複素二環スピロ化合物
複素二環スピロ化合物；それら化合物を含む医薬組成物；並びにアルツハイマー病、インスリン抵抗性症候群、及び２型糖尿病を含む、Ｍ１ムスカリン受容体の調節に感受性である疾患及び症状の哺乳類を治療するための方法が開示されている。他の実施形態も開示されている。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２００９年１月２６日に出願された米国特許仮出願第６１／１４７１４３号の優先権を主張するものである。この仮出願の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）のリガンドであり、特にムスカリン受容体アゴニストとして機能する複素二環スピロ化合物、これら化合物を含む医薬組成物、並びに哺乳類のアルツハイマー病、及びインスリン抵抗性症候群、及び２型糖尿病を治療するための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
医学的必要性が満たされていない広範囲の疾患は、それぞれプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）活性化因子及びグリコゲン合成酵素キナーゼ−３β（ＧＳＫ−３β）阻害剤により原理的に治療可能であり得る幾つかの共通した病因を共有している。３つのそのような疾患状態、アルツハイマー病（ＡＤ）（神経学的な中枢神経（ＣＮＳ）疾患）、並びにインスリン抵抗性症候群（ＩＲＳ）及び２型糖尿病（Ｔ２Ｄ）（互いに関連する２つの代謝疾患）が、下記で簡潔に記述されている。ＩＲＳ／Ｔ２ＤとＡＤとの間には密接な関連性が存在する（Ｓｉｍａ及びＬｉ、Ｒｅｖ．Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｓｔｕｄ．２００６年、３巻：１６１〜１６８頁）。
【０００４】
ＡＤは、進行性の記憶喪失により、シナプスの喪失により、β−アミロイド（Ａβ）で構成される老人斑の存在により、神経原線維のもつれ（ＮＦＴ）の存在により、及び前脳基底部のコリン作動性ニューロンの喪失により臨床的に特徴付けられる変性脳障害である。Ａβは、神経毒性ペプチドである。タウ（τ）は、神経突起伸長に必要な微小管結合タンパク質である。過剰リン酸化型タウタンパク質は実際に毒性であり、対らせん状細線維（ＰＨＦ）及びＮＦＴの主成分である。インスリン抵抗性は、慢性の末梢インスリン上昇を誘導し、インスリン活性を低減し、脳インスリンレベルを低減する。ＩＲＳ並びにＴ２Ｄ及び高血圧などの関連症状は、加齢性記憶障害及びＡＤと関連している（Ｓｉｍａ及びＬｉ、Ｒｅｖ Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｓｔｕｄ ２００６年、３巻：１６１〜１６８頁、）に関係している。
【０００５】
多数のキナーゼが、ＡＤ病理及びＩＲＳ／Ｔ２Ｄに関与している。したがって、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の量は、ＡＤを罹患している人々の脳で減少しており、この減少は、神経病理学的な病期と相関することが示されている。これにより、このキナーゼがＡＤの主要な治療標的として重要であることが強調される（Ｋｕｒｕｍａｔａｎｉら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ １９９８年；７９６巻：２０９〜２１頁）。
【０００６】
別のキナーゼ、ＧＳＫ−３βは、細胞膜から核へのシグナル伝達、遺伝子転写、翻訳、細胞骨格形成から、細胞周期進行及び生存に及ぶ数多くの細胞プロセスにおいて重要な調節的役割を果たす（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌｅｃ Ｍｅｄ．２００２年、８巻：１２６〜３２頁；Ｂｈａｔら、Ｎｅｕｒｏｓｉｇｎａｌｓ ２００２年、１１巻：２５１〜６１頁；Ｂａｌａｒａｍら、Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ２００６年、６３巻：１２２６〜３５頁）。ＧＳＫ−３βは、ＡＤタウ過剰リン酸化、Ａβ誘導性神経毒性、及びプレセニリン−１（ＰＳ−１）突然変異病原性効果などのＡＤに関連する主要な異常のほとんどに関連している。活性ＧＳＫ−３βは、細胞死に関与するシグナル伝達事象を開始させ、一部のＡＤ病理が、異常なＧＳＫ−３β発現及び活性に起因している可能性を示している。さらに、ＧＳＫ−３βの不活化は、Ａβ分泌の減少と相関している（Ｓｕｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２００２年、３２１巻：６１〜４頁）。現在、ＧＳＫ−３βは、β−アミロイドとタウ病理とを結び付けるために欠けている部分であることが仮定されており、ＧＳＫ−３βは、ＡＤの病因に顕著に関与するものとして位置付けられている［Ｔａｋａｓｈｉｍａ、Ｊ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ ２００６年、９巻（付録３）、３０９〜１７頁］。
【０００７】
ＧＳＫ−３βは、グリコゲン合成酵素をリン酸化し、グルコース代謝経路を制御する。したがって、ＧＳＫ−３βは、インスリンシグナル伝達経路における中心的な負の制御因子であり、インスリン抵抗性に役割を有している可能性がある（Ｇａｓｐａｒｉｎｉら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００２年：２３巻：２８８〜９２頁；Ｊａｎｓｓｅｎｓら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ ２００６年；２４巻：２６３〜８０頁）。
【０００８】
したがって、ＧＳＫ−３βの阻害は、ＧＳＫ−３β経路を使用する、インスリンなどの特定のホルモン及び増殖因子の作用を模倣することができる。この戦略より、シグナル伝達機構の欠損受容体（例えば、インスリン受容体）又は別の欠陥部分を迂回することが可能になる場合があり、その結果、インスリン非依存性２型糖尿病などのように、シグナル伝達カスケードの幾つかの上流関与体に欠陥がある場合でさえ、生物学的なシグナルは効果を現すことになる［Ｔａｎａｂｅら、ＰＬｏＳ Ｂｉｏｌ． ２００８年（２）：ｅ３７；Ｗａｇｍａｎら、Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ、２００４年 １０巻：１１０５〜１１３７頁］。
【０００９】
上記で言及されている疾患の治療戦略には、ＰＫＣ活性化因子及びＧＳＫ−３β阻害剤が含まれていてもよい。これは、原理的に、これらキナーゼの間接的（ＧＰＣＲ媒介性）又は直接的調節のいずれかにより達成することができる。直接的なＰＫＣ活性化因子又はＧＳＫ−３β阻害剤の場合には、非常に強力で選択的なリガンドが探究される。しかしながら、それらの標的キナーゼが多数のプロセス及び下流カスケードに関与するため、そのような治療戦略では、有害効果はなくならないだろう。したがって、ある経路（および関連疾患）におけるそれらの機能について、これらキナーゼを直接的に標的とすることにより、別の経路におけるそれらの機能が変更され、重大な副作用（非特異的副作用）を起こす可能性があるだろう。
【００１０】
したがって、これらキナーゼを直接的に標的とする化合物を用いた理想的な療法は、疾患状態に関与する別々の経路（複数可）を選択的に調節するべきである。そのようなキナーゼは、ＧＰＣＲを介して細胞膜の外部から調節することができる。ＧＰＣＲは、細胞の外部から受け取ったシグナルを、シグナル伝達経路を介して細胞内部の生物学的プロセスへと変換する。ＧＰＣＲにより調節されるそのようなシグナル伝達経路は、細胞及び生物が微弱なシグナルを増幅してロバストな応答を生成することができる洗練された系である。この下流増幅プロセスにより、適度な結合能力を有し、ＡＤ、ＩＲＳ、及びＴ２Ｄなどの慢性疾患状態の長期治療後にＧＰＣＲ媒介性シグナル伝達の除感作を引き起こさない部分的アゴニストの臨床開発が可能になる。
【００１１】
ＧＰＣＲ調節の薬物候補は、他のＧＰＣＲサブタイプの活性化を防止するために、標的ＧＰＣＲサブタイプに対して選択性を有することが望ましい。ムスカリン受容体（ｍＡＣｈＲ）は、ＧＰＣＲのサブクラスである。Ｍ１〜Ｍ５と呼ばれる５つの遺伝子的に異なるヒトムスカリン受容体がクローニングされている（Ｂｕｃｋｌｅｙら、Ｍｏ１ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９８９年；３５巻：４６９〜７６頁；Ｈｕｌｍｅら、Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ １９９０年；３０巻：６３３〜７３頁）。皮質、海馬、及び線条体に広く分布しているＭ１ ｍＡＣｈＲは、認知処理、特にＡＤにおいて損なわれる短期記憶に重要な役割を有する。Ｍ１選択的ムスカリンアゴニストは、抗認知症薬物治療として機能する場合がある。そのような化合物の治療能力は、原理的に、コリンエステラーゼ阻害剤（ＡＣｈＥ−Ｉｓ）ほどシナプス前コリン作動性端末の変性の程度により影響を受けないはずであり、したがってＦＤＡ承認のＡＣｈＥ−Ｉｓより合理的なＡＤ治療であり得る（総説：Ｆｉｓｈｅｒ、Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、５巻：４３３〜４２頁、２００８年）。多くの二環式スピロ化合物が開示されており、幾つかはＭ１選択的アゴニストであることが報告されている（米国特許第４，８５５，２９０号、第４，９８１，８５８号、第４，９００，８３０号、第４，８７６，２６０号、第５，０５３，４１２号、第５，４０７，９３８号、第５，５３４，５２０号、第５，８５２，０２９号、第７，０４９，３２１号、第５，２２１，６７５号、第７，３４９，２５１号）。
【００１２】
ＡＤの主な顕著な特徴のうちの３つ：ＣＮＳコリン作動性機能低下、Ａβペプチドアミロイド斑の形成、及び過剰リン酸化型タウタンパク質を含有するもつれの間に関連性があることが報告されている。この状況では、ＡＤにおけるコリン作動性機能低下とＡβペプチド及びタウリン酸化とが、悪循環で結び付けられる。Ｍ１ ｍＡＣｈＲの刺激は、そのβ−アミロイド領域の中央でのアミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）の切断を増加させる場合がある。この切断により、分泌性で神経組織栄養性の神経保護性ＡＰＰ（α−ＡＰＰ）が産生され、Ａβペプチドの形成が防止される。Ｍ１アゴニストは、ＡＤのα−セクレターゼプロセシング経路を選択的に亢進することにより、Ａβ形成を防止するという点で価値がある場合がある。さらに、Ｍ１ ｍＡＣｈＲの刺激は、タウ過剰リン酸化を減少させることができる（総説：Ｆｉｓｈｅｒ、Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ５巻：４３３〜４２頁、２００８年）。したがって、ＧＰＣＲサブタイプの幾つか及び特にＭ１ ｍＡＣｈＲは、健康時及び疾患時の両方において数多くの機能の調節に関与する。ＰＫＣは、Ｍ１ ｍＡＣｈＲ、代謝調節型受容体、及びＷｎｔシグナル伝達を含むがそれらに限定されない幾つかのＧＰＣＲにより活性化することができる（Ｆａｒｉａｓら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．２００４年、４７巻：３３７〜４８頁；Ｍｕｄｈｅｒら、Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００１年、２１巻：４９８７〜９５頁；Ｂａｌｌｏｕら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１年、４４巻：４０９１０〜９１６頁）。
【００１３】
一般的に、ＧＰＣＲは、複数の部位を含有することができる。この状況では、ｍＡＣｈＲサブタイプは、オルソステリック部位（天然神経伝達物質であるアセチルコリンの主要な結合部位）及びアロステリック部位（オルソステリック部位及びアセチコリン（ａｃｅｔｙｃｈｏｌｉｎｅ）の効果を変更してもよく、変更しなくてもよい）を両方とも含有する。
【００１４】
それぞれＡＤ及びＩＲＳ／Ｔ２Ｄを含むＣＮＳ及びＰＮＳ疾患の病理学的特徴の多くは、酸化ストレス関連の特徴を伴っている。Ａβにより引き起こされるＡＤの酸化ストレスは、一連の事象及び悪循環を増幅させる場合があり、幾つかのＧＰＣＲ誘導性シグナル伝達の遮断（最も良く記述されているのはＭ１ ｍＡＣｈＲについてである）及び神経毒性Ａβのさらなる蓄積に結び付く。酸化防止剤は、原理的にそのような悪循環を防止することができる（Ｆｉｓｈｅｒ、Ｊａｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００年、８４巻：１０１〜１２頁；Ｋｅｌｌｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９６年 ９３巻：６７５３〜５８頁）。
【００１５】
酸化ストレスは、最終的に、Ｔ２Ｄの発症及びその後の合併症の両方に結び付く場合がある。酸化防止剤治療は糖尿病の動物モデルで有益性を示す場合があるが、新しいより強力な酸化防止剤は、酸化防止剤が合併症の治療に有効であり得るかどうかが実証されることが必要である。さらに、酸化ストレスは、糖尿病合併症に寄与する１つの因子に過ぎないと考えられるため、酸化防止剤治療は、糖尿病合併症の他の治療と併用された方が、より有効である可能性が高いだろう。特に、代謝調節型受容体シグナル伝達（例えば、ＧＰＣＲ媒介性シグナル伝達）及びＧＳＫ−３βが関与する新規経路は、糖尿病に関与する可能性があり、包括的な治療戦略で取り組まれる必要があるだろう（Ｍａｉｅｓｅら、Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２００７年 １４巻：１７２９〜３８頁。総説）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】米国特許第４，８５５，２９０号
【特許文献２】米国特許第４，９８１，８５８号
【特許文献３】米国特許第４，９００，８３０号
【特許文献４】米国特許第４，８７６，２６０号
【特許文献５】米国特許第５，０５３，４１２号
【特許文献６】米国特許第５，４０７，９３８号
【特許文献７】米国特許第５，５３４，５２０号
【特許文献８】米国特許第５，８５２，０２９号
【特許文献９】米国特許第７，０４９，３２１号
【特許文献１０】米国特許第５，２２１，６７５号
【特許文献１１】米国特許第７，３４９，２５１号
【特許文献１２】国際公開第９７／１１６８２号
【特許文献１３】欧州特許第７３６２９９号
【特許文献１４】国際公開第９９／５９５５０号
【特許文献１５】国際公開第９７／１３５００号
【特許文献１６】国際公開第０３／０９４８８６号
【特許文献１７】米国特許出願公開第２００２００６１３３６号
【特許文献１８】国際公開第００／４５７９２号
【特許文献１９】国際公開第００／５３１６０号
【特許文献２０】国際公開第０２／１９９８９号
【特許文献２１】国際公開第８９／０４１７９号
【特許文献２２】国際公開第９６／１１７０５号
【特許文献２３】国際公開第９０／０７９２３号
【特許文献２４】米国特許第６，４８５，７０６号
【特許文献２５】国際公開第０２／４９６２１号
【特許文献２６】米国特許第５，１７９，０７９号
【特許文献２７】国際公開第００／６２７５９号
【特許文献２８】米国特許出願公開第２００３０２０６９３９号
【特許文献２９】国際公開第００／０６１０８号
【特許文献３０】米国特許出願公開第２００２００３４５３６号
【特許文献３１】米国特許第６，５２４，５５７号
【特許文献３２】米国特許第６，６３２，４５６号
【特許文献３３】国際公開第０２／０８０８８４号
【特許文献３４】米国特許第５，２３０，８８４号
【特許文献３５】米国特許第５，２９２，４９９号
【特許文献３６】国際公開第０１７／８６９４号
【特許文献３７】国際公開第０１／７８６９６号
【特許文献３８】米国特許出願第２００３０１９４３７号
【特許文献３９】米国特許出願公開第２００３０１６５４３６号
【特許文献４０】国際公開第９６／４００８９号
【特許文献４１】米国特許出願公開第２００１００３６４８１号Ａ１
【特許文献４２】米国特許出願公開第２００３０２３２０１９号Ａ１
【特許文献４３】米国特許出願公開第２００４００１８２４３号Ａ１
【特許文献４４】国際公開第０１／１３８９１号
【特許文献４５】国際公開第０２／０６７９０２号
【特許文献４６】国際公開第０３／０７２０８０号
【特許文献４７】国際公開第０３／０７９８８５号
【特許文献４８】国際公開第０３／０１５７５０号
【特許文献４９】米国特許出願公開第２００３０００８０１３号
【特許文献５０】国際公開第００／００１７６号
【特許文献５１】米国特許出願公開第２００２０１４１９４５号
【特許文献５２】米国特許第６，３０９，６７１号
【特許文献５３】欧州特許出願公開第１３３８２７２号Ａ１
【特許文献５４】国際公開第９０／０９７８１号
【特許文献５５】米国特許第５，３４８，７３０号
【特許文献５６】米国特許第６，４３６，３６７号
【特許文献５７】国際公開第９１／０４０１１号
【特許文献５８】米国特許第６，２９４，１５３号
【特許文献５９】米国特許第６，２９０，９８７号
【特許文献６０】米国特許出願公開第２００３００５３９６０号
【特許文献６１】国際公開第０１／６０３４１号
【特許文献６２】米国特許出願公開第２００１００３８８２４号
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Ｓｉｍａ及びＬｉ、Ｒｅｖ．Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｓｔｕｄ．２００６年、３巻：１６１〜１６８頁
【非特許文献２】Ｋｕｒｕｍａｔａｎｉら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ １９９８年；７９６巻：２０９〜２１頁
【非特許文献３】Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌｅｃ Ｍｅｄ．２００２年、８巻：１２６〜３２頁
【非特許文献４】Ｂｈａｔら、Ｎｅｕｒｏｓｉｇｎａｌｓ ２００２年、１１巻：２５１〜６１頁
【非特許文献５】Ｂａｌａｒａｍら、Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ２００６年、６３巻：１２２６〜３５頁
【非特許文献６】Ｓｕｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２００２年、３２１巻：６１〜４頁
【非特許文献７】Ｔａｋａｓｈｉｍａ、Ｊ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ ２００６年、９巻（付録３）、３０９〜１７頁
【非特許文献８】Ｇａｓｐａｒｉｎｉら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００２年：２３巻：２８８〜９２頁
【非特許文献９】Ｊａｎｓｓｅｎｓら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ ２００６年；２４巻：２６３〜８０頁
【非特許文献１０】Ｔａｎａｂｅら、ＰＬｏＳ Ｂｉｏｌ．２００８年（２）：ｅ３７
【非特許文献１１】Ｗａｇｍａｎら、Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ、２００４年 １０巻：１１０５〜１１３７頁
【非特許文献１２】Ｂｕｃｋｌｅｙら、Ｍｏ１ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９８９年；３５巻：４６９〜７６頁
【非特許文献１３】Ｈｕｌｍｅら、Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ １９９０年；３０巻：６３３〜７３頁
【非特許文献１４】Ｆｉｓｈｅｒ、Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、５巻：４３３〜４２頁、２００８年
【非特許文献１５】Ｆａｒｉａｓら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．２００４年、４７巻：３３７〜４８頁
【非特許文献１６】Ｍｕｄｈｅｒら、Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００１年、２１巻：４９８７〜９５頁
【非特許文献１７】Ｂａｌｌｏｕら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１年、４４巻：４０９１０〜９１６頁
【非特許文献１８】Ｆｉｓｈｅｒ、Ｊａｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００年、８４巻：１０１〜１２頁
【非特許文献１９】Ｋｅｌｌｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９６年 ９３巻：６７５３〜５８頁
【非特許文献２０】Ｍａｉｅｓｅら、Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２００７年 １４巻：１７２９〜３８頁
【非特許文献２１】Ｎａｍｉｎｇ ａｎｄ Ｉｎｄｅｘｉｎｇ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｆｏｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ、米国化学会
【非特許文献２２】Ｍａｅｈｒ Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．６２巻、１１４〜１２０頁（１９８５年）
【非特許文献２３】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、２０００年
【非特許文献２４】Ｐｒａｕｓｎｉｔｚら、２００４年 Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ３巻：１１５頁
【非特許文献２５】Ｓｐｒｏｗｌｓ’ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｙ
【非特許文献２６】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ
【非特許文献２７】Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁
【非特許文献２８】Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ９（２００５年）４、２９１〜２９３頁
【非特許文献２９】Ｓｕｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ２００３年、１００巻：１３６７４〜１３６７９頁
【非特許文献３０】Ｆａｇａｒａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔ．１９９６年、１巻：３９８〜４０３頁
【非特許文献３１】Ｓｈｅａｒｍａｎら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ １９９４年、９１巻：１４７０〜７４頁
【非特許文献３２】Ｈａｒｉｎｇら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、１９９８年、７１巻：２０９４〜１０３頁
【非特許文献３３】Ｆａｎｇら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２００２年、２２巻：２０９９〜１１０頁
【非特許文献３４】Ｄｏｂｌｅら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．２００３年、１１６巻：１１７５〜８６頁
【非特許文献３５】Ｆｉｓｈｅｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐｔｌ．Ｔｈｅｒａｐ．１９９１年、２５７巻：３９２〜４０３頁
【非特許文献３６】Ｂｙｍａｓｔｅｒら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２６７巻：１６〜２４頁、１９９３年
【非特許文献３７】Ｒｏｌｄａｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２３０巻：９３〜９６頁、１９９７年
【非特許文献３８】Ｋｉｍｕｒａら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８３４巻：６〜１２頁、１９９９年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明の実施形態によると、式Ｉのスピロ化合物又はその薬学的に許容される塩が提供される：
【００１９】
【化１】
【００２０】
式中、Ａは、
【００２１】
【化２】
【００２２】
【化３】
【００２３】
【化４】
【００２４】
及び
【００２５】
【化５】
からなる群から選択され
式中、
全ての構造において、「Ｃ」と示されている炭素はスピロ炭素を示し、 Ｒは、Ｈ及び随意に置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、 ｎ及びｐは、各々独立して０、１、２、及び３から選択され、ただしｎ＋ｐ＝ｌ、２、又は３であり、
Ｙは、−Ｏ−又は−Ｓ−であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ６は、各々独立して、Ｈ、随意に置換されたＣ１〜６アルキル、随意に置換されたＣ１〜６アルコキシ、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、及び随意に置換されたフェニルから選択され、
Ｒ５は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、随意に置換されたＣ２〜６アルキニル、随意に置換されたフェニル、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換されたへテロアリール、随意に置換されたＣ１〜６アルキルへテロアリール、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８、−ＳＯ２−Ｒ９から選択され、Ａが、
【００２６】
【化６】
−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８である場合、
Ｒ８は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜７アルコキシ、随意に置換されたＣ２〜７ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜７アルケニル、随意に置換されたＣ２〜７アルキニル、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、随意に置換されたアリール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換された〜Ｃ２〜３アルケニルインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドリジン、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルイソインドール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインダジオール（ａｌｋｙｌｉｎｄａｚｉｏｌｅ）、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインダゾール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインダゾール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルベンズイミダゾール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルベンズイミダゾール、及び随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシベンズイミダゾールから選択され、
Ｒ９は、アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、ヒドロキシル、及びＣＦ３からなる群の１つ又は複数のメンバーにより置換されたアリールである。
【００２７】
本発明の幾つかの実施形態では、Ｒはメチルである。本発明の幾つかの実施形態では、ｐ及びｎは、各々１である。
【００２８】
幾つかの実施形態では、Ａは、
【００２９】
【化７】
である。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３０】
【化８】
である。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３１】
【化９】
である。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３２】
【化１０】
幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３３】
【化１１】
である。
【００３４】
本発明の幾つかの実施形態では、Ｒ１はメチルである。幾つかの実施形態では、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２はＨである。幾つかの実施形態では、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、各々Ｈである。
【００３５】
幾つかの実施形態では、Ｒ６はＨである。
【００３６】
本発明の幾つかの実施形態では、ＹはＳである。幾つかの実施形態では、ＹはＯである。
【００３７】
幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１〜３）−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−（（１−メチル）−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、ｔｒａｎｓ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−ＳＯ２−４−フルオロフェニルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ｎ−プロピル）２である。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−（４−ヒドロキシ−３，５−ジ−ｔｅｒｔブチルフェニル）である。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ３である。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３８】
【化１２】
であり、Ｒ５は、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである。
【００３９】
本発明の幾つかの実施形態では、化合物は、以下のうちの１つから選択される：
【００４０】
【化１３】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【００４１】
【化１４】
（（Ｒ））−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【００４２】
【化１５】
（（Ｓ））−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【００４３】
【化１６】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【００４４】
【化１７】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピルペンタン−１−オン）、
【００４５】
【化１８】
（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−メタノン）、
【００４６】
【化１９】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール３−イル）ブタン−１−オン）、
【００４７】
【化２０】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール３−イル）エタン−１−オン）、
【００４８】
【化２１】
【００４９】
【化２２】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール３−イル）プロパ−２−エン−１−オン）、
【００５０】
【化２３】
１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン−１−オン、
【００５１】
【化２４】
１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５２】
【化２５】
（（Ｒ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５３】
【化２６】
（（Ｓ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５４】
【化２７】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【００５５】
【化２８】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【００５６】
【化２９】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−４−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５７】
【化３０】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−４−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【００５８】
【化３１】
（４−（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］−デカン）、
【００５９】
【化３２】
（１’，４−ジメチル−６−（３−インドールプロピオニル）−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、及び
【００６０】
【化３３】
（１’，４−ジメチル−６−［３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）］−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、
【００６１】
【化３４】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【００６２】
【化３５】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【００６３】
【化３６】
（３Ｅ）−２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン−Ｏ−［３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］オキシム、
【００６４】
【化３７】
（Ｄ）−２−アミノ−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、又はそれらの薬学的に許容される塩。
【００６５】
本発明の幾つかの実施形態によると、以下のものからなる群から選択される化合物も提供される：（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン、（＋）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、（−）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、（＋）−１−（２、８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、及び（−）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン。
【００６６】
本発明の実施形態によると、本明細書に記載されている化合物、及びその薬学的に許容される担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物も提供される。
【００６７】
本発明の実施形態によると、アルツハイマー病を治療するための方法であって、そのような治療を必要性とする患者に、本明細書に記載されている有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。
【００６８】
本発明の実施形態によると、インスリン抵抗性症候群を治療するための方法であって、そのような治療を必要性とする患者に、本明細書に記載されている有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。
【００６９】
本発明の実施形態によると、２型糖尿病を治療するための方法であって、そのような治療を必要性とする患者に、本明細書に記載されている有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。
【００７０】
本発明の実施形態によると、Ｍ１ムスカリン受容体調節因子による治療に感受性である疾患又は症状を治療するための方法であって、その必要がある患者に、本明細書に記載されている治療上有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。幾つかの実施形態では、疾患又は症状は、以下のものからなる群から選択される：脳アミロイド媒介性障害；ＧＳＫ３β媒介性障害；Ｗｎｔ−シグナル伝達の異常；タウタンパク質過剰リン酸化媒介性損傷、機能不全、又は疾患；内因性成長因子媒介性疾患；ＡＤ及び／又は前述の疾患のリスク因子の組合せ、例えば頭部損傷、酸化ストレス、フリーラジカル、アポトーシス、炎症、外来性又は内因性毒素、興奮毒、遺伝的素因、免疫又は自己免疫性機能不全又は疾患（例えば、狼瘡、多発性硬化症、シェーグレン症候群、慢性疲労症候群、線維筋痛）；及びコリン作動性機能不全の関与が示唆されている障害を伴う疾患状態。幾つかの実施形態では、疾患又は症状は、以下のものからなる群から選択される：ＡＤ、レビー小体認知症、脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、大脳アミロイドーシス、前頭側頭型認知症、血管性認知症、高脂血症、高コレステロール血症、前頭側頭型認知症、血管性認知症、多発梗塞性認知症（ＭＩＤ）、脳卒中虚血（ｓｔｒｏｋｅ ｉｓｃｈｅｍｉａ）、脳卒中／虚血／頭部損傷を伴うＭＩＤ、ＭＩＤ及びＡＤの併発、ＡＤ及びＰＤの併発、ヒト頭部損傷、加齢性記憶障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＡＤに至るＭＣＩ、双極性障害、躁病、急性錯乱障害、注意欠陥障害、幻覚−妄想性状態、情緒及び注意障害、術後せん妄（全身麻酔後の抗コリン作動性症候群）、三環系抗うつ薬又は統合失調症及びＰＤの治療に使用される特定の薬物（例えば、トリヘキシフェニジル）の有害効果（口内乾燥、失名辞、記憶喪失、及び／又は錯乱、精神病）のアンタゴニズム、統合失調症、双極性障害、躁病、遅発性ジスキネジー、先天性オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症、オリーブ橋小脳萎縮症、アルコール離脱症状、ハンチントン舞踏病、ピック病、フリードライヒ運動失調症（Ｆｒｉｅｄｒｉｃｋ’ｓ ａｔａｘｉａ）、ジルドラツレット病、及びダウン症候群。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１Ａ】ＡＦ７１０及びＡＦ７１０Ｂが、Ｍ１ ｍＡＣｈＲのオルソステリック部位と相互作用せず、したがってアロステリックなアゴニストであることを示す。
【図１Ｂ】ＡＦ７１０及びＡＦ７１０Ｂが、Ｍ１ ｍＡＣｈＲのオルソステリック部位と相互作用せず、したがってアロステリックなアゴニストであることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００７２】
定義 用語及び置換基は、本明細書の全体にわたって、それらの定義を保持する。
【００７３】
アルキルは、直鎖、分岐、又は環式炭化水素構造及びそれらの組合せを含むことが意図されている。別様に制限されていない場合、この用語は、２０個以下の炭素のアルキルを指す。低級アルキルは、１、２、３、４、５、及び６個の炭素原子のアルキル基を指す。低級アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、並びにｓ−ブチル及びｔ−ブチルなどが含まれる。シクロアルキルは、アルキルのサブセットであり、それには、３、４、５、６、７、及び８個の炭素原子の環式炭化水素基が含まれる。シクロアルキル基の例には、ｃ−プロピル、ｃ−ブチル、ｃ−ペンチル、ノルボルニル、及びアダマンチルなどが含まれる。
【００７４】
Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０）には、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、及びそれらの組合せが含まれる。例には、ベンジル、フェネチル、シクロヘキシルメチル、カンホリル（ｃａｍｐｈｏｒｙｌ）、及びナフチルエチルが含まれる。用語「フェニレン」は、下記式のオルト、メタ、又はパラ残基を指す：
【００７５】
【化３８】
【００７６】
【化３９】
及び
【００７７】
【化４０】
【００７８】
アルコキシ又はアルコキシルは、酸素を介して親構造に結合した直鎖状、分岐状、環状配置、及びそれらの組合せの１、２、３、４、５、６、７、又は８個の炭素原子の基を指す。例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、シクロプロピルオキシ、及びシクロヘキシルオキシなどが含まれる。低級アルコキシは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。本特許出願の目的では、アルコキシには、環を形成するようにメチレンジオキシ又はエチレンジオキシ基がそこから垂下している原子、鎖、又は環に各酸素原子が結合しているメチレンジオキシ及びエチレンジオキシが含まれる。したがって、例えば、アルコキシにより置換されたフェニルは、例えば、
【００７９】
【化４１】
又は
【００８０】
【化４２】
であってもよい。
【００８１】
オキサアルキルは、１つ又は複数の炭素（及びそれらに結合している水素）が、酸素により置換されたアルキル残基を指す。例には、メトキシプロポキシ、３，６，９−トリオキサデシルなどが含まれる。オキサアルキルという用語は、それが当技術分野で理解されているように意図されており［米国化学会が出版したＮａｍｉｎｇ ａｎｄ Ｉｎｄｅｘｉｎｇ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｆｏｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ、第１９６項を参照されたい。しかし第１２７（ａ）項の制限は適用されない。］、つまり、その隣接した原子に対する単結合を介して酸素が結合されている（エーテル結合を形成する）化合物を指す。同様に、チアアルキル及びアザアルキルは、１つ又は複数の炭素が、それぞれ硫黄又は窒素により置換されたアルキル残基を指す。例には、エチルアミノエチル及びメチルチオプロピルが含まれる。
【００８２】
アシルは、カルボニル官能基を介して親構造に結合した直鎖状、分岐状、環状配置、飽和、不飽和、及び芳香族、並びにそれらの組合せの１、２、３、４、５、６、７、及び８個の炭素原子の基を指す。アシル残基の１つ又は複数の炭素は、親構造との結合点がカルボニルである限り、窒素、酸素、又は硫黄により置換されていてもよい。例には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、イソブチリル、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンゾイル、及びベンジルオキシカルボニルなどが含まれる。低級アシルは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。
【００８３】
アリール及びへテロアリールは、置換基として、それぞれ芳香族環又は芳香族複素環を指す。へテロアリールは、Ｏ、Ｎ、又はＳから選択される１、２、又は３個のヘテロ原子を含有する。両方とも、単環式５員又は６員芳香族環又は芳香族複素環、二環式９員又は１０員芳香族環又は芳香族複素環、及び三環式１３員又は１４員芳香族環又は芳香族複素環を指す。芳香族６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、及び１４員炭素環には、例えば、ベンゼン、ナフタレン、インダン、テトラリン、及びフルオレンが含まれ、５、６、７、８、９、及び１０員芳香族複素環には、例えば、イミダゾール、ピリジン、インドール、チオフェン、ベンゾピラノン、チアゾール、フラン、ベンズイミダゾール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、ピリミジン、ピラジン、テトラゾール、及びピラゾールが含まれる。
【００８４】
アリールアルキルは、アリール環に結合したアルキル残基を意味する。例には、ベンジル及びフェネチルなどである。
【００８５】
置換アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリルなどは、各残基中の最大３個のＨ原子が、ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アシル、アルコキシアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル、へテロアリール、ベンゼンスルホニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロアルコキシ、カルボキシ、カルボアルコキシ（アルコキシカルボニルとも呼ばれる）、アルコキシカルボニルアミノ、カルボキサミド（アルキルアミノカルボニルとも呼ばれる）、シアノ、カルボニル、アセトキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、アルキルチオ、スルホキシド、スルホン、スルホニルアミノ、アシルアミノ、アミジノ、アリール、ベンジル、ヘテロシクリル、フェノキシ、ベンジルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシイミノ、アルコキシイミノ、オキサアルキル、アミノスルホニル、トリチル、アミジノ、グアニジノ、ウレイド、及びベンジルオキシにより置換されているアルキル、アリール、シクロアルキル、又はヘテロシクリルを指す。
【００８６】
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素を意味する。
【００８７】
置換基の幾つかの特徴付けでは、ある置換基は結合して環を形成することができることが記されている。別様の記載がない限り、そのような環は、種々の不飽和度（完全飽和から完全不飽和まで）を示していてもよく、ヘテロ原子を含んでいてもよく、低級アルキル又はアルコキシで置換されていてもよいことが意図されている。
【００８８】
用語「治療又は予防するための方法」は、列挙されている疾患、状態、又は症状に関連した徴候及び／又は効果の寛解、予防、又は軽減を意味する。本明細書で使用される場合、用語「予防する」は、急性発症を未然に防ぐか又は鈍化させるために、又は慢性症状の場合には、症状の発生可能性又は重症度を減少させるために、薬剤を投与することを指す。当医学技術（本方法の特許請求の範囲が関する）における当業者は、用語「予防」が絶対用語ではないことを認識している。当医学技術では、この用語は、症状の発生可能性又は重症度を実質的に減少させるための予防的な薬物投与を指すと理解されており、出願人らの特許請求の範囲で意図されている意味はこれである。本明細書で使用される場合、患者の「治療」に関しては、予防を含むことが意図されている。
【００８９】
本出願の全体にわたって、種々の出版物が引用されている。本明細書で言及されている特許、特許出願、特許広報、及び他の出版物の各々は、これによりその全体が参照により組み込まれる。
【００９０】
用語「哺乳類」は、その辞書的な意味で使用される。用語「哺乳類」には、例えば、マウス、ハムスター、ラット、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、及びウマ、サル、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、及びヒトを含む霊長類が含まれる。
【００９１】
本明細書に記載の化合物は、１つ又は複数の不斉中心を含有してもよく、したがってエナンチオマー、ジアステレオマー、及び他の立体異性体が生じる場合ある。各キラル中心は、絶対立体化学の点で（Ｒ）−又は（Ｓ）−として定義することができる。本発明は、ラセミ形態及び光学的に純粋な形態を含むそのような考え得る全ての異性体並びにそれらの混合物を含むことが意図されている。光学的に活性な（Ｒ）−及び（Ｓ）−、（−）−及び（＋）−、又は（Ｄ）−及び（Ｌ）−異性体は、キラルシントン又はキラル試薬を使用して調製してもよく、又は従来技術を使用して分離してもよい。
【００９２】
本明細書で使用される場合、当業者であれば理解するように、「化合物」という記述は、その化合物の塩、溶媒和物、及び挿入錯体（ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｘ）、並びにあらゆる立体異性体又はその化合物のそのようなあらゆる形態の任意の比率の混合物を含むことが意図される。したがって、本発明の幾つかの実施形態によると、医薬組成物、治療法、及び化合物それ自体での状況を含む本明細書に記載の化合物は、塩の形態で提供される。代表的な好適な塩には、以下の酸と形成される塩が含まれる：塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、ギ酸、パルミチン酸、安息香酸、グルタル酸、コール酸、パモ酸、ムチン酸、Ｄ−グルタミン酸、ｄ−ショウノウ酸、グリコール酸、フタル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、及びケイ皮酸など。
【００９３】
本明細書で使用されるラセミ化合物、アンビスケールミック（ａｍｂｉｓｃａｌｅｍｉｃ）化合物、スケールミック（ｓｃａｌｅｍｉｃ）化合物、又はエナンチオ的に純粋な化合物の図的表現は、Ｍａｅｈｒ Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．６２巻、１１４〜１２０頁（１９８５年）か引用されている：くさび型の実線及び破線は、キラル要素の絶対配置を示すために使用され、波線は、それが表す結合が生成し得るあらゆる立体化学的関係の否定を示し、実線又は破線の太線は、示されている相対配置を示すがラセミ特徴を示す幾何学的な記述子であり、くさび型の輪郭及び点線又は破線は、絶対配置が未定のエナンチオ的に純粋な化合物を示す。したがって、例えば、式Ｗは、その対の純粋なエナンチオマーを両方とも包含することが意図されており、
【００９４】
【化４３】
Ｗは、
【００９５】
【化４４】
及び
【００９６】
【化４５】
を意味し、
その一方で、式Ｘは、４つのジアステレオマーを表すことが意図されており、
【００９７】
【化４６】
Ｘは、
【００９８】
【化４７】
【００９９】
【化４８】
【０１００】
【化４９】
及び
【０１０１】
【化５０】
を意味する。
【０１０２】
用語「エナンチオマー過剰率」は、当技術分野で周知であり、ａｂのａ＋ｂへの分離に関しては以下のように定義される：
【０１０３】
【数１】
用語「エナンチオマー過剰率」は、両方が同じ現象の尺度であるという点で、より古い用語「光学純度」と関連している。ｅｅの値は、０〜１００の数値となるはずであり、ゼロはラセミであり、１００は純粋な単一エナンチオマーである。過去には９８％の光学純度と呼ばれていた場合がある化合物は、現在ではより正確に９６％のｅｅと記述されており、言い換えれば、９０％のｅｅは、目的の物質中に一方のエナンチオマーが９５％存在し、他方が５％存在することを反映する。
【０１０４】
別様の指示がない限り、環の一部ではない本明細書に見られるあらゆる炭素間二重結合の配置は、便宜的に選択されているに過ぎず、特定の配置を指定することは意図されておらず、したがって、別様の指示がない限り、適宜的にＥとして本明細書に示されている非環式炭素間二重結合は、Ｚ、Ｅ、又は任意の割合の２つの混合物であり得る。同様に、全ての互変異性体が含まれることが意図されている。
【０１０５】
Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｈ、Ｔｆ、Ｔｓ、及びＭｓという略語は、それぞれメチル、エチル、フェニル、トリフルオロメタンスルホニル、トルエンスルホニル、及びメタンスルホニルを表す。以下の略語及び用語は、全体にわたって、指示されている意味を有する：
ａｂｓ＝絶対
Ａｃ＝アセチル ＡＣＮ＝アセトニトリル Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル Ｂｕ＝ブチル
ｃ−＝シクロ ＣＤＩ＝カルボジイミド ｃｏｎｃ．＝濃縮
ＤＣＭ＝ジクロロメタン＝塩化メチレン＝ＣＨ２Ｃｌ２ ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミド ＤＭＡＰ＝４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン Ｅｔ＝エチル ＦＣＣ＝フラッシュカラムクロマトグラフィー ＧＣ＝ガスクロマトグラフィー ＨＯＢｔ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール ＨＰＬＣ＝高速（又は高圧）液体クロマトグラフィー ｉ−＝イソ−
ＩＰＡ＝イソプロピルアルコール Ｍｅ＝メチル Ｐｈ又はκ＝フェニル
ｐｐｔ．＝沈殿物
Ｐｒ＝プロピル
ｒｔ＝室温 ｓａｔ’ｄ＝飽和
ｓ−＝二級
ｔ−＝三級
ＴＥＡ＝トリエチルアミン ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー ＴＭＳ＝トリメチルシリル ｔｏｓｙｌ＝ｐ−トルエンスルホニル
【０１０６】
有機化学者（つまり、当業者）により使用される略語の総覧は、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙの各巻の第１号に示されている。典型的には「略語の標準一覧表」と題する表に示されている一覧表は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１０７】
式Ｉの化合物は、Ｍ１ ｍＡＣｈＲ調節因子であり、つまり、それらはＭ１ ｍＡＣｈＲに結合し、この受容体のアゴニスト又はアンタゴニストのいずれかとして作用する。幾つかの場合では、調節はアロステリックであり、幾つかの場合ではオルソステリックであり、幾つかの場合では、その両方である。
【０１０８】
式Ｉの化合物は、化学薬品としてそのまま投与することが可能である場合があるが、医薬組成物（本明細書では製剤とも呼ばれる）の一部として提供することが望ましいことが多いだろう。本発明の実施形態によると、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を、その１つ又は複数の薬学的担体及び随意に１つ又は複数の他の治療成分を一緒に含む医薬組成物が提供される。担体（複数可）は、製剤の他の成分と適合し、その受容者に有害でないという意味において「許容」されなければならない。
【０１０９】
さらに、上述のように、用語「化合物」は、その塩も同様に含み、したがって「化合物」を記述する独立請求項は、その塩も同様に参照すると理解されるだろう。にもかかわらず、独立請求項において「化合物又はその薬学的に許容される塩」が参照されている場合、そのような化合物を参照するその独立請求項に依存する請求項は、たとえ従属請求項においてその塩が明示的に参照されていなくとも、その化合物の薬学的に許容される塩も含むと理解されるだろう。
【０１１０】
製剤には、経口、非経口（皮下、皮内、筋肉内、静脈内、及び関節内を含む）、直腸内、及び局所的（皮膚、頬側、舌下、及び眼内）投与に好適なものが含まれる。最も好適な経路は、受容者の症状及び障害に依存する場合がある。製剤は、単位剤形で便利に提供することができ、薬学の技術分野で周知の方法のいずれかにより調製することができる。そのような方法は、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物（「活性成分」）を、１つ又は複数の副次的成分を構成する担体と接触させるステップを含む。一般的には、製剤は、液体担体又は微粉化された固体担体又はその両方を活性成分と均一に及び密接に接触させ、その後必要に応じて生成物を成形して所望の製剤にすることにより調製される。
【０１１１】
経口投与に好適な製剤は、各々が所定量の活性成分を含有するカプセル剤、カシェ剤、又は錠剤などの個別単位として、散剤又は果粒剤として、水性の液体又は非水性の液体中の液剤又は懸濁剤として、又は水中油型液体乳剤又は油中水型液体乳剤として提供することができる。活性成分は、ボーラス、舐剤、又は軟膏として提供することもできる。
【０１１２】
錠剤は、随意に１つ又は複数の副次的成分と共に圧縮又は成型することにより製作することができる。圧縮錠剤は、散剤又は果粒剤などの易流動性形態の活性成分を、随意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、潤滑剤、界面活性剤、又は分散剤と混合して、好適な機械で圧縮することにより調製することができる。成型錠剤は、不活性液体希釈剤で加湿された粉末状化合物の混合物を好適な機械で成型することにより製作することができる。錠剤は、随意に被膜又は刻溝することができ、その中の活性成分の徐放、遅延放出、又は放出制御を提供するように製剤することができる。医薬組成物は、「薬学的に許容される不活性担体」を含んでいてもよく、この表現は、１つ又は複数の不活性賦形剤を含むことが意図されており、それらには、デンプン、ポリオール、造粒剤、微結晶性セルロース、希釈剤、潤滑剤、結合剤、及び崩壊剤などが含まれる。所望の場合、開示されている組成物の錠剤用量は、標準的な水性又は非水性技術により被膜することができる。「薬学的に許容される担体」は、放出抑制手段も包含する。
【０１１３】
非経口投与用の製剤には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、及び製剤を対象受容者の血液と等張性にする溶質を含有していてもよい水性及び非水性の無菌注射溶液が含まれる。非経口投与用の製剤には、懸濁化剤及び増粘剤を含んでいてもよい水性及び非水性の無菌懸濁剤も含まれる。製剤は、複数用量容器、例えば密封アンプル及びバイアルの単位用量で提供してもよく、使用の直前に無菌の液体担体、例えば生理食塩水又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）などを添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保管することができる。即時調合注射溶液及び懸濁剤は、以前に記述されている種類の無菌散剤、果粒剤、及び錠剤から調製することができる。
【０１１４】
直腸内投与用の製剤は、カカオ脂又はポリエチレングリコールなどの通常の担体と共に坐剤として提供することができる。
【０１１５】
口内、例えば頬側又は舌下の局所投与用の製剤には、スクロース及びアカシア又はトラガントなどの香味料の基礎原料中に活性成分を含む舐剤、並びにゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアカシアなどの基礎原料中に活性成分を含む香錠が含まれる。
【０１１６】
医薬組成物は、随意に他の治療成分、凝固阻止剤、保存剤、甘味料、着色剤、香味料、乾燥剤、可塑剤、及び染料なども含むことができる。任意のそのような随意成分は、式Ｉの化合物との適合性をもち、製剤の安定性を保証しなければならない。組成物は、必要に応じて、例えば、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、ラフィノース、マルチトール、メレチトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、デンプン、キシリトール、マンニトール、及びミオイノシトールなど、並びにそれらの水和物、並びにアミノ酸、例えばアラニン、グリシン、及びベタイン、並びにペプチド及びタンパク質、例えば卵白を含む他の添加物を含有していてもよい。
【０１１７】
薬学的に許容される担体及び薬学的に許容される不活性担体及び前述の追加的成分として使用するための賦形剤の例には、これらに限定されないが、結合剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、抗菌剤剤、及び被膜剤が含まれる。
【０１１８】
本発明の製剤は、目的とする製剤のタイプを考慮して、特に上記で言及した成分に加えて当技術分野で従来使用されている他の作用剤を含んでいてもよく、例えば、経口投与に好適な製剤は、香味料を含んでいてもよいことが理解されるべきである。
【０１１９】
成人の用量範囲は、一般的に経口で０．００５ｍｇ〜１０ｇ／日である。錠剤又は個別単位で提供される他の提供形態は、そのような用量で又は複数のそのような用量で有効である量の式Ｉの化合物を便利に含有していてもよく、例えば単位は、５ｍｇ〜５００ｍｇ、通常は約１０ｍｇ〜２００ｍｇを含有する。患者に投与する化合物の正確な量は、担当医師の責任となるだろう。しかしながら、使用される用量は、患者の年齢及び性別、治療する障害の詳細及びその重症度を含む多数の因子に依存するだろう。
【０１２０】
１用量単位（例えば、経口用量単位）は、例えば、１〜３０ｍｇ、１〜４０ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜３００ｍｇ、１〜５００ｍｇ、２〜５００ｍｇ、３〜１００ｍｇ、５〜２０ｍｇ、５〜１００ｍｇ（例えば、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、１０ｍｇ、１１ｍｇ、１２ｍｇ、１３ｍｇ、１４ｍｇ、１５ｍｇ、１６ｍｇ、１７ｍｇ、１８ｍｇ、１９ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ）の本明細書に記載の化合物を含んでいてもよい。
【０１２１】
医薬組成物及びそれらの製剤に関する追加情報については、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、２０００年を参照されたい。
【０１２２】
作用剤は、例えば、静脈注射、筋肉内注射、皮下注射、腹膜腔内注射により、局所的、舌下、関節内（関節に）、皮内、バッカル、眼部的に（眼内を含む）、鼻腔内（カニューレの使用を含む）、又は他の経路より投与することができる。作用剤は、経口で、例えば、所定量の活性成分を含有する錠剤又はカシェ剤、ゲル剤、小丸剤、軟膏、シロップ剤、ボーラス剤、舐剤、スラリー剤、カプセル剤、散剤、果粒剤として、水性液体又は非水性液体中の液剤又は懸濁剤として、水中油型乳剤又は油中水型乳剤として、ミセル製剤（例えば、国際公開第９７／１１６８２号を参照）により、リポソーム製剤（例えば、欧州特許第７３６２９９号、国際公開第９９／５９５５０号、及び国際公開第９７／１３５００号を参照）により、国際公開第０３／０９４８８６号に記載の製剤、又は幾つかの他の形態で投与することができる。作用剤は、経皮的に（つまり、レザバー型（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ−ｔｙｐｅ）又はマトリクス型パッチ、極微針、熱穿孔法、皮下針、イオン導入法、電気穿孔法、超音波又は他の形態の超音波導入法、ジェット式注射、又は上記方法の任意の組合せで）投与することもできる（Ｐｒａｕｓｎｉｔｚら、２００４年 Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ３巻：１１５頁）。作用剤は、局所的に投与することができる。作用剤は、ステントに被膜することができる。作用剤は、米国特許出願公開第２００２００６１３３６号に記載のヒドロゲル粒子製剤を使用し、高速経皮粒子注射技術を使用して投与することができる。さらなる粒子製剤は、国際公開第００／４５７９２号、国際公開第００／５３１６０号、及び国際公開第０２／１９９８９号に記載されている。硬膏及び吸収促進剤ジメチルイソソルビドを含有する経皮製剤の一例は、国際公開第８９／０４１７９号に見出すことができる。国際公開第９６／１１７０５号には、経皮投与に好適な製剤が提供されている。作用剤は、坐剤の形態で、又は他の膣的若しくは直腸的手段により投与することができる。作用剤は、国際公開第９０／０７９２３号に記載の膜貫通型製剤で投与することができる。作用剤は、米国特許第６，４８５，７０６号に記載の脱水粒子により、非侵襲的に投与することができる。作用剤は、国際公開第０２／４９６２１号に記載の腸溶薬物製剤で投与することができる。作用剤は、米国特許第５，１７９，０７９号に記載の製剤を使用して、鼻腔内投与することができる。非経口注射に好適な製剤は、国際公開第００／６２７５９号に記載されている。作用剤は、米国特許出願公開第２００３０２０６９３９号及び国際公開第００／０６１０８号に記載のカゼイン製剤を使用して投与することができる。作用剤は、米国特許出願公開第２００２００３４５３６号に記載の粒子性製剤を使用して投与することができる。
【０１２３】
作用剤は、単独で又は他の好適な成分と組み合わせて、気管内注入（注射器により溶液を肺に送達すること）、リポソームの気管内送達、通気法（注射器又は任意の他の類似デバイスにより粉末製剤を肺に投与すること）、及びエアゾール吸入を含むが、これらに限定されない幾つかの技術を使用して、肺経路により投与することができる。エアゾール剤（例えば、ジェット噴霧器又は超音波噴霧器、計量式吸入器（ＭＤＩ）、及び乾燥粉吸入器（ＤＰＩ））も、鼻腔内適用に使用することができる。エアロゾル製剤は、ガス媒体中の固形物質及び液体液滴の安定的分散剤又は懸濁剤であり、ヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ、つまりＨＦＡ−１３４ａ及びＨＦＡ−２２７、又はそれらの混合物）、ジクロロジフルオロメタン（又は噴射剤１１、１２、及び／又は１１４の混合物などの他のクロロフルオロカーボン噴射剤）、プロパン、及び窒素などの加圧された許容される噴射剤
に入れることができる。肺用製剤は、脂肪酸及びサッカリドなどの透過促進剤、キレート剤、酵素阻害剤（例えば、プロテアーゼ阻害剤）、アジュバント（例えば、グリココラート、サーファクチン、スパン８５、及びナファモスタット）、保存剤（例えば、塩化ベンザルコニウム又はクロロブタノール）、及びエタノール（通常は最大５重量％だが、２０重量％まで可能）を含んでいてもよい。エタノールは、調量弁の機能を向上させることができ、幾つかの場合には分散の安定性を向上させることもできるため、エアゾール組成物に一般的に含まれている。肺用製剤は、胆汁酸塩、及び米国特許第６，５２４，５５７号及びその中の参考文献に記載されているものを含むがそれらに限定されない界面活性剤を含む場合もある。米国特許第６，５２４，５５７号に記載の界面活性剤、例えば、Ｃ８〜Ｃ１６脂肪酸塩、胆汁酸塩、リン脂質、又はアルキルサッカリドは、それらの幾つかも製剤中の化合物の吸収を増強することが報告されているという点で有利である。適切な担体と混合された治療上有効量の活性化合物を含み、乾燥粉末吸入器で使用するのに適した乾燥粉末製剤も、本発明に好適である。本発明の乾燥粉末製剤に添加することができる吸収促進剤には、米国特許第６，６３２，４５６号に記載されているものが含まれる。国際公開第０２／０８０８８４号には、散剤の表面を改質するための新しい方法が記載されている。エアロゾル製剤には、米国特許第５，２３０，８８４号、米国特許第５，２９２，４９９号、国際公開第０１７／８６９４号、国際公開第０１／７８６９６号、米国特許出願第２００３０１９４３７号、米国特許出願公開第２００３０１６５４３６号、及び国際公開第９６／４００８９号（これは植物油を含んでいる）が含まれていてもよい。吸入に好適な徐放性製剤は、米国特許出願公開第２００１００３６４８１号Ａ１、第２００３０２３２０１９号Ａ１、及び米国特許出願公開第２００４００１８２４３号Ａ１、並びに国際公開第０１／１３８９１号、国際公開第０２／０６７９０２号、国際公開第０３／０７２０８０号、及び国際公開第０３／０７９８８５号にも記載されている。微粒子を含有する肺用製剤は、国際公開第０３／０１５７５０号、米国特許出願公開第２００３０００８０１３号、及び国際公開第００／００１７６号に記載されている。安定したガラス状態粉末を含有する肺用製剤は、米国特許出願公開第２００２０１４１９４５号及び米国特許第６，３０９，６７１号に記載されている。他のエアロゾル製剤は、欧州特許出願公開第１３３８２７２号Ａ１、国際公開第９０／０９７８１号、米国特許第５，３４８，７３０号、米国特許第６，４３６，３６７号、国際公開第９１／０４０１１号、及び米国特許第６，２９４，１５３号に記載されており、米国特許第６，２９０，９８７号には、エアロゾルまたは他の手段により投与することができるリポソームの基づく製剤が記載されている。吸入用の粉末製剤は、米国特許出願公開第２００３００５３９６０号及び国際公開第０１／６０３４１号に記載されている。作用剤は、米国特許出願公開第２００１００３８８２４号に記載されているように、鼻腔内投与することができる。
【０１２４】
緩衝食塩水及び類似媒体中の薬剤溶液は、噴霧器中でエアロゾルを生成するために一般的に使用されている。単純な噴霧器は、ベルヌーイの原理で作動し、空気又は酸素の流動を使用して噴霧粒子を生成する。より複雑な噴霧器は、超音波を使用して噴霧粒子を生成する。両タイプは、当技術分野で周知であり、Ｓｐｒｏｗｌｓ’ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｙ及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙなどの薬学の標準的教科書に記載されている。エアゾール生成用の他のデバイスは、圧縮ガス、通常はハイドロフルオロカーボン及びクロロフルオロカーボンを使用し、これらは加圧容器中で薬剤及び任意の必要とされる賦形剤と混合されており、これらデバイスは、同様にＳｐｒｏｗｌｓ及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎなどの標準的教科書に記載されている。
【０１２５】
本発明の幾つかの実施形態によると、式Ｉの化合物は、他の活性作用剤と組合せて使用することができることも認識されるだろう。併用療法は、それらの各々が別々に製剤及び投与される２つ以上の作用剤を投与することにより、又は単一製剤中の２つ以上の作用剤を投与することにより達成することができる。他の組合せも併用療法により包含される。例えば、２つの作用剤を一緒に製剤し、それを、第３の作用剤を含有する別々の製剤と共に投与してもよい。併用療法における２つ以上の作用剤は、同時に投与してもよいが、そうである必要はない。例えば、第１の作用剤（又は作用剤の組合せ）の投与は、第２の作用剤（又は作用剤の組合せ）を投与する数分、数時間、数日、又は数週間前であってもよい。したがって、２つ以上の作用剤は、互いに数分以内に、又は互いに１、２、３、６、９、１２、１５、１８、若しくは２４時間以内に、又は互いに１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４日間以内に、又は互いに２、３、４、５、６、７、８、９、若しくは１０週間以内に投与してもよい。幾つか場合では、さらにより長い間隔が可能である。多くの場合、併用療法で使用される２つ以上の作用剤は、患者の体内に同時に存在することが望ましいが、そうである必要はない。併用療法は、組合せて使用される１つ又は複数の作用剤を２回以上投与することを含んでいてもよい。例えば、作用剤Ｘ及び作用剤Ｙが組合せて使用される場合、それらは、任意の組合せで順次、例えばＸ−Ｙ−Ｘ、Ｘ−Ｘ−Ｙ、Ｙ−Ｘ−Ｙ、Ｙ−Ｙ−Ｘ、Ｘ−Ｘ−Ｙ−Ｙなど順序で、１回又は複数回投与することができる。
【０１２６】
表１には、本発明の実施形態の代表的化合物が列挙されている。
【０１２７】
本発明の実施形態による化合物をＭ１ムスカリン受容体調節因子として使用して、コリン作動性機能の障害に関連する哺乳類疾患又はコリン作動性機能に不均衡がある疾患、又は以下のものからなる群からのアセチルコリン受容体の活性障害を有する疾患を治療することができることが理解されるだろう：アルツハイマー病型の老人性認知症；アルツハイマー病（ＡＤ）；レビー小体認知症；アルツハイマー病及びパーキンソン病の併発；多発梗塞性認知症（ＭＩＤ）；前頭側頭型認知症；血管性認知症；脳卒中／虚血；脳卒中／虚血／頭部損傷に伴うＭＩＤ；ＭＩＤ及びＡＤの併発；ヒト頭部損傷；加齢性記憶障害；軽度認知障害（ＭＣＩ）；ＡＤに至るＭＣＩ；認知機能障害（失念、急性錯乱障害、注意欠陥障害、注意力及び集中力障害を含む）；幻覚−妄想性状態；情緒及び注意障害；睡眠障害；術後せん妄；三環系抗うつ薬の有害効果；統合失調症及びパーキンソン病の治療に使用される特定の薬物の有害効果；口内乾燥、失名辞、記憶喪失、及び／又は錯乱；精神病；統合失調症、ＡＤとの統合失調症並存症、遅発性統合失調症、パラフレニー、統合失調症様障害；不安症；双極性障害；躁病；気分安定化（ｍｏｏｄ ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）；特定の神経膠腫除去後の認知障害；遅発性ジスキネジー；酸素療法中の酸化ストレス；失語症；脳炎後の記憶喪失症候群；ＡＩＤＳ認知症；狼瘡、多発性硬化症、シェーグレン症候群、慢性疲労症候群、及び線維筋痛を含む自己免疫疾患における記憶障害；非定型うつ病又は統合失調症における記憶障害；疼痛、リウマチ、関節炎、及び末期疾患；眼球乾燥症、腟乾燥症、皮膚乾燥症；免疫機能障害；過食症及び食欲不振を含む、ニューロクリン障害（ｎｅｕｒｏｃｒｉｎｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）及び食物摂取の調節異常；肥満；先天性オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症；オリーブ橋小脳萎縮；アルコール離脱症状；離脱症状及び補充療法を含む物質乱用；ハンチントン舞踏病；進行性核上性麻痺；ピック病；フリードライヒ運動失調症；ジルドラツレット病；ダウン症候群；緑内障；老視；炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、下痢、便秘、胃酸分泌、及び潰瘍などの胃腸運動及び機能の機能不全を含む自律神経障害；切迫尿失禁、喘息、ＣＯＰＤ。本発明の実施形態による化合物は、そのような治療のための薬剤の調製に使用することもできる。
【０１２８】
同様に、本発明の実施形態による化合物Ｍ１ムスカリン受容体調節因子として使用して、脳、神経系、心臓血管系、免疫系、ニューロクリン系、消化器系、又は内分泌腺及び外分泌腺、眼、角膜、肺、前立腺、又はコリン作動性機能がムスカリン受容体サブタイプにより媒介される他の器官のうちの１つ又は複数の機能不全による中枢神経系又は末梢神経系の疾患状態を予防又は治療することができ、前記機能不全は、以下のものを含むことが認識されるだろう：脳アミロイド媒介性障害；グリコゲン合成酵素キナーゼ（ＧＳＫ３ｐ）媒介性障害；タウタンパク質過剰リン酸化媒介性損傷、機能不全、又は疾患；ＣＮＳ及びＰＮＳ高コレステロール血症及び／又は高脂血症媒介性損傷、機能不全、又は疾患；Ｗｎｔ媒介性シグナル伝達異常；神経可塑性の障害；高血糖症；糖尿病；内因性成長因子媒介性疾患、又はさらなるリスク因子の組合せ；又はアポリポタンパク質Ｅが関与する疾患状態；又はアルツハイマー病型の老人性認知症、アルツハイマー病（ＡＤ）、ＡＤを発症するリスクにある患者におけるＡＤ症状発症の遅延、レビー小体認知症、大脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、大脳アミロイドーシス、前頭側頭型認知症、血管性認知症、高脂血症、高コレステロール血症、多発梗塞性認知症（ＭＩＤ）、脳卒中虚血、脳卒中／虚血／頭部損傷に伴うＭＩＤ、ＭＩＤ及びアルツハイマー病の併発、ヒト頭部損傷、加齢性記憶障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＡＤに至るＭＣＩ、双極性障害、躁病、統合失調症、非情動性統合失調症（ｎｏｎａｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｙｃｈｏｚｏｐｈｒｅｎｉａ）、パラフレニー、免疫機能障害、ニューロクリン障害、並びに過食症及び食欲不振、体重管理、肥満、炎症を含む食物摂取の調節異常を含むコリン作動性機能不全の関与が示唆されている障害。本発明の実施形態による化合物は、そのような治療のための薬剤の調製に使用することもできる。
【０１２９】
合成方法 一般的に、式Ｉの化合物は、容易に入手可能な出発物質、試薬、及び従来の合成手順を使用して、例えば下記に記述されているような一般反応スキームに例示されている方法により、又はその改変方法により調製することができる。それら反応には、それら自体が公知であるが、本明細書では言及されていない変法を使用することも可能である。
【０１３０】
式Ｉの化合物を得るためのプロセスは下記に示されている。式Ｉの他の化合物は、その合成が本明細書で例示されている化合物と相似した様式で調製することができる。下記の手順には、そのような方法が例示されている。さらに、本明細書に示されている合成により、特定の立体化学を有するエナンチオマーの調製がもたらされる場合があるが、あらゆる立体異性形態の式Ｉの化合物が本発明の範囲内に含まれ、本明細書に示されているもの以外のあらゆる立体異性形態の式Ｉの化合物の調製は、化学分野の当業者であれば、本明細書に示されている手順に基づき明白だろう。
【０１３１】
式Ｉの化合物は、Ｒ５の代りにＨが存在する対応するスピロ化合物から、下記のスキーム１に例示されているように合成することができる：
スキーム１
【０１３２】
【化５１】
【０１３３】
アミンと３−インドールカルボキシル酸との結合は、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、又はＤＣＣ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の組合せのいずれかによる酸部分の活性化により進行させることができる。アミンと３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ安息香酸との結合は、ＤＣＣ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の組合せによる酸部分の活性化により進行させることができる。対応する置換アミンを産出するためのアミンとバルプロイルクロリド又はｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリドとの結合は、塩基（トリエチルアミン又は水素化ナトリウム）の存在下で達成することができる。
【０１３４】
次いで、前駆物質アミン化合物は、下記でより詳しく説明されているように調製することができる。したがって、例えば、２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンは、乾燥ジクロロメタン中で４−アミノメチル−１−メチル−ピペリジン−４−オールをアセトアルデヒドと反応させることにより得ることができる。２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカンは、還流下で１−アミノ−２−プロパノールを１−メチル−４−ピペリドンと反応させることにより得ることができる。１’，４−ジメチルスピロ［３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン］は、最初にＴｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順により、１−メチル−４−ピペリドンから２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを調製し、その後、このオキシムをＲｅｄ−Ａｌ（水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム）で還元し、その後塩基処理して、１’，４−ジメチルスピロ［３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン］を産出することにより得ることができる。２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンは、最初にＴｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順により、１−メチル−４−ピペリドンから２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを調製し、その後このオキシムを水素化アルミニウムリチウム／塩化アルミニウムで還元することにより得ることができる。その後、式Ｉの化合物は、適切な結合反応によりこれらアミンから調製することができる。
【０１３５】
式Ｉの化合物を調製する際には、５員環の形成、環置換、環飽和／不飽和度の変更、並びに塩及び塩基の相互変換などのための方法など、有機化学者に知られている方法を使用することができる。これら合成方法では、出発物質は、キラル中心を含有していてもよく、ラセミ出発物質が使用される場合、その結果生じる生成物は、一般的にＲ及びＳエナンチオマーの混合物である。或いは、出発物質のキラル異性体を使用してもよく、使用する反応プロトコールがこの出発物質をラセミ化しない場合、キラル生成物が得られる。そのような反応プロトコールでは、合成中にキラル中心の反転を伴う場合がある。ラセミ体又はジアステレオマー混合物が得られる場合、異なる立体異性体は、当技術分野で公知である方法により互いに分離することができる。或いは、所与の異性体は、立体特異性合成又は不斉合成により得ることができる。したがって、本発明のある化合物を調製するための例示的な方法が記述されることになるが、当業者であれば理解するように、他の方法を応用して本化合物を調製することもできることが認識されるだろう。
【０１３６】
実施例
本発明の実施形態による新化合物の調製を容易にするために、幾つかのリジッドな二環スピロ構造を合成した：
【０１３７】
２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンは、２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−２−エンを、メタノール中のシアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより得た。
【０１３８】
２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンは、４−アミノメチル−１−メチル−ピペリジン−４−オールを、乾燥ジクロロメタン中のアセトアルデヒドと反応させることにより得た。
【０１３９】
２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカンは、還流下で１−アミノ−２−プロパノールを１−メチル−４−ピペリドンと反応させることにより得た。
【０１４０】
１’，４−ジメチルスピロ［３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン］を、数ステップで得た。最初に、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順に従って、１−メチル−４−ピペリドンから、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て調製した。このオキシムをＲｅｄ−Ａｌで還元し、その後塩基処理することにより、表題化合物を得た。
【０１４１】
２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンを、数ステップで得た。最初に、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順に従って、１−メチル−４−ピペリドンから、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て調製した。このオキシムをＬｉＡｌＨ４／ＡｌＣｌ３で還元することにより、表題化合物を得た。
【０１４２】
２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンを、数ステップで得た。最初に、２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを、１−メチル−４−ピペリドンから、２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て調製した。このオキシムをＲｅｄ−Ａｌで還元し、その後塩基処理することにより、表題化合物を得た。
【０１４３】
別様の記載がない限り、試薬及び溶媒は、商業的供給業者から受領したままで使用した。プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、それぞれ３００又は５００ＭＨｚのＢｒｕｋｅｒ社製Ａｖａｎｃｅ−３００型及びＢｒｕｋｅｒ社製５００型分光計で得た。スペクトルは、ｐｐｍ（δ）で報告されており、及び結合定数Ｊはヘルツで報告されている。テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を、内部標準物質として使用した。以下の略語をＮＭＲデータの報告に使用する：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｂｒ＝ブロード。１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ社製Ａｖａｎｃｅ−３００型及びＢｒｕｋｅｒ社製５００型分光計で記録した。質量スペクトルは、ＵＧ７０ ＵＳＥＱ質量分析計を使用して収集した。ＧＣ−ＭＳスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ社製Ｓａｔｕｒａｎ ２０００型ＧＣＭＳ／ＭＳ分光計で記録した。赤外（ＩＲ）スペクトルは、Ｓｍａｒｔ Ｍｕｌｔｉ−Ｂｏｕｎｃｅ ＺｎＳｅ ＨＡＴＲを備えたＮｉｃｏｌｅｔ社製３８０型ＦＴ−ＩＲ分光光度計で記録した。溶媒及び試薬は全て分析用等級だった。本発明者らのＮＣＥの化学的純度の解析は、ＨＰＬＣ ＦＩＮＮＩＧＡＮ Ｓｕｒｖｅｙｏｒで記録した。
【０１４４】
実施例１：２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカンの合成：
【０１４５】
【化５２】
室温のメタノール（１５０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−２−エンの撹拌溶液（１０．４ｍｌ、６０ｍｍｏｌ）に、ブロモクレゾールグリーン（５ｍｇ）を添加し、溶液は青色になった。色が黄色に変わるまで、４ＮのＨＣｌ／ＭｅＯＨを撹拌溶液に添加した。その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３．９ｇｒ、６２ｍｍｏｌ）を、一度に添加し、その結果生じた混合物を２時間室温で撹拌した。この期間中、反応色が緑に変化するたびに、４ＮのＨＣｌ／ＭｅＯＨをさらに添加して溶液色を黄色に維持した。この期間の終わりに、溶媒を減圧下で蒸発させて青緑色油状物を得た。ジクロロメタン（１００ｍｌ）を残留物に添加し、混合物を２ＮのＮａＯＨ（５０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（１００ｍｌ）で抽出した。有機相を混合し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、ほとんど無色の油状物として表題化合物を得た（２．１８ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ４．６１（ｑ、Ｊ＝６．１８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１０（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．７４（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．２７〜２．１９（ｍ、１Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１０（ｍ、２Ｈ）、１．８５〜１．７０（ｍ、５Ｈ）、１．４６（ｄ、Ｊ＝６．１８Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）ｐｐｍ。
【０１４６】
実施例２：２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンの合成
【０１４７】
【化５３】
ジクロロメタン（１５ｍｌ）中４−アミノメチル−１−メチル−ピペリジン−４−オール（２．１２７ｇ、１４．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、無水硫酸マグネシウム（２．９ｇ）を添加した。その結果生じた混合物を０℃に冷却し、新しく蒸留したアセトアルデヒド（８３５μｌ、１４．７８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で６時間撹拌した後、混合物をろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、ほとんど無色の液体として表題化合物を得た（２．１６ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ４．６０（ｑ、Ｊ＝５．４０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．０１（ｄ、Ｊ＝１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．７６（ｄ、Ｊ＝１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．５５〜２．３１（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２Ｎ）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７７〜１．５８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２ＣＯ）、１．３６（ｄ、Ｊ＝５．４０Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８７．５７（ＣＨ）、５７．１９（ＣＨ２）、５３．１４（Ｃ）、５２．９６（ＣＨ２）、４６．１５（ＣＨ３）、３７．２８（ＣＨ２）、３５．７３（ＣＨ２）、２０．３２（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１４８】
実施例３：２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカンの合成
【０１４９】
【化５４】
１−アミノ−２−プロパノール（９．２ｍｌ、１．２ｍｍｏｌ）及び１−メチル−４−ピペリドン（１１．５ｍｌ、１．０ｍｍｏｌ）の混合物を、還流下で２時間加熱し、室温で一晩そのままにしておいた。反応混合物を、減圧下で蒸留した（約１５ｍｍＨｇ）。表題化合物を８２〜９５℃で収集した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ４．０２（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．２５（ｄｄ、Ｊ＝１１．９、６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨ）、２．６８（ｄｄ、Ｊ＝１１．９、６．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨ）、２．４〜２．６（ｍ、４Ｈ−ピペリジン）、２．１（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．６５〜１．８１（ｍ、４Ｈ−ピペリジン）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）ｐｐｍ。
【０１５０】
実施例４：１’，４−ジメチル−スピロ−（３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン）の合成：
【０１５１】
【化５５】
Ｒｅｄ−Ａｌ（トルエン中６５％の溶液、５．４ｍｌ）を、乾燥ＴＨＦ（３９ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（１．５ｇｒ、７．６ｍｍｏｌ）の溶液に滴加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を冷却し（氷−水）、水（１．６ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ水溶液（１．６ｍｌ）、及び水（４．６ｍｌ）を連続して添加することにより分解した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（４０ｍｌ）を添加し、固形物をセライトでろ過した。ＴＨＦろ過液を減圧下で濃縮した。残留油状物をジクロロメタンに溶解し、乾燥し、蒸発させた。残留物のフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ６０／４０／１）により、表題アミンを得た（明らかに２つの異性体として）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ４．１３及び４．０６（２つのｑ、Ｊ＝６．７及びＪ＝６．２Ｈｚ、１Ｈ、２つのＯＣＨ）、２．５４〜２．３３（ｍ、６Ｈ）、２．２７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７７〜１．６５（ｍ、４Ｈ）、１．２４及び１．２０（２つのｄ、Ｊ＝６．７及びＪ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；Ｃ１０Ｈ１８Ｎ２ＯのＧＣ−ＭＳ（ＣＩ）６．９５分−１８３（Ｍ＋１）及び６．６４分−１８３（Ｍ＋１）。
【０１５２】
実施例５：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ＡＦ７１０）の合成
【０１５３】
【化５６】
室温のジクロロメタン（２３０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（２．１８ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（３．２４ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加し、その後３−インドールプロピオン酸（２．８７ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１０を白色固形物として得た（２．５ｇ、１００％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣ１３、３００ＭＨｚ）δ ８．１７（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．０８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．５３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝１．８６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５２、５．０９（２ｑ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．２２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６２、３．６６（２ｄ、Ｊ＝１１．７６及びＪ＝１１．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．２９、３．０８（２ｄ、Ｊ＝１１．４８及びＪ＝１２．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１８〜３．１１（ｍ、２Ｈ）、２．７２〜２．６６（ｍ、２Ｈ）、２．６４〜２．４６（ｍ、２Ｈ）、２．２６、２．２５（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．３２〜２．１９、２．１２〜２．０２（２ｍ、２Ｈ）、１．８７〜１．８０、１．６８〜１．５１（２ｍ、４Ｈ）、１．４８、１．４３（２ｄ、Ｊ＝６．２１及びＪ＝６．１９Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １７０．５８（Ｃ）、１３６．３９（Ｃ）、１２７．２５（Ｃ）、１２２．１９（ＣＨ）、１２１．８０（ＣＨ）、１１９．５２（ＣＨ）、１１８．７３（ＣＨ）、１１５．１７（Ｃ）、１１１．３１（ＣＨ）、５７．４８、５７．１９（ＣＨ）、５５．４６（Ｃ）、５４．５５、５４．１２（ＣＨ２）、５３．１１、５２．８６（ＣＨ２）、４６．２１、４６．１５（ＣＨ３）、３８．０５、３７．３２（ＣＨ２）、３６．８２、３６．３１（ＣＨ２）、３４．４１（ＣＨ２）、２５．４４、２３．４７（ＣＨ３）、２１．０４、２０．９６（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１５４】
実施例６：ＡＦ７１０Ａ及びＡＦ７１０Ｂのキラル分離 ＡＦ７１０をそのエナンチオマーに分離することは、セミ分取カラムを用いてＨＰＬＣにより実施した。メタノール（５０ｍｇ／ｍｌ）中ＡＦ７１０の２００μｌ溶液を、カラムに注入し、カラムを通過させて溶出した。溶出した後、溶出液を蒸発させて乾燥した。
ＨＰＬＣ：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−６２０００Ａ型
検出器：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−４２５０型
カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ、２５０ｘ１０ｍｍ
流速：４ｍｌ／分
カラム温度：室温
移動相：ヘキサン／エタノール ８５：１５
濃度：５０ｍｇ／ｍｌ
ＵＶ検出：２５５ｎｍ
最初に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１０Ａ）：９９％ｅｅ；比旋光度［α］＝＋６０°（Ｃ＝０．４１５、メタノール）
次に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１０Ｂ）：９９％ｅｅ；比旋光度［α］＝−５６°（Ｃ＝０．３０３、メタノール）
【０１５５】
実施例７：３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン（ＡＦ７１６）の合成
【０１５６】
【化５７】
２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（５７３ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（６４４μｌ、４．６２ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。乾燥ジクロロメタン（２ｍｌ）中ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（６００ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）の溶液を、注射器で滴加した。反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。１時間撹拌した後、ジクロロメタン（５０ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（２ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させて、粗混合物を油状物として得た。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９３／７／１）で精製して、ＡＦ７１６を白色に近い粉末として得た（４９６ｍｇ、９８．８％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ７．８９〜７．８５（ｍ、２Ｈ、２つのＣＨＣＳＯ２）、７．２７〜７．１９（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＦ）、５．０２（ｑ、Ｊ＝６．１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨ−ＣＨ３）、３．６６（ｄ、Ｊ＝１１．３７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、３．４８（ｄ、Ｊ＝１１．３７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、２．７２〜２．５０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＮＣＨ３）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１６〜２．０７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＮＣＨ３）、１．９５〜１．８８（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）、１．５５（ｄ、Ｊ＝６．１２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．４８（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６６．９２及び１６３．５４（Ｃ）、１３０．０５（ＣＨ）、１２９．９３（ＣＨ）、１２９．５８（Ｃ）、１１６．６０（ＣＨ）、１１６．３０（ＣＨ）、６０．７６（Ｃ）、６０．２４（ＣＨ）、５４．０５（ＣＨ２）、５３．２２（ＣＨ２）、４６．０３（ＣＨ３）、３７．１６（ＣＨ２）、３７．０５（ＣＨ２）、２５．５６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１５７】
実施例８：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピルペンタン−１−オン（ＡＦ７１７）の合成
【０１５８】
【化５８】
２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（９８２ｍｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（１．１０ｍｌ、７．９２ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。バルプロイルクロリド（９１０ｍｇ、５．６０ｍｍｏｌ）を注射器で滴加した。反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。４時間撹拌した後、ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（１０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（２×５０ｍｌ）で抽出した。混合した有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １５０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１７を白色に近い粉末として得た（５２１ｍｇ、９９．２％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ５．５３、５．２６（２ｑ、Ｊ＝６．１２及びＪ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６７、３．９０（２ｄ、Ｊ＝１２．０及びＪ＝１１．３５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．４８、３．０９（２ｄ、Ｊ＝１１．３５及びＪ＝１２．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．７８〜２．５９（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２Ｎ）、２．５３〜２．４７（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＯ）、２．３０、２．１９（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１５〜２．０５（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２Ｎ）、２．０２〜１．８４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）、１．７４〜１．６１（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２ＣＨＣＯ）、１．５５、１．５０（２ｄ、Ｊ＝６．３及びＪ＝６．１２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．４４〜１．３６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）、１．３４〜１．２１（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２ＣＨ３）、０．９３〜０．８７（ｍ、６Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７４．３５、１７４．０４（Ｃ）、５９．１３（Ｃ）、５７．３５、５７．１９（ＣＨ）、５４．５２、５４．０６（ＣＨ２）、５３．１３、５２．７７（ＣＨ２）、４６．０９（ＣＨ３）、４３．７７、４２．５５（ＣＨ）、３８．３７、３７．５８（ＣＨ２）、３７．０４、３６．２０（ＣＨ２）、３５．７６、３５．３５（ＣＨ２）、３５．０８、３４．７７（ＣＨ２）、２６．０１、２３．０１（ＣＨ３）、２１．０８、２０．９８（ＣＨ２）、２０．７３、２０．５６（ＣＨ２）、１４．２７、１４．２２（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１５９】
実施例９：（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−メタノン（ＡＦ７２３）の合成
【０１６０】
【化５９】
乾燥蒸留ジクロロメタン（１０ｍｌ）中ジシクロヘキシルカルボジイミド（９８５ｍｇ、４．７７ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴン雰囲気下で、室温のジクロロメタン（１５ｍｌ）中３，５−ジーｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ安息香酸（１．１４ｇ、４．５５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。ジシクロヘキシル尿素が、白色固形物として沈殿し始めた。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（６４５ｍｇ、４．７７ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を５分間室温で撹拌した。その後、ジクロロメタン（５ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（８４６ｍｇ、４．５５ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた混合物を室温で一晩維持した。翌日、混合物を３０℃（水浴の温度）で５時間加熱し、その後室温でさらに４日間維持した。その結果生じた懸濁液をろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １４０／１０／１）で精製して、２つの画分：ＡＦ７２３（２２４ｍｇ、９９．１６％の化学的純度）及びＡＦ７２３と副生成物との混合物（９４３ｍｇ）を得た。ＡＦ７２３と副生成物との混合物を、ＣＯＭＢＩ−フラッシュシステムで線形濃度勾配を使用してフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（シリカ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ２２０／１０／１〜１４０／１０／１）。減圧下で蒸発及び乾燥した後、ＡＦ７２３（５１６ｍｇ、１００％の化学的純度）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ７．２７（ｓ、２Ｈ、ａｒｏｍ ＣＨ）、５．５５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−Ｓ）、５．４４（ｓ、１Ｈ、ＯＨ）、４．１０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−Ｎ−ＣＯ）、３．４０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−Ｎ−ＣＯ）、２．６０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ＮＣＨ３）、２．２８（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−ＮＣＨ３）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１１（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−ＮＣＨ３）、１．９５〜１．６６（ｍ、４Ｈ、２つのＣＨ２−ＣＳ）、１．６０（ｄ、Ｊ＝６．１５Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）、１．４４（ｓ、１８Ｈ、ｔ−ブチル）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １７０．７８（Ｃ＝Ｏ）、１５５．５２（Ｃ）、１３５．９３（２つのＣ）、１２７．３９（Ｃ）、１２４．３０（２つのＣＨ）、５９．５６（Ｃ）、５８．００（ＣＨ）、５６．４０（ＣＨ２）、５４．２３（ＣＨ２）、５２．８２（ＣＨ２）、４５．８８（ＣＨ３）、３７．６８（ＣＨ２）、３６．５０（ＣＨ２）、３４．２８（Ｃ）、３０．２１（ＣＨ３）、２３．９９（ＣＨ３）ｐｐｍ；ＦＴＩＲ（ＨＡＴＲ）２９４３．８９、１６１９．９２、１３８８．６７ｃｍ−１；ＧＣ−ＭＳ（ＥＩ）７．３１分 ｍ／ｚ：４１９（Ｍ＋１）。
【０１６１】
実施例１０：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７２４）の合成
【０１６２】
【化６０】
室温のジクロロメタン（９０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．８６ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．２８ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を添加し、その後プロピオン酸（０．４１ｍｌ、５．５ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、無色油状物として表題化合物を得た（０．５ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ５．５１、５．１９（２ｑ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．２２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６３、３．７４（２ｄ、Ｊ＝１１．８８及びＪ＝１１．５７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．４４、３．０８（２ｄ、Ｊ＝１１．５５及びＪ＝１２．０９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．８〜２．６（ｍ、２Ｈ）、２．５〜２．２（ｍ、７Ｈ、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ３、ＮＣＨ３）、２．２〜２．０（ｍ、１Ｈ），２．０〜１．８（ｍ、３Ｈ）１．５２、１．４８（２ｄ、Ｊ＝６，３０及びＪ＝６．１８Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）、１．１９〜１．１２（ｍ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７１．６（Ｃ）、５７．５、５７．２（ＣＨ）、５５．５（Ｃ）、５４．７、５４．３（ＣＨ２）、５３．２、５３．０（ＣＨ２）、４６．３（ＣＨ３）、３８．４、３７．７（ＣＨ２）、３７．０、３６．４（ＣＨ２）、２８．８、２６．８（ＣＨ２）、２５．６、２３．６（ＣＨ３）、９．６、９．４（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１６３】
実施例１１：１−（２，８）−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ブタン−１−オン（ＡＦ７２５）の合成
【０１６４】
【化６１】
室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．９７ｇ、５２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４４ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を添加し、その後３−インドール酪酸（１．２６ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（４００ｍｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．２１（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．７５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．０９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１０（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、６．９９（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５３、５．０８（２ｑ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．１７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６５、３．５８（２ｄ、Ｊ＝１１．９６及びＪ＝１１．５５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．３２、３．０８（２ｄ、Ｊ＝１１．５９及びＪ＝１２．０９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．８７〜２．８０（ｍ、２Ｈ）、２．８〜２．５（ｍ、２Ｈ）、２．５〜２．１８（ｍ、３Ｈ）、２．２７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１８〜２．０（ｍ、３Ｈ）、２．０〜１．５８（ｍ、４Ｈ）、１．４８、１．４３（２ｄ、Ｊ＝６．１７及びＪ＝６．２４Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７０．９９（Ｃ）、１３６．５４（Ｃ）、１２７．６５（Ｃ）、１２２．１３（ＣＨ）、１２１．６９（ＣＨ）、１１９．３８（ＣＨ）、１１９．０９（ＣＨ）、１１５．７７（Ｃ）、１１１．３３（ＣＨ）、５７．５７、５７．１７（ＣＨ）、５５．３０（Ｃ）、５４．６７、５４．２３（ＣＨ２）、５３．２１、５２．９２（ＣＨ２）、４６．２３（ＣＨ３）、３８．４２、３７．５６（ＣＨ２）、３７．０４、３６．３１（ＣＨ２）、３４．９３、３２．９７（ＣＨ２）、２５．６８、２５．５２（ＣＨ２）、２４．７２、２４．６３（ＣＨ２）、２３．５６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１６５】
実施例１２：１−（２，８）−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−エタン−１−オン（ＡＦ７２６）の合成
【０１６６】
【化６２】
室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．９７ｇ、５２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４４ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を添加し、その後３−インドール酢酸（１．０９ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（６００ｍｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．７１、８．６６（２ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６２、７．５９（２ｄ、Ｊ＝７．９０及びＪ＝８．３９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２２〜７．０８（ｍ、１Ｈ、２ＣＨ ａｒｏｍ）、７．０３（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５３、５．３３（２ｑ、Ｊ＝６．１２及びＪ＝６．２２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６９、３．８８（２ｄ、Ｊ＝１２．１５及びＪ＝１１．２０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．４９及び３．８１（２ｓ、２Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２）、３．３６、３．１３（２ｄ、Ｊ＝１１．４１及びＪ＝１２．１９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．８〜２．５（ｍ、１Ｈ）、２．５〜２．０５（ｍ、２Ｈ）、２．２５及び２．１９（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．０５〜１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．８５〜１．６（ｍ、１Ｈ）、１．５２、１．４８（２ｄ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．３０Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）、１．４５〜１．３５（ｍ、１Ｈ）、１．３５〜１．１５（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６９．６（Ｃ）、１３６．４３（Ｃ）、１２７．１９（Ｃ）、１２２．９８、１２２．８２（ＣＨ）、１２２．４３（ＣＨ）、１１９．８８、１１９．８１（ＣＨ）、１１８．７９、１１８．６７（ＣＨ）、１１１．５２（ＣＨ）、１０８．５５（Ｃ）、５８．０６、５７．５８（ＣＨ）、５５．６６（Ｃ）、５４．６６、５４．１５（ＣＨ２）、５３．２０、５２．７６（ＣＨ２）、４６．２７、４６．１１（ＣＨ３）、３８．４５、３７．１３（ＣＨ２）、３６．９５、３６．１３（ＣＨ２）、３３．９６（ＣＨ２）、３１．３７（ＣＨ２）、２５．７５、２３．３３（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１６７】
実施例１３：（Ｅ）−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロペノン（ＡＦ７２７）の合成
【０１６８】
【化６３】
室温のジクロロメタン（８５ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．８３ｇ、４４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．２３ｇ、５．９ｍｍｏｌ）を添加し、その後ｔｒａｎｓ−３−インドールアセチクリル酸（ｔｒａｎｓ−３−ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃｒｙｌｉｃ ａｃｉｄ）（１．０ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（６００ｍｇ）。１ＨＮＭＲ（１，１，２，２−ジクロロエタン−ｄ２、３００ＭＨｚ、１００℃）δ ８．５６（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．９４（ｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、１Ｈ、ＨＣ＝Ｃ）、７．８３（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．４６（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．４２（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、７．２６（ｍ、２Ｈ、２ＣＨ ａｒｏｍ）、６．７１（ｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ＝ＣＨ）、５．６５（ｑ、Ｊ＝６．１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．３８（ｄ、Ｊ＝１１．７５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．５０（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１〜２．８（ｍ、２Ｈ）、２．８〜２．６（ｍ、１Ｈ）、２．６〜２．３（ｍ、２Ｈ）、２．４６（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．２〜１．９（ｍ、２Ｈ）、１．９〜１．８（ｍ、１Ｈ）、１．６４（ｄ、Ｊ＝６．２１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３〜ＣＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（ＥＩ＋）ｍ／ｚ ３５５（Ｍ＋）、３２２、１８５、１７０。
【０１６９】
実施例１４：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７１１）の合成
【０１７０】
【化６４】
室温のジクロロメタン（１１０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（９９１．２ｍｇ、５．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．６１ｇ、７．８ｍｍｏｌ）及び３−インドールプロピオン酸（１．４３ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製した。減圧下で蒸発及び乾燥した後、ＡＦ７１１（７１６ｍｇ、９９．６％の化学的純度）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ８．５０、８．４６（２ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨインドール）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．５５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝７．８５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＮＨ ａｒｏｍ）、７．１８（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．２４、７．８５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１１（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．５５、７．２４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝１．８６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨインドール）、５．３２、５．１５（２ｑ、Ｊ＝５．０９及びＪ＝５．１６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．９９、３．２２（２ｄ、Ｊ＝１１及びＪ＝９．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１９（ｍ、１Ｈ）、３．１３〜３．０８（ｍ、１Ｈ）、３．０３、２．９７（２ｄ、Ｊ＝９．５及びＪ＝１１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．７２〜２．６０（ｍ、２Ｈ）、２．５１〜２．２０（ｍ、４Ｈ）、２．２５、２．２３（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７８〜１．６４（ｍ、２Ｈ）、１．４３、１．３１（２ｄ、Ｊ＝５．１５及びＪ＝５．１５Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．３９、１．２８（２ｍ、１Ｈ）、１．１４（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １７０．５０、１６９．８５（Ｃ）、１３６．３０、１３６．２５（Ｃ）、１２７．０７、１２６．９９（Ｃ）、１２１．９３（ＣＨ）、１２１．８５（ＣＨ）、１１９．２４（ＣＨ）、１１８．５５、１１８．５２（ＣＨ）、１１４．７３（Ｃ）、１１１．２０、１１１．１２（ＣＨ）、８４．６９、８４．０６（ＣＨ）、７７．９８（Ｃ）、５４．１８（ＣＨ２）、５２．１８（ＣＨ２）、５１．８６（ＣＨ２）、４５．８９、４５．８３（ＣＨ３）、３６．３８（ＣＨ２）、３４．９８（ＣＨ２）、３２．９９、３２．４１（ＣＨ２）、２２．７０、２０．５０（ＣＨ３）、２０．９６、２０．７３（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１７１】
実施例１５：ＡＦ７１１Ａ及びＡＦ７１１Ｂのキラル分離 ＡＦ７１１をそのエナンチオマーに分離することは、セミ分取カラムを用いてＨＰＬＣにより実施した。メタノール（５０ｍｇ／ｍｌ）中ＡＦ７１１の２００μｌ溶液を、カラムに注入し、溶出した。溶出した後、溶出液を蒸発させて乾燥した。
ＨＰＬＣ：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−６２０００Ａ型
検出器：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−４２５０型
カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ、２５０ｘ１０ｍｍ
流速：４ｍｌ／分
カラム温度：室温
移動相：ヘキサン／エタノール／メタノール ９５：１：４
濃度：５０ｍｇ／ｍｌ
ＵＶ検出：３００ｎｍ
最初に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１１Ａ）：９９％ｅｅ（（−）エナンチオマーであると考えられる） 次に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１１Ｂ）：９９％ｅｅ；比旋光度［α］＝＋７３．５°（Ｃ＝０．３６５、メタノール）
【０１７２】
実施例１６：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン（ＡＦ７１２）の合成
【０１７３】
【化６５】
２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（１．５２ｇ、８．９５ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（１．８７ｍｌ、１３．４２ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。バルプロイルクロリド（１．４６ｇ、８．９５ｍｍｏｌ）を注射器で滴加した。反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。４時間撹拌した後、ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（１０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（２×５０ｍｌ）で抽出した。混合した有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １３０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１２を黄色粉末として得た（３８９ｍｇ、９８．７％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ５．４３（ｑ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．１３、３．６３（２ｄ、Ｊ＝１１．３５及びＪ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．２２、３．００（２ｄ、Ｊ＝９．６及びＪ＝１１．３５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．５６〜２．３８（ｍ、５Ｈ）、２．３０、２．２９（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．８４〜１．５３（３ｍ、６Ｈ）、１．４４、１．４３（２ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．４〜１．１９（ｍ、６Ｈ）、０．９０（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．１１Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７３．９２、１７３．６８（Ｃ）、８４．７５、８４．２０（ＣＨ）、７８．３２、７８．０９（Ｃ）、５４．２４（ＣＨ２）、５２．３４（ＣＨ２）、５２．０２（ＣＨ２）、４６．０３（ＣＨ３）、４４．３４、４３．６４（ＣＨ）、３５．６３（ＣＨ２）、３５．０５（ＣＨ２）、３４．９２（ＣＨ２）、３２．８３（ＣＨ２）、２３．５２、２０．９１（ＣＨ３）、２０．５９（ＣＨ２）、２０．４３（ＣＨ２）、１４．３０（ＣＨ３）、１４．１６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１７４】
実施例１７：３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン（ＡＦ７１５）の合成
【０１７５】
【化６６】
２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（１．４２ｇ、８．３８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（１．７５ｍｌ、１２．５７ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（１．６３ｇｒ、８．３７ｍｍｏｌ）を添加し、反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。３０分間撹拌した後、ジクロロメタン（９０ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（２×１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １４０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１５を白色に近い粉末として得た（１．２３ｇ、９８．７％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ７．８９〜７．８７（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＳＯ２）、７．２７〜７．２２（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＦ）、５．０５（ｑ、Ｊ＝５．２３、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．３３（ｄ、Ｊ＝１０．２６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、３．１９（ｄ、Ｊ＝１０．２６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、２．５２〜２．４２（ｍ、１Ｈ）、２．３４〜２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１８〜２．０９（ｍ、１Ｈ）、１．７７〜１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．５２（ｄ、Ｊ＝５．２３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．２５〜１．１８（ｍ、１Ｈ）、１．１０〜１．０３（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １６６．４５及び１６４．４２（Ｃ）、１３４．０（Ｃ）、１３０．３７（ＣＨ）、１３０．２９（ＣＨ）、１１６．６８（ＣＨ）、１１６．５０（ＣＨ）、８６．９５（ＣＨ）、６６．３０（Ｃ）、５５．４８（ＣＨ２）、５２．５７（ＣＨ２）、５２．１１（ＣＨ２）、４６．０４（ＣＨ３）、３５．６４（ＣＨ２）、３２．８４（ＣＨ２）、２２．９５（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１７６】
実施例１８：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−４−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７０６）の合成
【０１７７】
【化６７】
ジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（１．０９ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）、３−インドールプロピオン酸（１．５７ｇ、８．３ｍｍｏｌ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１．７８ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）、及びジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、０．７８ｇ、６．４１ｍｏｌ）の溶液を、室温で４日間撹拌した。沈殿物をろ過により除去し、溶媒を蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ｉ−ＰｒＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ８５／１５／１）により、エーテル中で粉末化された表題化合物を得た。得られた白色固形物（ＡＦ７０６）、１．１ｇｒ（９９．４％の化学的純度）をろ過及び乾燥した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１５（ｂｒ ＮＨ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝７．７６Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝７．９８Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．２３（ｄｔ、Ｊ＝１．１２、７．５６Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．１３（ｄｔ、Ｊ＝１．０７、７．４４Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝２．１５Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＣ）、４．０５（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．５３（ｄｄ、Ｊ＝９．０、５．５Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＨ）、３．１３（ｍ、３Ｈ）、２．９６（ｔ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．８０〜２．７０（ｍ、３Ｈ）、２．６１〜２．７０（（ｍ、２Ｈ）、２．２３〜２．３４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、２．３１（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．３７（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．３３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６９．６６（Ｃ）、１３６．５２（Ｃ）、１２２．４９（ＣＨ）、１２１．９０（ＣＨ）、１１９．２４（ＣＨ）、１１８．７８（ＣＨ）、１１５．１８（Ｃ）、１１１．４１（ＣＨ）、９４．１６（Ｃ）、６９．９２（ＣＨ）、５３．２５（ＣＨ２）、５２．８４（ＣＨ２）、５２．７０（ＣＨ２）、４５．９９（ＣＨ３）、３７．５２（ＣＨ２）、３３．６６（ＣＨ２）、３０．９０（ＣＨ２）、２０．７３（ＣＨ２）、１８．２６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１７８】
実施例１９：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−４−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン（ＡＦ７１３）の合成
【０１７９】
【化６８】
ＴＨＦ（６０ｍｌ）中水素化ナトリウム（６０％、０．６ｇ、１５ｍｍｏｌ）の冷却（０℃、氷−水浴）溶液に、アルゴン雰囲気下で２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（２．４４ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を添加した。冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。バルプロイルクロリド（２．３６ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を、室温、アルゴン雰囲気下で２．５時間撹拌したままにしておいた。反応混合物を、シリカ短床でろ過した。シリカをＴＨＦ（３ｘ１５０ｍｌ）で洗浄し、ろ過液を混合し蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１）により、黄褐色固形物として表題化合物を得た。固形物をジクロロメタン（１５０ｍｌ）に溶解し、チャコールを撹拌溶液に添加した。ろ過し蒸発させることにより、白色に近いＡＦ７１３を得た（１．４ｇ、９７．２％の化学的純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ４．１〜４．２（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．７〜３．８（ｍ、１Ｈ）、３．０〜３．２（ｍ、２Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ、３Ｈ）、２．３〜２．５（ｍ、３Ｈ）、２．３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．５５〜１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．４〜１．５２（ｍ、１Ｈ）、１．２６（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）、１．２〜１．４（ｍ、６Ｈ）、０．８９（ｂｒ ｔ、Ｊ＝７．０３Ｈｚ、６Ｈ、２ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７３．１４（Ｃ）、９４．２２（Ｃ）、６９．６５（ＣＨ）、５３．４１（ＣＨ２）、５２．４６（ＣＨ２）、５２．３０（ＣＨ２）、４５．３５（ＣＨ２）、４５．０６（ＣＨ２）、３５．３５（ＣＨ２）、３５．２１（ＣＨ２）、３２．９３（ＣＨ２）、３０．２７（ＣＨ２）、２０．７９（ＣＨ２）、２０．７３（ＣＨ２）、１８．１４（ＣＨ３）、１４．３３（ＣＨ３）、１４．２７（ＣＨ３）ｐｐｍ；ＦＴＩＲ（ＨＡＴＲ）１６２７ｃｍ−１。
【０１８０】
実施例２０：４−（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］−デカン（ＡＦ７１４）の合成
【０１８１】
【化６９】
ＴＨＦ（６０ｍｌ）中水素化ナトリウム（６０％、０．６ｇ、１５ｍｍｏｌ）の冷却（０℃、氷−水浴）溶液に、アルゴン雰囲気下で２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（２．４９ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）を添加した。冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で４０分間撹拌した。４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（２．８４ｇｒ、１４．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を、室温、アルゴン雰囲気下で一晩撹拌したままにしておいた。反応混合物をシリカ短床でろ過し、それをテトラヒドロフラン（ＴＨＦ、２ｘ１５０ｍｌ）で洗浄した。ろ過液を混合し蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１）により、黄褐色固形物として表題化合物を得た。固形物を、加熱したｉ−ＰｒＯＨから再結晶させた。ＡＦ７１４を、白色固形物として得た（１．３ｇ、９９．８％の化学的純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ７．８８（ｍ、２Ｈ、２Ｈ−Ａｒ）、７．２０（ｍ、２Ｈ、２Ｈ−Ａｒ）、４．２１（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．６９（ｄｄ、Ｊ＝５．４、８．４Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＨ）、２．９１（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＨ）、２．７２（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、２．６３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、２．４３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．２５（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、１．７２（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．４３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．２８（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６６．５８及び１６３．２０（Ｃ）、１３７．０２（Ｃ）、１２９．９５（Ｃ）、１２９．８３（Ｃ）、１１６．３４（Ｃ）、１１６．０４（Ｃ）、９６．２９（Ｃ）、７０．４２（ＣＨ）、５３．４９（ＣＨ２）、５２．９６（ＣＨ２）、５２．７９（ＣＨ２）、４５．８５（ＣＨ３）、３５．８８（ＣＨ２）、３４．８９（ＣＨ２）、１８．０８（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１８２】
実施例２１：１’，４−ジメチル−６−（３−インドールプロピオニル）−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２，４’−ピペリジン（ＡＦ７１８Ｃ）の合成
【０１８３】
【化７０】
ジクロロメタン（５０ｍｌ）中３−インドールプロピオン酸（１．６３ｇ、８．６ｍｍｏｌ）及びジシクロヘキシル−カルボジイミド（ＤＣＣ、１．８６ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１５分間撹拌した。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ、１．２２ｇｒ ９．０６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌をさらに３０分間継続した。１’，４−ジメチルスピロ−３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン（１．５７ｇ、８．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、反応混合物を水（２×２０ｍｌ）で洗浄した。有機画分を混合し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／２０／１）で精製して、ＡＦ７１８Ｃを白色固形物として得た（２００ｍｇ、９９．３％の化学的純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０８（ｂｒ ＮＨ）、５９（ｄ、Ｊ＝７．７２Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝７．９１Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．２１（ｄｔ、Ｊ＝１．１９、７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．１３（ｄｔ、Ｊ＝１．１３、７．４０Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、６．９８（ｄ、Ｊ＝２．２４Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＣ）、４．１５（ｑ、Ｊ＝６．７７Ｈｚ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．１２（ｔ、Ｊ＝７．２５Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．９２（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨ）、２．８５（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨ）、２．８５〜２．７４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．４〜２．２（ｍ、４Ｈ、２ＣＨ２−ピペリジン）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７６〜１．６７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、１．６６〜１．５６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、１．１２（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １８４．４０（Ｃ）、１３６．２６（Ｃ）、１２２．１６（ＣＨ）、１２１．６７（ＣＨ）、１１９．５３（ＣＨ）、１１８．６５（ＣＨ）、１１４．９３（Ｃ）、１１１．２３（ＣＨ）、７８．６９（Ｃ）、７４．５０（ＣＨ）、５３．０８（ＣＨ２）、５２．０８（ＣＨ２）、４７．１４（ＣＨ）、４６．２５（ＣＨ）、４５．９５（ＣＨ３）、３７．９０（ＣＨ２）、３６．０２（ＣＨ２）、３３．３９（ＣＨ２）、２０．９３（ＣＨ２）、２０．７７（ＣＨ３）ｐｐｍ；ＦＴ−ＩＲ（ＨＡＴＲ）１６７６ｃｍ−１；Ｃ２１Ｈ２７Ｎ３Ｏ２のＭＳ（ＣＩ）３５４（Ｍ＋１）。
【０１８４】
実施例２２：１’，４−ジメチル−６−［３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）］−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン（ＡＦ７２１）の合成
【０１８５】
【化７１】
乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）中４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（１．０４ｇ、５．３ｍｍｏｌ）の溶液を、乾燥ジクロロメタン（１２ｍｌ）中のアミン［ＡＦ７１８Ｃ合成のパート（ａ）を参照、０．９７ｇ、５．３ｍｍｏｌ］及び乾燥トリエチルアミン（１．１ｍｌ、８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（５０ｍｌ）を添加し、反応混合物を水（１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーすることにより、ＡＦ７２１を得た（油状物、０．８ｇ）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０１〜７．９５（ｍ、２Ｈ、２ＣＨ）、７．２８〜７．１６（ｍ、２Ｈ、２ＣＨ）、４．２４（ｑ、Ｊ＝６．８３Ｈｚ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．５４〜３．４８（２つのｄ、Ｊ＝５．３８及びＪ＝５．３８Ｈｚ、２Ｈ、２ＣＨ）、２．５３〜２．３（ｍ、４Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１６〜１．７３（ｍ、４Ｈ）、１．２５ ｄ、Ｊ＝６．８４Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６７．５及び１６４．１（ＣＦ）、１３４．２（Ｃ）、１３０．７（ＣＨ）、１３０．６（ＣＨ）、１１６．６（ＣＨ）、１１６．３（ＣＨ）、７９．６（Ｃ）、７５．０（ＣＨ）、５２．８（ＣＨ２）、５２．２（ＣＨ２）、５０．９（ＣＨ）、４９．９（ＣＨ）、４６．０（ＣＨ３）、３６．３（ＣＨ２）、３３．１（ＣＨ２）、２０．９（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１８６】
実施例２３：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ＡＦ７３２）の合成
【０１８７】
【化７２】
室温のジクロロメタン（５０ｍｌ）中ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．３ｇ、６．３ｍｍｏｌ）の溶液に、３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン酸（１．１８ｇ、５．８ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン（５０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（１．２ｇ、６．４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。その結果生じた溶液を、室温で４８時間撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１）で精製して、無色油状物として表題化合物を得た（０．７ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５〜７．２（ｍ、２Ｈ、２ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２３（ｄｔ、Ｊ＝１．０６、７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、６．９０（ｓ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５４、５．０７（２ｑ、Ｊ＝６．１６及びＪ＝６．２５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６３、３．６８（２ｄ、Ｊ＝１２．０及びＪ＝１１．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．７５、３．７４（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、３．３２（ｄ、Ｊ＝１１．５Ｈｚ、０．６Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１７〜３．０５（ｍ、２．４Ｈ）、２．８〜２．４（ｍ）、２．６８［ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２］、２．２８、２．２６（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．３〜２．２（ｍ）、２．１〜２．０（ｍ）、２．０〜１．８（ｍ）、１．７〜１．４（ｍ）、１．４８、１．４３（２ｄ、Ｊ＝６．１８及びＪ＝６．２６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７０．６（Ｃ）、１３７．１（Ｃ）、１２６．８（Ｃ）、１２６．７（ＣＨ）、１２１．８（ＣＨ）、１１９．０（ＣＨ）、１１８．９（ＣＨ）、１１３．７（Ｃ）、１０９．４（ＣＨ）、５９．０（Ｃ）、５７．５、５７．２（ＣＨ）、５４．６、５４．２（ＣＨ２）、５３．２、５２．９（ＣＨ２）、４６．３、４６．２（ＣＨ３）、３８．１、３７．４（ＣＨ２）、３６．９、３６．６（ＣＨ２）、３６．４、３４．７（ＣＨ２）、３２．７（ＣＨ３）、２５．５、２３．５（ＣＨ３）、２１．０、２０．９（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１８８】
実施例２４：Ｎ−（２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド（ＡＦ７３０）の合成
【０１８９】
【化７３】
２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンの合成：乾燥ＴＨＦ（３０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（１．２４ｇ、６．３ｍｍｏｌ、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順に従って調製した）の溶液を、乾燥ＴＨＦ（５０ｍｌ）中水素化アルミニウムリチウム（１．１３ｇ、３０ｍｍｏｌ）及び塩化アルミニウム（０．２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に滴加した。反応混合物を、室温で１０時間撹拌した。反応混合物を冷却し（氷で）、水（３ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ水溶液（３ｍｌ）、及び水（７ｍｌ）を添加することにより反応を停止させた。固形物をセライトでろ過し、ＴＨＦろ過液を減圧下で濃縮した。残留油状物をジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶解し、溶液を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去し、粗アミンを次のステップに移行させた。
【０１９０】
室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４９ｇ、７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジクロロメタン（２０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンの溶液を添加し（化合物は全て上記のステップで得られた）、その後３−インドールプロピオン酸（１．３ｇ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １４０／１０／１〜ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１の勾配）で精製して、白色固形物のＡＦ７３０を、２つの幾何異性体の混合物（異性体Ｉ／異性体ＩＩ １：２）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０７（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．８１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ、異性体ＩＩ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ、異性体Ｉ）、７．２０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１５（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０２（ｍ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．３６（ｄ、Ｊ＝８．８５Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ 異性体Ｉ）、５．１８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ 異性体ＩＩ）、４．３５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ 異性体Ｉ）、４．０４（ｍ、１Ｈ、ＣＨ 異性体ＩＩ）、３．９３（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３ 異性体Ｉ）、３．４８（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３ 異性体Ｈ）、３．１３（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２ＣＨ２）、２．５８（ｍ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２９（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３ 異性体ＩＩ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３ 異性体Ｉ）、２．１０（ｄｄ、Ｊ＝１２．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ 異性体ＩＩ）、１．９６（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、７．１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ 異性体Ｉ）、１．７〜１．４（２ｍ）、１．４〜１．２（２ｍ）、１．１５（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ 異性体ＩＩ）、０．９７（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ 異性体Ｉ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７２．９、１７２．５（Ｃ）、１３６．６、１３６．５（Ｃ）、１２７．２、１２７．１（Ｃ）、１２２．２、１２２．１（ＣＨ）、１１９．６、１１９．５（ＣＨ）、１１８．８（ＣＨ）、１１４．６、１１４．５（Ｃ）、１１１．６、１１１．５（ＣＨ）、７８．２、７４．５（ＣＨ）、５５．５（ＣＨ）、５３．０（Ｃ）、５２．９、５２．７（ＣＨ２）、４６．６、４６．２（ＣＨ３）、３８．７、３８．５（ＣＨ２）、３７．７、３７．６（ＣＨ２）、２１．８、２１．７（ＣＨ２）、１９．７，１５．０（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１９１】
幾何異性体（２００ｍｇ）を、Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎシステム（Ｉｓｃｏ，Ｉｎｃ社）でフラッシュクロマトグラフィーにより分離した（ＨＰ４０−ｇｏｌｄシリカカラム、線形勾配ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １２０／１０／１〜ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）。 ＡＦ７３０ Ｉ（より極性が低い異性体）：１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０９（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．８０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ｄｔ、Ｊ＝１．１、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ｄｔ、Ｊ＝１．０１、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０３（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．３６（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、４．３５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．９３（ｄｑ、Ｊ＝６．３、６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１３（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２ＣＨ２）、２．５８（ｍ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．５〜２．１（ｍ、４Ｈ、２ＣＨ２）、２．２４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．９６（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、７．１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、１．７〜１．４（２ｍ、２Ｈ）、１．４〜１．３（ｍ、２Ｈ），１．３１（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、２．７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、０．９７（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ。ＡＦ７３０ ＩＩ（より極性の高い異性体）：１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２０（ｄｔ、Ｊ＝１．１、７．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ｄｔ、Ｊ＝１．１、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０１（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．１９（ｄ、Ｊ＝８．３０Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、４．０３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．４６（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１３（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２ＣＨ２）、２．５７（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．５〜２．３（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．３〜２．１（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１０（ｄｄ、Ｊ＝１２．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、１．７〜１．４（２ｍ、４Ｈ）、１．２６（ｄｄ、、Ｊ＝１２．７、７．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、１．１５（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ。
【０１９２】
実施例２５：Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド（ＡＦ７３１）
【０１９３】
【化７４】
（ａ）２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンの合成。温度計、滴下漏斗、及び塩化カルシウム乾燥管が取付けられている三つ口丸底部フラスコに、鉱油中６０％の水素化ナトリウム（８．７４ｇ、０．２１８ｍｏｌ）及び乾燥エーテル（３００ｍｌ）を入れた。この撹拌冷却懸濁液に、乾燥エーテル（１００ｍｌ）中エチルチオラクタート（２８．４ｇ、９５％、０．２００ｍｏｌ）の溶液を５〜１０℃で添加し、同じ温度でメタノール（１００ｍｌ）をゆっくりと添加した。その後、反応混合物を、室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物に乾燥ジメチルスルホキシド（１７０ｍｌ）を添加した。得られた溶液を１５℃に冷却し、エチル（１−メチル−４−ピペリジニリデン）アセタート（４０ｇ、０．２２ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２日間撹拌し、その後、氷冷水（６００ｍｌ）に注いだ。その後、反応混合物を濃塩酸で酸性化し、その後重炭酸ナトリウムで塩基化した（ｐＨ８）。その後、反応混合物をジクロロメタン（４×４５０ｍｌ）で抽出し、混合した抽出液をブライン（２×４００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶媒を除去して、多少のジメチルスルホキシドを含有する油状物を得た（５９．４０ｇ）。上記の生成物（２７．６ｇ）の一部に塩酸（１．３Ｎ、２００ｍｌ）を添加し、得られた溶液を１１時間還流し、その後それをヘキサン（３×７５ｍｌ）で抽出し、ヘキサンを破棄した。水相を３５％水酸化ナトリウム水溶液で塩基化し（ｐＨ１３）、その後ジクロロメタン（３×１２０ｍｌ）で抽出し、混合した抽出物をブライン（２×８０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発させて油状物（９．２ｇ）を得、それを、シリカゲルカラムを用いてクロマトグラフィーにより精製した。メタノール／ジクロロメタン／アンモニア ４／９６／１で溶出することにより、ケトンを得た（７．０ｇ、２段階での収率は３７．９％）。１Ｈ−ＮＭＲ ＣＤＣｌ３）δ １．４０（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、ＣＨ３Ｃ）、１．７５〜２．１５（ｍ、４Ｈ）、２．２０〜２．８０（ｍ、４Ｈ）、２．３２（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．５７及び２．６５（２ｄ、Ｊ＝１７．２Ｈｚ、ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３．５９（ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、ＣＨＳ）。
【０１９４】
（ｂ）２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムの合成。メタノール（９ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン（０．６６９ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）の溶液を、水（１．５ｍｌ）中の塩酸ヒドロキシルアミン（０．２７０ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（０．３２０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を８０℃で２時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー分離した。メタノール／ジクロロメタン／アンモニア［５／９４／１］で溶出することにより、最初にａｎｔｉ配置のオキシム（０．２６７ｇ）、次にこのオキシムの２つの異性体（ｓｙｎ−及びａｎｔｉ−）の混合物（０．３１６ｇ）（収率８１％）を得た。ａｎｔｉ異性体を酢酸エチルから結晶化した。ｍｐ．１４８〜１４９℃。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ａｎｔｉ異性体）δ １．４６（ｄ、Ｊ＝６．６、ＣＨ３Ｃ）、１．７３〜１．９６（ｍ、３Ｈ）、２．０５（ｍ、１Ｈ）、２．１５〜２．４０（ｍ、１Ｈ）、２．３２（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．４７（ｍ、１Ｈ）、２．７０（ｍ、２Ｈ）、２．７８及び２．８６（２ｄ、Ｊ＝１７．４Ｈｚ、ＣＨ２Ｃ＝Ｎ）、３．９９（ｑ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、ＣＨＳ）、１０．１（ｂｓ、−ＮＯＨ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ａｎｔｉ異性体）δ １９．７（ＣＨ３）、３８．２（ＣＨ２）、３８．９（ＣＨ２）、４２．５（ＣＨ）、４２．８（ｂｓ、ＣＨ２）、４５．９（ＣＨ３）、５２．３（Ｃ）、５３．１（ＣＨ２）、５３．４（ＣＨ２）、１６３．７（Ｃ）。Ｇｃ−Ｍｓ ｍ／ｚ ２１５（Ｍ＋１）、１９７（Ｍ−ＯＨ）＋、９６。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｓｙｎ異性体、ｓｙｎ及びａｎｔｉ異性体の混合物のＮＭＲスペクトルからａｎｔｉ異性体のＮＭＲスペクトルを減算することにより算出した）δ １．４８（ｄ、Ｊ＝６．８、ＣＨ３Ｃ）、１．６０〜１．７３（ｍ、１Ｈ）、１．７４〜１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．９５〜２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．３１（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．４４（ｍ、１Ｈ）、２．５４及び２．７７（２ｄ、Ｊ＝１４．５Ｈｚ、ＣＨ２Ｃ＝Ｎ）、２．６０〜２．９０（ｍ、２Ｈ）、４．３７（ｑ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、ＣＨＳ）、１０．２（ｂｓ、ＮＯＨ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｓｙｎ異性体）δ ２１．０（ＣＨ３）、３７．９（ＣＨ２）、３８．２（ＣＨ２）、３８．４（ＣＨ）、４６．０（ＣＨ３）、４６．６（ｂｓ、（ＣＨ２）、）、５１．７（Ｃ）、５２．６（ＣＨ２）、５３．８（ＣＨ２）、１６３．８（Ｃ）．
【０１９５】
（ｃ）２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンの合成：室温で窒素下の乾燥テトラヒドロフラン（４５ｍｌ）中水素化アルミニウムリチウム（１．００ｇ、２６．３５ｍｍｏｌ）及び塩化アルミニウム（０．１１０ｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（１．２４ｇ、５．７９ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。室温での撹拌を３日間継続した。その後、反応混合物を冷却し（水−氷浴）、水（３．０ｍｌ）、次いで水酸化ナトリウム水溶液（１５％、４．０ｍｌ）、その後水（４．０ｍｌ）をゆっくりと添加した。沈殿物をろ過し、少量のジクロロメタンで洗浄した。混合したろ過液及び洗浄液を蒸発させて油状物を得、それをシリカゲルカラムを用いて１０％メタノール−８９％ジクロロメタン−１％アンモニアで溶出したクロマトグラフィーで精製し、油状物としてアミンを得た（０．４３０ｇ、収率３７％）。１Ｈ ＮＭＲデータは、生成物が２対のジアステレオ異性体からなり、一方の対が他方より豊富に存在していることを示す。以下のデータでは、＊は、より豊富に存在する異性体を示し、＃は、それほど豊富に存在していない異性体を示す。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２５＊（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、ＣＨ３Ｃ）、１．３１＊（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、ＣＨ３Ｃ）、１．６０〜２．０８（ｍ、４Ｈ）、１．７２（ｍ、ＣＨ２ＣＮＨ２の１つ）、２．０８〜２．４５（ｍ、２Ｈ）、２．１８（ｄｄ、ＣＨ２ＣＮＨ２の１つ）、２．２９（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．６７（ｍ、２Ｈ）、３．００＊（ｍ、ＣＨＳ）、３．１０（ｍ、ＣＨＮＨ２）、３．３７＊（ｍ、ＣＨＳ）；ＧＣ−ｍｓ ｍ／ｚ ２０１（Ｍ＋１）＋、１８４（Ｍ−ＮＨ２）＋。
【０１９６】
（ｄ）Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオノアミド（ＡＦ７３１）の合成。室温のジクロロメタン（２０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミン（０．３７５ｇ、１．８７２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジクロロメタン（８ｍｌ）中１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．５２０ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液を、その後ジクロロメタン（１５ｍｌ）中３−インドールプロピオン酸（０．４５８ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で３日間撹拌した。形成された固形物をろ過し、少量のジクロロメタンで洗浄し、混合したろ過液及び洗浄液を蒸発させて発泡物を得、それをシリカゲルカラムのクロマトグラフィーで精製した。１％アンモニアを含有するジクロロメタン中５〜７％メタノールの混合溶媒で溶出することにより、最初に生成物を異性体の混合物として得（３２５ｍｇ、収率４６．７％）、次に未反応のアミン（９０ｍｇ）を得た。１Ｈ−ＮＭＲデータは、生成物が２対のジアステレオ異性体からなり、一方の対が他方より豊富に存在していることを示す。以下のデータでは、＊は、より豊富に存在する異性体を示し、＃は、それほど豊富に存在していない異性体を示す。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ０．９９＃（ｄ、Ｊ＝６．９、ＣＨ３Ｃ）、１．１９＊（ｄ、Ｊ＝６．６、ＣＨ３Ｃ）、１．５３及び２．０５（２ｍ、ＣＨ２ＣＨＮＨ）、１．６０〜２．１８（ｍ、４Ｈ）、２．１８〜２．８５（ｍ、２Ｈ）、２．２８＃（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．３０＊（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．９５＊（ｍ、ＣＨＳ）、３．１３（ｔ、２Ｈ）、３．５０＃（ｍ、ＣＨＳ）、４．２４＊（ｍ、ＣＨＮ）、４．５１＃（ｍ、ＣＨＮ）、５．２８＊（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、ＮＨＣＯ）、５．５５＃（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、ＮＨＣＯ）、７．０３＊（ｄ、Ｊ＝２．３Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、７．０４＃（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、７．１１（ｔ、１Ｈ Ａｒ）、７．２０（ｍ、１Ｈ Ａｒ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、８．２２（ｂｓ、ＮＨ インドール）。
【０１９７】
実施例２６：（３Ｅ）−２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン−Ｏ−［３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］オキシム（ＡＦ７３３）
【０１９８】
【化７５】
カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（０．１９ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）中３−インドールプロピオン酸（０．２２ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を室温で０．５時間撹拌し、その後ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（０．２３ｇ、１．２ｍｍｏｌ、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順により調製した）を添加した。反応混合物を、室温で４時間、その後４５℃で８時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン（８０ｍｌ）を添加し、混合物を水（１０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（３０ｍｌ）で抽出した。有機相を混合し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過液を減圧下で濃縮した。残留物を、Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎシステム（Ｉｓｃｏ，Ｉｎｃ社）を用いてフラッシュクロマトグラフィーで精製し（ＨＰ１２−ｇｏｌｄシリカカラム、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）、その後Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎシステム（Ｉｓｃｏ，Ｉｎｃ社）を用いてフラッシュクロマトグラフィーでさらに精製した（ＨＰ１２−ｇｏｌｄシリカカラム、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １２０／１０／１）。残留物をエーテル中で粉末化して、ＡＦ７３３（１０４ｍｇ）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１７（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．７３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝７．９８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．７６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０４（ｄ、Ｊ＝２．１１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５６（ｑ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１８（ｔ、Ｊ＝７．３７Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．８３（ｔ、Ｊ＝７．４１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．４０（ＡＢｑ、Ｊ＝１８．６Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．５〜２．３（ｍ、４Ｈ）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７４（２ｍ、３Ｈ）、１．５（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｄ、Ｊ＝６．３６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７３．４（Ｃ）、１７１．０（Ｃ）、１３６．５（Ｃ）、１２７．３（Ｃ）、１２２．２（ＣＨ）、１２２．１（ＣＨ）、１１９．５（ＣＨ）、１１８．８（ＣＨ）、１１４．５（Ｃ）、１１１．４（ＣＨ）、７８．７（Ｃ）、７２．５（ＣＨ）、５２．５（ＣＨ２）、５２．２（ＣＨ２）、４６．１（ＣＨ３）、４０．０（ＣＨ２）、３７．４（ＣＨ２）、３４．４（ＣＨ２）、３３．７（ＣＨ２）、２０．９（ＣＨ２）、１９．５（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１９９】
実施例２７：（Ｄ）−２−アミノ−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７２８）の合成
【０２００】
【化７６】
１）室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（０．９７ｇ、５．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４４ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を添加し、その後Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン（１．８８ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で４８時間撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、（Ｒ）−３−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−３−オキソ−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．１ｇ）を固形物として得た。
【０２０１】
２）室温のジクロロメタン（２０ｍｌ）中（Ｒ）−３−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−３−オキソ−プロピオン酸ｔｅｒｔブチルエステル（０．９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１．２ｍｌ、１６．２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、Ｂｏｃ保護基が完全に離脱するまで室温で撹拌した。反応混合物をジクロロメタン（２０ｍｌ）で希釈し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１レジン（２０ｇ；Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ９（２００５年）４、２９１〜２９３頁）で１時間処理し、ろ過し、ジクロロメタン（２０ｍｌ）で洗浄した。混合したろ過液を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（０．１ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１４（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６２（ｄ、Ｊ＝７．６５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３８及び７．３７（２ｄ、Ｊ＝７．９６Ｈｚ及びＪ＝７．８８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２２（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１０（ａｐｐ ｄｔ、Ｊ＝１．０、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０９及び７．０６（２つのｄ、Ｊ＝２．２８Ｈｚ及びＪ＝２．２５Ｈｚ １Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．４８、４．９８（２ｑ、Ｊ＝６．２及びＪ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．４２、３．６９（２ｄ、Ｊ＝１２．０及びＪ＝１１．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．９８及び３．９２（２ｔ、Ｊ＝７．３及びＪ＝７．０５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ２）、３．１２（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＨ２）、２．８０（ｄ、Ｊ＝１１．４Ｈｚ、０．７２Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．６（ｍ、２Ｈ）、２．３〜２．２（ｍ、１Ｈ）、２．２６及び２．２５（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１５〜２．０（ｍ、１Ｈ）、１．５２、１．３８（２ｄ、Ｊ＝６．３及びＪ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ。
【０２０２】
生物学的アッセイ 式Ｉの化合物の生物活性を、様々なアッセイを使用して試験した。
【０２０３】
ＧＰＣＲ（例えば、ｍＡＣｈＲサブタイプ）で安定的に形質移入された細胞培養中での細胞内カルシウムイオン（Ｃａ２＋）動員アッセイは、試験化合物の活性（アゴニスト的又はアンタゴニスト的）並びに特定の受容体サブタイプに対するその選択性に関する情報を両方とも提供することができる。生細胞中の遊離細胞内Ｃａ２＋のレベルを、蛍光Ｃａ２＋指示薬、Ｆｌｕｏ−４ ＮＷ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社製、カタログ番号３６２０６）の蛍光をモニターすることにより決定した。この方法は、ＧＰＣＲ薬理学及び機能を特徴付けるのに有用である。Ｃａ２＋測定は、インジェクタ及びピペッタ装置を備えたＮＯＶＯｓｔａｒ（登録商標）プレートリーダ（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製、オッフェンブルク、ドイツ）を使用して実施した。実験の１日前に、ムスカリン受容体サブタイプＭ１〜Ｍ５のうちの１つで安定的形質移入された細胞を回収し、１０％ウシ胎仔血清、ＭＥＭＥ非必須アミノ酸（ＧＩＢＣＯ社製、英国）、グルタミン、ペニシリン、ストレプトマイシン、アンホテリシン、及びＧ４１８（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、イスラエル）で補完された培養培地（ダルベッコ変法イーグル培地、ＧＩＢＣＯ社製、英国）ですすぎ、４０，０００細胞／ウエルの濃度で、黒色壁透明光学底９６穴プレート（Ｎｕｎｃ社製、ロチェスター、ニューヨーク州、米国）に均等に入れた。実験の当日には、細胞は十分にコンフルエントである。増殖培地を取り除き、２．５ｍＭプロベネシド（４−ジプロピルスルファモイル）安息香酸）を含有する８０μｌのローディング緩衝液を注意深く添加した（ローディング緩衝液は、ＦＬＵＯ−４ＮＷカルシウムアッセイキットの手引書に従って調製した）。細胞プレートを、３７℃で３０分間インキュベートし、その後室温でさらに３０分間インキュベートした。試験化合物が細胞内Ｃａ２＋（Ｃａ２−ｉ）に与える効果を評価するために、幾つかの実験では、ＥＧＴＡ［エチレングリコール四酢酸］を使用して細胞外カルシウム源を排除した。ＥＧＴＡ（ＨＢＳＳ（ハンクス緩衝食塩水）に溶解された、１０μｌの５０ｍＭ溶液）を、ＮＯＶＯｓｔａｒインジェクタ装置を使用して各ウエルに自動添加し、その後０．５分間振盪し（１ｍｍ幅、６００ｒｐｍ）、その後さらに１０分間インキュベートした。その後、ＨＢＳＳ単独又はＨＢＳＳに溶解した試験化合物を、ＮＯＶＯｓｔａｒロボットピペッタ装置を使用して、別々のウエルに順次添加した（１０μｌ）。蛍光強度を、４８５ｎｍ（帯域幅１０ｎｍ）の励起波長及び５２０ｎｍ（帯域幅１０ｎｍ）の発光、カットオフ５１５ｎｍを使用して、各ウエルにつき２５秒間、０．５秒間隔で測定した。
【０２０４】
ｍＡＣｈＲのサブタイプ、特にＭ３及びＭ５ ｍＡＣｈＲと比べたＭ１ ｍＡＣｈＲの選択性を評価するために、混合活性、例えばそれぞれＭ１アゴニスト的及びＭ３アンタゴニスト的又はＭ１アゴニスト的及びＭ５アンタゴニスト的特性を有するリガンドを使用して、アッセイを較正した。これにより、細胞に基づくアッセイにおいて、様々な予備受容体による影響を排除することができる。
【０２０５】
化合物ＡＦ７１０、ＡＦ７１０Ｂ、ＡＦ７１１、ＡＦ７１１Ａ、ＡＦ７１８Ｃ、ＡＦ７２１、ＡＦ７３０、ＡＦ７３０Ｉ、ＡＦ７３０ＩＩ、及びＡＦ７３３は、Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対して部分的アゴニストであることが観察され、１００μＭにおける対カルバコール（完全なムスカリンアゴニスト、１００％）の相対的アゴニスト活性は、以下の順序である：ＡＦ７３３（９０％）＞ＡＦ７３０Ｉ（７４５）＞ＡＦ７１０Ｂ＞（６６％）ＡＦ７１１Ａ（４５％）＞ＡＦ７１８Ｃ＞（４３％）＞ＡＦ７１０（４０％）≧ＡＦ７３０（４０％）＞ＡＦ７３０ＩＩ（３６％）＞ＡＦ７１１（１９％）＞ＡＦ７２１（１３％）（表を参照）。これらアゴニストのアゴニスト効果は、Ｍ１選択的なアンタゴニストであるピレンゼピンにより遮断された。ＡＦ７１０Ｂは、Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対して高度に選択的であることが見出され、それぞれＭ２〜Ｍ５ ｍＡＣｈＲサブタイプに対する検出可能なアゴニスト活性を示さなかった。
【０２０６】
化合物ＡＦ７０６、ＡＦ７１２〜ＡＦ７１６、ＡＦ７２６、及びＡＦ７２７（１００μＭ）は、カルバコールの濃度曲線の右方移行により明らかなように、Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対するアンタゴニスト活性を示した（表）。
【０２０７】
オルソステリック又はアロステリックなＭ１ムスカリンアゴニスト活性は、アロステリックなＭ１調節因子ブルシンの存在下又は非存在下で試験することができる（Ｓｕｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ２００３年、１００巻：１３６７４〜１３６７９頁）。Ｍ１ ｍＡＣｈＲで安定的に形質移入された細胞培養又はＭ１ ｍＡＣｈＲ及びヒトアミロイド前駆タンパク質６９５の両方で安定的に形質移入されたチャイニーズハムスター卵巣細胞をブルシン（１００μＭ）で事前インキュベーションすることにより、それらの濃度反応曲線がそれぞれ左方移行したことにより示されるように、カルバコールなどのオルソステリックなアゴニストにより誘導される細胞内カルシウムイオンの上昇に対して強力な増強効果が引き起こされた。ブルシンは、ＡＦ７１０又はＡＦ７１０Ｂのいずれに対してもそのような効果を示さず、ＡＦ７１０Ｂ効果のわずかな阻害を誘導した。まとめると、これらの結果は、ＡＦ７１０及びＡＦ７１０Ｂが、Ｍ１ ｍＡＣｈＲのオルソステリック部位と相互作用せず、したがってアロステリックなアゴニストであることを示す。図１を参照されたい。
【０２０８】
３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）アッセイでは、最終的に細胞死に結び付くプロセスを表すミトコンドリア活性化を含む、細胞内で起こる変化が測定される（Ｆａｇａｒａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔ．１９９６年、１巻：３９８〜４０３頁）。このアッセイは、β−アミロイド媒介性細胞死の機序の特異的な初期指標である（Ｓｈｅａｒｍａｎら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ １９９４年、９１巻：１４７０〜７４頁）。このアッセイを使用して、化学式Ｉ及びＩＩの化合物を評価した。ラット褐色細胞腫（ＰＣ１２）細胞を１０，０００細胞／ウエルの濃度で９６穴プレートに播種し、５％ウシ胎仔血清（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０４−１２１−１Ａ）、１０％加熱不活化ウマ血清（Ｇｉｂｃｏ社製、カタログ番号２６０５０）、Ｌ−グルタミン２００ｍＭ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０３−０２０−１Ｃ）、ペニシリン１００００Ｕ／ｍｌ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０３−０３１−１Ｃ）、及びアムホテリシンＢ ５０ｍｇ／ｍｌ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０１−０２９−１Ｃ）で補完されたダルベッコ変法イーグル培地（Ｇｉｂｃｏ社製、カタログ番号２１９６９）中で維持した。翌日、培地を無血清培地に交換し、試験化合物の存在下又は非存在下で５μＭのβ−アミロイド２５〜３５（Ｈ−１１９２．０００１、Ｂａｃｈｅｍ社製）で、細胞を処理した。化合物は、それぞれ０．１ｎＭ〜１００μＭの範囲の終濃度で６時間試験した。３−インドール−プロピオン酸（３−ＤＰＡ、カタログ番号２２００２７、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社製）は、基準酸化防止剤としての役割を果たした。３−ＩＰＡ、ＡＦ７１０、及びＡＦ７１１は、一連の濃度（１０μＭ〜１ｎＭ）で、Ａβ２５〜３５（４０又は４２個のアミノ酸を有するベータアミロイドに由来するアミノ酸（ＡＡ）２５〜３５の配列を有するペプチド）により誘導される毒性から細胞を保護した。これらの結果は、ＡＦ７１０及びＡＦ７１１が、酸化防止特性を有することを示す。
【０２０９】
試験化合物と共にインキュベーションした後のα−ＡＰＰ分泌研究を、Ｈａｒｉｎｇら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、１９９８年、７１巻：２０９４〜１０３頁に記述されているように実施した。ヒトＡＰＰ６９５及びヒトＭ１ ｍＡＣｈＲで同時形質移入されたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又はラットＭ１ ｍＡＣｈＲで安定的に形質移入されたラット褐色細胞腫細胞（ＰＣ１２）を、２×１０６細胞／ウエルの密度で６穴プレートに接種した。１日後に、細胞を無血清培地で２回洗浄し、０．１ｎＭ〜１００μＭの範囲の種々の濃度の試験化合物で処理した。各プレートにおいて、１つのウエルは、対照（未処理）としての役割を果たし、１つのウエルは、細胞が１又は１００μＭカルバコール（
ＣＣｈ）（最大応答）のいずれかで処理された陽性基準としての役割を果たした。１時間後、馴化培地を冷却エッペンドルフチューブに収集し、このチューブには、αＡＰＰ放出量の定量用プロテアーゼ阻害剤カクテル（０．１ｍＭ フェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）；５μｇ／ｍｌロイペプチン；５μｇ／ｍｌペプスタチン、及び５単位／ｍｌアプロチニン）が含まれていた。各試料のタンパク質内容物を、Ｃｅｎｔｒｉｃｏｎチューブ（Ａｍｉｃｏｎ社製、ベバリー、マサチューセッツ州）を使用して濃縮した。タンパク質定量後（Ｂｉｏ−Ｒａｄ社製タンパク質アッセイ）、同量のタンパク質（３０μｇタンパク質／レーン）を、４〜１２％のＮｕＰａｇｅ Ｎｏｖｅｘ Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製、カリフォルニア州）に負荷し、その後電気泳動にかけた。電気泳動の完了時に、ゲルを、Ｈｏｅｆｅｒ社製半乾燥移動ユニット（Ｓｅｍｉ−Ｐｈｏｒ、Ｈｏｅｆｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｓｔ．社製 サンフランシスコ、カリフォルニア州）を使用して、イムノ−ブロットＰＶＤＦ膜（０．２μｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂ社製、カリフォルニア州）にブロッティングした。その後、膜を、０．１％ Ｔｗｅｅｎ−２０（Ｓｉｇｍａ社、カタログ番号Ｐ５９２７）を有し、カルシウム及びマグネシウムを有していないダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ；Ｇｉｂｃｏ社製、カタログ番号１４２００）に溶解された５％脂肪粉乳でブロッキングした。ヒトＡＰＰ６９５及びＭ１ ｍＡＣｈＲ ＡＰＰバンドで同時形質移入されたＣＨＯ細胞を、抗アミロイドベータタンパク質（１：１０００、モノクローナル６Ｅ１０抗体、ＭＡＢ１５６０、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ社製）及びペルオキシダーゼ結合ウサギ抗マウスＩｇＧ（１：５，０００；Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ社製、ペンシルベニア州）を使用して探索した。Ｍ１ ｍＡＣｈＲ ＡＰＰバンドで安定的に形質移入されたＰＣ１２細胞を、抗アルツハイマー前駆タンパク質Ａ４（１：４，０００；モノクローナル２２Ｃ１１抗体、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ社製）及びペルオキシダーゼ結合ウサギ抗マウスＩｇＧ（１：２０，０００；Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ社製、ペンシルベニア州）を使用して探索した。よく洗い流した後、膜を、Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｌｉｇｈｔｎｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社製、マサチューセッツ州）で処理し、その後ＳｕｐｅｒＲＸフィルム（Ｆｕｊｉ Ｍｅｄｉｃａｌ社製Ｘ線フィルム、東京、日本）に露光した。総ＡＰＰバンドの定量的決定は、Ｓｃｉｏｎ Ｉｍａｇｅプログラム（ＮＩＨ、ベテスダ、米国）により実施した。対照及びＣＣｈの試料を並行してアッセイし、したがって別々の実験からデータを蓄積することが可能であった。
【０２１０】
ＡＦ７１０は、０．１ｎＭ〜１μＭの範囲の濃度にわたって、形質移入されたＣＨＯ及びＰＣ１２細胞中のαＡＰＰ放出を増強した。形質移入されたＰＣ１２細胞で観察された高レベルのαＡＰＰは、形質移入されなかったＰＣ１２細胞では観察されなかった。
【０２１１】
未処置対照細胞との比較では、同時形質移入されたＣＨＯ細胞中の最大αＡＰＰ分泌量は、以下の順序で増強された：ＡＦ７１０Ｂ（０．０１μＭ ２２５％）＞ＡＦ７１０（０．１μＭ １７５％）＞ＡＦ７１０Ａ（１μＭ １２５％）。
【０２１２】
ＧＳＫ−３βレベルの検出は、Ｆａｎｇら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２００２年、２２巻：２０９９〜１１０頁）らに記述されているものと類似したプロトコールを使用するが、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社、米国から購入したホスホ−ＧＳＫ３β（Ｓｅｒ９）、つまりＧＳＫ３βの不活性形態（Ｄｏｂｌｅら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．２００３年、１１６巻：１１７５〜８６頁）に対して選択的な抗体を使用して、試験化合物（＋／−Ａβ２５〜３５、２０μＭ）で処理されたＭ１ ｍＡＣｈＲ細胞培養で安定的に形質移入されたラット褐色細胞腫細胞（ＰＣ１２）で、ウエスタンブロッティングを使用して評価した。この抗体は、非リン酸化ＧＳＫ−３β（最大１μｇ）を検出せず、ＧＳＫ−３αと交差反応しない。抗ＧＳＫ−３（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）は、ＧＳＫ−３α及びＧＳＫ３βの両方に反応的なリン酸化依存性モノクローナル抗体である。同じ実験で、タウタンパク質のリン酸化状態を、タウの非リン酸化エピトープを認識するマウス抗タウ−１モノクローナル抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ社製、カタログ番号ＭＡＢ３４２０）を使用して研究した。Ａβ２５〜３５（２０μＭ）が存在することにより、ＧＳＫ３βの不活性形態を標識するホスホ−ＧＳＫ３β（Ｓｅｒ９）による染色の４０〜５０％減少がもたらされた。これは、活性形態の存在量が上昇したことを示す。ＡＦ７１０Ｂ（１００μＭ〜１０ｎＭ）は、Ａβ２５〜３５（２０μＭ）により誘導されたＧＳＫ−３βの過剰活性化を阻害した。同じ実験で、Ａβ２５〜３５（２０μＭ）は、タウ−１及びＡＦ７１０Ｂ（１００μＭ〜１０ｎＭ）の染色を４０〜６０％減少させ、これら効果を対照レベルに回復させた。まとめると、これらの結果は、ＡＦ７１０Ｂが、ＧＳＫ３βの過剰活性化及びタウタンパク質の過剰リン酸化を減少させたことを示す。
【０２１３】
結合研究を、Ｆｉｓｈｅｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐｔｌ．Ｔｈｅｒａｐ．１９９１年、２５７巻：３９２〜４０３頁に記述されているように、ラット脳ホモジネート（Ｍ１ ｍＡＣｈＲが豊富な皮質）を使用して実施した。大脳皮質を解剖し、氷上に置き、清浄し、計量し、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液、２ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４に移した。組織を、ポリトロンホモジナイザーを使用して、緩衝液（１：１０重量／容積）中でホモジナイズし、−７０℃の凍結／解凍サイクルの後、ホモジネートを４℃で１０分間３５，０００ｇで遠心分離した。上清を取り除き、ペレットをＴｒｉｓ緩衝液に１：６（重量／容積）の比率で再懸濁した。ホモジネートを各々１ｍｌの等量に分割し、その後使用するまで−７０℃で保管した。試験化合物がｍＡＣｈＲに結合する結合特性は、Ｍ１選択的アンタゴニストである［３Ｈ］ピレンゼピン（［３Ｈ］ＰＺ）；比活性８６Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ社、ＭＡ、マサチューセッツ州、米国から購入）を使用してラット皮質膜で研究した種々の濃度の試験化合物（例えば、１０−９〜１０−４Ｍの終濃度）を、［３Ｈ］ＰＺ（各個別の実験での終濃度は、４〜６ｎＭの範囲である）、１ｍＭ ＥＤＴＡ及び２ｍＭ ＭｎＣｌ２、並びに皮質膜（上記で指定されているように希釈した）を全て一緒に０．２ｍｌの最終容積で含有する２０ｍＭ Ｔｒｉｓ／Ｍｎ緩衝液、ｐＨ７．４を含有する１３×１００ｍｍガラス管にピペットで移した。全体の結合及び非特異的結合を、それぞれ競合リガンドの非存在下又は１０μＭアトロピンの存在下で決定した。アッセイは全て、２５℃で１時間、三重反復で実施した。インキュベーション期間の終了時に、管を氷浴に浸漬し、それらの内容物をろ過した。結合した物質を、Ｂｒａｎｄｅｌ社製システム（Ｍ−２４Ｒ、ゲーサーズバーグ、メリーランド州、米国）を使用して、事前に浸漬された（０．５％ポリエチレンイミンに１時間）ＧＦ／Ｂフィルター、３１７×５７ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎ社製、タマル、エルサレム、イスラエル）で捕捉した。その後、フィルターを乾燥し、バイアルの中に押し出した。シンチレーション液体（生分解性計数用シンチレーション物質、Ａｍｅｒｓｈａｍ社製、イリノイ州、米国）を添加し、放射能を、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社製ＴｒｉＣａｒｂ ２８００型液体シンチレーション計数器を使用して測定した。競合曲線、ＫＨ、ＫＬ値を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアプログラム、バージョン３．０を使用して導出した。この研究では、ＡＦ７１０Ｂは、ラット皮質膜中でＭ１ ｍＡＣｈＲに対して２部位結合曲線を示し、２つの結合部位間で強度が５桁異なっており、より高親和性の結合部位ではＫＨ＝０．２３ｎＭ（３７％）であり、より低親和性の結合部位ではＫＬ＝３４．５μＭ（６３％）である。
【０２１４】
８０種の膜貫通及び可溶性受容体、イオンチャネル、及びモノアミン輸送体の幅広いコレクションで構成されるハイスループットプロファイリングを、ＡＦ７１０Ｂに対して実施した。それは、薬物候補を潜在的に限定するためだけでなく、非特異的活性を特定するための情報を提供することを特に目的としている。得られた結果は、ＡＦ７１０Ｂが、以下のＭ１及びＭ２ ｍＡＣｈＲ、並びに他の受容体に結合することを示す。この研究のさらなる延長では、これら受容体のほとんどに関する機能的研究を実施した。下流の神経化学的測定値（例えば、αＡＰＰ、ＧＳＫ３β、タウ）に対するＡＦ７１０ＢのＭ１ ｍＡＣｈＲ媒介性効果が、他のＧＰＣＲとの相互作用と比べて３〜５桁低い濃度で検出されたことが判明した。
【０２１５】
ラットにおける急性毒性研究：ＡＦ７１０Ｂ（１、１０、及び５０ｍｇ／ｋｇ）及び対照として不活性媒体を、３匹の雄＋３匹の雌ラット／用量の群に経管栄養により経口投与し、考え得る毒性又は他の明白な効果について評価した。投与の当日に、投与後の最初の４時間は定期的に、及びそれぞれの作業日の終了時に臨床検査を注意深く実施及び記録した。その後、動物を検査し、臨床的兆候を１４日間の観察期間全体にわたって少なくとも１日１回記録した。観察には、皮膚、柔皮、目、粘膜、分泌及び排出（例えば下痢）の発生、並びに自律神経活性（例えば、涙液分泌、流涎、立毛、瞳孔サイズ、異常な呼吸パターン）の変化が含まれていた。歩行、姿勢、及び取り扱いに対する反応における変化、並びに奇異な行動、身震い、痙攣、睡眠、及び昏睡の存在も検査した。試験物又は試験物媒体対照で処理された動物のいずれにおいても、急性経口（ＰＯ）経管栄養投与の１４日後に実施された計画的安楽死の前に、死亡は発生しなかった。処理に関連した明白な有害反応は、５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルの試験物に曝露され、投与後１００分間十分に回復させた１匹の雄ラットに運動活性のわずかな減少及びわずかな呼吸困難が投与５分後に認められたことを除いて、それぞれの投与日又は１４日間の全観察期間中、いかなる試験物又は試験物媒体対照処理動物にも観察されなかった。現行の研究に適用された経時的な方法を考慮し、可能な限りの標準化を行うために、全ての体重及び体重増加の値、投与日と比較したそれぞれの体重変化のパーセントを各動物及び群毎に計算した。全ての試験物処理群対媒体対照群には、雌ラット（１０ｍｇ／ｋｇの用量レベル）の１つの群の群平均体重変化パーセントに統計的に有意な減少（ｐ＜０．０５）が投与７日後に認められたことを除いて、統計的な有意差は認められなかった。計画的屠殺後に、全て動物を十分に詳細な剖検及び総体的病理学検査にかけた。剖検では、全ての動物を、身体の外部表面、全ての開口部、頭蓋、胸腔及び腹腔、並びにそれらの内容物を含む徹底的な検査にかけた。急性経口（ＰＯ）経管栄養投与の１４日後に実施された計画的剖検時には、全ての試験物又は試験物媒体処理動物中に、肉眼的に明白な総体的病理所見はなかった。ラットに対する急性経口（ＰＯ）経管栄養投与後の試験物ＡＦ７１０Ｂの最大耐用量（ＭＴＤ）を計算した。
【０２１６】
トリヘキシフェニジルは、血液脳関門と交差し、記憶及び学習障害を誘導する選択的Ｍ１ムスカリンアンタゴニストである（Ｂｙｍａｓｔｅｒら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２６７巻：１６〜２４頁、１９９３年；Ｒｏｌｄａｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２３０巻：９３〜９６頁、１９９７年；Ｋｉｍｕｒａら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８３４巻：６〜１２頁、１９９９年）。したがって、この化合物の全身投与は、学習及び記憶プ
ロセスにおける脳Ｍ１ムスカリン受容体の役割を研究する薬学的ツールとして有用である。下記の実験では、未感作ウィスターラットを使用した。受動的回避（ＰＡ）課題は、訓練（獲得）局面及び保持局面で構成される。訓練手順では、各ラットを照明付小区画に個別に収納し、６０秒間の馴化／順応後に大区画へのドアを開け、進入までの待ち時間を測定した（初期待ち時間）。暗所区画への進入直後にドアを閉じ、グリッド床を介して回避不能なフットショックを与えた（０．６ｍＡで３秒間）。初期待ち時間には、１８０秒のカットオフを使用した。１８０秒以内に進入（通過）しなかった動物を、実験から除外した。獲得試行の後、ラットをホームケージに返した。受動的回避課題の保持は、ラットを再び明所区画に収納し、６０秒間の順応期間後にドアを開け、暗色区画に再び進入するまでの待ち時間を測定することにより、２４時間後に測定した。保持待ち時間には、３００秒のカットオフを使用した。３００秒以内に通過しなかった動物を装置から取り除き、それらについては、３００秒の待ち時間を記録した。ラットを２群に分割した。ショックを与える３０分前に、第１の群（Ｎ＝４０）を、トリヘキシフェニジル（５ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ）で処理し、第２の群（Ｎ＝３０）を、再蒸留水（ＤＤＷ １ｍｌ／ｋｇ、ｓ．ｃ）で処理した。各群では、ラットを４つの処理サブグループに分割し（トリヘキシフェニジル処理群はＮ＝９〜１１、及びＤＤＷ処理群はＮ＝７〜８）、ショックを与える６０分前に、１つのサブグループをＤＤＷ（１０ｍｌ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）で処理し、３つのサブグループをＡＦ７１０Ｂ（０．０１、０．０３、及び０．１ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）で処理した。トリヘキシフェニジルと処理との間に有意な相互作用が見出された（Ｆ（２／６３）＝４．０、ｐ＜０．０２３）。ＤＤＷで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間（５４．２２±１４．６０秒）は、ＤＤＷで処理された対照ラットの保持待ち時間より有意に短かった（２４２．００±３０．６０秒）（ｐ＜０．００１）。しかしながら、ＡＦ７１０Ｂ ０．０１ｍｇ／ｋｇ（２５２．５０±３２．３０秒）及び０．０３ｍｇ／ｋｇ（１７８．８２±３２．７０秒）で処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間は、ＤＤＷで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間より有意に長かった（ｐ＜０．０１〜０．００１）。ＡＦ７１０Ｂ ０．１ｍｇ／ｋｇで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間（１２２．００±３４．６０秒）は、ＤＤＷで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間と変わらなかった。したがって、ＡＦ７１０Ｂは、０．０１ｍｇ／ｋｇ、ｐｏ（０．０２８μｍｏｌｅ／ｋｇ、ｐｏ）の用量でさえ有効であることが見出された。
【０２１７】
式Ｉの化合物がＣＮＳに輸送されることになる可能性が高いかどうかを評価するために、表１に示されている化合物の分配係数を計算した。分配係数は親油性の尺度であり、「ｌｏｇ Ｐ」値として数値的に表現することができ、ｌｏｇ Ｐは、オクタノール−水又は緩衝液間の分配係数のｌｏｇである。ｌｏｇ Ｐ値は、ＨＰＬＣ法を含む実験的な方法によるか、又は予測計算法によるかのいずれでも決定することができる。ｌｏｇ Ｐの値が高いほど、目的化学物質の親油性、したがって脂溶性はより大きくなる。ｌｏｇ Ｐが高い物質は、水より油脂により良好に溶解する。これにより、受動拡散により体内の脂質（脂肪に基づく）膜に進入するそれらの能力が増強され、これによりそれらの吸収能力が増強される。多くの薬物は１〜４のｌｏｇ Ｐ値を有しており、経口送達法に好適となっている。したがって、ｌｏｇ Ｐ値は、薬物が迅速にＣＮＳに接近することができるかどうかに関する一般的な指針を提供する。表１に示されている化合物のｌｏｇ Ｐは、分子特性の計算用パッケージソフトである「Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ」によりインターネット上で利用可能なプログラムを使用して計算し（ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社）、全ての場合で１〜４の間であった。
【０２１８】
【表１】
＊ 分子特性の計算用パッケージソフトである「Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ」によりインターネット上で利用可能なプログラムを使用して計算した（Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社、ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ）。
＃ Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対する効果は、上述のように細胞内Ｃａイオンの動員により評価した。Ｍ１ ｍＡＣｈＲは、特定のＧＰＣＲを表す。
【０２１９】
本発明は、上記の例に見出される化合物に限定されるものではなく、上記の合成スキームに示されている手順を使用して、本発明の範囲以内にある他の多くの化合物を調製することもできる。これら方法を使用する式Ｉのさらなる化合物の調製は、化学分野の当業者であれば明白であろう。
【０２２０】
本発明は、その幾つかの実施形態に具体的に言及して詳述されているが、当業者であれば、本発明の趣旨及び範囲内で変異及び改変を達成することができることを理解するだろう。
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２００９年１月２６日に出願された米国特許仮出願第６１／１４７１４３号の優先権を主張するものである。この仮出願の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）のリガンドであり、特にムスカリン受容体アゴニストとして機能する複素二環スピロ化合物、これら化合物を含む医薬組成物、並びに哺乳類のアルツハイマー病、及びインスリン抵抗性症候群、及び２型糖尿病を治療するための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
医学的必要性が満たされていない広範囲の疾患は、それぞれプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）活性化因子及びグリコゲン合成酵素キナーゼ−３β（ＧＳＫ−３β）阻害剤により原理的に治療可能であり得る幾つかの共通した病因を共有している。３つのそのような疾患状態、アルツハイマー病（ＡＤ）（神経学的な中枢神経（ＣＮＳ）疾患）、並びにインスリン抵抗性症候群（ＩＲＳ）及び２型糖尿病（Ｔ２Ｄ）（互いに関連する２つの代謝疾患）が、下記で簡潔に記述されている。ＩＲＳ／Ｔ２ＤとＡＤとの間には密接な関連性が存在する（Ｓｉｍａ及びＬｉ、Ｒｅｖ．Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｓｔｕｄ．２００６年、３巻：１６１〜１６８頁）。
【０００４】
ＡＤは、進行性の記憶喪失により、シナプスの喪失により、β−アミロイド（Ａβ）で構成される老人斑の存在により、神経原線維のもつれ（ＮＦＴ）の存在により、及び前脳基底部のコリン作動性ニューロンの喪失により臨床的に特徴付けられる変性脳障害である。Ａβは、神経毒性ペプチドである。タウ（τ）は、神経突起伸長に必要な微小管結合タンパク質である。過剰リン酸化型タウタンパク質は実際に毒性であり、対らせん状細線維（ＰＨＦ）及びＮＦＴの主成分である。インスリン抵抗性は、慢性の末梢インスリン上昇を誘導し、インスリン活性を低減し、脳インスリンレベルを低減する。ＩＲＳ並びにＴ２Ｄ及び高血圧などの関連症状は、加齢性記憶障害及びＡＤと関連している（Ｓｉｍａ及びＬｉ、Ｒｅｖ Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｓｔｕｄ ２００６年、３巻：１６１〜１６８頁、）に関係している。
【０００５】
多数のキナーゼが、ＡＤ病理及びＩＲＳ／Ｔ２Ｄに関与している。したがって、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の量は、ＡＤを罹患している人々の脳で減少しており、この減少は、神経病理学的な病期と相関することが示されている。これにより、このキナーゼがＡＤの主要な治療標的として重要であることが強調される（Ｋｕｒｕｍａｔａｎｉら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ １９９８年；７９６巻：２０９〜２１頁）。
【０００６】
別のキナーゼ、ＧＳＫ−３βは、細胞膜から核へのシグナル伝達、遺伝子転写、翻訳、細胞骨格形成から、細胞周期進行及び生存に及ぶ数多くの細胞プロセスにおいて重要な調節的役割を果たす（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌｅｃ Ｍｅｄ．２００２年、８巻：１２６〜３２頁；Ｂｈａｔら、Ｎｅｕｒｏｓｉｇｎａｌｓ ２００２年、１１巻：２５１〜６１頁；Ｂａｌａｒａｍら、Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ２００６年、６３巻：１２２６〜３５頁）。ＧＳＫ−３βは、ＡＤタウ過剰リン酸化、Ａβ誘導性神経毒性、及びプレセニリン−１（ＰＳ−１）突然変異病原性効果などのＡＤに関連する主要な異常のほとんどに関連している。活性ＧＳＫ−３βは、細胞死に関与するシグナル伝達事象を開始させ、一部のＡＤ病理が、異常なＧＳＫ−３β発現及び活性に起因している可能性を示している。さらに、ＧＳＫ−３βの不活化は、Ａβ分泌の減少と相関している（Ｓｕｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２００２年、３２１巻：６１〜４頁）。現在、ＧＳＫ−３βは、β−アミロイドとタウ病理とを結び付けるために欠けている部分であることが仮定されており、ＧＳＫ−３βは、ＡＤの病因に顕著に関与するものとして位置付けられている［Ｔａｋａｓｈｉｍａ、Ｊ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ ２００６年、９巻（付録３）、３０９〜１７頁］。
【０００７】
ＧＳＫ−３βは、グリコゲン合成酵素をリン酸化し、グルコース代謝経路を制御する。したがって、ＧＳＫ−３βは、インスリンシグナル伝達経路における中心的な負の制御因子であり、インスリン抵抗性に役割を有している可能性がある（Ｇａｓｐａｒｉｎｉら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００２年：２３巻：２８８〜９２頁；Ｊａｎｓｓｅｎｓら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ ２００６年；２４巻：２６３〜８０頁）。
【０００８】
したがって、ＧＳＫ−３βの阻害は、ＧＳＫ−３β経路を使用する、インスリンなどの特定のホルモン及び増殖因子の作用を模倣することができる。この戦略より、シグナル伝達機構の欠損受容体（例えば、インスリン受容体）又は別の欠陥部分を迂回することが可能になる場合があり、その結果、インスリン非依存性２型糖尿病などのように、シグナル伝達カスケードの幾つかの上流関与体に欠陥がある場合でさえ、生物学的なシグナルは効果を現すことになる［Ｔａｎａｂｅら、ＰＬｏＳ Ｂｉｏｌ． ２００８年（２）：ｅ３７；Ｗａｇｍａｎら、Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ、２００４年 １０巻：１１０５〜１１３７頁］。
【０００９】
上記で言及されている疾患の治療戦略には、ＰＫＣ活性化因子及びＧＳＫ−３β阻害剤が含まれていてもよい。これは、原理的に、これらキナーゼの間接的（ＧＰＣＲ媒介性）又は直接的調節のいずれかにより達成することができる。直接的なＰＫＣ活性化因子又はＧＳＫ−３β阻害剤の場合には、非常に強力で選択的なリガンドが探究される。しかしながら、それらの標的キナーゼが多数のプロセス及び下流カスケードに関与するため、そのような治療戦略では、有害効果はなくならないだろう。したがって、ある経路（および関連疾患）におけるそれらの機能について、これらキナーゼを直接的に標的とすることにより、別の経路におけるそれらの機能が変更され、重大な副作用（非特異的副作用）を起こす可能性があるだろう。
【００１０】
したがって、これらキナーゼを直接的に標的とする化合物を用いた理想的な療法は、疾患状態に関与する別々の経路（複数可）を選択的に調節するべきである。そのようなキナーゼは、ＧＰＣＲを介して細胞膜の外部から調節することができる。ＧＰＣＲは、細胞の外部から受け取ったシグナルを、シグナル伝達経路を介して細胞内部の生物学的プロセスへと変換する。ＧＰＣＲにより調節されるそのようなシグナル伝達経路は、細胞及び生物が微弱なシグナルを増幅してロバストな応答を生成することができる洗練された系である。この下流増幅プロセスにより、適度な結合能力を有し、ＡＤ、ＩＲＳ、及びＴ２Ｄなどの慢性疾患状態の長期治療後にＧＰＣＲ媒介性シグナル伝達の除感作を引き起こさない部分的アゴニストの臨床開発が可能になる。
【００１１】
ＧＰＣＲ調節の薬物候補は、他のＧＰＣＲサブタイプの活性化を防止するために、標的ＧＰＣＲサブタイプに対して選択性を有することが望ましい。ムスカリン受容体（ｍＡＣｈＲ）は、ＧＰＣＲのサブクラスである。Ｍ１〜Ｍ５と呼ばれる５つの遺伝子的に異なるヒトムスカリン受容体がクローニングされている（Ｂｕｃｋｌｅｙら、Ｍｏ１ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９８９年；３５巻：４６９〜７６頁；Ｈｕｌｍｅら、Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ １９９０年；３０巻：６３３〜７３頁）。皮質、海馬、及び線条体に広く分布しているＭ１ ｍＡＣｈＲは、認知処理、特にＡＤにおいて損なわれる短期記憶に重要な役割を有する。Ｍ１選択的ムスカリンアゴニストは、抗認知症薬物治療として機能する場合がある。そのような化合物の治療能力は、原理的に、コリンエステラーゼ阻害剤（ＡＣｈＥ−Ｉｓ）ほどシナプス前コリン作動性端末の変性の程度により影響を受けないはずであり、したがってＦＤＡ承認のＡＣｈＥ−Ｉｓより合理的なＡＤ治療であり得る（総説：Ｆｉｓｈｅｒ、Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、５巻：４３３〜４２頁、２００８年）。多くの二環式スピロ化合物が開示されており、幾つかはＭ１選択的アゴニストであることが報告されている（米国特許第４，８５５，２９０号、第４，９８１，８５８号、第４，９００，８３０号、第４，８７６，２６０号、第５，０５３，４１２号、第５，４０７，９３８号、第５，５３４，５２０号、第５，８５２，０２９号、第７，０４９，３２１号、第５，２２１，６７５号、第７，３４９，２５１号）。
【００１２】
ＡＤの主な顕著な特徴のうちの３つ：ＣＮＳコリン作動性機能低下、Ａβペプチドアミロイド斑の形成、及び過剰リン酸化型タウタンパク質を含有するもつれの間に関連性があることが報告されている。この状況では、ＡＤにおけるコリン作動性機能低下とＡβペプチド及びタウリン酸化とが、悪循環で結び付けられる。Ｍ１ ｍＡＣｈＲの刺激は、そのβ−アミロイド領域の中央でのアミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）の切断を増加させる場合がある。この切断により、分泌性で神経組織栄養性の神経保護性ＡＰＰ（α−ＡＰＰ）が産生され、Ａβペプチドの形成が防止される。Ｍ１アゴニストは、ＡＤのα−セクレターゼプロセシング経路を選択的に亢進することにより、Ａβ形成を防止するという点で価値がある場合がある。さらに、Ｍ１ ｍＡＣｈＲの刺激は、タウ過剰リン酸化を減少させることができる（総説：Ｆｉｓｈｅｒ、Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ５巻：４３３〜４２頁、２００８年）。したがって、ＧＰＣＲサブタイプの幾つか及び特にＭ１ ｍＡＣｈＲは、健康時及び疾患時の両方において数多くの機能の調節に関与する。ＰＫＣは、Ｍ１ ｍＡＣｈＲ、代謝調節型受容体、及びＷｎｔシグナル伝達を含むがそれらに限定されない幾つかのＧＰＣＲにより活性化することができる（Ｆａｒｉａｓら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．２００４年、４７巻：３３７〜４８頁；Ｍｕｄｈｅｒら、Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００１年、２１巻：４９８７〜９５頁；Ｂａｌｌｏｕら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１年、４４巻：４０９１０〜９１６頁）。
【００１３】
一般的に、ＧＰＣＲは、複数の部位を含有することができる。この状況では、ｍＡＣｈＲサブタイプは、オルソステリック部位（天然神経伝達物質であるアセチルコリンの主要な結合部位）及びアロステリック部位（オルソステリック部位及びアセチコリン（ａｃｅｔｙｃｈｏｌｉｎｅ）の効果を変更してもよく、変更しなくてもよい）を両方とも含有する。
【００１４】
それぞれＡＤ及びＩＲＳ／Ｔ２Ｄを含むＣＮＳ及びＰＮＳ疾患の病理学的特徴の多くは、酸化ストレス関連の特徴を伴っている。Ａβにより引き起こされるＡＤの酸化ストレスは、一連の事象及び悪循環を増幅させる場合があり、幾つかのＧＰＣＲ誘導性シグナル伝達の遮断（最も良く記述されているのはＭ１ ｍＡＣｈＲについてである）及び神経毒性Ａβのさらなる蓄積に結び付く。酸化防止剤は、原理的にそのような悪循環を防止することができる（Ｆｉｓｈｅｒ、Ｊａｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００年、８４巻：１０１〜１２頁；Ｋｅｌｌｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９６年 ９３巻：６７５３〜５８頁）。
【００１５】
酸化ストレスは、最終的に、Ｔ２Ｄの発症及びその後の合併症の両方に結び付く場合がある。酸化防止剤治療は糖尿病の動物モデルで有益性を示す場合があるが、新しいより強力な酸化防止剤は、酸化防止剤が合併症の治療に有効であり得るかどうかが実証されることが必要である。さらに、酸化ストレスは、糖尿病合併症に寄与する１つの因子に過ぎないと考えられるため、酸化防止剤治療は、糖尿病合併症の他の治療と併用された方が、より有効である可能性が高いだろう。特に、代謝調節型受容体シグナル伝達（例えば、ＧＰＣＲ媒介性シグナル伝達）及びＧＳＫ−３βが関与する新規経路は、糖尿病に関与する可能性があり、包括的な治療戦略で取り組まれる必要があるだろう（Ｍａｉｅｓｅら、Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２００７年 １４巻：１７２９〜３８頁。総説）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】米国特許第４，８５５，２９０号
【特許文献２】米国特許第４，９８１，８５８号
【特許文献３】米国特許第４，９００，８３０号
【特許文献４】米国特許第４，８７６，２６０号
【特許文献５】米国特許第５，０５３，４１２号
【特許文献６】米国特許第５，４０７，９３８号
【特許文献７】米国特許第５，５３４，５２０号
【特許文献８】米国特許第５，８５２，０２９号
【特許文献９】米国特許第７，０４９，３２１号
【特許文献１０】米国特許第５，２２１，６７５号
【特許文献１１】米国特許第７，３４９，２５１号
【特許文献１２】国際公開第９７／１１６８２号
【特許文献１３】欧州特許第７３６２９９号
【特許文献１４】国際公開第９９／５９５５０号
【特許文献１５】国際公開第９７／１３５００号
【特許文献１６】国際公開第０３／０９４８８６号
【特許文献１７】米国特許出願公開第２００２００６１３３６号
【特許文献１８】国際公開第００／４５７９２号
【特許文献１９】国際公開第００／５３１６０号
【特許文献２０】国際公開第０２／１９９８９号
【特許文献２１】国際公開第８９／０４１７９号
【特許文献２２】国際公開第９６／１１７０５号
【特許文献２３】国際公開第９０／０７９２３号
【特許文献２４】米国特許第６，４８５，７０６号
【特許文献２５】国際公開第０２／４９６２１号
【特許文献２６】米国特許第５，１７９，０７９号
【特許文献２７】国際公開第００／６２７５９号
【特許文献２８】米国特許出願公開第２００３０２０６９３９号
【特許文献２９】国際公開第００／０６１０８号
【特許文献３０】米国特許出願公開第２００２００３４５３６号
【特許文献３１】米国特許第６，５２４，５５７号
【特許文献３２】米国特許第６，６３２，４５６号
【特許文献３３】国際公開第０２／０８０８８４号
【特許文献３４】米国特許第５，２３０，８８４号
【特許文献３５】米国特許第５，２９２，４９９号
【特許文献３６】国際公開第０１７／８６９４号
【特許文献３７】国際公開第０１／７８６９６号
【特許文献３８】米国特許出願第２００３０１９４３７号
【特許文献３９】米国特許出願公開第２００３０１６５４３６号
【特許文献４０】国際公開第９６／４００８９号
【特許文献４１】米国特許出願公開第２００１００３６４８１号Ａ１
【特許文献４２】米国特許出願公開第２００３０２３２０１９号Ａ１
【特許文献４３】米国特許出願公開第２００４００１８２４３号Ａ１
【特許文献４４】国際公開第０１／１３８９１号
【特許文献４５】国際公開第０２／０６７９０２号
【特許文献４６】国際公開第０３／０７２０８０号
【特許文献４７】国際公開第０３／０７９８８５号
【特許文献４８】国際公開第０３／０１５７５０号
【特許文献４９】米国特許出願公開第２００３０００８０１３号
【特許文献５０】国際公開第００／００１７６号
【特許文献５１】米国特許出願公開第２００２０１４１９４５号
【特許文献５２】米国特許第６，３０９，６７１号
【特許文献５３】欧州特許出願公開第１３３８２７２号Ａ１
【特許文献５４】国際公開第９０／０９７８１号
【特許文献５５】米国特許第５，３４８，７３０号
【特許文献５６】米国特許第６，４３６，３６７号
【特許文献５７】国際公開第９１／０４０１１号
【特許文献５８】米国特許第６，２９４，１５３号
【特許文献５９】米国特許第６，２９０，９８７号
【特許文献６０】米国特許出願公開第２００３００５３９６０号
【特許文献６１】国際公開第０１／６０３４１号
【特許文献６２】米国特許出願公開第２００１００３８８２４号
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Ｓｉｍａ及びＬｉ、Ｒｅｖ．Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｓｔｕｄ．２００６年、３巻：１６１〜１６８頁
【非特許文献２】Ｋｕｒｕｍａｔａｎｉら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ １９９８年；７９６巻：２０９〜２１頁
【非特許文献３】Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌｅｃ Ｍｅｄ．２００２年、８巻：１２６〜３２頁
【非特許文献４】Ｂｈａｔら、Ｎｅｕｒｏｓｉｇｎａｌｓ ２００２年、１１巻：２５１〜６１頁
【非特許文献５】Ｂａｌａｒａｍら、Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ２００６年、６３巻：１２２６〜３５頁
【非特許文献６】Ｓｕｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２００２年、３２１巻：６１〜４頁
【非特許文献７】Ｔａｋａｓｈｉｍａ、Ｊ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ ２００６年、９巻（付録３）、３０９〜１７頁
【非特許文献８】Ｇａｓｐａｒｉｎｉら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００２年：２３巻：２８８〜９２頁
【非特許文献９】Ｊａｎｓｓｅｎｓら、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ ２００６年；２４巻：２６３〜８０頁
【非特許文献１０】Ｔａｎａｂｅら、ＰＬｏＳ Ｂｉｏｌ．２００８年（２）：ｅ３７
【非特許文献１１】Ｗａｇｍａｎら、Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ、２００４年 １０巻：１１０５〜１１３７頁
【非特許文献１２】Ｂｕｃｋｌｅｙら、Ｍｏ１ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９８９年；３５巻：４６９〜７６頁
【非特許文献１３】Ｈｕｌｍｅら、Ａｎｎ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ １９９０年；３０巻：６３３〜７３頁
【非特許文献１４】Ｆｉｓｈｅｒ、Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、５巻：４３３〜４２頁、２００８年
【非特許文献１５】Ｆａｒｉａｓら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．２００４年、４７巻：３３７〜４８頁
【非特許文献１６】Ｍｕｄｈｅｒら、Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００１年、２１巻：４９８７〜９５頁
【非特許文献１７】Ｂａｌｌｏｕら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１年、４４巻：４０９１０〜９１６頁
【非特許文献１８】Ｆｉｓｈｅｒ、Ｊａｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００年、８４巻：１０１〜１２頁
【非特許文献１９】Ｋｅｌｌｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９６年 ９３巻：６７５３〜５８頁
【非特許文献２０】Ｍａｉｅｓｅら、Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２００７年 １４巻：１７２９〜３８頁
【非特許文献２１】Ｎａｍｉｎｇ ａｎｄ Ｉｎｄｅｘｉｎｇ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｆｏｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ、米国化学会
【非特許文献２２】Ｍａｅｈｒ Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．６２巻、１１４〜１２０頁（１９８５年）
【非特許文献２３】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、２０００年
【非特許文献２４】Ｐｒａｕｓｎｉｔｚら、２００４年 Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ３巻：１１５頁
【非特許文献２５】Ｓｐｒｏｗｌｓ’ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｙ
【非特許文献２６】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ
【非特許文献２７】Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁
【非特許文献２８】Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ９（２００５年）４、２９１〜２９３頁
【非特許文献２９】Ｓｕｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ２００３年、１００巻：１３６７４〜１３６７９頁
【非特許文献３０】Ｆａｇａｒａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔ．１９９６年、１巻：３９８〜４０３頁
【非特許文献３１】Ｓｈｅａｒｍａｎら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ １９９４年、９１巻：１４７０〜７４頁
【非特許文献３２】Ｈａｒｉｎｇら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、１９９８年、７１巻：２０９４〜１０３頁
【非特許文献３３】Ｆａｎｇら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２００２年、２２巻：２０９９〜１１０頁
【非特許文献３４】Ｄｏｂｌｅら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．２００３年、１１６巻：１１７５〜８６頁
【非特許文献３５】Ｆｉｓｈｅｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐｔｌ．Ｔｈｅｒａｐ．１９９１年、２５７巻：３９２〜４０３頁
【非特許文献３６】Ｂｙｍａｓｔｅｒら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２６７巻：１６〜２４頁、１９９３年
【非特許文献３７】Ｒｏｌｄａｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２３０巻：９３〜９６頁、１９９７年
【非特許文献３８】Ｋｉｍｕｒａら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８３４巻：６〜１２頁、１９９９年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明の実施形態によると、式Ｉのスピロ化合物又はその薬学的に許容される塩が提供される：
【００１９】
【化１】
【００２０】
式中、Ａは、
【００２１】
【化２】
【００２２】
【化３】
【００２３】
【化４】
【００２４】
及び
【００２５】
【化５】
からなる群から選択され
式中、
全ての構造において、「Ｃ」と示されている炭素はスピロ炭素を示し、 Ｒは、Ｈ及び随意に置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、 ｎ及びｐは、各々独立して０、１、２、及び３から選択され、ただしｎ＋ｐ＝ｌ、２、又は３であり、
Ｙは、−Ｏ−又は−Ｓ−であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ６は、各々独立して、Ｈ、随意に置換されたＣ１〜６アルキル、随意に置換されたＣ１〜６アルコキシ、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、及び随意に置換されたフェニルから選択され、
Ｒ５は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、随意に置換されたＣ２〜６アルキニル、随意に置換されたフェニル、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換されたへテロアリール、随意に置換されたＣ１〜６アルキルへテロアリール、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８、−ＳＯ２−Ｒ９から選択され、Ａが、
【００２６】
【化６】
−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８である場合、
Ｒ８は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜７アルコキシ、随意に置換されたＣ２〜７ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜７アルケニル、随意に置換されたＣ２〜７アルキニル、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、随意に置換されたアリール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換された〜Ｃ２〜３アルケニルインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドリジン、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルイソインドール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインダジオール（ａｌｋｙｌｉｎｄａｚｉｏｌｅ）、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインダゾール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインダゾール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルベンズイミダゾール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルベンズイミダゾール、及び随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシベンズイミダゾールから選択され、
Ｒ９は、アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、ヒドロキシル、及びＣＦ３からなる群の１つ又は複数のメンバーにより置換されたアリールである。
【００２７】
本発明の幾つかの実施形態では、Ｒはメチルである。本発明の幾つかの実施形態では、ｐ及びｎは、各々１である。
【００２８】
幾つかの実施形態では、Ａは、
【００２９】
【化７】
である。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３０】
【化８】
である。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３１】
【化９】
である。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３２】
【化１０】
幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３３】
【化１１】
である。
【００３４】
本発明の幾つかの実施形態では、Ｒ１はメチルである。幾つかの実施形態では、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２はＨである。幾つかの実施形態では、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、各々Ｈである。
【００３５】
幾つかの実施形態では、Ｒ６はＨである。
【００３６】
本発明の幾つかの実施形態では、ＹはＳである。幾つかの実施形態では、ＹはＯである。
【００３７】
幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１〜３）−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−（（１−メチル）−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、ｔｒａｎｓ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−ＳＯ２−４−フルオロフェニルである。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ｎ−プロピル）２である。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−（４−ヒドロキシ−３，５−ジ−ｔｅｒｔブチルフェニル）である。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ３である。幾つかの実施形態では、Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−インドール−３−イルである。幾つかの実施形態では、Ａは、
【００３８】
【化１２】
であり、Ｒ５は、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである。
【００３９】
本発明の幾つかの実施形態では、化合物は、以下のうちの１つから選択される：
【００４０】
【化１３】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【００４１】
【化１４】
（（Ｒ））−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【００４２】
【化１５】
（（Ｓ））−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【００４３】
【化１６】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【００４４】
【化１７】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピルペンタン−１−オン）、
【００４５】
【化１８】
（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−メタノン）、
【００４６】
【化１９】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール３−イル）ブタン−１−オン）、
【００４７】
【化２０】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール３−イル）エタン−１−オン）、
【００４８】
【化２１】
【００４９】
【化２２】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール３−イル）プロパ−２−エン−１−オン）、
【００５０】
【化２３】
１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン−１−オン、
【００５１】
【化２４】
１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５２】
【化２５】
（（Ｒ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５３】
【化２６】
（（Ｓ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５４】
【化２７】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【００５５】
【化２８】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【００５６】
【化２９】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−４−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【００５７】
【化３０】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−４−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【００５８】
【化３１】
（４−（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］−デカン）、
【００５９】
【化３２】
（１’，４−ジメチル−６−（３−インドールプロピオニル）−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、及び
【００６０】
【化３３】
（１’，４−ジメチル−６−［３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）］−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、
【００６１】
【化３４】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【００６２】
【化３５】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【００６３】
【化３６】
（３Ｅ）−２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン−Ｏ−［３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］オキシム、
【００６４】
【化３７】
（Ｄ）−２−アミノ−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、又はそれらの薬学的に許容される塩。
【００６５】
本発明の幾つかの実施形態によると、以下のものからなる群から選択される化合物も提供される：（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン、（＋）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、（−）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、（＋）−１−（２、８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、及び（−）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン。
【００６６】
本発明の実施形態によると、本明細書に記載されている化合物、及びその薬学的に許容される担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物も提供される。
【００６７】
本発明の実施形態によると、アルツハイマー病を治療するための方法であって、そのような治療を必要性とする患者に、本明細書に記載されている有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。
【００６８】
本発明の実施形態によると、インスリン抵抗性症候群を治療するための方法であって、そのような治療を必要性とする患者に、本明細書に記載されている有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。
【００６９】
本発明の実施形態によると、２型糖尿病を治療するための方法であって、そのような治療を必要性とする患者に、本明細書に記載されている有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。
【００７０】
本発明の実施形態によると、Ｍ１ムスカリン受容体調節因子による治療に感受性である疾患又は症状を治療するための方法であって、その必要がある患者に、本明細書に記載されている治療上有効量の化合物を投与することを含む方法も提供される。幾つかの実施形態では、疾患又は症状は、以下のものからなる群から選択される：脳アミロイド媒介性障害；ＧＳＫ３β媒介性障害；Ｗｎｔ−シグナル伝達の異常；タウタンパク質過剰リン酸化媒介性損傷、機能不全、又は疾患；内因性成長因子媒介性疾患；ＡＤ及び／又は前述の疾患のリスク因子の組合せ、例えば頭部損傷、酸化ストレス、フリーラジカル、アポトーシス、炎症、外来性又は内因性毒素、興奮毒、遺伝的素因、免疫又は自己免疫性機能不全又は疾患（例えば、狼瘡、多発性硬化症、シェーグレン症候群、慢性疲労症候群、線維筋痛）；及びコリン作動性機能不全の関与が示唆されている障害を伴う疾患状態。幾つかの実施形態では、疾患又は症状は、以下のものからなる群から選択される：ＡＤ、レビー小体認知症、脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、大脳アミロイドーシス、前頭側頭型認知症、血管性認知症、高脂血症、高コレステロール血症、前頭側頭型認知症、血管性認知症、多発梗塞性認知症（ＭＩＤ）、脳卒中虚血（ｓｔｒｏｋｅ ｉｓｃｈｅｍｉａ）、脳卒中／虚血／頭部損傷を伴うＭＩＤ、ＭＩＤ及びＡＤの併発、ＡＤ及びＰＤの併発、ヒト頭部損傷、加齢性記憶障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＡＤに至るＭＣＩ、双極性障害、躁病、急性錯乱障害、注意欠陥障害、幻覚−妄想性状態、情緒及び注意障害、術後せん妄（全身麻酔後の抗コリン作動性症候群）、三環系抗うつ薬又は統合失調症及びＰＤの治療に使用される特定の薬物（例えば、トリヘキシフェニジル）の有害効果（口内乾燥、失名辞、記憶喪失、及び／又は錯乱、精神病）のアンタゴニズム、統合失調症、双極性障害、躁病、遅発性ジスキネジー、先天性オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症、オリーブ橋小脳萎縮症、アルコール離脱症状、ハンチントン舞踏病、ピック病、フリードライヒ運動失調症（Ｆｒｉｅｄｒｉｃｋ’ｓ ａｔａｘｉａ）、ジルドラツレット病、及びダウン症候群。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１Ａ】ＡＦ７１０及びＡＦ７１０Ｂが、Ｍ１ ｍＡＣｈＲのオルソステリック部位と相互作用せず、したがってアロステリックなアゴニストであることを示す。
【図１Ｂ】ＡＦ７１０及びＡＦ７１０Ｂが、Ｍ１ ｍＡＣｈＲのオルソステリック部位と相互作用せず、したがってアロステリックなアゴニストであることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００７２】
定義 用語及び置換基は、本明細書の全体にわたって、それらの定義を保持する。
【００７３】
アルキルは、直鎖、分岐、又は環式炭化水素構造及びそれらの組合せを含むことが意図されている。別様に制限されていない場合、この用語は、２０個以下の炭素のアルキルを指す。低級アルキルは、１、２、３、４、５、及び６個の炭素原子のアルキル基を指す。低級アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、並びにｓ−ブチル及びｔ−ブチルなどが含まれる。シクロアルキルは、アルキルのサブセットであり、それには、３、４、５、６、７、及び８個の炭素原子の環式炭化水素基が含まれる。シクロアルキル基の例には、ｃ−プロピル、ｃ−ブチル、ｃ−ペンチル、ノルボルニル、及びアダマンチルなどが含まれる。
【００７４】
Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０）には、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、及びそれらの組合せが含まれる。例には、ベンジル、フェネチル、シクロヘキシルメチル、カンホリル（ｃａｍｐｈｏｒｙｌ）、及びナフチルエチルが含まれる。用語「フェニレン」は、下記式のオルト、メタ、又はパラ残基を指す：
【００７５】
【化３８】
【００７６】
【化３９】
及び
【００７７】
【化４０】
【００７８】
アルコキシ又はアルコキシルは、酸素を介して親構造に結合した直鎖状、分岐状、環状配置、及びそれらの組合せの１、２、３、４、５、６、７、又は８個の炭素原子の基を指す。例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、シクロプロピルオキシ、及びシクロヘキシルオキシなどが含まれる。低級アルコキシは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。本特許出願の目的では、アルコキシには、環を形成するようにメチレンジオキシ又はエチレンジオキシ基がそこから垂下している原子、鎖、又は環に各酸素原子が結合しているメチレンジオキシ及びエチレンジオキシが含まれる。したがって、例えば、アルコキシにより置換されたフェニルは、例えば、
【００７９】
【化４１】
又は
【００８０】
【化４２】
であってもよい。
【００８１】
オキサアルキルは、１つ又は複数の炭素（及びそれらに結合している水素）が、酸素により置換されたアルキル残基を指す。例には、メトキシプロポキシ、３，６，９−トリオキサデシルなどが含まれる。オキサアルキルという用語は、それが当技術分野で理解されているように意図されており［米国化学会が出版したＮａｍｉｎｇ ａｎｄ Ｉｎｄｅｘｉｎｇ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｆｏｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ、第１９６項を参照されたい。しかし第１２７（ａ）項の制限は適用されない。］、つまり、その隣接した原子に対する単結合を介して酸素が結合されている（エーテル結合を形成する）化合物を指す。同様に、チアアルキル及びアザアルキルは、１つ又は複数の炭素が、それぞれ硫黄又は窒素により置換されたアルキル残基を指す。例には、エチルアミノエチル及びメチルチオプロピルが含まれる。
【００８２】
アシルは、カルボニル官能基を介して親構造に結合した直鎖状、分岐状、環状配置、飽和、不飽和、及び芳香族、並びにそれらの組合せの１、２、３、４、５、６、７、及び８個の炭素原子の基を指す。アシル残基の１つ又は複数の炭素は、親構造との結合点がカルボニルである限り、窒素、酸素、又は硫黄により置換されていてもよい。例には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、イソブチリル、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンゾイル、及びベンジルオキシカルボニルなどが含まれる。低級アシルは、１〜４個の炭素を含有する基を指す。
【００８３】
アリール及びへテロアリールは、置換基として、それぞれ芳香族環又は芳香族複素環を指す。へテロアリールは、Ｏ、Ｎ、又はＳから選択される１、２、又は３個のヘテロ原子を含有する。両方とも、単環式５員又は６員芳香族環又は芳香族複素環、二環式９員又は１０員芳香族環又は芳香族複素環、及び三環式１３員又は１４員芳香族環又は芳香族複素環を指す。芳香族６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、及び１４員炭素環には、例えば、ベンゼン、ナフタレン、インダン、テトラリン、及びフルオレンが含まれ、５、６、７、８、９、及び１０員芳香族複素環には、例えば、イミダゾール、ピリジン、インドール、チオフェン、ベンゾピラノン、チアゾール、フラン、ベンズイミダゾール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、ピリミジン、ピラジン、テトラゾール、及びピラゾールが含まれる。
【００８４】
アリールアルキルは、アリール環に結合したアルキル残基を意味する。例には、ベンジル及びフェネチルなどである。
【００８５】
置換アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリルなどは、各残基中の最大３個のＨ原子が、ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アシル、アルコキシアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル、へテロアリール、ベンゼンスルホニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロアルコキシ、カルボキシ、カルボアルコキシ（アルコキシカルボニルとも呼ばれる）、アルコキシカルボニルアミノ、カルボキサミド（アルキルアミノカルボニルとも呼ばれる）、シアノ、カルボニル、アセトキシ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、アルキルチオ、スルホキシド、スルホン、スルホニルアミノ、アシルアミノ、アミジノ、アリール、ベンジル、ヘテロシクリル、フェノキシ、ベンジルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシイミノ、アルコキシイミノ、オキサアルキル、アミノスルホニル、トリチル、アミジノ、グアニジノ、ウレイド、及びベンジルオキシにより置換されているアルキル、アリール、シクロアルキル、又はヘテロシクリルを指す。
【００８６】
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素を意味する。
【００８７】
置換基の幾つかの特徴付けでは、ある置換基は結合して環を形成することができることが記されている。別様の記載がない限り、そのような環は、種々の不飽和度（完全飽和から完全不飽和まで）を示していてもよく、ヘテロ原子を含んでいてもよく、低級アルキル又はアルコキシで置換されていてもよいことが意図されている。
【００８８】
用語「治療又は予防するための方法」は、列挙されている疾患、状態、又は症状に関連した徴候及び／又は効果の寛解、予防、又は軽減を意味する。本明細書で使用される場合、用語「予防する」は、急性発症を未然に防ぐか又は鈍化させるために、又は慢性症状の場合には、症状の発生可能性又は重症度を減少させるために、薬剤を投与することを指す。当医学技術（本方法の特許請求の範囲が関する）における当業者は、用語「予防」が絶対用語ではないことを認識している。当医学技術では、この用語は、症状の発生可能性又は重症度を実質的に減少させるための予防的な薬物投与を指すと理解されており、出願人らの特許請求の範囲で意図されている意味はこれである。本明細書で使用される場合、患者の「治療」に関しては、予防を含むことが意図されている。
【００８９】
本出願の全体にわたって、種々の出版物が引用されている。本明細書で言及されている特許、特許出願、特許広報、及び他の出版物の各々は、これによりその全体が参照により組み込まれる。
【００９０】
用語「哺乳類」は、その辞書的な意味で使用される。用語「哺乳類」には、例えば、マウス、ハムスター、ラット、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、及びウマ、サル、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、及びヒトを含む霊長類が含まれる。
【００９１】
本明細書に記載の化合物は、１つ又は複数の不斉中心を含有してもよく、したがってエナンチオマー、ジアステレオマー、及び他の立体異性体が生じる場合ある。各キラル中心は、絶対立体化学の点で（Ｒ）−又は（Ｓ）−として定義することができる。本発明は、ラセミ形態及び光学的に純粋な形態を含むそのような考え得る全ての異性体並びにそれらの混合物を含むことが意図されている。光学的に活性な（Ｒ）−及び（Ｓ）−、（−）−及び（＋）−、又は（Ｄ）−及び（Ｌ）−異性体は、キラルシントン又はキラル試薬を使用して調製してもよく、又は従来技術を使用して分離してもよい。
【００９２】
本明細書で使用される場合、当業者であれば理解するように、「化合物」という記述は、その化合物の塩、溶媒和物、及び挿入錯体（ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｘ）、並びにあらゆる立体異性体又はその化合物のそのようなあらゆる形態の任意の比率の混合物を含むことが意図される。したがって、本発明の幾つかの実施形態によると、医薬組成物、治療法、及び化合物それ自体での状況を含む本明細書に記載の化合物は、塩の形態で提供される。代表的な好適な塩には、以下の酸と形成される塩が含まれる：塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、ギ酸、パルミチン酸、安息香酸、グルタル酸、コール酸、パモ酸、ムチン酸、Ｄ−グルタミン酸、ｄ−ショウノウ酸、グリコール酸、フタル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、及びケイ皮酸など。
【００９３】
本明細書で使用されるラセミ化合物、アンビスケールミック（ａｍｂｉｓｃａｌｅｍｉｃ）化合物、スケールミック（ｓｃａｌｅｍｉｃ）化合物、又はエナンチオ的に純粋な化合物の図的表現は、Ｍａｅｈｒ Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．６２巻、１１４〜１２０頁（１９８５年）か引用されている：くさび型の実線及び破線は、キラル要素の絶対配置を示すために使用され、波線は、それが表す結合が生成し得るあらゆる立体化学的関係の否定を示し、実線又は破線の太線は、示されている相対配置を示すがラセミ特徴を示す幾何学的な記述子であり、くさび型の輪郭及び点線又は破線は、絶対配置が未定のエナンチオ的に純粋な化合物を示す。したがって、例えば、式Ｗは、その対の純粋なエナンチオマーを両方とも包含することが意図されており、
【００９４】
【化４３】
Ｗは、
【００９５】
【化４４】
及び
【００９６】
【化４５】
を意味し、
その一方で、式Ｘは、４つのジアステレオマーを表すことが意図されており、
【００９７】
【化４６】
Ｘは、
【００９８】
【化４７】
【００９９】
【化４８】
【０１００】
【化４９】
及び
【０１０１】
【化５０】
を意味する。
【０１０２】
用語「エナンチオマー過剰率」は、当技術分野で周知であり、ａｂのａ＋ｂへの分離に関しては以下のように定義される：
【０１０３】
【数１】
用語「エナンチオマー過剰率」は、両方が同じ現象の尺度であるという点で、より古い用語「光学純度」と関連している。ｅｅの値は、０〜１００の数値となるはずであり、ゼロはラセミであり、１００は純粋な単一エナンチオマーである。過去には９８％の光学純度と呼ばれていた場合がある化合物は、現在ではより正確に９６％のｅｅと記述されており、言い換えれば、９０％のｅｅは、目的の物質中に一方のエナンチオマーが９５％存在し、他方が５％存在することを反映する。
【０１０４】
別様の指示がない限り、環の一部ではない本明細書に見られるあらゆる炭素間二重結合の配置は、便宜的に選択されているに過ぎず、特定の配置を指定することは意図されておらず、したがって、別様の指示がない限り、適宜的にＥとして本明細書に示されている非環式炭素間二重結合は、Ｚ、Ｅ、又は任意の割合の２つの混合物であり得る。同様に、全ての互変異性体が含まれることが意図されている。
【０１０５】
Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｈ、Ｔｆ、Ｔｓ、及びＭｓという略語は、それぞれメチル、エチル、フェニル、トリフルオロメタンスルホニル、トルエンスルホニル、及びメタンスルホニルを表す。以下の略語及び用語は、全体にわたって、指示されている意味を有する：
ａｂｓ＝絶対
Ａｃ＝アセチル ＡＣＮ＝アセトニトリル Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル Ｂｕ＝ブチル
ｃ−＝シクロ ＣＤＩ＝カルボジイミド ｃｏｎｃ．＝濃縮
ＤＣＭ＝ジクロロメタン＝塩化メチレン＝ＣＨ２Ｃｌ２ ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミド ＤＭＡＰ＝４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン Ｅｔ＝エチル ＦＣＣ＝フラッシュカラムクロマトグラフィー ＧＣ＝ガスクロマトグラフィー ＨＯＢｔ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール ＨＰＬＣ＝高速（又は高圧）液体クロマトグラフィー ｉ−＝イソ−
ＩＰＡ＝イソプロピルアルコール Ｍｅ＝メチル Ｐｈ又はκ＝フェニル
ｐｐｔ．＝沈殿物
Ｐｒ＝プロピル
ｒｔ＝室温 ｓａｔ’ｄ＝飽和
ｓ−＝二級
ｔ−＝三級
ＴＥＡ＝トリエチルアミン ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー ＴＭＳ＝トリメチルシリル ｔｏｓｙｌ＝ｐ−トルエンスルホニル
【０１０６】
有機化学者（つまり、当業者）により使用される略語の総覧は、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙの各巻の第１号に示されている。典型的には「略語の標準一覧表」と題する表に示されている一覧表は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１０７】
式Ｉの化合物は、Ｍ１ ｍＡＣｈＲ調節因子であり、つまり、それらはＭ１ ｍＡＣｈＲに結合し、この受容体のアゴニスト又はアンタゴニストのいずれかとして作用する。幾つかの場合では、調節はアロステリックであり、幾つかの場合ではオルソステリックであり、幾つかの場合では、その両方である。
【０１０８】
式Ｉの化合物は、化学薬品としてそのまま投与することが可能である場合があるが、医薬組成物（本明細書では製剤とも呼ばれる）の一部として提供することが望ましいことが多いだろう。本発明の実施形態によると、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を、その１つ又は複数の薬学的担体及び随意に１つ又は複数の他の治療成分を一緒に含む医薬組成物が提供される。担体（複数可）は、製剤の他の成分と適合し、その受容者に有害でないという意味において「許容」されなければならない。
【０１０９】
さらに、上述のように、用語「化合物」は、その塩も同様に含み、したがって「化合物」を記述する独立請求項は、その塩も同様に参照すると理解されるだろう。にもかかわらず、独立請求項において「化合物又はその薬学的に許容される塩」が参照されている場合、そのような化合物を参照するその独立請求項に依存する請求項は、たとえ従属請求項においてその塩が明示的に参照されていなくとも、その化合物の薬学的に許容される塩も含むと理解されるだろう。
【０１１０】
製剤には、経口、非経口（皮下、皮内、筋肉内、静脈内、及び関節内を含む）、直腸内、及び局所的（皮膚、頬側、舌下、及び眼内）投与に好適なものが含まれる。最も好適な経路は、受容者の症状及び障害に依存する場合がある。製剤は、単位剤形で便利に提供することができ、薬学の技術分野で周知の方法のいずれかにより調製することができる。そのような方法は、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物（「活性成分」）を、１つ又は複数の副次的成分を構成する担体と接触させるステップを含む。一般的には、製剤は、液体担体又は微粉化された固体担体又はその両方を活性成分と均一に及び密接に接触させ、その後必要に応じて生成物を成形して所望の製剤にすることにより調製される。
【０１１１】
経口投与に好適な製剤は、各々が所定量の活性成分を含有するカプセル剤、カシェ剤、又は錠剤などの個別単位として、散剤又は果粒剤として、水性の液体又は非水性の液体中の液剤又は懸濁剤として、又は水中油型液体乳剤又は油中水型液体乳剤として提供することができる。活性成分は、ボーラス、舐剤、又は軟膏として提供することもできる。
【０１１２】
錠剤は、随意に１つ又は複数の副次的成分と共に圧縮又は成型することにより製作することができる。圧縮錠剤は、散剤又は果粒剤などの易流動性形態の活性成分を、随意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、潤滑剤、界面活性剤、又は分散剤と混合して、好適な機械で圧縮することにより調製することができる。成型錠剤は、不活性液体希釈剤で加湿された粉末状化合物の混合物を好適な機械で成型することにより製作することができる。錠剤は、随意に被膜又は刻溝することができ、その中の活性成分の徐放、遅延放出、又は放出制御を提供するように製剤することができる。医薬組成物は、「薬学的に許容される不活性担体」を含んでいてもよく、この表現は、１つ又は複数の不活性賦形剤を含むことが意図されており、それらには、デンプン、ポリオール、造粒剤、微結晶性セルロース、希釈剤、潤滑剤、結合剤、及び崩壊剤などが含まれる。所望の場合、開示されている組成物の錠剤用量は、標準的な水性又は非水性技術により被膜することができる。「薬学的に許容される担体」は、放出抑制手段も包含する。
【０１１３】
非経口投与用の製剤には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、及び製剤を対象受容者の血液と等張性にする溶質を含有していてもよい水性及び非水性の無菌注射溶液が含まれる。非経口投与用の製剤には、懸濁化剤及び増粘剤を含んでいてもよい水性及び非水性の無菌懸濁剤も含まれる。製剤は、複数用量容器、例えば密封アンプル及びバイアルの単位用量で提供してもよく、使用の直前に無菌の液体担体、例えば生理食塩水又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）などを添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保管することができる。即時調合注射溶液及び懸濁剤は、以前に記述されている種類の無菌散剤、果粒剤、及び錠剤から調製することができる。
【０１１４】
直腸内投与用の製剤は、カカオ脂又はポリエチレングリコールなどの通常の担体と共に坐剤として提供することができる。
【０１１５】
口内、例えば頬側又は舌下の局所投与用の製剤には、スクロース及びアカシア又はトラガントなどの香味料の基礎原料中に活性成分を含む舐剤、並びにゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアカシアなどの基礎原料中に活性成分を含む香錠が含まれる。
【０１１６】
医薬組成物は、随意に他の治療成分、凝固阻止剤、保存剤、甘味料、着色剤、香味料、乾燥剤、可塑剤、及び染料なども含むことができる。任意のそのような随意成分は、式Ｉの化合物との適合性をもち、製剤の安定性を保証しなければならない。組成物は、必要に応じて、例えば、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、ラフィノース、マルチトール、メレチトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、デンプン、キシリトール、マンニトール、及びミオイノシトールなど、並びにそれらの水和物、並びにアミノ酸、例えばアラニン、グリシン、及びベタイン、並びにペプチド及びタンパク質、例えば卵白を含む他の添加物を含有していてもよい。
【０１１７】
薬学的に許容される担体及び薬学的に許容される不活性担体及び前述の追加的成分として使用するための賦形剤の例には、これらに限定されないが、結合剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、抗菌剤剤、及び被膜剤が含まれる。
【０１１８】
本発明の製剤は、目的とする製剤のタイプを考慮して、特に上記で言及した成分に加えて当技術分野で従来使用されている他の作用剤を含んでいてもよく、例えば、経口投与に好適な製剤は、香味料を含んでいてもよいことが理解されるべきである。
【０１１９】
成人の用量範囲は、一般的に経口で０．００５ｍｇ〜１０ｇ／日である。錠剤又は個別単位で提供される他の提供形態は、そのような用量で又は複数のそのような用量で有効である量の式Ｉの化合物を便利に含有していてもよく、例えば単位は、５ｍｇ〜５００ｍｇ、通常は約１０ｍｇ〜２００ｍｇを含有する。患者に投与する化合物の正確な量は、担当医師の責任となるだろう。しかしながら、使用される用量は、患者の年齢及び性別、治療する障害の詳細及びその重症度を含む多数の因子に依存するだろう。
【０１２０】
１用量単位（例えば、経口用量単位）は、例えば、１〜３０ｍｇ、１〜４０ｍｇ、１〜１００ｍｇ、１〜３００ｍｇ、１〜５００ｍｇ、２〜５００ｍｇ、３〜１００ｍｇ、５〜２０ｍｇ、５〜１００ｍｇ（例えば、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、１０ｍｇ、１１ｍｇ、１２ｍｇ、１３ｍｇ、１４ｍｇ、１５ｍｇ、１６ｍｇ、１７ｍｇ、１８ｍｇ、１９ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ）の本明細書に記載の化合物を含んでいてもよい。
【０１２１】
医薬組成物及びそれらの製剤に関する追加情報については、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、２０００年を参照されたい。
【０１２２】
作用剤は、例えば、静脈注射、筋肉内注射、皮下注射、腹膜腔内注射により、局所的、舌下、関節内（関節に）、皮内、バッカル、眼部的に（眼内を含む）、鼻腔内（カニューレの使用を含む）、又は他の経路より投与することができる。作用剤は、経口で、例えば、所定量の活性成分を含有する錠剤又はカシェ剤、ゲル剤、小丸剤、軟膏、シロップ剤、ボーラス剤、舐剤、スラリー剤、カプセル剤、散剤、果粒剤として、水性液体又は非水性液体中の液剤又は懸濁剤として、水中油型乳剤又は油中水型乳剤として、ミセル製剤（例えば、国際公開第９７／１１６８２号を参照）により、リポソーム製剤（例えば、欧州特許第７３６２９９号、国際公開第９９／５９５５０号、及び国際公開第９７／１３５００号を参照）により、国際公開第０３／０９４８８６号に記載の製剤、又は幾つかの他の形態で投与することができる。作用剤は、経皮的に（つまり、レザバー型（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ−ｔｙｐｅ）又はマトリクス型パッチ、極微針、熱穿孔法、皮下針、イオン導入法、電気穿孔法、超音波又は他の形態の超音波導入法、ジェット式注射、又は上記方法の任意の組合せで）投与することもできる（Ｐｒａｕｓｎｉｔｚら、２００４年 Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ３巻：１１５頁）。作用剤は、局所的に投与することができる。作用剤は、ステントに被膜することができる。作用剤は、米国特許出願公開第２００２００６１３３６号に記載のヒドロゲル粒子製剤を使用し、高速経皮粒子注射技術を使用して投与することができる。さらなる粒子製剤は、国際公開第００／４５７９２号、国際公開第００／５３１６０号、及び国際公開第０２／１９９８９号に記載されている。硬膏及び吸収促進剤ジメチルイソソルビドを含有する経皮製剤の一例は、国際公開第８９／０４１７９号に見出すことができる。国際公開第９６／１１７０５号には、経皮投与に好適な製剤が提供されている。作用剤は、坐剤の形態で、又は他の膣的若しくは直腸的手段により投与することができる。作用剤は、国際公開第９０／０７９２３号に記載の膜貫通型製剤で投与することができる。作用剤は、米国特許第６，４８５，７０６号に記載の脱水粒子により、非侵襲的に投与することができる。作用剤は、国際公開第０２／４９６２１号に記載の腸溶薬物製剤で投与することができる。作用剤は、米国特許第５，１７９，０７９号に記載の製剤を使用して、鼻腔内投与することができる。非経口注射に好適な製剤は、国際公開第００／６２７５９号に記載されている。作用剤は、米国特許出願公開第２００３０２０６９３９号及び国際公開第００／０６１０８号に記載のカゼイン製剤を使用して投与することができる。作用剤は、米国特許出願公開第２００２００３４５３６号に記載の粒子性製剤を使用して投与することができる。
【０１２３】
作用剤は、単独で又は他の好適な成分と組み合わせて、気管内注入（注射器により溶液を肺に送達すること）、リポソームの気管内送達、通気法（注射器又は任意の他の類似デバイスにより粉末製剤を肺に投与すること）、及びエアゾール吸入を含むが、これらに限定されない幾つかの技術を使用して、肺経路により投与することができる。エアゾール剤（例えば、ジェット噴霧器又は超音波噴霧器、計量式吸入器（ＭＤＩ）、及び乾燥粉吸入器（ＤＰＩ））も、鼻腔内適用に使用することができる。エアロゾル製剤は、ガス媒体中の固形物質及び液体液滴の安定的分散剤又は懸濁剤であり、ヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ、つまりＨＦＡ−１３４ａ及びＨＦＡ−２２７、又はそれらの混合物）、ジクロロジフルオロメタン（又は噴射剤１１、１２、及び／又は１１４の混合物などの他のクロロフルオロカーボン噴射剤）、プロパン、及び窒素などの加圧された許容される噴射剤
に入れることができる。肺用製剤は、脂肪酸及びサッカリドなどの透過促進剤、キレート剤、酵素阻害剤（例えば、プロテアーゼ阻害剤）、アジュバント（例えば、グリココラート、サーファクチン、スパン８５、及びナファモスタット）、保存剤（例えば、塩化ベンザルコニウム又はクロロブタノール）、及びエタノール（通常は最大５重量％だが、２０重量％まで可能）を含んでいてもよい。エタノールは、調量弁の機能を向上させることができ、幾つかの場合には分散の安定性を向上させることもできるため、エアゾール組成物に一般的に含まれている。肺用製剤は、胆汁酸塩、及び米国特許第６，５２４，５５７号及びその中の参考文献に記載されているものを含むがそれらに限定されない界面活性剤を含む場合もある。米国特許第６，５２４，５５７号に記載の界面活性剤、例えば、Ｃ８〜Ｃ１６脂肪酸塩、胆汁酸塩、リン脂質、又はアルキルサッカリドは、それらの幾つかも製剤中の化合物の吸収を増強することが報告されているという点で有利である。適切な担体と混合された治療上有効量の活性化合物を含み、乾燥粉末吸入器で使用するのに適した乾燥粉末製剤も、本発明に好適である。本発明の乾燥粉末製剤に添加することができる吸収促進剤には、米国特許第６，６３２，４５６号に記載されているものが含まれる。国際公開第０２／０８０８８４号には、散剤の表面を改質するための新しい方法が記載されている。エアロゾル製剤には、米国特許第５，２３０，８８４号、米国特許第５，２９２，４９９号、国際公開第０１７／８６９４号、国際公開第０１／７８６９６号、米国特許出願第２００３０１９４３７号、米国特許出願公開第２００３０１６５４３６号、及び国際公開第９６／４００８９号（これは植物油を含んでいる）が含まれていてもよい。吸入に好適な徐放性製剤は、米国特許出願公開第２００１００３６４８１号Ａ１、第２００３０２３２０１９号Ａ１、及び米国特許出願公開第２００４００１８２４３号Ａ１、並びに国際公開第０１／１３８９１号、国際公開第０２／０６７９０２号、国際公開第０３／０７２０８０号、及び国際公開第０３／０７９８８５号にも記載されている。微粒子を含有する肺用製剤は、国際公開第０３／０１５７５０号、米国特許出願公開第２００３０００８０１３号、及び国際公開第００／００１７６号に記載されている。安定したガラス状態粉末を含有する肺用製剤は、米国特許出願公開第２００２０１４１９４５号及び米国特許第６，３０９，６７１号に記載されている。他のエアロゾル製剤は、欧州特許出願公開第１３３８２７２号Ａ１、国際公開第９０／０９７８１号、米国特許第５，３４８，７３０号、米国特許第６，４３６，３６７号、国際公開第９１／０４０１１号、及び米国特許第６，２９４，１５３号に記載されており、米国特許第６，２９０，９８７号には、エアロゾルまたは他の手段により投与することができるリポソームの基づく製剤が記載されている。吸入用の粉末製剤は、米国特許出願公開第２００３００５３９６０号及び国際公開第０１／６０３４１号に記載されている。作用剤は、米国特許出願公開第２００１００３８８２４号に記載されているように、鼻腔内投与することができる。
【０１２４】
緩衝食塩水及び類似媒体中の薬剤溶液は、噴霧器中でエアロゾルを生成するために一般的に使用されている。単純な噴霧器は、ベルヌーイの原理で作動し、空気又は酸素の流動を使用して噴霧粒子を生成する。より複雑な噴霧器は、超音波を使用して噴霧粒子を生成する。両タイプは、当技術分野で周知であり、Ｓｐｒｏｗｌｓ’ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｙ及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙなどの薬学の標準的教科書に記載されている。エアゾール生成用の他のデバイスは、圧縮ガス、通常はハイドロフルオロカーボン及びクロロフルオロカーボンを使用し、これらは加圧容器中で薬剤及び任意の必要とされる賦形剤と混合されており、これらデバイスは、同様にＳｐｒｏｗｌｓ及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎなどの標準的教科書に記載されている。
【０１２５】
本発明の幾つかの実施形態によると、式Ｉの化合物は、他の活性作用剤と組合せて使用することができることも認識されるだろう。併用療法は、それらの各々が別々に製剤及び投与される２つ以上の作用剤を投与することにより、又は単一製剤中の２つ以上の作用剤を投与することにより達成することができる。他の組合せも併用療法により包含される。例えば、２つの作用剤を一緒に製剤し、それを、第３の作用剤を含有する別々の製剤と共に投与してもよい。併用療法における２つ以上の作用剤は、同時に投与してもよいが、そうである必要はない。例えば、第１の作用剤（又は作用剤の組合せ）の投与は、第２の作用剤（又は作用剤の組合せ）を投与する数分、数時間、数日、又は数週間前であってもよい。したがって、２つ以上の作用剤は、互いに数分以内に、又は互いに１、２、３、６、９、１２、１５、１８、若しくは２４時間以内に、又は互いに１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４日間以内に、又は互いに２、３、４、５、６、７、８、９、若しくは１０週間以内に投与してもよい。幾つか場合では、さらにより長い間隔が可能である。多くの場合、併用療法で使用される２つ以上の作用剤は、患者の体内に同時に存在することが望ましいが、そうである必要はない。併用療法は、組合せて使用される１つ又は複数の作用剤を２回以上投与することを含んでいてもよい。例えば、作用剤Ｘ及び作用剤Ｙが組合せて使用される場合、それらは、任意の組合せで順次、例えばＸ−Ｙ−Ｘ、Ｘ−Ｘ−Ｙ、Ｙ−Ｘ−Ｙ、Ｙ−Ｙ−Ｘ、Ｘ−Ｘ−Ｙ−Ｙなど順序で、１回又は複数回投与することができる。
【０１２６】
表１には、本発明の実施形態の代表的化合物が列挙されている。
【０１２７】
本発明の実施形態による化合物をＭ１ムスカリン受容体調節因子として使用して、コリン作動性機能の障害に関連する哺乳類疾患又はコリン作動性機能に不均衡がある疾患、又は以下のものからなる群からのアセチルコリン受容体の活性障害を有する疾患を治療することができることが理解されるだろう：アルツハイマー病型の老人性認知症；アルツハイマー病（ＡＤ）；レビー小体認知症；アルツハイマー病及びパーキンソン病の併発；多発梗塞性認知症（ＭＩＤ）；前頭側頭型認知症；血管性認知症；脳卒中／虚血；脳卒中／虚血／頭部損傷に伴うＭＩＤ；ＭＩＤ及びＡＤの併発；ヒト頭部損傷；加齢性記憶障害；軽度認知障害（ＭＣＩ）；ＡＤに至るＭＣＩ；認知機能障害（失念、急性錯乱障害、注意欠陥障害、注意力及び集中力障害を含む）；幻覚−妄想性状態；情緒及び注意障害；睡眠障害；術後せん妄；三環系抗うつ薬の有害効果；統合失調症及びパーキンソン病の治療に使用される特定の薬物の有害効果；口内乾燥、失名辞、記憶喪失、及び／又は錯乱；精神病；統合失調症、ＡＤとの統合失調症並存症、遅発性統合失調症、パラフレニー、統合失調症様障害；不安症；双極性障害；躁病；気分安定化（ｍｏｏｄ ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）；特定の神経膠腫除去後の認知障害；遅発性ジスキネジー；酸素療法中の酸化ストレス；失語症；脳炎後の記憶喪失症候群；ＡＩＤＳ認知症；狼瘡、多発性硬化症、シェーグレン症候群、慢性疲労症候群、及び線維筋痛を含む自己免疫疾患における記憶障害；非定型うつ病又は統合失調症における記憶障害；疼痛、リウマチ、関節炎、及び末期疾患；眼球乾燥症、腟乾燥症、皮膚乾燥症；免疫機能障害；過食症及び食欲不振を含む、ニューロクリン障害（ｎｅｕｒｏｃｒｉｎｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）及び食物摂取の調節異常；肥満；先天性オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症；オリーブ橋小脳萎縮；アルコール離脱症状；離脱症状及び補充療法を含む物質乱用；ハンチントン舞踏病；進行性核上性麻痺；ピック病；フリードライヒ運動失調症；ジルドラツレット病；ダウン症候群；緑内障；老視；炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、下痢、便秘、胃酸分泌、及び潰瘍などの胃腸運動及び機能の機能不全を含む自律神経障害；切迫尿失禁、喘息、ＣＯＰＤ。本発明の実施形態による化合物は、そのような治療のための薬剤の調製に使用することもできる。
【０１２８】
同様に、本発明の実施形態による化合物Ｍ１ムスカリン受容体調節因子として使用して、脳、神経系、心臓血管系、免疫系、ニューロクリン系、消化器系、又は内分泌腺及び外分泌腺、眼、角膜、肺、前立腺、又はコリン作動性機能がムスカリン受容体サブタイプにより媒介される他の器官のうちの１つ又は複数の機能不全による中枢神経系又は末梢神経系の疾患状態を予防又は治療することができ、前記機能不全は、以下のものを含むことが認識されるだろう：脳アミロイド媒介性障害；グリコゲン合成酵素キナーゼ（ＧＳＫ３ｐ）媒介性障害；タウタンパク質過剰リン酸化媒介性損傷、機能不全、又は疾患；ＣＮＳ及びＰＮＳ高コレステロール血症及び／又は高脂血症媒介性損傷、機能不全、又は疾患；Ｗｎｔ媒介性シグナル伝達異常；神経可塑性の障害；高血糖症；糖尿病；内因性成長因子媒介性疾患、又はさらなるリスク因子の組合せ；又はアポリポタンパク質Ｅが関与する疾患状態；又はアルツハイマー病型の老人性認知症、アルツハイマー病（ＡＤ）、ＡＤを発症するリスクにある患者におけるＡＤ症状発症の遅延、レビー小体認知症、大脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、大脳アミロイドーシス、前頭側頭型認知症、血管性認知症、高脂血症、高コレステロール血症、多発梗塞性認知症（ＭＩＤ）、脳卒中虚血、脳卒中／虚血／頭部損傷に伴うＭＩＤ、ＭＩＤ及びアルツハイマー病の併発、ヒト頭部損傷、加齢性記憶障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、ＡＤに至るＭＣＩ、双極性障害、躁病、統合失調症、非情動性統合失調症（ｎｏｎａｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｙｃｈｏｚｏｐｈｒｅｎｉａ）、パラフレニー、免疫機能障害、ニューロクリン障害、並びに過食症及び食欲不振、体重管理、肥満、炎症を含む食物摂取の調節異常を含むコリン作動性機能不全の関与が示唆されている障害。本発明の実施形態による化合物は、そのような治療のための薬剤の調製に使用することもできる。
【０１２９】
合成方法 一般的に、式Ｉの化合物は、容易に入手可能な出発物質、試薬、及び従来の合成手順を使用して、例えば下記に記述されているような一般反応スキームに例示されている方法により、又はその改変方法により調製することができる。それら反応には、それら自体が公知であるが、本明細書では言及されていない変法を使用することも可能である。
【０１３０】
式Ｉの化合物を得るためのプロセスは下記に示されている。式Ｉの他の化合物は、その合成が本明細書で例示されている化合物と相似した様式で調製することができる。下記の手順には、そのような方法が例示されている。さらに、本明細書に示されている合成により、特定の立体化学を有するエナンチオマーの調製がもたらされる場合があるが、あらゆる立体異性形態の式Ｉの化合物が本発明の範囲内に含まれ、本明細書に示されているもの以外のあらゆる立体異性形態の式Ｉの化合物の調製は、化学分野の当業者であれば、本明細書に示されている手順に基づき明白だろう。
【０１３１】
式Ｉの化合物は、Ｒ５の代りにＨが存在する対応するスピロ化合物から、下記のスキーム１に例示されているように合成することができる：
スキーム１
【０１３２】
【化５１】
【０１３３】
アミンと３−インドールカルボキシル酸との結合は、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、又はＤＣＣ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の組合せのいずれかによる酸部分の活性化により進行させることができる。アミンと３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ安息香酸との結合は、ＤＣＣ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の組合せによる酸部分の活性化により進行させることができる。対応する置換アミンを産出するためのアミンとバルプロイルクロリド又はｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリドとの結合は、塩基（トリエチルアミン又は水素化ナトリウム）の存在下で達成することができる。
【０１３４】
次いで、前駆物質アミン化合物は、下記でより詳しく説明されているように調製することができる。したがって、例えば、２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンは、乾燥ジクロロメタン中で４−アミノメチル−１−メチル−ピペリジン−４−オールをアセトアルデヒドと反応させることにより得ることができる。２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカンは、還流下で１−アミノ−２−プロパノールを１−メチル−４−ピペリドンと反応させることにより得ることができる。１’，４−ジメチルスピロ［３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン］は、最初にＴｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順により、１−メチル−４−ピペリドンから２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを調製し、その後、このオキシムをＲｅｄ−Ａｌ（水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム）で還元し、その後塩基処理して、１’，４−ジメチルスピロ［３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン］を産出することにより得ることができる。２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンは、最初にＴｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順により、１−メチル−４−ピペリドンから２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを調製し、その後このオキシムを水素化アルミニウムリチウム／塩化アルミニウムで還元することにより得ることができる。その後、式Ｉの化合物は、適切な結合反応によりこれらアミンから調製することができる。
【０１３５】
式Ｉの化合物を調製する際には、５員環の形成、環置換、環飽和／不飽和度の変更、並びに塩及び塩基の相互変換などのための方法など、有機化学者に知られている方法を使用することができる。これら合成方法では、出発物質は、キラル中心を含有していてもよく、ラセミ出発物質が使用される場合、その結果生じる生成物は、一般的にＲ及びＳエナンチオマーの混合物である。或いは、出発物質のキラル異性体を使用してもよく、使用する反応プロトコールがこの出発物質をラセミ化しない場合、キラル生成物が得られる。そのような反応プロトコールでは、合成中にキラル中心の反転を伴う場合がある。ラセミ体又はジアステレオマー混合物が得られる場合、異なる立体異性体は、当技術分野で公知である方法により互いに分離することができる。或いは、所与の異性体は、立体特異性合成又は不斉合成により得ることができる。したがって、本発明のある化合物を調製するための例示的な方法が記述されることになるが、当業者であれば理解するように、他の方法を応用して本化合物を調製することもできることが認識されるだろう。
【０１３６】
実施例
本発明の実施形態による新化合物の調製を容易にするために、幾つかのリジッドな二環スピロ構造を合成した：
【０１３７】
２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンは、２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−２−エンを、メタノール中のシアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより得た。
【０１３８】
２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンは、４−アミノメチル−１−メチル−ピペリジン−４−オールを、乾燥ジクロロメタン中のアセトアルデヒドと反応させることにより得た。
【０１３９】
２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカンは、還流下で１−アミノ−２−プロパノールを１−メチル−４−ピペリドンと反応させることにより得た。
【０１４０】
１’，４−ジメチルスピロ［３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン］を、数ステップで得た。最初に、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順に従って、１−メチル−４−ピペリドンから、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て調製した。このオキシムをＲｅｄ−Ａｌで還元し、その後塩基処理することにより、表題化合物を得た。
【０１４１】
２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンを、数ステップで得た。最初に、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順に従って、１−メチル−４−ピペリドンから、２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て調製した。このオキシムをＬｉＡｌＨ４／ＡｌＣｌ３で還元することにより、表題化合物を得た。
【０１４２】
２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンを、数ステップで得た。最初に、２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムを、１−メチル−４−ピペリドンから、２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンを経て調製した。このオキシムをＲｅｄ−Ａｌで還元し、その後塩基処理することにより、表題化合物を得た。
【０１４３】
別様の記載がない限り、試薬及び溶媒は、商業的供給業者から受領したままで使用した。プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、それぞれ３００又は５００ＭＨｚのＢｒｕｋｅｒ社製Ａｖａｎｃｅ−３００型及びＢｒｕｋｅｒ社製５００型分光計で得た。スペクトルは、ｐｐｍ（δ）で報告されており、及び結合定数Ｊはヘルツで報告されている。テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を、内部標準物質として使用した。以下の略語をＮＭＲデータの報告に使用する：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｂｒ＝ブロード。１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ社製Ａｖａｎｃｅ−３００型及びＢｒｕｋｅｒ社製５００型分光計で記録した。質量スペクトルは、ＵＧ７０ ＵＳＥＱ質量分析計を使用して収集した。ＧＣ−ＭＳスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ社製Ｓａｔｕｒａｎ ２０００型ＧＣＭＳ／ＭＳ分光計で記録した。赤外（ＩＲ）スペクトルは、Ｓｍａｒｔ Ｍｕｌｔｉ−Ｂｏｕｎｃｅ ＺｎＳｅ ＨＡＴＲを備えたＮｉｃｏｌｅｔ社製３８０型ＦＴ−ＩＲ分光光度計で記録した。溶媒及び試薬は全て分析用等級だった。本発明者らのＮＣＥの化学的純度の解析は、ＨＰＬＣ ＦＩＮＮＩＧＡＮ Ｓｕｒｖｅｙｏｒで記録した。
【０１４４】
実施例１：２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカンの合成：
【０１４５】
【化５２】
室温のメタノール（１５０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−２−エンの撹拌溶液（１０．４ｍｌ、６０ｍｍｏｌ）に、ブロモクレゾールグリーン（５ｍｇ）を添加し、溶液は青色になった。色が黄色に変わるまで、４ＮのＨＣｌ／ＭｅＯＨを撹拌溶液に添加した。その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３．９ｇｒ、６２ｍｍｏｌ）を、一度に添加し、その結果生じた混合物を２時間室温で撹拌した。この期間中、反応色が緑に変化するたびに、４ＮのＨＣｌ／ＭｅＯＨをさらに添加して溶液色を黄色に維持した。この期間の終わりに、溶媒を減圧下で蒸発させて青緑色油状物を得た。ジクロロメタン（１００ｍｌ）を残留物に添加し、混合物を２ＮのＮａＯＨ（５０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（１００ｍｌ）で抽出した。有機相を混合し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、ほとんど無色の油状物として表題化合物を得た（２．１８ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ４．６１（ｑ、Ｊ＝６．１８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１０（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．７４（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．２７〜２．１９（ｍ、１Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１０（ｍ、２Ｈ）、１．８５〜１．７０（ｍ、５Ｈ）、１．４６（ｄ、Ｊ＝６．１８Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）ｐｐｍ。
【０１４６】
実施例２：２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカンの合成
【０１４７】
【化５３】
ジクロロメタン（１５ｍｌ）中４−アミノメチル−１−メチル−ピペリジン−４−オール（２．１２７ｇ、１４．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、無水硫酸マグネシウム（２．９ｇ）を添加した。その結果生じた混合物を０℃に冷却し、新しく蒸留したアセトアルデヒド（８３５μｌ、１４．７８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で６時間撹拌した後、混合物をろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、ほとんど無色の液体として表題化合物を得た（２．１６ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ４．６０（ｑ、Ｊ＝５．４０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．０１（ｄ、Ｊ＝１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．７６（ｄ、Ｊ＝１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＨ）、２．５５〜２．３１（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２Ｎ）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７７〜１．５８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２ＣＯ）、１．３６（ｄ、Ｊ＝５．４０Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８７．５７（ＣＨ）、５７．１９（ＣＨ２）、５３．１４（Ｃ）、５２．９６（ＣＨ２）、４６．１５（ＣＨ３）、３７．２８（ＣＨ２）、３５．７３（ＣＨ２）、２０．３２（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１４８】
実施例３：２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカンの合成
【０１４９】
【化５４】
１−アミノ−２−プロパノール（９．２ｍｌ、１．２ｍｍｏｌ）及び１−メチル−４−ピペリドン（１１．５ｍｌ、１．０ｍｍｏｌ）の混合物を、還流下で２時間加熱し、室温で一晩そのままにしておいた。反応混合物を、減圧下で蒸留した（約１５ｍｍＨｇ）。表題化合物を８２〜９５℃で収集した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ４．０２（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．２５（ｄｄ、Ｊ＝１１．９、６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨ）、２．６８（ｄｄ、Ｊ＝１１．９、６．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨ）、２．４〜２．６（ｍ、４Ｈ−ピペリジン）、２．１（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．６５〜１．８１（ｍ、４Ｈ−ピペリジン）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）ｐｐｍ。
【０１５０】
実施例４：１’，４−ジメチル−スピロ−（３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン）の合成：
【０１５１】
【化５５】
Ｒｅｄ−Ａｌ（トルエン中６５％の溶液、５．４ｍｌ）を、乾燥ＴＨＦ（３９ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（１．５ｇｒ、７．６ｍｍｏｌ）の溶液に滴加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を冷却し（氷−水）、水（１．６ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ水溶液（１．６ｍｌ）、及び水（４．６ｍｌ）を連続して添加することにより分解した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（４０ｍｌ）を添加し、固形物をセライトでろ過した。ＴＨＦろ過液を減圧下で濃縮した。残留油状物をジクロロメタンに溶解し、乾燥し、蒸発させた。残留物のフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ６０／４０／１）により、表題アミンを得た（明らかに２つの異性体として）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ／ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ４．１３及び４．０６（２つのｑ、Ｊ＝６．７及びＪ＝６．２Ｈｚ、１Ｈ、２つのＯＣＨ）、２．５４〜２．３３（ｍ、６Ｈ）、２．２７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７７〜１．６５（ｍ、４Ｈ）、１．２４及び１．２０（２つのｄ、Ｊ＝６．７及びＪ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；Ｃ１０Ｈ１８Ｎ２ＯのＧＣ−ＭＳ（ＣＩ）６．９５分−１８３（Ｍ＋１）及び６．６４分−１８３（Ｍ＋１）。
【０１５２】
実施例５：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ＡＦ７１０）の合成
【０１５３】
【化５６】
室温のジクロロメタン（２３０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（２．１８ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（３．２４ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加し、その後３−インドールプロピオン酸（２．８７ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１０を白色固形物として得た（２．５ｇ、１００％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣ１３、３００ＭＨｚ）δ ８．１７（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．０８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．５３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝１．８６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５２、５．０９（２ｑ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．２２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６２、３．６６（２ｄ、Ｊ＝１１．７６及びＪ＝１１．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．２９、３．０８（２ｄ、Ｊ＝１１．４８及びＪ＝１２．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１８〜３．１１（ｍ、２Ｈ）、２．７２〜２．６６（ｍ、２Ｈ）、２．６４〜２．４６（ｍ、２Ｈ）、２．２６、２．２５（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．３２〜２．１９、２．１２〜２．０２（２ｍ、２Ｈ）、１．８７〜１．８０、１．６８〜１．５１（２ｍ、４Ｈ）、１．４８、１．４３（２ｄ、Ｊ＝６．２１及びＪ＝６．１９Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １７０．５８（Ｃ）、１３６．３９（Ｃ）、１２７．２５（Ｃ）、１２２．１９（ＣＨ）、１２１．８０（ＣＨ）、１１９．５２（ＣＨ）、１１８．７３（ＣＨ）、１１５．１７（Ｃ）、１１１．３１（ＣＨ）、５７．４８、５７．１９（ＣＨ）、５５．４６（Ｃ）、５４．５５、５４．１２（ＣＨ２）、５３．１１、５２．８６（ＣＨ２）、４６．２１、４６．１５（ＣＨ３）、３８．０５、３７．３２（ＣＨ２）、３６．８２、３６．３１（ＣＨ２）、３４．４１（ＣＨ２）、２５．４４、２３．４７（ＣＨ３）、２１．０４、２０．９６（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１５４】
実施例６：ＡＦ７１０Ａ及びＡＦ７１０Ｂのキラル分離 ＡＦ７１０をそのエナンチオマーに分離することは、セミ分取カラムを用いてＨＰＬＣにより実施した。メタノール（５０ｍｇ／ｍｌ）中ＡＦ７１０の２００μｌ溶液を、カラムに注入し、カラムを通過させて溶出した。溶出した後、溶出液を蒸発させて乾燥した。
ＨＰＬＣ：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−６２０００Ａ型
検出器：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−４２５０型
カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ、２５０ｘ１０ｍｍ
流速：４ｍｌ／分
カラム温度：室温
移動相：ヘキサン／エタノール ８５：１５
濃度：５０ｍｇ／ｍｌ
ＵＶ検出：２５５ｎｍ
最初に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１０Ａ）：９９％ｅｅ；比旋光度［α］＝＋６０°（Ｃ＝０．４１５、メタノール）
次に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１０Ｂ）：９９％ｅｅ；比旋光度［α］＝−５６°（Ｃ＝０．３０３、メタノール）
【０１５５】
実施例７：３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン（ＡＦ７１６）の合成
【０１５６】
【化５７】
２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（５７３ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（６４４μｌ、４．６２ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。乾燥ジクロロメタン（２ｍｌ）中ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（６００ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）の溶液を、注射器で滴加した。反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。１時間撹拌した後、ジクロロメタン（５０ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（２ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させて、粗混合物を油状物として得た。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９３／７／１）で精製して、ＡＦ７１６を白色に近い粉末として得た（４９６ｍｇ、９８．８％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ７．８９〜７．８５（ｍ、２Ｈ、２つのＣＨＣＳＯ２）、７．２７〜７．１９（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＦ）、５．０２（ｑ、Ｊ＝６．１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨ−ＣＨ３）、３．６６（ｄ、Ｊ＝１１．３７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、３．４８（ｄ、Ｊ＝１１．３７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、２．７２〜２．５０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＮＣＨ３）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１６〜２．０７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＮＣＨ３）、１．９５〜１．８８（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）、１．５５（ｄ、Ｊ＝６．１２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．４８（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６６．９２及び１６３．５４（Ｃ）、１３０．０５（ＣＨ）、１２９．９３（ＣＨ）、１２９．５８（Ｃ）、１１６．６０（ＣＨ）、１１６．３０（ＣＨ）、６０．７６（Ｃ）、６０．２４（ＣＨ）、５４．０５（ＣＨ２）、５３．２２（ＣＨ２）、４６．０３（ＣＨ３）、３７．１６（ＣＨ２）、３７．０５（ＣＨ２）、２５．５６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１５７】
実施例８：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピルペンタン−１−オン（ＡＦ７１７）の合成
【０１５８】
【化５８】
２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（９８２ｍｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（１．１０ｍｌ、７．９２ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。バルプロイルクロリド（９１０ｍｇ、５．６０ｍｍｏｌ）を注射器で滴加した。反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。４時間撹拌した後、ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（１０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（２×５０ｍｌ）で抽出した。混合した有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １５０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１７を白色に近い粉末として得た（５２１ｍｇ、９９．２％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ５．５３、５．２６（２ｑ、Ｊ＝６．１２及びＪ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６７、３．９０（２ｄ、Ｊ＝１２．０及びＪ＝１１．３５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．４８、３．０９（２ｄ、Ｊ＝１１．３５及びＪ＝１２．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．７８〜２．５９（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２Ｎ）、２．５３〜２．４７（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＯ）、２．３０、２．１９（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１５〜２．０５（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２Ｎ）、２．０２〜１．８４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）、１．７４〜１．６１（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２ＣＨＣＯ）、１．５５、１．５０（２ｄ、Ｊ＝６．３及びＪ＝６．１２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．４４〜１．３６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２ＣＳ）、１．３４〜１．２１（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２ＣＨ３）、０．９３〜０．８７（ｍ、６Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７４．３５、１７４．０４（Ｃ）、５９．１３（Ｃ）、５７．３５、５７．１９（ＣＨ）、５４．５２、５４．０６（ＣＨ２）、５３．１３、５２．７７（ＣＨ２）、４６．０９（ＣＨ３）、４３．７７、４２．５５（ＣＨ）、３８．３７、３７．５８（ＣＨ２）、３７．０４、３６．２０（ＣＨ２）、３５．７６、３５．３５（ＣＨ２）、３５．０８、３４．７７（ＣＨ２）、２６．０１、２３．０１（ＣＨ３）、２１．０８、２０．９８（ＣＨ２）、２０．７３、２０．５６（ＣＨ２）、１４．２７、１４．２２（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１５９】
実施例９：（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−メタノン（ＡＦ７２３）の合成
【０１６０】
【化５９】
乾燥蒸留ジクロロメタン（１０ｍｌ）中ジシクロヘキシルカルボジイミド（９８５ｍｇ、４．７７ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴン雰囲気下で、室温のジクロロメタン（１５ｍｌ）中３，５−ジーｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ安息香酸（１．１４ｇ、４．５５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。ジシクロヘキシル尿素が、白色固形物として沈殿し始めた。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（６４５ｍｇ、４．７７ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を５分間室温で撹拌した。その後、ジクロロメタン（５ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（８４６ｍｇ、４．５５ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた混合物を室温で一晩維持した。翌日、混合物を３０℃（水浴の温度）で５時間加熱し、その後室温でさらに４日間維持した。その結果生じた懸濁液をろ過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １４０／１０／１）で精製して、２つの画分：ＡＦ７２３（２２４ｍｇ、９９．１６％の化学的純度）及びＡＦ７２３と副生成物との混合物（９４３ｍｇ）を得た。ＡＦ７２３と副生成物との混合物を、ＣＯＭＢＩ−フラッシュシステムで線形濃度勾配を使用してフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（シリカ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ２２０／１０／１〜１４０／１０／１）。減圧下で蒸発及び乾燥した後、ＡＦ７２３（５１６ｍｇ、１００％の化学的純度）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ７．２７（ｓ、２Ｈ、ａｒｏｍ ＣＨ）、５．５５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−Ｓ）、５．４４（ｓ、１Ｈ、ＯＨ）、４．１０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−Ｎ−ＣＯ）、３．４０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−Ｎ−ＣＯ）、２．６０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ＮＣＨ３）、２．２８（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−ＮＣＨ３）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１１（ｍ、１Ｈ、ＣＨＨ−ＮＣＨ３）、１．９５〜１．６６（ｍ、４Ｈ、２つのＣＨ２−ＣＳ）、１．６０（ｄ、Ｊ＝６．１５Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）、１．４４（ｓ、１８Ｈ、ｔ−ブチル）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １７０．７８（Ｃ＝Ｏ）、１５５．５２（Ｃ）、１３５．９３（２つのＣ）、１２７．３９（Ｃ）、１２４．３０（２つのＣＨ）、５９．５６（Ｃ）、５８．００（ＣＨ）、５６．４０（ＣＨ２）、５４．２３（ＣＨ２）、５２．８２（ＣＨ２）、４５．８８（ＣＨ３）、３７．６８（ＣＨ２）、３６．５０（ＣＨ２）、３４．２８（Ｃ）、３０．２１（ＣＨ３）、２３．９９（ＣＨ３）ｐｐｍ；ＦＴＩＲ（ＨＡＴＲ）２９４３．８９、１６１９．９２、１３８８．６７ｃｍ−１；ＧＣ−ＭＳ（ＥＩ）７．３１分 ｍ／ｚ：４１９（Ｍ＋１）。
【０１６１】
実施例１０：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７２４）の合成
【０１６２】
【化６０】
室温のジクロロメタン（９０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．８６ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．２８ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を添加し、その後プロピオン酸（０．４１ｍｌ、５．５ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、無色油状物として表題化合物を得た（０．５ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ５．５１、５．１９（２ｑ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．２２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６３、３．７４（２ｄ、Ｊ＝１１．８８及びＪ＝１１．５７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．４４、３．０８（２ｄ、Ｊ＝１１．５５及びＪ＝１２．０９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．８〜２．６（ｍ、２Ｈ）、２．５〜２．２（ｍ、７Ｈ、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ３、ＮＣＨ３）、２．２〜２．０（ｍ、１Ｈ），２．０〜１．８（ｍ、３Ｈ）１．５２、１．４８（２ｄ、Ｊ＝６，３０及びＪ＝６．１８Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）、１．１９〜１．１２（ｍ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７１．６（Ｃ）、５７．５、５７．２（ＣＨ）、５５．５（Ｃ）、５４．７、５４．３（ＣＨ２）、５３．２、５３．０（ＣＨ２）、４６．３（ＣＨ３）、３８．４、３７．７（ＣＨ２）、３７．０、３６．４（ＣＨ２）、２８．８、２６．８（ＣＨ２）、２５．６、２３．６（ＣＨ３）、９．６、９．４（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１６３】
実施例１１：１−（２，８）−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ブタン−１−オン（ＡＦ７２５）の合成
【０１６４】
【化６１】
室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．９７ｇ、５２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４４ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を添加し、その後３−インドール酪酸（１．２６ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（４００ｍｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．２１（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．７５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．０９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１０（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、６．９９（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５３、５．０８（２ｑ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．１７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６５、３．５８（２ｄ、Ｊ＝１１．９６及びＪ＝１１．５５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．３２、３．０８（２ｄ、Ｊ＝１１．５９及びＪ＝１２．０９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．８７〜２．８０（ｍ、２Ｈ）、２．８〜２．５（ｍ、２Ｈ）、２．５〜２．１８（ｍ、３Ｈ）、２．２７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１８〜２．０（ｍ、３Ｈ）、２．０〜１．５８（ｍ、４Ｈ）、１．４８、１．４３（２ｄ、Ｊ＝６．１７及びＪ＝６．２４Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７０．９９（Ｃ）、１３６．５４（Ｃ）、１２７．６５（Ｃ）、１２２．１３（ＣＨ）、１２１．６９（ＣＨ）、１１９．３８（ＣＨ）、１１９．０９（ＣＨ）、１１５．７７（Ｃ）、１１１．３３（ＣＨ）、５７．５７、５７．１７（ＣＨ）、５５．３０（Ｃ）、５４．６７、５４．２３（ＣＨ２）、５３．２１、５２．９２（ＣＨ２）、４６．２３（ＣＨ３）、３８．４２、３７．５６（ＣＨ２）、３７．０４、３６．３１（ＣＨ２）、３４．９３、３２．９７（ＣＨ２）、２５．６８、２５．５２（ＣＨ２）、２４．７２、２４．６３（ＣＨ２）、２３．５６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１６５】
実施例１２：１−（２，８）−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−エタン−１−オン（ＡＦ７２６）の合成
【０１６６】
【化６２】
室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．９７ｇ、５２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４４ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を添加し、その後３−インドール酢酸（１．０９ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（６００ｍｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．７１、８．６６（２ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６２、７．５９（２ｄ、Ｊ＝７．９０及びＪ＝８．３９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２２〜７．０８（ｍ、１Ｈ、２ＣＨ ａｒｏｍ）、７．０３（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５３、５．３３（２ｑ、Ｊ＝６．１２及びＪ＝６．２２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６９、３．８８（２ｄ、Ｊ＝１２．１５及びＪ＝１１．２０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．４９及び３．８１（２ｓ、２Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２）、３．３６、３．１３（２ｄ、Ｊ＝１１．４１及びＪ＝１２．１９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．８〜２．５（ｍ、１Ｈ）、２．５〜２．０５（ｍ、２Ｈ）、２．２５及び２．１９（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．０５〜１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．８５〜１．６（ｍ、１Ｈ）、１．５２、１．４８（２ｄ、Ｊ＝６．１５及びＪ＝６．３０Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）、１．４５〜１．３５（ｍ、１Ｈ）、１．３５〜１．１５（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６９．６（Ｃ）、１３６．４３（Ｃ）、１２７．１９（Ｃ）、１２２．９８、１２２．８２（ＣＨ）、１２２．４３（ＣＨ）、１１９．８８、１１９．８１（ＣＨ）、１１８．７９、１１８．６７（ＣＨ）、１１１．５２（ＣＨ）、１０８．５５（Ｃ）、５８．０６、５７．５８（ＣＨ）、５５．６６（Ｃ）、５４．６６、５４．１５（ＣＨ２）、５３．２０、５２．７６（ＣＨ２）、４６．２７、４６．１１（ＣＨ３）、３８．４５、３７．１３（ＣＨ２）、３６．９５、３６．１３（ＣＨ２）、３３．９６（ＣＨ２）、３１．３７（ＣＨ２）、２５．７５、２３．３３（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１６７】
実施例１３：（Ｅ）−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロペノン（ＡＦ７２７）の合成
【０１６８】
【化６３】
室温のジクロロメタン（８５ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（実施例１）（０．８３ｇ、４４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．２３ｇ、５．９ｍｍｏｌ）を添加し、その後ｔｒａｎｓ−３−インドールアセチクリル酸（ｔｒａｎｓ−３−ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃｒｙｌｉｃ ａｃｉｄ）（１．０ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（６００ｍｇ）。１ＨＮＭＲ（１，１，２，２−ジクロロエタン−ｄ２、３００ＭＨｚ、１００℃）δ ８．５６（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．９４（ｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、１Ｈ、ＨＣ＝Ｃ）、７．８３（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．４６（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．４２（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、７．２６（ｍ、２Ｈ、２ＣＨ ａｒｏｍ）、６．７１（ｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ＝ＣＨ）、５．６５（ｑ、Ｊ＝６．１２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．３８（ｄ、Ｊ＝１１．７５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．５０（ｄ、Ｊ＝１１．８４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１〜２．８（ｍ、２Ｈ）、２．８〜２．６（ｍ、１Ｈ）、２．６〜２．３（ｍ、２Ｈ）、２．４６（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．２〜１．９（ｍ、２Ｈ）、１．９〜１．８（ｍ、１Ｈ）、１．６４（ｄ、Ｊ＝６．２１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３〜ＣＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（ＥＩ＋）ｍ／ｚ ３５５（Ｍ＋）、３２２、１８５、１７０。
【０１６９】
実施例１４：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７１１）の合成
【０１７０】
【化６４】
室温のジクロロメタン（１１０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（９９１．２ｍｇ、５．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．６１ｇ、７．８ｍｍｏｌ）及び３−インドールプロピオン酸（１．４３ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製した。減圧下で蒸発及び乾燥した後、ＡＦ７１１（７１６ｍｇ、９９．６％の化学的純度）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ８．５０、８．４６（２ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨインドール）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．５５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝７．８５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＮＨ ａｒｏｍ）、７．１８（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．２４、７．８５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１１（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．５５、７．２４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝１．８６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨインドール）、５．３２、５．１５（２ｑ、Ｊ＝５．０９及びＪ＝５．１６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．９９、３．２２（２ｄ、Ｊ＝１１及びＪ＝９．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１９（ｍ、１Ｈ）、３．１３〜３．０８（ｍ、１Ｈ）、３．０３、２．９７（２ｄ、Ｊ＝９．５及びＪ＝１１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．７２〜２．６０（ｍ、２Ｈ）、２．５１〜２．２０（ｍ、４Ｈ）、２．２５、２．２３（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７８〜１．６４（ｍ、２Ｈ）、１．４３、１．３１（２ｄ、Ｊ＝５．１５及びＪ＝５．１５Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．３９、１．２８（２ｍ、１Ｈ）、１．１４（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １７０．５０、１６９．８５（Ｃ）、１３６．３０、１３６．２５（Ｃ）、１２７．０７、１２６．９９（Ｃ）、１２１．９３（ＣＨ）、１２１．８５（ＣＨ）、１１９．２４（ＣＨ）、１１８．５５、１１８．５２（ＣＨ）、１１４．７３（Ｃ）、１１１．２０、１１１．１２（ＣＨ）、８４．６９、８４．０６（ＣＨ）、７７．９８（Ｃ）、５４．１８（ＣＨ２）、５２．１８（ＣＨ２）、５１．８６（ＣＨ２）、４５．８９、４５．８３（ＣＨ３）、３６．３８（ＣＨ２）、３４．９８（ＣＨ２）、３２．９９、３２．４１（ＣＨ２）、２２．７０、２０．５０（ＣＨ３）、２０．９６、２０．７３（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１７１】
実施例１５：ＡＦ７１１Ａ及びＡＦ７１１Ｂのキラル分離 ＡＦ７１１をそのエナンチオマーに分離することは、セミ分取カラムを用いてＨＰＬＣにより実施した。メタノール（５０ｍｇ／ｍｌ）中ＡＦ７１１の２００μｌ溶液を、カラムに注入し、溶出した。溶出した後、溶出液を蒸発させて乾燥した。
ＨＰＬＣ：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−６２０００Ａ型
検出器：Ｍｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ社製Ｌ−４２５０型
カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ、２５０ｘ１０ｍｍ
流速：４ｍｌ／分
カラム温度：室温
移動相：ヘキサン／エタノール／メタノール ９５：１：４
濃度：５０ｍｇ／ｍｌ
ＵＶ検出：３００ｎｍ
最初に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１１Ａ）：９９％ｅｅ（（−）エナンチオマーであると考えられる） 次に溶出したエナンチオマー（ＡＦ７１１Ｂ）：９９％ｅｅ；比旋光度［α］＝＋７３．５°（Ｃ＝０．３６５、メタノール）
【０１７２】
実施例１６：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン（ＡＦ７１２）の合成
【０１７３】
【化６５】
２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（１．５２ｇ、８．９５ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（１．８７ｍｌ、１３．４２ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。バルプロイルクロリド（１．４６ｇ、８．９５ｍｍｏｌ）を注射器で滴加した。反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。４時間撹拌した後、ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（１０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（２×５０ｍｌ）で抽出した。混合した有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １３０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１２を黄色粉末として得た（３８９ｍｇ、９８．７％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ５．４３（ｑ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．１３、３．６３（２ｄ、Ｊ＝１１．３５及びＪ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．２２、３．００（２ｄ、Ｊ＝９．６及びＪ＝１１．３５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．５６〜２．３８（ｍ、５Ｈ）、２．３０、２．２９（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．８４〜１．５３（３ｍ、６Ｈ）、１．４４、１．４３（２ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．４〜１．１９（ｍ、６Ｈ）、０．９０（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．１１Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７３．９２、１７３．６８（Ｃ）、８４．７５、８４．２０（ＣＨ）、７８．３２、７８．０９（Ｃ）、５４．２４（ＣＨ２）、５２．３４（ＣＨ２）、５２．０２（ＣＨ２）、４６．０３（ＣＨ３）、４４．３４、４３．６４（ＣＨ）、３５．６３（ＣＨ２）、３５．０５（ＣＨ２）、３４．９２（ＣＨ２）、３２．８３（ＣＨ２）、２３．５２、２０．９１（ＣＨ３）、２０．５９（ＣＨ２）、２０．４３（ＣＨ２）、１４．３０（ＣＨ３）、１４．１６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１７４】
実施例１７：３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン（ＡＦ７１５）の合成
【０１７５】
【化６６】
２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（１．４２ｇ、８．３８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解した。蒸留トリエチルアミン（１．７５ｍｌ、１２．５７ｍｍｏｌ）を添加し、その結果生じた溶液を０℃に冷却した。ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（１．６３ｇｒ、８．３７ｍｍｏｌ）を添加し、反応フラスコを撹拌しながら加温して室温にし、白色固形物が沈殿し始めた。３０分間撹拌した後、ジクロロメタン（９０ｍｌ）を添加し、その結果生じた溶液を、水（２×１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １４０／１０／１）で精製して、ＡＦ７１５を白色に近い粉末として得た（１．２３ｇ、９８．７％の化学的純度）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ ７．８９〜７．８７（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＳＯ２）、７．２７〜７．２２（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＦ）、５．０５（ｑ、Ｊ＝５．２３、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．３３（ｄ、Ｊ＝１０．２６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、３．１９（ｄ、Ｊ＝１０．２６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＳ）、２．５２〜２．４２（ｍ、１Ｈ）、２．３４〜２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１８〜２．０９（ｍ、１Ｈ）、１．７７〜１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．５２（ｄ、Ｊ＝５．２３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＨ）、１．２５〜１．１８（ｍ、１Ｈ）、１．１０〜１．０３（ｍ、１Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、５００ＭＨｚ）δ １６６．４５及び１６４．４２（Ｃ）、１３４．０（Ｃ）、１３０．３７（ＣＨ）、１３０．２９（ＣＨ）、１１６．６８（ＣＨ）、１１６．５０（ＣＨ）、８６．９５（ＣＨ）、６６．３０（Ｃ）、５５．４８（ＣＨ２）、５２．５７（ＣＨ２）、５２．１１（ＣＨ２）、４６．０４（ＣＨ３）、３５．６４（ＣＨ２）、３２．８４（ＣＨ２）、２２．９５（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１７６】
実施例１８：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−４−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７０６）の合成
【０１７７】
【化６７】
ジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（１．０９ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）、３−インドールプロピオン酸（１．５７ｇ、８．３ｍｍｏｌ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１．７８ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）、及びジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、０．７８ｇ、６．４１ｍｏｌ）の溶液を、室温で４日間撹拌した。沈殿物をろ過により除去し、溶媒を蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ｉ−ＰｒＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ８５／１５／１）により、エーテル中で粉末化された表題化合物を得た。得られた白色固形物（ＡＦ７０６）、１．１ｇｒ（９９．４％の化学的純度）をろ過及び乾燥した。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１５（ｂｒ ＮＨ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝７．７６Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝７．９８Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．２３（ｄｔ、Ｊ＝１．１２、７．５６Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．１３（ｄｔ、Ｊ＝１．０７、７．４４Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝２．１５Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＣ）、４．０５（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．５３（ｄｄ、Ｊ＝９．０、５．５Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＨ）、３．１３（ｍ、３Ｈ）、２．９６（ｔ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．８０〜２．７０（ｍ、３Ｈ）、２．６１〜２．７０（（ｍ、２Ｈ）、２．２３〜２．３４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、２．３１（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．３７（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．３３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６９．６６（Ｃ）、１３６．５２（Ｃ）、１２２．４９（ＣＨ）、１２１．９０（ＣＨ）、１１９．２４（ＣＨ）、１１８．７８（ＣＨ）、１１５．１８（Ｃ）、１１１．４１（ＣＨ）、９４．１６（Ｃ）、６９．９２（ＣＨ）、５３．２５（ＣＨ２）、５２．８４（ＣＨ２）、５２．７０（ＣＨ２）、４５．９９（ＣＨ３）、３７．５２（ＣＨ２）、３３．６６（ＣＨ２）、３０．９０（ＣＨ２）、２０．７３（ＣＨ２）、１８．２６（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１７８】
実施例１９：１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−４−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン（ＡＦ７１３）の合成
【０１７９】
【化６８】
ＴＨＦ（６０ｍｌ）中水素化ナトリウム（６０％、０．６ｇ、１５ｍｍｏｌ）の冷却（０℃、氷−水浴）溶液に、アルゴン雰囲気下で２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（２．４４ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を添加した。冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。バルプロイルクロリド（２．３６ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を、室温、アルゴン雰囲気下で２．５時間撹拌したままにしておいた。反応混合物を、シリカ短床でろ過した。シリカをＴＨＦ（３ｘ１５０ｍｌ）で洗浄し、ろ過液を混合し蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１）により、黄褐色固形物として表題化合物を得た。固形物をジクロロメタン（１５０ｍｌ）に溶解し、チャコールを撹拌溶液に添加した。ろ過し蒸発させることにより、白色に近いＡＦ７１３を得た（１．４ｇ、９７．２％の化学的純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ４．１〜４．２（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．７〜３．８（ｍ、１Ｈ）、３．０〜３．２（ｍ、２Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ、３Ｈ）、２．３〜２．５（ｍ、３Ｈ）、２．３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．５５〜１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．４〜１．５２（ｍ、１Ｈ）、１．２６（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）、１．２〜１．４（ｍ、６Ｈ）、０．８９（ｂｒ ｔ、Ｊ＝７．０３Ｈｚ、６Ｈ、２ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７３．１４（Ｃ）、９４．２２（Ｃ）、６９．６５（ＣＨ）、５３．４１（ＣＨ２）、５２．４６（ＣＨ２）、５２．３０（ＣＨ２）、４５．３５（ＣＨ２）、４５．０６（ＣＨ２）、３５．３５（ＣＨ２）、３５．２１（ＣＨ２）、３２．９３（ＣＨ２）、３０．２７（ＣＨ２）、２０．７９（ＣＨ２）、２０．７３（ＣＨ２）、１８．１４（ＣＨ３）、１４．３３（ＣＨ３）、１４．２７（ＣＨ３）ｐｐｍ；ＦＴＩＲ（ＨＡＴＲ）１６２７ｃｍ−１。
【０１８０】
実施例２０：４−（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］−デカン（ＡＦ７１４）の合成
【０１８１】
【化６９】
ＴＨＦ（６０ｍｌ）中水素化ナトリウム（６０％、０．６ｇ、１５ｍｍｏｌ）の冷却（０℃、氷−水浴）溶液に、アルゴン雰囲気下で２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（２．４９ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）を添加した。冷却浴を取り外し、反応混合物を室温で４０分間撹拌した。４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（２．８４ｇｒ、１４．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を、室温、アルゴン雰囲気下で一晩撹拌したままにしておいた。反応混合物をシリカ短床でろ過し、それをテトラヒドロフラン（ＴＨＦ、２ｘ１５０ｍｌ）で洗浄した。ろ過液を混合し蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１）により、黄褐色固形物として表題化合物を得た。固形物を、加熱したｉ−ＰｒＯＨから再結晶させた。ＡＦ７１４を、白色固形物として得た（１．３ｇ、９９．８％の化学的純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ７．８８（ｍ、２Ｈ、２Ｈ−Ａｒ）、７．２０（ｍ、２Ｈ、２Ｈ−Ａｒ）、４．２１（ｍ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．６９（ｄｄ、Ｊ＝５．４、８．４Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＨ）、２．９１（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＨ）、２．７２（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、２．６３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、２．４３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．２５（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、１．７２（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．４３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ピペリジン）、１．２８（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６６．５８及び１６３．２０（Ｃ）、１３７．０２（Ｃ）、１２９．９５（Ｃ）、１２９．８３（Ｃ）、１１６．３４（Ｃ）、１１６．０４（Ｃ）、９６．２９（Ｃ）、７０．４２（ＣＨ）、５３．４９（ＣＨ２）、５２．９６（ＣＨ２）、５２．７９（ＣＨ２）、４５．８５（ＣＨ３）、３５．８８（ＣＨ２）、３４．８９（ＣＨ２）、１８．０８（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１８２】
実施例２１：１’，４−ジメチル−６−（３−インドールプロピオニル）−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２，４’−ピペリジン（ＡＦ７１８Ｃ）の合成
【０１８３】
【化７０】
ジクロロメタン（５０ｍｌ）中３−インドールプロピオン酸（１．６３ｇ、８．６ｍｍｏｌ）及びジシクロヘキシル−カルボジイミド（ＤＣＣ、１．８６ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１５分間撹拌した。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ、１．２２ｇｒ ９．０６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌をさらに３０分間継続した。１’，４−ジメチルスピロ−３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン（１．５７ｇ、８．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、反応混合物を水（２×２０ｍｌ）で洗浄した。有機画分を混合し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／２０／１）で精製して、ＡＦ７１８Ｃを白色固形物として得た（２００ｍｇ、９９．３％の化学的純度）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０８（ｂｒ ＮＨ）、５９（ｄ、Ｊ＝７．７２Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝７．９１Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．２１（ｄｔ、Ｊ＝１．１９、７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、７．１３（ｄｔ、Ｊ＝１．１３、７．４０Ｈｚ、１Ｈ、ＡｒＨ）、６．９８（ｄ、Ｊ＝２．２４Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨＣ）、４．１５（ｑ、Ｊ＝６．７７Ｈｚ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．１２（ｔ、Ｊ＝７．２５Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．９２（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨ）、２．８５（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、ＮＣＨ）、２．８５〜２．７４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．４〜２．２（ｍ、４Ｈ、２ＣＨ２−ピペリジン）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７６〜１．６７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、１．６６〜１．５６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２−ピペリジン）、１．１２（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １８４．４０（Ｃ）、１３６．２６（Ｃ）、１２２．１６（ＣＨ）、１２１．６７（ＣＨ）、１１９．５３（ＣＨ）、１１８．６５（ＣＨ）、１１４．９３（Ｃ）、１１１．２３（ＣＨ）、７８．６９（Ｃ）、７４．５０（ＣＨ）、５３．０８（ＣＨ２）、５２．０８（ＣＨ２）、４７．１４（ＣＨ）、４６．２５（ＣＨ）、４５．９５（ＣＨ３）、３７．９０（ＣＨ２）、３６．０２（ＣＨ２）、３３．３９（ＣＨ２）、２０．９３（ＣＨ２）、２０．７７（ＣＨ３）ｐｐｍ；ＦＴ−ＩＲ（ＨＡＴＲ）１６７６ｃｍ−１；Ｃ２１Ｈ２７Ｎ３Ｏ２のＭＳ（ＣＩ）３５４（Ｍ＋１）。
【０１８４】
実施例２２：１’，４−ジメチル−６−［３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）］−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン（ＡＦ７２１）の合成
【０１８５】
【化７１】
乾燥ジクロロメタン（５ｍｌ）中４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（１．０４ｇ、５．３ｍｍｏｌ）の溶液を、乾燥ジクロロメタン（１２ｍｌ）中のアミン［ＡＦ７１８Ｃ合成のパート（ａ）を参照、０．９７ｇ、５．３ｍｍｏｌ］及び乾燥トリエチルアミン（１．１ｍｌ、８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（５０ｍｌ）を添加し、反応混合物を水（１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーすることにより、ＡＦ７２１を得た（油状物、０．８ｇ）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０１〜７．９５（ｍ、２Ｈ、２ＣＨ）、７．２８〜７．１６（ｍ、２Ｈ、２ＣＨ）、４．２４（ｑ、Ｊ＝６．８３Ｈｚ、１Ｈ、ＯＣＨ）、３．５４〜３．４８（２つのｄ、Ｊ＝５．３８及びＪ＝５．３８Ｈｚ、２Ｈ、２ＣＨ）、２．５３〜２．３（ｍ、４Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１６〜１．７３（ｍ、４Ｈ）、１．２５ ｄ、Ｊ＝６．８４Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３）ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １６７．５及び１６４．１（ＣＦ）、１３４．２（Ｃ）、１３０．７（ＣＨ）、１３０．６（ＣＨ）、１１６．６（ＣＨ）、１１６．３（ＣＨ）、７９．６（Ｃ）、７５．０（ＣＨ）、５２．８（ＣＨ２）、５２．２（ＣＨ２）、５０．９（ＣＨ）、４９．９（ＣＨ）、４６．０（ＣＨ３）、３６．３（ＣＨ２）、３３．１（ＣＨ２）、２０．９（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１８６】
実施例２３：１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン−１−オン（ＡＦ７３２）の合成
【０１８７】
【化７２】
室温のジクロロメタン（５０ｍｌ）中ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．３ｇ、６．３ｍｍｏｌ）の溶液に、３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン酸（１．１８ｇ、５．８ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン（５０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（１．２ｇ、６．４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。その結果生じた溶液を、室温で４８時間撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１）で精製して、無色油状物として表題化合物を得た（０．７ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５〜７．２（ｍ、２Ｈ、２ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２３（ｄｔ、Ｊ＝１．０６、７．４５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、６．９０（ｓ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５４、５．０７（２ｑ、Ｊ＝６．１６及びＪ＝６．２５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．６３、３．６８（２ｄ、Ｊ＝１２．０及びＪ＝１１．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．７５、３．７４（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、３．３２（ｄ、Ｊ＝１１．５Ｈｚ、０．６Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．１７〜３．０５（ｍ、２．４Ｈ）、２．８〜２．４（ｍ）、２．６８［ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２］、２．２８、２．２６（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．３〜２．２（ｍ）、２．１〜２．０（ｍ）、２．０〜１．８（ｍ）、１．７〜１．４（ｍ）、１．４８、１．４３（２ｄ、Ｊ＝６．１８及びＪ＝６．２６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７０．６（Ｃ）、１３７．１（Ｃ）、１２６．８（Ｃ）、１２６．７（ＣＨ）、１２１．８（ＣＨ）、１１９．０（ＣＨ）、１１８．９（ＣＨ）、１１３．７（Ｃ）、１０９．４（ＣＨ）、５９．０（Ｃ）、５７．５、５７．２（ＣＨ）、５４．６、５４．２（ＣＨ２）、５３．２、５２．９（ＣＨ２）、４６．３、４６．２（ＣＨ３）、３８．１、３７．４（ＣＨ２）、３６．９、３６．６（ＣＨ２）、３６．４、３４．７（ＣＨ２）、３２．７（ＣＨ３）、２５．５、２３．５（ＣＨ３）、２１．０、２０．９（ＣＨ２）ｐｐｍ。
【０１８８】
実施例２４：Ｎ−（２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド（ＡＦ７３０）の合成
【０１８９】
【化７３】
２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンの合成：乾燥ＴＨＦ（３０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（１．２４ｇ、６．３ｍｍｏｌ、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順に従って調製した）の溶液を、乾燥ＴＨＦ（５０ｍｌ）中水素化アルミニウムリチウム（１．１３ｇ、３０ｍｍｏｌ）及び塩化アルミニウム（０．２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に滴加した。反応混合物を、室温で１０時間撹拌した。反応混合物を冷却し（氷で）、水（３ｍｌ）、１５％ＮａＯＨ水溶液（３ｍｌ）、及び水（７ｍｌ）を添加することにより反応を停止させた。固形物をセライトでろ過し、ＴＨＦろ過液を減圧下で濃縮した。残留油状物をジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶解し、溶液を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去し、粗アミンを次のステップに移行させた。
【０１９０】
室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４９ｇ、７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジクロロメタン（２０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンの溶液を添加し（化合物は全て上記のステップで得られた）、その後３−インドールプロピオン酸（１．３ｇ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １４０／１０／１〜ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １００／１０／１の勾配）で精製して、白色固形物のＡＦ７３０を、２つの幾何異性体の混合物（異性体Ｉ／異性体ＩＩ １：２）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０７（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．８１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ、異性体ＩＩ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ、異性体Ｉ）、７．２０（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１５（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０２（ｍ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．３６（ｄ、Ｊ＝８．８５Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ 異性体Ｉ）、５．１８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ 異性体ＩＩ）、４．３５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ 異性体Ｉ）、４．０４（ｍ、１Ｈ、ＣＨ 異性体ＩＩ）、３．９３（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３ 異性体Ｉ）、３．４８（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３ 異性体Ｈ）、３．１３（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２ＣＨ２）、２．５８（ｍ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２９（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２５（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３ 異性体ＩＩ）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３ 異性体Ｉ）、２．１０（ｄｄ、Ｊ＝１２．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ 異性体ＩＩ）、１．９６（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、７．１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ 異性体Ｉ）、１．７〜１．４（２ｍ）、１．４〜１．２（２ｍ）、１．１５（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ 異性体ＩＩ）、０．９７（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ 異性体Ｉ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７２．９、１７２．５（Ｃ）、１３６．６、１３６．５（Ｃ）、１２７．２、１２７．１（Ｃ）、１２２．２、１２２．１（ＣＨ）、１１９．６、１１９．５（ＣＨ）、１１８．８（ＣＨ）、１１４．６、１１４．５（Ｃ）、１１１．６、１１１．５（ＣＨ）、７８．２、７４．５（ＣＨ）、５５．５（ＣＨ）、５３．０（Ｃ）、５２．９、５２．７（ＣＨ２）、４６．６、４６．２（ＣＨ３）、３８．７、３８．５（ＣＨ２）、３７．７、３７．６（ＣＨ２）、２１．８、２１．７（ＣＨ２）、１９．７，１５．０（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１９１】
幾何異性体（２００ｍｇ）を、Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎシステム（Ｉｓｃｏ，Ｉｎｃ社）でフラッシュクロマトグラフィーにより分離した（ＨＰ４０−ｇｏｌｄシリカカラム、線形勾配ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １２０／１０／１〜ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）。 ＡＦ７３０ Ｉ（より極性が低い異性体）：１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．０９（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．８０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ｄｔ、Ｊ＝１．１、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ｄｔ、Ｊ＝１．０１、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０３（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．３６（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、４．３５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．９３（ｄｑ、Ｊ＝６．３、６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１３（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２ＣＨ２）、２．５８（ｍ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．５〜２．１（ｍ、４Ｈ、２ＣＨ２）、２．２４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．９６（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、７．１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、１．７〜１．４（２ｍ、２Ｈ）、１．４〜１．３（ｍ、２Ｈ），１．３１（ｄｄ、Ｊ＝１３．６、２．７Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、０．９７（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ。ＡＦ７３０ ＩＩ（より極性の高い異性体）：１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２０（ｄｔ、Ｊ＝１．１、７．５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ｄｔ、Ｊ＝１．１、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０１（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．１９（ｄ、Ｊ＝８．３０Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、４．０３（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．４６（ｍ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１３（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２ＣＨ２）、２．５７（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．５〜２．３（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．３〜２．１（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１０（ｄｄ、Ｊ＝１２．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、１．７〜１．４（２ｍ、４Ｈ）、１．２６（ｄｄ、、Ｊ＝１２．７、７．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＣＨ）、１．１５（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ。
【０１９２】
実施例２５：Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド（ＡＦ７３１）
【０１９３】
【化７４】
（ａ）２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンの合成。温度計、滴下漏斗、及び塩化カルシウム乾燥管が取付けられている三つ口丸底部フラスコに、鉱油中６０％の水素化ナトリウム（８．７４ｇ、０．２１８ｍｏｌ）及び乾燥エーテル（３００ｍｌ）を入れた。この撹拌冷却懸濁液に、乾燥エーテル（１００ｍｌ）中エチルチオラクタート（２８．４ｇ、９５％、０．２００ｍｏｌ）の溶液を５〜１０℃で添加し、同じ温度でメタノール（１００ｍｌ）をゆっくりと添加した。その後、反応混合物を、室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物に乾燥ジメチルスルホキシド（１７０ｍｌ）を添加した。得られた溶液を１５℃に冷却し、エチル（１−メチル−４−ピペリジニリデン）アセタート（４０ｇ、０．２２ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２日間撹拌し、その後、氷冷水（６００ｍｌ）に注いだ。その後、反応混合物を濃塩酸で酸性化し、その後重炭酸ナトリウムで塩基化した（ｐＨ８）。その後、反応混合物をジクロロメタン（４×４５０ｍｌ）で抽出し、混合した抽出液をブライン（２×４００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶媒を除去して、多少のジメチルスルホキシドを含有する油状物を得た（５９．４０ｇ）。上記の生成物（２７．６ｇ）の一部に塩酸（１．３Ｎ、２００ｍｌ）を添加し、得られた溶液を１１時間還流し、その後それをヘキサン（３×７５ｍｌ）で抽出し、ヘキサンを破棄した。水相を３５％水酸化ナトリウム水溶液で塩基化し（ｐＨ１３）、その後ジクロロメタン（３×１２０ｍｌ）で抽出し、混合した抽出物をブライン（２×８０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発させて油状物（９．２ｇ）を得、それを、シリカゲルカラムを用いてクロマトグラフィーにより精製した。メタノール／ジクロロメタン／アンモニア ４／９６／１で溶出することにより、ケトンを得た（７．０ｇ、２段階での収率は３７．９％）。１Ｈ−ＮＭＲ ＣＤＣｌ３）δ １．４０（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、ＣＨ３Ｃ）、１．７５〜２．１５（ｍ、４Ｈ）、２．２０〜２．８０（ｍ、４Ｈ）、２．３２（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．５７及び２．６５（２ｄ、Ｊ＝１７．２Ｈｚ、ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３．５９（ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、ＣＨＳ）。
【０１９４】
（ｂ）２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシムの合成。メタノール（９ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン（０．６６９ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）の溶液を、水（１．５ｍｌ）中の塩酸ヒドロキシルアミン（０．２７０ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（０．３２０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を８０℃で２時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー分離した。メタノール／ジクロロメタン／アンモニア［５／９４／１］で溶出することにより、最初にａｎｔｉ配置のオキシム（０．２６７ｇ）、次にこのオキシムの２つの異性体（ｓｙｎ−及びａｎｔｉ−）の混合物（０．３１６ｇ）（収率８１％）を得た。ａｎｔｉ異性体を酢酸エチルから結晶化した。ｍｐ．１４８〜１４９℃。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ａｎｔｉ異性体）δ １．４６（ｄ、Ｊ＝６．６、ＣＨ３Ｃ）、１．７３〜１．９６（ｍ、３Ｈ）、２．０５（ｍ、１Ｈ）、２．１５〜２．４０（ｍ、１Ｈ）、２．３２（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．４７（ｍ、１Ｈ）、２．７０（ｍ、２Ｈ）、２．７８及び２．８６（２ｄ、Ｊ＝１７．４Ｈｚ、ＣＨ２Ｃ＝Ｎ）、３．９９（ｑ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、ＣＨＳ）、１０．１（ｂｓ、−ＮＯＨ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ａｎｔｉ異性体）δ １９．７（ＣＨ３）、３８．２（ＣＨ２）、３８．９（ＣＨ２）、４２．５（ＣＨ）、４２．８（ｂｓ、ＣＨ２）、４５．９（ＣＨ３）、５２．３（Ｃ）、５３．１（ＣＨ２）、５３．４（ＣＨ２）、１６３．７（Ｃ）。Ｇｃ−Ｍｓ ｍ／ｚ ２１５（Ｍ＋１）、１９７（Ｍ−ＯＨ）＋、９６。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｓｙｎ異性体、ｓｙｎ及びａｎｔｉ異性体の混合物のＮＭＲスペクトルからａｎｔｉ異性体のＮＭＲスペクトルを減算することにより算出した）δ １．４８（ｄ、Ｊ＝６．８、ＣＨ３Ｃ）、１．６０〜１．７３（ｍ、１Ｈ）、１．７４〜１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．９５〜２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．３１（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．４４（ｍ、１Ｈ）、２．５４及び２．７７（２ｄ、Ｊ＝１４．５Ｈｚ、ＣＨ２Ｃ＝Ｎ）、２．６０〜２．９０（ｍ、２Ｈ）、４．３７（ｑ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、ＣＨＳ）、１０．２（ｂｓ、ＮＯＨ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｓｙｎ異性体）δ ２１．０（ＣＨ３）、３７．９（ＣＨ２）、３８．２（ＣＨ２）、３８．４（ＣＨ）、４６．０（ＣＨ３）、４６．６（ｂｓ、（ＣＨ２）、）、５１．７（Ｃ）、５２．６（ＣＨ２）、５３．８（ＣＨ２）、１６３．８（Ｃ）．
【０１９５】
（ｃ）２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミンの合成：室温で窒素下の乾燥テトラヒドロフラン（４５ｍｌ）中水素化アルミニウムリチウム（１．００ｇ、２６．３５ｍｍｏｌ）及び塩化アルミニウム（０．１１０ｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（１．２４ｇ、５．７９ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。室温での撹拌を３日間継続した。その後、反応混合物を冷却し（水−氷浴）、水（３．０ｍｌ）、次いで水酸化ナトリウム水溶液（１５％、４．０ｍｌ）、その後水（４．０ｍｌ）をゆっくりと添加した。沈殿物をろ過し、少量のジクロロメタンで洗浄した。混合したろ過液及び洗浄液を蒸発させて油状物を得、それをシリカゲルカラムを用いて１０％メタノール−８９％ジクロロメタン−１％アンモニアで溶出したクロマトグラフィーで精製し、油状物としてアミンを得た（０．４３０ｇ、収率３７％）。１Ｈ ＮＭＲデータは、生成物が２対のジアステレオ異性体からなり、一方の対が他方より豊富に存在していることを示す。以下のデータでは、＊は、より豊富に存在する異性体を示し、＃は、それほど豊富に存在していない異性体を示す。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２５＊（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、ＣＨ３Ｃ）、１．３１＊（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、ＣＨ３Ｃ）、１．６０〜２．０８（ｍ、４Ｈ）、１．７２（ｍ、ＣＨ２ＣＮＨ２の１つ）、２．０８〜２．４５（ｍ、２Ｈ）、２．１８（ｄｄ、ＣＨ２ＣＮＨ２の１つ）、２．２９（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．６７（ｍ、２Ｈ）、３．００＊（ｍ、ＣＨＳ）、３．１０（ｍ、ＣＨＮＨ２）、３．３７＊（ｍ、ＣＨＳ）；ＧＣ−ｍｓ ｍ／ｚ ２０１（Ｍ＋１）＋、１８４（Ｍ−ＮＨ２）＋。
【０１９６】
（ｄ）Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオノアミド（ＡＦ７３１）の合成。室温のジクロロメタン（２０ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イルアミン（０．３７５ｇ、１．８７２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジクロロメタン（８ｍｌ）中１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．５２０ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液を、その後ジクロロメタン（１５ｍｌ）中３−インドールプロピオン酸（０．４５８ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で３日間撹拌した。形成された固形物をろ過し、少量のジクロロメタンで洗浄し、混合したろ過液及び洗浄液を蒸発させて発泡物を得、それをシリカゲルカラムのクロマトグラフィーで精製した。１％アンモニアを含有するジクロロメタン中５〜７％メタノールの混合溶媒で溶出することにより、最初に生成物を異性体の混合物として得（３２５ｍｇ、収率４６．７％）、次に未反応のアミン（９０ｍｇ）を得た。１Ｈ−ＮＭＲデータは、生成物が２対のジアステレオ異性体からなり、一方の対が他方より豊富に存在していることを示す。以下のデータでは、＊は、より豊富に存在する異性体を示し、＃は、それほど豊富に存在していない異性体を示す。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ０．９９＃（ｄ、Ｊ＝６．９、ＣＨ３Ｃ）、１．１９＊（ｄ、Ｊ＝６．６、ＣＨ３Ｃ）、１．５３及び２．０５（２ｍ、ＣＨ２ＣＨＮＨ）、１．６０〜２．１８（ｍ、４Ｈ）、２．１８〜２．８５（ｍ、２Ｈ）、２．２８＃（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．３０＊（ｓ、ＣＨ３Ｎ）、２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．９５＊（ｍ、ＣＨＳ）、３．１３（ｔ、２Ｈ）、３．５０＃（ｍ、ＣＨＳ）、４．２４＊（ｍ、ＣＨＮ）、４．５１＃（ｍ、ＣＨＮ）、５．２８＊（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、ＮＨＣＯ）、５．５５＃（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、ＮＨＣＯ）、７．０３＊（ｄ、Ｊ＝２．３Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、７．０４＃（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、７．１１（ｔ、１Ｈ Ａｒ）、７．２０（ｍ、１Ｈ Ａｒ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ Ａｒ）、８．２２（ｂｓ、ＮＨ インドール）。
【０１９７】
実施例２６：（３Ｅ）−２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン−Ｏ−［３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］オキシム（ＡＦ７３３）
【０１９８】
【化７５】
カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（０．１９ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）中３−インドールプロピオン酸（０．２２ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を室温で０．５時間撹拌し、その後ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オンオキシム（０．２３ｇ、１．２ｍｍｏｌ、Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｕｌｌ．１９９５年、４３巻、８４２〜８５２頁の手順により調製した）を添加した。反応混合物を、室温で４時間、その後４５℃で８時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン（８０ｍｌ）を添加し、混合物を水（１０ｍｌ）で洗浄した。２つの相を分離し、水相をジクロロメタン（３０ｍｌ）で抽出した。有機相を混合し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過液を減圧下で濃縮した。残留物を、Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎシステム（Ｉｓｃｏ，Ｉｎｃ社）を用いてフラッシュクロマトグラフィーで精製し（ＨＰ１２−ｇｏｌｄシリカカラム、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）、その後Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈ Ｃｏｍｐａｎｉｏｎシステム（Ｉｓｃｏ，Ｉｎｃ社）を用いてフラッシュクロマトグラフィーでさらに精製した（ＨＰ１２−ｇｏｌｄシリカカラム、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ １２０／１０／１）。残留物をエーテル中で粉末化して、ＡＦ７３３（１０４ｍｇ）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１７（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６０（ｄ、Ｊ＝７．７３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝７．９８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．１９（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．７６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１２（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．４３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０４（ｄ、Ｊ＝２．１１Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．５６（ｑ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、３．１８（ｔ、Ｊ＝７．３７Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．８３（ｔ、Ｊ＝７．４１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＯＣＨ２）、２．４０（ＡＢｑ、Ｊ＝１８．６Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．５〜２．３（ｍ、４Ｈ）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、１．７４（２ｍ、３Ｈ）、１．５（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｄ、Ｊ＝６．３６Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ １７３．４（Ｃ）、１７１．０（Ｃ）、１３６．５（Ｃ）、１２７．３（Ｃ）、１２２．２（ＣＨ）、１２２．１（ＣＨ）、１１９．５（ＣＨ）、１１８．８（ＣＨ）、１１４．５（Ｃ）、１１１．４（ＣＨ）、７８．７（Ｃ）、７２．５（ＣＨ）、５２．５（ＣＨ２）、５２．２（ＣＨ２）、４６．１（ＣＨ３）、４０．０（ＣＨ２）、３７．４（ＣＨ２）、３４．４（ＣＨ２）、３３．７（ＣＨ２）、２０．９（ＣＨ２）、１９．５（ＣＨ３）ｐｐｍ。
【０１９９】
実施例２７：（Ｄ）−２−アミノ−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン（ＡＦ７２８）の合成
【０２００】
【化７６】
１）室温のジクロロメタン（１００ｍｌ）中２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカン（０．９７ｇ、５．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．４４ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を添加し、その後Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン（１．８８ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、室温で４８時間撹拌した。反応中に、白色固形物が沈殿した。ろ過した後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、（Ｒ）−３−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−３−オキソ−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．１ｇ）を固形物として得た。
【０２０１】
２）室温のジクロロメタン（２０ｍｌ）中（Ｒ）−３−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−３−オキソ−プロピオン酸ｔｅｒｔブチルエステル（０．９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１．２ｍｌ、１６．２ｍｍｏｌ）を添加した。その結果生じた溶液を、Ｂｏｃ保護基が完全に離脱するまで室温で撹拌した。反応混合物をジクロロメタン（２０ｍｌ）で希釈し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１レジン（２０ｇ；Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ９（２００５年）４、２９１〜２９３頁）で１時間処理し、ろ過し、ジクロロメタン（２０ｍｌ）で洗浄した。混合したろ過液を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９０／１０／１）で精製して、固形物として表題化合物を得た（０．１ｇ）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ）δ ８．１４（ｂｒ ｓ、１Ｈ、ＮＨ−インドール）、７．６２（ｄ、Ｊ＝７．６５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．３８及び７．３７（２ｄ、Ｊ＝７．９６Ｈｚ及びＪ＝７．８８Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣ ａｒｏｍ）、７．２２（ａｐｐ ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．１０（ａｐｐ ｄｔ、Ｊ＝１．０、７．４Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ ａｒｏｍ）、７．０９及び７．０６（２つのｄ、Ｊ＝２．２８Ｈｚ及びＪ＝２．２５Ｈｚ １Ｈ、ＣＨＮＨ ａｒｏｍ）、５．４８、４．９８（２ｑ、Ｊ＝６．２及びＪ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ３）、４．４２、３．６９（２ｄ、Ｊ＝１２．０及びＪ＝１１．６Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、３．９８及び３．９２（２ｔ、Ｊ＝７．３及びＪ＝７．０５Ｈｚ、１Ｈ、ＣＨＣＨ２）、３．１２（ｍ、２Ｈ、ＣＨＣＨ２）、２．８０（ｄ、Ｊ＝１１．４Ｈｚ、０．７２Ｈ、ＣＨＨＮＣＯ）、２．６（ｍ、２Ｈ）、２．３〜２．２（ｍ、１Ｈ）、２．２６及び２．２５（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨ３）、２．１５〜２．０（ｍ、１Ｈ）、１．５２、１．３８（２ｄ、Ｊ＝６．３及びＪ＝６．２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ３−ＣＨ）ｐｐｍ。
【０２０２】
生物学的アッセイ 式Ｉの化合物の生物活性を、様々なアッセイを使用して試験した。
【０２０３】
ＧＰＣＲ（例えば、ｍＡＣｈＲサブタイプ）で安定的に形質移入された細胞培養中での細胞内カルシウムイオン（Ｃａ２＋）動員アッセイは、試験化合物の活性（アゴニスト的又はアンタゴニスト的）並びに特定の受容体サブタイプに対するその選択性に関する情報を両方とも提供することができる。生細胞中の遊離細胞内Ｃａ２＋のレベルを、蛍光Ｃａ２＋指示薬、Ｆｌｕｏ−４ ＮＷ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社製、カタログ番号３６２０６）の蛍光をモニターすることにより決定した。この方法は、ＧＰＣＲ薬理学及び機能を特徴付けるのに有用である。Ｃａ２＋測定は、インジェクタ及びピペッタ装置を備えたＮＯＶＯｓｔａｒ（登録商標）プレートリーダ（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製、オッフェンブルク、ドイツ）を使用して実施した。実験の１日前に、ムスカリン受容体サブタイプＭ１〜Ｍ５のうちの１つで安定的形質移入された細胞を回収し、１０％ウシ胎仔血清、ＭＥＭＥ非必須アミノ酸（ＧＩＢＣＯ社製、英国）、グルタミン、ペニシリン、ストレプトマイシン、アンホテリシン、及びＧ４１８（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、イスラエル）で補完された培養培地（ダルベッコ変法イーグル培地、ＧＩＢＣＯ社製、英国）ですすぎ、４０，０００細胞／ウエルの濃度で、黒色壁透明光学底９６穴プレート（Ｎｕｎｃ社製、ロチェスター、ニューヨーク州、米国）に均等に入れた。実験の当日には、細胞は十分にコンフルエントである。増殖培地を取り除き、２．５ｍＭプロベネシド（４−ジプロピルスルファモイル）安息香酸）を含有する８０μｌのローディング緩衝液を注意深く添加した（ローディング緩衝液は、ＦＬＵＯ−４ＮＷカルシウムアッセイキットの手引書に従って調製した）。細胞プレートを、３７℃で３０分間インキュベートし、その後室温でさらに３０分間インキュベートした。試験化合物が細胞内Ｃａ２＋（Ｃａ２−ｉ）に与える効果を評価するために、幾つかの実験では、ＥＧＴＡ［エチレングリコール四酢酸］を使用して細胞外カルシウム源を排除した。ＥＧＴＡ（ＨＢＳＳ（ハンクス緩衝食塩水）に溶解された、１０μｌの５０ｍＭ溶液）を、ＮＯＶＯｓｔａｒインジェクタ装置を使用して各ウエルに自動添加し、その後０．５分間振盪し（１ｍｍ幅、６００ｒｐｍ）、その後さらに１０分間インキュベートした。その後、ＨＢＳＳ単独又はＨＢＳＳに溶解した試験化合物を、ＮＯＶＯｓｔａｒロボットピペッタ装置を使用して、別々のウエルに順次添加した（１０μｌ）。蛍光強度を、４８５ｎｍ（帯域幅１０ｎｍ）の励起波長及び５２０ｎｍ（帯域幅１０ｎｍ）の発光、カットオフ５１５ｎｍを使用して、各ウエルにつき２５秒間、０．５秒間隔で測定した。
【０２０４】
ｍＡＣｈＲのサブタイプ、特にＭ３及びＭ５ ｍＡＣｈＲと比べたＭ１ ｍＡＣｈＲの選択性を評価するために、混合活性、例えばそれぞれＭ１アゴニスト的及びＭ３アンタゴニスト的又はＭ１アゴニスト的及びＭ５アンタゴニスト的特性を有するリガンドを使用して、アッセイを較正した。これにより、細胞に基づくアッセイにおいて、様々な予備受容体による影響を排除することができる。
【０２０５】
化合物ＡＦ７１０、ＡＦ７１０Ｂ、ＡＦ７１１、ＡＦ７１１Ａ、ＡＦ７１８Ｃ、ＡＦ７２１、ＡＦ７３０、ＡＦ７３０Ｉ、ＡＦ７３０ＩＩ、及びＡＦ７３３は、Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対して部分的アゴニストであることが観察され、１００μＭにおける対カルバコール（完全なムスカリンアゴニスト、１００％）の相対的アゴニスト活性は、以下の順序である：ＡＦ７３３（９０％）＞ＡＦ７３０Ｉ（７４５）＞ＡＦ７１０Ｂ＞（６６％）ＡＦ７１１Ａ（４５％）＞ＡＦ７１８Ｃ＞（４３％）＞ＡＦ７１０（４０％）≧ＡＦ７３０（４０％）＞ＡＦ７３０ＩＩ（３６％）＞ＡＦ７１１（１９％）＞ＡＦ７２１（１３％）（表を参照）。これらアゴニストのアゴニスト効果は、Ｍ１選択的なアンタゴニストであるピレンゼピンにより遮断された。ＡＦ７１０Ｂは、Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対して高度に選択的であることが見出され、それぞれＭ２〜Ｍ５ ｍＡＣｈＲサブタイプに対する検出可能なアゴニスト活性を示さなかった。
【０２０６】
化合物ＡＦ７０６、ＡＦ７１２〜ＡＦ７１６、ＡＦ７２６、及びＡＦ７２７（１００μＭ）は、カルバコールの濃度曲線の右方移行により明らかなように、Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対するアンタゴニスト活性を示した（表）。
【０２０７】
オルソステリック又はアロステリックなＭ１ムスカリンアゴニスト活性は、アロステリックなＭ１調節因子ブルシンの存在下又は非存在下で試験することができる（Ｓｕｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ２００３年、１００巻：１３６７４〜１３６７９頁）。Ｍ１ ｍＡＣｈＲで安定的に形質移入された細胞培養又はＭ１ ｍＡＣｈＲ及びヒトアミロイド前駆タンパク質６９５の両方で安定的に形質移入されたチャイニーズハムスター卵巣細胞をブルシン（１００μＭ）で事前インキュベーションすることにより、それらの濃度反応曲線がそれぞれ左方移行したことにより示されるように、カルバコールなどのオルソステリックなアゴニストにより誘導される細胞内カルシウムイオンの上昇に対して強力な増強効果が引き起こされた。ブルシンは、ＡＦ７１０又はＡＦ７１０Ｂのいずれに対してもそのような効果を示さず、ＡＦ７１０Ｂ効果のわずかな阻害を誘導した。まとめると、これらの結果は、ＡＦ７１０及びＡＦ７１０Ｂが、Ｍ１ ｍＡＣｈＲのオルソステリック部位と相互作用せず、したがってアロステリックなアゴニストであることを示す。図１を参照されたい。
【０２０８】
３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）アッセイでは、最終的に細胞死に結び付くプロセスを表すミトコンドリア活性化を含む、細胞内で起こる変化が測定される（Ｆａｇａｒａｓａｎら、Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔ．１９９６年、１巻：３９８〜４０３頁）。このアッセイは、β−アミロイド媒介性細胞死の機序の特異的な初期指標である（Ｓｈｅａｒｍａｎら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ １９９４年、９１巻：１４７０〜７４頁）。このアッセイを使用して、化学式Ｉ及びＩＩの化合物を評価した。ラット褐色細胞腫（ＰＣ１２）細胞を１０，０００細胞／ウエルの濃度で９６穴プレートに播種し、５％ウシ胎仔血清（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０４−１２１−１Ａ）、１０％加熱不活化ウマ血清（Ｇｉｂｃｏ社製、カタログ番号２６０５０）、Ｌ−グルタミン２００ｍＭ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０３−０２０−１Ｃ）、ペニシリン１００００Ｕ／ｍｌ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０３−０３１−１Ｃ）、及びアムホテリシンＢ ５０ｍｇ／ｍｌ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製、カタログ番号０１−０２９−１Ｃ）で補完されたダルベッコ変法イーグル培地（Ｇｉｂｃｏ社製、カタログ番号２１９６９）中で維持した。翌日、培地を無血清培地に交換し、試験化合物の存在下又は非存在下で５μＭのβ−アミロイド２５〜３５（Ｈ−１１９２．０００１、Ｂａｃｈｅｍ社製）で、細胞を処理した。化合物は、それぞれ０．１ｎＭ〜１００μＭの範囲の終濃度で６時間試験した。３−インドール−プロピオン酸（３−ＤＰＡ、カタログ番号２２００２７、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社製）は、基準酸化防止剤としての役割を果たした。３−ＩＰＡ、ＡＦ７１０、及びＡＦ７１１は、一連の濃度（１０μＭ〜１ｎＭ）で、Ａβ２５〜３５（４０又は４２個のアミノ酸を有するベータアミロイドに由来するアミノ酸（ＡＡ）２５〜３５の配列を有するペプチド）により誘導される毒性から細胞を保護した。これらの結果は、ＡＦ７１０及びＡＦ７１１が、酸化防止特性を有することを示す。
【０２０９】
試験化合物と共にインキュベーションした後のα−ＡＰＰ分泌研究を、Ｈａｒｉｎｇら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、１９９８年、７１巻：２０９４〜１０３頁に記述されているように実施した。ヒトＡＰＰ６９５及びヒトＭ１ ｍＡＣｈＲで同時形質移入されたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又はラットＭ１ ｍＡＣｈＲで安定的に形質移入されたラット褐色細胞腫細胞（ＰＣ１２）を、２×１０６細胞／ウエルの密度で６穴プレートに接種した。１日後に、細胞を無血清培地で２回洗浄し、０．１ｎＭ〜１００μＭの範囲の種々の濃度の試験化合物で処理した。各プレートにおいて、１つのウエルは、対照（未処理）としての役割を果たし、１つのウエルは、細胞が１又は１００μＭカルバコール（
ＣＣｈ）（最大応答）のいずれかで処理された陽性基準としての役割を果たした。１時間後、馴化培地を冷却エッペンドルフチューブに収集し、このチューブには、αＡＰＰ放出量の定量用プロテアーゼ阻害剤カクテル（０．１ｍＭ フェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）；５μｇ／ｍｌロイペプチン；５μｇ／ｍｌペプスタチン、及び５単位／ｍｌアプロチニン）が含まれていた。各試料のタンパク質内容物を、Ｃｅｎｔｒｉｃｏｎチューブ（Ａｍｉｃｏｎ社製、ベバリー、マサチューセッツ州）を使用して濃縮した。タンパク質定量後（Ｂｉｏ−Ｒａｄ社製タンパク質アッセイ）、同量のタンパク質（３０μｇタンパク質／レーン）を、４〜１２％のＮｕＰａｇｅ Ｎｏｖｅｘ Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製、カリフォルニア州）に負荷し、その後電気泳動にかけた。電気泳動の完了時に、ゲルを、Ｈｏｅｆｅｒ社製半乾燥移動ユニット（Ｓｅｍｉ−Ｐｈｏｒ、Ｈｏｅｆｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｓｔ．社製 サンフランシスコ、カリフォルニア州）を使用して、イムノ−ブロットＰＶＤＦ膜（０．２μｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂ社製、カリフォルニア州）にブロッティングした。その後、膜を、０．１％ Ｔｗｅｅｎ−２０（Ｓｉｇｍａ社、カタログ番号Ｐ５９２７）を有し、カルシウム及びマグネシウムを有していないダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ；Ｇｉｂｃｏ社製、カタログ番号１４２００）に溶解された５％脂肪粉乳でブロッキングした。ヒトＡＰＰ６９５及びＭ１ ｍＡＣｈＲ ＡＰＰバンドで同時形質移入されたＣＨＯ細胞を、抗アミロイドベータタンパク質（１：１０００、モノクローナル６Ｅ１０抗体、ＭＡＢ１５６０、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ社製）及びペルオキシダーゼ結合ウサギ抗マウスＩｇＧ（１：５，０００；Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ社製、ペンシルベニア州）を使用して探索した。Ｍ１ ｍＡＣｈＲ ＡＰＰバンドで安定的に形質移入されたＰＣ１２細胞を、抗アルツハイマー前駆タンパク質Ａ４（１：４，０００；モノクローナル２２Ｃ１１抗体、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ社製）及びペルオキシダーゼ結合ウサギ抗マウスＩｇＧ（１：２０，０００；Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ社製、ペンシルベニア州）を使用して探索した。よく洗い流した後、膜を、Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｌｉｇｈｔｎｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社製、マサチューセッツ州）で処理し、その後ＳｕｐｅｒＲＸフィルム（Ｆｕｊｉ Ｍｅｄｉｃａｌ社製Ｘ線フィルム、東京、日本）に露光した。総ＡＰＰバンドの定量的決定は、Ｓｃｉｏｎ Ｉｍａｇｅプログラム（ＮＩＨ、ベテスダ、米国）により実施した。対照及びＣＣｈの試料を並行してアッセイし、したがって別々の実験からデータを蓄積することが可能であった。
【０２１０】
ＡＦ７１０は、０．１ｎＭ〜１μＭの範囲の濃度にわたって、形質移入されたＣＨＯ及びＰＣ１２細胞中のαＡＰＰ放出を増強した。形質移入されたＰＣ１２細胞で観察された高レベルのαＡＰＰは、形質移入されなかったＰＣ１２細胞では観察されなかった。
【０２１１】
未処置対照細胞との比較では、同時形質移入されたＣＨＯ細胞中の最大αＡＰＰ分泌量は、以下の順序で増強された：ＡＦ７１０Ｂ（０．０１μＭ ２２５％）＞ＡＦ７１０（０．１μＭ １７５％）＞ＡＦ７１０Ａ（１μＭ １２５％）。
【０２１２】
ＧＳＫ−３βレベルの検出は、Ｆａｎｇら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２００２年、２２巻：２０９９〜１１０頁）らに記述されているものと類似したプロトコールを使用するが、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社、米国から購入したホスホ−ＧＳＫ３β（Ｓｅｒ９）、つまりＧＳＫ３βの不活性形態（Ｄｏｂｌｅら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．２００３年、１１６巻：１１７５〜８６頁）に対して選択的な抗体を使用して、試験化合物（＋／−Ａβ２５〜３５、２０μＭ）で処理されたＭ１ ｍＡＣｈＲ細胞培養で安定的に形質移入されたラット褐色細胞腫細胞（ＰＣ１２）で、ウエスタンブロッティングを使用して評価した。この抗体は、非リン酸化ＧＳＫ−３β（最大１μｇ）を検出せず、ＧＳＫ−３αと交差反応しない。抗ＧＳＫ−３（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）は、ＧＳＫ−３α及びＧＳＫ３βの両方に反応的なリン酸化依存性モノクローナル抗体である。同じ実験で、タウタンパク質のリン酸化状態を、タウの非リン酸化エピトープを認識するマウス抗タウ−１モノクローナル抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ社製、カタログ番号ＭＡＢ３４２０）を使用して研究した。Ａβ２５〜３５（２０μＭ）が存在することにより、ＧＳＫ３βの不活性形態を標識するホスホ−ＧＳＫ３β（Ｓｅｒ９）による染色の４０〜５０％減少がもたらされた。これは、活性形態の存在量が上昇したことを示す。ＡＦ７１０Ｂ（１００μＭ〜１０ｎＭ）は、Ａβ２５〜３５（２０μＭ）により誘導されたＧＳＫ−３βの過剰活性化を阻害した。同じ実験で、Ａβ２５〜３５（２０μＭ）は、タウ−１及びＡＦ７１０Ｂ（１００μＭ〜１０ｎＭ）の染色を４０〜６０％減少させ、これら効果を対照レベルに回復させた。まとめると、これらの結果は、ＡＦ７１０Ｂが、ＧＳＫ３βの過剰活性化及びタウタンパク質の過剰リン酸化を減少させたことを示す。
【０２１３】
結合研究を、Ｆｉｓｈｅｒら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐｔｌ．Ｔｈｅｒａｐ．１９９１年、２５７巻：３９２〜４０３頁に記述されているように、ラット脳ホモジネート（Ｍ１ ｍＡＣｈＲが豊富な皮質）を使用して実施した。大脳皮質を解剖し、氷上に置き、清浄し、計量し、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液、２ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４に移した。組織を、ポリトロンホモジナイザーを使用して、緩衝液（１：１０重量／容積）中でホモジナイズし、−７０℃の凍結／解凍サイクルの後、ホモジネートを４℃で１０分間３５，０００ｇで遠心分離した。上清を取り除き、ペレットをＴｒｉｓ緩衝液に１：６（重量／容積）の比率で再懸濁した。ホモジネートを各々１ｍｌの等量に分割し、その後使用するまで−７０℃で保管した。試験化合物がｍＡＣｈＲに結合する結合特性は、Ｍ１選択的アンタゴニストである［３Ｈ］ピレンゼピン（［３Ｈ］ＰＺ）；比活性８６Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ社、ＭＡ、マサチューセッツ州、米国から購入）を使用してラット皮質膜で研究した種々の濃度の試験化合物（例えば、１０−９〜１０−４Ｍの終濃度）を、［３Ｈ］ＰＺ（各個別の実験での終濃度は、４〜６ｎＭの範囲である）、１ｍＭ ＥＤＴＡ及び２ｍＭ ＭｎＣｌ２、並びに皮質膜（上記で指定されているように希釈した）を全て一緒に０．２ｍｌの最終容積で含有する２０ｍＭ Ｔｒｉｓ／Ｍｎ緩衝液、ｐＨ７．４を含有する１３×１００ｍｍガラス管にピペットで移した。全体の結合及び非特異的結合を、それぞれ競合リガンドの非存在下又は１０μＭアトロピンの存在下で決定した。アッセイは全て、２５℃で１時間、三重反復で実施した。インキュベーション期間の終了時に、管を氷浴に浸漬し、それらの内容物をろ過した。結合した物質を、Ｂｒａｎｄｅｌ社製システム（Ｍ−２４Ｒ、ゲーサーズバーグ、メリーランド州、米国）を使用して、事前に浸漬された（０．５％ポリエチレンイミンに１時間）ＧＦ／Ｂフィルター、３１７×５７ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎ社製、タマル、エルサレム、イスラエル）で捕捉した。その後、フィルターを乾燥し、バイアルの中に押し出した。シンチレーション液体（生分解性計数用シンチレーション物質、Ａｍｅｒｓｈａｍ社製、イリノイ州、米国）を添加し、放射能を、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社製ＴｒｉＣａｒｂ ２８００型液体シンチレーション計数器を使用して測定した。競合曲線、ＫＨ、ＫＬ値を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアプログラム、バージョン３．０を使用して導出した。この研究では、ＡＦ７１０Ｂは、ラット皮質膜中でＭ１ ｍＡＣｈＲに対して２部位結合曲線を示し、２つの結合部位間で強度が５桁異なっており、より高親和性の結合部位ではＫＨ＝０．２３ｎＭ（３７％）であり、より低親和性の結合部位ではＫＬ＝３４．５μＭ（６３％）である。
【０２１４】
８０種の膜貫通及び可溶性受容体、イオンチャネル、及びモノアミン輸送体の幅広いコレクションで構成されるハイスループットプロファイリングを、ＡＦ７１０Ｂに対して実施した。それは、薬物候補を潜在的に限定するためだけでなく、非特異的活性を特定するための情報を提供することを特に目的としている。得られた結果は、ＡＦ７１０Ｂが、以下のＭ１及びＭ２ ｍＡＣｈＲ、並びに他の受容体に結合することを示す。この研究のさらなる延長では、これら受容体のほとんどに関する機能的研究を実施した。下流の神経化学的測定値（例えば、αＡＰＰ、ＧＳＫ３β、タウ）に対するＡＦ７１０ＢのＭ１ ｍＡＣｈＲ媒介性効果が、他のＧＰＣＲとの相互作用と比べて３〜５桁低い濃度で検出されたことが判明した。
【０２１５】
ラットにおける急性毒性研究：ＡＦ７１０Ｂ（１、１０、及び５０ｍｇ／ｋｇ）及び対照として不活性媒体を、３匹の雄＋３匹の雌ラット／用量の群に経管栄養により経口投与し、考え得る毒性又は他の明白な効果について評価した。投与の当日に、投与後の最初の４時間は定期的に、及びそれぞれの作業日の終了時に臨床検査を注意深く実施及び記録した。その後、動物を検査し、臨床的兆候を１４日間の観察期間全体にわたって少なくとも１日１回記録した。観察には、皮膚、柔皮、目、粘膜、分泌及び排出（例えば下痢）の発生、並びに自律神経活性（例えば、涙液分泌、流涎、立毛、瞳孔サイズ、異常な呼吸パターン）の変化が含まれていた。歩行、姿勢、及び取り扱いに対する反応における変化、並びに奇異な行動、身震い、痙攣、睡眠、及び昏睡の存在も検査した。試験物又は試験物媒体対照で処理された動物のいずれにおいても、急性経口（ＰＯ）経管栄養投与の１４日後に実施された計画的安楽死の前に、死亡は発生しなかった。処理に関連した明白な有害反応は、５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルの試験物に曝露され、投与後１００分間十分に回復させた１匹の雄ラットに運動活性のわずかな減少及びわずかな呼吸困難が投与５分後に認められたことを除いて、それぞれの投与日又は１４日間の全観察期間中、いかなる試験物又は試験物媒体対照処理動物にも観察されなかった。現行の研究に適用された経時的な方法を考慮し、可能な限りの標準化を行うために、全ての体重及び体重増加の値、投与日と比較したそれぞれの体重変化のパーセントを各動物及び群毎に計算した。全ての試験物処理群対媒体対照群には、雌ラット（１０ｍｇ／ｋｇの用量レベル）の１つの群の群平均体重変化パーセントに統計的に有意な減少（ｐ＜０．０５）が投与７日後に認められたことを除いて、統計的な有意差は認められなかった。計画的屠殺後に、全て動物を十分に詳細な剖検及び総体的病理学検査にかけた。剖検では、全ての動物を、身体の外部表面、全ての開口部、頭蓋、胸腔及び腹腔、並びにそれらの内容物を含む徹底的な検査にかけた。急性経口（ＰＯ）経管栄養投与の１４日後に実施された計画的剖検時には、全ての試験物又は試験物媒体処理動物中に、肉眼的に明白な総体的病理所見はなかった。ラットに対する急性経口（ＰＯ）経管栄養投与後の試験物ＡＦ７１０Ｂの最大耐用量（ＭＴＤ）を計算した。
【０２１６】
トリヘキシフェニジルは、血液脳関門と交差し、記憶及び学習障害を誘導する選択的Ｍ１ムスカリンアンタゴニストである（Ｂｙｍａｓｔｅｒら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２６７巻：１６〜２４頁、１９９３年；Ｒｏｌｄａｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２３０巻：９３〜９６頁、１９９７年；Ｋｉｍｕｒａら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８３４巻：６〜１２頁、１９９９年）。したがって、この化合物の全身投与は、学習及び記憶プ
ロセスにおける脳Ｍ１ムスカリン受容体の役割を研究する薬学的ツールとして有用である。下記の実験では、未感作ウィスターラットを使用した。受動的回避（ＰＡ）課題は、訓練（獲得）局面及び保持局面で構成される。訓練手順では、各ラットを照明付小区画に個別に収納し、６０秒間の馴化／順応後に大区画へのドアを開け、進入までの待ち時間を測定した（初期待ち時間）。暗所区画への進入直後にドアを閉じ、グリッド床を介して回避不能なフットショックを与えた（０．６ｍＡで３秒間）。初期待ち時間には、１８０秒のカットオフを使用した。１８０秒以内に進入（通過）しなかった動物を、実験から除外した。獲得試行の後、ラットをホームケージに返した。受動的回避課題の保持は、ラットを再び明所区画に収納し、６０秒間の順応期間後にドアを開け、暗色区画に再び進入するまでの待ち時間を測定することにより、２４時間後に測定した。保持待ち時間には、３００秒のカットオフを使用した。３００秒以内に通過しなかった動物を装置から取り除き、それらについては、３００秒の待ち時間を記録した。ラットを２群に分割した。ショックを与える３０分前に、第１の群（Ｎ＝４０）を、トリヘキシフェニジル（５ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ）で処理し、第２の群（Ｎ＝３０）を、再蒸留水（ＤＤＷ １ｍｌ／ｋｇ、ｓ．ｃ）で処理した。各群では、ラットを４つの処理サブグループに分割し（トリヘキシフェニジル処理群はＮ＝９〜１１、及びＤＤＷ処理群はＮ＝７〜８）、ショックを与える６０分前に、１つのサブグループをＤＤＷ（１０ｍｌ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）で処理し、３つのサブグループをＡＦ７１０Ｂ（０．０１、０．０３、及び０．１ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）で処理した。トリヘキシフェニジルと処理との間に有意な相互作用が見出された（Ｆ（２／６３）＝４．０、ｐ＜０．０２３）。ＤＤＷで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間（５４．２２±１４．６０秒）は、ＤＤＷで処理された対照ラットの保持待ち時間より有意に短かった（２４２．００±３０．６０秒）（ｐ＜０．００１）。しかしながら、ＡＦ７１０Ｂ ０．０１ｍｇ／ｋｇ（２５２．５０±３２．３０秒）及び０．０３ｍｇ／ｋｇ（１７８．８２±３２．７０秒）で処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間は、ＤＤＷで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間より有意に長かった（ｐ＜０．０１〜０．００１）。ＡＦ７１０Ｂ ０．１ｍｇ／ｋｇで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間（１２２．００±３４．６０秒）は、ＤＤＷで処理されたトリヘキシフェニジルラットの保持待ち時間と変わらなかった。したがって、ＡＦ７１０Ｂは、０．０１ｍｇ／ｋｇ、ｐｏ（０．０２８μｍｏｌｅ／ｋｇ、ｐｏ）の用量でさえ有効であることが見出された。
【０２１７】
式Ｉの化合物がＣＮＳに輸送されることになる可能性が高いかどうかを評価するために、表１に示されている化合物の分配係数を計算した。分配係数は親油性の尺度であり、「ｌｏｇ Ｐ」値として数値的に表現することができ、ｌｏｇ Ｐは、オクタノール−水又は緩衝液間の分配係数のｌｏｇである。ｌｏｇ Ｐ値は、ＨＰＬＣ法を含む実験的な方法によるか、又は予測計算法によるかのいずれでも決定することができる。ｌｏｇ Ｐの値が高いほど、目的化学物質の親油性、したがって脂溶性はより大きくなる。ｌｏｇ Ｐが高い物質は、水より油脂により良好に溶解する。これにより、受動拡散により体内の脂質（脂肪に基づく）膜に進入するそれらの能力が増強され、これによりそれらの吸収能力が増強される。多くの薬物は１〜４のｌｏｇ Ｐ値を有しており、経口送達法に好適となっている。したがって、ｌｏｇ Ｐ値は、薬物が迅速にＣＮＳに接近することができるかどうかに関する一般的な指針を提供する。表１に示されている化合物のｌｏｇ Ｐは、分子特性の計算用パッケージソフトである「Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ」によりインターネット上で利用可能なプログラムを使用して計算し（ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社）、全ての場合で１〜４の間であった。
【０２１８】
【表１】
＊ 分子特性の計算用パッケージソフトである「Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ」によりインターネット上で利用可能なプログラムを使用して計算した（Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社、ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ）。
＃ Ｍ１ ｍＡＣｈＲに対する効果は、上述のように細胞内Ｃａイオンの動員により評価した。Ｍ１ ｍＡＣｈＲは、特定のＧＰＣＲを表す。
【０２１９】
本発明は、上記の例に見出される化合物に限定されるものではなく、上記の合成スキームに示されている手順を使用して、本発明の範囲以内にある他の多くの化合物を調製することもできる。これら方法を使用する式Ｉのさらなる化合物の調製は、化学分野の当業者であれば明白であろう。
【０２２０】
本発明は、その幾つかの実施形態に具体的に言及して詳述されているが、当業者であれば、本発明の趣旨及び範囲内で変異及び改変を達成することができることを理解するだろう。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉのスピロ化合物又はその薬学的に許容される塩。
【化１】
（式中、Ａは、
【化２】
【化３】
【化４】
【化５】
及び
【化６】
からなる群から選択され、
式中、全ての構造において、「Ｃ」と示されている炭素はスピロ炭素を示し、 Ｒは、Ｈ及び随意に置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、 ｎ及びｐは、各々独立して０、１、２、及び３から選択され、ただしｎ＋ｐ＝ｌ、２、又は３であり、
Ｙは、−Ｏ−又は−Ｓ−であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ６は、各出現において各々独立して、Ｈ、随意に置換されたＣ１〜６アルキル、随意に置換されたＣ１〜６アルコキシ、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、及び随意に置換されたフェニルから選択され、
Ｒ５は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、随意に置換されたＣ２〜６アルキニル、随意に置換された置換フェニル、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換されたへテロアリール、随意に置換されたＣ１〜６アルキルへテロアリール、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８、−ＳＯ２−Ｒ９から選択され、Ａが、
【化７】
−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８である場合、
Ｒ８は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜７アルコキシ、随意に置換されたＣ２〜７ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜７アルケニル、随意に置換されたＣ２〜７アルキニル、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、随意に置換されたアリール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換されたＣ２〜３アルケニルインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドリジン、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルイソインドール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインダジオール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインダゾール、随意に置換された−Ｃ１〜６アルコキシインダゾール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルベンズイミダゾール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルベンズイミダゾール、及び随意に置換された−Ｃ１〜６アルコキシベンズイミダゾールから選択され、
Ｒ９は、アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、ヒドロキシル、及びＣＦ３からなる群の１つ又は複数のメンバーにより置換されたアリールである。）
【請求項２】
Ｒがメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｐ及びｎが各々１である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ａが、
【化８】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
Ａが、
【化９】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ａが、
【化１０】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ａが、
【化１１】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ａが、
【化１２】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１がメチルである、請求項１〜８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２がＨである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ３及びＲ４が各々Ｈである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６がＨである、請求項１〜１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
ＹがＳである、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
ＹがＯである、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ５が、随意に置換された−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１〜３）−インドール−３−イルである、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ５が、ｔｒａｎｓ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項２１】
Ａが、
【化１３】
であり、Ｒ５が、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ５が、−ＳＯ２−４−フルオロフェニルである、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ｎ−プロピル）２である、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−（４−ヒドロキシ−３，５−ジ−ｔｅｒｔブチルフェニル）である、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ３である、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
【化１４】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１５】
（（Ｒ）−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１６】
（（Ｓ）−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１７】
１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１８】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【化１９】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピルペンタン−１−オン）、
【化２０】
（（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−メタノン）、
【化２１】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）ブタン−１−オン）、
【化２２】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エタン−１−オン）、
【化２３】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化２４】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパ−２−エン−１−オン）、
【化２５】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化２６】
（（Ｒ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化２７】
（（Ｓ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化２８】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【化２９】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【化３０】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−４−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化３１】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−４−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【化３２】
（４−（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］−デカン）、
【化３３】
（１’，４−ジメチル−６−（３−インドールプロピオニル）−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、及び
【化３４】
（１’，４−ジメチル−６−［３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）］−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、
【化３５】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【化３６】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【化３７】
（３Ｅ）−２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン−Ｏ−［３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］オキシムのうちの１つから選択される請求項１に記載の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項２７】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、（＋）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、（−）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、（＋）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、及び（−）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オンからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれかに記載の化合物、及びその薬学的に許容される担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項２９】
アルツハイマー病を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の有効量の化合物を投与することを含む方法。
【請求項３０】
インスリン抵抗性症候群を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の有効量の化合物を投与することを含む方法。
【請求項３１】
２型糖尿病を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の有効量の化合物を投与することを含む方法。
【請求項３２】
Ｍ１ムスカリン受容体調節因子による治療に感受性である疾患又は症状を治療するための方法であって、その必要がある患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の治療上有効量のａを投与することを含む方法。
【請求項１】
式Ｉのスピロ化合物又はその薬学的に許容される塩。
【化１】
（式中、Ａは、
【化２】
【化３】
【化４】
【化５】
及び
【化６】
からなる群から選択され、
式中、全ての構造において、「Ｃ」と示されている炭素はスピロ炭素を示し、 Ｒは、Ｈ及び随意に置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、 ｎ及びｐは、各々独立して０、１、２、及び３から選択され、ただしｎ＋ｐ＝ｌ、２、又は３であり、
Ｙは、−Ｏ−又は−Ｓ−であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ６は、各出現において各々独立して、Ｈ、随意に置換されたＣ１〜６アルキル、随意に置換されたＣ１〜６アルコキシ、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、及び随意に置換されたフェニルから選択され、
Ｒ５は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜６ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜６アルケニル、随意に置換されたＣ２〜６アルキニル、随意に置換された置換フェニル、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換されたへテロアリール、随意に置換されたＣ１〜６アルキルへテロアリール、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８、−ＳＯ２−Ｒ９から選択され、Ａが、
【化７】
−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ８である場合、
Ｒ８は、随意に置換されたＣ１〜７アルキル、随意に置換されたＣ１〜７アルコキシ、随意に置換されたＣ２〜７ヒドロキシアルキル、随意に置換されたＣ２〜７アルケニル、随意に置換されたＣ２〜７アルキニル、随意に置換されたＣ３〜７シクロアルキル、随意に置換されたアリール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドール、随意に置換されたＣ２〜３アルケニルインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインドリジン、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシインドリジン、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルイソインドール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルコキシイソインドール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルインダジオール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルインダゾール、随意に置換された−Ｃ１〜６アルコキシインダゾール、随意に置換された−（Ｃ１〜６）アルキルベンズイミダゾール、随意に置換された−Ｃ２〜３アルケニルベンズイミダゾール、及び随意に置換された−Ｃ１〜６アルコキシベンズイミダゾールから選択され、
Ｒ９は、アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、ヒドロキシル、及びＣＦ３からなる群の１つ又は複数のメンバーにより置換されたアリールである。）
【請求項２】
Ｒがメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｐ及びｎが各々１である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ａが、
【化８】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
Ａが、
【化９】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ａが、
【化１０】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ａが、
【化１１】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ａが、
【化１２】
である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１がメチルである、請求項１〜８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２がＨである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ３及びＲ４が各々Ｈである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６がＨである、請求項１〜１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
ＹがＳである、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
ＹがＯである、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ５が、随意に置換された−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１〜３）−インドール−３−イルである、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ５が、ｔｒａｎｓ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項２１】
Ａが、
【化１３】
であり、Ｒ５が、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ２−インドール−３−イルである、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ５が、−ＳＯ２−４−フルオロフェニルである、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ｎ−プロピル）２である、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−（４−ヒドロキシ−３，５−ジ−ｔｅｒｔブチルフェニル）である、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２ＣＨ３である、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
【化１４】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１５】
（（Ｒ）−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１６】
（（Ｓ）−１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１７】
１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１−メチル−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化１８】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【化１９】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピルペンタン−１−オン）、
【化２０】
（（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシ−フェニル）−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−メタノン）、
【化２１】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）ブタン−１−オン）、
【化２２】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エタン−１−オン）、
【化２３】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化２４】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパ−２−エン−１−オン）、
【化２５】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、
【化２６】
（（Ｒ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化２７】
（（Ｓ）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化２８】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【化２９】
（３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］−デカン）、
【化３０】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−４−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン）、
【化３１】
（１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］デカ−４−イル）−２−プロピル−ペンタン−１−オン）、
【化３２】
（４−（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−２，８−ジメチル−１−オキサ−４，８−ジアザ−スピロ［４．５］−デカン）、
【化３３】
（１’，４−ジメチル−６−（３−インドールプロピオニル）−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、及び
【化３４】
（１’，４−ジメチル−６−［３−（４−フルオロベンゼンスルホニル）］−スピロ−（３−オキサ−６−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，４’−ピペリジン））、
【化３５】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【化３６】
Ｎ−（２，８−ジメチル−１−チア−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロピオンアミド、
【化３７】
（３Ｅ）−２，８−ジメチル−１−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−オン−Ｏ−［３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパノイル］オキシムのうちの１つから選択される請求項１に記載の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項２７】
（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、（＋）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、（−）−（１−（２，８−ジメチル−１−チア−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン−１−オン）、１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、（＋）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オン、及び（−）−１−（２，８−ジメチル−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−３−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−プロパン−１−オンからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれかに記載の化合物、及びその薬学的に許容される担体、賦形剤、又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項２９】
アルツハイマー病を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の有効量の化合物を投与することを含む方法。
【請求項３０】
インスリン抵抗性症候群を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の有効量の化合物を投与することを含む方法。
【請求項３１】
２型糖尿病を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の有効量の化合物を投与することを含む方法。
【請求項３２】
Ｍ１ムスカリン受容体調節因子による治療に感受性である疾患又は症状を治療するための方法であって、その必要がある患者に、請求項１〜２７のいずれかに記載の治療上有効量のａを投与することを含む方法。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図１Ｂ】
【公表番号】特表２０１２−５１５７６３（Ｐ２０１２−５１５７６３Ａ）
【公表日】平成２４年７月１２日（２０１２．７．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４７０５４（Ｐ２０１１−５４７０５４）
【出願日】平成２２年１月２６日（２０１０．１．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２０１０／００００６４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８４４９９
【国際公開日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【出願人】（５１１１８０５７０）
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年７月１２日（２０１２．７．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１月２６日（２０１０．１．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２０１０／００００６４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８４４９９
【国際公開日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【出願人】（５１１１８０５７０）
【Ｆターム（参考）】
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