Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミドの製造における新規中間体およびその用途
【課題】医薬として有用なアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の合成において鍵となる中間体を提供する。
【解決手段】下式で示される化合物。
（式中、Ｒ1はＯ−トシル基である。）該化合物は、望ましくない有毒不純物を伴わず、高い収率でＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するのに有用である。また、該化合物は、アイソザイム選択的ＰＫＣ阻害物質としても有用であり、糖尿病およびその合併症、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、皮膚疾患および癌に関連する状態の処置に有用である。
【解決手段】下式で示される化合物。
（式中、Ｒ1はＯ−トシル基である。）該化合物は、望ましくない有毒不純物を伴わず、高い収率でＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するのに有用である。また、該化合物は、アイソザイム選択的ＰＫＣ阻害物質としても有用であり、糖尿病およびその合併症、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、皮膚疾患および癌に関連する状態の処置に有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
プロテインキナーゼＣアイソザイムの広在性およびその生理学上の重要な役割は、高度に選択的なＰＫＣ阻害物質製造の動機を与える。あるアイソザイムの疾患状態との結び付きを実証する証拠が与えられれば、他のＰＫＣアイソザイムおよび他のプロテインキナーゼと比べて１つまたは２つのプロテインキナーゼＣアイソザイムに対して選択的な阻害化合物が優れた治療薬剤であるとするのは理にかなっている。そのような化合物はその特異性によってより大きな効能およびより少ない毒性を示す。
【背景技術】
【０００２】
あるクラスのＰＫＣアイソザイムに選択的なＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物は１９９５年６月１４日発行のHeathら., (ＥＰ ０ ６５７ ４５８）に開示されている。このＮ，Ｎ’−架橋化合物群において好ましい化合物は、式Ｉ：
【化１】
（式中、Ｒはアミノ基、アルキルアミノ基またはジアルキルアミノ基である）で示される化合物を含む。Heathらは以下のように製造されるいくつかのこれらアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を例証している。
【化２】
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するために用いたＯ−メシレート機能が有毒であり、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造において望ましくない不純物であることが見いだされた。Ｏ−メシレート中間体を最終生成物から確実に取り除くためには高価な精製技術を使用しなければならない。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明はアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の合成において鍵となる中間体を提供する。この新規中間体はＯ−メシレート中間体を経由せずに容易にアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物に変換される。この中間体はまた劇的に、より反応性が高い。アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造の際に、この中間体をできるだけ低い温度、短い反応時間で用いると、副生成物がより少なくなり収率がより高くなるので、好ましい。これゆえ、この中間体は望ましくない有毒不純物を伴わない高い収率でＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するのに有用である。
【０００５】
さらに、特許請求している化合物はアイソザイム選択的ＰＫＣ阻害物質として有用である。それゆえこの化合物は、糖尿病およびその合併症、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、皮膚疾患および癌に関連する状態の処置に有用である。
【０００６】
本発明は式ＩＩ：
【化３】
［ここに、Ｒ1は臭素原子（Ｂｒ）、ヨウ素原子（Ｉ）またはＯ−トシル基である］
で示される化合物を与える。
【０００７】
さらに本発明は式ＩＩで示される化合物および製薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含有する医薬製剤に関する。
【０００８】
本発明のもう１つの態様は、式ＩＩの化合物を式Ｉで示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造に用いる方法であり、これは式ＩＩの化合物を非反応性の極性溶媒中でアミン化合物と反応させることを本質とする。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本明細書に開示し特許請求している本発明の目的のために、以後の用語および略語を次のように定義する。
【００１０】
用語「Ｃ1−Ｃ4アルキル」は１〜４つの炭素原子をもつ環状、直鎖または分岐鎖状のアルキル基、例えばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基などを表す。
【００１１】
用語「アリール」は置換もしくは非置換のベンジル基、フェニル基またはナフチル基を表す。
【００１２】
用語「アミン化合物」は本明細書に用いている−Ｎ（ＣＦ3）ＣＨ3）、−ＮＨ（ＣＦ3）または−ＮＲ3Ｒ4（式中、Ｒ3およびＲ4は独立に水素原子、Ｃ1−Ｃ4アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはＲ3およびＲ4が結合している窒素原子と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成する）を意味する。
【００１３】
上記のように、本発明は式ＩＩ：
【化４】
（式中、Ｒ1は臭素原子、ヨウ素原子またはＯ−トシル基である）
で示される化合物に関する。
【００１４】
式ＩＩの化合物には種々の立体異性体が存在し得ることがわかっている。本発明の好ましい化合物は式ＩＩａおよびＩＩｂ：
【化５】
の化合物である。しかしながら、ラセミ体および個々の光学異性体ならびにその混合物は本発明の一部を構成する。
【００１５】
本発明の化合物は式：
【化６】
で示される化合物から最も容易に製造される。このヒドロキシ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物（化合物ＩＩＩ）は１９９５年６月１４日発行のHeathら., ＥＰ ０ ６５７ ４５８（これは引用によって本明細書に包含される）に記載の技術によって製造される。
【００１６】
特許請求している化合物は以下のように製造される：
【化７】
（Ｒ1は前記定義と同意義である）。Ｒ1は臭素原子またはヨウ素原子であるのが好ましく、最も好ましいのは臭素原子である。特許請求しているトシレート（ｐ−トルエンスルホニル）化合物は、塩基、例えばピリジンの存在下、ＴＨＦ、エーテル、塩化メチレンまたは他の非反応性有機溶媒中でこのアルコール体をｐ−トルエンスルホン酸無水物と反応させることによって製造する。この反応は一般に窒素の存在下、室温から反応混合物の還流温度で行う。
【００１７】
特許請求しているハロゲン化物はこのアルコール体を臭素源またはヨウ素源と反応させることによって製造する。臭素源およびヨウ素源はＨＩ、ＨＢｒ、ＬｉＢｒ、ＣａＢｒ2、ＰＢｒ3、Ｒ5ＰＢｒ2、Ｎ−ブロモスクシンイミド、ＣＢｒ4、アリール−Ｂｒ、ベンジル−Ｂｒ、ＳＯＢｒ2（ここに、Ｒ5はフェニル基、フェニルオキシ基、アルキル基またはアリール基である）を含む、当分野において認められるたくさんの試薬とすることができる。当業者であれば１，１’−カルボニルジイミダゾールのような種々の活性化試薬を反応に加えることができるのは理解されよう。ヒドロキシ体（ＩＩＩ）からハロゲン化物（ＩＩ）への転換はRichard C. Larock, A GUIDE TO FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS, VCH Publishers, p. 356-63 (1989)(これは引用によって本明細書に包含される)に開示され当分野において認められている技術によって行うことができる。好ましい条件は、ＰＸ3、（フェニル）3ＰＸ2または（フェノキシ）3ＰＸ2（ここに、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子である）のようなハロゲン化リン試薬の存在下に上記臭素源またはヨウ素源を用いる条件である。この反応はＴＨＦ、アセトニトリル、塩化メチレン、または当分野において認められている他の非反応性溶媒中で行うのが適切である。ＤＭＦおよび他の溶媒もまた、Barluenga J. Synthesis p. 426 (1985)およびHodosi G, Carbohydrate Research 230:327-42 (1992)に記載のフィルスマイヤー型試薬の生成によって有効である。
【００１８】
式ＩＩで示される化合物は以下のように、式ＩＶで示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物に転換される：
【化８】
［ここに、Ｒ1は臭素原子、ヨウ素原子、またはＯ−トシル基であり；Ｒ2は−Ｎ（ＣＦ3）ＣＨ3）、−ＮＨ（ＣＦ3）、または−ＮＲ3Ｒ4（式中、Ｒ3およびＲ4は独立して水素原子、Ｃ1−Ｃ4アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはＲ3およびＲ4が結合している窒素と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成する）である］。好ましくは、Ｒ2はＮ（ＣＨ3）。
【００１９】
化合物ＩＩを用いて化合物ＩＶを生成させる方法は化合物ＩＩを式：ＨＮ（ＣＦ3）ＣＨ3）、ＨＮＨ（ＣＦ3）、またはＨＮＲ3Ｒ4（ここにＲ3およびＲ4は独立して水素原子、Ｃ1−Ｃ4アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはこれらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成する）で示されるアミン化合物と非反応性の極性非プロトン溶媒中で反応させることを特徴とする。この反応は温度０℃から反応混合物の還流温度までの範囲でＤＭＦ、ＴＨＦ：水、またはジメチルアセトアミド中にて行うのが好ましい。この反応は一般に約１〜２０時間で完了する。好ましくは、室温から５０℃で反応を行う。化合物ＩＶは標準的な技術を用いて反応混合物から精製できるが、反応混合物から直接結晶化するのが好ましい。
【００２０】
最も驚くべきは、特許請求している中間体をアミノ置換Ｎ，Ｎ’−ビスインドリルマレイミド化合物の製造に用いると、より高い収率が得られ、有毒不純物の生成を回避できることである。そして意外にも、本発明の中間体は既知のメシレート中間体よりも高い反応性を示した。ＨＮ（ＣＨ3）2に対する種々の脱離基の反応性を表１に示した。当分野において推測される相対的な反応性はCAREY AND SUNDBERG, Part A, 3rd Edition, page 291 (1990)に記載されている。
【００２１】
表１． ＨＮ(ＣＨ3)2との反応速度
基 Ｋrel
（離脱基のＨＮ(ＣＨ3)2との反応速度）
p-トルエンスルホネート ２.２×１０-2
ＭsＯ- ５.５×１０-3
Ｃl- ９.８×１０-4
Ｉ- ２.０×１０-1
Ｂr- ２.２×１０-2
【００２２】
表１のデータはトシル基、ブロミドおよびヨウダイドが意外にも反応性が高いことを示している（特にブロミドおよびヨウダイドは既知のメシレート中間体よりも４〜３６倍も高い反応性を示す）。Ｈ2ＮＣＨ3、Ｈ2Ｎ（ベンジル）を用いてもＭｓＯに比べて高い反応性が見られた。反応性の増大により反応がより低温でより短時間に完了するようになる。さらに本発明の中間体を用いることにより生成物中の不純物がほとんどなくなる。既知のＯ−メシル中間体を用いると、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−ビスインドリルマレイミド化合物を生成する反応は、マレイミドのカルボニル基での反応から生じる副生成物のために不純度のレベルが１５〜３０％となる。本発明の中間体を用いると不純度のレベルは５％より低くなり、これは実質的な進歩である。
【００２３】
前述のように、アミノ置換Ｎ，Ｎ’架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するために用いられていたＯ−メシレート機能は有毒であり、またアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造において望ましくない不純物であることが分かった。最終生成物からＯ−メシラート中間体を確実に取り除くためには高価な精製技術を用いなければならない。それゆえ、本発明の中間体および本発明の中間体を用いるアミノ置換Ｎ，Ｎ’架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造方法のさらなる利点は有毒不純物を取り除くための困難な精製工程が回避されることである。
【００２４】
本発明の中間体を用いて製造される好ましい化合物は以下の通りである：（Ｓ）−１３−［（ジメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン、特にそのメシレ−ト塩として；（Ｓ）−１３−［（モノメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−１３−［（ピロリジノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン一塩酸塩；および（Ｓ）−１３−［ベンジルアミノメチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン。
【００２５】
式ＩＶで示される好ましい一置換アミン化合物は本発明の化合物から直接製造できる。高い収率の直接的な方法でこれらの化合物を製造するのはメシレート中間体では不可能である。
【００２６】
式ＩＶで示される化合物は遊離塩基として製造され、好ましくは当分野において認められている技術によって製薬的に許容される塩に変換する。好ましい塩は塩酸塩およびメシレート塩をなどである。
【００２７】
以下の実施例および製造例は本発明を単に例示するためのものである。本発明の範囲は単に以下の実施例のみから構成されるものと理解するべきではない。以下の実施例および製造例では融点、核磁気共鳴スペクトル、質量スペクトル、シリカゲルの高圧液体クロマトグラフィー、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、および酢酸エチルはそれぞれＭ．Ｐｔ．、ＮＭＲ、ＭＳ、ＨＰＬＣ、ＤＭＦ、ＴＨＦ、およびＥｔＯＡｃと略記する。記号「ＮＭＲ」および「ＭＳ」はそのスペクトルが所期の構造を満足することを示す。
【００２８】
製造例１
３−（２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート
トリチルクロライド（１７５.２ｇ、０．６１６モル）を窒素雰囲気下、ＣＨ2Ｃｌ2５００ｍＬに溶解した。トリエチルアミン（７１．９ｇ、１００ｍＬ、０．７１０モル）を加えた後、Ｒ，Ｓ−グリシドール（５０．０ｇ、０．６４８モル）を加え、反応溶液を４時間緩やかな還流温度（４２℃）にまで加熱した。この反応物を室温にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液２５０ｍＬ次いでブライン（塩水）２５０ｍＬで２回抽出した。水相をＣＨ2Ｃｌ2１００ｍＬで逆抽出し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させて、油状物としてトリチル−グリシドールを得、これをエタノールから再結晶し、固形のトリチル−グリシドール１０４．４ｇ（５４％）を得た。
【００２９】
ビニルマグネシウムブロミド（５０ｍＬ、５０ミリモル、２．０当量）の１ＭＴＨＦ溶液を窒素雰囲気下で−２０℃にまで冷却し、触媒量のヨウ化銅を加えた（０．２４ｇ、１．２６ミリモル、０．０５当量）。得られた混合物を−２０℃で５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ４０ｍＬ中のトリチル−グリシドール（７．９１ｇ、２５．０ミリモル）の溶液を−２０℃で１５分間かけて滴加する。この反応混合物を−２０℃で３時間撹拌した後、室温にまで戻し、１５分間撹拌した。この反応混合物を−３０℃に冷却することによって反応を停止し、塩化アンモニウムの飽和水溶液１２５ｍＬをゆっくりと加えた。得られた混合物を酢酸エチル２００ｍＬで抽出した。次いで有機相を脱イオン水１２５ｍＬ中のエチレンジアミンテトラ酢酸、二ナトリウム塩、二水和物（ＥＤＴＡ）０．９３ｇ（２．５０ミリモル、０．１当量）の水溶液で抽出し、すべての金属を取り除いた。水相を酢酸エチル５０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブライン１００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物を得、これを３／１ヘキサン／酢酸エチル１．２Ｌを用いてシリカ（７６ｇ）に通し、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、明黄色油状物の１−（トリフェニルメトキシ）−４−ペンテン−２−オール９．０７ｇ（１００％）を得た。
【００３０】
鉱油中の水素化ナトリウム６０％懸濁液（６．１３ｇ、０．１５３モル、１．５当量）を乾燥ＴＨＦ１７５ｍＬに懸濁し、これは室温で加えた。得られた混合物を４５℃で１.５時間懸濁した後、新たに蒸留した臭化アリル１７.７ｍＬ（０.２０４ミリモル、２．０当量）をシリンジによって加えた。この反応物を４５℃で１時間加熱した。この反応はＴＬＣまたはＨＰＬＣによってモニターできる。この反応混合物を０℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液４００ｍＬをゆっくりと加え、過剰の塩基を失活（クエンチ）する。得られた混合物を酢酸エチル８００ｍＬで抽出し、有機相を水５００ｍＬで洗浄する。水相を酢酸エチル１００ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブライン２００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、黄色油状物の１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］４１．５ｇ（＞１００％）を得た。
【００３１】
１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］（３９．３ｇ、０．１０２モル）を無水メチルアルコール３９０ｍＬおよびＣＨ2Ｃｌ2６０ｍＬの溶液に溶解し、粘性のある反応溶液に窒素気泡を通しながら、−５０℃から−４０℃に冷却した。次いで−５０℃から−４０℃で８０分間、反応物の色が淡青色に変化するまでオゾン気泡を反応混合物に通した。得られた混合物を窒素雰囲気下で０℃にまであたためた後、反応温度を１０℃以下に保ちながら、エタノール８５ｍＬ／水８５ｍＬ中のホウ水素化ナトリウム（２３．１５ｇ、０．６１２モル、６当量）溶液をゆっくりと加え、反応を停止した。この反応物を氷浴中で３０分間撹拌し、次いで室温にまで戻し、一晩撹拌した。あたためる温度は３１℃にまで上がった。この反応混合物を塩化アンモニウムの飽和水溶液４００ｍＬで希釈し、酢酸エチル８００ｍＬで抽出した。有機相を水４００ｍＬで洗浄し、水相を酢酸エチル１５０ｍＬで逆抽出した。有機相をまとめ、ブライン２００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、濁った油状物を得た。この油状物を２／１ヘキサン／酢酸エチルから３回再結晶を繰り返し、３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブトノ−ル２８．９ｇを得た（７２％）。
【００３２】
３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブトノール（１４．０ｇ、３５．７ミリモル）をＣＨ2Ｃｌ2１４０ｍＬに溶解し、これを窒素雰囲気下で０℃にまで冷却し、トリエチルアミン（１０．８ｇ、１４．９ｍＬ、０．１０７モル、３．０当量）を加えた。次いでメタンスルホニルクロライド（１１．０ｇ、７．４６ｍＬ、９６．４ミリモル、２．７当量）を＜５℃で滴加した。得られた反応混合物をさらにＣＨ2Ｃｌ2（３００ｍＬ）で希釈し、水２００ｍＬおよび塩化アンモニウムの飽和水溶液２００ｍＬで洗浄した。水相をＣＨ2Ｃｌ2５０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブリン１００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、白色固形の３−（２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート１８．４ｇ（９４％）を得た。
【００３３】
製造例２
（Ｓ）−トリチルグリシドール
トリチルクロライド（２８６６ｇ、１０．３モル）を窒素雰囲気下でＣＨ2Ｃｌ2７Ｌに溶解した。トリエチルアミン（１１８９ｇ、１６３８ｍＬ、１１．８モル）を加えた後、ＣＨ2Ｃｌ2１Ｌを洗浄液として用いて（Ｒ）−（＋）−グリシドール（７９５．０ｇ、１０．６モル）を加えた。反応溶液を緩やかな還流温度（４２℃）にまで３〜４時間加熱した。反応物を室温にまで冷却した後、ブリン３Ｌを加えた。有機相を乾燥（６００ｇ Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物標題化合物を得、これをエタノールから再結晶し、固形の標題化合物２３５４ｇ（７０％）を得た。
【００３４】
製造例３
（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート
ビニルマグネシウムブロミド（５．７６Ｌ、５．７６モル、１．９６当量）の１Ｍ ＴＨＦ溶液を窒素雰囲気下で−２０℃にまで冷却し、触媒量のヨウ化銅を加えた（２８．２ｇ、０．１４８モル、０．０５当量）。得られた混合物を−２０℃で５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ３．２Ｌ中の（Ｓ）−トリチル−グリシドール（９２９．０ｇ、２．９４モル）の溶液を−２０℃で１．５時間かけて滴加した。反応混合物を−２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を−３０℃にまで冷却することによって反応を停止し、塩化アンモニウムの飽和水溶液５Ｌをゆっくりと加えた。次いで有機相をエチレンジアミン四酢酸、二ナトリウム塩二水和物（ＥＤＴＡ）の１０重量％／容量溶液１Ｌで２回抽出し、すべての金属を取り除いた。有機相をブライン２Ｌで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物の（Ｓ）−１−０−トリフェニルメチル−４−ヒドロキシペンタノール１０６１ｇ（９６％）を得た。
【００３５】
鉱油中の水素化ナトリウム（２６８．９ｇ、６．７２モル、１．５当量）の６０％懸濁液を窒素雰囲気下で乾燥ＴＨＦ２．８Ｌに懸濁し、乾燥ＴＨＦ５．６Ｌ中の（Ｓ）−１−０−トリフェニルメチル−４−ヒドロキシペンタノール（１５４３ｇ、４．４８モル）溶液を室温で加えた。得られた混合物を室温で１．５時間撹拌した後、新たに蒸留した臭化アリル７７０ｍＬ（８．８９モル、２．０当量）を２０分間かけて加えた。反応物を１〜２時間４５℃にまで加熱した。この反応混合物を１５〜２０℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液２Ｌをゆっくりと加え、過剰の塩基をクエンチした。得られた混合物を酢酸エチル１Ｌおよび水１Ｌで希釈し、有機相を単離した。水相を酢酸エチル５００ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、黄色油状物の（Ｓ）−１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］１８６７ｇ（９８％）を得た。 （Ｓ）−１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］（１２８１ｇ、３．３３モル）を無水メチルアルコール４ＬおよびＣＨ2Ｃｌ2３．６Ｌの溶液に溶解し、粘性のある反応溶液に窒素気泡を通しながら−５０℃から−４０℃にまで冷却した。スーダンＩＩＩ指示薬をこの反応物に加え、−５０℃〜−３５℃で１３時間、反応物が桃色から明緑／黄色に変化するまでオゾン気泡を反応混合物に通した。得られた反応混合物を窒素雰囲気下で０℃にまで戻した後、これをエタノール２．５Ｌ／水２．５Ｌ中のホウ水素化ナトリウム（７５４ｇ、１９．９モル、６当量）の溶液に反応温度を３０℃以下に保ちながら４０分間かけてゆっくりと加えた。次いでこの反応物を室温で一晩撹拌した。反応はＨＰＬＣによってモニターできる。この反応混合物を１０〜１５℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液４Ｌへ＜２０℃でゆっくりと加えた。次いで反応停止した混合物を濾過し、固形物をＣＨ2Ｃｌ2３Ｌで洗浄した。有機相を単離し、塩化アンモニウムの飽和水溶液３Ｌで洗浄し、水相をＣＨ2Ｃｌ2１Ｌで逆抽出した。有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物の（Ｓ）−３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノ−ル１３６１ｇ（＞１００％）を得た。
【００３６】
（Ｓ）−３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノ−ル（５００ｇ、１．２７モル）をＣＨ2Ｃｌ2４．８Ｌに溶解し、これを窒素雰囲気下、０℃にまで冷却し、トリエチルアミン（３８６．４ｇ、５３２ｍＬ、３．８１モル、３．０当量）を加えた。次いでメタンスルホニルクロライド（３９６．３ｇ、２６８ｍＬ、３．４６モル、２．７当量）を＜５℃で３０分間かけて滴加した。得られた反応混合物を０〜５℃で１〜２時間撹拌し、反応をＨＰＬＣによってモニターした。この反応混合物をさらにＣＨ2Ｃｌ2２Ｌで希釈し、水２Ｌおよび塩化アンモニウムの飽和水溶液２Ｌで２回洗浄した。水相をＣＨ2Ｃｌ2１Ｌで逆抽出し、有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、粗製の固形物を得、これを１／１ヘプタン／酢酸エチルから再結晶３回し、固形の（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート６１５ｇ（８８％）を得た。ＮＭＲ。ＭＳ。
【００３７】
製造例４
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−（ヒドロキシメチル）−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
２，３−ビス−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−メチルマレイミド（１１４．７ｇ、０．３３６モル）および（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート（２２０．０ｇ、０．４０１モル、１．２当量）をＤＭＦ４．３Ｌに溶解した。次いでこの試薬溶液をＤＭＦ７Ｌ中の炭酸セシウム（４３７．８ｇ、１．３４モル、４．０当量）の５０℃スラリーに７０時間かけてゆっくりと加えた（約１ｍＬ／分）。７０〜７２時間後、この反応物を冷却し、濾過し、ＤＭＦを減圧下で取り除き、残留物を得、これをＣＨ2Ｃｌ2４．６ｍＬに溶解した。有機相を１Ｎ ＨＣｌ水溶液１．１５Ｌ次いでブライン４．６Ｌで抽出した。水相をまとめて、ＣＨ2Ｃｌ2１．１Ｌで逆抽出した。有機相をまとめ、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過した。溶媒のほとんどを減圧下で取り除き、得られた溶液をさらにＣＨ2Ｃｌ2４〜５ガロンを用い、シリカゲル２Ｋｇに通して濾過し、ベースライン（基線）物質を取り除いた。溶媒を減圧下で取り除き、得られた紫色固形物をアセトニトリル７容量（粗製の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオンの重さを基準として）中にトリチュレートし、乾燥後、（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン１５０．２ｇ（５７％）を得た（ＨＰＬＣによると標品に対して８９％純度）。
【００３８】
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（３２．７ｇ、４６．９ミリモル）をエタノール１．６Ｌおよび１０Ｎ ＫＯＨ水溶液１．６Ｌ中に懸濁した。得られた混合物を緩やかな還流温度（７８℃）にまで１９時間加熱した。還流温度に達すると固形物のほとんどが溶解した。反応溶液を１０〜１５℃にまで冷却し、１０Ｎ ＨＣｌ水溶液（１.２Ｌ）を＜１５℃でゆっくりと加え、酸度をｐＨ＝１に調節した。酸性にすると赤色のスラリーが生成した。この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2５００ｍＬで希釈し、２０分間撹拌し、濾過し、ほとんどの塩を取り出した。この塩をさらにＣＨ2Ｃｌ2（１．５Ｌ）で洗浄し、濾液を水１Ｌで２回抽出した。水相をまとめ、ＣＨ2Ｃｌ2１Ｌで逆抽出し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ4）した。溶媒を減圧下で取り除き、紫色固形の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］フロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３−ジオン３６．０ｇ（＞１００％）を得た（ＨＰＬＣ領域で８０％純度）。
【００３９】
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］フロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３−ジオン（３６．０ｇ、推定４６．９ミリモル）を窒素雰囲気下で乾燥ＤＭＦ３２０ｍＬに溶解し、前もって混合しておいた１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（９９ｍＬ、７５．７ｇ、０．４６９モル、１０当量）およびメタノール（９．５ｍＬ、７．５１ｇ、０．２３５モル、５当量）の溶液で処理した。得られた溶液を４５℃で７時間加熱した。この反応はＨＰＬＣによってモニターできる。ほとんどのＤＭＦを減圧下で取り除き、得られた残留物を酢酸エチル２００ｍＬで抽出し、水２００ｍＬで洗浄し、５％ＬｉＣｌ水溶液１００ｍＬで２回洗浄した。水相を酢酸エチル１００ｍＬで逆抽出した。有機相をまとめ、塩化アンモニウムの飽和水溶液２００ｍＬで洗浄した。有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、粗製の紫色固形（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ；１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン３５．９ｇ（＞１００％）を得た。
【００４０】
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ；１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（３４．０、推定４６．８ミリモル）をＣＨ2Ｃｌ2３５０ｍＬに溶解し、窒素雰囲気下で−２５℃にまで冷却する。＜０℃で約１〜２分間無水塩酸ガスを反応溶液へ導入した。得られたスラリーを室温にまで戻し、１時間撹拌した。この反応はＨＰＬＣによってモニターできる。このスラリーを濾過し、固形物をＣＨ2Ｃｌ2２００ｍＬで洗浄した。この固形物を減圧オーブン中、５０℃で乾燥し、紫色固形の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−（ヒドロキシメチル）−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン１８．６ｇ（９０％）を得た（ＨＰＬＣ領域で９３％純度）。
【実施例】
【００４１】
実施例１
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ブロモ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ−［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
臭素（２．０当量）およびピリジン（０．１当量）を塩化メチレン（１０容量）へ加え、この溶液を−５℃にまで冷却した。この臭素をトリフェニルホスファイト（２．０当量）で滴定した。すべての臭素が消費されると溶液は黄色から透明に変化した。２番目の反応容器へ塩化メチレン（１０容量）中の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヒドロキシ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０当量）を加えた。このスラリーを−５℃にまで冷却した。次いでトリフェニルホスファイトジブロミド溶液をピローロジオンのスラリーへ加え、この反応物を室温にまで戻し、１２〜１６時間撹拌し、反応を完了させた。（ＨＰＬＣによると＜０．４％化合物ＩＩＩ）。このスラリーを減圧下に室温で２時間かけて濃縮し、次いで脱イオン水１容量でクエンチし、１５分間撹拌した。トルエン（４０容量）をこの反応物のスラリーへ加え、生成物を沈殿させた。１０℃で１時間撹拌した後、生成物を濾別し、トルエン（５容量）で２回、脱イオン水（５容量）、最後にトルエン５容量で洗浄した。標題ブロミド化合物を減圧乾燥機中、５０℃で乾燥した。収率８５〜９０％（不純物１〜２％）。
【００４２】
さらに不純物のレベルを下げるために、生成物をアセトン：水、メタノール：水、イソプロパノール：水、または酢酸エチルのような溶媒系中へ再びスラリー化する。生成物は比１：１から５：１のＴＨＦ：水中へ再スラリー化するのが好ましい。
【００４３】
実施例２
（Ｓ）−１３−［（ジメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７容量）中の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ブロモ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０当量）溶液へジメチルアミン（１０．７３Ｋｇ、１２当量）を加えた。反応容器を密閉し、４５℃で９時間加熱した。次いでこの反応物を室温にまで冷却し、１２〜１６時間撹拌した。ＮａＯＨ（１２Ｎ、１．１当量）をこの反応物に加え、遊離塩基とした。この溶液をさらに２時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを減圧下で５〜７容量にまで取り除いた後、６０℃のＭｅＯＨ（３０容量）を同温度で１時間かけてこの反応物に加えた。次いでこの反応物を室温にまで冷却し、一晩撹拌した後、さらに０〜１０℃にまで冷却した。得られた生成物を濾別し、ＭｅＯＨ（３容量）で洗浄した。この物質を減圧乾燥機中、５０℃で恒量になるまで乾燥した。収率８５〜９２％。この反応で使用した他の溶媒はＴＨＦ／水およびジメチルアセトアミドであるが、出発物質および生成物の溶解度が低いため、反応は極性非プロトン溶媒中で行うべきである。ｉｎ ｓｉｔｕで臭酸塩を遊離させるのに他の塩基を試した（以下参照）が、最も効果的な塩基は６Ｎ ＮａＯＨ、１２Ｎ ＮａＯＨおよびＫ2ＣＯ3であった。
【００４４】
実施例３
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヨード（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［メタンスルホニロキシ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０ｇ、１．９４ミリモル）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬ（２０容量）中に取った。この溶液にヨウ化ナトリウム（３．０ｇ、１９．４ミリモル、１０．０当量）を加え、この反応物を撹拌し、５０℃で３６時間加熱した。この反応物を環境温度にまで冷却し、水（５０ｍＬ、５０容量）を加えることによって生成物を単離した。析出した紫色固形生成物を５：１ＴＨＦ：水から再結晶して標題化合物０．８７ｇ（８１％）を得た。
【００４５】
実施例４
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ｐ−トルエンスルホニルオキシ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヒドロキシメチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサ−ジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０ｇ、２．２７ミリモル）をジクロロメタン２０ｍＬ（２０容量）中に取った。この溶液へ無水トルエンスルホン酸（２．２２ｇ、６．８０ミリモル、３．０当量）およびピリジン（０．７２ｇ、９．０８ミリモル、４．０当量）を加え、反応物を撹拌し、４２℃で２時間加熱還流した。この反応物を環境温度にまで冷却し、ジクロロメタン４０ｍＬで希釈した。有機相を１Ｎ塩酸５０ｍＬおよびブライン５０ｍＬで洗浄した。水相をジクロロメタン３０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、溶媒を塩化メチレンからエタノールに交換した。析出した紫色固形生成物を濾過し、標題化合物１．２５ｇ（９３％収率）を得た。
【００４６】
実施例５
（Ｓ）−１３−［（モノメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
メチルアミン（３７．１ｇ、１．１９モル、２０当量）を、温度を２３℃以下に保持しつつＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド６００ｍｌに溶解した。この溶液に実施例１の化合物（３０ｇ、０．０５９５モル）を加えた。得られた反応物を密閉容器内にて環境温度で２４時間撹拌した。この反応中に生成されるＨＢｒを、トリエチルアミン（８．３ｍｌ、０．０５９５モル、１当量）を加えて除去し、得られた反応物をさらに３０分撹拌した後、４℃に冷却し、反応温度を２５℃以下に保持しつつ水４５０ｍｌをゆっくりと加えた。水を加えるとスラリーが形成され、それを１時間撹拌し、濾過し、得られた濾過固形物を水２００ｍｌをさらに用いて洗浄した。この固形物を５０℃の減圧オーブン中で乾燥し、標題化合物２５．０３ｇ（９３％）を得た。
【００４７】
実施例６
（Ｓ）−１３−［（ピロリジノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン一塩酸塩
実施例１の化合物（１．０ｇ、１．０当量）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド５ｍｌ中に取り、ピロリジン（１．６ｍｌ、１０当量）を加えた。得られた反応物を４５℃に９時間加熱し、次いで室温にまで冷却した。この赤色スラリーに１２Ｎ ＮａＯＨ（０．１７ｍｌ、１．０当量）を加え、混合物を室温にて２時間撹拌し、赤色の溶液を得た。溶媒を減圧下に除去し、得られた油状物質を塩化メチレン（１００ｍｌ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム（１００ｍｌ）および５％ＬｉＣｌ溶液（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄した。減圧下に塩化メチレンを除去し、油状物質を得、これにメチルｔ−ブチルエーテルを加えて赤色固形物として標題化合物を沈殿させた。濾過してこの固形物を単離し、５０℃にて減圧オーブン内で一晩乾燥し、生成物０．８ｇ（８１％）を得た。
【００４８】
実施例７
（Ｓ）−１３−［ベンジルアミノメチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
実施例１の化合物をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド２０容量中に取り、ベンジルアミン（６当量）を一回で加えた。得られた反応物を密閉容器内で撹拌し、８０℃に２４時間加熱した。その反応物を環境室温にまで冷却し、トリエチルアミン（１当量）を加えてＨＢｒを除去し、得られた反応物をさらに３０分撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄した。この溶液の酢酸エチルをエタノールに溶媒変換して赤色スラリーを得、これを濾過し、赤色固形物として標題化合物を得た（収率７９％）。
【００４９】
実施例８
動力学試験
【化９】
動力学試験のため、ジメチルアミン２モル濃度のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）溶液を調製した。化合物Ａ（０．２５ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｂ（０．２２９ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｃ（０．２０９ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｄ（０．２３６ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）および化合物Ｅ（０．２７１ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）をそれぞれＤＭＡ（〜２０ｍｌ／ｇ、４−６ｍｌ）に溶解し、ジメチルアミン２モル濃度のＤＭＡ溶液（４．５ｍｌ、９．０ｍｍｏｌ、２０当量）を各反応物に加えた。これらの反応溶液を封栓し、２３℃にて撹拌し、ＨＰＬＣ分析用に経時的にサンプリングした。アイソクラティック(isocratic)な５０／５０ＴＨＦ／０．１％トリフルオロ酢酸緩衝化水の１ｍｌ／分の移動相および２３３ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いて４．６ｍｍ ｘ ２５ｃｍゾルバックスＳＢ−ＣＮカラムを利用した（Ｒｔ 化合物Ａ＝１０．４分、Ｒｔ 化合物Ｂ＝９．３分、Ｒｔ 化合物Ｃ＝９．０分、Ｒｔ 化合物Ｄ＝６．２分、Ｒｔ 化合物Ｅ＝１０．６分）。３点検量線の一次方程式（０．１ｍｇ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍｌおよび０．０２５ｍｇ／ｍｌの濃度に対して対応する応答領域）から各化合物について応答係数を得、その係数から反応物濃度を測定した。ＨＰＬＣ分析の前に反応物試料（０．１ｍｌ）を計量フラスコ中で２５ｍｌに希釈し、得られた濃度（ｍｇ／ｍｌ）をモル濃度（ｍｍｏｌ／ｍｌ）に変換した。化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの濃度で割ったジメチルアミン濃度の常用対数を時間に対してプロットした。各プロットから得られた直線の傾きを、最初のアミン濃度から最初の化合物濃度を差し引いた差で割り、二次速度定数（単位：ＬＭ-1Ｈｒ-1）を得た。得られた結果を表Ｉに示す。
【００５０】
実施例９
メシレート対ブロミドとジメチルアミン、メチルアミンおよびベンジルアミンとの比較速度試験
動力学試験に使用するため、メチルアミンおよびジメチルアミンの２モル濃度Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）溶液を調製した。化合物Ｄ（１．０３ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）および化合物Ｂ（１．００ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（メチルアミンおよびジメチルアミン反応については２０ｍｌ／ｇ、ベンジルアミン反応については３６ｍｌ／ｇ）中にて一緒にし、メチルアミンの２モル濃度ＤＭＡ溶液（１９．８ｍｌ、３９．７ｍｍｏｌ、２０当量）またはジメチルアミンの２モル濃度ＤＭＡ溶液（１９．８ｍｌ、３９．７ｍｍｏｌ、２０当量）またはベンジルアミン（４．２５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。これらの反応溶液を封栓し、２３℃にて撹拌し、ＨＰＬＣ分析用に経時的にサンプリングした。アイソクラティック(isocratic)な４５／５５ＴＨＦ／０．１％トリフルオロ酢酸緩衝化水の１ｍｌ／分の移動相および２３３ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いて４．６ｍｍ ｘ ２５ｃｍゾルバックスＳＢ−ＣＮカラムを利用した（Ｒｔ 化合物Ｄ＝１１．４分、Ｒｔ 化合物Ｂ＝１９．９分）。３点検量線の一次方程式（０．１ｍｇ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍｌおよび０．０２５ｍｇ／ｍｌの濃度に対して対応する応答領域）から各化合物について応答係数を得、その係数から反応物濃度を測定した。ＨＰＬＣ分析を行う前に反応物試料（０．１ｍｌ）を計量フラスコ中で２５ｍｌに希釈し、得られた濃度（ｍｇ／ｍｌ）をモル濃度（ｍｍｏｌ／ｍｌ）に変換した。化合物濃度で割ったアミン濃度の常用対数を時間に対してプロットした。各プロットから得られた直線の傾きを、最初のアミン濃度から最初の化合物濃度を差し引いた差で割り、二次速度定数（単位：ＬＭ-1Ｈｒ-1）を得た。これにより、特許請求しているブロミド中間体から直接、メチルアミノおよびベンジルアミノ誘導体が高収率で調製された。メシレート中間体からは、メチルアミノおよびベンジルアミノ誘導体が直接、高収率には得られなかった。
【００５１】
このように、本発明の化合物はさらに、選択的プロテインキナーゼＣインヒビターとして活性を示す。この化合物の活性は、カルシウムカルモジュリン依存性プロテインキナーゼ検定、カゼインプロテインキナーゼＩＩ検定、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ触媒サブユニット検定および１９９５年６月１４日発行のＥＰ０ ６５７ ４５８［Ｈｅａｔｈら］（これは引用によって本明細書に包含される）に記載されているタンパク−チロシンキナーゼ検定によって測定した。特許請求している化合物は１０μＭ以下のＩＣ50値を有しており、これらの検定において活性でありアイソザイム選択的である。
【００５２】
この証明された薬理活性を有している化合物はプロテインキナーゼＣが病因となっていると示されている状態の処置に有用である。当業界にて認められている状態には、糖尿病およびその合併症（特に微小血管性糖尿病合併症、網膜症、腎症および神経障害）、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、アルツハイマー病、皮膚疾患および癌などがある。
【００５３】
式：ＩＩで示される化合物は好ましくは投与前に製剤化する。従って、本発明のもうひとつの態様は式：ＩＩで示される化合物および１つまたはそれ以上の製薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含有する医薬組成物に関する。
【００５４】
本発明の医薬組成物は周知かつ容易に入手可能な成分を用いて既知の手法によって調製される。本発明の組成物を作製するには、活性成分を通常、担体と混合し、または担体で希釈し、またはカプセル、サシエ、ペーパーもしくは他のコンテナの形態にできる担体内に充填する。担体を希釈剤として利用する際には、担体は固形物、半固形物または、活性成分のビヒクル、賦形剤もしくは媒質として有用な液状物質であることができる。従って、本発明の組成物は錠剤、ピル剤、粉末剤、トローチ剤、サシエ剤（sachet）、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、溶液剤、シロップ剤、エアロゾル剤（固体として、または液状媒質中）、ゼラチン軟および硬カプセル剤、坐剤、滅菌注射液剤および滅菌密封粉末剤などの剤形とすることができる。
【００５５】
適当な担体、賦形剤および希釈剤を幾つか例示すれば、ラクトース、デキストロース、シュクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギネート、トラガカントゴム、ゼラチン、珪酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水性シロップ（water syrup）、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチルおよびプロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油が挙げられる。本発明の製剤はさらに、滑沢剤、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、保存剤、甘味料または香料を含むことができる。本発明の組成物は、患者に投与した後、活性成分を即時に、持続して、または徐放して放出するよう製剤化することができる。
【００５６】
化合物の医薬的有効量は哺乳動物においてＰＫＣ活性を阻害できる量である。通常の１日投与量は活性化合物約０．０１ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇである。本発明の組成物は好ましくは、それぞれが約１から約５００ｍｇを、より普通には約５から約３００ｍｇを含有する単位投与剤形の形態に製剤化する。しかし、投与する治療学的用量は処置する症状、投与する化合物の種類および選択する投与経路などの関連する状況を勘案して医師によって決定されるので、上記の投与量の範囲はいかなる意味においても本発明の範囲の限定を意図していないことは理解されよう。「単位投与剤形」なる用語は、ヒト対象および他の哺乳動物に対する単一投与に適した物理的に別個の単位を意味しており、各単位それぞれは所望の治療効果を得るよう計算された活性成分の予め決められた量を適当な製薬学的担体とともに含有している。
以下に製剤例を挙げるが、これは単なる例示であり、いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものではない。
【００５７】
製剤例１
ゼラチン硬カプセル剤を以下の成分を使用して調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 ５
乾燥デンプン １８５
ステアリン酸マグネシウム １０
総量 ２００ｍｇ
上記成分を混合し、２００ｍｇ量のゼラチン硬カプセルに充填する。
【００５８】
製剤例２
以下の成分を使用して錠剤を調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 ２０
微結晶セルロース ４００
フュームド二酸化珪素 １０
ステアリン酸 ５
総量 ４３５ｍｇ
上記成分を混合し、圧縮して各４３５ｍｇ重量の錠剤を成形する。
【００５９】
製剤例３
活性成分１０ｍｇを含有する各錠剤を以下のようにして調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 １０ｍｇ
デンプン ４５ｍｇ
微結晶セルロース ３５ｍｇ
ポリビニルピロリドン（１０％水溶液として） ４ｍｇ
カルボキシメチルデンプン・ナトリウム ４．５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．５ｍｇ
タルク １ｍｇ
総量 １００ｍｇ
【００６０】
活性成分、デンプンおよびセルロースをＮｏ．４５メッシュ米国ふるいに通し、充分に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液をこの粉末と混合し、次いでＮｏ．１４メッシュ米国ふるいに通す。このようにして調製した顆粒を５０℃で乾燥し、Ｎｏ．１８メッシュ米国ゆるいに通す。この顆粒に、前もってＮｏ．６０メッシュ米国ふるいに通しておいたカルボキシメチルデンプン・ナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを加え、混合した後、錠剤成形装置にて圧縮し、各１００ｍｇ重量の錠剤を作成する。
【００６１】
製剤例４
活性成分４０ｍｇを含有するカプセル剤を以下のようにして調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 ４０ｍｇ
デンプン ５９ｍｇ
微結晶セルロース ５９ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ
総量 ２００ｍｇ
活性成分、セルロース、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、Ｎｏ．４５メッシュ米国ふるいに通し、２００ｍｇ量のゼラチン硬カプセルに充填する。
【００６２】
本明細書において本発明の基本、好ましい態様および操作手順を説明してきた。しかし、ここに保護を求めようとする発明は、本明細書に開示した特定の形態が制限的なものでなく例示と見なされるべきものであるので、開示の形態には限定されないと解釈すべきである。当業者ならば、本発明の精神を逸脱することなく、修飾および改変が可能である。
【技術分野】
【０００１】
プロテインキナーゼＣアイソザイムの広在性およびその生理学上の重要な役割は、高度に選択的なＰＫＣ阻害物質製造の動機を与える。あるアイソザイムの疾患状態との結び付きを実証する証拠が与えられれば、他のＰＫＣアイソザイムおよび他のプロテインキナーゼと比べて１つまたは２つのプロテインキナーゼＣアイソザイムに対して選択的な阻害化合物が優れた治療薬剤であるとするのは理にかなっている。そのような化合物はその特異性によってより大きな効能およびより少ない毒性を示す。
【背景技術】
【０００２】
あるクラスのＰＫＣアイソザイムに選択的なＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物は１９９５年６月１４日発行のHeathら., (ＥＰ ０ ６５７ ４５８）に開示されている。このＮ，Ｎ’−架橋化合物群において好ましい化合物は、式Ｉ：
【化１】
（式中、Ｒはアミノ基、アルキルアミノ基またはジアルキルアミノ基である）で示される化合物を含む。Heathらは以下のように製造されるいくつかのこれらアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を例証している。
【化２】
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するために用いたＯ−メシレート機能が有毒であり、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造において望ましくない不純物であることが見いだされた。Ｏ−メシレート中間体を最終生成物から確実に取り除くためには高価な精製技術を使用しなければならない。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明はアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の合成において鍵となる中間体を提供する。この新規中間体はＯ−メシレート中間体を経由せずに容易にアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物に変換される。この中間体はまた劇的に、より反応性が高い。アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造の際に、この中間体をできるだけ低い温度、短い反応時間で用いると、副生成物がより少なくなり収率がより高くなるので、好ましい。これゆえ、この中間体は望ましくない有毒不純物を伴わない高い収率でＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するのに有用である。
【０００５】
さらに、特許請求している化合物はアイソザイム選択的ＰＫＣ阻害物質として有用である。それゆえこの化合物は、糖尿病およびその合併症、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、皮膚疾患および癌に関連する状態の処置に有用である。
【０００６】
本発明は式ＩＩ：
【化３】
［ここに、Ｒ1は臭素原子（Ｂｒ）、ヨウ素原子（Ｉ）またはＯ−トシル基である］
で示される化合物を与える。
【０００７】
さらに本発明は式ＩＩで示される化合物および製薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含有する医薬製剤に関する。
【０００８】
本発明のもう１つの態様は、式ＩＩの化合物を式Ｉで示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造に用いる方法であり、これは式ＩＩの化合物を非反応性の極性溶媒中でアミン化合物と反応させることを本質とする。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本明細書に開示し特許請求している本発明の目的のために、以後の用語および略語を次のように定義する。
【００１０】
用語「Ｃ1−Ｃ4アルキル」は１〜４つの炭素原子をもつ環状、直鎖または分岐鎖状のアルキル基、例えばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基などを表す。
【００１１】
用語「アリール」は置換もしくは非置換のベンジル基、フェニル基またはナフチル基を表す。
【００１２】
用語「アミン化合物」は本明細書に用いている−Ｎ（ＣＦ3）ＣＨ3）、−ＮＨ（ＣＦ3）または−ＮＲ3Ｒ4（式中、Ｒ3およびＲ4は独立に水素原子、Ｃ1−Ｃ4アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはＲ3およびＲ4が結合している窒素原子と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成する）を意味する。
【００１３】
上記のように、本発明は式ＩＩ：
【化４】
（式中、Ｒ1は臭素原子、ヨウ素原子またはＯ−トシル基である）
で示される化合物に関する。
【００１４】
式ＩＩの化合物には種々の立体異性体が存在し得ることがわかっている。本発明の好ましい化合物は式ＩＩａおよびＩＩｂ：
【化５】
の化合物である。しかしながら、ラセミ体および個々の光学異性体ならびにその混合物は本発明の一部を構成する。
【００１５】
本発明の化合物は式：
【化６】
で示される化合物から最も容易に製造される。このヒドロキシ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物（化合物ＩＩＩ）は１９９５年６月１４日発行のHeathら., ＥＰ ０ ６５７ ４５８（これは引用によって本明細書に包含される）に記載の技術によって製造される。
【００１６】
特許請求している化合物は以下のように製造される：
【化７】
（Ｒ1は前記定義と同意義である）。Ｒ1は臭素原子またはヨウ素原子であるのが好ましく、最も好ましいのは臭素原子である。特許請求しているトシレート（ｐ−トルエンスルホニル）化合物は、塩基、例えばピリジンの存在下、ＴＨＦ、エーテル、塩化メチレンまたは他の非反応性有機溶媒中でこのアルコール体をｐ−トルエンスルホン酸無水物と反応させることによって製造する。この反応は一般に窒素の存在下、室温から反応混合物の還流温度で行う。
【００１７】
特許請求しているハロゲン化物はこのアルコール体を臭素源またはヨウ素源と反応させることによって製造する。臭素源およびヨウ素源はＨＩ、ＨＢｒ、ＬｉＢｒ、ＣａＢｒ2、ＰＢｒ3、Ｒ5ＰＢｒ2、Ｎ−ブロモスクシンイミド、ＣＢｒ4、アリール−Ｂｒ、ベンジル−Ｂｒ、ＳＯＢｒ2（ここに、Ｒ5はフェニル基、フェニルオキシ基、アルキル基またはアリール基である）を含む、当分野において認められるたくさんの試薬とすることができる。当業者であれば１，１’−カルボニルジイミダゾールのような種々の活性化試薬を反応に加えることができるのは理解されよう。ヒドロキシ体（ＩＩＩ）からハロゲン化物（ＩＩ）への転換はRichard C. Larock, A GUIDE TO FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS, VCH Publishers, p. 356-63 (1989)(これは引用によって本明細書に包含される)に開示され当分野において認められている技術によって行うことができる。好ましい条件は、ＰＸ3、（フェニル）3ＰＸ2または（フェノキシ）3ＰＸ2（ここに、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子である）のようなハロゲン化リン試薬の存在下に上記臭素源またはヨウ素源を用いる条件である。この反応はＴＨＦ、アセトニトリル、塩化メチレン、または当分野において認められている他の非反応性溶媒中で行うのが適切である。ＤＭＦおよび他の溶媒もまた、Barluenga J. Synthesis p. 426 (1985)およびHodosi G, Carbohydrate Research 230:327-42 (1992)に記載のフィルスマイヤー型試薬の生成によって有効である。
【００１８】
式ＩＩで示される化合物は以下のように、式ＩＶで示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物に転換される：
【化８】
［ここに、Ｒ1は臭素原子、ヨウ素原子、またはＯ−トシル基であり；Ｒ2は−Ｎ（ＣＦ3）ＣＨ3）、−ＮＨ（ＣＦ3）、または−ＮＲ3Ｒ4（式中、Ｒ3およびＲ4は独立して水素原子、Ｃ1−Ｃ4アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはＲ3およびＲ4が結合している窒素と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成する）である］。好ましくは、Ｒ2はＮ（ＣＨ3）。
【００１９】
化合物ＩＩを用いて化合物ＩＶを生成させる方法は化合物ＩＩを式：ＨＮ（ＣＦ3）ＣＨ3）、ＨＮＨ（ＣＦ3）、またはＨＮＲ3Ｒ4（ここにＲ3およびＲ4は独立して水素原子、Ｃ1−Ｃ4アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはこれらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成する）で示されるアミン化合物と非反応性の極性非プロトン溶媒中で反応させることを特徴とする。この反応は温度０℃から反応混合物の還流温度までの範囲でＤＭＦ、ＴＨＦ：水、またはジメチルアセトアミド中にて行うのが好ましい。この反応は一般に約１〜２０時間で完了する。好ましくは、室温から５０℃で反応を行う。化合物ＩＶは標準的な技術を用いて反応混合物から精製できるが、反応混合物から直接結晶化するのが好ましい。
【００２０】
最も驚くべきは、特許請求している中間体をアミノ置換Ｎ，Ｎ’−ビスインドリルマレイミド化合物の製造に用いると、より高い収率が得られ、有毒不純物の生成を回避できることである。そして意外にも、本発明の中間体は既知のメシレート中間体よりも高い反応性を示した。ＨＮ（ＣＨ3）2に対する種々の脱離基の反応性を表１に示した。当分野において推測される相対的な反応性はCAREY AND SUNDBERG, Part A, 3rd Edition, page 291 (1990)に記載されている。
【００２１】
表１． ＨＮ(ＣＨ3)2との反応速度
基 Ｋrel
（離脱基のＨＮ(ＣＨ3)2との反応速度）
p-トルエンスルホネート ２.２×１０-2
ＭsＯ- ５.５×１０-3
Ｃl- ９.８×１０-4
Ｉ- ２.０×１０-1
Ｂr- ２.２×１０-2
【００２２】
表１のデータはトシル基、ブロミドおよびヨウダイドが意外にも反応性が高いことを示している（特にブロミドおよびヨウダイドは既知のメシレート中間体よりも４〜３６倍も高い反応性を示す）。Ｈ2ＮＣＨ3、Ｈ2Ｎ（ベンジル）を用いてもＭｓＯに比べて高い反応性が見られた。反応性の増大により反応がより低温でより短時間に完了するようになる。さらに本発明の中間体を用いることにより生成物中の不純物がほとんどなくなる。既知のＯ−メシル中間体を用いると、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−ビスインドリルマレイミド化合物を生成する反応は、マレイミドのカルボニル基での反応から生じる副生成物のために不純度のレベルが１５〜３０％となる。本発明の中間体を用いると不純度のレベルは５％より低くなり、これは実質的な進歩である。
【００２３】
前述のように、アミノ置換Ｎ，Ｎ’架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するために用いられていたＯ−メシレート機能は有毒であり、またアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造において望ましくない不純物であることが分かった。最終生成物からＯ−メシラート中間体を確実に取り除くためには高価な精製技術を用いなければならない。それゆえ、本発明の中間体および本発明の中間体を用いるアミノ置換Ｎ，Ｎ’架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造方法のさらなる利点は有毒不純物を取り除くための困難な精製工程が回避されることである。
【００２４】
本発明の中間体を用いて製造される好ましい化合物は以下の通りである：（Ｓ）−１３−［（ジメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン、特にそのメシレ−ト塩として；（Ｓ）−１３−［（モノメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン；（Ｓ）−１３−［（ピロリジノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン一塩酸塩；および（Ｓ）−１３−［ベンジルアミノメチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン。
【００２５】
式ＩＶで示される好ましい一置換アミン化合物は本発明の化合物から直接製造できる。高い収率の直接的な方法でこれらの化合物を製造するのはメシレート中間体では不可能である。
【００２６】
式ＩＶで示される化合物は遊離塩基として製造され、好ましくは当分野において認められている技術によって製薬的に許容される塩に変換する。好ましい塩は塩酸塩およびメシレート塩をなどである。
【００２７】
以下の実施例および製造例は本発明を単に例示するためのものである。本発明の範囲は単に以下の実施例のみから構成されるものと理解するべきではない。以下の実施例および製造例では融点、核磁気共鳴スペクトル、質量スペクトル、シリカゲルの高圧液体クロマトグラフィー、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、および酢酸エチルはそれぞれＭ．Ｐｔ．、ＮＭＲ、ＭＳ、ＨＰＬＣ、ＤＭＦ、ＴＨＦ、およびＥｔＯＡｃと略記する。記号「ＮＭＲ」および「ＭＳ」はそのスペクトルが所期の構造を満足することを示す。
【００２８】
製造例１
３−（２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート
トリチルクロライド（１７５.２ｇ、０．６１６モル）を窒素雰囲気下、ＣＨ2Ｃｌ2５００ｍＬに溶解した。トリエチルアミン（７１．９ｇ、１００ｍＬ、０．７１０モル）を加えた後、Ｒ，Ｓ−グリシドール（５０．０ｇ、０．６４８モル）を加え、反応溶液を４時間緩やかな還流温度（４２℃）にまで加熱した。この反応物を室温にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液２５０ｍＬ次いでブライン（塩水）２５０ｍＬで２回抽出した。水相をＣＨ2Ｃｌ2１００ｍＬで逆抽出し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させて、油状物としてトリチル−グリシドールを得、これをエタノールから再結晶し、固形のトリチル−グリシドール１０４．４ｇ（５４％）を得た。
【００２９】
ビニルマグネシウムブロミド（５０ｍＬ、５０ミリモル、２．０当量）の１ＭＴＨＦ溶液を窒素雰囲気下で−２０℃にまで冷却し、触媒量のヨウ化銅を加えた（０．２４ｇ、１．２６ミリモル、０．０５当量）。得られた混合物を−２０℃で５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ４０ｍＬ中のトリチル−グリシドール（７．９１ｇ、２５．０ミリモル）の溶液を−２０℃で１５分間かけて滴加する。この反応混合物を−２０℃で３時間撹拌した後、室温にまで戻し、１５分間撹拌した。この反応混合物を−３０℃に冷却することによって反応を停止し、塩化アンモニウムの飽和水溶液１２５ｍＬをゆっくりと加えた。得られた混合物を酢酸エチル２００ｍＬで抽出した。次いで有機相を脱イオン水１２５ｍＬ中のエチレンジアミンテトラ酢酸、二ナトリウム塩、二水和物（ＥＤＴＡ）０．９３ｇ（２．５０ミリモル、０．１当量）の水溶液で抽出し、すべての金属を取り除いた。水相を酢酸エチル５０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブライン１００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物を得、これを３／１ヘキサン／酢酸エチル１．２Ｌを用いてシリカ（７６ｇ）に通し、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、明黄色油状物の１−（トリフェニルメトキシ）−４−ペンテン−２−オール９．０７ｇ（１００％）を得た。
【００３０】
鉱油中の水素化ナトリウム６０％懸濁液（６．１３ｇ、０．１５３モル、１．５当量）を乾燥ＴＨＦ１７５ｍＬに懸濁し、これは室温で加えた。得られた混合物を４５℃で１.５時間懸濁した後、新たに蒸留した臭化アリル１７.７ｍＬ（０.２０４ミリモル、２．０当量）をシリンジによって加えた。この反応物を４５℃で１時間加熱した。この反応はＴＬＣまたはＨＰＬＣによってモニターできる。この反応混合物を０℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液４００ｍＬをゆっくりと加え、過剰の塩基を失活（クエンチ）する。得られた混合物を酢酸エチル８００ｍＬで抽出し、有機相を水５００ｍＬで洗浄する。水相を酢酸エチル１００ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブライン２００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、黄色油状物の１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］４１．５ｇ（＞１００％）を得た。
【００３１】
１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］（３９．３ｇ、０．１０２モル）を無水メチルアルコール３９０ｍＬおよびＣＨ2Ｃｌ2６０ｍＬの溶液に溶解し、粘性のある反応溶液に窒素気泡を通しながら、−５０℃から−４０℃に冷却した。次いで−５０℃から−４０℃で８０分間、反応物の色が淡青色に変化するまでオゾン気泡を反応混合物に通した。得られた混合物を窒素雰囲気下で０℃にまであたためた後、反応温度を１０℃以下に保ちながら、エタノール８５ｍＬ／水８５ｍＬ中のホウ水素化ナトリウム（２３．１５ｇ、０．６１２モル、６当量）溶液をゆっくりと加え、反応を停止した。この反応物を氷浴中で３０分間撹拌し、次いで室温にまで戻し、一晩撹拌した。あたためる温度は３１℃にまで上がった。この反応混合物を塩化アンモニウムの飽和水溶液４００ｍＬで希釈し、酢酸エチル８００ｍＬで抽出した。有機相を水４００ｍＬで洗浄し、水相を酢酸エチル１５０ｍＬで逆抽出した。有機相をまとめ、ブライン２００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、濁った油状物を得た。この油状物を２／１ヘキサン／酢酸エチルから３回再結晶を繰り返し、３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブトノ−ル２８．９ｇを得た（７２％）。
【００３２】
３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブトノール（１４．０ｇ、３５．７ミリモル）をＣＨ2Ｃｌ2１４０ｍＬに溶解し、これを窒素雰囲気下で０℃にまで冷却し、トリエチルアミン（１０．８ｇ、１４．９ｍＬ、０．１０７モル、３．０当量）を加えた。次いでメタンスルホニルクロライド（１１．０ｇ、７．４６ｍＬ、９６．４ミリモル、２．７当量）を＜５℃で滴加した。得られた反応混合物をさらにＣＨ2Ｃｌ2（３００ｍＬ）で希釈し、水２００ｍＬおよび塩化アンモニウムの飽和水溶液２００ｍＬで洗浄した。水相をＣＨ2Ｃｌ2５０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブリン１００ｍＬで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、白色固形の３−（２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート１８．４ｇ（９４％）を得た。
【００３３】
製造例２
（Ｓ）−トリチルグリシドール
トリチルクロライド（２８６６ｇ、１０．３モル）を窒素雰囲気下でＣＨ2Ｃｌ2７Ｌに溶解した。トリエチルアミン（１１８９ｇ、１６３８ｍＬ、１１．８モル）を加えた後、ＣＨ2Ｃｌ2１Ｌを洗浄液として用いて（Ｒ）−（＋）−グリシドール（７９５．０ｇ、１０．６モル）を加えた。反応溶液を緩やかな還流温度（４２℃）にまで３〜４時間加熱した。反応物を室温にまで冷却した後、ブリン３Ｌを加えた。有機相を乾燥（６００ｇ Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物標題化合物を得、これをエタノールから再結晶し、固形の標題化合物２３５４ｇ（７０％）を得た。
【００３４】
製造例３
（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート
ビニルマグネシウムブロミド（５．７６Ｌ、５．７６モル、１．９６当量）の１Ｍ ＴＨＦ溶液を窒素雰囲気下で−２０℃にまで冷却し、触媒量のヨウ化銅を加えた（２８．２ｇ、０．１４８モル、０．０５当量）。得られた混合物を−２０℃で５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ３．２Ｌ中の（Ｓ）−トリチル−グリシドール（９２９．０ｇ、２．９４モル）の溶液を−２０℃で１．５時間かけて滴加した。反応混合物を−２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を−３０℃にまで冷却することによって反応を停止し、塩化アンモニウムの飽和水溶液５Ｌをゆっくりと加えた。次いで有機相をエチレンジアミン四酢酸、二ナトリウム塩二水和物（ＥＤＴＡ）の１０重量％／容量溶液１Ｌで２回抽出し、すべての金属を取り除いた。有機相をブライン２Ｌで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物の（Ｓ）−１−０−トリフェニルメチル−４−ヒドロキシペンタノール１０６１ｇ（９６％）を得た。
【００３５】
鉱油中の水素化ナトリウム（２６８．９ｇ、６．７２モル、１．５当量）の６０％懸濁液を窒素雰囲気下で乾燥ＴＨＦ２．８Ｌに懸濁し、乾燥ＴＨＦ５．６Ｌ中の（Ｓ）−１−０−トリフェニルメチル−４−ヒドロキシペンタノール（１５４３ｇ、４．４８モル）溶液を室温で加えた。得られた混合物を室温で１．５時間撹拌した後、新たに蒸留した臭化アリル７７０ｍＬ（８．８９モル、２．０当量）を２０分間かけて加えた。反応物を１〜２時間４５℃にまで加熱した。この反応混合物を１５〜２０℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液２Ｌをゆっくりと加え、過剰の塩基をクエンチした。得られた混合物を酢酸エチル１Ｌおよび水１Ｌで希釈し、有機相を単離した。水相を酢酸エチル５００ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、黄色油状物の（Ｓ）−１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］１８６７ｇ（９８％）を得た。 （Ｓ）−１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］（１２８１ｇ、３．３３モル）を無水メチルアルコール４ＬおよびＣＨ2Ｃｌ2３．６Ｌの溶液に溶解し、粘性のある反応溶液に窒素気泡を通しながら−５０℃から−４０℃にまで冷却した。スーダンＩＩＩ指示薬をこの反応物に加え、−５０℃〜−３５℃で１３時間、反応物が桃色から明緑／黄色に変化するまでオゾン気泡を反応混合物に通した。得られた反応混合物を窒素雰囲気下で０℃にまで戻した後、これをエタノール２．５Ｌ／水２．５Ｌ中のホウ水素化ナトリウム（７５４ｇ、１９．９モル、６当量）の溶液に反応温度を３０℃以下に保ちながら４０分間かけてゆっくりと加えた。次いでこの反応物を室温で一晩撹拌した。反応はＨＰＬＣによってモニターできる。この反応混合物を１０〜１５℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液４Ｌへ＜２０℃でゆっくりと加えた。次いで反応停止した混合物を濾過し、固形物をＣＨ2Ｃｌ2３Ｌで洗浄した。有機相を単離し、塩化アンモニウムの飽和水溶液３Ｌで洗浄し、水相をＣＨ2Ｃｌ2１Ｌで逆抽出した。有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、油状物の（Ｓ）−３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノ−ル１３６１ｇ（＞１００％）を得た。
【００３６】
（Ｓ）−３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノ−ル（５００ｇ、１．２７モル）をＣＨ2Ｃｌ2４．８Ｌに溶解し、これを窒素雰囲気下、０℃にまで冷却し、トリエチルアミン（３８６．４ｇ、５３２ｍＬ、３．８１モル、３．０当量）を加えた。次いでメタンスルホニルクロライド（３９６．３ｇ、２６８ｍＬ、３．４６モル、２．７当量）を＜５℃で３０分間かけて滴加した。得られた反応混合物を０〜５℃で１〜２時間撹拌し、反応をＨＰＬＣによってモニターした。この反応混合物をさらにＣＨ2Ｃｌ2２Ｌで希釈し、水２Ｌおよび塩化アンモニウムの飽和水溶液２Ｌで２回洗浄した。水相をＣＨ2Ｃｌ2１Ｌで逆抽出し、有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、粗製の固形物を得、これを１／１ヘプタン／酢酸エチルから再結晶３回し、固形の（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート６１５ｇ（８８％）を得た。ＮＭＲ。ＭＳ。
【００３７】
製造例４
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−（ヒドロキシメチル）−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
２，３−ビス−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−メチルマレイミド（１１４．７ｇ、０．３３６モル）および（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート（２２０．０ｇ、０．４０１モル、１．２当量）をＤＭＦ４．３Ｌに溶解した。次いでこの試薬溶液をＤＭＦ７Ｌ中の炭酸セシウム（４３７．８ｇ、１．３４モル、４．０当量）の５０℃スラリーに７０時間かけてゆっくりと加えた（約１ｍＬ／分）。７０〜７２時間後、この反応物を冷却し、濾過し、ＤＭＦを減圧下で取り除き、残留物を得、これをＣＨ2Ｃｌ2４．６ｍＬに溶解した。有機相を１Ｎ ＨＣｌ水溶液１．１５Ｌ次いでブライン４．６Ｌで抽出した。水相をまとめて、ＣＨ2Ｃｌ2１．１Ｌで逆抽出した。有機相をまとめ、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過した。溶媒のほとんどを減圧下で取り除き、得られた溶液をさらにＣＨ2Ｃｌ2４〜５ガロンを用い、シリカゲル２Ｋｇに通して濾過し、ベースライン（基線）物質を取り除いた。溶媒を減圧下で取り除き、得られた紫色固形物をアセトニトリル７容量（粗製の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオンの重さを基準として）中にトリチュレートし、乾燥後、（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン１５０．２ｇ（５７％）を得た（ＨＰＬＣによると標品に対して８９％純度）。
【００３８】
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（３２．７ｇ、４６．９ミリモル）をエタノール１．６Ｌおよび１０Ｎ ＫＯＨ水溶液１．６Ｌ中に懸濁した。得られた混合物を緩やかな還流温度（７８℃）にまで１９時間加熱した。還流温度に達すると固形物のほとんどが溶解した。反応溶液を１０〜１５℃にまで冷却し、１０Ｎ ＨＣｌ水溶液（１.２Ｌ）を＜１５℃でゆっくりと加え、酸度をｐＨ＝１に調節した。酸性にすると赤色のスラリーが生成した。この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2５００ｍＬで希釈し、２０分間撹拌し、濾過し、ほとんどの塩を取り出した。この塩をさらにＣＨ2Ｃｌ2（１．５Ｌ）で洗浄し、濾液を水１Ｌで２回抽出した。水相をまとめ、ＣＨ2Ｃｌ2１Ｌで逆抽出し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ4）した。溶媒を減圧下で取り除き、紫色固形の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］フロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３−ジオン３６．０ｇ（＞１００％）を得た（ＨＰＬＣ領域で８０％純度）。
【００３９】
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］フロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３−ジオン（３６．０ｇ、推定４６．９ミリモル）を窒素雰囲気下で乾燥ＤＭＦ３２０ｍＬに溶解し、前もって混合しておいた１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（９９ｍＬ、７５．７ｇ、０．４６９モル、１０当量）およびメタノール（９．５ｍＬ、７．５１ｇ、０．２３５モル、５当量）の溶液で処理した。得られた溶液を４５℃で７時間加熱した。この反応はＨＰＬＣによってモニターできる。ほとんどのＤＭＦを減圧下で取り除き、得られた残留物を酢酸エチル２００ｍＬで抽出し、水２００ｍＬで洗浄し、５％ＬｉＣｌ水溶液１００ｍＬで２回洗浄した。水相を酢酸エチル１００ｍＬで逆抽出した。有機相をまとめ、塩化アンモニウムの飽和水溶液２００ｍＬで洗浄した。有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、減圧下で蒸発させ、粗製の紫色固形（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ；１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン３５．９ｇ（＞１００％）を得た。
【００４０】
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ；１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（３４．０、推定４６．８ミリモル）をＣＨ2Ｃｌ2３５０ｍＬに溶解し、窒素雰囲気下で−２５℃にまで冷却する。＜０℃で約１〜２分間無水塩酸ガスを反応溶液へ導入した。得られたスラリーを室温にまで戻し、１時間撹拌した。この反応はＨＰＬＣによってモニターできる。このスラリーを濾過し、固形物をＣＨ2Ｃｌ2２００ｍＬで洗浄した。この固形物を減圧オーブン中、５０℃で乾燥し、紫色固形の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−（ヒドロキシメチル）−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン１８．６ｇ（９０％）を得た（ＨＰＬＣ領域で９３％純度）。
【実施例】
【００４１】
実施例１
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ブロモ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ−［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
臭素（２．０当量）およびピリジン（０．１当量）を塩化メチレン（１０容量）へ加え、この溶液を−５℃にまで冷却した。この臭素をトリフェニルホスファイト（２．０当量）で滴定した。すべての臭素が消費されると溶液は黄色から透明に変化した。２番目の反応容器へ塩化メチレン（１０容量）中の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヒドロキシ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０当量）を加えた。このスラリーを−５℃にまで冷却した。次いでトリフェニルホスファイトジブロミド溶液をピローロジオンのスラリーへ加え、この反応物を室温にまで戻し、１２〜１６時間撹拌し、反応を完了させた。（ＨＰＬＣによると＜０．４％化合物ＩＩＩ）。このスラリーを減圧下に室温で２時間かけて濃縮し、次いで脱イオン水１容量でクエンチし、１５分間撹拌した。トルエン（４０容量）をこの反応物のスラリーへ加え、生成物を沈殿させた。１０℃で１時間撹拌した後、生成物を濾別し、トルエン（５容量）で２回、脱イオン水（５容量）、最後にトルエン５容量で洗浄した。標題ブロミド化合物を減圧乾燥機中、５０℃で乾燥した。収率８５〜９０％（不純物１〜２％）。
【００４２】
さらに不純物のレベルを下げるために、生成物をアセトン：水、メタノール：水、イソプロパノール：水、または酢酸エチルのような溶媒系中へ再びスラリー化する。生成物は比１：１から５：１のＴＨＦ：水中へ再スラリー化するのが好ましい。
【００４３】
実施例２
（Ｓ）−１３−［（ジメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７容量）中の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ブロモ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０当量）溶液へジメチルアミン（１０．７３Ｋｇ、１２当量）を加えた。反応容器を密閉し、４５℃で９時間加熱した。次いでこの反応物を室温にまで冷却し、１２〜１６時間撹拌した。ＮａＯＨ（１２Ｎ、１．１当量）をこの反応物に加え、遊離塩基とした。この溶液をさらに２時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを減圧下で５〜７容量にまで取り除いた後、６０℃のＭｅＯＨ（３０容量）を同温度で１時間かけてこの反応物に加えた。次いでこの反応物を室温にまで冷却し、一晩撹拌した後、さらに０〜１０℃にまで冷却した。得られた生成物を濾別し、ＭｅＯＨ（３容量）で洗浄した。この物質を減圧乾燥機中、５０℃で恒量になるまで乾燥した。収率８５〜９２％。この反応で使用した他の溶媒はＴＨＦ／水およびジメチルアセトアミドであるが、出発物質および生成物の溶解度が低いため、反応は極性非プロトン溶媒中で行うべきである。ｉｎ ｓｉｔｕで臭酸塩を遊離させるのに他の塩基を試した（以下参照）が、最も効果的な塩基は６Ｎ ＮａＯＨ、１２Ｎ ＮａＯＨおよびＫ2ＣＯ3であった。
【００４４】
実施例３
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヨード（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［メタンスルホニロキシ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０ｇ、１．９４ミリモル）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬ（２０容量）中に取った。この溶液にヨウ化ナトリウム（３．０ｇ、１９．４ミリモル、１０．０当量）を加え、この反応物を撹拌し、５０℃で３６時間加熱した。この反応物を環境温度にまで冷却し、水（５０ｍＬ、５０容量）を加えることによって生成物を単離した。析出した紫色固形生成物を５：１ＴＨＦ：水から再結晶して標題化合物０．８７ｇ（８１％）を得た。
【００４５】
実施例４
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ｐ−トルエンスルホニルオキシ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヒドロキシメチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサ−ジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０ｇ、２．２７ミリモル）をジクロロメタン２０ｍＬ（２０容量）中に取った。この溶液へ無水トルエンスルホン酸（２．２２ｇ、６．８０ミリモル、３．０当量）およびピリジン（０．７２ｇ、９．０８ミリモル、４．０当量）を加え、反応物を撹拌し、４２℃で２時間加熱還流した。この反応物を環境温度にまで冷却し、ジクロロメタン４０ｍＬで希釈した。有機相を１Ｎ塩酸５０ｍＬおよびブライン５０ｍＬで洗浄した。水相をジクロロメタン３０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、溶媒を塩化メチレンからエタノールに交換した。析出した紫色固形生成物を濾過し、標題化合物１．２５ｇ（９３％収率）を得た。
【００４６】
実施例５
（Ｓ）−１３−［（モノメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
メチルアミン（３７．１ｇ、１．１９モル、２０当量）を、温度を２３℃以下に保持しつつＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド６００ｍｌに溶解した。この溶液に実施例１の化合物（３０ｇ、０．０５９５モル）を加えた。得られた反応物を密閉容器内にて環境温度で２４時間撹拌した。この反応中に生成されるＨＢｒを、トリエチルアミン（８．３ｍｌ、０．０５９５モル、１当量）を加えて除去し、得られた反応物をさらに３０分撹拌した後、４℃に冷却し、反応温度を２５℃以下に保持しつつ水４５０ｍｌをゆっくりと加えた。水を加えるとスラリーが形成され、それを１時間撹拌し、濾過し、得られた濾過固形物を水２００ｍｌをさらに用いて洗浄した。この固形物を５０℃の減圧オーブン中で乾燥し、標題化合物２５．０３ｇ（９３％）を得た。
【００４７】
実施例６
（Ｓ）−１３−［（ピロリジノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン一塩酸塩
実施例１の化合物（１．０ｇ、１．０当量）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド５ｍｌ中に取り、ピロリジン（１．６ｍｌ、１０当量）を加えた。得られた反応物を４５℃に９時間加熱し、次いで室温にまで冷却した。この赤色スラリーに１２Ｎ ＮａＯＨ（０．１７ｍｌ、１．０当量）を加え、混合物を室温にて２時間撹拌し、赤色の溶液を得た。溶媒を減圧下に除去し、得られた油状物質を塩化メチレン（１００ｍｌ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム（１００ｍｌ）および５％ＬｉＣｌ溶液（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄した。減圧下に塩化メチレンを除去し、油状物質を得、これにメチルｔ−ブチルエーテルを加えて赤色固形物として標題化合物を沈殿させた。濾過してこの固形物を単離し、５０℃にて減圧オーブン内で一晩乾燥し、生成物０．８ｇ（８１％）を得た。
【００４８】
実施例７
（Ｓ）−１３−［ベンジルアミノメチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン
実施例１の化合物をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド２０容量中に取り、ベンジルアミン（６当量）を一回で加えた。得られた反応物を密閉容器内で撹拌し、８０℃に２４時間加熱した。その反応物を環境室温にまで冷却し、トリエチルアミン（１当量）を加えてＨＢｒを除去し、得られた反応物をさらに３０分撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄した。この溶液の酢酸エチルをエタノールに溶媒変換して赤色スラリーを得、これを濾過し、赤色固形物として標題化合物を得た（収率７９％）。
【００４９】
実施例８
動力学試験
【化９】
動力学試験のため、ジメチルアミン２モル濃度のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）溶液を調製した。化合物Ａ（０．２５ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｂ（０．２２９ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｃ（０．２０９ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｄ（０．２３６ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）および化合物Ｅ（０．２７１ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）をそれぞれＤＭＡ（〜２０ｍｌ／ｇ、４−６ｍｌ）に溶解し、ジメチルアミン２モル濃度のＤＭＡ溶液（４．５ｍｌ、９．０ｍｍｏｌ、２０当量）を各反応物に加えた。これらの反応溶液を封栓し、２３℃にて撹拌し、ＨＰＬＣ分析用に経時的にサンプリングした。アイソクラティック(isocratic)な５０／５０ＴＨＦ／０．１％トリフルオロ酢酸緩衝化水の１ｍｌ／分の移動相および２３３ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いて４．６ｍｍ ｘ ２５ｃｍゾルバックスＳＢ−ＣＮカラムを利用した（Ｒｔ 化合物Ａ＝１０．４分、Ｒｔ 化合物Ｂ＝９．３分、Ｒｔ 化合物Ｃ＝９．０分、Ｒｔ 化合物Ｄ＝６．２分、Ｒｔ 化合物Ｅ＝１０．６分）。３点検量線の一次方程式（０．１ｍｇ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍｌおよび０．０２５ｍｇ／ｍｌの濃度に対して対応する応答領域）から各化合物について応答係数を得、その係数から反応物濃度を測定した。ＨＰＬＣ分析の前に反応物試料（０．１ｍｌ）を計量フラスコ中で２５ｍｌに希釈し、得られた濃度（ｍｇ／ｍｌ）をモル濃度（ｍｍｏｌ／ｍｌ）に変換した。化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの濃度で割ったジメチルアミン濃度の常用対数を時間に対してプロットした。各プロットから得られた直線の傾きを、最初のアミン濃度から最初の化合物濃度を差し引いた差で割り、二次速度定数（単位：ＬＭ-1Ｈｒ-1）を得た。得られた結果を表Ｉに示す。
【００５０】
実施例９
メシレート対ブロミドとジメチルアミン、メチルアミンおよびベンジルアミンとの比較速度試験
動力学試験に使用するため、メチルアミンおよびジメチルアミンの２モル濃度Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）溶液を調製した。化合物Ｄ（１．０３ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）および化合物Ｂ（１．００ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（メチルアミンおよびジメチルアミン反応については２０ｍｌ／ｇ、ベンジルアミン反応については３６ｍｌ／ｇ）中にて一緒にし、メチルアミンの２モル濃度ＤＭＡ溶液（１９．８ｍｌ、３９．７ｍｍｏｌ、２０当量）またはジメチルアミンの２モル濃度ＤＭＡ溶液（１９．８ｍｌ、３９．７ｍｍｏｌ、２０当量）またはベンジルアミン（４．２５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ、２０当量）を加えた。これらの反応溶液を封栓し、２３℃にて撹拌し、ＨＰＬＣ分析用に経時的にサンプリングした。アイソクラティック(isocratic)な４５／５５ＴＨＦ／０．１％トリフルオロ酢酸緩衝化水の１ｍｌ／分の移動相および２３３ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いて４．６ｍｍ ｘ ２５ｃｍゾルバックスＳＢ−ＣＮカラムを利用した（Ｒｔ 化合物Ｄ＝１１．４分、Ｒｔ 化合物Ｂ＝１９．９分）。３点検量線の一次方程式（０．１ｍｇ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍｌおよび０．０２５ｍｇ／ｍｌの濃度に対して対応する応答領域）から各化合物について応答係数を得、その係数から反応物濃度を測定した。ＨＰＬＣ分析を行う前に反応物試料（０．１ｍｌ）を計量フラスコ中で２５ｍｌに希釈し、得られた濃度（ｍｇ／ｍｌ）をモル濃度（ｍｍｏｌ／ｍｌ）に変換した。化合物濃度で割ったアミン濃度の常用対数を時間に対してプロットした。各プロットから得られた直線の傾きを、最初のアミン濃度から最初の化合物濃度を差し引いた差で割り、二次速度定数（単位：ＬＭ-1Ｈｒ-1）を得た。これにより、特許請求しているブロミド中間体から直接、メチルアミノおよびベンジルアミノ誘導体が高収率で調製された。メシレート中間体からは、メチルアミノおよびベンジルアミノ誘導体が直接、高収率には得られなかった。
【００５１】
このように、本発明の化合物はさらに、選択的プロテインキナーゼＣインヒビターとして活性を示す。この化合物の活性は、カルシウムカルモジュリン依存性プロテインキナーゼ検定、カゼインプロテインキナーゼＩＩ検定、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ触媒サブユニット検定および１９９５年６月１４日発行のＥＰ０ ６５７ ４５８［Ｈｅａｔｈら］（これは引用によって本明細書に包含される）に記載されているタンパク−チロシンキナーゼ検定によって測定した。特許請求している化合物は１０μＭ以下のＩＣ50値を有しており、これらの検定において活性でありアイソザイム選択的である。
【００５２】
この証明された薬理活性を有している化合物はプロテインキナーゼＣが病因となっていると示されている状態の処置に有用である。当業界にて認められている状態には、糖尿病およびその合併症（特に微小血管性糖尿病合併症、網膜症、腎症および神経障害）、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、アルツハイマー病、皮膚疾患および癌などがある。
【００５３】
式：ＩＩで示される化合物は好ましくは投与前に製剤化する。従って、本発明のもうひとつの態様は式：ＩＩで示される化合物および１つまたはそれ以上の製薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含有する医薬組成物に関する。
【００５４】
本発明の医薬組成物は周知かつ容易に入手可能な成分を用いて既知の手法によって調製される。本発明の組成物を作製するには、活性成分を通常、担体と混合し、または担体で希釈し、またはカプセル、サシエ、ペーパーもしくは他のコンテナの形態にできる担体内に充填する。担体を希釈剤として利用する際には、担体は固形物、半固形物または、活性成分のビヒクル、賦形剤もしくは媒質として有用な液状物質であることができる。従って、本発明の組成物は錠剤、ピル剤、粉末剤、トローチ剤、サシエ剤（sachet）、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、溶液剤、シロップ剤、エアロゾル剤（固体として、または液状媒質中）、ゼラチン軟および硬カプセル剤、坐剤、滅菌注射液剤および滅菌密封粉末剤などの剤形とすることができる。
【００５５】
適当な担体、賦形剤および希釈剤を幾つか例示すれば、ラクトース、デキストロース、シュクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギネート、トラガカントゴム、ゼラチン、珪酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水性シロップ（water syrup）、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチルおよびプロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油が挙げられる。本発明の製剤はさらに、滑沢剤、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、保存剤、甘味料または香料を含むことができる。本発明の組成物は、患者に投与した後、活性成分を即時に、持続して、または徐放して放出するよう製剤化することができる。
【００５６】
化合物の医薬的有効量は哺乳動物においてＰＫＣ活性を阻害できる量である。通常の１日投与量は活性化合物約０．０１ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇである。本発明の組成物は好ましくは、それぞれが約１から約５００ｍｇを、より普通には約５から約３００ｍｇを含有する単位投与剤形の形態に製剤化する。しかし、投与する治療学的用量は処置する症状、投与する化合物の種類および選択する投与経路などの関連する状況を勘案して医師によって決定されるので、上記の投与量の範囲はいかなる意味においても本発明の範囲の限定を意図していないことは理解されよう。「単位投与剤形」なる用語は、ヒト対象および他の哺乳動物に対する単一投与に適した物理的に別個の単位を意味しており、各単位それぞれは所望の治療効果を得るよう計算された活性成分の予め決められた量を適当な製薬学的担体とともに含有している。
以下に製剤例を挙げるが、これは単なる例示であり、いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものではない。
【００５７】
製剤例１
ゼラチン硬カプセル剤を以下の成分を使用して調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 ５
乾燥デンプン １８５
ステアリン酸マグネシウム １０
総量 ２００ｍｇ
上記成分を混合し、２００ｍｇ量のゼラチン硬カプセルに充填する。
【００５８】
製剤例２
以下の成分を使用して錠剤を調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 ２０
微結晶セルロース ４００
フュームド二酸化珪素 １０
ステアリン酸 ５
総量 ４３５ｍｇ
上記成分を混合し、圧縮して各４３５ｍｇ重量の錠剤を成形する。
【００５９】
製剤例３
活性成分１０ｍｇを含有する各錠剤を以下のようにして調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 １０ｍｇ
デンプン ４５ｍｇ
微結晶セルロース ３５ｍｇ
ポリビニルピロリドン（１０％水溶液として） ４ｍｇ
カルボキシメチルデンプン・ナトリウム ４．５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．５ｍｇ
タルク １ｍｇ
総量 １００ｍｇ
【００６０】
活性成分、デンプンおよびセルロースをＮｏ．４５メッシュ米国ふるいに通し、充分に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液をこの粉末と混合し、次いでＮｏ．１４メッシュ米国ふるいに通す。このようにして調製した顆粒を５０℃で乾燥し、Ｎｏ．１８メッシュ米国ゆるいに通す。この顆粒に、前もってＮｏ．６０メッシュ米国ふるいに通しておいたカルボキシメチルデンプン・ナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを加え、混合した後、錠剤成形装置にて圧縮し、各１００ｍｇ重量の錠剤を作成する。
【００６１】
製剤例４
活性成分４０ｍｇを含有するカプセル剤を以下のようにして調製する：
用量
（ｍｇ／カプセル剤）
活性成分 ４０ｍｇ
デンプン ５９ｍｇ
微結晶セルロース ５９ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ
総量 ２００ｍｇ
活性成分、セルロース、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、Ｎｏ．４５メッシュ米国ふるいに通し、２００ｍｇ量のゼラチン硬カプセルに充填する。
【００６２】
本明細書において本発明の基本、好ましい態様および操作手順を説明してきた。しかし、ここに保護を求めようとする発明は、本明細書に開示した特定の形態が制限的なものでなく例示と見なされるべきものであるので、開示の形態には限定されないと解釈すべきである。当業者ならば、本発明の精神を逸脱することなく、修飾および改変が可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
［式中、Ｒ1はＯ−トシルである］
で示される化合物。
【請求項１】
式：
【化１】
［式中、Ｒ1はＯ−トシルである］
で示される化合物。
【公開番号】特開２００８−１３８００６（Ｐ２００８−１３８００６Ａ）
【公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−３３８８０８（Ｐ２００７−３３８８０８）
【出願日】平成１９年１２月２８日（２００７．１２．２８）
【分割の表示】特願平９−５１９８３８の分割
【原出願日】平成８年１１月１８日（１９９６．１１．１８）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１２月２８日（２００７．１２．２８）
【分割の表示】特願平９−５１９８３８の分割
【原出願日】平成８年１１月１８日（１９９６．１１．１８）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]