【課題】改変型オリゴ糖を有する真核生物宿主細胞の提供。
【解決手段】一組のグリコシルトランスフェラーゼ、糖および糖ヌクレオチドトランスポーターの異種発現によってグリコシル化に関与する任意の望ましい遺伝子を発現して標的とするために使用され、哺乳動物の例えばヒト治療糖タンパク質の生成のための宿主株になるようにさらに改変され得る下等真核生物宿主細胞であって、改変型脂質結合型オリゴ糖を有する宿主細胞。その操作された宿主細胞において生成されるＮ−グリカンは、ＧｎＴＩＩＩ活性、ＧｎＴＩＶ活性、ＧｎＴＶ活性、ＧｎＴ ＶＩ活性、またはＧｎＴＩＸ活性を示す。このＮ−グリカンは、二分されかつ／または複数のアンテナを有するＮ−グリカン構造を生じ、１つ以上の酵素、糖、糖ヌクレオチドトランスポーターの異種発現によって、ヒト様糖タンパク質を生じるようにさらに改変される。 （もっと読む）

【課題】ヒト様糖タンパク質を真菌または他の下等真核生物で発現するための方法を提供する。
【解決手段】真菌または他の下等真核生物宿主細胞中においてエンドマンノシダーゼ活性を発現させることによって、組換えタンパク質のグリコシル化グリカンを高等哺乳動物（特に、ヒト）に由来するタンパク質のグリコシル化構造により密接に類似させる方法。また、新規酵素、およびそれらをコードする核酸、およびそれらの酵素を発現するように操作された宿主、宿主において改変糖タンパク質を産生するための方法およびそのように産生された改変糖タンパク質。 （もっと読む）

内因性または異種Ｃａ^２＋ ＡＴＰアーゼが過剰発現される下等真核宿主細胞を記載する。カルレチクリンおよび／またはＥＲｐ５７タンパク質が過剰発現される下等真核宿主細胞も記載する。これらの宿主細胞は、軽減したＯ−グリコシル化を有する組換え糖タンパク質を製造するのに有用である。
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【課題】改変された脂質連結オリゴ糖を有する宿主細胞を提供すること。
【解決手段】本発明は、改変された脂質連結オリゴ糖を有する宿主細胞に関する。この脂質連結オリゴ糖は、グリコシルトランスフェラーゼ、糖トランスポーターおよびマンノシダーゼのセットの異種発現によってさらに改変されて、哺乳動物（例えば、ヒト）の治療用糖タンパク質の産生のための宿主系となり得る。このプロセスは、操作された宿主細胞を提供し、この宿主細胞を使用して、グリコシル化に関与する任意の望ましい遺伝子を発現させ得、標的化し得る。改変された脂質連結オリゴ糖を有する宿主細胞が、産生または選択される。 （もっと読む）

酵母及び糸状真菌などの下等真核生物の表面上に組換えタンパク質又はタンパク質ライブラリーをディスプレイするための方法が記載されている。この方法は、ライブラリー中のタンパク質のアレイから所望の特性を有する特定のタンパク質を同定するために、下等真核生物中の組換えタンパク質のライブラリーをスクリーニングするのに有用である。前記方法は、下等真核生物中に抗体ライブラリーを構築し、スクリーニングするのに特に有用である。
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ピチア・パストリス（Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ）を含む酵母および真菌のａｄｅ１およびａｄｅ２栄養要求性株に基づく、発現系のための方法および系を開示する。該発現系は、形質転換細胞系の細胞生産性の増加および工業的規模の組換え糖タンパク質の製造に有用である。 （もっと読む）

フコシル化Ｎ−グリカンを有する糖タンパク質を産生できるように糖タンパク質のＮ−グリカンをフコシル化するための内因性経路を欠く宿主細胞の遺伝子工学的方法が開示されている。
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予め選択されたＮ−結合グリコシル化パターンを優勢なＮ−糖形態として含む、エリスロポエチンタンパク質の組成物の製造のための方法および物質を提供する。
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挿入部位に隣接の遺伝子の発現を破壊することなく細胞またはウイルスのゲノム内部に異種核酸を組込むための方法および材料が提供される。
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本発明は、シアリル転移酵素及び／又はトランスシアリダーゼを含めて、１組の糖転移酵素の異種発現によってシアル酸付加糖タンパク質を産生するように改変されて、ほ乳動物、例えば、ヒト治療用糖タンパク質の製造用宿主系統になる、真核生物宿主細胞に関する。シアル酸付加糖タンパク質の産生用ＣＭＰ−シアル酸生合成経路を発現する新規真核生物宿主細胞も提供する。本発明は、（シアリル化に関与するほ乳動物酵素活性などの）ほ乳動物酵素活性を、真核生物宿主細胞中の細胞内区画に首尾よく向け、発現させるのに使用することができる、核酸分子及びコンビナトリアルライブラリーを提供する。方法は、グリコシル化に関与する任意の望ましい遺伝子を発現させ、標的にするのに使用することができる、操作された宿主細胞を与える。
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