛様筋調節薬、及び多くの細胞安定剤及び抗ヒスタミン剤のような抗アレルギー薬を含む。
【０１１４】
本発明の調剤薬を用いる利点は、特に従来のキャリヤの代わりに目の表面媒体（ＯＳＭ)又は輪部幹細胞媒体（ＬＳＣＭ)を用いる利点は、本発明の調剤薬は、目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び／又は正常な分化を支え、その一方で安定な涙液膜を維持し、そうして積極的に正常で健康な目の表面を促進し、輪部幹細胞媒体の場合、目の表面の幹 細胞に成長及び分化を支える。
【０１１５】
多くの目の治療薬は、目の表面に有害な効果を有する、例えば、有毒で角膜上皮に有毒な防腐剤を含むものがある。しかしながら、治療が必要な状態 が十分に深刻である場合、そのような状態を治療しない危険は、目の表面を損傷することよりもまさる。目の表面の健康及び生存能力を促進するためには、本発明のＯＳＭ又はＬＳＣＭをそのような治療薬の媒体として用いることは、治療薬の反対の効果を中和し、損傷の危険性を減少させる。
【０１１６】
塩化ベンザルコニウムは防腐剤で眼科に用いられるが、目の表面細胞を害する。しかしながら、 防腐剤の使用は常に避けることはできない。 目の表面の健康及び生存能力を促進することにより、本発明のＯＳＭ又はＬＳＣＭを塩化ベンザルコニウムを含む成分の媒体として用いることは、 防腐剤の反対の効果を中和し、損傷の危険性を減少させる。
【０１１７】
[本発明の調剤薬を目の表面の上皮細胞の生体外の培養に使用]
本発明の調剤薬は目の表面の上皮細胞の生体外培養媒体として用いられる。
【０１１８】
以下に本発明の制限的でない実施例を述べる。
実施例
【実施例１】
【０１１９】
目の表面媒体
目の表面媒体を以下のとおり点眼液を構成する。
【０１２０】
目の表面媒体の基本的混合物の製造
点眼液に用いられるのに適した水は、全体の体積の８０％以上である。マグネティック スターラーでこの水を静かに攪拌しながら、以下のものを加える：Ｌ−アラニン（８．６９ｍｇ／L）、L−アルギニン．ＨＣｌ（４０６．７０ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−アスパラギン．ＨＣＬ （１２．７４ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−アスパラギン酸（３．８６ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−システィン．ＨＣＬ．Ｈ２Ｏ（４０．５３ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−グルタミン酸（１４．２８ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−グルタミン（９８４．４０ｍｇ／Ｌ）、グリシン（７．３４ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−ヒスチジン．ＨＣＬ．Ｈ２Ｏ（４８．６４ｍｇ／Ｌ）、L−イソロイシン（５．７９ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−ロイシン（１２６．６０ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−リジン．ＨＣＬ（５２．９８ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−メチオニン（１３．０３ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−フェニルアラニン（９．６５ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−プロリン（３３．３９ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−セリン（１２１．８０ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−トレオニン（２２．９７ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−トリプトファン（８．９８ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−チロシン−二ナトリウム塩（１１．２７ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−バリン（６７．７５ｍｇ／Ｌ）、ビオチン（０．０１９ｍｇ／Ｌ）、Ｄ−Ｃａ＋＋−パントテン酸塩（０．２９ｍｇ／Ｌ）、塩化コリン（１３．５１ｍｇ／Ｌ）、葉酸（０．７７２ｍｇ／Ｌ）、i-イノシトール（１７．３７ｍｇ／Ｌ）、ナイアシンアミド（０．０３９ｍｇ／Ｌ）、ピリドキシン．ＨＣＬ（０．０５８ｍｇ／Ｌ）、リボフラビン（０．０３９ｍｇ／Ｌ）、チアミン．ＨＣＬ（０．２９ｍｇ／Ｌ）、ビタミンＢ１２（０．３９６ｍｇ／Ｌ）、プトレシン．２ＨＣＬ（０．１９３ｍｇ／Ｌ）、Ｄ−グルコース（１４６２．００ｍｇ／Ｌ）、ＫＣＬ（１０８．１０ｍｇ／Ｌ）、ＮａＣｌ（６５５３．００ｍｇ／Ｌ）、チミジン（０．７０４ｍｇ／Ｌ）、アデニン（２３．１６ｍｇ／Ｌ）、[４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸]、（ＨＥＰＥＳ、３２２０．００ｍｇ／Ｌ）、リポ酸（０．１９３ｍｇ／Ｌ）、ピルビン酸ナトリウム（５３．０８ｇ）、酢酸ナトリウム（２９０．５０ｍｇ／Ｌ）、Ｎａ２ＨＰＯ４（２７４．１０ｍｇ／Ｌ）、Ｎａ２ＳＯ４（３．３８ｍｇ／Ｌ）、及び遺伝子組み換えのインスリン（５．００ｍｇ／Ｌ）。
【０１２１】
エタノールアミン．ＨＣＬの原液は、９７６ｍｇ／Ｌ／Ｌで水中に調整され、この原液の０．６１５ｍｌ／Ｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的にエタノールアミン．ＨＣＬの濃度は０．６０ｍｇ／Ｌになる。
【０１２２】
ホスホエタノールアミンの原液 は１４０８．００ｍｇ／Ｌで水中に調整され、この原液の０．１００１ｍｌ／Ｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的なホスホエタノールアミンの濃度は、０．１４１ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２３】
ＦｅＳＯ４．７Ｈ２Ｏ（４１．７０ｍｇ／Ｌ）、 ＭｇＣｌ２．６Ｈ２Ｏ（１８８９０ｍｇ／Ｌ）、ＣａＣｌ２．２Ｈ２Ｏ及び０．２０７ＣｕＳｏ４．５Ｈ２Ｏ（１３４３．５ｍｇ／Ｌ）は水中に０．５ｍｌ／Ｌの濃度の濃ＨＣＬを含むように調整され、原液の９．６６０ｍｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的な濃度は、 ＦｅＳＯ４．７Ｈ２Ｏが０．４０３ｍｇ／Ｌ、 ＭｇＣｌ２．６Ｈ２Ｏが１８２．５０ｍｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２．２Ｈ２Ｏが１２．９８ｍｇ／Ｌ及びＣｕＳｏ４．５Ｈ２Ｏ が０．００２ｍｇ／Ｌである。
【０１２４】
ＺｎＳＯ４．７Ｈ２Ｏ（１３７．６８ｍｇ／Ｌ）の原液 は水中に調整され、この原液の０．９６６０ｍｌ／Ｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的なＺｎＳＯ４．７Ｈ２Ｏの濃度は、０．１３３ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２５】
Ｎａ２ＳｅＯ３（０．５１３ｍｇ／Ｌ）、（ＮＨ４）６Ｍｏ７Ｏ２４．４Ｈ２Ｏ（０．１２４ｍｇ／Ｌ）、ＮａＳｉＯ３．９Ｈ２Ｏ（１４．２ｍｇ／Ｌ）、ＮｉＳＯ４．６Ｈ２Ｏ（０．０１３ｍｇ／Ｌ）、ＭｎＣｌ２．４Ｈ２Ｏ（０．００２ｍｇ／Ｌ）、ＳｎＣｌ２．２Ｈ２Ｏ（０．０１１ｍｇ／Ｌ）、及びＮＨ４ＶＯ３（０．０５９ｍｇ／Ｌ）は水中に０．５ｍｌ／Ｌの濃度の濃ＨＣＬを含むように調整され、原液の９．６６０ｍｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的な濃度は、 Ｎａ２ＳｅＯ３が０．００４９６ｍｇ／Ｌ、 （ＮＨ４）６Ｍｏ７Ｏ２４．４Ｈ２Ｏが０．００１２０ｍｇ／Ｌ、ＮａＳｉＯ３．９Ｈ２Ｏが０．１３７ｍｇ／Ｌ、ＮｉＳＯ４．６Ｈ２Ｏが０．００００２ｍｇ／Ｌ、ＭｎＣｌ２．４Ｈ２Ｏが０．０００１１ｍｇ／Ｌ、ＳｎＣｌ２．２Ｈ２Ｏが０．０００１１ｍｇ／Ｌ及びＮＨ４ＶＯ３ が０．０００５７ｍｇ／Ｌである。
【０１２６】
ヒドロコルチゾンの原液 は３７０ｍｇ／Ｌで９５％エタノール中に調整され、この原液の０．２ｍｌ は基礎媒体溶液に加えられ、最終的なヒドロコルチゾンの濃度は、０．０７４ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２７】
トリヨードチロニン（Ｔ３）の原液 は６７．００ｍｇ／Ｌで７０％エタノール中に調整され、この原液の０．１ｍｌ は基礎媒体溶液に加えられ、最終的なＴ３の濃度は、０．００６７ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２８】
ＮａＨＣＯ３ （１１６０ｍｇ／Ｌ）は基礎媒体溶液に加えられ、溶液のｐＨはＨＣｌを用いて７．２±０．２５に調節され、体積は水で所望の体積にする。浸透圧は、２９０±１５ｍＯｓｍに定められる。
【０１２９】
前記混合物はその後、適切な条件で低蛋白質結合フィルターを細菌ろ過し、びんに詰め、使用されるまで光の少ない状態で４℃で保管される。
【０１３０】
補足物の調整
下記のものを無菌のダルベッコホスフェート緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）に攪拌しながら加える：アスコルビン酸ホスフェート、マグネシウム塩（５０ｍｇ／Ｌ）、酸性ＦＧＦ（２．５ｍｇ／Ｌ）、 人間のヘパリン遺伝子組み換えナトリウム塩（５０００ＵＳＰ単位／Ｌ）及び人間ＥＧＦの遺伝子組み換え。
【０１３１】
イソプロテノール．ＨＣｌ（１，０００，０００ｍｇ／Ｌ） の原液をＤＰＢＳ又はアスコルビン酸５０ｍｇ／Ｌを含む水中に調整し、この溶液の１．２５ｍｌ／Ｌを上記液に加え、補足物を５００Ｘ生成する。
【０１３２】
この５００Ｘ溶液はその後、適切な条件で低蛋白質結合フィルターを細菌ろ過し、基礎媒体溶液に加えられるか等分され、用いられるまで−２０から−８０℃で保管される。
【０１３３】
点眼液の調整
点眼液として用いられるためには、前記補足物は基礎媒体の混合物の１：５００の体積比で加えられる。
点眼液は２時間毎に用いる（１日に８回）。
【実施例２】
【０１３４】
実施例１に記載された調剤薬を製剤して３人 の健康なボランティアに試した。滴状の溶液は２時間毎（１日に８回）１週間まで投与する。副作用は起きなかった。点眼液は「心地よい」 と記された。
【実施例３】
【０１３５】
目の表面媒体
以下に示すデータは、ドライアイの治療に用いられる目の表面媒体の成分のリストであって、その媒体は実施例１で示されたものの代替物である。それぞれの成分の好ましい濃度及びそれぞれの成分の濃度の好ましい範囲のおおよその目安が記載されている。それらの媒体は実施例１と同様に実証されている。
【表１】
【表２】
上記媒体は、この例に従って作成され、補足物が１：５００希釈で加えられた場合、下記の物理特性が測定される。許容できる値の範囲も記載する。
【表３】
【０１３６】
上記媒体の生体外での試験は、人間の上皮細胞ラインの生存能力を維持することができ、生体外で人間の角膜の上皮細胞を初代培養できることを示した。 培養された輪部移植片からの人間の角膜の上皮細胞の派生物は、この細胞によって支えられている。人間の角膜の線維芽細胞の傷を癒す働きは、この媒体によって人間の血清中の活性に比較して穏やかになる。このような緩和は、過剰な細胞の増殖を避け、組織の傷の形成を制限するのが望ましい状況で、望ましい特性である。
【実施例４】
【０１３７】
以下のデータは、ドライアイの治療のためのさらなる代わりの目の表面媒体の成分のリストである。この媒体は実施例１に示したと同様な方法で調整された。
【表４】
【表５】
【実施例５】
【０１３８】
以下のデータは、以下の治療に用いられるのが特に適している 治療上の目の表面の回復媒体の成分のリストである。
・持続性の上皮の不具合
・激しく慢性の目の病気
・ＰＥＤを伴う全層角膜移植の手術後治療及び大規模な結膜の自己移植の手術後治療
媒体及び補足物のいずれの成分も実施例３に以下の変更、追加を伴って与えられる。
【表６】
【表７】
【実施例６】
【０１３９】
以下のデータは、輪部幹細胞の欠如又は機能障害の治療及び輪部幹細胞移植後の治療のための媒体の成分のリストである。
媒体及び補足物のいずれの成分も実施例３に以下の変更、追加を伴って与えられる。
【表８】
【実施例７】
【０１４０】
ドライアイ臨床試験
この実施例で述べられる臨床試験は、ドライアイの治療において本発明に従って作られた目の表面媒体の効能を示す。
【０１４１】
[患者のデータ]
被験者
ムーアフィールド眼科医院で角膜及び外部の病気科の穏やかから激しいドライアイの患者を１０人募った。８患者は女性で、２患者は男性である。それぞれの患者の両目を試験した。
年齢： ５２．９０±１８．４５才
範囲 １８−７７
中央値 ５３
追跡できなかった患者はなく、辞退した患者もいない。
【０１４２】
患者の経歴は以下の通りである：
シェーグレン症候群
初期の（１）及び二次的な（５）
非シェーグレン涙欠乏（５）
全身の病気
リウマチ関節炎（５）
目の瘢痕性類天疱瘡
スティーブン−ジョンソン症候群
アトピー
その他の自己免疫病
全身の治療
コルチコステロイド、口（１）
免疫抑制、口（２）
被験目の角膜移植
刺し傷
【０１４３】
[方法]
臨床の採点方法
被験目の臨床状態は、以下の技術によって評価される。
【０１４４】
ローズベンガル染色：ローズベンガルは目に染み込む。目は６つの標準領域に分割され、それそれの領域がその領域の状態に基づいて、０点が最高及び０点が最低として０から３の点が与えられる。それぞれの目の領域の点は、加えられ、それぞれの目が１８点を超えて全得点を与えられる。
【０１４５】
蛍光色素染色：蛍光色素は、目に染み込む。目は５つの標準領域に分割され、それそれの領域がその領域の状態に基づいて、０点が最高及び０点が最低として０から３の点が与えられる。それぞれの目の領域の点は、加えられ、それぞれの目が１５点を超えて全得点を与えられる。
【０１４６】
シルマー試験：シルマー試験は５分間麻酔なしで行われる。この時間内に涙によって濡れたフィルターペーパーの長さは 、ｍｍで記録される。
【０１４７】
涙中断時間（ＢＵＴ）：目の表面上に乾燥した場所が現れ、完全なまばたきがなされる時間をストップウォッチで測定し、秒単位で記録する。
【０１４８】
症状の採点：患者は症状のひどさを以下の等級に従って尋ねられる。
等級０：症状なし。
等級１：症状は穏やかで不快でない。
等級２：症状は普通で不快であるが、活動に支障はない。
等級３：症状はひどく不快であるが、活動に支障はない。
等級４：症状は非常にひどく、不快であり、活動に支障がある。
【０１４９】
以下の症状は得点される：
乾燥
異物感（砂又は砂利が目に入った感じ）
視界のかすみ
不快感
羞明
【０１５０】
それぞれの症状の点数は、合わせて加えられ、全点数が２０を超えて全症状の点数が与えられる。
【０１５１】
顔の類似の得点（顔得点）：患者は「うれしい」（得点１）から「悲しい」（得点１０）までの一連の１０の顔を見せられ、「どの顔が最もあなたの状態を示していますか」とたずねられる。
【０１５２】
結膜充血：結膜充血（「目が血走る」）は、角膜及びコンタクトレンズの調査単位（ＣＣＬＲＵ）階級に従って、０から４の階級がつけられ、階級４が最も激しい。
【０１５３】
眼瞼炎：１２点を超えた点が、それぞれの目の症状の数に基づいて、それぞれの目に対して計算される。それぞれの症状は１点である。観察される症状は：
【０１５４】
瞼の先の縁：潤滑油
皮膚落屑
小環
明らかな潰瘍
まつ毛の喪失
炎症
瞼の後ろの縁：
塞がれた腺 ＞１／３
テランジエクラシア（Ｔｅｌａｎｇｉｅｃｌａｓｉａ）
マイボーム腺炎
瞼の縁の刻み
活性霰粒腫
【０１５５】
目の内圧（ＩＯＰ）：ＩＯＰはｍｍｔｌｇで測定され、記録される。
最も矯正された視力（ＢＣＶＡ）：ＢＣＶＡは以下のように測定され、得点される。
１＝６／６
２＝６／９
３＝６／１２
４＝６／１８
５＝６／２４
６＝６／３６
７＝６／６０
８＝３／６０
９＝１／６０
１０＝ＨＭ，ＣＦ
１１＝ＰＬ
１２＝ＮＰＬ
【表９】
ＲＢ＝ローズベンガル、ＢＵＴ＝涙中断時間の延長、ＩＯＰ＝目の内圧、ＢＣＶＡ＝最も矯正された視力、シルマー＝シルマー試験
【０１５６】
医療行為
実施例１の目の表面媒体は、１ヶ月にわたって１日に８回、両目に与える。患者は、１週、２週及び調査を終了する４週に、自覚的な症状及び他覚的なサインを評価され記録する。
【０１５７】
[分析]
基準からの自覚的及び他覚的な変化が分析される。データは、「包括解析」に基づいて分析される。 効果の変化は、より悪い目のデータからのみ分析される。より悪い目とは、 シルマー試験の点が最も低く、角膜と結膜の染色の合計が悪いものと定義される。両目が同程度の場合は、右目が用いられる。
【０１５８】
両目に対して安全な分析が行われる。
ウイルコクソンの順位和検定は、追跡診察の度にすべての一次的及び二次的な効果の変化における基準からの変化に関して２つのグループ間の違いの評価に用いられる。
【０１５９】
定量的なデータは、組となる試料のパラメータのデータのｔ−試験によって分析される。独立した非パラメータデータは、２グループを比較するためのマン−ウィットニー（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ）Ｕ試験 によって分析される。
【０１６０】
結果
[一次的な結果]
ローズベンガル染色（ＲＢ）が第４週の試験の完了時には被験目（基準のより悪い目）の１０人中７人が基準より３点又はそれ以上の点で改善された。
[二次的な結果]
ドライアイの自覚的な症状が１０人全ての患者において改善された。第４週 までに、乾燥、異物感、不快感、羞明及び顔得点の記録の意義深い改善が見られた。 眼瞼炎、涙中断時間の延長、蛍光色素染色の得点、シルマー試験及び目の内圧（ＩＯＰ）には第４週までに意義深い変化は見られなかった。
【０１６１】
【表１０】
【表１１】
【０１６２】
成功例（ＲＢの得点が第４週の記録から３点又はそれ以上改善された）
リウマチ関節炎（５）であり二次的にシェーグレン症候群（３）でもある患者
スティーブン−ジョンソン症候群（２）
シルマー試験（涙で濡れたフィルター紙の一片の長さでｍｍで現される）０ｍｍ （２）、１ｍｍ（２）、２ｍｍ（１）、３ｍｍ（１）、４ｍｍ（１）
【０１６３】
失敗例（ＲＢの得点が第４週の記録から３点以下改善された）
ＯＣＰ（１）の患者。５４才の女性は全身免疫抑制である。シルマーは０ｍ。
被験目のＲＢ得点は１６であり、ＲＢ得点の変化は２である。
スティーブン−ジョンソン症候群及びアトピー（１）。１８才の女性。シルマー０。 被験目のＲＢ得点は９であり、ＲＢ得点の変化は−３である。
初期のシェーグレン症候群。３９才の女性。シルマーは１ｍｍ。 被験目のＲＢ得 点は１４であり、ＲＢ得点の変化は２である。
【０１６４】
[安全性データ（ウイルコクソンの順位和検定で両目を分析した）]
ＢＣＶＡ：最も矯正された視力は、基準から第４週まで被験目（ｐ＝０．８９１）又はもう一方の目（ｐ＝０．７０５）に大きな変化はない。
ＩＯＰ： ＩＯＰは、基準から第４週まで被験目（ｐ＝０．８８９）又はもう一方の目（ｐ＝０．４８２）に大きな変化はない。
【０１６５】
結膜充血：基準から第４週まで被験目（ｐ＝０．００８）又はもう一方の目（ｐ＝０．０１４）も大きく減少した。
白内障：試験期間において被験目又はもう一方の目が白内障に発展した患者はいなかった。１人の患者は、試験期間中に、目の局所又は全体の治療の変更を伴わずに、もう一方の目に白内障摘出及び眼内レンズの移植を受けた。
【０１６６】
不利な出来事：一人の患者が第２週及び第３週に読書中の目のかすみを訴えたが、試験は続行され、症状は解決した。
【０１６７】
[結論]
自覚的な症状の改善が１０人の患者全員に見られ、他覚的な症状の改善が７人の患者に見られた。深刻な不利な出来事はなく、視力、目の内圧、レンズの不透明さに大きな変化はなかった。本発明に従って、目の表面媒体を適用することは、目の表面の病気に対して有効で安全な治療であることがわかった。
【０１６８】
実施例８
様々な増粘剤及び栄養物の比較
様々な増粘剤は、濃縮された状態で、本発明に従って、生理学上目の表面媒体と両立して用いられる補足物である。生じた媒体は、生体外で試験される。
【０１６９】
[材料と方法]
ヒプロメロース、カルボポール又はヒアロン酸ナトリウムは、０．０００１％から０．４％の濃度で目の表面媒体への補足剤として用いられた。結果物のｐＨと浸透圧は調整され、生理学上の範囲に調節された。生物物理学的な特性、例えば粘度及び表面張力は、血流計及び電子圧力計によって測定される。２人の人の角膜上皮細胞（ＨＣＥ−Ｔ及びＣＥＰＥＩ−１７−Ｃｌ．４）及び２人の人の結膜上皮細胞は、製剤に応答した細胞の増殖、生存能力、転移 をＡＴＰ分析に基づく発光、カルセインＡＭ／ＥｔｈＤ−１分析、コロニー分散分析によって調査される。全ての溶液は４℃で３ヶ月保存され、再度安定性の調査がなされる。
【０１７０】
結果
補足されていない媒体の浸透圧は、ずり速度１．７から１２８．５ｓ−１で０．７５ｍＰａ．ｓｅｃ であった。 ヒプロメロース、カルボポール又はヒアロン酸ナトリウムは、全ての濃度において媒体の粘度を大きく増加した、しかし、ほんの０．２％及び０．４％のヒプロメロース及び０．４％のヒアロン酸ナトリウムで補足された媒体は、適度の粘度と非ニュートン挙動を見せた。ヒプロメロースで補足された媒体の粘度は、４℃で保管された場合３ヶ月の間安定である。それに対して、カルボポール又はヒアロン酸ナトリウムで補足された媒体の粘度は大きく変化した。ヒプロメロースで補足した媒体の表面張力は涙に類似した表面張力５０ｍＮ／ｍを示した。比較のために、水の表面張力は約７０ｍN／ｍである。０．２％又は０．４％のヒプロメロースで補足された媒体は、細胞の成長と細胞増殖を支える優れた能力を示した。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドライアイ状態及びその他の目の表面の障害の治療及び／又は予防における調剤薬及びその使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
目の表面が完全な状態であることが、視力及び目の保護にとって非常に重要なことである。目の表面の障害は、健康な目の表面を保つメカニズムが機能しないことによる、種々の病気や障害のグループである。目の表面が、適切に機能しない単位である状態又は障害は、目の表面の障害である。
【０００３】
目の表面の障害は、栄養上のもの、外傷のもの、医原性のもの、増殖性のもの、まぶたの異常に次ぐもの、涙液膜の異常により生ずるもの、神経栄養のものであってもよい。外傷は物理的、化学的、熱的なものであってよい。目の表面の障害は、しばしば治療を受け付けない。目の表面の障害のいくつかのタイプは、ドライ又は非常にドライアイから生じる又はそれらを生じさせるものであり、乾性角結膜炎として知られている状態である。しかしながら、ドライアイ状態は、目の表面の障害から生じる又はそれらを生じさせなくても起きる。
【０００４】
一般に知られているドライアイ状態の２つの基本的なタイプは、ひとつは、「涙不足」ドライアイ、それは「蒸発」ドライアイとしても知られているもので、正常な目よりも涙の生成量が少ないものであり、もうひとつは、「涙が十分な」ドライアイであって、生成される涙量は正常又はほぼ正常であるが、涙の構成が機能が適切に働かないものであるものである。涙が十分なドライアイの最も一般的な原因は、マイボーム腺の病気である。マイボーム腺は脂質を分泌し、涙の表面張力に影響して、目の表面を濡らす能力に影響する。十分な及び／又は適切な脂質がなければ、涙はその機能を適切に実現しない。
【０００５】
涙不足のドライアイはシェーグレン（Ｓｊｏｅｇｒｅｎ）ドライアイ及び非シェーグレンドライアイのいずれも含む。シェーグレン症候群の場合、ドライアイは、しばしば深刻である。非シェーグレンドライアイは非常にありふれている。ドライアイ状態は、他の病理を伴っていない場合でさえ、非常に不快感と痛みを生じ、目が感染しやすくなり、まれには、角膜が溶解する。
【０００６】
目の表面の障害及びドライアイ状態のためには、さまざまな治療法が提案されている。そのような治療法には、局所療法、外科及び治療用のコンタクトレンズが含まれる。現在商業的に入手可能は涙代替療法のための製品は、目の潤滑剤であって、それは涙の体積と流体力学を改善する。それらは一般に電解質と水と薬剤からなり、目の表面の保持能力を高める。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、目に用いるのに適した調剤薬を提供するものであり、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防することができる要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、構成要素（ii）及び（iii）中の要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものである。
【０００８】
この調剤薬は、ここでは、「目の表面媒体」又は「ＯＳ媒体」と呼ぶ。
本発明の目の表面媒体は、
（iv）目の表面の病気、障害又は損傷の治療に用いられるのに適した１又は複数の薬剤
もまた有することができる。
そのような調剤薬をここでは、「治療上の目の表面媒体」又は「ＴＯＳ媒体」と呼ぶ。
【０００９】
構成要素（i）、（ii）及び（iii）を有する本発明の調剤薬は、さらに（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有することができ、前記要因及び薬剤は合成又は遺伝子組み換え又は薬事上の使用のために許可されているものである。
そのような調剤薬は、ここでは「輪部幹細胞媒体」又は「ＬＳＣ媒体」と呼ぶ。
【００１０】
本発明の輪部幹細胞媒体は、構成要素（i）、（ii）、（iii）及び（v）を有し、さらに（iv）目の表面の病気、障害又は損傷の治療に用いられるのに適した１又は複数の薬剤もまた有することができる。
そのような調剤薬は、ここでは「治療上の輪部幹細胞の媒体」又は「ＴＬＳＣ媒体」と呼ぶ。
【００１１】
他に明記しない限り、「本発明の調剤薬」とは、ここでは本発明のどのような調剤薬、すなわち、本発明の目の表面媒体、本発明の治療上の目の表面媒体、本発明の輪部幹細胞媒体、本発明の治療上の輪部幹細胞の媒体も示すように一般的に用いられる。
【００１２】
本発明は、本発明の調剤薬を薬として用いることもできる、例えば、ドライアイ又は目の表面の障害の治療又は予防に用いることが挙げられる。本発明の目の表面媒体又は治療上の目の表面媒体を用いることができる。
【００１３】
本発明はドライアイ又は目の表面の障害の治療又は予防を主題とする方法も提供することができる、その方法は、本発明の調剤薬を治療上効果的な量を冒された目に与えることを含む。本発明の目の表面媒体又は治療上の目の表面媒体を用いることができる。
【００１４】
本発明は、特に本発明の輪部幹細胞媒体、治療上の輪部幹細胞の媒体といった本発明の調剤薬を輪部幹細胞の欠乏又は不足の予防又は治療又は輪部幹細胞移植手術の前治療にも用いることが出来る。
【００１５】
本発明は、さらに目の輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態の治療又は予防に用いられる方法、輪部幹細胞移植手術の前治療の方法であって、本発明の調剤薬、例えば輪部幹細胞媒体、治療上の輪部幹細胞の媒体を治療上効果的な量を冒された目に与えることを含む方法を提供する。
【００１６】
本発明は、本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を眼科の薬成分の薬の媒体又はキャリヤとして用いることを提供する。
【００１７】
本発明は、治療薬剤、および薬の媒体又はキャリヤとして本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を含む眼科の薬成分も提供する。
【００１８】
本発明は、本発明の治療上効果的な量を与えること含む治療を必要とする目の表面の障害の治療方法も提供する。
【００１９】
好ましくは、目の表面の障害は、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい目の表面の障害、慢性の目の表面の病気、目の感染症又は炎症、目の腫瘍、目の外傷の中から選ばれる。
【００２０】
好ましくは、対象は哺乳類である。好ましくは、哺乳類は人間である。代わりに、哺乳動物は人間でない動物であってもよい。人間でない動物としては、食用、輸送用、皮革用、毛又は羊毛用の動物であって、例えば、牛、馬、羊、ヤギ、豚が挙げられる、薬学上有用な薬剤、例えば、遺伝子組み換えたんぱく質を生産するのに用いられる動物、種馬及び産むための動物、競走馬、コンパニオン アニマル、例えば猫、犬及び小動物である。
【００２１】
代わりに、前記対象は、鳥であってもよい、例えば食用の鳥またはコンパニオン アニマルとしての鳥である。
【００２２】
[定義]
ここで用いられる用語は、以下の意味を有する：
細胞付着：細胞付着とは、細胞が互いに癒着すること及び基底膜に癒着することをいう。
【００２３】
ドライアイ状態及びドライアイ：「ドライアイ状態」及び「ドライアイ」とは、ここでは涙の欠乏又は不足を特徴とする全ての状態をいう。そのような状態において、目の表面は水分が欠乏する。ドライアイは穏やかなものから激しいものまであり、目の表面の障害又はその他の病気の状態の一部であることもあり、そうでないこともある。目の表面の病気のいくつかのタイプはドライ又は非常にドライアイから生じるか又はそれらを生じ、乾性角結膜炎としても知られている、しかし、ドライアイ状態は、目の表面の障害を生じることがない、又は目の表面の障害から生じることがなくてもよい。
【００２４】
成長：「成長」とは、長期間にわたって継続する過程に用いられるときは、一般的に細胞の数に比例して全体の大きさ及び体積が増加することを意味する。短期間の場合、「成長」という言葉は、細胞数に変更なく細胞のサイズ（大きさや体積）が増加することを示すことができる。
【００２５】
成長要因：成長要因とは生合成、代謝又は触媒に加わらず、代わりに増殖を調節する非栄養物質をいう。
【００２６】
成長要件：成長要件とは、細胞の成長に効果のあるものであるものであれば、何でも示す。
【００２７】
健康：健康とは通常の特性及び細胞の機能を維持し、細胞の表現型をも維持することを意味する。
【００２８】
ホルモン：ホルモンは体の流体を通して伝えられる化学物質であって、それらを作り出す細胞から遠い標的細胞に影響を与える。
【００２９】
増殖：増殖とは細胞数の正味の増加を意味し、対応する全体の大きさ及び体積の増加を伴い、娘細胞は基本的に親細胞に一致する。
【００３０】
正常な細胞：正常な細胞は、健康で損なわれていない有機体中に見出される細胞と重要な点では相違しない。
【００３１】
正常な分化：正常な分化とは、正常な細胞終点への分化を意味する。
【００３２】
栄養：栄養とは、細胞内に取り入れられて生合成又はエネルギー代謝又はそれらの過程のうち１つの触媒として役立つ化学物質をいう。
【００３３】
目の表面の障害：目の表面が適切に機能しない構成単位であるいかなる状態又は障害も、目の表面の障害である。目の表面の障害は、種々の発病の病気や障害を含み、健康な目の表面を維持する機能の不全から生じる。目の表面の障害の原因は、栄養上の、医原性の、増殖性のものであり、二次的にまぶたの異常であり、又は神経栄養のものである。目の表面の障害は目の表面の損傷により生じるものであり、例えば、外科におけるもの、突発的な外傷であって、物理的、化学的及び熱的外傷を含むものによるもの、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）によるものが挙げられ、目の類天疱瘡も含む。目の表面の障害のいくつかのタイプはドライ又は非常にドライアイから生じるか又はそれらを生じる。
【００３４】
生存：「生存」は、特に生存能力を維持することをいう。多くの場合、生存は、成長に必要な全てのものが満たされているときに増殖によって応答する能力を保持することを意味する。
【００３５】
生存に必要とされるもの：生存に必要とされるものとは、細胞が十分に生存できるために提供されなくてはならない最小限の環境状態の組み合わせのどのような要素でも意味する。
【００３６】
合成及び遺伝子組み換え要因及び薬剤：合成及び遺伝子組み換え要因及び薬剤は、化学合成によって、又はＤＮＡ遺伝子組み換え技術によって生成された基質、すなわち自然源から得られたことがないものである。
【００３７】
涙中断時間（ＢＵＴ）：涙中断時間とは、完全なまばたきと角膜表面の最初の乾燥段階の現れの合間をいう。
【００３８】
本発明の調剤薬
上記に述べたように、本発明は、目に用いるのに適した調剤薬を提供するものであり、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防することができる要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤、及び任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、
構成要素（ii）及び（iii）中の要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものである。
【００３９】
本発明のこの態様は、「目の表面媒体」又は「ＯＳ媒体」と呼ぶ。好適なキャリヤ（i）及び成分（ii）及び（iii）で用いられる要因及び薬剤は、述べられ、以下の「本発明の調剤薬の成分」の項で例示する。
【００４０】
本発明の目の表面媒体は、（iv）成分（i）から（iii）に加えて目の表面の障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤もまた有することができる。目の表面の障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した薬剤は、例えば、散瞳薬、ステロイド、粘液溶解薬、血管形成阻害剤、抗繊維化剤、抗菌剤、目の表面において毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤などが挙げられる。成分（v）において用いられる薬剤の更なる例は、以下の「本発明の調剤薬の成分」の項で述べられる。
【００４１】
本発明の調剤薬は、成分（i）、（ii）及び（iii）を有し、さらに（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有することができる。
【００４２】
そのような調剤薬は、ここでは「輪部幹細胞媒体」又は「ＬＳＣ媒体」と呼ぶ。成分（v）に用いられるのに適した例は、「本発明の調剤薬の成分」として以下に示す。
【００４３】
本発明の輪部幹細胞媒体は、成分（i）、（ii）、（iii）及び（v）を有し、さらに（iv）目の表面の障害の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤もまた有することができる。
【００４４】
そのような調剤薬は、ここでは「治療上の輪部幹細胞の媒体」又は「ＴＬＳＣ媒体」と呼ぶ。
【００４５】
輪部幹細胞媒体は、角膜及び結膜の接合における角膜輪部組織及び／又は円蓋組織中に現れ、結膜及び角膜すなわち目の表面の上皮細胞の幹である。健康を維持するためのこれらの幹細胞が一部損傷していても、正常に分化した目の表面の上皮細胞は、目の表面に対し、深刻な結果となる。
【００４６】
本発明の調剤薬の成分
成分（i）：本発明の調剤薬の成分（i）は、目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤである。目における使用に適したキャリヤはよく知られ、ファーマコピア（ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａｅ）に載っている。それには、点眼液のための精製水、眼科用クリーム、ゲル及び軟膏基材が含まれる。例えば、カルボマーがしばしばゲルの基材として用いられ、パラフィン及び／又はラノリンが軟膏のために用いられる。キャリヤは、１又は複数の等張化剤、例えばグルコース、緩衝材例えばＨＥＰＥＳ又は重炭酸塩から選ばれる。
【００４７】
成分（ii）：本発明の全ての調剤薬は、上皮細胞の生存、健康、体内移行、細胞付着及び正常な分化及び任意に扁平上皮化生を予防することができる１又は複数を促進する要因及び薬剤を含む。
【００４８】
そのような薬剤は、炭素代謝源、アミノ酸、成長因子、ビタミン、抗酸化剤、ムチン置換体、バルクイオン、微量元素、たんぱく質、ホルモン、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤を提供する薬剤から選ぶことが出来る。
【００４９】
上記の様々なカテゴリーの中で、好ましい成分を以下に述べる。それぞれのカテゴリーから１又は複数の成分のいずれを選んで用いてもよく、成分のいかなる組み合わせも用いることができる。好ましくは、それぞれのカテゴリーから少なくとも１つの成分を選ぶことが好ましい。
【００５０】
[炭素代謝源]
グルコース、ピルビン酸塩、好ましくはグルコースである。
【００５１】
[アミノ酸]
好ましくは必須アミノ酸、及び任意に非必須アミノ酸、好ましくはＬ―アミノ酸である：
必須アミノ酸：アルギニン、システィン、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、バリン
非必須アミノ酸：アラニン、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、セリン、チロシン
【００５２】
[成長因子]
ＥＧＦ（上皮成長因子）、ＨＧＦ（肝細胞成長因子）、ＫＧＦ（ケラチノサイト成長因子）、ＮＧＦ（ニューロン成長因子）、グリア由来の神経と栄養の因子、ニューロトロフィン
【００５３】
[抗菌剤]
ラクトフェリン、リゾチーム、デフェンシン、分泌免疫グロブリンA
【００５４】
[ホルモン]
インスリン
【００５５】
[ビタミン]
ビタミンC（アスコルビン酸及びその塩）、任意にビオチン、葉酸、リポ酸、ナイアシンアミド、パントテン酸塩、ピリドキシン、リボフラビン、ビタミンB１２及びビタミンA。
【００５６】
[抗酸化剤]
チロシン及び／又はグルタチオン
【００５７】
[ムチン置換体]
合成ムチン置換体及び／又はヒアルロン酸
【００５８】
[電解質]
バルクイオンから選ばれる１又は複数の電解質、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、塩素、重炭酸塩、硝酸塩、サルフェート、マグネシウム及びリン酸塩のイオンの１又は複数、及び微量元素、例えば銅、鉄、マンガン、モリブデン、ニッケル、セレニウム、シリコン、スズ、バナジウム、亜鉛
【００５９】
[有機化合物]
アデニン、アラントイン、クロリン、i-イノシトール、リノール酸塩、プトレイシン、ピルビン酸塩、チミジンの１又は複数のいずれか。
【００６０】
[プロテアーゼ阻害剤]
マトリックスメタロプロテアーゼの組織阻害剤（TIMPs）、α１−アンチトリプシン、α２−マクログロブリン、インター−α−アンチトリプシン、及びα１−チモトリプシンの１又は複数のいずれか。
【００６１】
[付加要因]
フィブロネクチン
【００６２】
[細胞代謝の毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤]
キレーター、フリーラジカル捕捉剤
【００６３】
成分（ii）において、本発明の調剤薬は、一般に炭素の代謝源、好ましくはグルコースを含む。グルコースは、一般的に約２０から約１５００ｍｇ／ｌの濃度、好ましくは約２６ｍｇ／ｌの濃度で提供する。
【００６４】
ラクトフェリンは好ましくは存在し、例えば約０．２から約４ｍｇ／ｌの濃度で、例えば約１．５ｍｇ／ｌの濃度で存在する。
【００６５】
リゾチームは、さらに好ましい成分として約０．２から約７．０ｍｇ／ｍｌの濃度、より好ましくは約０．４から約３．５ｍｇ／ｍｌの濃度、例えば約１．５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００６６】
ビタミンCは、好ましくは存在し、例えば、目の表面媒体又は輪部表面媒体に対して約１００から約５００μｇ／ｍｌ、例えば、約１１７μｇ／ｍｌの濃度で、及び治療上の目の表面媒体に対して約５００μｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００６７】
ビタミンAは、一般的に存在する。目の表面媒体または輪部表面媒体に対しての濃度は、例えば約１０から約２０ｎｇ／ｍｌ、例えば、約１５ｎｇ／ｍｌの濃度である。治療上の目の表面媒体又は治療上の輪部表面媒体に対しては、濃度は好ましくはより高く、例えば約０．５ｍｇ／ｍｌの濃度が、アルカリによる傷害の治療のための治療媒体に用いられるのに適している。
【００６８】
表皮成長因子は好ましくは存在し、例えば、約０．１から２ｎｇ／ｍｌの濃度で、例えば１ｎｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００６９】
チロシンは好ましくは存在し、例えば約４０から約１００μモルの濃度で、好ましくは、６２μモルの濃度で存在する。
【００７０】
グルタチオンはチロシンに加えて又はチロシンに代えて、例えば約５０から約１１０μモルの濃度で好ましくは存在する。
【００７１】
ナトリウムイオンは好ましくは存在し、例えば約１４０から１５０ｍＥｑ／リットルの量で、例えば約１４５ｍＥｑ／リットルの量で存在する。
【００７２】
カリウムイオンは好ましくは存在し、例えば約２０から約３０ｍＥｑ／リットルの量で、例えば約２４から２５ｍＥｑ／リットルの量で存在する。
【００７３】
カルシウム、塩素、重炭酸塩、硝酸塩、リン酸塩、サルフェートのイオンが好ましくは存在し、カルシウムイオンは約１．０から約２．０ｍＭの濃度で、例えば１．５ｍＭの濃度で、塩素イオンは約１２０から約１３０ｍＭの濃度で、例えば約１２８ｍＭの濃度で、重炭酸塩イオンは約２０から３０ｍＭの濃度で、例えば２６ｍＭの濃度で、硝酸塩イオンは０．１から０．２ｍＭの濃度で、例えば約０．１３から０．１４ｍＭの濃度で、リン酸塩イオンは約０．１５から０．２５ｍＭの濃度で、例えば約０．２０から約０．２４ｍＭの濃度で、サルフェートイオンは、約０．３５から約０．４５ｍＭの濃度で、例えば約０．３８から約０．４０ｍＭの濃度で存在する。
【００７４】
この節に挙げられた全ての成分を有することは、本発明の調剤薬にとって望ましい、すなわち、グルコース、ラクトフェリン、リゾチーム、ＥＧＦ、チロシン、グルタチオン、ビタミンC、ビタミンA及びナトリウム、カリウム、カルシウム、重炭酸塩、硝酸塩、リン酸塩、サルフェートのイオンである。濃度は、好ましくは上記に述べたものである。
【００７５】
成分（iii）：本発明の調剤薬の成分（iii）は、涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤及び任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含む。
【００７６】
安定した涙液膜を形成し、保持することができる薬剤は知られており、様々な脂質を含み、好ましくは極性脂質である、例えばスフィンゴミエリン、ホスファチジルクロリブ（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｂｅ）、及びリポタンパク質、例えば、エタノールアミン及びホスホエタノールアミンである。その代わりに、又はそれに加えてマイボーム腺分泌物、又はその合成類似物、又は１又は複数のそれらの成分を用いることができる。マイボーム腺分泌物は、、涙液膜を形成し、保持することに含まれる薬剤であるタンパク質リポカリンを含む。
【００７７】
眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤は、公知のものであり、また例えばヒプロメロース（ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｅ）(ヒドロキシプロピルメチルセルロースとしても知られている)、半合成のセルロース誘導体、メチルセルロース、カルボマー（例えば、「カルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ）」のブランド名で販売されている）、カルメロース、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポビドン、デキストラン溶液、及び粘弾性薬剤、例えばヒアロン酸、ヒアロン酸ナトリウム及びコンドロイチン硫酸である。
【００７８】
本発明のある態様によると、成分（iii）は、好ましくは、本発明の一態様によると発明者によって非常に優れた潤滑特性を有することが示され、望ましい栄養特性、低毒性で保管に良好な安定性を示すヒプロメロースを含む。好ましくは、調剤薬においては０．２から０．４％のヒプロメロースを含む。
【００７９】
成分（iv）：本発明の調剤薬の任意の成分（iv）は、目の表面の病気、障害、損傷の治療又は予防に用いるのに適した１又は複数の薬剤を含む。そのような薬剤は、例えば、イソプロテレノール、コルチコステロイド、例えば、ヒドロコルチゾン及びデキサメタゾン、非ステロディアル（ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｄｉａｌ）反インフラメートリ（ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍａｔｏｒｙ）薬剤、粘液溶解薬剤、例えば、アセチルシステイン、血管形成阻害剤、例えばアンギオスタチン、アンジオテンシン及び抗ＶＥＧＦ、結合要因、例えばフィブロネクチン、抗線維化剤、例えば、抗ＴＧＦβ、抗菌剤、例えば、抗生物質、デフェンシン、殺菌剤、及び正常な涙中にある抗菌剤、例えば、リゾチーム、ラクトフェリン、ｓＩｇＡ、細胞代謝の毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤、例えばキレーター、フリーラジカル捕捉剤、及び抗酸化物質、プロテアーゼ阻害剤、例えばマトリックスメタロプロテアーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰｓ）、α１−アンチトリプシン、α２−マクログロブリン、インター−α−アンチトリプシン、及びα１−チモトリプシン、及びビタミンA。
【００８０】
本発明の調剤薬は、好ましくは防腐剤を含まない、特にベンズアルコニウムクロライド（ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を含まない、目の表面細胞に有毒だからである。抗菌剤の組み合わせは、例えば、ラクトフェリン、リゾチーム、デフェンシン及びsIgAの１又は複数は、薬を１ヶ月の間細菌の汚染なしで用いることができ、標準の衛生状態を保つ。防腐剤の入っていない薬は、冷蔵庫で約４℃で保存する。
【００８１】
成分（v）：成分（v）は、本発明の輪部幹細胞薬中に存在し、幹細胞特性の生存及び維持、幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を含むことができる。そのような薬剤としては、ＥＧＦ、基礎ＦＧＦ及びＮＧＦを含み、輪部幹細胞及びその親細胞の増殖を刺激する。
【００８２】
本発明の調剤薬の最適の量、濃度及び様々な成分の比は、生体外及び／又は生体内の試験を用いられる経験に従って、経験的に決定することができる。生体外で上皮細胞、例えば角膜及び結膜の上皮細胞を分離し、培養する方法は、よく知られている、例えばＷＯ９８／１６６２９を参照のこと。生体内での目の表面の細胞の成長及び分化を動物を用いて測定する方法もよく知られており、たとえばよく確立されたドライズ（Ｄｒａｉｚｅ）試験が挙げられる。倫理上の問題から、できる限り多くの検証は生体外で行うことが好ましい。
【００８３】
本発明の調剤薬に用いられるのに適した成分の詳細な説明及び適当な濃度及びその他の要因については、以下の実施例においてのべる。当業者であれば決まりきった生成物及び一般知識、例えば上記に述べたことを用いて、どのような特別な要求に従って、どのようなパラメータも変更することができる。
【００８４】
本発明の調剤薬は、人間又は非人間に対する投薬に適しており、特に人間への投薬に適している。非人間である動物には、食用、輸送用、皮革用、毛又は羊毛用の動物が含まれ、例えば、牛、馬、羊、ヤギ、豚、鳥が挙げられる、薬学上有用な薬剤を生成するのに用いられる動物としては、例えば、遺伝子組み換え蛋白質、種馬及び産むための動物、競走馬、及びコンパニオン アニマル、例えば、猫、犬、小動物及び鳥である。
【００８５】
人のための調剤薬又は獣医の使用のための規定の標準を満たすためには、調剤薬は、薬のための使用が許可されているものは除き、人間又は動物から得られた成分を含まないべきである、特に血液、臓器、腺から得られるものである。本発明の調剤薬成分は、合成又は遺伝子組み換え、又は薬事上用いられることが許可されるものである。好ましくは、調剤薬は、医療上の製品のための欧州連合感染性海綿状脳症（ＴＳＥ）必要条件の一般モノグラフ１４８３及び欧州ファーマコピア（Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉａ）の一般章５．２．８に従うべきである。
【００８６】
製剤
本発明の調剤薬は、目における使用に適した形態である、例えば溶液、クリーム、軟膏又はゲルが挙げられる。
【００８７】
目での使用に適したキャリヤはよく知られ、ファーマコピア中に述べられている。それらは、適切な点眼薬のための精製水、ゲルのためのカルボマー、軟膏のためのパラフィン及び／又はラノリンを含む。
【００８８】
調剤薬のｐＨは意図的な使用に適切である。例えば、点眼液は４．５から９．０の範囲のpHを有し、例えば６．０から９．０、好ましくは６．６から８．０、最も好ましくは約７．２である。ドライアイの治療又は予防のために、アルカリｐＨ、例えば約８．５以下が望ましい。点眼液の浸透圧は一般に１００から３５０ｍＯｓｍ、例えば、１２０から３２０ｍＯｓｍ、例えば１５０から３５０ｍＯｓｍ、例えば２９０から３２０ｍＯｓｍ、例えば約３０５ｍＯｓｍである。同じｐＨ及び浸透圧の範囲が一般にクリーム、ゲル及び軟膏に用いられる。
【００８９】
点眼液の表面張力は、好ましくは約４０ｄｙｎｅ／ｃｍから約８０ｄｙｎｅ／ｃｍで、例えば約６０ｄｙｎｅ／ｃｍである。
【００９０】
点眼液の接触角（ぬれ角）は、好ましくは約２０°から約５０°、例えば約３０°である。
【００９１】
点眼液の粘度は、好ましくは、約５ｃｐｓから約５０ｃｐｓ、例えば約１０ｃｐｓである。
【００９２】
本発明の調剤薬は、好ましくは臨床上重要な涙中断時間（ＢＵＴ）を作る。涙中断時間は、涙液膜の組成及び身体構造上の要因に依存する、例えば、眼瞼球不一致は個人間でさまざまである。一般のガイドとして、本発明の調剤薬は、典型的な投与の場合、例えば、５０μｌの点眼液は、ＢＵＴの延長を少なくとも２０分、好ましくは少なくとも４０分、例えば約５０分とする結果になる。
【００９３】
溶液の場合、本発明の調剤薬の成分は、キャリヤに溶解することができ、適切な容器を満たす。１回の投与量が提供される、例えば１回の投与量のプラスチック製のアンプルが挙げられる。他の形態の場合、例えば、ゲル、クリーム及び軟膏は、通常の薬事上の慣例に従って生成される。そのような形態は、１回の投与量の単位又は１回の投与量を投与することのできる容器によって提供される、例えば定量ポンプである。それは溶液に用いるのに有用である、特に治療上の薬剤が調剤薬の中に存在している場合、１回の投与量を溶液で与えることは、クリーム、ゲル又は軟膏で与えるよりも容易である。溶液の１滴は、約５０μｌである。
【発明の効果】
【００９４】
本発明の調剤薬の治療上の効用
上記に述べたとおり、本発明の調剤薬は様々な目の状態の治療又は予防に有用である。
【００９５】
目の表面の障害は、種々の病因の障害であり、健康な目の表面を保つためのメカニズムの故障によって生じるものである。障害の原因は、栄養上のもの、外傷のもの、医原性のもの、増殖性のもの、まぶたの異常に次ぐもの、涙液膜の異常により生ずるもの、神経栄養のものであってもよい。その欠陥は、しばしば治療を受け付けない。目の表面の障害のいくつかのタイプは、ドライ又は非常にドライアイから生じる。ドライアイの状態は、ひどくない場合は、一般に「ドライアイ」又は「ドライアイ状態」と呼ばれる。ひどいドライアイは、乾性角結膜炎として知られている状態である。しかしながら、ドライアイ状態は、目の表面の障害を生じることなく、又は目の表面の障害に起因することなく生じる可能性がある。シェーグレン症候群の場合、ドライアイは、しばしば深刻である。非シェーグレンドライアイ（「ドライアイ」）は非常にありふれている。ドライアイ状態は、他の病理を伴っていない場合でさえ、非常に不快感と痛みを生じ、目が感染しやすくなる。目の表面が適切に機能していない状態又は障害はいずれも、目の表面の障害である。そのような障害は、ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む。
【００９６】
輪部幹細胞媒体は、角膜及び結膜の接合における角膜輪部組織及び／又は円蓋組織中に現れ、結膜及び角膜すなわち目の表面の上皮細胞の幹である。健康を維持するためのこれらの幹細胞が一部損傷していても、正常に分化した目の表面の上皮細胞は、目の表面に対し、深刻な結果となる。
【００９７】
本発明の目の表面媒体は、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防する要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、構成要素（ii）及び（iii）中の前記要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものである。
【００９８】
目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進し、及び任意に安定な涙液膜を維持しながら、扁平上皮化生を予防することによって、本発明の目の表面媒体は、活発に正常で健康な目の表面を活性化し、ドライアイ状態及び目の表面の障害の治療及び／又は予防に用いることができる。ドライアイ状態は、ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群を含む。目の表面の障害は、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後、その他外傷後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む。
【００９９】
本発明の治療上の目の表面媒体は、成分（i）から（iii）に加えて、（iv）目の表面、障害、損傷の予防又は治療に用いられるのに適した１又は複数の薬剤を有し、目の表面の障害及びドライアイ状態であって、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態の治療又は予防に用いられる。さらなる例としては、手術後及び外傷後の状態、例えば持続性の上皮の不具合の経歴（ＰＥＤ）を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１００】
本発明の輪部幹細胞媒体は、成分（i）から（iii）に加えて、（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有する。本発明の輪部幹細胞媒体は、輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態の治療又は予防に用いられることが出来る。
【０１０１】
本発明の治療上の輪部幹細胞媒体は、成分（i）から（iii）及び（v）に加えて、上述した（iv）を有する。治療上の輪部幹細胞媒体は、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態が存する又はその状態である輪部幹細胞媒体状態の治療又は予防に用いられることができる。さらなる例としては、手術後及び外傷後の状態、例えば持続性の上皮の不具合の経歴（ＰＥＤ）を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１０２】
本発明は、薬として用いられる調剤薬を提供する。本発明は、上記に述べた様々な媒体を以下に述べるように特定の目的に使用することもまた提供する。
【０１０３】
ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後、その他外傷後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む目の表面の障害及びドライアイ状態の治療又は予防に用いられる本発明の目の表面媒体。
【０１０４】
ドライアイ、乾性角結膜炎、シェーグレン症候群、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、手術後、その他外傷後の状態、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい又は慢性の目の表面の病気を含む目の表面の障害及びドライアイ状態であって、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態が存する目の表面の障害及びドライアイ状態の治療又は予防に用いられる本発明の治療上の目の表面媒体。さらなる例としては、手術後及び他の外傷後の状態、例えば持続性の上皮の不具合の経歴を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１０５】
輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態の治療又は予防に用いられることが出来る輪部幹細胞媒体。
【０１０６】
本発明の治療上の輪部幹細胞媒体は、輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態であって、さらなる病理状態、例えば感染症又は炎症、腫瘍、外傷、又は自己免疫、変性、医原性の状態が存する状態の治療又は予防に用いられることが出来る。さらなる例としては、手術後及び外傷後の状態、例えばＰＥＤの経歴を伴う全層角膜移植及びそれに次ぐ大規模な結膜の自己移植が挙げられる。
【０１０７】
本発明は、上述した治療及び予防の様々な方法に用いられる薬の製造のための本発明の調剤薬の使用もまた提供する。
【０１０８】
本発明はさらに冒された目に適用するものを含む上述した様々な状態の治療及び予防の様々な方法を提供する、詳細は、課題を解決するための手段を参照。
【０１０９】
本発明の調剤薬は、目の表面の上皮細胞の生存、健康、成長、移染、細胞付着及び正常な分化を促進し、及び任意に扁平上皮化生を予防することができ、目の表面の障害及びドライアイ状態の治療に効果的である。以前提案されていた「人口涙」は、目の潤滑剤であり、涙の量と流体力学を改善することは可能であるが、目の表面の上皮細胞の生存、健康、成長、移染、細胞付着及び正常な分化を促進しない。以前提案されていた目の表面の障害及びドライアイ状態の治療であって、局所治療、手術及び治療的なコンタクトレンズを含むものは、満足なものではなかった。ドライアイ状態は、深刻なものでなくても、不快感、痛みを生じ、目を感染しやすくする。そのような状態はありふれたことである。本発明の調剤薬は、特に目の表面媒体及び治療上の目の表面媒体であり、そのような状態及びその他の目の表面の障害に単純で効果的な治療及び予防を提供する。
【０１１０】
本発明の輪部幹細胞媒体は、目の表面の上皮細胞の生存、健康、成長、移染、細胞付着及び／又は正常な分化を促進し、及び扁平上皮化生を予防することに加え、幹細胞特性の生存及び維持、及び／又は目の表面の幹細胞の成長、及び／又は幹細胞の子孫の生存、維持及び分化を促進する。輪部幹細胞媒体は、輪部細胞の再生及び上皮細胞への分化を促進し、幹細胞自体を育て、支え、その中に入る細胞を分化する。本発明の輪部幹細胞媒体は、輪部幹細胞の欠乏又は不足を含む状態、例えば、輪部幹細胞の部分的又は全体的な不足、及び輪部幹細胞の移植手術後の治療を含む状態に対する単純で効果的な治療及び予防を提供する。
【０１１１】
[他の治療薬の媒体としての使用]
本発明の調剤薬は、治療薬特にドライアイ又は目の表面の状態に伴う状態の治療に有用な治療薬を含むことが可能である。
【０１１２】
さらに、本発明は、本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を薬事上の媒体又はキャリヤとして用いることを提供する。
【０１１３】
本発明は、治療薬を含み、治療媒体又はキャリヤとして、本発明の目の表面媒体又は輪部幹細胞媒体を含む眼科の薬剤組成物もまた提供する。そのような治療薬は、例えば抗生物質、抗菌剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤及び殺菌剤といった抗菌性薬、副腎皮質及び非ステロイド抗炎症剤といった抗炎症性薬、交感神経興奮剤、ベータブロッカー、プロスタグランジン類似体、副交感神経作用、炭素脱水酵素阻害剤といった眼球内の圧力を下げる抗緑内障薬、アセチルシスティンのような粘液溶解薬、抗ムスカリン剤及び交感神経興奮剤といった散瞳薬及び毛様筋調節薬、及び多くの細胞安定剤及び抗ヒスタミン剤のような抗アレルギー薬を含む。
【０１１４】
本発明の調剤薬を用いる利点は、特に従来のキャリヤの代わりに目の表面媒体（ＯＳＭ)又は輪部幹細胞媒体（ＬＳＣＭ)を用いる利点は、本発明の調剤薬は、目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び／又は正常な分化を支え、その一方で安定な涙液膜を維持し、そうして積極的に正常で健康な目の表面を促進し、輪部幹細胞媒体の場合、目の表面の幹 細胞に成長及び分化を支える。
【０１１５】
多くの目の治療薬は、目の表面に有害な効果を有する、例えば、有毒で角膜上皮に有毒な防腐剤を含むものがある。しかしながら、治療が必要な状態 が十分に深刻である場合、そのような状態を治療しない危険は、目の表面を損傷することよりもまさる。目の表面の健康及び生存能力を促進するためには、本発明のＯＳＭ又はＬＳＣＭをそのような治療薬の媒体として用いることは、治療薬の反対の効果を中和し、損傷の危険性を減少させる。
【０１１６】
塩化ベンザルコニウムは防腐剤で眼科に用いられるが、目の表面細胞を害する。しかしながら、 防腐剤の使用は常に避けることはできない。 目の表面の健康及び生存能力を促進することにより、本発明のＯＳＭ又はＬＳＣＭを塩化ベンザルコニウムを含む成分の媒体として用いることは、 防腐剤の反対の効果を中和し、損傷の危険性を減少させる。
【０１１７】
[本発明の調剤薬を目の表面の上皮細胞の生体外の培養に使用]
本発明の調剤薬は目の表面の上皮細胞の生体外培養媒体として用いられる。
【０１１８】
以下に本発明の制限的でない実施例を述べる。
実施例
【実施例１】
【０１１９】
目の表面媒体
目の表面媒体を以下のとおり点眼液を構成する。
【０１２０】
目の表面媒体の基本的混合物の製造
点眼液に用いられるのに適した水は、全体の体積の８０％以上である。マグネティック スターラーでこの水を静かに攪拌しながら、以下のものを加える：Ｌ−アラニン（８．６９ｍｇ／L）、L−アルギニン．ＨＣｌ（４０６．７０ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−アスパラギン．ＨＣＬ （１２．７４ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−アスパラギン酸（３．８６ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−システィン．ＨＣＬ．Ｈ２Ｏ（４０．５３ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−グルタミン酸（１４．２８ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−グルタミン（９８４．４０ｍｇ／Ｌ）、グリシン（７．３４ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−ヒスチジン．ＨＣＬ．Ｈ２Ｏ（４８．６４ｍｇ／Ｌ）、L−イソロイシン（５．７９ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−ロイシン（１２６．６０ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−リジン．ＨＣＬ（５２．９８ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−メチオニン（１３．０３ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−フェニルアラニン（９．６５ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−プロリン（３３．３９ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−セリン（１２１．８０ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−トレオニン（２２．９７ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−トリプトファン（８．９８ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−チロシン−二ナトリウム塩（１１．２７ｍｇ／Ｌ）、Ｌ−バリン（６７．７５ｍｇ／Ｌ）、ビオチン（０．０１９ｍｇ／Ｌ）、Ｄ−Ｃａ＋＋−パントテン酸塩（０．２９ｍｇ／Ｌ）、塩化コリン（１３．５１ｍｇ／Ｌ）、葉酸（０．７７２ｍｇ／Ｌ）、i-イノシトール（１７．３７ｍｇ／Ｌ）、ナイアシンアミド（０．０３９ｍｇ／Ｌ）、ピリドキシン．ＨＣＬ（０．０５８ｍｇ／Ｌ）、リボフラビン（０．０３９ｍｇ／Ｌ）、チアミン．ＨＣＬ（０．２９ｍｇ／Ｌ）、ビタミンＢ１２（０．３９６ｍｇ／Ｌ）、プトレシン．２ＨＣＬ（０．１９３ｍｇ／Ｌ）、Ｄ−グルコース（１４６２．００ｍｇ／Ｌ）、ＫＣＬ（１０８．１０ｍｇ／Ｌ）、ＮａＣｌ（６５５３．００ｍｇ／Ｌ）、チミジン（０．７０４ｍｇ／Ｌ）、アデニン（２３．１６ｍｇ／Ｌ）、[４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸]、（ＨＥＰＥＳ、３２２０．００ｍｇ／Ｌ）、リポ酸（０．１９３ｍｇ／Ｌ）、ピルビン酸ナトリウム（５３．０８ｇ）、酢酸ナトリウム（２９０．５０ｍｇ／Ｌ）、Ｎａ２ＨＰＯ４（２７４．１０ｍｇ／Ｌ）、Ｎａ２ＳＯ４（３．３８ｍｇ／Ｌ）、及び遺伝子組み換えのインスリン（５．００ｍｇ／Ｌ）。
【０１２１】
エタノールアミン．ＨＣＬの原液は、９７６ｍｇ／Ｌ／Ｌで水中に調整され、この原液の０．６１５ｍｌ／Ｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的にエタノールアミン．ＨＣＬの濃度は０．６０ｍｇ／Ｌになる。
【０１２２】
ホスホエタノールアミンの原液 は１４０８．００ｍｇ／Ｌで水中に調整され、この原液の０．１００１ｍｌ／Ｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的なホスホエタノールアミンの濃度は、０．１４１ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２３】
ＦｅＳＯ４．７Ｈ２Ｏ（４１．７０ｍｇ／Ｌ）、 ＭｇＣｌ２．６Ｈ２Ｏ（１８８９０ｍｇ／Ｌ）、ＣａＣｌ２．２Ｈ２Ｏ及び０．２０７ＣｕＳｏ４．５Ｈ２Ｏ（１３４３．５ｍｇ／Ｌ）は水中に０．５ｍｌ／Ｌの濃度の濃ＨＣＬを含むように調整され、原液の９．６６０ｍｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的な濃度は、 ＦｅＳＯ４．７Ｈ２Ｏが０．４０３ｍｇ／Ｌ、 ＭｇＣｌ２．６Ｈ２Ｏが１８２．５０ｍｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２．２Ｈ２Ｏが１２．９８ｍｇ／Ｌ及びＣｕＳｏ４．５Ｈ２Ｏ が０．００２ｍｇ／Ｌである。
【０１２４】
ＺｎＳＯ４．７Ｈ２Ｏ（１３７．６８ｍｇ／Ｌ）の原液 は水中に調整され、この原液の０．９６６０ｍｌ／Ｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的なＺｎＳＯ４．７Ｈ２Ｏの濃度は、０．１３３ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２５】
Ｎａ２ＳｅＯ３（０．５１３ｍｇ／Ｌ）、（ＮＨ４）６Ｍｏ７Ｏ２４．４Ｈ２Ｏ（０．１２４ｍｇ／Ｌ）、ＮａＳｉＯ３．９Ｈ２Ｏ（１４．２ｍｇ／Ｌ）、ＮｉＳＯ４．６Ｈ２Ｏ（０．０１３ｍｇ／Ｌ）、ＭｎＣｌ２．４Ｈ２Ｏ（０．００２ｍｇ／Ｌ）、ＳｎＣｌ２．２Ｈ２Ｏ（０．０１１ｍｇ／Ｌ）、及びＮＨ４ＶＯ３（０．０５９ｍｇ／Ｌ）は水中に０．５ｍｌ／Ｌの濃度の濃ＨＣＬを含むように調整され、原液の９．６６０ｍｌは基礎媒体溶液に加えられ、最終的な濃度は、 Ｎａ２ＳｅＯ３が０．００４９６ｍｇ／Ｌ、 （ＮＨ４）６Ｍｏ７Ｏ２４．４Ｈ２Ｏが０．００１２０ｍｇ／Ｌ、ＮａＳｉＯ３．９Ｈ２Ｏが０．１３７ｍｇ／Ｌ、ＮｉＳＯ４．６Ｈ２Ｏが０．００００２ｍｇ／Ｌ、ＭｎＣｌ２．４Ｈ２Ｏが０．０００１１ｍｇ／Ｌ、ＳｎＣｌ２．２Ｈ２Ｏが０．０００１１ｍｇ／Ｌ及びＮＨ４ＶＯ３ が０．０００５７ｍｇ／Ｌである。
【０１２６】
ヒドロコルチゾンの原液 は３７０ｍｇ／Ｌで９５％エタノール中に調整され、この原液の０．２ｍｌ は基礎媒体溶液に加えられ、最終的なヒドロコルチゾンの濃度は、０．０７４ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２７】
トリヨードチロニン（Ｔ３）の原液 は６７．００ｍｇ／Ｌで７０％エタノール中に調整され、この原液の０．１ｍｌ は基礎媒体溶液に加えられ、最終的なＴ３の濃度は、０．００６７ｍｇ／Ｌとなる。
【０１２８】
ＮａＨＣＯ３ （１１６０ｍｇ／Ｌ）は基礎媒体溶液に加えられ、溶液のｐＨはＨＣｌを用いて７．２±０．２５に調節され、体積は水で所望の体積にする。浸透圧は、２９０±１５ｍＯｓｍに定められる。
【０１２９】
前記混合物はその後、適切な条件で低蛋白質結合フィルターを細菌ろ過し、びんに詰め、使用されるまで光の少ない状態で４℃で保管される。
【０１３０】
補足物の調整
下記のものを無菌のダルベッコホスフェート緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）に攪拌しながら加える：アスコルビン酸ホスフェート、マグネシウム塩（５０ｍｇ／Ｌ）、酸性ＦＧＦ（２．５ｍｇ／Ｌ）、 人間のヘパリン遺伝子組み換えナトリウム塩（５０００ＵＳＰ単位／Ｌ）及び人間ＥＧＦの遺伝子組み換え。
【０１３１】
イソプロテノール．ＨＣｌ（１，０００，０００ｍｇ／Ｌ） の原液をＤＰＢＳ又はアスコルビン酸５０ｍｇ／Ｌを含む水中に調整し、この溶液の１．２５ｍｌ／Ｌを上記液に加え、補足物を５００Ｘ生成する。
【０１３２】
この５００Ｘ溶液はその後、適切な条件で低蛋白質結合フィルターを細菌ろ過し、基礎媒体溶液に加えられるか等分され、用いられるまで−２０から−８０℃で保管される。
【０１３３】
点眼液の調整
点眼液として用いられるためには、前記補足物は基礎媒体の混合物の１：５００の体積比で加えられる。
点眼液は２時間毎に用いる（１日に８回）。
【実施例２】
【０１３４】
実施例１に記載された調剤薬を製剤して３人 の健康なボランティアに試した。滴状の溶液は２時間毎（１日に８回）１週間まで投与する。副作用は起きなかった。点眼液は「心地よい」 と記された。
【実施例３】
【０１３５】
目の表面媒体
以下に示すデータは、ドライアイの治療に用いられる目の表面媒体の成分のリストであって、その媒体は実施例１で示されたものの代替物である。それぞれの成分の好ましい濃度及びそれぞれの成分の濃度の好ましい範囲のおおよその目安が記載されている。それらの媒体は実施例１と同様に実証されている。
【表１】
【表２】
上記媒体は、この例に従って作成され、補足物が１：５００希釈で加えられた場合、下記の物理特性が測定される。許容できる値の範囲も記載する。
【表３】
【０１３６】
上記媒体の生体外での試験は、人間の上皮細胞ラインの生存能力を維持することができ、生体外で人間の角膜の上皮細胞を初代培養できることを示した。 培養された輪部移植片からの人間の角膜の上皮細胞の派生物は、この細胞によって支えられている。人間の角膜の線維芽細胞の傷を癒す働きは、この媒体によって人間の血清中の活性に比較して穏やかになる。このような緩和は、過剰な細胞の増殖を避け、組織の傷の形成を制限するのが望ましい状況で、望ましい特性である。
【実施例４】
【０１３７】
以下のデータは、ドライアイの治療のためのさらなる代わりの目の表面媒体の成分のリストである。この媒体は実施例１に示したと同様な方法で調整された。
【表４】
【表５】
【実施例５】
【０１３８】
以下のデータは、以下の治療に用いられるのが特に適している 治療上の目の表面の回復媒体の成分のリストである。
・持続性の上皮の不具合
・激しく慢性の目の病気
・ＰＥＤを伴う全層角膜移植の手術後治療及び大規模な結膜の自己移植の手術後治療
媒体及び補足物のいずれの成分も実施例３に以下の変更、追加を伴って与えられる。
【表６】
【表７】
【実施例６】
【０１３９】
以下のデータは、輪部幹細胞の欠如又は機能障害の治療及び輪部幹細胞移植後の治療のための媒体の成分のリストである。
媒体及び補足物のいずれの成分も実施例３に以下の変更、追加を伴って与えられる。
【表８】
【実施例７】
【０１４０】
ドライアイ臨床試験
この実施例で述べられる臨床試験は、ドライアイの治療において本発明に従って作られた目の表面媒体の効能を示す。
【０１４１】
[患者のデータ]
被験者
ムーアフィールド眼科医院で角膜及び外部の病気科の穏やかから激しいドライアイの患者を１０人募った。８患者は女性で、２患者は男性である。それぞれの患者の両目を試験した。
年齢： ５２．９０±１８．４５才
範囲 １８−７７
中央値 ５３
追跡できなかった患者はなく、辞退した患者もいない。
【０１４２】
患者の経歴は以下の通りである：
シェーグレン症候群
初期の（１）及び二次的な（５）
非シェーグレン涙欠乏（５）
全身の病気
リウマチ関節炎（５）
目の瘢痕性類天疱瘡
スティーブン−ジョンソン症候群
アトピー
その他の自己免疫病
全身の治療
コルチコステロイド、口（１）
免疫抑制、口（２）
被験目の角膜移植
刺し傷
【０１４３】
[方法]
臨床の採点方法
被験目の臨床状態は、以下の技術によって評価される。
【０１４４】
ローズベンガル染色：ローズベンガルは目に染み込む。目は６つの標準領域に分割され、それそれの領域がその領域の状態に基づいて、０点が最高及び０点が最低として０から３の点が与えられる。それぞれの目の領域の点は、加えられ、それぞれの目が１８点を超えて全得点を与えられる。
【０１４５】
蛍光色素染色：蛍光色素は、目に染み込む。目は５つの標準領域に分割され、それそれの領域がその領域の状態に基づいて、０点が最高及び０点が最低として０から３の点が与えられる。それぞれの目の領域の点は、加えられ、それぞれの目が１５点を超えて全得点を与えられる。
【０１４６】
シルマー試験：シルマー試験は５分間麻酔なしで行われる。この時間内に涙によって濡れたフィルターペーパーの長さは 、ｍｍで記録される。
【０１４７】
涙中断時間（ＢＵＴ）：目の表面上に乾燥した場所が現れ、完全なまばたきがなされる時間をストップウォッチで測定し、秒単位で記録する。
【０１４８】
症状の採点：患者は症状のひどさを以下の等級に従って尋ねられる。
等級０：症状なし。
等級１：症状は穏やかで不快でない。
等級２：症状は普通で不快であるが、活動に支障はない。
等級３：症状はひどく不快であるが、活動に支障はない。
等級４：症状は非常にひどく、不快であり、活動に支障がある。
【０１４９】
以下の症状は得点される：
乾燥
異物感（砂又は砂利が目に入った感じ）
視界のかすみ
不快感
羞明
【０１５０】
それぞれの症状の点数は、合わせて加えられ、全点数が２０を超えて全症状の点数が与えられる。
【０１５１】
顔の類似の得点（顔得点）：患者は「うれしい」（得点１）から「悲しい」（得点１０）までの一連の１０の顔を見せられ、「どの顔が最もあなたの状態を示していますか」とたずねられる。
【０１５２】
結膜充血：結膜充血（「目が血走る」）は、角膜及びコンタクトレンズの調査単位（ＣＣＬＲＵ）階級に従って、０から４の階級がつけられ、階級４が最も激しい。
【０１５３】
眼瞼炎：１２点を超えた点が、それぞれの目の症状の数に基づいて、それぞれの目に対して計算される。それぞれの症状は１点である。観察される症状は：
【０１５４】
瞼の先の縁：潤滑油
皮膚落屑
小環
明らかな潰瘍
まつ毛の喪失
炎症
瞼の後ろの縁：
塞がれた腺 ＞１／３
テランジエクラシア（Ｔｅｌａｎｇｉｅｃｌａｓｉａ）
マイボーム腺炎
瞼の縁の刻み
活性霰粒腫
【０１５５】
目の内圧（ＩＯＰ）：ＩＯＰはｍｍｔｌｇで測定され、記録される。
最も矯正された視力（ＢＣＶＡ）：ＢＣＶＡは以下のように測定され、得点される。
１＝６／６
２＝６／９
３＝６／１２
４＝６／１８
５＝６／２４
６＝６／３６
７＝６／６０
８＝３／６０
９＝１／６０
１０＝ＨＭ，ＣＦ
１１＝ＰＬ
１２＝ＮＰＬ
【表９】
ＲＢ＝ローズベンガル、ＢＵＴ＝涙中断時間の延長、ＩＯＰ＝目の内圧、ＢＣＶＡ＝最も矯正された視力、シルマー＝シルマー試験
【０１５６】
医療行為
実施例１の目の表面媒体は、１ヶ月にわたって１日に８回、両目に与える。患者は、１週、２週及び調査を終了する４週に、自覚的な症状及び他覚的なサインを評価され記録する。
【０１５７】
[分析]
基準からの自覚的及び他覚的な変化が分析される。データは、「包括解析」に基づいて分析される。 効果の変化は、より悪い目のデータからのみ分析される。より悪い目とは、 シルマー試験の点が最も低く、角膜と結膜の染色の合計が悪いものと定義される。両目が同程度の場合は、右目が用いられる。
【０１５８】
両目に対して安全な分析が行われる。
ウイルコクソンの順位和検定は、追跡診察の度にすべての一次的及び二次的な効果の変化における基準からの変化に関して２つのグループ間の違いの評価に用いられる。
【０１５９】
定量的なデータは、組となる試料のパラメータのデータのｔ−試験によって分析される。独立した非パラメータデータは、２グループを比較するためのマン−ウィットニー（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ）Ｕ試験 によって分析される。
【０１６０】
結果
[一次的な結果]
ローズベンガル染色（ＲＢ）が第４週の試験の完了時には被験目（基準のより悪い目）の１０人中７人が基準より３点又はそれ以上の点で改善された。
[二次的な結果]
ドライアイの自覚的な症状が１０人全ての患者において改善された。第４週 までに、乾燥、異物感、不快感、羞明及び顔得点の記録の意義深い改善が見られた。 眼瞼炎、涙中断時間の延長、蛍光色素染色の得点、シルマー試験及び目の内圧（ＩＯＰ）には第４週までに意義深い変化は見られなかった。
【０１６１】
【表１０】
【表１１】
【０１６２】
成功例（ＲＢの得点が第４週の記録から３点又はそれ以上改善された）
リウマチ関節炎（５）であり二次的にシェーグレン症候群（３）でもある患者
スティーブン−ジョンソン症候群（２）
シルマー試験（涙で濡れたフィルター紙の一片の長さでｍｍで現される）０ｍｍ （２）、１ｍｍ（２）、２ｍｍ（１）、３ｍｍ（１）、４ｍｍ（１）
【０１６３】
失敗例（ＲＢの得点が第４週の記録から３点以下改善された）
ＯＣＰ（１）の患者。５４才の女性は全身免疫抑制である。シルマーは０ｍ。
被験目のＲＢ得点は１６であり、ＲＢ得点の変化は２である。
スティーブン−ジョンソン症候群及びアトピー（１）。１８才の女性。シルマー０。 被験目のＲＢ得点は９であり、ＲＢ得点の変化は−３である。
初期のシェーグレン症候群。３９才の女性。シルマーは１ｍｍ。 被験目のＲＢ得 点は１４であり、ＲＢ得点の変化は２である。
【０１６４】
[安全性データ（ウイルコクソンの順位和検定で両目を分析した）]
ＢＣＶＡ：最も矯正された視力は、基準から第４週まで被験目（ｐ＝０．８９１）又はもう一方の目（ｐ＝０．７０５）に大きな変化はない。
ＩＯＰ： ＩＯＰは、基準から第４週まで被験目（ｐ＝０．８８９）又はもう一方の目（ｐ＝０．４８２）に大きな変化はない。
【０１６５】
結膜充血：基準から第４週まで被験目（ｐ＝０．００８）又はもう一方の目（ｐ＝０．０１４）も大きく減少した。
白内障：試験期間において被験目又はもう一方の目が白内障に発展した患者はいなかった。１人の患者は、試験期間中に、目の局所又は全体の治療の変更を伴わずに、もう一方の目に白内障摘出及び眼内レンズの移植を受けた。
【０１６６】
不利な出来事：一人の患者が第２週及び第３週に読書中の目のかすみを訴えたが、試験は続行され、症状は解決した。
【０１６７】
[結論]
自覚的な症状の改善が１０人の患者全員に見られ、他覚的な症状の改善が７人の患者に見られた。深刻な不利な出来事はなく、視力、目の内圧、レンズの不透明さに大きな変化はなかった。本発明に従って、目の表面媒体を適用することは、目の表面の病気に対して有効で安全な治療であることがわかった。
【０１６８】
実施例８
様々な増粘剤及び栄養物の比較
様々な増粘剤は、濃縮された状態で、本発明に従って、生理学上目の表面媒体と両立して用いられる補足物である。生じた媒体は、生体外で試験される。
【０１６９】
[材料と方法]
ヒプロメロース、カルボポール又はヒアロン酸ナトリウムは、０．０００１％から０．４％の濃度で目の表面媒体への補足剤として用いられた。結果物のｐＨと浸透圧は調整され、生理学上の範囲に調節された。生物物理学的な特性、例えば粘度及び表面張力は、血流計及び電子圧力計によって測定される。２人の人の角膜上皮細胞（ＨＣＥ−Ｔ及びＣＥＰＥＩ−１７−Ｃｌ．４）及び２人の人の結膜上皮細胞は、製剤に応答した細胞の増殖、生存能力、転移 をＡＴＰ分析に基づく発光、カルセインＡＭ／ＥｔｈＤ−１分析、コロニー分散分析によって調査される。全ての溶液は４℃で３ヶ月保存され、再度安定性の調査がなされる。
【０１７０】
結果
補足されていない媒体の浸透圧は、ずり速度１．７から１２８．５ｓ−１で０．７５ｍＰａ．ｓｅｃ であった。 ヒプロメロース、カルボポール又はヒアロン酸ナトリウムは、全ての濃度において媒体の粘度を大きく増加した、しかし、ほんの０．２％及び０．４％のヒプロメロース及び０．４％のヒアロン酸ナトリウムで補足された媒体は、適度の粘度と非ニュートン挙動を見せた。ヒプロメロースで補足された媒体の粘度は、４℃で保管された場合３ヶ月の間安定である。それに対して、カルボポール又はヒアロン酸ナトリウムで補足された媒体の粘度は大きく変化した。ヒプロメロースで補足した媒体の表面張力は涙に類似した表面張力５０ｍＮ／ｍを示した。比較のために、水の表面張力は約７０ｍN／ｍである。０．２％又は０．４％のヒプロメロースで補足された媒体は、細胞の成長と細胞増殖を支える優れた能力を示した。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
目に用いるのに適した調剤薬であって、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防する要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と、任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、
構成要素（ii）及び（iii）中の前記要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものであることを特徴とする調剤薬。
【請求項２】
請求項１に記載された調剤薬であって、さらに
iv）目の表面の病気、障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤を有することを特徴とする調剤薬。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載の調剤薬であって、さらに
（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有することができ、前記要因及び薬剤は合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものであることを特徴とする調剤薬。
【請求項４】
請求項２又は請求項３に記載の調剤薬であって、（iv)目の表面の病気、障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤 が、
散瞳薬、ステロイド、粘液溶解薬、血管形成阻害剤、接着因子、抗繊維化剤、抗菌剤、抗グルコマ（ａｎｔｉ−ｇｌｕｃｏｍａ）剤、細胞の代謝の毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤から選ばれることを特徴とする調剤薬。
【請求項５】
請求項１から４のいずれかに記載の調剤薬であって、成分（i）が、
点眼液用精製水、眼科組成物用クリーム基材、眼科組成物用ゲル基材及び眼科組成物用軟膏基材 から選ばれる１又は複数の薬剤であることを特徴とする調剤薬。
【請求項６】
請求項１から５のいずれかに記載の調剤薬であって、成分（ii）が
炭素代謝源、アミノ酸、成長因子、ビタミン、抗酸化剤、ムチン置換体、バルクイオン、微量元素、たんぱく質、ホルモン、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤を提供する薬剤から選ばれる１又は複数の薬剤であることを特徴とする調剤薬。
【請求項７】
請求項１から６のいずれかに記載の調剤薬であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる薬剤が、
脂質、リポタンパク質、 マイボーム腺分泌物、又はその合成類似物
から選ばれることを特徴とする調剤薬。
【請求項８】
請求項１から７のいずれかに記載の調剤薬であって、成分（iii）が、
ヒプロメロース（ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｅ）、半合成のセルロース誘導体、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマー、カルメロース、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポビドン、デキストラン溶液、ヒアロン酸、及びコンドロイチン硫酸から選ばれる眼科用潤滑剤、増粘剤又は涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤を含むことを特徴とする調剤薬。
【請求項９】
請求項１から８のいずれかに記載の調剤薬であって、 塩化ベンザルコニウムを含まないことを特徴とする調剤薬。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれかに記載の調剤薬であって、調剤薬が摂氏４℃で１ヶ月保存しても細菌により汚染されないように、
ラクトフェリン、リゾチーム、デフェンシン、sIgA
から選ばれる抗菌剤を含むことを特徴とする調剤薬。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれかに記載の調剤薬であって、ｐＨが６．６から８．０の範囲にあることを特徴とする調剤薬。
【請求項１２】
点眼液として用いられる溶液の形態であることを特徴とする 請求項１から１１のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１３】
クリーム、軟膏、ゲル の形態であることを特徴とする 請求項１から１１のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１４】
請求項１２に記載の調剤薬であって、点眼液として用いられる前記溶液の浸透圧が、２９０ｍＯｓｍから３２０ｍＯｓｍの範囲であることを特徴とする調剤薬。
【請求項１５】
請求項１２又は請求項１４に記載の調剤薬であって、点眼液として用いられる前記溶液の表面張力が、４０ ｄｙｎｅ／ｃｍから８０ ｄｙｎｅ／ｃｍの範囲であることを特徴とする調剤薬。
【請求項１６】
請求項１２、請求項１４又は請求項１５に記載の調剤薬であって、点眼液として用いられる前記溶液の粘度が、５ ｃｐｓから５０ ｃｐｓの範囲であることを特徴とする調剤薬。
【請求項１７】
１回の投与量であることを特徴とする請求項１から１６のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１８】
薬剤として用いられることを特徴とする 請求項１から１７のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１９】
前記薬剤が目の表面の障害の治療に用いられることを特徴とする請求項１８記載の調剤薬。
【請求項２０】
請求項１９記載の調剤薬であって、前記目の表面の障害が、
ドライアイ、激しいドライアイ、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい目の表面の障害、慢性の目の表面の病気、目の感染症又は炎症、目の腫瘍、目の外傷の中から選ばれることを特徴とする調剤薬。
【請求項２１】
請求項１９又は請求項２０に定義された状態の治療に用いられる薬剤の製造に、請求項１から１７のいずれかに記載の調剤薬を用いる方法。
【請求項２２】
請求項１から１７のいずれかに記載の調剤薬を治療に効果的な量投与することを有する治療が必要とされる対象における目の表面の障害を治療する方法。
【請求項２３】
目の表面の障害が、請求項２０に定義されたものであることを特徴とする請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
対象が哺乳類であることを請求項２２又は請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
哺乳類が人間であることを特徴とする請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
目の薬事上の組成物のための薬事上の媒体又はキャリヤとして請求項１から請求項１７のいずれかに記載された調剤薬を用いる組成物。
【請求項２７】
１又は複数の実施例を参照してここで述べられた調剤薬。
【請求項１】
目に用いるのに適した調剤薬であって、
（i）目における使用に適した調剤上受容可能なキャリヤと、
（ii）目の表面の上皮細胞の生存、健康、細胞付着及び正常な分化の１又は複数を促進する要因及び薬剤、及び任意に扁平上皮化生を予防する要因及び薬剤から選ばれた１又は複数の成分と、
（iii）涙液膜の流体特性を変えることのできる１又は複数の薬剤であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる少なくとも１の薬剤と、任意に眼科用潤滑剤、増粘剤、涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤の中から選ばれた１又は複数の薬剤を含むものとを有し、
構成要素（ii）及び（iii）中の前記要因及び薬剤は、合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものであることを特徴とする調剤薬。
【請求項２】
請求項１に記載された調剤薬であって、さらに
iv）目の表面の病気、障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤を有することを特徴とする調剤薬。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載の調剤薬であって、さらに
（v）幹細胞特性の生存及び維持、目の表面の幹細胞の成長、及び生体外又は生体内での幹細胞の子孫の生存、維持及び分化、の１又は複数を促進する要因及び薬剤から選ばれる１又は複数の成分を有することができ、前記要因及び薬剤は合成又は遺伝子組み換え又は薬の製造のために許可されているものであることを特徴とする調剤薬。
【請求項４】
請求項２又は請求項３に記載の調剤薬であって、（iv)目の表面の病気、障害又は損傷の治療又は予防に用いられるのに適した１又は複数の薬剤 が、
散瞳薬、ステロイド、粘液溶解薬、血管形成阻害剤、接着因子、抗繊維化剤、抗菌剤、抗グルコマ（ａｎｔｉ−ｇｌｕｃｏｍａ）剤、細胞の代謝の毒性の副生成物の蓄積を減少させる薬剤から選ばれることを特徴とする調剤薬。
【請求項５】
請求項１から４のいずれかに記載の調剤薬であって、成分（i）が、
点眼液用精製水、眼科組成物用クリーム基材、眼科組成物用ゲル基材及び眼科組成物用軟膏基材 から選ばれる１又は複数の薬剤であることを特徴とする調剤薬。
【請求項６】
請求項１から５のいずれかに記載の調剤薬であって、成分（ii）が
炭素代謝源、アミノ酸、成長因子、ビタミン、抗酸化剤、ムチン置換体、バルクイオン、微量元素、たんぱく質、ホルモン、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤を提供する薬剤から選ばれる１又は複数の薬剤であることを特徴とする調剤薬。
【請求項７】
請求項１から６のいずれかに記載の調剤薬であって、安定した涙液膜を形成し、保持することができる薬剤が、
脂質、リポタンパク質、 マイボーム腺分泌物、又はその合成類似物
から選ばれることを特徴とする調剤薬。
【請求項８】
請求項１から７のいずれかに記載の調剤薬であって、成分（iii）が、
ヒプロメロース（ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｅ）、半合成のセルロース誘導体、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマー、カルメロース、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポビドン、デキストラン溶液、ヒアロン酸、及びコンドロイチン硫酸から選ばれる眼科用潤滑剤、増粘剤又は涙液膜の蒸発を減少させることができる薬剤を含むことを特徴とする調剤薬。
【請求項９】
請求項１から８のいずれかに記載の調剤薬であって、 塩化ベンザルコニウムを含まないことを特徴とする調剤薬。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれかに記載の調剤薬であって、調剤薬が摂氏４℃で１ヶ月保存しても細菌により汚染されないように、
ラクトフェリン、リゾチーム、デフェンシン、sIgA
から選ばれる抗菌剤を含むことを特徴とする調剤薬。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれかに記載の調剤薬であって、ｐＨが６．６から８．０の範囲にあることを特徴とする調剤薬。
【請求項１２】
点眼液として用いられる溶液の形態であることを特徴とする 請求項１から１１のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１３】
クリーム、軟膏、ゲル の形態であることを特徴とする 請求項１から１１のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１４】
請求項１２に記載の調剤薬であって、点眼液として用いられる前記溶液の浸透圧が、２９０ｍＯｓｍから３２０ｍＯｓｍの範囲であることを特徴とする調剤薬。
【請求項１５】
請求項１２又は請求項１４に記載の調剤薬であって、点眼液として用いられる前記溶液の表面張力が、４０ ｄｙｎｅ／ｃｍから８０ ｄｙｎｅ／ｃｍの範囲であることを特徴とする調剤薬。
【請求項１６】
請求項１２、請求項１４又は請求項１５に記載の調剤薬であって、点眼液として用いられる前記溶液の粘度が、５ ｃｐｓから５０ ｃｐｓの範囲であることを特徴とする調剤薬。
【請求項１７】
１回の投与量であることを特徴とする請求項１から１６のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１８】
薬剤として用いられることを特徴とする 請求項１から１７のいずれかに記載の調剤薬。
【請求項１９】
前記薬剤が目の表面の障害の治療に用いられることを特徴とする請求項１８記載の調剤薬。
【請求項２０】
請求項１９記載の調剤薬であって、前記目の表面の障害が、
ドライアイ、激しいドライアイ、スケアリング（ｓｃａｒｉｎｇ）、目の類天疱瘡、持続性の上皮の不具合、激しい目の表面の障害、慢性の目の表面の病気、目の感染症又は炎症、目の腫瘍、目の外傷の中から選ばれることを特徴とする調剤薬。
【請求項２１】
請求項１９又は請求項２０に定義された状態の治療に用いられる薬剤の製造に、請求項１から１７のいずれかに記載の調剤薬を用いる方法。
【請求項２２】
請求項１から１７のいずれかに記載の調剤薬を治療に効果的な量投与することを有する治療が必要とされる対象における目の表面の障害を治療する方法。
【請求項２３】
目の表面の障害が、請求項２０に定義されたものであることを特徴とする請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
対象が哺乳類であることを請求項２２又は請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
哺乳類が人間であることを特徴とする請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
目の薬事上の組成物のための薬事上の媒体又はキャリヤとして請求項１から請求項１７のいずれかに記載された調剤薬を用いる組成物。
【請求項２７】
１又は複数の実施例を参照してここで述べられた調剤薬。
【公表番号】特表２００７−５２６２９２（Ｐ２００７−５２６２９２Ａ）
【公表日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５０１３４９（Ｐ２００７−５０１３４９）
【出願日】平成１７年３月２日（２００５．３．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００５／０００８０６
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０８４６３５
【国際公開日】平成１７年９月１５日（２００５．９．１５）
【出願人】（５０６１８８６６６）インスティテュート オブ オフタルモロジー (2)
【出願人】（５０６２９８０４６）ムーアフィールズ アイ ホスピタル エヌエイチエス ファウンデーション トラスト (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年３月２日（２００５．３．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００５／０００８０６
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０８４６３５
【国際公開日】平成１７年９月１５日（２００５．９．１５）
【出願人】（５０６１８８６６６）インスティテュート オブ オフタルモロジー (2)
【出願人】（５０６２９８０４６）ムーアフィールズ アイ ホスピタル エヌエイチエス ファウンデーション トラスト (1)
【Ｆターム（参考）】
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