アッセイ
堅固な基材と、基材を少なくとも部分的に覆う柔軟なカバー要素と、液体を収容するように適合された、及び1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの、標的分子を含む内容物を放出するように適合された、基材中に形成された第一の構造と、液体を収容し、及び標的分子を捕捉するように適合された少なくとも1つの結合要素を含むように適合された、並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定するように適合された、基材中に形成された第二の構造と、少なくとも第一の構造及び第二の構造を相互接続する微小流体ネットワーク、並びに微小流体ネットワークの一部を選択的に閉鎖するために、基材に対して柔軟なカバー要素を押圧することによって、第一の構造と第二の構造の間に流体流を起こさせるように適合されたアクチュエータ要素と、を含む装置。
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【特許請求の範囲】
【請求項1】
(a)堅固な基材;
(b)基材を少なくとも部分的に覆う柔軟なカバー要素;
(c)液体を収容するように適合された、及び1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの、標的分子を含む内容物を放出するように適合された、基材中に形成された第一の構造;
(d)液体を収容し、及び標的分子を捕捉するように適合された少なくとも1つの結合要素を含むように適合された、並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定するように適合された、基材中に形成された第二の構造;
(e)少なくとも第一の構造及び第二の構造を相互接続する微小流体ネットワーク;
(f)微小流体ネットワークの一部を選択的に閉鎖するために、基材に対して柔軟なカバー要素を押圧することによって、第一の構造と第二の構造の間に流体流を起こさせるように適合されたアクチュエータユニット;
を含む装置。
【請求項2】
(a)少なくとも1つの結合要素を含み及び微小流体ネットワークと流体連通している、液体を収容するように適合された構造;
(b)標的分子が少なくとも1つの結合要素において捕捉されるように、微小流体ネットワークを通じた流体流を調節するように適合され、構造中の標的分子の増幅を調節するように適合され、及び少なくとも1つの結合要素において捕捉された化合物の検出を調節するように適合された調節ユニット;
を含む装置。
【請求項3】
化合物が標的分子である、請求項2の装置。
【請求項4】
化合物が標的分子の存在及び/又は量に対する指標となるレポーター化合物である、請求項2の装置。
【請求項5】
少なくとも1つの結合要素が標的分子を捕捉するように適合されている、請求項1から4の何れか一項の装置。
【請求項6】
少なくとも1つの結合要素が標的分子の存在及び/又は量に対する指標となるレポーター化合物を捕捉するように適合されている、請求項1から5の何れか一項の装置。
【請求項7】
少なくとも1つの結合要素が標的分子を捕捉するように適合された第一の結合要素並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となるレポーター化合物を捕捉するように適合された第二の結合要素を含む、請求項1から6の何れか一項の装置。
【請求項8】
構造がウェルである、請求項1から7の何れか1項の装置。
【請求項9】
微小流体ネットワークが1つのチャネル又は相互接続されたチャネルの複数を含む、請求項1から8の何れか一項の装置。
【請求項10】
微小流体ネットワークが少なくとも1つのさらなる構造を含む、請求項1から9の何れか一項の装置。
【請求項11】
少なくとも1つのさらなる構造が1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの、標的分子を含む内容物を放出するように適合されている、請求項10の装置。
【請求項12】
少なくとも1つのさらなる構造が標的分子と複合体を形成することができる捕捉プローブを含む、請求項10又は11の装置。
【請求項13】
少なくとも1つのさらなる構造が標的分子の増幅を促進する少なくとも1つの物質を含む、請求項10から12の何れか一項の装置。
【請求項14】
少なくとも1つのさらなる構造がウェルである、請求項10から13の何れか1項の装置。
【請求項15】
基材を含み、構造が基材上に及び/又は基材中に付与されている、請求項1から14の何れか一項の装置。
【請求項16】
基材が堅固な基材である、請求項15の装置。
【請求項17】
基材を少なくとも部分的に覆うカバー要素を含む、請求項15又は16の装置。
【請求項18】
基材が第一の表面及び該第一の表面と対向する第二の表面を有し、
構造が基材の第一の表面上及び/又は表面中に付与されており、
基材の第二の表面上及び/又は表面中に付与されているさらなる構造を含み、
第一及び第二の表面の間に配置され、並びに構造をさらなる構造との流体連通させるように構成された接続構造を含む、
請求項15から17の何れか一項の装置。
【請求項19】
接続構造が基材中の通過穴又は基材の第一の表面中及び第二の表面中の溝である、請求項18の装置。
【請求項20】
さらなる基材を含み、さらなる構造がさらなる基材上及びさらなる基材中に付与されており、基材がさらなる基材に接続されている作動状態において、構造とさらなる構造が流体連通されるように、基材及びさらなる基材が相互接続可能であるように適合されている、請求項15から19の何れか一項の装置。
【請求項21】
標的分子の分析中における固相カップリング手順の複数が少なくとも1つの結合要素において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から20の何れか一項の装置。
【請求項22】
標的分子の分析中における正確に2つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から21の何れか一項の装置。
【請求項23】
試料中の標的分子の分析中における正確に1つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から19の何れか一項の装置。
【請求項24】
少なくとも1つの結合要素に隣接して配置された装置の少なくとも一部が1nmから10μmの波長の範囲の電磁波照射に対して透過性であり、これにより、標的分子の存在及び/又は量に対する指標となり、及び少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物の電磁波照射をベースとする検出が可能となる、請求項1から23の何れか一項の装置。
【請求項25】
調節ユニットがプロセッサである、特にマイクロプロセッサ及び中央演算装置からなる群の1つである、請求項2から24又は97の何れかの装置。
【請求項26】
構造に配置され、及び構造中に配置された少なくとも1つの結合要素、特にビーズが構造から取り除かれることを防ぐように適合された少なくも1つのフィルター、特に少なくとも1つのフリットを含む、請求項1から25の何れかの装置。
【請求項27】
少なくとも1つの結合要素が表面機能化を含む、請求項1から26の何れかの装置。
【請求項28】
少なくとも1つの結合要素が、構造の表面上に配置された捕捉分子、粒子上に配置された捕捉分子、構造の多孔性表面上に配置された捕捉分子及び構造の表面に関して異なる位置上に配置された1つ又はそれ以上の異なる捕捉分子からなる群の少なくとも1つを含む、請求項1から27の何れか一項の装置。
【請求項29】
構造が1μlから1mlの範囲、特に20μlから300μlの範囲の容積を有する、請求項1から28の何れか一項の装置。
【請求項30】
基材が装置に液体を供給するための挿管を受容するように構成された溝を有する、請求項15から29の何れか一項の装置。
【請求項31】
基材が構造に隣接するウィンドウ部分を有し、及び1nmから10μmの波長の範囲、400nmから800nmの波長の範囲の電磁波照射に対して透過性であり、これにより、構造又は微小流体ネットワークを通じた液体流のメニスカスの電磁波照射をベースとする検出を可能とする、請求項15から30の何れか一項の装置。
【請求項32】
構造及びさらなる構造からなる群の少なくとも1つが2つの液体開口部を含む、請求項10から31の何れか一項の装置。
【請求項33】
少なくとも1つの結合要素が捕捉分子のアンカー基を結合するように構成されている、請求項1から32の何れか一項の装置。
【請求項34】
少なくとも1つの結合要素がポリヌクレオチドを捕捉するように構成されている、請求項1から33の何れかの装置。
【請求項35】
カバー要素が柔軟なカバー要素である、請求項17から34の何れかの装置。
【請求項36】
カバー要素が少なくとも部分的に変形可能であるように構成されている、請求項17から35の何れか一項の装置。
【請求項37】
構造又は微小流体ネットワークを開放又は閉鎖することにより、液体の流れを選択的に可能又は不能にするように、カバー要素が少なくとも部分的に変形可能なように構成されている、請求項17から36の何れか一項の装置。
【請求項38】
構造に沿って又は微小流体ネットワークに沿って液体を輸送するように、カバー要素が少なくとも部分的に変形可能なように構成されている、請求項17から37の何れか一項の装置。
【請求項39】
(a)構造を覆うカバー要素の一部;及び
(b)カバー要素を変形させるように作動されるように適合されたアクチュエータユニット;
をさらに含む、請求項38の装置。
【請求項40】
構造が生物学的に、生化学的に及び/又は化学的に活性である1つ又はそれ以上の物質を含む、請求項1から39の何れかの装置。
【請求項41】
1つ又はそれ以上の物質が、捕捉分子、検出可能なマーカー及び試薬からなる群の少なくとも1つを含む、請求項40の装置。
【請求項42】
1つ又はそれ以上の物質が乾燥された形態で、特に凍結乾燥された形態で存在する、請求項40又は41の装置。
【請求項43】
チャネルが50μmから1mmの範囲、特に100μmから300μmの範囲の幅を有する、請求項9から42の何れか一項の装置。
【請求項44】
チャネルが20μmから300μmの範囲、特に50μmから200μmの範囲の高さを有する、請求項9から43の何れか一項の装置。
【請求項45】
構造が液体用の輸送媒体として適合された材料を含む、請求項1から44の何れかの装置。
【請求項46】
材料が固体材料、ゲル材料、液体材料及びこれらの組み合わせからなる群の少なくとも1つを含む、請求項45の装置。
【請求項47】
カバー要素が柔軟な膜又は柔軟な密封を含む、請求項17から46の何れかの装置。
【請求項48】
カバー要素を変形し、これにより、構造中及び/又は微小流体ネットワーク中の液体の液体流の特性を調節するように作動するように適合されたアクチュエータユニットを含む、請求項17から47の何れかの装置。
【請求項49】
チャネルの直線部分に沿って液体の液体流特性を調節するようにアクチュエータユニットが適合されている、請求項48の装置。
【請求項50】
バルブ、流体混合装置及び流体ポンプからなる群の少なくとも1つとして、アクチュエータユニットが適合されている、請求項48又は49の装置。
【請求項51】
アクチュエータユニットが、カバー要素を変形して、これにより、調節ユニットによって規定される流体流スキームに従って液体の液体流特性を調節するために協調的に作動されるように適合されたアクチュエータ要素の複数を含む、請求項48から50の何れか一項の装置。
【請求項52】
標的分子が少なくとも1つの結合要素に捕捉され、標的分子が構造中で増幅され、並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となり、及び少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物が検出されるようにカバー要素を変形するためにアクチュエータユニットを調節するように調節ユニットが適合される、請求項48から51の何れか一項の装置。
【請求項53】
アクチュエータユニットが往復運動されるように構成されたピンを含む、請求項48から52の何れか一項の装置。
【請求項54】
アクチュエータユニットが基材の主表面に対して垂直な方向に移動可能に取り付けられている、請求項48から53の何れかの装置。
【請求項55】
構造を通じた液体の輸送を不能にするために、構造の少なくとも一部を選択的に閉鎖するように、アクチュエータユニットが移動可能に取り付けられている、請求項48から54の何れかの装置。
【請求項56】
構造を通じた液体の輸送を可能とするために、構造の少なくとも一部を選択的に開放するように、アクチュエータユニットが移動可能に取り付けられている、請求項48から55の何れかの装置。
【請求項57】
構造を通じた液体の流体流を選択的に可能又は不能とするために、基材の主表面に対して垂直に往復運動するようにアクチュエータユニットが適合されている、請求項48から56の何れかの装置。
【請求項58】
構造を通じて液体を拍出するために、基材の主表面に対して垂直に往復運動するようにアクチュエータユニットが適合されている、請求項48から57の何れかの装置。
【請求項59】
アクチュエータユニットが構造の容量又は高さを調節するように適合されている、請求項48から58の何れかの装置。
【請求項60】
アクチュエータユニットが構造を選択的に閉鎖するように適合されている、請求項48から59の何れかの装置。
【請求項61】
アクチュエータユニットを機械的に駆動するように適合された駆動ユニットを含み、駆動ユニットが調節ユニットによって調節可能である、請求項48から60の何れかの装置。
【請求項62】
駆動ユニットが空気圧式駆動機構、水力学的駆動機構及び電磁的駆動機構からなる群の少なくとも1つを含む、請求項61の装置。
【請求項63】
少なくとも1つの結合要素が三次元媒体を含む、請求項1から62の何れか一項の装置。
【請求項64】
三次元媒体が粒子及び多孔性マトリックスからなる群の少なくとも1つから選択される、請求項63の装置。
【請求項65】
アクチュエータユニットを移動させることによって可逆的に圧縮可能であるように三次元媒体が配置及び構成されている、請求項63又は64の装置。
【請求項66】
バイオセンサーアッセイ装置、微小流体カートリッジ及びラブ・オン・チップ(lab on chip)からなる群の少なくとも1つとして適合された、請求項1から65の何れかの装置。
【請求項67】
液体の温度を感知するように適合され、及び好ましくはアクチュエータユニットに配置されている温度センサーを含む、請求項1から66の何れかの装置。
【請求項68】
液体の温度を操作するように適合され、及び必要に応じてアクチュエータユニットに配置されている温度操作ユニットを含む、請求項1から67の何れかの装置。
【請求項69】
温度操作ユニットがポリメラーゼ連鎖反応を実施するための温度系列に従って構造中に配置された液体の温度を操作するように適合されている、請求項68の装置。
【請求項70】
構造中に配置されている液体の温度を最大95℃まで上昇させるように、温度操作単位が適合されている、請求項68又は69の装置。
【請求項71】
温度操作ユニットが加熱要素及び冷却要素からなる群の少なくとも1つを含む、請求項68から70の何れか一項の装置。
【請求項72】
液体の温度を操作するように適合された温度操作ユニットを含み、温度操作ユニットが第一の加熱要素及び第二の加熱要素を含み、構造が第一の加熱要素と第二の加熱要素の間に配置されている、請求項1から71の何れか一項の装置。
【請求項73】
第一の加熱要素が連続板であり、及び第二の加熱要素が環状板である、請求項72の装置。
【請求項74】
構造中の液体の温度を制御するように適合された温度制御ユニットを含む、請求項1から73の何れかの装置。
【請求項75】
基材が光透過性材料を含む、請求項15から74の何れかの装置。
【請求項76】
少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物を検出するように適合された検出ユニットを構造中に含む、請求項1から75の何れかの装置。
【請求項77】
検出領域が光学的検出ユニット、特に蛍光検出ユニットを含む、請求項76の装置。
【請求項78】
微小流体ネットワークが相互接続されたチャネルの複数を含む、請求項1から77の何れかの装置。
【請求項79】
基材及びカバー要素が互いに接続されている別個のコンポーネントである、請求項17から78の何れかの装置。
【請求項80】
基材及びカバー要素が異なる材料で作製されている、請求項17から79の何れかの装置。
【請求項81】
構造及び/又は微小流体ネットワークを通じて液体を輸送するように適合された輸送ユニットを含む、請求項1から80の何れかの装置。
【請求項82】
輸送ユニットがポンプ、特に、圧縮空気ポンプ、水圧式ポンプ、蠕動式ポンプ及び真空ポンプからなる群の1つを含む、請求項81の装置。
【請求項83】
輸送ユニットが構造中及び/又は微小流体ネットワーク中に気泡を発生させることによって、液体を輸送するように適合されている、請求項81の装置。
【請求項84】
基材及びカバー要素が直接接触している、請求項17から83の何れかの装置。
【請求項85】
基材がカバー要素と直接接触していない、請求項17から84の何れかの装置。
【請求項86】
構造に隣接して位置している基材の一部が400nmから800nmの波長の範囲の電磁的放射に対して透過性であり、これにより、構造中での光学的検出を可能とする、請求項15から85の何れかの装置。
【請求項87】
標的分子の分析中における少なくとも2つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素の正確に1つにおいて行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から86の何れか一項の装置。
【請求項88】
複数の結合要素を含み、及び標的分子の分析中における少なくとも2つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素の2つ又はそれ以上において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から86の何れか一項の装置。
【請求項89】
溶解剤と及び標的分子と複合体を形成することができる捕捉プローブとを含む溶解構造を含み、
液体の1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの内容物(該内容物は標的分子を含む。)が放出され、及び捕捉プローブと複合体を形成するように、溶解構造への液体の流れを調節するように調節ユニットが適合されている、請求項2から88の何れかの装置。
【請求項90】
複合体が構造中の少なくとも1つの結合部分に捕捉されるように、調節ユニットが、溶解構造から構造中への複合体の流体流を調節するように適合されている、請求項89の装置。
【請求項91】
構造と流体連通している廃棄チャンバーを含み、
少なくとも1つの結合要素に捕捉されていない構造中の成分が廃棄チャンバー中に輸送される様式で、調節ユニットが微小液体ネットワークを通じた流体流を調節するように適合されている、請求項90の装置。
【請求項92】
洗浄剤を含む洗浄構造を含み、
洗浄手順が構造中で行われるように、調節ユニットが洗浄構造から構造中への洗浄剤の流体流を調節するように適合されている、請求項91の装置。
【請求項93】
逆転写剤を含む逆転写構造を含み、逆転写手順が構造中で行われるように、調節ユニットが逆転写構造から構造中への逆転写剤の流体流を調節するように適合されている、請求項92の装置。
【請求項94】
増幅剤を含む増幅構造を含み、増幅構造中への構造からの液体の流体流を調節するように、及び増幅構造から構造へ戻る液体の及び増幅剤の流体流を調節するように調節ユニットが適合されている、請求項93に装置。
【請求項95】
増幅剤を使用することによって及び構造へ温度系列を適用することによって、構造中の増幅を調節するように調節ユニットが適合されている、請求項94の装置。
【請求項96】
少なくとも1つの結合要素に捕捉された、増幅された化合物の検出を調節するように調節ユニットが適合されている、請求項95の装置。
【請求項97】
標的分子が少なくとも1つの結合要素において捕捉されるように、微小流体ネットワークを通じた流体流を調節するように適合され、第二の構造中の標的分子の増幅を調節するように適合され、及び少なくとも1つの結合要素において捕捉された化合物の検出を調節するように適合された調節ユニットを含む、請求項1の装置。
【請求項98】
微小流体ネットワークを通じた液体流を調節するために、アクチュエータユニットを調節するように、調節ユニットが適合されている、請求項97の装置。
【請求項99】
液体を収容するように適合された構造を含み、該構造が第一の化合物を捕捉するように適合された第一の結合要素と並びに第一の化合物の存在及び/又は量に対する指標となる第二の化合物を捕捉するように適合された第二の結合要素とを含む、装置。
【請求項100】
(a)少なくとも1つの結合要素を含み及び微小流体ネットワークと流体連通している構造中に液体を収容すること、
(b)標的分子が少なくとも1つの結合要素において捕捉されるように、微小流体ネットワークを通じた流体流を調節すること、
(c)構造中の標的分子を増幅すること、及び
(d)標的分子の存在及び/又は量に対する指標となり、並びに少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物を検出すること、
を含む、方法。
【請求項101】
(a)それぞれ標的核酸と捕捉分子を含む複合体を形成させること(各捕捉分子は、標的核酸のある領域に対して特異的な結合部分とアンカー基を含む。)、
(b)複合体を結合要素と接触させること(結合要素は、複合体を結合要素に結合するための捕捉分子のアンカー基を結合するように構成されている。)、
(c)1つ又はそれ以上の標的核酸を増幅に供すること、
(d)結合要素に関して、増幅された標的核酸を捕捉すること、及び
(e)捕捉された標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる1つ又はそれ以上の値を測定すること、
を含む、方法。
【請求項102】
1つ又はそれ以上の標的核酸が一本鎖核酸である、請求項101の方法。
【請求項103】
工程(c)を実施する前に、標的核酸を逆転写に供することをさらに含む、請求項102の方法。
【請求項104】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させること、並びに工程(c)及び(d)を反復することをさらに含む、請求項101から103の何れかの方法。
【請求項105】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復するサイクルが少なくとも10回実施される、請求項104の方法。
【請求項106】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復するサイクルが少なくとも20回実施される、請求項105の方法。
【請求項107】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復する少なくとも1サイクルの後に、工程(e)が実施される、請求項104から106の何れかの方法。
【請求項108】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復する各サイクルの後に、工程(e)が実施される、請求項107の方法。
【請求項109】
結合要素が標的核酸を捕捉することができる1つ又はそれ以上の捕捉分子を含み、及び標的核酸が1つ又はそれ以上の捕捉分子によって、結合要素に関し捕捉されている、請求項101から108の何れかの方法。
【請求項110】
工程(a)が工程(b)から空間的に隔てて行われる、請求項101から109の何れかの方法。
【請求項111】
結合要素が粒子を含む、請求項101から110の何れかの方法。
【請求項112】
工程(c)及び/又は(d)を実施する前に、1つ又はそれ以上の検出可能なマーカーを添加することによって、標的核酸を標識することをさらに含む、請求項101から111の何れかの方法。
【請求項113】
1つ又はそれ以上の検出可能なマーカーが蛍光マーカーである、請求項112の方法。
【請求項114】
工程(e)が、取得された1つ又はそれ以上の指標値の時間依存的モニタリングを含む、請求項101から113の何れかの方法。
【請求項115】
工程(a)を実施する前に、1つ又はそれ以上の標的核酸を提供することをさらに含む、請求項101から114の何れかの方法。
【請求項116】
1つ又はそれ以上の標的核酸を提供することが生物学的材料からの標的核酸を放出させることを含む、請求項115の方法。
【請求項117】
生物学的材料が1つ又はそれ以上の原核細胞、1つ又はそれ以上の真核細胞及び1つ又はそれ以上のウイルス粒子並びにこれらの混合物からなる群から選択される、請求項116の方法。
【請求項118】
生物学的材料から標的核酸を放出させることが生物学的材料を溶解試薬と接触させることを含む、請求項116又は117の方法。
【請求項119】
1つ又はそれ以上の標的核酸を提供することが、1つ又はそれ以上の標的核酸を含む試料を提供することを含み、試料が、全血、血漿、血清、尿、痰、唾液及び脳脊髄液からなる群から選択される、請求項115から118の何れかの方法。
【請求項120】
きょう雑材料から1つ又はそれ以上の標的核酸を分離することをさらに含む、請求項101から119の何れかの方法。
【請求項121】
標的核酸を提供することが工程(b)、(c)、(d)及び(e)から空間的に隔てて行われる、請求項116から120の何れかの方法。
【請求項122】
請求項1から99の何れかの装置中で行われる、請求項101から111の何れかの方法。
【請求項123】
装置が液体を収容するように適合された第一の構造を含み、及び工程(a)が第一の構造中で実施される、請求項122の方法。
【請求項124】
装置が液体を収容するように適合され、及び1つ又はそれ以上の標的核酸を検出するように構成された第二の構造を含み(第二の構造は第二の構造を覆うカバー要素を含む。)、及びカバー要素を変形するように作動されるように適合されたアクチュエータユニットを含み、並びに工程(e)が第二の構造中で行われる、請求項122又は123の方法。
【請求項125】
工程(c)及び/又は工程(d)が第二の構造中で行われる、請求項124の方法。
【請求項126】
工程(e)がカバー要素を変形させるように作動されるアクチュエータを用いて実施される、請求項124又は125の方法。
【請求項127】
第二の構造の容量が減少されるようにカバー要素が変形される、請求項126の方法。
【請求項128】
工程(e)を実施した後に、第二のウェルの容積が再度増加される、請求項127の方法。
【請求項129】
(a)レポーター化合物のある量;
捕捉分子のアンカー基を結合するように構成された第一の結合要素;
レポーター化合物を捕捉することができる第二の結合要素;
レポーター化合物と複合体を形成することができる標的核酸のある量(レポーター化合物との複合体の形成は第二の結合要素によるレポーター化合物の捕捉を阻害する。);及び
捕捉分子のある量(各捕捉分子は標的核酸のある領域に対して特異的な結合部分及びアンカー基を含む。)を提供すること;
(b)それぞれ標的核酸及び捕捉分子を含む複合体を形成すること;
(c)複合体を第一の結合要素に結合させるために、複合体を第一の結合要素と接触させること;
(d)第一の結合要素から標的核酸の量の少なくとも一部を放出させること;
(e)標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させること;
(f)第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;並びに
(e)第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること、
を含む、方法。
【請求項130】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値に基づいて、標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定することをさらに含む、請求項129の方法。
【請求項131】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定する工程の後に、第二の結合要素からレポーター化合物の量の残りの一部を放出させること;
標的核酸の量の少なくとも一部とレポーター化合物の量のサブセットの複合体を形成させること;
第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;並びに
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること
をさらに含む、請求項129又は130の方法。
【請求項132】
N回のさらなる回数(Nは、1より大きい又は1に等しい整数である。)、放出させる、複合体を形成させる、捕捉する及び測定する工程を実施することをさらに含む、請求項121の方法。
【請求項133】
N>5である、請求項132の方法。
【請求項134】
N>10である、請求項132の方法。
【請求項135】
N>20である、請求項132の方法。
【請求項136】
標的核酸の量の少なくとも一部とレポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程が同時に行われる、請求項129から135の何れかの方法。
【請求項137】
標的核酸を増幅に供することをさらに含む、請求項129から136の何れかの方法。
【請求項138】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の前に、標的核酸の増幅が開始される、請求項137の方法。
【請求項139】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体の形成及び第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部の捕捉が化学的平衡状態になる前に、第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項136から138の何れかの方法。
【請求項140】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成する工程及び第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程を開始してから1秒ないし120秒後に、第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項136から139の何れかの方法。
【請求項141】
レポーター化合物が1つ又はそれ以上の検出可能な標識を含む、請求項129から140の何れかの方法。
【請求項142】
1つ又はそれ以上の検出可能な標識が蛍光標識である、請求項141の方法。
【請求項143】
レポーター化合物がオリゴヌクレオチドである、請求項129から142の何れかの方法。
【請求項144】
標的核酸を増幅に供する前に、標的核酸を逆転写に供することをさらに含む、請求項137から143の何れかの方法。
【請求項145】
第二の結合要素が、第二の結合要素上にレポーター化合物を捕捉することができる1つ又はそれ以上の異なるレポーター特異的捕捉分子を含む、請求項129から144の何れかの方法。
【請求項146】
レポーター特異的捕捉分子がオリゴヌクレオチドである、請求項145の方法。
【請求項147】
異なるレポーター特異的捕捉分子が第二の結合要素に関して異なる位置上に配置されている、請求項145又は146の方法。
【請求項148】
レポーター特異的捕捉分子と複合体を形成することによって、レポーター化合物が第二の結合要素上に捕捉される、請求項145から147の何れかの方法。
【請求項149】
標的核酸と複合体を形成することが可能なレポーター化合物の相互作用部位の少なくとも一部がレポーター特異的捕捉分子と複合体を形成することもできる、請求項145から148の何れかの方法。
【請求項150】
レポーター特異的捕捉分子及び標的核酸がレポーター化合物との複合体の形成に関して競合する、請求項145から149の何れかの方法。
【請求項151】
増幅が二本鎖核酸を変性させる工程を含む、請求項137から150の何れかの方法。
【請求項152】
二本鎖核酸が標的核酸とのレポーター化合物の複合体、レポーター特異的捕捉分子とのレポーター化合物の複合体、レポーター化合物の二本鎖及び標的核酸の二本鎖を含む、請求項151の方法。
【請求項153】
増幅が標的核酸へプライマー分子を徐冷する工程を含む、請求項137から152の何れかの方法。
【請求項154】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び/又は第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程と同時に徐冷工程が行われる、請求項153の方法。
【請求項155】
増幅が循環増幅である、請求項137から154の何れかの方法。
【請求項156】
循環増幅がPCRである、請求項155の方法。
【請求項157】
PCRを実施することがエキソヌクレアーゼ活性を有するポリメラーゼを使用することを含む、請求項156の方法。
【請求項158】
循環増幅が少なくとも10のサイクルを含む、請求項155から157の何れかの方法。
【請求項159】
循環増幅が少なくとも20のサイクルを含む、請求項155から158の何れかの方法。
【請求項160】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の少なくとも1サイクル後に測定される、請求項155から159の何れかの方法。
【請求項161】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の各サイクル後に測定される、請求項155から160の何れかの方法。
【請求項162】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定した後に毎回測定される、請求項155から161の何れかの方法。
【請求項163】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値の測定が指標値の時間依存性モニタリングを含む、請求項129から163の何れかの方法。
【請求項164】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、レポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値と相関させる較正曲線に基づいて測定される、請求項130から163の何れかの方法。
【請求項165】
請求項1から99の何れかの装置中で行われる、請求項129から164の何れかの方法。
【請求項166】
装置が液体を収容するように適合された第一の構造を含み、及びそれぞれ標的核酸と捕捉分子を含む複合体を形成させる工程(各捕捉分子は標的核酸のある領域に対して特異的な結合部分とアンカー基を含む。)が第一の構造中で行われる、請求項165の方法。
【請求項167】
装置が液体を収容するように適合された第二の構造を含み、第一の結合要素及び必要に応じて第二の結合要素が第二の構造中に提供される、請求項165又は166の方法。
【請求項168】
試料が1μLから50μLの容積を有する流体試料である、請求項100から167の何れかの方法。
【請求項169】
試料が液体全血試料である、請求項100から168の何れかの方法。
【請求項170】
請求項100から169の何れかの方法を実施するように構成された請求項1から99の何れかの流体装置。
【請求項171】
−レポーター化合物のある量、
−レポーター化合物を捕捉することができる結合要素及び
−レポーター化合物と複合体を形成することができる標的核酸のある量(レポーター化合物との複合体の形成は結合要素によるレポーター化合物の捕捉を阻害する。)、
を含む組成物を形成すること;
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させること;
結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;並びに
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること
を含む方法。
【請求項172】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値に基づいて、標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定することをさらに含む、請求項171の方法。
【請求項173】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の後に、結合要素からレポーター化合物の量の残りの一部を放出させること、結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること、並びに結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定することをさらに含む、請求項171又は172の方法。
【請求項174】
N回のさらなる回数(Nは、1より大きい又は1に等しい整数である。)、放出、複合体の形成、捕捉及び測定の工程を実施することをさらに含む、請求項173の方法。
【請求項175】
N>5である、請求項174の方法。
【請求項176】
N>10である、請求項174の方法。
【請求項177】
N>20である、請求項174の方法。
【請求項178】
複合体を形成させる工程の前に、
結合要素上にレポーター化合物の量の少なくとも一部を捕捉すること;
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること;並びに
捕捉されたレポーター化合物を結合要素から放出させること
をさらに含む、請求項171から177の何れかの方法。
【請求項179】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程が同時に行われる、請求項171から178の何れかの方法。
【請求項180】
標的核酸を増幅に供することをさらに含む、請求項171から179の何れかの方法。
【請求項181】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の前に、標的核酸の増幅が開始される、請求項180の方法。
【請求項182】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体の形成及び結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部の捕捉が化学的平衡状態になる前に、結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項171から181の何れかの方法。
【請求項183】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成する工程及び結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程を開始してから1秒ないし120秒後に、結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項171から182の何れかの方法。
【請求項184】
レポーター化合物が1つ又はそれ以上の検出可能な標識を含む、請求項171から183の何れかの方法。
【請求項185】
1つ又はそれ以上の検出可能な標識が蛍光標識である、請求項184の方法。
【請求項186】
レポーター化合物がオリゴヌクレオチドである、請求項171から185の何れかの方法。
【請求項187】
標的核酸を増幅に供する前に、標的核酸を逆転写に供することをさらに含む、請求項180から186の何れかの方法。
【請求項188】
組成物を形成することが、
−第一のレポーター化合物のある量と、
−第一のレポーター化合物と複合体を形成することができる第一の標的核酸のある量と(第一のレポーター化合物との複合体の形成は結合要素による第一のレポーター化合物の捕捉を阻害する。)、
−第二のレポーター化合物のある量と、及び
−第二のレポーター化合物と複合体を形成することができる第二の標的核酸のある量(第二のレポーター化合物との複合体の形成は結合要素による第二のレポーター化合物の捕捉を阻害する。)と
を含む組成物を形成することを含む、請求項171から187の何れかの方法。
【請求項189】
結合要素が、結合要素上にレポーター化合物を捕捉することができる1つ又はそれ以上の異なるレポーター捕捉分子を含む、請求項171から188の何れかの方法。
【請求項190】
捕捉分子がオリゴヌクレオチドである、請求項189の方法。
【請求項191】
異なる捕捉分子が結合要素に関して異なる位置上に配置されている、請求項189又は190の方法。
【請求項192】
捕捉分子と複合体を形成することによって、レポーター化合物が結合要素上に捕捉される、請求項189から191の何れかの方法。
【請求項193】
標的核酸と複合体を形成することが可能なレポーター化合物の相互作用部位の少なくとも一部が捕捉分子と複合体を形成することもできる、請求項189から192の何れかの方法。
【請求項194】
捕捉分子及び標的核酸がレポーター化合物との複合体の形成に関して競合する、請求項189から193の何れかの方法。
【請求項195】
増幅が二本鎖核酸を変性させる工程を含む、請求項180から194の何れかの方法。
【請求項196】
二本鎖核酸が標的核酸とのレポーター化合物の複合体、捕捉分子とのレポーター化合物の複合体、レポーター化合物の二本鎖及び標的核酸の二本鎖を含む、請求項195の方法。
【請求項197】
増幅が標的核酸へプライマー分子を徐冷する工程を含む、請求項180から196の何れかの方法。
【請求項198】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び/又は結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程と同時に徐冷工程が行われる、請求項197の方法。
【請求項199】
増幅が循環増幅である、請求項180から198の何れかの方法。
【請求項200】
循環増幅がPCRである、請求項199の方法。
【請求項201】
PCRを実施することがエキソヌクレアーゼ活性を有するポリメラーゼを使用すること含む、請求項200の方法。
【請求項202】
循環増幅が少なくとも10のサイクルを含む、請求項199から201の何れかの方法。
【請求項203】
循環増幅が少なくとも20のサイクルを含む、請求項199から202の何れかの方法。
【請求項204】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の少なくとも1つのサイクル後に測定される、請求項199から203の何れかの方法。
【請求項205】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の各サイクル後に測定される、請求項199から204の何れかの方法。
【請求項206】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定した後に毎回測定される、請求項199から205の何れかの方法。
【請求項207】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値の測定が指標となる値の時間依存性モニタリングを含む、請求項171から206の何れかの方法。
【請求項208】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、レポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値と相関させる較正曲線に基づいて測定される、請求項172から207の何れかの方法。
【請求項209】
バイオセンサーアッセイ装置、微小流体カートリッジ及びラブ・オン・チップ(lab on chip)からなる群から選択される装置中で実施される、請求項171から208の何れかの方法。
【請求項210】
流体状態の試料を収容するように適合された装置中に流体全血試料を導入すること;並びに
装置中で行われた分析に基づいて、全血試料中のウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値を測定すること;
を含む、方法。
【請求項211】
測定された値がウイルス感染と関連する全核酸の存在及び/又は量の指標である、請求項210の方法。
【請求項212】
流体全血試料の容量が1μlから50μlである、請求項210又は211の方法。
【請求項213】
流体全血試料が患者の指先の穿刺から得られる、請求項210から212の何れかの方法。
【請求項214】
血液を指先と接触させながら、指先での穿刺から得られた血液を毛細管と接触させることをさらに含む、請求項213の方法。
【請求項215】
毛細管と血液を接触させた後に、毛細管を装置に接続することをさらに含む、請求項214の方法。
【請求項216】
1μlから50μlの容量を有する流体試料を準備すること;並びに
流体試料中のウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値を測定すること;
を含む方法
【請求項217】
流体状態の試料を収容するように適合された装置中に、流体試料を導入すること;並びに
装置中で行われた分析に基づいて、流体試料中のウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値を測定することをさらに含む、請求項216の方法。
【請求項218】
流体試料が全血試料である、請求項216又は217の方法。
【請求項219】
全血試料が処理されていない全血試料である、請求項218の方法。
【請求項220】
ウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値に基づいて、感染された患者中のウイルス負荷量の指標となる値を測定することをさらに含む、請求項210から219の何れかの方法。
【請求項221】
流体試料の容量が1μlから10μlである、請求項210から220の何れかの方法。
【請求項222】
ウイルス感染がHIVでの感染である、請求項210から221の何れかの方法。
【請求項223】
装置が微小流体装置である、請求項210から215及び217から222の方法。
【請求項224】
装置が流体試料中の核酸を検出するためにさらに適合されている、請求項210から215及び217から223の方法。
【請求項225】
装置中で行われる分析が試料から核酸を放出させることをさらに含む、請求項210から215及び217から224の方法。
【請求項226】
放出の工程が流体試料を溶解試薬と接触させることを含む、請求項225の方法。
【請求項227】
装置中で行われる分析が複合体を形成させることをさらに含み、各複合体がウイルス感染と関連する核酸及び捕捉分子を含み、各捕捉分子がアンカー基及びウイルス感染と関連する核酸の領域に対して特異的な結合部分を含む、請求項210から215及び217から226の何れかの方法。
【請求項228】
装置中で行われる分析が複合体を装置の第一の結合要素と接触させることをさらに含み、複合体を第一の結合要素に結合するために、第一の結合要素が捕捉分子のアンカー基本を結合するように構成されている、請求項227の方法。
【請求項229】
ウイルス感染と関連する核酸との捕捉分子の複合体を形成させる工程が、複合体を第一の結合要素と接触させる工程から空間的に分離されて行われる、請求項227又は228の方法。
【請求項230】
装置中で行われる分析がウイルス感染と関連する核酸を増幅することをさらに含む、請求項210から215及び217から229の方法。
【請求項231】
核酸がPCRによって増幅される、請求項230の方法。
【請求項232】
装置中で行われる分析が、第一の結合要素に関して、増幅された核酸を捕捉することをさらに含む、請求項230又は231の方法。
【請求項233】
ウイルス感染と関連する核酸と複合体を形成することができるレポーター化合物の一定量及びレポーター化合物を捕捉することができる第二の結合要素を準備することをさらに含み、レポーター化合物の核酸との複合体の形成が第二の結合要素によるレポーター化合物の捕捉を阻害する、請求項227から232の方法。
【請求項234】
ウイルス感染と関連する核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させること;
第二の結合要素上の、ウイルス感染と関連する核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標と値を測定すること;並びに、必要に応じて、
レポーター化合物の量に対する指標となる値に基づいて、ウイルス感染と関連する核酸の量の指標となる1つ又はそれ以上の値を測定すること;
をさらに含む、請求項233の方法。
【請求項235】
ウイルス感染と関連する核酸を増幅に供することをさらに含み、核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の前に、核酸の増幅が開始される、請求項234の方法。
【請求項236】
装置が、バイオセンサーアッセイ装置、微小流体カートリッジ及びラブ−オン−チップからなる群から選択される装置である、請求項210から215及び217から235の何れかの方法。
【請求項237】
HIVを検出するための及び/又は患者中のHIV負荷量を測定するための、請求項210から236の方法の使用。
【請求項238】
診断マーカーとしての、全ウイルス核酸の量の使用。
【請求項239】
全ウイルス核酸の量が請求項210から236の何れかの方法によって測定される、請求項238の使用。
【請求項240】
ウイルス核酸がHIV核酸である、請求項238又は239の使用。
【請求項241】
全HIV核酸の量が、HIVを検出し、患者中のHIV負荷量を測定し、HIVに感染した患者中での疾病の進行をモニタリングし、及び/又はHIVに感染した患者の抗ウイルス治療の効率性をモニタリングするための指標である、請求項240の使用。
【請求項242】
全HIV核酸の量が遊離のウイルス及び細胞随伴ウイルスに由来する核酸を含む、請求項240又は241の使用。
【請求項243】
遊離のウイルス及び細胞随伴ウイルスに由来する核酸が遊離のウイルスに由来するRNA、細胞に随伴したウイルスに由来するRNA、プロウイルスDNA、逆転写されたウイルスDNA及び転写されたプロウイルスRNAを含む、請求項242の使用。
【請求項1】
(a)堅固な基材;
(b)基材を少なくとも部分的に覆う柔軟なカバー要素;
(c)液体を収容するように適合された、及び1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの、標的分子を含む内容物を放出するように適合された、基材中に形成された第一の構造;
(d)液体を収容し、及び標的分子を捕捉するように適合された少なくとも1つの結合要素を含むように適合された、並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定するように適合された、基材中に形成された第二の構造;
(e)少なくとも第一の構造及び第二の構造を相互接続する微小流体ネットワーク;
(f)微小流体ネットワークの一部を選択的に閉鎖するために、基材に対して柔軟なカバー要素を押圧することによって、第一の構造と第二の構造の間に流体流を起こさせるように適合されたアクチュエータユニット;
を含む装置。
【請求項2】
(a)少なくとも1つの結合要素を含み及び微小流体ネットワークと流体連通している、液体を収容するように適合された構造;
(b)標的分子が少なくとも1つの結合要素において捕捉されるように、微小流体ネットワークを通じた流体流を調節するように適合され、構造中の標的分子の増幅を調節するように適合され、及び少なくとも1つの結合要素において捕捉された化合物の検出を調節するように適合された調節ユニット;
を含む装置。
【請求項3】
化合物が標的分子である、請求項2の装置。
【請求項4】
化合物が標的分子の存在及び/又は量に対する指標となるレポーター化合物である、請求項2の装置。
【請求項5】
少なくとも1つの結合要素が標的分子を捕捉するように適合されている、請求項1から4の何れか一項の装置。
【請求項6】
少なくとも1つの結合要素が標的分子の存在及び/又は量に対する指標となるレポーター化合物を捕捉するように適合されている、請求項1から5の何れか一項の装置。
【請求項7】
少なくとも1つの結合要素が標的分子を捕捉するように適合された第一の結合要素並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となるレポーター化合物を捕捉するように適合された第二の結合要素を含む、請求項1から6の何れか一項の装置。
【請求項8】
構造がウェルである、請求項1から7の何れか1項の装置。
【請求項9】
微小流体ネットワークが1つのチャネル又は相互接続されたチャネルの複数を含む、請求項1から8の何れか一項の装置。
【請求項10】
微小流体ネットワークが少なくとも1つのさらなる構造を含む、請求項1から9の何れか一項の装置。
【請求項11】
少なくとも1つのさらなる構造が1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの、標的分子を含む内容物を放出するように適合されている、請求項10の装置。
【請求項12】
少なくとも1つのさらなる構造が標的分子と複合体を形成することができる捕捉プローブを含む、請求項10又は11の装置。
【請求項13】
少なくとも1つのさらなる構造が標的分子の増幅を促進する少なくとも1つの物質を含む、請求項10から12の何れか一項の装置。
【請求項14】
少なくとも1つのさらなる構造がウェルである、請求項10から13の何れか1項の装置。
【請求項15】
基材を含み、構造が基材上に及び/又は基材中に付与されている、請求項1から14の何れか一項の装置。
【請求項16】
基材が堅固な基材である、請求項15の装置。
【請求項17】
基材を少なくとも部分的に覆うカバー要素を含む、請求項15又は16の装置。
【請求項18】
基材が第一の表面及び該第一の表面と対向する第二の表面を有し、
構造が基材の第一の表面上及び/又は表面中に付与されており、
基材の第二の表面上及び/又は表面中に付与されているさらなる構造を含み、
第一及び第二の表面の間に配置され、並びに構造をさらなる構造との流体連通させるように構成された接続構造を含む、
請求項15から17の何れか一項の装置。
【請求項19】
接続構造が基材中の通過穴又は基材の第一の表面中及び第二の表面中の溝である、請求項18の装置。
【請求項20】
さらなる基材を含み、さらなる構造がさらなる基材上及びさらなる基材中に付与されており、基材がさらなる基材に接続されている作動状態において、構造とさらなる構造が流体連通されるように、基材及びさらなる基材が相互接続可能であるように適合されている、請求項15から19の何れか一項の装置。
【請求項21】
標的分子の分析中における固相カップリング手順の複数が少なくとも1つの結合要素において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から20の何れか一項の装置。
【請求項22】
標的分子の分析中における正確に2つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から21の何れか一項の装置。
【請求項23】
試料中の標的分子の分析中における正確に1つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から19の何れか一項の装置。
【請求項24】
少なくとも1つの結合要素に隣接して配置された装置の少なくとも一部が1nmから10μmの波長の範囲の電磁波照射に対して透過性であり、これにより、標的分子の存在及び/又は量に対する指標となり、及び少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物の電磁波照射をベースとする検出が可能となる、請求項1から23の何れか一項の装置。
【請求項25】
調節ユニットがプロセッサである、特にマイクロプロセッサ及び中央演算装置からなる群の1つである、請求項2から24又は97の何れかの装置。
【請求項26】
構造に配置され、及び構造中に配置された少なくとも1つの結合要素、特にビーズが構造から取り除かれることを防ぐように適合された少なくも1つのフィルター、特に少なくとも1つのフリットを含む、請求項1から25の何れかの装置。
【請求項27】
少なくとも1つの結合要素が表面機能化を含む、請求項1から26の何れかの装置。
【請求項28】
少なくとも1つの結合要素が、構造の表面上に配置された捕捉分子、粒子上に配置された捕捉分子、構造の多孔性表面上に配置された捕捉分子及び構造の表面に関して異なる位置上に配置された1つ又はそれ以上の異なる捕捉分子からなる群の少なくとも1つを含む、請求項1から27の何れか一項の装置。
【請求項29】
構造が1μlから1mlの範囲、特に20μlから300μlの範囲の容積を有する、請求項1から28の何れか一項の装置。
【請求項30】
基材が装置に液体を供給するための挿管を受容するように構成された溝を有する、請求項15から29の何れか一項の装置。
【請求項31】
基材が構造に隣接するウィンドウ部分を有し、及び1nmから10μmの波長の範囲、400nmから800nmの波長の範囲の電磁波照射に対して透過性であり、これにより、構造又は微小流体ネットワークを通じた液体流のメニスカスの電磁波照射をベースとする検出を可能とする、請求項15から30の何れか一項の装置。
【請求項32】
構造及びさらなる構造からなる群の少なくとも1つが2つの液体開口部を含む、請求項10から31の何れか一項の装置。
【請求項33】
少なくとも1つの結合要素が捕捉分子のアンカー基を結合するように構成されている、請求項1から32の何れか一項の装置。
【請求項34】
少なくとも1つの結合要素がポリヌクレオチドを捕捉するように構成されている、請求項1から33の何れかの装置。
【請求項35】
カバー要素が柔軟なカバー要素である、請求項17から34の何れかの装置。
【請求項36】
カバー要素が少なくとも部分的に変形可能であるように構成されている、請求項17から35の何れか一項の装置。
【請求項37】
構造又は微小流体ネットワークを開放又は閉鎖することにより、液体の流れを選択的に可能又は不能にするように、カバー要素が少なくとも部分的に変形可能なように構成されている、請求項17から36の何れか一項の装置。
【請求項38】
構造に沿って又は微小流体ネットワークに沿って液体を輸送するように、カバー要素が少なくとも部分的に変形可能なように構成されている、請求項17から37の何れか一項の装置。
【請求項39】
(a)構造を覆うカバー要素の一部;及び
(b)カバー要素を変形させるように作動されるように適合されたアクチュエータユニット;
をさらに含む、請求項38の装置。
【請求項40】
構造が生物学的に、生化学的に及び/又は化学的に活性である1つ又はそれ以上の物質を含む、請求項1から39の何れかの装置。
【請求項41】
1つ又はそれ以上の物質が、捕捉分子、検出可能なマーカー及び試薬からなる群の少なくとも1つを含む、請求項40の装置。
【請求項42】
1つ又はそれ以上の物質が乾燥された形態で、特に凍結乾燥された形態で存在する、請求項40又は41の装置。
【請求項43】
チャネルが50μmから1mmの範囲、特に100μmから300μmの範囲の幅を有する、請求項9から42の何れか一項の装置。
【請求項44】
チャネルが20μmから300μmの範囲、特に50μmから200μmの範囲の高さを有する、請求項9から43の何れか一項の装置。
【請求項45】
構造が液体用の輸送媒体として適合された材料を含む、請求項1から44の何れかの装置。
【請求項46】
材料が固体材料、ゲル材料、液体材料及びこれらの組み合わせからなる群の少なくとも1つを含む、請求項45の装置。
【請求項47】
カバー要素が柔軟な膜又は柔軟な密封を含む、請求項17から46の何れかの装置。
【請求項48】
カバー要素を変形し、これにより、構造中及び/又は微小流体ネットワーク中の液体の液体流の特性を調節するように作動するように適合されたアクチュエータユニットを含む、請求項17から47の何れかの装置。
【請求項49】
チャネルの直線部分に沿って液体の液体流特性を調節するようにアクチュエータユニットが適合されている、請求項48の装置。
【請求項50】
バルブ、流体混合装置及び流体ポンプからなる群の少なくとも1つとして、アクチュエータユニットが適合されている、請求項48又は49の装置。
【請求項51】
アクチュエータユニットが、カバー要素を変形して、これにより、調節ユニットによって規定される流体流スキームに従って液体の液体流特性を調節するために協調的に作動されるように適合されたアクチュエータ要素の複数を含む、請求項48から50の何れか一項の装置。
【請求項52】
標的分子が少なくとも1つの結合要素に捕捉され、標的分子が構造中で増幅され、並びに標的分子の存在及び/又は量に対する指標となり、及び少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物が検出されるようにカバー要素を変形するためにアクチュエータユニットを調節するように調節ユニットが適合される、請求項48から51の何れか一項の装置。
【請求項53】
アクチュエータユニットが往復運動されるように構成されたピンを含む、請求項48から52の何れか一項の装置。
【請求項54】
アクチュエータユニットが基材の主表面に対して垂直な方向に移動可能に取り付けられている、請求項48から53の何れかの装置。
【請求項55】
構造を通じた液体の輸送を不能にするために、構造の少なくとも一部を選択的に閉鎖するように、アクチュエータユニットが移動可能に取り付けられている、請求項48から54の何れかの装置。
【請求項56】
構造を通じた液体の輸送を可能とするために、構造の少なくとも一部を選択的に開放するように、アクチュエータユニットが移動可能に取り付けられている、請求項48から55の何れかの装置。
【請求項57】
構造を通じた液体の流体流を選択的に可能又は不能とするために、基材の主表面に対して垂直に往復運動するようにアクチュエータユニットが適合されている、請求項48から56の何れかの装置。
【請求項58】
構造を通じて液体を拍出するために、基材の主表面に対して垂直に往復運動するようにアクチュエータユニットが適合されている、請求項48から57の何れかの装置。
【請求項59】
アクチュエータユニットが構造の容量又は高さを調節するように適合されている、請求項48から58の何れかの装置。
【請求項60】
アクチュエータユニットが構造を選択的に閉鎖するように適合されている、請求項48から59の何れかの装置。
【請求項61】
アクチュエータユニットを機械的に駆動するように適合された駆動ユニットを含み、駆動ユニットが調節ユニットによって調節可能である、請求項48から60の何れかの装置。
【請求項62】
駆動ユニットが空気圧式駆動機構、水力学的駆動機構及び電磁的駆動機構からなる群の少なくとも1つを含む、請求項61の装置。
【請求項63】
少なくとも1つの結合要素が三次元媒体を含む、請求項1から62の何れか一項の装置。
【請求項64】
三次元媒体が粒子及び多孔性マトリックスからなる群の少なくとも1つから選択される、請求項63の装置。
【請求項65】
アクチュエータユニットを移動させることによって可逆的に圧縮可能であるように三次元媒体が配置及び構成されている、請求項63又は64の装置。
【請求項66】
バイオセンサーアッセイ装置、微小流体カートリッジ及びラブ・オン・チップ(lab on chip)からなる群の少なくとも1つとして適合された、請求項1から65の何れかの装置。
【請求項67】
液体の温度を感知するように適合され、及び好ましくはアクチュエータユニットに配置されている温度センサーを含む、請求項1から66の何れかの装置。
【請求項68】
液体の温度を操作するように適合され、及び必要に応じてアクチュエータユニットに配置されている温度操作ユニットを含む、請求項1から67の何れかの装置。
【請求項69】
温度操作ユニットがポリメラーゼ連鎖反応を実施するための温度系列に従って構造中に配置された液体の温度を操作するように適合されている、請求項68の装置。
【請求項70】
構造中に配置されている液体の温度を最大95℃まで上昇させるように、温度操作単位が適合されている、請求項68又は69の装置。
【請求項71】
温度操作ユニットが加熱要素及び冷却要素からなる群の少なくとも1つを含む、請求項68から70の何れか一項の装置。
【請求項72】
液体の温度を操作するように適合された温度操作ユニットを含み、温度操作ユニットが第一の加熱要素及び第二の加熱要素を含み、構造が第一の加熱要素と第二の加熱要素の間に配置されている、請求項1から71の何れか一項の装置。
【請求項73】
第一の加熱要素が連続板であり、及び第二の加熱要素が環状板である、請求項72の装置。
【請求項74】
構造中の液体の温度を制御するように適合された温度制御ユニットを含む、請求項1から73の何れかの装置。
【請求項75】
基材が光透過性材料を含む、請求項15から74の何れかの装置。
【請求項76】
少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物を検出するように適合された検出ユニットを構造中に含む、請求項1から75の何れかの装置。
【請求項77】
検出領域が光学的検出ユニット、特に蛍光検出ユニットを含む、請求項76の装置。
【請求項78】
微小流体ネットワークが相互接続されたチャネルの複数を含む、請求項1から77の何れかの装置。
【請求項79】
基材及びカバー要素が互いに接続されている別個のコンポーネントである、請求項17から78の何れかの装置。
【請求項80】
基材及びカバー要素が異なる材料で作製されている、請求項17から79の何れかの装置。
【請求項81】
構造及び/又は微小流体ネットワークを通じて液体を輸送するように適合された輸送ユニットを含む、請求項1から80の何れかの装置。
【請求項82】
輸送ユニットがポンプ、特に、圧縮空気ポンプ、水圧式ポンプ、蠕動式ポンプ及び真空ポンプからなる群の1つを含む、請求項81の装置。
【請求項83】
輸送ユニットが構造中及び/又は微小流体ネットワーク中に気泡を発生させることによって、液体を輸送するように適合されている、請求項81の装置。
【請求項84】
基材及びカバー要素が直接接触している、請求項17から83の何れかの装置。
【請求項85】
基材がカバー要素と直接接触していない、請求項17から84の何れかの装置。
【請求項86】
構造に隣接して位置している基材の一部が400nmから800nmの波長の範囲の電磁的放射に対して透過性であり、これにより、構造中での光学的検出を可能とする、請求項15から85の何れかの装置。
【請求項87】
標的分子の分析中における少なくとも2つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素の正確に1つにおいて行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から86の何れか一項の装置。
【請求項88】
複数の結合要素を含み、及び標的分子の分析中における少なくとも2つの固相カップリング手順が少なくとも1つの結合要素の2つ又はそれ以上において行われるように、少なくとも1つの結合要素が適合されている、請求項1から86の何れか一項の装置。
【請求項89】
溶解剤と及び標的分子と複合体を形成することができる捕捉プローブとを含む溶解構造を含み、
液体の1つ又はそれ以上の細胞、芽胞又はウイルスの内容物(該内容物は標的分子を含む。)が放出され、及び捕捉プローブと複合体を形成するように、溶解構造への液体の流れを調節するように調節ユニットが適合されている、請求項2から88の何れかの装置。
【請求項90】
複合体が構造中の少なくとも1つの結合部分に捕捉されるように、調節ユニットが、溶解構造から構造中への複合体の流体流を調節するように適合されている、請求項89の装置。
【請求項91】
構造と流体連通している廃棄チャンバーを含み、
少なくとも1つの結合要素に捕捉されていない構造中の成分が廃棄チャンバー中に輸送される様式で、調節ユニットが微小液体ネットワークを通じた流体流を調節するように適合されている、請求項90の装置。
【請求項92】
洗浄剤を含む洗浄構造を含み、
洗浄手順が構造中で行われるように、調節ユニットが洗浄構造から構造中への洗浄剤の流体流を調節するように適合されている、請求項91の装置。
【請求項93】
逆転写剤を含む逆転写構造を含み、逆転写手順が構造中で行われるように、調節ユニットが逆転写構造から構造中への逆転写剤の流体流を調節するように適合されている、請求項92の装置。
【請求項94】
増幅剤を含む増幅構造を含み、増幅構造中への構造からの液体の流体流を調節するように、及び増幅構造から構造へ戻る液体の及び増幅剤の流体流を調節するように調節ユニットが適合されている、請求項93に装置。
【請求項95】
増幅剤を使用することによって及び構造へ温度系列を適用することによって、構造中の増幅を調節するように調節ユニットが適合されている、請求項94の装置。
【請求項96】
少なくとも1つの結合要素に捕捉された、増幅された化合物の検出を調節するように調節ユニットが適合されている、請求項95の装置。
【請求項97】
標的分子が少なくとも1つの結合要素において捕捉されるように、微小流体ネットワークを通じた流体流を調節するように適合され、第二の構造中の標的分子の増幅を調節するように適合され、及び少なくとも1つの結合要素において捕捉された化合物の検出を調節するように適合された調節ユニットを含む、請求項1の装置。
【請求項98】
微小流体ネットワークを通じた液体流を調節するために、アクチュエータユニットを調節するように、調節ユニットが適合されている、請求項97の装置。
【請求項99】
液体を収容するように適合された構造を含み、該構造が第一の化合物を捕捉するように適合された第一の結合要素と並びに第一の化合物の存在及び/又は量に対する指標となる第二の化合物を捕捉するように適合された第二の結合要素とを含む、装置。
【請求項100】
(a)少なくとも1つの結合要素を含み及び微小流体ネットワークと流体連通している構造中に液体を収容すること、
(b)標的分子が少なくとも1つの結合要素において捕捉されるように、微小流体ネットワークを通じた流体流を調節すること、
(c)構造中の標的分子を増幅すること、及び
(d)標的分子の存在及び/又は量に対する指標となり、並びに少なくとも1つの結合要素に捕捉された化合物を検出すること、
を含む、方法。
【請求項101】
(a)それぞれ標的核酸と捕捉分子を含む複合体を形成させること(各捕捉分子は、標的核酸のある領域に対して特異的な結合部分とアンカー基を含む。)、
(b)複合体を結合要素と接触させること(結合要素は、複合体を結合要素に結合するための捕捉分子のアンカー基を結合するように構成されている。)、
(c)1つ又はそれ以上の標的核酸を増幅に供すること、
(d)結合要素に関して、増幅された標的核酸を捕捉すること、及び
(e)捕捉された標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる1つ又はそれ以上の値を測定すること、
を含む、方法。
【請求項102】
1つ又はそれ以上の標的核酸が一本鎖核酸である、請求項101の方法。
【請求項103】
工程(c)を実施する前に、標的核酸を逆転写に供することをさらに含む、請求項102の方法。
【請求項104】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させること、並びに工程(c)及び(d)を反復することをさらに含む、請求項101から103の何れかの方法。
【請求項105】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復するサイクルが少なくとも10回実施される、請求項104の方法。
【請求項106】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復するサイクルが少なくとも20回実施される、請求項105の方法。
【請求項107】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復する少なくとも1サイクルの後に、工程(e)が実施される、請求項104から106の何れかの方法。
【請求項108】
捕捉された、増幅された標的核酸を結合要素から放出させ、並びに工程(c)及び(d)を反復する各サイクルの後に、工程(e)が実施される、請求項107の方法。
【請求項109】
結合要素が標的核酸を捕捉することができる1つ又はそれ以上の捕捉分子を含み、及び標的核酸が1つ又はそれ以上の捕捉分子によって、結合要素に関し捕捉されている、請求項101から108の何れかの方法。
【請求項110】
工程(a)が工程(b)から空間的に隔てて行われる、請求項101から109の何れかの方法。
【請求項111】
結合要素が粒子を含む、請求項101から110の何れかの方法。
【請求項112】
工程(c)及び/又は(d)を実施する前に、1つ又はそれ以上の検出可能なマーカーを添加することによって、標的核酸を標識することをさらに含む、請求項101から111の何れかの方法。
【請求項113】
1つ又はそれ以上の検出可能なマーカーが蛍光マーカーである、請求項112の方法。
【請求項114】
工程(e)が、取得された1つ又はそれ以上の指標値の時間依存的モニタリングを含む、請求項101から113の何れかの方法。
【請求項115】
工程(a)を実施する前に、1つ又はそれ以上の標的核酸を提供することをさらに含む、請求項101から114の何れかの方法。
【請求項116】
1つ又はそれ以上の標的核酸を提供することが生物学的材料からの標的核酸を放出させることを含む、請求項115の方法。
【請求項117】
生物学的材料が1つ又はそれ以上の原核細胞、1つ又はそれ以上の真核細胞及び1つ又はそれ以上のウイルス粒子並びにこれらの混合物からなる群から選択される、請求項116の方法。
【請求項118】
生物学的材料から標的核酸を放出させることが生物学的材料を溶解試薬と接触させることを含む、請求項116又は117の方法。
【請求項119】
1つ又はそれ以上の標的核酸を提供することが、1つ又はそれ以上の標的核酸を含む試料を提供することを含み、試料が、全血、血漿、血清、尿、痰、唾液及び脳脊髄液からなる群から選択される、請求項115から118の何れかの方法。
【請求項120】
きょう雑材料から1つ又はそれ以上の標的核酸を分離することをさらに含む、請求項101から119の何れかの方法。
【請求項121】
標的核酸を提供することが工程(b)、(c)、(d)及び(e)から空間的に隔てて行われる、請求項116から120の何れかの方法。
【請求項122】
請求項1から99の何れかの装置中で行われる、請求項101から111の何れかの方法。
【請求項123】
装置が液体を収容するように適合された第一の構造を含み、及び工程(a)が第一の構造中で実施される、請求項122の方法。
【請求項124】
装置が液体を収容するように適合され、及び1つ又はそれ以上の標的核酸を検出するように構成された第二の構造を含み(第二の構造は第二の構造を覆うカバー要素を含む。)、及びカバー要素を変形するように作動されるように適合されたアクチュエータユニットを含み、並びに工程(e)が第二の構造中で行われる、請求項122又は123の方法。
【請求項125】
工程(c)及び/又は工程(d)が第二の構造中で行われる、請求項124の方法。
【請求項126】
工程(e)がカバー要素を変形させるように作動されるアクチュエータを用いて実施される、請求項124又は125の方法。
【請求項127】
第二の構造の容量が減少されるようにカバー要素が変形される、請求項126の方法。
【請求項128】
工程(e)を実施した後に、第二のウェルの容積が再度増加される、請求項127の方法。
【請求項129】
(a)レポーター化合物のある量;
捕捉分子のアンカー基を結合するように構成された第一の結合要素;
レポーター化合物を捕捉することができる第二の結合要素;
レポーター化合物と複合体を形成することができる標的核酸のある量(レポーター化合物との複合体の形成は第二の結合要素によるレポーター化合物の捕捉を阻害する。);及び
捕捉分子のある量(各捕捉分子は標的核酸のある領域に対して特異的な結合部分及びアンカー基を含む。)を提供すること;
(b)それぞれ標的核酸及び捕捉分子を含む複合体を形成すること;
(c)複合体を第一の結合要素に結合させるために、複合体を第一の結合要素と接触させること;
(d)第一の結合要素から標的核酸の量の少なくとも一部を放出させること;
(e)標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させること;
(f)第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;並びに
(e)第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること、
を含む、方法。
【請求項130】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値に基づいて、標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定することをさらに含む、請求項129の方法。
【請求項131】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定する工程の後に、第二の結合要素からレポーター化合物の量の残りの一部を放出させること;
標的核酸の量の少なくとも一部とレポーター化合物の量のサブセットの複合体を形成させること;
第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;並びに
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること
をさらに含む、請求項129又は130の方法。
【請求項132】
N回のさらなる回数(Nは、1より大きい又は1に等しい整数である。)、放出させる、複合体を形成させる、捕捉する及び測定する工程を実施することをさらに含む、請求項121の方法。
【請求項133】
N>5である、請求項132の方法。
【請求項134】
N>10である、請求項132の方法。
【請求項135】
N>20である、請求項132の方法。
【請求項136】
標的核酸の量の少なくとも一部とレポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程が同時に行われる、請求項129から135の何れかの方法。
【請求項137】
標的核酸を増幅に供することをさらに含む、請求項129から136の何れかの方法。
【請求項138】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の前に、標的核酸の増幅が開始される、請求項137の方法。
【請求項139】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体の形成及び第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部の捕捉が化学的平衡状態になる前に、第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項136から138の何れかの方法。
【請求項140】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成する工程及び第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程を開始してから1秒ないし120秒後に、第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項136から139の何れかの方法。
【請求項141】
レポーター化合物が1つ又はそれ以上の検出可能な標識を含む、請求項129から140の何れかの方法。
【請求項142】
1つ又はそれ以上の検出可能な標識が蛍光標識である、請求項141の方法。
【請求項143】
レポーター化合物がオリゴヌクレオチドである、請求項129から142の何れかの方法。
【請求項144】
標的核酸を増幅に供する前に、標的核酸を逆転写に供することをさらに含む、請求項137から143の何れかの方法。
【請求項145】
第二の結合要素が、第二の結合要素上にレポーター化合物を捕捉することができる1つ又はそれ以上の異なるレポーター特異的捕捉分子を含む、請求項129から144の何れかの方法。
【請求項146】
レポーター特異的捕捉分子がオリゴヌクレオチドである、請求項145の方法。
【請求項147】
異なるレポーター特異的捕捉分子が第二の結合要素に関して異なる位置上に配置されている、請求項145又は146の方法。
【請求項148】
レポーター特異的捕捉分子と複合体を形成することによって、レポーター化合物が第二の結合要素上に捕捉される、請求項145から147の何れかの方法。
【請求項149】
標的核酸と複合体を形成することが可能なレポーター化合物の相互作用部位の少なくとも一部がレポーター特異的捕捉分子と複合体を形成することもできる、請求項145から148の何れかの方法。
【請求項150】
レポーター特異的捕捉分子及び標的核酸がレポーター化合物との複合体の形成に関して競合する、請求項145から149の何れかの方法。
【請求項151】
増幅が二本鎖核酸を変性させる工程を含む、請求項137から150の何れかの方法。
【請求項152】
二本鎖核酸が標的核酸とのレポーター化合物の複合体、レポーター特異的捕捉分子とのレポーター化合物の複合体、レポーター化合物の二本鎖及び標的核酸の二本鎖を含む、請求項151の方法。
【請求項153】
増幅が標的核酸へプライマー分子を徐冷する工程を含む、請求項137から152の何れかの方法。
【請求項154】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び/又は第二の結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程と同時に徐冷工程が行われる、請求項153の方法。
【請求項155】
増幅が循環増幅である、請求項137から154の何れかの方法。
【請求項156】
循環増幅がPCRである、請求項155の方法。
【請求項157】
PCRを実施することがエキソヌクレアーゼ活性を有するポリメラーゼを使用することを含む、請求項156の方法。
【請求項158】
循環増幅が少なくとも10のサイクルを含む、請求項155から157の何れかの方法。
【請求項159】
循環増幅が少なくとも20のサイクルを含む、請求項155から158の何れかの方法。
【請求項160】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の少なくとも1サイクル後に測定される、請求項155から159の何れかの方法。
【請求項161】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の各サイクル後に測定される、請求項155から160の何れかの方法。
【請求項162】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定した後に毎回測定される、請求項155から161の何れかの方法。
【請求項163】
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値の測定が指標値の時間依存性モニタリングを含む、請求項129から163の何れかの方法。
【請求項164】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、レポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値と相関させる較正曲線に基づいて測定される、請求項130から163の何れかの方法。
【請求項165】
請求項1から99の何れかの装置中で行われる、請求項129から164の何れかの方法。
【請求項166】
装置が液体を収容するように適合された第一の構造を含み、及びそれぞれ標的核酸と捕捉分子を含む複合体を形成させる工程(各捕捉分子は標的核酸のある領域に対して特異的な結合部分とアンカー基を含む。)が第一の構造中で行われる、請求項165の方法。
【請求項167】
装置が液体を収容するように適合された第二の構造を含み、第一の結合要素及び必要に応じて第二の結合要素が第二の構造中に提供される、請求項165又は166の方法。
【請求項168】
試料が1μLから50μLの容積を有する流体試料である、請求項100から167の何れかの方法。
【請求項169】
試料が液体全血試料である、請求項100から168の何れかの方法。
【請求項170】
請求項100から169の何れかの方法を実施するように構成された請求項1から99の何れかの流体装置。
【請求項171】
−レポーター化合物のある量、
−レポーター化合物を捕捉することができる結合要素及び
−レポーター化合物と複合体を形成することができる標的核酸のある量(レポーター化合物との複合体の形成は結合要素によるレポーター化合物の捕捉を阻害する。)、
を含む組成物を形成すること;
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させること;
結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;並びに
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること
を含む方法。
【請求項172】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値に基づいて、標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定することをさらに含む、請求項171の方法。
【請求項173】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の後に、結合要素からレポーター化合物の量の残りの一部を放出させること、結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること、並びに結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定することをさらに含む、請求項171又は172の方法。
【請求項174】
N回のさらなる回数(Nは、1より大きい又は1に等しい整数である。)、放出、複合体の形成、捕捉及び測定の工程を実施することをさらに含む、請求項173の方法。
【請求項175】
N>5である、請求項174の方法。
【請求項176】
N>10である、請求項174の方法。
【請求項177】
N>20である、請求項174の方法。
【請求項178】
複合体を形成させる工程の前に、
結合要素上にレポーター化合物の量の少なくとも一部を捕捉すること;
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定すること;並びに
捕捉されたレポーター化合物を結合要素から放出させること
をさらに含む、請求項171から177の何れかの方法。
【請求項179】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程が同時に行われる、請求項171から178の何れかの方法。
【請求項180】
標的核酸を増幅に供することをさらに含む、請求項171から179の何れかの方法。
【請求項181】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の前に、標的核酸の増幅が開始される、請求項180の方法。
【請求項182】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体の形成及び結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部の捕捉が化学的平衡状態になる前に、結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項171から181の何れかの方法。
【請求項183】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成する工程及び結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程を開始してから1秒ないし120秒後に、結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が測定される、請求項171から182の何れかの方法。
【請求項184】
レポーター化合物が1つ又はそれ以上の検出可能な標識を含む、請求項171から183の何れかの方法。
【請求項185】
1つ又はそれ以上の検出可能な標識が蛍光標識である、請求項184の方法。
【請求項186】
レポーター化合物がオリゴヌクレオチドである、請求項171から185の何れかの方法。
【請求項187】
標的核酸を増幅に供する前に、標的核酸を逆転写に供することをさらに含む、請求項180から186の何れかの方法。
【請求項188】
組成物を形成することが、
−第一のレポーター化合物のある量と、
−第一のレポーター化合物と複合体を形成することができる第一の標的核酸のある量と(第一のレポーター化合物との複合体の形成は結合要素による第一のレポーター化合物の捕捉を阻害する。)、
−第二のレポーター化合物のある量と、及び
−第二のレポーター化合物と複合体を形成することができる第二の標的核酸のある量(第二のレポーター化合物との複合体の形成は結合要素による第二のレポーター化合物の捕捉を阻害する。)と
を含む組成物を形成することを含む、請求項171から187の何れかの方法。
【請求項189】
結合要素が、結合要素上にレポーター化合物を捕捉することができる1つ又はそれ以上の異なるレポーター捕捉分子を含む、請求項171から188の何れかの方法。
【請求項190】
捕捉分子がオリゴヌクレオチドである、請求項189の方法。
【請求項191】
異なる捕捉分子が結合要素に関して異なる位置上に配置されている、請求項189又は190の方法。
【請求項192】
捕捉分子と複合体を形成することによって、レポーター化合物が結合要素上に捕捉される、請求項189から191の何れかの方法。
【請求項193】
標的核酸と複合体を形成することが可能なレポーター化合物の相互作用部位の少なくとも一部が捕捉分子と複合体を形成することもできる、請求項189から192の何れかの方法。
【請求項194】
捕捉分子及び標的核酸がレポーター化合物との複合体の形成に関して競合する、請求項189から193の何れかの方法。
【請求項195】
増幅が二本鎖核酸を変性させる工程を含む、請求項180から194の何れかの方法。
【請求項196】
二本鎖核酸が標的核酸とのレポーター化合物の複合体、捕捉分子とのレポーター化合物の複合体、レポーター化合物の二本鎖及び標的核酸の二本鎖を含む、請求項195の方法。
【請求項197】
増幅が標的核酸へプライマー分子を徐冷する工程を含む、請求項180から196の何れかの方法。
【請求項198】
標的核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程及び/又は結合要素上の、標的核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉する工程と同時に徐冷工程が行われる、請求項197の方法。
【請求項199】
増幅が循環増幅である、請求項180から198の何れかの方法。
【請求項200】
循環増幅がPCRである、請求項199の方法。
【請求項201】
PCRを実施することがエキソヌクレアーゼ活性を有するポリメラーゼを使用すること含む、請求項200の方法。
【請求項202】
循環増幅が少なくとも10のサイクルを含む、請求項199から201の何れかの方法。
【請求項203】
循環増幅が少なくとも20のサイクルを含む、請求項199から202の何れかの方法。
【請求項204】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の少なくとも1つのサイクル後に測定される、請求項199から203の何れかの方法。
【請求項205】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値が循環増幅の各サイクル後に測定される、請求項199から204の何れかの方法。
【請求項206】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を測定した後に毎回測定される、請求項199から205の何れかの方法。
【請求項207】
結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値の測定が指標となる値の時間依存性モニタリングを含む、請求項171から206の何れかの方法。
【請求項208】
標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値が、レポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標となる値を標的核酸の存在及び/又は量に対する指標となる値と相関させる較正曲線に基づいて測定される、請求項172から207の何れかの方法。
【請求項209】
バイオセンサーアッセイ装置、微小流体カートリッジ及びラブ・オン・チップ(lab on chip)からなる群から選択される装置中で実施される、請求項171から208の何れかの方法。
【請求項210】
流体状態の試料を収容するように適合された装置中に流体全血試料を導入すること;並びに
装置中で行われた分析に基づいて、全血試料中のウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値を測定すること;
を含む、方法。
【請求項211】
測定された値がウイルス感染と関連する全核酸の存在及び/又は量の指標である、請求項210の方法。
【請求項212】
流体全血試料の容量が1μlから50μlである、請求項210又は211の方法。
【請求項213】
流体全血試料が患者の指先の穿刺から得られる、請求項210から212の何れかの方法。
【請求項214】
血液を指先と接触させながら、指先での穿刺から得られた血液を毛細管と接触させることをさらに含む、請求項213の方法。
【請求項215】
毛細管と血液を接触させた後に、毛細管を装置に接続することをさらに含む、請求項214の方法。
【請求項216】
1μlから50μlの容量を有する流体試料を準備すること;並びに
流体試料中のウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値を測定すること;
を含む方法
【請求項217】
流体状態の試料を収容するように適合された装置中に、流体試料を導入すること;並びに
装置中で行われた分析に基づいて、流体試料中のウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値を測定することをさらに含む、請求項216の方法。
【請求項218】
流体試料が全血試料である、請求項216又は217の方法。
【請求項219】
全血試料が処理されていない全血試料である、請求項218の方法。
【請求項220】
ウイルス感染と関連する核酸の存在及び/又は量の指標となる値に基づいて、感染された患者中のウイルス負荷量の指標となる値を測定することをさらに含む、請求項210から219の何れかの方法。
【請求項221】
流体試料の容量が1μlから10μlである、請求項210から220の何れかの方法。
【請求項222】
ウイルス感染がHIVでの感染である、請求項210から221の何れかの方法。
【請求項223】
装置が微小流体装置である、請求項210から215及び217から222の方法。
【請求項224】
装置が流体試料中の核酸を検出するためにさらに適合されている、請求項210から215及び217から223の方法。
【請求項225】
装置中で行われる分析が試料から核酸を放出させることをさらに含む、請求項210から215及び217から224の方法。
【請求項226】
放出の工程が流体試料を溶解試薬と接触させることを含む、請求項225の方法。
【請求項227】
装置中で行われる分析が複合体を形成させることをさらに含み、各複合体がウイルス感染と関連する核酸及び捕捉分子を含み、各捕捉分子がアンカー基及びウイルス感染と関連する核酸の領域に対して特異的な結合部分を含む、請求項210から215及び217から226の何れかの方法。
【請求項228】
装置中で行われる分析が複合体を装置の第一の結合要素と接触させることをさらに含み、複合体を第一の結合要素に結合するために、第一の結合要素が捕捉分子のアンカー基本を結合するように構成されている、請求項227の方法。
【請求項229】
ウイルス感染と関連する核酸との捕捉分子の複合体を形成させる工程が、複合体を第一の結合要素と接触させる工程から空間的に分離されて行われる、請求項227又は228の方法。
【請求項230】
装置中で行われる分析がウイルス感染と関連する核酸を増幅することをさらに含む、請求項210から215及び217から229の方法。
【請求項231】
核酸がPCRによって増幅される、請求項230の方法。
【請求項232】
装置中で行われる分析が、第一の結合要素に関して、増幅された核酸を捕捉することをさらに含む、請求項230又は231の方法。
【請求項233】
ウイルス感染と関連する核酸と複合体を形成することができるレポーター化合物の一定量及びレポーター化合物を捕捉することができる第二の結合要素を準備することをさらに含み、レポーター化合物の核酸との複合体の形成が第二の結合要素によるレポーター化合物の捕捉を阻害する、請求項227から232の方法。
【請求項234】
ウイルス感染と関連する核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させること;
第二の結合要素上の、ウイルス感染と関連する核酸と複合体を形成していないレポーター化合物の量の残りの一部を捕捉すること;
第二の結合要素上に捕捉されたレポーター化合物の存在及び/又は量に対する指標と値を測定すること;並びに、必要に応じて、
レポーター化合物の量に対する指標となる値に基づいて、ウイルス感染と関連する核酸の量の指標となる1つ又はそれ以上の値を測定すること;
をさらに含む、請求項233の方法。
【請求項235】
ウイルス感染と関連する核酸を増幅に供することをさらに含み、核酸の量の少なくとも一部との、レポーター化合物の量の一部の複合体を形成させる工程の前に、核酸の増幅が開始される、請求項234の方法。
【請求項236】
装置が、バイオセンサーアッセイ装置、微小流体カートリッジ及びラブ−オン−チップからなる群から選択される装置である、請求項210から215及び217から235の何れかの方法。
【請求項237】
HIVを検出するための及び/又は患者中のHIV負荷量を測定するための、請求項210から236の方法の使用。
【請求項238】
診断マーカーとしての、全ウイルス核酸の量の使用。
【請求項239】
全ウイルス核酸の量が請求項210から236の何れかの方法によって測定される、請求項238の使用。
【請求項240】
ウイルス核酸がHIV核酸である、請求項238又は239の使用。
【請求項241】
全HIV核酸の量が、HIVを検出し、患者中のHIV負荷量を測定し、HIVに感染した患者中での疾病の進行をモニタリングし、及び/又はHIVに感染した患者の抗ウイルス治療の効率性をモニタリングするための指標である、請求項240の使用。
【請求項242】
全HIV核酸の量が遊離のウイルス及び細胞随伴ウイルスに由来する核酸を含む、請求項240又は241の使用。
【請求項243】
遊離のウイルス及び細胞随伴ウイルスに由来する核酸が遊離のウイルスに由来するRNA、細胞に随伴したウイルスに由来するRNA、プロウイルスDNA、逆転写されたウイルスDNA及び転写されたプロウイルスRNAを含む、請求項242の使用。
【図1a】
【図1b】
【図1c】
【図1d】
【図1e】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17a】
【図17b】
【図17c】
【図17d】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26A】
【図26B】
【図26C】
【図26D】
【図27A】
【図27B】
【図28A】
【図28B】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【図1b】
【図1c】
【図1d】
【図1e】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17a】
【図17b】
【図17c】
【図17d】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26A】
【図26B】
【図26C】
【図26D】
【図27A】
【図27B】
【図28A】
【図28B】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【公表番号】特表2010−534328(P2010−534328A)
【公表日】平成22年11月4日(2010.11.4)
【国際特許分類】
【出願番号】特願2010−517401(P2010−517401)
【出願日】平成20年7月23日(2008.7.23)
【国際出願番号】PCT/EP2008/059670
【国際公開番号】WO2009/013321
【国際公開日】平成21年1月29日(2009.1.29)
【出願人】(508135149)クロンデイアグ・ゲーエムベーハー (5)
【Fターム(参考)】
【公表日】平成22年11月4日(2010.11.4)
【国際特許分類】
【出願日】平成20年7月23日(2008.7.23)
【国際出願番号】PCT/EP2008/059670
【国際公開番号】WO2009/013321
【国際公開日】平成21年1月29日(2009.1.29)
【出願人】(508135149)クロンデイアグ・ゲーエムベーハー (5)
【Fターム(参考)】
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