ＴＮＦα抗体および他の薬剤の使用
【課題】ＴＦＮα活性が有害である障害を、ヒトの腫瘍壊死因子α（ｈＴＮＦα）に特異的に結合するヒト抗体を用いて治療する方法の提供。
【解決手段】該抗体、好ましくは組み換え型ヒト抗体を、障害の治療に有用な、一種以上の他の薬剤と組み合わせて隔週で皮下投与することによって治療する方法。該抗体は、全長の抗体またはその抗原結合部分であることが好ましい。また医薬組成物および投与のための取扱説明書を含むキット。
【解決手段】該抗体、好ましくは組み換え型ヒト抗体を、障害の治療に有用な、一種以上の他の薬剤と組み合わせて隔週で皮下投与することによって治療する方法。該抗体は、全長の抗体またはその抗原結合部分であることが好ましい。また医薬組成物および投与のための取扱説明書を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）は、単球およびマクロファージを含めた非常に多くのタイプの細胞によって生産されるサイトカインであり、当初は特定のマウスの腫瘍の壊死を誘導するその能力に基づいて特定された（たとえばオールド，エル．（Ｏｌｄ，Ｌ．）、（１９８５） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：６３０−６３２を参照すること）。その後、悪液質と関係があるカケクチンと称される因子がＴＮＦαと同一の分子であることが示された。ＴＮＦαは、ショックの仲介に関係している（たとえば、ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．（Ｂｅｕｔｌｅｒ，Ｂ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９８８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５７：５０５−５１８；ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．、（１９８９）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：６２５−６５５を参照すること）。さらに、ＴＮＦαは、敗血症、感染症、自己免疫疾患、移植片の拒絶反応および移植片対宿主疾患を含めた他の種々のヒトの疾患および障害の病態生理に関係している（たとえば、バシリ，ピー．（Ｖａｓｉｌｌｉ，Ｐ．）、（１９９２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４１１−４５２；トレーシー，ケイ．ジェイ．およびセラミ，エイ．（Ｔｒａｃｅｙ，Ｋ．Ｊ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１−５０３を参照すること）。
【０００２】
種々のヒトの障害におけるヒトＴＮＦα（ｈＴＮＦα）の有害な役割のせいで、ｈＴＮＦα活性を阻害するかまたは打ち消すための治療計画が設計されてきた。とりわけ、ｈＴＮＦαと結合し、そしてそれを中和する抗体が、ｈＴＮＦα活性を阻害するための手段として求められてきた。このような抗体の最も初期のもののうちのいくつかは、マウスのモノクローナル抗体（ｍＡｂ）であり、このものは、ｈＴＮＦαで免疫化されたマウスのリンパ球から調製されたハイブリドーマによって分泌された（たとえば、ハーン，ティー（Ｈａｈｎ Ｔ）；ら、（１９８５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８２：３８１４−３８１８；リャン，シー−エム．（Ｌｉａｎｇ，Ｃ−Ｍ．）ら、（１９８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１３７：８４７−８５４；ヒライ，エム．（Ｈｉｒａｉ，Ｍ．）ら、（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ９６：５７−６２；フェンドリー，ビー．エム．（Ｆｅｎｄｌｙ，Ｂ．Ｍ．）ら、（１９８７）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ６：３５９−３７０；モラー，エイ．（Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ａ．）ら、（１９９０）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ２：１６２−１６９；モラーらの米国特許第５，２３１，０２４号；ウォーラック，ディー．（Ｗａｌｌａｃｈ，Ｄ．）による欧州特許公報第１８６ ８３３ Ｂ１号；オールドらによる欧州特許公開公報第２１８ ８６８ Ａ１号；モラー，エイ．らによる欧州特許公報第２６０ ６１０ Ｂ１号を参照すること）。多くの場合、これらのマウス抗ｈＴＮＦα抗体はｈＴＮＦαに対して高い親和性を示し（たとえばＫｄ≦１０−９Ｍ）、かつｈＴＮＦα活性を中和することができたのだが、これらのものをインビボで用いることは、マウスの抗体をヒトに投与することに伴う問題点（たとえば、血清中の半減期が短いこと、ヒトの特定のエフェクター機能を引き起こす能力を奪うこと、およびヒトにおけるマウス抗体に対する不必要な免疫応答（「ヒト抗マウス抗体」（ＨＡＭＡ）反応）を導くことなど）によって、制限を受けるのかもしれない。
【０００３】
ヒトにおいて完全なマウスの抗体を用いることに伴う問題点を克服しようとして、マウスの抗ｈＴＮＦα抗体の遺伝子を操作して、より「ヒトのような」ものにしてきた。たとえば、キメラ抗体（その抗体における抗体の鎖の可変領域がマウス由来のものであり、かつ抗体の鎖の定常領域がヒト由来のものである）が調製された（ナイト，ディー．エム（Ｋｎｉｇｈｔ，Ｄ．Ｍ）ら、（１９９３） Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１４４３−１４５３；ダッドナ，ピー．イー．（Ｄａｄｄｏｎａ，Ｐ．Ｅ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１６５５３号）。さらに、ヒト化抗体（その抗体における抗体の可変領域の超可変領域がマウス由来のものであるが、可変領域の残りと抗体の定常領域はヒト由来のものである）も調製された（アデア，ジェイ．アール．（Ａｄａｉｒ，Ｊ．Ｒ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１１３８３号）。しかしながら、これらのキメラ抗体およびヒト化抗体はそれでもなお、いくらかのマウスの配列を保持しているので、不必要な免疫反応を、特に長期間、たとえば慢性関節リウマチなどの慢性的な適応症のために投与する場合にはヒト抗キメラ抗体（ＨＡＣＡ）反応をやはり惹起するかもしれない（たとえば、エリオット，エム．ジェイ．（Ｅｌｌｉｏｔｔ，Ｍ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５−１１２７；エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１０５−１１１０を参照すること）。
【０００４】
マウスのｍＡｂまたはその誘導体（たとえばキメラ抗体またはヒト化抗体）に対する好ましいｈＴＮＦα阻害剤は、全体がヒト抗ｈＴＮＦα抗体である。というのは、たとえ長期間用いる場合であっても、このような薬剤はＨＡＭＡ反応を惹起すべきではないからである。ヒトのハイブリドーマ技術を利用して、ｈＴＮＦαに対するヒトモノクローナル自己抗体が調製された（ボイル，ピー．（Ｂｏｙｌｅ，Ｐ．）ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５５６−５６８；ボイル，ピー．ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５６９−５８１；ボイルらによる欧州特許公開公報第６１４ ９８４ Ａ２号）。しかしながら、これらのハイブリドーマ由来のモノクローナル自己抗体は、ｈＴＮＦαに対する親和性があまりにも弱いために従来法によって計算できないことが報告され、可溶性ｈＴＮＦαと結合する能力がなく、そしてｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性を中和する能力がなかった（上掲のボイルらを参照すること）。さらに、ヒトのハイブリドーマ技術が成功するかどうかは、ヒトの末梢血中の、ｈＴＮＦαに対して特異的な自己抗体を生産するリンパ球に関する自然の存在次第である。ある研究では、ヒトの被験体の血清においてｈＴＮＦαに対する自己抗体が検出された（フォムズガード，エイ．（Ｆｏｍｓｇａａｒｄ，Ａ．）ら、（１９８９）Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：２１９−２２３；ベンテン，ケイ．（Ｂｅｎｄｔｚｅｎ，Ｋ．）ら、（１９９０）Ｐｒｏｇ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．１０Ｂ：４４７−４５２）。それに対して他の研究では検出されなかった（ロイシュ，エイチ−ジー．（Ｌｅｕｓｃｈ，Ｈ−Ｇ．）ら、（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １３９：１４５−１４７）。
【０００５】
天然型のヒト抗ｈＴＮＦα抗体に代わるものとしては、組み換え型ｈＴＮＦα抗体がある。比較的親和性が弱く（すなわち、Ｋｄは約１０−７Ｍ）、かつ解離速度が速い（すなわち、Ｋｏｆｆは約１０−２ｓｅｃ−１）組み換え型ヒト抗体であってｈＴＮＦαと結合する組み換え型ヒト抗体が記載された（グリフィス，エイ．ディー．（Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ａ．Ｄ．）ら、（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ．１２：７２５−７３４）。しかしながら、これらの解離動態は比較的速いために、これらの抗体は治療用途には適さないかもしれない。さらに、ｈＴＮＦα活性を中和するどころか、むしろ細胞表面へのｈＴＮＦαの結合を促進し、かつｈＴＮＦαの内在化を促進するような組み換え型ヒト抗ｈＴＮＦαが記載された（リドバリー，エイ．（Ｌｉｄｂｕｒｙ，Ａ．）ら、（１９９４） Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．５：２７−４５；アストン，アール．（Ａｓｔｏｎ，Ｒ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０３１４５号）。
【０００６】
高い親和性で可溶性ｈＴＮＦαと結合し、解離動態が遅く、そして（インビトロおよびインビボでの）ｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性ならびにｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化を含めたｈＴＮＦα活性を中和する能力を有する組み換え型ヒト抗体も記載された（米国特許第６，０９０，３８２号を参照すること）。週に一回の頻度で抗体を静脈内に投与するための典型的なプロトコールを実施する。抗体および／または任意の薬剤を毎週投与することは、費用と手間がかかる可能性があり、そして結果的に、頻繁な投与によって副作用の頻度が増加する可能性がある。静脈内投与には、多くの場合その投与が誰かの医学訓練として行われるという制限もある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第５，２３１，０２４号
【特許文献２】欧州特許公報第１８６ ８３３ Ｂ１号
【特許文献３】欧州特許公開公報第２１８ ８６８ Ａ１号
【特許文献４】欧州特許公報第２６０ ６１０ Ｂ１号
【特許文献５】国際公開第９２／１６５５３号
【特許文献６】国際公開第９２／１１３８３号
【特許文献７】欧州特許公開公報第６１４ ９８４ Ａ２号
【特許文献８】国際公開第９２／０３１４５号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】オールド，エル．（Ｏｌｄ，Ｌ．）、（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：６３０−６３２
【非特許文献２】ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．（Ｂｅｕｔｌｅｒ，Ｂ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９８８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５７：５０５−５１８
【非特許文献３】ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．、（１９８９）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：６２５−６５５
【非特許文献４】バシリ，ピー．（Ｖａｓｉｌｌｉ，Ｐ．）、（１９９２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４１１−４５２
【非特許文献５】トレーシー，ケイ．ジェイ．およびセラミ，エイ．（Ｔｒａｃｅｙ，Ｋ．Ｊ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１−５０３
【非特許文献６】ハーン，ティー（Ｈａｈｎ Ｔ）；ら、（１９８５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８２：３８１４−３８１８
【非特許文献７】リャン，シー−エム．（Ｌｉａｎｇ，Ｃ−Ｍ．）ら、（１９８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１３７：８４７−８５４
【非特許文献８】ヒライ，エム．（Ｈｉｒａｉ，Ｍ．）ら、（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ９６：５７−６２
【非特許文献９】フェンドリー，ビー．エム．（Ｆｅｎｄｌｙ，Ｂ．Ｍ．）ら、（１９８７）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ６：３５９−３７０
【非特許文献１０】モラー，エイ．（Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ａ．）ら、（１９９０）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ２：１６２−１６９
【非特許文献１１】ナイト，ディー．エム（Ｋｎｉｇｈｔ，Ｄ．Ｍ）ら、（１９９３）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１４４３−１４５３
【非特許文献１２】エリオット，エム．ジェイ．（Ｅｌｌｉｏｔｔ，Ｍ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５−１１２７
【非特許文献１３】エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１０５−１１１０
【非特許文献１４】ボイル，ピー．（Ｂｏｙｌｅ，Ｐ．）ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５５６−５６８
【非特許文献１５】ボイル，ピー．ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５６９−５８１
【非特許文献１６】フォムズガード，エイ．（Ｆｏｍｓｇａａｒｄ，Ａ．）ら、（１９８９） Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：２１９−２２３
【非特許文献１７】ベンテン，ケイ．（Ｂｅｎｄｔｚｅｎ，Ｋ．）ら、（１９９０）Ｐｒｏｇ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．１０Ｂ：４４７−４５２
【非特許文献１８】ロイシュ，エイチ−ジー．（Ｌｅｕｓｃｈ，Ｈ−Ｇ．）ら、（１９９１） Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １３９：１４５−１４７
【非特許文献１９】グリフィス，エイ．ディー．（Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ａ．Ｄ．）ら、（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ．１２：７２５−７３４
【非特許文献２０】リドバリー，エイ．（Ｌｉｄｂｕｒｙ，Ａ．）ら、（１９９４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．５：２７−４５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、ＴＮＦαに関連する障害（たとえば、敗血症、自己免疫疾患（慢性関節リウマチ、アレルギー、多発性硬化症、自己免疫性糖尿病、自己免疫性ブドウ膜炎およびネフローゼ症候群など）、感染症、悪性腫瘍、移植片の拒絶反応または移植片対宿主疾患、肺疾患、骨疾患、腸疾患、中枢神経系の障害、心疾患）を治療するために、一種以上の薬剤と共に抗ＴＮＦα抗体を投与する方法を提供する。治療される自己免疫疾患としては、慢性関節リウマチが好ましい。
【００１０】
他の（単数または複数の）薬剤の投与の前に、投与と一緒にまたは投与後に、抗体を投与してもよい。本発明の方法は、抗体および他の（単数または複数の）薬剤のあらゆる投与順序、ならびにあらゆる投与手段を包含する。ＴＮＦαに関連する障害を治療するために隔週で投与する計画にて、好ましくは皮下経路を経て抗体を投与することが好ましい。
【００１１】
他の薬剤としては、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）もしくは非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、もしくはステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせが好ましい。ＤＭＡＲＤの好ましい例は、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤およびスルファサラジンである。これらの方法には、ヒト抗体を、別の治療剤（たとえば、他の標的と結合する一種以上のさらなる抗体（他のサイトカイン類と結合または細胞表面分子と結合する抗体など）、一種以上のサイトカイン類、可溶性ＴＮＦα受容体（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９４／０６４７６号を参照すること）、イミュネックス社（Ｉｍｍｕｎｅｘ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）のエタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標））およびセントコア社（Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．）のインフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標））および／またはｈＴＮＦαの生産または活性を阻害する一種以上の化学薬品（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１９７５１号に記載されているようなシクロヘキサン−イリデン誘導体））と共に、被験体に投与するという組合せ療法を利用することが包含される。
【００１２】
本発明の別の側面は、抗ＴＮＦα抗体および自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の薬剤ならびに医薬適合性の担体を含有する医薬組成物に関する。
【００１３】
本発明の別の側面は、抗ＴＮＦα抗体および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物、ならびに自己免疫疾患の治療に有用な薬剤および医薬適合性の担体をそれぞれ含有する一種以上の医薬組成物を含むキットに関する。あるいは、このキットは、抗ＴＮＦα抗体、自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の薬剤および医薬適合性の担体を含有する単一の医薬組成物を含む。このキットは、抗ＴＮＦα抗体の投与が有用である障害（たとえば自己免疫疾患、特に慢性関節リウマチ）の治療のための医薬組成物を投与するための取扱説明書、を含む。
【００１４】
抗体またはその抗原結合部分としては、ヒトＴＮＦαに特異的に結合する組み換え型ヒト抗体が好ましい。抗体としては、ヒトＴＮＦαに特異的に結合する組み換え型ヒト抗体が好ましい。本発明の抗体は、高い親和性でｈＴＮＦαに結合し、解離動態が遅く、そして（インビトロおよびインビボでの）ｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性およびｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化を含めたｈＴＮＦα活性を中和することを特徴とする。この抗体またはその抗原結合部分としては、共に表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｄが１×１０−８Ｍ以下かつＫｏｆｆ速度定数が１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離し、かつ標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−７Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和するものが好ましい。より好ましいものは、Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分であり、さらに好ましいものは、Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にて解離するものである。さらに好ましい単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分は、標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−８Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和するものであり、より好ましいものは、ＩＣ５０が１×１０−９Ｍ以下にて中和するものであり、特に好ましいものは、ＩＣ５０が１×１０−１０Ｍ以下にて中和するものである。抗体は全長（たとえばＩｇＧ１抗体またはＩｇＧ４抗体）であってもよく、または一つの抗原結合部分（たとえばＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ断片または単一のドメイン）のみを含むものであってもよい。本発明の最も好ましい組み換え型抗体（Ｄ２Ｅ７と称されるもの）は、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、および配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメインを有する。配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）とを有するＤ２Ｅ７抗体が好ましい。これらの抗体は米国特許第６，０９０，３８２号に記載されており、その全体が本明細書に参考として援用されている。
【００１５】
次の特徴：
ａ）表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｏｆｆが１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、または１番目、３番目、４番目、６番目、７番目、８番目および／または９番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメインを有する；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、または２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目、１１番目および／または１２番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメインを有する；
を有する抗体またはその抗原結合部分が好ましい。
【００１６】
Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がより好ましい。Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がさらに好ましい。
【００１７】
配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＬＣＶＲを、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＨＣＶＲと共に含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。ＬＣＶＲが配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメインをさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメインをさらに有することが、より好ましい。ＬＣＶＲが配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインをさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを有することが、さらに好ましい。
【００１８】
配列番号１のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲおよび配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲを含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。特定の実施態様においては、抗体はＩｇＧ１の重鎖定常領域またはＩｇＧ４の重鎖定常領域を有する。さらに別の実施態様においては、抗体はＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片または単鎖Ｆｖ断片である。
【００１９】
さらに他の実施態様においては、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効である障害を、一種以上の抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分を隔週で被験体に皮下投与することによって治療する方法が、本発明によって提供される。配列番号３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＬＣＶＲを含むか、または配列番号４、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＨＣＶＲと共に含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。
【００２０】
本発明の上記の実施態様のうちで最も好ましいものは、抗体がＤ２Ｅ７であって、４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与する実施態様である。一種以上の他の薬剤の投与量は、その有効投与量に従う。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明は、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効である障害を治療する方法であって、その障害が治療されるように、一種以上の他の薬剤と共に、高い親和性、遅い解離速度かつ高い中和能力にてヒトＴＮＦαと結合する単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を投与する工程を含む方法に関する。
【００２２】
本発明の理解がより容易となるように、特定の用語を最初に定義する。
【００２３】
本明細書で用いられる「投与すること」という用語は、治療目的（たとえばＴＮＦαに関連する障害の治療）を達成するために、物質（たとえば抗ＴＮＦα抗体）を投与することを意味する。
【００２４】
本明細書で用いられる「隔週で投与する計画」、「隔週で投与すること」、および「隔週投与」という用語は、治療目的（たとえばＴＮＦαに関連する障害の治療）を達成するために、物質（たとえば抗ＴＮＦα抗体）を被験体に投与することの時間的経過を意味する。隔週で投与する計画は、毎週投与する計画を包含することを意図しない。９〜１９日ごとに物質を投与することが好ましく、１１〜１７日ごとに投与することがより好ましく、１３〜１５日ごとに投与することがさらに好ましく、１４日ごとに投与することが特に好ましい。
【００２５】
本明細書で用いられる「組合せ療法」という用語は、二種以上の治療用物質（たとえば抗ＴＮＦα抗体とＤＭＡＲＤまたはＮＳＡＩＤなどの他の薬剤）を投与することを意味する。抗ＴＮＦα抗体の投与と同時に、投与の前に、または投与後に、他の（単数または複数の）薬剤を投与してもよい。
【００２６】
本明細書で用いられる「ヒトＴＮＦα」（本明細書ではｈＴＮＦαまたは単にｈＴＮＦと略記する）という用語は、１７ｋＤの分泌型および２６ｋＤの膜結合型として存在するヒトのサイトカインを意味する意図であり、このものの生物的に活性な形態は、１７ｋＤの分子が非共有的に結合した三量体からなる。ＴＮＦαの構造は、たとえば、ペニーカ，ディー．（Ｐｅｎｎｉｃａ，Ｄ．）ら、（１９８４）Ｎａｔｕｒｅ ３１２：７２４−７２９；デイビス，ジェイ．エム．（Ｄａｖｉｓ，Ｊ．Ｍ．）ら、（１９８７）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２６：１３２２−１３２６；およびジョーンズ，イー．ワイ．（Ｊｏｎｅｓ，Ｅ．Ｙ．）ら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３３８：２２５−２２８にさらに記載されている。ヒトＴＮＦαという用語は、組み換え型ヒトＴＮＦα（ｒｈＴＮＦα）を包含する意図であり、このものは、標準的な組み換え発現法によって調製することができ、または市販のもの（アール・アンド・ディー・システムズ（Ｒ ａｎｄ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）社、カタログ番号２１０−ＴＡ、ミネアポリス、ミネソタ州）を購入することができる。
【００２７】
本明細書で用いられる「抗体」という用語は、四本のポリペプチド鎖からなる免疫グロブリン分子を意味する意図であり、二本の重（Ｈ）鎖と二本の軽（Ｌ）鎖はジスルフィド結合によって相互に連結している。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＨＣＶＲまたはＶＨと略記する）および重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、三つのドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）からなる。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲまたはＶＬと略記する）および軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、一つのドメインであるＣＬからなる。ＶＨ領域およびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称するより保存性の高い領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する超可変領域にさらに細分することができる。それぞれのＶＨおよびＶＬは三つのＣＤＲと四つのＦＲからなり、アミノ末端からカルボキシ末端まで、次の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配列している。
【００２８】
本明細書で用いられる、抗体の「抗原結合部分」（または単に「抗体の一部分」）という用語は、抗原（たとえばｈＴＮＦα）と特異的に結合する能力を保持する抗体の一つ以上の断片を意味する。全長の抗体の断片によって、抗原と結合するという抗体の機能を発揮できることが示された。「抗原結合部分」という用語の範囲内に含まれる抗体の結合性断片の具体例としては、（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメインおよびＣＨ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって結合された二つのＦａｂ断片を含む二価の断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（ワード（Ｗａｒｄ）ら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が包含される。そのうえ、Ｆｖ断片の二つのドメインであるＶＬおよびＶＨは異なる遺伝子にコードされているが、ＶＬ領域およびＶＨ領域が組になって一価分子を形成するような単一のタンパク質鎖としてこれらを形成させることができる合成リンカーによって組み換え法を用いてこれらを結合することができる（この一価分子は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている；たとえば、バード（Ｂｉｒｄ）ら、（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；およびヒューストン（Ｈｕｓｔｏｎ）ら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３を参照すること）。このような単鎖抗体を、抗体の「抗原結合部分」という用語の範囲内に包含することも意図される。二重特異性抗体などの単鎖抗体の他の形態も包含される。二重特異性抗体（ｄｉａｂｏｄｙ）とは、二重に特異性を持つ二価の抗体であり、ここで、この中のＶＨドメインおよびＶＬドメインは単一のポリペプチド鎖上に発現しているが、同一の鎖上で二つのドメイン間での対形成ができないような極めて短いリンカーを用いることによって、これらのドメインを別の鎖の相補的なドメインと対形成させて二つの抗原結合部分が作られている（たとえば、ホリガー，ピー．（Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．）ら、（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４−６４４８；ポリャック，アール．ジェイ．（Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ２：１１２１−１１２３を参照すること）。
【００２９】
さらに、抗体またはその抗原結合部分は、より大きなイムノアドヘシン分子の一部でもよく、ここで、この分子は、抗体または抗体の一部分と、一種以上の他のタンパク質またはペプチドとが共有的にまたは非共有的に結合して形成されるものである。このようなイムノアドヘシン分子の具体例としては、四量体ｓｃＦｖ分子を作製するために用いられるストレプトアビジンのコア領域（キプリヤノフ，エス．エム．（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．）ら、（１９９５）Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ６：９３−１０１）、ならびにビオチン化された二価のｓｃＦｖ分子を作製するために用いられるシステイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端のポリヒスチジンタグ（キプリヤノフ，エス．エム．ら、（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８）が挙げられる。従来の技術（たとえば、抗体全体をそれぞれパパインまたはペプシンで消化すること）を用いて、抗体全体からＦａｂ断片およびＦ（ａｂ’）２断片などの抗体の一部分を調製することができる。さらに、上記のような標準的な組み換えＤＮＡ技術を用いて、抗体、抗体の一部分およびイムノアドヘシン分子を得ることができる。
【００３０】
本明細書で用いられる「ヒト抗体」という用語は、ヒトの生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を包含する意図である。本発明のヒト抗体には、例えばＣＤＲ、特にＣＤＲ３において、ヒトの生殖細胞系列の免疫グロブリン配列にコードされていないアミノ酸残基（たとえば、インビトロでのランダム突然変異または部位特異的突然変異によって導入された突然変異体、またはインビボでの体細胞変異によって導入された突然変異体）が含まれてもよい。しかしながら、本明細書で用いられる「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するその中のＣＤＲ配列がヒトのフレームワーク配列上にグラフトされた抗体を包含することは意図しない。
【００３１】
本明細書で用いられる「組み換え型ヒト抗体」という用語は、組み換え手段によって調製された、発現された、作製されたまたは単離されたすべてのヒト抗体（たとえば、宿主細胞内にトランスフェクトされた組み換え発現ベクターを用いて発現された抗体（下記のＩＩ部でさらに記載されている）、組み換え型ヒト抗体の組合せライブラリーから単離された抗体（下記のＩＩＩ部でさらに記載されている）、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックな動物（たとえばマウス）から単離された抗体（たとえばテイラー，エル．ディー．（Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．Ｄ．）ら、（１９９２）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０：６２８７−６２９５を参照すること））または、他のＤＮＡ配列に対するヒトの免疫グロブリンの遺伝子配列のスプライシングを含む、他のあらゆる手段によって調製された、発現された、作製されたまたは単離された抗体を包含する意図である。このような組み換え型ヒト抗体は、ヒトの生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する。しかしながら、特定の実施態様においては、このような組み換え型ヒト抗体をインビトロでの突然変異誘発に付して（またはヒトＩｇ配列についてのトランスジェニック動物を用いる場合はインビボの体細胞変異誘発に付して）、それによって組み換え型抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域のアミノ酸配列を、ヒトの生殖細胞系列のＶＨ配列およびＶＬ配列に由来し、それらに関連するものであると同時に、インビボでの天然のヒト抗体の生殖細胞系列のレパートリーの範囲内には存在しないかもしれない配列とする。
【００３２】
本明細書で用いられる「単離された抗体」とは、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を意味する意図である（たとえば、単離された、ｈＴＮＦαと特異的に結合する抗体は、ｈＴＮＦα以外の抗原と特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、単離された、ｈＴＮＦαと特異的に結合する抗体は、他の抗原（たとえば（下記にてより詳細に検討される）他の種に由来するｈＴＮＦα分子）に対する交差反応性を有してもよい。さらに、単離された抗体は、他の細胞性成分および／または化合物を実質的に含まない。
【００３３】
本明細書で用いられる「中和抗体」（または「ｈＴＮＦα活性を中和する抗体」）とは、それがｈＴＮＦαと結合すると、ｈＴＮＦαの生物活性の阻害を生ずる抗体を意味する意図である。ｈＴＮＦαの生物活性の一種以上の指標（たとえば、（インビトロまたはインビボのいずれかにおける）ｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性、ｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化、およびｈＴＮＦα受容体に対するｈＴＮＦαの結合性）を測定することによって、ｈＴＮＦαの生物活性のこの阻害を評価することができる。当該技術分野で公知のインビトロまたはインビボでの数種のアッセイ（米国特許第６，０９０，３８２号を参照すること）のうちの一種以上によって、ｈＴＮＦαの生物活性のこれらの指標を評価することができる。ｈＴＮＦαに誘導されるＬ９２９細胞の細胞毒性の阻害によって、ｈＴＮＦα活性を中和する抗体の能力を評価することが好ましい。ｈＴＮＦα活性の追加のまたは代替的なパラメータとして、ｈＴＮＦαに誘導されるＨＵＶＥＣ上でのＥＬＡＭ−１の発現を阻害する抗体の能力を、ｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化の指標と同様に評価することができる。
【００３４】
本明細書で用いられる「表面プラズモン共鳴」という用語は、ある光学現象を意味し、この光学現象によって、バイオセンサー・マトリクス内のタンパク質濃度の変化を検出することによる生物特異的相互作用のリアルタイム分析が可能となる。たとえば、ＢＩＡｃｏｒｅシステム（ファルマシア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）社のＢｉｏｓｅｎｓｏｒ ＡＢ、ウプサラ、スウェーデンおよびピスカタウェイ、ニュージャージー州）が用いられる。さらなる説明については、実施例１、ならびにイェンソン，ユー．（Ｊｏｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．）ら、（１９９３）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９−２６；イェンソン，ユー．ら、（１９９１）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １１：６２０−６２７；ジョンソン，ビー．（Ｊｏｈｎｓｓｏｎ，Ｂ．）ら、（１９９５）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．８：１２５−１３１；およびジョンソン，ビー．ら、（１９９１）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８：２６８−２７７を参照すること。
【００３５】
本明細書で用いられる「Ｋｏｆｆ」という用語は、抗体／抗原複合体から解離する抗体についての解離速度定数を意味する意図である。
【００３６】
本明細書で用いられる「Ｋｄ」という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の解離定数を意味する意図である。
【００３７】
本明細書で用いられる「核酸分子」という用語は、ＤＮＡ分子およびＲＮＡ分子を包含する意図である。核酸分子は一本鎖でもまたは二本鎖でもよいが、二本鎖ＤＮＡが好ましい。
【００３８】
ｈＴＮＦαと結合する抗体または抗体の一部分（たとえばＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ３）をコードする核酸に関連して、本明細書で用いられる「単離された核酸分子」という用語は、その中の抗体または抗体の一部分をコードするヌクレオチド配列が、ｈＴＮＦα以外の抗原と結合する抗体または抗体の一部分をコードする他のヌクレオチド配列を含んでいない核酸分子を意味する意図であり、ここで、他の配列とは、ヒトのゲノムＤＮＡにおいて天然の状態でその核酸に隣接しているかもしれない配列である。したがって、たとえば、抗ｈＴＮＦα抗体のＶＨ領域をコードする本発明の単離された核酸は、ｈＴＮＦα以外の抗原と結合する他のＶＨ領域をコードする他のいかなる配列も含まない。
【００３９】
本明細書で用いられる「ベクター」という用語は、それに連結した別の核酸を輸送する能力を有する核酸分子を意味する意図である。ベクターの一つのタイプは「プラスミド」であり、このものは、追加のＤＮＡセグメントがその中に連結されてもよい環状の二本鎖ＤＮＡループという意味である。別のタイプのベクターはウイルスベクターであり、ここでは、ウイルスゲノム内に追加のＤＮＡセグメントが連結され得る。特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞内で自律複製する能力を有する（たとえば、細菌の複製起点と哺乳動物のエピソームベクターを有する細菌ベクター）。宿主細胞内への導入時に、宿主細胞のゲノム内に他のベクター（たとえば哺乳動物の非エピソームベクター）を組み込むことができ、それによって、宿主ゲノムと共に複製される。さらに、特定のベクターは、それに機能的に連結する遺伝子の発現を導く能力を有する。本明細書では、このようなベクターを「組み換え発現ベクター」（または単に「発現ベクター」）と称する。一般的に、組み換えＤＮＡ技術において役立つ発現ベクターは、プラスミドの形態であることが多い。プラスミドは最も広く用いられるベクターの形態なので、本明細書において、「プラスミド」と「ベクター」とを相互に交換して用いてもよい。しかしながら、本発明は、ウイルスベクター（たとえば、複製能を欠損したレトロウイルス、アデノウイルスおよびアデノ関連ウイルス）などの他の形態の発現ベクターを包含することを意図し、これらのものは等価な機能を果たす。
【００４０】
本明細書で用いられる「組み換え宿主細胞」（または単に「宿主細胞」）という用語は、その中に組み換え発現ベクターが導入された細胞を意味する意図である。このような用語は、特定の対象細胞だけではなく、そのような細胞の子孫をも意味する意図であることを理解すべきである。突然変異または環境の影響のいずれかによる特定の修飾が、後の世代では生じてもよいので、実際のところ、このような子孫は親細胞と同一ではないかもしれないが、それでもなお本明細書で用いられる「宿主細胞」という用語の範囲内に包含される。
【００４１】
本発明の種々の側面を、ここにより詳細に説明する。
【００４２】
本発明によって、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効である障害を治療する方法が提供される。これらの方法には、高い親和性でヒトＴＮＦαと結合し、解離速度が遅く、そしてそれを中和する能力が高い、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を、自己免疫疾患、とりわけ慢性関節リウマチの治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に隔週で皮下投与することが挙げられる。本発明のヒト抗体は、組み換え型ヒト抗ｈＴＮＦα中和抗体であることが好ましい。本発明の組み換え型中和抗体としては、本明細書でＤ２Ｅ７（Ｄ２Ｅ７ ＶＬ領域のアミノ酸配列を配列番号１に示す；Ｄ２Ｅ７ ＶＨ領域のアミノ酸配列を配列番号２に示す）と称されるものが最も好ましく、このものを４０ｍｇの投与量で投与する。Ｄ２Ｅ７の特性は、サルフェルド（Ｓａｌｆｅｌｄ）ら、米国特許第６，０９０，３８２号に記載されており、このものは、本明細書中に参考として援用されている。
【００４３】
一つの側面において、本発明は、抗ＴＮＦα抗体および自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤を投与することが有効である障害の治療に関する。これらの治療としては、Ｄ２Ｅ７抗体およびその抗体の一部分、Ｄ２Ｅ７に関係がある抗体およびその抗体の一部分、ならびにＤ２Ｅ７と等価の特性（たとえば、高い親和性でｈＴＮＦαと結合し、解離動態が遅く、そして中和能力が高いこと）を有する他のヒト抗体およびその抗体の一部分を隔週で皮下投与することが挙げられる。一つの実施態様においては、共に表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｄが１×１０−８Ｍ以下かつＫｏｆｆ速度定数が１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離し、かつ標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−７Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を用いての治療が、本発明によって提供される。Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分がより好ましく、または、Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にて解離するものがより好ましい。標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−８Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分がより好ましく、ＩＣ５０が１×１０−９Ｍ以下にて中和するものがさらに好ましく、ＩＣ５０が１×１０−１０Ｍ以下にて中和するものがなお一層好ましい。好ましい実施態様においては、抗体は単離された組み換え型ヒト抗体またはその抗原結合部分である。
【００４４】
抗体の重鎖のＣＤＲ３ドメインおよび軽鎖のＣＤＲ３ドメインが、抗原についての抗体の結合特異性／親和性において重要な役割を果たすことは、当該技術分野においては周知である。その結果、別の側面において、本発明は、ｈＴＮＦαとの会合についての解離動態が遅いヒト抗体であって、かつＤ２Ｅ７のそれらと構造的に同一かまたは関連する軽鎖のＣＤＲ３ドメインおよび重鎖のＣＤＲ３ドメインを有するヒト抗体を皮下投与することによって、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効であるの障害を治療する方法に関する。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３の９番目の位置を、Ｋｏｆｆに実質的な影響を与えることなくＡｌａまたはＴｈｒで占有することができる。その結果、Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３についてのコンセンサスモチーフは、アミノ酸配列：Ｑ−Ｒ−Ｙ−Ｎ−Ｒ−Ａ−Ｐ−Ｙ−（Ｔ／Ａ）（配列番号３）を含む。さらに、Ｄ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３の１２番目の位置を、Ｋｏｆｆに実質的な影響を与えることなくＴｙｒまたはＡｓｎで占有することができる。その結果、Ｄ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３についてのコンセンサスモチーフは、アミノ酸配列：Ｖ−Ｓ−Ｙ−Ｌ−Ｓ−Ｔ−Ａ−Ｓ−Ｓ−Ｌ−Ｄ−（Ｙ／Ｎ）（配列番号４）を含む。さらに、実施例２で示されるように、Ｄ２Ｅ７の重鎖および軽鎖のＣＤＲ３ドメインは、Ｋｏｆｆの実質的な影響を伴わず、（ＶＬ ＣＤＲ３内の１番目、４番目、５番目、７番目または８番目の位置において、またはＶＨ ＣＤＲ３内の２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目または１１番目の位置において）ただ一つのアラニン残基による置換を受けやすい。さらに、Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよびＶＨ ＣＤＲ３ドメインがアラニンによる置換を受けやすいことを考えれば、抗体の解離速度定数がなお小さいまま、ＣＤＲ３ドメイン内の他のアミノ酸の置換、とりわけ同類アミノ酸による置換が可能かもしれないことを、当業者であれば理解する。本明細書で用いられる「同類アミノ酸の置換」とは、あるアミノ酸残基が類似の側鎖を有する別のアミノ酸残基で置き換えられる置換である。当該技術分野においては、類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーが規定されており、塩基性側鎖（たとえば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（たとえば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（たとえば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（たとえば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β分岐側鎖（たとえば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（たとえば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が含まれる。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよび／またはＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３ドメイン内で、多くても１から５個の同類アミノ酸の置換がなされることが好ましい。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよび／またはＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３ドメイン内で、多くても１から３個の同類アミノ酸の置換がなされることがより好ましい。さらに、ｈＴＮＦαとの結合に決定的な位置のアミノ酸において、同類アミノ酸の置換がなされるべきではない。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３の２番目および５番目の位置、ならびにＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３の１番目および７番目の位置は、ｈＴＮＦαとの相互作用のために決定的であるように思われる。したがって、これらの位置において、同類アミノ酸の置換がなされないことが好ましい（Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３の５番目の位置におけるアラニンの置換は、上記のように許容し得るが）（米国特許第６，０９０，３８２号を参照すること）。
【００４５】
その結果、別の実施態様においては、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を隔週で皮下投与することによって、自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、抗ＴＮＦα抗体を投与することが有効である障害を治療する方法が、本発明によって提供される。抗体またはその抗原結合部分は次の特徴を含むことが好ましい：
ａ）表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｏｆｆ速度定数が１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、または１番目、３番目、４番目、６番目、７番目、８番目および／または９番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメインを有する；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、または２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目、１１番目および／または１２番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメインを有する。
【００４６】
Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がより好ましい。Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がさらに好ましい。
【００４７】
さらに好ましい実施態様においては、配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置のただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と共に含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。ＬＣＶＲが配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ２）をさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ２）をさらに有することが、好ましい。ＬＣＶＲが配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ１）をさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ１）を有することが、さらに好ましい。ＶＬについてのフレームワーク領域はＶκＩヒト生殖細胞系列ファミリーに由来するものが好ましく、Ａ２０ヒト生殖細胞系列Ｖｋ遺伝子に由来するものがより好ましく、米国特許第６，０９０，３８２号の図１Ａおよび図１Ｂに示されるＤ２Ｅ７ ＶＬフレームワーク配列に由来するものが特に好ましい。ＶＨについてのフレームワーク領域は、ＶＨ３ヒト生殖細胞系列ファミリーに由来するものが好ましく、ＤＰ−３１ヒト生殖細胞系列のＶＨ遺伝子に由来するものがより好ましく、米国特許第６，０９０，３８２号の図２Ａおよび図２Ｂに示されるＤ２Ｅ７ ＶＨフレームワーク配列に由来するものが特に好ましい。
【００４８】
さらに別の実施態様においては、配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＬ）および配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＨ）を含む抗体またはその抗原結合部分が好ましい。特定の実施態様においては、抗体は重鎖定常領域（たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤの定常領域）を含む。重鎖定常領域がＩｇＧ１の重鎖定常領域またはＩｇＧ４の重鎖定常領域であることが好ましい。そのうえ、抗体は軽鎖定常領域、すなわちκ軽鎖定常領域またはλ軽鎖定常領域のいずれかを含むことができる。κ軽鎖定常領域を含む抗体が好ましい。あるいは、抗体の一部分は、たとえばＦａｂ断片または単鎖Ｆｖ断片であってもよい。
【００４９】
さらに他の実施態様においては、Ｄ２Ｅ７に関係があるＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよびＶＨ ＣＤＲ３ドメイン（たとえば、配列番号３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５および配列番号２６からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を伴うか、または、配列番号４、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を伴う、抗体またはその抗原結合部分）を含む抗体またはその抗原結合部分が好ましい。
【００５０】
本発明の抗体または抗体の一部分を、別の機能的分子（たとえば別のペプチドまたはタンパク質）に誘導体化させるかまたはそれに結合させることができる。その結果、本発明の抗体および抗体の一部分には、本明細書に記載された、イムノアドヘシン分子を含むヒト抗ｈＴＮＦα抗体の誘導体化された形態および他の修飾された形態を含める意図である。たとえば、本発明の抗体または抗体の一部分を、一種以上の他の分子的実体（たとえば、別の抗体（二重に特異性を持つ抗体すなわち二重特異性抗体など）、検出可能な薬剤、細胞毒性薬剤、医薬、および／または抗体もしくは抗体の一部分と別の分子（ストレプトアビジンのコア領域またはポリヒスチジンタグなど）との会合を仲介する能力を持つタンパク質もしくはペプチド）に（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有的会合または他の方法によって）機能的に結合させることができる。
【００５１】
（たとえば二重に特異性を持つ抗体を作製するために、同じタイプまたは異なるタイプの）二以上の抗体を架橋することによって、誘導体化された抗体の一つのタイプを作製する。適切な架橋剤としては、適切なスペーサーによって分離された二種の別個の反応性基を有するヘテロ二官能性のもの（たとえばｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、またはホモ二官能性のもの（たとえばスベリン酸ジスクシンイミジル）が挙げられる。このようなリンカーは、ピアース・ケミカル社（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）、ロックフォード、イリノイ州から入手できる。
【００５２】
それによって本発明の抗体または抗体の一部分を誘導体化してもよい、有用な検出用薬剤としては、蛍光性化合物が挙げられる。蛍光性の検出用薬剤の具体例としては、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、５−ジメチルアミン−１−ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリトリンなどが挙げられる。検出可能な酵素によって抗体を誘導体化してもよく、たとえば、アルカリホスファターゼ、ホースラディシュペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼなどがある。検出可能な酵素で抗体を誘導体化する場合、その酵素によって利用され、検出可能な反応生成物を生産する追加の試薬を添加することによってそれを検出する。たとえば、検出用薬剤のホースラディシュペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素およびジアミノベンジジンを添加することによって有色の反応生成物を導く。この生成物は検出可能なものである。ビオチンを用いて抗体を誘導体化してもよく、アビジンまたはストレプトアビジンの結合を間接的に測定することを介して検出する。
【００５３】
宿主細胞内で免疫グロブリンの軽鎖遺伝子および重鎖遺伝子を組み換え発現させることによって、本発明の抗体または抗体の一部分を調製することができる。抗体を組み的に換え発現させるために、その抗体の免疫グロブリンの軽鎖および重鎖をコードするＤＮＡ断片を保持する一種以上の組み換え発現ベクターを用いて、軽鎖および重鎖が宿主細胞内で発現するようなやり方で、好ましくは宿主細胞が培養されている培地内に分泌されるようなやり方で、宿主細胞をトランスフェクトし、そしてその培地から抗体を回収することができる。標準的な組み換えＤＮＡの方法論を用いて、抗体の重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子を得、これらの遺伝子を組み換え発現ベクター内に組み込み、そして宿主細胞内にベクターを導入する。これらは、たとえば、サムブロック、フリッチュおよびマニアティス（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉａｔｉｓ）ら（編）、分子クローニング；実験の手引き（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ；Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ）、第二版、コールド・スプリング・ハーバー、ニューヨーク、（１９８９）、オースベル，エフ．エム．（Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．）ら（編）、分子生物学の最新のプロトコール（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、グリーン・パブリッシング・アソシエイツ（Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ）、（１９８９）およびボス（Ｂｏｓｓ）らによる米国特許第４，８１６，３９７号に記載されている。
【００５４】
Ｄ２Ｅ７またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体を発現させるためには、軽鎖および重鎖の可変領域をコードするＤＮＡ断片をまず最初に得る。ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を利用して生殖細胞系列の軽鎖および重鎖の可変配列を増複し、そして修飾することによって、これらのＤＮＡを得ることができる。ヒトの重鎖可変領域の遺伝子および軽鎖可変領域の遺伝子についての生殖細胞系列のＤＮＡ配列は、当該技術分野において公知である（たとえば「Ｖｂａｓｅ」ヒトの生殖細胞系列の配列のデータベースを参照すること；さらに、カバット，イー．エイ．（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．）ら、（１９９１）、免疫学的に興味深いタンパク質の配列（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ）、第五版、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ公報第９１−３２４２号；トムリンソン，アイ．エム．（Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，Ｉ．Ｍ．）ら、（１９９２）、「ヒト生殖細胞系列のＶＨ配列のレパートリーから、異なる超可変ループを有する約５０グループのＶＨセグメントが明らかにされる（Ｔｈｅ Ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｒｍｌｉｎｅ ＶＨ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ Ｒｅｖｅａｌｓ ａｂｏｕｔ Ｆｉｆｔｙ Ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ＶＨ Ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ Ｌｏｏｐｓ）」、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：７７６−７９８；およびコックス，ジェイ．ピー．エル．（Ｃｏｘ，Ｊ．Ｐ．Ｌ．）ら、（１９９４）、「ヒトの生殖細胞系列Ｖ７８セグメントのディレクトリーから、それらの使用における強い偏りが明らかにされる（Ａ Ｄｉｒｅｃｔｏｒｙ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｒｍ−ｌｉｎｅ Ｖ７８ Ｓｅｇｍｅｎｔｓ Ｒｅｖｅａｌｓ ａ Ｓｔｒｏｎｇ Ｂｉａｓ ｉｎ ｔｈｅｉｒ Ｕｓａｇｅ）」、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：８２７−８３６を参照すること；これらのもののそれぞれの内容は、参照して本明細書に明確に組み込まれる）。Ｄ２Ｅ７の重鎖可変領域またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体の重鎖可変領域をコードするＤＮＡ断片を得るためには、標準的なＰＣＲによって、ヒトの生殖細胞系列のＶＨ遺伝子のＶＨ３ファミリーのメンバーを増幅する。生殖細胞系列のＤＰ−３１ ＶＨの配列を増幅することが最も好ましい。Ｄ２Ｅ７の軽鎖可変領域またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体の軽鎖可変領域をコードするＤＮＡ断片を得るためには、標準的なＰＣＲによって、ヒトの生殖細胞系列のＶＬ遺伝子のＶκＩファミリーのメンバーを増幅する。Ａ２０ ＶＬ生殖細胞系列の配列を増幅することが最も好ましい。上記の参考文献に開示されたヌクレオチド配列に基づいて、標準的な方法を用いて、ＤＰ−３１生殖細胞系列のＶＨの配列およびＡ２０生殖細胞系列のＶＬの配列の増幅に用いることに適したＰＣＲプライマーを設計することができる。
【００５５】
生殖細胞系列のＶＨ断片およびＶＬ断片を一旦得れば、これらの配列を変異させて、Ｄ２Ｅ７のアミノ酸配列または本明細書に開示されたＤ２Ｅ７に関係があるアミノ酸配列をコードさせることができる。まず最初に、生殖細胞系列のＶＨのＤＮＡ配列およびＶＬのＤＮＡ配列によってコードされるアミノ酸配列を、Ｄ２Ｅ７のＶＨのアミノ酸配列およびＶＬのアミノ酸配列、またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらの配列と比較して、Ｄ２Ｅ７の配列またはＤ２Ｅ７に関係がある配列内の、生殖細胞系列とは異なるアミノ酸残基を同定する。次いで、どのヌクレオチドが変化すべきなのかを決定するために遺伝暗号を利用して、生殖細胞系列のＤＮＡ配列のうちの適切なヌクレオチドを、変異した生殖細胞系列の配列がＤ２Ｅ７のアミノ酸配列またはＤ２Ｅ７に関係があるアミノ酸配列をコードするように変異させる。標準的な方法（たとえば、ＰＣＲを介する変異誘発法（ここでは、ＰＣＲ産物が変異を含むように、変異を受けたヌクレオチドをＰＣＲプライマーの中に組み込む）または部位特異的突然変異法）によって、生殖細胞系列の配列の変異を誘発する。
【００５６】
（上記のように生殖細胞系列のＶＨ遺伝子およびＶＬ遺伝子を増幅し変異を誘発することによって）Ｄ２Ｅ７のＶＨセグメントおよびＶＬセグメント、またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらセグメントをコードするＤＮＡ断片を一旦得れば、標準的な組み換えＤＮＡ技術によってこれらのＤＮＡ断片をさらに操作して、たとえば、可変領域の遺伝子を全長の抗体の鎖の遺伝子に、Ｆａｂ断片の遺伝子に、またはｓｃＦｖの遺伝子に転換することができる。これらの操作においては、ＶＬをコードするＤＮＡ断片またはＶＨをコードするＤＮＡ断片が、別のタンパク質（たとえば抗体の定常領域またはフレキシブルリンカー）をコードする別のＤＮＡ断片に機能的に結合される。この文脈で用いられる「機能的に結合される」という用語は、二つのＤＮＡ断片によってコードされたアミノ酸配列がインフレームの状態のままであるように、その二つのＤＮＡ断片が結合されることを意味する意図である。
【００５７】
ＶＨをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）をコードする別のＤＮＡ分子に機能的に結合することによって、ＶＨ領域をコードする単離されたＤＮＡを重鎖の全長遺伝子に転換することができる。ヒトの重鎖定常領域の遺伝子配列は当該技術分野において公知であり（たとえばカバット，イー．エイ．ら、（１９９１）、免疫学的に興味深いタンパク質の配列、第五版、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ公報第９１−３２４２号を参照すること）、そして標準的なＰＣＲ増幅法によって、これらの領域を含むＤＮＡ断片を得ることができる。重鎖定常領域はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤの定常領域であり得るが、ＩｇＧ１の定常領域またはＩｇＧ４の定常領域が最も好ましい。Ｆａｂ断片の重鎖遺伝子については、重鎖のＣＨ１の定常領域のみをコードする別のＤＮＡ分子に、ＶＨをコードするＤＮＡを機能的に結合すればよい。
【００５８】
ＶＬをコードするＤＮＡを、軽鎖定常領域であるＣＬをコードする別のＤＮＡ分子に機能的に結合することによって、ＶＬ領域をコードする単離されたＤＮＡを軽鎖の全長の遺伝子（ならびにＦａｂの軽鎖の遺伝子）に転換することができる。ヒトの軽鎖定常領域の遺伝子配列は当該技術分野において公知であり（たとえばカバット，イー．エイ．ら、（１９９１）、免疫学的に興味深いタンパク質の配列、第五版、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ公報第９１−３２４２号を参照すること）、そして標準的なＰＣＲ増幅法によって、これらの領域を含むＤＮＡ断片を得ることができる。軽鎖定常領域はκの定常領域またはλの定常領域であり得るが、κの定常領域が最も好ましい。
【００５９】
ｓｃＦｖ遺伝子を作製するためには、フレキシブルリンカーによって結合されたＶＬ領域およびＶＨ領域を有する、連続的な一本鎖タンパク質としてＶＨ配列およびＶＬ配列が発現できるように、ＶＨをコードするＤＮＡ断片およびＶＬをコードするＤＮＡ断片を、フレキシブルリンカーをコードする（たとえばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３をコードする）別の断片に機能的に結合する（たとえば、バードら、（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；ヒューストンら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３；マッカフェティー（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ）ら、Ｎａｔｕｒｅ（１９９０）３４８：５５２−５５４を参照すること）。
【００６０】
本発明の抗体または抗体の一部分を発現させるためには、上記のようにして得られる軽鎖および重鎖の一部または全長をコードする複数のＤＮＡを、その遺伝子が転写調節配列および翻訳調節配列に機能的に結合するように発現ベクター内に挿入する。この文脈において、「機能的に結合される」という用語は、ベクター内の転写調節配列および翻訳調節配列が、抗体遺伝子の転写および翻訳を調節するというそれらの意図された機能を果たすように、抗体遺伝子がベクター内に連結されることを意味する意図である。発現に用いる宿主細胞に適合する発現ベクターおよび発現調節配列を選択する。抗体の軽鎖の遺伝子および抗体の重鎖の遺伝子を別個のベクター内に挿入することができ、または、より一般的には、両方の遺伝子を同じ発現ベクター内に挿入する。標準的な方法（たとえば、抗体遺伝子断片上およびベクター上の相補的な制限酵素認識部位のライゲーション、または制限酵素認識部位が存在しない場合は平滑末端ライゲーション）によって、抗体遺伝子を発現ベクター内に挿入する。Ｄ２Ｅ７の軽鎖配列もしくは重鎖配列またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらの配列を挿入する前に、発現ベクターが抗体の定常領域の配列を既に保持していてもよい。たとえば、Ｄ２Ｅ７のＶＨ配列およびＶＬ配列またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらの配列を抗体の全長遺伝子に転換する一つのアプローチは、ベクター内の（単数または複数の）ＣＨセグメントにＶＨセグメントが機能的に結合するように、かつベクター内のＣＬセグメントにＶＬセグメントが機能的に結合するように、重鎖定常領域および軽鎖定常領域のそれぞれを既にコードしている発現ベクター内にそれらの配列を挿入するというものである。さらにまたはあるいは、組み換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を促進するシグナルペプチドをコードすることができる。シグナルペプチドがインフレームで抗体鎖遺伝子のアミノ末端に結合するように、この抗体鎖の遺伝子をベクター内にクローニングすることができる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンのシグナルペプチドまたは異種のシグナルペプチド（すなわち非免疫グロブリンタンパク質に由来するシグナルペプチド）であり得る。
【００６１】
抗体鎖の遺伝子に加えて、本発明の組み換え発現ベクターは、宿主細胞での抗体鎖の遺伝子の発現を調節する調節配列を保持する。「調節配列」という用語は、プロモーター、エンハンサー、および抗体鎖の遺伝子の転写または翻訳を調節する他の発現調節エレメント（たとえばポリアデニル化シグナル）を包含する意図である。このような調節配列は、たとえば、ゲッデル（Ｇｏｅｄｄｅｌ）；遺伝子発現の技術（Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）：酵素学の方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ）１８５、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）社、サンディエゴ、カリフォルニア州（１９９０）に記載されている。調節配列の選択を含めた発現ベクターの設計は、形質転換を受ける宿主細胞の選択、所望のタンパク質の発現レベルなどのような因子によって決定されてもよいことを、当業者であれば認識できる。哺乳動物の宿主細胞の発現にとって好ましい調節配列としては、哺乳動物細胞においてタンパク質発現を高レベルに導くウイルスのエレメント（たとえば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に由来するプロモーターおよび／またはエンハンサー（ＣＭＶプロモーター／エンハンサーなど）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）に由来するもの（ＳＶ４０プロモーター／エンハンサーなど）、アデノウイルスに由来するもの（アデノウイルス主要後期プロモーター（ＡｄＭＬＰ）など）ならびにポリオーマウイルス）が挙げられる。ウイルスの調節エレメントおよびその配列についてのさらなる記載は、たとえば、スティンスキ（Ｓｔｉｎｓｋｉ）による米国特許第５，１６８，０６２号、ベル（Ｂｅｌｌ）らによる米国特許第４，５１０，２４５号およびシャフナー（Ｓｃｈａｆｆｎｅｒ）らによる米国特許第４，９６８，６１５号を参照すること。
【００６２】
抗体鎖の遺伝子および調節配列に加えて、本発明の組み換え発現ベクターは、追加の配列（たとえば、宿主細胞内でベクターの複製を調節する配列（複製起点など）および選択マーカー遺伝子）を保持してもよい。選択マーカー遺伝子によって、その中にベクターが導入された宿主細胞の選択が容易になる（たとえば、すべてがアクセル（Ａｘｅｌ）らによる米国特許第４，３９９，２１６号、第４，６３４，６６５号および第５，１７９，０１７号を参照すること）。たとえば、一般的に選択マーカー遺伝子は、薬剤（たとえば、Ｇ４１８、ハイグロマイシンまたはメトトレキサート）に対する抵抗性を、その中にベクターが導入された宿主細胞に与える。好ましい選択マーカー遺伝子としては、（メトトレキサートによるｄｈｆｒ−宿主細胞の選択／増幅に用いるための）ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子および（Ｇ４１８選択のための）ｎｅｏ遺伝子が挙げられる。
【００６３】
軽鎖および重鎖の発現のためには、重鎖および軽鎖をコードする（単数または複数の）発現ベクターを、標準的な技術によって宿主細胞内にトランスフェクトする。「トランスフェクション」という用語の種々の形態は、外因性ＤＮＡを原核生物の宿主細胞内または真核生物の宿主細胞内に導入するために一般的に用いられている広範囲の技術（たとえば、エレクトロポレーション法、リン酸カルシウム沈殿法、ＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクト法など）を包含する意図である。原核生物の宿主細胞または真核生物の宿主細胞のいずれかにおいて本発明の抗体を発現させることは理論上はあり得るが、真核生物の細胞内で、特に好ましくは哺乳動物の宿主細胞内で抗体を発現させることが最も好ましい。というのは、このような真核生物の細胞、とりわけ哺乳動物細胞は、原核生物の細胞よりも、正確に折りたたまれた免疫学的に活性な抗体を構築し分泌しやすいからである。活性な抗体を高い収率で生産することにとって、原核生物での抗体遺伝子の発現は効果的ではないことが報告された（ボス，エム．エイ．およびウッド，シー．アール．（Ｂｏｓｓ，Ｍ．Ａ．ａｎｄ Ｗｏｏｄ，Ｃ．Ｒ．）、（１９８５）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ６：１２−１３）。
【００６４】
本発明の組み換え型抗体の発現にとって好ましい哺乳動物の宿主細胞としては、（たとえばアール・ジェイ・カウフマンおよびピー・エイ・シャープ（Ｒ．Ｊ．Ｋａｕｆｍａｎ ａｎｄ Ｐ．Ａ．Ｓｈａｒｐ）、（１９８２）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１−６２１に記載されたようなＤＨＦＲ選択マーカー遺伝子を一緒に用いる、ウルラウブおよびチェイスン（Ｕｒｌａｕｂ ａｎｄ Ｃｈａｓｉｎ）、（１９８０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６−４２２０に記載されたｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む）チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）、ＮＳ０ミエローマ細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞が挙げられる。抗体遺伝子をコードする組み換え発現ベクターを哺乳動物の宿主細胞内に導入する場合、宿主細胞内で抗体の発現が可能となるのに十分な時間、またはより好ましくはその中で宿主細胞が成長する培地内に抗体が分泌されるのに十分な時間、宿主細胞を培養することによって抗体が生産される。標準的なタンパク質精製法を用いて、培地から抗体を回収することができる。
【００６５】
宿主細胞を用いて、無傷の抗体の一部分、たとえばＦａｂ断片またはｓｃＦｖ分子を生産することもできる。上記の手法の変形物は本発明の範囲内であることが理解される。たとえば、本発明の抗体の軽鎖または重鎖の（両方ではなく）いずれかをコードするＤＮＡによって宿主細胞のトランスフェクトを行うことが望ましい。軽鎖および重鎖のいずれかまたは両方をコードするＤＮＡであって、ｈＴＮＦαへの結合には必要でないＤＮＡのいくつかまたはすべてを、組み換えＤＮＡ技術を用いて除去してもよい。このような切型のＤＮＡ分子から発現する分子も、本発明の抗体に包含される。さらに、標準的な化学的架橋法によって本発明の抗体を第二の抗体に架橋することによって、ある重鎖および軽鎖が本発明の抗体であり、そして別の重鎖および軽鎖がｈＴＮＦα以外の抗原に対して特異的であるという二官能性の抗体を生産してもよい。
【００６６】
本発明の抗体またはその抗原結合部分の組み換え発現にとって好ましいシステムにおいては、リン酸カルシウムを介したトランスフェクトによって、抗体の重鎖および抗体の軽鎖の両方をコードする組み換え発現ベクターをｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞内に導入する。組み換え発現ベクター内では、抗体の重鎖の遺伝子および軽鎖の遺伝子のそれぞれが、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントに機能的に結合して、遺伝子の高レベルの転写を促進する。組み換え発現ベクターもＤＨＦＲ遺伝子を保持しており、このものによって、メトトレキサートの選択／増幅を利用して、ベクターがトランスフェクトされたＣＨＯ細胞の選択が可能となる。選択された、形質転換を受けた宿主細胞を、抗体の重鎖および軽鎖の発現が可能となるように培養し、そして無傷の抗体を培地から回収する。標準的な分子生物学の技術を用いて、組み換え発現ベクターの調製、宿主細胞のトランスフェクト、形質転換体の選択、宿主細胞の培養および培地からの抗体の回収を行う。
【００６７】
本明細書で開示されたＤ２Ｅ７もしくはその抗原結合部分またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体に加えて、ヒトのリンパ球に由来するｍＲＮＡから作製されたヒトのＶＬおよびＶＨのｃＤＮＡを用いて調製された組み換え型の組合せ抗体ライブラリー、好ましくはｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーをスクリーニングすることによって、本発明の組み換え型ヒト抗体を単離することができる。このようなライブラリーを調製し、スクリーニングする方法論は、当該技術分野において公知である。ファージディスプレイライブラリーを作製するための市販のキット（たとえば、ファルマシア社の組み換え体ファージ抗体システム、カタログ番号２７−９４００−０１；およびストラタジーン（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）社のＳｕｒｆＺＡＰ（商標）ファージディスプレイキット、カタログ番号２４０６１２）に加えて、抗体のディスプレイライブラリーを作製しスクリーニングに特に供し得る方法および試薬の具体例を、次のものに見出すことができる：たとえば、ラドナー（Ｌａｄｎｅｒ）ら、米国特許第５，２２３，４０９号；カン（Ｋａｎｇ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１８６１９号；ダウアー（Ｄｏｗｅｒ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９１／１７２７１号；ウィンター（Ｗｉｎｔｅｒ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／２０７９１号；マークランド（Ｍａｒｋｌｄａｎｄ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１５６７９号；ブリートリング（Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９３／０１２８８号；マッカフェティーら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０１０４７号；ガーラード（Ｇａｒｒａｒｄ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０９６９０号；フックス（Ｆｕｃｈｓ）ら、（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７０−１３７２；ヘイ（Ｈａｙ）ら、（１９９２）Ｈｕｍ Ａｎｔｉｂｏｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ３：８１−８５；ヒューズ（Ｈｕｓｅ）ら、（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１；マッカフェティーら、Ｎａｔｕｒｅ （１９９０）３４８：５５２−５５４；グリフィスら（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５−７３４；ホーキンス（Ｈａｗｋｉｎｓ）ら、（１９９２）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２２６：８８９−８９６；クラックソン（Ｃｌａｃｋｓｏｎ）ら、（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４−６２８；グラム（Ｇｒａｍ）ら、（１９９２） ＰＮＡＳ ８９：３５７６−３５８０；ガーラードら、（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７３−１３７７；フーゲンブーム（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ）ら、（１９９１）Ｎｕｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １９：４１３３−４１３７；およびバルバス（Ｂａｒｂａｓ）ら、（１９９１）ＰＮＡＳ ８８：７９７８−７９８２。
【００６８】
好ましい実施態様においては、ｈＴＮＦαに対して高い親和性と小さい解離速度定数を有するヒト抗体を単離するために、ｈＴＮＦαに対して高い親和性と小さい解離速度定数を有するネズミ抗ｈＴＮＦα抗体（たとえばＭＡＫ １９５、受託番号がＥＣＡＣＣ ８７ ０５０８０１のハイブリドーマ）をまず最初に用いて、ｈＴＮＦαに対してよく似た結合活性を有するヒトの重鎖配列および軽鎖配列を、フーゲンブームらのＰＣＴ公報ＷＯ ９３／０６２１３号に記載されたエピトープインプリンティング法を利用して選択する。この方法で用いられる抗体ライブラリーは、マッカフェティーら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０１０４７号、マッカフェティーら、Ｎａｔｕｒｅ（１９９０）３４８：５５２−５５４；およびグリフィスら（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５−７３４に記載されたように調製され、スクリーニングされる好ましいｓｃＦｖライブラリーである。抗原として組み換え型ヒトＴＮＦαを用いてスクリーニングされるｓｃＦｖ抗体ライブラリーが好ましい。
【００６９】
最初のヒトのＶＬセグメントおよびＶＨセグメントを一旦選択すれば、ｈＴＮＦα結合のために、最初に選択したＶＬセグメントおよびＶＨセグメントの異なるペアをスクリーニングするという「ミックス・アンド・マッチ」実験を実施して、好ましいＶＬ／ＶＨのペアの組み合わせを選択する。さらに、ｈＴＮＦαの結合についての親和性をさらに向上させるおよび／または解離速度定数をより小さくするために、自然のままの免疫応答の間に抗体の親和性成熟を引き起こすインビボでの体細胞変異プロセスとよく似たプロセスにおいて、好ましいＶＬ／ＶＨの（単数または複数の）ペアのＶＬセグメントおよびＶＨセグメントを、好ましくはＶＨおよび／またはＶＬのＣＤＲ３領域の範囲内で無作為に変異させることができる。ＶＨ ＣＤＲ３またはＶＬ ＣＤＲ３に相補的なＰＣＲプライマーを用いてＶＨ領域およびＶＬ領域をそれぞれ増幅することによって、このようなインビトロの親和性成熟を達成することができる。ここで、結果として生じるＰＣＲ産物が、ＶＨセグメントおよびＶＬセグメント（ＶＨ ＣＤＲ３領域および／またはＶＬ ＣＤＲ３領域内に導入されたランダム変異がそのセグメント内にある）をコードするように、これらのプライマーには、特定の位置において四種のヌクレオチド塩基の無作為混合物が「スパイクされて」いた。これらのランダム変異を受けたＶＨセグメントおよびＶＬセグメントを、ｈＴＮＦαとの結合のために再度スクリーニングすることができる。そしてｈＴＮＦαの結合について高い親和性と遅い解離速度を示す配列を選択することができる。
【００７０】
組み換え型免疫グロブリンディスプレイライブラリーから、本発明の抗ｈＴＮＦα抗体をスクリーニングして単離した後に、ディスプレイパッケージから（たとえばファージのゲノムから）、選択された抗体をコードする核酸を回収し、そして標準的な組み換えＤＮＡ技術によって、別の発現ベクター内にサブクローニングすることができる。必要に応じて、核酸をさらに操作して、本発明の別の抗体の形態を作製することができる（たとえば、追加の定常領域などの追加の免疫グロブリンドメインをコードする核酸に結合したもの）。組合せライブラリーのスクリーニングによって単離された組み換え型ヒト抗体を発現させるためには、その抗体をコードするＤＮＡを組み換え発現ベクター内にクローニングし、そして、上記のＩＩ部にさらなる詳細が記載されているように、哺乳動物の宿主細胞内に導入する。
【００７１】
本発明の抗体および抗体の一部分ならびに自己免疫疾患の治療に有用な薬剤を、本明細書に記載された方法についての被験体への投与に適した医薬組成物内に別個にまたは一緒に組み込むことができる。典型的な医薬組成物は、本発明の抗体（もしくは抗体の一部分）および／または自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤ならびに医薬適合性の担体を含む。本明細書で用いられる「医薬適合性の担体」としては、生理的に適合性を有し、かつ本明細書に記載された方法についての被験体への投与に適したありとあらゆる溶媒、分散媒、被覆剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。医薬適合性の担体の具体例としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ブドウ糖、グリセリン、エタノールなどの一種以上、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、組成物内に等張性の物質、たとえば糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムが含まれることは好ましい。医薬適合性の担体が、湿潤剤もしくは乳化剤、防腐剤または緩衝剤などの微量の補助的物質をさらに含んでもよく、これらのものは、抗体または抗体の一部分の保存性または有効性を高める。
【００７２】
本発明の組成物は、種々の剤形であってもよい。たとえば、液体、半固体および固形の剤形（具体的には、溶液（たとえば注射可能な溶液および不溶性の溶液）、分散液もしくは懸濁液、錠剤、丸薬、粉剤、リポソームおよび座薬）が挙げられる。好ましい剤形は、意図される投与様式および治療上の用途に依存する。好ましい組成の典型例は、注射可能な溶液または不溶性の溶液の剤形（たとえば、他の抗体によるヒトの受動免疫化に用いられる組成とよく似た組成）である。好ましい投与様式は非経口である（たとえば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）。好ましい実施態様においては、抗体を含む医薬組成物を注射によって投与する。別の好ましい実施態様においては、抗体を筋肉注射によって投与する。特に好ましい実施態様においては、抗体を皮下注射によって投与する。
【００７３】
医薬組成物は、一般的に、製造および保存の条件下で無菌かつ安定でなければならない。溶液、マイクロエマルション、分散液、リポソーム、または他の指示された、高濃度の薬剤に適した構造として、組成物を製剤化することができる。活性化合物（すなわち抗体または抗体の一部分）を、必要に応じて上記に列挙された成分の一種または組み合わせたものと共に、必要な量の適切な溶媒内に組み込み、次いでろ過滅菌することによって、注射可能な無菌の溶液を調製することができる。基本的な分散媒と、上記に列挙されたものから必要な他の成分とを含む無菌の媒体内に、活性化合物を組み込むことによって分散液を調製するのが一般的である。注射可能な無菌の溶液を調製するための無菌の粉剤の場合において、好ましい調製方法とは、真空乾燥および凍結乾燥して、有効成分プラス既にろ過滅菌されたその溶液からの任意の所望の追加成分の粉剤を得ることである。たとえば、レシチンなどの被覆剤を用いることによって、分散液の場合は必要な粒子径を維持することによって、そして界面活性剤を用いることによって、溶液の適切な流動性を維持することができる。モノステアリン酸塩およびゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤を組成物内にを含めることによって、注射可能な組成物の持続的な吸収を成し遂げることができる。
【００７４】
当該技術分野で公知の種々の方法によって、本発明の抗体および抗体の一部分を投与することができるが、多くの治療上の用途にとって好ましい投与経路／投与様式は皮下注射である。当業者であれば理解できるように、投与経路および／または投与様式は、所望の結果に応じて変化することになる。ある特定の実施態様においては、インプラント、経皮貼布、およびマイクロカプセル化送達システムを含めた制御放出製剤などの、化合物を急激な放出から保護するような担体を用いて活性化合物を調製してもよい。エチレン酢酸ビニル、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生物分解性、生物適合性ポリマーを用いることができる。このような製剤を調製するための多数の方法は特許が付与されているか、または当業者にとって周知のものである。たとえば、放出が制御された徐放性薬剤送達システム（Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ジェイ・アール・ロビンソン（Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）編、マルセル・デッカー社（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．）、ニューヨーク、１９７８を参照すること。
【００７５】
特定の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を、たとえば不活性な希釈剤または吸収可能な食用になる担体と共に経口投与してもよい。この化合物（および必要に応じて他の成分）を、硬質または軟質のゼラチンカプセル内に封入・圧縮して錠剤としてもよく、または被験体の食物に直接組み込んでもよい。治療のための経口投与に関して、化合物を賦形剤と一緒に組み込んで、そして摂取用の錠剤、舌下錠、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、カシェ剤などの剤形で用いてもよい。非経口投与以外によって本発明の化合物を投与するためには、不活性化を防止する材料で化合物を被覆すること、または化合物を、不活性化を防止する材料と同時投与することが必要である。
【００７６】
追加の活性化合物を組成物内に組み込んでもよい。ある特定の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を、一種以上の追加の治療剤と共に製剤化したりおよび／またはかかる治療剤と同時投与する。たとえば、本発明の抗ｈＴＮＦα抗体または抗体の一部分を、一種以上のＤＭＡＲＤもしくは一種以上のＮＳＡＩＤ、もしくは他の標的と結合する一種以上のさらなる抗体（他のサイトカイン類または細胞表面分子と結合する抗体など）、一種以上のサイトカイン類、可溶性ＴＮＦα受容体（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９４／０６４７６号を参照すること）および／またはｈＴＮＦαの生産または活性を阻害する一種以上の化学薬品（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１９７５１号に記載されているようなシクロヘキサン−イリデン誘導体）またはそれらの任意の組み合わせと共に製剤化および／または同時投与してもよい。そのうえ、本発明の一種以上の抗体を、二種以上の上記の治療剤と組み合わせて用いてもよい。このような多剤併用療法を、投与される治療剤の投与量がより少ない場合に利用することが有利かもしれず、したがって、種々の単剤療法と関係がある患者による、考えられる副作用、合併症または低いレベルの応答が避けられる。
【００７７】
本発明の医薬組成物には、「治療的に有効な量」または「予防的に有効な量」の本発明の抗体または抗体の一部分および／または他の（単数または複数の）薬剤が含まれる。「治療的に有効な量」とは、所望の治療効果を達成するために必要な期間投与される有効な量という意味である。治療的に有効な量は、個体の病状、年齢、性別および体重、ならびに自己免疫疾患の治療に有用な抗体もしくは抗体の一部分または他の薬剤の持つ、個体において所望の応答を惹起させる能力などの因子に基づいて変化してもよい。治療的に有効な量とは、抗体もしくは抗体の一部分または他の（単数または複数の）薬剤の副作用よりも、治療的に有益な効果の方が上回る量でもある。「予防的に有効な量」とは、所望の予防効果を達成するために必要な期間投与される有効な量という意味である。疾患の前に、または疾患の早い段階で被験体に予防のための投与が行われることが通常なので、予防的に有効な量は治療的に有効な量よりも少量となる。
【００７８】
所望の最適な応答（たとえば治療上の応答または予防上の応答）を提供するために、投与計画を調整してもよい。たとえば、単一の大きな丸薬を投与してもよく、長期の間に投与量をいくつかに分割して投与してもよく、または治療状況の緊急性で示されるように、投与量を比例的に減少もしくは増加させてもよい。投与が容易で投与量の均一な投与量単位の剤形にて非経口用組成物を製剤することは、特に有利である。本明細書で用いられる投与量単位の剤形とは、治療を受ける哺乳動物の被験体への単一の投与量として適する、物理的に独立した単位という意味である；必須の製剤用の担体と共に所望の治療効果を提供するために計算された、予め決められた量の活性化合物をそれぞれの単位が含んでいる。本発明の投与量単位の剤形についての詳細は、（ａ）活性化合物の独自の特性および達成される具体的な治療上のまたは予防上の効果、ならびに（ｂ）個体における感受性を治療するためのそのような活性化合物の、合成技術的に内在する制限によって定められ、そしてそれらに直接影響を受ける。
【００７９】
本発明の抗体または抗体の一部分の治療的にまたは予防的に有効な量についての典型的で限定されない範囲は、１０から１００ｍｇであり、２０から８０ｍｇがより好ましく、約４０ｍｇが特に好ましい。緩和される健康状態のタイプと重症度によって、投与量の値を変化させてもよいことに留意すべきである。個体の必要性、および組成物の投与を管理するかまたは監督する専門家の判断に従って、あらゆる特定の被験体についての具体的な投与計画を長期に亘って調整すべきであること、ならびに本明細書に記載された投与量の範囲は単なる例示であり、請求の範囲の組成物の範囲または実務を制限する意図がないことをさらに理解すべきである。
【００８０】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる慢性関節リウマチの治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：（単数または複数の）非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）；（単数または複数の）サイトカイン抑制性抗炎症薬（ＣＳＡＩＤｓ）；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ／Ｂａｙｅｒ）社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）社）；ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１／ＳＢ ２１０３９６（非枯渇性霊長類化抗ＣＤ４抗体；アイディーイーシ／スミスクライン（ＩＤＥＣ／ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）社；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９５）Ｖｏｌ．３８，Ｓ１８５を参照すること）；ＤＡＢ４８６−ＩＬ−２および／またはＤＡＢ３８９−ＩＬ−２（ＩＬ−２融合タンパク質；シーラジェン（Ｓｅｒａｇｅｎ）社；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９３）Ｖｏｌ．３６，１２２３を参照すること）；抗Ｔａｃ（ヒト化抗ＩＬ−２Ｒα；プロテイン・デザイン・ラブズ／ロシュ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｓｉｇｎ Ｌａｂｓ／Ｒｏｃｈｅ）社）；ＩＬ−４（抗炎症性サイトカイン；ディーエヌエイエックス／シェリング（ＤＮＡＸ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）社）；ＩＬ−１０（ＳＣＨ ５２０００；組み換え型ＩＬ−１０、抗炎症性サイトカイン；ディーエヌエイエックス／シェリング社）；ＩＬ−４アゴニスト；ＩＬ−１０アゴニストおよび／またはＩＬ−４アゴニスト（たとえばアゴニスト抗体）；ＩＬ−１ＲＡ（ＩＬ−１受容体アンタゴニスト；シナージェン／アムジェン（Ｓｙｎｅｒｇｅｎ／Ａｍｇｅｎ）社）；ＴＮＦ−ｂｐ／ｓ−ＴＮＦＲ（可溶性ＴＮＦ結合タンパク質；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８４；Ａｍｅｒ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．− Ｈｅａｒｔ ａｎｄ Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ（１９９５）Ｖｏｌ．２６８，ｐｐ．３７−４２を参照すること）；Ｒ９７３４０１（ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）；ＭＫ−９６６（ＣＯＸ−２阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ８１を参照すること）；イロプロスト（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ８２を参照すること）；メトトレキサート；サリドマイド（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）およびサリドマイドに関係がある薬剤（たとえばセルジェン）；レフルノミド（抗炎症性のサイトカイン阻害剤；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ１３１；Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（１９９６）Ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０３−１０７を参照すること）；トラネキサム酸（プラスミノゲン活性化の阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８４を参照すること）；Ｔ−６１４（サイトカイン阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）；プロスタグランジンＥ１（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ （１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）；テニダップ（非ステロイド性抗炎症薬；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８０を参照すること）；ナプロキセン（非ステロイド性抗炎症薬；たとえばＮｅｕｒｏ Ｒｅｐｏｒｔ（１９９６）Ｖｏｌ．７，ｐｐ．１２０９−１２１３を参照すること）；メロキシカム（非ステロイド性抗炎症薬）；イブプロフェン（非ステロイド性抗炎症薬）；ピロキシカム（非ステロイド性抗炎症薬）；ジクロフェナク（非ステロイド性抗炎症薬）；インドメタシン（非ステロイド性抗炎症薬）；スルファサラジン（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８１を参照すること）；アザチオプリン（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８１を参照すること）；ＩＣＥ阻害剤（酵素のインターロイキン−１β転換酵素の阻害剤）；ｚａｐ−７０阻害剤および／またはｌｃｋ阻害剤（チロシンキナーゼのｚａｐ−７０またはｌｃｋの阻害剤）；ＶＥＧＦ阻害剤および／またはＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤（血管内皮細胞増殖因子または血管内皮細胞増殖因子受容体の阻害剤；脈管形成の阻害剤）；コルチコステロイド性抗炎症薬（たとえばＳＢ２０３５８０）；ＴＮＦコンバーターゼ阻害剤；抗ＩＬ−１２抗体；インターロイキン−１１（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２９６を参照すること）；インターロイキン−１３（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ３０８を参照すること）；インターロイキン−１７阻害剤（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ１２０を参照すること）；金；ペニシラミン；クロロキン；ヒドロキシクロロキン；クロラムブシル；シクロホスファミド；シクロスポリン；全身リンパ節照射；抗胸腺細胞グロブリン；抗ＣＤ４抗体；ＣＤ５トキシン；経口投与用のペプチドおよびコラーゲン；ロベンザリット二ナトリウム；サイトカイン調節剤（ＣＲＡ）のＨＰ２２８およびＨＰ４６６（ホートン・ファーマシューティカルズ社（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．））；ＩＣＡＭ−１アンチセンス・ホスホロチオアート・オリゴデオキシヌクレオチド（ＩＳＩＳ ２３０２；イシス・ファーマシューティカルズ社（Ｉｓｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．））；可溶性補体レセプター１（ＴＰ１０；ティーセル・サイエンシス社（Ｔ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．））；プレドニゾン；オルゴテイン；グリコサミノグリカンポリスルファート；ミノサイクリン；抗ＩＬ２Ｒ抗体；海産のおよび植物性の脂質（魚類のおよび植物種子の脂肪酸；たとえばデルーサ（ＤｅＬｕｃａ）ら、（１９９５）Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ Ａｍ．２１：７５９−７７７を参照すること）；オーラノフィン；フェニルブタゾン；メクロフェナム酸；フルフェナム酸；静脈内の免疫グロブリン；ジロートン；ミコフェノール酸（ＲＳ−６１４４３）；タクロリムス（ＦＫ−５０６）；シロリムス（ラパマイシン）；アミプリロース（セラフェクチン）；クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン）；ならびにアザリビン。
【００８１】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる炎症性腸疾患の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：ブデノサイド；上皮増殖因子；コルチコステロイド；シクロスポリン、スルファサラジン；アミノサリチル酸塩；６−メルカプトプリン；アザチオプリン；メトロニダゾール；リポキシゲナーゼ阻害剤；メサラミン；オルサラジン；バルサラジド；抗酸化剤；トロンボキサン阻害剤；ＩＬ−１受容体アンタゴニスト；抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体；抗ＩＬ−６モノクローナル抗体；増殖因子；エラスターゼ阻害剤；ピリジニル−イミダゾール化合物；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）；インターロイキン−１０（ＳＣＨ ５２０００；シェリングプラウ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）社）；ＩＬ−４アゴニスト；ＩＬ−１０アゴニストおよび／またはＩＬ−４アゴニスト（たとえばアゴニスト抗体）；インターロイキン−１１；プレドニゾロン、デキサメタゾンまたはブデソニドのグルクロニド複合化プロドラッグまたはデキストラン複合化プロドラッグ；ＩＣＡＭ−１アンチセンス・ホスホロチオアート・オリゴデオキシヌクレオチド（ＩＳＩＳ ２３０２；イシス・ファーマシューティカルズ社）；可溶性補体レセプター１（ＴＰ１０；ティーセル・サイエンシス社）；徐放性メサラジン；メトトレキサート；血小板活性化因子（ＰＡＦ）のアンタゴニスト；シプロフロキサシン；ならびにリグノカイン。
【００８２】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる多発性硬化症の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：コルチコステロイド；プレドニゾロン；メチルプレドニゾロン；アザチオプリン；シクロホスファミド；シクロスポリン；メトトレキサート；４−アミノピリジン；チザニジン；インターフェロン−β１ａ（Ａｖｏｎｅｘ（商標）；バイオジェン（Ｂｉｏｇｅｎ）社）；インターフェロン−β１ｂ（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（商標）；カイロン／ベレックス（Ｃｈｉｒｏｎ／Ｂｅｒｌｅｘ）社）；コポリマー１（Ｃｏｐ−１；Ｃｏｐａｘｏｎｅ（商標）；テバ・ファーマシューティカル・インダストリーズ社（Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．））；高圧酸素；静脈内免疫グロブリン；クラブリビン；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）；ＩＬ−１０；ＩＬ−４；およびＩＬ−１０アゴニストおよび／またはＩＬ−４アゴニスト（たとえばアゴニスト抗体）。
【００８３】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる敗血症の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：高張食塩水；抗生物質；静脈内のガンマグロブリン；持続的血液ろ過；カルバペネム類（たとえばメロペネム）；ＴＮＦα、ＩＬ−１β、ＩＬ−６および／またはＩＬ−８などのサイトカイン類のアンタゴニスト；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）；サイトカイン調節剤（ＣＲＡ）のＨＰ２２８およびＨＰ４６６（ホートン・ファーマシューティカルズ社）；ＳＫ＆Ｆ １０７６４７（低分子量ペプチド；スミスクライン・ビーチャム（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ）社）；四価のグアニルヒドラゾンＣＮＩ−１４９３（ピコワー・インスティチュート（Ｐｉｃｏｗｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）社）；組織因子経路阻害剤（ＴＦＰＩ；カイロン社）；ＰＨＰ（化学的に修飾されたヘモグロビン；エーピーイーエックス・バイオサイエンス（ＡＰＥＸ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）社）；ジエチレントリアミン五酢酸−鉄（ＩＩＩ）複合体（ＤＴＰＡ鉄（ＩＩＩ）；モリケム・メディスンズ（Ｍｏｌｉｃｈｅｍ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ）社）を含めた鉄キレーターおよびキレート；リソフィリン（メチルキサンチンの合成小分子；セル・セラピューティクス社（Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．））；ＰＧＧ−グルカン（水溶性のβ１，３グルカン；アルファ−ベータ・テクノロジー（Ａｌｐｈａ−Ｂｅｔａ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）社）；脂質と共に再構成されたアポリポタンパク質Ａ−１；キラルなヒドロキサム酸（リピドＡの生合成を阻害する合成抗菌剤）；抗エンドトキシン抗体；Ｅ５５３１（リピドＡの合成アンタゴニスト；エーザイ・アメリカ社（Ｅｉｓａｉ Ａｍｅｒｉｃａ，Ｉｎｃ．））；ｒＢＰＩ２１（ヒトの殺菌性・膜透過性亢進タンパク質の組み換え型Ｎ末端断片）；ならびに抗エンドトキシン性合成ペプチド（ＳＡＥＰ；バイオシンス・リサーチ・ラボラトリーズ（ＢｉｏｓＹｎｔｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）社）；
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：抗ＩＬ−８抗体；サーファクタント置換療法；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ （１９９４） Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；ならびに５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）。
【００８４】
抗ＴＮＦα抗体と一種以上の他の薬剤とを組み合わせて用いることは、ＴＮＦαを阻害することによって障害が影響を受けるかどうかによって決まる。本明細書で用いられる「抗ＴＮＦα抗体の投与が有効であるところの障害」という用語は、障害に苦しむ被験体に存在するＴＮＦαが、障害の病態生理学の原因もしくは障害の悪化に寄与する因子のいずれかであることが示されたかもしくは推測されている疾患および他の障害、または別の抗ＴＮＦα抗体もしくはその生物学的活性を有する部分を用いて疾患をうまく治療できたことが示された疾患および他の障害を含む意図である。従って、ＴＮＦα活性が有害であるところの障害は、ＴＮＦα活性の阻害によって、障害の症状および／または進行の軽減が予想される障害である。たとえば、障害に苦しむ被験体の生理学的体液中のＴＮＦα濃度の上昇（たとえば、被験体の血清、血漿、滑液などにおけるＴＮＦαの濃度の上昇）によって、このような障害を証明できるかもしれず、そしてこのことは、たとえば上記のような抗ＴＮＦα抗体を用いて検出することができる。ＴＮＦα活性が有害であるところの障害の具体例は、数多く存在する：
Ａ．敗血症
腫瘍壊死因子には、低血圧、心筋抑制、血管漏出症候群、臓器の壊死、トキシック・セカンダリー・メディエータ放出の刺激および凝固カスケードの活性化を含む生物学的作用を伴った、敗血症の病態生理学における立証された役割がある（たとえば、トレーシー，ケイ．ジェイ．およびセラミ，エイ．、（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１−５０３；ラッセル，ディー．およびトンプソン，アール．シー．（Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｄ ａｎｄ Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｒ．Ｃ．）、（１９９３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．４：７１４−７２１を参照すること）。従って、本発明のヒト抗体および抗体の一部分を用いて、敗血症性ショック、エンドトキシンショック、グラム陰性敗血症およびトキシックショック症候群を含めたあらゆる臨床場面における敗血症を治療することができる。好ましくは、敗血症の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。敗血症の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００８５】
そのうえ、敗血症を治療するために、本発明の抗ｈＴＮＦα抗体または抗体の一部分を、敗血症をさらに緩和するかもしれない一種以上の追加の治療剤（たとえば、インターロイキン−１阻害剤（ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１６２２１号およびＷＯ ９２／１７５８３号に記載されたものなど）、サイトカインであるインターロイキン−６（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１１７９３を参照すること）、または血小板活性化因子のアンタゴニスト（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ３７４ ５１０号を参照すること））と同時投与することができる。
【００８６】
さらに、好ましい実施態様においては、治療の時点での血清または血漿のＩＬ−６濃度が５００ｐｇ／ｍＬを超える、より好ましくは１０００ｐｇ／ｍＬを超える敗血症患者の下位群の範囲内のヒトの被験体に、本発明の抗ＴＮＦα抗体または抗体の一部分を投与する（ドーム，エル．（Ｄａｕｍ，Ｌ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９５／２０９７８号を参照すること）。
【００８７】
Ｂ．自己免疫疾患
腫瘍壊死因子は、種々の自己免疫疾患の病態生理学における役割を果たすことに関与してきている。たとえば、慢性関節リウマチにおいて、組織の炎症を活性化することおよび関節の破壊を引き起こすことにＴＮＦαは関与した（たとえば、上掲のトレーシーおよびセラミ；アレント，ダブリュ．ピー．およびデイヤー，ジェイ−エム．（Ａｒｅｎｄ，Ｗ．Ｐ．ａｎｄ Ｄａｙｅｒ，Ｊ−Ｍ．）、（１９９５） Ａｒｔｈ．Ｒｈｅｕｍ．３８：１５１−１６０；フェイバ，アール．エイ．（Ｆａｖａ，Ｒ．Ａ．）ら、（１９９３）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９４：２６１−２６６を参照すること）。糖尿病において、島細胞の死滅を促進することおよびインスリン抵抗性を仲介することにもＴＮＦαは関与した（たとえば、上掲のトレーシーおよびセラミ；ＰＣＴ公報ＷＯ ９４／０８６０９号を参照すること）。多発性硬化症において、乏突起膠細胞への細胞毒性を仲介することおよび炎症性のプラークを誘導することにもＴＮＦαは関与した（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。キメラのヒト化マウス抗ｈＴＮＦα抗体は、慢性関節リウマチの治療についての臨床試験を経験した（たとえば、エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４） Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５−１１２７；エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４） Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１０５−１１１０；ランキン，イー．シー．（Ｒａｎｋｉｎ，Ｅ．Ｃ．）ら、（１９９５）Ｂｒ．Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．３４：３３４−３４２を参照すること）。
【００８８】
本発明のヒト抗体および抗体の一部分を用いて自己免疫疾患を治療することができる。好ましくは、自己免疫疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、慢性関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、変形性関節症および痛風性関節炎、アレルギー、多発性硬化症、自己免疫性糖尿病、自己免疫性ブドウ膜炎ならびにネフローゼ症候群を含めた炎症に関係するものである。特定の障害について、抗体または抗体の一部分を全身投与することが通常ではあるが、抗体または抗体の一部分の炎症部位での局所投与も有用かもしれない（たとえば、単独でのまたはＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１９７５１号に記載されたようなシクロヘキサン−イリデン誘導体と組み合わせての、慢性関節リウマチにおける関節への局所投与または糖尿病性潰瘍への局所適用）。
【００８９】
Ｃ．感染症
腫瘍壊死因子は、種々の感染症において見られる生物学的作用を仲介することに関与してきた。たとえば、マラリアにおいて、脳の炎症および毛細血管の血栓症、ならびに梗塞の形成を仲介することにＴＮＦαは関与した（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。髄膜炎において、脳の炎症を仲介すること、血液脳関門の破壊を誘導すること、敗血症性ショック症候群を引き起こすことおよび静脈の梗塞を活性化させることにもＴＮＦαは関与した（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）において、悪液質を誘導すること、ウイルス増殖を刺激することおよび中枢神経系の損傷を仲介することにもＴＮＦαは関与している（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を感染症の治療に用いることができる。好ましくは、感染症の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。感染症の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、移植後の、細菌性髄膜炎（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ５８５ ７０５号を参照すること）、脳マラリア、ＡＩＤＳおよびＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ２３０ ５７４号を参照すること）、ならびにサイトメガロウイルス感染（たとえばフィーツ，イー．（Ｆｉｅｔｚｅ，Ｅ．）ら、（１９９４） Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５８：６７５−６８０を参照すること）。本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、（インフルエンザなどの）感染が原因の発熱および筋肉痛および感染後の（たとえばＡＩＤＳまたはＡＲＣの後の）悪液質を含めた、感染症と関係がある症状を軽減することもできる。
【００９０】
Ｄ．移植
腫瘍壊死因子は、同種移植の拒絶反応および移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）の主要なメディエータとして、Ｔ細胞受容体のＣＤ３複合体に対して向けられたラットの抗体ＯＫＴ３を用いて、腎移植の拒絶を抑制する場合に見られる有害反応を仲介することに関与してきた（たとえば、上掲のトレーシーおよびセラミ；イーソン，ジェイ．ディー．（Ｅａｓｏｎ，Ｊ．Ｄ．）ら、（１９９５）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５９：３００−３０５；サザンチラン，エム．およびストーム，ティー．ビー．（Ｓｕｔｈａｎｔｈｉｒａｎ，Ｍ．ａｎｄ Ｓｔｒｏｍ，Ｔ．Ｂ．）、（１９９４）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３１：３６５−３７５を参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、同種移植および異種移植の拒絶反応を含めた移植片の拒絶反応、およびＧＶＨＤを抑制することができる。好ましくは、移植片の拒絶反応の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。移植片の拒絶反応の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。たとえば、一つの実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分をＯＫＴ３と組み合わせて用いて、ＯＫＴ３に誘導される反応を阻害する。別の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を、免疫応答を調節することに関わる別の標的（たとえば、細胞表面分子ＣＤ２５（インターロイキン−２受容体−α）、ＣＤ１１ａ（ＬＦＡ−１）、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ−１）、ＣＤ４、ＣＤ４５、ＣＤ２８／ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０（Ｂ７−１）および／またはＣＤ８６（Ｂ７−２））に向けられた一種以上の抗体と組み合わせて用いる。さらに別の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を一種以上の一般的な免疫抑制剤、たとえばシクロスポリンＡまたはＦＫ５０６と組み合わせて用いる。
【００９１】
Ｅ．悪性腫瘍
腫瘍壊死因子は、悪液質を生じさせること、腫瘍の増殖を刺激すること、転移の可能性を高めることおよび悪性腫瘍における細胞毒性を仲介することに関与してきた（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を悪性腫瘍の治療に用いて、腫瘍の増殖または転移を抑制することおよび／または悪性腫瘍に副次的な悪液質を軽減することができる。好ましくは、悪性腫瘍の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用であり、これによって腫瘍の増殖または転移を抑制および／または悪性腫瘍に副次的な悪液質を軽減する。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。悪性腫瘍の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましく、これによって腫瘍の増殖または転移を抑制および／または悪性腫瘍に副次的な悪液質を軽減する。抗体もしくは抗体の一部分を全身投与してもよく、または腫瘍の部位に局所投与してもよい。
【００９２】
Ｆ．肺疾患
腫瘍壊死因子は、白血球内皮活性化を刺激すること、肺細胞へ細胞毒性を導くことおよび血管漏出症候群を誘導することを含めた成人呼吸窮迫症候群の病態生理に関与してきた（たとえば上掲のレーシーおよびセラミを参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を用いて種々の肺疾患を治療することができる。好ましくは、肺疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。肺疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、成人呼吸窮迫症候群（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９１／０４０５４号を参照すること）、ショック肺、慢性炎症性肺疾患、肺サルコイドーシス、肺線維症およびケイ肺症である。抗体もしくは抗体の一部分を全身投与してもよく、または肺の表面に、たとえばエアゾールとして局所投与してもよい。
【００９３】
Ｇ．腸疾患
腫瘍壊死因子は、炎症性腸疾患の病態生理に関与してきた（たとえば、トレーシー，ケイ．ジェイ．（Ｔｒａｃｙ，Ｋ．Ｊ．）ら、（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３４：４７０−４７４；スン，エックス−エム．（Ｓｕｎ，Ｘ−Ｍ．）ら、（１９８８）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８１：１３２８−１３３１；マクドナルド，ティー．ティー．（ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｔ．Ｔ．）ら、（１９９０）Ｃｌｉｎ．ＥＸＰ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．８１：３０１−３０５を参照すること）。キメラのネズミ抗ｈＴＮＦα抗体は、クローン病の治療についての臨床試験を経験した（バンドルメン，エイチ．エム．（ｖａｎ Ｄｕｌｌｅｍｅｎ，Ｈ．Ｍ．）ら、（１９９５）Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １０９：１２９−１３５）。本発明のヒト抗体および抗体の一部分を用いて腸疾患を治療することもできる。好ましくは、腸疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。腸疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、特発性炎症性腸疾患、このものには二種の症候群が含まれ、クローン病および潰瘍性大腸炎である。
【００９４】
Ｈ．心疾患
本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、心臓の虚血（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ４５３ ８９８号を参照すること）および心不全（心筋の衰弱）（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９４／２０１３９号を参照すること）を含めた種々の心疾患を治療することができる。好ましくは、心疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。心疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００９５】
Ｉ．神経疾患
本発明の抗体および抗体の一部分を用いて神経疾患を治療することができる。好ましくは、神経疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。神経疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００９６】
実験に基づく証拠から、ニューロン組織に対する損傷によって、過剰なレベルのＴＮＦが放出されることが示されている。従って、ＴＮＦアンタゴニストを用いると、これらの神経の状態が改善するという結果になる。脱髄性疾患（多発性硬化症など）、免疫疾患、炎症、外傷、または圧迫症に起因する神経疾患が、解剖学的な部位および生理的な問題の原因と性質の履歴に左右される、臨床上の異なった形態で生じる。これらの障害のすべてに共通することは、これらによって永続的な神経の損傷が生じる可能性があるという事実であり、この損傷は急激に生じかつ不可逆となる可能性があり、そして外科手術および／または薬理学的な物質の使用をしばしば必要とする、これらの状態の最新の治療は十分ではなく、完全に成功しないことがよくある。これらの神経の状態としては、急性脊髄損傷、脊髄圧迫症、脊髄の血腫、脊髄挫傷（これらの症例は通常、オートバイの事故またはスポーツでの負傷などのように外傷性である）；神経圧迫、その最も一般的な状態は坐骨神経の圧迫、ニューロパシー、および疼痛を引き起こす椎間板ヘルニアである；首の神経圧迫を引き起こす頸椎椎間板ヘルニアも含まれる；手根管症候群（非ＲＡ）；ガンによる急性または慢性の脊髄の圧迫（このことは、前立腺ガン、乳ガンまたは肺ガンなどから棘への転移に起因することが多い）；神経系の自己免疫疾患；ならびに脱髄性疾患、その最も一般的な状態は多発性硬化症である、が挙げられる。
【００９７】
神経疾患の治療に有用な別の薬剤の具体例は、上記の神経学上の問題および状態を治療するために用いられるコルチゾンなどのステロイド剤である。神経疾患、外傷、負傷および圧迫症の治療のために用いられる、種々の有機構造および代謝機能を有する薬理学上の化学物質、化合物および薬剤のさらなる具体例が、たとえば米国特許第５，７５６，４８２号および第５，５７４，０２２号（これらのものは、その全体が本明細書中に参考として援用されている）に開示されている。ここでは、負傷のあとで、プレグネノロンおよび硫酸プレグネノロンなどのステロイドホルモンまたはステロイド前駆体を、インドメタシンなどの非ステロイド系抗炎症性物質と組み合わせて用いることで、神経系および脊髄への物理的損傷を緩和する方法が開示されている。
【００９８】
Ｊ．他の疾患
本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、ＴＮＦα活性が有害である他の種々の疾患を治療することができる。ＴＮＦα活性が病態生理に関与し、従って本発明の抗体または抗体の一部分を用いて治療が可能である他の疾患および障害の具体例としては、炎症性の骨疾患および骨吸収の疾患（たとえば、ベルトリーニ，ディー．アール．（Ｂｅｒｔｏｌｉｎｉ，Ｄ．Ｒ．）ら、（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ ３１９：５１６−５１８；ケーニヒ，エイ．（Ｋｏｎｉｇ，Ａ．）ら、（１９８８）Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．３：６２１−６２７；レーナー，ユー．エイチ．およびオーリン，エイ．（Ｌｅｒｎｅｒ，Ｕ．Ｈ．ａｎｄ Ｏｈｌｉｎ，Ａ．）、（１９９３）Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．８：１４７−１５５；ならびにシャンカー，ジー．およびスターン，ピー．エイチ．（Ｓｈａｎｋａｒ，Ｇ．ａｎｄ Ｓｔｅｒｎ，Ｐ．Ｈ．）、（１９９３）Ｂｏｎｅ １４：８７１−８７６を参照すること）、アルコール性肝炎（たとえば、マッククライン，シー．ジェイ．およびコーエン，ディー．エイ．（ＭｃＣｌａｉｎ，Ｃ．Ｊ．ａｎｄ Ｃｏｈｅｎ，Ｄ．Ａ．）、（１９８９）Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ９：３４９−３５１；フェルバー，エム．イー．（Ｆｅｌｖｅｒ，Ｍ．Ｅ．）ら、（１９９０）Ａｌｃｏｈｏｌ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｒｅｓ．１４：２５５−２５９；およびハンセン，ジェイ．（Ｈａｎｓｅｎ，Ｊ．）ら、（１９９４） Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０：４６１−４７４を参照すること）およびウイルス性肝炎（シェロン，エヌ．（Ｓｈｅｒｏｎ，Ｎ．）ら、（１９９１）Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌ．１２：２４１−２４５；およびフサイン，エム．ジェイ．（Ｈｕｓｓａｉｎ，Ｍ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．４７：１１１２−１１１５）を含めた肝炎、凝固障害（たとえば、バンデルポール，ティー．（ｖａｎ ｄｅｒ Ｐｏｌｌ，Ｔ．）ら、（１９９０）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２２：１６２２−１６２７；およびバンデルポール，ティー．ら、（１９９１）Ｐｒｏｇ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ．３６７：５５−６０を参照すること）、火傷（たとえば、ジロール，ビー．ピー．（Ｇｉｒｏｉｒ，Ｂ．Ｐ．）ら、（１９９４）Ａｉｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏ．２６７：Ｈ１１８−１２４；およびリウ，エックス．エス．（Ｌｉｕ，Ｘ．Ｓ．）ら、（１９９４）Ｂｕｒｎｓ ２０：４０−４４を参照すること）、再灌流障害（たとえば、スケイルス，ダブリュ．イー．（Ｓｃａｌｅｓ，Ｗ．Ｅ．）ら、（１９９４）Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏ．２６７：Ｇ１１２２−１１２７；シェリック，シー．（Ｓｅｒｒｉｃｋ，Ｃ．）ら、（１９９４） Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５８：１１５８−１１６２；およびヤオ，ワイ．エム．（Ｙａｏ，Ｙ．Ｍ．）ら、（１９９５）Ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎ ２９：１５７−１６８を参照すること）、ケロイド形成（たとえばマックコーリー，アール．エル．（ＭｃＣａｕｌｅｙ，Ｒ．Ｌ．）ら、（１９９２）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：３００−３０８を参照すること）、瘢痕組織の形成ならびに発熱が挙げられる。好ましくは、それぞれの障害または疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。それぞれの障害または疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００９９】
以下の実施例によって本発明をさらに説明するが、制限するものと解釈すべきではない。本出願を通して列挙された参考文献、特許および公開された特許出願のすべての内容は、本明細書中に参考として援用されている。上記の開示および以下の開示の組み合わせを適用でき、かつ可能である場合、たとえその組み合わせの言葉自体が記載されていなくても、そのような組み合わせは本発明の範囲内である。
【実施例】
【０１００】
（承認されたＤＭＡＲＤ、ＮＳＡＩＤまたはステロイド剤を含めた）最新の抗リウマチ療法で適切な治療を受けていないＲＡ疾患の患者に、隔週にてＤ２Ｅ７を４０ｍｇ投与することの安全性と有効性とを調査するために、一つの研究を設計し、そして実施した；この研究は、最新の抗リウマチ療法で適切な治療を受けていない慢性関節リウマチ（ＲＡ）疾患の患者に、隔週にてＤ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量で２４週目まで皮下（ｓｃ）投与するという、マルチセンター無作為化二重盲検プラシーボ管理研究であった。抗リウマチ療法では、承認された疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）またはステロイド剤を含む研究期間中の使用が許可された。抗リウマチ療法を利用したのにも関わらず、スクリーニング・ビジットおよびベースライン・ビジットの両方にて記録される活発な疾患を、患者は経験しなければならなかった。スクリーニングに先立つ少なくとも２８日間を安定とするためには、併用するプレドニゾン（一日あたり１０ｍｇ以下）およびＮＳＡＩＤだけでなく、ＤＭＡＲＤの投与が必要であった。さらに、アザチオプリンおよび／またはシクロスポリンを用いている患者は、これらの療法を中止してスクリーニングの前に２８日間の洗い流し期間を経験した。ベースライン・ビジットにおいて、患者をＤ２Ｅ７またはプラシーボに無作為化し、そしてこのことが２４週間のプラシーボ管理期間の開始を意味した。研究の２週目、４週目、８週目、１２週目、１６週目、２０週目および２４週目において、患者の検査を行った。米国リウマチ学会の２０％の改善（ＡＣＲ２０）応答を満たせなかったかまたは維持できなかった患者には、ノール医療用モニターを用いての立会い診察の後で、ＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド療法の投与量を一回増加させるか、研究に参加してから３ヵ月後に別のＤＭＡＲＤでの治療を行うか、または投与量をさらに調節した。
【０１０１】
７５０（７５０）名の患者を登録し、６３６名の患者を無作為化し、５７８名の患者が完了し、そして６３６名の患者を分析した。
【０１０２】
対照的に、すべての無作為化患者が人口統計学上の分析および安全性の分析に算入された。
【０１０３】
患者は少なくとも３ヶ月間、（１９８７年に改訂されたＡＣＲの判断基準で規定された）ＲＡの確定診断のままで過ごし、そしてＡＣＲの機能クラスＩ、ＩＩ、またはＩＩＩとした。最新の抗リウマチ療法による患者の治療は十分でなく、６以上の関節の腫れおよび９以上の圧痛のある関節として規定される活発なＲＡを有していた。さらに、投与量が１０ｍｇ／日以下のプレドニゾンと等価であり、少なくとも２８日間は変化がなかったことを維持した場合の糖質コルチコイドを用いるその患者が、研究への参加を許された。
【０１０４】
２ｍＬのガラスビン内にＤ２Ｅ７を供給した（それぞれのビンにおけるＤ２Ｅ７の濃度は２５ｍｇ／ｍＬであった（すなわち４０ｍｇ／１．６ｍＬ））。それぞれは、１．６ｍＬの注射用溶液あたり４０ｍｇのＤ２Ｅ７を含んでいた。Ｄ２Ｅ７は、オーストリアのウンターラッハにあるエベーウェ・アルツナイミッテル株式会社（Ｅｂｅｗｅ Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌ ＧｍｂＨ）で製造され提供を受けた。米国メリーランド州のロックビルにあるマケッソン・エイチビーオーシ・バイオサイエンシズ（ＭｃＫｅｓｓｏｎ，ＨＢＯＣ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）社で、Ｄ２Ｅ７が包装され、ラベルを付けられ、貯蔵され、そしてこの研究のための各地における研究者に送られた。２４週間の期間中、隔週で行う４０ｍｇの一回の皮下注射としてＤ２Ｅ７が自己管理された。研究用の薬剤の濃度は２５ｍｇ／ｍＬであった。２４週間の期間中、隔週で行う一回の皮下注射としてプラシーボ／１．６ｍＬ（Ｄ２Ｅ７が含まれないクエン酸−リン酸緩衝液）が自己管理された。
【０１０５】
抗リウマチ療法の研究前の投与量を患者は受け続けた。研究期間中、抗リウマチ療法の使用が許されたのは、ＤＭＡＲＤ（ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤およびスルファサラジンもしくはそれらの任意の組み合わせまたは他のＤＭＡＲＤ）、ＮＳＡＩＤおよびステロイド剤が含まれた。スクリーニングに先立つ少なくとも２８日間を安定とするためには、併用するプレドニゾン（一日あたり１０ｍｇ以下）およびＮＳＡＩＤだけでなく、ＤＭＡＲＤを投与しなければならなかった。
【０１０６】
２４週間のプラシーボ管理期間中、この研究における患者を保護することに、すべての努力が向けられた。最新の臨床上の実務を反映させてこのプロトコールを設計したので、次のような付加的な治療および投与量の調節も可能であった。
【０１０７】
本研究の最初の３ヶ月間は、最大で３回まで関節内にステロイドを注射することが許された。（一回または複数回）注射された関節は、それぞれの注射から２８日間は関節の試験について評価されなかった。
【０１０８】
耐性の問題のために、バックグラウンドのＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド剤またはＮＳＡＩＤの治療の投与量を研究期間中に一度調整することができた。さらなる投与量の調整は、ノール医療用モニターを用いての立会い診察後にのみ行うように定められた。
【０１０９】
有効性の欠如が記録された場合（すなわちベースラインと比べてＡＣＲ２０応答が達成できなかった場合）、次のことが生じる可能性があった。
【０１１０】
−バックグラウンドのＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド剤の治療の投与量の一回分の増加（供給される残りのプレドニゾンの投与量は１０ｍｇ／日以下のままであった）。
【０１１１】
−３ヶ月目以降、上記に列挙された別のＤＭＡＲＤ療法での治療の開始。
【０１１２】
−以前に認められた、バックグラウンドの抗リウマチ薬の投与量の、ノール医療用モニターから判断されるさらなる調整。
【０１１３】
アザチオプリンおよび／またはシクロスポリンを投与されている患者は、これらの療法を中止してスクリーニング・ビジット前の２８日間の洗い流し期間に参加することが求められた。本研究の期間中はこれらの療法を用いてはならなかった。
【０１１４】
併用療法は、ベースラインで用いられ、かつ研究期間中に続けられる療法として、または研究期間中に開始される療法として規定された。無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、併用療法が示される。
【０１１５】
研究者によってＣＲＦ上に記入された指標に従って、併用療法は、「ＲＡ特異的」および「ＲＡ非特異的」に分けられた。研究の間、すべての患者はＲＡ特異的併用投薬（ＤＭＡＲＤまたは非ＤＭＡＲＤ）のいくつかの形式の上にあった。
【０１１６】
ＲＡ特異的ＤＭＡＲＤ併用療法：
表１において、無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、ＤＭＡＲＤ併用療法を示す。
【０１１７】
【表１】
【０１１８】
無作為化患者の大部分（６３６名中の５３１名［８３．５％］）が、研究期間中に一種以上のＤＭＡＲＤ併用療法を用いた（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の２６１名［８２．１％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の２７０名［８４．９％］）。合計で１０５名（６３６名中の１６．５％）の患者はＤＭＡＲＤを用いなかった（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の５７名［１７．９％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の４８名［１５．１％］）。３５６名（６３６名中の５６．０％）の患者は一種のＤＭＡＲＤを用いた（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の１８４名［５７．９％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者名中の１７２名［５４．１％］）。そして１７５名の患者（６３６名中の２７．５％）は二から四種の異なるＤＭＡＲＤを用いた（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の７７名［２４．２％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の９８名［３０．８％］）。
【０１１９】
研究期間中、Ｄ２Ｅ７処理群では、平均で１．１０の異なるＤＭＡＲＤを用いたのに対して、プラシーボ処理群では、平均で１．２１の異なるＤＭＡＲＤを用いた。
【０１２０】
最も高頻度で報告されたＤＭＡＲＤ併用療法はメトトレキサートであった。このものは、６３６名の患者中の３７７名（５９．３％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の１７８名［５６．０％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の１９９名［６２．６％］）によって用いられた。次に続く三種の最も広く用いられたＤＭＡＲＤ併用療法は、抗マラリア薬（すなわちクロロキン、ヒドロキシクロロキン）（６３６名の患者の２４．７％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２３．６％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２５．８％）、レフルノミド（６３６名の患者の１３．８％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の１３．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１４．５％）、そしてスルファサラジン（６３６名の患者の９．７％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の９．１％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１０．４％）であった。Ｄ２Ｅ７治療を受けた患者とプラシーボ処理を受けた患者との間には、ＲＡ特異的ＤＭＡＲＤ併用療法を用いた頻度についての関連性のある違いはなかった。
【０１２１】
ＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法：
表２において、無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、ＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法を示す。
【０１２２】
【表２】
【０１２３】
６３６名の無作為化患者中の合計で６１９名（９７．３％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の３１５名［９９．１％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の３０４名［９５．６％］）が、研究期間中に一種以上のＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法を用いた。
【０１２４】
最も高頻度で報告されたＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法はプレドニゾンであった。このものは、６３６名の患者中の２８７名（４５．１％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の１４１名［４４．３％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の１４６名［４５．９％］）によって用いられた。次に続く最も広く用いられた非ＤＭＡＲＤ併用療法は葉酸であった（６３６名の患者の２７．４％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２７．７％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２７．０％）。ＣＲＦに記載された指示に従って、葉酸はＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ療法または非ＲＡ特異的療法に分類された。ＲＡ以外のすべての指示に関しては、葉酸は非ＲＡ特異的療法に分類された。セレコキシブ（６３６名の患者の２５．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２４．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２６．１％）およびロフェコキシブ（６３６名の患者の１３．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の１４．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１２．３％）が、次に続く最も頻繁に用いられたＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法であった。Ｄ２Ｅ７治療を受けた患者とプラシーボ処理を受けた患者との間には、ＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法を用いた頻度についての関連性のある違いはなかった。
【０１２５】
ＲＡ非特異的併用療法：
無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、ＲＡ非特異的併用療法を示す。
【０１２６】
６３６名の無作為化患者中の合計で６１４名（９６．５％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の３０６名［９６．２％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の３０８名［９６．９％］）が、一種以上の非ＲＡ特異的併用療法を用いた。
【０１２７】
最も高頻度で報告された非ＲＡ特異的併用療法は総合ビタミン類であった。このものは、６３６名の患者中の１６６名（２６．１％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の７８名［２４．５％］および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の８８名［２７．７％］）によって用いられた。次に続く三種の最も広く用いられた併用療法は、カルシウム（６３６名の患者の２４．４％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２３．６％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２５．２％）、葉酸（６３６名の患者の２２．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２１．４％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２３．０％）ならびにインフルエンザウイルスの多価ワクチン（６３６名の患者の１４．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の１４．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１４．２％）であった。（ＣＲＦに記載された指示に従って、葉酸はＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ療法または非ＲＡ特異的療法に分類された。ＲＡ以外のすべての指示に関しては、葉酸は非ＲＡ特異的療法に分類された。）Ｄ２Ｅ７治療を受けた患者とプラシーボ処理を受けた患者との間には、非ＲＡ特異的併用療法を用いた頻度についての関連性のある違いはなかった。
【０１２８】
有効性の指標としては：２４週目でのＡＣＲ２０応答；２４週目でのＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０；ベースラインから２４週目までのＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０のＡＵＣ（曲線下面積）；ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０についての最初の応答までの時間；ＡＣＲの数値（ＡＣＲ−Ｎ）；ベースラインから２４週目までの、ＡＣＲ応答の判断基準の構成要素の変化（圧痛のある関節の総数［ＴＪＣ］、腫れた関節の総数［ＳＪＣ］、患者による疼痛の評価、患者および主治医による疾患の活動の総合評価、ＨＡＱおよびＣ反応性タンパク質［ＣＲＰ］）；ＳＦ−３６、ヘルス・ユーティリティーズ・インデックス（ＨＵＩ）、慢性病の治療の疲労の機能評価（ＦＡＣＩＴ）の度合いによって測定される、ベースラインから２４週目までの肉体機能の変化；Ｅｕｒｏ−ＱｏＬ質問表；疲労の多次元評価（ＭＡＦ）の度合い；被験体の簡易調査；バックグラウンドのＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド剤の治療の際の投与量増加までの発生率および時間；臨床上の応答を欠くことによる新規ＤＭＡＲＤ療法の設定；リウマチ因子（ＲＦ）；ならびに朝の硬直が挙げられる。
【０１２９】
頻度、パーセンテージならびに１００名の患者の年間あたりの割合によって、有害事象を要約した。ピアソンのカイ二乗（χ２）検定を用いて、Ｄ２Ｅ７群とプラシーボ群との間での統計的な比較を行った。統計的な特性ならびに異常値の頻度によって、理学的検査、研究室のパラメータおよび胸部ｘ線の変化を記述した。シフトテーブルも提供された。統計的な特性によってバイタルサインを記述した。２４週目のＡＣＲ２０の応答（ベースラインからの変化）を最初の有効性変数と規定した。有意水準αが０．０５のピアソンのχ２両側検定を利用して、Ｄ２Ｅ７群とプラシーボ群との間のＡＣＲ２０の応答速度を比較した。他のすべての有効性変数を記述的に要約し（統計的な特性、頻度、パーセンテージ、信頼区間）、統計的両側検定によって予備的に分析した。カテゴリーデータについてはピアソンのχ２検定を用い、連続的なデータについては、因子として処理群を、そして共変動としてそれぞれのベースライン値を含む共分散分析法（ＡＮＣＯＶＡ）モデルを用いた。連続型変数についてはウィルコクソンの順位和検定を用いて、そして離散型変数についてはピアソンのχ２検定を用いて、Ｄ２Ｅ７群とプラシーボ群との間の人口統計的な特性およびベースライン特性を比較した。
【０１３０】
有効性の結果：
主要な有効性の指標であるＡＣＲ２０応答は、最新の抗リウマチ療法にＤ２Ｅ７が追加された患者における、プラシーボと比較しての統計的に有意な大幅な改善（Ｄ２Ｅ７については５３．０％であるのに対してプラシーボについては３４．９％）に関連していた。
【０１３１】
【表３】
【０１３２】
Ｄ２Ｅ７による治療は、二次的な有効性の指標であるＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０、ＡＣＲ−Ｎ、圧痛のある関節の総数、腫れた関節の総数、患者および主治医による疾患の活動の総合評価、患者による疼痛の評価、ＨＡＱの障害指数、Ｃ反応性タンパク質、朝の硬直、朝の硬直の継続時間、ＦＡＣＩＴの疲労の度合い、ＳＦ−３６の１０ドメインのうちの９ならびにＨＵＩの１６ドメインの７に関する統計的に有意な改善に関連していた。
【０１３３】
Ｄ２Ｅ７によって、ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、およびＡＣＲ７０についての応答までの時間；ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０およびＡＣＲ−ＮについてのＡＵＣ；Ｅｕｒｏ−ＱｏＬ、ＲＦ、ならびにＭＡＦのスケールといった指標についての治療上の応答が、プラシーボを超えて改善したことも実証された。
【０１３４】
下位群の分析からは、メトトレキサート、抗マラリア薬治療、スルファサラジン、他のＤＭＡＲＤ、またはＤＭＡＲＤの併用数（すなわち０、１、２、または３以上）を併用して与えられたＤ２Ｅ７の患者について、プラシーボの患者と比較して、ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０、ＡＣＲ−Ｎのパラメータ、およびＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０、およびＡＣＲ−ＮのＡＵＣのスコアが大きく改善したことが実証された。レフルノミドの併用は、試験を行ったすべてのパラメータについてプラシーボによく似ていた。
【０１３５】
【表４】
【０１３６】
【表５】
【０１３７】
【表６】
【０１３８】
【表７】
【０１３９】
結論：
患者の既存のＤＭＡＲＤ療法（たとえば、メトトレキサート、抗マラリア薬〔クロロキン／ヒドロキシクロロキン〕、レフルノミド、およびスルファサラジン）に追加した場合、Ｄ２Ｅ７は一般的に耐性が良好であった。その追加は、有害事象の発生率またはプロフィールのあらゆる重大な変化とは関係がなかった。さらに、有害事象のプロフィールは、患者に用いられる、併用するＤＭＡＲＤの総数（すなわち０、１、２、または３以上）に関連はしないことであった。
【０１４０】
全体として、Ｄ２Ｅ７の投与量が４０ｍｇでは、単独で用いてもまたは他のＤＭＡＲＤと組み合わせて用いても安全であることが実証された。
【０１４１】
Ｄ２Ｅ７の治療は、その疾患が既存のＤＭＡＲＤ療法による治療では不十分である患者におけるＲＡの有意な改善と関連した。メトトレキサート、抗マラリア薬の治療、スルファサラジン、他のＤＭＡＲＤ、またはＤＭＡＲＤの併用数（すなわち０、１、２、または３以上）と組み合わせて用いた場合、Ｄ２Ｅ７はプラシーボと比較するとより高い応答と関連した。最後に、応答速度の改善は、用いるＤＭＡＲＤのタイプまたは回数とは、一般的に無関係であった。
【０１４２】
均等物
当業者であれば、ルーチンな実験を利用して、本明細書に記載された本発明の特定の実施態様に関する多数の均等物を認識するか、または確認できる。次の請求の範囲は、そのような均等物を包含することを意図する。
【技術分野】
【０００１】
腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）は、単球およびマクロファージを含めた非常に多くのタイプの細胞によって生産されるサイトカインであり、当初は特定のマウスの腫瘍の壊死を誘導するその能力に基づいて特定された（たとえばオールド，エル．（Ｏｌｄ，Ｌ．）、（１９８５） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：６３０−６３２を参照すること）。その後、悪液質と関係があるカケクチンと称される因子がＴＮＦαと同一の分子であることが示された。ＴＮＦαは、ショックの仲介に関係している（たとえば、ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．（Ｂｅｕｔｌｅｒ，Ｂ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９８８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５７：５０５−５１８；ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．、（１９８９）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：６２５−６５５を参照すること）。さらに、ＴＮＦαは、敗血症、感染症、自己免疫疾患、移植片の拒絶反応および移植片対宿主疾患を含めた他の種々のヒトの疾患および障害の病態生理に関係している（たとえば、バシリ，ピー．（Ｖａｓｉｌｌｉ，Ｐ．）、（１９９２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４１１−４５２；トレーシー，ケイ．ジェイ．およびセラミ，エイ．（Ｔｒａｃｅｙ，Ｋ．Ｊ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１−５０３を参照すること）。
【０００２】
種々のヒトの障害におけるヒトＴＮＦα（ｈＴＮＦα）の有害な役割のせいで、ｈＴＮＦα活性を阻害するかまたは打ち消すための治療計画が設計されてきた。とりわけ、ｈＴＮＦαと結合し、そしてそれを中和する抗体が、ｈＴＮＦα活性を阻害するための手段として求められてきた。このような抗体の最も初期のもののうちのいくつかは、マウスのモノクローナル抗体（ｍＡｂ）であり、このものは、ｈＴＮＦαで免疫化されたマウスのリンパ球から調製されたハイブリドーマによって分泌された（たとえば、ハーン，ティー（Ｈａｈｎ Ｔ）；ら、（１９８５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８２：３８１４−３８１８；リャン，シー−エム．（Ｌｉａｎｇ，Ｃ−Ｍ．）ら、（１９８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１３７：８４７−８５４；ヒライ，エム．（Ｈｉｒａｉ，Ｍ．）ら、（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ９６：５７−６２；フェンドリー，ビー．エム．（Ｆｅｎｄｌｙ，Ｂ．Ｍ．）ら、（１９８７）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ６：３５９−３７０；モラー，エイ．（Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ａ．）ら、（１９９０）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ２：１６２−１６９；モラーらの米国特許第５，２３１，０２４号；ウォーラック，ディー．（Ｗａｌｌａｃｈ，Ｄ．）による欧州特許公報第１８６ ８３３ Ｂ１号；オールドらによる欧州特許公開公報第２１８ ８６８ Ａ１号；モラー，エイ．らによる欧州特許公報第２６０ ６１０ Ｂ１号を参照すること）。多くの場合、これらのマウス抗ｈＴＮＦα抗体はｈＴＮＦαに対して高い親和性を示し（たとえばＫｄ≦１０−９Ｍ）、かつｈＴＮＦα活性を中和することができたのだが、これらのものをインビボで用いることは、マウスの抗体をヒトに投与することに伴う問題点（たとえば、血清中の半減期が短いこと、ヒトの特定のエフェクター機能を引き起こす能力を奪うこと、およびヒトにおけるマウス抗体に対する不必要な免疫応答（「ヒト抗マウス抗体」（ＨＡＭＡ）反応）を導くことなど）によって、制限を受けるのかもしれない。
【０００３】
ヒトにおいて完全なマウスの抗体を用いることに伴う問題点を克服しようとして、マウスの抗ｈＴＮＦα抗体の遺伝子を操作して、より「ヒトのような」ものにしてきた。たとえば、キメラ抗体（その抗体における抗体の鎖の可変領域がマウス由来のものであり、かつ抗体の鎖の定常領域がヒト由来のものである）が調製された（ナイト，ディー．エム（Ｋｎｉｇｈｔ，Ｄ．Ｍ）ら、（１９９３） Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１４４３−１４５３；ダッドナ，ピー．イー．（Ｄａｄｄｏｎａ，Ｐ．Ｅ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１６５５３号）。さらに、ヒト化抗体（その抗体における抗体の可変領域の超可変領域がマウス由来のものであるが、可変領域の残りと抗体の定常領域はヒト由来のものである）も調製された（アデア，ジェイ．アール．（Ａｄａｉｒ，Ｊ．Ｒ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１１３８３号）。しかしながら、これらのキメラ抗体およびヒト化抗体はそれでもなお、いくらかのマウスの配列を保持しているので、不必要な免疫反応を、特に長期間、たとえば慢性関節リウマチなどの慢性的な適応症のために投与する場合にはヒト抗キメラ抗体（ＨＡＣＡ）反応をやはり惹起するかもしれない（たとえば、エリオット，エム．ジェイ．（Ｅｌｌｉｏｔｔ，Ｍ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５−１１２７；エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１０５−１１１０を参照すること）。
【０００４】
マウスのｍＡｂまたはその誘導体（たとえばキメラ抗体またはヒト化抗体）に対する好ましいｈＴＮＦα阻害剤は、全体がヒト抗ｈＴＮＦα抗体である。というのは、たとえ長期間用いる場合であっても、このような薬剤はＨＡＭＡ反応を惹起すべきではないからである。ヒトのハイブリドーマ技術を利用して、ｈＴＮＦαに対するヒトモノクローナル自己抗体が調製された（ボイル，ピー．（Ｂｏｙｌｅ，Ｐ．）ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５５６−５６８；ボイル，ピー．ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５６９−５８１；ボイルらによる欧州特許公開公報第６１４ ９８４ Ａ２号）。しかしながら、これらのハイブリドーマ由来のモノクローナル自己抗体は、ｈＴＮＦαに対する親和性があまりにも弱いために従来法によって計算できないことが報告され、可溶性ｈＴＮＦαと結合する能力がなく、そしてｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性を中和する能力がなかった（上掲のボイルらを参照すること）。さらに、ヒトのハイブリドーマ技術が成功するかどうかは、ヒトの末梢血中の、ｈＴＮＦαに対して特異的な自己抗体を生産するリンパ球に関する自然の存在次第である。ある研究では、ヒトの被験体の血清においてｈＴＮＦαに対する自己抗体が検出された（フォムズガード，エイ．（Ｆｏｍｓｇａａｒｄ，Ａ．）ら、（１９８９）Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：２１９−２２３；ベンテン，ケイ．（Ｂｅｎｄｔｚｅｎ，Ｋ．）ら、（１９９０）Ｐｒｏｇ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．１０Ｂ：４４７−４５２）。それに対して他の研究では検出されなかった（ロイシュ，エイチ−ジー．（Ｌｅｕｓｃｈ，Ｈ−Ｇ．）ら、（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １３９：１４５−１４７）。
【０００５】
天然型のヒト抗ｈＴＮＦα抗体に代わるものとしては、組み換え型ｈＴＮＦα抗体がある。比較的親和性が弱く（すなわち、Ｋｄは約１０−７Ｍ）、かつ解離速度が速い（すなわち、Ｋｏｆｆは約１０−２ｓｅｃ−１）組み換え型ヒト抗体であってｈＴＮＦαと結合する組み換え型ヒト抗体が記載された（グリフィス，エイ．ディー．（Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ａ．Ｄ．）ら、（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ．１２：７２５−７３４）。しかしながら、これらの解離動態は比較的速いために、これらの抗体は治療用途には適さないかもしれない。さらに、ｈＴＮＦα活性を中和するどころか、むしろ細胞表面へのｈＴＮＦαの結合を促進し、かつｈＴＮＦαの内在化を促進するような組み換え型ヒト抗ｈＴＮＦαが記載された（リドバリー，エイ．（Ｌｉｄｂｕｒｙ，Ａ．）ら、（１９９４） Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．５：２７−４５；アストン，アール．（Ａｓｔｏｎ，Ｒ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０３１４５号）。
【０００６】
高い親和性で可溶性ｈＴＮＦαと結合し、解離動態が遅く、そして（インビトロおよびインビボでの）ｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性ならびにｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化を含めたｈＴＮＦα活性を中和する能力を有する組み換え型ヒト抗体も記載された（米国特許第６，０９０，３８２号を参照すること）。週に一回の頻度で抗体を静脈内に投与するための典型的なプロトコールを実施する。抗体および／または任意の薬剤を毎週投与することは、費用と手間がかかる可能性があり、そして結果的に、頻繁な投与によって副作用の頻度が増加する可能性がある。静脈内投与には、多くの場合その投与が誰かの医学訓練として行われるという制限もある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第５，２３１，０２４号
【特許文献２】欧州特許公報第１８６ ８３３ Ｂ１号
【特許文献３】欧州特許公開公報第２１８ ８６８ Ａ１号
【特許文献４】欧州特許公報第２６０ ６１０ Ｂ１号
【特許文献５】国際公開第９２／１６５５３号
【特許文献６】国際公開第９２／１１３８３号
【特許文献７】欧州特許公開公報第６１４ ９８４ Ａ２号
【特許文献８】国際公開第９２／０３１４５号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】オールド，エル．（Ｏｌｄ，Ｌ．）、（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：６３０−６３２
【非特許文献２】ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．（Ｂｅｕｔｌｅｒ，Ｂ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９８８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５７：５０５−５１８
【非特許文献３】ビュートラー，ビー．およびセラミ，エイ．、（１９８９）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：６２５−６５５
【非特許文献４】バシリ，ピー．（Ｖａｓｉｌｌｉ，Ｐ．）、（１９９２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４１１−４５２
【非特許文献５】トレーシー，ケイ．ジェイ．およびセラミ，エイ．（Ｔｒａｃｅｙ，Ｋ．Ｊ．ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．）、（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１−５０３
【非特許文献６】ハーン，ティー（Ｈａｈｎ Ｔ）；ら、（１９８５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８２：３８１４−３８１８
【非特許文献７】リャン，シー−エム．（Ｌｉａｎｇ，Ｃ−Ｍ．）ら、（１９８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１３７：８４７−８５４
【非特許文献８】ヒライ，エム．（Ｈｉｒａｉ，Ｍ．）ら、（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ９６：５７−６２
【非特許文献９】フェンドリー，ビー．エム．（Ｆｅｎｄｌｙ，Ｂ．Ｍ．）ら、（１９８７）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ６：３５９−３７０
【非特許文献１０】モラー，エイ．（Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ａ．）ら、（１９９０）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ２：１６２−１６９
【非特許文献１１】ナイト，ディー．エム（Ｋｎｉｇｈｔ，Ｄ．Ｍ）ら、（１９９３）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１４４３−１４５３
【非特許文献１２】エリオット，エム．ジェイ．（Ｅｌｌｉｏｔｔ，Ｍ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５−１１２７
【非特許文献１３】エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１０５−１１１０
【非特許文献１４】ボイル，ピー．（Ｂｏｙｌｅ，Ｐ．）ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５５６−５６８
【非特許文献１５】ボイル，ピー．ら、（１９９３）Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５６９−５８１
【非特許文献１６】フォムズガード，エイ．（Ｆｏｍｓｇａａｒｄ，Ａ．）ら、（１９８９） Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：２１９−２２３
【非特許文献１７】ベンテン，ケイ．（Ｂｅｎｄｔｚｅｎ，Ｋ．）ら、（１９９０）Ｐｒｏｇ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．１０Ｂ：４４７−４５２
【非特許文献１８】ロイシュ，エイチ−ジー．（Ｌｅｕｓｃｈ，Ｈ−Ｇ．）ら、（１９９１） Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １３９：１４５−１４７
【非特許文献１９】グリフィス，エイ．ディー．（Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ａ．Ｄ．）ら、（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ．１２：７２５−７３４
【非特許文献２０】リドバリー，エイ．（Ｌｉｄｂｕｒｙ，Ａ．）ら、（１９９４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．５：２７−４５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、ＴＮＦαに関連する障害（たとえば、敗血症、自己免疫疾患（慢性関節リウマチ、アレルギー、多発性硬化症、自己免疫性糖尿病、自己免疫性ブドウ膜炎およびネフローゼ症候群など）、感染症、悪性腫瘍、移植片の拒絶反応または移植片対宿主疾患、肺疾患、骨疾患、腸疾患、中枢神経系の障害、心疾患）を治療するために、一種以上の薬剤と共に抗ＴＮＦα抗体を投与する方法を提供する。治療される自己免疫疾患としては、慢性関節リウマチが好ましい。
【００１０】
他の（単数または複数の）薬剤の投与の前に、投与と一緒にまたは投与後に、抗体を投与してもよい。本発明の方法は、抗体および他の（単数または複数の）薬剤のあらゆる投与順序、ならびにあらゆる投与手段を包含する。ＴＮＦαに関連する障害を治療するために隔週で投与する計画にて、好ましくは皮下経路を経て抗体を投与することが好ましい。
【００１１】
他の薬剤としては、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）もしくは非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、もしくはステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせが好ましい。ＤＭＡＲＤの好ましい例は、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤およびスルファサラジンである。これらの方法には、ヒト抗体を、別の治療剤（たとえば、他の標的と結合する一種以上のさらなる抗体（他のサイトカイン類と結合または細胞表面分子と結合する抗体など）、一種以上のサイトカイン類、可溶性ＴＮＦα受容体（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９４／０６４７６号を参照すること）、イミュネックス社（Ｉｍｍｕｎｅｘ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）のエタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標））およびセントコア社（Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．）のインフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標））および／またはｈＴＮＦαの生産または活性を阻害する一種以上の化学薬品（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１９７５１号に記載されているようなシクロヘキサン−イリデン誘導体））と共に、被験体に投与するという組合せ療法を利用することが包含される。
【００１２】
本発明の別の側面は、抗ＴＮＦα抗体および自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の薬剤ならびに医薬適合性の担体を含有する医薬組成物に関する。
【００１３】
本発明の別の側面は、抗ＴＮＦα抗体および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物、ならびに自己免疫疾患の治療に有用な薬剤および医薬適合性の担体をそれぞれ含有する一種以上の医薬組成物を含むキットに関する。あるいは、このキットは、抗ＴＮＦα抗体、自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の薬剤および医薬適合性の担体を含有する単一の医薬組成物を含む。このキットは、抗ＴＮＦα抗体の投与が有用である障害（たとえば自己免疫疾患、特に慢性関節リウマチ）の治療のための医薬組成物を投与するための取扱説明書、を含む。
【００１４】
抗体またはその抗原結合部分としては、ヒトＴＮＦαに特異的に結合する組み換え型ヒト抗体が好ましい。抗体としては、ヒトＴＮＦαに特異的に結合する組み換え型ヒト抗体が好ましい。本発明の抗体は、高い親和性でｈＴＮＦαに結合し、解離動態が遅く、そして（インビトロおよびインビボでの）ｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性およびｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化を含めたｈＴＮＦα活性を中和することを特徴とする。この抗体またはその抗原結合部分としては、共に表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｄが１×１０−８Ｍ以下かつＫｏｆｆ速度定数が１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離し、かつ標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−７Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和するものが好ましい。より好ましいものは、Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分であり、さらに好ましいものは、Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にて解離するものである。さらに好ましい単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分は、標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−８Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和するものであり、より好ましいものは、ＩＣ５０が１×１０−９Ｍ以下にて中和するものであり、特に好ましいものは、ＩＣ５０が１×１０−１０Ｍ以下にて中和するものである。抗体は全長（たとえばＩｇＧ１抗体またはＩｇＧ４抗体）であってもよく、または一つの抗原結合部分（たとえばＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ断片または単一のドメイン）のみを含むものであってもよい。本発明の最も好ましい組み換え型抗体（Ｄ２Ｅ７と称されるもの）は、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、および配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメインを有する。配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）とを有するＤ２Ｅ７抗体が好ましい。これらの抗体は米国特許第６，０９０，３８２号に記載されており、その全体が本明細書に参考として援用されている。
【００１５】
次の特徴：
ａ）表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｏｆｆが１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、または１番目、３番目、４番目、６番目、７番目、８番目および／または９番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメインを有する；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、または２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目、１１番目および／または１２番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメインを有する；
を有する抗体またはその抗原結合部分が好ましい。
【００１６】
Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がより好ましい。Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がさらに好ましい。
【００１７】
配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＬＣＶＲを、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＨＣＶＲと共に含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。ＬＣＶＲが配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメインをさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメインをさらに有することが、より好ましい。ＬＣＶＲが配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインをさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを有することが、さらに好ましい。
【００１８】
配列番号１のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲおよび配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲを含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。特定の実施態様においては、抗体はＩｇＧ１の重鎖定常領域またはＩｇＧ４の重鎖定常領域を有する。さらに別の実施態様においては、抗体はＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片または単鎖Ｆｖ断片である。
【００１９】
さらに他の実施態様においては、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効である障害を、一種以上の抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分を隔週で被験体に皮下投与することによって治療する方法が、本発明によって提供される。配列番号３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＬＣＶＲを含むか、または配列番号４、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有するＨＣＶＲと共に含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。
【００２０】
本発明の上記の実施態様のうちで最も好ましいものは、抗体がＤ２Ｅ７であって、４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与する実施態様である。一種以上の他の薬剤の投与量は、その有効投与量に従う。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明は、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効である障害を治療する方法であって、その障害が治療されるように、一種以上の他の薬剤と共に、高い親和性、遅い解離速度かつ高い中和能力にてヒトＴＮＦαと結合する単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を投与する工程を含む方法に関する。
【００２２】
本発明の理解がより容易となるように、特定の用語を最初に定義する。
【００２３】
本明細書で用いられる「投与すること」という用語は、治療目的（たとえばＴＮＦαに関連する障害の治療）を達成するために、物質（たとえば抗ＴＮＦα抗体）を投与することを意味する。
【００２４】
本明細書で用いられる「隔週で投与する計画」、「隔週で投与すること」、および「隔週投与」という用語は、治療目的（たとえばＴＮＦαに関連する障害の治療）を達成するために、物質（たとえば抗ＴＮＦα抗体）を被験体に投与することの時間的経過を意味する。隔週で投与する計画は、毎週投与する計画を包含することを意図しない。９〜１９日ごとに物質を投与することが好ましく、１１〜１７日ごとに投与することがより好ましく、１３〜１５日ごとに投与することがさらに好ましく、１４日ごとに投与することが特に好ましい。
【００２５】
本明細書で用いられる「組合せ療法」という用語は、二種以上の治療用物質（たとえば抗ＴＮＦα抗体とＤＭＡＲＤまたはＮＳＡＩＤなどの他の薬剤）を投与することを意味する。抗ＴＮＦα抗体の投与と同時に、投与の前に、または投与後に、他の（単数または複数の）薬剤を投与してもよい。
【００２６】
本明細書で用いられる「ヒトＴＮＦα」（本明細書ではｈＴＮＦαまたは単にｈＴＮＦと略記する）という用語は、１７ｋＤの分泌型および２６ｋＤの膜結合型として存在するヒトのサイトカインを意味する意図であり、このものの生物的に活性な形態は、１７ｋＤの分子が非共有的に結合した三量体からなる。ＴＮＦαの構造は、たとえば、ペニーカ，ディー．（Ｐｅｎｎｉｃａ，Ｄ．）ら、（１９８４）Ｎａｔｕｒｅ ３１２：７２４−７２９；デイビス，ジェイ．エム．（Ｄａｖｉｓ，Ｊ．Ｍ．）ら、（１９８７）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２６：１３２２−１３２６；およびジョーンズ，イー．ワイ．（Ｊｏｎｅｓ，Ｅ．Ｙ．）ら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３３８：２２５−２２８にさらに記載されている。ヒトＴＮＦαという用語は、組み換え型ヒトＴＮＦα（ｒｈＴＮＦα）を包含する意図であり、このものは、標準的な組み換え発現法によって調製することができ、または市販のもの（アール・アンド・ディー・システムズ（Ｒ ａｎｄ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）社、カタログ番号２１０−ＴＡ、ミネアポリス、ミネソタ州）を購入することができる。
【００２７】
本明細書で用いられる「抗体」という用語は、四本のポリペプチド鎖からなる免疫グロブリン分子を意味する意図であり、二本の重（Ｈ）鎖と二本の軽（Ｌ）鎖はジスルフィド結合によって相互に連結している。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＨＣＶＲまたはＶＨと略記する）および重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、三つのドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）からなる。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲまたはＶＬと略記する）および軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、一つのドメインであるＣＬからなる。ＶＨ領域およびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称するより保存性の高い領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する超可変領域にさらに細分することができる。それぞれのＶＨおよびＶＬは三つのＣＤＲと四つのＦＲからなり、アミノ末端からカルボキシ末端まで、次の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配列している。
【００２８】
本明細書で用いられる、抗体の「抗原結合部分」（または単に「抗体の一部分」）という用語は、抗原（たとえばｈＴＮＦα）と特異的に結合する能力を保持する抗体の一つ以上の断片を意味する。全長の抗体の断片によって、抗原と結合するという抗体の機能を発揮できることが示された。「抗原結合部分」という用語の範囲内に含まれる抗体の結合性断片の具体例としては、（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメインおよびＣＨ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって結合された二つのＦａｂ断片を含む二価の断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（ワード（Ｗａｒｄ）ら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が包含される。そのうえ、Ｆｖ断片の二つのドメインであるＶＬおよびＶＨは異なる遺伝子にコードされているが、ＶＬ領域およびＶＨ領域が組になって一価分子を形成するような単一のタンパク質鎖としてこれらを形成させることができる合成リンカーによって組み換え法を用いてこれらを結合することができる（この一価分子は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている；たとえば、バード（Ｂｉｒｄ）ら、（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；およびヒューストン（Ｈｕｓｔｏｎ）ら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３を参照すること）。このような単鎖抗体を、抗体の「抗原結合部分」という用語の範囲内に包含することも意図される。二重特異性抗体などの単鎖抗体の他の形態も包含される。二重特異性抗体（ｄｉａｂｏｄｙ）とは、二重に特異性を持つ二価の抗体であり、ここで、この中のＶＨドメインおよびＶＬドメインは単一のポリペプチド鎖上に発現しているが、同一の鎖上で二つのドメイン間での対形成ができないような極めて短いリンカーを用いることによって、これらのドメインを別の鎖の相補的なドメインと対形成させて二つの抗原結合部分が作られている（たとえば、ホリガー，ピー．（Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．）ら、（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４−６４４８；ポリャック，アール．ジェイ．（Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ２：１１２１−１１２３を参照すること）。
【００２９】
さらに、抗体またはその抗原結合部分は、より大きなイムノアドヘシン分子の一部でもよく、ここで、この分子は、抗体または抗体の一部分と、一種以上の他のタンパク質またはペプチドとが共有的にまたは非共有的に結合して形成されるものである。このようなイムノアドヘシン分子の具体例としては、四量体ｓｃＦｖ分子を作製するために用いられるストレプトアビジンのコア領域（キプリヤノフ，エス．エム．（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．）ら、（１９９５）Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ６：９３−１０１）、ならびにビオチン化された二価のｓｃＦｖ分子を作製するために用いられるシステイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端のポリヒスチジンタグ（キプリヤノフ，エス．エム．ら、（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８）が挙げられる。従来の技術（たとえば、抗体全体をそれぞれパパインまたはペプシンで消化すること）を用いて、抗体全体からＦａｂ断片およびＦ（ａｂ’）２断片などの抗体の一部分を調製することができる。さらに、上記のような標準的な組み換えＤＮＡ技術を用いて、抗体、抗体の一部分およびイムノアドヘシン分子を得ることができる。
【００３０】
本明細書で用いられる「ヒト抗体」という用語は、ヒトの生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を包含する意図である。本発明のヒト抗体には、例えばＣＤＲ、特にＣＤＲ３において、ヒトの生殖細胞系列の免疫グロブリン配列にコードされていないアミノ酸残基（たとえば、インビトロでのランダム突然変異または部位特異的突然変異によって導入された突然変異体、またはインビボでの体細胞変異によって導入された突然変異体）が含まれてもよい。しかしながら、本明細書で用いられる「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するその中のＣＤＲ配列がヒトのフレームワーク配列上にグラフトされた抗体を包含することは意図しない。
【００３１】
本明細書で用いられる「組み換え型ヒト抗体」という用語は、組み換え手段によって調製された、発現された、作製されたまたは単離されたすべてのヒト抗体（たとえば、宿主細胞内にトランスフェクトされた組み換え発現ベクターを用いて発現された抗体（下記のＩＩ部でさらに記載されている）、組み換え型ヒト抗体の組合せライブラリーから単離された抗体（下記のＩＩＩ部でさらに記載されている）、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックな動物（たとえばマウス）から単離された抗体（たとえばテイラー，エル．ディー．（Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．Ｄ．）ら、（１９９２）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０：６２８７−６２９５を参照すること））または、他のＤＮＡ配列に対するヒトの免疫グロブリンの遺伝子配列のスプライシングを含む、他のあらゆる手段によって調製された、発現された、作製されたまたは単離された抗体を包含する意図である。このような組み換え型ヒト抗体は、ヒトの生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する。しかしながら、特定の実施態様においては、このような組み換え型ヒト抗体をインビトロでの突然変異誘発に付して（またはヒトＩｇ配列についてのトランスジェニック動物を用いる場合はインビボの体細胞変異誘発に付して）、それによって組み換え型抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域のアミノ酸配列を、ヒトの生殖細胞系列のＶＨ配列およびＶＬ配列に由来し、それらに関連するものであると同時に、インビボでの天然のヒト抗体の生殖細胞系列のレパートリーの範囲内には存在しないかもしれない配列とする。
【００３２】
本明細書で用いられる「単離された抗体」とは、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を意味する意図である（たとえば、単離された、ｈＴＮＦαと特異的に結合する抗体は、ｈＴＮＦα以外の抗原と特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、単離された、ｈＴＮＦαと特異的に結合する抗体は、他の抗原（たとえば（下記にてより詳細に検討される）他の種に由来するｈＴＮＦα分子）に対する交差反応性を有してもよい。さらに、単離された抗体は、他の細胞性成分および／または化合物を実質的に含まない。
【００３３】
本明細書で用いられる「中和抗体」（または「ｈＴＮＦα活性を中和する抗体」）とは、それがｈＴＮＦαと結合すると、ｈＴＮＦαの生物活性の阻害を生ずる抗体を意味する意図である。ｈＴＮＦαの生物活性の一種以上の指標（たとえば、（インビトロまたはインビボのいずれかにおける）ｈＴＮＦαに誘導される細胞毒性、ｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化、およびｈＴＮＦα受容体に対するｈＴＮＦαの結合性）を測定することによって、ｈＴＮＦαの生物活性のこの阻害を評価することができる。当該技術分野で公知のインビトロまたはインビボでの数種のアッセイ（米国特許第６，０９０，３８２号を参照すること）のうちの一種以上によって、ｈＴＮＦαの生物活性のこれらの指標を評価することができる。ｈＴＮＦαに誘導されるＬ９２９細胞の細胞毒性の阻害によって、ｈＴＮＦα活性を中和する抗体の能力を評価することが好ましい。ｈＴＮＦα活性の追加のまたは代替的なパラメータとして、ｈＴＮＦαに誘導されるＨＵＶＥＣ上でのＥＬＡＭ−１の発現を阻害する抗体の能力を、ｈＴＮＦαに誘導される細胞の活性化の指標と同様に評価することができる。
【００３４】
本明細書で用いられる「表面プラズモン共鳴」という用語は、ある光学現象を意味し、この光学現象によって、バイオセンサー・マトリクス内のタンパク質濃度の変化を検出することによる生物特異的相互作用のリアルタイム分析が可能となる。たとえば、ＢＩＡｃｏｒｅシステム（ファルマシア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）社のＢｉｏｓｅｎｓｏｒ ＡＢ、ウプサラ、スウェーデンおよびピスカタウェイ、ニュージャージー州）が用いられる。さらなる説明については、実施例１、ならびにイェンソン，ユー．（Ｊｏｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．）ら、（１９９３）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９−２６；イェンソン，ユー．ら、（１９９１）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １１：６２０−６２７；ジョンソン，ビー．（Ｊｏｈｎｓｓｏｎ，Ｂ．）ら、（１９９５）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．８：１２５−１３１；およびジョンソン，ビー．ら、（１９９１）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８：２６８−２７７を参照すること。
【００３５】
本明細書で用いられる「Ｋｏｆｆ」という用語は、抗体／抗原複合体から解離する抗体についての解離速度定数を意味する意図である。
【００３６】
本明細書で用いられる「Ｋｄ」という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の解離定数を意味する意図である。
【００３７】
本明細書で用いられる「核酸分子」という用語は、ＤＮＡ分子およびＲＮＡ分子を包含する意図である。核酸分子は一本鎖でもまたは二本鎖でもよいが、二本鎖ＤＮＡが好ましい。
【００３８】
ｈＴＮＦαと結合する抗体または抗体の一部分（たとえばＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ３）をコードする核酸に関連して、本明細書で用いられる「単離された核酸分子」という用語は、その中の抗体または抗体の一部分をコードするヌクレオチド配列が、ｈＴＮＦα以外の抗原と結合する抗体または抗体の一部分をコードする他のヌクレオチド配列を含んでいない核酸分子を意味する意図であり、ここで、他の配列とは、ヒトのゲノムＤＮＡにおいて天然の状態でその核酸に隣接しているかもしれない配列である。したがって、たとえば、抗ｈＴＮＦα抗体のＶＨ領域をコードする本発明の単離された核酸は、ｈＴＮＦα以外の抗原と結合する他のＶＨ領域をコードする他のいかなる配列も含まない。
【００３９】
本明細書で用いられる「ベクター」という用語は、それに連結した別の核酸を輸送する能力を有する核酸分子を意味する意図である。ベクターの一つのタイプは「プラスミド」であり、このものは、追加のＤＮＡセグメントがその中に連結されてもよい環状の二本鎖ＤＮＡループという意味である。別のタイプのベクターはウイルスベクターであり、ここでは、ウイルスゲノム内に追加のＤＮＡセグメントが連結され得る。特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞内で自律複製する能力を有する（たとえば、細菌の複製起点と哺乳動物のエピソームベクターを有する細菌ベクター）。宿主細胞内への導入時に、宿主細胞のゲノム内に他のベクター（たとえば哺乳動物の非エピソームベクター）を組み込むことができ、それによって、宿主ゲノムと共に複製される。さらに、特定のベクターは、それに機能的に連結する遺伝子の発現を導く能力を有する。本明細書では、このようなベクターを「組み換え発現ベクター」（または単に「発現ベクター」）と称する。一般的に、組み換えＤＮＡ技術において役立つ発現ベクターは、プラスミドの形態であることが多い。プラスミドは最も広く用いられるベクターの形態なので、本明細書において、「プラスミド」と「ベクター」とを相互に交換して用いてもよい。しかしながら、本発明は、ウイルスベクター（たとえば、複製能を欠損したレトロウイルス、アデノウイルスおよびアデノ関連ウイルス）などの他の形態の発現ベクターを包含することを意図し、これらのものは等価な機能を果たす。
【００４０】
本明細書で用いられる「組み換え宿主細胞」（または単に「宿主細胞」）という用語は、その中に組み換え発現ベクターが導入された細胞を意味する意図である。このような用語は、特定の対象細胞だけではなく、そのような細胞の子孫をも意味する意図であることを理解すべきである。突然変異または環境の影響のいずれかによる特定の修飾が、後の世代では生じてもよいので、実際のところ、このような子孫は親細胞と同一ではないかもしれないが、それでもなお本明細書で用いられる「宿主細胞」という用語の範囲内に包含される。
【００４１】
本発明の種々の側面を、ここにより詳細に説明する。
【００４２】
本発明によって、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効である障害を治療する方法が提供される。これらの方法には、高い親和性でヒトＴＮＦαと結合し、解離速度が遅く、そしてそれを中和する能力が高い、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を、自己免疫疾患、とりわけ慢性関節リウマチの治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に隔週で皮下投与することが挙げられる。本発明のヒト抗体は、組み換え型ヒト抗ｈＴＮＦα中和抗体であることが好ましい。本発明の組み換え型中和抗体としては、本明細書でＤ２Ｅ７（Ｄ２Ｅ７ ＶＬ領域のアミノ酸配列を配列番号１に示す；Ｄ２Ｅ７ ＶＨ領域のアミノ酸配列を配列番号２に示す）と称されるものが最も好ましく、このものを４０ｍｇの投与量で投与する。Ｄ２Ｅ７の特性は、サルフェルド（Ｓａｌｆｅｌｄ）ら、米国特許第６，０９０，３８２号に記載されており、このものは、本明細書中に参考として援用されている。
【００４３】
一つの側面において、本発明は、抗ＴＮＦα抗体および自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤を投与することが有効である障害の治療に関する。これらの治療としては、Ｄ２Ｅ７抗体およびその抗体の一部分、Ｄ２Ｅ７に関係がある抗体およびその抗体の一部分、ならびにＤ２Ｅ７と等価の特性（たとえば、高い親和性でｈＴＮＦαと結合し、解離動態が遅く、そして中和能力が高いこと）を有する他のヒト抗体およびその抗体の一部分を隔週で皮下投与することが挙げられる。一つの実施態様においては、共に表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｄが１×１０−８Ｍ以下かつＫｏｆｆ速度定数が１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離し、かつ標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−７Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を用いての治療が、本発明によって提供される。Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分がより好ましく、または、Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にて解離するものがより好ましい。標準的なインビトロのＬ９２９アッセイでのＩＣ５０が１×１０−８Ｍ以下にてヒトＴＮＦαの細胞毒性を中和する、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分がより好ましく、ＩＣ５０が１×１０−９Ｍ以下にて中和するものがさらに好ましく、ＩＣ５０が１×１０−１０Ｍ以下にて中和するものがなお一層好ましい。好ましい実施態様においては、抗体は単離された組み換え型ヒト抗体またはその抗原結合部分である。
【００４４】
抗体の重鎖のＣＤＲ３ドメインおよび軽鎖のＣＤＲ３ドメインが、抗原についての抗体の結合特異性／親和性において重要な役割を果たすことは、当該技術分野においては周知である。その結果、別の側面において、本発明は、ｈＴＮＦαとの会合についての解離動態が遅いヒト抗体であって、かつＤ２Ｅ７のそれらと構造的に同一かまたは関連する軽鎖のＣＤＲ３ドメインおよび重鎖のＣＤＲ３ドメインを有するヒト抗体を皮下投与することによって、抗ＴＮＦα抗体の投与が有効であるの障害を治療する方法に関する。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３の９番目の位置を、Ｋｏｆｆに実質的な影響を与えることなくＡｌａまたはＴｈｒで占有することができる。その結果、Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３についてのコンセンサスモチーフは、アミノ酸配列：Ｑ−Ｒ−Ｙ−Ｎ−Ｒ−Ａ−Ｐ−Ｙ−（Ｔ／Ａ）（配列番号３）を含む。さらに、Ｄ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３の１２番目の位置を、Ｋｏｆｆに実質的な影響を与えることなくＴｙｒまたはＡｓｎで占有することができる。その結果、Ｄ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３についてのコンセンサスモチーフは、アミノ酸配列：Ｖ−Ｓ−Ｙ−Ｌ−Ｓ−Ｔ−Ａ−Ｓ−Ｓ−Ｌ−Ｄ−（Ｙ／Ｎ）（配列番号４）を含む。さらに、実施例２で示されるように、Ｄ２Ｅ７の重鎖および軽鎖のＣＤＲ３ドメインは、Ｋｏｆｆの実質的な影響を伴わず、（ＶＬ ＣＤＲ３内の１番目、４番目、５番目、７番目または８番目の位置において、またはＶＨ ＣＤＲ３内の２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目または１１番目の位置において）ただ一つのアラニン残基による置換を受けやすい。さらに、Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよびＶＨ ＣＤＲ３ドメインがアラニンによる置換を受けやすいことを考えれば、抗体の解離速度定数がなお小さいまま、ＣＤＲ３ドメイン内の他のアミノ酸の置換、とりわけ同類アミノ酸による置換が可能かもしれないことを、当業者であれば理解する。本明細書で用いられる「同類アミノ酸の置換」とは、あるアミノ酸残基が類似の側鎖を有する別のアミノ酸残基で置き換えられる置換である。当該技術分野においては、類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーが規定されており、塩基性側鎖（たとえば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（たとえば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（たとえば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（たとえば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β分岐側鎖（たとえば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（たとえば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が含まれる。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよび／またはＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３ドメイン内で、多くても１から５個の同類アミノ酸の置換がなされることが好ましい。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよび／またはＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３ドメイン内で、多くても１から３個の同類アミノ酸の置換がなされることがより好ましい。さらに、ｈＴＮＦαとの結合に決定的な位置のアミノ酸において、同類アミノ酸の置換がなされるべきではない。Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３の２番目および５番目の位置、ならびにＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ３の１番目および７番目の位置は、ｈＴＮＦαとの相互作用のために決定的であるように思われる。したがって、これらの位置において、同類アミノ酸の置換がなされないことが好ましい（Ｄ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ３の５番目の位置におけるアラニンの置換は、上記のように許容し得るが）（米国特許第６，０９０，３８２号を参照すること）。
【００４５】
その結果、別の実施態様においては、単離されたヒト抗体またはその抗原結合部分を隔週で皮下投与することによって、自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、抗ＴＮＦα抗体を投与することが有効である障害を治療する方法が、本発明によって提供される。抗体またはその抗原結合部分は次の特徴を含むことが好ましい：
ａ）表面プラズモン共鳴によって測定されるＫｏｆｆ速度定数が１×１０−３ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメイン、または１番目、３番目、４番目、６番目、７番目、８番目および／または９番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む軽鎖のＣＤＲ３ドメインを有する；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメイン、または２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目、１１番目および／または１２番目の位置で１〜５個の同類アミノ酸置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含む重鎖のＣＤＲ３ドメインを有する。
【００４６】
Ｋｏｆｆが５×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がより好ましい。Ｋｏｆｆが１×１０−４ｓ−１以下にてヒトＴＮＦαから解離する抗体またはその抗原結合部分がさらに好ましい。
【００４７】
さらに好ましい実施態様においては、配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号３からの１番目、４番目、５番目、７番目もしくは８番目の位置のただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、または配列番号４からの２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、８番目、９番目、１０番目もしくは１１番目の位置でただ一つのアラニン置換による修飾を受けたアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と共に含む、抗体またはその抗原結合部分が好ましい。ＬＣＶＲが配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ２）をさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ２）をさらに有することが、好ましい。ＬＣＶＲが配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＬ ＣＤＲ１）をさらに有し、かつＨＣＶＲが配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＨ ＣＤＲ１）を有することが、さらに好ましい。ＶＬについてのフレームワーク領域はＶκＩヒト生殖細胞系列ファミリーに由来するものが好ましく、Ａ２０ヒト生殖細胞系列Ｖｋ遺伝子に由来するものがより好ましく、米国特許第６，０９０，３８２号の図１Ａおよび図１Ｂに示されるＤ２Ｅ７ ＶＬフレームワーク配列に由来するものが特に好ましい。ＶＨについてのフレームワーク領域は、ＶＨ３ヒト生殖細胞系列ファミリーに由来するものが好ましく、ＤＰ−３１ヒト生殖細胞系列のＶＨ遺伝子に由来するものがより好ましく、米国特許第６，０９０，３８２号の図２Ａおよび図２Ｂに示されるＤ２Ｅ７ ＶＨフレームワーク配列に由来するものが特に好ましい。
【００４８】
さらに別の実施態様においては、配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＬ）および配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）（すなわちＤ２Ｅ７ ＶＨ）を含む抗体またはその抗原結合部分が好ましい。特定の実施態様においては、抗体は重鎖定常領域（たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤの定常領域）を含む。重鎖定常領域がＩｇＧ１の重鎖定常領域またはＩｇＧ４の重鎖定常領域であることが好ましい。そのうえ、抗体は軽鎖定常領域、すなわちκ軽鎖定常領域またはλ軽鎖定常領域のいずれかを含むことができる。κ軽鎖定常領域を含む抗体が好ましい。あるいは、抗体の一部分は、たとえばＦａｂ断片または単鎖Ｆｖ断片であってもよい。
【００４９】
さらに他の実施態様においては、Ｄ２Ｅ７に関係があるＶＬ ＣＤＲ３ドメインおよびＶＨ ＣＤＲ３ドメイン（たとえば、配列番号３、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５および配列番号２６からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を伴うか、または、配列番号４、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を伴う、抗体またはその抗原結合部分）を含む抗体またはその抗原結合部分が好ましい。
【００５０】
本発明の抗体または抗体の一部分を、別の機能的分子（たとえば別のペプチドまたはタンパク質）に誘導体化させるかまたはそれに結合させることができる。その結果、本発明の抗体および抗体の一部分には、本明細書に記載された、イムノアドヘシン分子を含むヒト抗ｈＴＮＦα抗体の誘導体化された形態および他の修飾された形態を含める意図である。たとえば、本発明の抗体または抗体の一部分を、一種以上の他の分子的実体（たとえば、別の抗体（二重に特異性を持つ抗体すなわち二重特異性抗体など）、検出可能な薬剤、細胞毒性薬剤、医薬、および／または抗体もしくは抗体の一部分と別の分子（ストレプトアビジンのコア領域またはポリヒスチジンタグなど）との会合を仲介する能力を持つタンパク質もしくはペプチド）に（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有的会合または他の方法によって）機能的に結合させることができる。
【００５１】
（たとえば二重に特異性を持つ抗体を作製するために、同じタイプまたは異なるタイプの）二以上の抗体を架橋することによって、誘導体化された抗体の一つのタイプを作製する。適切な架橋剤としては、適切なスペーサーによって分離された二種の別個の反応性基を有するヘテロ二官能性のもの（たとえばｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、またはホモ二官能性のもの（たとえばスベリン酸ジスクシンイミジル）が挙げられる。このようなリンカーは、ピアース・ケミカル社（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）、ロックフォード、イリノイ州から入手できる。
【００５２】
それによって本発明の抗体または抗体の一部分を誘導体化してもよい、有用な検出用薬剤としては、蛍光性化合物が挙げられる。蛍光性の検出用薬剤の具体例としては、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、５−ジメチルアミン−１−ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリトリンなどが挙げられる。検出可能な酵素によって抗体を誘導体化してもよく、たとえば、アルカリホスファターゼ、ホースラディシュペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼなどがある。検出可能な酵素で抗体を誘導体化する場合、その酵素によって利用され、検出可能な反応生成物を生産する追加の試薬を添加することによってそれを検出する。たとえば、検出用薬剤のホースラディシュペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素およびジアミノベンジジンを添加することによって有色の反応生成物を導く。この生成物は検出可能なものである。ビオチンを用いて抗体を誘導体化してもよく、アビジンまたはストレプトアビジンの結合を間接的に測定することを介して検出する。
【００５３】
宿主細胞内で免疫グロブリンの軽鎖遺伝子および重鎖遺伝子を組み換え発現させることによって、本発明の抗体または抗体の一部分を調製することができる。抗体を組み的に換え発現させるために、その抗体の免疫グロブリンの軽鎖および重鎖をコードするＤＮＡ断片を保持する一種以上の組み換え発現ベクターを用いて、軽鎖および重鎖が宿主細胞内で発現するようなやり方で、好ましくは宿主細胞が培養されている培地内に分泌されるようなやり方で、宿主細胞をトランスフェクトし、そしてその培地から抗体を回収することができる。標準的な組み換えＤＮＡの方法論を用いて、抗体の重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子を得、これらの遺伝子を組み換え発現ベクター内に組み込み、そして宿主細胞内にベクターを導入する。これらは、たとえば、サムブロック、フリッチュおよびマニアティス（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉａｔｉｓ）ら（編）、分子クローニング；実験の手引き（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ；Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ）、第二版、コールド・スプリング・ハーバー、ニューヨーク、（１９８９）、オースベル，エフ．エム．（Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．）ら（編）、分子生物学の最新のプロトコール（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、グリーン・パブリッシング・アソシエイツ（Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ）、（１９８９）およびボス（Ｂｏｓｓ）らによる米国特許第４，８１６，３９７号に記載されている。
【００５４】
Ｄ２Ｅ７またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体を発現させるためには、軽鎖および重鎖の可変領域をコードするＤＮＡ断片をまず最初に得る。ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を利用して生殖細胞系列の軽鎖および重鎖の可変配列を増複し、そして修飾することによって、これらのＤＮＡを得ることができる。ヒトの重鎖可変領域の遺伝子および軽鎖可変領域の遺伝子についての生殖細胞系列のＤＮＡ配列は、当該技術分野において公知である（たとえば「Ｖｂａｓｅ」ヒトの生殖細胞系列の配列のデータベースを参照すること；さらに、カバット，イー．エイ．（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．）ら、（１９９１）、免疫学的に興味深いタンパク質の配列（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ）、第五版、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ公報第９１−３２４２号；トムリンソン，アイ．エム．（Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，Ｉ．Ｍ．）ら、（１９９２）、「ヒト生殖細胞系列のＶＨ配列のレパートリーから、異なる超可変ループを有する約５０グループのＶＨセグメントが明らかにされる（Ｔｈｅ Ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｒｍｌｉｎｅ ＶＨ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ Ｒｅｖｅａｌｓ ａｂｏｕｔ Ｆｉｆｔｙ Ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ＶＨ Ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ Ｌｏｏｐｓ）」、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：７７６−７９８；およびコックス，ジェイ．ピー．エル．（Ｃｏｘ，Ｊ．Ｐ．Ｌ．）ら、（１９９４）、「ヒトの生殖細胞系列Ｖ７８セグメントのディレクトリーから、それらの使用における強い偏りが明らかにされる（Ａ Ｄｉｒｅｃｔｏｒｙ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｒｍ−ｌｉｎｅ Ｖ７８ Ｓｅｇｍｅｎｔｓ Ｒｅｖｅａｌｓ ａ Ｓｔｒｏｎｇ Ｂｉａｓ ｉｎ ｔｈｅｉｒ Ｕｓａｇｅ）」、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：８２７−８３６を参照すること；これらのもののそれぞれの内容は、参照して本明細書に明確に組み込まれる）。Ｄ２Ｅ７の重鎖可変領域またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体の重鎖可変領域をコードするＤＮＡ断片を得るためには、標準的なＰＣＲによって、ヒトの生殖細胞系列のＶＨ遺伝子のＶＨ３ファミリーのメンバーを増幅する。生殖細胞系列のＤＰ−３１ ＶＨの配列を増幅することが最も好ましい。Ｄ２Ｅ７の軽鎖可変領域またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体の軽鎖可変領域をコードするＤＮＡ断片を得るためには、標準的なＰＣＲによって、ヒトの生殖細胞系列のＶＬ遺伝子のＶκＩファミリーのメンバーを増幅する。Ａ２０ ＶＬ生殖細胞系列の配列を増幅することが最も好ましい。上記の参考文献に開示されたヌクレオチド配列に基づいて、標準的な方法を用いて、ＤＰ−３１生殖細胞系列のＶＨの配列およびＡ２０生殖細胞系列のＶＬの配列の増幅に用いることに適したＰＣＲプライマーを設計することができる。
【００５５】
生殖細胞系列のＶＨ断片およびＶＬ断片を一旦得れば、これらの配列を変異させて、Ｄ２Ｅ７のアミノ酸配列または本明細書に開示されたＤ２Ｅ７に関係があるアミノ酸配列をコードさせることができる。まず最初に、生殖細胞系列のＶＨのＤＮＡ配列およびＶＬのＤＮＡ配列によってコードされるアミノ酸配列を、Ｄ２Ｅ７のＶＨのアミノ酸配列およびＶＬのアミノ酸配列、またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらの配列と比較して、Ｄ２Ｅ７の配列またはＤ２Ｅ７に関係がある配列内の、生殖細胞系列とは異なるアミノ酸残基を同定する。次いで、どのヌクレオチドが変化すべきなのかを決定するために遺伝暗号を利用して、生殖細胞系列のＤＮＡ配列のうちの適切なヌクレオチドを、変異した生殖細胞系列の配列がＤ２Ｅ７のアミノ酸配列またはＤ２Ｅ７に関係があるアミノ酸配列をコードするように変異させる。標準的な方法（たとえば、ＰＣＲを介する変異誘発法（ここでは、ＰＣＲ産物が変異を含むように、変異を受けたヌクレオチドをＰＣＲプライマーの中に組み込む）または部位特異的突然変異法）によって、生殖細胞系列の配列の変異を誘発する。
【００５６】
（上記のように生殖細胞系列のＶＨ遺伝子およびＶＬ遺伝子を増幅し変異を誘発することによって）Ｄ２Ｅ７のＶＨセグメントおよびＶＬセグメント、またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらセグメントをコードするＤＮＡ断片を一旦得れば、標準的な組み換えＤＮＡ技術によってこれらのＤＮＡ断片をさらに操作して、たとえば、可変領域の遺伝子を全長の抗体の鎖の遺伝子に、Ｆａｂ断片の遺伝子に、またはｓｃＦｖの遺伝子に転換することができる。これらの操作においては、ＶＬをコードするＤＮＡ断片またはＶＨをコードするＤＮＡ断片が、別のタンパク質（たとえば抗体の定常領域またはフレキシブルリンカー）をコードする別のＤＮＡ断片に機能的に結合される。この文脈で用いられる「機能的に結合される」という用語は、二つのＤＮＡ断片によってコードされたアミノ酸配列がインフレームの状態のままであるように、その二つのＤＮＡ断片が結合されることを意味する意図である。
【００５７】
ＶＨをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）をコードする別のＤＮＡ分子に機能的に結合することによって、ＶＨ領域をコードする単離されたＤＮＡを重鎖の全長遺伝子に転換することができる。ヒトの重鎖定常領域の遺伝子配列は当該技術分野において公知であり（たとえばカバット，イー．エイ．ら、（１９９１）、免疫学的に興味深いタンパク質の配列、第五版、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ公報第９１−３２４２号を参照すること）、そして標準的なＰＣＲ増幅法によって、これらの領域を含むＤＮＡ断片を得ることができる。重鎖定常領域はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはＩｇＤの定常領域であり得るが、ＩｇＧ１の定常領域またはＩｇＧ４の定常領域が最も好ましい。Ｆａｂ断片の重鎖遺伝子については、重鎖のＣＨ１の定常領域のみをコードする別のＤＮＡ分子に、ＶＨをコードするＤＮＡを機能的に結合すればよい。
【００５８】
ＶＬをコードするＤＮＡを、軽鎖定常領域であるＣＬをコードする別のＤＮＡ分子に機能的に結合することによって、ＶＬ領域をコードする単離されたＤＮＡを軽鎖の全長の遺伝子（ならびにＦａｂの軽鎖の遺伝子）に転換することができる。ヒトの軽鎖定常領域の遺伝子配列は当該技術分野において公知であり（たとえばカバット，イー．エイ．ら、（１９９１）、免疫学的に興味深いタンパク質の配列、第五版、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ公報第９１−３２４２号を参照すること）、そして標準的なＰＣＲ増幅法によって、これらの領域を含むＤＮＡ断片を得ることができる。軽鎖定常領域はκの定常領域またはλの定常領域であり得るが、κの定常領域が最も好ましい。
【００５９】
ｓｃＦｖ遺伝子を作製するためには、フレキシブルリンカーによって結合されたＶＬ領域およびＶＨ領域を有する、連続的な一本鎖タンパク質としてＶＨ配列およびＶＬ配列が発現できるように、ＶＨをコードするＤＮＡ断片およびＶＬをコードするＤＮＡ断片を、フレキシブルリンカーをコードする（たとえばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３をコードする）別の断片に機能的に結合する（たとえば、バードら、（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；ヒューストンら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３；マッカフェティー（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ）ら、Ｎａｔｕｒｅ（１９９０）３４８：５５２−５５４を参照すること）。
【００６０】
本発明の抗体または抗体の一部分を発現させるためには、上記のようにして得られる軽鎖および重鎖の一部または全長をコードする複数のＤＮＡを、その遺伝子が転写調節配列および翻訳調節配列に機能的に結合するように発現ベクター内に挿入する。この文脈において、「機能的に結合される」という用語は、ベクター内の転写調節配列および翻訳調節配列が、抗体遺伝子の転写および翻訳を調節するというそれらの意図された機能を果たすように、抗体遺伝子がベクター内に連結されることを意味する意図である。発現に用いる宿主細胞に適合する発現ベクターおよび発現調節配列を選択する。抗体の軽鎖の遺伝子および抗体の重鎖の遺伝子を別個のベクター内に挿入することができ、または、より一般的には、両方の遺伝子を同じ発現ベクター内に挿入する。標準的な方法（たとえば、抗体遺伝子断片上およびベクター上の相補的な制限酵素認識部位のライゲーション、または制限酵素認識部位が存在しない場合は平滑末端ライゲーション）によって、抗体遺伝子を発現ベクター内に挿入する。Ｄ２Ｅ７の軽鎖配列もしくは重鎖配列またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらの配列を挿入する前に、発現ベクターが抗体の定常領域の配列を既に保持していてもよい。たとえば、Ｄ２Ｅ７のＶＨ配列およびＶＬ配列またはＤ２Ｅ７に関係があるそれらの配列を抗体の全長遺伝子に転換する一つのアプローチは、ベクター内の（単数または複数の）ＣＨセグメントにＶＨセグメントが機能的に結合するように、かつベクター内のＣＬセグメントにＶＬセグメントが機能的に結合するように、重鎖定常領域および軽鎖定常領域のそれぞれを既にコードしている発現ベクター内にそれらの配列を挿入するというものである。さらにまたはあるいは、組み換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を促進するシグナルペプチドをコードすることができる。シグナルペプチドがインフレームで抗体鎖遺伝子のアミノ末端に結合するように、この抗体鎖の遺伝子をベクター内にクローニングすることができる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンのシグナルペプチドまたは異種のシグナルペプチド（すなわち非免疫グロブリンタンパク質に由来するシグナルペプチド）であり得る。
【００６１】
抗体鎖の遺伝子に加えて、本発明の組み換え発現ベクターは、宿主細胞での抗体鎖の遺伝子の発現を調節する調節配列を保持する。「調節配列」という用語は、プロモーター、エンハンサー、および抗体鎖の遺伝子の転写または翻訳を調節する他の発現調節エレメント（たとえばポリアデニル化シグナル）を包含する意図である。このような調節配列は、たとえば、ゲッデル（Ｇｏｅｄｄｅｌ）；遺伝子発現の技術（Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）：酵素学の方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ）１８５、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）社、サンディエゴ、カリフォルニア州（１９９０）に記載されている。調節配列の選択を含めた発現ベクターの設計は、形質転換を受ける宿主細胞の選択、所望のタンパク質の発現レベルなどのような因子によって決定されてもよいことを、当業者であれば認識できる。哺乳動物の宿主細胞の発現にとって好ましい調節配列としては、哺乳動物細胞においてタンパク質発現を高レベルに導くウイルスのエレメント（たとえば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に由来するプロモーターおよび／またはエンハンサー（ＣＭＶプロモーター／エンハンサーなど）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）に由来するもの（ＳＶ４０プロモーター／エンハンサーなど）、アデノウイルスに由来するもの（アデノウイルス主要後期プロモーター（ＡｄＭＬＰ）など）ならびにポリオーマウイルス）が挙げられる。ウイルスの調節エレメントおよびその配列についてのさらなる記載は、たとえば、スティンスキ（Ｓｔｉｎｓｋｉ）による米国特許第５，１６８，０６２号、ベル（Ｂｅｌｌ）らによる米国特許第４，５１０，２４５号およびシャフナー（Ｓｃｈａｆｆｎｅｒ）らによる米国特許第４，９６８，６１５号を参照すること。
【００６２】
抗体鎖の遺伝子および調節配列に加えて、本発明の組み換え発現ベクターは、追加の配列（たとえば、宿主細胞内でベクターの複製を調節する配列（複製起点など）および選択マーカー遺伝子）を保持してもよい。選択マーカー遺伝子によって、その中にベクターが導入された宿主細胞の選択が容易になる（たとえば、すべてがアクセル（Ａｘｅｌ）らによる米国特許第４，３９９，２１６号、第４，６３４，６６５号および第５，１７９，０１７号を参照すること）。たとえば、一般的に選択マーカー遺伝子は、薬剤（たとえば、Ｇ４１８、ハイグロマイシンまたはメトトレキサート）に対する抵抗性を、その中にベクターが導入された宿主細胞に与える。好ましい選択マーカー遺伝子としては、（メトトレキサートによるｄｈｆｒ−宿主細胞の選択／増幅に用いるための）ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子および（Ｇ４１８選択のための）ｎｅｏ遺伝子が挙げられる。
【００６３】
軽鎖および重鎖の発現のためには、重鎖および軽鎖をコードする（単数または複数の）発現ベクターを、標準的な技術によって宿主細胞内にトランスフェクトする。「トランスフェクション」という用語の種々の形態は、外因性ＤＮＡを原核生物の宿主細胞内または真核生物の宿主細胞内に導入するために一般的に用いられている広範囲の技術（たとえば、エレクトロポレーション法、リン酸カルシウム沈殿法、ＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクト法など）を包含する意図である。原核生物の宿主細胞または真核生物の宿主細胞のいずれかにおいて本発明の抗体を発現させることは理論上はあり得るが、真核生物の細胞内で、特に好ましくは哺乳動物の宿主細胞内で抗体を発現させることが最も好ましい。というのは、このような真核生物の細胞、とりわけ哺乳動物細胞は、原核生物の細胞よりも、正確に折りたたまれた免疫学的に活性な抗体を構築し分泌しやすいからである。活性な抗体を高い収率で生産することにとって、原核生物での抗体遺伝子の発現は効果的ではないことが報告された（ボス，エム．エイ．およびウッド，シー．アール．（Ｂｏｓｓ，Ｍ．Ａ．ａｎｄ Ｗｏｏｄ，Ｃ．Ｒ．）、（１９８５）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ６：１２−１３）。
【００６４】
本発明の組み換え型抗体の発現にとって好ましい哺乳動物の宿主細胞としては、（たとえばアール・ジェイ・カウフマンおよびピー・エイ・シャープ（Ｒ．Ｊ．Ｋａｕｆｍａｎ ａｎｄ Ｐ．Ａ．Ｓｈａｒｐ）、（１９８２）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１−６２１に記載されたようなＤＨＦＲ選択マーカー遺伝子を一緒に用いる、ウルラウブおよびチェイスン（Ｕｒｌａｕｂ ａｎｄ Ｃｈａｓｉｎ）、（１９８０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６−４２２０に記載されたｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む）チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）、ＮＳ０ミエローマ細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞が挙げられる。抗体遺伝子をコードする組み換え発現ベクターを哺乳動物の宿主細胞内に導入する場合、宿主細胞内で抗体の発現が可能となるのに十分な時間、またはより好ましくはその中で宿主細胞が成長する培地内に抗体が分泌されるのに十分な時間、宿主細胞を培養することによって抗体が生産される。標準的なタンパク質精製法を用いて、培地から抗体を回収することができる。
【００６５】
宿主細胞を用いて、無傷の抗体の一部分、たとえばＦａｂ断片またはｓｃＦｖ分子を生産することもできる。上記の手法の変形物は本発明の範囲内であることが理解される。たとえば、本発明の抗体の軽鎖または重鎖の（両方ではなく）いずれかをコードするＤＮＡによって宿主細胞のトランスフェクトを行うことが望ましい。軽鎖および重鎖のいずれかまたは両方をコードするＤＮＡであって、ｈＴＮＦαへの結合には必要でないＤＮＡのいくつかまたはすべてを、組み換えＤＮＡ技術を用いて除去してもよい。このような切型のＤＮＡ分子から発現する分子も、本発明の抗体に包含される。さらに、標準的な化学的架橋法によって本発明の抗体を第二の抗体に架橋することによって、ある重鎖および軽鎖が本発明の抗体であり、そして別の重鎖および軽鎖がｈＴＮＦα以外の抗原に対して特異的であるという二官能性の抗体を生産してもよい。
【００６６】
本発明の抗体またはその抗原結合部分の組み換え発現にとって好ましいシステムにおいては、リン酸カルシウムを介したトランスフェクトによって、抗体の重鎖および抗体の軽鎖の両方をコードする組み換え発現ベクターをｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞内に導入する。組み換え発現ベクター内では、抗体の重鎖の遺伝子および軽鎖の遺伝子のそれぞれが、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントに機能的に結合して、遺伝子の高レベルの転写を促進する。組み換え発現ベクターもＤＨＦＲ遺伝子を保持しており、このものによって、メトトレキサートの選択／増幅を利用して、ベクターがトランスフェクトされたＣＨＯ細胞の選択が可能となる。選択された、形質転換を受けた宿主細胞を、抗体の重鎖および軽鎖の発現が可能となるように培養し、そして無傷の抗体を培地から回収する。標準的な分子生物学の技術を用いて、組み換え発現ベクターの調製、宿主細胞のトランスフェクト、形質転換体の選択、宿主細胞の培養および培地からの抗体の回収を行う。
【００６７】
本明細書で開示されたＤ２Ｅ７もしくはその抗原結合部分またはＤ２Ｅ７に関係がある抗体に加えて、ヒトのリンパ球に由来するｍＲＮＡから作製されたヒトのＶＬおよびＶＨのｃＤＮＡを用いて調製された組み換え型の組合せ抗体ライブラリー、好ましくはｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーをスクリーニングすることによって、本発明の組み換え型ヒト抗体を単離することができる。このようなライブラリーを調製し、スクリーニングする方法論は、当該技術分野において公知である。ファージディスプレイライブラリーを作製するための市販のキット（たとえば、ファルマシア社の組み換え体ファージ抗体システム、カタログ番号２７−９４００−０１；およびストラタジーン（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）社のＳｕｒｆＺＡＰ（商標）ファージディスプレイキット、カタログ番号２４０６１２）に加えて、抗体のディスプレイライブラリーを作製しスクリーニングに特に供し得る方法および試薬の具体例を、次のものに見出すことができる：たとえば、ラドナー（Ｌａｄｎｅｒ）ら、米国特許第５，２２３，４０９号；カン（Ｋａｎｇ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１８６１９号；ダウアー（Ｄｏｗｅｒ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９１／１７２７１号；ウィンター（Ｗｉｎｔｅｒ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／２０７９１号；マークランド（Ｍａｒｋｌｄａｎｄ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１５６７９号；ブリートリング（Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９３／０１２８８号；マッカフェティーら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０１０４７号；ガーラード（Ｇａｒｒａｒｄ）ら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０９６９０号；フックス（Ｆｕｃｈｓ）ら、（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７０−１３７２；ヘイ（Ｈａｙ）ら、（１９９２）Ｈｕｍ Ａｎｔｉｂｏｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ３：８１−８５；ヒューズ（Ｈｕｓｅ）ら、（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１；マッカフェティーら、Ｎａｔｕｒｅ （１９９０）３４８：５５２−５５４；グリフィスら（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５−７３４；ホーキンス（Ｈａｗｋｉｎｓ）ら、（１９９２）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２２６：８８９−８９６；クラックソン（Ｃｌａｃｋｓｏｎ）ら、（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４−６２８；グラム（Ｇｒａｍ）ら、（１９９２） ＰＮＡＳ ８９：３５７６−３５８０；ガーラードら、（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７３−１３７７；フーゲンブーム（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ）ら、（１９９１）Ｎｕｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １９：４１３３−４１３７；およびバルバス（Ｂａｒｂａｓ）ら、（１９９１）ＰＮＡＳ ８８：７９７８−７９８２。
【００６８】
好ましい実施態様においては、ｈＴＮＦαに対して高い親和性と小さい解離速度定数を有するヒト抗体を単離するために、ｈＴＮＦαに対して高い親和性と小さい解離速度定数を有するネズミ抗ｈＴＮＦα抗体（たとえばＭＡＫ １９５、受託番号がＥＣＡＣＣ ８７ ０５０８０１のハイブリドーマ）をまず最初に用いて、ｈＴＮＦαに対してよく似た結合活性を有するヒトの重鎖配列および軽鎖配列を、フーゲンブームらのＰＣＴ公報ＷＯ ９３／０６２１３号に記載されたエピトープインプリンティング法を利用して選択する。この方法で用いられる抗体ライブラリーは、マッカフェティーら、ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／０１０４７号、マッカフェティーら、Ｎａｔｕｒｅ（１９９０）３４８：５５２−５５４；およびグリフィスら（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５−７３４に記載されたように調製され、スクリーニングされる好ましいｓｃＦｖライブラリーである。抗原として組み換え型ヒトＴＮＦαを用いてスクリーニングされるｓｃＦｖ抗体ライブラリーが好ましい。
【００６９】
最初のヒトのＶＬセグメントおよびＶＨセグメントを一旦選択すれば、ｈＴＮＦα結合のために、最初に選択したＶＬセグメントおよびＶＨセグメントの異なるペアをスクリーニングするという「ミックス・アンド・マッチ」実験を実施して、好ましいＶＬ／ＶＨのペアの組み合わせを選択する。さらに、ｈＴＮＦαの結合についての親和性をさらに向上させるおよび／または解離速度定数をより小さくするために、自然のままの免疫応答の間に抗体の親和性成熟を引き起こすインビボでの体細胞変異プロセスとよく似たプロセスにおいて、好ましいＶＬ／ＶＨの（単数または複数の）ペアのＶＬセグメントおよびＶＨセグメントを、好ましくはＶＨおよび／またはＶＬのＣＤＲ３領域の範囲内で無作為に変異させることができる。ＶＨ ＣＤＲ３またはＶＬ ＣＤＲ３に相補的なＰＣＲプライマーを用いてＶＨ領域およびＶＬ領域をそれぞれ増幅することによって、このようなインビトロの親和性成熟を達成することができる。ここで、結果として生じるＰＣＲ産物が、ＶＨセグメントおよびＶＬセグメント（ＶＨ ＣＤＲ３領域および／またはＶＬ ＣＤＲ３領域内に導入されたランダム変異がそのセグメント内にある）をコードするように、これらのプライマーには、特定の位置において四種のヌクレオチド塩基の無作為混合物が「スパイクされて」いた。これらのランダム変異を受けたＶＨセグメントおよびＶＬセグメントを、ｈＴＮＦαとの結合のために再度スクリーニングすることができる。そしてｈＴＮＦαの結合について高い親和性と遅い解離速度を示す配列を選択することができる。
【００７０】
組み換え型免疫グロブリンディスプレイライブラリーから、本発明の抗ｈＴＮＦα抗体をスクリーニングして単離した後に、ディスプレイパッケージから（たとえばファージのゲノムから）、選択された抗体をコードする核酸を回収し、そして標準的な組み換えＤＮＡ技術によって、別の発現ベクター内にサブクローニングすることができる。必要に応じて、核酸をさらに操作して、本発明の別の抗体の形態を作製することができる（たとえば、追加の定常領域などの追加の免疫グロブリンドメインをコードする核酸に結合したもの）。組合せライブラリーのスクリーニングによって単離された組み換え型ヒト抗体を発現させるためには、その抗体をコードするＤＮＡを組み換え発現ベクター内にクローニングし、そして、上記のＩＩ部にさらなる詳細が記載されているように、哺乳動物の宿主細胞内に導入する。
【００７１】
本発明の抗体および抗体の一部分ならびに自己免疫疾患の治療に有用な薬剤を、本明細書に記載された方法についての被験体への投与に適した医薬組成物内に別個にまたは一緒に組み込むことができる。典型的な医薬組成物は、本発明の抗体（もしくは抗体の一部分）および／または自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤ならびに医薬適合性の担体を含む。本明細書で用いられる「医薬適合性の担体」としては、生理的に適合性を有し、かつ本明細書に記載された方法についての被験体への投与に適したありとあらゆる溶媒、分散媒、被覆剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。医薬適合性の担体の具体例としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ブドウ糖、グリセリン、エタノールなどの一種以上、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、組成物内に等張性の物質、たとえば糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムが含まれることは好ましい。医薬適合性の担体が、湿潤剤もしくは乳化剤、防腐剤または緩衝剤などの微量の補助的物質をさらに含んでもよく、これらのものは、抗体または抗体の一部分の保存性または有効性を高める。
【００７２】
本発明の組成物は、種々の剤形であってもよい。たとえば、液体、半固体および固形の剤形（具体的には、溶液（たとえば注射可能な溶液および不溶性の溶液）、分散液もしくは懸濁液、錠剤、丸薬、粉剤、リポソームおよび座薬）が挙げられる。好ましい剤形は、意図される投与様式および治療上の用途に依存する。好ましい組成の典型例は、注射可能な溶液または不溶性の溶液の剤形（たとえば、他の抗体によるヒトの受動免疫化に用いられる組成とよく似た組成）である。好ましい投与様式は非経口である（たとえば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）。好ましい実施態様においては、抗体を含む医薬組成物を注射によって投与する。別の好ましい実施態様においては、抗体を筋肉注射によって投与する。特に好ましい実施態様においては、抗体を皮下注射によって投与する。
【００７３】
医薬組成物は、一般的に、製造および保存の条件下で無菌かつ安定でなければならない。溶液、マイクロエマルション、分散液、リポソーム、または他の指示された、高濃度の薬剤に適した構造として、組成物を製剤化することができる。活性化合物（すなわち抗体または抗体の一部分）を、必要に応じて上記に列挙された成分の一種または組み合わせたものと共に、必要な量の適切な溶媒内に組み込み、次いでろ過滅菌することによって、注射可能な無菌の溶液を調製することができる。基本的な分散媒と、上記に列挙されたものから必要な他の成分とを含む無菌の媒体内に、活性化合物を組み込むことによって分散液を調製するのが一般的である。注射可能な無菌の溶液を調製するための無菌の粉剤の場合において、好ましい調製方法とは、真空乾燥および凍結乾燥して、有効成分プラス既にろ過滅菌されたその溶液からの任意の所望の追加成分の粉剤を得ることである。たとえば、レシチンなどの被覆剤を用いることによって、分散液の場合は必要な粒子径を維持することによって、そして界面活性剤を用いることによって、溶液の適切な流動性を維持することができる。モノステアリン酸塩およびゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤を組成物内にを含めることによって、注射可能な組成物の持続的な吸収を成し遂げることができる。
【００７４】
当該技術分野で公知の種々の方法によって、本発明の抗体および抗体の一部分を投与することができるが、多くの治療上の用途にとって好ましい投与経路／投与様式は皮下注射である。当業者であれば理解できるように、投与経路および／または投与様式は、所望の結果に応じて変化することになる。ある特定の実施態様においては、インプラント、経皮貼布、およびマイクロカプセル化送達システムを含めた制御放出製剤などの、化合物を急激な放出から保護するような担体を用いて活性化合物を調製してもよい。エチレン酢酸ビニル、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生物分解性、生物適合性ポリマーを用いることができる。このような製剤を調製するための多数の方法は特許が付与されているか、または当業者にとって周知のものである。たとえば、放出が制御された徐放性薬剤送達システム（Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ジェイ・アール・ロビンソン（Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）編、マルセル・デッカー社（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．）、ニューヨーク、１９７８を参照すること。
【００７５】
特定の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を、たとえば不活性な希釈剤または吸収可能な食用になる担体と共に経口投与してもよい。この化合物（および必要に応じて他の成分）を、硬質または軟質のゼラチンカプセル内に封入・圧縮して錠剤としてもよく、または被験体の食物に直接組み込んでもよい。治療のための経口投与に関して、化合物を賦形剤と一緒に組み込んで、そして摂取用の錠剤、舌下錠、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、カシェ剤などの剤形で用いてもよい。非経口投与以外によって本発明の化合物を投与するためには、不活性化を防止する材料で化合物を被覆すること、または化合物を、不活性化を防止する材料と同時投与することが必要である。
【００７６】
追加の活性化合物を組成物内に組み込んでもよい。ある特定の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を、一種以上の追加の治療剤と共に製剤化したりおよび／またはかかる治療剤と同時投与する。たとえば、本発明の抗ｈＴＮＦα抗体または抗体の一部分を、一種以上のＤＭＡＲＤもしくは一種以上のＮＳＡＩＤ、もしくは他の標的と結合する一種以上のさらなる抗体（他のサイトカイン類または細胞表面分子と結合する抗体など）、一種以上のサイトカイン類、可溶性ＴＮＦα受容体（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９４／０６４７６号を参照すること）および／またはｈＴＮＦαの生産または活性を阻害する一種以上の化学薬品（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１９７５１号に記載されているようなシクロヘキサン−イリデン誘導体）またはそれらの任意の組み合わせと共に製剤化および／または同時投与してもよい。そのうえ、本発明の一種以上の抗体を、二種以上の上記の治療剤と組み合わせて用いてもよい。このような多剤併用療法を、投与される治療剤の投与量がより少ない場合に利用することが有利かもしれず、したがって、種々の単剤療法と関係がある患者による、考えられる副作用、合併症または低いレベルの応答が避けられる。
【００７７】
本発明の医薬組成物には、「治療的に有効な量」または「予防的に有効な量」の本発明の抗体または抗体の一部分および／または他の（単数または複数の）薬剤が含まれる。「治療的に有効な量」とは、所望の治療効果を達成するために必要な期間投与される有効な量という意味である。治療的に有効な量は、個体の病状、年齢、性別および体重、ならびに自己免疫疾患の治療に有用な抗体もしくは抗体の一部分または他の薬剤の持つ、個体において所望の応答を惹起させる能力などの因子に基づいて変化してもよい。治療的に有効な量とは、抗体もしくは抗体の一部分または他の（単数または複数の）薬剤の副作用よりも、治療的に有益な効果の方が上回る量でもある。「予防的に有効な量」とは、所望の予防効果を達成するために必要な期間投与される有効な量という意味である。疾患の前に、または疾患の早い段階で被験体に予防のための投与が行われることが通常なので、予防的に有効な量は治療的に有効な量よりも少量となる。
【００７８】
所望の最適な応答（たとえば治療上の応答または予防上の応答）を提供するために、投与計画を調整してもよい。たとえば、単一の大きな丸薬を投与してもよく、長期の間に投与量をいくつかに分割して投与してもよく、または治療状況の緊急性で示されるように、投与量を比例的に減少もしくは増加させてもよい。投与が容易で投与量の均一な投与量単位の剤形にて非経口用組成物を製剤することは、特に有利である。本明細書で用いられる投与量単位の剤形とは、治療を受ける哺乳動物の被験体への単一の投与量として適する、物理的に独立した単位という意味である；必須の製剤用の担体と共に所望の治療効果を提供するために計算された、予め決められた量の活性化合物をそれぞれの単位が含んでいる。本発明の投与量単位の剤形についての詳細は、（ａ）活性化合物の独自の特性および達成される具体的な治療上のまたは予防上の効果、ならびに（ｂ）個体における感受性を治療するためのそのような活性化合物の、合成技術的に内在する制限によって定められ、そしてそれらに直接影響を受ける。
【００７９】
本発明の抗体または抗体の一部分の治療的にまたは予防的に有効な量についての典型的で限定されない範囲は、１０から１００ｍｇであり、２０から８０ｍｇがより好ましく、約４０ｍｇが特に好ましい。緩和される健康状態のタイプと重症度によって、投与量の値を変化させてもよいことに留意すべきである。個体の必要性、および組成物の投与を管理するかまたは監督する専門家の判断に従って、あらゆる特定の被験体についての具体的な投与計画を長期に亘って調整すべきであること、ならびに本明細書に記載された投与量の範囲は単なる例示であり、請求の範囲の組成物の範囲または実務を制限する意図がないことをさらに理解すべきである。
【００８０】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる慢性関節リウマチの治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：（単数または複数の）非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）；（単数または複数の）サイトカイン抑制性抗炎症薬（ＣＳＡＩＤｓ）；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ／Ｂａｙｅｒ）社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）社）；ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１／ＳＢ ２１０３９６（非枯渇性霊長類化抗ＣＤ４抗体；アイディーイーシ／スミスクライン（ＩＤＥＣ／ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）社；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９５）Ｖｏｌ．３８，Ｓ１８５を参照すること）；ＤＡＢ４８６−ＩＬ−２および／またはＤＡＢ３８９−ＩＬ−２（ＩＬ−２融合タンパク質；シーラジェン（Ｓｅｒａｇｅｎ）社；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９３）Ｖｏｌ．３６，１２２３を参照すること）；抗Ｔａｃ（ヒト化抗ＩＬ−２Ｒα；プロテイン・デザイン・ラブズ／ロシュ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｓｉｇｎ Ｌａｂｓ／Ｒｏｃｈｅ）社）；ＩＬ−４（抗炎症性サイトカイン；ディーエヌエイエックス／シェリング（ＤＮＡＸ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）社）；ＩＬ−１０（ＳＣＨ ５２０００；組み換え型ＩＬ−１０、抗炎症性サイトカイン；ディーエヌエイエックス／シェリング社）；ＩＬ−４アゴニスト；ＩＬ−１０アゴニストおよび／またはＩＬ−４アゴニスト（たとえばアゴニスト抗体）；ＩＬ−１ＲＡ（ＩＬ−１受容体アンタゴニスト；シナージェン／アムジェン（Ｓｙｎｅｒｇｅｎ／Ａｍｇｅｎ）社）；ＴＮＦ−ｂｐ／ｓ−ＴＮＦＲ（可溶性ＴＮＦ結合タンパク質；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８４；Ａｍｅｒ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．− Ｈｅａｒｔ ａｎｄ Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ（１９９５）Ｖｏｌ．２６８，ｐｐ．３７−４２を参照すること）；Ｒ９７３４０１（ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）；ＭＫ−９６６（ＣＯＸ−２阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ８１を参照すること）；イロプロスト（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ８２を参照すること）；メトトレキサート；サリドマイド（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）およびサリドマイドに関係がある薬剤（たとえばセルジェン）；レフルノミド（抗炎症性のサイトカイン阻害剤；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ１３１；Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（１９９６）Ｖｏｌ．４５，ｐｐ．１０３−１０７を参照すること）；トラネキサム酸（プラスミノゲン活性化の阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８４を参照すること）；Ｔ−６１４（サイトカイン阻害剤；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）；プロスタグランジンＥ１（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ （１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８２を参照すること）；テニダップ（非ステロイド性抗炎症薬；たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８０を参照すること）；ナプロキセン（非ステロイド性抗炎症薬；たとえばＮｅｕｒｏ Ｒｅｐｏｒｔ（１９９６）Ｖｏｌ．７，ｐｐ．１２０９−１２１３を参照すること）；メロキシカム（非ステロイド性抗炎症薬）；イブプロフェン（非ステロイド性抗炎症薬）；ピロキシカム（非ステロイド性抗炎症薬）；ジクロフェナク（非ステロイド性抗炎症薬）；インドメタシン（非ステロイド性抗炎症薬）；スルファサラジン（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８１を参照すること）；アザチオプリン（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２８１を参照すること）；ＩＣＥ阻害剤（酵素のインターロイキン−１β転換酵素の阻害剤）；ｚａｐ−７０阻害剤および／またはｌｃｋ阻害剤（チロシンキナーゼのｚａｐ−７０またはｌｃｋの阻害剤）；ＶＥＧＦ阻害剤および／またはＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤（血管内皮細胞増殖因子または血管内皮細胞増殖因子受容体の阻害剤；脈管形成の阻害剤）；コルチコステロイド性抗炎症薬（たとえばＳＢ２０３５８０）；ＴＮＦコンバーターゼ阻害剤；抗ＩＬ−１２抗体；インターロイキン−１１（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ２９６を参照すること）；インターロイキン−１３（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ３０８を参照すること）；インターロイキン−１７阻害剤（たとえばＡｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９６）Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．９（補遺），Ｓ１２０を参照すること）；金；ペニシラミン；クロロキン；ヒドロキシクロロキン；クロラムブシル；シクロホスファミド；シクロスポリン；全身リンパ節照射；抗胸腺細胞グロブリン；抗ＣＤ４抗体；ＣＤ５トキシン；経口投与用のペプチドおよびコラーゲン；ロベンザリット二ナトリウム；サイトカイン調節剤（ＣＲＡ）のＨＰ２２８およびＨＰ４６６（ホートン・ファーマシューティカルズ社（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．））；ＩＣＡＭ−１アンチセンス・ホスホロチオアート・オリゴデオキシヌクレオチド（ＩＳＩＳ ２３０２；イシス・ファーマシューティカルズ社（Ｉｓｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．））；可溶性補体レセプター１（ＴＰ１０；ティーセル・サイエンシス社（Ｔ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．））；プレドニゾン；オルゴテイン；グリコサミノグリカンポリスルファート；ミノサイクリン；抗ＩＬ２Ｒ抗体；海産のおよび植物性の脂質（魚類のおよび植物種子の脂肪酸；たとえばデルーサ（ＤｅＬｕｃａ）ら、（１９９５）Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ Ａｍ．２１：７５９−７７７を参照すること）；オーラノフィン；フェニルブタゾン；メクロフェナム酸；フルフェナム酸；静脈内の免疫グロブリン；ジロートン；ミコフェノール酸（ＲＳ−６１４４３）；タクロリムス（ＦＫ−５０６）；シロリムス（ラパマイシン）；アミプリロース（セラフェクチン）；クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン）；ならびにアザリビン。
【００８１】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる炎症性腸疾患の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：ブデノサイド；上皮増殖因子；コルチコステロイド；シクロスポリン、スルファサラジン；アミノサリチル酸塩；６−メルカプトプリン；アザチオプリン；メトロニダゾール；リポキシゲナーゼ阻害剤；メサラミン；オルサラジン；バルサラジド；抗酸化剤；トロンボキサン阻害剤；ＩＬ−１受容体アンタゴニスト；抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体；抗ＩＬ−６モノクローナル抗体；増殖因子；エラスターゼ阻害剤；ピリジニル−イミダゾール化合物；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）；インターロイキン−１０（ＳＣＨ ５２０００；シェリングプラウ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）社）；ＩＬ−４アゴニスト；ＩＬ−１０アゴニストおよび／またはＩＬ−４アゴニスト（たとえばアゴニスト抗体）；インターロイキン−１１；プレドニゾロン、デキサメタゾンまたはブデソニドのグルクロニド複合化プロドラッグまたはデキストラン複合化プロドラッグ；ＩＣＡＭ−１アンチセンス・ホスホロチオアート・オリゴデオキシヌクレオチド（ＩＳＩＳ ２３０２；イシス・ファーマシューティカルズ社）；可溶性補体レセプター１（ＴＰ１０；ティーセル・サイエンシス社）；徐放性メサラジン；メトトレキサート；血小板活性化因子（ＰＡＦ）のアンタゴニスト；シプロフロキサシン；ならびにリグノカイン。
【００８２】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる多発性硬化症の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：コルチコステロイド；プレドニゾロン；メチルプレドニゾロン；アザチオプリン；シクロホスファミド；シクロスポリン；メトトレキサート；４−アミノピリジン；チザニジン；インターフェロン−β１ａ（Ａｖｏｎｅｘ（商標）；バイオジェン（Ｂｉｏｇｅｎ）社）；インターフェロン−β１ｂ（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（商標）；カイロン／ベレックス（Ｃｈｉｒｏｎ／Ｂｅｒｌｅｘ）社）；コポリマー１（Ｃｏｐ−１；Ｃｏｐａｘｏｎｅ（商標）；テバ・ファーマシューティカル・インダストリーズ社（Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．））；高圧酸素；静脈内免疫グロブリン；クラブリビン；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）；ＩＬ−１０；ＩＬ−４；およびＩＬ−１０アゴニストおよび／またはＩＬ−４アゴニスト（たとえばアゴニスト抗体）。
【００８３】
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる敗血症の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：高張食塩水；抗生物質；静脈内のガンマグロブリン；持続的血液ろ過；カルバペネム類（たとえばメロペネム）；ＴＮＦα、ＩＬ−１β、ＩＬ−６および／またはＩＬ−８などのサイトカイン類のアンタゴニスト；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ（１９９４）Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）；サイトカイン調節剤（ＣＲＡ）のＨＰ２２８およびＨＰ４６６（ホートン・ファーマシューティカルズ社）；ＳＫ＆Ｆ １０７６４７（低分子量ペプチド；スミスクライン・ビーチャム（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ）社）；四価のグアニルヒドラゾンＣＮＩ−１４９３（ピコワー・インスティチュート（Ｐｉｃｏｗｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）社）；組織因子経路阻害剤（ＴＦＰＩ；カイロン社）；ＰＨＰ（化学的に修飾されたヘモグロビン；エーピーイーエックス・バイオサイエンス（ＡＰＥＸ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）社）；ジエチレントリアミン五酢酸−鉄（ＩＩＩ）複合体（ＤＴＰＡ鉄（ＩＩＩ）；モリケム・メディスンズ（Ｍｏｌｉｃｈｅｍ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ）社）を含めた鉄キレーターおよびキレート；リソフィリン（メチルキサンチンの合成小分子；セル・セラピューティクス社（Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．））；ＰＧＧ−グルカン（水溶性のβ１，３グルカン；アルファ−ベータ・テクノロジー（Ａｌｐｈａ−Ｂｅｔａ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）社）；脂質と共に再構成されたアポリポタンパク質Ａ−１；キラルなヒドロキサム酸（リピドＡの生合成を阻害する合成抗菌剤）；抗エンドトキシン抗体；Ｅ５５３１（リピドＡの合成アンタゴニスト；エーザイ・アメリカ社（Ｅｉｓａｉ Ａｍｅｒｉｃａ，Ｉｎｃ．））；ｒＢＰＩ２１（ヒトの殺菌性・膜透過性亢進タンパク質の組み換え型Ｎ末端断片）；ならびに抗エンドトキシン性合成ペプチド（ＳＡＥＰ；バイオシンス・リサーチ・ラボラトリーズ（ＢｉｏｓＹｎｔｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）社）；
本発明の抗体または抗体の一部分と組み合わせることができる成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療剤の非限定的な具体例としては、次のものが挙げられる：抗ＩＬ−８抗体；サーファクタント置換療法；ＣＤＰ−５７１／ＢＡＹ−１０−３３５６（ヒト化抗ＴＮＦα抗体；セルテック／バイエル社）；ｃＡ２（キメラ抗ＴＮＦα抗体；セントコア社）；７５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；イミュネックス社；たとえば、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ （１９９４） Ｖｏｌ．３７，Ｓ２９５；Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．（１９９６）Ｖｏｌ．４４，２３５Ａを参照すること）；ならびに５５ｋｄのＴＮＦＲ−ＩｇＧ（５５ｋＤのＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質；ホフマン・ラロシュ社）。
【００８４】
抗ＴＮＦα抗体と一種以上の他の薬剤とを組み合わせて用いることは、ＴＮＦαを阻害することによって障害が影響を受けるかどうかによって決まる。本明細書で用いられる「抗ＴＮＦα抗体の投与が有効であるところの障害」という用語は、障害に苦しむ被験体に存在するＴＮＦαが、障害の病態生理学の原因もしくは障害の悪化に寄与する因子のいずれかであることが示されたかもしくは推測されている疾患および他の障害、または別の抗ＴＮＦα抗体もしくはその生物学的活性を有する部分を用いて疾患をうまく治療できたことが示された疾患および他の障害を含む意図である。従って、ＴＮＦα活性が有害であるところの障害は、ＴＮＦα活性の阻害によって、障害の症状および／または進行の軽減が予想される障害である。たとえば、障害に苦しむ被験体の生理学的体液中のＴＮＦα濃度の上昇（たとえば、被験体の血清、血漿、滑液などにおけるＴＮＦαの濃度の上昇）によって、このような障害を証明できるかもしれず、そしてこのことは、たとえば上記のような抗ＴＮＦα抗体を用いて検出することができる。ＴＮＦα活性が有害であるところの障害の具体例は、数多く存在する：
Ａ．敗血症
腫瘍壊死因子には、低血圧、心筋抑制、血管漏出症候群、臓器の壊死、トキシック・セカンダリー・メディエータ放出の刺激および凝固カスケードの活性化を含む生物学的作用を伴った、敗血症の病態生理学における立証された役割がある（たとえば、トレーシー，ケイ．ジェイ．およびセラミ，エイ．、（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１−５０３；ラッセル，ディー．およびトンプソン，アール．シー．（Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｄ ａｎｄ Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｒ．Ｃ．）、（１９９３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．４：７１４−７２１を参照すること）。従って、本発明のヒト抗体および抗体の一部分を用いて、敗血症性ショック、エンドトキシンショック、グラム陰性敗血症およびトキシックショック症候群を含めたあらゆる臨床場面における敗血症を治療することができる。好ましくは、敗血症の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。敗血症の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００８５】
そのうえ、敗血症を治療するために、本発明の抗ｈＴＮＦα抗体または抗体の一部分を、敗血症をさらに緩和するかもしれない一種以上の追加の治療剤（たとえば、インターロイキン−１阻害剤（ＰＣＴ公報ＷＯ ９２／１６２２１号およびＷＯ ９２／１７５８３号に記載されたものなど）、サイトカインであるインターロイキン−６（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１１７９３を参照すること）、または血小板活性化因子のアンタゴニスト（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ３７４ ５１０号を参照すること））と同時投与することができる。
【００８６】
さらに、好ましい実施態様においては、治療の時点での血清または血漿のＩＬ−６濃度が５００ｐｇ／ｍＬを超える、より好ましくは１０００ｐｇ／ｍＬを超える敗血症患者の下位群の範囲内のヒトの被験体に、本発明の抗ＴＮＦα抗体または抗体の一部分を投与する（ドーム，エル．（Ｄａｕｍ，Ｌ．）らによるＰＣＴ公報ＷＯ ９５／２０９７８号を参照すること）。
【００８７】
Ｂ．自己免疫疾患
腫瘍壊死因子は、種々の自己免疫疾患の病態生理学における役割を果たすことに関与してきている。たとえば、慢性関節リウマチにおいて、組織の炎症を活性化することおよび関節の破壊を引き起こすことにＴＮＦαは関与した（たとえば、上掲のトレーシーおよびセラミ；アレント，ダブリュ．ピー．およびデイヤー，ジェイ−エム．（Ａｒｅｎｄ，Ｗ．Ｐ．ａｎｄ Ｄａｙｅｒ，Ｊ−Ｍ．）、（１９９５） Ａｒｔｈ．Ｒｈｅｕｍ．３８：１５１−１６０；フェイバ，アール．エイ．（Ｆａｖａ，Ｒ．Ａ．）ら、（１９９３）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９４：２６１−２６６を参照すること）。糖尿病において、島細胞の死滅を促進することおよびインスリン抵抗性を仲介することにもＴＮＦαは関与した（たとえば、上掲のトレーシーおよびセラミ；ＰＣＴ公報ＷＯ ９４／０８６０９号を参照すること）。多発性硬化症において、乏突起膠細胞への細胞毒性を仲介することおよび炎症性のプラークを誘導することにもＴＮＦαは関与した（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。キメラのヒト化マウス抗ｈＴＮＦα抗体は、慢性関節リウマチの治療についての臨床試験を経験した（たとえば、エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４） Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５−１１２７；エリオット，エム．ジェイ．ら、（１９９４） Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１０５−１１１０；ランキン，イー．シー．（Ｒａｎｋｉｎ，Ｅ．Ｃ．）ら、（１９９５）Ｂｒ．Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．３４：３３４−３４２を参照すること）。
【００８８】
本発明のヒト抗体および抗体の一部分を用いて自己免疫疾患を治療することができる。好ましくは、自己免疫疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。自己免疫疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、慢性関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、変形性関節症および痛風性関節炎、アレルギー、多発性硬化症、自己免疫性糖尿病、自己免疫性ブドウ膜炎ならびにネフローゼ症候群を含めた炎症に関係するものである。特定の障害について、抗体または抗体の一部分を全身投与することが通常ではあるが、抗体または抗体の一部分の炎症部位での局所投与も有用かもしれない（たとえば、単独でのまたはＰＣＴ公報ＷＯ ９３／１９７５１号に記載されたようなシクロヘキサン−イリデン誘導体と組み合わせての、慢性関節リウマチにおける関節への局所投与または糖尿病性潰瘍への局所適用）。
【００８９】
Ｃ．感染症
腫瘍壊死因子は、種々の感染症において見られる生物学的作用を仲介することに関与してきた。たとえば、マラリアにおいて、脳の炎症および毛細血管の血栓症、ならびに梗塞の形成を仲介することにＴＮＦαは関与した（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。髄膜炎において、脳の炎症を仲介すること、血液脳関門の破壊を誘導すること、敗血症性ショック症候群を引き起こすことおよび静脈の梗塞を活性化させることにもＴＮＦαは関与した（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）において、悪液質を誘導すること、ウイルス増殖を刺激することおよび中枢神経系の損傷を仲介することにもＴＮＦαは関与している（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を感染症の治療に用いることができる。好ましくは、感染症の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。感染症の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、移植後の、細菌性髄膜炎（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ５８５ ７０５号を参照すること）、脳マラリア、ＡＩＤＳおよびＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ２３０ ５７４号を参照すること）、ならびにサイトメガロウイルス感染（たとえばフィーツ，イー．（Ｆｉｅｔｚｅ，Ｅ．）ら、（１９９４） Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５８：６７５−６８０を参照すること）。本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、（インフルエンザなどの）感染が原因の発熱および筋肉痛および感染後の（たとえばＡＩＤＳまたはＡＲＣの後の）悪液質を含めた、感染症と関係がある症状を軽減することもできる。
【００９０】
Ｄ．移植
腫瘍壊死因子は、同種移植の拒絶反応および移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）の主要なメディエータとして、Ｔ細胞受容体のＣＤ３複合体に対して向けられたラットの抗体ＯＫＴ３を用いて、腎移植の拒絶を抑制する場合に見られる有害反応を仲介することに関与してきた（たとえば、上掲のトレーシーおよびセラミ；イーソン，ジェイ．ディー．（Ｅａｓｏｎ，Ｊ．Ｄ．）ら、（１９９５）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５９：３００−３０５；サザンチラン，エム．およびストーム，ティー．ビー．（Ｓｕｔｈａｎｔｈｉｒａｎ，Ｍ．ａｎｄ Ｓｔｒｏｍ，Ｔ．Ｂ．）、（１９９４）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３１：３６５−３７５を参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、同種移植および異種移植の拒絶反応を含めた移植片の拒絶反応、およびＧＶＨＤを抑制することができる。好ましくは、移植片の拒絶反応の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。移植片の拒絶反応の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。たとえば、一つの実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分をＯＫＴ３と組み合わせて用いて、ＯＫＴ３に誘導される反応を阻害する。別の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を、免疫応答を調節することに関わる別の標的（たとえば、細胞表面分子ＣＤ２５（インターロイキン−２受容体−α）、ＣＤ１１ａ（ＬＦＡ−１）、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ−１）、ＣＤ４、ＣＤ４５、ＣＤ２８／ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０（Ｂ７−１）および／またはＣＤ８６（Ｂ７−２））に向けられた一種以上の抗体と組み合わせて用いる。さらに別の実施態様においては、本発明の抗体または抗体の一部分を一種以上の一般的な免疫抑制剤、たとえばシクロスポリンＡまたはＦＫ５０６と組み合わせて用いる。
【００９１】
Ｅ．悪性腫瘍
腫瘍壊死因子は、悪液質を生じさせること、腫瘍の増殖を刺激すること、転移の可能性を高めることおよび悪性腫瘍における細胞毒性を仲介することに関与してきた（たとえば上掲のトレーシーおよびセラミを参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を悪性腫瘍の治療に用いて、腫瘍の増殖または転移を抑制することおよび／または悪性腫瘍に副次的な悪液質を軽減することができる。好ましくは、悪性腫瘍の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用であり、これによって腫瘍の増殖または転移を抑制および／または悪性腫瘍に副次的な悪液質を軽減する。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。悪性腫瘍の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましく、これによって腫瘍の増殖または転移を抑制および／または悪性腫瘍に副次的な悪液質を軽減する。抗体もしくは抗体の一部分を全身投与してもよく、または腫瘍の部位に局所投与してもよい。
【００９２】
Ｆ．肺疾患
腫瘍壊死因子は、白血球内皮活性化を刺激すること、肺細胞へ細胞毒性を導くことおよび血管漏出症候群を誘導することを含めた成人呼吸窮迫症候群の病態生理に関与してきた（たとえば上掲のレーシーおよびセラミを参照すること）。従って、本発明の抗体および抗体の一部分を用いて種々の肺疾患を治療することができる。好ましくは、肺疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。肺疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、成人呼吸窮迫症候群（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９１／０４０５４号を参照すること）、ショック肺、慢性炎症性肺疾患、肺サルコイドーシス、肺線維症およびケイ肺症である。抗体もしくは抗体の一部分を全身投与してもよく、または肺の表面に、たとえばエアゾールとして局所投与してもよい。
【００９３】
Ｇ．腸疾患
腫瘍壊死因子は、炎症性腸疾患の病態生理に関与してきた（たとえば、トレーシー，ケイ．ジェイ．（Ｔｒａｃｙ，Ｋ．Ｊ．）ら、（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３４：４７０−４７４；スン，エックス−エム．（Ｓｕｎ，Ｘ−Ｍ．）ら、（１９８８）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８１：１３２８−１３３１；マクドナルド，ティー．ティー．（ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｔ．Ｔ．）ら、（１９９０）Ｃｌｉｎ．ＥＸＰ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．８１：３０１−３０５を参照すること）。キメラのネズミ抗ｈＴＮＦα抗体は、クローン病の治療についての臨床試験を経験した（バンドルメン，エイチ．エム．（ｖａｎ Ｄｕｌｌｅｍｅｎ，Ｈ．Ｍ．）ら、（１９９５）Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １０９：１２９−１３５）。本発明のヒト抗体および抗体の一部分を用いて腸疾患を治療することもできる。好ましくは、腸疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。腸疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。とりわけ、特発性炎症性腸疾患、このものには二種の症候群が含まれ、クローン病および潰瘍性大腸炎である。
【００９４】
Ｈ．心疾患
本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、心臓の虚血（たとえば欧州特許公開公報ＥＰ ４５３ ８９８号を参照すること）および心不全（心筋の衰弱）（たとえばＰＣＴ公報ＷＯ ９４／２０１３９号を参照すること）を含めた種々の心疾患を治療することができる。好ましくは、心疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。心疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００９５】
Ｉ．神経疾患
本発明の抗体および抗体の一部分を用いて神経疾患を治療することができる。好ましくは、神経疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。神経疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００９６】
実験に基づく証拠から、ニューロン組織に対する損傷によって、過剰なレベルのＴＮＦが放出されることが示されている。従って、ＴＮＦアンタゴニストを用いると、これらの神経の状態が改善するという結果になる。脱髄性疾患（多発性硬化症など）、免疫疾患、炎症、外傷、または圧迫症に起因する神経疾患が、解剖学的な部位および生理的な問題の原因と性質の履歴に左右される、臨床上の異なった形態で生じる。これらの障害のすべてに共通することは、これらによって永続的な神経の損傷が生じる可能性があるという事実であり、この損傷は急激に生じかつ不可逆となる可能性があり、そして外科手術および／または薬理学的な物質の使用をしばしば必要とする、これらの状態の最新の治療は十分ではなく、完全に成功しないことがよくある。これらの神経の状態としては、急性脊髄損傷、脊髄圧迫症、脊髄の血腫、脊髄挫傷（これらの症例は通常、オートバイの事故またはスポーツでの負傷などのように外傷性である）；神経圧迫、その最も一般的な状態は坐骨神経の圧迫、ニューロパシー、および疼痛を引き起こす椎間板ヘルニアである；首の神経圧迫を引き起こす頸椎椎間板ヘルニアも含まれる；手根管症候群（非ＲＡ）；ガンによる急性または慢性の脊髄の圧迫（このことは、前立腺ガン、乳ガンまたは肺ガンなどから棘への転移に起因することが多い）；神経系の自己免疫疾患；ならびに脱髄性疾患、その最も一般的な状態は多発性硬化症である、が挙げられる。
【００９７】
神経疾患の治療に有用な別の薬剤の具体例は、上記の神経学上の問題および状態を治療するために用いられるコルチゾンなどのステロイド剤である。神経疾患、外傷、負傷および圧迫症の治療のために用いられる、種々の有機構造および代謝機能を有する薬理学上の化学物質、化合物および薬剤のさらなる具体例が、たとえば米国特許第５，７５６，４８２号および第５，５７４，０２２号（これらのものは、その全体が本明細書中に参考として援用されている）に開示されている。ここでは、負傷のあとで、プレグネノロンおよび硫酸プレグネノロンなどのステロイドホルモンまたはステロイド前駆体を、インドメタシンなどの非ステロイド系抗炎症性物質と組み合わせて用いることで、神経系および脊髄への物理的損傷を緩和する方法が開示されている。
【００９８】
Ｊ．他の疾患
本発明の抗体および抗体の一部分を用いて、ＴＮＦα活性が有害である他の種々の疾患を治療することができる。ＴＮＦα活性が病態生理に関与し、従って本発明の抗体または抗体の一部分を用いて治療が可能である他の疾患および障害の具体例としては、炎症性の骨疾患および骨吸収の疾患（たとえば、ベルトリーニ，ディー．アール．（Ｂｅｒｔｏｌｉｎｉ，Ｄ．Ｒ．）ら、（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ ３１９：５１６−５１８；ケーニヒ，エイ．（Ｋｏｎｉｇ，Ａ．）ら、（１９８８）Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．３：６２１−６２７；レーナー，ユー．エイチ．およびオーリン，エイ．（Ｌｅｒｎｅｒ，Ｕ．Ｈ．ａｎｄ Ｏｈｌｉｎ，Ａ．）、（１９９３）Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．８：１４７−１５５；ならびにシャンカー，ジー．およびスターン，ピー．エイチ．（Ｓｈａｎｋａｒ，Ｇ．ａｎｄ Ｓｔｅｒｎ，Ｐ．Ｈ．）、（１９９３）Ｂｏｎｅ １４：８７１−８７６を参照すること）、アルコール性肝炎（たとえば、マッククライン，シー．ジェイ．およびコーエン，ディー．エイ．（ＭｃＣｌａｉｎ，Ｃ．Ｊ．ａｎｄ Ｃｏｈｅｎ，Ｄ．Ａ．）、（１９８９）Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ９：３４９−３５１；フェルバー，エム．イー．（Ｆｅｌｖｅｒ，Ｍ．Ｅ．）ら、（１９９０）Ａｌｃｏｈｏｌ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｒｅｓ．１４：２５５−２５９；およびハンセン，ジェイ．（Ｈａｎｓｅｎ，Ｊ．）ら、（１９９４） Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０：４６１−４７４を参照すること）およびウイルス性肝炎（シェロン，エヌ．（Ｓｈｅｒｏｎ，Ｎ．）ら、（１９９１）Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌ．１２：２４１−２４５；およびフサイン，エム．ジェイ．（Ｈｕｓｓａｉｎ，Ｍ．Ｊ．）ら、（１９９４）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．４７：１１１２−１１１５）を含めた肝炎、凝固障害（たとえば、バンデルポール，ティー．（ｖａｎ ｄｅｒ Ｐｏｌｌ，Ｔ．）ら、（１９９０）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２２：１６２２−１６２７；およびバンデルポール，ティー．ら、（１９９１）Ｐｒｏｇ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ．３６７：５５−６０を参照すること）、火傷（たとえば、ジロール，ビー．ピー．（Ｇｉｒｏｉｒ，Ｂ．Ｐ．）ら、（１９９４）Ａｉｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏ．２６７：Ｈ１１８−１２４；およびリウ，エックス．エス．（Ｌｉｕ，Ｘ．Ｓ．）ら、（１９９４）Ｂｕｒｎｓ ２０：４０−４４を参照すること）、再灌流障害（たとえば、スケイルス，ダブリュ．イー．（Ｓｃａｌｅｓ，Ｗ．Ｅ．）ら、（１９９４）Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏ．２６７：Ｇ１１２２−１１２７；シェリック，シー．（Ｓｅｒｒｉｃｋ，Ｃ．）ら、（１９９４） Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５８：１１５８−１１６２；およびヤオ，ワイ．エム．（Ｙａｏ，Ｙ．Ｍ．）ら、（１９９５）Ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎ ２９：１５７−１６８を参照すること）、ケロイド形成（たとえばマックコーリー，アール．エル．（ＭｃＣａｕｌｅｙ，Ｒ．Ｌ．）ら、（１９９２）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：３００−３０８を参照すること）、瘢痕組織の形成ならびに発熱が挙げられる。好ましくは、それぞれの障害または疾患の治療に有用な別の薬剤と併用する抗体および抗体の一部分が有用である。抗体がＤ２Ｅ７であることがさらに好ましい。それぞれの障害または疾患の治療に有用な一種以上の他の薬剤と共に、Ｄ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量にて隔週で皮下に投与することがさらに好ましい。
【００９９】
以下の実施例によって本発明をさらに説明するが、制限するものと解釈すべきではない。本出願を通して列挙された参考文献、特許および公開された特許出願のすべての内容は、本明細書中に参考として援用されている。上記の開示および以下の開示の組み合わせを適用でき、かつ可能である場合、たとえその組み合わせの言葉自体が記載されていなくても、そのような組み合わせは本発明の範囲内である。
【実施例】
【０１００】
（承認されたＤＭＡＲＤ、ＮＳＡＩＤまたはステロイド剤を含めた）最新の抗リウマチ療法で適切な治療を受けていないＲＡ疾患の患者に、隔週にてＤ２Ｅ７を４０ｍｇ投与することの安全性と有効性とを調査するために、一つの研究を設計し、そして実施した；この研究は、最新の抗リウマチ療法で適切な治療を受けていない慢性関節リウマチ（ＲＡ）疾患の患者に、隔週にてＤ２Ｅ７を４０ｍｇの投与量で２４週目まで皮下（ｓｃ）投与するという、マルチセンター無作為化二重盲検プラシーボ管理研究であった。抗リウマチ療法では、承認された疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）またはステロイド剤を含む研究期間中の使用が許可された。抗リウマチ療法を利用したのにも関わらず、スクリーニング・ビジットおよびベースライン・ビジットの両方にて記録される活発な疾患を、患者は経験しなければならなかった。スクリーニングに先立つ少なくとも２８日間を安定とするためには、併用するプレドニゾン（一日あたり１０ｍｇ以下）およびＮＳＡＩＤだけでなく、ＤＭＡＲＤの投与が必要であった。さらに、アザチオプリンおよび／またはシクロスポリンを用いている患者は、これらの療法を中止してスクリーニングの前に２８日間の洗い流し期間を経験した。ベースライン・ビジットにおいて、患者をＤ２Ｅ７またはプラシーボに無作為化し、そしてこのことが２４週間のプラシーボ管理期間の開始を意味した。研究の２週目、４週目、８週目、１２週目、１６週目、２０週目および２４週目において、患者の検査を行った。米国リウマチ学会の２０％の改善（ＡＣＲ２０）応答を満たせなかったかまたは維持できなかった患者には、ノール医療用モニターを用いての立会い診察の後で、ＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド療法の投与量を一回増加させるか、研究に参加してから３ヵ月後に別のＤＭＡＲＤでの治療を行うか、または投与量をさらに調節した。
【０１０１】
７５０（７５０）名の患者を登録し、６３６名の患者を無作為化し、５７８名の患者が完了し、そして６３６名の患者を分析した。
【０１０２】
対照的に、すべての無作為化患者が人口統計学上の分析および安全性の分析に算入された。
【０１０３】
患者は少なくとも３ヶ月間、（１９８７年に改訂されたＡＣＲの判断基準で規定された）ＲＡの確定診断のままで過ごし、そしてＡＣＲの機能クラスＩ、ＩＩ、またはＩＩＩとした。最新の抗リウマチ療法による患者の治療は十分でなく、６以上の関節の腫れおよび９以上の圧痛のある関節として規定される活発なＲＡを有していた。さらに、投与量が１０ｍｇ／日以下のプレドニゾンと等価であり、少なくとも２８日間は変化がなかったことを維持した場合の糖質コルチコイドを用いるその患者が、研究への参加を許された。
【０１０４】
２ｍＬのガラスビン内にＤ２Ｅ７を供給した（それぞれのビンにおけるＤ２Ｅ７の濃度は２５ｍｇ／ｍＬであった（すなわち４０ｍｇ／１．６ｍＬ））。それぞれは、１．６ｍＬの注射用溶液あたり４０ｍｇのＤ２Ｅ７を含んでいた。Ｄ２Ｅ７は、オーストリアのウンターラッハにあるエベーウェ・アルツナイミッテル株式会社（Ｅｂｅｗｅ Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌ ＧｍｂＨ）で製造され提供を受けた。米国メリーランド州のロックビルにあるマケッソン・エイチビーオーシ・バイオサイエンシズ（ＭｃＫｅｓｓｏｎ，ＨＢＯＣ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）社で、Ｄ２Ｅ７が包装され、ラベルを付けられ、貯蔵され、そしてこの研究のための各地における研究者に送られた。２４週間の期間中、隔週で行う４０ｍｇの一回の皮下注射としてＤ２Ｅ７が自己管理された。研究用の薬剤の濃度は２５ｍｇ／ｍＬであった。２４週間の期間中、隔週で行う一回の皮下注射としてプラシーボ／１．６ｍＬ（Ｄ２Ｅ７が含まれないクエン酸−リン酸緩衝液）が自己管理された。
【０１０５】
抗リウマチ療法の研究前の投与量を患者は受け続けた。研究期間中、抗リウマチ療法の使用が許されたのは、ＤＭＡＲＤ（ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤およびスルファサラジンもしくはそれらの任意の組み合わせまたは他のＤＭＡＲＤ）、ＮＳＡＩＤおよびステロイド剤が含まれた。スクリーニングに先立つ少なくとも２８日間を安定とするためには、併用するプレドニゾン（一日あたり１０ｍｇ以下）およびＮＳＡＩＤだけでなく、ＤＭＡＲＤを投与しなければならなかった。
【０１０６】
２４週間のプラシーボ管理期間中、この研究における患者を保護することに、すべての努力が向けられた。最新の臨床上の実務を反映させてこのプロトコールを設計したので、次のような付加的な治療および投与量の調節も可能であった。
【０１０７】
本研究の最初の３ヶ月間は、最大で３回まで関節内にステロイドを注射することが許された。（一回または複数回）注射された関節は、それぞれの注射から２８日間は関節の試験について評価されなかった。
【０１０８】
耐性の問題のために、バックグラウンドのＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド剤またはＮＳＡＩＤの治療の投与量を研究期間中に一度調整することができた。さらなる投与量の調整は、ノール医療用モニターを用いての立会い診察後にのみ行うように定められた。
【０１０９】
有効性の欠如が記録された場合（すなわちベースラインと比べてＡＣＲ２０応答が達成できなかった場合）、次のことが生じる可能性があった。
【０１１０】
−バックグラウンドのＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド剤の治療の投与量の一回分の増加（供給される残りのプレドニゾンの投与量は１０ｍｇ／日以下のままであった）。
【０１１１】
−３ヶ月目以降、上記に列挙された別のＤＭＡＲＤ療法での治療の開始。
【０１１２】
−以前に認められた、バックグラウンドの抗リウマチ薬の投与量の、ノール医療用モニターから判断されるさらなる調整。
【０１１３】
アザチオプリンおよび／またはシクロスポリンを投与されている患者は、これらの療法を中止してスクリーニング・ビジット前の２８日間の洗い流し期間に参加することが求められた。本研究の期間中はこれらの療法を用いてはならなかった。
【０１１４】
併用療法は、ベースラインで用いられ、かつ研究期間中に続けられる療法として、または研究期間中に開始される療法として規定された。無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、併用療法が示される。
【０１１５】
研究者によってＣＲＦ上に記入された指標に従って、併用療法は、「ＲＡ特異的」および「ＲＡ非特異的」に分けられた。研究の間、すべての患者はＲＡ特異的併用投薬（ＤＭＡＲＤまたは非ＤＭＡＲＤ）のいくつかの形式の上にあった。
【０１１６】
ＲＡ特異的ＤＭＡＲＤ併用療法：
表１において、無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、ＤＭＡＲＤ併用療法を示す。
【０１１７】
【表１】
【０１１８】
無作為化患者の大部分（６３６名中の５３１名［８３．５％］）が、研究期間中に一種以上のＤＭＡＲＤ併用療法を用いた（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の２６１名［８２．１％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の２７０名［８４．９％］）。合計で１０５名（６３６名中の１６．５％）の患者はＤＭＡＲＤを用いなかった（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の５７名［１７．９％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の４８名［１５．１％］）。３５６名（６３６名中の５６．０％）の患者は一種のＤＭＡＲＤを用いた（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の１８４名［５７．９％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者名中の１７２名［５４．１％］）。そして１７５名の患者（６３６名中の２７．５％）は二から四種の異なるＤＭＡＲＤを用いた（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の７７名［２４．２％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の９８名［３０．８％］）。
【０１１９】
研究期間中、Ｄ２Ｅ７処理群では、平均で１．１０の異なるＤＭＡＲＤを用いたのに対して、プラシーボ処理群では、平均で１．２１の異なるＤＭＡＲＤを用いた。
【０１２０】
最も高頻度で報告されたＤＭＡＲＤ併用療法はメトトレキサートであった。このものは、６３６名の患者中の３７７名（５９．３％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の１７８名［５６．０％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の１９９名［６２．６％］）によって用いられた。次に続く三種の最も広く用いられたＤＭＡＲＤ併用療法は、抗マラリア薬（すなわちクロロキン、ヒドロキシクロロキン）（６３６名の患者の２４．７％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２３．６％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２５．８％）、レフルノミド（６３６名の患者の１３．８％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の１３．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１４．５％）、そしてスルファサラジン（６３６名の患者の９．７％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の９．１％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１０．４％）であった。Ｄ２Ｅ７治療を受けた患者とプラシーボ処理を受けた患者との間には、ＲＡ特異的ＤＭＡＲＤ併用療法を用いた頻度についての関連性のある違いはなかった。
【０１２１】
ＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法：
表２において、無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、ＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法を示す。
【０１２２】
【表２】
【０１２３】
６３６名の無作為化患者中の合計で６１９名（９７．３％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の３１５名［９９．１％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の３０４名［９５．６％］）が、研究期間中に一種以上のＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法を用いた。
【０１２４】
最も高頻度で報告されたＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法はプレドニゾンであった。このものは、６３６名の患者中の２８７名（４５．１％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の１４１名［４４．３％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の１４６名［４５．９％］）によって用いられた。次に続く最も広く用いられた非ＤＭＡＲＤ併用療法は葉酸であった（６３６名の患者の２７．４％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２７．７％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２７．０％）。ＣＲＦに記載された指示に従って、葉酸はＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ療法または非ＲＡ特異的療法に分類された。ＲＡ以外のすべての指示に関しては、葉酸は非ＲＡ特異的療法に分類された。セレコキシブ（６３６名の患者の２５．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２４．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２６．１％）およびロフェコキシブ（６３６名の患者の１３．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の１４．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１２．３％）が、次に続く最も頻繁に用いられたＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法であった。Ｄ２Ｅ７治療を受けた患者とプラシーボ処理を受けた患者との間には、ＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ併用療法を用いた頻度についての関連性のある違いはなかった。
【０１２５】
ＲＡ非特異的併用療法：
無作為化されたすべての患者に関する採用術語および処理群によって、ＲＡ非特異的併用療法を示す。
【０１２６】
６３６名の無作為化患者中の合計で６１４名（９６．５％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の３０６名［９６．２％］と、３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の３０８名［９６．９％］）が、一種以上の非ＲＡ特異的併用療法を用いた。
【０１２７】
最も高頻度で報告された非ＲＡ特異的併用療法は総合ビタミン類であった。このものは、６３６名の患者中の１６６名（２６．１％）（３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者中の７８名［２４．５％］および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者中の８８名［２７．７％］）によって用いられた。次に続く三種の最も広く用いられた併用療法は、カルシウム（６３６名の患者の２４．４％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２３．６％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２５．２％）、葉酸（６３６名の患者の２２．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の２１．４％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の２３．０％）ならびにインフルエンザウイルスの多価ワクチン（６３６名の患者の１４．２％：３１８名のＤ２Ｅ７処理を受けた患者の１４．２％および３１８名のプラシーボ処理を受けた患者の１４．２％）であった。（ＣＲＦに記載された指示に従って、葉酸はＲＡ特異的非ＤＭＡＲＤ療法または非ＲＡ特異的療法に分類された。ＲＡ以外のすべての指示に関しては、葉酸は非ＲＡ特異的療法に分類された。）Ｄ２Ｅ７治療を受けた患者とプラシーボ処理を受けた患者との間には、非ＲＡ特異的併用療法を用いた頻度についての関連性のある違いはなかった。
【０１２８】
有効性の指標としては：２４週目でのＡＣＲ２０応答；２４週目でのＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０；ベースラインから２４週目までのＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０のＡＵＣ（曲線下面積）；ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０についての最初の応答までの時間；ＡＣＲの数値（ＡＣＲ−Ｎ）；ベースラインから２４週目までの、ＡＣＲ応答の判断基準の構成要素の変化（圧痛のある関節の総数［ＴＪＣ］、腫れた関節の総数［ＳＪＣ］、患者による疼痛の評価、患者および主治医による疾患の活動の総合評価、ＨＡＱおよびＣ反応性タンパク質［ＣＲＰ］）；ＳＦ−３６、ヘルス・ユーティリティーズ・インデックス（ＨＵＩ）、慢性病の治療の疲労の機能評価（ＦＡＣＩＴ）の度合いによって測定される、ベースラインから２４週目までの肉体機能の変化；Ｅｕｒｏ−ＱｏＬ質問表；疲労の多次元評価（ＭＡＦ）の度合い；被験体の簡易調査；バックグラウンドのＤＭＡＲＤおよび／またはステロイド剤の治療の際の投与量増加までの発生率および時間；臨床上の応答を欠くことによる新規ＤＭＡＲＤ療法の設定；リウマチ因子（ＲＦ）；ならびに朝の硬直が挙げられる。
【０１２９】
頻度、パーセンテージならびに１００名の患者の年間あたりの割合によって、有害事象を要約した。ピアソンのカイ二乗（χ２）検定を用いて、Ｄ２Ｅ７群とプラシーボ群との間での統計的な比較を行った。統計的な特性ならびに異常値の頻度によって、理学的検査、研究室のパラメータおよび胸部ｘ線の変化を記述した。シフトテーブルも提供された。統計的な特性によってバイタルサインを記述した。２４週目のＡＣＲ２０の応答（ベースラインからの変化）を最初の有効性変数と規定した。有意水準αが０．０５のピアソンのχ２両側検定を利用して、Ｄ２Ｅ７群とプラシーボ群との間のＡＣＲ２０の応答速度を比較した。他のすべての有効性変数を記述的に要約し（統計的な特性、頻度、パーセンテージ、信頼区間）、統計的両側検定によって予備的に分析した。カテゴリーデータについてはピアソンのχ２検定を用い、連続的なデータについては、因子として処理群を、そして共変動としてそれぞれのベースライン値を含む共分散分析法（ＡＮＣＯＶＡ）モデルを用いた。連続型変数についてはウィルコクソンの順位和検定を用いて、そして離散型変数についてはピアソンのχ２検定を用いて、Ｄ２Ｅ７群とプラシーボ群との間の人口統計的な特性およびベースライン特性を比較した。
【０１３０】
有効性の結果：
主要な有効性の指標であるＡＣＲ２０応答は、最新の抗リウマチ療法にＤ２Ｅ７が追加された患者における、プラシーボと比較しての統計的に有意な大幅な改善（Ｄ２Ｅ７については５３．０％であるのに対してプラシーボについては３４．９％）に関連していた。
【０１３１】
【表３】
【０１３２】
Ｄ２Ｅ７による治療は、二次的な有効性の指標であるＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０、ＡＣＲ−Ｎ、圧痛のある関節の総数、腫れた関節の総数、患者および主治医による疾患の活動の総合評価、患者による疼痛の評価、ＨＡＱの障害指数、Ｃ反応性タンパク質、朝の硬直、朝の硬直の継続時間、ＦＡＣＩＴの疲労の度合い、ＳＦ−３６の１０ドメインのうちの９ならびにＨＵＩの１６ドメインの７に関する統計的に有意な改善に関連していた。
【０１３３】
Ｄ２Ｅ７によって、ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、およびＡＣＲ７０についての応答までの時間；ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０およびＡＣＲ−ＮについてのＡＵＣ；Ｅｕｒｏ−ＱｏＬ、ＲＦ、ならびにＭＡＦのスケールといった指標についての治療上の応答が、プラシーボを超えて改善したことも実証された。
【０１３４】
下位群の分析からは、メトトレキサート、抗マラリア薬治療、スルファサラジン、他のＤＭＡＲＤ、またはＤＭＡＲＤの併用数（すなわち０、１、２、または３以上）を併用して与えられたＤ２Ｅ７の患者について、プラシーボの患者と比較して、ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０、ＡＣＲ−Ｎのパラメータ、およびＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０、およびＡＣＲ−ＮのＡＵＣのスコアが大きく改善したことが実証された。レフルノミドの併用は、試験を行ったすべてのパラメータについてプラシーボによく似ていた。
【０１３５】
【表４】
【０１３６】
【表５】
【０１３７】
【表６】
【０１３８】
【表７】
【０１３９】
結論：
患者の既存のＤＭＡＲＤ療法（たとえば、メトトレキサート、抗マラリア薬〔クロロキン／ヒドロキシクロロキン〕、レフルノミド、およびスルファサラジン）に追加した場合、Ｄ２Ｅ７は一般的に耐性が良好であった。その追加は、有害事象の発生率またはプロフィールのあらゆる重大な変化とは関係がなかった。さらに、有害事象のプロフィールは、患者に用いられる、併用するＤＭＡＲＤの総数（すなわち０、１、２、または３以上）に関連はしないことであった。
【０１４０】
全体として、Ｄ２Ｅ７の投与量が４０ｍｇでは、単独で用いてもまたは他のＤＭＡＲＤと組み合わせて用いても安全であることが実証された。
【０１４１】
Ｄ２Ｅ７の治療は、その疾患が既存のＤＭＡＲＤ療法による治療では不十分である患者におけるＲＡの有意な改善と関連した。メトトレキサート、抗マラリア薬の治療、スルファサラジン、他のＤＭＡＲＤ、またはＤＭＡＲＤの併用数（すなわち０、１、２、または３以上）と組み合わせて用いた場合、Ｄ２Ｅ７はプラシーボと比較するとより高い応答と関連した。最後に、応答速度の改善は、用いるＤＭＡＲＤのタイプまたは回数とは、一般的に無関係であった。
【０１４２】
均等物
当業者であれば、ルーチンな実験を利用して、本明細書に記載された本発明の特定の実施態様に関する多数の均等物を認識するか、または確認できる。次の請求の範囲は、そのような均等物を包含することを意図する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＮＦα抗体またはその抗原結合断片により治療可能な疾患を患うヒト被験体における障害を治療する方法であって、その障害が治療されるように隔週で投与する計画に基づいて、それが必要な該ヒト被験体に抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分を含有する組成物を投与すること、および一種以上の他の薬剤を投与すること、を包含する方法。
【請求項２】
抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分を含有する組成物の投与が皮下注射によるものである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分がヒト抗ＴＮＦα抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ヒト抗体がＤ２Ｅ７である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
４０ｍｇのＤ２Ｅ７を投与する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
疾患が自己免疫疾患である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
自己免疫疾患が慢性関節リウマチである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
他の薬剤が、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＤＭＡＲＤが、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤、スルファサラジンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＮＳＡＩＤが、プレドニゾン、葉酸、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パラセタモール、ナプロキセン、イブプロフェン、メチルプレドニゾロン、トラマドール、ジ−ゲシック、ジクロフェナク、バイコジン、トリアムシノロン、リドカインまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
他の薬剤が、総合ビタミン類、カルシウム、葉酸、インフルエンザウイルスの多価ワクチンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
４０ｍｇのＤ２Ｅ７、一種以上の他の薬剤および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物。
【請求項１３】
他の薬剤が、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ＤＭＡＲＤが、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤、スルファサラジンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ＮＳＡＩＤが、プレドニゾン、葉酸、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パラセタモール、ナプロキセン、イブプロフェン、メチルプレドニゾロン、トラマドール、ジ−ゲシック、ジクロフェナク、バイコジン、トリアムシノロン、リドカインまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
他の薬剤が、総合ビタミン類、カルシウム、葉酸、インフルエンザウイルスの多価ワクチンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ａ）抗ＴＮＦα抗体および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物；
ｂ）一種以上の医薬組成物であって、それぞれの組成物が一種以上の他の薬剤および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物；ならびに
ｃ）抗ＴＮＦα抗体またはその結合部位が治療に有効である障害の治療のための医薬組成物を隔週投与するための取扱説明書、
を含む処方を含むキット。
【請求項１８】
抗体を含有する組成物が４０ｍｇのＤ２Ｅ７であり、取扱説明書が慢性関節リウマチの治療に関するものである、請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
他の組成物が、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせを含有する、請求項１８に記載のキット。
【請求項２０】
ＤＭＡＲＤが、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤、スルファサラジンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１９に記載のキット。
【請求項２１】
ＮＳＡＩＤが、プレドニゾン、葉酸、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パラセタモール、ナプロキセン、イブプロフェン、メチルプレドニゾロン、トラマドール、ジ−ゲシック、ジクロフェナク、バイコジン、トリアムシノロン、リドカインまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１９に記載のキット。
【請求項２２】
他の薬剤が、総合ビタミン類、カルシウム、葉酸、インフルエンザウイルスの多価ワクチンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１８に記載のキット。
【請求項１】
ＴＮＦα抗体またはその抗原結合断片により治療可能な疾患を患うヒト被験体における障害を治療する方法であって、その障害が治療されるように隔週で投与する計画に基づいて、それが必要な該ヒト被験体に抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分を含有する組成物を投与すること、および一種以上の他の薬剤を投与すること、を包含する方法。
【請求項２】
抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分を含有する組成物の投与が皮下注射によるものである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分がヒト抗ＴＮＦα抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ヒト抗体がＤ２Ｅ７である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
４０ｍｇのＤ２Ｅ７を投与する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
疾患が自己免疫疾患である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
自己免疫疾患が慢性関節リウマチである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
他の薬剤が、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＤＭＡＲＤが、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤、スルファサラジンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＮＳＡＩＤが、プレドニゾン、葉酸、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パラセタモール、ナプロキセン、イブプロフェン、メチルプレドニゾロン、トラマドール、ジ−ゲシック、ジクロフェナク、バイコジン、トリアムシノロン、リドカインまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
他の薬剤が、総合ビタミン類、カルシウム、葉酸、インフルエンザウイルスの多価ワクチンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
４０ｍｇのＤ２Ｅ７、一種以上の他の薬剤および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物。
【請求項１３】
他の薬剤が、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ＤＭＡＲＤが、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤、スルファサラジンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ＮＳＡＩＤが、プレドニゾン、葉酸、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パラセタモール、ナプロキセン、イブプロフェン、メチルプレドニゾロン、トラマドール、ジ−ゲシック、ジクロフェナク、バイコジン、トリアムシノロン、リドカインまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
他の薬剤が、総合ビタミン類、カルシウム、葉酸、インフルエンザウイルスの多価ワクチンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ａ）抗ＴＮＦα抗体および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物；
ｂ）一種以上の医薬組成物であって、それぞれの組成物が一種以上の他の薬剤および医薬適合性の担体を含有する医薬組成物；ならびに
ｃ）抗ＴＮＦα抗体またはその結合部位が治療に有効である障害の治療のための医薬組成物を隔週投与するための取扱説明書、
を含む処方を含むキット。
【請求項１８】
抗体を含有する組成物が４０ｍｇのＤ２Ｅ７であり、取扱説明書が慢性関節リウマチの治療に関するものである、請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
他の組成物が、疾患修飾化抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド剤またはそれらの任意の組み合わせを含有する、請求項１８に記載のキット。
【請求項２０】
ＤＭＡＲＤが、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、注射用金製剤、経口用金製剤、スルファサラジンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１９に記載のキット。
【請求項２１】
ＮＳＡＩＤが、プレドニゾン、葉酸、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パラセタモール、ナプロキセン、イブプロフェン、メチルプレドニゾロン、トラマドール、ジ−ゲシック、ジクロフェナク、バイコジン、トリアムシノロン、リドカインまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１９に記載のキット。
【請求項２２】
他の薬剤が、総合ビタミン類、カルシウム、葉酸、インフルエンザウイルスの多価ワクチンまたはそれらの任意の組み合わせである、請求項１８に記載のキット。
【公開番号】特開２０１０−２４８１９９（Ｐ２０１０−２４８１９９Ａ）
【公開日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１０−１１８６４７（Ｐ２０１０−１１８６４７）
【出願日】平成２２年５月２４日（２０１０．５．２４）
【分割の表示】特願２００４−５１９５３６（Ｐ２００４−５１９５３６）の分割
【原出願日】平成１５年４月２４日（２００３．４．２４）
【出願人】（５０３４４８５７２）アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド (30)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１１８６４７（Ｐ２０１０−１１８６４７）
【出願日】平成２２年５月２４日（２０１０．５．２４）
【分割の表示】特願２００４−５１９５３６（Ｐ２００４−５１９５３６）の分割
【原出願日】平成１５年４月２４日（２００３．４．２４）
【出願人】（５０３４４８５７２）アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド (30)
【Ｆターム（参考）】
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