神経変性を抑制する化合物のスクリーニング方法を示す。ＡＰＰの分断は神経変性の有用なマーカーであり得、ＡＰＰの分断を抑制する化合物は神経変性のインヒビターとして有用である。このような化合物は、様々な神経学的疾患、障害および神経系損傷の治療および／または防止に有用であり得、哺乳類の神経細胞又は組織の成長、再生又は生存を亢進しうる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経変性の阻害方法であって、
(a) ＡＰＰに対するＤＲ６の結合が阻害される条件下で、ＤＲ６ポリペプチド及び／又はＡＰＰポリペプチドを一又は複数のＤＲ６アンタゴニストに曝すこと、
(b) ｐ７５に対するＡＰＰの結合が阻害される条件下で、ｐ７５ポリペプチド及び／又はＡＰＰポリペプチドを一又は複数のｐ７５アンタゴニストに曝すこと、又は
(c) ＡＰＰに対するＤＲ６及びｐ７５の結合が阻害される条件下で、ＤＲ６ポリペプチド、ｐ７５ポリペプチド及び／又はＡＰＰポリペプチドを一又は複数のＤＲ６及びｐ７５アンタゴニストに曝すこと
を含む方法。
【請求項２】
前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストが、ＤＲ６を結合する抗体、配列番号：１のアミノ酸１−３５４を含む可溶性ＤＲ６ポリペプチド及びＡＰＰを結合する抗体から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記の一又は複数のｐ７５アンタゴニストが、ｐ７５を結合する抗体、可溶性ｐ７５ポリペプチドおよびＡＰＰを結合する抗体から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
可溶性ＤＲ６ポリペプチドがＤＲ６イムノアドヘシンを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
可溶性ｐ７５ポリペプチドがｐ７５イムノアドヘシンを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
可溶性ＤＲ６ポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃ領域に融合したＤＲ６細胞外ドメイン配列を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
可溶性ｐ７５ポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃ領域に融合したｐ７５細胞外ドメイン配列を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記のＤＲ６を結合する抗体が、配列番号：１のアミノ酸１−３４９又は４２−３４９を含むＤＲ６ポリペプチドを結合する、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記のＤＲ6を結合する抗体がキメラ、ヒト化、又はヒト抗体である、請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
前記のＤＲ６を結合する抗体が、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−８０９５、ＰＴＡ−８０９４又はＰＴＡ−８０９６として寄託されるハイブリドーマ細胞株によってそれぞれ生産される３Ｆ４.４.８、４Ｂ６.９.７又は１Ｅ５.５.７モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害する、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記のＤＲ６を結合する抗体又は可溶性ＤＲ６ポリペプチドが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項２に記載の方法。
【請求項１２】
前記のＡＰＰを結合する抗体がモノクローナル抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記のＡＰＰを結合するモノクローナル抗体がキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記のＡＰＰを結合するモノクローナル抗体が３Ｆ４.４.８、４Ｂ６.９.７又は１Ｅ５.５.７抗体の結合を競合的に阻害する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記のＡＰＰを結合する抗体が、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＤＲ６ポリペプチドが一又は複数の哺乳動物細胞の細胞表面に発現され、前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストの結合がＤＲ６活性化又はシグナル伝達を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
ＤＲ６を発現する一又は複数の哺乳動物細胞のアポトーシスを阻害するためにインビトロで実施される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＤＲ６を発現する一又は複数の哺乳動物細胞のアポトーシスを阻害するためにインビボで実施される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
ＤＲ６ポリペプチドが細胞表面上に発現している一又は複数の哺乳動物細胞のうちの少なくとも一が、交連ニューロン細胞、感覚ニューロン細胞又は運動ニューロン細胞である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
神経学的状態又は疾患を有する哺乳動物においてインビボで実施される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
神経学的状態又は疾患が、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病又はアルツハイマー病である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
神経学的状態又は疾患が、脳卒中による神経細胞ないし組織の損傷、大脳又は脊髄の組織への外傷、又は神経系組織の病変を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストのうちの少なくとも一が、配列番号：６のアミノ酸６６−８１を含むＡＰＰポリペプチドへのＤＲ６の結合を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストのうちの少なくとも一が、配列番号：１のアミノ酸１−６５５を含むＤＲ６ポリペプチドへのＡＰＰの結合を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記のｐ７５を結合する抗体がキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である、請求項３に記載の方法。
【請求項２６】
前記のｐ７５を結合する抗体又は可溶性ｐ７５ポリペプチドが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項３に記載の方法。
【請求項２７】
前記ｐ７５ポリペプチドが一又は複数の哺乳動物細胞の細胞表面に発現され、前記の一又は複数のｐ７５アンタゴニストの結合がＤＲ６活性化又はシグナル伝達を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
ｐ７５を発現する一又は複数の哺乳動物細胞のアポトーシスを阻害するためにインビトロで実施される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
ｐ７５を発現する一又は複数の哺乳動物細胞のアポトーシスを阻害するためにインビボで実施される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
ｐ７５ポリペプチドが細胞表面上に発現している一又は複数の哺乳動物細胞のうちの少なくとも一が、交連ニューロン細胞、感覚ニューロン細胞、後根神経節ニューロン、小脳顆粒ニューロン又は運動ニューロン細胞である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
神経学的状態又は疾患を有する哺乳動物においてインビボで実施される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
神経学的状態又は疾患が、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病又はアルツハイマー病である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
神経学的状態又は疾患が、脳卒中による神経細胞ないし組織の損傷、大脳又は脊髄の組織への外傷、又は神経系組織の病変を含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
神経学的状態又は疾患を有する哺乳動物の治療方法であって、哺乳動物に対し、有効量の一又は複数のＤＲ６アンタゴニスト及び一又は複数のｐ７５アンタゴニストを投与することを含む方法。
【請求項３５】
前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストが、ＤＲ６を結合する抗体、配列番号：１のアミノ酸１−３５４を含む可溶性ＤＲ６ポリペプチド及びＡＰＰを結合する抗体から選択され、前記ｐ７５アンタゴニストが、可溶性ｐ７５およびｐ７５を結合する抗体から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
可溶性ＤＲ６ポリペプチドがＤＲ６イムノアドヘシンを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
可溶性ＤＲ６ポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃ領域に融合したＤＲ６細胞外ドメイン配列を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記のＤＲ６を結合する抗体が、配列番号：１のアミノ酸１−３４９又は４２−３４９を含むＤＲ６ポリペプチドを結合する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
前記のＤＲ６を結合する抗体がキメラ、ヒト化、又はヒト抗体である、請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
前記のＤＲ６を結合する抗体が、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−８０９５、ＰＴＡ−８０９４又はＰＴＡ−８０９６として寄託されるハイブリドーマ細胞株によってそれぞれ生産される３Ｆ４.４.８、４Ｂ６.９.７又は１Ｅ５.５.７モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害する、請求項３５に記載の方法。
【請求項４１】
前記のＤＲ６を結合する抗体又は可溶性ＤＲ６ポリペプチドが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項３５に記載の方法。
【請求項４２】
前記のＡＰＰを結合する抗体がモノクローナル抗体である、請求項３４に記載の方法。
【請求項４３】
前記のＡＰＰを結合するモノクローナル抗体がキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である、請求項３０に記載の方法。
【請求項４４】
前記のＡＰＰを結合するモノクローナル抗体がモノクローナル抗体２２Ｃ１１の結合を競合的に阻害する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４５】
前記のＡＰＰを結合するモノクローナル抗体が、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項３０に記載の方法。
【請求項４６】
前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストのうちの少なくとも一が、配列番号：６のアミノ酸６６−８１を含むＡＰＰポリペプチドへのＤＲ６の結合を阻害する、請求項３４に記載の方法。
【請求項４７】
前記の一又は複数のＤＲ６アンタゴニストのうちの少なくとも一が、配列番号：１のアミノ酸１−６５５を含むＤＲ６ポリペプチドへのＡＰＰの結合を阻害する、請求項３４に記載の方法。
【請求項４８】
神経学的状態又は疾患が、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病又はアルツハイマー病である、請求項３４に記載の方法。
【請求項４９】
神経学的状態又は疾患が、脳卒中による神経細胞ないし組織の損傷、大脳又は脊髄の組織への外傷、又は神経系組織の病変を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項５０】
一又は複数の他の治療薬が前記哺乳動物に投与される、請求項３４に記載に方法。
【請求項５１】
一又は複数のＤＲ６アンタゴニストが、注射、注入又は灌流により哺乳動物に投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項５２】
前記の一又は複数の他の治療薬が、ＮＧＦ、アポトーシスインヒビター、ＥＧＦＲインヒビター、β-分泌酵素インヒビター、γ-分泌酵素インヒビター、コリンエステラーゼインヒビター、抗βアミロイド抗体、及びＮＭＤＡレセプターアンタゴニストから選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
可溶性ｐ７５ポリペプチドがｐ７５イムノアドヘシンを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項５４】
可溶性ｐ７５ポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃ領域に融合したｐ７５細胞外ドメイン配列を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項５５】
前記のｐ７５を結合する抗体がキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である、請求項３５に記載の方法。
【請求項５６】
前記のｐ７５を結合する抗体又は可溶性ｐ７５ポリペプチドが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項３５に記載の方法。
【請求項５７】
(a) (i) 配列番号：１を含むＤＲ６ポリペプチドを結合するモノクローナル抗体、又は(ｉｉ)可溶性ＤＲ６ポリペプチド、又は(iii) 配列番号：６を含むＡＰＰを結合するモノクローナル抗体を含む単離されたＤＲ６アンタゴニストであって、ＤＲ６へのＡＰＰの結合を阻害するＤＲ６アンタゴニストと、
(b) (i) ｐ７５ポリペプチドを結合するモノクローナル抗体、又は(ii) 可溶性ｐ７５ポリペプチドを含む単離されたｐ７５アンタゴニストであって、ｐ７５へのＡＰＰの結合を阻害するｐ７５アンタゴニスト
とを含有してなる組成物。
【請求項５８】
可溶性ＤＲ６ポリペプチドがＤＲ６ イムノアドヘシンを含む、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項５９】
可溶性ＤＲ６ポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃ領域に融合したＤＲ６細胞外ドメイン配列を含む、請求項５８に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６０】
前記のＤＲ６を結合する抗体が、図１（配列番号：１）のアミノ酸１−３４９又は４２−３４９を含むＤＲ６ポリペプチドを結合する、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６１】
前記のＤＲ６を結合する抗体がキメラ、ヒト化、ヒトの抗体である、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６２】
前記のＤＲ６を結合する抗体が、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−８０９５、ＰＴＡ−８０９４又はＰＴＡ−８０９６として寄託されるハイブリドーマ細胞株によってそれぞれ生産される３Ｆ４.４.８、４Ｂ６.９.７又は１Ｅ５.５.７モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害する、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６３】
前記のＤＲ６を結合する抗体又は可溶性ＤＲ６ポリペプチドが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６４】
前記のＤＲ６アンタゴニストが、配列番号：６のアミノ酸６６−８１を含むＡＰＰポリペプチドへのＤＲ６の結合を阻害する、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６５】
アンタゴニストが立体的阻害によってＡＰＰへのＤＲ６の結合を阻害するエピトープを結合する、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６６】
前記のＡＰＰを結合するモノクローナル抗体がキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６７】
前記のＡＰＰを結合する抗体が２２Ｃ１１モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害する、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６８】
前記のＡＰＰを結合する抗体が、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項６９】
前記アンタゴニストが、配列番号：６のアミノ酸６６−８１を含むＡＰＰポリペプチドへのＤＲ６の結合を阻害する、請求項５７に記載の単離されたＤＲ６アンタゴニスト。
【請求項７０】
可溶性ｐ７５ポリペプチドがｐ７５ イムノアドヘシンを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項７１】
可溶性ｐ７５ポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃ領域に融合したｐ７５細胞外ドメイン配列を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項７２】
前記のｐ７５を結合する抗体がキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である、請求項３５に記載の方法。
【請求項７３】
前記のｐ７５を結合する抗体又は可溶性ｐ７５ポリペプチドが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシアルキレンからなる群から選択される一又は複数の非タンパク質性ポリマーに連結している、請求項３５に記載の方法。
【請求項７４】
請求項５７から６９の何れか一に記載のＤＲ６アンタゴニストとｐ７５アンタゴニストと、薬学的に許容可能な担体とを含有してなる薬学的組成物。
【請求項７５】
(a) 請求項５７から６９の何れか一に記載のＤＲ６アンタゴニストの有効量を含有する組成物と、
(b) 請求項５７から６９の何れか一に記載のｐ７５アンタゴニストの有効量を含有する組成物と、
(c) 前記組成物を含む容器と、
(d) 前記容器に貼付されるラベル又は前記容器に内包されるパッケージ挿入物であって、前記ＤＲ６アンタゴニストの神経学的状態又は疾患の治療における使用についての指示を提供するもの
を具備する製造品。
【請求項７６】
第一容器と、該容器上のラベルと、該容器内に内包される組成物であって、
このとき、該組成物は、少なくとも一種の哺乳動物神経細胞のアポトーシスを抑制するために有効な第一活性剤と、少なくとも一種の哺乳動物神経細胞のアポトーシスを抑制するために有効な第二活性剤とを含み、該容器上のラベル又は該容器に内包されるパッケージ挿入物が、該組成物が少なくとも一種の哺乳動物神経細胞のアポトーシスを阻害するために使用できることを示し、該組成物中の該第一活性剤が、請求項５７から６９の何れか一に記載の少なくとも一のＤＲ６アンタゴニストを含み、該組成物中の該第二活性剤が請求項５７から６９の何れか一に記載の少なくとも一のｐ７５アンタゴニストを含むものであり、
薬学的に許容可能なバッファを含む第二容器と、少なくとも一種の哺乳動物神経細胞のアポトーシスを阻害するためのＤＲ６アンタゴニストとｐ７５アンタゴニストの使用についての指示
とを具備するキット。

【図３】

【図９Ａ】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２７】

【図２９】

【図３０】

【図３２】

【図３７】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９Ｂ】

【図９Ｃ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１４Ｃ】

【図１４Ｄ】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１５Ｄ】

【図１６】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１７Ｃ】

【図１７Ｄ】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２６】

【図２８】

【図３１】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【公表番号】特表２０１２−５１８０４２（Ｐ２０１２−５１８０４２Ａ）
【公表日】平成２４年８月９日（２０１２．８．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５５１１８６（Ｐ２０１１−５５１１８６）
【出願日】平成２２年２月１７日（２０１０．２．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２４４５８
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９６４７０
【国際公開日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．テフロン
【出願人】（５０９０１２６２５）ジェネンテック，　インコーポレイテッド (357)
【Ｆターム（参考）】