本出願は、筋細胞における遺伝子発現を調整する方法及び組成物を提供する。さらに、本出願の組成物を含む細胞を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における筋肉損傷を治療する方法であって、患者の筋肉損傷部位に有効量のマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、該ｍｉＲＮＡをコードするベクター、若しくは該ｍｉＲＮＡの阻害剤又はこれらの組合せを投与することから成り、該ｍｉＲＮＡが筋肉損傷部位における筋細胞内の遺伝子を標的とする方法。
【請求項２】
前記筋肉損傷が機械的筋肉外傷、筋肉変性疾患、心臓発作又はこれらの組合せである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記患者が哺乳動物である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ｍｉＲＮＡが、配列番号１〜１１及び配列番号１〜１１のいずれかと少なくとも７０％相同な配列から成る群から選択されるヌクレオチド配列から成る請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−２０６、ｍｉＲ−２０８、ｍｉＲ−２２、ｍｉＲ−２６、ｍｉＲ−２９、ｍｉＲ−３０、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１４３及びｍｉＲ−１４５から成る群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ｍｉＲＮＡが、前記遺伝子の３’非飜訳領域を標的とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ｍｉＲＮＡをコードするベクターが、
（ａ）該ｍｉＲＮＡ分子をコードする核酸分子に作動可能に連結したプロモーター、及び
（ｂ）転写終結配列、
を含む請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ｍｉＲＮＡの阻害剤が標的ｍｉＲＮＡとハイブリダイズすることができる請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記標的ｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−２０６、ｍｉＲ−２０８、ｍｉＲ−２２、ｍｉＲ−２６、ｍｉＲ−２９、ｍｉＲ−３０、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１４３及びｍｉＲ−１４５から成る群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記遺伝子が、筋肉細胞分化遺伝子及び筋肉細胞増殖遺伝子から成る群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記筋細胞分化遺伝子が、ヒストンジアセチラーゼ４（ＨＤＡＣ４）ポリペプチド又は甲状腺ホルモン受容体タンパク質２４０（ＴＲＡＰ２４０）ポリペプチドをコードする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記筋細胞増殖遺伝子が、血清応答因子（ＳＲＦ）ポリペプチドをコードする請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
第１時点において、ｍｉＲ−１３３及びｍｉＲ−１阻害剤を筋肉損傷部位に共投与し、第２時点において、ｍｉＲ−１及びｍｉＲ−１３３阻害剤を筋肉損傷部位に共投与する請求項５に記載の方法。
【請求項１４】
筋細胞分化、増殖又はこの両者を調節する方法であって、筋細胞をｍｉＲＮＡ又は筋細胞中の遺伝子を標的とするｍｉＲＮＡをコードするベクターと接触させ、これにより筋細胞分化、増殖又は両者を調節可能にする方法。
【請求項１５】
前記調節が阻害である請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の飜訳を阻害する請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の３’非飜訳領域を標的とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ｍｉＲＮＡが、配列番号１〜１１及び配列番号１〜１１のいずれかと少なくとも７０％相同な配列から成る群から選択されるヌクレオチド配列から成る請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記ｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−２０６、ｍｉＲ−２０８、ｍｉＲ−２２、ｍｉＲ−２６、ｍｉＲ−２９、ｍｉＲ−３０、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１４３及びｍｉＲ−１４５から成る群から選択される請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記ｍｉＲＮＡをコードするベクターが、
（ａ）該ｍｉＲＮＡ分子をコードする核酸分子に作動可能に連結したプロモーター、及び
（ｂ）転写終結配列、
を含む請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
前記筋細胞分化遺伝子が、ヒストンジアセチラーゼ４（ＨＤＡＣ４）ポリペプチド又は甲状腺ホルモン受容体タンパク質２４０（ＴＲＡＰ２４０）ポリペプチドをコードする請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
前記筋細胞増殖遺伝子が、血清応答因子（ＳＲＦ）ポリペプチドをコードする請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
筋細胞中の遺伝子発現を調節する方法であって、筋細胞を、筋細胞中の遺伝子を標的とするｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）又はｍｉＲＮＡをコードするベクターと接触させることから成る方法。
【請求項２４】
前記調節が阻害である請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の飜訳を阻害する請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の３’非飜訳領域を標的とする請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ｍｉＲＮＡが、配列番号１〜１１及び配列番号１〜１１のいずれかと少なくとも７０％相同な配列から成る群から選択されるヌクレオチド配列から成る請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
前記ｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−２０６、ｍｉＲ−２０８、ｍｉＲ−２２、ｍｉＲ−２６、ｍｉＲ−２９、ｍｉＲ−３０、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１４３及びｍｉＲ−１４５から成る群から選択される請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
前記ｍｉＲＮＡをコードするベクターが、
（ａ）該ｍｉＲＮＡ分子をコードする核酸分子に作動可能に連結したプロモーター、及び
（ｂ）転写終結配列、
を含む請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
前記遺伝子が、筋肉細胞分化遺伝子及び筋肉細胞増殖遺伝子から成る群から選択される請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
前記筋細胞分化遺伝子が、ヒストンジアセチラーゼ４（ＨＤＡＣ４）ポリペプチドをコードする請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記筋細胞増殖遺伝子が、血清応答因子（ＳＲＦ）ポリペプチドをコードする請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
筋細胞中の遺伝子発現を阻害する方法であって、該筋細胞をｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）分子をコードするベクターで形質転換することから成り、該ｍｉＲＮＡ分子が、連続した１７〜２４ヌクレオチドの前記遺伝子の部分配列に少なくとも７０％相同であるヌクレオチド配列から成る方法。
【請求項３４】
前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の飜訳を阻害する請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記部分配列が前記遺伝子の３’非飜訳領域に局在する請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記ｍｉＲＮＡが、配列番号１〜１１及び配列番号１〜１１のいずれかと少なくとも７０％相同な配列から成る群から選択されるヌクレオチド配列から成る請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記ｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−２０６、ｍｉＲ−２０８、ｍｉＲ−２２、ｍｉＲ−２６、ｍｉＲ−２９、ｍｉＲ−３０、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１４３及びｍｉＲ−１４５から成る群から選択される請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
前記ｍｉＲＮＡをコードするベクターが、
（ａ）該ｍｉＲＮＡ分子をコードする核酸分子に作動可能に連結したプロモーター、及び
（ｂ）転写終結配列、
を含む請求項３３に記載の方法。
【請求項３９】
前記遺伝子が、筋肉細胞分化遺伝子及び筋肉細胞増殖遺伝子から成る群から選択される請求項３３に記載の方法。
【請求項４０】
前記筋細胞分化遺伝子が、ヒストンジアセチラーゼ４（ＨＤＡＣ４）ポリペプチド又は甲状腺ホルモン受容体タンパク質２４０（ＴＲＡＰ２４０）ポリペプチドをコードする請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記筋細胞増殖遺伝子が、血清応答因子（ＳＲＦ）ポリペプチドをコードする請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
筋細胞中でｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）分子を発現するベクターであって、
（ａ）該ｍｉＲＮＡ分子をコードする核酸分子に作動可能に連結したプロモーター、及び
（ｂ）転写終結配列、
を含むベクター。
【請求項４３】
発現した前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の飜訳を阻害する請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記ｍｉＲＮＡが前記遺伝子の３’非飜訳領域を標的とする請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ｍｉＲＮＡが、配列番号１〜１１及び配列番号１〜１１のいずれかと少なくとも７０％相同な配列から成る群から選択されるヌクレオチド配列から成る請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
前記ｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−２０６、ｍｉＲ−２０８、ｍｉＲ−２２、ｍｉＲ−２６、ｍｉＲ−２９、ｍｉＲ−３０、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−１４３及びｍｉＲ−１４５から成る群から選択される請求項４２に記載の方法。
【請求項４７】
前記遺伝子が、筋肉細胞分化遺伝子及び筋肉細胞増殖遺伝子から成る群から選択される請求項４３に記載の方法。
【請求項４８】
前記筋細胞分化遺伝子が、ヒストンジアセチラーゼ４（ＨＤＡＣ４）ポリペプチド又は甲状腺ホルモン受容体タンパク質２４０（ＴＲＡＰ２４０）ポリペプチドをコードする請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記筋細胞増殖遺伝子が、血清応答因子（ＳＲＦ）ポリペプチドをコードする請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
請求項３９に記載のベクター及び該ベクターを筋細胞へ導入するための少なくとも１種の試薬から成るキット。
【請求項５１】
さらに、前記ベクターを筋細胞へ導入するための取扱説明書を含む請求項５０に記載のキット。
【請求項５２】
請求項４２に記載のベクターを含む筋細胞。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０Ａ−Ｆ】

【図１０Ｇ】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【公表番号】特表２００９−５１９３３９（Ｐ２００９−５１９３３９Ａ）
【公表日】平成２１年５月１４日（２００９．５．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４５７１８（Ｐ２００８−５４５７１８）
【出願日】平成１８年１２月１２日（２００６．１２．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４７２５５
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０７０４８３
【国際公開日】平成１９年６月２１日（２００７．６．２１）
【出願人】（５０１３４５３２３）ザ　ユニバーシティ　オブ　ノース　カロライナ　アット　チャペル　ヒル (52)
【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ　ＯＦ　ＮＯＲＴＨ　ＣＡＲＯＬＩＮＡ　ＡＴ　ＣＨＡＰＥＬ　ＨＩＬＬ
【住所又は居所原語表記】３０８　Ｂｙｎｕｍ　Ｈａｌｌ，Ｃａｍｐｕｓ　Ｂｏｘ　４１０５，Ｃｈａｐｅｌ　Ｈｉｌｌ，Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ　２７５９９−４１０５，　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ
【Ｆターム（参考）】