２−アルキルアミノキノリン化合物及びこれを有効成分として含有するエリスロポエチン産生促進剤
【課題】本発明は、低分子性のＥＰＯ産生促進作用を有する化合物を提供する。
【解決手段】本発明は、次の一般式（１）：
［式中、Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ6-10アリール−Ｃ1-6アルキル基、又はＣ3-8シクロアルキル基を示し、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、同一又は異なってもよく、水素原子、又はＣ1-6アルキル基を示す］
で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤に関する。
【解決手段】本発明は、次の一般式（１）：
［式中、Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ6-10アリール−Ｃ1-6アルキル基、又はＣ3-8シクロアルキル基を示し、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、同一又は異なってもよく、水素原子、又はＣ1-6アルキル基を示す］
で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なエリスロポエチン産生促進剤に関する。さらに、詳細にはエリスロポエチン産生低下に起因する疾患、例えば貧血の予防及び／又は治療剤に関する。また本発明は、エリスロポエチン産生促進作用を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
エリスロポエチン（Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ：ＥＰＯ）は、赤芽球前駆細胞から成熟赤血球への成熟と分化に関与する糖タンパク質ホルモンであり、天然に存在する１６５アミノ酸からなる単量体ポリペプチドである（非特許文献１）。
【０００３】
ヒトのＥＰＯは、赤血球の増殖・分化において必須であり、赤血球産生の低下を特徴とする血液疾患の治療に有用である。臨床的には、ＥＰＯは、慢性腎不全（ｃｈｒｏｎｉｃ ｒｅｎａｌ ｆａｉｌｕｒｅ：ＣＲＦ）患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血の治療（非特許文献２〜４）、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者において使用されている（非特許文献５）。また、ＥＰＯは慢性貧血における有効性も認められている。
【０００４】
ＥＰＯは、成人では主に腎臓で産生されるが、それ以外では、中枢神経系のアストロサイト及びニューロンにおいても産生され、ＥＰＯ及びＥＰＯ受容体は脳−末梢境界の毛細血管において発現している。さらに、ＥＰＯを全身投与すると、ＥＰＯは血液脳関門を通過して、脳及び脊髄虚血、機械的外傷、てんかん、興奮毒及び神経炎症に応答したニューロン細胞の喪失を減少させることが報告されている（非特許文献６〜１０）。
【０００５】
ＥＰＯのようなタンパク質を用いた療法においては、プロテアーゼによる分解を受けやすいことによる血漿半減期の短さ（非特許文献１１、１２）や、循環における化合物の治療有効濃度を維持するために、静脈内注射を頻回行わねばならないなどの問題がある。また、静脈内注射に代わる投与経路として皮下注射があるが、投与部位からの吸収が遅いため、徐放効果は有るものの、血漿中濃度が静脈内注射に比べて有意に低くなる。そこで、同等の治療効果を挙げるためには静脈内注射の場合と同様の回数を注射しなければならず、患者への負担となる。また、ヒト血清ＥＰＯは糖タンパク質であって、ＥＰＯ表面に結合した糖鎖の構造は複雑であり、そのグリコシル化は広範かつ多様であることから、サイズの不均一性を示し、組換えヒトＥＰＯではヒト血清ＥＰＯを再現よく作製することができない、などの問題もある。
【０００６】
従って、上記に示したような貧血を含むＥＰＯ産生低下に起因する疾患の治療において生体利用性の低いＥＰＯでなく、内因性ＥＰＯを増加させる方法及び化合物が当該技術分野において必要とされている。
【０００７】
一方、ＥＰＯの産生量は、転写因子である低酸素誘導性因子（ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ：ＨＩＦ）を介して酸素濃度により制御されていることが知られている（非特許文献１３）。すなわち、通常大気下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によりプロリン残基がヒドロキシル化されたＨＩＦサブユニット（ＨＩＦ−１α）がユビキチン−プロテアソーム系により分解され、ＥＰＯの産生は促進されないが、低酸素下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によるＨＩＦ−１αのプロリン残基のヒドロキシル化が抑制され、その結果、安定化されたＨＩＦ−１αは細胞質から核内に移行し、ＨＩＦ−１βと二量体を形成してＥＰＯ遺伝子のｈｙｐｏｘｉａ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｅｌｅｍｅｎｔ（ＨＲＥ）配列に結合して転写を促進し、ＥＰＯの産生を促進する。
【０００８】
このようなＥＰＯ産生機構を利用した２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素などのＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼに対する酵素阻害剤が、ＥＰＯ産生促進剤として報告されている（特許文献１〜４）。
【０００９】
しかしながら、ＨＩＦにより産生が制御されている遺伝子には、ＥＰＯをコードする遺伝子だけではなく、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）をコードする遺伝子なども挙げられる。ＶＥＧＦは血管新生促進作用を有しており、この機能を介して悪性腫瘍を悪化させる原因となり得ることも報告されている（非特許文献１４、１５）。また、貧血は癌による化学治療によっても引き起こされ、貧血治療薬はそのような化学療法を受けている癌患者に投与されることも考えられることから（非特許文献６）、癌を悪化させるＶＥＧＦなどの産生も促進する可能性のあるＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害作用を有する化合物には、そのような危険性も内包される。
【００１０】
ＥＰＯの産生は、ＥＰＯの５’側に位置するプロモーター及び３’側に位置するエンハンサーにより制御されており、ＨＩＦはエンハンサー中のＨＲＥ配列に結合し、ＥＰＯの産生を促進すると考えられている。加えて、ＧＡＴＡ−２、ＮＦκＢなどもＥＰＯ産生を制御するとされており（非特許文献１６、１７）、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害以外の作用機構でもＥＰＯ産生促進は達成できると考えられる。このようなことからＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害に依存しないＥＰＯ産生促進作用を有する化合物は、貧血治療において有用であると考えられる。
【００１１】
また、前述のように、ＥＰＯは赤芽球前駆細胞の増殖及び成熟を促進するが、ＥＰＯの産生を介さずに赤芽球前駆細胞の成熟・分化を促進する作用を有する化合物も貧血治療薬として有用である。ＥＰＯの有する血球増殖促進作用を増強する活性を有する化合物やＥＰＯのシグナル伝達の重要な制御機構のひとつである脱リン酸化を触媒する造血細胞ホスファターゼに対して阻害作用を有する化合物が報告されているが（特許文献５〜７）、その活性は必ずしも十分とは言えない。また、ＥＰＯ受容体に作用する合成ペプチド、ヘマタイドが報告されているが（非特許文献１８）、ＥＰＯと同等の活性発現には高用量の投与が必要であり、経口投与に適さないという問題点がある。
【００１２】
従って、ＥＰＯ産生促進作用を持つ経口投与可能な低分子性の貧血治療剤が、今後の貧血治療において有用であると考えられる。
【００１３】
一方、２−アルキルアミノキノリン骨格を有する化合物には種々の薬理活性が知られている。例えば、抗肥満活性を有するＭＣＨ受容体阻害剤（特許文献８、非特許文献１９）、抗菌及び抗バクテリア剤（非特許文献２０）、細胞増殖、アポトーシスに関与するＳＨ３ドメインモジュレータ（特許文献９、非特許文献２１）等が知られている。また、ヒトＹＡＫ３キナーゼ阻害活性を有し、貧血治療に有効な２−アニリノキノリン骨格を有する化合物が報告されている（特許文献１０）。
【００１４】
【化１】
【００１５】
［式中、Ｒ6は−ＮＨ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＨ−アリール等から選択され、Ｒ7は−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯＮＨ2、−ＣＨＮＯＨ、−ＣＯ2Ｒ’、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯＮＨＲ”、−ＣＯＮＨＣＯＲ”、及び−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ”からなる群より選択され、Ｒ8は−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ1-6アルキル、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1-6アルキル、ハロゲン等からなる群より選択され、Ｒ9は−Ｈ、−Ｃ1-6アルキル、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1-6アルキル、ハロゲン等からなる群より選択され、Ｒ10は、−Ｈ及びハロゲンの群より選択される。］
【００１６】
同様にヒトＹＡＫ３キナーゼ阻害活性を有し、貧血治療に有効な２−アニリノキノリン骨格を有する化合物が報告されている（特許文献１１、１２）。しかしながら、これらの文献に記載された化合物群はキノリン環上３位（上記一般式においてはＲ7）がカルボン酸又はカルボン酸等価体であることを特徴とし、この点で本発明化合物とは異なる。また、これらの文献の化合物群には、赤芽球分化促進作用を示唆する記載があるものの、本発明化合物のようなエリスロポエチンの産生を促進する作用に関しての記載や示唆はない。
【００１７】
また、ＥＰＯ産生促進作用を有する２−フェニルキノリン骨格を有する低分子化合物が報告されている（特許文献１３）。
【００１８】
【化２】
【００１９】
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、及びＲ10は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ3-8シクロアルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基等を示し、Ｒ11は、水素原子、Ｃ1-6アルキル基等を示す。］
【００２０】
しかしながら、この文献に記載された化合物は、２位にフェニル基が直接結合したキノリン−４−カルボン酸構造を特徴としており、本発明の化合物と異なる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２１】
【特許文献１】特開２００６−１３７７６３号公報
【特許文献２】ＷＯ２００３／５３９９７号パンフレット
【特許文献３】ＷＯ２００５／１１６９６号パンフレット
【特許文献４】ＷＯ２００７／３８５７１号パンフレット
【特許文献５】特表２０００−５３６３６５号公報
【特許文献６】特開平１１−１７１７７４号公報
【特許文献７】特開２００２−２７５１５９号公報
【特許文献８】特表２００５−５１９８７６号公報
【特許文献９】ＷＯ２００３／１３５２３号パンフレット
【特許文献１０】特表平２００４−５２６７５６号公報
【特許文献１１】特表平２００６−５０３０９４号公報
【特許文献１２】特表平２００８−５４０４４２号公報
【特許文献１３】ＷＯ２００９／０１６８１２号パンフレット
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】Lin F-K et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 7580-7584 (1985)
【非特許文献２】Eschbach JW, et al., N. Engl. J. Med, 316: 73-78(1987)
【非特許文献３】Eschbach JW, et al., Ann. Intern. Med., 111: 992 (1989)
【非特許文献４】Lim VS, et al., Ann. Intern. Med., 110: 108-114 (1989)
【非特許文献５】Danna RP, et al., Erythropoietin in Clinical Applications-An International Perspective, New York: Marcel Dekker; p301-324 (1990)
【非特許文献６】Sakanaka M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 95, 4635-4640 (1998)
【非特許文献７】Celik M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 99, 2258-2263 (2002)
【非特許文献８】Brines ML, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 97, 10526-10531 (2000)
【非特許文献９】Calapai G, et al., Eur. J. Pharmacol., 401, 349-356 (2000)
【非特許文献１０】Siren A-L, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 98, 4044-4049 (2001)
【非特許文献１１】Spivack JL and Hogans BB, Blood, 73: 90 (1989)
【非特許文献１２】McMahon FG, et al., Blood, 76: 1718 (1990)
【非特許文献１３】Jelkman W, Internal Medicine 43, 649-659 (2004)
【非特許文献１４】Maxwell PH, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94, 15, 8104-8109 (1997)
【非特許文献１５】Fang J, et al., Cancer Res., 61, 15, 5731-5735 (2001)
【非特許文献１６】Imagawa S, et al., Blood 89, 1430-1439 (1997)
【非特許文献１７】La Ferla K, et al., FASEB J, 16, 1811-1813 (2002)
【非特許文献１８】Stead RB, et al., Blood 108, 1830-1834 (2006)
【非特許文献１９】Souers AJ, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 14, 4873-4877 (2004)
【非特許文献２０】Yu L, et al., J. Am. Chem. Soc., 125, 4444-4450 (2003)
【非特許文献２１】Inglis SR, et al., J. Med. Chem., 47, 5405-5417(2004)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明の目的は、低分子性のＥＰＯ産生促進作用を有する化合物を提供することにある。さらに詳細には、貧血の予防及び／又は治療に有用な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
上記実情に鑑み、本発明者らは、ＥＰＯ産生促進作用を持つ化合物を鋭意探索した結果、下記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物が、ヒト肝臓癌由来のＨｅｐＧ２細胞を用いた試験においてＥＰＯ産生を促進することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００２５】
すなわち本発明は、次の一般式（１）：
【００２６】
【化３】
【００２７】
［式中、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ6-10アリール−Ｃ1-6アルキル基、又はＣ3-8シクロアルキル基を示し、
Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、同一又は異なってもよく、水素原子、又はＣ1-6アルキル基を示す］
で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤に関する。
【００２８】
より詳細には、前記一般式（１）で表される化合物が、次の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
２−シクロヘキシルアミノ−３，７−ジメチルキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、及び
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン
からなる群から選択される前記ＥＰＯ産生促進剤を提供するものである。
【００２９】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【００３０】
また、本発明は、ＥＰＯ産生促進用の製剤を製造するための、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）を提供するものである。
【００３１】
さらに、本発明は、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）を提供するものである。
【００３２】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法を提供するものである。ここで、「接触」とは、本明細書中で使用するとき、インビトロ又はインビボにおいて、本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物等が、細胞による前記化合物等の取り込み作用又は細胞表面での相互作用などにより、増殖、分化、生理活性物質の分泌などの細胞の機能を調節するように前記化合物等を細胞に添加することを意味する。
【００３３】
別の観点からは、本発明は、次の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン、
からなる群から選択される、２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を提供するものである。
【００３４】
さらに、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び製薬上許容される担体とを含有してなるＥＰＯの産生を促進させるための医薬組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【００３５】
本発明は、優れたＥＰＯ産生促進作用を有している、２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を見出したものであり、ＥＰＯ産生を促進することにより症状が改善される疾患（例えば、慢性腎不全患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者の貧血、慢性貧血、鉄欠乏性貧血、再生不良性貧血、溶血性貧血、巨赤芽球性貧血などの貧血）の予防及び／又は治療のための医薬組成物として有用である。また、本発明は、ＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の化合物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００３７】
本発明における用語の定義は以下のとおりである。
【００３８】
本明細書中で使用するとき、「ハロゲン原子」とは、ハロゲノ基を意味し、具体的にはフッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子等である。
【００３９】
本明細書中で使用するとき、「アルキル基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ1-6アルキル基」には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、４−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基等の炭素数１〜６個の直鎖又は分枝状のアルキル基が挙げられる。好ましくは、「Ｃ1―4アルキル基」である。
【００４０】
本明細書中で使用するとき、「アルコキシ基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ1―6アルコキシ基」には、メチルオキシ基、エチルオキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、４−メチルブチルオキシ基、１−エチルプロピルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、３−メチルペンチルオキシ基、２−メチルペンチルオキシ基、１−メチルペンチルオキシ基、３，３−ジメチルブチルオキシ基、２，２−ジメチルブチルオキシ基、１，１−ジメチルブチルオキシ基、１，２−ジメチルブチルオキシ基、１，３−ジメチルブチルオキシ基、２，３−ジメチルブチルオキシ基、１−エチルブチルオキシ基、２−エチルブチルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖又は分枝状のアルコキシ基が挙げられる。好ましくは、「Ｃ1―4アルコキシ基」である。
【００４１】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ6―10アリール基」とは、フェニル基、ナフチル基、アズレニル基等が挙げられる。
【００４２】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ1―6アルコキシ−Ｃ1―6アルキル基」としては、例えば、メチルオキシメチル基、メチルオキシエチル基、メチルオキシプロピル基、メチルオキシブチル基、エチルオキシメチル基、エチルオキシエチル基、エチルオキシプロピル基、エチルオキシブチル基、ｎ−プロピルオキシメチル基、イソプロピルオキシメチル基、ｎ−ブチルオキシメチル基、イソブチルオキシメチル基、ｓｅｃ−ブチルオキシメチル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシメチル基、ペンチルオキシメチル基、ヘキシルオキシメチル基等が挙げられる。好ましくは「Ｃ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルキル基」である。
【００４３】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ6―10アリール−Ｃ1―6アルキル基」とは、例えば、ベンジル基、フェネチル基、フェニルプロピル基、フェニルブチル基、フェニルペンチル基、フェニルヘキシル基、ナフタレン−１−イルメチル基、ナフタレン−２−イルメチル基等が挙げられる。好ましくは「Ｃ6-10アリール−Ｃ1-4アルキル基」である。
【００４４】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ3―8シクロアルキル基」とは、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基等が挙げられる。好ましくは「Ｃ3―6シクロアルキル基」である。
【００４５】
その他、ここに定義のない基については、通常の定義に従う。
【００４６】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ1-4アルキル基」としては、ｎ−プロピル基、ｎ−ヘキシル基がより好ましい。
【００４７】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルキル基」としては、メチルオキシプロピル基がより好ましい。
【００４８】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ6-10アリール−Ｃ1-4アルキル基」としては、ベンジル基がより好ましい。
【００４９】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ3-6シクロアルキル基」としては、シクロヘキシル基がより好ましい。
【００５０】
一般式（１）中、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4における「Ｃ1-4アルキル基」としては、メチル基がより好ましい。
【００５１】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物の具体例として、下記化合物を挙げることができる。
【００５２】
【表１】
【００５３】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物のみならず、その医薬として許容される塩、それらの各種の水和物や溶媒和物、若しくはそれらの結晶多形、及びこれらの物質のプロドラッグとなる物質を包含している。
【００５４】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物の医薬として許容される塩としては、具体的には、化合物を塩基性化合物として扱う場合は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）や有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等）との酸付加塩等が挙げられ、化合物を酸性化合物として扱う場合には、無機塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、バリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等）や有機塩（例えば、ピリジニウム塩、ピコリニウム塩、トリエチルアンモニウム塩等）が挙げられる。
【００５５】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物やその医薬として許容される塩の溶媒和物としては、水和物や各種の溶媒和物（例えば、エタノールなどのアルコールとの溶媒和物）が挙げられる。
【００５６】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物は、公知の方法により製造することができる。例えば、以下に示す方法、あるいはこれに準じた方法により製造することができるが、これに限定されるものではない。
【００５７】
２−アルキルアミノキノリン化合物（１）の製造
【００５８】
【化４】
【００５９】
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、前記と同じものを示し、Ｘはハロゲン原子等の脱離基を示す］
【００６０】
本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物は、キノリン誘導体（Ｉ）とアルキルアミン類（II）を溶媒中、塩基の存在下又は非存在下、金属触媒存在下にて行われるアリールハライドとアミン類の反応手法を適用することにより製造することができる。その際、マイクロウェーブ照射を行ってもよい。溶媒としては特に制限はないが、例えば、テトラヒドロフラン、トルエン、キシレン、ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、水等を単独又は組み合わせて使用することができる。塩基は特に制限はないが、例えば、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、金属リチウム、金属ナトリウム、金属カリウム等のアルカリ金属類、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、リチウムジイソプロピルアミド、ナトリウムジイソプロピルアミド、カリウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド、tert−ブトキシナトリウム、tert−ブトキシカリウム、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等を使用することができる。金属触媒としては、例えば、ビス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）（クロロホルム）ジパラジウム（０）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（II）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等を単独で用いてもよいが、これらの触媒に必要に応じて、トリ（tert−ブチル）ホスフィン、トリフェニルホスフィン、トリ（ｏ−トリル）ホスフィン、トリ（２−フリル）ホスフィン、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル、１，２−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン等の配位子を組み合わせてもよい。反応条件は、使用する原料によって異なるが、一般に０〜１８０℃、好ましくは８０〜１６０℃にて５分〜７２時間、好ましくは１０分〜２４時間反応させることによって目的物が得られる。また、マイクロウェーブを照射する場合においては０〜１８０℃、好ましくはマイクロウェーブ照射下室温より反応を開始し、８０〜１５０℃まで昇温し、昇温時間を含めて１分〜２０時間反応させることによって目的物が得られる。
【００６１】
また、本反応は、遷移金属触媒が存在しない条件下でも行うことができる。この場合は、キノリン誘導体（Ｉ）とアルキルアミン類（II）に塩基を共存させ、溶媒中で反応すればよい。使用する塩基としては特に制限は無いが、例えば、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、金属リチウム、金属ナトリウム、金属カリウム等のアルカリ金属類、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、リチウムジイソプロピルアミド、ナトリウムジイソプロピルアミド、カリウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド、tert−ブトキシナトリウム、tert−ブトキシカリウム、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等を使用することができる。使用する溶媒には特に制限はないが、N，N−ジメチルホルムアミド、N−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、プロピオニトリル等を単独又は組み合わせて使用することができる。反応条件は、使用する原料によって異なるが、一般に０〜２５０℃、好ましくは２０〜２２０℃にて５分〜７２時間、好ましくは１０分〜２４時間反応させることによって目的物が得られる。
【００６２】
前記の各反応で得られた中間体及び目的物は、有機合成化学で常用されている精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して必要に応じて単離、精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次反応に供することもできる。
【００６３】
さらに、各種の異性体は異性体間の物理化学的性質の差を利用した常法を適用して単離できる。たとえばラセミ混合物は、例えば、酒石酸等の一般的な光学活性酸とのジアステレオマー塩に導き光学分割する方法、又は、光学活性カラムクロマトグラフィーを用いた方法等の一般的ラセミ分割法により、光学的に純粋な異性体に導くことができる。また、ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化又は各種クロマトグラフィー等により分割できる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。
【００６４】
本発明のＥＰＯ産生促進剤又は貧血治療・予防剤は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、その塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有するものであって、医薬組成物として使用することができる。その場合、本発明の化合物を単独で用いてもよいが、通常は医薬として許容される担体、及び／又は希釈剤を配合して使用される。
【００６５】
投与経路は、特に限定されないが、治療目的に応じて適宜選択することができる。例えば、経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤等のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、公知の製剤方法を利用することによって製造できる。
【００６６】
経口用固形製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物に医薬として許容される賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法を利用して、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。添加剤は、当該技術分野で一般的に使用されているものでよい。例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。結合剤としては水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。矯味剤としては、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００６７】
経口用液体製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法を利用して内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。矯味剤としては上記に挙げられたものでよく、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００６８】
注射剤を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法を利用して皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。ｐＨ調製剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。
【００６９】
坐薬を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物に公知の坐薬用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等、更に必要に応じて界面活性剤（例えば、ツイーン（登録商標））等を加えた後、常法を利用して製造することができる。
【００７０】
上記以外に、常法を利用して適宜好ましい製剤とすることもできる。
【００７１】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して一般式（１）で表わされる化合物として１日あたり１ｍｇから１０００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００７２】
次に、実施例、試験例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００７３】
実施例１：３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン（化合物１）の製造
【００７４】
【化５】
【００７５】
アルゴン雰囲気下、２−クロロ−３，７−ジメチルキノリン９２ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ベンジルアミン５８ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）、１０ｍｏｌ％ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム２８ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）、トリtert−ブチルホスフィン０．０５ｍＬ（０．２０ｍｍｏｌ）、ナトリウムtert−ブトキシド９６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を、キシレン３ｍＬ溶媒中、１２０℃で２時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製し、表題化合物１０４ｍｇ（７９％）を淡黄色粉末として得た。
【００７６】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：2.22 (3 H, s), 2.48 (3 H, s), 4.71 (1 H, br. s), 4.85 (2 H, d, J = 5.2 Hz), 7.05 (1 H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz), 7.29 (1 H, br. t, J = 7.3 Hz), 7.36 (2 H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.45 (2 H, br. d, J = 7.3 Hz), 7.45 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.55 (1 H, br. s), 7.60 (1 H, br. s)
【００７７】
製造例１：２−シクロヘキシルアミノ−３，７−ジメチルキノリン（化合物２）の製造
【００７８】
【化６】
【００７９】
ベンジルアミンの代わりにシクロへキシルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム単独）で精製し、表題化合物１３２ｍｇ（定量的）を淡黄色粉末として得た。
【００８０】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1.65-1.82 (3 H, m), 1.44-1.58 (2 H, m), 1.13-1.32 (3 H, m), 2.12-2.20 (2 H, m), 2.19 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 4.23 (1 H, tdt, J = 10.2, 7.3, 3.9 Hz), 4.32 (1 H, br. d, J = 7.3 Hz), 7.00 (1 H, dd, J = 8.1, 1.5 Hz), 7.40 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 7.49 (1 H, br. s), 7.53 (1 H, br. s)
【００８１】
実施例２：３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン（化合物３）の製造
【００８２】
【化７】
【００８３】
ベンジルアミンの代わりにｎ−プロピルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製して、表題化合物４．５ｍｇ（４％）を淡黄色油状物として得た。
【００８４】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1.04 (3 H, t, J = 7.4 Hz), 1.73 (2 H, tq, J = 7.4, 7.4 Hz), 2.22 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 3.59 (2 H, td, J = 7.4, 5.4 Hz), 4.44 (1 H, br. s), 7.01 (1 H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz), 7.42 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.52 (1 H, br. s), 7.55 (1 H, s)
【００８５】
実施例３：３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン（化合物４）の製造
【００８６】
【化８】
【００８７】
ベンジルアミンの代わりに３−メトキシプロピルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製して、表題化合物１０８ｍｇ（８８％）を黄色油状物として得た。
【００８８】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1 98 (2 H, tt, J = 5.8, 5.8 Hz), 2.20 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 3.39 (3 H, s), 3.60 (2 H, t, J = 5.8 Hz), 3.72 (2 H, td, J = 5.8, 5.2 Hz), 5.25 (1 H, br. s), 7.00 (1 H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz), 7.41 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.51 (1 H, br. s), 7.53 (1 H, s)
【００８９】
実施例４：３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン（化合物５）の製造
【００９０】
【化９】
【００９１】
ベンジルアミンの代わりにｎ−ヘキシルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣を分取薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製して、表題化合物９１ｍｇ（７１％）を淡黄色固体として得た。
【００９２】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：0.91 (3 H, br. t, J = 7.2 Hz), 1.28-1.53 (6 H, m), 1.70 (2 H, tt, J = 7.3, 7.3 Hz), 2.22 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 3.61 (2 H, td, J = 7.3, 5.4 Hz), 4.42 (1 H, br. t, J = 5.4 Hz), 7.01(1 H, dd, J = 8.1, 1.8 Hz), 7.47 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 7.52 (1 H, br. s), 7.55 (1 H, s)
【００９３】
［試験例］
試験例に使用した化合物は製造例又は実施例に記載の方法で製造したものを使用した。
【００９４】
試験例
本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物によるＥＰＯ産生促進活性は、ＥＰＯプロモーター活性に基づいて測定した。
＜材料と方法＞
ｐＧＬ３ ｂａｓｉｃ（プロメガ）のルシフェラーゼ遺伝子にヒトＥＰＯの５’プロモーター領域、及び３’エンハンサー領域を連結したベクターをリポフェクションによってヒト肝臓癌由来である細胞株ＨｅｐＧ２に遺伝子導入した。得られた安定発現株（ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃ）を被検化合物の評価に使用した。次に、ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃは、１０％ウシ胎児血清を含む最小必須培地（ＭＥＭ）（シグマ）を用いて９６ウェルプレートの各ウェルに５×１０3細胞ずつ播種した。その後、ＤＭＳＯに溶解した被検化合物を最終濃度１０μＭとなるように各ウェルに添加し、培地量を１ウェルあたり１００μｌとした。酸素濃度を４％としたＣＯ2インキュベーターで２４時間インキュベート後、ＥＰＯプロモーター活性として、Ｂｒｉｇｈｔ―Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（プロメガ）を１００μｌ／ウェルで添加し、直ちに、ＡＲＶＯ（パーキンエルマー）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。上記方法は、Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍに添付された取扱説明書に準じた。
【００９５】
化合物を添加しない未刺激状態でのＥＰＯプロモーター活性を１００％とし、各化合物により誘導されたＥＰＯプロモーター活性（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を算出した。結果を表１に示す。
【００９６】
【表２】
【００９７】
＜結果＞
被検化合物を濃度１０μＭ添加することにより、ＥＰＯ産生促進が認められた（表１参照）。特に、化合物３は１０００％を超える強力なＥＰＯ産生促進作用を有していた。このことから、これらの化合物にはＥＰＯ産生促進作用があることが明らかとなり、貧血治療剤として有用であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００９８】
本発明は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物が、優れたＥＰＯ産生促進作用を有していることを初めて見出し、優れたＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。本発明は、低分子性の新たな貧血の予防及び／又は治療剤を提供し、製薬工業において有用であり、産業上の利用可能性を有している。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なエリスロポエチン産生促進剤に関する。さらに、詳細にはエリスロポエチン産生低下に起因する疾患、例えば貧血の予防及び／又は治療剤に関する。また本発明は、エリスロポエチン産生促進作用を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
エリスロポエチン（Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ：ＥＰＯ）は、赤芽球前駆細胞から成熟赤血球への成熟と分化に関与する糖タンパク質ホルモンであり、天然に存在する１６５アミノ酸からなる単量体ポリペプチドである（非特許文献１）。
【０００３】
ヒトのＥＰＯは、赤血球の増殖・分化において必須であり、赤血球産生の低下を特徴とする血液疾患の治療に有用である。臨床的には、ＥＰＯは、慢性腎不全（ｃｈｒｏｎｉｃ ｒｅｎａｌ ｆａｉｌｕｒｅ：ＣＲＦ）患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血の治療（非特許文献２〜４）、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者において使用されている（非特許文献５）。また、ＥＰＯは慢性貧血における有効性も認められている。
【０００４】
ＥＰＯは、成人では主に腎臓で産生されるが、それ以外では、中枢神経系のアストロサイト及びニューロンにおいても産生され、ＥＰＯ及びＥＰＯ受容体は脳−末梢境界の毛細血管において発現している。さらに、ＥＰＯを全身投与すると、ＥＰＯは血液脳関門を通過して、脳及び脊髄虚血、機械的外傷、てんかん、興奮毒及び神経炎症に応答したニューロン細胞の喪失を減少させることが報告されている（非特許文献６〜１０）。
【０００５】
ＥＰＯのようなタンパク質を用いた療法においては、プロテアーゼによる分解を受けやすいことによる血漿半減期の短さ（非特許文献１１、１２）や、循環における化合物の治療有効濃度を維持するために、静脈内注射を頻回行わねばならないなどの問題がある。また、静脈内注射に代わる投与経路として皮下注射があるが、投与部位からの吸収が遅いため、徐放効果は有るものの、血漿中濃度が静脈内注射に比べて有意に低くなる。そこで、同等の治療効果を挙げるためには静脈内注射の場合と同様の回数を注射しなければならず、患者への負担となる。また、ヒト血清ＥＰＯは糖タンパク質であって、ＥＰＯ表面に結合した糖鎖の構造は複雑であり、そのグリコシル化は広範かつ多様であることから、サイズの不均一性を示し、組換えヒトＥＰＯではヒト血清ＥＰＯを再現よく作製することができない、などの問題もある。
【０００６】
従って、上記に示したような貧血を含むＥＰＯ産生低下に起因する疾患の治療において生体利用性の低いＥＰＯでなく、内因性ＥＰＯを増加させる方法及び化合物が当該技術分野において必要とされている。
【０００７】
一方、ＥＰＯの産生量は、転写因子である低酸素誘導性因子（ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ：ＨＩＦ）を介して酸素濃度により制御されていることが知られている（非特許文献１３）。すなわち、通常大気下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によりプロリン残基がヒドロキシル化されたＨＩＦサブユニット（ＨＩＦ−１α）がユビキチン−プロテアソーム系により分解され、ＥＰＯの産生は促進されないが、低酸素下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によるＨＩＦ−１αのプロリン残基のヒドロキシル化が抑制され、その結果、安定化されたＨＩＦ−１αは細胞質から核内に移行し、ＨＩＦ−１βと二量体を形成してＥＰＯ遺伝子のｈｙｐｏｘｉａ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｅｌｅｍｅｎｔ（ＨＲＥ）配列に結合して転写を促進し、ＥＰＯの産生を促進する。
【０００８】
このようなＥＰＯ産生機構を利用した２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素などのＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼに対する酵素阻害剤が、ＥＰＯ産生促進剤として報告されている（特許文献１〜４）。
【０００９】
しかしながら、ＨＩＦにより産生が制御されている遺伝子には、ＥＰＯをコードする遺伝子だけではなく、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）をコードする遺伝子なども挙げられる。ＶＥＧＦは血管新生促進作用を有しており、この機能を介して悪性腫瘍を悪化させる原因となり得ることも報告されている（非特許文献１４、１５）。また、貧血は癌による化学治療によっても引き起こされ、貧血治療薬はそのような化学療法を受けている癌患者に投与されることも考えられることから（非特許文献６）、癌を悪化させるＶＥＧＦなどの産生も促進する可能性のあるＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害作用を有する化合物には、そのような危険性も内包される。
【００１０】
ＥＰＯの産生は、ＥＰＯの５’側に位置するプロモーター及び３’側に位置するエンハンサーにより制御されており、ＨＩＦはエンハンサー中のＨＲＥ配列に結合し、ＥＰＯの産生を促進すると考えられている。加えて、ＧＡＴＡ−２、ＮＦκＢなどもＥＰＯ産生を制御するとされており（非特許文献１６、１７）、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害以外の作用機構でもＥＰＯ産生促進は達成できると考えられる。このようなことからＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害に依存しないＥＰＯ産生促進作用を有する化合物は、貧血治療において有用であると考えられる。
【００１１】
また、前述のように、ＥＰＯは赤芽球前駆細胞の増殖及び成熟を促進するが、ＥＰＯの産生を介さずに赤芽球前駆細胞の成熟・分化を促進する作用を有する化合物も貧血治療薬として有用である。ＥＰＯの有する血球増殖促進作用を増強する活性を有する化合物やＥＰＯのシグナル伝達の重要な制御機構のひとつである脱リン酸化を触媒する造血細胞ホスファターゼに対して阻害作用を有する化合物が報告されているが（特許文献５〜７）、その活性は必ずしも十分とは言えない。また、ＥＰＯ受容体に作用する合成ペプチド、ヘマタイドが報告されているが（非特許文献１８）、ＥＰＯと同等の活性発現には高用量の投与が必要であり、経口投与に適さないという問題点がある。
【００１２】
従って、ＥＰＯ産生促進作用を持つ経口投与可能な低分子性の貧血治療剤が、今後の貧血治療において有用であると考えられる。
【００１３】
一方、２−アルキルアミノキノリン骨格を有する化合物には種々の薬理活性が知られている。例えば、抗肥満活性を有するＭＣＨ受容体阻害剤（特許文献８、非特許文献１９）、抗菌及び抗バクテリア剤（非特許文献２０）、細胞増殖、アポトーシスに関与するＳＨ３ドメインモジュレータ（特許文献９、非特許文献２１）等が知られている。また、ヒトＹＡＫ３キナーゼ阻害活性を有し、貧血治療に有効な２−アニリノキノリン骨格を有する化合物が報告されている（特許文献１０）。
【００１４】
【化１】
【００１５】
［式中、Ｒ6は−ＮＨ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＨ−アリール等から選択され、Ｒ7は−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯＮＨ2、−ＣＨＮＯＨ、−ＣＯ2Ｒ’、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯＮＨＲ”、−ＣＯＮＨＣＯＲ”、及び−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ”からなる群より選択され、Ｒ8は−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ1-6アルキル、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1-6アルキル、ハロゲン等からなる群より選択され、Ｒ9は−Ｈ、−Ｃ1-6アルキル、−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1-6アルキル、ハロゲン等からなる群より選択され、Ｒ10は、−Ｈ及びハロゲンの群より選択される。］
【００１６】
同様にヒトＹＡＫ３キナーゼ阻害活性を有し、貧血治療に有効な２−アニリノキノリン骨格を有する化合物が報告されている（特許文献１１、１２）。しかしながら、これらの文献に記載された化合物群はキノリン環上３位（上記一般式においてはＲ7）がカルボン酸又はカルボン酸等価体であることを特徴とし、この点で本発明化合物とは異なる。また、これらの文献の化合物群には、赤芽球分化促進作用を示唆する記載があるものの、本発明化合物のようなエリスロポエチンの産生を促進する作用に関しての記載や示唆はない。
【００１７】
また、ＥＰＯ産生促進作用を有する２−フェニルキノリン骨格を有する低分子化合物が報告されている（特許文献１３）。
【００１８】
【化２】
【００１９】
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、及びＲ10は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ3-8シクロアルキル基、Ｃ1-6アルコキシ基等を示し、Ｒ11は、水素原子、Ｃ1-6アルキル基等を示す。］
【００２０】
しかしながら、この文献に記載された化合物は、２位にフェニル基が直接結合したキノリン−４−カルボン酸構造を特徴としており、本発明の化合物と異なる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２１】
【特許文献１】特開２００６−１３７７６３号公報
【特許文献２】ＷＯ２００３／５３９９７号パンフレット
【特許文献３】ＷＯ２００５／１１６９６号パンフレット
【特許文献４】ＷＯ２００７／３８５７１号パンフレット
【特許文献５】特表２０００−５３６３６５号公報
【特許文献６】特開平１１−１７１７７４号公報
【特許文献７】特開２００２−２７５１５９号公報
【特許文献８】特表２００５−５１９８７６号公報
【特許文献９】ＷＯ２００３／１３５２３号パンフレット
【特許文献１０】特表平２００４−５２６７５６号公報
【特許文献１１】特表平２００６−５０３０９４号公報
【特許文献１２】特表平２００８−５４０４４２号公報
【特許文献１３】ＷＯ２００９／０１６８１２号パンフレット
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】Lin F-K et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 7580-7584 (1985)
【非特許文献２】Eschbach JW, et al., N. Engl. J. Med, 316: 73-78(1987)
【非特許文献３】Eschbach JW, et al., Ann. Intern. Med., 111: 992 (1989)
【非特許文献４】Lim VS, et al., Ann. Intern. Med., 110: 108-114 (1989)
【非特許文献５】Danna RP, et al., Erythropoietin in Clinical Applications-An International Perspective, New York: Marcel Dekker; p301-324 (1990)
【非特許文献６】Sakanaka M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 95, 4635-4640 (1998)
【非特許文献７】Celik M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 99, 2258-2263 (2002)
【非特許文献８】Brines ML, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 97, 10526-10531 (2000)
【非特許文献９】Calapai G, et al., Eur. J. Pharmacol., 401, 349-356 (2000)
【非特許文献１０】Siren A-L, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 98, 4044-4049 (2001)
【非特許文献１１】Spivack JL and Hogans BB, Blood, 73: 90 (1989)
【非特許文献１２】McMahon FG, et al., Blood, 76: 1718 (1990)
【非特許文献１３】Jelkman W, Internal Medicine 43, 649-659 (2004)
【非特許文献１４】Maxwell PH, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94, 15, 8104-8109 (1997)
【非特許文献１５】Fang J, et al., Cancer Res., 61, 15, 5731-5735 (2001)
【非特許文献１６】Imagawa S, et al., Blood 89, 1430-1439 (1997)
【非特許文献１７】La Ferla K, et al., FASEB J, 16, 1811-1813 (2002)
【非特許文献１８】Stead RB, et al., Blood 108, 1830-1834 (2006)
【非特許文献１９】Souers AJ, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 14, 4873-4877 (2004)
【非特許文献２０】Yu L, et al., J. Am. Chem. Soc., 125, 4444-4450 (2003)
【非特許文献２１】Inglis SR, et al., J. Med. Chem., 47, 5405-5417(2004)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明の目的は、低分子性のＥＰＯ産生促進作用を有する化合物を提供することにある。さらに詳細には、貧血の予防及び／又は治療に有用な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
上記実情に鑑み、本発明者らは、ＥＰＯ産生促進作用を持つ化合物を鋭意探索した結果、下記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物が、ヒト肝臓癌由来のＨｅｐＧ２細胞を用いた試験においてＥＰＯ産生を促進することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００２５】
すなわち本発明は、次の一般式（１）：
【００２６】
【化３】
【００２７】
［式中、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ6-10アリール−Ｃ1-6アルキル基、又はＣ3-8シクロアルキル基を示し、
Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、同一又は異なってもよく、水素原子、又はＣ1-6アルキル基を示す］
で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤に関する。
【００２８】
より詳細には、前記一般式（１）で表される化合物が、次の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
２−シクロヘキシルアミノ−３，７−ジメチルキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、及び
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン
からなる群から選択される前記ＥＰＯ産生促進剤を提供するものである。
【００２９】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【００３０】
また、本発明は、ＥＰＯ産生促進用の製剤を製造するための、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）を提供するものである。
【００３１】
さらに、本発明は、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）を提供するものである。
【００３２】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法を提供するものである。ここで、「接触」とは、本明細書中で使用するとき、インビトロ又はインビボにおいて、本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物等が、細胞による前記化合物等の取り込み作用又は細胞表面での相互作用などにより、増殖、分化、生理活性物質の分泌などの細胞の機能を調節するように前記化合物等を細胞に添加することを意味する。
【００３３】
別の観点からは、本発明は、次の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン、
からなる群から選択される、２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を提供するものである。
【００３４】
さらに、本発明は、前記した化合物群から選ばれる２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び製薬上許容される担体とを含有してなるＥＰＯの産生を促進させるための医薬組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【００３５】
本発明は、優れたＥＰＯ産生促進作用を有している、２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を見出したものであり、ＥＰＯ産生を促進することにより症状が改善される疾患（例えば、慢性腎不全患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者の貧血、慢性貧血、鉄欠乏性貧血、再生不良性貧血、溶血性貧血、巨赤芽球性貧血などの貧血）の予防及び／又は治療のための医薬組成物として有用である。また、本発明は、ＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の化合物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００３７】
本発明における用語の定義は以下のとおりである。
【００３８】
本明細書中で使用するとき、「ハロゲン原子」とは、ハロゲノ基を意味し、具体的にはフッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子等である。
【００３９】
本明細書中で使用するとき、「アルキル基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ1-6アルキル基」には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、４−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基等の炭素数１〜６個の直鎖又は分枝状のアルキル基が挙げられる。好ましくは、「Ｃ1―4アルキル基」である。
【００４０】
本明細書中で使用するとき、「アルコキシ基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ1―6アルコキシ基」には、メチルオキシ基、エチルオキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、４−メチルブチルオキシ基、１−エチルプロピルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、３−メチルペンチルオキシ基、２−メチルペンチルオキシ基、１−メチルペンチルオキシ基、３，３−ジメチルブチルオキシ基、２，２−ジメチルブチルオキシ基、１，１−ジメチルブチルオキシ基、１，２−ジメチルブチルオキシ基、１，３−ジメチルブチルオキシ基、２，３−ジメチルブチルオキシ基、１−エチルブチルオキシ基、２−エチルブチルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖又は分枝状のアルコキシ基が挙げられる。好ましくは、「Ｃ1―4アルコキシ基」である。
【００４１】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ6―10アリール基」とは、フェニル基、ナフチル基、アズレニル基等が挙げられる。
【００４２】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ1―6アルコキシ−Ｃ1―6アルキル基」としては、例えば、メチルオキシメチル基、メチルオキシエチル基、メチルオキシプロピル基、メチルオキシブチル基、エチルオキシメチル基、エチルオキシエチル基、エチルオキシプロピル基、エチルオキシブチル基、ｎ−プロピルオキシメチル基、イソプロピルオキシメチル基、ｎ−ブチルオキシメチル基、イソブチルオキシメチル基、ｓｅｃ−ブチルオキシメチル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシメチル基、ペンチルオキシメチル基、ヘキシルオキシメチル基等が挙げられる。好ましくは「Ｃ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルキル基」である。
【００４３】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ6―10アリール−Ｃ1―6アルキル基」とは、例えば、ベンジル基、フェネチル基、フェニルプロピル基、フェニルブチル基、フェニルペンチル基、フェニルヘキシル基、ナフタレン−１−イルメチル基、ナフタレン−２−イルメチル基等が挙げられる。好ましくは「Ｃ6-10アリール−Ｃ1-4アルキル基」である。
【００４４】
本明細書中で使用するとき、「Ｃ3―8シクロアルキル基」とは、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基等が挙げられる。好ましくは「Ｃ3―6シクロアルキル基」である。
【００４５】
その他、ここに定義のない基については、通常の定義に従う。
【００４６】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ1-4アルキル基」としては、ｎ−プロピル基、ｎ−ヘキシル基がより好ましい。
【００４７】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ1-4アルコキシ−Ｃ1-4アルキル基」としては、メチルオキシプロピル基がより好ましい。
【００４８】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ6-10アリール−Ｃ1-4アルキル基」としては、ベンジル基がより好ましい。
【００４９】
一般式（１）中、Ｒ1における「Ｃ3-6シクロアルキル基」としては、シクロヘキシル基がより好ましい。
【００５０】
一般式（１）中、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4における「Ｃ1-4アルキル基」としては、メチル基がより好ましい。
【００５１】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物の具体例として、下記化合物を挙げることができる。
【００５２】
【表１】
【００５３】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物のみならず、その医薬として許容される塩、それらの各種の水和物や溶媒和物、若しくはそれらの結晶多形、及びこれらの物質のプロドラッグとなる物質を包含している。
【００５４】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物の医薬として許容される塩としては、具体的には、化合物を塩基性化合物として扱う場合は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）や有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等）との酸付加塩等が挙げられ、化合物を酸性化合物として扱う場合には、無機塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、バリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等）や有機塩（例えば、ピリジニウム塩、ピコリニウム塩、トリエチルアンモニウム塩等）が挙げられる。
【００５５】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物やその医薬として許容される塩の溶媒和物としては、水和物や各種の溶媒和物（例えば、エタノールなどのアルコールとの溶媒和物）が挙げられる。
【００５６】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物は、公知の方法により製造することができる。例えば、以下に示す方法、あるいはこれに準じた方法により製造することができるが、これに限定されるものではない。
【００５７】
２−アルキルアミノキノリン化合物（１）の製造
【００５８】
【化４】
【００５９】
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、前記と同じものを示し、Ｘはハロゲン原子等の脱離基を示す］
【００６０】
本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物は、キノリン誘導体（Ｉ）とアルキルアミン類（II）を溶媒中、塩基の存在下又は非存在下、金属触媒存在下にて行われるアリールハライドとアミン類の反応手法を適用することにより製造することができる。その際、マイクロウェーブ照射を行ってもよい。溶媒としては特に制限はないが、例えば、テトラヒドロフラン、トルエン、キシレン、ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、水等を単独又は組み合わせて使用することができる。塩基は特に制限はないが、例えば、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、金属リチウム、金属ナトリウム、金属カリウム等のアルカリ金属類、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、リチウムジイソプロピルアミド、ナトリウムジイソプロピルアミド、カリウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド、tert−ブトキシナトリウム、tert−ブトキシカリウム、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等を使用することができる。金属触媒としては、例えば、ビス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）（クロロホルム）ジパラジウム（０）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（II）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等を単独で用いてもよいが、これらの触媒に必要に応じて、トリ（tert−ブチル）ホスフィン、トリフェニルホスフィン、トリ（ｏ−トリル）ホスフィン、トリ（２−フリル）ホスフィン、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル、１，２−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン等の配位子を組み合わせてもよい。反応条件は、使用する原料によって異なるが、一般に０〜１８０℃、好ましくは８０〜１６０℃にて５分〜７２時間、好ましくは１０分〜２４時間反応させることによって目的物が得られる。また、マイクロウェーブを照射する場合においては０〜１８０℃、好ましくはマイクロウェーブ照射下室温より反応を開始し、８０〜１５０℃まで昇温し、昇温時間を含めて１分〜２０時間反応させることによって目的物が得られる。
【００６１】
また、本反応は、遷移金属触媒が存在しない条件下でも行うことができる。この場合は、キノリン誘導体（Ｉ）とアルキルアミン類（II）に塩基を共存させ、溶媒中で反応すればよい。使用する塩基としては特に制限は無いが、例えば、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、金属リチウム、金属ナトリウム、金属カリウム等のアルカリ金属類、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、リチウムジイソプロピルアミド、ナトリウムジイソプロピルアミド、カリウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド、tert−ブトキシナトリウム、tert−ブトキシカリウム、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等を使用することができる。使用する溶媒には特に制限はないが、N，N−ジメチルホルムアミド、N−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、プロピオニトリル等を単独又は組み合わせて使用することができる。反応条件は、使用する原料によって異なるが、一般に０〜２５０℃、好ましくは２０〜２２０℃にて５分〜７２時間、好ましくは１０分〜２４時間反応させることによって目的物が得られる。
【００６２】
前記の各反応で得られた中間体及び目的物は、有機合成化学で常用されている精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して必要に応じて単離、精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次反応に供することもできる。
【００６３】
さらに、各種の異性体は異性体間の物理化学的性質の差を利用した常法を適用して単離できる。たとえばラセミ混合物は、例えば、酒石酸等の一般的な光学活性酸とのジアステレオマー塩に導き光学分割する方法、又は、光学活性カラムクロマトグラフィーを用いた方法等の一般的ラセミ分割法により、光学的に純粋な異性体に導くことができる。また、ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化又は各種クロマトグラフィー等により分割できる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。
【００６４】
本発明のＥＰＯ産生促進剤又は貧血治療・予防剤は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、その塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有するものであって、医薬組成物として使用することができる。その場合、本発明の化合物を単独で用いてもよいが、通常は医薬として許容される担体、及び／又は希釈剤を配合して使用される。
【００６５】
投与経路は、特に限定されないが、治療目的に応じて適宜選択することができる。例えば、経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤等のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、公知の製剤方法を利用することによって製造できる。
【００６６】
経口用固形製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物に医薬として許容される賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法を利用して、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。添加剤は、当該技術分野で一般的に使用されているものでよい。例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。結合剤としては水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。矯味剤としては、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００６７】
経口用液体製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法を利用して内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。矯味剤としては上記に挙げられたものでよく、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００６８】
注射剤を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法を利用して皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。ｐＨ調製剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。
【００６９】
坐薬を調製する場合は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物に公知の坐薬用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等、更に必要に応じて界面活性剤（例えば、ツイーン（登録商標））等を加えた後、常法を利用して製造することができる。
【００７０】
上記以外に、常法を利用して適宜好ましい製剤とすることもできる。
【００７１】
本発明の一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して一般式（１）で表わされる化合物として１日あたり１ｍｇから１０００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００７２】
次に、実施例、試験例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００７３】
実施例１：３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン（化合物１）の製造
【００７４】
【化５】
【００７５】
アルゴン雰囲気下、２−クロロ−３，７−ジメチルキノリン９２ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ベンジルアミン５８ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）、１０ｍｏｌ％ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム２８ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）、トリtert−ブチルホスフィン０．０５ｍＬ（０．２０ｍｍｏｌ）、ナトリウムtert−ブトキシド９６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を、キシレン３ｍＬ溶媒中、１２０℃で２時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製し、表題化合物１０４ｍｇ（７９％）を淡黄色粉末として得た。
【００７６】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：2.22 (3 H, s), 2.48 (3 H, s), 4.71 (1 H, br. s), 4.85 (2 H, d, J = 5.2 Hz), 7.05 (1 H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz), 7.29 (1 H, br. t, J = 7.3 Hz), 7.36 (2 H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.45 (2 H, br. d, J = 7.3 Hz), 7.45 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.55 (1 H, br. s), 7.60 (1 H, br. s)
【００７７】
製造例１：２−シクロヘキシルアミノ−３，７−ジメチルキノリン（化合物２）の製造
【００７８】
【化６】
【００７９】
ベンジルアミンの代わりにシクロへキシルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム単独）で精製し、表題化合物１３２ｍｇ（定量的）を淡黄色粉末として得た。
【００８０】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1.65-1.82 (3 H, m), 1.44-1.58 (2 H, m), 1.13-1.32 (3 H, m), 2.12-2.20 (2 H, m), 2.19 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 4.23 (1 H, tdt, J = 10.2, 7.3, 3.9 Hz), 4.32 (1 H, br. d, J = 7.3 Hz), 7.00 (1 H, dd, J = 8.1, 1.5 Hz), 7.40 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 7.49 (1 H, br. s), 7.53 (1 H, br. s)
【００８１】
実施例２：３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン（化合物３）の製造
【００８２】
【化７】
【００８３】
ベンジルアミンの代わりにｎ−プロピルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製して、表題化合物４．５ｍｇ（４％）を淡黄色油状物として得た。
【００８４】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1.04 (3 H, t, J = 7.4 Hz), 1.73 (2 H, tq, J = 7.4, 7.4 Hz), 2.22 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 3.59 (2 H, td, J = 7.4, 5.4 Hz), 4.44 (1 H, br. s), 7.01 (1 H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz), 7.42 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.52 (1 H, br. s), 7.55 (1 H, s)
【００８５】
実施例３：３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン（化合物４）の製造
【００８６】
【化８】
【００８７】
ベンジルアミンの代わりに３−メトキシプロピルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５）で精製して、表題化合物１０８ｍｇ（８８％）を黄色油状物として得た。
【００８８】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1 98 (2 H, tt, J = 5.8, 5.8 Hz), 2.20 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 3.39 (3 H, s), 3.60 (2 H, t, J = 5.8 Hz), 3.72 (2 H, td, J = 5.8, 5.2 Hz), 5.25 (1 H, br. s), 7.00 (1 H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz), 7.41 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.51 (1 H, br. s), 7.53 (1 H, s)
【００８９】
実施例４：３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン（化合物５）の製造
【００９０】
【化９】
【００９１】
ベンジルアミンの代わりにｎ−ヘキシルアミンを用いて実施例１と同様に反応処理した。残渣を分取薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製して、表題化合物９１ｍｇ（７１％）を淡黄色固体として得た。
【００９２】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：0.91 (3 H, br. t, J = 7.2 Hz), 1.28-1.53 (6 H, m), 1.70 (2 H, tt, J = 7.3, 7.3 Hz), 2.22 (3 H, s), 2.46 (3 H, s), 3.61 (2 H, td, J = 7.3, 5.4 Hz), 4.42 (1 H, br. t, J = 5.4 Hz), 7.01(1 H, dd, J = 8.1, 1.8 Hz), 7.47 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 7.52 (1 H, br. s), 7.55 (1 H, s)
【００９３】
［試験例］
試験例に使用した化合物は製造例又は実施例に記載の方法で製造したものを使用した。
【００９４】
試験例
本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物によるＥＰＯ産生促進活性は、ＥＰＯプロモーター活性に基づいて測定した。
＜材料と方法＞
ｐＧＬ３ ｂａｓｉｃ（プロメガ）のルシフェラーゼ遺伝子にヒトＥＰＯの５’プロモーター領域、及び３’エンハンサー領域を連結したベクターをリポフェクションによってヒト肝臓癌由来である細胞株ＨｅｐＧ２に遺伝子導入した。得られた安定発現株（ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃ）を被検化合物の評価に使用した。次に、ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃは、１０％ウシ胎児血清を含む最小必須培地（ＭＥＭ）（シグマ）を用いて９６ウェルプレートの各ウェルに５×１０3細胞ずつ播種した。その後、ＤＭＳＯに溶解した被検化合物を最終濃度１０μＭとなるように各ウェルに添加し、培地量を１ウェルあたり１００μｌとした。酸素濃度を４％としたＣＯ2インキュベーターで２４時間インキュベート後、ＥＰＯプロモーター活性として、Ｂｒｉｇｈｔ―Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（プロメガ）を１００μｌ／ウェルで添加し、直ちに、ＡＲＶＯ（パーキンエルマー）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。上記方法は、Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍに添付された取扱説明書に準じた。
【００９５】
化合物を添加しない未刺激状態でのＥＰＯプロモーター活性を１００％とし、各化合物により誘導されたＥＰＯプロモーター活性（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を算出した。結果を表１に示す。
【００９６】
【表２】
【００９７】
＜結果＞
被検化合物を濃度１０μＭ添加することにより、ＥＰＯ産生促進が認められた（表１参照）。特に、化合物３は１０００％を超える強力なＥＰＯ産生促進作用を有していた。このことから、これらの化合物にはＥＰＯ産生促進作用があることが明らかとなり、貧血治療剤として有用であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００９８】
本発明は、一般式（１）で表される２−アルキルアミノキノリン化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物が、優れたＥＰＯ産生促進作用を有していることを初めて見出し、優れたＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。本発明は、低分子性の新たな貧血の予防及び／又は治療剤を提供し、製薬工業において有用であり、産業上の利用可能性を有している。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）：
【化１】
［式中、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ6-10アリール−Ｃ1-6アルキル基、又はＣ3-8シクロアルキル基を示し、
Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、同一又は異なってもよく、水素原子、又はＣ1-6アルキル基を示す］
で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物が、下記の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
２−シクロヘキシルアミノ−３，７−ジメチルキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、又は
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン
からなる群から選択される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物である請求項１に記載のＥＰＯ産生促進剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
一般式（１）で表される化合物が、下記の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、又は
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン
からなる群から選択される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
【請求項５】
請求項４に記載の２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び医薬として許容される担体とを含有してなる医薬組成物。
【請求項６】
ＥＰＯの産生を促進させるためのものである請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
貧血の予防及び／又は治療用である請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１】
次の一般式（１）：
【化１】
［式中、
Ｒ1は、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシ−Ｃ1-6アルキル基、Ｃ6-10アリール−Ｃ1-6アルキル基、又はＣ3-8シクロアルキル基を示し、
Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、同一又は異なってもよく、水素原子、又はＣ1-6アルキル基を示す］
で表される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物が、下記の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
２−シクロヘキシルアミノ−３，７−ジメチルキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、又は
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン
からなる群から選択される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物である請求項１に記載のＥＰＯ産生促進剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
一般式（１）で表される化合物が、下記の化合物群：
３，７−ジメチル−２−（フェニルメチル）アミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−プロピルアミノキノリン、
３，７−ジメチル−２−（３−メトキシプロピル）アミノキノリン、又は
３，７−ジメチル−２−ヘキシルアミノキノリン
からなる群から選択される２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
【請求項５】
請求項４に記載の２−アルキルアミノキノリン化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び医薬として許容される担体とを含有してなる医薬組成物。
【請求項６】
ＥＰＯの産生を促進させるためのものである請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
貧血の予防及び／又は治療用である請求項５に記載の医薬組成物。
【公開番号】特開２０１１−１２９９（Ｐ２０１１−１２９９Ａ）
【公開日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１４５７３６（Ｐ２００９−１４５７３６）
【出願日】平成２１年６月１８日（２００９．６．１８）
【出願人】（０００１６３００６）興和株式会社 (618)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年６月１８日（２００９．６．１８）
【出願人】（０００１６３００６）興和株式会社 (618)
【Ｆターム（参考）】
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