ＳＨＩＰ１モデュレーター
本発明は、ＳＨＩＰ１活性のモデュレーターとしてのペロロール、その関連化合物およびその医薬組成物の使用を包含する。本発明はまた、ＳＨＩＰ１活性をモデュレートすることのできる新規なテルペン化合物およびその合成法をも提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞増殖および生存および免疫細胞活性化の負のレギュレーターであるＳＨＩＰ１に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＳＨ２含有イノシトール５−ホスファターゼ（ＳＨＩＰ１）は、イノシトール１,３,４,５−四リン酸（ＩＰ４）およびホスファチジルイノシトール３,４,５−三リン酸（ＰＩＰ３）からの５−リン酸を選択的に加水分解する。米国特許第6,238,903号は、ＳＨＩＰ１が、遺伝子発現、細胞の増殖、分化、活性化、および代謝を制御するシグナル伝達経路、とりわけＲａｓおよびリン脂質シグナル伝達経路の酵素レギュレーターであることを開示している。ＳＨＩＰ１は、サイトカインおよび免疫レセプターのシグナル伝達において重要な役割を果たしている。ＳＨＩＰ１の破壊された（ＳＨＩＰ１ -/-）マウスは、顆粒球およびマクロファージの過剰産生を特徴とする骨髄増殖性の表現型を示す１。ＳＨＩＰ１ -/-の肥満細胞はＩｇＥおよびSteel因子により誘発された脱顆粒を起こしやすく、一方、ＳＨＩＰ１ -/-のＢ細胞はFc RIIBによる負の制御に対して耐性である。ＳＨＩＰ１はまた、慢性の骨髄性白血病の病因にも関与している２。
【０００３】
ＳＨＩＰ１の活性を特異的にモデュレートする化合物は、細胞の増殖性、造血性および免疫性の疾患の治療、並びに研究および医薬発見の試験の際にＳＨＩＰ１媒体経路を操作するのに有用であろう。今日まで、小分子のＳＨＩＰ１特異的モデュレーターの構造は開示されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ペロロール（pelorol）と称するセスキテルペン化合物は、Petrosaspongia metachromiaおよびDactylospongia elegansを含む種々の海洋性の海綿動物から得ることができる。KwakらおよびGoclikらは、それぞれペロロールの構造および種々の海洋性海綿動物からのその抽出を開示している４,５。ペロロールは、弱い抗トリパノソーマおよび抗マラリア原虫活性を有すると報告されている５。ペロロールの正確な構造は以下のとおりであり、Ｍｅはメチル基を表し、キラル原子（Ｃ−５、８、９および１０）の相対的な立体構造は示したとおりである。
【化１】
【０００５】
ペロロールと類似でペロロールの特徴的なgem置換非芳香族環を有する幾つかの還元および置換されたクリセン誘導体が、頁岩中に見出される種々の多環ポリプレノールの調製６−１２、タキソジオン（taxodione）の調製１３、および化合物1,2,3,4,4a,4b,5,6,10b,11,12,12a-ドデカヒドロ-1,1-ジメチル-クリセンの調製１４における中間体または誘導体として知られている。これらクリセン誘導体のいずれも生物学的活性を有することは知られていない。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、ペロロールおよび関連化合物がＳＨＩＰ１活性をモデュレートすることができるとの発見に基づくものである。
【０００７】
本発明の幾つかの態様は、式Ｉの新規な化合物およびその塩を提供する。式Ｉの化合物は、以下の構造を有する：
【化２】
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＹ１Ｙ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＹ１Ｙ２−および−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４ＣＹ５Ｙ６−（式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ’、およびＳＨよりなる群から選ばれるか；またはＹ１／Ｙ２、Ｙ３／Ｙ４、およびＹ５／Ｙ６のいずれか一つの群が＝Ｏであるか；またはＹ１／Ｙ３がエポキシドを形成し、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６の少なくとも一つ（存在するときは）はＨではない）よりなる群から選ばれる；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、ＮＯ２、ＮＨ２、−ＮＨＲ、および−ＮＲ２よりなる群から選ばれる（式中、Ｒは、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’２、ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、およびエポキシド）である）；
Ｒ’は、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ”、−ＮＲ”２、ＮＯ２、および−ＣＯ２Ｈ（ここでＲ”は、直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基）である））。
【０００８】
本発明の式Ｉの新規な化合物は、以前に記載されたgem置換クリセン誘導体の正確な構造を包含するものではない。これら以前に記載された化合物には、ペロロールおよび以下の構造（式中、Ｍｅはメチルである）を有する化合物が含まれる。
【化３】
【化４】
【０００９】
別の定義により、本発明は、式Ｉにおいて各Ｒ１〜Ｒ４がメチルであり、Ｑが−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｘ１〜Ｘ４が以下の定義のいずれかである、そのような以前に知られた特定の化合物を排除する：
（ａ）Ｘ１およびＸ２がＯＨ、Ｘ３がＨ、およびＸ４が−ＣＯＯＣＨ３；
（ｂ）Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＨ；
（ｃ）Ｘ１、Ｘ２、およびＸ４がＨ、Ｘ３がＣＨ３；
（ｄ）Ｘ１、Ｘ３、およびＸ４がＨ、Ｘ２がＣＨ３；
（ｅ）Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４がＨ、Ｘ１がＣＨ３；および
（ｆ）Ｘ１およびＸ４がＨ、Ｘ２およびＸ３がＯＣＨ３。
【００１０】
式ＩにおいてＲ１およびＲ２がＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ４がＨであり、Ｑが−ＣＨ２ＣＨ２−であり、各Ｘ１〜Ｘ４がＨである化合物も排除される。
【００１１】
本発明の幾つかの態様は、１またはそれ以上の式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩、および薬理学的に許容しうる担体を含む医薬組成物を提供する。そのような組成物は、医薬用途に適した生物学的に活性な化合物として知られていない式Ｉの以前に知られた化合物を含んでいてよい。
【００１２】
本発明の幾つかの態様は、免疫性、炎症性、または新生物性の疾患または状態の治療または予防方法であって、そのような治療または予防を必要とする患者に有効量の本発明の式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩、または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
本発明の幾つかの態様は、ＳＨＩＰ１活性のモデュレートのためおよびＳＨＩＰ１活性のモデュレート剤の調製のための式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩の使用を提供する。そのようなモデュレートはインビトロまたはインビボであってよい。インビボで使用するための剤としては、本発明の医薬組成物並びにインビトロでの使用に適合させた剤が挙げられる。モデュレートは、上記の免疫性、炎症性、または新生物性の状態または疾患の治療または予防のためのものであってよい。
【００１４】
式Ｉの幾つかの化合物は、生物学的抽出物を分画することにより、または利用できる化合物を誘導体化することにより、全体としてまたは部分的に調製することができる。別法として、式Ｉの化合物は全合成により調製することができる。
【００１５】
本発明の幾つかの態様は、式ＩＡ：
【化５】
（式中、Ｒ１〜Ｒ４、Ｘ１、Ｘ３、Ｘ４は式Ｉの定義と同じ、Ｌ’はＣ１〜Ｃ４飽和または不飽和のアルキル連結基；およびＡは活性化基である）で示される化合物の製造方法であって、式IIＡまたはIIＢ：
【化６】
（式中、Ｌは不在であるかまたはＣ１〜Ｃ３飽和または不飽和のアルキル連結基、およびＥおよびＥ’は求電子性反応基である）で示される化合物を、式III：
【化７】
（式中、Ｎｕは、Ｎｕにおいて式IIIの化合物を求核性にする基である）で示される化合物と反応させ、ついで任意に還元および加水分解して式ＩＶ：
【化８】
で示される化合物を生成させ、ついで式ＩＶの化合物を縮合して式ＩＡの化合物を生成することを含む方法を提供する。
【００１６】
式ＩＡの化合物中のＬ’は、式Ｉの所望の成分Ｑを生成すべく任意に変化させ誘導体化させてよい。たとえば、上記方法により製造した式ＩＡの化合物中の成分Ｌ’は、式Ｉの化合物中のＱと比べて異なる程度の飽和または異なる置換基を有していてよい。環中の原子数を減らすため、不飽和のＬ’基を有する化合物を酸化および還元工程に供してＱを含む式Ｉ中の環のサイズを小さくすることができる。さらに、ケトン、ヒドロキシルその他の基などの官能基をＬ’に付加して所望のＱ成分を生成することができる。
【００１７】
Ｅの好ましい求電子性反応基は、ラクトン、エステル、およびチオエステルである。Ｅ’の好ましい基はカルボキシルである。さらに好ましくは、式IIＡおよびIIＢの化合物は以下のとおりである：
【化９】
【００１８】
さらに一層好ましくは、式IIＡおよびIIＢの化合物は以下のとおりである：
【化１０】
【００１９】
式IIIの化合物中の好ましいＮｕはリチウムであり、このものは臭素などのハロゲンに対して環上で置換されてよい。好ましくは、式IIIの化合物中のＡは−ＯＭｅまたはＮＨＡｃ（Ｍｅ＝メチル、Ａｃ＝アセチル）などの活性化基であり、この基はその後に式Ｉの化合物中のＸ２に対して所望の置換基に変換されてよい。置換基はまた、必要に応じてＴＢＳなどの保護基で保護することもできる。
【００２０】
本明細書では以下の略語を使用する：ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；ｎ−ｂｕＬｉ（ｎ−ブチルリチウム）；ｔ−ｂｕＬｉ（tert−ブチルリチウム）；Ｐｈ３ＰＭｅ（メチルトリフェニルホスホニウムブロマイド）；ＰＣＣ（ピリジニウムクロロクロム酸）；Ａｃ（アセチル）；Ｍｅ（メチル）；Ｅｔ（エチル）；prop.（プロピル）；but.（ブチル）；ＲＴまたはr.t.（室温）；hr.（時間）；ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）；ＤＮＦＢ（２,４−ジニトロフルオロベンゼン）；ＬＰＳ（リポ多糖）；ＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子アルファ）；ＴＢＳ（tert−ブチルジメチルシリル）；およびＥＡ（酢酸エチル）。
【００２１】
ＳＨＩＰ１モデュレート化合物
式Ｉの化合物は、Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０にキラル中心を有し、Ｒ１とＲ２とが異なるか否かによってＣ−４がキラルであってよい。本発明の化合物は、式Ｉの化合物の全ての立体異性体およびエナンシオマーを含む。幾つかの態様は、ペロロールと同じキラル中心の相対的立体配置を有するかまたはそのエナンシオマーである、すなわち、Ｓ,Ｒ,Ｒ,Ｓ；またはＲ,Ｓ,Ｓ,Ｒ（それぞれ、Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０）。幾つかの態様は、キラル中心においてペロロールと同じ絶対立体配置を有する。幾つかの態様は、Ｃ−５およびＣ−１０においてペロロールと同じ相対的立体配置を有し、Ｃ−８およびＣ−９において独立に変化する立体配置を有する。幾つかの態様は、Ｃ−５、Ｃ−８およびＣ−１０においてペロロールと同じ相対的立体配置を有し、Ｃ−９において変化する立体配置を有する。すべての場合において、Ｃ−４における立体配置は、（もしもキラルであるなら）変化するものであるか、または他の残りのキラル中心に対して本明細書に記載の式Ｉの化合物の構造の例に示すものと同じ相対的立体配置であってよい。
【００２２】
本発明の様々な態様において、本発明の化合物は上記式Ｉの限定を有していてよいし、または置換基Ｑ、Ｒ１〜Ｒ４、およびＸ１〜Ｘ４に関してさらに特別の限定を有していてよい。以下の限定のいずれの組み合わせも本発明により包含される：
（ａ）Ｑは、Ｙ１〜Ｙ６がＨまたはハロゲンに限定される他は式Ｉに記載の定義であってよい；
（ｂ）Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−に限定されてよい；
（ｃ）Ｑは、式Ｉの限定中でＨまたは飽和残基に限定されるか、または上記（ａ）または（ｂ）の限定によるものであってよい；
（ｄ）Ｑは、式Ｉの限定中で１または２の炭素原子の骨格に限定されるか、または上記（ａ）〜（ｃ）の限定によるものであってよい；
（ｅ）Ｒ１およびＲ２の一方または両方は、メチル、エチル、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＣＨ２ＯＲ’に限定されてよい；
（ｆ）式Ｉによるまたは上記（ｅ）の限定によるＲ１およびＲ２の一方または両方中のＲ’は、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定されてよい；
（ｇ）Ｒ１およびＲ２の一方または両方は、メチルまたはエチルに限定されてよい；
（ｈ）Ｒ１およびＲ２の一方または両方は、メチルに限定されてよい；
（ｉ）Ｘ１〜Ｘ４の一つまたはそれ以上中のＲおよびＲ’は、置換されていないメチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定されてよい；
（ｊ）Ｘ１〜Ｘ３の一つまたはそれ以上は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、−ＣＯＲ’２、ＮＨＲまたはＮＲ２（式中、ＲおよびＲ’は式Ｉ中の定義に限定されるか、またはＲおよびＲ’は上記（ｉ）の限定によるものであってよい）に限定されてよい；
（ｋ）Ｘ１〜Ｘ３の一つまたはそれ以上は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、および−ＣＯＲ’２（式中、ＲおよびＲ’は式Ｉ中の定義に限定されるか、またはＲおよびＲ’は上記（ｉ）に従って限定されてよい）に限定されてよい；
（ｌ）Ｘ１〜Ｘ３の一つまたはそれ以上は、Ｈ、ＯＨ、およびＯＣＨ３に限定されてよい；
（ｍ）Ｘ４は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２Ｒ’（式中、ＲおよびＲ’は式Ｉ中の定義に限定されるか、またはＲおよびＲ’は上記（ｉ）に従って限定されてよい）に限定されてよい；
（ｎ）Ｘ４は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｒ’（式中、ＲおよびＲ’は上記（ｉ）に従って限定されてよい）に限定されてよい；および
（ｏ）Ｘ４は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＣＨ３、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２ＣＨ３に限定されてよい。
【００２３】
以下の特別の構造は本発明の態様である。幾つかの場合において、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ４における変動性はＲ、ＺおよびＹとして定められる置換基と関連して示してあり、これら置換基は説明する化合物の目的のために下記に定めてある。各構造について相対的な立体化学を示してあるが、キラル中心の立体化学は上記キラリティーに基づく態様のいずれであるかに従って変わりうる。
【００２４】
【化１１】
【００２５】
【化１２】
【００２６】
【化１３】
【００２７】
化合物の採取源および活性のアッセイ
ペロロールは、当該技術分野および本明細書の実施例１に教示されるように天然の採取源から得ることができる。溶媒分画および／またはクロマトグラフィーを用いることができる。また、式Ｉの成員を製造するため、置換基を付加、除去または置換する公知の化学的方法によりペロロールまたはクリセン誘導体などの他の利用できる化合物を修飾することも可能である。式Ｉの種々の化合物に適用可能なそのような誘導体化工程の例を以下にさらに詳細に示す。
【００２８】
調製物中のＳＨＩＰ１モデュレート化合物の存在は、実施例１および図１に開示した方法によるなどのＳＨＩＰ１酵素の活性の変化の直接モニタリングを含む種々のアッセイの使用により、または細胞または動物アッセイ（活性化マクロファージからの一酸化窒素の産生、ＩｇＥ誘発肥満細胞の脱顆粒、ＬＰＳ誘発マクロファージ活性化、ＴＮＦ−α発現または活性における変化をモニターする）を含む、公知の手法から容易に適合させることのできる生物学的アッセイにより、決定することができる。さらに、生体において炎症活性を媒体する因子の標準アッセイを用いることができる。これらアッセイの適合は、ＳＨＩＰ１ -/-およびＳＨＩＰ１ +/-マウス１５,１６および骨髄由来マクロファージ１７を利用できることにより容易となっている。さらに、抗ＳＨＩＰ１抗体１８が利用できることはイムノアッセイ態様の使用を容易にしている。そのようなアッセイはまた、本明細書に記載の全合成によって調製した化合物の活性を評価するのにも用いることができる。
【００２９】
化合物の全合成
ペロロールおよび式Ｉの他の化合物の合成スキームを本明細書で提供する。表（１〜２）は、調製できる式Ｉの異なる化合物の例を用いたそのような合成の２つの態様の詳細な例示を提供する。該表に示した化合物で芳香環に隣接した環が６員環である他はペロロールと同一である化合物は「ホモペロロールアナログ」と称する。５員環であるペロロール以外の化合物は「ペロロールアナログ」と称する。
【００３０】
表１および２に示す合成法において、そこに示された式IIＡの化合物は出発物質としてスクラレオライド（sclareolide）に基づくのが便利である。所望のＲ１〜Ｒ４置換基を提供するスクラレオライドの適当な誘導体を用いることができる。該表に示した式IIIの芳香族化合物において、Ｎｕはリチウムであるのが好ましい。式IIIの出発化合物中のＸ２は、−ＯＭｅや−ＮＨＡｃなどの活性化基であるのが好ましい。Ｒ１〜Ｒ４は出発原料のままであってもよいし、または最終生成物に所望の置換基を提供すべく適当に変化してもよい。保護基をＲ１〜Ｒ４またはＸ１、Ｘ３、またはＸ４に用いることができる。式Ｉの所望の成員Ｑを生成する式ＩＡ中のＬ’を含む環の誘導体化の例を表２に示してあり、その際、酸化（たとえば、ＯｓＣｌ４で処理した後にＨＣｌなどの酸で処理することにより）を行って該環にケトン置換基が導入される。
【００３１】
表１：ペロロールおよびペロロールアナログの合成
【化１４】
【００３２】
表２：ホモペロロールおよびホモペロロールアナログの合成
【化１５】
【００３３】
医薬組成物、投与量、投与および適応症
本発明において使用する化合物は、当業者に知られた多くの仕方で医薬組成物に製剤化することができ、その全てが本発明に包含される。当業者であれば適当な薬理学的に許容しうる塩並びに適当な薬理学的に許容しうる賦形剤、希釈剤および担体を選択できるであろう。
【００３４】
本発明による化合物は、薬理学的に許容しうる担体中、治療学的または予防上許容しうる量にて単独または他の薬剤（たとえば、小分子、ペプチド、またはペプチドアナログ）とともに提供することができる。そのような医薬製剤を製造するための当該技術分野でよく知られた方法は、たとえば、「Remington's Pharmaceutical Sciences」（第１９版；A. Gennaro編、1995、Mack Publishing Company、イーストン、ペンシルベニア）（参照のため本明細書に引用する）に見出すことができる。本発明による医薬製剤は、たとえば、賦形剤、滅菌水、または食塩水、エタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド、ポリアルキレングリコール、たとえばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、または他の合成溶媒、植物起源のオイル、または水素添加ナフタレンを含んでいてよい。
【００３５】
本発明による化合物は、疎水性の化合物、たとえば、水には実質的に不溶であるが、たとえばエタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド、またはクロロホルム、またはそれらの混合物などの溶媒には自由に溶解する化合物を含んでいてよい。そのような疎水性の化合物を含む製剤は、たとえば、両親媒性化合物により一定の条件下で生成するミセルを用いて提供することができる。水性溶媒中でミセルはその炭化水素コア中、またはミセル壁内に疎水性化合物を導入することができる。疎水性化合物はまた、トリグリセリド（オイル）、たとえば食用植物油中で可溶化することによっても提供できる。油相中で安定化した疎水性化合物は水性溶液中に分散させることができ、所望なら乳化剤を用いて安定化することができる。あるいは、疎水性化合物は、オイル中で提供して、たとえば胃腸管系に送達させ、そこでインビボで胆汁塩に乳化剤として作用させてもよい。疎水性化合物はまたマイクロエマルジョンとしても提供することができる。マイクロエマルジョンはエマルジョンと同様、オイルと水との液体分散液であるが、ミセル様の「コア」中に油相を有する一層小さな粒子を有する。本発明による疎水性化合物はまた、ポリマー担体、たとえば炭水化物、たとえばセルロース、デキストラン、シクロデキストリン、メチルセルロース、またはヒアルロン酸、あるいはポリペプチド、たとえばアルブミン、コラーゲン、またはゼラチンとともに提供することができる。疎水性化合物の他の製剤様式としては、リポソーム、天然および合成のリン脂質、または溶媒、たとえばジメチルスルホキシドまたはアルコールが挙げられる。
【００３６】
本発明の医薬組成物は、所定の時間をかけて活性化合物の制御された放出が提供されるように製剤化することができる。それゆえ、製剤は、たとえば単回投与として投与したなら毒性であるが、その制御された放出は毒性レベルを超えないような量の化合物を含んでいてよい。該化合物の放出を制御するため、たとえば、生体適合性で生分解性のラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーを用いることができる。本発明によるモデュレート化合物にとって潜在的に有用な他の送達系としては、エチレン−酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透ポンプ、埋め込み可能な注入系、およびリポソームが挙げられる。
【００３７】
化合物の「治療学的有効量」とは、本発明による化合物を用いて所望の治療効果を達成するために必要な投与量および時間にて有効な量である。治療学的有効量はまた、化合物の治療的に有利な効果の方が毒性または有害な効果よりも勝る量である。化合物の「予防上有効な量」とは、本発明による化合物を用いて所望の予防効果を達成するために必要な投与量および時間にて有効な量である。典型的には、予防的投与量は、予防上有効な量が治療学的有効量よりも少なくなるように、疾患の前または疾患の初期の段階で患者に用いる。充分と考えられる量は、使用した特定の化合物、投与方法、疾患の段階および重篤度、治療すべき個体の年齢、性別、および健康、および同時に行っている治療により変わるであろう。
【００３８】
本発明の化合物の治療学的有効量または予防上有効な量は、0.1nM〜0.1M、0.1nM〜0.05M、0.05nM〜15μMまたは0.01nM〜10μMであってよい。投与量の値は、緩和すべき状態の重篤度で変わりうることに注意すべきである。いかなる特定の患者に対しても、特定の投与量レジメンは個々の必要性および組成物の投与の管理人または監督人の専門的判断に従い、経時的に調節することができる。本明細書において示す投与量の範囲は例示に過ぎず、医療従事者によって選択することのできる投与量の範囲を限定するものではない。投与量レジメンは最適の治療応答を提供すべく調節することができる。たとえば、単回ボーラスを投与することができ、幾つかの分割投与を時間をかけて投与することができ、または治療状況の緊急事態によって示されるように投与量を比例的に低減あるいは増大させることができる。
【００３９】
一般に、本発明の化合物は実質的な毒性を引き起こすことなく用いるべきである。本発明の化合物の毒性は、標準法を用い、たとえば、細胞培養または実験動物で試験することおよび治療指数、すなわちＬＤ５０（集団の５０％に致死的な投与量）とＬＤ１００（集団の１００％に致死的な投与量）との比を決定することにより決定することができる。しかしながら、重篤な疾患状態などの一定の環境では実質的に過剰な組成物を投与することが必要である。
【００４０】
本発明の化合物を患者に投与すべく、治療目的かまたは予防目的かに応じて適当な製剤または組成物を提供するために通常の製薬実務を採用することができる。あらゆる適当な投与経路を用いることができ、たとえば、全身、非経口、静脈内、皮下、経皮、経粘膜、筋肉内、頭蓋内、眼窩内、眼内、心室内、被膜内、脊髄内、くも膜下内、腹腔内、鼻内、エアゾル、局所、外科、または経口投与が挙げられる。使用する製剤は、選択した投与経路によって変わってよい。それゆえ、経口投与の場合、製剤は錠剤またはカプセルの形態であってよく；吸入剤の場合、製剤は粉末薬、点鼻剤、またはエアゾル剤の形態であってよく；経粘膜投与の場合、製剤は鼻内スプレーまたは坐剤の形態であってよく；経皮投与の場合、製剤はクリーム剤、軟膏、またはゲル剤であってよい；など。
【００４１】
本発明の治療学的有効量または予防上有効な量のＳＨＩＰ１モデュレーターおよび医薬組成物は、癌（新生物疾患）、他の細胞増殖性疾患、炎症性疾患および免疫疾患の治療または予防を必要とする患者に投与してよい。新生物疾患としては、これらに限られるものではないが、白血病、癌腫、肉腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、毛管漏出症候群（capillary leak syndrome）および造血系の悪性腫瘍が挙げられる。炎症性の徴候を有する疾患としては、これらに限られるものではないが、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、ギヤン−バレル症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性胃腸管症候群、乾癬、対宿主性移植片病、全身性エリテマトーデス、アルツハイマー病およびインスリン依存性糖尿病が挙げられる。細網内皮系のマクロファージ関連細胞の不適切な活性化と関連する疾患としては、骨粗鬆症が挙げられる。
【００４２】
式Ｉの構造を有するペロロールおよび他の化合物は、ＳＨＩＰ１アゴニスト活性を示す。ＳＨＩＰ１を活性化することにより、そのようなアゴニストは、とりわけ、炎症性疾患、たとえば敗血症性ショック、大腸炎、炎症性胃腸管症候群、およびマクロファージの増殖または活性化が関与する疾患；新生物疾患、たとえば骨髄性およびリンパ性白血病；免疫抑制疾患、たとえば移植の拒絶；造血性疾患の治療；およびアレルギーの治療および予防におけるような肥満細胞の変性に影響を及ぼすのに有用である。
【００４３】
実施例１
１５０の海洋性生物抽出物の予備的スクリーニングにおいて、酵素アッセイでＳＨＩＰ１を活性化した抽出物を同定した。これら抽出物の一つのアッセイによる分画は、ペロロールとしての活性化合物の同定という結果となった（図１）。スクリーニングにおいて陽性と試験された抽出物の起源およびプロセシングおよびアッセイの性質は以下のとおりである。
【００４４】
褐色がかったシート状の海綿動物Dactylospongia elegans（Dictyoceratida目、Spongiidae科）の試料を、１９９５年１月にパプアニューギニア、マダンラグーン、の外リーフ上のRasch Passage中の保護された突出部から、５〜１０ｍの深さにてSCUBAを用いて手で回収した。新たに回収した海綿動物をその場で凍結させ、ドライアイス上でカナダ、バンクーバーに輸送した。海綿動物を同定し、検証のため証拠試料をZoological Museum of Amsterdamに置いた（ZMA POR. 15986）。凍結した海綿動物（120g）を小切片に切断し、MeOH中に浸漬、およびその後に繰り返し抽出した（3×250mL）。コンバインしたメタノール抽出物を真空濃縮し、ついでEtOAc（4×100mL）とH2O（300mL）との間に分配した。コンバインしたEtOAc抽出物を真空乾固して490mgの褐色がかった油状物を得、これにはペロロールが含まれることがわかった。
【００４５】
アッセイは９６ウエルのマイクロタイタープレートで行った。ＳＨＩＰ１酵素は、赤血球凝集素およびヘキサヒスチジンタグを用い、哺乳動物発現ベクターから産生させた。Ｈｉｓタグは精製を促進するのに用いた。200Mのイノシトール-1,3,4,5-テトラキスホスフェートを添加する前にＳＨＩＰ１酵素（10ng）を抽出物またはDMSOとともに室温で１５分間インキュベートした。反応を３７℃にて２０分間進行させた。ついで、放出された無機リン酸の量をマラカイトグリーン試薬の添加、およびその後の650nmでの吸光度測定により評価した。
【００４６】
実施例２
ペロロールを以下のスキームに従い、下記に記載した特定の条件下で調製した。
【化１６】
【００４７】
無水Et2O（30mL）中の化合物１（1.00g、3.99ミリモル）の攪拌溶液に、Et2O中のMeLiの新たに調製した1.6M溶液（3mL、4.8ミリモル）を室温にて１０分かけて少しずつ加え、攪拌をさらに５分間続けた。ついで、この混合物を10%HCl（2mL）で処理し、ついで漏斗に移し、エーテルで繰り返し抽出した。コンバインした抽出物をNaHCO3およびH2Oで洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、ついで濃縮した。残渣をヘキサン／Et2O（6:4）を用いたカラムクロマトグラフィーにかけて化合物２（0.74g、70%）を得た。
【００４８】
CH2Cl2（40mL）中の(CF3CO)2O（9mL、63.85ミリモル）の攪拌し冷却した（氷浴上）溶液に、50%水性H2O2（1.8mL、31.66ミリモル）を加え、混合物を氷浴中で１０分間静置した。以下の操作はすべて室温で行った。溶液を固体NaHCO3（5.40g、64.28ミリモル）で２分間処理し、混合物を８分間攪拌した後、CH2Cl2（54mL）中の化合物２（1.80g、6.76ミリモル）の溶液を加えた。得られた混合物を３０分間攪拌し、H2O（10mL）を加えた後、ｐＨが７に達するまで固体NaHCO3で４５分間少しずつ処理した。最後に混合物をEt2Oで抽出した。コンバインした抽出物をNaHCO3、H2Oで洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、ついで濃縮して純粋な化合物３を得た。
【００４９】
化合物３（1g、3.6ミリモル）をMeOH中のKOHの10%溶液（1mL、1.78ミリモル）に０℃で溶解した。得られた混合物を１０分間攪拌した。H2Oを加えた後、溶液をEt2Oで抽出した。抽出物をH2Oで洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、ついで濃縮して化合物４（0.8g）を得た。
【００５０】
マグネチックスターラーバーを備えたオーブン乾燥しN2を流し込んだ100mL容の丸底フラスコに、3.24g（15ミリモル）のPCC、30mLのCH2Cl2および2.4g（10ミリモル）の化合物４を入れた。混合物を室温で２時間充分に攪拌し、30mLのEt2Oを添加して反応停止させた。得られた溶液をシリカゲルの厚いパッドで濾過し、濃縮して残渣を得た。この残渣をヘキサン／Et2O（8:2）を用いたカラムクロマトグラフィーにかけて化合物５（1.6g、67%）を得た。
【００５１】
水素化ナトリウム（24.6mg、0.82ミリモル、80%オイル分散液）および乾燥THF（5mL）を、冷却器および乾燥N2流を備えた乾燥フラスコに加えた。この懸濁液にメチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（0.146g、0.41ミリモル）を加え、混合物を１０分間攪拌した。ついでTHF（2mL）中の化合物６（100mg、0.41ミリモル）を加え、混合物を穏やかに２時間還流した。2mLのメタノールを加えて反応停止させ、ついでEt2Oで抽出した。通常の処理後、94.3mgの化合物７を得た。
【００５２】
ペンタン（1.74mL、2.79ミリモル）中のtBuLiの1.6M溶液を、乾燥THF（20mL）中の化合物７（612.6mg、2.52ミリモル）の攪拌溶液に−７８℃にてゆっくりと加えた。３０分間攪拌した後、乾燥THF（5mL）中の化合物５（300mg、1.26ミリモル）の溶液を加えた。混合物をさらに−７８℃で２時間攪拌した。ついで、H2O（10mL）を加え、混合物をEt2Oで抽出した（120mL、２回）。コンバインしたEt2O抽出物を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し（MgSO4）、ついで濃縮して残渣を得、これをNP SepakTM上のクロマトグラフィーにかけて280mg（55%）の化合物９を得た。
【００５３】
EA（5mL）中の化合物９（40mg、0.1ミリモル）の溶液を10%Pd/C（50mg）上、水素雰囲気下、室温にて一夜、水素化した。濾過および濃縮により37mgの化合物１０（96%）を得た。
【００５４】
CH2Cl2（10mL）中の化合物１０（38.8mg、0.1ミリモル）の攪拌溶液に、SnCl4（0.1mL）をアルゴン下、−２０℃にて２分間ゆっくりと加えた。得られた混合物をさらに２０分間攪拌し、ついでCH2Cl2（20mL）で希釈し、氷上に注いだ。水性相をCH2Cl2で２回（20mL）抽出し、抽出物をコンバインし、飽和NaHCO3、飽和食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させた。蒸発させて化合物１１（28mg、76%）を得た。
【００５５】
2mLのCH2Cl2に溶解した化合物１１（7.4mg、0.02ミリモル）にPCC（41.6mg、0.192ミリモル）を加えた。混合物をアルゴン下、穏やかな還流下で２４時間攪拌した。反応液をEt2O（20mL）で希釈し、得られた暗色の溶液をNP SepakTMで濾過した。濾液の濃縮およびさらなる精製により1.5mg（20%）の化合物１２を得た。
【００５６】
1.5mgの化合物１２を2mLのNaOH（10%）溶液（0.5mLのTHFを含む）に溶解し、攪拌した。引き続き5mgのヨウ素を加え、混合物をさらに２０分間攪拌し、3mLの10%H2SO4を加えて酸性にした。この溶液を50mLのEt2Oで抽出し、飽和食塩水で洗浄し、ついで濃縮して残渣１３を得た。
【００５７】
38.6mg（0.1ミリモル）の化合物１３をアルゴン下、CH2Cl2（1mL）中で攪拌した。CH2Cl2（2.0mL、1M）中のBBr3を加え、攪拌を１.５時間続けた。ついで、混合物をH2Oに注ぎ、CH2Cl2（50mL）で抽出した。ついで、コンバインした抽出物をMgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をNP SepakTM（ヘキサン：ＥＡ＝7:3）により精製して化合物１４（25mg、70%）を得た。
【００５８】
35.8mg（0.1ミリモル）の化合物１４を、5%H2SO4を含むMeOH（2mL）に溶解した。攪拌を２時間続け、混合物をEt2Oで抽出し、MgSO4で乾燥させ、濃縮して化合物１５を得た。
【００５９】
実施例３
ペロロールアナログPNSR-15Aを、以下のスキームを用い、実施例３に記載の方法に従って合成した。
【化１７】
【００６０】
実施例４
ペロロールアナログPNSR-4Aを、以下のスキームに従い、上記方法により合成した。
【化１８】
【００６１】
実施例５
ホモペロロールアナログPNSR-14Aを、以下のスキームに従い、上記方法により合成した。
【化１９】
【００６２】
実施例６
ホモペロロールを、上記実施例に基づく以下のスキームに従い、上記方法に従って合成することができる。
【化２０】
【００６３】
実施例７
図１に記載したＳＨＩＰ１酵素アッセイでの活性の増大を引き起こすことに加え、式Ｉのアゴニスト化合物は、全細胞ベースのアッセイでマクロファージおよび肥満細胞に対して抗炎症作用を示し、内毒素活性化された野生型マクロファージからの一酸化窒素の産生を抑制し、生きた被験者に対して抗炎症作用を示す。ＮＯ放出アッセイおよび肥満細胞活性化アッセイでペロロールについて得られた結果を、それぞれ図２および図３に示す。ＮＯ放出の抑制はＳＨＩＰ１ -/-マクロファージでは観察されなかった。ペロロールはＩｇＥ誘発された肥満細胞の脱顆粒を有意に低減した。
【００６４】
細胞および動物ベースのアッセイに用いた手順を以下に記載する。ペロロールおよび式Ｉの範囲内の種々のアナログについての結果を表３に示すが、これには実施例１に記載の酵素アッセイを用いた結果も含まれる。
【００６５】
ＮＯ放出アッセイについては、野生型またはＳＨＩＰ１ -/-マクロファージ細胞をマイクロタイタープレート（5×104/ウエル）にアリコートし、被験化合物またはDMSO担体の存在下または不在下、1g/mLの内毒素（ＬＰＳ）で活性化させた。細胞を３７℃、5%CO2にて２４時間インキュベートし、ついでGriess試薬を用いたＮＯ決定のために培養上澄み液を除去した。あるいは、ＬＰＳを添加する前に、J774.1aマクロファージ細胞を、DMSOに溶解した10μg/mlの被験化合物で４０分間処理した。Griess試薬を用いたＮＯ濃度の決定のために培養上澄み液を２４時間後に回収した。
【００６６】
肥満細胞活性化アッセイについては、骨髄由来肥満細胞を抗ＤＮＰ ＩｇＥとともに４℃で１時間インキュベートした。ついで、該細胞を２３℃のTyrode's緩衝液で２回洗浄し、ＤＮＰ−ヒト血清アルブミンで１５分間処理する前に被験化合物またはビヒクル対照の存在下で３０分間インキュベートした。脱顆粒の程度を、β−ヘキソサミナーゼの放出を測定することにより決定した。
【００６７】
マクロファージＴＮＦ−α産生アッセイについては、100ng/mLのＬＰＳを添加する前に、J774.1aマクロファージ細胞をシクロデキストリン中に溶解した10μg/mLの被験化合物で４０分間処理した。ELISAによりＴＮＦ−αを決定するため、培養上澄み液を２時間後および５時間後に回収した。
【００６８】
マウスの耳浮腫（Evans Blue）アッセイは、アレルギー炎症の標準モデルである。マウスにモノクローナル抗ＤＮＰ ＩｇＥ抗体を静脈内注射することにより受動感作させた。２４時間後、20μlのDMSO：メタノール（1：3）中の10μgの被験化合物（右耳）またはビヒクル単独（左耳）を投与し、２０分後に誘発剤［アセトン中の20μlの0.15%DNFB：オリーブ油（4：1）］を投与した。ついで、マウスに300μlの1%Evans Blueを静脈内注射した。誘発剤の投与１時間後、耳でのEvans Blueの管外遊出の視覚による点検および定量により血管透過性を測定した。Evans Blue含量を定量するため、DNFB処理の１時間後に耳を回収し、ホルムアミド中、３７℃で２４時間インキュベートすることによりEvans Blueを抽出し、620nmでの分光分析により定量した。担体のみで前処理した耳はDNFB攻撃に応答して速やかなアナフィラキシー反応を展開した。対照的に、ＳＨＩＰ１アゴニストは、Evans Blueの管外遊出の低減によって示されるように血管透過性亢進の明らかな抑制を示した。
【００６９】
マウスの耳浮腫（リンパ球浸潤アッセイ）は接触過敏症または耳炎症のモデルであり、ヒトアレルギーの標準的なインビボモデルである。接触過敏症は、初期の感作相（sensitizing phase）と惹起相（eliciting phase）とからなる。後者の相は、表皮細胞が以前に暴露された特定の抗原に出会ったときに起こり、局所的な細胞浸潤、炎症、および浮腫を特徴とする。このアッセイでは、４週齢（20g）Balb/cマウスの腹部領域を電気カミソリで剃った後に腹壁にアセトン：オリーブ油（4：1、v/v）中の0.5%2,4-ジニトロフルオロベンゼン（DNFB；ハプテン化剤）を25μl適用することにより、DNFBに対して感作させた。第二の適用の４日後、マウスをハロタンで軽く麻酔し、ついで右および左耳の両側の皮膚の上に（epicutaneously）10μlの0.2%DNFBを攻撃した。マウスはすべて、DNFBによる皮膚上攻撃の２４時間前に滅菌食塩水中の[3H]−メチルチミジン（1μCi/g体重）を500μl腹腔内（i.p.）注射した。DNFB攻撃の３０分前に右および左耳をそれぞれDMSO：メタノール（1:3、v/v）中の被験化合物かまたはビヒクル単独で前処理した。DNFB攻撃の２４時間後、マウスをCO2窒息により屠殺し、8mm直径のくり抜きを各耳から採取し、500μlのSolvableTM中、６０℃で１０〜１２時間消化した。試料をH2O2の添加により脱色し、標準液体シンチレーションカウンティングにより放射性標識白血球の浸潤物を分析した。
【００７０】
大腸炎アッセイは、被験化合物がTNBS（トリニトロベンゼンスルホン酸）により誘発された炎症からマウスを防御するか否かを決定することに基づいている。TNBS浮腫投与の直前に被験化合物（10mg/kg）またはビヒクル対照をマウスに腹腔内注射した。２日後、ビヒクル処理したマウスの結腸は重篤な炎症であったが、ＳＨＩＰ１アゴニスト処理したマウスは炎症の徴候を示さなかった。
【００７１】
表３
【表１】
【００７２】
以上、本発明を理解の明瞭を目的として説明および実施例により若干詳細に記載したが、添付の特許請求の範囲の精神および範囲から逸脱することなく変更および改変をなし得ることは当業者には明らかであろう。本明細書において言及したすべての特許、特許出願および出願公報は参照のため本明細書に引用される。
【００７３】
参考文献
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18. Damen, J. E.ら、(1998) Blood 92:1199
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】図１は、海綿動物抽出物がＳＨＩＰ１酵素活性にインビトロで及ぼす作用を示すグラフである。
【００７５】
【図２】図２は、ペロロールがマクロファージの一酸化窒素（ＮＯ）産生に及ぼす作用を示すグラフである。
【００７６】
【図３】図３は、ペロロールがＩｇＥ媒体肥満細胞活性化に及ぼす作用を示すグラフである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞増殖および生存および免疫細胞活性化の負のレギュレーターであるＳＨＩＰ１に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＳＨ２含有イノシトール５−ホスファターゼ（ＳＨＩＰ１）は、イノシトール１,３,４,５−四リン酸（ＩＰ４）およびホスファチジルイノシトール３,４,５−三リン酸（ＰＩＰ３）からの５−リン酸を選択的に加水分解する。米国特許第6,238,903号は、ＳＨＩＰ１が、遺伝子発現、細胞の増殖、分化、活性化、および代謝を制御するシグナル伝達経路、とりわけＲａｓおよびリン脂質シグナル伝達経路の酵素レギュレーターであることを開示している。ＳＨＩＰ１は、サイトカインおよび免疫レセプターのシグナル伝達において重要な役割を果たしている。ＳＨＩＰ１の破壊された（ＳＨＩＰ１ -/-）マウスは、顆粒球およびマクロファージの過剰産生を特徴とする骨髄増殖性の表現型を示す１。ＳＨＩＰ１ -/-の肥満細胞はＩｇＥおよびSteel因子により誘発された脱顆粒を起こしやすく、一方、ＳＨＩＰ１ -/-のＢ細胞はFc RIIBによる負の制御に対して耐性である。ＳＨＩＰ１はまた、慢性の骨髄性白血病の病因にも関与している２。
【０００３】
ＳＨＩＰ１の活性を特異的にモデュレートする化合物は、細胞の増殖性、造血性および免疫性の疾患の治療、並びに研究および医薬発見の試験の際にＳＨＩＰ１媒体経路を操作するのに有用であろう。今日まで、小分子のＳＨＩＰ１特異的モデュレーターの構造は開示されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ペロロール（pelorol）と称するセスキテルペン化合物は、Petrosaspongia metachromiaおよびDactylospongia elegansを含む種々の海洋性の海綿動物から得ることができる。KwakらおよびGoclikらは、それぞれペロロールの構造および種々の海洋性海綿動物からのその抽出を開示している４,５。ペロロールは、弱い抗トリパノソーマおよび抗マラリア原虫活性を有すると報告されている５。ペロロールの正確な構造は以下のとおりであり、Ｍｅはメチル基を表し、キラル原子（Ｃ−５、８、９および１０）の相対的な立体構造は示したとおりである。
【化１】
【０００５】
ペロロールと類似でペロロールの特徴的なgem置換非芳香族環を有する幾つかの還元および置換されたクリセン誘導体が、頁岩中に見出される種々の多環ポリプレノールの調製６−１２、タキソジオン（taxodione）の調製１３、および化合物1,2,3,4,4a,4b,5,6,10b,11,12,12a-ドデカヒドロ-1,1-ジメチル-クリセンの調製１４における中間体または誘導体として知られている。これらクリセン誘導体のいずれも生物学的活性を有することは知られていない。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、ペロロールおよび関連化合物がＳＨＩＰ１活性をモデュレートすることができるとの発見に基づくものである。
【０００７】
本発明の幾つかの態様は、式Ｉの新規な化合物およびその塩を提供する。式Ｉの化合物は、以下の構造を有する：
【化２】
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＹ１Ｙ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＹ１Ｙ２−および−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４ＣＹ５Ｙ６−（式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ’、およびＳＨよりなる群から選ばれるか；またはＹ１／Ｙ２、Ｙ３／Ｙ４、およびＹ５／Ｙ６のいずれか一つの群が＝Ｏであるか；またはＹ１／Ｙ３がエポキシドを形成し、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６の少なくとも一つ（存在するときは）はＨではない）よりなる群から選ばれる；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、ＮＯ２、ＮＨ２、−ＮＨＲ、および−ＮＲ２よりなる群から選ばれる（式中、Ｒは、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’２、ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、およびエポキシド）である）；
Ｒ’は、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ”、−ＮＲ”２、ＮＯ２、および−ＣＯ２Ｈ（ここでＲ”は、直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基）である））。
【０００８】
本発明の式Ｉの新規な化合物は、以前に記載されたgem置換クリセン誘導体の正確な構造を包含するものではない。これら以前に記載された化合物には、ペロロールおよび以下の構造（式中、Ｍｅはメチルである）を有する化合物が含まれる。
【化３】
【化４】
【０００９】
別の定義により、本発明は、式Ｉにおいて各Ｒ１〜Ｒ４がメチルであり、Ｑが−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｘ１〜Ｘ４が以下の定義のいずれかである、そのような以前に知られた特定の化合物を排除する：
（ａ）Ｘ１およびＸ２がＯＨ、Ｘ３がＨ、およびＸ４が−ＣＯＯＣＨ３；
（ｂ）Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＨ；
（ｃ）Ｘ１、Ｘ２、およびＸ４がＨ、Ｘ３がＣＨ３；
（ｄ）Ｘ１、Ｘ３、およびＸ４がＨ、Ｘ２がＣＨ３；
（ｅ）Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４がＨ、Ｘ１がＣＨ３；および
（ｆ）Ｘ１およびＸ４がＨ、Ｘ２およびＸ３がＯＣＨ３。
【００１０】
式ＩにおいてＲ１およびＲ２がＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ４がＨであり、Ｑが−ＣＨ２ＣＨ２−であり、各Ｘ１〜Ｘ４がＨである化合物も排除される。
【００１１】
本発明の幾つかの態様は、１またはそれ以上の式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩、および薬理学的に許容しうる担体を含む医薬組成物を提供する。そのような組成物は、医薬用途に適した生物学的に活性な化合物として知られていない式Ｉの以前に知られた化合物を含んでいてよい。
【００１２】
本発明の幾つかの態様は、免疫性、炎症性、または新生物性の疾患または状態の治療または予防方法であって、そのような治療または予防を必要とする患者に有効量の本発明の式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩、または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
本発明の幾つかの態様は、ＳＨＩＰ１活性のモデュレートのためおよびＳＨＩＰ１活性のモデュレート剤の調製のための式Ｉの化合物または薬理学的に許容しうるその塩の使用を提供する。そのようなモデュレートはインビトロまたはインビボであってよい。インビボで使用するための剤としては、本発明の医薬組成物並びにインビトロでの使用に適合させた剤が挙げられる。モデュレートは、上記の免疫性、炎症性、または新生物性の状態または疾患の治療または予防のためのものであってよい。
【００１４】
式Ｉの幾つかの化合物は、生物学的抽出物を分画することにより、または利用できる化合物を誘導体化することにより、全体としてまたは部分的に調製することができる。別法として、式Ｉの化合物は全合成により調製することができる。
【００１５】
本発明の幾つかの態様は、式ＩＡ：
【化５】
（式中、Ｒ１〜Ｒ４、Ｘ１、Ｘ３、Ｘ４は式Ｉの定義と同じ、Ｌ’はＣ１〜Ｃ４飽和または不飽和のアルキル連結基；およびＡは活性化基である）で示される化合物の製造方法であって、式IIＡまたはIIＢ：
【化６】
（式中、Ｌは不在であるかまたはＣ１〜Ｃ３飽和または不飽和のアルキル連結基、およびＥおよびＥ’は求電子性反応基である）で示される化合物を、式III：
【化７】
（式中、Ｎｕは、Ｎｕにおいて式IIIの化合物を求核性にする基である）で示される化合物と反応させ、ついで任意に還元および加水分解して式ＩＶ：
【化８】
で示される化合物を生成させ、ついで式ＩＶの化合物を縮合して式ＩＡの化合物を生成することを含む方法を提供する。
【００１６】
式ＩＡの化合物中のＬ’は、式Ｉの所望の成分Ｑを生成すべく任意に変化させ誘導体化させてよい。たとえば、上記方法により製造した式ＩＡの化合物中の成分Ｌ’は、式Ｉの化合物中のＱと比べて異なる程度の飽和または異なる置換基を有していてよい。環中の原子数を減らすため、不飽和のＬ’基を有する化合物を酸化および還元工程に供してＱを含む式Ｉ中の環のサイズを小さくすることができる。さらに、ケトン、ヒドロキシルその他の基などの官能基をＬ’に付加して所望のＱ成分を生成することができる。
【００１７】
Ｅの好ましい求電子性反応基は、ラクトン、エステル、およびチオエステルである。Ｅ’の好ましい基はカルボキシルである。さらに好ましくは、式IIＡおよびIIＢの化合物は以下のとおりである：
【化９】
【００１８】
さらに一層好ましくは、式IIＡおよびIIＢの化合物は以下のとおりである：
【化１０】
【００１９】
式IIIの化合物中の好ましいＮｕはリチウムであり、このものは臭素などのハロゲンに対して環上で置換されてよい。好ましくは、式IIIの化合物中のＡは−ＯＭｅまたはＮＨＡｃ（Ｍｅ＝メチル、Ａｃ＝アセチル）などの活性化基であり、この基はその後に式Ｉの化合物中のＸ２に対して所望の置換基に変換されてよい。置換基はまた、必要に応じてＴＢＳなどの保護基で保護することもできる。
【００２０】
本明細書では以下の略語を使用する：ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；ｎ−ｂｕＬｉ（ｎ−ブチルリチウム）；ｔ−ｂｕＬｉ（tert−ブチルリチウム）；Ｐｈ３ＰＭｅ（メチルトリフェニルホスホニウムブロマイド）；ＰＣＣ（ピリジニウムクロロクロム酸）；Ａｃ（アセチル）；Ｍｅ（メチル）；Ｅｔ（エチル）；prop.（プロピル）；but.（ブチル）；ＲＴまたはr.t.（室温）；hr.（時間）；ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）；ＤＮＦＢ（２,４−ジニトロフルオロベンゼン）；ＬＰＳ（リポ多糖）；ＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子アルファ）；ＴＢＳ（tert−ブチルジメチルシリル）；およびＥＡ（酢酸エチル）。
【００２１】
ＳＨＩＰ１モデュレート化合物
式Ｉの化合物は、Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０にキラル中心を有し、Ｒ１とＲ２とが異なるか否かによってＣ−４がキラルであってよい。本発明の化合物は、式Ｉの化合物の全ての立体異性体およびエナンシオマーを含む。幾つかの態様は、ペロロールと同じキラル中心の相対的立体配置を有するかまたはそのエナンシオマーである、すなわち、Ｓ,Ｒ,Ｒ,Ｓ；またはＲ,Ｓ,Ｓ,Ｒ（それぞれ、Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０）。幾つかの態様は、キラル中心においてペロロールと同じ絶対立体配置を有する。幾つかの態様は、Ｃ−５およびＣ−１０においてペロロールと同じ相対的立体配置を有し、Ｃ−８およびＣ−９において独立に変化する立体配置を有する。幾つかの態様は、Ｃ−５、Ｃ−８およびＣ−１０においてペロロールと同じ相対的立体配置を有し、Ｃ−９において変化する立体配置を有する。すべての場合において、Ｃ−４における立体配置は、（もしもキラルであるなら）変化するものであるか、または他の残りのキラル中心に対して本明細書に記載の式Ｉの化合物の構造の例に示すものと同じ相対的立体配置であってよい。
【００２２】
本発明の様々な態様において、本発明の化合物は上記式Ｉの限定を有していてよいし、または置換基Ｑ、Ｒ１〜Ｒ４、およびＸ１〜Ｘ４に関してさらに特別の限定を有していてよい。以下の限定のいずれの組み合わせも本発明により包含される：
（ａ）Ｑは、Ｙ１〜Ｙ６がＨまたはハロゲンに限定される他は式Ｉに記載の定義であってよい；
（ｂ）Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−に限定されてよい；
（ｃ）Ｑは、式Ｉの限定中でＨまたは飽和残基に限定されるか、または上記（ａ）または（ｂ）の限定によるものであってよい；
（ｄ）Ｑは、式Ｉの限定中で１または２の炭素原子の骨格に限定されるか、または上記（ａ）〜（ｃ）の限定によるものであってよい；
（ｅ）Ｒ１およびＲ２の一方または両方は、メチル、エチル、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＣＨ２ＯＲ’に限定されてよい；
（ｆ）式Ｉによるまたは上記（ｅ）の限定によるＲ１およびＲ２の一方または両方中のＲ’は、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定されてよい；
（ｇ）Ｒ１およびＲ２の一方または両方は、メチルまたはエチルに限定されてよい；
（ｈ）Ｒ１およびＲ２の一方または両方は、メチルに限定されてよい；
（ｉ）Ｘ１〜Ｘ４の一つまたはそれ以上中のＲおよびＲ’は、置換されていないメチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定されてよい；
（ｊ）Ｘ１〜Ｘ３の一つまたはそれ以上は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、−ＣＯＲ’２、ＮＨＲまたはＮＲ２（式中、ＲおよびＲ’は式Ｉ中の定義に限定されるか、またはＲおよびＲ’は上記（ｉ）の限定によるものであってよい）に限定されてよい；
（ｋ）Ｘ１〜Ｘ３の一つまたはそれ以上は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、および−ＣＯＲ’２（式中、ＲおよびＲ’は式Ｉ中の定義に限定されるか、またはＲおよびＲ’は上記（ｉ）に従って限定されてよい）に限定されてよい；
（ｌ）Ｘ１〜Ｘ３の一つまたはそれ以上は、Ｈ、ＯＨ、およびＯＣＨ３に限定されてよい；
（ｍ）Ｘ４は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２Ｒ’（式中、ＲおよびＲ’は式Ｉ中の定義に限定されるか、またはＲおよびＲ’は上記（ｉ）に従って限定されてよい）に限定されてよい；
（ｎ）Ｘ４は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＣＨ３、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｒ’（式中、ＲおよびＲ’は上記（ｉ）に従って限定されてよい）に限定されてよい；および
（ｏ）Ｘ４は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＣＨ３、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２ＣＨ３に限定されてよい。
【００２３】
以下の特別の構造は本発明の態様である。幾つかの場合において、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ４における変動性はＲ、ＺおよびＹとして定められる置換基と関連して示してあり、これら置換基は説明する化合物の目的のために下記に定めてある。各構造について相対的な立体化学を示してあるが、キラル中心の立体化学は上記キラリティーに基づく態様のいずれであるかに従って変わりうる。
【００２４】
【化１１】
【００２５】
【化１２】
【００２６】
【化１３】
【００２７】
化合物の採取源および活性のアッセイ
ペロロールは、当該技術分野および本明細書の実施例１に教示されるように天然の採取源から得ることができる。溶媒分画および／またはクロマトグラフィーを用いることができる。また、式Ｉの成員を製造するため、置換基を付加、除去または置換する公知の化学的方法によりペロロールまたはクリセン誘導体などの他の利用できる化合物を修飾することも可能である。式Ｉの種々の化合物に適用可能なそのような誘導体化工程の例を以下にさらに詳細に示す。
【００２８】
調製物中のＳＨＩＰ１モデュレート化合物の存在は、実施例１および図１に開示した方法によるなどのＳＨＩＰ１酵素の活性の変化の直接モニタリングを含む種々のアッセイの使用により、または細胞または動物アッセイ（活性化マクロファージからの一酸化窒素の産生、ＩｇＥ誘発肥満細胞の脱顆粒、ＬＰＳ誘発マクロファージ活性化、ＴＮＦ−α発現または活性における変化をモニターする）を含む、公知の手法から容易に適合させることのできる生物学的アッセイにより、決定することができる。さらに、生体において炎症活性を媒体する因子の標準アッセイを用いることができる。これらアッセイの適合は、ＳＨＩＰ１ -/-およびＳＨＩＰ１ +/-マウス１５,１６および骨髄由来マクロファージ１７を利用できることにより容易となっている。さらに、抗ＳＨＩＰ１抗体１８が利用できることはイムノアッセイ態様の使用を容易にしている。そのようなアッセイはまた、本明細書に記載の全合成によって調製した化合物の活性を評価するのにも用いることができる。
【００２９】
化合物の全合成
ペロロールおよび式Ｉの他の化合物の合成スキームを本明細書で提供する。表（１〜２）は、調製できる式Ｉの異なる化合物の例を用いたそのような合成の２つの態様の詳細な例示を提供する。該表に示した化合物で芳香環に隣接した環が６員環である他はペロロールと同一である化合物は「ホモペロロールアナログ」と称する。５員環であるペロロール以外の化合物は「ペロロールアナログ」と称する。
【００３０】
表１および２に示す合成法において、そこに示された式IIＡの化合物は出発物質としてスクラレオライド（sclareolide）に基づくのが便利である。所望のＲ１〜Ｒ４置換基を提供するスクラレオライドの適当な誘導体を用いることができる。該表に示した式IIIの芳香族化合物において、Ｎｕはリチウムであるのが好ましい。式IIIの出発化合物中のＸ２は、−ＯＭｅや−ＮＨＡｃなどの活性化基であるのが好ましい。Ｒ１〜Ｒ４は出発原料のままであってもよいし、または最終生成物に所望の置換基を提供すべく適当に変化してもよい。保護基をＲ１〜Ｒ４またはＸ１、Ｘ３、またはＸ４に用いることができる。式Ｉの所望の成員Ｑを生成する式ＩＡ中のＬ’を含む環の誘導体化の例を表２に示してあり、その際、酸化（たとえば、ＯｓＣｌ４で処理した後にＨＣｌなどの酸で処理することにより）を行って該環にケトン置換基が導入される。
【００３１】
表１：ペロロールおよびペロロールアナログの合成
【化１４】
【００３２】
表２：ホモペロロールおよびホモペロロールアナログの合成
【化１５】
【００３３】
医薬組成物、投与量、投与および適応症
本発明において使用する化合物は、当業者に知られた多くの仕方で医薬組成物に製剤化することができ、その全てが本発明に包含される。当業者であれば適当な薬理学的に許容しうる塩並びに適当な薬理学的に許容しうる賦形剤、希釈剤および担体を選択できるであろう。
【００３４】
本発明による化合物は、薬理学的に許容しうる担体中、治療学的または予防上許容しうる量にて単独または他の薬剤（たとえば、小分子、ペプチド、またはペプチドアナログ）とともに提供することができる。そのような医薬製剤を製造するための当該技術分野でよく知られた方法は、たとえば、「Remington's Pharmaceutical Sciences」（第１９版；A. Gennaro編、1995、Mack Publishing Company、イーストン、ペンシルベニア）（参照のため本明細書に引用する）に見出すことができる。本発明による医薬製剤は、たとえば、賦形剤、滅菌水、または食塩水、エタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド、ポリアルキレングリコール、たとえばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、または他の合成溶媒、植物起源のオイル、または水素添加ナフタレンを含んでいてよい。
【００３５】
本発明による化合物は、疎水性の化合物、たとえば、水には実質的に不溶であるが、たとえばエタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド、またはクロロホルム、またはそれらの混合物などの溶媒には自由に溶解する化合物を含んでいてよい。そのような疎水性の化合物を含む製剤は、たとえば、両親媒性化合物により一定の条件下で生成するミセルを用いて提供することができる。水性溶媒中でミセルはその炭化水素コア中、またはミセル壁内に疎水性化合物を導入することができる。疎水性化合物はまた、トリグリセリド（オイル）、たとえば食用植物油中で可溶化することによっても提供できる。油相中で安定化した疎水性化合物は水性溶液中に分散させることができ、所望なら乳化剤を用いて安定化することができる。あるいは、疎水性化合物は、オイル中で提供して、たとえば胃腸管系に送達させ、そこでインビボで胆汁塩に乳化剤として作用させてもよい。疎水性化合物はまたマイクロエマルジョンとしても提供することができる。マイクロエマルジョンはエマルジョンと同様、オイルと水との液体分散液であるが、ミセル様の「コア」中に油相を有する一層小さな粒子を有する。本発明による疎水性化合物はまた、ポリマー担体、たとえば炭水化物、たとえばセルロース、デキストラン、シクロデキストリン、メチルセルロース、またはヒアルロン酸、あるいはポリペプチド、たとえばアルブミン、コラーゲン、またはゼラチンとともに提供することができる。疎水性化合物の他の製剤様式としては、リポソーム、天然および合成のリン脂質、または溶媒、たとえばジメチルスルホキシドまたはアルコールが挙げられる。
【００３６】
本発明の医薬組成物は、所定の時間をかけて活性化合物の制御された放出が提供されるように製剤化することができる。それゆえ、製剤は、たとえば単回投与として投与したなら毒性であるが、その制御された放出は毒性レベルを超えないような量の化合物を含んでいてよい。該化合物の放出を制御するため、たとえば、生体適合性で生分解性のラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーを用いることができる。本発明によるモデュレート化合物にとって潜在的に有用な他の送達系としては、エチレン−酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透ポンプ、埋め込み可能な注入系、およびリポソームが挙げられる。
【００３７】
化合物の「治療学的有効量」とは、本発明による化合物を用いて所望の治療効果を達成するために必要な投与量および時間にて有効な量である。治療学的有効量はまた、化合物の治療的に有利な効果の方が毒性または有害な効果よりも勝る量である。化合物の「予防上有効な量」とは、本発明による化合物を用いて所望の予防効果を達成するために必要な投与量および時間にて有効な量である。典型的には、予防的投与量は、予防上有効な量が治療学的有効量よりも少なくなるように、疾患の前または疾患の初期の段階で患者に用いる。充分と考えられる量は、使用した特定の化合物、投与方法、疾患の段階および重篤度、治療すべき個体の年齢、性別、および健康、および同時に行っている治療により変わるであろう。
【００３８】
本発明の化合物の治療学的有効量または予防上有効な量は、0.1nM〜0.1M、0.1nM〜0.05M、0.05nM〜15μMまたは0.01nM〜10μMであってよい。投与量の値は、緩和すべき状態の重篤度で変わりうることに注意すべきである。いかなる特定の患者に対しても、特定の投与量レジメンは個々の必要性および組成物の投与の管理人または監督人の専門的判断に従い、経時的に調節することができる。本明細書において示す投与量の範囲は例示に過ぎず、医療従事者によって選択することのできる投与量の範囲を限定するものではない。投与量レジメンは最適の治療応答を提供すべく調節することができる。たとえば、単回ボーラスを投与することができ、幾つかの分割投与を時間をかけて投与することができ、または治療状況の緊急事態によって示されるように投与量を比例的に低減あるいは増大させることができる。
【００３９】
一般に、本発明の化合物は実質的な毒性を引き起こすことなく用いるべきである。本発明の化合物の毒性は、標準法を用い、たとえば、細胞培養または実験動物で試験することおよび治療指数、すなわちＬＤ５０（集団の５０％に致死的な投与量）とＬＤ１００（集団の１００％に致死的な投与量）との比を決定することにより決定することができる。しかしながら、重篤な疾患状態などの一定の環境では実質的に過剰な組成物を投与することが必要である。
【００４０】
本発明の化合物を患者に投与すべく、治療目的かまたは予防目的かに応じて適当な製剤または組成物を提供するために通常の製薬実務を採用することができる。あらゆる適当な投与経路を用いることができ、たとえば、全身、非経口、静脈内、皮下、経皮、経粘膜、筋肉内、頭蓋内、眼窩内、眼内、心室内、被膜内、脊髄内、くも膜下内、腹腔内、鼻内、エアゾル、局所、外科、または経口投与が挙げられる。使用する製剤は、選択した投与経路によって変わってよい。それゆえ、経口投与の場合、製剤は錠剤またはカプセルの形態であってよく；吸入剤の場合、製剤は粉末薬、点鼻剤、またはエアゾル剤の形態であってよく；経粘膜投与の場合、製剤は鼻内スプレーまたは坐剤の形態であってよく；経皮投与の場合、製剤はクリーム剤、軟膏、またはゲル剤であってよい；など。
【００４１】
本発明の治療学的有効量または予防上有効な量のＳＨＩＰ１モデュレーターおよび医薬組成物は、癌（新生物疾患）、他の細胞増殖性疾患、炎症性疾患および免疫疾患の治療または予防を必要とする患者に投与してよい。新生物疾患としては、これらに限られるものではないが、白血病、癌腫、肉腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、毛管漏出症候群（capillary leak syndrome）および造血系の悪性腫瘍が挙げられる。炎症性の徴候を有する疾患としては、これらに限られるものではないが、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、ギヤン−バレル症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性胃腸管症候群、乾癬、対宿主性移植片病、全身性エリテマトーデス、アルツハイマー病およびインスリン依存性糖尿病が挙げられる。細網内皮系のマクロファージ関連細胞の不適切な活性化と関連する疾患としては、骨粗鬆症が挙げられる。
【００４２】
式Ｉの構造を有するペロロールおよび他の化合物は、ＳＨＩＰ１アゴニスト活性を示す。ＳＨＩＰ１を活性化することにより、そのようなアゴニストは、とりわけ、炎症性疾患、たとえば敗血症性ショック、大腸炎、炎症性胃腸管症候群、およびマクロファージの増殖または活性化が関与する疾患；新生物疾患、たとえば骨髄性およびリンパ性白血病；免疫抑制疾患、たとえば移植の拒絶；造血性疾患の治療；およびアレルギーの治療および予防におけるような肥満細胞の変性に影響を及ぼすのに有用である。
【００４３】
実施例１
１５０の海洋性生物抽出物の予備的スクリーニングにおいて、酵素アッセイでＳＨＩＰ１を活性化した抽出物を同定した。これら抽出物の一つのアッセイによる分画は、ペロロールとしての活性化合物の同定という結果となった（図１）。スクリーニングにおいて陽性と試験された抽出物の起源およびプロセシングおよびアッセイの性質は以下のとおりである。
【００４４】
褐色がかったシート状の海綿動物Dactylospongia elegans（Dictyoceratida目、Spongiidae科）の試料を、１９９５年１月にパプアニューギニア、マダンラグーン、の外リーフ上のRasch Passage中の保護された突出部から、５〜１０ｍの深さにてSCUBAを用いて手で回収した。新たに回収した海綿動物をその場で凍結させ、ドライアイス上でカナダ、バンクーバーに輸送した。海綿動物を同定し、検証のため証拠試料をZoological Museum of Amsterdamに置いた（ZMA POR. 15986）。凍結した海綿動物（120g）を小切片に切断し、MeOH中に浸漬、およびその後に繰り返し抽出した（3×250mL）。コンバインしたメタノール抽出物を真空濃縮し、ついでEtOAc（4×100mL）とH2O（300mL）との間に分配した。コンバインしたEtOAc抽出物を真空乾固して490mgの褐色がかった油状物を得、これにはペロロールが含まれることがわかった。
【００４５】
アッセイは９６ウエルのマイクロタイタープレートで行った。ＳＨＩＰ１酵素は、赤血球凝集素およびヘキサヒスチジンタグを用い、哺乳動物発現ベクターから産生させた。Ｈｉｓタグは精製を促進するのに用いた。200Mのイノシトール-1,3,4,5-テトラキスホスフェートを添加する前にＳＨＩＰ１酵素（10ng）を抽出物またはDMSOとともに室温で１５分間インキュベートした。反応を３７℃にて２０分間進行させた。ついで、放出された無機リン酸の量をマラカイトグリーン試薬の添加、およびその後の650nmでの吸光度測定により評価した。
【００４６】
実施例２
ペロロールを以下のスキームに従い、下記に記載した特定の条件下で調製した。
【化１６】
【００４７】
無水Et2O（30mL）中の化合物１（1.00g、3.99ミリモル）の攪拌溶液に、Et2O中のMeLiの新たに調製した1.6M溶液（3mL、4.8ミリモル）を室温にて１０分かけて少しずつ加え、攪拌をさらに５分間続けた。ついで、この混合物を10%HCl（2mL）で処理し、ついで漏斗に移し、エーテルで繰り返し抽出した。コンバインした抽出物をNaHCO3およびH2Oで洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、ついで濃縮した。残渣をヘキサン／Et2O（6:4）を用いたカラムクロマトグラフィーにかけて化合物２（0.74g、70%）を得た。
【００４８】
CH2Cl2（40mL）中の(CF3CO)2O（9mL、63.85ミリモル）の攪拌し冷却した（氷浴上）溶液に、50%水性H2O2（1.8mL、31.66ミリモル）を加え、混合物を氷浴中で１０分間静置した。以下の操作はすべて室温で行った。溶液を固体NaHCO3（5.40g、64.28ミリモル）で２分間処理し、混合物を８分間攪拌した後、CH2Cl2（54mL）中の化合物２（1.80g、6.76ミリモル）の溶液を加えた。得られた混合物を３０分間攪拌し、H2O（10mL）を加えた後、ｐＨが７に達するまで固体NaHCO3で４５分間少しずつ処理した。最後に混合物をEt2Oで抽出した。コンバインした抽出物をNaHCO3、H2Oで洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、ついで濃縮して純粋な化合物３を得た。
【００４９】
化合物３（1g、3.6ミリモル）をMeOH中のKOHの10%溶液（1mL、1.78ミリモル）に０℃で溶解した。得られた混合物を１０分間攪拌した。H2Oを加えた後、溶液をEt2Oで抽出した。抽出物をH2Oで洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、ついで濃縮して化合物４（0.8g）を得た。
【００５０】
マグネチックスターラーバーを備えたオーブン乾燥しN2を流し込んだ100mL容の丸底フラスコに、3.24g（15ミリモル）のPCC、30mLのCH2Cl2および2.4g（10ミリモル）の化合物４を入れた。混合物を室温で２時間充分に攪拌し、30mLのEt2Oを添加して反応停止させた。得られた溶液をシリカゲルの厚いパッドで濾過し、濃縮して残渣を得た。この残渣をヘキサン／Et2O（8:2）を用いたカラムクロマトグラフィーにかけて化合物５（1.6g、67%）を得た。
【００５１】
水素化ナトリウム（24.6mg、0.82ミリモル、80%オイル分散液）および乾燥THF（5mL）を、冷却器および乾燥N2流を備えた乾燥フラスコに加えた。この懸濁液にメチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（0.146g、0.41ミリモル）を加え、混合物を１０分間攪拌した。ついでTHF（2mL）中の化合物６（100mg、0.41ミリモル）を加え、混合物を穏やかに２時間還流した。2mLのメタノールを加えて反応停止させ、ついでEt2Oで抽出した。通常の処理後、94.3mgの化合物７を得た。
【００５２】
ペンタン（1.74mL、2.79ミリモル）中のtBuLiの1.6M溶液を、乾燥THF（20mL）中の化合物７（612.6mg、2.52ミリモル）の攪拌溶液に−７８℃にてゆっくりと加えた。３０分間攪拌した後、乾燥THF（5mL）中の化合物５（300mg、1.26ミリモル）の溶液を加えた。混合物をさらに−７８℃で２時間攪拌した。ついで、H2O（10mL）を加え、混合物をEt2Oで抽出した（120mL、２回）。コンバインしたEt2O抽出物を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し（MgSO4）、ついで濃縮して残渣を得、これをNP SepakTM上のクロマトグラフィーにかけて280mg（55%）の化合物９を得た。
【００５３】
EA（5mL）中の化合物９（40mg、0.1ミリモル）の溶液を10%Pd/C（50mg）上、水素雰囲気下、室温にて一夜、水素化した。濾過および濃縮により37mgの化合物１０（96%）を得た。
【００５４】
CH2Cl2（10mL）中の化合物１０（38.8mg、0.1ミリモル）の攪拌溶液に、SnCl4（0.1mL）をアルゴン下、−２０℃にて２分間ゆっくりと加えた。得られた混合物をさらに２０分間攪拌し、ついでCH2Cl2（20mL）で希釈し、氷上に注いだ。水性相をCH2Cl2で２回（20mL）抽出し、抽出物をコンバインし、飽和NaHCO3、飽和食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させた。蒸発させて化合物１１（28mg、76%）を得た。
【００５５】
2mLのCH2Cl2に溶解した化合物１１（7.4mg、0.02ミリモル）にPCC（41.6mg、0.192ミリモル）を加えた。混合物をアルゴン下、穏やかな還流下で２４時間攪拌した。反応液をEt2O（20mL）で希釈し、得られた暗色の溶液をNP SepakTMで濾過した。濾液の濃縮およびさらなる精製により1.5mg（20%）の化合物１２を得た。
【００５６】
1.5mgの化合物１２を2mLのNaOH（10%）溶液（0.5mLのTHFを含む）に溶解し、攪拌した。引き続き5mgのヨウ素を加え、混合物をさらに２０分間攪拌し、3mLの10%H2SO4を加えて酸性にした。この溶液を50mLのEt2Oで抽出し、飽和食塩水で洗浄し、ついで濃縮して残渣１３を得た。
【００５７】
38.6mg（0.1ミリモル）の化合物１３をアルゴン下、CH2Cl2（1mL）中で攪拌した。CH2Cl2（2.0mL、1M）中のBBr3を加え、攪拌を１.５時間続けた。ついで、混合物をH2Oに注ぎ、CH2Cl2（50mL）で抽出した。ついで、コンバインした抽出物をMgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をNP SepakTM（ヘキサン：ＥＡ＝7:3）により精製して化合物１４（25mg、70%）を得た。
【００５８】
35.8mg（0.1ミリモル）の化合物１４を、5%H2SO4を含むMeOH（2mL）に溶解した。攪拌を２時間続け、混合物をEt2Oで抽出し、MgSO4で乾燥させ、濃縮して化合物１５を得た。
【００５９】
実施例３
ペロロールアナログPNSR-15Aを、以下のスキームを用い、実施例３に記載の方法に従って合成した。
【化１７】
【００６０】
実施例４
ペロロールアナログPNSR-4Aを、以下のスキームに従い、上記方法により合成した。
【化１８】
【００６１】
実施例５
ホモペロロールアナログPNSR-14Aを、以下のスキームに従い、上記方法により合成した。
【化１９】
【００６２】
実施例６
ホモペロロールを、上記実施例に基づく以下のスキームに従い、上記方法に従って合成することができる。
【化２０】
【００６３】
実施例７
図１に記載したＳＨＩＰ１酵素アッセイでの活性の増大を引き起こすことに加え、式Ｉのアゴニスト化合物は、全細胞ベースのアッセイでマクロファージおよび肥満細胞に対して抗炎症作用を示し、内毒素活性化された野生型マクロファージからの一酸化窒素の産生を抑制し、生きた被験者に対して抗炎症作用を示す。ＮＯ放出アッセイおよび肥満細胞活性化アッセイでペロロールについて得られた結果を、それぞれ図２および図３に示す。ＮＯ放出の抑制はＳＨＩＰ１ -/-マクロファージでは観察されなかった。ペロロールはＩｇＥ誘発された肥満細胞の脱顆粒を有意に低減した。
【００６４】
細胞および動物ベースのアッセイに用いた手順を以下に記載する。ペロロールおよび式Ｉの範囲内の種々のアナログについての結果を表３に示すが、これには実施例１に記載の酵素アッセイを用いた結果も含まれる。
【００６５】
ＮＯ放出アッセイについては、野生型またはＳＨＩＰ１ -/-マクロファージ細胞をマイクロタイタープレート（5×104/ウエル）にアリコートし、被験化合物またはDMSO担体の存在下または不在下、1g/mLの内毒素（ＬＰＳ）で活性化させた。細胞を３７℃、5%CO2にて２４時間インキュベートし、ついでGriess試薬を用いたＮＯ決定のために培養上澄み液を除去した。あるいは、ＬＰＳを添加する前に、J774.1aマクロファージ細胞を、DMSOに溶解した10μg/mlの被験化合物で４０分間処理した。Griess試薬を用いたＮＯ濃度の決定のために培養上澄み液を２４時間後に回収した。
【００６６】
肥満細胞活性化アッセイについては、骨髄由来肥満細胞を抗ＤＮＰ ＩｇＥとともに４℃で１時間インキュベートした。ついで、該細胞を２３℃のTyrode's緩衝液で２回洗浄し、ＤＮＰ−ヒト血清アルブミンで１５分間処理する前に被験化合物またはビヒクル対照の存在下で３０分間インキュベートした。脱顆粒の程度を、β−ヘキソサミナーゼの放出を測定することにより決定した。
【００６７】
マクロファージＴＮＦ−α産生アッセイについては、100ng/mLのＬＰＳを添加する前に、J774.1aマクロファージ細胞をシクロデキストリン中に溶解した10μg/mLの被験化合物で４０分間処理した。ELISAによりＴＮＦ−αを決定するため、培養上澄み液を２時間後および５時間後に回収した。
【００６８】
マウスの耳浮腫（Evans Blue）アッセイは、アレルギー炎症の標準モデルである。マウスにモノクローナル抗ＤＮＰ ＩｇＥ抗体を静脈内注射することにより受動感作させた。２４時間後、20μlのDMSO：メタノール（1：3）中の10μgの被験化合物（右耳）またはビヒクル単独（左耳）を投与し、２０分後に誘発剤［アセトン中の20μlの0.15%DNFB：オリーブ油（4：1）］を投与した。ついで、マウスに300μlの1%Evans Blueを静脈内注射した。誘発剤の投与１時間後、耳でのEvans Blueの管外遊出の視覚による点検および定量により血管透過性を測定した。Evans Blue含量を定量するため、DNFB処理の１時間後に耳を回収し、ホルムアミド中、３７℃で２４時間インキュベートすることによりEvans Blueを抽出し、620nmでの分光分析により定量した。担体のみで前処理した耳はDNFB攻撃に応答して速やかなアナフィラキシー反応を展開した。対照的に、ＳＨＩＰ１アゴニストは、Evans Blueの管外遊出の低減によって示されるように血管透過性亢進の明らかな抑制を示した。
【００６９】
マウスの耳浮腫（リンパ球浸潤アッセイ）は接触過敏症または耳炎症のモデルであり、ヒトアレルギーの標準的なインビボモデルである。接触過敏症は、初期の感作相（sensitizing phase）と惹起相（eliciting phase）とからなる。後者の相は、表皮細胞が以前に暴露された特定の抗原に出会ったときに起こり、局所的な細胞浸潤、炎症、および浮腫を特徴とする。このアッセイでは、４週齢（20g）Balb/cマウスの腹部領域を電気カミソリで剃った後に腹壁にアセトン：オリーブ油（4：1、v/v）中の0.5%2,4-ジニトロフルオロベンゼン（DNFB；ハプテン化剤）を25μl適用することにより、DNFBに対して感作させた。第二の適用の４日後、マウスをハロタンで軽く麻酔し、ついで右および左耳の両側の皮膚の上に（epicutaneously）10μlの0.2%DNFBを攻撃した。マウスはすべて、DNFBによる皮膚上攻撃の２４時間前に滅菌食塩水中の[3H]−メチルチミジン（1μCi/g体重）を500μl腹腔内（i.p.）注射した。DNFB攻撃の３０分前に右および左耳をそれぞれDMSO：メタノール（1:3、v/v）中の被験化合物かまたはビヒクル単独で前処理した。DNFB攻撃の２４時間後、マウスをCO2窒息により屠殺し、8mm直径のくり抜きを各耳から採取し、500μlのSolvableTM中、６０℃で１０〜１２時間消化した。試料をH2O2の添加により脱色し、標準液体シンチレーションカウンティングにより放射性標識白血球の浸潤物を分析した。
【００７０】
大腸炎アッセイは、被験化合物がTNBS（トリニトロベンゼンスルホン酸）により誘発された炎症からマウスを防御するか否かを決定することに基づいている。TNBS浮腫投与の直前に被験化合物（10mg/kg）またはビヒクル対照をマウスに腹腔内注射した。２日後、ビヒクル処理したマウスの結腸は重篤な炎症であったが、ＳＨＩＰ１アゴニスト処理したマウスは炎症の徴候を示さなかった。
【００７１】
表３
【表１】
【００７２】
以上、本発明を理解の明瞭を目的として説明および実施例により若干詳細に記載したが、添付の特許請求の範囲の精神および範囲から逸脱することなく変更および改変をなし得ることは当業者には明らかであろう。本明細書において言及したすべての特許、特許出願および出願公報は参照のため本明細書に引用される。
【００７３】
参考文献
1. Huber, M.ら、(1999) Prog Biophys Mol Biol 71:423
2. Sattler, M.ら、(1999) Mol Cell Biol 19:7473
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4. Kwak, J.H.ら、(2000) J. Nat. Prod. 63:1153-56
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18. Damen, J. E.ら、(1998) Blood 92:1199
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】図１は、海綿動物抽出物がＳＨＩＰ１酵素活性にインビトロで及ぼす作用を示すグラフである。
【００７５】
【図２】図２は、ペロロールがマクロファージの一酸化窒素（ＮＯ）産生に及ぼす作用を示すグラフである。
【００７６】
【図３】図３は、ペロロールがＩｇＥ媒体肥満細胞活性化に及ぼす作用を示すグラフである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＹ１Ｙ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＹ１Ｙ２−および−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４ＣＹ５Ｙ６−（式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ’、およびＳＨよりなる群から選ばれるか；またはＹ１／Ｙ２、Ｙ３／Ｙ４、およびＹ５／Ｙ６のいずれか一つの群が＝Ｏであるか；またはＹ１／Ｙ３がエポキシドを形成し、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６の少なくとも一つ（存在するときは）はＨではない）よりなる群から選ばれる炭素骨格である；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、ＮＯ２、ＮＨ２、−ＮＨＲ、および−ＮＲ２よりなる群から選ばれる（式中、Ｒは、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’２、ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、およびエポキシド）である）；
Ｒ’は、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ”、−ＮＲ”２、ＮＯ２、および−ＣＯ２Ｈ（ここでＲ”は、直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基）である））により示されるが、ただし、ペロロールの正確な構造または
【化２】
よりなる構造群のいずれか一つを有することはない化合物またはその塩。
【請求項２】
Ｙ１〜Ｙ６が、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、ＣｌおよびＩから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｑが、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｑの炭素骨格が飽和されている、請求項１、２または３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｑの炭素骨格が１または２の炭素原子からなる、請求項１ないし４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、メチル、エチル、−ＣＨ２ＯＨ、または−ＣＨ２ＯＲ’である、請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２が、メチル、エチル、−ＣＨ２ＯＨ、または−ＣＨ２ＯＲ’である、請求項１ないし６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１中のＲ’が、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定される、請求項１ないし７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２中のＲ’が、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定される、請求項１ないし８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ’がメチルまたはエチルに限定される、請求項８または９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘ１が、Ｈ、ＯＨ、Ｒ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、または−ＣＯＲ’２である、請求項１ないし１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘ２が、Ｈ、ＯＨ、Ｒ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、または−ＣＯＲ’２である、請求項１ないし１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ３が、Ｈ、ＯＨ、Ｒ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、または−ＣＯＲ’２である、請求項１ないし１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
Ｘ１、Ｘ２およびＸ３のいずれか一つまたはそれ以上中のＲおよびＲ’が、メチル、エチル、プロピルおよびブチルに限定される、請求項１ないし１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘ１が、Ｈ、ＯＨ、または−ＯＣＨ３である、請求項１ないし１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｘ２が、Ｈ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項１ないし１０および１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘ２が、Ｈ、ＯＣＨ３、または−ＮＨＯＣＨ３である、請求項１ないし１０および１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ３が、Ｈ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項１ないし１０、１５、１６、および１７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘ４が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＣＯ２ＨまたはＣＯ２Ｒ’である、請求項１ないし１８のいずれかに記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘ４中のＲおよびＲ’が、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定される、請求項１ないし１９のいずれかに記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘ４が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＣＨ３、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２ＣＨ３である、請求項１ないし１８のいずれかに記載の化合物。
【請求項２２】
ホモペロロール、ジメトキシペロロール、PNSR-4A、PNSR-15A、PNSR-16A、PNSR-17AおよびPNSR-18Aから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０の立体配置がそれぞれＳ、Ｒ、Ｒ、Ｓである、請求項１ないし２２のいずれかに記載の化合物。
【請求項２４】
Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０の立体配置がそれぞれＲ、Ｓ、Ｓ、Ｒである、請求項１ないし２２のいずれかに記載の化合物。
【請求項２５】
ＳＨＩＰ１活性のモデュレーターとして使用するためのものである、請求項１ないし２４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
ＳＨＩＰ１活性のアゴニストである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
炎症性、新生物性、造血性または免疫性の疾患または状態の治療または予防用医薬の製造のための請求項１ないし２６のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２８】
式ＩＡ：
【化３】
（式中、Ｒ１〜Ｒ４、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は請求項１の記載と同じであり、Ｌ’はＣ１−Ｃ４の飽和または不飽和アルキル連結基であり、Ａは活性化基である）により示される化合物の製造方法であって、式IIＡまたはIIＢ：
【化４】
（式中、Ｌは不在またはＣ１−Ｃ３の飽和または不飽和アルキル連結基であり、ＥおよびＥ’は求電子性反応基である）により示される化合物を式III：
【化５】
（式中、Ｎｕは式IIIの化合物をＮｕにおいて求核性にする基である）により示される化合物と反応させ、ついで任意に還元および加水分解を行って、式ＩＶ：
【化６】
により示される化合物を生成し、ついで式ＩＶの化合物を縮合して式ＩＡの化合物を生成することを含む方法。
【請求項２９】
式IIＡおよびIIＢの化合物が下記構造：
【化７】
を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
式IIＡおよびIIＢの化合物が下記構造：
【化８】
を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
式IIＡまたはIIＢの化合物が、スクラレオライドであるか、またはスクラレオライドに由来する、請求項２８ないし３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
Ｎｕがリチウムである、請求項２８ないし３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
ＡがＯＣＨ３または−ＮＨＯＣＨ３である、請求項２８ないし３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
薬理学的に許容しうる担体、および式Ｉ：
【化９】
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＹ１Ｙ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＹ１Ｙ２−および−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４ＣＹ５Ｙ６−（式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ’、およびＳＨよりなる群から選ばれるか；またはＹ１／Ｙ２、Ｙ３／Ｙ４、およびＹ５／Ｙ６のいずれか一つの群が＝Ｏであるか；またはＹ１／Ｙ３がエポキシドを形成し、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６の少なくとも一つ（存在するときは）はＨではない）よりなる群から選ばれる炭素骨格である；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、ＮＯ２、ＮＨ２、−ＮＨＲ、および−ＮＲ２よりなる群から選ばれる（式中、Ｒは、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’２、ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、およびエポキシド）である）；
Ｒ’は、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ”、−ＮＲ”２、ＮＯ２、および−ＣＯ２Ｈ（ここでＲ”は、直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基）である））により示される化合物または薬理学的に許容しうるその塩の一つまたはそれ以上を含む医薬組成物。
【請求項３５】
式Ｉにより示される一つまたはそれ以上の化合物が単独でペロロールであることはない、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
ペロロールを含む、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
請求項１ないし２６のいずれかに記載の化合物を含む、請求項３４、３５、または３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
免疫性、造血性、炎症性または新生物性の疾患または状態の予防または治療方法であって、該予防または治療を必要とする患者に有効量の請求項３４ないし３７のいずれかに記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＹ１Ｙ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＹ１Ｙ２−および−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４ＣＹ５Ｙ６−（式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ’、およびＳＨよりなる群から選ばれるか；またはＹ１／Ｙ２、Ｙ３／Ｙ４、およびＹ５／Ｙ６のいずれか一つの群が＝Ｏであるか；またはＹ１／Ｙ３がエポキシドを形成し、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６の少なくとも一つ（存在するときは）はＨではない）よりなる群から選ばれる炭素骨格である；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、ＮＯ２、ＮＨ２、−ＮＨＲ、および−ＮＲ２よりなる群から選ばれる（式中、Ｒは、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’２、ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、およびエポキシド）である）；
Ｒ’は、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ”、−ＮＲ”２、ＮＯ２、および−ＣＯ２Ｈ（ここでＲ”は、直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基）である））により示されるが、ただし、ペロロールの正確な構造または
【化２】
よりなる構造群のいずれか一つを有することはない化合物またはその塩。
【請求項２】
Ｙ１〜Ｙ６が、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、ＣｌおよびＩから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｑが、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、または−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｑの炭素骨格が飽和されている、請求項１、２または３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｑの炭素骨格が１または２の炭素原子からなる、請求項１ないし４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、メチル、エチル、−ＣＨ２ＯＨ、または−ＣＨ２ＯＲ’である、請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２が、メチル、エチル、−ＣＨ２ＯＨ、または−ＣＨ２ＯＲ’である、請求項１ないし６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１中のＲ’が、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定される、請求項１ないし７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２中のＲ’が、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定される、請求項１ないし８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ’がメチルまたはエチルに限定される、請求項８または９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘ１が、Ｈ、ＯＨ、Ｒ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、または−ＣＯＲ’２である、請求項１ないし１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘ２が、Ｈ、ＯＨ、Ｒ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、または−ＣＯＲ’２である、請求項１ないし１１のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ３が、Ｈ、ＯＨ、Ｒ、ＯＲ、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ’、または−ＣＯＲ’２である、請求項１ないし１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
Ｘ１、Ｘ２およびＸ３のいずれか一つまたはそれ以上中のＲおよびＲ’が、メチル、エチル、プロピルおよびブチルに限定される、請求項１ないし１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘ１が、Ｈ、ＯＨ、または−ＯＣＨ３である、請求項１ないし１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｘ２が、Ｈ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項１ないし１０および１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘ２が、Ｈ、ＯＣＨ３、または−ＮＨＯＣＨ３である、請求項１ないし１０および１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ３が、Ｈ、ＯＨ、またはＯＣＨ３である、請求項１ないし１０、１５、１６、および１７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘ４が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＣＯ２ＨまたはＣＯ２Ｒ’である、請求項１ないし１８のいずれかに記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘ４中のＲおよびＲ’が、メチル、エチル、プロピルまたはブチルに限定される、請求項１ないし１９のいずれかに記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘ４が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＣＨ３、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２ＣＨ３である、請求項１ないし１８のいずれかに記載の化合物。
【請求項２２】
ホモペロロール、ジメトキシペロロール、PNSR-4A、PNSR-15A、PNSR-16A、PNSR-17AおよびPNSR-18Aから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０の立体配置がそれぞれＳ、Ｒ、Ｒ、Ｓである、請求項１ないし２２のいずれかに記載の化合物。
【請求項２４】
Ｃ−５、Ｃ−８、Ｃ−９およびＣ−１０の立体配置がそれぞれＲ、Ｓ、Ｓ、Ｒである、請求項１ないし２２のいずれかに記載の化合物。
【請求項２５】
ＳＨＩＰ１活性のモデュレーターとして使用するためのものである、請求項１ないし２４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
ＳＨＩＰ１活性のアゴニストである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
炎症性、新生物性、造血性または免疫性の疾患または状態の治療または予防用医薬の製造のための請求項１ないし２６のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２８】
式ＩＡ：
【化３】
（式中、Ｒ１〜Ｒ４、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は請求項１の記載と同じであり、Ｌ’はＣ１−Ｃ４の飽和または不飽和アルキル連結基であり、Ａは活性化基である）により示される化合物の製造方法であって、式IIＡまたはIIＢ：
【化４】
（式中、Ｌは不在またはＣ１−Ｃ３の飽和または不飽和アルキル連結基であり、ＥおよびＥ’は求電子性反応基である）により示される化合物を式III：
【化５】
（式中、Ｎｕは式IIIの化合物をＮｕにおいて求核性にする基である）により示される化合物と反応させ、ついで任意に還元および加水分解を行って、式ＩＶ：
【化６】
により示される化合物を生成し、ついで式ＩＶの化合物を縮合して式ＩＡの化合物を生成することを含む方法。
【請求項２９】
式IIＡおよびIIＢの化合物が下記構造：
【化７】
を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
式IIＡおよびIIＢの化合物が下記構造：
【化８】
を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
式IIＡまたはIIＢの化合物が、スクラレオライドであるか、またはスクラレオライドに由来する、請求項２８ないし３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
Ｎｕがリチウムである、請求項２８ないし３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
ＡがＯＣＨ３または−ＮＨＯＣＨ３である、請求項２８ないし３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
薬理学的に許容しうる担体、および式Ｉ：
【化９】
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＲ’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、および−ＣＯ２Ｒ’よりなる群から選ばれる；
Ｑは、−ＣＨ２−、−ＣＹ１Ｙ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨＣＹ１Ｙ２−および−ＣＹ１Ｙ２ＣＹ３Ｙ４ＣＹ５Ｙ６−（式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ’、およびＳＨよりなる群から選ばれるか；またはＹ１／Ｙ２、Ｙ３／Ｙ４、およびＹ５／Ｙ６のいずれか一つの群が＝Ｏであるか；またはＹ１／Ｙ３がエポキシドを形成し、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６の少なくとも一つ（存在するときは）はＨではない）よりなる群から選ばれる炭素骨格である；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、ＮＯ２、ＮＨ２、−ＮＨＲ、および−ＮＲ２よりなる群から選ばれる（式中、Ｒは、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ’、−ＮＲ’２、ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒ’、およびエポキシド）である）；
Ｒ’は、置換されていないかまたは１またはそれ以上の置換基で置換された直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基（置換基は、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、ＮＨ２、−ＮＨＲ”、−ＮＲ”２、ＮＯ２、および−ＣＯ２Ｈ（ここでＲ”は、直線状、分枝鎖、または環状の飽和または不飽和の１〜１０炭素原子アルキル基）である））により示される化合物または薬理学的に許容しうるその塩の一つまたはそれ以上を含む医薬組成物。
【請求項３５】
式Ｉにより示される一つまたはそれ以上の化合物が単独でペロロールであることはない、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
ペロロールを含む、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
請求項１ないし２６のいずれかに記載の化合物を含む、請求項３４、３５、または３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
免疫性、造血性、炎症性または新生物性の疾患または状態の予防または治療方法であって、該予防または治療を必要とする患者に有効量の請求項３４ないし３７のいずれかに記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公表番号】特表２００６−５０６３６３（Ｐ２００６−５０６３６３Ａ）
【公表日】平成１８年２月２３日（２００６．２．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５４３８５４（Ｐ２００４−５４３８５４）
【出願日】平成１５年４月２３日（２００３．４．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００３／０００５７１
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０３５６０１
【国際公開日】平成１６年４月２９日（２００４．４．２９）
【出願人】（３０００６６８７４）ザ・ユニバーシティ・オブ・ブリティッシュ・コロンビア (24)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年２月２３日（２００６．２．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年４月２３日（２００３．４．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００３／０００５７１
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０３５６０１
【国際公開日】平成１６年４月２９日（２００４．４．２９）
【出願人】（３０００６６８７４）ザ・ユニバーシティ・オブ・ブリティッシュ・コロンビア (24)
【Ｆターム（参考）】
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