難水溶性薬剤の投与のための自己ナノ乳化油性製剤
水溶性が低いかまたは非水溶性の、１種または２種以上の治療剤と、ビタミンＥと、プロピレングリコール、エタノール、およびこれらの混合物から選択される１種の共溶媒と、チロキサポール、および、チロキサポールとＴＰＧＳの混合物から選択される１種の界面活性剤と、必要に応じて、バイオエンハンサーとを含んでなる、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、医薬賦形剤製剤、より具体的には、難水溶性薬剤の吸収、特にタキソイドおよび細胞毒性剤の経口吸収を、薬剤の改善された溶解および吸収に基づいて増強し、かつ薬剤の用量−ＡＵＣが線形である薬物動態を提供する、自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）からなる医薬賦形剤組成物に関する。
【０００２】
一部の薬剤の臨床使用は、これらを、人体におけるこれらの治療標的に輸送するために、具体的な薬物送達システムが開発された場合にのみ可能となる。この問題は、特に直接の注射が不可能かまたは問題を含み得る、非水溶性または難水溶性の化合物にとって重要である。
【０００３】
難水溶性の治療物質の少数の例は、以下の、パルミトイルリゾキシン、ペンクロメジン（Penclomedine）、ビタミンＡおよびその誘導体（レチノイン酸、イソトレチノイン等）、タモキシフェン、エトポシド、カンプトテシン、ナベルビン、バルプロン酸、タクロリムス、シロリムス（ラパマイシン）、シクロスポリンＡ、クラリスロマイシン、テストステロン、エストラジオール、プロゲステロン、シプロフロキサシン、フェノフィブラート、ベンザフィブラート（Benzafibrate）、アジスロマイシン、イトラコナゾール、ミコナゾール、プロポフォール、ブリモニジン、ラタノプロストおよびパクリタキセルである。
【０００４】
最もよく知られているタキソイドの１つであるパクリタキセル（Paclitaxel）は、チューブリンの動態を乱す。パクリタキセルは、胸部、肺、頭部および頸部、膀胱、およびプラチナ耐性卵巣癌を含む広範な腫瘍の種類に対して、有意な臨床活性を有する（E.K.Rowinsky.The development and clinical utility of the taxoid class of antimicrotubule chemotherapy agents.Annu Rev Med.48:353-74(1997)）。しかしながら、パクリタキセルは低い治療係数（therapeutic index）を有する。パクリタキセルは、大きな幅広い縮合環系に加え、多数の疎水性置換基を伴う複雑なジテルペノイド産物であり、これが、深刻な製剤上の問題をもたらす、その乏しい水への溶解性（１μｇ／ｍｌ）の原因となっている（R.T.Liggins,W.L.Hunter,H.M.Burt.Solid-state characterization of paclitaxel.J Pharm Sci.86:1458-63(1997)）。パクリタキセルは極めて疎液性であり、そして、ダイズ油のような親油性溶媒へのパクリタキセルの溶解性は全く低く、製剤上の配慮のために単純な水中油型乳剤の使用を排除する。商業的に入手可能な製品であるタキソール（商標）は、全身投与のために、現在エタノールとポリオキシエチレン化ヒマシ油（クレモホールＥＬ）との混合物中に製剤されており、ポリオキシエチレン化ヒマシ油は、むしろ薬剤自体よりも、薬剤に関連する過敏性反応の主な原因となっているようである（R.E.Gregory,A.F.De Lisa.Paclitaxel:a new antineoplastic agent for refractory ovarian cancer.Clin Pharm.12:401-15(1993)）。さらに、ポリオキシエチレン化ヒマシ油はまた、パクリタキセルの非線形薬物動態挙動を引き起こす（A.Sparreboom,O.van Tellingen,W.J.Nooijen,J.H.Beijnen.Nonlinear pharmacokinetics of paclitaxel in mice results from the pharmaceutical vehicle Cremophor EL.Cancer Res.56:2112-5(1996)、O.van Tellingen,M.T.Huizing,V.R.Panday,J.H.Schellens,W.J.Nooijen,J.H.Beijnen.Cremophor EL causes(pseudo-)non-linear pharmacokinetics of paclitaxel in patients.Br J Cancer 81:330-5(1999)）。
【０００５】
現在の市販製品の副作用を減らすための現行の取り組みは、主にポリオキシエチレン化ヒマシ油を欠く製剤を開発することに焦点が当てられている。ナノ粒子（R.Cavalli,O.Caputo,M.R.Gasco.Preparation and characterization of solid lipid nanospheres containing paclitaxel.Eur J Pharm Sci.10:305-9(2000)、S.S.Feng,G.F.Huang,L.Mu.Nanospheres of biodegradable polymers:a system for clinical administration of an anticancer drug paclitaxel(Taxol).［処理中の引用(In Process Citation)].Ann Acad Med Singapore.29:633-9(2000))、リポソーム（P.Crosasso,M.Ceruti,P.Brusa,S.Arpicco,F.Dosio,L.Cattel.Preparation,characterization and properties of sterically stabilized paclitaxel-containing liposomes.J Controlled Release.63:19-30(2000)、A.Sharma,R.M.Straubinger.Novel taxol formulations:preparation and characterization of taxol-containing liposomes.Pharm Res.11:889-96(1994)）、水溶性プロドラッグ（J.M.Terwogt,B.Nuijen,W.W.T.B.Huinink,J.H.Beijnen.Alternative formulations of paclitaxel.Cancer Treat Rev.23:87-95(1997)、A.Pendri,C.D.Conover,R.B.Greenwald.Antitumor activity of paclitaxel-2'-glycinate conjugated to poly(ethylene
glycol):a water-soluble prodrug.Anticancer Drug Des.13:387-95(1998)）、乳剤（P.P.Constantinides,K.J.Lambert,A.K.Tustian,B.Schneider,S.Lalji,W.Ma,B.Wentzel,D.Kessler,D.Worah,and S.C.Quay.Formulation development and antitumor activity of a filter-sterilizable emulsion of paclitaxel.Pharm Res.17:175-82(2000)、B.B.Lundberg.A submicron lipid emulsion coated with amphipathic polyethylene glycol for parenteral administration of paclitaxel(Taxol(商標)).J Pharm Pharmacol.49:16-21(1997)、P.Kan,Z.B.Chen,C.J.Lee,I.M.Chu.Development of nonionic surfactant/phospholipid o/w emulsion as a paclitaxel delivery system.J Controlled Release.58:271-8(1999)、P.Simamora,R.M.Dannenfelser,S.E.Tabibi,S.H.Yalkowsky.Emulsion formulations for intravenous administration of paclitaxel.PDA J Pharm Sci Technol.52:170-2(1998))およびマイクロスフェア（R.T.Liggins,S.D'Amours,J.S.Demetrick,L.S.Machan,H.M.Burt.Paclitaxel loaded poly(L-lactic acid)microspheres for the prevention of intraperitoneal carcinomatosis after a surgical repair and tumor cell spill［処理中の引用］.Biomaterials.21:1959-69(2000)、Y.M.Wang,H.Sato,I.Adachi,I.Horikoshi.Preparation and characterization of poly(lactic-co-glycolic acid)microspheres for targeted delivery of a novel anticancer agent,taxol.Chem Pharm Bull(Tokyo).44:1935-40(1996)）のような代替的なシステムを用いてパクリタキセルを送達するために複数の試みがなされた。しかしながら、成功は現在のところはなお限定的である。これらの代替物のいずれも、臨床応用においてポリオキシエチレン化ヒマシ油に基づく媒体に取って代わる段階に至っていない。
【０００６】
ポリオキシエチレン化ヒマシ油から生じる過敏性反応を克服する別の取り組みは、パクリタキセルの経口製剤の設計であってもよい（J.M.M.Terwogt,M.M.Malingre,J.H.Beijnen,W.W.B.Huinink,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,M.Swart,and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.5:3379-84(1999)）。したがって、パクリタキセルの経口投与であれば、媒体物質であるポリオキシエチレン化ヒマシ油が引き起こす副作用が防止でき、さらに、外来診療所へ頻繁に通院する必要性の解消および長期投与の簡易化を含めて、静脈内投与に対する追加の利点が得られよう（R.T.Dorr.Pharmacology and toxicology of Cremophor EL diluent.Ann Pharmacother.28:S11-4(1994)、A.J.ten Tije,J.Verweij,W.J.Loos,and A.Sparreboom.Pharmacological effects of formulation vehicles:implications for cancer chemotherapy.Clin Pharmacokinet 42:665-85(2003)）。しかしながら、前臨床試験は、パクリタキセルが経口投与の後で有意には吸収されないことを示唆し、パクリタキセルの経口投与後のヒトにおける全身的生物学的利用能は６％未満である（J.M.M.Terwogt,M.M.Malingre,J.H.Beijnen,W.W.B.Huinink,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,M.Swart,and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.5:3379-84(1999)）。パクリタキセルの乏しい経口生物学的利用能を明らかにするために提案された説明は多因子的である。最も可能性の高い説明は、膜結合型薬剤排出ポンプであるＰ糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）に関するパクリタキセルの親和性、チトクロームＰ４５０（２Ｃ８および３Ａ４）による代謝、および乏しい水溶性である（R.T.Liggins,W.L.Hunter,H.M.Burt.Solid-state characterization of paclitaxel.J Pharm Sci.86:1458-63(1997)、J.van Asperen,O.van Tellingen,A.Sparreboom,A.H.Schinkel,P.Borst,W.J.Nooijen,and J.H.Beijnen.Enhanced oral bioavailability of paclitaxel in mice treated with the P-glycoprotein blocker SDZ PSC 833.Br J Cancer.76:1181-3(1997)、C.D.Britten,S.D.Baker,L.J.Denis,T.Johnson,R.Drengler,L.L.Siu,K.Duchin,J.Kuhn,and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin A:targeting clinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.6:3459-68(2000)）。さらに、ポリエトキシル化ヒマシ油（クレモホールＥＬ）は、経口投与されたタキソール（商標）の低い生物学的利用性および薬物動態の乏しい線形性の一因であることが示された（H.A.Bardelmeijer,M.Ouwehand,M.M.Malingre,J.H.Schellens,J.H.Beijnen,and O.van Tellingen.Entrapment by Cremophor EL decreases the absorption of paclitaxel from the gut.Cancer Chemother Pharmacol 49:119-125(2002)、M.M.Malingre,J.H.Schellens,O.Van Tellingen,M.Ouwehand,H.A.Bardelmeijer,H.Rosing,F.J.Koopman,M.E.Schot,W.W.Ten Bokkel Huinink,and J.H.Beijnen.The co-solvent Cremophor EL limits absorption of orally administered paclitaxel in cancer patients.Br J Cancer 85:1472-1477(2001)）。
【０００７】
パクリタキセルの経口生物学的利用能が、前記薬剤がＰ−ｇｐまたはチトクロームＰ４５０阻害剤と共に投与された場合に改善され得るかどうかを、動物および患者の両方において確かめるために、複数の試験が行われた（R.T.Dorr.Pharmacology and toxicology of Cremophor EL diluent.Ann Pharmacother.28:S11-4(1994)、J.van Asperen,O.van Tellingen,A.Sparreboom,A.H.Schinkel,P.Borst,W.J.Nooijen,and J.H.Beijnen.Enhanced oral bioavailability of paclitaxel in mice treated with the P-glycoprotein blocker SDZ PSC 833.Br J Cancer.76:1181-3(1997)、C.D.Britten,S.D.Baker,L.J.Denis,T.Johnson,R.Drengler,L.L.Siu,K.Duchin,J.Kuhn,and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin A:targeting clinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.6:3459-68(2000)）。よく知られた免疫抑制剤であるシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）は、パクリタキセルの経口吸収を増強する最も有望なｇｐ阻害剤のうちの１つであることが示された（J.M.M.Terwogt,M.M.Malingre,J.H.Beijnen,W.W.B.Huinink,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,M.Swart,and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.5:3379-84(1999)、C.D.Britten,S.D.Baker,L.J.Denis,T.Johnson,R.Drengler,L.L.Siu,K.Duchin,J.Kuhn,and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin A:targeting clinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.6:3459-68(2000)）。ＣｓＡは登録された薬剤であり、したがって、臨床試験のためにより比較的容易に利用できる。タキソールの経口投与のためのシクロスポリンＡの併用で、パクリタキセルのＡＵＣが増加した（２０％の生物学的利用能）。それでもなお、このＡＵＣの増強は、低用量について達成されただけであった。それどころか、より高用量の投与は、齧歯動物およびヒトの両方において非線形薬物動態を示した。ヒトにおける用量の５倍の増加（６０から３００ｍｇ／ｍ２へ）は、血漿ＡＵＣの２倍の増加をもたらしただけであった（M.M.Malingre,J.M.Terwogt,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 18:2468-2475.(2000)）。この非線形の用量−ＡＵＣ関係は、経口タキソール（商標）の使用にとって重大な障害となる。その上、経口タキソール（商標）は患者において乏しい耐容性を示し、さらに、悪心および嘔吐のような急性胃腸障害を引き起こした。この製剤は高含量のエタノール（５０％）を含み、臨床的に要求される高い用量は、有意な量のエタノールを摂取することになる。さらに、前記製剤はクレモホールＥＬの存在のために、非常に苦い。結論として、タキソール（商標）の経口投与は、摂取後の不良な耐容性により大幅に制限される。薬物動態が非線形であるため、臨床医はタキソール（商標）を高用量（＞３００ｍｇ／ｍ２パクリタキセル）で試験せざるを得ない（M.M.Malingre,J.M.Terwogt,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 18:2468-2475.(2000)）。進行した非小細胞肺癌を有する患者における、毎週の経口パクリタキセルに加えてのシクロスポリンの第二相試験では、患者間の変動は４０から４５％と、および個体内の変動は１５％と算出された（C.M.Kruijtzer,J.H.Schellens,J.Mezger,M.E.Scheulen,U.Keilholz,J.H.Beijnen,H.Rosing,R.A.Mathot,S.Marcus,H.van Tinteren,and P.Baas.Phase II and pharmacologic study of weekly oral paclitaxel plus cyclosporine in patients with advanced non-small-cell lung cancer.J Clin Oncol 20:4508-16(2002)）。これらの点も、パクリタキセルの経口治療における重大なタキソール（商標）の制限を示すものである。
【０００８】
最近、油と界面活性剤との等方性混合物からなる自己乳化油性製剤（self-emulsifying oily formulation）（ＳＥＯＦ）が、難吸収性の、疎水性のおよび／または親油性の薬剤の経口利用性を有意に改善することができることが報告された（T.Gershanik,S.Benita.Self-dispersing lipid formulations for improving oral absorption of lipophilic drugs.Eur J Pharm Biopharm.50:179-88(2000)）。ＳＥＯＦは、天然または合成油と、界面活性剤と、１種または２種以上の親水性溶媒と、共溶媒とから構成される。ＳＥＯＦの主要な特徴は、水相による希釈の後に軽く攪拌すると、微細な水中油型乳剤またはマイクロ乳剤を形成するその能力である。これらの製剤は、胃腸の内腔で分散し、胃腸液により希釈されると、マイクロ乳剤または微細な乳剤を形成することができる。非絶食イヌにおける生体内吸収試験において、親油性ナフタレン誘導体をＳＥＯＦにすると、他の任意の剤形の当該薬剤よりも、ＣｍａｘおよびＡＵＣが少なくとも３倍となった（N.H.Shah,M.T.Carvajal,C.I.Patel,M.H.Infeld,A.W.Malick.Self-emulsifying drug delivery systems(SEDDS)with polyglycolyzed glycerides for improving in vitro dissolution and oral absorption of lipophilic drugs.Int J Pharm.106:15-23(1994)）。ラットにおけるオンタゾラストの吸収は、全ての脂質に基づく製剤によって有意に増強された（D.J.Hauss,S.E.Fogal,J.V.Ficorilli,C.A.Price,T.Roy,A.A.Jayaraj,and J.J.Kierns.Lipid-based delivery systems for improving the bioavailability and lymphatic transport of a poorly water-soluble LTB4 inhibitor.J Pharm Sci.87:164-9(1998)）。マイクロ乳剤は、ＣｓＡを含む、難吸収性薬剤の薬剤可溶化／溶解、および／または腸内吸収を改善するのに成功裡に用いられた（P.P.Constantinides.Lipid microemulsions for improving drug dissolution and oral absorption:physical and biopharmaceutical aspects.Pharm Res.12:1561-72(1995)、S.Tenjarla.Microemulsions:an overview and pharmaceutical applications.Crit Rev Ther Drug Carrier Syst.16:461-521(1999)）。
【０００９】
従来の界面活性剤は、疎液性薬剤を捕獲することが知られている。たとえば、経口薬剤調製物の製剤へのクレモホールＥＬの追加は、有意に減少した薬剤の取り込みおよび低減した循環濃度をもたらした。薬剤製剤におけるクレモホールＥＬまたはトゥイーン８０の存在によって提示される欠点は、代替的な送達形態を開発するための多数の試験を後押しした。現在、薬学的、化学的または生物学的戦略に基づいた、トゥイーン８０とクレモホールＥＬとを含まないドセタキセルおよびパクリタキセルの製剤を開発するための複数の戦略が進行中である（A.J.ten Tije,J.Verweij,W.J.Loos,and A.Sparreboom.Pharmacological effects of formulation vehicles:implications for cancer chemotherapy.Clin Pharmacokinet 42:665-85(2003)、H.A.Bardelmeijer,M.Ouwehand,M.M.Malingre,J.H.Schellens,J.H.Beijnen,and O.van Tellingen.Entrapment by Cremophor EL decreases the absorption of paclitaxel from the gut.Cancer Chemother Pharmacol 49:119-125(2002)）。
【００１０】
経口パクリタキセルの投与のための自己乳化油性製剤の原理は、パクリタキセルのより良好な可溶化および吸収、および付随する生物学的利用能の変動の低減にある。
【発明の概要】
【００１１】
望まない副作用を引き起こすことなくタキサンを投与するより効率的な手段を提供し、かつ、改善された安定性およびより長い貯蔵寿命を有する、タキサン組成物および製剤が、依然として必要とされている。
【００１２】
本発明の目的は、
− 水溶性が低いかまたは非水溶性である、１種または２種以上の治療剤と、
− ビタミンＥと、
− プロピレングリコール、エタノール、およびこれらの混合物から選択される、１種の共溶媒と、
− チロキサポール、および、チロキサポールとＴＰＧＳの混合物から選択される、１種の界面活性剤と、
− 必要に応じて、バイオエンハンサーと
を含んでなる、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物である。
【発明の具体的説明】
【００１３】
本発明の特定の態様においては、組成物のｐＨは、治療剤の安定性をさらに改善するために低減されていてもよい。いくつかの態様では、ｐＨの低減は、アスコルビン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、シュウ酸、ギ酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マレイン酸、グルタミン酸、コハク酸、アスパラギン酸、ジアトリゾ酸、および酢酸を含む群から選択される酸性ｐＨ調整剤の添加によって達成される。酸性化剤はまた、塩酸、硫酸、リン酸、および硝酸を含むが、これらに限定されない無機酸であってもよい。無水クエン酸のような無水有機酸は、前記組成物において好ましく用いられ得る。
【００１４】
前記医薬組成物の別の特定の態様において、ビタミンＥは、最終的な組成物の２〜６％（ｗ／ｗ）までである。
【００１５】
本発明によれば、１種または２種以上の治療剤は、抗真菌薬、抗ウイルス薬、抗菌薬、抗炎症薬、抗癌薬、鎮痛剤、抗うつ薬、抗精神病薬、ホルモン類、制酸剤、冠血管拡張剤、脳血管拡張剤、向精神剤、抗新生物剤、興奮剤、抗ヒスタミン剤、血管拡張剤、抗不整脈剤、抗高血圧薬、血管収縮剤、抗片頭痛薬、抗凝固剤および抗血栓薬、解熱剤、睡眠薬、鎮静剤、抗痙攣剤、抗癲癇剤、神経筋薬、中枢神経系に作用する薬剤、血糖上昇および降下剤、利尿剤、抗肥満薬、同化薬、抗尿酸薬、および、これらの組み合わせを含む群から選択される。
【００１６】
特定の態様において、抗癌薬はタキソイドであり、好ましくはパクリタキセル、ドセタキセル、これらの誘導体、類縁体、プロドラッグとから選択される。
【００１７】
タキソイドがパクリタキセルである場合、それは最終的な組成物の０．５〜４％（ｗ／ｗ）、好ましくは１．５〜３％（ｗ／ｗ）の相対的な割合で存在する。
【００１８】
本発明の１つの特定の態様によれば、経口使用のための好ましい医薬組成物は、ビタミンＥと、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコールコハク酸塩１０００（ＴＰＧＳ）と、チロキサポールと、少なくとも１種の治療剤とを含有する乳剤を含む。
【００１９】
ビタミンＥ、ＴＰＧＳおよびチロキサポールの相対的な割合は、それぞれ最終的な組成物の２〜６、０〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、好ましくはそれぞれ最終的な組成物の２〜６、５〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、より好ましくはそれぞれ３〜５、２０〜４０および２０〜４０％であってもよい。
【００２０】
組成物が静脈内経路のために用いられる場合、組成物はＴＰＧＳを含まない。
【００２１】
本発明の別の特定の態様によれば、プロピレングリコールの相対的な割合は、最終的な組成物の０〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは２０％（ｗ／ｗ）に等しく、そして、エタノールの相対的な割合は、最終的な組成物の５〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは３０％（ｗ／ｗ）に等しい。
【００２２】
本発明によれば、エンハンサーは当業者によく知られたものである。エンハンサーは、チトクロームＰ４５０ ２Ｃ８阻害剤、チトクロームＰ４５０ ３Ａ４阻害剤、多剤耐性阻害剤、Ｐｇｐ阻害剤または非特異的阻害剤を含む群から有利に選択される。
【００２３】
特定の態様において、エンハンサーはシクロスポリンＡと、その類縁体と、誘導体とから選択される。
【００２４】
本発明による組成物は、動物またはヒトに血管内、経口、筋肉内、皮膚および皮下経路を介して投与され得る剤形を形成するために、任意の医薬賦形剤と結合されてもよい。具体的には、本発明による乳剤は、なかでも以下の任意の経路、即ち腹内、動脈内、関節内、嚢内、子宮頸管内、頭蓋内、管内、硬膜内、病巣内、眼内、小室内、腰椎内、壁内、手術中、体腔壁内、腹腔内、胸膜腔内、肺内、髄腔内、胸郭内、気管内、鼓室内、子宮内、脳室内、静脈内または経皮経路により与えられ得、または適切なエアロゾル噴射剤を用いて噴霧され得る。
【００２５】
自己乳化システムは、水性の媒質に希釈すると乳剤を与える。乳液滴の状態の油性核の存在（ミセルの状態では存在しない）は、薬剤のより高い量を溶解することを可能にし、そして、安定化の封入効果を提供する。油性核（ミセルではなく液滴）の存在は、タキソール（商標）のような従来のミセル形成システムよりも、より多量の薬剤（たとえば、パクリタキセル）をＳＮＥＯＦ内に装荷することを可能にする。さらに、同等の薬剤濃度では、乳剤は、ミセルよりもより良好なパクリタキセルの安定性（分解および／または沈殿）を提供する。自己ナノ乳化油性製剤は、１０ナノメートル以下の液滴直径を有するナノ乳剤を与える。パクリタキセルまたはシクロスポリンＡのような薬剤のＳＮＥＯＦ内への組み込みは、乳剤の粒度も自己ナノ乳化過程も有意には変化させない。薬剤放出および吸収に提供される表面は巨大であり、そして、１ｍｌのＳＮＥＯＦについて６００ｍ２超である。
【００２６】
本発明による組成物は、自己ナノ乳化（粘度、ＨＬＢ）を確実にし、そして、最良の薬剤可溶化特性を提供するために具体的に設計されている。さらに、界面活性剤の選択は、線形薬物動態を経口投与後にさえ確実にするように、薬剤を放出する能力によって条件づけられた。
【００２７】
本発明の意味において、薬物動態が線形である場合、治療剤の用量は、所望の治療剤の血漿レベルと比例している。
【００２８】
こうして、２つの新規な高分子界面活性剤、チロキサポール（オキシエチレン化ｔｅｒｔ−オクチルフェノールホルムアルデヒド重合体）およびアルファ−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ＴＰＧＳ）が、油性担体と併用された。ＳＮＥＯＦにおけるこれらの独特の組み合わせは、疎液性薬剤の線形放出と、高用量においてさえも線形薬物動態とを確実にする。
【００２９】
本発明の他の目的は、経口投与後、高用量においてさえも線形薬物動態を有する、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物の調製のための、ＴＰＧＳとチロキサポールとの使用である。
【００３０】
本発明の別の態様は、本発明による組成物の有効量がこれを必要とする患者に投与される、タキソイド反応性疾患の治療方法である。
【００３１】
経口投与タキソール（商標）に対する、本発明によるパクリタキセルＳＮＥＯＦの利点は、
−クレモホールＥＬの欠如、
−風味の向上、苦味の減少、
−パクリタキセル含有量が２．５から５倍
−同等の用量でエタノールが１／４から１／８、および
−摂取容量が１／１．２５から１／２．５、
である。
【００３２】
経口タキソール（商標）による６０または９０ｍｇ／ｍ２の低いパクリタキセル用量でさえ、患者の劣悪な耐容性（悪心、嘔吐）をもたらす（C.M.Kruijtzer,H.Boot,J.H.Beijnen,H.L.Lochs,F.X.Parnis,A.S.Planting,J.M.Pelgrims,R.Williams,R.A.Mathot,H.Rosing,M.E.Schot,H.Van Tinteren,and J.H.Schellens.Weekly oral paclitaxel as first-line treatment in patients with advanced gastric cancer.Ann Oncol 14:197-204(2003)）。摂取後のより良好な耐容性は、エタノール含有量および苦味低減の有意な低減に基づいて担われる。さらにまた、選択された賦形剤（ＴＰＧＳ、チロキサポール）は、クレモホールＥＬより低い齧歯類における経口ＤＬ５０を有する。低減した容量および低減した全体的な毒性は、最大耐用量（ＭＴＤ）が３６０ｍｇ／ｍ２と推定されている経口タキソール（商標）（M.M.Malingre,J.M.Terwogt,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 18:2468-2475.(2000)）よりも高いパクリタキセル用量を患者に投与することを、安全に許容することができる。さらに、経口で与えられたタキソール（商標）の用量−ＡＵＣの非線形性と、薬物動態の変動とは、経口による臨床実践使用および安全性への主要な制限を構成している（M.M.Malingre,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Ten Bokkel Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.A phase I and pharmacokinetic study of bi-daily dosing of oral paclitaxel in combination with cyclosporin A.Cancer Chemother Pharmacol 47:347-54(2001)）。
【００３３】
本発明による自己ナノ乳化組成物は、癌、腫瘍、カポジ肉腫、悪性腫瘍、組織損傷に続発する組織または細胞の制御されない増殖のような様々な疾患、ならびに、パクリタキセルおよびドセタキセル、および／または前記のパクリタキセルおよびドセタキセルのプロドラッグおよび誘導体のようなタキソイドに反応性の任意の他の疾患状態の治療のために使用されてもよい。経口のパクリタキセル、ドセタキセル、他のタキソイドおよびこれらのプロドラッグおよび誘導体により特に有効に治療され得る癌腫の種類の中には、肝細胞癌および肝転移、胃腸管、膵臓、前立腺および肺の癌、およびカポジ肉腫が含まれる。本発明による経口投与されるこれらの活性剤で有効に治療し得る非癌性疾患状態の例は、組織損傷に続発する組織または細胞の制御されない増殖、多発性嚢胞腎、炎症性疾患（たとえば、関節炎）、およびマラリアである。
【００３４】
新規な組成物は、既知の任意の経口医薬剤形で投与されてもよい。たとえば、製剤は軟質または硬質ゼラチンカプセル中に封入していてもよく、または、液状油性調製物の形態で投与されてもよい。各剤形は、組成物の必須成分の他に、慣用の医薬賦形剤、希釈剤、甘味料、風味剤、着色剤、および、経口投与を目的とした剤形に通常含まれる他の任意の不活性成分（たとえば、Remington's Pharmaceutical Sciences,17th Ed.,1985を参照）を含んでもよい。
【００３５】
経口剤形に含まれる各々の標的薬剤の正確な量は、患者の年齢、体重、疾患および状態により異なるだろう。
【００３６】
本発明の経口製剤の一部は、単独で投与された場合にタキソイド有効成分の治療的な血中濃度を提供し得るが、タキソイド反応性の疾患状態に苦しむ哺乳類患者（特にヒト患者）を治療するための本発明の有利な方法は、タキソイド標的薬剤を含む経口製剤を、少なくとも１用量の生物学的利用能を増強する経口剤の投与と併用して投与することである。このバイオエンハンサーは、ＳＮＥＯＦ中に共存的に製剤されるか、または別々に投与され得る。哺乳類患者を治療するための本発明の別の有利な方法は、タキソイド標的薬剤を含む経口製剤を、カルボプラチナ（carboplatinum）などのような別の抗腫瘍剤と併用して、または別々に投与することである。
【００３７】
パクリタキセル、その誘導体、類縁体およびプロドラッグ、ならびに他のタキソイドのヒトへの経口投与のための方法の好ましい態様は、血流中への無傷な標的薬剤の吸収量を増加させるために、経口投与と同時の、または経口投与の前の、または経口投与と同時および経口投与の前の両方における、経口吸収または生物学的利用能増強剤のヒト患者への経口投与を含む。
【００３８】
本発明の様々な利点は、以下の図面、表および実施例により容易に理解される。
【実施例】
【００３９】
実施例１： ＳＮＥＯＦの水による１：１０希釈の後のパクリタキセル乳剤の特性決定
１．材料および方法
１．１．材料
９９．３４％（ｗ／ｗ）の純度（ＨＰＬＣ）を有するパクリタキセル（分子量８５３）は、Ｆａｒｍａｃｈｅｍ（ルガノ、スイス）から購入した。ビタミンＥおよびチロキサポールは、Ｓｉｇｍａ（セントルイス、ミズーリ州、米国）から購入した。Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコールコハク酸塩１０００（ＴＰＧＳ）は、Eastman Chemical（キングズポート、テネシー州、ＵＳＡ）からの贈与であった。エタノールは、ＳＤＳ（ペパン、フランス）から購入した。全ての溶媒は、ＨＰＬＣ等級であった。
【００４０】
１．２．方法
パクリタキセルＳＮＥＯＦの調製
ＳＮＥＯＦは、まず、各々の賦形剤の連続した添加および混合によって調製した。油性担体が透明かつ均質であるときに、パクリタキセルが添加し、そして穏和な攪拌の下で迅速に溶解した。組み合わされた製剤については、シクロスポリンＡは最後に添加し、そして穏和な攪拌の下でＳＮＥＯＦ中に迅速に溶解した。同様の方法で、ｐＨ低下製剤は、事前に調製されたパクリタキセル含有ＳＮＥＯＦ中への、０．０１または０．０２％の無水クエン酸の添加によって得られる。その溶解は遅く、そして、攪拌を必要とする。
【００４１】
パクリタキセル乳剤は、ＳＮＥＯＦの蒸留水での希釈によって形成できる。
【００４２】
パクリタキセルＳＮＥＯＦの例
以下の組成物は、上記に開示された方法に従って調製した。
【表１】
【００４３】
組み合わせ製剤の例
以下の組成物は、上記に開示された方法に従って調製した。
【表２】
【００４４】
ｐＨ低下製剤の例
以下の組成物は、上記に開示された方法に従って調製した。
【表３】
【００４５】
液滴径
乳剤は、パクリタキセルＳＮＥＯＦの蒸留水による１：１０希釈後に形成した。得られた乳剤の液滴径は、Nanosizer（マルヴァーン、英国）を用いて、ＰＣＳ法により測定した。
【００４６】
安定性試験
１．５％および３％（ｗ／ｗ）のパクリタキセルを含むＳＮＥＯＦが調製した。１．５％のパクリタキセルに１．５％のシクロスポリンＡを加えた組み合わせ形態もまた調製した。ＳＮＥＯＦ中のパクリタキセルの化学的安定性は、分析ＨＰＬＣ法を使用して観察した（M.Andreeva,P.D.Iedmann,L.Binder,V.W.Armstrong,H.Meden,M.Binder,M.Oellerich.A simple and reliable reversed-phase high-performance liquid chromatographic procedure for determination of paclitaxel(taxol)in human serum.Ther Drug Monit.19:327-32(1997)、A.Sharma,W.D.Conway,R.M.Straubinger.Reversed-phase high-performance liquid chromatographic determination of taxol in mouse plasma.J Chromatogr B Biomed Appl.655:315-9(1994)）。
【００４７】
２．結果
２．１．物理化学的特性決定
液滴径
パクリタキセルＳＮＥＯＦ（１．５％および３％ｗ／ｗ）の蒸留水中への１：１０の希釈の後、得られたナノ乳剤の液滴径は１０±４．０ｎｍに等しい平均値にあり、低い多分散指数（＜０．１５）を伴った。
【００４８】
２．２．安定性試験
予備的な化学的安定性試験は、ＳＮＥＯＦ中のパクリタキセルが４．２５および４０℃で安定であることを示した。ＳＮＥＯＦ中の薬剤含有量は、４．２５および４０℃において、３カ月にわたり変化しなかった。
【００４９】
実施例２： シクロスポリンＡの経口前処置後のパクリタキセル経口乳剤の薬物動態試験
１．材料および方法
１．１．材料
１．１．１．動物
系統：ＦＶＢ野生型マウス
供給源：Netherlands Kancer Institute（ＮＫＩ）の動物施設の種畜
週齢：８〜１４週
体重：１８〜３０グラム
性別：雌
飼育場所：ＮＫＩの動物部門
【００５０】
１．１．２．薬剤
経口製剤：シクロスポリンＡ（サンディミュン（商標））
供給源：Ｎｏｖａｒｔｉｓ
媒体：クレモホールＥＬ：エタノール（６５：３５、ｖ／ｖ）
濃度：５０ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００５１】
経口タキソール：パクリタキセル（タキソール（商標））
供給源：Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ
媒体：クレモホール ＥＬ：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）
濃度：６ｍｇ／ｍｌ、注射用水（ＷＦＩ）中に１：３に希釈後は２ｍｇ／ｍＬ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００５２】
経口製剤１：パクリタキセル ＳＮＥＯＦ
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉ ＳＡＳ
媒体：チロキサポール／ＴＰＧＳ／エタノール／ビタミンＥ
濃度：ＳＥＯＦについては１５ｍｇ／ｍｌ、ＷＦＩ中に１：１０に希釈後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【表４】
【００５３】
本発明による経口製剤２：パクリタキセル／シクロスポリンＡ ＳＮＥＯＦ
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉ ＳＡＳ
媒体：チロキサポール／ＴＰＧＳ／エタノール／ビタミンＥ
濃度：パクリタキセル：ＳＥＯＦについては１５ｍｇ／ｍｌ、ＷＦＩ中に１：１０に希釈後は１．５ｍｇ／ｍｌ
シクロスポリンＡ：ＳＥＯＦについては１５ｍｇ／ｍｌ、１：１０に希釈後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：パクリタキセル１０ｍｇ／ｋｇ、およびシクロスポリンＡ１０ｍｇ／ｋｇ
【表５】
【００５４】
静注（I.V.）製剤：パクリタキセル
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉにより供給されたパクリタキセル（純粋化合物）
媒体：ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）
濃度：６ｍｇ／ｍｌ、生理食塩水への１：４希釈の後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：静脈内（ｉ．ｖ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００５５】
１．１．３．経口投与のための薬剤液の調製
シクロスポリンＡ（サンディミュン（商標））は注射用水に１：２５で希釈し、最終濃度を２ｍｇ／ｍｌとした。体重１グラムあたり５μｌの容量を動物に投与し、その結果シクロスポリンＡの用量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５６】
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）１番および２番は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、マイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を動物に投与し、パクリタキセルの用量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５７】
クレモホールＥＬ：エタノール中のパクリタキセル（タキソール（商標））を、注射用水で１．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度に希釈した（１：４希釈）。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を投与し、パクリタキセルの用量水準を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５８】
１．１．４．静脈内投与のための薬剤液の調製
ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）中のパクリタキセルの原液は、生理食塩水で１：４に希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度を達成した。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を動物に投与し、パクリタキセルの用量水準を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５９】
１．２．試験の準備
【表６】
【００６０】
集団１は、クレモホールＥＬおよびエタノールの従来製剤中のパクリタキセルを１０ｍｇ／ｋｇの用量で受けた。
【００６１】
集団２は、本発明によるパクリタキセルマイクロ乳液製剤を、１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの用量で受けた。
【００６２】
集団１および２は、シクロスポリンＡ１０ｍｇ／ｋｇの前処置を、パクリタキセル投与の３０分前に受けた。
【００６３】
集団３は、本発明によるマイクロ乳剤中のシクロスポリンおよびパクリタキセルの両方を、１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルおよび１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの用量水準で受けた。
【００６４】
集団４および５は、生物学的利用能の算出のための参照群であり、そして、１集団あたり２４匹の動物からなっていた。これらの集団は、経口のシクロスポリンＡまたはシクロスポリンＡ媒体の後、尾静脈中への静脈内注射によって、１０ｍｇ／ｋｇの用量でパクリタキセルを受けた。
【００６５】
経口薬剤投与は、ステンレス鋼製強制給餌器により、ガラス製注射器（２５０μｌ：ハミルトン・ルアー・チップ）または使い捨てポリプロピレン注射器（１ｍｌ）を用いて行った。強制給餌器は、食道を介して胃中に挿入した。シクロスポリンＡは、経口パクリタキセルの１８±２分前に経口投与した。パクリタキセルの経口投与後１、２、４および８時間の時点で、動物（１群１時点あたりｎ＝５）をメトファン（metofane）で麻酔し、血液を心臓穿刺によって採取した。
【００６６】
静脈内薬剤投与は、固定された２９ｇ針を備えた使い捨てポリプロピレン注射器（３００μｌ）を用いて、尾静脈内への注射で行った。シクロスポリンＡは、静脈内パクリタキセルの３０±５分前に投与された。静脈内パクリタキセル投与後５、３０分、１、２、４および８時間の時点で、動物（１群１時点あたりｎ＝４）をメトファンで麻酔し、血液を心臓穿刺によって採取した。
【００６７】
１．２．１．試料の回収、操作および貯蔵
規定した時点に、メトファンを用いて動物を麻酔した。胸部を直立位にして仰向けに固定後、２５ｇ針を装着した１ｍｌのポリプロピレン注射器を用いて、血液を心臓穿刺により回収した。血液を血液凝固阻止剤としてＥＤＴＡカリウムを含む管に直ちに移し、逆さにして混和した。血液試料は、バイアル中４０００ｇで５分間遠心分離した。上清の血漿分画を適切な表示を有する清浄な管に移し、分析まで−２０℃で保存した。
【００６８】
１．２．２．動物数／試料
以前の経験に基づいて、１時点あたり５匹の動物が、経口投与後の血漿濃度−時間曲線のＡＵＣを正確に決定するのに十分である一方、静脈内用量群については１時点あたり４匹の動物で十分であった。血漿試料は、全ての動物から得られた。
【００６９】
１．２．３．分析方法
血漿試料中のパクリタキセル濃度の分析は、検証済みのＨＰＬＣ−ＵＶ法を使用した（Sparreboom,A.,van Tellingen,O.,Nooijen,W.J.,and Beijnen,J.H.Determination of paclitaxel and metabolites in mouse plasma,tissues,urine and faeces by semi-automated reversed-phase high-performance liquid chromatography.J Chromatogr B Biomed Appl,664:383-391,1995.）。
【００７０】
１．２．４．分析性能管理
被験試料は、一組の較正標準とＱＣ試料とからなる分析バッチ内で、パクリタキセルについて１試料につき１回（in singular）分析した。一連の４０個の被験試料あたり、予想される範囲を超える濃度でパクリタキセルを含む少なくとも３つのＱＣ試料が、１試料につき２回（in duplicate）分析した。分析されたバッチの結果は、
−較正曲線の相関係数（ｒ）が、０．９８より高い場合
−６個のＱＣ試料のうちの少なくとも４個が、そのそれぞれの名目値の±２０％以内にあり、６個のＱＣ試料のうちの２個（両方とも同じ濃度ではない）が、そのそれぞれの名目値の±２０％の外部にあってもよい場合
に許容した。
【００７１】
１．２．５．データの再処理
クロマトグラフィーデータの取得および処理は、Chromeleon(v.6）クロマトグラフィーデータ装置を用いて行った。較正線は、二乗された濃度の逆数を重み因子として用いた重み付き最小２乗法回帰分析によって適合させた。
【００７２】
血漿濃度データを記録した。血漿濃度対時間曲線は、ＭＥＤＩ＼ＷＡＲＥソフトウェアパッケージ（バージョン３．０）を用いて適合させ、薬物動態変数である血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ）、最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、消失半減期（ｔｌ／２）および生物学的利用可能性（Ｆ）を計算した。
【００７３】
２．結果
結果は、図１および２および以下の表に示されている。
【表７】
【００７４】
３．結論
シクロスポリンＡは、経口のタキサンのバイオエンハンサーであることが知られている。シクロスポリンＡによる経口前処置は、静脈内投与されたパクリタキセルのＡＵＣの、５９６１±３７４から１４００６±７２５への（２．３５倍）有意な増加をもたらした。シクロスポリンＡによる経口前処置はまた、経口投与したパクリタキセルのＡＵＣの有意な増加をもたらした（データは示さず）。
【００７５】
野生型マウスに経口投与した、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡを加えた１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの用量において、ＳＮＥＯＦ製剤およびタキソール（商標）製剤のいずれも、およそ２０％の等しい生物学的利用能を示した。
【００７６】
パクリタキセルとシクロスポリンＡとを含むＳＮＥＯＦも、パクリタキセルの２０％の生物学的利用能をもたらす。この製剤は、薬剤とバイオエンハンサーとの組み合わせ経口剤形（ＳＮＥＯＦ）を使用する可能性を示す。
【００７７】
実施例３： 野生型マウスにおけるシクロスポリンＡ経口前処置の後の、またはＰ−糖タンパク質ノックアウトマウスにおけるシクロスポリン経口前処置なしの、パクリタキセル経口乳剤の用量対血漿ＡＵＣ薬物動態試験
１．材料および方法
１．１．材料
１．１．１．動物
系統：Ｍｄｒｌ ａ／ｂ ＫＯマウスおよびＦＶＢ野生型マウス
供給源：ＮＫＩの動物施設の種畜
週齢：８〜１４週
体重：１８〜３０グラム
性別：雌
飼育場所：ＮＫＩの動物部門
【００７８】
１．１．２．薬剤
経口製剤：パクリタキセルＳＮＥＯＦ
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉ Ｐｈａｒｍａ ＳＡ
媒体：チロキサポール／ＴＰＧＳ／エタノール／ビタミンＥ
濃度：パクリタキセル１５ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ）
用量：１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇ
【００７９】
【表８】
【００８０】
静注製剤：パクリタキセル
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉにより供給されるパクリタキセル（純粋化合物）
媒体：ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）
濃度：６ｍｇ／ｍｌ、ＷＦＩへの１：４希釈の後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：静脈内（ｉ．ｖ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００８１】
１．１．３．経口および静脈内投与のための薬剤液の調製
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルを含むマイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を経口投与し、パクリタキセルの用量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８２】
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルを含むマイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり２０μｌの容量を経口投与し、パクリタキセルの用量を３０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８３】
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルを含むマイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり４０μｌの容量を経口投与し、パクリタキセルの用量を３０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８４】
ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）中のパクリタキセルの原液は、生理食塩水で１：４に希釈され、１．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度を達成した。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を動物に静脈内投与し、パクリタキセルの用量水準を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８５】
１．２．試験の準備
１．２．１．血漿薬物動態試験
集団１２、１３および１４は、パクリタキセルの用量対血漿ＡＵＣの関係の線形性を、この薬剤をＰ糖タンパク質ノックアウトマウスに単独薬剤として与えた場合に調べるために、それぞれ１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの用量水準でＳＮＥＯＦ製剤のパクリタキセルを与える一方、集団１５、１６および１７は、パクリタキセルの用量対血漿ＡＵＣの関係の線形性を、この薬剤をシクロスポリンＡ前処置の後に、野生型マウスに与えた場合に調べるために、それぞれ１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの用量水準で、ＳＮＥＯＦ製剤のパクリタキセルを与えた。各々の集団は、２０匹のマウスからなっていた。
【００８６】
１．２．２．試料の回収、操作および貯蔵
血漿薬物動態試験
規定した時点に、動物はメトファンを用いて麻酔した。胸部を直立位にして仰向けに固定後、２５ｇ針が装着された１ｍｌのポリプロピレン注射器を用いて、血液を心臓穿刺により回収した。血液は血液凝固阻止剤としてＥＤＴＡカリウムを含む管に直ちに移され、転倒により混和された。血液試料は、バイアル中４０００ｇで５分間遠心分離した。上清の血漿分画を適切な表示を有する清浄な管に移し、分析まで−２０℃で保存した。
【００８７】
１時点あたり５匹の動物を、経口投薬後の血漿濃度−時間曲線のＡＵＣを決定するのに用いる一方、静脈内用量群については１時点あたり４匹の動物を用いた。その後の分析のための血漿試料は、全ての動物から得た。
【００８８】
１．３．分析方法
血漿試料中のパクリタキセル濃度の分析は、検証済みのＨＰＬＣ−ＵＶ法を使用した（Sparreboom,A.,van Tellingen,O.,Nooijen,W.J.,and Beijnen,J.H.Determination of paclitaxel and metabolites in mouse plasma,tissues,urine and faeces by semi-automated reversed-phase high-performance liquid chromatography.J Chromatogr B Biomed Appl,664:383-391,1995.）。
【００８９】
１．３．１．分析性能管理
被験試料は、一組の較正標準とＱＣ試料とからなる分析バッチ内で、パクリタキセルについて１試料につき１回分析した。一連の６０の被験試料あたり、予想される範囲を超える濃度でパクリタキセルを含む少なくとも３つのＱＣ試料が、１試料につき２回分析した。分析したバッチの結果は、
−較正曲線の相関係数（ｒ）が、０．９８より高い場合
−６個のＱＣ試料のうちの少なくとも４個が、そのそれぞれの名目値の±２０％以内にあり、６個のＱＣ試料のうちの２個（両方とも同じ濃度ではない）が、そのそれぞれの名目値の±２０％の外部にあってもよい場合
に許容した。
【００９０】
１．３．２．データの再処理
クロマトグラフィーデータの取得および処理は、Chromeleon(v.6)クロマトグラフィーデータ装置を用いて行った。較正線は、重み付き最小２乗法回帰分析によって適合させた。
【００９１】
血漿濃度データを記録した。血漿濃度対時間曲線は、ＭＥＤＩ＼ＷＡＲＥソフトウェアパッケージ（バージョン３．０）を用いて適合させ、薬物動態変数である血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ）、最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、消失半減期（ｔｌ／２）および生物学的利用可能性（Ｆ）を計算した。
【００９２】
２．結果
結果は、以下の表および図３および４に与えられている。
【表９】
【００９３】
３．結論
表から分かるように、Ｐ糖タンパク質ノックアウトマウスにおけるＳＮＥＯＦ中のパクリタキセルの平均経口生物学的利用能は、３０．４から３８．６％までの範囲であり、平均経口生物学的利用能の差が統計学的に異なっていないため、経口生物学的利用能は、試験した用量の範囲にわたり線形であるように見える。
【００９４】
シクロスポリンＡを伴う野生型マウスにおける１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの後のＡＵＣは、同じ用量を受けたノックアウトマウスの場合と同様であった。シクロスポリンＡの併用投与はまた、静注で与えられたパクリタキセルのＡＵＣを増加させるため（たとえば、（代謝性の）消失の抑制によって）、野生型マウスにおける経口生物学的利用能はより低かった。さらに、野生型動物における経口生物学的利用能は線形でなく、用量と共に有意に減少した。この試験において、シクロスポリンＡの用量水準は１０ｍｇ／ｋｇで一定に保たれており、この競合性のＰｇｐ阻害剤の濃度は、パクリタキセルのより高い用量水準を用いた場合に不十分である可能性がある。
【００９５】
最高血漿濃度に達する時間（Ｔｍａｘ）は、投与量が増すと増加し、これはマウスにおける胃内容排出および／または腸通過速度に対する影響があり得ることを示唆する。
【図面の簡単な説明】
【００９６】
【図１】１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴うか、または伴わない、静脈内投与された１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの薬物動態の分析結果を示す図である。
【図２】パクリタキセル単独と比較した、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴うか、または伴わない、経口での１０ｍｇ／ｋｇの本発明によるパクリタキセル製剤の薬物動態の分析結果を示す図である。
【図３】Ｐ−ｇｐノックアウトマウスにおける、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴わない、経口での１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの本発明によるパクリタキセル製剤の薬物動態の分析結果を示す図である。
【図４】野生型マウスにおける、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴う、経口での１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの本発明によるパクリタキセル製剤の薬物動態の分析結果を示す図である。
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、医薬賦形剤製剤、より具体的には、難水溶性薬剤の吸収、特にタキソイドおよび細胞毒性剤の経口吸収を、薬剤の改善された溶解および吸収に基づいて増強し、かつ薬剤の用量−ＡＵＣが線形である薬物動態を提供する、自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）からなる医薬賦形剤組成物に関する。
【０００２】
一部の薬剤の臨床使用は、これらを、人体におけるこれらの治療標的に輸送するために、具体的な薬物送達システムが開発された場合にのみ可能となる。この問題は、特に直接の注射が不可能かまたは問題を含み得る、非水溶性または難水溶性の化合物にとって重要である。
【０００３】
難水溶性の治療物質の少数の例は、以下の、パルミトイルリゾキシン、ペンクロメジン（Penclomedine）、ビタミンＡおよびその誘導体（レチノイン酸、イソトレチノイン等）、タモキシフェン、エトポシド、カンプトテシン、ナベルビン、バルプロン酸、タクロリムス、シロリムス（ラパマイシン）、シクロスポリンＡ、クラリスロマイシン、テストステロン、エストラジオール、プロゲステロン、シプロフロキサシン、フェノフィブラート、ベンザフィブラート（Benzafibrate）、アジスロマイシン、イトラコナゾール、ミコナゾール、プロポフォール、ブリモニジン、ラタノプロストおよびパクリタキセルである。
【０００４】
最もよく知られているタキソイドの１つであるパクリタキセル（Paclitaxel）は、チューブリンの動態を乱す。パクリタキセルは、胸部、肺、頭部および頸部、膀胱、およびプラチナ耐性卵巣癌を含む広範な腫瘍の種類に対して、有意な臨床活性を有する（E.K.Rowinsky.The development and clinical utility of the taxoid class of antimicrotubule chemotherapy agents.Annu Rev Med.48:353-74(1997)）。しかしながら、パクリタキセルは低い治療係数（therapeutic index）を有する。パクリタキセルは、大きな幅広い縮合環系に加え、多数の疎水性置換基を伴う複雑なジテルペノイド産物であり、これが、深刻な製剤上の問題をもたらす、その乏しい水への溶解性（１μｇ／ｍｌ）の原因となっている（R.T.Liggins,W.L.Hunter,H.M.Burt.Solid-state characterization of paclitaxel.J Pharm Sci.86:1458-63(1997)）。パクリタキセルは極めて疎液性であり、そして、ダイズ油のような親油性溶媒へのパクリタキセルの溶解性は全く低く、製剤上の配慮のために単純な水中油型乳剤の使用を排除する。商業的に入手可能な製品であるタキソール（商標）は、全身投与のために、現在エタノールとポリオキシエチレン化ヒマシ油（クレモホールＥＬ）との混合物中に製剤されており、ポリオキシエチレン化ヒマシ油は、むしろ薬剤自体よりも、薬剤に関連する過敏性反応の主な原因となっているようである（R.E.Gregory,A.F.De Lisa.Paclitaxel:a new antineoplastic agent for refractory ovarian cancer.Clin Pharm.12:401-15(1993)）。さらに、ポリオキシエチレン化ヒマシ油はまた、パクリタキセルの非線形薬物動態挙動を引き起こす（A.Sparreboom,O.van Tellingen,W.J.Nooijen,J.H.Beijnen.Nonlinear pharmacokinetics of paclitaxel in mice results from the pharmaceutical vehicle Cremophor EL.Cancer Res.56:2112-5(1996)、O.van Tellingen,M.T.Huizing,V.R.Panday,J.H.Schellens,W.J.Nooijen,J.H.Beijnen.Cremophor EL causes(pseudo-)non-linear pharmacokinetics of paclitaxel in patients.Br J Cancer 81:330-5(1999)）。
【０００５】
現在の市販製品の副作用を減らすための現行の取り組みは、主にポリオキシエチレン化ヒマシ油を欠く製剤を開発することに焦点が当てられている。ナノ粒子（R.Cavalli,O.Caputo,M.R.Gasco.Preparation and characterization of solid lipid nanospheres containing paclitaxel.Eur J Pharm Sci.10:305-9(2000)、S.S.Feng,G.F.Huang,L.Mu.Nanospheres of biodegradable polymers:a system for clinical administration of an anticancer drug paclitaxel(Taxol).［処理中の引用(In Process Citation)].Ann Acad Med Singapore.29:633-9(2000))、リポソーム（P.Crosasso,M.Ceruti,P.Brusa,S.Arpicco,F.Dosio,L.Cattel.Preparation,characterization and properties of sterically stabilized paclitaxel-containing liposomes.J Controlled Release.63:19-30(2000)、A.Sharma,R.M.Straubinger.Novel taxol formulations:preparation and characterization of taxol-containing liposomes.Pharm Res.11:889-96(1994)）、水溶性プロドラッグ（J.M.Terwogt,B.Nuijen,W.W.T.B.Huinink,J.H.Beijnen.Alternative formulations of paclitaxel.Cancer Treat Rev.23:87-95(1997)、A.Pendri,C.D.Conover,R.B.Greenwald.Antitumor activity of paclitaxel-2'-glycinate conjugated to poly(ethylene
glycol):a water-soluble prodrug.Anticancer Drug Des.13:387-95(1998)）、乳剤（P.P.Constantinides,K.J.Lambert,A.K.Tustian,B.Schneider,S.Lalji,W.Ma,B.Wentzel,D.Kessler,D.Worah,and S.C.Quay.Formulation development and antitumor activity of a filter-sterilizable emulsion of paclitaxel.Pharm Res.17:175-82(2000)、B.B.Lundberg.A submicron lipid emulsion coated with amphipathic polyethylene glycol for parenteral administration of paclitaxel(Taxol(商標)).J Pharm Pharmacol.49:16-21(1997)、P.Kan,Z.B.Chen,C.J.Lee,I.M.Chu.Development of nonionic surfactant/phospholipid o/w emulsion as a paclitaxel delivery system.J Controlled Release.58:271-8(1999)、P.Simamora,R.M.Dannenfelser,S.E.Tabibi,S.H.Yalkowsky.Emulsion formulations for intravenous administration of paclitaxel.PDA J Pharm Sci Technol.52:170-2(1998))およびマイクロスフェア（R.T.Liggins,S.D'Amours,J.S.Demetrick,L.S.Machan,H.M.Burt.Paclitaxel loaded poly(L-lactic acid)microspheres for the prevention of intraperitoneal carcinomatosis after a surgical repair and tumor cell spill［処理中の引用］.Biomaterials.21:1959-69(2000)、Y.M.Wang,H.Sato,I.Adachi,I.Horikoshi.Preparation and characterization of poly(lactic-co-glycolic acid)microspheres for targeted delivery of a novel anticancer agent,taxol.Chem Pharm Bull(Tokyo).44:1935-40(1996)）のような代替的なシステムを用いてパクリタキセルを送達するために複数の試みがなされた。しかしながら、成功は現在のところはなお限定的である。これらの代替物のいずれも、臨床応用においてポリオキシエチレン化ヒマシ油に基づく媒体に取って代わる段階に至っていない。
【０００６】
ポリオキシエチレン化ヒマシ油から生じる過敏性反応を克服する別の取り組みは、パクリタキセルの経口製剤の設計であってもよい（J.M.M.Terwogt,M.M.Malingre,J.H.Beijnen,W.W.B.Huinink,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,M.Swart,and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.5:3379-84(1999)）。したがって、パクリタキセルの経口投与であれば、媒体物質であるポリオキシエチレン化ヒマシ油が引き起こす副作用が防止でき、さらに、外来診療所へ頻繁に通院する必要性の解消および長期投与の簡易化を含めて、静脈内投与に対する追加の利点が得られよう（R.T.Dorr.Pharmacology and toxicology of Cremophor EL diluent.Ann Pharmacother.28:S11-4(1994)、A.J.ten Tije,J.Verweij,W.J.Loos,and A.Sparreboom.Pharmacological effects of formulation vehicles:implications for cancer chemotherapy.Clin Pharmacokinet 42:665-85(2003)）。しかしながら、前臨床試験は、パクリタキセルが経口投与の後で有意には吸収されないことを示唆し、パクリタキセルの経口投与後のヒトにおける全身的生物学的利用能は６％未満である（J.M.M.Terwogt,M.M.Malingre,J.H.Beijnen,W.W.B.Huinink,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,M.Swart,and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.5:3379-84(1999)）。パクリタキセルの乏しい経口生物学的利用能を明らかにするために提案された説明は多因子的である。最も可能性の高い説明は、膜結合型薬剤排出ポンプであるＰ糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）に関するパクリタキセルの親和性、チトクロームＰ４５０（２Ｃ８および３Ａ４）による代謝、および乏しい水溶性である（R.T.Liggins,W.L.Hunter,H.M.Burt.Solid-state characterization of paclitaxel.J Pharm Sci.86:1458-63(1997)、J.van Asperen,O.van Tellingen,A.Sparreboom,A.H.Schinkel,P.Borst,W.J.Nooijen,and J.H.Beijnen.Enhanced oral bioavailability of paclitaxel in mice treated with the P-glycoprotein blocker SDZ PSC 833.Br J Cancer.76:1181-3(1997)、C.D.Britten,S.D.Baker,L.J.Denis,T.Johnson,R.Drengler,L.L.Siu,K.Duchin,J.Kuhn,and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin A:targeting clinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.6:3459-68(2000)）。さらに、ポリエトキシル化ヒマシ油（クレモホールＥＬ）は、経口投与されたタキソール（商標）の低い生物学的利用性および薬物動態の乏しい線形性の一因であることが示された（H.A.Bardelmeijer,M.Ouwehand,M.M.Malingre,J.H.Schellens,J.H.Beijnen,and O.van Tellingen.Entrapment by Cremophor EL decreases the absorption of paclitaxel from the gut.Cancer Chemother Pharmacol 49:119-125(2002)、M.M.Malingre,J.H.Schellens,O.Van Tellingen,M.Ouwehand,H.A.Bardelmeijer,H.Rosing,F.J.Koopman,M.E.Schot,W.W.Ten Bokkel Huinink,and J.H.Beijnen.The co-solvent Cremophor EL limits absorption of orally administered paclitaxel in cancer patients.Br J Cancer 85:1472-1477(2001)）。
【０００７】
パクリタキセルの経口生物学的利用能が、前記薬剤がＰ−ｇｐまたはチトクロームＰ４５０阻害剤と共に投与された場合に改善され得るかどうかを、動物および患者の両方において確かめるために、複数の試験が行われた（R.T.Dorr.Pharmacology and toxicology of Cremophor EL diluent.Ann Pharmacother.28:S11-4(1994)、J.van Asperen,O.van Tellingen,A.Sparreboom,A.H.Schinkel,P.Borst,W.J.Nooijen,and J.H.Beijnen.Enhanced oral bioavailability of paclitaxel in mice treated with the P-glycoprotein blocker SDZ PSC 833.Br J Cancer.76:1181-3(1997)、C.D.Britten,S.D.Baker,L.J.Denis,T.Johnson,R.Drengler,L.L.Siu,K.Duchin,J.Kuhn,and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin A:targeting clinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.6:3459-68(2000)）。よく知られた免疫抑制剤であるシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）は、パクリタキセルの経口吸収を増強する最も有望なｇｐ阻害剤のうちの１つであることが示された（J.M.M.Terwogt,M.M.Malingre,J.H.Beijnen,W.W.B.Huinink,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,M.Swart,and J.H.M.Schellens.Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel.Clin Cancer Res.5:3379-84(1999)、C.D.Britten,S.D.Baker,L.J.Denis,T.Johnson,R.Drengler,L.L.Siu,K.Duchin,J.Kuhn,and E.K.Rowinsky.Oral paclitaxel and concurrent cyclosporin A:targeting clinically relevant systemic exposure to paclitaxel.Clin Cancer Res.6:3459-68(2000)）。ＣｓＡは登録された薬剤であり、したがって、臨床試験のためにより比較的容易に利用できる。タキソールの経口投与のためのシクロスポリンＡの併用で、パクリタキセルのＡＵＣが増加した（２０％の生物学的利用能）。それでもなお、このＡＵＣの増強は、低用量について達成されただけであった。それどころか、より高用量の投与は、齧歯動物およびヒトの両方において非線形薬物動態を示した。ヒトにおける用量の５倍の増加（６０から３００ｍｇ／ｍ２へ）は、血漿ＡＵＣの２倍の増加をもたらしただけであった（M.M.Malingre,J.M.Terwogt,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 18:2468-2475.(2000)）。この非線形の用量−ＡＵＣ関係は、経口タキソール（商標）の使用にとって重大な障害となる。その上、経口タキソール（商標）は患者において乏しい耐容性を示し、さらに、悪心および嘔吐のような急性胃腸障害を引き起こした。この製剤は高含量のエタノール（５０％）を含み、臨床的に要求される高い用量は、有意な量のエタノールを摂取することになる。さらに、前記製剤はクレモホールＥＬの存在のために、非常に苦い。結論として、タキソール（商標）の経口投与は、摂取後の不良な耐容性により大幅に制限される。薬物動態が非線形であるため、臨床医はタキソール（商標）を高用量（＞３００ｍｇ／ｍ２パクリタキセル）で試験せざるを得ない（M.M.Malingre,J.M.Terwogt,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 18:2468-2475.(2000)）。進行した非小細胞肺癌を有する患者における、毎週の経口パクリタキセルに加えてのシクロスポリンの第二相試験では、患者間の変動は４０から４５％と、および個体内の変動は１５％と算出された（C.M.Kruijtzer,J.H.Schellens,J.Mezger,M.E.Scheulen,U.Keilholz,J.H.Beijnen,H.Rosing,R.A.Mathot,S.Marcus,H.van Tinteren,and P.Baas.Phase II and pharmacologic study of weekly oral paclitaxel plus cyclosporine in patients with advanced non-small-cell lung cancer.J Clin Oncol 20:4508-16(2002)）。これらの点も、パクリタキセルの経口治療における重大なタキソール（商標）の制限を示すものである。
【０００８】
最近、油と界面活性剤との等方性混合物からなる自己乳化油性製剤（self-emulsifying oily formulation）（ＳＥＯＦ）が、難吸収性の、疎水性のおよび／または親油性の薬剤の経口利用性を有意に改善することができることが報告された（T.Gershanik,S.Benita.Self-dispersing lipid formulations for improving oral absorption of lipophilic drugs.Eur J Pharm Biopharm.50:179-88(2000)）。ＳＥＯＦは、天然または合成油と、界面活性剤と、１種または２種以上の親水性溶媒と、共溶媒とから構成される。ＳＥＯＦの主要な特徴は、水相による希釈の後に軽く攪拌すると、微細な水中油型乳剤またはマイクロ乳剤を形成するその能力である。これらの製剤は、胃腸の内腔で分散し、胃腸液により希釈されると、マイクロ乳剤または微細な乳剤を形成することができる。非絶食イヌにおける生体内吸収試験において、親油性ナフタレン誘導体をＳＥＯＦにすると、他の任意の剤形の当該薬剤よりも、ＣｍａｘおよびＡＵＣが少なくとも３倍となった（N.H.Shah,M.T.Carvajal,C.I.Patel,M.H.Infeld,A.W.Malick.Self-emulsifying drug delivery systems(SEDDS)with polyglycolyzed glycerides for improving in vitro dissolution and oral absorption of lipophilic drugs.Int J Pharm.106:15-23(1994)）。ラットにおけるオンタゾラストの吸収は、全ての脂質に基づく製剤によって有意に増強された（D.J.Hauss,S.E.Fogal,J.V.Ficorilli,C.A.Price,T.Roy,A.A.Jayaraj,and J.J.Kierns.Lipid-based delivery systems for improving the bioavailability and lymphatic transport of a poorly water-soluble LTB4 inhibitor.J Pharm Sci.87:164-9(1998)）。マイクロ乳剤は、ＣｓＡを含む、難吸収性薬剤の薬剤可溶化／溶解、および／または腸内吸収を改善するのに成功裡に用いられた（P.P.Constantinides.Lipid microemulsions for improving drug dissolution and oral absorption:physical and biopharmaceutical aspects.Pharm Res.12:1561-72(1995)、S.Tenjarla.Microemulsions:an overview and pharmaceutical applications.Crit Rev Ther Drug Carrier Syst.16:461-521(1999)）。
【０００９】
従来の界面活性剤は、疎液性薬剤を捕獲することが知られている。たとえば、経口薬剤調製物の製剤へのクレモホールＥＬの追加は、有意に減少した薬剤の取り込みおよび低減した循環濃度をもたらした。薬剤製剤におけるクレモホールＥＬまたはトゥイーン８０の存在によって提示される欠点は、代替的な送達形態を開発するための多数の試験を後押しした。現在、薬学的、化学的または生物学的戦略に基づいた、トゥイーン８０とクレモホールＥＬとを含まないドセタキセルおよびパクリタキセルの製剤を開発するための複数の戦略が進行中である（A.J.ten Tije,J.Verweij,W.J.Loos,and A.Sparreboom.Pharmacological effects of formulation vehicles:implications for cancer chemotherapy.Clin Pharmacokinet 42:665-85(2003)、H.A.Bardelmeijer,M.Ouwehand,M.M.Malingre,J.H.Schellens,J.H.Beijnen,and O.van Tellingen.Entrapment by Cremophor EL decreases the absorption of paclitaxel from the gut.Cancer Chemother Pharmacol 49:119-125(2002)）。
【００１０】
経口パクリタキセルの投与のための自己乳化油性製剤の原理は、パクリタキセルのより良好な可溶化および吸収、および付随する生物学的利用能の変動の低減にある。
【発明の概要】
【００１１】
望まない副作用を引き起こすことなくタキサンを投与するより効率的な手段を提供し、かつ、改善された安定性およびより長い貯蔵寿命を有する、タキサン組成物および製剤が、依然として必要とされている。
【００１２】
本発明の目的は、
− 水溶性が低いかまたは非水溶性である、１種または２種以上の治療剤と、
− ビタミンＥと、
− プロピレングリコール、エタノール、およびこれらの混合物から選択される、１種の共溶媒と、
− チロキサポール、および、チロキサポールとＴＰＧＳの混合物から選択される、１種の界面活性剤と、
− 必要に応じて、バイオエンハンサーと
を含んでなる、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物である。
【発明の具体的説明】
【００１３】
本発明の特定の態様においては、組成物のｐＨは、治療剤の安定性をさらに改善するために低減されていてもよい。いくつかの態様では、ｐＨの低減は、アスコルビン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、シュウ酸、ギ酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マレイン酸、グルタミン酸、コハク酸、アスパラギン酸、ジアトリゾ酸、および酢酸を含む群から選択される酸性ｐＨ調整剤の添加によって達成される。酸性化剤はまた、塩酸、硫酸、リン酸、および硝酸を含むが、これらに限定されない無機酸であってもよい。無水クエン酸のような無水有機酸は、前記組成物において好ましく用いられ得る。
【００１４】
前記医薬組成物の別の特定の態様において、ビタミンＥは、最終的な組成物の２〜６％（ｗ／ｗ）までである。
【００１５】
本発明によれば、１種または２種以上の治療剤は、抗真菌薬、抗ウイルス薬、抗菌薬、抗炎症薬、抗癌薬、鎮痛剤、抗うつ薬、抗精神病薬、ホルモン類、制酸剤、冠血管拡張剤、脳血管拡張剤、向精神剤、抗新生物剤、興奮剤、抗ヒスタミン剤、血管拡張剤、抗不整脈剤、抗高血圧薬、血管収縮剤、抗片頭痛薬、抗凝固剤および抗血栓薬、解熱剤、睡眠薬、鎮静剤、抗痙攣剤、抗癲癇剤、神経筋薬、中枢神経系に作用する薬剤、血糖上昇および降下剤、利尿剤、抗肥満薬、同化薬、抗尿酸薬、および、これらの組み合わせを含む群から選択される。
【００１６】
特定の態様において、抗癌薬はタキソイドであり、好ましくはパクリタキセル、ドセタキセル、これらの誘導体、類縁体、プロドラッグとから選択される。
【００１７】
タキソイドがパクリタキセルである場合、それは最終的な組成物の０．５〜４％（ｗ／ｗ）、好ましくは１．５〜３％（ｗ／ｗ）の相対的な割合で存在する。
【００１８】
本発明の１つの特定の態様によれば、経口使用のための好ましい医薬組成物は、ビタミンＥと、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコールコハク酸塩１０００（ＴＰＧＳ）と、チロキサポールと、少なくとも１種の治療剤とを含有する乳剤を含む。
【００１９】
ビタミンＥ、ＴＰＧＳおよびチロキサポールの相対的な割合は、それぞれ最終的な組成物の２〜６、０〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、好ましくはそれぞれ最終的な組成物の２〜６、５〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、より好ましくはそれぞれ３〜５、２０〜４０および２０〜４０％であってもよい。
【００２０】
組成物が静脈内経路のために用いられる場合、組成物はＴＰＧＳを含まない。
【００２１】
本発明の別の特定の態様によれば、プロピレングリコールの相対的な割合は、最終的な組成物の０〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは２０％（ｗ／ｗ）に等しく、そして、エタノールの相対的な割合は、最終的な組成物の５〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは３０％（ｗ／ｗ）に等しい。
【００２２】
本発明によれば、エンハンサーは当業者によく知られたものである。エンハンサーは、チトクロームＰ４５０ ２Ｃ８阻害剤、チトクロームＰ４５０ ３Ａ４阻害剤、多剤耐性阻害剤、Ｐｇｐ阻害剤または非特異的阻害剤を含む群から有利に選択される。
【００２３】
特定の態様において、エンハンサーはシクロスポリンＡと、その類縁体と、誘導体とから選択される。
【００２４】
本発明による組成物は、動物またはヒトに血管内、経口、筋肉内、皮膚および皮下経路を介して投与され得る剤形を形成するために、任意の医薬賦形剤と結合されてもよい。具体的には、本発明による乳剤は、なかでも以下の任意の経路、即ち腹内、動脈内、関節内、嚢内、子宮頸管内、頭蓋内、管内、硬膜内、病巣内、眼内、小室内、腰椎内、壁内、手術中、体腔壁内、腹腔内、胸膜腔内、肺内、髄腔内、胸郭内、気管内、鼓室内、子宮内、脳室内、静脈内または経皮経路により与えられ得、または適切なエアロゾル噴射剤を用いて噴霧され得る。
【００２５】
自己乳化システムは、水性の媒質に希釈すると乳剤を与える。乳液滴の状態の油性核の存在（ミセルの状態では存在しない）は、薬剤のより高い量を溶解することを可能にし、そして、安定化の封入効果を提供する。油性核（ミセルではなく液滴）の存在は、タキソール（商標）のような従来のミセル形成システムよりも、より多量の薬剤（たとえば、パクリタキセル）をＳＮＥＯＦ内に装荷することを可能にする。さらに、同等の薬剤濃度では、乳剤は、ミセルよりもより良好なパクリタキセルの安定性（分解および／または沈殿）を提供する。自己ナノ乳化油性製剤は、１０ナノメートル以下の液滴直径を有するナノ乳剤を与える。パクリタキセルまたはシクロスポリンＡのような薬剤のＳＮＥＯＦ内への組み込みは、乳剤の粒度も自己ナノ乳化過程も有意には変化させない。薬剤放出および吸収に提供される表面は巨大であり、そして、１ｍｌのＳＮＥＯＦについて６００ｍ２超である。
【００２６】
本発明による組成物は、自己ナノ乳化（粘度、ＨＬＢ）を確実にし、そして、最良の薬剤可溶化特性を提供するために具体的に設計されている。さらに、界面活性剤の選択は、線形薬物動態を経口投与後にさえ確実にするように、薬剤を放出する能力によって条件づけられた。
【００２７】
本発明の意味において、薬物動態が線形である場合、治療剤の用量は、所望の治療剤の血漿レベルと比例している。
【００２８】
こうして、２つの新規な高分子界面活性剤、チロキサポール（オキシエチレン化ｔｅｒｔ−オクチルフェノールホルムアルデヒド重合体）およびアルファ−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ＴＰＧＳ）が、油性担体と併用された。ＳＮＥＯＦにおけるこれらの独特の組み合わせは、疎液性薬剤の線形放出と、高用量においてさえも線形薬物動態とを確実にする。
【００２９】
本発明の他の目的は、経口投与後、高用量においてさえも線形薬物動態を有する、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物の調製のための、ＴＰＧＳとチロキサポールとの使用である。
【００３０】
本発明の別の態様は、本発明による組成物の有効量がこれを必要とする患者に投与される、タキソイド反応性疾患の治療方法である。
【００３１】
経口投与タキソール（商標）に対する、本発明によるパクリタキセルＳＮＥＯＦの利点は、
−クレモホールＥＬの欠如、
−風味の向上、苦味の減少、
−パクリタキセル含有量が２．５から５倍
−同等の用量でエタノールが１／４から１／８、および
−摂取容量が１／１．２５から１／２．５、
である。
【００３２】
経口タキソール（商標）による６０または９０ｍｇ／ｍ２の低いパクリタキセル用量でさえ、患者の劣悪な耐容性（悪心、嘔吐）をもたらす（C.M.Kruijtzer,H.Boot,J.H.Beijnen,H.L.Lochs,F.X.Parnis,A.S.Planting,J.M.Pelgrims,R.Williams,R.A.Mathot,H.Rosing,M.E.Schot,H.Van Tinteren,and J.H.Schellens.Weekly oral paclitaxel as first-line treatment in patients with advanced gastric cancer.Ann Oncol 14:197-204(2003)）。摂取後のより良好な耐容性は、エタノール含有量および苦味低減の有意な低減に基づいて担われる。さらにまた、選択された賦形剤（ＴＰＧＳ、チロキサポール）は、クレモホールＥＬより低い齧歯類における経口ＤＬ５０を有する。低減した容量および低減した全体的な毒性は、最大耐用量（ＭＴＤ）が３６０ｍｇ／ｍ２と推定されている経口タキソール（商標）（M.M.Malingre,J.M.Terwogt,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.Phase I and pharmacokinetic study of oral paclitaxel.J Clin Oncol 18:2468-2475.(2000)）よりも高いパクリタキセル用量を患者に投与することを、安全に許容することができる。さらに、経口で与えられたタキソール（商標）の用量−ＡＵＣの非線形性と、薬物動態の変動とは、経口による臨床実践使用および安全性への主要な制限を構成している（M.M.Malingre,J.H.Beijnen,H.Rosing,F.J.Koopman,O.van Tellingen,K.Duchin,W.W.Ten Bokkel Huinink,M.Swart,J.Lieverst,and J.H.Schellens.A phase I and pharmacokinetic study of bi-daily dosing of oral paclitaxel in combination with cyclosporin A.Cancer Chemother Pharmacol 47:347-54(2001)）。
【００３３】
本発明による自己ナノ乳化組成物は、癌、腫瘍、カポジ肉腫、悪性腫瘍、組織損傷に続発する組織または細胞の制御されない増殖のような様々な疾患、ならびに、パクリタキセルおよびドセタキセル、および／または前記のパクリタキセルおよびドセタキセルのプロドラッグおよび誘導体のようなタキソイドに反応性の任意の他の疾患状態の治療のために使用されてもよい。経口のパクリタキセル、ドセタキセル、他のタキソイドおよびこれらのプロドラッグおよび誘導体により特に有効に治療され得る癌腫の種類の中には、肝細胞癌および肝転移、胃腸管、膵臓、前立腺および肺の癌、およびカポジ肉腫が含まれる。本発明による経口投与されるこれらの活性剤で有効に治療し得る非癌性疾患状態の例は、組織損傷に続発する組織または細胞の制御されない増殖、多発性嚢胞腎、炎症性疾患（たとえば、関節炎）、およびマラリアである。
【００３４】
新規な組成物は、既知の任意の経口医薬剤形で投与されてもよい。たとえば、製剤は軟質または硬質ゼラチンカプセル中に封入していてもよく、または、液状油性調製物の形態で投与されてもよい。各剤形は、組成物の必須成分の他に、慣用の医薬賦形剤、希釈剤、甘味料、風味剤、着色剤、および、経口投与を目的とした剤形に通常含まれる他の任意の不活性成分（たとえば、Remington's Pharmaceutical Sciences,17th Ed.,1985を参照）を含んでもよい。
【００３５】
経口剤形に含まれる各々の標的薬剤の正確な量は、患者の年齢、体重、疾患および状態により異なるだろう。
【００３６】
本発明の経口製剤の一部は、単独で投与された場合にタキソイド有効成分の治療的な血中濃度を提供し得るが、タキソイド反応性の疾患状態に苦しむ哺乳類患者（特にヒト患者）を治療するための本発明の有利な方法は、タキソイド標的薬剤を含む経口製剤を、少なくとも１用量の生物学的利用能を増強する経口剤の投与と併用して投与することである。このバイオエンハンサーは、ＳＮＥＯＦ中に共存的に製剤されるか、または別々に投与され得る。哺乳類患者を治療するための本発明の別の有利な方法は、タキソイド標的薬剤を含む経口製剤を、カルボプラチナ（carboplatinum）などのような別の抗腫瘍剤と併用して、または別々に投与することである。
【００３７】
パクリタキセル、その誘導体、類縁体およびプロドラッグ、ならびに他のタキソイドのヒトへの経口投与のための方法の好ましい態様は、血流中への無傷な標的薬剤の吸収量を増加させるために、経口投与と同時の、または経口投与の前の、または経口投与と同時および経口投与の前の両方における、経口吸収または生物学的利用能増強剤のヒト患者への経口投与を含む。
【００３８】
本発明の様々な利点は、以下の図面、表および実施例により容易に理解される。
【実施例】
【００３９】
実施例１： ＳＮＥＯＦの水による１：１０希釈の後のパクリタキセル乳剤の特性決定
１．材料および方法
１．１．材料
９９．３４％（ｗ／ｗ）の純度（ＨＰＬＣ）を有するパクリタキセル（分子量８５３）は、Ｆａｒｍａｃｈｅｍ（ルガノ、スイス）から購入した。ビタミンＥおよびチロキサポールは、Ｓｉｇｍａ（セントルイス、ミズーリ州、米国）から購入した。Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコールコハク酸塩１０００（ＴＰＧＳ）は、Eastman Chemical（キングズポート、テネシー州、ＵＳＡ）からの贈与であった。エタノールは、ＳＤＳ（ペパン、フランス）から購入した。全ての溶媒は、ＨＰＬＣ等級であった。
【００４０】
１．２．方法
パクリタキセルＳＮＥＯＦの調製
ＳＮＥＯＦは、まず、各々の賦形剤の連続した添加および混合によって調製した。油性担体が透明かつ均質であるときに、パクリタキセルが添加し、そして穏和な攪拌の下で迅速に溶解した。組み合わされた製剤については、シクロスポリンＡは最後に添加し、そして穏和な攪拌の下でＳＮＥＯＦ中に迅速に溶解した。同様の方法で、ｐＨ低下製剤は、事前に調製されたパクリタキセル含有ＳＮＥＯＦ中への、０．０１または０．０２％の無水クエン酸の添加によって得られる。その溶解は遅く、そして、攪拌を必要とする。
【００４１】
パクリタキセル乳剤は、ＳＮＥＯＦの蒸留水での希釈によって形成できる。
【００４２】
パクリタキセルＳＮＥＯＦの例
以下の組成物は、上記に開示された方法に従って調製した。
【表１】
【００４３】
組み合わせ製剤の例
以下の組成物は、上記に開示された方法に従って調製した。
【表２】
【００４４】
ｐＨ低下製剤の例
以下の組成物は、上記に開示された方法に従って調製した。
【表３】
【００４５】
液滴径
乳剤は、パクリタキセルＳＮＥＯＦの蒸留水による１：１０希釈後に形成した。得られた乳剤の液滴径は、Nanosizer（マルヴァーン、英国）を用いて、ＰＣＳ法により測定した。
【００４６】
安定性試験
１．５％および３％（ｗ／ｗ）のパクリタキセルを含むＳＮＥＯＦが調製した。１．５％のパクリタキセルに１．５％のシクロスポリンＡを加えた組み合わせ形態もまた調製した。ＳＮＥＯＦ中のパクリタキセルの化学的安定性は、分析ＨＰＬＣ法を使用して観察した（M.Andreeva,P.D.Iedmann,L.Binder,V.W.Armstrong,H.Meden,M.Binder,M.Oellerich.A simple and reliable reversed-phase high-performance liquid chromatographic procedure for determination of paclitaxel(taxol)in human serum.Ther Drug Monit.19:327-32(1997)、A.Sharma,W.D.Conway,R.M.Straubinger.Reversed-phase high-performance liquid chromatographic determination of taxol in mouse plasma.J Chromatogr B Biomed Appl.655:315-9(1994)）。
【００４７】
２．結果
２．１．物理化学的特性決定
液滴径
パクリタキセルＳＮＥＯＦ（１．５％および３％ｗ／ｗ）の蒸留水中への１：１０の希釈の後、得られたナノ乳剤の液滴径は１０±４．０ｎｍに等しい平均値にあり、低い多分散指数（＜０．１５）を伴った。
【００４８】
２．２．安定性試験
予備的な化学的安定性試験は、ＳＮＥＯＦ中のパクリタキセルが４．２５および４０℃で安定であることを示した。ＳＮＥＯＦ中の薬剤含有量は、４．２５および４０℃において、３カ月にわたり変化しなかった。
【００４９】
実施例２： シクロスポリンＡの経口前処置後のパクリタキセル経口乳剤の薬物動態試験
１．材料および方法
１．１．材料
１．１．１．動物
系統：ＦＶＢ野生型マウス
供給源：Netherlands Kancer Institute（ＮＫＩ）の動物施設の種畜
週齢：８〜１４週
体重：１８〜３０グラム
性別：雌
飼育場所：ＮＫＩの動物部門
【００５０】
１．１．２．薬剤
経口製剤：シクロスポリンＡ（サンディミュン（商標））
供給源：Ｎｏｖａｒｔｉｓ
媒体：クレモホールＥＬ：エタノール（６５：３５、ｖ／ｖ）
濃度：５０ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００５１】
経口タキソール：パクリタキセル（タキソール（商標））
供給源：Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ
媒体：クレモホール ＥＬ：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）
濃度：６ｍｇ／ｍｌ、注射用水（ＷＦＩ）中に１：３に希釈後は２ｍｇ／ｍＬ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００５２】
経口製剤１：パクリタキセル ＳＮＥＯＦ
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉ ＳＡＳ
媒体：チロキサポール／ＴＰＧＳ／エタノール／ビタミンＥ
濃度：ＳＥＯＦについては１５ｍｇ／ｍｌ、ＷＦＩ中に１：１０に希釈後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【表４】
【００５３】
本発明による経口製剤２：パクリタキセル／シクロスポリンＡ ＳＮＥＯＦ
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉ ＳＡＳ
媒体：チロキサポール／ＴＰＧＳ／エタノール／ビタミンＥ
濃度：パクリタキセル：ＳＥＯＦについては１５ｍｇ／ｍｌ、ＷＦＩ中に１：１０に希釈後は１．５ｍｇ／ｍｌ
シクロスポリンＡ：ＳＥＯＦについては１５ｍｇ／ｍｌ、１：１０に希釈後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ．）
用量：パクリタキセル１０ｍｇ／ｋｇ、およびシクロスポリンＡ１０ｍｇ／ｋｇ
【表５】
【００５４】
静注（I.V.）製剤：パクリタキセル
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉにより供給されたパクリタキセル（純粋化合物）
媒体：ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）
濃度：６ｍｇ／ｍｌ、生理食塩水への１：４希釈の後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：静脈内（ｉ．ｖ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００５５】
１．１．３．経口投与のための薬剤液の調製
シクロスポリンＡ（サンディミュン（商標））は注射用水に１：２５で希釈し、最終濃度を２ｍｇ／ｍｌとした。体重１グラムあたり５μｌの容量を動物に投与し、その結果シクロスポリンＡの用量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５６】
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）１番および２番は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、マイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を動物に投与し、パクリタキセルの用量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５７】
クレモホールＥＬ：エタノール中のパクリタキセル（タキソール（商標））を、注射用水で１．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度に希釈した（１：４希釈）。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を投与し、パクリタキセルの用量水準を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５８】
１．１．４．静脈内投与のための薬剤液の調製
ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）中のパクリタキセルの原液は、生理食塩水で１：４に希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度を達成した。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を動物に投与し、パクリタキセルの用量水準を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００５９】
１．２．試験の準備
【表６】
【００６０】
集団１は、クレモホールＥＬおよびエタノールの従来製剤中のパクリタキセルを１０ｍｇ／ｋｇの用量で受けた。
【００６１】
集団２は、本発明によるパクリタキセルマイクロ乳液製剤を、１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの用量で受けた。
【００６２】
集団１および２は、シクロスポリンＡ１０ｍｇ／ｋｇの前処置を、パクリタキセル投与の３０分前に受けた。
【００６３】
集団３は、本発明によるマイクロ乳剤中のシクロスポリンおよびパクリタキセルの両方を、１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルおよび１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの用量水準で受けた。
【００６４】
集団４および５は、生物学的利用能の算出のための参照群であり、そして、１集団あたり２４匹の動物からなっていた。これらの集団は、経口のシクロスポリンＡまたはシクロスポリンＡ媒体の後、尾静脈中への静脈内注射によって、１０ｍｇ／ｋｇの用量でパクリタキセルを受けた。
【００６５】
経口薬剤投与は、ステンレス鋼製強制給餌器により、ガラス製注射器（２５０μｌ：ハミルトン・ルアー・チップ）または使い捨てポリプロピレン注射器（１ｍｌ）を用いて行った。強制給餌器は、食道を介して胃中に挿入した。シクロスポリンＡは、経口パクリタキセルの１８±２分前に経口投与した。パクリタキセルの経口投与後１、２、４および８時間の時点で、動物（１群１時点あたりｎ＝５）をメトファン（metofane）で麻酔し、血液を心臓穿刺によって採取した。
【００６６】
静脈内薬剤投与は、固定された２９ｇ針を備えた使い捨てポリプロピレン注射器（３００μｌ）を用いて、尾静脈内への注射で行った。シクロスポリンＡは、静脈内パクリタキセルの３０±５分前に投与された。静脈内パクリタキセル投与後５、３０分、１、２、４および８時間の時点で、動物（１群１時点あたりｎ＝４）をメトファンで麻酔し、血液を心臓穿刺によって採取した。
【００６７】
１．２．１．試料の回収、操作および貯蔵
規定した時点に、メトファンを用いて動物を麻酔した。胸部を直立位にして仰向けに固定後、２５ｇ針を装着した１ｍｌのポリプロピレン注射器を用いて、血液を心臓穿刺により回収した。血液を血液凝固阻止剤としてＥＤＴＡカリウムを含む管に直ちに移し、逆さにして混和した。血液試料は、バイアル中４０００ｇで５分間遠心分離した。上清の血漿分画を適切な表示を有する清浄な管に移し、分析まで−２０℃で保存した。
【００６８】
１．２．２．動物数／試料
以前の経験に基づいて、１時点あたり５匹の動物が、経口投与後の血漿濃度−時間曲線のＡＵＣを正確に決定するのに十分である一方、静脈内用量群については１時点あたり４匹の動物で十分であった。血漿試料は、全ての動物から得られた。
【００６９】
１．２．３．分析方法
血漿試料中のパクリタキセル濃度の分析は、検証済みのＨＰＬＣ−ＵＶ法を使用した（Sparreboom,A.,van Tellingen,O.,Nooijen,W.J.,and Beijnen,J.H.Determination of paclitaxel and metabolites in mouse plasma,tissues,urine and faeces by semi-automated reversed-phase high-performance liquid chromatography.J Chromatogr B Biomed Appl,664:383-391,1995.）。
【００７０】
１．２．４．分析性能管理
被験試料は、一組の較正標準とＱＣ試料とからなる分析バッチ内で、パクリタキセルについて１試料につき１回（in singular）分析した。一連の４０個の被験試料あたり、予想される範囲を超える濃度でパクリタキセルを含む少なくとも３つのＱＣ試料が、１試料につき２回（in duplicate）分析した。分析されたバッチの結果は、
−較正曲線の相関係数（ｒ）が、０．９８より高い場合
−６個のＱＣ試料のうちの少なくとも４個が、そのそれぞれの名目値の±２０％以内にあり、６個のＱＣ試料のうちの２個（両方とも同じ濃度ではない）が、そのそれぞれの名目値の±２０％の外部にあってもよい場合
に許容した。
【００７１】
１．２．５．データの再処理
クロマトグラフィーデータの取得および処理は、Chromeleon(v.6）クロマトグラフィーデータ装置を用いて行った。較正線は、二乗された濃度の逆数を重み因子として用いた重み付き最小２乗法回帰分析によって適合させた。
【００７２】
血漿濃度データを記録した。血漿濃度対時間曲線は、ＭＥＤＩ＼ＷＡＲＥソフトウェアパッケージ（バージョン３．０）を用いて適合させ、薬物動態変数である血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ）、最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、消失半減期（ｔｌ／２）および生物学的利用可能性（Ｆ）を計算した。
【００７３】
２．結果
結果は、図１および２および以下の表に示されている。
【表７】
【００７４】
３．結論
シクロスポリンＡは、経口のタキサンのバイオエンハンサーであることが知られている。シクロスポリンＡによる経口前処置は、静脈内投与されたパクリタキセルのＡＵＣの、５９６１±３７４から１４００６±７２５への（２．３５倍）有意な増加をもたらした。シクロスポリンＡによる経口前処置はまた、経口投与したパクリタキセルのＡＵＣの有意な増加をもたらした（データは示さず）。
【００７５】
野生型マウスに経口投与した、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡを加えた１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの用量において、ＳＮＥＯＦ製剤およびタキソール（商標）製剤のいずれも、およそ２０％の等しい生物学的利用能を示した。
【００７６】
パクリタキセルとシクロスポリンＡとを含むＳＮＥＯＦも、パクリタキセルの２０％の生物学的利用能をもたらす。この製剤は、薬剤とバイオエンハンサーとの組み合わせ経口剤形（ＳＮＥＯＦ）を使用する可能性を示す。
【００７７】
実施例３： 野生型マウスにおけるシクロスポリンＡ経口前処置の後の、またはＰ−糖タンパク質ノックアウトマウスにおけるシクロスポリン経口前処置なしの、パクリタキセル経口乳剤の用量対血漿ＡＵＣ薬物動態試験
１．材料および方法
１．１．材料
１．１．１．動物
系統：Ｍｄｒｌ ａ／ｂ ＫＯマウスおよびＦＶＢ野生型マウス
供給源：ＮＫＩの動物施設の種畜
週齢：８〜１４週
体重：１８〜３０グラム
性別：雌
飼育場所：ＮＫＩの動物部門
【００７８】
１．１．２．薬剤
経口製剤：パクリタキセルＳＮＥＯＦ
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉ Ｐｈａｒｍａ ＳＡ
媒体：チロキサポール／ＴＰＧＳ／エタノール／ビタミンＥ
濃度：パクリタキセル１５ｍｇ／ｍｌ
経路：経口（ｐ．ｏ）
用量：１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇ
【００７９】
【表８】
【００８０】
静注製剤：パクリタキセル
供給源：Ｎｏｖａｇａｌｉにより供給されるパクリタキセル（純粋化合物）
媒体：ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）
濃度：６ｍｇ／ｍｌ、ＷＦＩへの１：４希釈の後は１．５ｍｇ／ｍｌ
経路：静脈内（ｉ．ｖ．）
用量：１０ｍｇ／ｋｇ
【００８１】
１．１．３．経口および静脈内投与のための薬剤液の調製
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルを含むマイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を経口投与し、パクリタキセルの用量を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８２】
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルを含むマイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり２０μｌの容量を経口投与し、パクリタキセルの用量を３０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８３】
パクリタキセル自己ナノ乳化油性製剤（ＳＮＥＯＦ）は、ＷＦＩに１：１０で希釈し、１．５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルを含むマイクロ乳剤を与えた。１グラム（体重）あたり４０μｌの容量を経口投与し、パクリタキセルの用量を３０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８４】
ポリソルベート８０：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）中のパクリタキセルの原液は、生理食塩水で１：４に希釈され、１．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度を達成した。１グラム（体重）あたり６．６７μｌの容量を動物に静脈内投与し、パクリタキセルの用量水準を１０ｍｇ／ｋｇとした。
【００８５】
１．２．試験の準備
１．２．１．血漿薬物動態試験
集団１２、１３および１４は、パクリタキセルの用量対血漿ＡＵＣの関係の線形性を、この薬剤をＰ糖タンパク質ノックアウトマウスに単独薬剤として与えた場合に調べるために、それぞれ１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの用量水準でＳＮＥＯＦ製剤のパクリタキセルを与える一方、集団１５、１６および１７は、パクリタキセルの用量対血漿ＡＵＣの関係の線形性を、この薬剤をシクロスポリンＡ前処置の後に、野生型マウスに与えた場合に調べるために、それぞれ１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの用量水準で、ＳＮＥＯＦ製剤のパクリタキセルを与えた。各々の集団は、２０匹のマウスからなっていた。
【００８６】
１．２．２．試料の回収、操作および貯蔵
血漿薬物動態試験
規定した時点に、動物はメトファンを用いて麻酔した。胸部を直立位にして仰向けに固定後、２５ｇ針が装着された１ｍｌのポリプロピレン注射器を用いて、血液を心臓穿刺により回収した。血液は血液凝固阻止剤としてＥＤＴＡカリウムを含む管に直ちに移され、転倒により混和された。血液試料は、バイアル中４０００ｇで５分間遠心分離した。上清の血漿分画を適切な表示を有する清浄な管に移し、分析まで−２０℃で保存した。
【００８７】
１時点あたり５匹の動物を、経口投薬後の血漿濃度−時間曲線のＡＵＣを決定するのに用いる一方、静脈内用量群については１時点あたり４匹の動物を用いた。その後の分析のための血漿試料は、全ての動物から得た。
【００８８】
１．３．分析方法
血漿試料中のパクリタキセル濃度の分析は、検証済みのＨＰＬＣ−ＵＶ法を使用した（Sparreboom,A.,van Tellingen,O.,Nooijen,W.J.,and Beijnen,J.H.Determination of paclitaxel and metabolites in mouse plasma,tissues,urine and faeces by semi-automated reversed-phase high-performance liquid chromatography.J Chromatogr B Biomed Appl,664:383-391,1995.）。
【００８９】
１．３．１．分析性能管理
被験試料は、一組の較正標準とＱＣ試料とからなる分析バッチ内で、パクリタキセルについて１試料につき１回分析した。一連の６０の被験試料あたり、予想される範囲を超える濃度でパクリタキセルを含む少なくとも３つのＱＣ試料が、１試料につき２回分析した。分析したバッチの結果は、
−較正曲線の相関係数（ｒ）が、０．９８より高い場合
−６個のＱＣ試料のうちの少なくとも４個が、そのそれぞれの名目値の±２０％以内にあり、６個のＱＣ試料のうちの２個（両方とも同じ濃度ではない）が、そのそれぞれの名目値の±２０％の外部にあってもよい場合
に許容した。
【００９０】
１．３．２．データの再処理
クロマトグラフィーデータの取得および処理は、Chromeleon(v.6)クロマトグラフィーデータ装置を用いて行った。較正線は、重み付き最小２乗法回帰分析によって適合させた。
【００９１】
血漿濃度データを記録した。血漿濃度対時間曲線は、ＭＥＤＩ＼ＷＡＲＥソフトウェアパッケージ（バージョン３．０）を用いて適合させ、薬物動態変数である血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ）、最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、消失半減期（ｔｌ／２）および生物学的利用可能性（Ｆ）を計算した。
【００９２】
２．結果
結果は、以下の表および図３および４に与えられている。
【表９】
【００９３】
３．結論
表から分かるように、Ｐ糖タンパク質ノックアウトマウスにおけるＳＮＥＯＦ中のパクリタキセルの平均経口生物学的利用能は、３０．４から３８．６％までの範囲であり、平均経口生物学的利用能の差が統計学的に異なっていないため、経口生物学的利用能は、試験した用量の範囲にわたり線形であるように見える。
【００９４】
シクロスポリンＡを伴う野生型マウスにおける１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの後のＡＵＣは、同じ用量を受けたノックアウトマウスの場合と同様であった。シクロスポリンＡの併用投与はまた、静注で与えられたパクリタキセルのＡＵＣを増加させるため（たとえば、（代謝性の）消失の抑制によって）、野生型マウスにおける経口生物学的利用能はより低かった。さらに、野生型動物における経口生物学的利用能は線形でなく、用量と共に有意に減少した。この試験において、シクロスポリンＡの用量水準は１０ｍｇ／ｋｇで一定に保たれており、この競合性のＰｇｐ阻害剤の濃度は、パクリタキセルのより高い用量水準を用いた場合に不十分である可能性がある。
【００９５】
最高血漿濃度に達する時間（Ｔｍａｘ）は、投与量が増すと増加し、これはマウスにおける胃内容排出および／または腸通過速度に対する影響があり得ることを示唆する。
【図面の簡単な説明】
【００９６】
【図１】１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴うか、または伴わない、静脈内投与された１０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルの薬物動態の分析結果を示す図である。
【図２】パクリタキセル単独と比較した、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴うか、または伴わない、経口での１０ｍｇ／ｋｇの本発明によるパクリタキセル製剤の薬物動態の分析結果を示す図である。
【図３】Ｐ−ｇｐノックアウトマウスにおける、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴わない、経口での１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの本発明によるパクリタキセル製剤の薬物動態の分析結果を示す図である。
【図４】野生型マウスにおける、１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡの経口前処置を伴う、経口での１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇの本発明によるパクリタキセル製剤の薬物動態の分析結果を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性が低いかまたは非水溶性である、１種または２種以上の治療剤と、
ビタミンＥと、
プロピレングリコール、エタノール、およびこれらの混合物から選択される、１種の共溶媒と、
チロキサポール、および、チロキサポールとＴＰＧＳの混合物から選択される、１種の界面活性剤と、
必要に応じて、バイオエンハンサーと
を含んでなる、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物。
【請求項２】
酸性のｐＨ調整剤をさらに含んでなる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
ビタミンＥが、最終的な組成物の２から６％（ｗ／ｗ）までである、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
１種または２種以上の治療剤が、抗真菌薬、抗ウイルス薬、抗菌薬、抗炎症薬、抗癌薬、鎮痛剤、抗うつ薬、抗精神病薬、ホルモン類、制酸剤、冠血管拡張剤、脳血管拡張剤、向精神剤、抗新生物剤、興奮剤、抗ヒスタミン剤、血管拡張剤、抗不整脈剤、抗高血圧薬、血管収縮剤、抗片頭痛薬、抗凝固剤および抗血栓薬、解熱剤、睡眠薬、鎮静剤、抗痙攣剤、抗癲癇剤、神経筋薬、中枢神経系に作用する薬剤、血糖上昇および降下剤、利尿剤、抗肥満薬、同化薬、抗尿酸薬、免疫抑制薬、および、これらの組み合わせを含む群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
１種または２種以上の治療剤が、抗癌薬、抗新生物薬、およびこれらの組み合わせを含む群から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗癌薬が、タキソイドであり、好ましくはパクリタキセル、ドセタキセル、これらの誘導体、類縁体、およびプロドラッグから選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
タキソイドが、最終的な組成物の０．５〜４％（ｗ／ｗ）、好ましくは１．５〜３％（ｗ／ｗ）の相対的な割合のパクリタキセルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ビタミンＥ、ＴＰＧＳおよびチロキサポールの相対的な割合が、それぞれ最終的な組成物の２〜６、０〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、好ましくはそれぞれ最終的な組成物の２〜６、５〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、より好ましくはそれぞれ３〜５、２０〜４０および２０〜４０％である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
プロピレングリコールの相対的な割合が、最終的な組成物の０〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは２０％（ｗ／ｗ）に等しく、かつ、エタノールの相対的な割合が、最終的な組成物の５〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは３０％（ｗ／ｗ）に等しい、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
エンハンサーが、チトクロームＰ４５０ ２Ｃ８阻害剤、チトクロームＰ４５０ ３Ａ４阻害剤、多剤耐性阻害剤、Ｐｇｐ阻害剤または非特異的阻害剤を含む群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
エンハンサーが、シクロスポリンＡ、その類縁体および誘導体である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
酸性のｐＨ調整剤が無水クエン酸である、請求項２〜１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
適切な医薬賦形剤と結合された、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の無水自己ナノ乳化油性製剤組成物を含んでなる、医薬剤形。
【請求項１４】
経口経路に適した、請求項１３に記載の医薬剤形。
【請求項１５】
組成物が、軟質または硬質ゼラチンカプセル中に封入されるか、または液体油性調製物である、請求項１４に記載の医薬剤形。
【請求項１６】
静脈内経路に適した、請求項１３に記載の医薬剤形。
【請求項１７】
タキソイド反応性疾患の治療に有用な医薬の製造ための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の無水自己ナノ乳化油性製剤の使用。
【請求項１８】
同時に、併用して、または先に、生物学的利用能増強剤および／または他の抗腫瘍剤を受容している患者への投与のための、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
投与される治療剤の用量が、該治療剤の所望の血漿濃度と線形的に比例する、医薬の製造のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の無水自己ナノ乳化油性製剤の使用。
【請求項２０】
投与される治療剤の用量が、該治療剤の所望の血漿濃度と線形的に比例する、医薬の製造に適した、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物を調製するための、チロキサポール、およびチロキサポールとＴＰＧＳの混合物の使用。
【請求項２１】
請求項１に記載の組成物の有効量をそれを必要とする患者に投与する、タキソイド反応性疾患の治療方法。
【請求項１】
水溶性が低いかまたは非水溶性である、１種または２種以上の治療剤と、
ビタミンＥと、
プロピレングリコール、エタノール、およびこれらの混合物から選択される、１種の共溶媒と、
チロキサポール、および、チロキサポールとＴＰＧＳの混合物から選択される、１種の界面活性剤と、
必要に応じて、バイオエンハンサーと
を含んでなる、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物。
【請求項２】
酸性のｐＨ調整剤をさらに含んでなる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
ビタミンＥが、最終的な組成物の２から６％（ｗ／ｗ）までである、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
１種または２種以上の治療剤が、抗真菌薬、抗ウイルス薬、抗菌薬、抗炎症薬、抗癌薬、鎮痛剤、抗うつ薬、抗精神病薬、ホルモン類、制酸剤、冠血管拡張剤、脳血管拡張剤、向精神剤、抗新生物剤、興奮剤、抗ヒスタミン剤、血管拡張剤、抗不整脈剤、抗高血圧薬、血管収縮剤、抗片頭痛薬、抗凝固剤および抗血栓薬、解熱剤、睡眠薬、鎮静剤、抗痙攣剤、抗癲癇剤、神経筋薬、中枢神経系に作用する薬剤、血糖上昇および降下剤、利尿剤、抗肥満薬、同化薬、抗尿酸薬、免疫抑制薬、および、これらの組み合わせを含む群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
１種または２種以上の治療剤が、抗癌薬、抗新生物薬、およびこれらの組み合わせを含む群から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗癌薬が、タキソイドであり、好ましくはパクリタキセル、ドセタキセル、これらの誘導体、類縁体、およびプロドラッグから選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
タキソイドが、最終的な組成物の０．５〜４％（ｗ／ｗ）、好ましくは１．５〜３％（ｗ／ｗ）の相対的な割合のパクリタキセルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ビタミンＥ、ＴＰＧＳおよびチロキサポールの相対的な割合が、それぞれ最終的な組成物の２〜６、０〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、好ましくはそれぞれ最終的な組成物の２〜６、５〜６０および５〜７０（ｗ／ｗ）、より好ましくはそれぞれ３〜５、２０〜４０および２０〜４０％である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
プロピレングリコールの相対的な割合が、最終的な組成物の０〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは２０％（ｗ／ｗ）に等しく、かつ、エタノールの相対的な割合が、最終的な組成物の５〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲にあり、好ましくは３０％（ｗ／ｗ）に等しい、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
エンハンサーが、チトクロームＰ４５０ ２Ｃ８阻害剤、チトクロームＰ４５０ ３Ａ４阻害剤、多剤耐性阻害剤、Ｐｇｐ阻害剤または非特異的阻害剤を含む群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
エンハンサーが、シクロスポリンＡ、その類縁体および誘導体である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
酸性のｐＨ調整剤が無水クエン酸である、請求項２〜１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
適切な医薬賦形剤と結合された、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の無水自己ナノ乳化油性製剤組成物を含んでなる、医薬剤形。
【請求項１４】
経口経路に適した、請求項１３に記載の医薬剤形。
【請求項１５】
組成物が、軟質または硬質ゼラチンカプセル中に封入されるか、または液体油性調製物である、請求項１４に記載の医薬剤形。
【請求項１６】
静脈内経路に適した、請求項１３に記載の医薬剤形。
【請求項１７】
タキソイド反応性疾患の治療に有用な医薬の製造ための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の無水自己ナノ乳化油性製剤の使用。
【請求項１８】
同時に、併用して、または先に、生物学的利用能増強剤および／または他の抗腫瘍剤を受容している患者への投与のための、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
投与される治療剤の用量が、該治療剤の所望の血漿濃度と線形的に比例する、医薬の製造のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の無水自己ナノ乳化油性製剤の使用。
【請求項２０】
投与される治療剤の用量が、該治療剤の所望の血漿濃度と線形的に比例する、医薬の製造に適した、無水自己ナノ乳化油性製剤の形態の医薬組成物を調製するための、チロキサポール、およびチロキサポールとＴＰＧＳの混合物の使用。
【請求項２１】
請求項１に記載の組成物の有効量をそれを必要とする患者に投与する、タキソイド反応性疾患の治療方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公表番号】特表２００７−５０４１２４（Ｐ２００７−５０４１２４Ａ）
【公表日】平成１９年３月１日（２００７．３．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５２４４６８（Ｐ２００６−５２４４６８）
【出願日】平成１６年８月２７日（２００４．８．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／００３０７７
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０２０９６２
【国際公開日】平成１７年３月１０日（２００５．３．１０）
【出願人】（５０４３３２５１７）
【氏名又は名称原語表記】ＮＯＶＡＧＡＬＩ ＰＨＡＲＭＡ ＳＡ
【出願人】（５０１４７９７２１）イースム、リサーチ、デベロプメント、カンパニー、オブ、ザ、ヘブライ、ユニバーシティー、オブ、イエルサレム (5)
【氏名又は名称原語表記】ＹＩＳＳＵＭ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ ＣＯＭＰＡＮＹ ＯＦ ＴＨＥ ＨＥＢＲＥＷ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＪＥＲＵＳＡＬＥＭ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年３月１日（２００７．３．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年８月２７日（２００４．８．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／００３０７７
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０２０９６２
【国際公開日】平成１７年３月１０日（２００５．３．１０）
【出願人】（５０４３３２５１７）
【氏名又は名称原語表記】ＮＯＶＡＧＡＬＩ ＰＨＡＲＭＡ ＳＡ
【出願人】（５０１４７９７２１）イースム、リサーチ、デベロプメント、カンパニー、オブ、ザ、ヘブライ、ユニバーシティー、オブ、イエルサレム (5)
【氏名又は名称原語表記】ＹＩＳＳＵＭ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ ＣＯＭＰＡＮＹ ＯＦ ＴＨＥ ＨＥＢＲＥＷ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＪＥＲＵＳＡＬＥＭ
【Ｆターム（参考）】
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