観察装置
【課題】本発明は、透明な被観察物を広視野で観察するのに適した観察装置を提供することを目的とする。
【解決手段】本発明の観察装置は、被観察物（１０）から射出した光を結像する結像光学系（１２）と、前記結像光学系（１２）が形成した前記被観察物（１０）の像を撮像する撮像手段（１１）と、明部と暗部とを繰り返し配置してなる面光源で前記被観察物（１０）を照明する照明手段（１４，１５）とを備えたことを特徴とする。面光源の位置と明暗のピッチとが適正に設定されれば、被観察物（１０）の各部分領域は、面光源の各明部により小角度で斜光照明される。よって、撮像手段（１１）は、各部分領域の暗視野観察像を取得することができる。
【解決手段】本発明の観察装置は、被観察物（１０）から射出した光を結像する結像光学系（１２）と、前記結像光学系（１２）が形成した前記被観察物（１０）の像を撮像する撮像手段（１１）と、明部と暗部とを繰り返し配置してなる面光源で前記被観察物（１０）を照明する照明手段（１４，１５）とを備えたことを特徴とする。面光源の位置と明暗のピッチとが適正に設定されれば、被観察物（１０）の各部分領域は、面光源の各明部により小角度で斜光照明される。よって、撮像手段（１１）は、各部分領域の暗視野観察像を取得することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、透明な被観察物を観察するための観察装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
培養容器中の細胞などの透明試料の観察には、その屈折率分布を可視化することのできる位相差観察が適している（非特許文献１，２など）。肉眼で観察することのできない透明試料は、試料全域の大まかな様子を確認するだけであっても、顕微鏡又は何らかの光学系が必要である。
【非特許文献１】小松啓，「光学顕微鏡の基礎と応用（３）」，応用物理，第６０巻 ，第１９号，１９９１年， ｐ１０３２−ｐ１０３４
【非特許文献２】小松啓，「光学顕微鏡の基礎と応用（４）」，応用物理，第６０巻 ，第１１号，１９９１年， ｐ１１３６−ｐ１１３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、培養容器の全域を一括して観察できるほど広視野の位相差顕微鏡は現存せず、仮にそれを実現しようとすると、特大の位相差結像光学系、特大の輪体照明光学系を要するので、極めて高コストである。
また、試料全域の大まかな様子を確認するだけであれば、位相差観察の代わりに暗視野観察を適用することも考えられる。暗視野観察は、試料中の屈折率の段差で生じた微弱な回折光（散乱光）を捉え、その回折光のみで観察像を形成するものである。
【０００４】
しかし、暗視野顕微鏡を広視野化すると、照明角度が大きくなり、試料から大角度で射出した極めて微弱な回折光でしか観察像を形成できなくなるので、その明るさが著しく不足する。また、照明角度が大きいと、培養容器の縁や底などで生じた強い光が結像光学系に入射し、観察の障害となる可能性もある。
そこで本発明は、透明な被観察物を広視野で観察するのに適した観察装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の観察装置は、明部と暗部とを繰り返し配置してなる面光源で被観察物を照明する照明手段と、前記照明手段により照明された前記被観察物を透過した光を結像する結像光学系と、前記結像光学系が形成した前記被観察物の像を撮像する撮像手段とを備えたことを特徴とする。
なお、前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡに対し、Ｐ／ｄ≦√［２｛１−０．０２／（ＮＡ2）｝］の式を満たすことが望ましい。
【０００６】
また、前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の像側開口数ＮＡ’に対し、Ｐ／ｄ≦２・ＮＡ’の式を満たすことが望ましい。
また、前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡ、前記面光源の波長λ、前記結像光学系の像側主面と前記撮像手段との間隔ａに対し、λ／（２・ａ・ＮＡ）≦Ｐ／ｄの式を満たすことが望ましい。
【０００７】
また、前記照明手段には、略一様な強度で発光する面光源と、前記面光源上に配置され、かつ開口部と遮光部とを繰り返し配置してなるマスクとが備えられてもよい。
また、前記照明手段には、液晶空間変調素子が備えられてもよい。
また、本発明の観察装置は、前記撮像手段が取得した前記被観察物の画像から、前記面光源の像の成分を除去する画像処理手段を更に備えてもよい。
【０００８】
また、本発明の観察装置は、前記面光源の明暗の位相を変化させる手段を更に備えてもよい。
また、本発明の観察装置は、前記面光源の明暗のピッチを変化させる手段を更に備えてもよい。
また、本発明の観察装置は、前記面光源の明暗のデューティー比を変化させる手段を更に備えてもよい。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、透明な被観察物を広視野で観察するのに適した観察装置が実現する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
［第１実施形態］
以下、第１実施形態を説明する。本実施形態は、観察装置の実施形態である。
図１は、本観察装置の全体構成図である。図１に示すとおり、本観察装置には、バックライト付きの透過型液晶パネル１４、ステージ（標本台）１３、結像光学系１２、撮像素子１１、透過型液晶パネルのコントローラ１５、コンピュータ１６、ディスプレイ１７などが備えられる。
【００１１】
ステージ１３には、透明な被観察物１０が載置されている。被観察物１０は、例えば、無染色の細胞が収められた透明な培養容器（例えば、径３５ｍｍのシャーレなど）である。
透過型液晶パネル１４は、被観察物１０の略全域を照明する。その照明光が遮られないように、ステージ１３のうち被観察物１０を載置した部分は、例えば、ガラス等の透明部材で構成されるか、或いは中空となっている。
【００１２】
結像光学系１２の視野は十分に大きく、被観察物１０の略全域から射出した光は、結像光学系１２によって捉えられ、撮像素子１１の撮像面上に結像する。撮像素子１１は、コンピュータ１６からの指示に応じて撮像面上の画像（輝度分布）を取得する。その画像は、コンピュータ１６へ取り込まれ、画像処理が施された後にディスプレイ１７上へ表示される。
【００１３】
なお、コンピュータ１６は、画像処理前の画像や画像処理後の画像を必要に応じて保存することができる。また、画像処理前の画像を必要に応じてディスプレイ１７へ表示することができる。
ここで、コントローラ１５は、コンピュータ１６からの指示に応じて、透過型液晶パネル１４上に、明部と暗部とを繰り返し配置してなるパターンを表示する。ここでは、このパターンをストライプパターンとする。このとき、透過型液晶パネル１４上に、ストライプ状の面光源が形成される。
【００１４】
この面光源の明暗のピッチＰは、観察対象である位相物体（細胞）のサイズ（１０〜１５μｍ）と比較して十分に大きく、この面光源から被観察物１０までの間隔ｄは、面光源が結像光学系１２の被写界深度から外れるよう、適度に離れている。そして、ピッチＰと間隔ｄとの関係は、以下の３条件を満たすように設定される。
（条件１）…面光源の暗部に正対する被観察物１０上の部分領域から見ると、その暗部の両側の２つの明部の張る角度は、十分に小さい。
（条件２）…面光源の明暗の双方が、結像光学系１２の視野内に確実に存在する。
（条件３）…面光源の明暗の存在が、撮像素子１１上で確実に認識できる。
【００１５】
これら条件１，２，３の詳細は、後述する。
特に、ここでは、面光源の明暗の数十ピッチが結像光学系１２の視野内に存在し、面光源の明部の幅と暗部の幅との比（デューティー比）が５０％であるとする。また、ここでは、撮像素子１１上の面光源像が適度にボケており、面光源像のピッチ方向の輝度分布カーブが正弦波を描くものとする。すなわち、観察面１０ａ上では面光源像の照度が略均一になっている。なお、透過型液晶パネル１４上の表示パターンには、二値のパターンとグレースケールパターンとの何れが採用されてもよい。
【００１６】
図２は、本観察装置の光学系部分の作用を説明する概念図である。図２には、本観察装置の光学系部分の概念を示した。
先ず、面光源上の或る暗部１４Ａと、その暗部１４Ａに正対する被観察物１０上の部分領域１０Ａとに着目して説明する。
この部分領域１０Ａには、暗部１４Ａに隣接する２つの明部１４Ｂ，１４Ｃからの光ＬＢ，ＬＣが入射する。暗部１４Ａからは光が入射しない。よって、部分領域１０Ａは、光ＬＢ，ＬＣで斜光照明される。
【００１７】
その部分領域１０Ａでは、入射した光ＬＢ，ＬＣの一部が回折せずにそのまま透過するが、光ＬＢ，ＬＣの他の一部は、部分領域１０Ａ中の屈折率の段差の影響を受けて回折（或いは散乱）する。この部分領域１０Ａをそのまま透過した非回折光ＬＢ，ＬＣは、結像光学系１２への瞳へ入射しないが、部分領域１０Ａで発生した一部の回折光（或いは散乱光）Ｌｂ，Ｌｃは、結像光学系１２の瞳へ入射する。
【００１８】
このとき、部分領域１０Ａと共役関係にある撮像素子１１上の領域１１Ａには、暗部１４Ａの像と、部分領域１０Ａに存在した位相物体の輪郭の像（以下、「観察像」という。）とが重畳して形成される。つまり、部分領域１０Ａの暗視野像が形成される。
ここで、部分領域１０Ａから見ると、２つの明部１４Ｂ，１４Ｃの張る角度は、十分に小さい。よって、光ＬＢ，ＬＣによる領域１０Ａの照明角度も、十分に小さい。このとき、部分領域１０Ａの観察像は、小角度で射出した大強度の回折光Ｌｂ，Ｌｃによって生成されることになる。よって、部分領域１０Ａの観察像の明るさは、十分に高い。
【００１９】
また、以上のことは、各暗部に正対する被観察物１０の各領域についてそれぞれ当てはまる。したがって、撮像素子１１によって取得される画像Ｉ1は、図３に示すとおり、ストライプ状の暗い背景上に観察像が重畳したものとなる。なお、図３では、面光源像の明暗部の境界をシャープに表したが、実際にはぼけている。
この画像Ｉ1をコンピュータ１６がディスプレイ１７に表示すれば、被観察物１０の様子をユーザが簡易に観察することができる。
【００２０】
但し、この画像Ｉ1に現れているのは、被観察物１０の略半分の領域の観察像のみ（暗部に正対する領域の観察像のみ）である。しかも、その観察像の背景は、完全な暗部ではなく正弦波状の輝度分布を持つので、観察像のコントラストは低い。
そこで、本観察装置のコンピュータ１６は、被観察物１０の略全域を、しかも高コントラストに観察できるよう、以下の各手順を実行する。
（手順１）…透過型液晶パネル１４上にストライプ状の面光源（デューティー比５０％）を表示し、その状態で図３に示すような画像Ｉ1を取得する。
（手順２）…その面光源の明暗の位相をπだけシフトさせ、その状態で図４に示すような画像Ｉ2を取得する。この画像Ｉ2には、画像Ｉ1とは異なる領域の観察像が現れている。これら画像Ｉ1，Ｉ2の明暗のピッチ方向の輝度分布の概念を、図５（ａ）に示した。
（手順３）…図５（ａ）→（ｂ）に示すとおり、画像Ｉ1，Ｉ2を個別に空間フーリエ変換し、画像Ｉ1を空間周波数成分毎に表すデータＤ1と、画像Ｉ2を空間周波数成分毎に表すデータＤ2とを得る。これらのデータＤ1，Ｄ2において、低周波数側の大きいピークが面光源像の成分であり、高周波数側の複数の小さいピークが観察像の成分である。
（手順４）…図５（ｂ）→（ｃ）に示すとおり、データＤ1，Ｄ2の各々から面光源像の成分を除去し、データＤ1’，Ｄ2’を取得する。
（手順５）…図５（ｃ）→（ｄ）に示すとおり、データＤ1’，Ｄ2’を個別に逆フーリエ変換し、画像Ｉ1’，Ｉ2’を得る。これらの画像Ｉ1，Ｉ2では、面光源像が除去されており、観察像のみが現れている。
（手順６）…図５（ｄ）→（ｅ）に示すとおり、画像Ｉ1’，Ｉ2’を合成して１つの画像Ｉを取得する。この画像Ｉが、ディスプレイ１７へ表示される。
【００２１】
この画像Ｉには、被観察物１０の略全域の観察像が現れており、その観察像の背景は真っ暗である。したがって、ユーザは、被観察物１０の略全域を、高いコントラストで暗視野観察することができる。
［第２実施形態］
以下、第２実施形態を説明する。ここでは、第１実施形態との相違点のみ説明する。相違点は、コンピュータ１６による処理の手順にある。本実施形態の手順は、以下のとおりである。
（手順１）…透過型液晶パネル１４上にストライプ状の面光源（デューティー比５０％）を表示し、その状態で図６（ａ）に示すような画像Ｉ1を取得する。
（手順２）…面光源の明暗の位相を２π／３だけシフトさせ、その状態で図６（ｂ）に示すような画像Ｉ2を取得する。
（手順３）…面光源の明暗の位相をさらに２π／３だけシフトさせ、その状態で図６（ｃ）に示すような画像Ｉ3を取得する。
（手順４）…画像Ｉ1，Ｉ2，Ｉ3を画素毎に以下の演算式（１）に当てはめて、図６（ｄ）に示すような１つの画像Ｉを取得する。
【００２２】
Ｉ＝√［（Ｉ1−Ｉ2）2＋（Ｉ2−Ｉ3）2＋（Ｉ3−Ｉ1）2］ …（１）
この画像Ｉには、被観察物１０の略全域の観察像が現れており、その観察像の背景は、一様な明るさである。コンピュータ１６は、その背景を真っ暗にするために、画像Ｉから空間周波数がゼロの成分（０次成分）を除去し、除去後の画像をディスプレイ１７へ表示する。
【００２３】
除去後の画像には、被観察物１０の略全域の観察像が現れており、その観察像の背景は真っ暗である。したがって、ユーザは、被観察物１０の略全域を、高いコントラストで暗視野観察することができる。
なお、本実施形態では、演算式（１）に代えて簡単な演算式（１’）を用いることもできる。
【００２４】
Ｉ＝Ｉ1＋Ｉ2＋Ｉ3 …（１’）
［条件１，２，３について］
以下、条件１，２，３の詳細を説明する。
図７は、条件１，２，３を説明する図である。図７において符号１１ａは、撮像素子１１の撮像面であり、符号１０ａは、結像光学系１２の焦点面（＝観察面）であり、符号１４ａは、面光源の形成面（＝光源面）である。
【００２５】
（条件１について）
先ず、観察面１０ａから見て暗部１４Ａと明部１４Ｃとの張る角度を、θとおく。この角度θは、観察面１０ａを照明する２つの光ＬＣ，ＬＢの入射角度に相当する。
このとき、観察面１０ａから結像光学系１２の瞳へと入射可能な回折光Ｌｃ，Ｌｂの回折角度は、下式（２），（３），（４）を同時に満たすような角度ξである。
【００２６】
ｃｏｓξ＝ｃｏｓθ・ｃｏｓρ＋ｓｉｎθ・ｓｉｎρ・ｃｏｓφ …（２）
０≦ρ≦ＮＡ …（３）
０≦φ≦２π …（４）
但し、ＮＡは、結像光学系１２の物体側開口数であり、十分に小さいとみなして近似することが可能である。
【００２７】
これらの式（２），（３），（４）より、観察面１０ａを照明する光ＬＣ，ＬＢの光量を基準とした回折光Ｌｃ，Ｌｂの光量比Ｒは、式（５）で表される。
Ｒ＝（１／２）・∫ｃｏｓξ・ｄρ・ｄφ
＝（１／２）・ＮＡ2・ｃｏｓθ …（５）
この光量比Ｒが十分に高ければ、観察像の明るさが十分に確保される。そのために光量比Ｒは、少なくとも以下の式（６）を満たす必要がある。
【００２８】
Ｒ≧０．０１ …（６）
この式（６）へ式（５）を代入すると、式（７）が得られる。
（１／２）・ＮＡ2・ｃｏｓθ≧０．０１ …（７）
ここで、角度θは、光源面１４ａから観察面１０ａまでの間隔ｄと、面光源の明暗のピッチＰとによって、以下の式（８）で与えられる。但し、θは小さいとみなして近似した。
【００２９】
θ＝（Ｐ／２）／ｄ …（８）
この式（８）を式（７）へ代入すると、式（９）が得られる。但し、θは十分に小さいとみなして近似した（ｃｏｓθ≒１−θ2／２の近似式を使用）。
Ｐ／ｄ≦√［２｛１−０．０２／（ＮＡ2）｝］ …（９）
この式（９）が、条件１に対応する条件式である。
【００３０】
（条件２について）
先ず、光源面１４ａのうち、結像光学系１２の視野に収まる領域の幅Ｚは、結像光学系１２の像側開口数をＮＡ’とおくと、式（１０）で表される。
Ｚ＝２・ＮＡ’×ｄ …（１０）
また、光源面１４ａ上の幅Ｚ内の領域に１ピッチ以上の明暗が存在するためには、式（１１）が満たされる必要がある。
【００３１】
Ｐ≦Ｚ …（１１）
この式（１１）へ式（１０）を代入すると、式（１２）が得られる。
Ｐ／ｄ≦２ＮＡ’ …（１２）
この式（１２）が、条件２に対応する条件式である。
（条件３について）
先ず、光源面１４ａ上の明暗が撮像面１１ａ上で解像されるためには、結像光学系１２の倍率Ｍ、光源波長λに対し、式（１３）が満たされる必要がある。
【００３２】
Ｐ・Ｍ≧λ／（２・ＮＡ） …（１３）
また、結像光学系１２の倍率Ｍは、結像光学系１２の像側主面から撮像面１１ａまでの間隔をａとおき、結像光学系１２の像側主面から観察面１０ａまでの間隔をｂとおくと、以下の式（１４）で表される。
Ｍ＝ａ／（ｂ＋ｄ） …（１４）
ここで、ｄ≫ｂとみなせるので、式（１４）は、式（１５）に書き換えられる。
【００３３】
Ｍ＝ａ／ｄ …（１５）
この式（１５）を式（１３）へ代入すると、式（１６）が得られる。
λ／（２・ａ・ＮＡ）≦Ｐ／ｄ …（１６）
この式（１６）が、条件３に対応する条件式である。
［各実施形態の変形例］
なお、各実施形態では、面光源を生成するために、バックライト付きの透過型液晶パネルとコントローラとを用いたが、同様の面光源を生成できるのであれば、他のものを用いてもよい。
【００３４】
例えば、ＬＥＤなどの小型光源を多数用意し、それらを密にアレイ状に配置する。これによって、略一様な強度で発光する面光源が形成される。そして、その面光源上に、ストライプ状の開口を有したマスク部材を配置する。これによって、ストライプ状の面光源が形成される。因みに、この面光源の明暗の位相をシフトさせるには、マスク部材を明暗のピッチ方向へシフトさせればよい。また、マスク部材をシフトさせる代わりに、開口パターンの異なる複数のマスク部材を用意し、それらを切り替え配置してもよい。
【００３５】
また、各実施形態では、面光源の明暗のピッチが不変であったが、そのピッチを、観察対象である位相物体（細胞）のサイズに応じて変化させてもよい。そうすれば、様々なサイズの位相物体（細胞）を良好に観察することができる。
また、各実施形態では、面光源の明暗のデューティー比が不変であったが、そのデューティー比を、観察対象となる位相物体（細胞）の屈折率に応じて変化させてもよい。例えば、位相物体（細胞）の屈折率が十分に高いときには回折光の強度が高くなるので、暗部の比率を高くし（７０％，８０％など）、その分だけ画像の取得回数を減らしてもよい。暗部の比率が多ければ、より広い領域の観察像が同一画像上に現れるからである。一方、位相物体（細胞）の屈折率が低いときには、暗部の比率を低くし（３０％など）、その分だけ画像の取得回数を増やしてもよい。
【００３６】
また、各実施形態では、面光源の明暗のパターンをストライプパターンとしたが、明部と暗部とが繰り返し出現する他のパターンを採用することも可能である。例えば、図８に示すような市松状パターンを採用することもできる。また、図９に示すような同心円状パターンを採用することもできる。何れの場合も、明暗の位相をシフトさせる際には、明暗が反転する方向（同心円状パターンの場合は径方向）へパターンを変化させればよい。
【００３７】
因みに、ストライプパターン（図１）や市松状パターン（図８）を採用すると、位相をシフトさせるための処理や画像処理の内容が簡単になるので好ましい。
【実施例１】
【００３８】
ＮＡ≧０．１４２８６，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
これらの数値は、条件１（式（９））を満たす。
【実施例２】
【００３９】
ＮＡ’≧０．１，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
これらの数値は、条件２（式（１２））を満たす。
【実施例３】
【００４０】
ＮＡ≧０．００３，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
ａ＝５ｍｍ，
λ＝５５０ｎｍ＝５５０×１０-4ｍｍ，
これらの数値は、条件３（式（１６））を満たす。
【実施例４】
【００４１】
ＮＡ≧０．１４２８６，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
ＮＡ’≧０．１，
ａ＝５ｍｍ，
λ＝５５０ｎｍ＝５５０×１０-4ｍｍ
これらの数値は、条件１（式（９）），条件２（式（１２）），条件３（式（１６））の全てを満たす。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】観察装置の全体構成図である。
【図２】観察装置の光学系部分の作用を説明する概念図である。
【図３】画像Ｉ1を示す図である。
【図４】画像Ｉ2を示す図である。
【図５】第１実施形態のコンピュータ１６による画像処理の手順を説明する図である。
【図６】第２実施形態のコンピュータ１６による画像処理の手順を説明する図である。
【図７】条件１，２，３を説明する図である。
【図８】面光源の明暗パターンの変形例を示す図である。
【図９】面光源の明暗パターンの別の変形例を示す図である。
【符号の説明】
【００４３】
１１…撮像素子，１２…結像光学系，１３…ステージ，１４…透過型液晶パネル，１５…コントローラ，１６…コンピュータ，１７…ディスプレイ
【技術分野】
【０００１】
本発明は、透明な被観察物を観察するための観察装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
培養容器中の細胞などの透明試料の観察には、その屈折率分布を可視化することのできる位相差観察が適している（非特許文献１，２など）。肉眼で観察することのできない透明試料は、試料全域の大まかな様子を確認するだけであっても、顕微鏡又は何らかの光学系が必要である。
【非特許文献１】小松啓，「光学顕微鏡の基礎と応用（３）」，応用物理，第６０巻 ，第１９号，１９９１年， ｐ１０３２−ｐ１０３４
【非特許文献２】小松啓，「光学顕微鏡の基礎と応用（４）」，応用物理，第６０巻 ，第１１号，１９９１年， ｐ１１３６−ｐ１１３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、培養容器の全域を一括して観察できるほど広視野の位相差顕微鏡は現存せず、仮にそれを実現しようとすると、特大の位相差結像光学系、特大の輪体照明光学系を要するので、極めて高コストである。
また、試料全域の大まかな様子を確認するだけであれば、位相差観察の代わりに暗視野観察を適用することも考えられる。暗視野観察は、試料中の屈折率の段差で生じた微弱な回折光（散乱光）を捉え、その回折光のみで観察像を形成するものである。
【０００４】
しかし、暗視野顕微鏡を広視野化すると、照明角度が大きくなり、試料から大角度で射出した極めて微弱な回折光でしか観察像を形成できなくなるので、その明るさが著しく不足する。また、照明角度が大きいと、培養容器の縁や底などで生じた強い光が結像光学系に入射し、観察の障害となる可能性もある。
そこで本発明は、透明な被観察物を広視野で観察するのに適した観察装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の観察装置は、明部と暗部とを繰り返し配置してなる面光源で被観察物を照明する照明手段と、前記照明手段により照明された前記被観察物を透過した光を結像する結像光学系と、前記結像光学系が形成した前記被観察物の像を撮像する撮像手段とを備えたことを特徴とする。
なお、前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡに対し、Ｐ／ｄ≦√［２｛１−０．０２／（ＮＡ2）｝］の式を満たすことが望ましい。
【０００６】
また、前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の像側開口数ＮＡ’に対し、Ｐ／ｄ≦２・ＮＡ’の式を満たすことが望ましい。
また、前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡ、前記面光源の波長λ、前記結像光学系の像側主面と前記撮像手段との間隔ａに対し、λ／（２・ａ・ＮＡ）≦Ｐ／ｄの式を満たすことが望ましい。
【０００７】
また、前記照明手段には、略一様な強度で発光する面光源と、前記面光源上に配置され、かつ開口部と遮光部とを繰り返し配置してなるマスクとが備えられてもよい。
また、前記照明手段には、液晶空間変調素子が備えられてもよい。
また、本発明の観察装置は、前記撮像手段が取得した前記被観察物の画像から、前記面光源の像の成分を除去する画像処理手段を更に備えてもよい。
【０００８】
また、本発明の観察装置は、前記面光源の明暗の位相を変化させる手段を更に備えてもよい。
また、本発明の観察装置は、前記面光源の明暗のピッチを変化させる手段を更に備えてもよい。
また、本発明の観察装置は、前記面光源の明暗のデューティー比を変化させる手段を更に備えてもよい。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、透明な被観察物を広視野で観察するのに適した観察装置が実現する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
［第１実施形態］
以下、第１実施形態を説明する。本実施形態は、観察装置の実施形態である。
図１は、本観察装置の全体構成図である。図１に示すとおり、本観察装置には、バックライト付きの透過型液晶パネル１４、ステージ（標本台）１３、結像光学系１２、撮像素子１１、透過型液晶パネルのコントローラ１５、コンピュータ１６、ディスプレイ１７などが備えられる。
【００１１】
ステージ１３には、透明な被観察物１０が載置されている。被観察物１０は、例えば、無染色の細胞が収められた透明な培養容器（例えば、径３５ｍｍのシャーレなど）である。
透過型液晶パネル１４は、被観察物１０の略全域を照明する。その照明光が遮られないように、ステージ１３のうち被観察物１０を載置した部分は、例えば、ガラス等の透明部材で構成されるか、或いは中空となっている。
【００１２】
結像光学系１２の視野は十分に大きく、被観察物１０の略全域から射出した光は、結像光学系１２によって捉えられ、撮像素子１１の撮像面上に結像する。撮像素子１１は、コンピュータ１６からの指示に応じて撮像面上の画像（輝度分布）を取得する。その画像は、コンピュータ１６へ取り込まれ、画像処理が施された後にディスプレイ１７上へ表示される。
【００１３】
なお、コンピュータ１６は、画像処理前の画像や画像処理後の画像を必要に応じて保存することができる。また、画像処理前の画像を必要に応じてディスプレイ１７へ表示することができる。
ここで、コントローラ１５は、コンピュータ１６からの指示に応じて、透過型液晶パネル１４上に、明部と暗部とを繰り返し配置してなるパターンを表示する。ここでは、このパターンをストライプパターンとする。このとき、透過型液晶パネル１４上に、ストライプ状の面光源が形成される。
【００１４】
この面光源の明暗のピッチＰは、観察対象である位相物体（細胞）のサイズ（１０〜１５μｍ）と比較して十分に大きく、この面光源から被観察物１０までの間隔ｄは、面光源が結像光学系１２の被写界深度から外れるよう、適度に離れている。そして、ピッチＰと間隔ｄとの関係は、以下の３条件を満たすように設定される。
（条件１）…面光源の暗部に正対する被観察物１０上の部分領域から見ると、その暗部の両側の２つの明部の張る角度は、十分に小さい。
（条件２）…面光源の明暗の双方が、結像光学系１２の視野内に確実に存在する。
（条件３）…面光源の明暗の存在が、撮像素子１１上で確実に認識できる。
【００１５】
これら条件１，２，３の詳細は、後述する。
特に、ここでは、面光源の明暗の数十ピッチが結像光学系１２の視野内に存在し、面光源の明部の幅と暗部の幅との比（デューティー比）が５０％であるとする。また、ここでは、撮像素子１１上の面光源像が適度にボケており、面光源像のピッチ方向の輝度分布カーブが正弦波を描くものとする。すなわち、観察面１０ａ上では面光源像の照度が略均一になっている。なお、透過型液晶パネル１４上の表示パターンには、二値のパターンとグレースケールパターンとの何れが採用されてもよい。
【００１６】
図２は、本観察装置の光学系部分の作用を説明する概念図である。図２には、本観察装置の光学系部分の概念を示した。
先ず、面光源上の或る暗部１４Ａと、その暗部１４Ａに正対する被観察物１０上の部分領域１０Ａとに着目して説明する。
この部分領域１０Ａには、暗部１４Ａに隣接する２つの明部１４Ｂ，１４Ｃからの光ＬＢ，ＬＣが入射する。暗部１４Ａからは光が入射しない。よって、部分領域１０Ａは、光ＬＢ，ＬＣで斜光照明される。
【００１７】
その部分領域１０Ａでは、入射した光ＬＢ，ＬＣの一部が回折せずにそのまま透過するが、光ＬＢ，ＬＣの他の一部は、部分領域１０Ａ中の屈折率の段差の影響を受けて回折（或いは散乱）する。この部分領域１０Ａをそのまま透過した非回折光ＬＢ，ＬＣは、結像光学系１２への瞳へ入射しないが、部分領域１０Ａで発生した一部の回折光（或いは散乱光）Ｌｂ，Ｌｃは、結像光学系１２の瞳へ入射する。
【００１８】
このとき、部分領域１０Ａと共役関係にある撮像素子１１上の領域１１Ａには、暗部１４Ａの像と、部分領域１０Ａに存在した位相物体の輪郭の像（以下、「観察像」という。）とが重畳して形成される。つまり、部分領域１０Ａの暗視野像が形成される。
ここで、部分領域１０Ａから見ると、２つの明部１４Ｂ，１４Ｃの張る角度は、十分に小さい。よって、光ＬＢ，ＬＣによる領域１０Ａの照明角度も、十分に小さい。このとき、部分領域１０Ａの観察像は、小角度で射出した大強度の回折光Ｌｂ，Ｌｃによって生成されることになる。よって、部分領域１０Ａの観察像の明るさは、十分に高い。
【００１９】
また、以上のことは、各暗部に正対する被観察物１０の各領域についてそれぞれ当てはまる。したがって、撮像素子１１によって取得される画像Ｉ1は、図３に示すとおり、ストライプ状の暗い背景上に観察像が重畳したものとなる。なお、図３では、面光源像の明暗部の境界をシャープに表したが、実際にはぼけている。
この画像Ｉ1をコンピュータ１６がディスプレイ１７に表示すれば、被観察物１０の様子をユーザが簡易に観察することができる。
【００２０】
但し、この画像Ｉ1に現れているのは、被観察物１０の略半分の領域の観察像のみ（暗部に正対する領域の観察像のみ）である。しかも、その観察像の背景は、完全な暗部ではなく正弦波状の輝度分布を持つので、観察像のコントラストは低い。
そこで、本観察装置のコンピュータ１６は、被観察物１０の略全域を、しかも高コントラストに観察できるよう、以下の各手順を実行する。
（手順１）…透過型液晶パネル１４上にストライプ状の面光源（デューティー比５０％）を表示し、その状態で図３に示すような画像Ｉ1を取得する。
（手順２）…その面光源の明暗の位相をπだけシフトさせ、その状態で図４に示すような画像Ｉ2を取得する。この画像Ｉ2には、画像Ｉ1とは異なる領域の観察像が現れている。これら画像Ｉ1，Ｉ2の明暗のピッチ方向の輝度分布の概念を、図５（ａ）に示した。
（手順３）…図５（ａ）→（ｂ）に示すとおり、画像Ｉ1，Ｉ2を個別に空間フーリエ変換し、画像Ｉ1を空間周波数成分毎に表すデータＤ1と、画像Ｉ2を空間周波数成分毎に表すデータＤ2とを得る。これらのデータＤ1，Ｄ2において、低周波数側の大きいピークが面光源像の成分であり、高周波数側の複数の小さいピークが観察像の成分である。
（手順４）…図５（ｂ）→（ｃ）に示すとおり、データＤ1，Ｄ2の各々から面光源像の成分を除去し、データＤ1’，Ｄ2’を取得する。
（手順５）…図５（ｃ）→（ｄ）に示すとおり、データＤ1’，Ｄ2’を個別に逆フーリエ変換し、画像Ｉ1’，Ｉ2’を得る。これらの画像Ｉ1，Ｉ2では、面光源像が除去されており、観察像のみが現れている。
（手順６）…図５（ｄ）→（ｅ）に示すとおり、画像Ｉ1’，Ｉ2’を合成して１つの画像Ｉを取得する。この画像Ｉが、ディスプレイ１７へ表示される。
【００２１】
この画像Ｉには、被観察物１０の略全域の観察像が現れており、その観察像の背景は真っ暗である。したがって、ユーザは、被観察物１０の略全域を、高いコントラストで暗視野観察することができる。
［第２実施形態］
以下、第２実施形態を説明する。ここでは、第１実施形態との相違点のみ説明する。相違点は、コンピュータ１６による処理の手順にある。本実施形態の手順は、以下のとおりである。
（手順１）…透過型液晶パネル１４上にストライプ状の面光源（デューティー比５０％）を表示し、その状態で図６（ａ）に示すような画像Ｉ1を取得する。
（手順２）…面光源の明暗の位相を２π／３だけシフトさせ、その状態で図６（ｂ）に示すような画像Ｉ2を取得する。
（手順３）…面光源の明暗の位相をさらに２π／３だけシフトさせ、その状態で図６（ｃ）に示すような画像Ｉ3を取得する。
（手順４）…画像Ｉ1，Ｉ2，Ｉ3を画素毎に以下の演算式（１）に当てはめて、図６（ｄ）に示すような１つの画像Ｉを取得する。
【００２２】
Ｉ＝√［（Ｉ1−Ｉ2）2＋（Ｉ2−Ｉ3）2＋（Ｉ3−Ｉ1）2］ …（１）
この画像Ｉには、被観察物１０の略全域の観察像が現れており、その観察像の背景は、一様な明るさである。コンピュータ１６は、その背景を真っ暗にするために、画像Ｉから空間周波数がゼロの成分（０次成分）を除去し、除去後の画像をディスプレイ１７へ表示する。
【００２３】
除去後の画像には、被観察物１０の略全域の観察像が現れており、その観察像の背景は真っ暗である。したがって、ユーザは、被観察物１０の略全域を、高いコントラストで暗視野観察することができる。
なお、本実施形態では、演算式（１）に代えて簡単な演算式（１’）を用いることもできる。
【００２４】
Ｉ＝Ｉ1＋Ｉ2＋Ｉ3 …（１’）
［条件１，２，３について］
以下、条件１，２，３の詳細を説明する。
図７は、条件１，２，３を説明する図である。図７において符号１１ａは、撮像素子１１の撮像面であり、符号１０ａは、結像光学系１２の焦点面（＝観察面）であり、符号１４ａは、面光源の形成面（＝光源面）である。
【００２５】
（条件１について）
先ず、観察面１０ａから見て暗部１４Ａと明部１４Ｃとの張る角度を、θとおく。この角度θは、観察面１０ａを照明する２つの光ＬＣ，ＬＢの入射角度に相当する。
このとき、観察面１０ａから結像光学系１２の瞳へと入射可能な回折光Ｌｃ，Ｌｂの回折角度は、下式（２），（３），（４）を同時に満たすような角度ξである。
【００２６】
ｃｏｓξ＝ｃｏｓθ・ｃｏｓρ＋ｓｉｎθ・ｓｉｎρ・ｃｏｓφ …（２）
０≦ρ≦ＮＡ …（３）
０≦φ≦２π …（４）
但し、ＮＡは、結像光学系１２の物体側開口数であり、十分に小さいとみなして近似することが可能である。
【００２７】
これらの式（２），（３），（４）より、観察面１０ａを照明する光ＬＣ，ＬＢの光量を基準とした回折光Ｌｃ，Ｌｂの光量比Ｒは、式（５）で表される。
Ｒ＝（１／２）・∫ｃｏｓξ・ｄρ・ｄφ
＝（１／２）・ＮＡ2・ｃｏｓθ …（５）
この光量比Ｒが十分に高ければ、観察像の明るさが十分に確保される。そのために光量比Ｒは、少なくとも以下の式（６）を満たす必要がある。
【００２８】
Ｒ≧０．０１ …（６）
この式（６）へ式（５）を代入すると、式（７）が得られる。
（１／２）・ＮＡ2・ｃｏｓθ≧０．０１ …（７）
ここで、角度θは、光源面１４ａから観察面１０ａまでの間隔ｄと、面光源の明暗のピッチＰとによって、以下の式（８）で与えられる。但し、θは小さいとみなして近似した。
【００２９】
θ＝（Ｐ／２）／ｄ …（８）
この式（８）を式（７）へ代入すると、式（９）が得られる。但し、θは十分に小さいとみなして近似した（ｃｏｓθ≒１−θ2／２の近似式を使用）。
Ｐ／ｄ≦√［２｛１−０．０２／（ＮＡ2）｝］ …（９）
この式（９）が、条件１に対応する条件式である。
【００３０】
（条件２について）
先ず、光源面１４ａのうち、結像光学系１２の視野に収まる領域の幅Ｚは、結像光学系１２の像側開口数をＮＡ’とおくと、式（１０）で表される。
Ｚ＝２・ＮＡ’×ｄ …（１０）
また、光源面１４ａ上の幅Ｚ内の領域に１ピッチ以上の明暗が存在するためには、式（１１）が満たされる必要がある。
【００３１】
Ｐ≦Ｚ …（１１）
この式（１１）へ式（１０）を代入すると、式（１２）が得られる。
Ｐ／ｄ≦２ＮＡ’ …（１２）
この式（１２）が、条件２に対応する条件式である。
（条件３について）
先ず、光源面１４ａ上の明暗が撮像面１１ａ上で解像されるためには、結像光学系１２の倍率Ｍ、光源波長λに対し、式（１３）が満たされる必要がある。
【００３２】
Ｐ・Ｍ≧λ／（２・ＮＡ） …（１３）
また、結像光学系１２の倍率Ｍは、結像光学系１２の像側主面から撮像面１１ａまでの間隔をａとおき、結像光学系１２の像側主面から観察面１０ａまでの間隔をｂとおくと、以下の式（１４）で表される。
Ｍ＝ａ／（ｂ＋ｄ） …（１４）
ここで、ｄ≫ｂとみなせるので、式（１４）は、式（１５）に書き換えられる。
【００３３】
Ｍ＝ａ／ｄ …（１５）
この式（１５）を式（１３）へ代入すると、式（１６）が得られる。
λ／（２・ａ・ＮＡ）≦Ｐ／ｄ …（１６）
この式（１６）が、条件３に対応する条件式である。
［各実施形態の変形例］
なお、各実施形態では、面光源を生成するために、バックライト付きの透過型液晶パネルとコントローラとを用いたが、同様の面光源を生成できるのであれば、他のものを用いてもよい。
【００３４】
例えば、ＬＥＤなどの小型光源を多数用意し、それらを密にアレイ状に配置する。これによって、略一様な強度で発光する面光源が形成される。そして、その面光源上に、ストライプ状の開口を有したマスク部材を配置する。これによって、ストライプ状の面光源が形成される。因みに、この面光源の明暗の位相をシフトさせるには、マスク部材を明暗のピッチ方向へシフトさせればよい。また、マスク部材をシフトさせる代わりに、開口パターンの異なる複数のマスク部材を用意し、それらを切り替え配置してもよい。
【００３５】
また、各実施形態では、面光源の明暗のピッチが不変であったが、そのピッチを、観察対象である位相物体（細胞）のサイズに応じて変化させてもよい。そうすれば、様々なサイズの位相物体（細胞）を良好に観察することができる。
また、各実施形態では、面光源の明暗のデューティー比が不変であったが、そのデューティー比を、観察対象となる位相物体（細胞）の屈折率に応じて変化させてもよい。例えば、位相物体（細胞）の屈折率が十分に高いときには回折光の強度が高くなるので、暗部の比率を高くし（７０％，８０％など）、その分だけ画像の取得回数を減らしてもよい。暗部の比率が多ければ、より広い領域の観察像が同一画像上に現れるからである。一方、位相物体（細胞）の屈折率が低いときには、暗部の比率を低くし（３０％など）、その分だけ画像の取得回数を増やしてもよい。
【００３６】
また、各実施形態では、面光源の明暗のパターンをストライプパターンとしたが、明部と暗部とが繰り返し出現する他のパターンを採用することも可能である。例えば、図８に示すような市松状パターンを採用することもできる。また、図９に示すような同心円状パターンを採用することもできる。何れの場合も、明暗の位相をシフトさせる際には、明暗が反転する方向（同心円状パターンの場合は径方向）へパターンを変化させればよい。
【００３７】
因みに、ストライプパターン（図１）や市松状パターン（図８）を採用すると、位相をシフトさせるための処理や画像処理の内容が簡単になるので好ましい。
【実施例１】
【００３８】
ＮＡ≧０．１４２８６，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
これらの数値は、条件１（式（９））を満たす。
【実施例２】
【００３９】
ＮＡ’≧０．１，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
これらの数値は、条件２（式（１２））を満たす。
【実施例３】
【００４０】
ＮＡ≧０．００３，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
ａ＝５ｍｍ，
λ＝５５０ｎｍ＝５５０×１０-4ｍｍ，
これらの数値は、条件３（式（１６））を満たす。
【実施例４】
【００４１】
ＮＡ≧０．１４２８６，
Ｐ＝６ｍｍ，
ｄ＝３０ｍｍ，
ＮＡ’≧０．１，
ａ＝５ｍｍ，
λ＝５５０ｎｍ＝５５０×１０-4ｍｍ
これらの数値は、条件１（式（９）），条件２（式（１２）），条件３（式（１６））の全てを満たす。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】観察装置の全体構成図である。
【図２】観察装置の光学系部分の作用を説明する概念図である。
【図３】画像Ｉ1を示す図である。
【図４】画像Ｉ2を示す図である。
【図５】第１実施形態のコンピュータ１６による画像処理の手順を説明する図である。
【図６】第２実施形態のコンピュータ１６による画像処理の手順を説明する図である。
【図７】条件１，２，３を説明する図である。
【図８】面光源の明暗パターンの変形例を示す図である。
【図９】面光源の明暗パターンの別の変形例を示す図である。
【符号の説明】
【００４３】
１１…撮像素子，１２…結像光学系，１３…ステージ，１４…透過型液晶パネル，１５…コントローラ，１６…コンピュータ，１７…ディスプレイ
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明部と暗部とを繰り返し配置してなる面光源で被観察物を照明する照明手段と、
前記照明手段により照明された前記被観察物を透過した光を結像する結像光学系と、
前記結像光学系が形成した前記被観察物の像を撮像する撮像手段と
を備えたことを特徴とする観察装置。
【請求項２】
請求項１に記載の観察装置において、
前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡに対し、
Ｐ／ｄ≦√［２｛１−０．０２／（ＮＡ2）｝］
の式を満たすことを特徴とする観察装置。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載の観察装置において、
前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の像側開口数ＮＡ’に対し、
Ｐ／ｄ≦２・ＮＡ’
の式を満たすことを特徴とする観察装置。
【請求項４】
請求項１〜請求項３の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡ、前記面光源の波長λ、前記結像光学系の像側主面と前記撮像手段との間隔ａに対し、
λ／（２・ａ・ＮＡ）≦Ｐ／ｄ
の式を満たすことを特徴とする観察装置。
【請求項５】
請求項１〜請求項４の何れか一項に記載の観察装置において、
前記照明手段には、
略一様な強度で発光する面光源と、
前記面光源上に配置され、かつ開口部と遮光部とを繰り返し配置してなるマスクとが備えられる
ことを特徴とする観察装置。
【請求項６】
請求項１〜請求項４の何れか一項に記載の観察装置において、
前記照明手段には、
液晶空間変調素子が備えられる
ことを特徴とする観察装置。
【請求項７】
請求項１〜請求項６の何れか一項に記載の観察装置において、
前記撮像手段が取得した前記被観察物の画像から、前記面光源の像の成分を除去する画像処理手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項８】
請求項１〜請求項７の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源の明暗の位相を変化させる手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項９】
請求項１〜請求項８の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源の明暗のピッチを変化させる手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項１０】
請求項１〜請求項９の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源の明暗のデューティー比を変化させる手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項１】
明部と暗部とを繰り返し配置してなる面光源で被観察物を照明する照明手段と、
前記照明手段により照明された前記被観察物を透過した光を結像する結像光学系と、
前記結像光学系が形成した前記被観察物の像を撮像する撮像手段と
を備えたことを特徴とする観察装置。
【請求項２】
請求項１に記載の観察装置において、
前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡに対し、
Ｐ／ｄ≦√［２｛１−０．０２／（ＮＡ2）｝］
の式を満たすことを特徴とする観察装置。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載の観察装置において、
前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の像側開口数ＮＡ’に対し、
Ｐ／ｄ≦２・ＮＡ’
の式を満たすことを特徴とする観察装置。
【請求項４】
請求項１〜請求項３の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源と前記被観察物との間隔ｄと、前記面光源の明暗のピッチＰとは、前記結像光学系の物体側開口数ＮＡ、前記面光源の波長λ、前記結像光学系の像側主面と前記撮像手段との間隔ａに対し、
λ／（２・ａ・ＮＡ）≦Ｐ／ｄ
の式を満たすことを特徴とする観察装置。
【請求項５】
請求項１〜請求項４の何れか一項に記載の観察装置において、
前記照明手段には、
略一様な強度で発光する面光源と、
前記面光源上に配置され、かつ開口部と遮光部とを繰り返し配置してなるマスクとが備えられる
ことを特徴とする観察装置。
【請求項６】
請求項１〜請求項４の何れか一項に記載の観察装置において、
前記照明手段には、
液晶空間変調素子が備えられる
ことを特徴とする観察装置。
【請求項７】
請求項１〜請求項６の何れか一項に記載の観察装置において、
前記撮像手段が取得した前記被観察物の画像から、前記面光源の像の成分を除去する画像処理手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項８】
請求項１〜請求項７の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源の明暗の位相を変化させる手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項９】
請求項１〜請求項８の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源の明暗のピッチを変化させる手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【請求項１０】
請求項１〜請求項９の何れか一項に記載の観察装置において、
前記面光源の明暗のデューティー比を変化させる手段を更に備えた
ことを特徴とする観察装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【公開番号】特開２００７−１７８４２６（Ｐ２００７−１７８４２６Ａ）
【公開日】平成１９年７月１２日（２００７．７．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−３２１９８９（Ｐ２００６−３２１９８９）
【出願日】平成１８年１１月２９日（２００６．１１．２９）
【出願人】（５０４３００１８１）国立大学法人浜松医科大学 (96)
【出願人】（０００００４１１２）株式会社ニコン (12,601)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年７月１２日（２００７．７．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月２９日（２００６．１１．２９）
【出願人】（５０４３００１８１）国立大学法人浜松医科大学 (96)
【出願人】（０００００４１１２）株式会社ニコン (12,601)
【Ｆターム（参考）】
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