腫瘍細胞の同定方法および同定装置
【課題】検査者の経験に依拠せず、細胞診の正診率を向上させることのできる、腫瘍細胞の同定方法と装置の提供。
【解決手段】被検体画像からＮ／Ｃ比が０．５以上であるか判定する第１ステップと、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定する第２ステップと、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する第３ステップと、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第４ステップとを含む、腫瘍細胞の同定方法と、そのための装置。
【解決手段】被検体画像からＮ／Ｃ比が０．５以上であるか判定する第１ステップと、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定する第２ステップと、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する第３ステップと、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第４ステップとを含む、腫瘍細胞の同定方法と、そのための装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、被検体画像から腫瘍細胞を同定する方法および装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞診検査は、有資格の専門家（細胞検査士）によって良悪性を中心とした細胞の判定が行なわれる癌の検査法の１つである。細胞は正常細胞と異常細胞に分類され、細胞診では異常細胞を異型細胞（atypical cell）という用語で表現している。異型細胞とは、検査材料を、光学顕微鏡を使って観察した場合に、細胞の形態が正常から隔たっている細胞を指す。細胞診検査では、細胞形態の変化した異型細胞が悪性腫瘍によるものか、良性腫瘍によるものか、炎症などの非腫瘍性疾患によるものなのかを判別する。
【０００３】
具体的には、細胞検査士は、検査材料について、（１）クロマチンの増量、（２）細胞質の濃染、異常、（３）Ｎ／Ｃ比大（核と細胞質の比：ＷＨＯの面積比から換算した直径比）、（４）核縁の不規則肥厚、（５）多核細胞、対細胞など結合性の異常、（６）細胞の大小不同、（７）細胞の多彩性、（８）単一な出現態度、（９）細胞結合の脆弱性、（１０）壊死性背景、（１１）異常細胞の量、（１２）細胞の重積性、（１３）細胞集塊の辺縁の異常、（１４）核の大小不同、（１５）核の配列不整、（１６）核の重積性、（１７）核クロマチン不規則分布、（１８）オイクロマチン増量、（１９）核偏在、（２０）核突出、（２１）核形不整、（２２）大きな核小体、（２３）核小体の数、（２４）核内空胞、（２５）細胞質内腺腔などの指標を観察することによって、上記判別を行っている。しかしながら、この細胞検査士の判別基準は、経験を通じて形成される暗黙知によるものであり、客観性や再現性に劣る。
【０００４】
また、細胞診検査に関する技術として、例えば特許文献１には、細胞画像と核の蛍光信号から細胞画像を切出し、２値化して、この２値化された細胞画像面積から細胞径Ｃを算出し、核径Ｎを用いてＮ／Ｃ比を演算することが記載されている。また、特許文献２には、細胞の形状、細胞のサイズ、核のサイズ、核の形状、核−細胞質比、核大小不同の有無などを指標に、細胞の正常、異型性、または悪性に分類することが記載されている。
【０００５】
また、非特許文献１には、早期の高分化型胃癌２例について異型度を核の断面積、核の長径、核の形状係数、極性、それぞれの変動係数および核と細胞質の比を用いて数量化し、９変量クラスター分析を行い、粘膜腺上皮の形態は異型度からは正常の腺上皮、低異型度異形性、高異型度異形性および腺癌の４群をカテゴリーとする分類が適当であることが開示されている。
【０００６】
また、非特許文献２には、６１の大腸機能低下上皮微小新形成を用いて直径５ｍｍ以下の微小腫ようの形態計測とｐ５３発現との間の関係を評価し、核／細胞質面積比がｐ５３の陽性発現頻度と関連したことが開示されている。また、非特許文献３には、膵島細胞腫瘍１９例について良悪性の鑑別診断に関して臨床病理学的検討を行い、悪性の指標として有用であったのは画像解析による細胞異型のうち核直径、核矩径、核面積、核円形度ならびに核／細胞質比であることが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−２５３６２４号公報
【特許文献２】特表２００４−５０５２７８号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】レン・エイチ（REN H）、外４名，「胃の高分化型腺癌の発生に関する組織病理学的研究形態計量と多変量解析による異型度マッピング」，加齢医学研究所雑誌，１９９９年１０月３０日，第５１巻，第１号，ページｐ．９−２２
【非特許文献２】ワダ・アール（WADA R）、外７名，「ザ・ポシブル・アソシエーション・ビトウィーン・エクスプレッション・オブ・ピー５３・アンド・ディベロップメント・イン・ディプレスト・タイプ・コロレクタル・カースノーマ（The possible association between expression of p53 and development in depressed type colorectal carcinoma）」，アクタ・ヒストケム・シトケム（Acta Histochem Cytochem），１９９３年，第２６巻，第１号，ページｐ．２１−２５
【非特許文献３】吉井克己，「すい島細胞腫ようの臨床病理学的研究特に良悪性鑑別診断について」，１９９２年１０月，東京女子医科大学雑誌，第６２巻，第１０号，ページｐ．９１５−９２２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
細胞検査士の知識は教育や経験を通じて形成されており、前述のように各細胞検査士の判定基準が細胞判定の精度に大きく関与している。細胞検査士は、前述の（１）〜（２５）等の細胞所見に基づいて良悪性を判別するが、これらの（１）〜（２５）等の指標間で矛盾が生じたときに細胞検査士がどの指標を重要視するかによって、最終診断結果が違ってくるという実情にある。このため、各々の細胞検査士で正診率にばらつきが生じる。
【００１０】
このことは、前述の特許文献２および非特許文献１〜３に記載の技術でも同じことであり、それぞれの指標間で矛盾が生じたときにどの指標を重要視するかによって、最終診断結果は違ってくることになる。
【００１１】
そこで、本発明においては、検査者の経験に依拠せず、細胞診の正診率を向上させることが可能な腫瘍細胞の同定方法および同定装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の腫瘍細胞の同定方法は、被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比（以下、「Ｎ／Ｃ比」と称す。）が０．５以上であるか判定する第１ステップと、この第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップ、または、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第２ステップおよび第３ステップと、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第４ステップとを含む。
【００１３】
本発明によれば、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいはクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定することができ、陽性であると判定されなかったものについては、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。一方、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、クロマチン染色濃度の判定を行うことなく、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。
【００１４】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第５ステップを含むことが望ましい。これにより、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を抽出することができる。
【００１５】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第６ステップを含むことが望ましい。これにより、前述の第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを抽出することができる。
【００１６】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核偏在がないものを陰性であると判定するステップ、または、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第７ステップおよび第８ステップを含むことが望ましい。これにより、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００１７】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞にクロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定するステップ、または、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第９ステップおよび第１０ステップを含むことが望ましい。これにより、前述の第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００１８】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に明瞭な核小体があるものを陽性、明瞭な核小体がないものを疑陽性であると判定する第１１ステップを含むことが望ましい。これにより、前述の第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを抽出することができる。
【００１９】
なお、第２ステップは、被検体画像からＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップであり、第３ステップは、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップであることが望ましい。これにより、陽性である被検細胞をより早く抽出することが可能となる。
【００２０】
本発明の腫瘍細胞の同定装置は、被検体画像を撮像する撮像手段と、撮像手段により撮像された被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比を算出し、算出されたＮ／Ｃ比が０．５以上であるか判定する第１判定手段と、この第１判定手段においてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定する手段、または、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度と白血球のクロマチン染色濃度とを算出し、算出された被検細胞のクロマチン染色濃度が算出された白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第２判定手段と、第１判定手段においてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側への核の突出状態を検出し、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第３判定手段と、第２判定手段および第３判定手段による判定結果を出力する出力手段とを含むものである。
【００２１】
本発明によれば、撮像された被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいはクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定され、陽性であると判定されなかったものについては、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものが陽性であると判定され、この判定結果が出力される。一方、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、クロマチン染色濃度の判定を行うことなく、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものが陽性であると判定され、この判定結果が出力される。
【００２２】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第３判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から前記被検細胞の核形状態を検出し、被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第４判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第３判定手段において陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を抽出することができる。
【００２３】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第４判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から細胞径を検出し、細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第５判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第４判定手段において陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを抽出することができる。
【００２４】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第５判定手段において疑陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から核の配置状態を検出し、核偏在がないものを陰性であると判定する手段、または、被検体画像から細胞の結合性を検出し、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第６判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第５判定手段において疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００２５】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第６判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像からクロマチンの分布状態を検出し、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する手段、または、被検体画像から核膜におけるクロマチン付着状態を検出し、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第７判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第６判定手段において陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００２６】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第７判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から核小体を検出し、明瞭な核小体があるものを陽性、ないものを疑陽性であると判定する第８判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第７判定手段において陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを抽出することができる。
【発明の効果】
【００２７】
（１）Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいはクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定し、陽性であると判定されなかったものについては、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定し、一方、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、クロマチン染色濃度の判定を行うことなく、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する構成により、検査者の経験に依拠せず、陽性細胞を同定することができ、正診率を向上させることが可能となる。
【００２８】
（２）また、上記により陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する構成により、陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を同定することができる。
【００２９】
（３）また、上記により陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する構成により、陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを同定することができる。
【００３０】
（４）また、上記により疑陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核偏在がないものであれば陰性、細胞の結合性異常がないものであれば陰性であると判定する構成により、疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを同定することができる。
【００３１】
（５）また、上記により陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞にクロマチンの不規則分布がないものであれば陰性、核縁不規則肥厚がないものであれば陰性であると判定する構成により、陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを同定することができる。
【００３２】
（６）また、上記により陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に明瞭な核小体があるものであれば陽性、明瞭な核小体がないものであれば疑陽性であると判定する構成により、陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを同定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】本発明の実施の形態における腫瘍細胞の同定方法を示すフロー図である。
【図２】図１の腫瘍細胞の同定方法を実行する同定装置の概略構成図である。
【図３】図２の同定装置の機能ブロック図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
図１は本発明の実施の形態における腫瘍細胞の同定方法を示すフロー図である。
【００３５】
第１ステップは、例えば尿沈渣画像などの被検体画像からＮ／Ｃ比が０．５以上であるかを判定する。第２ステップは、この第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像からＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性（Positive）であると判定する。また、第３ステップでは、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する。なお、第２ステップと第３ステップとは判定順序を逆にすることも可能である。
【００３６】
そして、第４ステップでは、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する。
【００３７】
第５ステップは、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性（Negative）であると判定する。核形不整は、被検細胞の核縁に凸凹、切れ込みまたは直線などが形成されているか否かによって判定する。核形不整がないものは陰性であると判定する。
【００３８】
第６ステップは、第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性（Suspicious）であると判定する。
【００３９】
第７ステップは、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについて、核偏在がないものを陰性であると判定する。また、第８ステップでは、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する。なお、第７ステップと第８ステップとは判定順序を逆にすることも可能である。
【００４０】
第９ステップは、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する。また、第１０ステップでは、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する。なお、第９ステップと第１０ステップとは判定順序を逆にすることも可能である。
【００４１】
第１１ステップは、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、明瞭な核小体があるものを陽性、明瞭な核小体がないものを疑陽性であると判定する。
【００４２】
図２は図１の腫瘍細胞の同定方法を実行する同定装置の概略構成図、図３は図２の同定装置の機能ブロック図である。
【００４３】
図２において、本発明の実施の形態における腫瘍細胞の同定装置１は、被検体画像を撮像する撮像装置としての顕微鏡カメラ２と、各種演算処理を行う演算装置としてのコンピュータ３と、入力装置としてのキーボード４およびポインティングデバイス５と、出力装置としてのディスプレイ６とから構成される。
【００４４】
顕微鏡カメラ２は、図３に示す撮像手段１０として機能する。コンピュータ３は、図３に示す第１〜第８判定手段１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８として機能する。第１〜第８判定手段１１〜１８は、これらの第１〜第８判定手段１１〜１８の機能を実現するプログラムを記録媒体からコンピュータ３に読み取り、実行することにより、実現することが可能である。また、ディスプレイ６は、図３に示す出力手段１９として機能する。
【００４５】
第１判定手段１１は、撮像手段１０により撮像した被検体画像に基づき、前述の第１ステップを実行するＮ／Ｃ比０．５以上判定手段である。第２判定手段１２は前述の第２ステップを実行するＮ／Ｃ比０．８以上判定手段および第３ステップを実行するクロマチン濃度判定手段である。第３判定手段１３は前述の第４ステップを実行する核突出判定手段である。第４判定手段１４は前述の第５ステップを実行する核形不整判定手段である。第５判定手段１５は前述の第６ステップを実行する細胞径判定手段である。
【００４６】
第６判定手段１６は前述の第７ステップを実行する核偏在判定手段および第８ステップを実行する細胞結合性判定手段である。第７判定手段１７は前述の第９ステップを実行するクロマチン不規則分布判定手段および第１０ステップを実行する核縁不規則肥厚判定手段である。第８判定手段１８は前述の第１１ステップを実行する明瞭核小体判定手段である。出力手段１９は、第２〜第８判定手段１２〜１８による判定結果を出力するものである。なお、出力手段１９としては、ディスプレイ６以外に印刷装置としてのプリンタ等により構成することも可能である。
【００４７】
次に、図１のフローの決定方法について説明する。以下の説明では、最初に優れた有資格の専門家（以下、「プロ」と称す。）を抽出し、つぎに細胞判定に関する優れたプロの暗黙知を形式知に置き換える。また、優れたプロとその他のプロとの判断ポイントの相違点を抽出し、形式知を用いた細胞判定のアルゴリズムからフローを決定する。
【００４８】
なお、本実施形態において細胞判定用に準備したのは特に曖昧な判定の多い尿細胞診の細胞画像である。被検体画像は、尿沈渣により得られた検体を顕微鏡カメラ２により撮像したものである。尿沈渣とは、尿を遠心分離器にかけたときに沈殿してくる赤血球や白血球、細胞、結晶成分などの固形成分のことを指す。
【００４９】
（ステップ１）プロの判定誤差の実態調査
尿細胞診検体を用い、プロに対し判定誤差の実態調査を行った。調査のために良性から悪性までのさまざまな異型細胞の写真撮影を行い、１２０例を用意した。これらの写真画像を全国６地域１５箇所で勤務する４６名のプロの協力者に送り、細胞の見方に関する質問とともに１２０例の細胞に対する判定結果データを収集した。これらの細胞の持ち主（患者）が癌であったか否かなどという最終診断データは存在するが、協力者には知らされていない。これにより、調査結果データとして、１２０×４６の回答データと１２０の正解データが揃えられた。
【００５０】
（ステップ２）判定誤差の評価
異型細胞をみて悪性が極めて強く疑われる細胞であれば陽性であると判定する。また、（ａ）陽性か陰性か判定が難しい、（ｂ）悪性の確定ができない、（ｃ）ディスプラシア（Dysplasia：良性腫瘍と悪性腫瘍の境界病変）が疑われる、のいずれかの場合は疑陽性であると判定する。また、良性を考える細胞であれば陰性であると判定する。Ｄijをｉ番目の細胞に対するｊ番目のプロの判定値として、それぞれに陽性ならば＋１、疑陽性なら０、陰性なら−１を与えると、細胞判定結果として表１が得られた。表１はプロによる判定結果（一部抜粋）を示している。
【００５１】
【表１】
【００５２】
また、このときの細胞判定値の行列Ｄは次式で表される（ｎ＝１２０，ｍ＝４６）。
【数１】
【００５３】
次に、Ｔiをｉ番目細胞の真の値として、それぞれに陽性ならば＋１、疑陽性なら０、陰性なら−１を与えることにより数値化する。すると、真の値の行列Ｔは次式で表わされる（ｎ＝１２０）。
【数２】
【００５４】
判定値と真値との誤差Ｅij＝Ｄij−Ｔiは＋２、＋１、０、−１、−２の値を取りうる。判定誤差値の行列Ｅは、次式のようになる（ｎ＝１２０，ｍ＝４６）。
【数３】
【００５５】
それぞれの判定誤差Ｅijの意味は次の通りである。
＋２：最終診断陰性の細胞を陽性と判定した場合、患者は癌の可能性が高いと判断される。
＋１：ａ）最終診断陰性の細胞を疑陽性と判定した場合
ｂ）最終診断疑陽性の細胞を陽性と判定した場合
０：最終診断陰性、疑陽性、陽性と完全に一致し、誤差はない。
−１：ａ）最終診断陽性の細胞を疑陽性と判定した場合
ｂ）最終診断疑陽性の細胞を陰性と判定した場合
−２：最終診断陽性の細胞を陰性と判定した場合、患者は癌の可能性がないと判断される。正確な診断も治療もされないまま、病態が進む場合があり致命的な判定である。ＣＴ、ＭＲＩなど他の検査法により発見される可能性は残る。
【００５６】
（ステップ３）優れたプロの抽出
全例１２０例中の判定誤差Ｅij（０）の割合は一致率として表す。プロの最終診断との判定誤差でランク付けを行い、Ｅij（０）の数の多いプロすなわち一致率の高いプロを上位とする。次に、＋２ならびに−２は危険率の高い誤差値を表している。そこで、それぞれのプロの判定危険率の高さを明確に表すために、次式により平均２乗誤差（Ｒｏｏｔ Ｍｅａｎ Ｓｑｕａｒｅ Ｅｒｒｏｒ：以下、「ＲＥ」と称す。）を求める。
【数４】
【００５７】
次に、一致率の高い判定者のランキング上位１０％までを表２に示す。表２は一致率とＲＥによるプロランキング結果を示している。ＲＥでの順位も同表に示す。表２より一致率とＲＥの双方で同一プロによる同一順位が確認される。すなわち、一致率の高い優秀なプロのＲＥは小さく、次の特長をあわせてもっているといえる。
（１）最も危険な判定Ｅij（−２）は認められない。
（２）曖昧な判定も含まれるＤij（０）の数が少ない。
【００５８】
【表２】
【００５９】
（ステップ４）プロの知識の抽出
１．知識について
本実施形態において、プロには細胞診断あるいは判定をする際の基本的な観察態度についての細胞所見重要度を３段階評価で質問を行っている。細胞所見とは細胞判定するために観察する細胞のさまざまなチェックポイントである。本実施形態では、１０項目の細胞所見について説明する。
【００６０】
（ａ）細胞の結合性異常
一般的に尿では良性細胞は単個あるいは数個で出現する。集団でみられることは少ない。結石や内視鏡的な診療後に結合性の強い細胞の集団が出現することがある。悪性細胞では対細胞か緩い粗な結合性をもつ集団で出現することがみられる。ときに３０個以上の細胞からなる集団で出現することがある。
【００６１】
（ｂ）細胞径
極端に大きい細胞や同じ種類の細胞で大小不同が顕著な場合は注意が必要であるが、自然変性、癌の治療（化学療法や放射線療法）により大型化することはしばしばみられる。白血球の６倍以上の大きさがあれば悪性を考えるが、大きな細胞が悪性とは限らず核が小さければ良性の可能性もある。小型細胞でも細胞径が２０〜３０μｍで核の大きい細胞はディスプラシアや悪性腫瘍の場合がある。
【００６２】
（ｃ）Ｎ／Ｃ比
同一系列の細胞で核（ｎｕｃｌｅａｒ）と細胞質（ｃｙｔｏｐｌａｓｍ）の面積比であり、悪性細胞では増大する。Ｎ／Ｃ比が０．５以上あれば悪性の可能性を考える。Ｎ／Ｃ比が高いほど悪性の可能性が高く、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば極めて悪性の可能性が高い。なお、細胞質を持たないような核のみで出現している裸核細胞では判断しない。ウイルス感染や治療による変性、反応性で核の面積が大きくなる場合もある。
【００６３】
（ｄ）核偏在（核の位置）
尿に出現する細胞は核の位置が偏在することが多いが、悪性細胞では極端に偏在することが多い。
【００６４】
（ｅ）核形不整
良性細胞の核は円形から楕円形であるが、凹凸や立体的な切れ込みが顕著な場合、悪性の可能性が高い。
【００６５】
（ｆ）クロマチン濃度（核クロマチン量）
クロマチン濃度の濃さで表す。核内構造が確認できて、背景にある白血球と比較し、クロマチンの黒紫色の濃い染色性を示す細胞は悪性の可能性がある。悪性、良性を問わず、細胞変性の終末像は核が濃縮し、濃い染色性を示すので、注意が必要である。
【００６６】
（ｇ）核クロマチンの不規則な分布
新鮮な細胞と変性の加わっている細胞ではクロマチンの状態が異なる。新鮮な細胞で不透明感のあり、ゴマ塩状にみえるオイクロマチンの増量がみられることがあり、核は濃い染色性を示さないが悪性である可能性が高い。また、クロマチン顆粒の大きさが様々であったり、クロマチン網が太いものと細いものが混在したりする細胞は、悪性細胞に変性が加わった細胞である可能性が高い。
【００６７】
（ｈ）核縁の不規則な肥厚
核膜にクロマチンが付着している状態を表す。新鮮悪性腫瘍細胞では核のふちは尖った鉛筆で描いたように薄く、良性細胞との鑑別が困難である。変性悪性腫瘍細胞では先端を四角に削った鉛筆を回しながら描いたように核のふちの肥厚が不規則で、肥厚の顕著な部位もみられる。
【００６８】
（ｉ）核の突出
悪性細胞ではＤＮＡ活性が高くなるため、核が立体的になり、細胞質から突出したようにみられることがある。
【００６９】
（ｊ）明瞭な核小体
悪性細胞ではＲＮＡ活性も高くなるため、核小体の増大、数の増加がみられる場合がある。変性が強い悪性細胞では確認できないこともしばしばある。
【００７０】
２．知識の抽出
上記の１０項目の細胞所見に関する質問の回答結果で常に重視する所見であれば３点を与え、場合によって重視するのであれば２点を与える。所見はあっても重視しないのであれば１点を与える。これを集計すると評価点数によって重要度が分類される。さらに次の手順で細胞所見重要度順位（表６）を決定する。
【００７１】
（１）上位１０％のプロ平均をとり評価合計点数の高い所見から順にならべる。表３は上位１０％プロの細胞所見重要度順位を示している。表３の網掛けの所見に注目する。
【表３】
【００７２】
（２）同一順位１位の中では下位の１０％のプロが重要視していない所見を上位の順位に位置づける。表４は下位１０％プロの細胞所見重要度順位を示している。ここではＮ／Ｃ比（網掛け）を上位のプロが重要視しているのと比較し下位のプロの評価は低いことからＮ／Ｃ比を１位とし、表６の１位に置く。
【表４】
【００７３】
（３）残ったクロマチン濃度と核突出では差違がみられなかったため、表５のプロ平均を参照し、ここでは点数の高いクロマチン濃度（網掛け）を採択し、２位とした。表５は全プロ平均細胞所見重要度順位を示している。３位は核突出（網掛け）となった。これにより、表６の２位および３位が決定される。
【表５】
【００７４】
（４）ここで表４に戻り、重要度１位の中での優先順位が決定したため、表４の上位１０％のプロの重要度順位に戻り、２位の核形不整、細胞径に着眼する。
【００７５】
（５）上位のプロの評価を基本に同一順位の時には下位のプロの評価の低いものを上位に位置づける。この段階で順位が決まらなければ、プロ平均の評価を参照し、点数の高い所見を上位とする。上記の手順で作業を繰り返し、次のような順位が決定し、優れたプロの有する暗黙知が抽出される（表６）。表６の順位１〜３、４〜５、６〜７、８〜９、１０の細胞所見は、表３に示した上位１０％のプロの考える重要度順位の同枠内にあることが確認される。
【００７６】
【表６】
【００７７】
（ステップ５）フロー作成
表６から重要度順位１〜５に基づき、作成したフローが図１のフローである。なお、図１の第１ステップから第４ステップは、重要度順位１〜３による判定である。また、第５ステップは重要度順位４による判定、第６ステップは重要度順位５による判定である。同様に、第７ステップおよび第８ステップは重要度順位６，７による判定、第９ステップおよび第１０ステップは重要度順位８，９による判定、第１１ステップは重要度順位１０による判定である。
【００７８】
このように決定された図１のフローに基づいて、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１は腫瘍細胞の同定を行う。まず、同定装置１は、顕微鏡カメラ２により被検体画像を撮像し、コンピュータ３へ取り込む。
【００７９】
コンピュータ３は、第１判定手段１１により、図１の第１ステップを実行し、被検体画像からＮ／Ｃ比を算出し、算出されたＮ／Ｃ比が０．５以上であるか判定する。この第１判定手段１１によりＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、コンピュータ３は、第２判定手段１２により第２ステップを実行し、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定する。
【００８０】
また、コンピュータ３は、第２判定手段１２により第３ステップを実行し、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度と白血球のクロマチン染色濃度とを算出し、算出された被検細胞のクロマチン染色濃度が算出された白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する。ここで、第２判定手段１２は、陽性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８１】
また、コンピュータ３は、第１判定手段１１によりＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２判定手段１２により陽性であると判定されなかったものについて、第３判定手段１３により第４ステップを実行し、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側への核の突出状態を検出し、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する。ここで、第３判定手段１３は、陽性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８２】
次に、コンピュータ３は、第３判定手段１３により陽性であると判定されなかったものについて、第４判定手段１４により第５ステップを実行し、被検体画像から被検細胞の核形状態を検出し、被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する。ここで、第４判定手段１４は、陰性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８３】
次に、コンピュータ３は、第４判定手段１４により陰性であると判定されなかったものについて、第５判定手段１５により第６ステップを実行し、被検体画像から細胞径を検出し、細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する。ここで、第５判定手段１５は、疑陽性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８４】
次に、コンピュータ３は、第５判定手段１５により疑陽性であると判定されなかったもについて、第６判定手段１６により第７ステップを実行し、被検体画像から核の配置状態を検出し、核偏在がないものを陰性であると判定する。また、コンピュータ３は、第６判定手段１６により第８ステップを実行し、被検体画像から細胞の結合性を検出し、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する。ここで、第５判定手段１５は、陰性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８５】
次に、コンピュータ３は、第６判定手段１５において陰性であると判定されなかったものについて、第７判定手段１７により第９ステップを実行し、被検体画像からクロマチンの分布状態を検出し、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する。また、コンピュータ３は、第７判定手段１７により第１０ステップを実行し、被検体画像から核膜におけるクロマチン付着状態を検出し、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する。ここで、第６判定手段１６は、陰性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８６】
次に、コンピュータ３は、第７判定手段１７において陰性であると判定されなかったものについて、第８判定手段１８により第１１ステップを実行し、被検体画像から核小体を検出し、明瞭な核小体があるものを陽性、ないものを疑陽性であると判定する。第７判定手段１７は、この判定結果を出力手段１９に出力し、処理を終了する。
【００８７】
以上のように、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１により実行される同定方法によれば、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、第２ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいは第３ステップにおいてクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定することができる。また、ここで陽性であると判定されなかったものについては、第４ステップにおいて、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。
【００８８】
一方、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、第３ステップにおけるクロマチン染色濃度の判定を行うことなく、第４ステップにおいて被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。
【００８９】
そして、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについては、第５ステップにおいて被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定することにより、陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を抽出することができる。
【００９０】
また、第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについては、第６ステップにおいて細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定することにより、陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを抽出することができる。
【００９１】
また、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについては、第７ステップにおいて核偏在がないものであれば陰性、第８ステップにおいて細胞の結合性異常がないものであれば陰性であると判定するので、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００９２】
また、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについては、第９ステップにおいてクロマチンの不規則分布がないものであれば陰性、第１０ステップにおいて核縁不規則肥厚がないものであれば陰性であると判定するので、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００９３】
また、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについては、第１１ステップにおいて明瞭な核小体があるものであれば陽性、明瞭な核小体がないものであれば疑陽性であると判定するので、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを抽出することができる。
【００９４】
特に、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１では、第２ステップにおいて被検体画像からＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定し、第３ステップにおいて被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するので、陽性である被検細胞をより早く抽出することが可能となる。
【実施例】
【００９５】
次に、形式知化されたアルゴリズムの有効性の評価を行った。図１のフローが優れたプロの暗黙知をどの程度伝達しているかを検証するために、次の実験を行った。ノンプロの被験者は５０名（女性３１名、男性１９名）を選んだが、彼らは次のようなキャリアを持っており、いずれも論理的思考が可能と考えられる者である。
【００９６】
文系大学生 ３名（女性 ２名、男性 １名）
理系大学生 ３名（女性 １名、男性 ２名）
工学を学ぶ大学院生 ３名（女性 ０名、男性 ３名）
２０代会社員 ６名（女性 ４名、男性 ２名）
３０代会社員 ７名（女性 ５名、男性 ２名）
４０代会社員、教職 ５名（女性 ４名、男性 １名）
５０代会社員、教職 ２２名（女性１５名、男性 ７名）
７０代会社員 １名（女性 ０名、男性 １名）
【００９７】
実験結果として得られた形式知による判定誤差行列Ｆは、次の通りである（ｎ＝１〜１２０、ｍ＝１〜４６）。
【数５】
【００９８】
ここでもプロの場合と同様に一致率とＲＥを算出した。判定結果を表７に示す。
【表７】
【００９９】
プロ、ノンプロともχ２乗適合検定により正規分布と見做すことができた。
優秀なプロ知識の形式知化されたアルゴリズムを用いたノンプロの判定の平均値（ＲＥ＝０．７４、ＣＲ＝０．７２）は、プロの判定の平均値（ＲＥ＝０．９、ＣＲ＝０．４４）より優れている。また、プロの判定と形式知化されたアルゴリズムによるノンプロ判定とのＲＥ値を比較すると、優れたプロ（上位１０％）には及ばないが、図１のフローに基づいてノンプロが判定した場合、経験則の暗黙知だけに依存していると考えられるプロ全体より精度の高い判定をしていることが明らかである。一方、プロとノンプロとも一致率とＲＥの間には各々−０．８２８、−０．８４１という高い負の相関がみられた。すなわち、一致率の高い判定者はプロ、ノンプロいずれでも危険率の高いＥij（±２）の判定は少ないといえる。
【０１００】
次に疑陽性の判定の中で唯一確立された病変であるディスプラシア症例７例についてのプロ、ノンプロでの比較をウエルチのｔ検定で行い、有意（ｐ＜０．０５）にプロの一致率が高いことが確認された。
【０１０１】
また、次に、本実施形態における腫瘍細胞の同定方法の的中率について検証した。検証においては、総数２３５例（陽性細胞９８例、疑陽性細胞４７例、陰性細胞９０例）の被検体画像を元に判定を行った。判定結果を表８に示す。
【０１０２】
【表８】
【０１０３】
表８から分かるように、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１により実行される同定方法によれば、陽性細胞９８例のうち陽性と同定できたものは９２例、疑陽性細胞４７例のうち疑陽性と同定できたものは１６例であり、それぞれ９４％、３４％の的中率であった。一方、陰性細胞９０例については第８ステップまでで１００％陰性と同定できた。また、陽性細胞および疑陽性細胞の合計１４５例のうち陽性または疑陽性と同定できたものは１３０例であり、９０％の的中率であった。疑陽性、陽性と判定されたものは確診するための再検査を必要とする。その後に治療方針が決定される。この点から鑑みれば、要再検率は９０％となり、陽性または疑陽性が疑われる細胞は９０％の確率で判定できたこととなる。
【産業上の利用可能性】
【０１０４】
本発明は、被検体画像から腫瘍細胞を同定する方法および装置として有用である。
【符号の説明】
【０１０５】
１ 同定装置
２ 顕微鏡カメラ
３ コンピュータ
４ キーボード
５ ポインティングデバイス
６ ディスプレイ
１０ 撮像手段
１１ 第１判定手段
１２ 第２判定手段
１３ 第３判定手段
１４ 第４判定手段
１５ 第５判定手段
１６ 第６判定手段
１７ 第７判定手段
１８ 第８判定手段
１９ 出力手段
【技術分野】
【０００１】
本発明は、被検体画像から腫瘍細胞を同定する方法および装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞診検査は、有資格の専門家（細胞検査士）によって良悪性を中心とした細胞の判定が行なわれる癌の検査法の１つである。細胞は正常細胞と異常細胞に分類され、細胞診では異常細胞を異型細胞（atypical cell）という用語で表現している。異型細胞とは、検査材料を、光学顕微鏡を使って観察した場合に、細胞の形態が正常から隔たっている細胞を指す。細胞診検査では、細胞形態の変化した異型細胞が悪性腫瘍によるものか、良性腫瘍によるものか、炎症などの非腫瘍性疾患によるものなのかを判別する。
【０００３】
具体的には、細胞検査士は、検査材料について、（１）クロマチンの増量、（２）細胞質の濃染、異常、（３）Ｎ／Ｃ比大（核と細胞質の比：ＷＨＯの面積比から換算した直径比）、（４）核縁の不規則肥厚、（５）多核細胞、対細胞など結合性の異常、（６）細胞の大小不同、（７）細胞の多彩性、（８）単一な出現態度、（９）細胞結合の脆弱性、（１０）壊死性背景、（１１）異常細胞の量、（１２）細胞の重積性、（１３）細胞集塊の辺縁の異常、（１４）核の大小不同、（１５）核の配列不整、（１６）核の重積性、（１７）核クロマチン不規則分布、（１８）オイクロマチン増量、（１９）核偏在、（２０）核突出、（２１）核形不整、（２２）大きな核小体、（２３）核小体の数、（２４）核内空胞、（２５）細胞質内腺腔などの指標を観察することによって、上記判別を行っている。しかしながら、この細胞検査士の判別基準は、経験を通じて形成される暗黙知によるものであり、客観性や再現性に劣る。
【０００４】
また、細胞診検査に関する技術として、例えば特許文献１には、細胞画像と核の蛍光信号から細胞画像を切出し、２値化して、この２値化された細胞画像面積から細胞径Ｃを算出し、核径Ｎを用いてＮ／Ｃ比を演算することが記載されている。また、特許文献２には、細胞の形状、細胞のサイズ、核のサイズ、核の形状、核−細胞質比、核大小不同の有無などを指標に、細胞の正常、異型性、または悪性に分類することが記載されている。
【０００５】
また、非特許文献１には、早期の高分化型胃癌２例について異型度を核の断面積、核の長径、核の形状係数、極性、それぞれの変動係数および核と細胞質の比を用いて数量化し、９変量クラスター分析を行い、粘膜腺上皮の形態は異型度からは正常の腺上皮、低異型度異形性、高異型度異形性および腺癌の４群をカテゴリーとする分類が適当であることが開示されている。
【０００６】
また、非特許文献２には、６１の大腸機能低下上皮微小新形成を用いて直径５ｍｍ以下の微小腫ようの形態計測とｐ５３発現との間の関係を評価し、核／細胞質面積比がｐ５３の陽性発現頻度と関連したことが開示されている。また、非特許文献３には、膵島細胞腫瘍１９例について良悪性の鑑別診断に関して臨床病理学的検討を行い、悪性の指標として有用であったのは画像解析による細胞異型のうち核直径、核矩径、核面積、核円形度ならびに核／細胞質比であることが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−２５３６２４号公報
【特許文献２】特表２００４−５０５２７８号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】レン・エイチ（REN H）、外４名，「胃の高分化型腺癌の発生に関する組織病理学的研究形態計量と多変量解析による異型度マッピング」，加齢医学研究所雑誌，１９９９年１０月３０日，第５１巻，第１号，ページｐ．９−２２
【非特許文献２】ワダ・アール（WADA R）、外７名，「ザ・ポシブル・アソシエーション・ビトウィーン・エクスプレッション・オブ・ピー５３・アンド・ディベロップメント・イン・ディプレスト・タイプ・コロレクタル・カースノーマ（The possible association between expression of p53 and development in depressed type colorectal carcinoma）」，アクタ・ヒストケム・シトケム（Acta Histochem Cytochem），１９９３年，第２６巻，第１号，ページｐ．２１−２５
【非特許文献３】吉井克己，「すい島細胞腫ようの臨床病理学的研究特に良悪性鑑別診断について」，１９９２年１０月，東京女子医科大学雑誌，第６２巻，第１０号，ページｐ．９１５−９２２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
細胞検査士の知識は教育や経験を通じて形成されており、前述のように各細胞検査士の判定基準が細胞判定の精度に大きく関与している。細胞検査士は、前述の（１）〜（２５）等の細胞所見に基づいて良悪性を判別するが、これらの（１）〜（２５）等の指標間で矛盾が生じたときに細胞検査士がどの指標を重要視するかによって、最終診断結果が違ってくるという実情にある。このため、各々の細胞検査士で正診率にばらつきが生じる。
【００１０】
このことは、前述の特許文献２および非特許文献１〜３に記載の技術でも同じことであり、それぞれの指標間で矛盾が生じたときにどの指標を重要視するかによって、最終診断結果は違ってくることになる。
【００１１】
そこで、本発明においては、検査者の経験に依拠せず、細胞診の正診率を向上させることが可能な腫瘍細胞の同定方法および同定装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の腫瘍細胞の同定方法は、被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比（以下、「Ｎ／Ｃ比」と称す。）が０．５以上であるか判定する第１ステップと、この第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップ、または、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第２ステップおよび第３ステップと、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第４ステップとを含む。
【００１３】
本発明によれば、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいはクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定することができ、陽性であると判定されなかったものについては、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。一方、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、クロマチン染色濃度の判定を行うことなく、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。
【００１４】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第５ステップを含むことが望ましい。これにより、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を抽出することができる。
【００１５】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第６ステップを含むことが望ましい。これにより、前述の第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを抽出することができる。
【００１６】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核偏在がないものを陰性であると判定するステップ、または、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第７ステップおよび第８ステップを含むことが望ましい。これにより、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００１７】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞にクロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定するステップ、または、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第９ステップおよび第１０ステップを含むことが望ましい。これにより、前述の第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００１８】
また、本発明の腫瘍細胞の同定方法は、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に明瞭な核小体があるものを陽性、明瞭な核小体がないものを疑陽性であると判定する第１１ステップを含むことが望ましい。これにより、前述の第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを抽出することができる。
【００１９】
なお、第２ステップは、被検体画像からＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップであり、第３ステップは、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップであることが望ましい。これにより、陽性である被検細胞をより早く抽出することが可能となる。
【００２０】
本発明の腫瘍細胞の同定装置は、被検体画像を撮像する撮像手段と、撮像手段により撮像された被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比を算出し、算出されたＮ／Ｃ比が０．５以上であるか判定する第１判定手段と、この第１判定手段においてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定する手段、または、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度と白血球のクロマチン染色濃度とを算出し、算出された被検細胞のクロマチン染色濃度が算出された白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第２判定手段と、第１判定手段においてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側への核の突出状態を検出し、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第３判定手段と、第２判定手段および第３判定手段による判定結果を出力する出力手段とを含むものである。
【００２１】
本発明によれば、撮像された被検体画像から被検細胞のＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいはクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定され、陽性であると判定されなかったものについては、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものが陽性であると判定され、この判定結果が出力される。一方、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、クロマチン染色濃度の判定を行うことなく、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものが陽性であると判定され、この判定結果が出力される。
【００２２】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第３判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から前記被検細胞の核形状態を検出し、被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第４判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第３判定手段において陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を抽出することができる。
【００２３】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第４判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から細胞径を検出し、細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第５判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第４判定手段において陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを抽出することができる。
【００２４】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第５判定手段において疑陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から核の配置状態を検出し、核偏在がないものを陰性であると判定する手段、または、被検体画像から細胞の結合性を検出し、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第６判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第５判定手段において疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００２５】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第６判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像からクロマチンの分布状態を検出し、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する手段、または、被検体画像から核膜におけるクロマチン付着状態を検出し、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第７判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第６判定手段において陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００２６】
また、本発明の腫瘍細胞の同定装置は、第７判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から核小体を検出し、明瞭な核小体があるものを陽性、ないものを疑陽性であると判定する第８判定手段を含むものであることが望ましい。これにより、第７判定手段において陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを抽出することができる。
【発明の効果】
【００２７】
（１）Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいはクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定し、陽性であると判定されなかったものについては、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定し、一方、Ｎ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、クロマチン染色濃度の判定を行うことなく、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する構成により、検査者の経験に依拠せず、陽性細胞を同定することができ、正診率を向上させることが可能となる。
【００２８】
（２）また、上記により陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する構成により、陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を同定することができる。
【００２９】
（３）また、上記により陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する構成により、陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを同定することができる。
【００３０】
（４）また、上記により疑陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に核偏在がないものであれば陰性、細胞の結合性異常がないものであれば陰性であると判定する構成により、疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを同定することができる。
【００３１】
（５）また、上記により陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞にクロマチンの不規則分布がないものであれば陰性、核縁不規則肥厚がないものであれば陰性であると判定する構成により、陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを同定することができる。
【００３２】
（６）また、上記により陰性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞に明瞭な核小体があるものであれば陽性、明瞭な核小体がないものであれば疑陽性であると判定する構成により、陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを同定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】本発明の実施の形態における腫瘍細胞の同定方法を示すフロー図である。
【図２】図１の腫瘍細胞の同定方法を実行する同定装置の概略構成図である。
【図３】図２の同定装置の機能ブロック図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
図１は本発明の実施の形態における腫瘍細胞の同定方法を示すフロー図である。
【００３５】
第１ステップは、例えば尿沈渣画像などの被検体画像からＮ／Ｃ比が０．５以上であるかを判定する。第２ステップは、この第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、被検体画像からＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性（Positive）であると判定する。また、第３ステップでは、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する。なお、第２ステップと第３ステップとは判定順序を逆にすることも可能である。
【００３６】
そして、第４ステップでは、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する。
【００３７】
第５ステップは、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性（Negative）であると判定する。核形不整は、被検細胞の核縁に凸凹、切れ込みまたは直線などが形成されているか否かによって判定する。核形不整がないものは陰性であると判定する。
【００３８】
第６ステップは、第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性（Suspicious）であると判定する。
【００３９】
第７ステップは、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについて、核偏在がないものを陰性であると判定する。また、第８ステップでは、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する。なお、第７ステップと第８ステップとは判定順序を逆にすることも可能である。
【００４０】
第９ステップは、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する。また、第１０ステップでは、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する。なお、第９ステップと第１０ステップとは判定順序を逆にすることも可能である。
【００４１】
第１１ステップは、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、明瞭な核小体があるものを陽性、明瞭な核小体がないものを疑陽性であると判定する。
【００４２】
図２は図１の腫瘍細胞の同定方法を実行する同定装置の概略構成図、図３は図２の同定装置の機能ブロック図である。
【００４３】
図２において、本発明の実施の形態における腫瘍細胞の同定装置１は、被検体画像を撮像する撮像装置としての顕微鏡カメラ２と、各種演算処理を行う演算装置としてのコンピュータ３と、入力装置としてのキーボード４およびポインティングデバイス５と、出力装置としてのディスプレイ６とから構成される。
【００４４】
顕微鏡カメラ２は、図３に示す撮像手段１０として機能する。コンピュータ３は、図３に示す第１〜第８判定手段１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８として機能する。第１〜第８判定手段１１〜１８は、これらの第１〜第８判定手段１１〜１８の機能を実現するプログラムを記録媒体からコンピュータ３に読み取り、実行することにより、実現することが可能である。また、ディスプレイ６は、図３に示す出力手段１９として機能する。
【００４５】
第１判定手段１１は、撮像手段１０により撮像した被検体画像に基づき、前述の第１ステップを実行するＮ／Ｃ比０．５以上判定手段である。第２判定手段１２は前述の第２ステップを実行するＮ／Ｃ比０．８以上判定手段および第３ステップを実行するクロマチン濃度判定手段である。第３判定手段１３は前述の第４ステップを実行する核突出判定手段である。第４判定手段１４は前述の第５ステップを実行する核形不整判定手段である。第５判定手段１５は前述の第６ステップを実行する細胞径判定手段である。
【００４６】
第６判定手段１６は前述の第７ステップを実行する核偏在判定手段および第８ステップを実行する細胞結合性判定手段である。第７判定手段１７は前述の第９ステップを実行するクロマチン不規則分布判定手段および第１０ステップを実行する核縁不規則肥厚判定手段である。第８判定手段１８は前述の第１１ステップを実行する明瞭核小体判定手段である。出力手段１９は、第２〜第８判定手段１２〜１８による判定結果を出力するものである。なお、出力手段１９としては、ディスプレイ６以外に印刷装置としてのプリンタ等により構成することも可能である。
【００４７】
次に、図１のフローの決定方法について説明する。以下の説明では、最初に優れた有資格の専門家（以下、「プロ」と称す。）を抽出し、つぎに細胞判定に関する優れたプロの暗黙知を形式知に置き換える。また、優れたプロとその他のプロとの判断ポイントの相違点を抽出し、形式知を用いた細胞判定のアルゴリズムからフローを決定する。
【００４８】
なお、本実施形態において細胞判定用に準備したのは特に曖昧な判定の多い尿細胞診の細胞画像である。被検体画像は、尿沈渣により得られた検体を顕微鏡カメラ２により撮像したものである。尿沈渣とは、尿を遠心分離器にかけたときに沈殿してくる赤血球や白血球、細胞、結晶成分などの固形成分のことを指す。
【００４９】
（ステップ１）プロの判定誤差の実態調査
尿細胞診検体を用い、プロに対し判定誤差の実態調査を行った。調査のために良性から悪性までのさまざまな異型細胞の写真撮影を行い、１２０例を用意した。これらの写真画像を全国６地域１５箇所で勤務する４６名のプロの協力者に送り、細胞の見方に関する質問とともに１２０例の細胞に対する判定結果データを収集した。これらの細胞の持ち主（患者）が癌であったか否かなどという最終診断データは存在するが、協力者には知らされていない。これにより、調査結果データとして、１２０×４６の回答データと１２０の正解データが揃えられた。
【００５０】
（ステップ２）判定誤差の評価
異型細胞をみて悪性が極めて強く疑われる細胞であれば陽性であると判定する。また、（ａ）陽性か陰性か判定が難しい、（ｂ）悪性の確定ができない、（ｃ）ディスプラシア（Dysplasia：良性腫瘍と悪性腫瘍の境界病変）が疑われる、のいずれかの場合は疑陽性であると判定する。また、良性を考える細胞であれば陰性であると判定する。Ｄijをｉ番目の細胞に対するｊ番目のプロの判定値として、それぞれに陽性ならば＋１、疑陽性なら０、陰性なら−１を与えると、細胞判定結果として表１が得られた。表１はプロによる判定結果（一部抜粋）を示している。
【００５１】
【表１】
【００５２】
また、このときの細胞判定値の行列Ｄは次式で表される（ｎ＝１２０，ｍ＝４６）。
【数１】
【００５３】
次に、Ｔiをｉ番目細胞の真の値として、それぞれに陽性ならば＋１、疑陽性なら０、陰性なら−１を与えることにより数値化する。すると、真の値の行列Ｔは次式で表わされる（ｎ＝１２０）。
【数２】
【００５４】
判定値と真値との誤差Ｅij＝Ｄij−Ｔiは＋２、＋１、０、−１、−２の値を取りうる。判定誤差値の行列Ｅは、次式のようになる（ｎ＝１２０，ｍ＝４６）。
【数３】
【００５５】
それぞれの判定誤差Ｅijの意味は次の通りである。
＋２：最終診断陰性の細胞を陽性と判定した場合、患者は癌の可能性が高いと判断される。
＋１：ａ）最終診断陰性の細胞を疑陽性と判定した場合
ｂ）最終診断疑陽性の細胞を陽性と判定した場合
０：最終診断陰性、疑陽性、陽性と完全に一致し、誤差はない。
−１：ａ）最終診断陽性の細胞を疑陽性と判定した場合
ｂ）最終診断疑陽性の細胞を陰性と判定した場合
−２：最終診断陽性の細胞を陰性と判定した場合、患者は癌の可能性がないと判断される。正確な診断も治療もされないまま、病態が進む場合があり致命的な判定である。ＣＴ、ＭＲＩなど他の検査法により発見される可能性は残る。
【００５６】
（ステップ３）優れたプロの抽出
全例１２０例中の判定誤差Ｅij（０）の割合は一致率として表す。プロの最終診断との判定誤差でランク付けを行い、Ｅij（０）の数の多いプロすなわち一致率の高いプロを上位とする。次に、＋２ならびに−２は危険率の高い誤差値を表している。そこで、それぞれのプロの判定危険率の高さを明確に表すために、次式により平均２乗誤差（Ｒｏｏｔ Ｍｅａｎ Ｓｑｕａｒｅ Ｅｒｒｏｒ：以下、「ＲＥ」と称す。）を求める。
【数４】
【００５７】
次に、一致率の高い判定者のランキング上位１０％までを表２に示す。表２は一致率とＲＥによるプロランキング結果を示している。ＲＥでの順位も同表に示す。表２より一致率とＲＥの双方で同一プロによる同一順位が確認される。すなわち、一致率の高い優秀なプロのＲＥは小さく、次の特長をあわせてもっているといえる。
（１）最も危険な判定Ｅij（−２）は認められない。
（２）曖昧な判定も含まれるＤij（０）の数が少ない。
【００５８】
【表２】
【００５９】
（ステップ４）プロの知識の抽出
１．知識について
本実施形態において、プロには細胞診断あるいは判定をする際の基本的な観察態度についての細胞所見重要度を３段階評価で質問を行っている。細胞所見とは細胞判定するために観察する細胞のさまざまなチェックポイントである。本実施形態では、１０項目の細胞所見について説明する。
【００６０】
（ａ）細胞の結合性異常
一般的に尿では良性細胞は単個あるいは数個で出現する。集団でみられることは少ない。結石や内視鏡的な診療後に結合性の強い細胞の集団が出現することがある。悪性細胞では対細胞か緩い粗な結合性をもつ集団で出現することがみられる。ときに３０個以上の細胞からなる集団で出現することがある。
【００６１】
（ｂ）細胞径
極端に大きい細胞や同じ種類の細胞で大小不同が顕著な場合は注意が必要であるが、自然変性、癌の治療（化学療法や放射線療法）により大型化することはしばしばみられる。白血球の６倍以上の大きさがあれば悪性を考えるが、大きな細胞が悪性とは限らず核が小さければ良性の可能性もある。小型細胞でも細胞径が２０〜３０μｍで核の大きい細胞はディスプラシアや悪性腫瘍の場合がある。
【００６２】
（ｃ）Ｎ／Ｃ比
同一系列の細胞で核（ｎｕｃｌｅａｒ）と細胞質（ｃｙｔｏｐｌａｓｍ）の面積比であり、悪性細胞では増大する。Ｎ／Ｃ比が０．５以上あれば悪性の可能性を考える。Ｎ／Ｃ比が高いほど悪性の可能性が高く、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であれば極めて悪性の可能性が高い。なお、細胞質を持たないような核のみで出現している裸核細胞では判断しない。ウイルス感染や治療による変性、反応性で核の面積が大きくなる場合もある。
【００６３】
（ｄ）核偏在（核の位置）
尿に出現する細胞は核の位置が偏在することが多いが、悪性細胞では極端に偏在することが多い。
【００６４】
（ｅ）核形不整
良性細胞の核は円形から楕円形であるが、凹凸や立体的な切れ込みが顕著な場合、悪性の可能性が高い。
【００６５】
（ｆ）クロマチン濃度（核クロマチン量）
クロマチン濃度の濃さで表す。核内構造が確認できて、背景にある白血球と比較し、クロマチンの黒紫色の濃い染色性を示す細胞は悪性の可能性がある。悪性、良性を問わず、細胞変性の終末像は核が濃縮し、濃い染色性を示すので、注意が必要である。
【００６６】
（ｇ）核クロマチンの不規則な分布
新鮮な細胞と変性の加わっている細胞ではクロマチンの状態が異なる。新鮮な細胞で不透明感のあり、ゴマ塩状にみえるオイクロマチンの増量がみられることがあり、核は濃い染色性を示さないが悪性である可能性が高い。また、クロマチン顆粒の大きさが様々であったり、クロマチン網が太いものと細いものが混在したりする細胞は、悪性細胞に変性が加わった細胞である可能性が高い。
【００６７】
（ｈ）核縁の不規則な肥厚
核膜にクロマチンが付着している状態を表す。新鮮悪性腫瘍細胞では核のふちは尖った鉛筆で描いたように薄く、良性細胞との鑑別が困難である。変性悪性腫瘍細胞では先端を四角に削った鉛筆を回しながら描いたように核のふちの肥厚が不規則で、肥厚の顕著な部位もみられる。
【００６８】
（ｉ）核の突出
悪性細胞ではＤＮＡ活性が高くなるため、核が立体的になり、細胞質から突出したようにみられることがある。
【００６９】
（ｊ）明瞭な核小体
悪性細胞ではＲＮＡ活性も高くなるため、核小体の増大、数の増加がみられる場合がある。変性が強い悪性細胞では確認できないこともしばしばある。
【００７０】
２．知識の抽出
上記の１０項目の細胞所見に関する質問の回答結果で常に重視する所見であれば３点を与え、場合によって重視するのであれば２点を与える。所見はあっても重視しないのであれば１点を与える。これを集計すると評価点数によって重要度が分類される。さらに次の手順で細胞所見重要度順位（表６）を決定する。
【００７１】
（１）上位１０％のプロ平均をとり評価合計点数の高い所見から順にならべる。表３は上位１０％プロの細胞所見重要度順位を示している。表３の網掛けの所見に注目する。
【表３】
【００７２】
（２）同一順位１位の中では下位の１０％のプロが重要視していない所見を上位の順位に位置づける。表４は下位１０％プロの細胞所見重要度順位を示している。ここではＮ／Ｃ比（網掛け）を上位のプロが重要視しているのと比較し下位のプロの評価は低いことからＮ／Ｃ比を１位とし、表６の１位に置く。
【表４】
【００７３】
（３）残ったクロマチン濃度と核突出では差違がみられなかったため、表５のプロ平均を参照し、ここでは点数の高いクロマチン濃度（網掛け）を採択し、２位とした。表５は全プロ平均細胞所見重要度順位を示している。３位は核突出（網掛け）となった。これにより、表６の２位および３位が決定される。
【表５】
【００７４】
（４）ここで表４に戻り、重要度１位の中での優先順位が決定したため、表４の上位１０％のプロの重要度順位に戻り、２位の核形不整、細胞径に着眼する。
【００７５】
（５）上位のプロの評価を基本に同一順位の時には下位のプロの評価の低いものを上位に位置づける。この段階で順位が決まらなければ、プロ平均の評価を参照し、点数の高い所見を上位とする。上記の手順で作業を繰り返し、次のような順位が決定し、優れたプロの有する暗黙知が抽出される（表６）。表６の順位１〜３、４〜５、６〜７、８〜９、１０の細胞所見は、表３に示した上位１０％のプロの考える重要度順位の同枠内にあることが確認される。
【００７６】
【表６】
【００７７】
（ステップ５）フロー作成
表６から重要度順位１〜５に基づき、作成したフローが図１のフローである。なお、図１の第１ステップから第４ステップは、重要度順位１〜３による判定である。また、第５ステップは重要度順位４による判定、第６ステップは重要度順位５による判定である。同様に、第７ステップおよび第８ステップは重要度順位６，７による判定、第９ステップおよび第１０ステップは重要度順位８，９による判定、第１１ステップは重要度順位１０による判定である。
【００７８】
このように決定された図１のフローに基づいて、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１は腫瘍細胞の同定を行う。まず、同定装置１は、顕微鏡カメラ２により被検体画像を撮像し、コンピュータ３へ取り込む。
【００７９】
コンピュータ３は、第１判定手段１１により、図１の第１ステップを実行し、被検体画像からＮ／Ｃ比を算出し、算出されたＮ／Ｃ比が０．５以上であるか判定する。この第１判定手段１１によりＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、コンピュータ３は、第２判定手段１２により第２ステップを実行し、Ｎ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定する。
【００８０】
また、コンピュータ３は、第２判定手段１２により第３ステップを実行し、被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度と白血球のクロマチン染色濃度とを算出し、算出された被検細胞のクロマチン染色濃度が算出された白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する。ここで、第２判定手段１２は、陽性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８１】
また、コンピュータ３は、第１判定手段１１によりＮ／Ｃ比が０．５以上でなかったもの、または、第２判定手段１２により陽性であると判定されなかったものについて、第３判定手段１３により第４ステップを実行し、被検体画像から被検細胞の細胞質辺縁の外側への核の突出状態を検出し、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する。ここで、第３判定手段１３は、陽性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８２】
次に、コンピュータ３は、第３判定手段１３により陽性であると判定されなかったものについて、第４判定手段１４により第５ステップを実行し、被検体画像から被検細胞の核形状態を検出し、被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する。ここで、第４判定手段１４は、陰性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８３】
次に、コンピュータ３は、第４判定手段１４により陰性であると判定されなかったものについて、第５判定手段１５により第６ステップを実行し、被検体画像から細胞径を検出し、細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する。ここで、第５判定手段１５は、疑陽性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８４】
次に、コンピュータ３は、第５判定手段１５により疑陽性であると判定されなかったもについて、第６判定手段１６により第７ステップを実行し、被検体画像から核の配置状態を検出し、核偏在がないものを陰性であると判定する。また、コンピュータ３は、第６判定手段１６により第８ステップを実行し、被検体画像から細胞の結合性を検出し、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する。ここで、第５判定手段１５は、陰性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８５】
次に、コンピュータ３は、第６判定手段１５において陰性であると判定されなかったものについて、第７判定手段１７により第９ステップを実行し、被検体画像からクロマチンの分布状態を検出し、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する。また、コンピュータ３は、第７判定手段１７により第１０ステップを実行し、被検体画像から核膜におけるクロマチン付着状態を検出し、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する。ここで、第６判定手段１６は、陰性であると判定した場合、出力手段１９に結果を出力し、処理を終了する。
【００８６】
次に、コンピュータ３は、第７判定手段１７において陰性であると判定されなかったものについて、第８判定手段１８により第１１ステップを実行し、被検体画像から核小体を検出し、明瞭な核小体があるものを陽性、ないものを疑陽性であると判定する。第７判定手段１７は、この判定結果を出力手段１９に出力し、処理を終了する。
【００８７】
以上のように、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１により実行される同定方法によれば、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されたものについて、第２ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．８以上であれば陽性、あるいは第３ステップにおいてクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものであれば陽性であると判定することができる。また、ここで陽性であると判定されなかったものについては、第４ステップにおいて、被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。
【００８８】
一方、第１ステップにおいてＮ／Ｃ比が０．５以上であると判定されなかったものについては、第３ステップにおけるクロマチン染色濃度の判定を行うことなく、第４ステップにおいて被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定することができる。
【００８９】
そして、第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについては、第５ステップにおいて被検体画像から被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定することにより、陽性であると判定されなかったものの中から陰性である被検細胞を抽出することができる。
【００９０】
また、第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについては、第６ステップにおいて細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定することにより、陰性であると判定されなかったものの中から疑陽性であるものを抽出することができる。
【００９１】
また、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについては、第７ステップにおいて核偏在がないものであれば陰性、第８ステップにおいて細胞の結合性異常がないものであれば陰性であると判定するので、第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００９２】
また、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについては、第９ステップにおいてクロマチンの不規則分布がないものであれば陰性、第１０ステップにおいて核縁不規則肥厚がないものであれば陰性であると判定するので、第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陰性であるものを抽出することができる。
【００９３】
また、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについては、第１１ステップにおいて明瞭な核小体があるものであれば陽性、明瞭な核小体がないものであれば疑陽性であると判定するので、第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものの中から陽性または疑陽性であるものを抽出することができる。
【００９４】
特に、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１では、第２ステップにおいて被検体画像からＮ／Ｃ比が０．８以上であるものを陽性であると判定し、第３ステップにおいて被検体画像から被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するので、陽性である被検細胞をより早く抽出することが可能となる。
【実施例】
【００９５】
次に、形式知化されたアルゴリズムの有効性の評価を行った。図１のフローが優れたプロの暗黙知をどの程度伝達しているかを検証するために、次の実験を行った。ノンプロの被験者は５０名（女性３１名、男性１９名）を選んだが、彼らは次のようなキャリアを持っており、いずれも論理的思考が可能と考えられる者である。
【００９６】
文系大学生 ３名（女性 ２名、男性 １名）
理系大学生 ３名（女性 １名、男性 ２名）
工学を学ぶ大学院生 ３名（女性 ０名、男性 ３名）
２０代会社員 ６名（女性 ４名、男性 ２名）
３０代会社員 ７名（女性 ５名、男性 ２名）
４０代会社員、教職 ５名（女性 ４名、男性 １名）
５０代会社員、教職 ２２名（女性１５名、男性 ７名）
７０代会社員 １名（女性 ０名、男性 １名）
【００９７】
実験結果として得られた形式知による判定誤差行列Ｆは、次の通りである（ｎ＝１〜１２０、ｍ＝１〜４６）。
【数５】
【００９８】
ここでもプロの場合と同様に一致率とＲＥを算出した。判定結果を表７に示す。
【表７】
【００９９】
プロ、ノンプロともχ２乗適合検定により正規分布と見做すことができた。
優秀なプロ知識の形式知化されたアルゴリズムを用いたノンプロの判定の平均値（ＲＥ＝０．７４、ＣＲ＝０．７２）は、プロの判定の平均値（ＲＥ＝０．９、ＣＲ＝０．４４）より優れている。また、プロの判定と形式知化されたアルゴリズムによるノンプロ判定とのＲＥ値を比較すると、優れたプロ（上位１０％）には及ばないが、図１のフローに基づいてノンプロが判定した場合、経験則の暗黙知だけに依存していると考えられるプロ全体より精度の高い判定をしていることが明らかである。一方、プロとノンプロとも一致率とＲＥの間には各々−０．８２８、−０．８４１という高い負の相関がみられた。すなわち、一致率の高い判定者はプロ、ノンプロいずれでも危険率の高いＥij（±２）の判定は少ないといえる。
【０１００】
次に疑陽性の判定の中で唯一確立された病変であるディスプラシア症例７例についてのプロ、ノンプロでの比較をウエルチのｔ検定で行い、有意（ｐ＜０．０５）にプロの一致率が高いことが確認された。
【０１０１】
また、次に、本実施形態における腫瘍細胞の同定方法の的中率について検証した。検証においては、総数２３５例（陽性細胞９８例、疑陽性細胞４７例、陰性細胞９０例）の被検体画像を元に判定を行った。判定結果を表８に示す。
【０１０２】
【表８】
【０１０３】
表８から分かるように、本実施形態における腫瘍細胞の同定装置１により実行される同定方法によれば、陽性細胞９８例のうち陽性と同定できたものは９２例、疑陽性細胞４７例のうち疑陽性と同定できたものは１６例であり、それぞれ９４％、３４％の的中率であった。一方、陰性細胞９０例については第８ステップまでで１００％陰性と同定できた。また、陽性細胞および疑陽性細胞の合計１４５例のうち陽性または疑陽性と同定できたものは１３０例であり、９０％の的中率であった。疑陽性、陽性と判定されたものは確診するための再検査を必要とする。その後に治療方針が決定される。この点から鑑みれば、要再検率は９０％となり、陽性または疑陽性が疑われる細胞は９０％の確率で判定できたこととなる。
【産業上の利用可能性】
【０１０４】
本発明は、被検体画像から腫瘍細胞を同定する方法および装置として有用である。
【符号の説明】
【０１０５】
１ 同定装置
２ 顕微鏡カメラ
３ コンピュータ
４ キーボード
５ ポインティングデバイス
６ ディスプレイ
１０ 撮像手段
１１ 第１判定手段
１２ 第２判定手段
１３ 第３判定手段
１４ 第４判定手段
１５ 第５判定手段
１６ 第６判定手段
１７ 第７判定手段
１８ 第８判定手段
１９ 出力手段
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．５以上であるか判定する第１ステップと、
この第１ステップにおいて前記面積比が０．５以上であると判定されたものについて、前記被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップ、または、前記被検体画像から前記被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第２ステップおよび第３ステップと、
前記第１ステップにおいて前記面積比が０．５以上でなかったもの、または、前記第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第４ステップと
を含む腫瘍細胞の同定方法。
【請求項２】
前記第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第５ステップを含む請求項１記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項３】
前記第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第６ステップを含む請求項２記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項４】
前記第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞に核偏在がないものを陰性であると判定するステップ、または、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第７ステップおよび第８ステップを含む請求項３記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項５】
前記第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞にクロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定するステップ、または、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第９ステップおよび第１０ステップを含む請求項４記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項６】
前記第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞に明瞭な核小体があるものを陽性、明瞭な核小体がないものを疑陽性であると判定する第１１ステップを含む請求項５記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項７】
前記第２ステップは、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップであり、
前記第３ステップは、前記被検体画像から前記被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップである
請求項１から６のいずれかに記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項８】
前記被検体画像は、尿沈渣画像である請求項１から７のいずれかに記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項９】
被検体画像を撮像する撮像手段と、
前記撮像手段により撮像された被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比を算出し、算出された面積比が０．５以上であるか判定する第１判定手段と、
この第１判定手段において前記面積比が０．５以上であると判定されたものについて、前記被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．８以上であるものを陽性であると判定する手段、または、前記被検体画像から前記被検細胞のクロマチン染色濃度と白血球のクロマチン染色濃度とを算出し、算出された被検細胞のクロマチン染色濃度が算出された白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第２判定手段と、
前記第１判定手段において前記面積比が０．５以上でなかったもの、または、前記第２判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞質辺縁の外側への核の突出状態を検出し、前記被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第３判定手段と、
前記第２判定手段および第３判定手段による判定結果を出力する出力手段と
を含む腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１０】
前記第３判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の核形状態を検出し、前記被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第４判定手段を含む請求項９記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１１】
前記第４判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から細胞径を検出し、前記細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第５判定手段を含む請求項１０記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１２】
前記第５判定手段において疑陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から核の配置状態を検出し、核偏在がないものを陰性であると判定する手段、または、前記被検体画像から細胞の結合性を検出し、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第６判定手段を含む請求項１１記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１３】
前記第６判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像からクロマチンの分布状態を検出し、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する手段、または、前記被検体画像から核膜におけるクロマチン付着状態を検出し、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第７判定手段を含む請求項１２記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１４】
前記第７判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から核小体を検出し、明瞭な核小体があるものを陽性、ないものを疑陽性であると判定する第８判定手段を含む請求項１３記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１】
被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．５以上であるか判定する第１ステップと、
この第１ステップにおいて前記面積比が０．５以上であると判定されたものについて、前記被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップ、または、前記被検体画像から前記被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第２ステップおよび第３ステップと、
前記第１ステップにおいて前記面積比が０．５以上でなかったもの、または、前記第２ステップおよび第３ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第４ステップと
を含む腫瘍細胞の同定方法。
【請求項２】
前記第４ステップにおいて陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第５ステップを含む請求項１記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項３】
前記第５ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第６ステップを含む請求項２記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項４】
前記第６ステップにおいて疑陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞に核偏在がないものを陰性であると判定するステップ、または、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第７ステップおよび第８ステップを含む請求項３記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項５】
前記第７ステップおよび第８ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞にクロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定するステップ、または、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定するステップのいずれか一方のステップにより判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方のステップにより判定を行う第９ステップおよび第１０ステップを含む請求項４記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項６】
前記第９ステップおよび第１０ステップにおいて陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞に明瞭な核小体があるものを陽性、明瞭な核小体がないものを疑陽性であると判定する第１１ステップを含む請求項５記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項７】
前記第２ステップは、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．８以上であるものを陽性であると判定するステップであり、
前記第３ステップは、前記被検体画像から前記被検細胞のクロマチン染色濃度が白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定するステップである
請求項１から６のいずれかに記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項８】
前記被検体画像は、尿沈渣画像である請求項１から７のいずれかに記載の腫瘍細胞の同定方法。
【請求項９】
被検体画像を撮像する撮像手段と、
前記撮像手段により撮像された被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比を算出し、算出された面積比が０．５以上であるか判定する第１判定手段と、
この第１判定手段において前記面積比が０．５以上であると判定されたものについて、前記被検体画像から被検細胞の細胞質に対する核の面積比が０．８以上であるものを陽性であると判定する手段、または、前記被検体画像から前記被検細胞のクロマチン染色濃度と白血球のクロマチン染色濃度とを算出し、算出された被検細胞のクロマチン染色濃度が算出された白血球のクロマチン染色濃度よりも高いものを陽性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陽性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第２判定手段と、
前記第１判定手段において前記面積比が０．５以上でなかったもの、または、前記第２判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の細胞質辺縁の外側への核の突出状態を検出し、前記被検細胞の細胞質辺縁の外側に核の少なくとも一部が突出するものを陽性であると判定する第３判定手段と、
前記第２判定手段および第３判定手段による判定結果を出力する出力手段と
を含む腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１０】
前記第３判定手段において陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から前記被検細胞の核形状態を検出し、前記被検細胞に核形不整がないものを陰性であると判定する第４判定手段を含む請求項９記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１１】
前記第４判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から細胞径を検出し、前記細胞径が２０〜３０μｍのものを疑陽性であると判定する第５判定手段を含む請求項１０記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１２】
前記第５判定手段において疑陽性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から核の配置状態を検出し、核偏在がないものを陰性であると判定する手段、または、前記被検体画像から細胞の結合性を検出し、細胞の結合性異常がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第６判定手段を含む請求項１１記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１３】
前記第６判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像からクロマチンの分布状態を検出し、クロマチンの不規則分布がないものを陰性であると判定する手段、または、前記被検体画像から核膜におけるクロマチン付着状態を検出し、核縁不規則肥厚がないものを陰性であると判定する手段のいずれか一方の手段により判定を行い、陰性であると判定されなかったものについて他方の手段により判定を行う第７判定手段を含む請求項１２記載の腫瘍細胞の同定装置。
【請求項１４】
前記第７判定手段において陰性であると判定されなかったものについて、前記被検体画像から核小体を検出し、明瞭な核小体があるものを陽性、ないものを疑陽性であると判定する第８判定手段を含む請求項１３記載の腫瘍細胞の同定装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２０１１−７２２６７（Ｐ２０１１−７２２６７Ａ）
【公開日】平成２３年４月１４日（２０１１．４．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２２８３５２（Ｐ２００９−２２８３５２）
【出願日】平成２１年９月３０日（２００９．９．３０）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り 平成２１年６月８日 Ｔｈｅ Ｌｅａｄｅｒｓｈｉｐ Ａｌｌｉａｎｃｅ Ｉｎｃ．がインターネットアドレス「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｔｌａｉｎｃ．ｃｏｍ／ｊｋｍｐｖ１０ｎ２０９．ｈｔｍ」及び「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｔｌａｉｎｃ．ｃｏｍ／ａｒｔｉｃｌ１９１．ｈｔｍ」にて掲載した「Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．１０，Ｎｏ．２，Ｊｕｎｅ ２００９」の目次が掲載されたページ及び「Ｔｒａｎｓｌａｔｉｎｇ Ｔａｃｉｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ Ｉｎｔｏ Ｅｘｐｌｉｃｉｔ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ」において発表
【出願人】（５０６０８７７０５）学校法人産業医科大学 (24)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年４月１４日（２０１１．４．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月３０日（２００９．９．３０）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り 平成２１年６月８日 Ｔｈｅ Ｌｅａｄｅｒｓｈｉｐ Ａｌｌｉａｎｃｅ Ｉｎｃ．がインターネットアドレス「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｔｌａｉｎｃ．ｃｏｍ／ｊｋｍｐｖ１０ｎ２０９．ｈｔｍ」及び「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｔｌａｉｎｃ．ｃｏｍ／ａｒｔｉｃｌ１９１．ｈｔｍ」にて掲載した「Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．１０，Ｎｏ．２，Ｊｕｎｅ ２００９」の目次が掲載されたページ及び「Ｔｒａｎｓｌａｔｉｎｇ Ｔａｃｉｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ Ｉｎｔｏ Ｅｘｐｌｉｃｉｔ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ」において発表
【出願人】（５０６０８７７０５）学校法人産業医科大学 (24)
【Ｆターム（参考）】
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