血液分析装置
【課題】 蛍光標識抗体を用いることなく、リンパ芽球を検出することが可能な血液分析装置を提供する。
【解決手段】
血液分析装置１は、試料調製部２２において、溶血剤と蛍光染色色素とを含有する第１試薬と血液検体とを混合してＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を調製し、この測定試料を検出部２３によって測定し、検出部２３から出力される測定データを情報処理ユニット５において処理することにより、リンパ芽球を含む血球群を検出し、この血球群に含まれる血球を計数する。情報処理ユニット２は、この計数結果に基づいてリンパ芽球の有無を判断し、リンパ芽球の有無の情報を含む分析結果画面を出力する。
【解決手段】
血液分析装置１は、試料調製部２２において、溶血剤と蛍光染色色素とを含有する第１試薬と血液検体とを混合してＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を調製し、この測定試料を検出部２３によって測定し、検出部２３から出力される測定データを情報処理ユニット５において処理することにより、リンパ芽球を含む血球群を検出し、この血球群に含まれる血球を計数する。情報処理ユニット２は、この計数結果に基づいてリンパ芽球の有無を判断し、リンパ芽球の有無の情報を含む分析結果画面を出力する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液検体を光学的に測定し、血液検体に含まれる細胞群を複数に分類する血液分析装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
末梢血液の血漿中には、赤血球、血小板、及び白血球が浮遊している。これらの細胞を検査する血液検査によれば、多くの臨床情報を提供することができるため、多数の検体が検査されている。血液検査には血球計数装置が用いられており、これにより血液中の赤血球数、血小板数、白血球数、ヘモグロビン濃度等が自動的に測定される。
【０００３】
正常な末梢血液中にはリンパ球、単球、好塩基球、好酸球、及び好中球の５種類の白血球が存在し、多くの血球計数装置は血液検体中の白血球をかかる５つの種類に分類する機能を有している。一方、造血器腫瘍等の疾患においては、正常な血液中には存在しない細胞が出現する。例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）では、末梢血液中に多数のリンパ芽球が出現する。このため、末梢血液中のリンパ芽球の検出は、急性リンパ性白血病の診断を行う上で極めて有用である。
【０００４】
特許文献１には、１）血液試料中の赤血球を測定の障害とならない程度に溶解し、正常又は異常細胞を染色に好適な状態にする溶血剤と混合する工程と、２）前記１）で調製した試料と、特定の構造式で表される細胞中のＲＮＡに特異的に結合し蛍光強度を増加する色素と混合することにより血液試料中の有核細胞を蛍光染色する工程と、３）前記２）で調製した測定試料をフローサイトメータで測定し、散乱光及び蛍光を測定する工程、４）前記３）で測定した散乱光と蛍光の強度さを用いて正常な白血球を少なくとも５つに分類計数する工程と、からなる白血球分類方法が開示されている。この特許文献１には、異型リンパ球を正常白血球と明確に分離し、分類計数することが開示されている。
【０００５】
特許文献２には、所定の細胞マーカーに対する抗体を使用して、骨髄球系細胞及びＢリンパ球系細胞の文化成熟段階を分類する血液細胞の分類方法が開示されている。かかる特許文献２には、側方散乱光と、蛍光標識ＣＤ４５抗体とを用いて、リンパ芽球を分類することが開示されている。
【０００６】
特許文献３には、細胞核、特にＤＮＡに対して特異性を有する色素あるいはＲＮＡに特異性を有する色素により細胞を染色し、このようにして調製された試料をフローサイトメータに導入し、試料中の染色された細胞のそれぞれについて、散乱光と蛍光を測定し、散乱光ピークの強度差と散乱光幅の差を用いて、血小板凝集及び同時通過細胞と白血球とを分類し、分類された成分の散乱光の強度差と蛍光の強度差を用いて、成熟白血球、ＤＮＡ量異常白血球及び幼若白血球に分類計数する白血球の分類計数方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−３１９０１０号公報
【特許文献２】特開２００７−２６３９５８号公報
【特許文献３】国際公開第ＷＯ２００４／００１４０８号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、上記特許文献１に開示されている白血球分類方法にあっては、異型リンパ球を正常白血球と分類し、計数することはできるが、リンパ芽球を検出することはできない。
【０００９】
また、上記特許文献２に開示されている血球細胞の分類方法にあっては、高価な蛍光標識抗体を測定に使用する必要があり、測定コストが嵩むという問題がある。
【００１０】
また、上記特許文献３に開示されている白血球の分類計数方法にあっては、リンパ芽球を含むＤＮＡ量異常白血球を分類計数することが可能であるが、ＤＮＡ量異常白血球にはリンパ芽球以外の細胞も含まれるため、リンパ芽球が存在するか否かを正確に検出することはできない。
【００１１】
本発明は斯かる事情に鑑みてなされたものであり、その主たる目的は、高価な蛍光標識抗体を用いることなく、リンパ芽球を検出することが可能な血液分析装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上述した課題を解決するために、本発明の一の態様の血液分析装置は、血液検体を供給する血液検体供給部と、前記血液検体供給部から供給された血液検体と、核酸を染色する蛍光色素とを混合して測定試料を調製する試料調製部と、前記測定試料に光を照射する光源と、前記光が照射された測定試料から発せられる蛍光を受光する光学検出部と、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群を検出する情報処理手段と、前記情報処理手段による検出結果に基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現に関する情報を出力する出力手段と、を備える。
【００１３】
この態様においては、前記血液検体供給部が、血液検体から分割された第１血液検体及び第２血液検体を供給するように構成されており、前記試料調製部が、前記第１血液検体と、第１溶血剤及び前記蛍光色素である第１蛍光色素とを混合して第１測定試料を調製し、前記第２血液検体と、前記第１溶血剤とは異なる第２溶血剤及び核酸を染色する第２蛍光色素とを混合して第２測定試料を調製するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第１測定試料に光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記蛍光に応じた第１信号を出力し、前記光源が前記第２測定試料に光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記散乱光及び蛍光に応じた第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記光学検出部が出力した前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む前記細胞群を検出し、前記光学検出部が出力した前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を検出するように構成されており、前記出力手段が、前記情報処理手段による前記第１信号に基づく前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に係る検出結果並びに前記前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１４】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１５】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数が有核赤血球の数よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１６】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数が所定値よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１７】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記リンパ芽球の計数結果を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１８】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数を、前記リンパ芽球の計数結果として出力するように構成されていることが好ましい。
【００１９】
また、上記態様においては、前記血液分析装置が、前記血液検体に含まれる有核赤血球に係る検出結果に関する情報を入力するための入力手段をさらに備え、前記出力手段が、前記情報処理手段による検出結果及び前記入力手段に入力された有核赤血球の出現に関する情報に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００２０】
また、上記態様においては、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む第１細胞群と、前記測定試料中に含まれる骨髄芽球及び幼若顆粒球を含む第２細胞群とを検出するように構成されており、前記出力手段が、前記血液検体における骨髄芽球の出現に関する情報、及び前記血液検体における幼若顆粒球の出現に関する情報をさらに出力するように構成されていることが好ましい。
【００２１】
また、上記態様においては、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出するように構成されており、前記出力手段が、成熟白血球の出現に関する情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００２２】
また、上記態様においては、前記光学検出部が、さらに前記光が照射された測定試料から発せられる散乱光を受光するように構成されており、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第２細胞群を、骨髄芽球を含む細胞群と、幼若顆粒球を含む細胞群とにさらに検出するように構成されていることが好ましい。
【００２３】
また、上記態様においては、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出し、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第３細胞群を、少なくとも３種類の成熟白血球に分類するように構成されていることが好ましい。
【００２４】
また、上記態様においては、前記光学検出部が、前記散乱光として、前記光が照射された測定試料から発せられる前方散乱光又は側方散乱光を受光するように構成されていることが好ましい。
【発明の効果】
【００２５】
本発明に係る血液分析装置によれば、蛍光標識抗体を用いることなく、リンパ芽球を検出することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】実施の形態に係る血液分析装置の外観を示す斜視図。
【図２】検体容器の外観を示す斜視図。
【図３】サンプルラックの外観を示す斜視図。
【図４】実施の形態に係る測定ユニットの構成を示すブロック図。
【図５】光学検出器の概要構成を示す模式図。
【図６】実施の形態に係る検体搬送ユニットの構成を示す平面図。
【図７】検体搬送ユニットの第１ベルトの構成を示す正面図。
【図８】検体搬送ユニットの第２ベルトの構成を示す正面図。
【図９】実施の形態に係る情報処理ユニットの構成を示すブロック図。
【図１０】実施の形態に係る血液分析装置の第１測定工程での動作手順を示すフローチャート。
【図１１】実施の形態に係る血液分析装置の第２測定工程での動作手順を示すフローチャート。
【図１２】実施の形態に係る血液分析装置のデータ処理工程での処理手順を示すフローチャート。
【図１３Ａ】第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１３Ｂ】第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１４】第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１５Ａ】実施の形態に係る血液分析装置の分析結果画面の一例を示す図。
【図１５Ｂ】実施の形態に係る血液分析装置の分析結果画面の他の例を示す図。
【図１５Ｃ】実施の形態に係る血液分析装置の分析結果画面のさらに他の例を示す図。
【図１６Ａ】リンパ芽球を含むが有核赤血球を含まない血液検体の第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１６Ｂ】リンパ芽球を含むが有核赤血球を含まない血液検体の第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１７】リンパ芽球を含むが有核赤血球を含まない血液検体の第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１８Ａ】有核赤血球を含むがリンパ芽球を含まない血液検体の第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１８Ｂ】有核赤血球を含むがリンパ芽球を含まない血液検体の第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１９】有核赤血球を含むがリンパ芽球を含まない血液検体の第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、本発明の好ましい実施の形態を、図面を参照しながら説明する。
【００２８】
本実施の形態は、血液検体と、核酸を染色する蛍光色素とを混合して測定試料を調製し、前記測定試料を光学式フローサイトメータにより測定することにより、前記血液検体中におけるリンパ芽球を検出する血液分析装置である。
【００２９】
［血液分析装置の構成］
図１は、本実施の形態に係る血液分析装置の外観を示す斜視図である。本実施の形態に係る血液分析装置１は、血液検体に含まれる血球を白血球、赤血球、血小板等を検出し、各血球を計数する多項目血球分析装置である。図１に示すように、血液分析装置１は、測定ユニット２と、測定ユニット２の前面側に配置された検体搬送ユニット４と、測定ユニット２及び検体搬送ユニット４を制御可能な情報処理ユニット５とを備えている。
【００３０】
図２は、検体を収容する検体容器の外観を示す斜視図であり、図３は、複数の検体容器を保持するサンプルラックの外観を示す斜視図である。図２に示すように、検体容器Ｔは、管状をなしており、上端が開口している。内部には患者から採取された血液検体が収容され、上端の開口は蓋部ＣＰにより密封されている。検体容器Ｔは、透光性を有するガラス又は合成樹脂により構成されており、内部の血液検体が視認可能となっている。また、検体容器Ｔの側面には、バーコードラベルＢＬ１が貼付されている。このバーコードラベルＢＬ１には、検体ＩＤを示すバーコードが印刷されている。サンプルラックＬは、１０本の検体容器Ｔを並べて保持することが可能である。サンプルラックＬでは、各検体容器Ｔが垂直状態（立位状態）で保持される。また、サンプルラックＬの側面には、バーコードラベルＢＬ２が貼付されている。このバーコードラベルＢＬ２には、ラックＩＤを示すバーコードが印刷されている。
【００３１】
＜測定ユニットの構成＞
次に、測定ユニットの構成について説明する。図４は、測定ユニットの構成を示すブロック図である。図４に示すように、測定ユニット２は、検体である血液を検体容器（採血管）Ｔから吸引する検体吸引部２１と、検体吸引部２１により吸引した血液から測定に用いられる測定試料を調製する試料調製部２２と、試料調製部２２により調製された測定試料から血球を検出する検出部２３とを有している。また、測定ユニット２は、検体搬送ユニット４のラック搬送部４３によって搬送されたサンプルラックＬに収容された検体容器Ｔを測定ユニット２の内部に取り込むための取込口（図１参照）と、サンプルラックＬから検体容器Ｔを測定ユニット２の内部に取り込み、検体吸引部２１による吸引位置まで検体容器Ｔを搬送する検体容器搬送部２５とをさらに有している。
【００３２】
図４に示すように、検体吸引部２１は、吸引管２１１を有している。また、検体吸引部２１はシリンジポンプ（図示せず）を備えている。また、吸引管２１１は、鉛直方向に移動可能であり、下方に移動されることにより、吸引位置まで搬送された検体容器Ｔの蓋部ＣＰを前記吸引管が貫通し、内部の血液を吸引するように構成されている。
【００３３】
試料調製部２２は、第１混合チャンバＭＣ１及び第２混合チャンバＭＣ２を備えている。吸引管２１１は、シリンジポンプ（図示せず）によって検体容器Ｔから所定量の全血検体を吸引し、吸引された検体は、第１混合チャンバＭＣ１と第２混合チャンバＭＣ２の位置へ移送され、前記シリンジポンプによって、それぞれのチャンバＭＣ１，ＭＣ２へ所定量の全血検体を分配供給する。また、試料調製部２２は、第１混合チャンバＭＣ１及び第２混合チャンバＭＣ２を加温するためのヒータＨを備えている。
【００３４】
試料調製部２２は、第１試薬を収容する試薬容器２２１、第２試薬を収容する試薬容器２２２ａ、第３試薬を収容する試薬容器２２２ｂ、及びシース液（希釈液）を収容する試薬容器２２３にチューブを介して接続されている。また、試料調製部２２は、図示しないコンプレッサに接続されており、当該コンプレッサにより発生される圧力により試薬容器２２１，２２２ａ，２２２ｂ，２２３からそれぞれの試薬を分取することが可能となっている。
【００３５】
第１試薬は、リンパ芽球と有核赤血球とからなる血球群（以下、「リンパ芽球／有核赤血球群」という）を検出するための試薬である。かかる第１試薬には、溶血剤及び蛍光色素が含有されている。第１試薬に含まれる溶血剤としては、白血球の測定に使用される公知の溶血剤が使用できる。この溶血剤を使用することで、赤血球及び成熟白血球の細胞膜に損傷を与え、損傷した血球を収縮できる。より具体的には、溶血剤には、赤血球及び成熟白血球の細胞膜に損傷を与える界面活性剤と、損傷した血球を収縮させる可溶化剤が含まれている。
【００３６】
ここで、溶血剤に含まれる界面活性剤としては、非イオン性界面活性剤が好ましい。非イオン性界面活性剤としては、ポリオキシエチレン系ノニオン界面活性剤が好ましい。具体的なポリオキシエチレン系ノニオン界面活性剤としては、以下の構造式（Ｉ）
Ｒ１−Ｒ２−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｈ
（Ｉ）
（式中、Ｒ１は炭素数９〜２５のアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基であり、Ｒ２は−Ｏ−、−ＣＯＯ−又は
【化１】
であり、ｎは１０〜４０の整数である）
で示されるものが挙げられる。
【００３７】
上記の構造式（Ｉ）で表される具体的な界面活性剤としては、ポリオキシエチレン（１５）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（１５）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（１６）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテルなど挙げられ、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテルが好ましい。なお、溶血剤は、界面活性剤を１種類又は２種類以上含むことができる。
【００３８】
第１試薬に含まれる界面活性剤の濃度は、界面活性剤の種類又は溶血剤の浸透圧等に応じて適宜選択できる。例えば、界面活性剤がポリオキシエチレンオレイルエーテルである場合、第１試薬に含まれる界面活性剤の濃度は、０．５〜５０．０ｇ／Ｌであり、好ましくは１．０〜２０．０ｇ／Ｌである。
【００３９】
溶血剤に含まれる可溶化剤としては、サルコシン誘導体、コール酸誘導体、メチルグルカンアミド、ｎ−オクチルβ−グルコシド、シュークロースモノカプレート、Ｎ−ホルミルメチルロイシルアラニンなどが挙げられ、特にサルコシン誘導体が好ましい。なお、溶血剤は、可溶化剤を１種類又は２種類以上含むことができる。
【００４０】
サルコシン誘導体としては、以下の構造式（ＩＩ）
【化２】
（式中、Ｒ１はＣ１０−２２のアルキル基であり、ｎは１〜５である。）
で示される化合物及びその塩が挙げられる。具体的なサルコシン誘導体としては、Ｎ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウム、ラウロイルメチルβ−アラニンナトリウム、ラウロイルサルコシンなどが挙げられ、特にＮ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウムが好ましい。
【００４１】
コール酸誘導体としては、以下の構造式（ＩＩＩ）
【化３】
（式中、Ｒ１は水素原子又は水酸基である。）
で示される化合物及びその塩が挙げられる。具体的なコール酸誘導体としては、ＣＨＡＰＳ（３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート）、ＣＨＡＰＳＯ（［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート）などが挙げられる。
【００４２】
メチルグルカンアミドとしては、以下の構造式（ＩＶ）
【化４】
（式中、ｎは５〜７である。）
で示される化合物が挙げられる。具体的なメチルグルカンアミドとしては、ＭＥＧＡ８（オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド）、ＭＥＧＡ９（ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド）、ＭＥＧＡ１０（デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド）などが挙げられる。
【００４３】
第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、用いる可溶化剤の種類に応じて適宜選択できる。例えば、可溶化剤としてサルコシン誘導体を用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、０．０５〜３．０ｇ／Ｌであり、好ましくは０．１〜１．０ｇ／Ｌである。コール酸誘導体を用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、０．１〜１０．０ｇ／Ｌであり、好ましくは０．２〜２．０ｇ／Ｌである。メチルグルカンアミドを用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、１．０〜８．０ｇ／Ｌであり、好ましくは２．０〜６．０ｇ／Ｌである。ｎ−オクチルβ−グルコシド、シュークロースモノカプレート、Ｎ−ホルミルメチルロイシルアラニンを用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、０．０１〜５０．０ｇ／Ｌであり、好ましくは０．０５〜３０．０ｇ／Ｌである。
【００４４】
第１試薬に含まれる核酸を染色できる蛍光色素としては、核酸を蛍光染色できるものであれば特に限定されない。このような色素を用いることにより、核酸を持たない赤血球はほとんど染色されず、核酸を有するリンパ芽球及び有核赤血球等の有核の血球は染色される。なお、核酸を染色できる蛍光色素は、光源から照射される光によって適宜選択することができる。具体的な核酸を染色できる蛍光色素としては、例えば、プロピジウムアイオダイド、エチジウムブロマイド、エチジウム−アクリジンヘテロダイマー、エチジウムジアジド、エチジウムホモダイマー−１、エチジウムホモダイマー−２、エチジウムモノアジド、トリメチレンビス［［３‐［［４‐［［（３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム）‐２‐イル］メチレン］‐１，４‐ジヒドロキノリン］‐１‐イル］プロピル］ジメチルアミニウム］・テトラヨージド（ＴＯＴＯ−１）、４‐［（３‐メチルベンゾチアゾール‐２（３Ｈ）‐イリデン）メチル］‐１‐［３‐（トリメチルアミニオ）プロピル］キノリニウム・ジヨージド（ＴＯ−ＰＲＯ−１）、Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'‐テトラメチル‐Ｎ，Ｎ'‐ビス［３‐［４‐［３‐［（３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム）‐２‐イル］‐２‐プロペニリデン］‐１，４‐ジヒドロキノリン‐１‐イル］プロピル］‐１，３‐プロパンジアミニウム・テトラヨージド（ＴＯＴＯ−３）、又は２‐［３‐［［１‐［３‐（トリメチルアミニオ）プロピル］‐１，４‐ジヒドロキノリン］‐４‐イリデン］‐１‐プロペニル］‐３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム・ジヨージド（ＴＯ−ＰＲＯ−３）、及び以下の構造式（Ｖ）〜（ＸＩＩＩ）で示される蛍光色素が挙げられる。
【００４５】
＜構造式（Ｖ）＞
【化５】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、低級アルキル基であり；ｎは１又は２であり；Ｘ−はアニオンであり；Ｚは硫黄原子、酸素原子、又は低級アルキル基で置換された炭素原子である）。
【００４６】
構造式（Ｖ）中、低級アルキル基とは炭素数１〜６の直鎖又は分枝のアルキル基である。具体的な低級アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられ、メチル基、エチル基が好ましい。また、Ｚとしては、硫黄原子が好ましい。Ｘ−におけるアニオンは、ハロゲンイオン（フッ素、塩素、臭素又はヨウ素イオン）、ハロゲン化ホウ素イオン（ＢＦ４−、ＢＣｌ４−、ＢＢｒ４−など）、リン化合物イオン、ハロゲン酸素酸イオン、フルオロ硫酸イオン、メチル硫酸イオン、芳香環ハロゲン或いはハロゲンをもつアルキル基を置換基として有するテトラフェニルホウ素化合物イオンなどが挙げられ、ヨウ素イオンが好ましい。
【００４７】
構造式（Ｖ）で示されるもののうち、特に好ましい核酸を染色できる蛍光色素は、次の構造式で示されるＮＫ−３２１である。
【化６】
【００４８】
＜構造式（ＶＩ）＞
【化７】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、低級アルキル基であり；ｎは１又は２であり；Ｘ−はアニオンである）。
【００４９】
構造式（ＩＩ）における低級アルキル基、並びにＸ−のアニオンは、構造式（Ｉ）と同様である。
【００５０】
構造式（ＶＩ）で示されるもののうち、特に好ましい核酸を染色できる蛍光色素は、次の構造式により示される。
【化８】
【００５１】
＜構造式（ＶＩＩ）＞
【化９】
（式中、Ｒ１は水素原子又は低級アルキル基であり；Ｒ２及びＲ３は水素原子、低級アルキル基又は低級アルコキシ基であり；Ｒ４は水素原子、アシル基又は低級アルキル基であり；Ｒ５は水素原子又は置換されていてもよい低級アルキル基であり；Ｚは硫黄原子、酸素原子、又は低級アルキル基で置換された炭素原子であり；ｎは１又は２であり；Ｘ−はアニオンである）。
【００５２】
構造式（ＶＩＩ）における低級アルキル基、並びにＸ−のアニオンは、構造式（Ｖ）と同様である。低級アルコキシ基は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示す。具体的な低級アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基等が挙げられ、特にメトキシ基、エトキシ基が好ましい。アシル基としては、脂肪族カルボン酸から誘導されたアシル基が好ましい。具体的なアシル基としては、アセチル基、プロピオニル基等が挙げられ、特にアセチル基が好ましい。置換されていてもよい低級アルキル基の置換基としては、水酸基やハロゲン原子（フッ素、塩素、臭素又はヨウ素）が挙げられる。置換されていてもよい低級アルキル基は、１〜３個の置換基で置換されることができる。置換されていてもよい低級アルキル基としては、特に１個の水酸基で置換された低級アルキル基が好ましい。なお、Ｚとしては硫黄原子が好ましく、Ｘ−は、臭素イオン又はＢＦ４−が好ましい。
【００５３】
構造式（ＶＩＩ）で示されるもののうち、特に好ましい核酸を染色できる蛍光色素は、以下の３つの構造式により示される。
【化１０】
【００５４】
【化１１】
【００５５】
【化１２】
【００５６】
＜構造式（ＶＩＩＩ）＞
【化１３】
（式中、Ｘ１及びＸ２は、独立してＣｌ又はＩである）
【００５７】
＜構造式（ＩＸ）＞
【化１４】
【００５８】
＜構造式（Ｘ）＞（ＮＫ−１５７０）
【化１５】
【００５９】
＜構造式（ＸＩ）＞（ＮＫ−１０４９）
【化１６】
【００６０】
＜構造式（ＸＩＩ）＞（ＮＫ−９８）
【化１７】
【００６１】
＜構造式（ＸＩＩＩ）＞（ＮＫ−１４１）。
【化１８】
【００６２】
上記の核酸を染色できる蛍光色素のうち、第１試薬に含まれる特に好ましい蛍光色素は、次の構造式で示されるＮＫ−３２１である。
【化１９】
【００６３】
上記の核酸を染色できる蛍光色素の第１試薬中の濃度は、１０〜５００ｍｇ／Ｌが好ましく、特に３０〜１００ｍｇ／Ｌが好ましい。なお、第１試薬は、核酸を染色できる蛍光色素を１種類又は２種類以上含むことができる。
【００６４】
第１試薬のｐＨは、５．０〜９．０が好ましく、より好ましくは６．５〜７．５、さらに好ましくは６．８〜７．３である。第１試薬のｐＨは、緩衝剤やｐＨ調整剤で調整できる。緩衝剤としては、例えばＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳ（3-morpholinopropanesulfonic acid）又はＭＯＰＳＯ（2-Hydroxy-3-morpholinopropanesulfonic
acid）などのグッド緩衝剤、リン酸緩衝剤などが挙げられる。ｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウムや塩酸などが挙げられる。
【００６５】
第１試薬の浸透圧は、上述の界面活性剤の種類や第１試薬中の濃度に応じて、適宜設定することができる。具体的な第１試薬の浸透圧としては、１０〜６００ｍＯｓｍ／ｋｇが挙げられる。また、第１試薬の浸透圧は、糖類、アミノ酸、塩化ナトリウムなどを第１試薬に添加することにより調整してもよい。具体的な糖類としては、単糖類、多糖類、糖アルコールなどが挙げられる。単糖類としては、グルコース、フルクトースが好ましい。多糖類としては、アラビノースが好ましい。糖アルコールとしては、キシリトール、ソルビトール、マンニトール、リビトールが好ましい。ここで、第１試薬に添加する糖類としては、糖アルコールが好ましく、特にキシリトールが好ましい。キシリトールを第１試薬に添加する場合、キシリトールの第１試薬中の濃度は、１．０〜７５．０ｇ／Ｌ、特に２０．０〜５０．０ｇ／Ｌが好ましい。具体的なアミノ酸としては、バリン、プロリン、グリシン、アラニンなどが挙げられ、特にグリシン、アラニンが好ましい。グリシンを第１試薬に添加する場合、グリシンの第１試薬中の濃度は、１．０〜５０．０ｇ／Ｌ、特に１０．０〜３０．０ｇ／Ｌが好ましい。
【００６６】
また、第１試薬の電気伝導度は、０．０１〜３ｍＳ／ｃｍが好ましく、特に０．１〜２ｍＳ／ｃｍが好ましい。さらに第１試薬には、キレート剤や防腐剤などを添加することもできる。キレート剤としては、ＥＤＴＡ−２Ｋ、ＥＤＴＡ−３Ｎａなどが挙げられる。防腐剤としては、Ｐｒｏｘｅｌ ＧＸＬ（Avecia社製）、マテリアルＴＫＭ−Ａ（株式会社エーピーアイ コーポレーション）などが挙げられる。
【００６７】
第２試薬は、有核赤血球（ＮＲＢＣ）測定用の溶血剤である。このＮＲＢＣ測定用の溶血剤としては、例えばシスメックス（株）製ストマトライザーＮＲ溶血剤が挙げられる。また、第３試薬は、ＮＲＢＣ測定用の染色液である。このＮＲＢＣ測定用の染色液としては、例えばシスメックス（株）製ストマトライザーＮＲ染色液が挙げられる。第４試薬は、後述するシースフローセルへと供給されるシース液である。かかるシース液は、希釈液としても使用される。このシース液としては、例えばシスメックス（株）製セルパック（II）が挙げられる。
【００６８】
検出部２３は、ＷＢＣ測定（白血球計数）及びＤＩＦＦ測定（白血球分類）を行うことができる光学検出器Ｄを有している。この光学検出器Ｄは、ＷＢＣ（成熟白血球）、ＮＲＢＣ（有核赤血球）、及びリンパ芽球（Ｌ−Ｂｌａｓｔ）の検出を、半導体レーザを使用したフローサイトメトリー法により行うことが可能であるように構成されている。また、この検出部２３を使用することにより、白血球を、ＮＥＵＴ（好中球）、ＬＹＭＰＨ（リンパ球）、ＥＯ（好酸球）、ＢＡＳＯ（好塩基球）、及びＭＯＮＯ（単球）の５種類に分類することが可能となっている。リンパ芽球／有核赤血球群の測定を行うときには、血液検体と第１試薬とが混合された測定試料（Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料）が光学検出器Ｄに供給され、ＮＲＢＣの測定を行うときには、血液検体と第２試薬と第３試薬とが混合された測定試料（ＮＲＢＣ測定試料）が光学検出器Ｄに供給される。
【００６９】
図５は、光学検出器Ｄの概要構成を示している。この光学検出器Ｄは、フローセル２３１に測定試料及びシース液を送り込み、フローセル２３１中に液流を発生させ、フローセル２３１内を通過する液流に含まれる血球に半導体レーザ光を照射して測定するものであり、シースフロー系２３２、ビームスポット形成系２３３、前方散乱光受光系２３４、側方散乱光受光系２３５、側方蛍光受光系２３６を有している。
【００７０】
シースフロー系２３２は、フローセル２３１内を測定試料がフローセル２３１内をシース液に包まれた状態で流すように構成されている。ビームスポット形成系２３３は、半導体レーザ２３７から照射された光が、コリメータレンズ２３８とコンデンサレンズ２３９とを通って、フローセル２３１に照射されるよう構成されている。また、ビームスポット形成系２３３は、ビームストッパ２４０も備えている。
【００７１】
前方散乱光受光系２３４は、前方への散乱光を前方集光レンズ２４１によって集光し、ピンホール２４２を通った光をフォトダイオード（前方散乱光受光部）２４３で受光するように構成されている。
【００７２】
側方散乱光受光系２３５は、側方への散乱光を側方集光レンズ２４４にて集光するとともに、一部の光をダイクロイックミラー２４５で反射させ、フォトダイオード（側方散乱光受光部）２４６で受光するよう構成されている。
【００７３】
光散乱は、光の進行方向に血球のような粒子が光の進行方向に障害物として存在すると、粒子により光がその進行方向を変えることによって生じる現象である。この散乱光を検出することによって、粒子の大きさや材質に関する情報を得ることができる。特に、前方散乱光からは、粒子（血球）の大きさに関する情報を得ることができる。また、側方散乱光からは、粒子内部の情報を得ることができる。血球粒子にレーザ光が照射された場合、側方散乱光強度は細胞内部の複雑さ（核の形状、大きさ、密度や顆粒の量）に依存する。したがって、これら散乱光強度は、リンパ芽球／有核赤血球群の測定、有核赤血球の測定、及び白血球の分類その他の測定に利用することができる。
【００７４】
側方蛍光受光系２３６は、ダイクロイックミラー２４５を透過した光をさらに分光フィルタ２４７に通し、アバランシェフォトダイオード（蛍光受光部）２４８で受光するよう構成されている。
【００７５】
蛍光物質により染色された血球に光を照射すると、照射した光の波長より長い波長の光を発する。蛍光の強度はよく染色されていれば強くなり、この蛍光強度を測定することによって血球の染色度合いに関する情報を得ることができる。したがって、（側方）蛍光強度の差は、リンパ芽球／有核赤血球群の測定、有核赤血球の測定、及び白血球の分類その他の測定に利用することができる。
【００７６】
次に、図４に戻って、検体容器搬送部２５の構成について説明する。検体容器搬送部２５は、検体容器Ｔを把持可能なハンド部２５ａを備えている。ハンド部２５ａは、互いに対向して配置された一対の把持部材を備えており、この把持部材を互いに近接及び離反させることが可能である。かかる把持部材を、検体容器Ｔを挟んだ状態で近接させることにより、検体容器Ｔを把持することができる。また、検体容器搬送部２５は、ハンド部２５ａを上下方向及び前後方向（Ｙ方向）に移動させることができ、さらに、ハンド部２５ａを揺動させることができる。これにより、サンプルラックＬに収容され、検体供給位置４３ａに位置した検体容器Ｔをハンド部２５ａにより把持し、その状態でハンド部２５ａを上方に移動させることによりサンプルラックＬから検体容器Ｔを抜き出し、ハンド部２５ａを揺動させることにより、検体容器Ｔ内の検体を撹拌することができる。
【００７７】
また、検体容器搬送部２５は、検体容器Ｔを挿入可能な穴部を有する検体容器セット部２５ｂを備えている。上述したハンド部２５ａによって把持された検体容器Ｔは、撹拌完了後移動され、把持した検体容器Ｔを検体容器セット部２５ｂの穴部に挿入する。その後、把持部材を離反させることにより、ハンド部２５ａから検体容器Ｔが開放され、検体容器セット部２５ｂに検体容器Ｔがセットされる。かかる検体容器セット部２５ｂは、図示しないステッピングモータの動力によって、図中Ｙ１及びＹ２方向へ水平移動可能である。
【００７８】
測定ユニット２の内部には、バーコード読取部２６が設けられている。検体容器セット部２５ｂは、バーコード読取部２６の近傍のバーコード読取位置２６ａ及び検体吸引部２１による吸引位置２１ａへ移動可能である。検体容器セット部２５ｂがバーコード読取位置２６ａへ移動したときには、セットされた検体容器Ｔが図示しない回転機構により水平回転され、バーコード読取部２６により検体バーコードが読み取られる。これにより、検体容器ＴのバーコードラベルＢＬ１がバーコード読取部２６に対して反対側に位置する場合でも、検体容器Ｔを回転させることにより、バーコードラベルＢＬ１をバーコード読取部２６へ向けることができ、バーコード読取部２６に検体バーコードを読み取らせることが可能である。また、検体容器セット部２５ｂが吸引位置へ移動したときには、検体吸引部２１により、セットされた検体容器Ｔから検体が吸引される。
【００７９】
＜検体搬送ユニットの構成＞
次に、検体搬送ユニット４の構成について説明する。図１に示すように、血液分析装置１の測定ユニット２の前方には、検体搬送ユニット４が配置されている。かかる検体搬送ユニット４は、測定ユニット２へ検体を供給するために、サンプルラックＬを搬送することが可能である。
【００８０】
図６は、検体搬送ユニット４の構成を示す平面図である。図６に示すように、検体搬送ユニット４は、分析が行われる前の検体を収容する検体容器Ｔを保持する複数のサンプルラックＬを保持することが可能な分析前ラック保持部４１と、測定ユニット２によって検体が吸引された検体容器Ｔを保持する複数のサンプルラックＬを保持することが可能な分析後ラック保持部４２と、検体を測定ユニット２に供給するために、サンプルラックＬを図中矢印Ｘ１方向又はＸ２方向へ水平に直線移動させ、分析前ラック保持部４１から受け付けたサンプルラックＬを分析後ラック保持部４２へ搬送するラック搬送部４３とを備えている。
【００８１】
分析前ラック保持部４１は、平面視において四角形をなしており、その幅はサンプルラックＬの幅より若干大きくなっている。この分析前ラック保持部４１は、周囲の面よりも一段低く形成されており、その上面に分析前のサンプルラックＬが載置される。また、分析前ラック保持部４１の両側面からは、内側へ向けてラック送込部４１ｂが突出可能に設けられている。このラック送込部４１ｂが突出することによりサンプルラックＬと係合し、この状態で後方（ラック搬送部４３に近接する方向）へ移動することにより、サンプルラックＬが後方へと移送される。かかるラック送込部４１ｂは、分析前ラック保持部４１の下方に設けられた図示しないステッピングモータによって駆動可能に構成されている。
【００８２】
ラック搬送部４３は、図６に示すように、分析前ラック保持部４１によって移送されたサンプルラックＬを、前記Ｘ方向へと移送可能となっている。このラック搬送部４３によるサンプルラックＬの搬送経路上には、図４に示すように、測定ユニット２へ検体を供給するための検体供給位置４３ａが存在する。検体搬送ユニット４は情報処理ユニット５によって制御され、検体供給位置４３ａに検体を搬送する。このとき、測定ユニット２のハンド部２５ａが搬送された検体容器Ｔを把持し、サンプルラックＬから検体容器Ｔを取り出すことで検体の供給が完了する。また、測定ユニット２から検体容器ＴをサンプルラックＬに返還する場合には、ラック搬送部４３は、検体容器Ｔが取り込まれたときから搬送を待機するか、他の位置へとサンプルラックＬを搬送した後、検体容器Ｔが測定ユニット２に取り込まれたことにより空きとなった保持位置を検体供給位置４３ａに位置させるようにサンプルラックＬを搬送する。これにより、検体容器Ｔが挿入されていない保持位置が検体供給位置４３ａに位置している状態で、ハンド部２５ａが、確実に検体容器ＴをサンプルラックＬへと戻すことが可能である。
【００８３】
また、ラック搬送部４３は、図６に示すように、それぞれ独立して動作可能な第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２の２つのベルトを有している。また、第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２の矢印Ｙ方向の幅ｂ１，ｂ２は、それぞれサンプルラックＬの矢印Ｙ方向の幅Ｂの半分以下の大きさである。かかる第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２は、ラック搬送部４３がサンプルラックＬを搬送するときにサンプルラックＬの幅Ｂからはみ出ないように並列に配置されている。図７は、第１ベルト４３１の構成を示す正面図であり、図８は、第２ベルト４３２の構成を示す正面図である。図７及び図８に示すように、第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２は、それぞれ環状に形成されており、第１ベルト４３１はローラ４３１ａ〜４３１ｃを取り囲むように配置され、第２ベルト４３２はローラ４３２ａ〜４３２ｃを取り囲むように配置されている。また、第１ベルト４３１の外周部には、サンプルラックＬのＸ方向の幅Ｗよりも若干（例えば、１ｍｍ）大きい内幅ｗ１を有するように２つの突起片４３１ｄが設けられており、同様に、第２ベルト４３２の外周部には、前記内幅ｗ１と同程度の内幅ｗ２を有するように２つの突起片４３２ｄが設けられている。第１ベルト４３１は、２つの突起片４３１ｄの内側にサンプルラックＬを保持した状態において、ステッピングモータ（図示せず）によりローラ４３１ａ〜４３１ｃの外周を移動されることによって、サンプルラックＬを矢印Ｘ方向に移動するように構成されている。第２ベルト４３２は、２つの突起片４３２ｄの内側にサンプルラックＬを保持した状態において、ステッピングモータ（図示せず）によりローラ４３２ａ〜４３２ｃの外周を移動されることによって、サンプルラックＬを矢印Ｘ方向に移動するように構成されている。また、第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２は、互いに独立してサンプルラックＬを移送可能に構成されている。
【００８４】
図４に示すように、ラック搬送部４３の搬送路上に検体容器センサ４５が設けられている。検体容器センサ４５は、接触型のセンサであり、のれん形状の接触片、光を出射する発光素子、及び受光素子（図示せず）を有している。検体容器センサ４５は、接触片が検出対象の被検出物に当接することにより屈曲され、その結果、発光素子から出射された光が接触片により反射されて受光素子に入射するように構成されている。これにより検体容器センサ４５の下方をサンプルラックＬに収容された検出対象の検体容器Ｔが通過する際に、接触片が検体容器Ｔにより屈曲されて、検体容器Ｔを検出することが可能である。
【００８５】
図４に示すように、ラック搬送部４３を挟んで後述する分析後ラック保持部４２に対向するようにラック送出部４６が配置されている。かかるラック送出部４６は、図示しないステッピングモータの駆動力により矢印Ｙ方向に水平に直線移動するように構成されている。これにより、分析後ラック保持部４２とラック送出部４６との間の位置４６１（以下、「分析後ラック送出位置」という。）にサンプルラックＬが搬送された場合に、ラック送出部４６を分析後ラック保持部４２側に移動することによって、サンプルラックＬを押動させて分析後ラック保持部４２内に移動することが可能である。
【００８６】
分析後ラック保持部４２は、平面視において四角形をなしており、その幅はサンプルラックＬの幅より若干大きくなっている。この分析後ラック保持部４２は、周囲の面よりも一段低く形成されており、その上面に分析が完了したサンプルラックＬが載置される。分析後ラック保持部４２は、上記のラック搬送部４３に連なっており、上述したように、ラック送出部４６によって、ラック搬送部４３からサンプルラックＬが送り込まれるようになっている。
【００８７】
上記のような構成とすることにより、検体搬送ユニット４は、分析前ラック保持部４１に載置されたサンプルラックＬをラック搬送部４３へと移送し、さらにラック搬送部４３によって搬送することにより、検体を測定ユニット２へと供給することができる。また、吸引が完了した検体を収容するサンプルラックＬは、ラック搬送部４３により、分析後ラック送出位置４６１へと移送され、ラック送出部４６により分析後ラック保持部４２へ送出される。複数のサンプルラックＬが分析前ラック保持部４１に載置された場合では、分析が完了した検体を収容するサンプルラックＬが次々にラック送出部４６により分析後ラック保持部４２へと送出され、これらの複数のサンプルラックＬが分析後ラック保持部４２に貯留されることとなる。
【００８８】
＜情報処理ユニットの構成＞
次に、情報処理ユニット５の構成について説明する。情報処理ユニット５は、コンピュータにより構成されている。図９は、情報処理ユニット５の構成を示すブロック図である。情報処理ユニット５は、コンピュータ５ａによって実現される。図９に示すように、コンピュータ５ａは、本体５１と、画像表示部５２と、入力部５３とを備えている。本体５１は、ＣＰＵ５１ａ、ＲＯＭ５１ｂ、ＲＡＭ５１ｃ、ハードディスク５１ｄ、読出装置５１ｅ、入出力インタフェース５１ｆ、通信インタフェース５１ｇ、及び画像出力インタフェース５１ｈを備えており、ＣＰＵ５１ａ、ＲＯＭ５１ｂ、ＲＡＭ５１ｃ、ハードディスク５１ｄ、読出装置５１ｅ、入出力インタフェース５１ｆ、通信インタフェース５１ｇ、及び画像出力インタフェース５１ｈは、バス５１ｊによって接続されている。
【００８９】
ＣＰＵ５１ａは、ＲＡＭ５１ｃにロードされたコンピュータプログラムを実行することが可能である。そして、後述するような血液分析用並びに測定ユニット２及び検体搬送ユニット４の制御用のコンピュータプログラム５４ａを当該ＣＰＵ５１ａが実行することにより、コンピュータ５ａが情報処理ユニット５として機能する。
【００９０】
ＲＯＭ５１ｂは、マスクＲＯＭ、ＰＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、又はＥＥＰＲＯＭ等によって構成されており、ＣＰＵ５１ａに実行されるコンピュータプログラム及びこれに用いるデータ等が記録されている。
【００９１】
ＲＡＭ５１ｃは、ＳＲＡＭまたはＤＲＡＭ等によって構成されている。ＲＡＭ５１ｃは、ハードディスク５１ｄに記録されているコンピュータプログラム５４ａの読み出しに用いられる。また、ＣＰＵ５１ａがコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ５１ａの作業領域として利用される。
【００９２】
ハードディスク５１ｄは、オペレーティングシステム及びアプリケーションプログラム等、ＣＰＵ５１ａに実行させるための種々のコンピュータプログラム及び当該コンピュータプログラムの実行に用いられるデータがインストールされている。後述するコンピュータプログラム５４ａも、このハードディスク５１ｄにインストールされている。また、このコンピュータプログラム５４ａは、イベントドリブン型のコンピュータプログラムである。
【００９３】
読出装置５１ｅは、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ−ＲＯＭドライブ、またはＤＶＤ−ＲＯＭドライブ等によって構成されており、可搬型記録媒体５４に記録されたコンピュータプログラムまたはデータを読み出すことができる。また、可搬型記録媒体５４には、コンピュータを情報処理ユニット５として機能させるためのコンピュータプログラム５４ａが格納されており、コンピュータ５ａが当該可搬型記録媒体５４からコンピュータプログラム５４ａを読み出し、当該コンピュータプログラム５４ａをハードディスク５１ｄにインストールすることが可能である。
【００９４】
なお、前記コンピュータプログラム５４ａは、可搬型記録媒体５４によって提供されるのみならず、電気通信回線（有線、無線を問わない）によってコンピュータ５ａと通信可能に接続された外部の機器から前記電気通信回線を通じて提供することも可能である。例えば、前記コンピュータプログラム５４ａがインターネット上のサーバコンピュータのハードディスク内に格納されており、このサーバコンピュータにコンピュータ５ａがアクセスして、当該コンピュータプログラムをダウンロードし、これをハードディスク５１ｄにインストールすることも可能である。
【００９５】
また、ハードディスク５１ｄには、例えば米マイクロソフト社が製造販売するWindows（登録商標）等のマルチタスクオペレーティングシステムがインストールされている。以下の説明においては、本実施の形態に係るコンピュータプログラム５４ａは当該オペレーティングシステム上で動作するものとしている。
【００９６】
入出力インタフェース５１ｆは、例えばUSB，IEEE1394，又はRS-232C等のシリアルインタフェース、SCSI，IDE，又は IEEE1284等のパラレルインタフェース、及びＤ／Ａ変換器、Ａ／Ｄ変換器等からなるアナログインタフェース等から構成されている。入出力インタフェース５１ｆには、キーボード及びマウスからなる入力部５３が接続されており、ユーザが当該入力部５３を使用することにより、コンピュータ５ａにデータを入力することが可能である。また、入出力インタフェース５１ｆは、測定ユニット２及び検体搬送ユニット４に接続されている。これにより、情報処理ユニット５は、測定ユニット２及び検体搬送ユニット４のそれぞれを制御可能となっている。
【００９７】
通信インタフェース５１ｇは、Ethernet（登録商標）インタフェースである。通信インタフェース５１ｇはＬＡＮを介してホストコンピュータ６に接続されている（図４参照）。コンピュータ５ａは、通信インタフェース５１ｇにより、所定の通信プロトコルを使用して当該ＬＡＮに接続されたホストコンピュータ６との間でデータの送受信が可能である。
【００９８】
画像出力インタフェース５１ｈは、ＬＣＤまたはＣＲＴ等で構成された画像表示部５２に接続されており、ＣＰＵ５１ａから与えられた画像データに応じた映像信号を画像表示部５２に出力するようになっている。画像表示部５２は、入力された映像信号にしたがって、画像（画面）を表示する。
【００９９】
［血液分析装置１の測定動作］
以下、本実施の形態に係る血液分析装置１の動作について説明する。
【０１００】
＜検体測定動作＞
まず、本実施の形態に係る血液分析装置１の検体測定動作について説明する。血液分析装置１は、光学検出器Ｄを用いたリンパ芽球／有核赤血球群測定、ＮＲＢＣ（有核赤血球）測定を実行可能である。かかる測定の工程は、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料を測定する第１測定工程と、ＮＲＢＣ測定試料を測定する第２測定工程と、第１測定工程及び第２測定工程によって得られた測定データを解析処理するデータ処理工程によって構成される。
【０１０１】
まず、検体容器Ｔを保持したサンプルラックＬがオペレータによって分析前ラック保持部４１に載置される。ラック送込部４１ｂが分析前ラック保持部４１に載置されたサンプルラックＬに係合し、後方へと搬送され、ラック搬送部４３へと送られる。その後、ラック搬送部４３によって当該サンプルラックＬが搬送され、測定対象の検体が収容されている検体容器Ｔが検体供給位置４３ａに位置する。次に、測定ユニット２のハンド部２５ａにより、当該検体容器Ｔが把持され、サンプルラックＬからこの検体容器Ｔが取り出される。ハンド部２５ａはその後揺動運動を行い、検体容器Ｔの内部の検体が撹拌される。次に、検体容器セット部２５ｂにこの検体容器Ｔが挿入され、Ｙ方向へと検体容器セット部２５ｂが移動し、バーコード読取部２６による検体バーコード読み取りを行った後、吸引位置に到達する。その後、以下の第１測定工程及び第２測定工程が実行される。
【０１０２】
第１測定工程
まず、第１測定工程について説明する。血液分析装置１は、第１測定工程では、全血検体（１９．０μＬ）と第１試薬（１．０２ｍＬ）とを混合してＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を作成し、このＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を光学検出器Ｄにてフローサイトメトリー法によって測定する。
【０１０３】
ここで、第１試薬として、以下に示される試薬を用いた。
＜第１試薬＞
ＭＯＰＳＯ ２．２５ｇ／Ｌ
ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル １０．０ｇ／Ｌ
Ｎ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウム ０．５ｇ／Ｌ
Ｐｒｏｘｅｌ ＧＸＬ ０．４０ｇ／Ｌ
ＥＤＴＡ−２Ｋ ０．５０ｇ／Ｌ
キシリトール ４０．２２ｇ／Ｌ
ＮＫ−３２１ １．０ｍｇ／Ｌ
ｐＨ： ７．０
浸透圧： ３００ｍＯｓｍ／Ｋｇ
電気伝導度： ０．７４５ｍＳ／ｃｍ
【０１０４】
なお、全血検体として以下に示される３つの検体を用いた。
【表１】
表１中、「○」は対象の血球（リンパ芽球又は有核赤血球）が存在することを示し、「×」は対象の血球が存在しないことを示す。
【０１０５】
図１０は、第１測定工程での血液分析装置１の動作手順を示すフローチャートである。まず、ＣＰＵ５１ａは、検体吸引部２１を制御して、吸引管２１１により検体容器Ｔの全血検体を定量吸引する（ステップＳ１０１）。ステップＳ１０１の処理は、具体的には、吸引管２１１が検体容器Ｔの中に挿入され、シリンジポンプの駆動によって、全血検体が定量（３９．０μＬ）吸引される。
【０１０６】
次に、ＣＰＵ５１ａが測定ユニット２を制御することにより、試薬容器２２１から第１試薬（１．０２ｍＬ）が、吸引管２１１から全血検体（１９．０μＬ）が第１混合チャンバＭＣ１にそれぞれ供給される（ステップＳ１０２）。ＣＰＵ５１ａは、第１混合チャンバＭＣ１への第１試薬及び全血検体の供給から１８．５秒間経過したか否かを判定し（ステップＳ１０３）、１８．５秒間待機する。ここで、ヒータにより第１混合チャンバＭＣ１は３５．０℃に加温されており、これにより、第１試薬と血液検体との混合液が３５．０℃で１８．５秒加温され、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料が調製される。
【０１０７】
そして、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料を対象に光学検出器Ｄにて光学測定が行われる（ステップＳ１０４）。ステップＳ１０４の処理においては、具体的には、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料とシース液とが同時に光学検出器Ｄのフローセル２３１に供給され、そのときの前方散乱光がフォトダイオード２４３で受光され、側方散乱光がフォトダイオード２４６で受光され、アバランシェフォトダイオード２４８で受光される。このような光学検出器Ｄの各受光素子により出力される出力信号（アナログ信号）は図示しないＡ／Ｄ変換器によりデジタル信号に変換され、図示しない信号処理回路により所定の信号処理が施されてデジタルデータである第１測定データに変換され、情報処理ユニット５にこの第１測定データが送信される。この信号処理においては、第１測定データに含まれる特徴パラメータとして、前方散乱光信号（前方散乱光強度）、側方散乱光信号（側方散乱光強度）、及び側方蛍光信号（側方蛍光強度）が得られる。これにより、第１測定工程が終了する。また、後述するように、情報処理ユニット５のＣＰＵ５１ａは、第１測定データに対して所定の解析処理を実行することにより、ＮＥＵＴ、ＬＹＭＰＨ、ＥＯ、ＢＡＳＯ、ＭＯＮＯ、及びＷＢＣ等の数値データを含む分析結果データを生成し、ハードディスク５１ｄに分析結果データを記憶する。
【０１０８】
第２測定工程
次に、第２測定工程について説明する。この第２測定工程は、第１測定工程と時間的に一部重複して実行される。血液分析装置１は、第２測定工程では、全血検体（１７．０μＬ）と第２試薬（１．０ｍＬ）と第３試薬（０．０３０ｍＬ）とを混合してＮＲＢＣ測定試料を作成し、このＮＲＢＣ測定試料を光学検出器Ｄにてフローサイトメトリー法によって測定する。ここで第２試薬としては、上述のストマトライザーＮＲ溶血剤を使用し、第３試薬としては、上述のストマトライザーＮＲ染色液を用いた。
【０１０９】
図１１は、第２測定工程での血液分析装置１の動作手順を示すフローチャートである。ＣＰＵ５１ａは測定ユニット２を制御することにより、試薬容器２２２ａから第２試薬（１．０ｍＬ）を、試薬容器２２２ｂから第３試薬（０．０３０ｍＬ）を、吸引管２１１から全血検体（１７．０μＬ）を第２混合チャンバＭＣ２にそれぞれ供給する（ステップＳ２０１）。このステップＳ２０１において第２混合チャンバＭＣ２に供給される検体は、上述したステップＳ１０１において吸引管２１１により吸引された全血検体の一部である。つまり、ステップＳ１０１においては、第１混合チャンバＭＣ１に供給する検体と、第２混合チャンバＭＣ２に供給される検体とが一度に検体容器Ｔから吸引される。
【０１１０】
次に、ＣＰＵ５１ａは、第２混合チャンバＭＣ２への第２試薬、第３試薬及び全血検体の供給から７．０秒間経過したか否かを判定し（ステップＳ２０２）、７．０秒間待機する。ここで、ヒータにより第２混合チャンバＭＣ２は４１．０℃に加温されており、これにより、第２試薬と第３試薬と血液検体との混合液が４１．０℃で７．０秒加温され、ＮＲＢＣ測定試料が調製される。
【０１１１】
そして、ＮＲＢＣ測定試料を対象に光学検出器Ｄにて光学測定が行われる（ステップＳ２０３）。ステップＳ２０３の処理においては、具体的には、ＮＲＢＣ測定試料とシース液とが同時に光学検出器Ｄのフローセル２３１に供給され、そのときの前方散乱光がフォトダイオード２４３で受光され、側方散乱光がフォトダイオード２４６で受光され、アバランシェフォトダイオード２４８で受光される。このような光学検出器Ｄの各受光素子により出力される出力信号（アナログ信号）は、上述した第１測定工程と同様に、デジタル信号に変換され、所定の信号処理が施されてデジタルデータである第２測定データに変換され、情報処理ユニット５にこの第２測定データが送信される。この信号処理においては、第２測定データに含まれる特徴パラメータとして、前方散乱光信号（前方散乱光強度）、側方散乱光信号（側方散乱光強度）、及び側方蛍光信号の（側方蛍光強度）が得られる。これにより、第２測定工程が終了する。また、後述するように、情報処理ユニット５のＣＰＵ５１ａは、第２測定データに対して所定の解析処理を実行することにより、ＮＲＢＣの数値データを含む分析結果データを生成し、ハードディスク５１ｄに分析結果データを記憶する。
【０１１２】
データ処理工程
次に、データ処理工程について説明する。図１２は、データ処理工程での血液分析装置１の処理手順を示すフローチャートである。血液分析装置１の情報処理ユニット５は、測定ユニット２から測定データを受信する（ステップＳ３０１）。ここで、受信された測定データには第１測定データ及び第２測定データが含まれる。ＣＰＵ５１ａによって実行されるコンピュータプログラム５４ａはイベントドリブン型のプログラムであり、測定データを受信するイベントが発生すると、ステップＳ３０２の処理が呼び出される。
【０１１３】
ステップＳ３０２において、ＣＰＵ５１ａは、第１測定データを用いてリンパ芽球／有核赤血球群と他の血球群とを分類し、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数を計数する（ステップＳ３０２）。かかる処理について詳しく説明する。図１３Ａは、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム（粒度分布図）であり、図１３Ｂは、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムである。
【０１１４】
図１３Ａに示す第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、骨髄芽球のクラスター、幼若顆粒球のクラスター、好塩基球のクラスター、好中球と好酸球とによってなる血球群のクラスター、リンパ球のクラスター、単球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。また、図１３Ｂに示す第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、幼若顆粒球と骨髄芽球とからなる血球群のクラスターと、顆粒球（好中球と好酸球と好塩基球とからなる血球群）のクラスター、単球のクラスター、リンパ球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。これらのスキャッタグラムに示されるように、第１測定データの蛍光強度を利用することによって、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターを、他のクラスターから弁別することができる。ステップＳ３０２の処理においては、ＣＰＵ５１ａは、第１測定データの側方散乱光強度及び蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群を他のクラスターと弁別し、これによってリンパ芽球／有核赤血球群を検出する。さらに、ＣＰＵ５１ａは、検出されたリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球の数を計数する。
【０１１５】
次にステップＳ３０３において、ＣＰＵ５１ａは、第２測定データを用いて有核赤血球群と他の血球群とを分類し、有核赤血球の数を計数する（ステップＳ３０３）。かかる処理について詳しく説明する。図１４は、第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムである。図１４に示す第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、有核赤血球のクラスター、白血球のクラスター、及び赤血球ゴーストのクラスターが現れる。このスキャッタグラムに示されるように、第２測定データの前方散乱光強度及び側方蛍光強度を利用することにより、有核赤血球のクラスターを、他のクラスターから弁別することができる。ステップＳ３０３の処理においては、ＣＰＵ５１ａは、第２測定データの前方散乱光強度及び蛍光強度を用いて、有核赤血球を他のクラスターから弁別し、これによって有核赤血球を検出する。さらに、ＣＰＵ５１ａは、検出された有核赤血球の数を計数する。
【０１１６】
次にステップＳ３０４において、ＣＰＵ５１ａは、ステップＳ３０２において取得したリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬと、ステップＳ３０３において取得した有核赤血球数ＮＮとの差が、所定の基準値Ｔ以上であるか否かを判定する（ステップＳ３０４）。ここで、基準値Ｔは、ＮＬ−ＮＮの値がこの基準値Ｔ以上の場合には、血液検体にリンパ芽球が含まれていると考えることができ、ＮＬ−ＮＮの値が基準値Ｔ未満の場合には、血液検体にリンパ芽球が含まれていないと考えることができるものとして、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬ及び有核赤血球数ＮＮの誤差を勘案して予め設定される。したがって、この処理においてＮＬ−ＮＮ≧Ｔである場合は（ステップＳ３０４においてＹＥＳ）、血液検体中にリンパ芽球が含まれていると判断することができる。よってこの場合には、ＣＰＵ５１ａは、ＲＡＭ５１ｃに設けられたリンパ芽球フラグに「１」をセットする（ステップＳ３０５）。ここで、リンパ芽球フラグは血液検体におけるリンパ芽球の有無を示すフラグであり、「１」がセットされている場合にはリンパ芽球が存在していることを示し、「０」がセットされている場合にはリンパ芽球が存在していないことを示す。その後、ＣＰＵ５１ａは、ステップＳ３０７へ処理を移す。
【０１１７】
一方、ステップＳ３０４においてＮＬ−ＮＮ＜Ｔである場合は（ステップＳ３０４においてＮＯ）、血液検体中にリンパ芽球が含まれていないと判断することができる。よってこの場合には、ＣＰＵ５１ａは、リンパ芽球フラグに「０」をセットする（ステップＳ３０６）。その後、ＣＰＵ５１ａは、ステップＳ３０７へ処理を移す。
【０１１８】
ステップＳ３０７において、ＣＰＵ５１ａは、上述のようにして得た分析結果（有核赤血球数、及びリンパ芽球フラグを含む）をハードディスク５１ｄに格納する（ステップＳ３０７）。次にＣＰＵ５１ａは、ハードディスク５１ｄに記憶した分析結果を示す分析結果画面を画像表示部５２に表示させ（ステップＳ３０８）、処理を終了する。
【０１１９】
図１５Ａ、図１５Ｂ及び図１５Ｃは、血液分析装置１の分析結果画面を示す図である。図１５Ａは、血液検体Ａの分析結果画面を示している。図１５Ｂは、血液検体Ｂの分析結果画面を示している。図１５Ｃは、血液検体Ｃの分析結果画面を示している。図１５Ａ〜Ｃに示すように、分析結果画面Ｒ１，Ｒ２及びＲ３においては、測定された測定項目（ＷＢＣ、ＲＢＣ、ＰＬＴ、ＮＲＢＣ等）の数値データが表示される。血液検体Ａにはリンパ芽球が含まれており、この血液検体Ａに係る分析結果データでは、リンパ芽球フラグが「１」にセットされている。したがって、血液検体Ａの分析結果画面Ｒ１では、図１５Ａに示すように、リンパ芽球項目が存在している可能性を示す情報である「Ｌ−Ｂｌａｓｔ？」の表示が、Ｆｌａｇの欄Ｆに付される。一方、血液検体Ｂ及び血液検体Ｃにはリンパ芽球が含まれておらず、血液検体Ｂに係る分析結果データ及び血液検体Ｃに係る分析結果データでは、リンパ芽球フラグが「０」にセットされている。したがって、血液検体Ｂの分析結果画面Ｒ２及び血液検体Ｃの分析結果画面Ｒ３では、図１５Ｂ及び図１５ＣのＦｌａｇの欄Ｆに示すように、上記の「Ｌ−Ｂｌａｓｔ？」の表示は付されない。また、血液検体Ｃは有核赤血球を含んでいるため、血液検体Ｃの分析結果画面Ｒ３では、図１５Ｃに示すように、有核赤血球の存在を示す情報である「ＮＲＢＣ ｐｒｅｓｅｎｔ」の表示が、Ｆｌａｇの欄Ｆに付される。これによって、オペレータは分析結果画面を見るだけで、その血液検体にリンパ芽球が検出されたか否かを把握することができる。また、この分析結果画面Ｒ１，Ｒ２及びＲ３には、第１測定データの側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムＳＬ１，ＳＬ２及びＳＬ３が表示される。さらに、この分析結果画面Ｒ１，Ｒ２及びＲ３には、第２測定データの側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムＳＮ１，ＳＮ２及びＳＮ３が表示される。オペレータはこのスキャッタグラムを参照することによって、血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の根拠を把握することができ、また血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の妥当性を判断することができる。
【０１２０】
ここで、スキャッタグラムの具体例を用いて、リンパ芽球の検出について詳細に説明する。図１６Ａは、血液検体Ａの第１測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムであり、図１６Ｂは、血液検体Ａの第１測定データにおける側方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。また、図１７は、血液検体Ａの第２測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。さらに、図１８Ａは、血液検体Ｃの第１測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムであり、図１８Ｂは、血液検体Ｃの第１測定データにおける側方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。図１９は、血液検体Ｃの第２測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。
【０１２１】
図１６Ａ及び図１６Ｂから明らかなように、血液検体Ａでは、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターがスキャッタグラム上で確認できる。一方、図１７から明らかなように、血液検体Ａでは、有核赤血球のクラスターがスキャッタグラム上で確認できない。このことは、図１６Ａ及び図１６Ｂに出現しているリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが主としてリンパ芽球によって形成されているということを示しており、ここから血液検体Ａにリンパ芽球が存在することが分かる。
【０１２２】
また、図１８Ａ及び図１８Ｂから明らかなように、血液検体Ｃでは、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターがスキャッタグラム上で確認できる。加えて、血液検体Ｃにおけるリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターは、血液検体Ａにおけるリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターよりも規模が小さく、血球数が少ないことが分かる。さらに、図１９から明らかなように、血液検体Ｃでは、有核赤血球のクラスターがスキャッタグラム上で確認できる。このことは、図１８Ａ及び図１８Ｂに出現しているリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが主として有核赤血球によって形成されているということを示している。つまり、このことは、血液検体Ｃにおいては、リンパ芽球ではなく、有核赤血球が存在していることを示唆している。
【０１２３】
このように、第１測定データ及び第２測定データから得られるスキャッタグラムを参照することで、より正確に血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の根拠を把握することができ、また血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の妥当性を判断することができる。
【０１２４】
以上のような構成とすることにより、血液分析装置１は、血液検体と核酸を染色する蛍光色素が含有された第１試薬とを混合して調製したＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を光学検出器Ｄにより測定することにより、リンパ芽球／有核赤血球群を検出し、そのリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数を測定することができる。また、この血球数と、第２測定工程によって得られた有核赤血球数とによって、血液検体にリンパ芽球が含まれているか否かを検出することができる。したがって、血液分析装置１の上記測定に蛍光標識抗体が用いられることがなく、測定コストを抑制しつつ、リンパ芽球の検出を行うことが可能である。
【０１２５】
（その他の実施の形態）
なお、試料調製部２２における、血液検体と第１試薬との混合の際の反応温度及び反応時間は、血液検体中の血球の損傷や染色の状態により適宜設定すればよく、特に制限されない。具体的には、反応温度が高いときは反応時間を短くし、反応温度が低いときは反応時間を長くするように調整することができる。より具体的には、血液検体と試薬の混合は、２０℃〜４０℃の温度において、３〜２０秒間行うことが好ましい。
【０１２６】
また、上述した実施の形態においては、溶血剤及び核酸を染色できる蛍光色素を含む第１試薬を用いて、第１測定工程を行う構成について述べたが、これに限定されるものではない。溶血剤を含む試薬と、核酸染色色素を含む試薬とを別々に設け、これらの２つの試薬を血液検体と混合してＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を調製し、リンパ芽球／有核赤血球群の検出及びリンパ芽球／有核赤血球群の血球数の測定を行う構成としてもよい。この場合、界面活性剤、可溶化剤及び蛍光色素の濃度は、上記２つの試薬を混合した際に、上述の濃度になるように調整される。ここで、溶血剤を含む試薬及び核酸染色色素を含む試薬の混合比は、１０００：１〜１０：１が好ましい。
【０１２７】
上記の試薬キットを用いる場合、試薬キットの各試薬と血液検体とを混合する順序は特に限定されないが、２つの試薬を混合し、次いで混合した試薬に血液検体を混合することが好ましい。
【０１２８】
また、上述した実施の形態においては、第１測定工程と第２測定工程とを実行し、第１測定工程によって得られる第１測定データ及び第２測定工程によって得られる第２測定データによって血液検体にリンパ芽球が含まれているか否かを検出する構成について述べたが、これに限定されるものではない。図１３Ａに示すように、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターにおいて、蛍光強度が低い部分にはリンパ芽球のクラスターと有核赤血球のクラスターとが重複し、蛍光強度が高い部分にはリンパ芽球のみが出現している。つまり、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターにおいて、有核赤血球のクラスターの蛍光強度の上限値付近に蛍光強度の基準値を設け、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスター内で蛍光強度がこの基準値以上の粒子が検出された場合には、リンパ芽球が存在すると判断し、蛍光強度が当該基準値以上の粒子が検出されなかった場合には、リンパ芽球が存在しないと判断することもできる。この場合には、有核赤血球の検出のための第２測定工程を行わなくてもリンパ芽球の有無を判断することができるため、より一層血液分析装置１の構成を簡単にすることができ、また測定コストを低減することができる。
【０１２９】
また、上述した実施の形態においては、第１測定データに基づいてリンパ芽球／有核赤血球群の検出及びリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球の計数を行い、第２測定データに基づいて有核赤血球の検出及び有核赤血球の計数を行い、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数と有核赤血球数との差を求め、この差と基準値Ｔとの比較によりリンパ芽球の有無を判断する構成について述べたが、これに限定されるものではない。第１測定データに基づいてリンパ芽球／有核赤血球群の検出及び第２測定データに基づいて有核赤血球の検出を行い、リンパ芽球／有核赤血球群として検出される粒子が存在し、且つ、有核赤血球として検出される粒子が存在しない場合には、リンパ芽球が存在すると判断し、それ以外の場合には、リンパ芽球が存在しないと判断する構成としてもよい。また、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数と有核赤血球数との差を、リンパ芽球数として分析結果画面に表示することもでき、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数と有核赤血球数との差に対して、所定数を差し引いた結果の数を、リンパ芽球数として分析結果画面に表示することもできる。
【０１３０】
また、上述した実施の形態においては、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬと有核赤血球数ＮＮとの差ＮＬ−ＮＮが基準値Ｔ以上の場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在すると判断し、ＮＬ−ＮＮが基準値Ｔ未満の場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在しないと判断する構成について述べたが、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬが有核赤血球数ＮＮよりも大きい場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在すると判断し、血球数ＮＬが有核赤血球数ＮＮ以下の場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在しないと判断する構成としてもよい。
【０１３１】
上述したように、図１３Ａに示す第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、骨髄芽球のクラスター、幼若顆粒球のクラスター、好塩基球のクラスター、好中球と好酸球とによってなる血球群のクラスター、リンパ球のクラスター、単球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。したがって、この第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、骨髄芽球のクラスターと他のクラスターとを分類し、骨髄芽球のクラスターに含まれる血球が存在する場合には、その存在を示す情報又は骨髄芽球のクラスターに含まれる血球数（骨髄芽球数）を分析結果画面に表示する構成としてもよい。また、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、幼若顆粒球のクラスターと他のクラスターとを分類し、幼若顆粒球のクラスターに含まれる血球が存在する場合には、その存在を示す情報又は幼若顆粒球のクラスターに含まれる血球数（幼若顆粒球数）を分析結果画面に表示する構成としてもよい。
【０１３２】
さらに、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、成熟白血球を、リンパ球、好塩基球、単球、及び好中球と好酸球とからなる血球群に分類し、リンパ球、好塩基球、単球、及び好中球と好酸球とからなる血球群に含まれる血球をそれぞれ計数し、分析結果画面にそれぞれの血球数を表示する構成としてもよい。また、上記の好中球と好酸球とからなる血球群に好塩基球も含まれているものとし、顆粒球としてリンパ球及び単球と区別して、成熟白血球をリンパ球、単球及び顆粒球に分類し、それぞれのクラスターに含まれる血球を計数し、リンパ球数、単球数、顆粒球数を分析結果画面に表示する構成としてもよい。
【０１３３】
また、上述した実施の形態においては、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群の検出を行う構成について述べたが、これに限定されるものではない。図１３Ｂに示すように、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、幼若顆粒球と骨髄芽球とからなる血球群のクラスター、顆粒球（好中球と好酸球と好塩基球とからなる血球群）のクラスター、単球のクラスター、リンパ球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。したがって、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群の検出を行う構成とし、さらにはリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球を計数する構成としてもよい。また、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群のクラスターと他のクラスターとを分類し、骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群のクラスターに含まれる血球が存在する場合には、その存在を示す情報又は骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群のクラスターに含まれる血球数を分析結果画面に表示する構成としてもよい。
【０１３４】
さらに、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、成熟白血球を、リンパ球、単球、及び顆粒球に分類し、リンパ球、単球、及び顆粒球をそれぞれ計数し、分析結果画面にそれぞれの血球数を表示する構成としてもよい。
【０１３５】
また、図１３Ａ及び図１３Ｂに示すように、第１測定データに含まれる側方蛍光強度だけを用いて、リンパ芽球／有核赤血球群、成熟白血球（リンパ球、単球、及び顆粒球）、及び骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群を弁別することができる。したがって、第１測定データに含まれる側方蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群の領域（蛍光強度が高い領域）と、成熟白血球（蛍光強度が中程度の領域）と、骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群の領域（蛍光強度が低い領域）とに区分し、領域毎に血球を計数し、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数、成熟白血球数、及び骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群の血球数を取得する構成としてもよい。
【０１３６】
また、上述した実施の形態においては、血液分析装置１が第２測定工程を実施し、データ処理工程において有核赤血球群を検出する構成について述べたが、これに限定されるものではない。すなわち、有核赤血球群の検出に関する情報を、血液分析装置１とは異なる他の血液分析装置又は用手法により取得し、取得した情報を血液分析装置１の入力手段を用いて入力する構成としても良い。ここで、血液分析装置１の入力手段としては、上述の入力部５３及び通信インタフェース５１ｇ等が挙げられる。より具体的には、上述の入出力インタフェース５１ｆに接続されているキーボード及びマウスからなる入力部５３を用いて有核赤血球群の検出に関する情報を血液分析装置１に入力することができる。また、通信インタフェース５１ｇを用いて血液分析装置１と上記の他の血液分析装置を接続し、通信インタフェース５１ｇ介して有核赤血球群の検出に関する情報を血液分析装置１に入力することもできる。
【０１３７】
また、上述した実施の形態においては、ＣＰＵ５１ａが上記のコンピュータプログラム５４ａを実行することにより、測定ユニット２の制御及び測定データの処理を行う構成について述べたがこれに限定されるものではない。上記コンピュータプログラム５４ａと同様の処理を実行することが可能なＦＰＧＡ又はＡＳＩＣ等の専用ハードウェアにより、測定ユニット２の制御及び測定データの処理を実行する構成としてもよい。
【０１３８】
また、上述した実施の形態においては、単一のコンピュータ５ａによりコンピュータプログラム５４ａの全ての処理を実行する構成について述べたが、これに限定されるものではなく、上述したコンピュータプログラム５４ａと同様の処理を、複数の装置（コンピュータ）により分散して実行する分散システムとすることも可能である。
【産業上の利用可能性】
【０１３９】
本発明の検体検査システムは、血液検体を光学的に測定し、血液検体に含まれる細胞群を複数に分類する血液分析装置として有用である。
【符号の説明】
【０１４０】
１ 血液分析装置
２ 測定ユニット
２２ 試料調製部
２２１，２２２ａ，２２２ｂ，２２３ 試薬容器
２３ 検出部
２３１ フローセル
２３７ 半導体レーザ
２４３ フォトダイオード
２４６ フォトダイオード
２４８ アバランシェフォトダイオード
５ 情報処理ユニット
５ａ コンピュータ
５１ 本体
５１ａ ＣＰＵ
５１ｂ ＲＯＭ
５１ｃ ＲＡＭ
５１ｄ ハードディスク
５１ｈ 画像出力インタフェース
５２ 画像表示部
５４ａ コンピュータプログラム
ＭＣ１ 第１混合チャンバ
ＭＣ２ 第２混合チャンバ
Ｈ ヒータ
Ｄ 光学検出器
Ｒ１，Ｒ２,Ｒ３ 分析結果画面
ＳＬ１，ＳＬ２,ＳＬ３ スキャッタグラム
ＳＮ１，ＳＮ２,ＳＮ３ スキャッタグラム
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液検体を光学的に測定し、血液検体に含まれる細胞群を複数に分類する血液分析装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
末梢血液の血漿中には、赤血球、血小板、及び白血球が浮遊している。これらの細胞を検査する血液検査によれば、多くの臨床情報を提供することができるため、多数の検体が検査されている。血液検査には血球計数装置が用いられており、これにより血液中の赤血球数、血小板数、白血球数、ヘモグロビン濃度等が自動的に測定される。
【０００３】
正常な末梢血液中にはリンパ球、単球、好塩基球、好酸球、及び好中球の５種類の白血球が存在し、多くの血球計数装置は血液検体中の白血球をかかる５つの種類に分類する機能を有している。一方、造血器腫瘍等の疾患においては、正常な血液中には存在しない細胞が出現する。例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）では、末梢血液中に多数のリンパ芽球が出現する。このため、末梢血液中のリンパ芽球の検出は、急性リンパ性白血病の診断を行う上で極めて有用である。
【０００４】
特許文献１には、１）血液試料中の赤血球を測定の障害とならない程度に溶解し、正常又は異常細胞を染色に好適な状態にする溶血剤と混合する工程と、２）前記１）で調製した試料と、特定の構造式で表される細胞中のＲＮＡに特異的に結合し蛍光強度を増加する色素と混合することにより血液試料中の有核細胞を蛍光染色する工程と、３）前記２）で調製した測定試料をフローサイトメータで測定し、散乱光及び蛍光を測定する工程、４）前記３）で測定した散乱光と蛍光の強度さを用いて正常な白血球を少なくとも５つに分類計数する工程と、からなる白血球分類方法が開示されている。この特許文献１には、異型リンパ球を正常白血球と明確に分離し、分類計数することが開示されている。
【０００５】
特許文献２には、所定の細胞マーカーに対する抗体を使用して、骨髄球系細胞及びＢリンパ球系細胞の文化成熟段階を分類する血液細胞の分類方法が開示されている。かかる特許文献２には、側方散乱光と、蛍光標識ＣＤ４５抗体とを用いて、リンパ芽球を分類することが開示されている。
【０００６】
特許文献３には、細胞核、特にＤＮＡに対して特異性を有する色素あるいはＲＮＡに特異性を有する色素により細胞を染色し、このようにして調製された試料をフローサイトメータに導入し、試料中の染色された細胞のそれぞれについて、散乱光と蛍光を測定し、散乱光ピークの強度差と散乱光幅の差を用いて、血小板凝集及び同時通過細胞と白血球とを分類し、分類された成分の散乱光の強度差と蛍光の強度差を用いて、成熟白血球、ＤＮＡ量異常白血球及び幼若白血球に分類計数する白血球の分類計数方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−３１９０１０号公報
【特許文献２】特開２００７−２６３９５８号公報
【特許文献３】国際公開第ＷＯ２００４／００１４０８号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、上記特許文献１に開示されている白血球分類方法にあっては、異型リンパ球を正常白血球と分類し、計数することはできるが、リンパ芽球を検出することはできない。
【０００９】
また、上記特許文献２に開示されている血球細胞の分類方法にあっては、高価な蛍光標識抗体を測定に使用する必要があり、測定コストが嵩むという問題がある。
【００１０】
また、上記特許文献３に開示されている白血球の分類計数方法にあっては、リンパ芽球を含むＤＮＡ量異常白血球を分類計数することが可能であるが、ＤＮＡ量異常白血球にはリンパ芽球以外の細胞も含まれるため、リンパ芽球が存在するか否かを正確に検出することはできない。
【００１１】
本発明は斯かる事情に鑑みてなされたものであり、その主たる目的は、高価な蛍光標識抗体を用いることなく、リンパ芽球を検出することが可能な血液分析装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上述した課題を解決するために、本発明の一の態様の血液分析装置は、血液検体を供給する血液検体供給部と、前記血液検体供給部から供給された血液検体と、核酸を染色する蛍光色素とを混合して測定試料を調製する試料調製部と、前記測定試料に光を照射する光源と、前記光が照射された測定試料から発せられる蛍光を受光する光学検出部と、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群を検出する情報処理手段と、前記情報処理手段による検出結果に基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現に関する情報を出力する出力手段と、を備える。
【００１３】
この態様においては、前記血液検体供給部が、血液検体から分割された第１血液検体及び第２血液検体を供給するように構成されており、前記試料調製部が、前記第１血液検体と、第１溶血剤及び前記蛍光色素である第１蛍光色素とを混合して第１測定試料を調製し、前記第２血液検体と、前記第１溶血剤とは異なる第２溶血剤及び核酸を染色する第２蛍光色素とを混合して第２測定試料を調製するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第１測定試料に光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記蛍光に応じた第１信号を出力し、前記光源が前記第２測定試料に光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記散乱光及び蛍光に応じた第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記光学検出部が出力した前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む前記細胞群を検出し、前記光学検出部が出力した前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を検出するように構成されており、前記出力手段が、前記情報処理手段による前記第１信号に基づく前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に係る検出結果並びに前記前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１４】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１５】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数が有核赤血球の数よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１６】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数が所定値よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１７】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記リンパ芽球の計数結果を出力するように構成されていることが好ましい。
【００１８】
また、上記態様においては、前記光源が、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、前記光学検出部が、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、前記情報処理手段が、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、前記出力手段が、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数を、前記リンパ芽球の計数結果として出力するように構成されていることが好ましい。
【００１９】
また、上記態様においては、前記血液分析装置が、前記血液検体に含まれる有核赤血球に係る検出結果に関する情報を入力するための入力手段をさらに備え、前記出力手段が、前記情報処理手段による検出結果及び前記入力手段に入力された有核赤血球の出現に関する情報に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００２０】
また、上記態様においては、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む第１細胞群と、前記測定試料中に含まれる骨髄芽球及び幼若顆粒球を含む第２細胞群とを検出するように構成されており、前記出力手段が、前記血液検体における骨髄芽球の出現に関する情報、及び前記血液検体における幼若顆粒球の出現に関する情報をさらに出力するように構成されていることが好ましい。
【００２１】
また、上記態様においては、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出するように構成されており、前記出力手段が、成熟白血球の出現に関する情報を出力するように構成されていることが好ましい。
【００２２】
また、上記態様においては、前記光学検出部が、さらに前記光が照射された測定試料から発せられる散乱光を受光するように構成されており、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第２細胞群を、骨髄芽球を含む細胞群と、幼若顆粒球を含む細胞群とにさらに検出するように構成されていることが好ましい。
【００２３】
また、上記態様においては、前記情報処理手段が、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出し、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第３細胞群を、少なくとも３種類の成熟白血球に分類するように構成されていることが好ましい。
【００２４】
また、上記態様においては、前記光学検出部が、前記散乱光として、前記光が照射された測定試料から発せられる前方散乱光又は側方散乱光を受光するように構成されていることが好ましい。
【発明の効果】
【００２５】
本発明に係る血液分析装置によれば、蛍光標識抗体を用いることなく、リンパ芽球を検出することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】実施の形態に係る血液分析装置の外観を示す斜視図。
【図２】検体容器の外観を示す斜視図。
【図３】サンプルラックの外観を示す斜視図。
【図４】実施の形態に係る測定ユニットの構成を示すブロック図。
【図５】光学検出器の概要構成を示す模式図。
【図６】実施の形態に係る検体搬送ユニットの構成を示す平面図。
【図７】検体搬送ユニットの第１ベルトの構成を示す正面図。
【図８】検体搬送ユニットの第２ベルトの構成を示す正面図。
【図９】実施の形態に係る情報処理ユニットの構成を示すブロック図。
【図１０】実施の形態に係る血液分析装置の第１測定工程での動作手順を示すフローチャート。
【図１１】実施の形態に係る血液分析装置の第２測定工程での動作手順を示すフローチャート。
【図１２】実施の形態に係る血液分析装置のデータ処理工程での処理手順を示すフローチャート。
【図１３Ａ】第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１３Ｂ】第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１４】第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１５Ａ】実施の形態に係る血液分析装置の分析結果画面の一例を示す図。
【図１５Ｂ】実施の形態に係る血液分析装置の分析結果画面の他の例を示す図。
【図１５Ｃ】実施の形態に係る血液分析装置の分析結果画面のさらに他の例を示す図。
【図１６Ａ】リンパ芽球を含むが有核赤血球を含まない血液検体の第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１６Ｂ】リンパ芽球を含むが有核赤血球を含まない血液検体の第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１７】リンパ芽球を含むが有核赤血球を含まない血液検体の第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１８Ａ】有核赤血球を含むがリンパ芽球を含まない血液検体の第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１８Ｂ】有核赤血球を含むがリンパ芽球を含まない血液検体の第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【図１９】有核赤血球を含むがリンパ芽球を含まない血液検体の第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、本発明の好ましい実施の形態を、図面を参照しながら説明する。
【００２８】
本実施の形態は、血液検体と、核酸を染色する蛍光色素とを混合して測定試料を調製し、前記測定試料を光学式フローサイトメータにより測定することにより、前記血液検体中におけるリンパ芽球を検出する血液分析装置である。
【００２９】
［血液分析装置の構成］
図１は、本実施の形態に係る血液分析装置の外観を示す斜視図である。本実施の形態に係る血液分析装置１は、血液検体に含まれる血球を白血球、赤血球、血小板等を検出し、各血球を計数する多項目血球分析装置である。図１に示すように、血液分析装置１は、測定ユニット２と、測定ユニット２の前面側に配置された検体搬送ユニット４と、測定ユニット２及び検体搬送ユニット４を制御可能な情報処理ユニット５とを備えている。
【００３０】
図２は、検体を収容する検体容器の外観を示す斜視図であり、図３は、複数の検体容器を保持するサンプルラックの外観を示す斜視図である。図２に示すように、検体容器Ｔは、管状をなしており、上端が開口している。内部には患者から採取された血液検体が収容され、上端の開口は蓋部ＣＰにより密封されている。検体容器Ｔは、透光性を有するガラス又は合成樹脂により構成されており、内部の血液検体が視認可能となっている。また、検体容器Ｔの側面には、バーコードラベルＢＬ１が貼付されている。このバーコードラベルＢＬ１には、検体ＩＤを示すバーコードが印刷されている。サンプルラックＬは、１０本の検体容器Ｔを並べて保持することが可能である。サンプルラックＬでは、各検体容器Ｔが垂直状態（立位状態）で保持される。また、サンプルラックＬの側面には、バーコードラベルＢＬ２が貼付されている。このバーコードラベルＢＬ２には、ラックＩＤを示すバーコードが印刷されている。
【００３１】
＜測定ユニットの構成＞
次に、測定ユニットの構成について説明する。図４は、測定ユニットの構成を示すブロック図である。図４に示すように、測定ユニット２は、検体である血液を検体容器（採血管）Ｔから吸引する検体吸引部２１と、検体吸引部２１により吸引した血液から測定に用いられる測定試料を調製する試料調製部２２と、試料調製部２２により調製された測定試料から血球を検出する検出部２３とを有している。また、測定ユニット２は、検体搬送ユニット４のラック搬送部４３によって搬送されたサンプルラックＬに収容された検体容器Ｔを測定ユニット２の内部に取り込むための取込口（図１参照）と、サンプルラックＬから検体容器Ｔを測定ユニット２の内部に取り込み、検体吸引部２１による吸引位置まで検体容器Ｔを搬送する検体容器搬送部２５とをさらに有している。
【００３２】
図４に示すように、検体吸引部２１は、吸引管２１１を有している。また、検体吸引部２１はシリンジポンプ（図示せず）を備えている。また、吸引管２１１は、鉛直方向に移動可能であり、下方に移動されることにより、吸引位置まで搬送された検体容器Ｔの蓋部ＣＰを前記吸引管が貫通し、内部の血液を吸引するように構成されている。
【００３３】
試料調製部２２は、第１混合チャンバＭＣ１及び第２混合チャンバＭＣ２を備えている。吸引管２１１は、シリンジポンプ（図示せず）によって検体容器Ｔから所定量の全血検体を吸引し、吸引された検体は、第１混合チャンバＭＣ１と第２混合チャンバＭＣ２の位置へ移送され、前記シリンジポンプによって、それぞれのチャンバＭＣ１，ＭＣ２へ所定量の全血検体を分配供給する。また、試料調製部２２は、第１混合チャンバＭＣ１及び第２混合チャンバＭＣ２を加温するためのヒータＨを備えている。
【００３４】
試料調製部２２は、第１試薬を収容する試薬容器２２１、第２試薬を収容する試薬容器２２２ａ、第３試薬を収容する試薬容器２２２ｂ、及びシース液（希釈液）を収容する試薬容器２２３にチューブを介して接続されている。また、試料調製部２２は、図示しないコンプレッサに接続されており、当該コンプレッサにより発生される圧力により試薬容器２２１，２２２ａ，２２２ｂ，２２３からそれぞれの試薬を分取することが可能となっている。
【００３５】
第１試薬は、リンパ芽球と有核赤血球とからなる血球群（以下、「リンパ芽球／有核赤血球群」という）を検出するための試薬である。かかる第１試薬には、溶血剤及び蛍光色素が含有されている。第１試薬に含まれる溶血剤としては、白血球の測定に使用される公知の溶血剤が使用できる。この溶血剤を使用することで、赤血球及び成熟白血球の細胞膜に損傷を与え、損傷した血球を収縮できる。より具体的には、溶血剤には、赤血球及び成熟白血球の細胞膜に損傷を与える界面活性剤と、損傷した血球を収縮させる可溶化剤が含まれている。
【００３６】
ここで、溶血剤に含まれる界面活性剤としては、非イオン性界面活性剤が好ましい。非イオン性界面活性剤としては、ポリオキシエチレン系ノニオン界面活性剤が好ましい。具体的なポリオキシエチレン系ノニオン界面活性剤としては、以下の構造式（Ｉ）
Ｒ１−Ｒ２−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｈ
（Ｉ）
（式中、Ｒ１は炭素数９〜２５のアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基であり、Ｒ２は−Ｏ−、−ＣＯＯ−又は
【化１】
であり、ｎは１０〜４０の整数である）
で示されるものが挙げられる。
【００３７】
上記の構造式（Ｉ）で表される具体的な界面活性剤としては、ポリオキシエチレン（１５）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（１５）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（１６）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテルなど挙げられ、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテルが好ましい。なお、溶血剤は、界面活性剤を１種類又は２種類以上含むことができる。
【００３８】
第１試薬に含まれる界面活性剤の濃度は、界面活性剤の種類又は溶血剤の浸透圧等に応じて適宜選択できる。例えば、界面活性剤がポリオキシエチレンオレイルエーテルである場合、第１試薬に含まれる界面活性剤の濃度は、０．５〜５０．０ｇ／Ｌであり、好ましくは１．０〜２０．０ｇ／Ｌである。
【００３９】
溶血剤に含まれる可溶化剤としては、サルコシン誘導体、コール酸誘導体、メチルグルカンアミド、ｎ−オクチルβ−グルコシド、シュークロースモノカプレート、Ｎ−ホルミルメチルロイシルアラニンなどが挙げられ、特にサルコシン誘導体が好ましい。なお、溶血剤は、可溶化剤を１種類又は２種類以上含むことができる。
【００４０】
サルコシン誘導体としては、以下の構造式（ＩＩ）
【化２】
（式中、Ｒ１はＣ１０−２２のアルキル基であり、ｎは１〜５である。）
で示される化合物及びその塩が挙げられる。具体的なサルコシン誘導体としては、Ｎ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウム、ラウロイルメチルβ−アラニンナトリウム、ラウロイルサルコシンなどが挙げられ、特にＮ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウムが好ましい。
【００４１】
コール酸誘導体としては、以下の構造式（ＩＩＩ）
【化３】
（式中、Ｒ１は水素原子又は水酸基である。）
で示される化合物及びその塩が挙げられる。具体的なコール酸誘導体としては、ＣＨＡＰＳ（３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート）、ＣＨＡＰＳＯ（［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート）などが挙げられる。
【００４２】
メチルグルカンアミドとしては、以下の構造式（ＩＶ）
【化４】
（式中、ｎは５〜７である。）
で示される化合物が挙げられる。具体的なメチルグルカンアミドとしては、ＭＥＧＡ８（オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド）、ＭＥＧＡ９（ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド）、ＭＥＧＡ１０（デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド）などが挙げられる。
【００４３】
第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、用いる可溶化剤の種類に応じて適宜選択できる。例えば、可溶化剤としてサルコシン誘導体を用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、０．０５〜３．０ｇ／Ｌであり、好ましくは０．１〜１．０ｇ／Ｌである。コール酸誘導体を用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、０．１〜１０．０ｇ／Ｌであり、好ましくは０．２〜２．０ｇ／Ｌである。メチルグルカンアミドを用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、１．０〜８．０ｇ／Ｌであり、好ましくは２．０〜６．０ｇ／Ｌである。ｎ−オクチルβ−グルコシド、シュークロースモノカプレート、Ｎ−ホルミルメチルロイシルアラニンを用いる場合、第１試薬に含まれる可溶化剤の濃度は、０．０１〜５０．０ｇ／Ｌであり、好ましくは０．０５〜３０．０ｇ／Ｌである。
【００４４】
第１試薬に含まれる核酸を染色できる蛍光色素としては、核酸を蛍光染色できるものであれば特に限定されない。このような色素を用いることにより、核酸を持たない赤血球はほとんど染色されず、核酸を有するリンパ芽球及び有核赤血球等の有核の血球は染色される。なお、核酸を染色できる蛍光色素は、光源から照射される光によって適宜選択することができる。具体的な核酸を染色できる蛍光色素としては、例えば、プロピジウムアイオダイド、エチジウムブロマイド、エチジウム−アクリジンヘテロダイマー、エチジウムジアジド、エチジウムホモダイマー−１、エチジウムホモダイマー−２、エチジウムモノアジド、トリメチレンビス［［３‐［［４‐［［（３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム）‐２‐イル］メチレン］‐１，４‐ジヒドロキノリン］‐１‐イル］プロピル］ジメチルアミニウム］・テトラヨージド（ＴＯＴＯ−１）、４‐［（３‐メチルベンゾチアゾール‐２（３Ｈ）‐イリデン）メチル］‐１‐［３‐（トリメチルアミニオ）プロピル］キノリニウム・ジヨージド（ＴＯ−ＰＲＯ−１）、Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'‐テトラメチル‐Ｎ，Ｎ'‐ビス［３‐［４‐［３‐［（３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム）‐２‐イル］‐２‐プロペニリデン］‐１，４‐ジヒドロキノリン‐１‐イル］プロピル］‐１，３‐プロパンジアミニウム・テトラヨージド（ＴＯＴＯ−３）、又は２‐［３‐［［１‐［３‐（トリメチルアミニオ）プロピル］‐１，４‐ジヒドロキノリン］‐４‐イリデン］‐１‐プロペニル］‐３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム・ジヨージド（ＴＯ−ＰＲＯ−３）、及び以下の構造式（Ｖ）〜（ＸＩＩＩ）で示される蛍光色素が挙げられる。
【００４５】
＜構造式（Ｖ）＞
【化５】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、低級アルキル基であり；ｎは１又は２であり；Ｘ−はアニオンであり；Ｚは硫黄原子、酸素原子、又は低級アルキル基で置換された炭素原子である）。
【００４６】
構造式（Ｖ）中、低級アルキル基とは炭素数１〜６の直鎖又は分枝のアルキル基である。具体的な低級アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられ、メチル基、エチル基が好ましい。また、Ｚとしては、硫黄原子が好ましい。Ｘ−におけるアニオンは、ハロゲンイオン（フッ素、塩素、臭素又はヨウ素イオン）、ハロゲン化ホウ素イオン（ＢＦ４−、ＢＣｌ４−、ＢＢｒ４−など）、リン化合物イオン、ハロゲン酸素酸イオン、フルオロ硫酸イオン、メチル硫酸イオン、芳香環ハロゲン或いはハロゲンをもつアルキル基を置換基として有するテトラフェニルホウ素化合物イオンなどが挙げられ、ヨウ素イオンが好ましい。
【００４７】
構造式（Ｖ）で示されるもののうち、特に好ましい核酸を染色できる蛍光色素は、次の構造式で示されるＮＫ−３２１である。
【化６】
【００４８】
＜構造式（ＶＩ）＞
【化７】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、低級アルキル基であり；ｎは１又は２であり；Ｘ−はアニオンである）。
【００４９】
構造式（ＩＩ）における低級アルキル基、並びにＸ−のアニオンは、構造式（Ｉ）と同様である。
【００５０】
構造式（ＶＩ）で示されるもののうち、特に好ましい核酸を染色できる蛍光色素は、次の構造式により示される。
【化８】
【００５１】
＜構造式（ＶＩＩ）＞
【化９】
（式中、Ｒ１は水素原子又は低級アルキル基であり；Ｒ２及びＲ３は水素原子、低級アルキル基又は低級アルコキシ基であり；Ｒ４は水素原子、アシル基又は低級アルキル基であり；Ｒ５は水素原子又は置換されていてもよい低級アルキル基であり；Ｚは硫黄原子、酸素原子、又は低級アルキル基で置換された炭素原子であり；ｎは１又は２であり；Ｘ−はアニオンである）。
【００５２】
構造式（ＶＩＩ）における低級アルキル基、並びにＸ−のアニオンは、構造式（Ｖ）と同様である。低級アルコキシ基は、炭素数１〜６のアルコキシ基を示す。具体的な低級アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基等が挙げられ、特にメトキシ基、エトキシ基が好ましい。アシル基としては、脂肪族カルボン酸から誘導されたアシル基が好ましい。具体的なアシル基としては、アセチル基、プロピオニル基等が挙げられ、特にアセチル基が好ましい。置換されていてもよい低級アルキル基の置換基としては、水酸基やハロゲン原子（フッ素、塩素、臭素又はヨウ素）が挙げられる。置換されていてもよい低級アルキル基は、１〜３個の置換基で置換されることができる。置換されていてもよい低級アルキル基としては、特に１個の水酸基で置換された低級アルキル基が好ましい。なお、Ｚとしては硫黄原子が好ましく、Ｘ−は、臭素イオン又はＢＦ４−が好ましい。
【００５３】
構造式（ＶＩＩ）で示されるもののうち、特に好ましい核酸を染色できる蛍光色素は、以下の３つの構造式により示される。
【化１０】
【００５４】
【化１１】
【００５５】
【化１２】
【００５６】
＜構造式（ＶＩＩＩ）＞
【化１３】
（式中、Ｘ１及びＸ２は、独立してＣｌ又はＩである）
【００５７】
＜構造式（ＩＸ）＞
【化１４】
【００５８】
＜構造式（Ｘ）＞（ＮＫ−１５７０）
【化１５】
【００５９】
＜構造式（ＸＩ）＞（ＮＫ−１０４９）
【化１６】
【００６０】
＜構造式（ＸＩＩ）＞（ＮＫ−９８）
【化１７】
【００６１】
＜構造式（ＸＩＩＩ）＞（ＮＫ−１４１）。
【化１８】
【００６２】
上記の核酸を染色できる蛍光色素のうち、第１試薬に含まれる特に好ましい蛍光色素は、次の構造式で示されるＮＫ−３２１である。
【化１９】
【００６３】
上記の核酸を染色できる蛍光色素の第１試薬中の濃度は、１０〜５００ｍｇ／Ｌが好ましく、特に３０〜１００ｍｇ／Ｌが好ましい。なお、第１試薬は、核酸を染色できる蛍光色素を１種類又は２種類以上含むことができる。
【００６４】
第１試薬のｐＨは、５．０〜９．０が好ましく、より好ましくは６．５〜７．５、さらに好ましくは６．８〜７．３である。第１試薬のｐＨは、緩衝剤やｐＨ調整剤で調整できる。緩衝剤としては、例えばＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳ（3-morpholinopropanesulfonic acid）又はＭＯＰＳＯ（2-Hydroxy-3-morpholinopropanesulfonic
acid）などのグッド緩衝剤、リン酸緩衝剤などが挙げられる。ｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウムや塩酸などが挙げられる。
【００６５】
第１試薬の浸透圧は、上述の界面活性剤の種類や第１試薬中の濃度に応じて、適宜設定することができる。具体的な第１試薬の浸透圧としては、１０〜６００ｍＯｓｍ／ｋｇが挙げられる。また、第１試薬の浸透圧は、糖類、アミノ酸、塩化ナトリウムなどを第１試薬に添加することにより調整してもよい。具体的な糖類としては、単糖類、多糖類、糖アルコールなどが挙げられる。単糖類としては、グルコース、フルクトースが好ましい。多糖類としては、アラビノースが好ましい。糖アルコールとしては、キシリトール、ソルビトール、マンニトール、リビトールが好ましい。ここで、第１試薬に添加する糖類としては、糖アルコールが好ましく、特にキシリトールが好ましい。キシリトールを第１試薬に添加する場合、キシリトールの第１試薬中の濃度は、１．０〜７５．０ｇ／Ｌ、特に２０．０〜５０．０ｇ／Ｌが好ましい。具体的なアミノ酸としては、バリン、プロリン、グリシン、アラニンなどが挙げられ、特にグリシン、アラニンが好ましい。グリシンを第１試薬に添加する場合、グリシンの第１試薬中の濃度は、１．０〜５０．０ｇ／Ｌ、特に１０．０〜３０．０ｇ／Ｌが好ましい。
【００６６】
また、第１試薬の電気伝導度は、０．０１〜３ｍＳ／ｃｍが好ましく、特に０．１〜２ｍＳ／ｃｍが好ましい。さらに第１試薬には、キレート剤や防腐剤などを添加することもできる。キレート剤としては、ＥＤＴＡ−２Ｋ、ＥＤＴＡ−３Ｎａなどが挙げられる。防腐剤としては、Ｐｒｏｘｅｌ ＧＸＬ（Avecia社製）、マテリアルＴＫＭ−Ａ（株式会社エーピーアイ コーポレーション）などが挙げられる。
【００６７】
第２試薬は、有核赤血球（ＮＲＢＣ）測定用の溶血剤である。このＮＲＢＣ測定用の溶血剤としては、例えばシスメックス（株）製ストマトライザーＮＲ溶血剤が挙げられる。また、第３試薬は、ＮＲＢＣ測定用の染色液である。このＮＲＢＣ測定用の染色液としては、例えばシスメックス（株）製ストマトライザーＮＲ染色液が挙げられる。第４試薬は、後述するシースフローセルへと供給されるシース液である。かかるシース液は、希釈液としても使用される。このシース液としては、例えばシスメックス（株）製セルパック（II）が挙げられる。
【００６８】
検出部２３は、ＷＢＣ測定（白血球計数）及びＤＩＦＦ測定（白血球分類）を行うことができる光学検出器Ｄを有している。この光学検出器Ｄは、ＷＢＣ（成熟白血球）、ＮＲＢＣ（有核赤血球）、及びリンパ芽球（Ｌ−Ｂｌａｓｔ）の検出を、半導体レーザを使用したフローサイトメトリー法により行うことが可能であるように構成されている。また、この検出部２３を使用することにより、白血球を、ＮＥＵＴ（好中球）、ＬＹＭＰＨ（リンパ球）、ＥＯ（好酸球）、ＢＡＳＯ（好塩基球）、及びＭＯＮＯ（単球）の５種類に分類することが可能となっている。リンパ芽球／有核赤血球群の測定を行うときには、血液検体と第１試薬とが混合された測定試料（Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料）が光学検出器Ｄに供給され、ＮＲＢＣの測定を行うときには、血液検体と第２試薬と第３試薬とが混合された測定試料（ＮＲＢＣ測定試料）が光学検出器Ｄに供給される。
【００６９】
図５は、光学検出器Ｄの概要構成を示している。この光学検出器Ｄは、フローセル２３１に測定試料及びシース液を送り込み、フローセル２３１中に液流を発生させ、フローセル２３１内を通過する液流に含まれる血球に半導体レーザ光を照射して測定するものであり、シースフロー系２３２、ビームスポット形成系２３３、前方散乱光受光系２３４、側方散乱光受光系２３５、側方蛍光受光系２３６を有している。
【００７０】
シースフロー系２３２は、フローセル２３１内を測定試料がフローセル２３１内をシース液に包まれた状態で流すように構成されている。ビームスポット形成系２３３は、半導体レーザ２３７から照射された光が、コリメータレンズ２３８とコンデンサレンズ２３９とを通って、フローセル２３１に照射されるよう構成されている。また、ビームスポット形成系２３３は、ビームストッパ２４０も備えている。
【００７１】
前方散乱光受光系２３４は、前方への散乱光を前方集光レンズ２４１によって集光し、ピンホール２４２を通った光をフォトダイオード（前方散乱光受光部）２４３で受光するように構成されている。
【００７２】
側方散乱光受光系２３５は、側方への散乱光を側方集光レンズ２４４にて集光するとともに、一部の光をダイクロイックミラー２４５で反射させ、フォトダイオード（側方散乱光受光部）２４６で受光するよう構成されている。
【００７３】
光散乱は、光の進行方向に血球のような粒子が光の進行方向に障害物として存在すると、粒子により光がその進行方向を変えることによって生じる現象である。この散乱光を検出することによって、粒子の大きさや材質に関する情報を得ることができる。特に、前方散乱光からは、粒子（血球）の大きさに関する情報を得ることができる。また、側方散乱光からは、粒子内部の情報を得ることができる。血球粒子にレーザ光が照射された場合、側方散乱光強度は細胞内部の複雑さ（核の形状、大きさ、密度や顆粒の量）に依存する。したがって、これら散乱光強度は、リンパ芽球／有核赤血球群の測定、有核赤血球の測定、及び白血球の分類その他の測定に利用することができる。
【００７４】
側方蛍光受光系２３６は、ダイクロイックミラー２４５を透過した光をさらに分光フィルタ２４７に通し、アバランシェフォトダイオード（蛍光受光部）２４８で受光するよう構成されている。
【００７５】
蛍光物質により染色された血球に光を照射すると、照射した光の波長より長い波長の光を発する。蛍光の強度はよく染色されていれば強くなり、この蛍光強度を測定することによって血球の染色度合いに関する情報を得ることができる。したがって、（側方）蛍光強度の差は、リンパ芽球／有核赤血球群の測定、有核赤血球の測定、及び白血球の分類その他の測定に利用することができる。
【００７６】
次に、図４に戻って、検体容器搬送部２５の構成について説明する。検体容器搬送部２５は、検体容器Ｔを把持可能なハンド部２５ａを備えている。ハンド部２５ａは、互いに対向して配置された一対の把持部材を備えており、この把持部材を互いに近接及び離反させることが可能である。かかる把持部材を、検体容器Ｔを挟んだ状態で近接させることにより、検体容器Ｔを把持することができる。また、検体容器搬送部２５は、ハンド部２５ａを上下方向及び前後方向（Ｙ方向）に移動させることができ、さらに、ハンド部２５ａを揺動させることができる。これにより、サンプルラックＬに収容され、検体供給位置４３ａに位置した検体容器Ｔをハンド部２５ａにより把持し、その状態でハンド部２５ａを上方に移動させることによりサンプルラックＬから検体容器Ｔを抜き出し、ハンド部２５ａを揺動させることにより、検体容器Ｔ内の検体を撹拌することができる。
【００７７】
また、検体容器搬送部２５は、検体容器Ｔを挿入可能な穴部を有する検体容器セット部２５ｂを備えている。上述したハンド部２５ａによって把持された検体容器Ｔは、撹拌完了後移動され、把持した検体容器Ｔを検体容器セット部２５ｂの穴部に挿入する。その後、把持部材を離反させることにより、ハンド部２５ａから検体容器Ｔが開放され、検体容器セット部２５ｂに検体容器Ｔがセットされる。かかる検体容器セット部２５ｂは、図示しないステッピングモータの動力によって、図中Ｙ１及びＹ２方向へ水平移動可能である。
【００７８】
測定ユニット２の内部には、バーコード読取部２６が設けられている。検体容器セット部２５ｂは、バーコード読取部２６の近傍のバーコード読取位置２６ａ及び検体吸引部２１による吸引位置２１ａへ移動可能である。検体容器セット部２５ｂがバーコード読取位置２６ａへ移動したときには、セットされた検体容器Ｔが図示しない回転機構により水平回転され、バーコード読取部２６により検体バーコードが読み取られる。これにより、検体容器ＴのバーコードラベルＢＬ１がバーコード読取部２６に対して反対側に位置する場合でも、検体容器Ｔを回転させることにより、バーコードラベルＢＬ１をバーコード読取部２６へ向けることができ、バーコード読取部２６に検体バーコードを読み取らせることが可能である。また、検体容器セット部２５ｂが吸引位置へ移動したときには、検体吸引部２１により、セットされた検体容器Ｔから検体が吸引される。
【００７９】
＜検体搬送ユニットの構成＞
次に、検体搬送ユニット４の構成について説明する。図１に示すように、血液分析装置１の測定ユニット２の前方には、検体搬送ユニット４が配置されている。かかる検体搬送ユニット４は、測定ユニット２へ検体を供給するために、サンプルラックＬを搬送することが可能である。
【００８０】
図６は、検体搬送ユニット４の構成を示す平面図である。図６に示すように、検体搬送ユニット４は、分析が行われる前の検体を収容する検体容器Ｔを保持する複数のサンプルラックＬを保持することが可能な分析前ラック保持部４１と、測定ユニット２によって検体が吸引された検体容器Ｔを保持する複数のサンプルラックＬを保持することが可能な分析後ラック保持部４２と、検体を測定ユニット２に供給するために、サンプルラックＬを図中矢印Ｘ１方向又はＸ２方向へ水平に直線移動させ、分析前ラック保持部４１から受け付けたサンプルラックＬを分析後ラック保持部４２へ搬送するラック搬送部４３とを備えている。
【００８１】
分析前ラック保持部４１は、平面視において四角形をなしており、その幅はサンプルラックＬの幅より若干大きくなっている。この分析前ラック保持部４１は、周囲の面よりも一段低く形成されており、その上面に分析前のサンプルラックＬが載置される。また、分析前ラック保持部４１の両側面からは、内側へ向けてラック送込部４１ｂが突出可能に設けられている。このラック送込部４１ｂが突出することによりサンプルラックＬと係合し、この状態で後方（ラック搬送部４３に近接する方向）へ移動することにより、サンプルラックＬが後方へと移送される。かかるラック送込部４１ｂは、分析前ラック保持部４１の下方に設けられた図示しないステッピングモータによって駆動可能に構成されている。
【００８２】
ラック搬送部４３は、図６に示すように、分析前ラック保持部４１によって移送されたサンプルラックＬを、前記Ｘ方向へと移送可能となっている。このラック搬送部４３によるサンプルラックＬの搬送経路上には、図４に示すように、測定ユニット２へ検体を供給するための検体供給位置４３ａが存在する。検体搬送ユニット４は情報処理ユニット５によって制御され、検体供給位置４３ａに検体を搬送する。このとき、測定ユニット２のハンド部２５ａが搬送された検体容器Ｔを把持し、サンプルラックＬから検体容器Ｔを取り出すことで検体の供給が完了する。また、測定ユニット２から検体容器ＴをサンプルラックＬに返還する場合には、ラック搬送部４３は、検体容器Ｔが取り込まれたときから搬送を待機するか、他の位置へとサンプルラックＬを搬送した後、検体容器Ｔが測定ユニット２に取り込まれたことにより空きとなった保持位置を検体供給位置４３ａに位置させるようにサンプルラックＬを搬送する。これにより、検体容器Ｔが挿入されていない保持位置が検体供給位置４３ａに位置している状態で、ハンド部２５ａが、確実に検体容器ＴをサンプルラックＬへと戻すことが可能である。
【００８３】
また、ラック搬送部４３は、図６に示すように、それぞれ独立して動作可能な第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２の２つのベルトを有している。また、第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２の矢印Ｙ方向の幅ｂ１，ｂ２は、それぞれサンプルラックＬの矢印Ｙ方向の幅Ｂの半分以下の大きさである。かかる第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２は、ラック搬送部４３がサンプルラックＬを搬送するときにサンプルラックＬの幅Ｂからはみ出ないように並列に配置されている。図７は、第１ベルト４３１の構成を示す正面図であり、図８は、第２ベルト４３２の構成を示す正面図である。図７及び図８に示すように、第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２は、それぞれ環状に形成されており、第１ベルト４３１はローラ４３１ａ〜４３１ｃを取り囲むように配置され、第２ベルト４３２はローラ４３２ａ〜４３２ｃを取り囲むように配置されている。また、第１ベルト４３１の外周部には、サンプルラックＬのＸ方向の幅Ｗよりも若干（例えば、１ｍｍ）大きい内幅ｗ１を有するように２つの突起片４３１ｄが設けられており、同様に、第２ベルト４３２の外周部には、前記内幅ｗ１と同程度の内幅ｗ２を有するように２つの突起片４３２ｄが設けられている。第１ベルト４３１は、２つの突起片４３１ｄの内側にサンプルラックＬを保持した状態において、ステッピングモータ（図示せず）によりローラ４３１ａ〜４３１ｃの外周を移動されることによって、サンプルラックＬを矢印Ｘ方向に移動するように構成されている。第２ベルト４３２は、２つの突起片４３２ｄの内側にサンプルラックＬを保持した状態において、ステッピングモータ（図示せず）によりローラ４３２ａ〜４３２ｃの外周を移動されることによって、サンプルラックＬを矢印Ｘ方向に移動するように構成されている。また、第１ベルト４３１及び第２ベルト４３２は、互いに独立してサンプルラックＬを移送可能に構成されている。
【００８４】
図４に示すように、ラック搬送部４３の搬送路上に検体容器センサ４５が設けられている。検体容器センサ４５は、接触型のセンサであり、のれん形状の接触片、光を出射する発光素子、及び受光素子（図示せず）を有している。検体容器センサ４５は、接触片が検出対象の被検出物に当接することにより屈曲され、その結果、発光素子から出射された光が接触片により反射されて受光素子に入射するように構成されている。これにより検体容器センサ４５の下方をサンプルラックＬに収容された検出対象の検体容器Ｔが通過する際に、接触片が検体容器Ｔにより屈曲されて、検体容器Ｔを検出することが可能である。
【００８５】
図４に示すように、ラック搬送部４３を挟んで後述する分析後ラック保持部４２に対向するようにラック送出部４６が配置されている。かかるラック送出部４６は、図示しないステッピングモータの駆動力により矢印Ｙ方向に水平に直線移動するように構成されている。これにより、分析後ラック保持部４２とラック送出部４６との間の位置４６１（以下、「分析後ラック送出位置」という。）にサンプルラックＬが搬送された場合に、ラック送出部４６を分析後ラック保持部４２側に移動することによって、サンプルラックＬを押動させて分析後ラック保持部４２内に移動することが可能である。
【００８６】
分析後ラック保持部４２は、平面視において四角形をなしており、その幅はサンプルラックＬの幅より若干大きくなっている。この分析後ラック保持部４２は、周囲の面よりも一段低く形成されており、その上面に分析が完了したサンプルラックＬが載置される。分析後ラック保持部４２は、上記のラック搬送部４３に連なっており、上述したように、ラック送出部４６によって、ラック搬送部４３からサンプルラックＬが送り込まれるようになっている。
【００８７】
上記のような構成とすることにより、検体搬送ユニット４は、分析前ラック保持部４１に載置されたサンプルラックＬをラック搬送部４３へと移送し、さらにラック搬送部４３によって搬送することにより、検体を測定ユニット２へと供給することができる。また、吸引が完了した検体を収容するサンプルラックＬは、ラック搬送部４３により、分析後ラック送出位置４６１へと移送され、ラック送出部４６により分析後ラック保持部４２へ送出される。複数のサンプルラックＬが分析前ラック保持部４１に載置された場合では、分析が完了した検体を収容するサンプルラックＬが次々にラック送出部４６により分析後ラック保持部４２へと送出され、これらの複数のサンプルラックＬが分析後ラック保持部４２に貯留されることとなる。
【００８８】
＜情報処理ユニットの構成＞
次に、情報処理ユニット５の構成について説明する。情報処理ユニット５は、コンピュータにより構成されている。図９は、情報処理ユニット５の構成を示すブロック図である。情報処理ユニット５は、コンピュータ５ａによって実現される。図９に示すように、コンピュータ５ａは、本体５１と、画像表示部５２と、入力部５３とを備えている。本体５１は、ＣＰＵ５１ａ、ＲＯＭ５１ｂ、ＲＡＭ５１ｃ、ハードディスク５１ｄ、読出装置５１ｅ、入出力インタフェース５１ｆ、通信インタフェース５１ｇ、及び画像出力インタフェース５１ｈを備えており、ＣＰＵ５１ａ、ＲＯＭ５１ｂ、ＲＡＭ５１ｃ、ハードディスク５１ｄ、読出装置５１ｅ、入出力インタフェース５１ｆ、通信インタフェース５１ｇ、及び画像出力インタフェース５１ｈは、バス５１ｊによって接続されている。
【００８９】
ＣＰＵ５１ａは、ＲＡＭ５１ｃにロードされたコンピュータプログラムを実行することが可能である。そして、後述するような血液分析用並びに測定ユニット２及び検体搬送ユニット４の制御用のコンピュータプログラム５４ａを当該ＣＰＵ５１ａが実行することにより、コンピュータ５ａが情報処理ユニット５として機能する。
【００９０】
ＲＯＭ５１ｂは、マスクＲＯＭ、ＰＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、又はＥＥＰＲＯＭ等によって構成されており、ＣＰＵ５１ａに実行されるコンピュータプログラム及びこれに用いるデータ等が記録されている。
【００９１】
ＲＡＭ５１ｃは、ＳＲＡＭまたはＤＲＡＭ等によって構成されている。ＲＡＭ５１ｃは、ハードディスク５１ｄに記録されているコンピュータプログラム５４ａの読み出しに用いられる。また、ＣＰＵ５１ａがコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ５１ａの作業領域として利用される。
【００９２】
ハードディスク５１ｄは、オペレーティングシステム及びアプリケーションプログラム等、ＣＰＵ５１ａに実行させるための種々のコンピュータプログラム及び当該コンピュータプログラムの実行に用いられるデータがインストールされている。後述するコンピュータプログラム５４ａも、このハードディスク５１ｄにインストールされている。また、このコンピュータプログラム５４ａは、イベントドリブン型のコンピュータプログラムである。
【００９３】
読出装置５１ｅは、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ−ＲＯＭドライブ、またはＤＶＤ−ＲＯＭドライブ等によって構成されており、可搬型記録媒体５４に記録されたコンピュータプログラムまたはデータを読み出すことができる。また、可搬型記録媒体５４には、コンピュータを情報処理ユニット５として機能させるためのコンピュータプログラム５４ａが格納されており、コンピュータ５ａが当該可搬型記録媒体５４からコンピュータプログラム５４ａを読み出し、当該コンピュータプログラム５４ａをハードディスク５１ｄにインストールすることが可能である。
【００９４】
なお、前記コンピュータプログラム５４ａは、可搬型記録媒体５４によって提供されるのみならず、電気通信回線（有線、無線を問わない）によってコンピュータ５ａと通信可能に接続された外部の機器から前記電気通信回線を通じて提供することも可能である。例えば、前記コンピュータプログラム５４ａがインターネット上のサーバコンピュータのハードディスク内に格納されており、このサーバコンピュータにコンピュータ５ａがアクセスして、当該コンピュータプログラムをダウンロードし、これをハードディスク５１ｄにインストールすることも可能である。
【００９５】
また、ハードディスク５１ｄには、例えば米マイクロソフト社が製造販売するWindows（登録商標）等のマルチタスクオペレーティングシステムがインストールされている。以下の説明においては、本実施の形態に係るコンピュータプログラム５４ａは当該オペレーティングシステム上で動作するものとしている。
【００９６】
入出力インタフェース５１ｆは、例えばUSB，IEEE1394，又はRS-232C等のシリアルインタフェース、SCSI，IDE，又は IEEE1284等のパラレルインタフェース、及びＤ／Ａ変換器、Ａ／Ｄ変換器等からなるアナログインタフェース等から構成されている。入出力インタフェース５１ｆには、キーボード及びマウスからなる入力部５３が接続されており、ユーザが当該入力部５３を使用することにより、コンピュータ５ａにデータを入力することが可能である。また、入出力インタフェース５１ｆは、測定ユニット２及び検体搬送ユニット４に接続されている。これにより、情報処理ユニット５は、測定ユニット２及び検体搬送ユニット４のそれぞれを制御可能となっている。
【００９７】
通信インタフェース５１ｇは、Ethernet（登録商標）インタフェースである。通信インタフェース５１ｇはＬＡＮを介してホストコンピュータ６に接続されている（図４参照）。コンピュータ５ａは、通信インタフェース５１ｇにより、所定の通信プロトコルを使用して当該ＬＡＮに接続されたホストコンピュータ６との間でデータの送受信が可能である。
【００９８】
画像出力インタフェース５１ｈは、ＬＣＤまたはＣＲＴ等で構成された画像表示部５２に接続されており、ＣＰＵ５１ａから与えられた画像データに応じた映像信号を画像表示部５２に出力するようになっている。画像表示部５２は、入力された映像信号にしたがって、画像（画面）を表示する。
【００９９】
［血液分析装置１の測定動作］
以下、本実施の形態に係る血液分析装置１の動作について説明する。
【０１００】
＜検体測定動作＞
まず、本実施の形態に係る血液分析装置１の検体測定動作について説明する。血液分析装置１は、光学検出器Ｄを用いたリンパ芽球／有核赤血球群測定、ＮＲＢＣ（有核赤血球）測定を実行可能である。かかる測定の工程は、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料を測定する第１測定工程と、ＮＲＢＣ測定試料を測定する第２測定工程と、第１測定工程及び第２測定工程によって得られた測定データを解析処理するデータ処理工程によって構成される。
【０１０１】
まず、検体容器Ｔを保持したサンプルラックＬがオペレータによって分析前ラック保持部４１に載置される。ラック送込部４１ｂが分析前ラック保持部４１に載置されたサンプルラックＬに係合し、後方へと搬送され、ラック搬送部４３へと送られる。その後、ラック搬送部４３によって当該サンプルラックＬが搬送され、測定対象の検体が収容されている検体容器Ｔが検体供給位置４３ａに位置する。次に、測定ユニット２のハンド部２５ａにより、当該検体容器Ｔが把持され、サンプルラックＬからこの検体容器Ｔが取り出される。ハンド部２５ａはその後揺動運動を行い、検体容器Ｔの内部の検体が撹拌される。次に、検体容器セット部２５ｂにこの検体容器Ｔが挿入され、Ｙ方向へと検体容器セット部２５ｂが移動し、バーコード読取部２６による検体バーコード読み取りを行った後、吸引位置に到達する。その後、以下の第１測定工程及び第２測定工程が実行される。
【０１０２】
第１測定工程
まず、第１測定工程について説明する。血液分析装置１は、第１測定工程では、全血検体（１９．０μＬ）と第１試薬（１．０２ｍＬ）とを混合してＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を作成し、このＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を光学検出器Ｄにてフローサイトメトリー法によって測定する。
【０１０３】
ここで、第１試薬として、以下に示される試薬を用いた。
＜第１試薬＞
ＭＯＰＳＯ ２．２５ｇ／Ｌ
ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル １０．０ｇ／Ｌ
Ｎ−ラウロイルサルコシン酸ナトリウム ０．５ｇ／Ｌ
Ｐｒｏｘｅｌ ＧＸＬ ０．４０ｇ／Ｌ
ＥＤＴＡ−２Ｋ ０．５０ｇ／Ｌ
キシリトール ４０．２２ｇ／Ｌ
ＮＫ−３２１ １．０ｍｇ／Ｌ
ｐＨ： ７．０
浸透圧： ３００ｍＯｓｍ／Ｋｇ
電気伝導度： ０．７４５ｍＳ／ｃｍ
【０１０４】
なお、全血検体として以下に示される３つの検体を用いた。
【表１】
表１中、「○」は対象の血球（リンパ芽球又は有核赤血球）が存在することを示し、「×」は対象の血球が存在しないことを示す。
【０１０５】
図１０は、第１測定工程での血液分析装置１の動作手順を示すフローチャートである。まず、ＣＰＵ５１ａは、検体吸引部２１を制御して、吸引管２１１により検体容器Ｔの全血検体を定量吸引する（ステップＳ１０１）。ステップＳ１０１の処理は、具体的には、吸引管２１１が検体容器Ｔの中に挿入され、シリンジポンプの駆動によって、全血検体が定量（３９．０μＬ）吸引される。
【０１０６】
次に、ＣＰＵ５１ａが測定ユニット２を制御することにより、試薬容器２２１から第１試薬（１．０２ｍＬ）が、吸引管２１１から全血検体（１９．０μＬ）が第１混合チャンバＭＣ１にそれぞれ供給される（ステップＳ１０２）。ＣＰＵ５１ａは、第１混合チャンバＭＣ１への第１試薬及び全血検体の供給から１８．５秒間経過したか否かを判定し（ステップＳ１０３）、１８．５秒間待機する。ここで、ヒータにより第１混合チャンバＭＣ１は３５．０℃に加温されており、これにより、第１試薬と血液検体との混合液が３５．０℃で１８．５秒加温され、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料が調製される。
【０１０７】
そして、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料を対象に光学検出器Ｄにて光学測定が行われる（ステップＳ１０４）。ステップＳ１０４の処理においては、具体的には、Ｌ−Ｂｌａｓｔ測定試料とシース液とが同時に光学検出器Ｄのフローセル２３１に供給され、そのときの前方散乱光がフォトダイオード２４３で受光され、側方散乱光がフォトダイオード２４６で受光され、アバランシェフォトダイオード２４８で受光される。このような光学検出器Ｄの各受光素子により出力される出力信号（アナログ信号）は図示しないＡ／Ｄ変換器によりデジタル信号に変換され、図示しない信号処理回路により所定の信号処理が施されてデジタルデータである第１測定データに変換され、情報処理ユニット５にこの第１測定データが送信される。この信号処理においては、第１測定データに含まれる特徴パラメータとして、前方散乱光信号（前方散乱光強度）、側方散乱光信号（側方散乱光強度）、及び側方蛍光信号（側方蛍光強度）が得られる。これにより、第１測定工程が終了する。また、後述するように、情報処理ユニット５のＣＰＵ５１ａは、第１測定データに対して所定の解析処理を実行することにより、ＮＥＵＴ、ＬＹＭＰＨ、ＥＯ、ＢＡＳＯ、ＭＯＮＯ、及びＷＢＣ等の数値データを含む分析結果データを生成し、ハードディスク５１ｄに分析結果データを記憶する。
【０１０８】
第２測定工程
次に、第２測定工程について説明する。この第２測定工程は、第１測定工程と時間的に一部重複して実行される。血液分析装置１は、第２測定工程では、全血検体（１７．０μＬ）と第２試薬（１．０ｍＬ）と第３試薬（０．０３０ｍＬ）とを混合してＮＲＢＣ測定試料を作成し、このＮＲＢＣ測定試料を光学検出器Ｄにてフローサイトメトリー法によって測定する。ここで第２試薬としては、上述のストマトライザーＮＲ溶血剤を使用し、第３試薬としては、上述のストマトライザーＮＲ染色液を用いた。
【０１０９】
図１１は、第２測定工程での血液分析装置１の動作手順を示すフローチャートである。ＣＰＵ５１ａは測定ユニット２を制御することにより、試薬容器２２２ａから第２試薬（１．０ｍＬ）を、試薬容器２２２ｂから第３試薬（０．０３０ｍＬ）を、吸引管２１１から全血検体（１７．０μＬ）を第２混合チャンバＭＣ２にそれぞれ供給する（ステップＳ２０１）。このステップＳ２０１において第２混合チャンバＭＣ２に供給される検体は、上述したステップＳ１０１において吸引管２１１により吸引された全血検体の一部である。つまり、ステップＳ１０１においては、第１混合チャンバＭＣ１に供給する検体と、第２混合チャンバＭＣ２に供給される検体とが一度に検体容器Ｔから吸引される。
【０１１０】
次に、ＣＰＵ５１ａは、第２混合チャンバＭＣ２への第２試薬、第３試薬及び全血検体の供給から７．０秒間経過したか否かを判定し（ステップＳ２０２）、７．０秒間待機する。ここで、ヒータにより第２混合チャンバＭＣ２は４１．０℃に加温されており、これにより、第２試薬と第３試薬と血液検体との混合液が４１．０℃で７．０秒加温され、ＮＲＢＣ測定試料が調製される。
【０１１１】
そして、ＮＲＢＣ測定試料を対象に光学検出器Ｄにて光学測定が行われる（ステップＳ２０３）。ステップＳ２０３の処理においては、具体的には、ＮＲＢＣ測定試料とシース液とが同時に光学検出器Ｄのフローセル２３１に供給され、そのときの前方散乱光がフォトダイオード２４３で受光され、側方散乱光がフォトダイオード２４６で受光され、アバランシェフォトダイオード２４８で受光される。このような光学検出器Ｄの各受光素子により出力される出力信号（アナログ信号）は、上述した第１測定工程と同様に、デジタル信号に変換され、所定の信号処理が施されてデジタルデータである第２測定データに変換され、情報処理ユニット５にこの第２測定データが送信される。この信号処理においては、第２測定データに含まれる特徴パラメータとして、前方散乱光信号（前方散乱光強度）、側方散乱光信号（側方散乱光強度）、及び側方蛍光信号の（側方蛍光強度）が得られる。これにより、第２測定工程が終了する。また、後述するように、情報処理ユニット５のＣＰＵ５１ａは、第２測定データに対して所定の解析処理を実行することにより、ＮＲＢＣの数値データを含む分析結果データを生成し、ハードディスク５１ｄに分析結果データを記憶する。
【０１１２】
データ処理工程
次に、データ処理工程について説明する。図１２は、データ処理工程での血液分析装置１の処理手順を示すフローチャートである。血液分析装置１の情報処理ユニット５は、測定ユニット２から測定データを受信する（ステップＳ３０１）。ここで、受信された測定データには第１測定データ及び第２測定データが含まれる。ＣＰＵ５１ａによって実行されるコンピュータプログラム５４ａはイベントドリブン型のプログラムであり、測定データを受信するイベントが発生すると、ステップＳ３０２の処理が呼び出される。
【０１１３】
ステップＳ３０２において、ＣＰＵ５１ａは、第１測定データを用いてリンパ芽球／有核赤血球群と他の血球群とを分類し、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数を計数する（ステップＳ３０２）。かかる処理について詳しく説明する。図１３Ａは、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラム（粒度分布図）であり、図１３Ｂは、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムである。
【０１１４】
図１３Ａに示す第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、骨髄芽球のクラスター、幼若顆粒球のクラスター、好塩基球のクラスター、好中球と好酸球とによってなる血球群のクラスター、リンパ球のクラスター、単球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。また、図１３Ｂに示す第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、幼若顆粒球と骨髄芽球とからなる血球群のクラスターと、顆粒球（好中球と好酸球と好塩基球とからなる血球群）のクラスター、単球のクラスター、リンパ球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。これらのスキャッタグラムに示されるように、第１測定データの蛍光強度を利用することによって、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターを、他のクラスターから弁別することができる。ステップＳ３０２の処理においては、ＣＰＵ５１ａは、第１測定データの側方散乱光強度及び蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群を他のクラスターと弁別し、これによってリンパ芽球／有核赤血球群を検出する。さらに、ＣＰＵ５１ａは、検出されたリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球の数を計数する。
【０１１５】
次にステップＳ３０３において、ＣＰＵ５１ａは、第２測定データを用いて有核赤血球群と他の血球群とを分類し、有核赤血球の数を計数する（ステップＳ３０３）。かかる処理について詳しく説明する。図１４は、第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムである。図１４に示す第２測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、有核赤血球のクラスター、白血球のクラスター、及び赤血球ゴーストのクラスターが現れる。このスキャッタグラムに示されるように、第２測定データの前方散乱光強度及び側方蛍光強度を利用することにより、有核赤血球のクラスターを、他のクラスターから弁別することができる。ステップＳ３０３の処理においては、ＣＰＵ５１ａは、第２測定データの前方散乱光強度及び蛍光強度を用いて、有核赤血球を他のクラスターから弁別し、これによって有核赤血球を検出する。さらに、ＣＰＵ５１ａは、検出された有核赤血球の数を計数する。
【０１１６】
次にステップＳ３０４において、ＣＰＵ５１ａは、ステップＳ３０２において取得したリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬと、ステップＳ３０３において取得した有核赤血球数ＮＮとの差が、所定の基準値Ｔ以上であるか否かを判定する（ステップＳ３０４）。ここで、基準値Ｔは、ＮＬ−ＮＮの値がこの基準値Ｔ以上の場合には、血液検体にリンパ芽球が含まれていると考えることができ、ＮＬ−ＮＮの値が基準値Ｔ未満の場合には、血液検体にリンパ芽球が含まれていないと考えることができるものとして、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬ及び有核赤血球数ＮＮの誤差を勘案して予め設定される。したがって、この処理においてＮＬ−ＮＮ≧Ｔである場合は（ステップＳ３０４においてＹＥＳ）、血液検体中にリンパ芽球が含まれていると判断することができる。よってこの場合には、ＣＰＵ５１ａは、ＲＡＭ５１ｃに設けられたリンパ芽球フラグに「１」をセットする（ステップＳ３０５）。ここで、リンパ芽球フラグは血液検体におけるリンパ芽球の有無を示すフラグであり、「１」がセットされている場合にはリンパ芽球が存在していることを示し、「０」がセットされている場合にはリンパ芽球が存在していないことを示す。その後、ＣＰＵ５１ａは、ステップＳ３０７へ処理を移す。
【０１１７】
一方、ステップＳ３０４においてＮＬ−ＮＮ＜Ｔである場合は（ステップＳ３０４においてＮＯ）、血液検体中にリンパ芽球が含まれていないと判断することができる。よってこの場合には、ＣＰＵ５１ａは、リンパ芽球フラグに「０」をセットする（ステップＳ３０６）。その後、ＣＰＵ５１ａは、ステップＳ３０７へ処理を移す。
【０１１８】
ステップＳ３０７において、ＣＰＵ５１ａは、上述のようにして得た分析結果（有核赤血球数、及びリンパ芽球フラグを含む）をハードディスク５１ｄに格納する（ステップＳ３０７）。次にＣＰＵ５１ａは、ハードディスク５１ｄに記憶した分析結果を示す分析結果画面を画像表示部５２に表示させ（ステップＳ３０８）、処理を終了する。
【０１１９】
図１５Ａ、図１５Ｂ及び図１５Ｃは、血液分析装置１の分析結果画面を示す図である。図１５Ａは、血液検体Ａの分析結果画面を示している。図１５Ｂは、血液検体Ｂの分析結果画面を示している。図１５Ｃは、血液検体Ｃの分析結果画面を示している。図１５Ａ〜Ｃに示すように、分析結果画面Ｒ１，Ｒ２及びＲ３においては、測定された測定項目（ＷＢＣ、ＲＢＣ、ＰＬＴ、ＮＲＢＣ等）の数値データが表示される。血液検体Ａにはリンパ芽球が含まれており、この血液検体Ａに係る分析結果データでは、リンパ芽球フラグが「１」にセットされている。したがって、血液検体Ａの分析結果画面Ｒ１では、図１５Ａに示すように、リンパ芽球項目が存在している可能性を示す情報である「Ｌ−Ｂｌａｓｔ？」の表示が、Ｆｌａｇの欄Ｆに付される。一方、血液検体Ｂ及び血液検体Ｃにはリンパ芽球が含まれておらず、血液検体Ｂに係る分析結果データ及び血液検体Ｃに係る分析結果データでは、リンパ芽球フラグが「０」にセットされている。したがって、血液検体Ｂの分析結果画面Ｒ２及び血液検体Ｃの分析結果画面Ｒ３では、図１５Ｂ及び図１５ＣのＦｌａｇの欄Ｆに示すように、上記の「Ｌ−Ｂｌａｓｔ？」の表示は付されない。また、血液検体Ｃは有核赤血球を含んでいるため、血液検体Ｃの分析結果画面Ｒ３では、図１５Ｃに示すように、有核赤血球の存在を示す情報である「ＮＲＢＣ ｐｒｅｓｅｎｔ」の表示が、Ｆｌａｇの欄Ｆに付される。これによって、オペレータは分析結果画面を見るだけで、その血液検体にリンパ芽球が検出されたか否かを把握することができる。また、この分析結果画面Ｒ１，Ｒ２及びＲ３には、第１測定データの側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムＳＬ１，ＳＬ２及びＳＬ３が表示される。さらに、この分析結果画面Ｒ１，Ｒ２及びＲ３には、第２測定データの側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムＳＮ１，ＳＮ２及びＳＮ３が表示される。オペレータはこのスキャッタグラムを参照することによって、血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の根拠を把握することができ、また血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の妥当性を判断することができる。
【０１２０】
ここで、スキャッタグラムの具体例を用いて、リンパ芽球の検出について詳細に説明する。図１６Ａは、血液検体Ａの第１測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムであり、図１６Ｂは、血液検体Ａの第１測定データにおける側方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。また、図１７は、血液検体Ａの第２測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。さらに、図１８Ａは、血液検体Ｃの第１測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムであり、図１８Ｂは、血液検体Ｃの第１測定データにおける側方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。図１９は、血液検体Ｃの第２測定データにおける前方散乱光強度及び蛍光強度のスキャッタグラムである。
【０１２１】
図１６Ａ及び図１６Ｂから明らかなように、血液検体Ａでは、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターがスキャッタグラム上で確認できる。一方、図１７から明らかなように、血液検体Ａでは、有核赤血球のクラスターがスキャッタグラム上で確認できない。このことは、図１６Ａ及び図１６Ｂに出現しているリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが主としてリンパ芽球によって形成されているということを示しており、ここから血液検体Ａにリンパ芽球が存在することが分かる。
【０１２２】
また、図１８Ａ及び図１８Ｂから明らかなように、血液検体Ｃでは、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターがスキャッタグラム上で確認できる。加えて、血液検体Ｃにおけるリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターは、血液検体Ａにおけるリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターよりも規模が小さく、血球数が少ないことが分かる。さらに、図１９から明らかなように、血液検体Ｃでは、有核赤血球のクラスターがスキャッタグラム上で確認できる。このことは、図１８Ａ及び図１８Ｂに出現しているリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが主として有核赤血球によって形成されているということを示している。つまり、このことは、血液検体Ｃにおいては、リンパ芽球ではなく、有核赤血球が存在していることを示唆している。
【０１２３】
このように、第１測定データ及び第２測定データから得られるスキャッタグラムを参照することで、より正確に血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の根拠を把握することができ、また血液分析装置１によるリンパ芽球の有無の検出結果の妥当性を判断することができる。
【０１２４】
以上のような構成とすることにより、血液分析装置１は、血液検体と核酸を染色する蛍光色素が含有された第１試薬とを混合して調製したＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を光学検出器Ｄにより測定することにより、リンパ芽球／有核赤血球群を検出し、そのリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数を測定することができる。また、この血球数と、第２測定工程によって得られた有核赤血球数とによって、血液検体にリンパ芽球が含まれているか否かを検出することができる。したがって、血液分析装置１の上記測定に蛍光標識抗体が用いられることがなく、測定コストを抑制しつつ、リンパ芽球の検出を行うことが可能である。
【０１２５】
（その他の実施の形態）
なお、試料調製部２２における、血液検体と第１試薬との混合の際の反応温度及び反応時間は、血液検体中の血球の損傷や染色の状態により適宜設定すればよく、特に制限されない。具体的には、反応温度が高いときは反応時間を短くし、反応温度が低いときは反応時間を長くするように調整することができる。より具体的には、血液検体と試薬の混合は、２０℃〜４０℃の温度において、３〜２０秒間行うことが好ましい。
【０１２６】
また、上述した実施の形態においては、溶血剤及び核酸を染色できる蛍光色素を含む第１試薬を用いて、第１測定工程を行う構成について述べたが、これに限定されるものではない。溶血剤を含む試薬と、核酸染色色素を含む試薬とを別々に設け、これらの２つの試薬を血液検体と混合してＬ−Ｂｌａｓｔ測定試料を調製し、リンパ芽球／有核赤血球群の検出及びリンパ芽球／有核赤血球群の血球数の測定を行う構成としてもよい。この場合、界面活性剤、可溶化剤及び蛍光色素の濃度は、上記２つの試薬を混合した際に、上述の濃度になるように調整される。ここで、溶血剤を含む試薬及び核酸染色色素を含む試薬の混合比は、１０００：１〜１０：１が好ましい。
【０１２７】
上記の試薬キットを用いる場合、試薬キットの各試薬と血液検体とを混合する順序は特に限定されないが、２つの試薬を混合し、次いで混合した試薬に血液検体を混合することが好ましい。
【０１２８】
また、上述した実施の形態においては、第１測定工程と第２測定工程とを実行し、第１測定工程によって得られる第１測定データ及び第２測定工程によって得られる第２測定データによって血液検体にリンパ芽球が含まれているか否かを検出する構成について述べたが、これに限定されるものではない。図１３Ａに示すように、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターにおいて、蛍光強度が低い部分にはリンパ芽球のクラスターと有核赤血球のクラスターとが重複し、蛍光強度が高い部分にはリンパ芽球のみが出現している。つまり、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスターにおいて、有核赤血球のクラスターの蛍光強度の上限値付近に蛍光強度の基準値を設け、リンパ芽球／有核赤血球群のクラスター内で蛍光強度がこの基準値以上の粒子が検出された場合には、リンパ芽球が存在すると判断し、蛍光強度が当該基準値以上の粒子が検出されなかった場合には、リンパ芽球が存在しないと判断することもできる。この場合には、有核赤血球の検出のための第２測定工程を行わなくてもリンパ芽球の有無を判断することができるため、より一層血液分析装置１の構成を簡単にすることができ、また測定コストを低減することができる。
【０１２９】
また、上述した実施の形態においては、第１測定データに基づいてリンパ芽球／有核赤血球群の検出及びリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球の計数を行い、第２測定データに基づいて有核赤血球の検出及び有核赤血球の計数を行い、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数と有核赤血球数との差を求め、この差と基準値Ｔとの比較によりリンパ芽球の有無を判断する構成について述べたが、これに限定されるものではない。第１測定データに基づいてリンパ芽球／有核赤血球群の検出及び第２測定データに基づいて有核赤血球の検出を行い、リンパ芽球／有核赤血球群として検出される粒子が存在し、且つ、有核赤血球として検出される粒子が存在しない場合には、リンパ芽球が存在すると判断し、それ以外の場合には、リンパ芽球が存在しないと判断する構成としてもよい。また、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数と有核赤血球数との差を、リンパ芽球数として分析結果画面に表示することもでき、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数と有核赤血球数との差に対して、所定数を差し引いた結果の数を、リンパ芽球数として分析結果画面に表示することもできる。
【０１３０】
また、上述した実施の形態においては、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬと有核赤血球数ＮＮとの差ＮＬ−ＮＮが基準値Ｔ以上の場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在すると判断し、ＮＬ−ＮＮが基準値Ｔ未満の場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在しないと判断する構成について述べたが、リンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球数ＮＬが有核赤血球数ＮＮよりも大きい場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在すると判断し、血球数ＮＬが有核赤血球数ＮＮ以下の場合には、血液検体中にリンパ芽球が存在しないと判断する構成としてもよい。
【０１３１】
上述したように、図１３Ａに示す第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、骨髄芽球のクラスター、幼若顆粒球のクラスター、好塩基球のクラスター、好中球と好酸球とによってなる血球群のクラスター、リンパ球のクラスター、単球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。したがって、この第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、骨髄芽球のクラスターと他のクラスターとを分類し、骨髄芽球のクラスターに含まれる血球が存在する場合には、その存在を示す情報又は骨髄芽球のクラスターに含まれる血球数（骨髄芽球数）を分析結果画面に表示する構成としてもよい。また、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、幼若顆粒球のクラスターと他のクラスターとを分類し、幼若顆粒球のクラスターに含まれる血球が存在する場合には、その存在を示す情報又は幼若顆粒球のクラスターに含まれる血球数（幼若顆粒球数）を分析結果画面に表示する構成としてもよい。
【０１３２】
さらに、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、成熟白血球を、リンパ球、好塩基球、単球、及び好中球と好酸球とからなる血球群に分類し、リンパ球、好塩基球、単球、及び好中球と好酸球とからなる血球群に含まれる血球をそれぞれ計数し、分析結果画面にそれぞれの血球数を表示する構成としてもよい。また、上記の好中球と好酸球とからなる血球群に好塩基球も含まれているものとし、顆粒球としてリンパ球及び単球と区別して、成熟白血球をリンパ球、単球及び顆粒球に分類し、それぞれのクラスターに含まれる血球を計数し、リンパ球数、単球数、顆粒球数を分析結果画面に表示する構成としてもよい。
【０１３３】
また、上述した実施の形態においては、第１測定データにおける側方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群の検出を行う構成について述べたが、これに限定されるものではない。図１３Ｂに示すように、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度のスキャッタグラムでは、幼若顆粒球と骨髄芽球とからなる血球群のクラスター、顆粒球（好中球と好酸球と好塩基球とからなる血球群）のクラスター、単球のクラスター、リンパ球のクラスター、及びリンパ芽球／有核赤血球群のクラスターが現れる。したがって、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群の検出を行う構成とし、さらにはリンパ芽球／有核赤血球群に含まれる血球を計数する構成としてもよい。また、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群のクラスターと他のクラスターとを分類し、骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群のクラスターに含まれる血球が存在する場合には、その存在を示す情報又は骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群のクラスターに含まれる血球数を分析結果画面に表示する構成としてもよい。
【０１３４】
さらに、第１測定データにおける前方散乱光強度及び側方蛍光強度を用いて、成熟白血球を、リンパ球、単球、及び顆粒球に分類し、リンパ球、単球、及び顆粒球をそれぞれ計数し、分析結果画面にそれぞれの血球数を表示する構成としてもよい。
【０１３５】
また、図１３Ａ及び図１３Ｂに示すように、第１測定データに含まれる側方蛍光強度だけを用いて、リンパ芽球／有核赤血球群、成熟白血球（リンパ球、単球、及び顆粒球）、及び骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群を弁別することができる。したがって、第１測定データに含まれる側方蛍光強度を用いて、リンパ芽球／有核赤血球群の領域（蛍光強度が高い領域）と、成熟白血球（蛍光強度が中程度の領域）と、骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群の領域（蛍光強度が低い領域）とに区分し、領域毎に血球を計数し、リンパ芽球／有核赤血球群の血球数、成熟白血球数、及び骨髄芽球と幼若顆粒球とからなる血球群の血球数を取得する構成としてもよい。
【０１３６】
また、上述した実施の形態においては、血液分析装置１が第２測定工程を実施し、データ処理工程において有核赤血球群を検出する構成について述べたが、これに限定されるものではない。すなわち、有核赤血球群の検出に関する情報を、血液分析装置１とは異なる他の血液分析装置又は用手法により取得し、取得した情報を血液分析装置１の入力手段を用いて入力する構成としても良い。ここで、血液分析装置１の入力手段としては、上述の入力部５３及び通信インタフェース５１ｇ等が挙げられる。より具体的には、上述の入出力インタフェース５１ｆに接続されているキーボード及びマウスからなる入力部５３を用いて有核赤血球群の検出に関する情報を血液分析装置１に入力することができる。また、通信インタフェース５１ｇを用いて血液分析装置１と上記の他の血液分析装置を接続し、通信インタフェース５１ｇ介して有核赤血球群の検出に関する情報を血液分析装置１に入力することもできる。
【０１３７】
また、上述した実施の形態においては、ＣＰＵ５１ａが上記のコンピュータプログラム５４ａを実行することにより、測定ユニット２の制御及び測定データの処理を行う構成について述べたがこれに限定されるものではない。上記コンピュータプログラム５４ａと同様の処理を実行することが可能なＦＰＧＡ又はＡＳＩＣ等の専用ハードウェアにより、測定ユニット２の制御及び測定データの処理を実行する構成としてもよい。
【０１３８】
また、上述した実施の形態においては、単一のコンピュータ５ａによりコンピュータプログラム５４ａの全ての処理を実行する構成について述べたが、これに限定されるものではなく、上述したコンピュータプログラム５４ａと同様の処理を、複数の装置（コンピュータ）により分散して実行する分散システムとすることも可能である。
【産業上の利用可能性】
【０１３９】
本発明の検体検査システムは、血液検体を光学的に測定し、血液検体に含まれる細胞群を複数に分類する血液分析装置として有用である。
【符号の説明】
【０１４０】
１ 血液分析装置
２ 測定ユニット
２２ 試料調製部
２２１，２２２ａ，２２２ｂ，２２３ 試薬容器
２３ 検出部
２３１ フローセル
２３７ 半導体レーザ
２４３ フォトダイオード
２４６ フォトダイオード
２４８ アバランシェフォトダイオード
５ 情報処理ユニット
５ａ コンピュータ
５１ 本体
５１ａ ＣＰＵ
５１ｂ ＲＯＭ
５１ｃ ＲＡＭ
５１ｄ ハードディスク
５１ｈ 画像出力インタフェース
５２ 画像表示部
５４ａ コンピュータプログラム
ＭＣ１ 第１混合チャンバ
ＭＣ２ 第２混合チャンバ
Ｈ ヒータ
Ｄ 光学検出器
Ｒ１，Ｒ２,Ｒ３ 分析結果画面
ＳＬ１，ＳＬ２,ＳＬ３ スキャッタグラム
ＳＮ１，ＳＮ２,ＳＮ３ スキャッタグラム
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液検体を供給する血液検体供給部と、
前記血液検体供給部から供給された血液検体と、核酸を染色する蛍光色素とを混合して測定試料を調製する試料調製部と、
前記測定試料に光を照射する光源と、
前記光が照射された測定試料から発せられる蛍光を受光する光学検出部と、
前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記測定試料中に含まれるリンパ芽球を含む細胞群を検出する情報処理手段と、
前記情報処理手段による検出結果に基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現に関する情報を出力する出力手段と、
を備える、血液分析装置。
【請求項２】
前記血液検体供給部は、血液検体から分割された第１血液検体及び第２血液検体を供給するように構成されており、
前記試料調製部は、前記第１血液検体と、第１溶血剤及び前記蛍光色素である第１蛍光色素とを混合して第１測定試料を調製し、前記第２血液検体と、前記第１溶血剤とは異なる第２溶血剤及び核酸を染色する第２蛍光色素とを混合して第２測定試料を調製するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第１測定試料に光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記蛍光に応じた第１信号を出力し、前記光源が前記第２測定試料に光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記散乱光及び蛍光に応じた第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記光学検出部が出力した前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む前記細胞群を検出し、前記光学検出部が出力した前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を検出するように構成されており、
前記出力手段は、前記情報処理手段による前記第１信号に基づく前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に係る検出結果並びに前記前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項３】
前記光源は、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されている、請求項２に記載の血液分析装置。
【請求項４】
前記光源は、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数が有核赤血球の数よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されている、請求項３に記載の血液分析装置。
【請求項５】
前記光源は、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数が所定値よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されている、請求項３に記載の血液分析装置。
【請求項６】
前記光源は、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記リンパ芽球の計数結果を出力するように構成されている、請求項２に記載の血液分析装置。
【請求項７】
前記光源は、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数を、前記リンパ芽球の計数結果として出力するように構成されている、請求項６に記載の血液分析装置。
【請求項８】
前記血液検体に含まれる有核赤血球に係る検出結果に関する情報を入力するための入力手段をさらに備え、
前記出力手段は、前記情報処理手段による検出結果及び前記入力手段に入力された有核赤血球の出現に関する情報に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項９】
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む第１細胞群と、前記測定試料中に含まれる骨髄芽球及び幼若顆粒球を含む第２細胞群とを検出するように構成されており、
前記出力手段は、前記血液検体における骨髄芽球の出現に関する情報、及び前記血液検体における幼若顆粒球の出現に関する情報をさらに出力するように構成されている、請求項１乃至８の何れかに記載の血液分析装置。
【請求項１０】
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出するように構成されており、
前記出力手段は、成熟白血球の出現に関する情報を出力するように構成されている、請求項９に記載の血液分析装置。
【請求項１１】
前記光学検出部は、さらに前記光が照射された測定試料から発せられる散乱光を受光するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第２細胞群を、骨髄芽球を含む細胞群と、幼若顆粒球を含む細胞群とにさらに分類するように構成されている、請求項９に記載の血液分析装置。
【請求項１２】
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出し、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第３細胞群を、少なくとも３種類の成熟白血球に分類するように構成されている、請求項１１に記載の血液分析装置。
【請求項１３】
前記光学検出部は、前記散乱光として、前記光が照射された測定試料から発せられる前方散乱光又は側方散乱光を受光するように構成されている、請求項１１又は１２に記載の血液分析装置。
【請求項１】
血液検体を供給する血液検体供給部と、
前記血液検体供給部から供給された血液検体と、核酸を染色する蛍光色素とを混合して測定試料を調製する試料調製部と、
前記測定試料に光を照射する光源と、
前記光が照射された測定試料から発せられる蛍光を受光する光学検出部と、
前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記測定試料中に含まれるリンパ芽球を含む細胞群を検出する情報処理手段と、
前記情報処理手段による検出結果に基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現に関する情報を出力する出力手段と、
を備える、血液分析装置。
【請求項２】
前記血液検体供給部は、血液検体から分割された第１血液検体及び第２血液検体を供給するように構成されており、
前記試料調製部は、前記第１血液検体と、第１溶血剤及び前記蛍光色素である第１蛍光色素とを混合して第１測定試料を調製し、前記第２血液検体と、前記第１溶血剤とは異なる第２溶血剤及び核酸を染色する第２蛍光色素とを混合して第２測定試料を調製するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第１測定試料に光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記蛍光に応じた第１信号を出力し、前記光源が前記第２測定試料に光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記散乱光及び蛍光に応じた第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記光学検出部が出力した前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む前記細胞群を検出し、前記光学検出部が出力した前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を検出するように構成されており、
前記出力手段は、前記情報処理手段による前記第１信号に基づく前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に係る検出結果並びに前記前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項３】
前記光源は、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されている、請求項２に記載の血液分析装置。
【請求項４】
前記光源は、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数が有核赤血球の数よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されている、請求項３に記載の血液分析装置。
【請求項５】
前記光源は、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数が所定値よりも大きい場合に、前記血液検体におけるリンパ芽球の出現を示す情報を出力するように構成されている、請求項３に記載の血液分析装置。
【請求項６】
前記光源は、前記第１測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第１測定試料の流れに光を照射したときに前記第１測定試料から発せられる蛍光を受光して前記第１信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第１信号に基づいて、前記第１測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数と、前記第２信号に基づく前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球に係る検出結果とに基づいて、前記リンパ芽球の計数結果を出力するように構成されている、請求項２に記載の血液分析装置。
【請求項７】
前記光源は、前記第２測定試料の流れに向けて光を照射するように構成されており、
前記光学検出部は、前記光源が前記第２測定試料の流れに光を照射したときに前記第２測定試料から発せられる散乱光及び蛍光を受光して前記第２信号を出力するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記第２信号に基づいて、前記第２測定試料中に含まれる有核赤血球を計数するように構成されており、
前記出力手段は、前記リンパ芽球及び有核赤血球を含む細胞群に含まれる細胞の数から、有核赤血球の数を差し引いた数を、前記リンパ芽球の計数結果として出力するように構成されている、請求項６に記載の血液分析装置。
【請求項８】
前記血液検体に含まれる有核赤血球に係る検出結果に関する情報を入力するための入力手段をさらに備え、
前記出力手段は、前記情報処理手段による検出結果及び前記入力手段に入力された有核赤血球の出現に関する情報に基づいて、リンパ芽球の出現に関する情報を出力するように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項９】
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、測定試料中に含まれるリンパ芽球及び有核赤血球を含む第１細胞群と、前記測定試料中に含まれる骨髄芽球及び幼若顆粒球を含む第２細胞群とを検出するように構成されており、
前記出力手段は、前記血液検体における骨髄芽球の出現に関する情報、及び前記血液検体における幼若顆粒球の出現に関する情報をさらに出力するように構成されている、請求項１乃至８の何れかに記載の血液分析装置。
【請求項１０】
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出するように構成されており、
前記出力手段は、成熟白血球の出現に関する情報を出力するように構成されている、請求項９に記載の血液分析装置。
【請求項１１】
前記光学検出部は、さらに前記光が照射された測定試料から発せられる散乱光を受光するように構成されており、
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第２細胞群を、骨髄芽球を含む細胞群と、幼若顆粒球を含む細胞群とにさらに分類するように構成されている、請求項９に記載の血液分析装置。
【請求項１２】
前記情報処理手段は、前記光学検出部によって受光された蛍光に基づいて、前記第１細胞群と、前記第２細胞群と、測定試料中に含まれる成熟白血球を含む第３細胞群とを検出し、前記光学検出部によって受光された散乱光及び蛍光に基づいて、前記第３細胞群を、少なくとも３種類の成熟白血球に分類するように構成されている、請求項１１に記載の血液分析装置。
【請求項１３】
前記光学検出部は、前記散乱光として、前記光が照射された測定試料から発せられる前方散乱光又は側方散乱光を受光するように構成されている、請求項１１又は１２に記載の血液分析装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３Ａ】
【図１３Ｂ】
【図１４】
【図１６Ａ】
【図１６Ｂ】
【図１７】
【図１８Ａ】
【図１８Ｂ】
【図１９】
【図１５Ａ】
【図１５Ｂ】
【図１５Ｃ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３Ａ】
【図１３Ｂ】
【図１４】
【図１６Ａ】
【図１６Ｂ】
【図１７】
【図１８Ａ】
【図１８Ｂ】
【図１９】
【図１５Ａ】
【図１５Ｂ】
【図１５Ｃ】
【公開番号】特開２０１０−２３７１４７（Ｐ２０１０−２３７１４７Ａ）
【公開日】平成２２年１０月２１日（２０１０．１０．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−８７６０９（Ｐ２００９−８７６０９）
【出願日】平成２１年３月３１日（２００９．３．３１）
【出願人】（３９００１４９６０）シスメックス株式会社 (810)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１０月２１日（２０１０．１０．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年３月３１日（２００９．３．３１）
【出願人】（３９００１４９６０）シスメックス株式会社 (810)
【Ｆターム（参考）】
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