イロペリドンの投与方法
本発明は、イロペリドンによる治療の後、ＱＴ延長の危険性に関連し得る遺伝子多型の同定方法、及びこのような多型を有する患者にイロペリドンを投与する関連方法に関する。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２００４年９月３０日出願された米国特許仮出願第６０／６１４７９８号の特典を請求する、２００７年３月２８日に出願され同時に係属している米国特許出願第１１／５７６１７８号の一部継続出願である、２００８年９月１０日に出願され、同時に係属している米国特許出願第１２／２０８０２７号の特典を請求するものであり、これらすべてによって、本明細書に援用される。
【０００２】
薬剤代謝に関連するいくつかの遺伝子は多形であることが発見されてきた。その結果、特定の薬剤を代謝する患者の個々の能力は、大きく異なる可能性がある。非代謝性薬剤又はその代謝物の濃度増加が、望ましくない生理学的効果を引き起こし得る場合には、これは明らかに問題であり、危険をはらんでいる。
【０００３】
２２番染色体に位置するチトクロームＰ４５０ ２Ｄ６遺伝子（ＣＹＰ２Ｄ６）は、第Ｉ相薬剤代謝酵素デブリソキン水酸化酵素をコードする。多くの総中枢神経系薬及び心臓血管薬を含む多数の薬剤は、デブリソキン水酸化酵素によって代謝されることが知られている。このような１薬剤は、イロペリドン（１−［４−［３−［４−（６−フルオロ−１，２−ベンズイソオキサゾール−３−イル）−１−ピペリジニル］プロポキシ］−３−メトキシフェニル］エタノン）である。イロペリドン及びその製造方法、並びに抗精神病薬及び鎮痛薬としての使用は、Ｓｔｒｕｐｃｚｅｗｓｋｉ他の米国特許第５３６４８６６号に記載されている。イロペリドンの投与によって治療することができる疾患及び障害には、統合失調症の全形態（すなわち、妄想型、緊張性、破瓜型、未分化型及び残部）、分裂情動性障害、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、短期精神障害、妄想障害、精神障害ＮＯＳ（不特定）、一般的病状による精神障害、統合失調症様障害及び物質誘導性精神障害が含まれる。Ｐ８８は、イロペリドンの活性型代謝物である。本明細書に参考として援用した国際公開第２００３／０２０７０７号パンフレットを参照すること。
【０００４】
とりわけ、イロペリドン又はその代謝物の濃度増加に関連した望ましくない生理学的効果は、心電図のＱＴ間隔の延長である。ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子中の変異は、いくつかの薬剤耐性関連表現型と関連している。これらには、超高速代謝型（ＵＭ）、迅速代謝型（ＥＭ）、中等度代謝型（ＩＭ）及び代謝欠損型（ＰＭ）の表現型が含まれる。特定の薬剤が代謝型又は非代謝型で望ましくない生理学的効果を生じ得る場合、投与前に患者がその薬剤の代謝欠損型であるかどうかを決定することが望ましい。
【０００５】
いくつかの参考文献では、ＣＹＰ２Ｄ６変異及び対応する表現型の同定を目標としている。例えば、Ｍｉｌｏｓ他の米国特許出願公開第２００３／００８３４８５号は、ＰＭ表現型に関連した新規ＣＹＰ２Ｄ６変種及び薬剤投与前に個体がこの変種を有するかどうかを評価する方法について記載している。Ｄａｗｓｏｎの米国特許出願公開第２００４／００７２２３５号は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の変種を同定するために有用なプライマーの組合せを記載している。同様に、Ｈｕａｎｇの米国特許出願公開第２００４／００９１９０９号は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子及びその他のチトクロームＰ４５０遺伝子における変種について個体をスクリーニングし、個体の表現型プロファイルによって個体の薬剤治療を調節する方法を記載している。最後に、Ｎｅｖｉｌｌｅ他の米国特許出願第２００４／００９６８７４号は、チトクロームＰ４５０変種を同定するための方法を記載している。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、ＣＹＰ２Ｄ６活性が正常人より低い患者の治療は、ＱＴ延長の原因となりやすく、ＣＹＰ２Ｄ６酵素によって代謝される薬剤によって、正常ＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する人に投与するよりも低い用量の薬剤を投与することによって、より安全に実施することができるという発見を含む。このような薬剤には、例えば、ドラセトロン、パロキセチン、ベンラファキシン及びイロペリドンが含まれる。ＣＰＹ２Ｄ６活性が正常より低い患者は、本明細書では、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型と称する。
【０００７】
本発明はまた、ＣＹＰ２Ｄ６酵素によって代謝される化合物、特にイロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩（例えば、それらの溶媒化合物、多形、水和物及び立体異性体）によって治療した後、ＱＴ延長の危険性に関連する可能性がある遺伝子多形の同定方法、並びにこのような多形を有する個体にこれらの化合物を投与する関連方法に関する。
【０００８】
本発明は、イロペリドン又はその代謝物の濃度増加に対応するＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座内の遺伝子多型と、基準値とを比較した修正ＱＴ（Ｑｔｃ）間隔に対するこのような濃度増加の効果との間の関係を説明する。ＱＴｃを計算するために、例えば、特にＦｒｉｄｅｒｉｃｉａ式（ＱＴｃＦ）及びＢａｚｅｔｔ式（ＱＴｃＢ）を含む様々な式を使用することができる。本発明は、このような式又はＱＴｃを計算するための方法を含む。
【０００９】
本発明の第１の態様は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を決定するステップと、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型である患者にはＣＹＰ２Ｄ６迅速代謝型である患者よりも低い用量を投与するように、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に基づいて、有効量のイロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩を患者に投与するステップとを含む、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩による患者の治療方法を提供する。
【００１０】
本発明の他の態様は、患者にＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型ではない個体に投与するよりも低い投与量を投与する、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩によるＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型である患者の治療方法を提供する。
【００１１】
本発明の他の態様は、患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されているかどうかを決定するステップと、患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されている場合、薬剤の投与量を減少させるステップとを含む、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩による患者の治療方法を提供する。
【００１２】
本発明の他の態様は、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩のある量を患者に投与するステップと、患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第１濃度を決定するステップと、少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を患者に投与するステップと、患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第２濃度を決定するステップと、第１及び第２濃度を比較するステップとを含む、患者のＣＹＰ２Ｄ６表現型の決定方法を提供する。
【００１３】
本発明の他の態様は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型又はＣＹＰ２Ｄ６表現型のいずれかを決定することによって患者のＣＹＰ２Ｄ６代謝状態を決定するステップを含む、患者がイロペリドン投与によってＱＴｃ間隔延長の危険性があるかどうかを決定する方法を提供する。患者にＱＴｃ間隔延長の危険性があることが決定された場合、この患者に投与するイロペリドンの投与量は削減することができる。
【００１４】
本発明の他の態様は、野生型ＣＹＰ２Ｄ６酵素の活性と比較してイロペリドン及びその代謝物の少なくとも１種に対する患者のＣＹＰ２Ｄ６酵素の活性を測定するステップと、患者のＣＹＰ２Ｄ６酵素活性が野生型ＣＹＰ２Ｄ６の活性よりも低い場合、イロペリドン及びその薬剤として許容される塩の少なくとも１種の用量を減少させるステップとを含む、ヒト患者における疾患又は障害を治療するために、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩を投与する方法を提供する。
【００１５】
本発明の他の態様は、イロペリドン又はＰ８８で治療した患者の、特にＱＴ延長又はＱＴ延長に関連した有害な作用を起こしやすい患者の血液試料中のＰ８８：Ｐ９５比及び／又は（Ｐ８８＋イロペリドン）：Ｐ９５比に基づいて、イロペリドン又はそれらの薬剤として許容される塩の用量及び／又は投与頻度の変更に関する。
【００１６】
本発明の他の態様は、検出装置、サンプリング装置及びキットを使用するための指示書を含む、個体のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型の測定に使用するためのキットを提供する。
【００１７】
本発明の他の態様は、検出装置、収集装置及びキットを使用するための指示書を含む、個体のＣＹＰ２Ｄ６表現型の測定に使用するためのキットを提供する。
【００１８】
本発明の他の態様は、検出装置、収集装置及びキットを使用するための指示書を含む、個体におけるＰ９５に対するＰ８８の比並びにＰ９５に対するＰ８８及びイロペリドンの比の少なくとも１種の測定に使用するためのキットを提供する。
【００１９】
本発明のさらに他の態様は、イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む医薬組成物を商品化するための方法であって、患者に投与する用量を決定する前に患者がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるかどうかを決定するために指示書に従って投与したとき、この組成物がヒトを治療するのに有効であることを示すデータを、規制当局に提出することによってこの組成物の当局承認を得ること、及びこのような組成物のこのような形態での使用に関する情報を処方者又は患者又はその両者に広めることを含む方法を提供する。
【００２０】
本発明の前記及びその他の特性は、本発明の実施形態の以下のより具体的な説明から明らかであろう。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
イロペリドンは、ベンズイソオキサゾール−ピペリジニル誘導体であり、近年ＣＮＳ障害の治療のために開発されている。イロペリドンのプラセボ対照第ＩＩＩ相試験のデータは、終点のシングルＥＣＧに対して基準のシングルＥＣＧを比較したとき、４〜２４ｍｇの用量においてＱＴ間隔（ＱＴｃＦ）のＦｒｉｅｒｉｃｉａ修正が０．１ｍｓｅｃから８．５ｍｓｅｃに増加することを示した。イロペリドン低用量（４ｍｇ〜１６ｍｇ）では、ＱＴｃＦ延長は最小限であった（０．１〜５ｍｇ）。ごく最近の研究では、より高い用量（２０〜２４ｍｇ／日）のイロペリドンについて研究したとき、より長い延長が認められた。この研究では、２０〜２４ｍｇ／日の用量でのＱＴｃＦの平均変化は８．５ｍｓｅｃであり、１２〜１６ｍｇ／日の用量範囲では４．６ｍｓｅｃであった。これらのデータは、イロペリドンによる治療は、この種のその他の薬剤と同様にＱＴ間隔の延長に関連することができ、その効果は臨床用量範囲内において用量感受性であり得ることを示唆している。
【００２２】
本発明につながる研究は、注意深く制御した条件下で、ジプラシドン及びクエチアピンのＱＴｃ間隔に対する効果と比較してイロペリドンの様々な用量の効果を試験するために設計された。イロペリドンへの曝露と対照薬への曝露との間にあり得る関係をＱＴｃ間隔に対してさらに評価するために、定常状態条件下で、各薬剤の主要な代謝経路を薬理学的に阻害した後に再評価することも計画した。
【００２３】
実施例１
薬理遺伝学的分析用の血液試料をスクリーニング時に収集した。代謝欠損状態に既に関連のある２種の多形性はＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座中に同定され、２５１個の遺伝子型が収集された。個々の遺伝子型を、遺伝子型の種類とイロペリドン及びその代謝物Ｐ８８及びＰ９５濃度との間の関係の検出のために研究した。多形の機能的効果はまた、親薬剤及びその代謝物の濃度に対するＣＹＰ２Ｄ６阻害剤パロキセチンの添加の効果を分析することによって評価された。
【００２４】
本発明につながる研究は、阻害剤を添加する前にＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型とＰ８８の濃度との間の有意な関係並びにＱＴｃ延長に対するこの関係の効果を同定した。
【００２５】
イロペリドンは、２種のＰ４５０酵素、ＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ３Ａ４の基質である。イロペリドンの代謝クリアランスのほとんどはこれら２種の酵素に左右される。ＣＹＰ２Ｄ６は、代謝物Ｐ９４を形成するために付属のアセチル基の加水分解を触媒し、代謝物Ｐ９４はさらにいくつかの反応の後にＰ９５に変換される。イロペリドンと共にＣＹＰ２Ｄ６阻害剤フルオキセチンを添加すると、曲線下面積（ＡＵＣ）の増加が生じ、イロペリドンでは１３１％で、Ｐ８８では１１９％であった。相互作用研究においてＣＹＰ３Ａ４阻害剤ケトコナゾールを添加すると、イロペリドン並びにその主要な代謝物Ｐ８８及びＰ９５の濃度の３８〜５８％の増加が生じた。Ｐ８８は、イロペリドンと同様の、ＨＥＲＧチャンネルに対する親和性を含めた薬理学的プロファイルを有する。Ｐ９５は、ＨＥＦＧチャンネルに対する親和性が非常に低いことを含めて、イロペリドンと比較して親脂質性が低く、結合プロファイルが異なる。これらの理由のため、Ｐ９５は薬理学的に不活性であると見なされる。
【００２６】
したがって、この研究において代謝阻害剤を添加すると、イロペリドン及び／又はその代謝物の血中濃度増加のＱＴ間隔に対する効果の評価が可能であった。より具体的には、この研究は、ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤、パロキセチン添加前後及びＣＹＰ３Ａ４阻害剤、ケトコナゾールの添加前後のイロペリドンのＱＴｃに対する効果の評価が可能であった。
【００２７】
ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子は、多形性が高く、今までに７０個を上回る対立遺伝子変種が記載されている。例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｍ．ｋｉ．ｓｅ／ＣＹＰａｌｌｅｌｅｓ／ＣＹＰ２Ｄ６．ｈｔｍを参照のこと。本発明のほとんどの実施形態は、コーカサス人種のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子内の最も一般的な２種の多形、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ及びＣＹＰ２Ｄ６Ｐ３４Ｓ（ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１１０Ｔとも称する）に関する。これらの多形は、ジーンバンク配列Ｍ３３２８８．１（ＧＩ：１８１３０３）のヌクレオチド３４６５及び１７１９それぞれに対応する。ＣＹＰ２Ｄ６Ｐ３４Ｓ／ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ多形はまた、ジーンバンクｍＲＮＡ配列Ｍ２０４０３．１（ＧＩ：１８１３４９）のヌクレオチド１００に対応する。
【００２８】
ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ多形（ＣＰＹＰ２Ｄ６＊４対立遺伝子として知られる、＊４Ａ、＊４Ｂ、＊４Ｃ、＊４Ｄ、＊４Ｅ、＊４Ｆ、＊４Ｇ、＊４Ｈ、＊４Ｊ、＊４Ｋ及び＊４Ｌを包含する）は、イントロン３とエキソン４の間の接合部のＧからＡへの遷移を表し、１塩基対によってスプライス部位を移動させ、フレームシフト及び蛋白質の中途終止を引き起こす（Ｋａｇｉｍｏｔｏ １９９０、Ｇｏｕｇｈ １９９０、Ｈａｎｉｏｋａ １９９０）。ＣＹＰ２Ｄ６Ｐ３４Ｓ／ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ多形（ＣＹＰ２Ｄ６＊１０及びＣＹＰ２Ｄ６＊１４対立遺伝子として知られている）は、３４位のプロリンのセリンによる置換を生じるＣからＴへの変化を表す（Ｙｏｋｏｔａ １９９３、Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ １９９４）。これらの多形はいずれも、異なる基質に対する酵素活性の減少に関連してきた（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ １９９４、Ｄａｈｌ １９９５、Ｊａａｎｓｏｎ ２００２、Ｂｅｒｔｉｌｓｓｏｎ ２００２の総説も参照のこと）。
【００２９】
方法
Ａ．試料
１２８人の個体が薬理遺伝学研究に同意した。薬理遺伝学プロトコールに従い、患者の同意を得た後、血液試料を採取した。ＤＮＡは、ＣｏｖａｎｃｅによってＰＵＲＥＧＥＮＥ ＤＮＡ単離キット（Ｄ−５０Ｋ）を使用して全血から抽出された。
【００３０】
参加した１２８人の個体は、１６５人の個体の全試料を良く表しており、イロペリドン８ｍｇ群からは、１日２回投与群全体２９人のうちの２２人、イロペリドン１２ｍｇ群からは、１日２回投与群３４人のうちの３０人、イロペリドン２４ｍｇ群からは、１日１回投与群３１人のうちの２２人、リスペリドン群５人のうちの３人、ジプラジドン群３３人のうちの２８人、クエチアピン群３３人のうちの２３人が参加した。
【００３１】
Ｂ．遺伝子型同定
ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ多形の遺伝子型は、同意した個体１２８人のうち１２３人で確認され、ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ多形の遺伝子型は、参加者１２８人全体について確認された。遺伝子型同定は、増幅したＤＮＡ断片で実施された。ＣＹＰ２Ｄ６ゲノム領域は、ｔｒｉｐｌｅｘ ＰＣＲ法（Ｎｅｖｉｌｌｅ ２００２）を使用して増幅した。簡単に説明すると、使用したプライマーは：
エキソン１＆２ 2D6L1F1:CTGGGCTGGGAGCAGCCTC
2D6L1R1:CACTCGCTGGCCTGTTTCATGTC
エキソン３、４、５＆６ 2D6L2F:CTGGAATCCGGTGTCGAAGTGG
2D6L2R2:CTCGGCCCCTGCACTGTTTC
エキソン７、８＆９ 2D6L3F:GAGGCAAGAAGGAGTGTCAGGG
2D6L3R5B:AGTCCTGTGGTGAGGTGACGAGG
であった。
【００３２】
増幅は、ＧＣリッチＰＣＲキット（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｍａｎｎｈｅｉｍ、ドイツ）を使用して、製造元の推奨に従ってゲノムＤＮＡの４０〜１００ｎｇで実施した。熱還流条件は以下の通りである。最初の変性（９５℃、３分）、変性３０秒（９５℃、３０秒）、アニーリング（６６℃、３０秒）、伸長（７２℃、６０秒）を１０回、次いで、９５℃で３０秒、６６℃で３０秒、７２℃で６０秒＋５秒／回を２２回。最後の伸長は（７２℃で７分）で行った。
【００３３】
Ｔｈｉｒｄ Ｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）は、遺伝子型同定用プローブセットを開発した。遺伝子型同定は、Ｉｎｖａｄｅｒ（登録商標）測定法（Ｌｙａｍｉｃｈｅｖ １９９９）（Ｔｈｉｒｄ Ｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ）を使用して、製造元の推奨に従ってＰＣＲ産物で実施した。
【００３４】
３種のイロペリドン群に割り当てられた個体の遺伝子型には、有意な違いはなかった（表１Ａ及び１Ｂ）。
【表１】
【表２】
【００３５】
Ｃ．統計学的分析
期間１濃度に対する２種のＣＹＰ２Ｄ６多形の遺伝子型の効果は、以下のＡＮＯＶＡモデルを使用して評価した。親化合物又は代謝物が最大血中濃度に達したとき（Ｔｍａｘ）、期間１における阻害剤なしでのイロペリドン、Ｐ８８及びＰ９５の濃度を従属変数として使用し、種類及び治療のように各多形の遺伝子型は共変量として使用した。イロペリドンを１回投与した後、治療効果を調節するために、８ｍｇの１日２回投与を８と識別し、１２ｍｇの１日２回投与を１２と識別し、２４ｍｇの１日１回投与を２４と識別した。
【００３６】
ＣＹＰ２Ｄ６酵素の阻害程度に対するこれらの多形の関数は、ＣＹＰ２Ｄ６の阻害剤を添加した後、期間２におけるＰ８８及びＰ９５の濃度の比から計算した。イロペリドン及び／又はその代謝物（例えば、Ｐ８８及びＰ９５）の濃度は、滴定を含めた公知の、又は最近開発された方法もしくは装置によって、期間１及び／又は期間２において測定することができる。
【００３７】
結果及び考察
この酵素の活性に対する２種のＣＹＰ２Ｄ６多形の機能的違いを理解するために、様々な遺伝子型と代謝物Ｐ８８及びＰ９５の相対濃度との関係を調べた。Ｐ８８は、ＣＹＰ２Ｄ６によって分解され、ＣＹＰ２Ｄ６はＰ９５の合成に関係することが知られている。したがって、Ｐ８８及びＰ９５の相対量は、ＣＹＰ２Ｄ６酵素の活性によって調節されるだろう。期間１における阻害前、及び２種の代謝物のＴｍａｘ時のＰ８８／Ｐ９５の比、並びに期間２におけるＣＹＰ２Ｄ６阻害剤パロキセチン添加後のＰ８８／Ｐ９５の比を計算した。野生型酵素を有する個体では、Ｐ８８の濃度は期間２において増加するが、同期間においてＰ９５の濃度は減少することが予測される。
【００３８】
期間１では、イロペリドン治療患者９１人の平均Ｐ８８／Ｐ９５比は１．０に等しく、範囲は０．１４から８．１９であった。期間２における同個体の平均比は２．４で、範囲は０．５から８．４９であった。期間１／期間２比の平均比は０．３７に等しく、範囲は０．１１から２．７５であった。
【００３９】
遺伝子型を決定した患者では、この値は、期間１、期間２及び期間１／期間２それぞれの平均の１、２．４５及び０．３７と類似しており、試料の偏りはないことを示している。多形ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａでは、この平均は３種の遺伝子型、ＡＡ、ＡＧ及びＧＧの間で有意に異なっていた。ＡＡでは、それぞれの値は６．１、３．４１及び１．８９で、ＡＧでは、２．４、４．２及び０．５２で、ＧＧでは０．５７、１．９４及び０．２８であった（表２）。
【表３】
【００４０】
遺伝子型の種類の間の差は、ＡＮＯＶＡ試験でｐ＜０．０００１のレベルで有意であった。これらのデータは、期間１におけるＰ８８／Ｐ９５の比が高く、期間２における阻害剤添加の効果が比較的小さいことによって示されるように、ＡＡ型がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型を表すこと示唆している。ＡＧ型は、比の比によって示されるように、代謝欠損型と阻害剤添加後のＣＹＰ２Ｄ６活性が約２倍減少した野生型との間の中間表現型を示すようである（表２）。この分析は、イロペリドンの代謝物に関連するので、ＣＹＰ２Ｄ６１８４６Ａ多形の表現型特性を提供する。
【００４１】
この多形の機能的役割を確立して、各遺伝型の種類についてＰ８８のＴｍａｘ時の期間１におけるＰ８８の濃度を計算した。３種のイロペリドン投与群それぞれについて、Ｐ８８濃度は、ＧＧ型と比較すると、ＡＡ及びＡＧ型で有意に高かった（ｐ＜０．００５）（表３）。
【表４】
【００４２】
Ａ対立遺伝子を有する個体の数は限定されているが、この研究で得られた結果は一貫して、ＡＡ型及びＡＧ型の個体は、ＧＧ型の個体と比較してＴｍａｘ時により高いＰ８８濃度を経験することが予測されることを示している。同様の結果が、多形ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔで得られた（表４及び５）。
【表５】
【表６】
【００４３】
この多形は、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ多形とほとんど完全に連鎖不均衡である事実を考えると、この結果は予測される。
【００４４】
期間１のＴｍａｘでのＰ８８の濃度の差が阻害剤添加後のＱＴｃの延長に関係するかどうかを理解するために、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ ＡＧ群のＰ８８で観察された平均値を使用して、患者全体を２種類の群に分けた。最初の群は、両方の阻害剤を添加した後の期間３のＰ８８濃度が３４ｎｇ／ｍＬ以下である個体を含み、第２の群はＰ８８の濃度が３４ｎｇ／ｍＬを上回る個体を含む。次に、期間３の基準値からのＱＴｃ変化に関して２種の群を比較した。最初の群Ｐ８８＞３４（ｎ＝５５）のＡＮＯＶＡ統計値を使用すると、期間３の基準値からのＱＴｃ平均の変化は２２．７ｍｓｅｃであり、Ｐ８８≦３４（ｎ＝１２）を使用すると、同期間の平均ＱＴｃは７．７ｍｓｅｃであった。遺伝子型及びイロペリドン用量による期間１及び期間２の基準値からのＱＴｃ変化を表６及び７に挙げる。
【表７】
【表８】
【００４５】
しかし、これらの結果は、観察数が少ないので、注意深く調べなければならない。イロペリドン２４ｍｇの１日１回に注目するならば、ＧＧと比較して、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６ＡのＡＡ及びＡＧ患者のＱＴｃは高くなる傾向がある。この差は、期間２でＣＹＰ２Ｄ６阻害剤添加後では消失する。
【００４６】
これらの所見は、異なる遺伝子型群間の期間１におけるＰ８８濃度の違いは、基準値からのＱＴｃ変化に関係し得ることを示唆している。観察数が少なく、研究の遺伝子型設計が不均衡であるならば、このデータのさらなる解釈を許可する前に、前向き検証的研究が必要である可能性がある。
【００４７】
これらの警告にもかかわらず、前述した結果は、イロペリドンの用量をそれぞれの患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に基づいて調節するならば、イロペリドンによってより安全に患者を治療できることを示す。例えば、患者が野生型ＣＹＰ２Ｄ６と比較して、ＣＹＰ２Ｄ６蛋白質の活性減少を引き起こす遺伝子型を有する場合、このような患者に投与するイロペリドンの用量は、例えば、Ｐ８８に対して野生型ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型／蛋白質と同じ、又は実質的に同じ酵素活性を有するＣＹＰ２Ｄ６蛋白質を生じるＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を有する患者に一般的に投与する用量の７５％以下、５０％以下、２５％以下に削減させる。例えば、個体に投与するイロペリドン又はその他のＣＹＰ２Ｄ６代謝化合物の通常投与量が１日当たり２４ｍｇである場合、ＣＹＰ２Ｄ６活性減少に関連する遺伝子型を有する患者には、１日当たり１８、１２又は６ｍｇの少ない投与量を投与することができる。
【００４８】
ＣＹＰ２Ｄ６活性減少は、本明細書で参考として援用したｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｍ．ｋｉ．ｓｅ／ＣＹＰａｌｌｅｌｅｓ／ＣＹＰ２Ｄ６．ｈｔｍに記載されたものを含めたその他の変異の結果であることができる。特に、ＣＹＰ２Ｄ６＊２Ａ変異は、イントロン１におけるＣＹＰ２Ｄ７遺伝子変換を含む。場合によって、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型においてＣＹＰ２Ｄ６活性が低い原因は、遺伝子型以外の要素である可能性がある。例えば、患者がＣＹＰ２Ｄ６活性を減少させる薬剤などの薬剤による治療を受けている可能性がある。
【００４９】
ＱＴｃ延長は、Ｐ８８／Ｐ９５比及び（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に相関する。ＣＹＰ２Ｄ６迅速代謝型の平均比は、それぞれ０．５７及び１．００である。前記の表３及び５に示したように、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型は、ＣＹＰ２Ｄ６迅速代謝型と比較してＰ８８レベルが上昇した。
【００５０】
ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型は、集団の約１５％を含むので、研究した集団の約１５％ではＰ８８／Ｐ９５比が２．０を上回り、残りの８５％ではＰ８８／Ｐ９５比は２．０未満であった。以下の表８は、各投与量群のＱＴｃの最小二乗平均変化を示す。いくつかの群の結果は統計学的に有意ではないが、ＱＴｃ延長はＰ８８／Ｐ９５比に相関するという仮説を支持する傾向を示している。カットオフ比３．０及び４．０を分析したとき、同様の結果が得られたので、治療後に患者が経験する可能性があるＱＴｃ延長の範囲は、Ｐ８８及びＰ９５の血液レベルを測定することによって予測できるという仮説がさらに支持される。
【表９】
【００５１】
（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に対するＱＴｃの相関を考察したとき、同様の結果が得られた。また、集団の約１５％がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるため、研究した集団の約１５％では（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比は３．０を上回るが、残りの８５％は３．０未満を示すことが発見された。以下の表９は、各投与量群のＱＴｃの最小二乗平均変化を示す。いくつかの群の結果は統計学的に有意ではないが、ＱＴｃ延長は（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に相関するという仮説を支持する傾向を示している。実際に、カットオフ比３以上を分析したとき、同様の結果が得られたので、治療後に患者が経験する可能性があるＱＴｃ延長の範囲は、イロペリドン、Ｐ８８及びＰ９５の血液レベルを測定することによって予測できるという仮説がさらに支持される。
【表１０】
【００５２】
ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ（ＡＡ又はＡＧ）遺伝子型及びＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ（ＣＴ又はＴＴ）遺伝子型を実施例１で例示するが、本発明の方法は、イロペリドン及びＰ８８に対するＣＹＰ２Ｄ６蛋白質の活性減少をもたらすその他の遺伝子型を使用することができる。本明細書の開示に基づいて、イロペリドン及びＰ８８に対する酵素活性減少をもたらす他のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を同定することは当業者の範囲内である。
【００５３】
実施例２
第２の研究は、非機能性タンパク質の産生又は酵素活性の減少を引き起こす他のＣＹＰ２Ｄ６変種の遺伝子型を同定することによって、イロペリドン応答の薬理ゲノミクス評価を拡大した。
【００５４】
変種の６つは、（ＣＹＰ２Ｄ６＊５多形におけるような）遺伝子の欠失、フレームシフト（＊３及び＊６）、スプライシングエラー（＊４）、又は切断型もしくは異常型タンパク質（＊７及び＊８）のいずれかによって、機能的酵素の欠如を生じることが示された。デブリソキンもしくはスパルテインなどの種々の化合物に対する酵素活性の有意な減少を示すか（＊９、＊１０、＊１７、＊４１）、又は中程度の活性減少を示す（＊２）機能的タンパク質の産生を生じたその他５種類の多形の遺伝子型を同定した。酵素に対するこれらの個々の多形の実際の影響は化合物毎に異なり、同じタンパク質に多形がいくつか存在することによってさらにＣＹＰ２Ｄ６活性が減少し得る。
【００５５】
方法
Ａ．試料
ＣＹＰ２Ｄ６＊４及び＊１０変種（ＶＰ−ＶＹＶ−６８３−３１０１）の遺伝子型が最初に同定されたイロペリドン治療患者３００人の残存するＤＮＡ試料２２２個を使用して、このようなさらに詳しい薬理ゲノミクス分析を行った。１患者は、Ｑｕｅｓｔ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ、ＰＡ）及びＣｏｇｅｎｉｃｓ（Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ、ＮＣ）によって得られたＣＹＰ２Ｄ６＊４対立遺伝子とは矛盾した結果であったので分析から除外した。これらの患者の１６８人について（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比の薬物動態データが利用できた。１４日目及び２８日目のＱＴ測定値は、それぞれ１６９人及び１４６人の患者から入手できた。
【００５６】
Ｂ．遺伝子型同定
１１個の特定のＣＹＰ２Ｄ６多形を評価した（表１０）。
【表１１】
【００５７】
ＣＹＰ２Ｄ６＊１０対立遺伝子の遺伝子型はＱｕｅｓｔ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ、ＰＡ）によって得られ、ＣＹＰ２Ｄ６＊２、＊３、＊５、＊６、＊７、＊８、＊９、＊１７及び＊４１対立遺伝子の遺伝子型はＣｏｇｅｎｉｃｓ（Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ、ＮＣ）によって得られ、ＣＹＰ２Ｄ６＊４の対立遺伝子の遺伝子型はＱｕｅｓｔで得られ、一部の患者についてはＣｏｇｅｎｉｃｓからも得られた。
【００５８】
ＣＹＰ２Ｄ６＊２対立遺伝子は、一連の変異によって特徴付けられる。このアッセイでは、アミノ酸２９６のアルギニンからシステインへの置換を引き起こす２８５０位のシトシンからチミンへのトランジションを調べた（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ他、１９９３、Ｗａｎｇ他、１９９５）。ＣＹＰ２Ｄ６マルチプレックスＰＣＲによる最初の産物を増幅し、得られた産物をＨｈａＩで消化した。ＨｈａＩ消化によって、ｗｔ／ｗｔ遺伝子型では４７６、３７２、２４７、１７８及び８４塩基対断片が生じ、＊２／ｗｔ遺伝子型では５５０、４７６、３７２、２４７、１７８及び８４塩基対断片が生じ、＊２／＊２遺伝子型では５５０、４７６、２４７及び８４塩基対断片が生じた。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００５９】
ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子＊３、＊４、＊６、＊７及び＊８の存在は、マルチプレックスＰＣＲ（Ｓｔｕｖｅｎ他、１９９６）を使用してアッセイした。ＣＹＰ２Ｄ６＊３対立遺伝子は、エキソン５におけるヌクレオチド２５４９の１塩基（アデニン）欠失によって生じる（Ｂｕｃｈｅｒｔ他、１９９３）。ＣＹＰ２Ｄ６＊４対立遺伝子の欠損は、イントロン３における最後のヌクレオチド（１８４６位）のグアニンからアデニンへのトランジションによって異常な３’スプライシング認識部位が生じることによる（Ｈａｎｉｏｋａ他、１９９０）。ＣＹＰ２Ｄ６＊６対立遺伝子は、エキソン３における１７０７位のチミン欠失によって、未熟な終止コドンが生じることによって引き起こされる（Ｓａｘｅｎａ他、１９９４）。ＣＹＰ２Ｄ６＊７対立遺伝子は、２９３５位のアデニンからシトシンへのミスセンス変異によって生じ、エキソン６におけるアミノ酸３２４のヒスチジンからプロリンへの置換が引き起こされ、酵素機能の全欠如がもたらされる（Ｅｖｅｒｔ他、１９９４）。ＣＹＰ２Ｄ６＊８対立遺伝子の欠損は、１７５８位のグアニンからチミンへのトランジションによって未熟な終止コドンの挿入が生じることによる（Ｓｔｕｖｅｎ他、１９９６）。
【００６０】
最初の増幅によって、５種類の対立遺伝子全てを含有する１５７８塩基対の産物が生じた。１５７８塩基対の産物は、５種類の対立遺伝子を同時に同定するマルチプレックス対立遺伝子特異的アッセイの鋳型として役だった。最初のＰＣＲ鋳型を、野生型又は変異型対立遺伝子を認識するプライマーを含有する２種類の別個のマスターミックスに添加した。これらのプライマーは、＊７、＊３、＊４、＊８及び＊６対立遺伝子それぞれに対する１３９４、１０１０、３０４、２１９及び１６７塩基対のＰＣＲ産物を生じる。内部標準として、＊８のプライマーを逆にした。すなわち、＊８の野生型対立遺伝子を認識するプライマーを変異型マスターミックスに存在させ、＊８の変異型対立遺伝子のプライマーを野生型マスターミックスに存在させた。野生型遺伝子型では（＊８を除く）、ＰＣＲ産物は野生型の列に出現し、変異型の列にはＰＣＲ産物は認められなかった。ヘテロ接合体遺伝子型では、同じ大きさの断片のＰＣＲ産物は野生型及び変異型の列の両方に出現した。変異型遺伝子型では（＊８を除く）、ＰＣＲ産物は変異型の列にのみ出現した。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６１】
ＣＹＰ２Ｄ６＊５対立遺伝子は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の完全な欠失から生じる（Ｇａｅｄｉｇｋ他、１９９１、Ｓｔｅｅｎ他、１９９５）。ロングレンジ（ｌｏｎｇ−ｒａｎｇｅ）ＰＣＲ法を使用してＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座の欠失を同定した。ＰＣＲ産物の有無及び強度によって、野生型、ヘテロ接合体変異体又は変異型対立遺伝子を同定した。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６２】
ＣＹＰ２Ｄ６＊９変異は、２６１３〜２６１５位における３塩基対欠失である（Ｔｙｎｄａｌｅ他、１９９１）。これによってアミノ酸２８１のリシンの欠失が生じる。ＣＹＰ２Ｄ６＊４１変異は、２９８８位のグアニンからアデニンへのトランジションによる（Ｒａｉｍｕｎｄｏ他、２００４）。最初の増幅によって、２種類の対立遺伝子を含有する１５７８塩基対の産物が生じた。１５７８塩基対産物は、２種類の対立遺伝子を同時に同定するマルチプレックス対立遺伝子特異的アッセイの鋳型として役だった。最初のＰＣＲ鋳型を、野生型又は変異型対立遺伝子を認識するプライマーを含有する２種類の別個のマスターミックスに添加した。これらのプライマーは、＊９野生型、内部標準及び＊４１野生型それぞれに対する４０９、５９３及び７８０塩基対のＰＣＲ産物を生成した。野生型遺伝子型では、ＰＣＲ産物は野生型の列に出現し、変異型の列にはＰＣＲ産物は認められなかった。ヘテロ接合体遺伝子型では、ＰＣＲ産物は、野生型及び変異型の列の両方に出現した。変異型遺伝子型では、ＰＣＲ産物は変異型の列にのみ出現した。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６３】
ＣＹＰ２Ｄ６＊１７対立遺伝子は、１０２３位のシトシンからチミンへの塩基変化によって、エキソン２におけるアミノ酸１０７のトレオニンからイソロイシンへの置換が生じることによって引き起こされる（Ｍａｓｉｍｉｒｅｍｂｗａ他、１９９６）。最初の増幅によって、ＣＹＰ２Ｄ６＊１７対立遺伝子を含有する３６９塩基対の産物が生じた。最初のＰＣＲ鋳型を、野生型又は変異型対立遺伝子並びに内部標準を認識するプライマーを含有する２種類の別個のマスターミックスに添加した。これらのプライマーは、＊１７対立遺伝子及び内部標準それぞれに対する２３５及び１８１塩基対のＰＣＲ産物を生成した。野生型遺伝子型では、両ＰＣＲ産物は野生型の列に出現したが、変異型の列に認められたのは内部標準ＰＣＲ産物のみであった。ヘテロ接合体遺伝子型では、両ＰＣＲ産物が野生型及び変異型の両方の列に出現した。変異型遺伝子型では、両ＰＣＲ産物は変異型の列に出現し、内部標準ＰＣＲ産物のみは野生型の列に認められた。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６４】
Ｃ．統計学的分析
分析は、観察した症例データにおいて、ＱＴｃ（Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａ式）のベースラインからの変化については共変量として基準値を用いたＡＮＣＯＶＡモデルを使用して、１４日目及び２８日目のイロペリドン血液曝露についてはＡＮＯＶＡモデルを使用して実施した。連鎖不均衡分析は、Ｈａｐｌｏｖｉｅｗ ｖ４．０（Ｂａｒｒｅｔｔ他、２００５）を使用して実施した。
【００６５】
統計学的に有意な関連が、ＣＹＰ２Ｄ６＊４、ＣＹＰ２Ｄ６＊５、ＣＹＰ２Ｄ６＊１０及びＣＹＰ２Ｄ６＊４１対立遺伝子とイロペリドン血液曝露レベルとの間に認められた。薬剤濃度の比［（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５］は、非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子及び酵素活性減少に関連する可能性がある変種が存在すると増加した。さらに、少なくとも１種の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者は、２個の機能性コピーを有する患者よりもイロペリドン治療１４日後のＱＴｃ延長が長かった。２８日目までに、ＱＴｃＦ延長は減少したが、２種類の患者群にはまだ統計学的な差があった。
【００６６】
イロペリドン治療患者において遺伝子型が同定された１１種のＣＹＰ２Ｄ６変種を表１０に挙げ、人種毎のそれぞれの対立遺伝子頻度を表１１に挙げる。
【表１２】
【００６７】
６種類の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６変種、＊３、＊４、＊５、＊６、＊７及び＊８の遺伝子型を同定した。最も一般的な変種は＊４で、白人患者では１６．２％、黒人及びアフリカ系アメリカ人患者では１１．０％、アジア人患者では１２．０％に検出された。＊４変種は白人（約２０％）及びアフリカ系アメリカ人（７．５％）では最も一般的な非機能性ＣＹＰ２Ｄ６変種であり、一方アジア人では稀であると予測されることが以前に報告された（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。＊５変種は、人種群に応じて３〜６％の頻度で認められており、以前の報告（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）と矛盾していなかった。予測通りに、＊３、＊６、＊７は稀で、＊８はいずれの患者においても認められなかった。
【００６８】
ＣＹＰ２Ｄ６酵素活性減少に関与する４種類の変種の遺伝子型を同定した。＊１０はアジア人でよく認められ（３８〜７０％）、＊１７はアフリカ系アメリカ人の約２２％で報告されており、＊４１は白人では一般的と思われ（おそらく約２０％）、＊９は少数の個体でのみ認められた（１〜２％）（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。
【００６９】
＊１０変種は、全人種群のイロペリドン治療患者の１５〜２０％で認められた。＊１０は、白人及びアフリカ系アメリカ人では予測よりも高い頻度で生じていたが、アジア人での頻度は低かった。その他の研究は、アジア人では＊１０の割合が高い（３８％を上回る）が、白人（４〜８％）及びアフリカ系アメリカ人（２〜７％）ではずっと低い割合であることが報告された（Ｂｒａｄｆｏｒｄ、２００２）。＊１７変種は、黒人及びアフリカ系アメリカ人では最も一般的な変種で（１７．６％）、アジア人（５．９％）及び白人（１．１％）では非常に稀であり、この結果は、これらの集団で予測された頻度と一致している（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。
【００７０】
予測通り、＊４１変種は白人では最も一般的であったが（１１．２％）、アフリカ系アメリカ人では稀であった（１．４％）。この変種はその他の集団では詳細に研究されていないが、アジア人の８．８％にも認められた。
【００７１】
機能性＊２変種は、ＣＹＰ２Ｄ６タンパク質をコードする最も一般的に生じる変種であることが報告されたが、活性は少し減少していた（野生型の約８０％）（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。＊２変種は最も一般的に認められる変種で、人種群に応じて頻度は３２〜４４％であった。
【００７２】
ＣＹＰ２Ｄ６変種の頻度が高いので、何人かの個体は酵素活性の減少又は消失に関連した複数の対立遺伝子を有するようである。
【００７３】
この研究では２個の非機能性対立遺伝子を有する患者は７人のみ確認されており（３．１％）、６人がホモ接合体＊４／＊４で、１人が複合ヘテロ接合体＊５／＊４であった。７２人の患者（３２．１％）がＣＹＰ２Ｄ６の機能性コピーを１個のみ有していた。６１人の患者（２７．２％）がＣＹＰ２Ｄ６の機能性コピーを２個及び酵素活性が減少した可能性のある対立遺伝子変種を１個又は２個有していた。その他の８４人の患者（３７．５％）は、＊２変種のみを有しているか、又は各変種遺伝子座におけるホモ接合体ｗｔ／ｗｔであった。
【００７４】
連鎖不均衡（ＬＤ）分析によって、いくつかのＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座が完全な連鎖不均衡内に存在することが明らかになった。＊４変種は、＊１０（Ｄ’＝１、ＬＤ ４２．３３）及び＊２（Ｄ’＝１、ＬＤ ５．７５）のＬＤ内に存在した。＊２変種はまた、＊１７（Ｄ’＝１、ＬＤ １３．４４）、＊１０（Ｄ’＝１、ＬＤ ８．８９）及び＊４１（Ｄ’＝１、ＬＤ ５．４３）のＬＤ内に存在した。
【００７５】
イロペリドン血液曝露した個々のＣＹＰ２Ｄ６変種の分析によって、＊４及び＊１０変種は（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比と有意に関連しており、ｗｔの１．１０に対して＊４対立遺伝子の比は２．２８（ｐ＝２．８Ｅ−０８）、ｗｔの１．０３に対して＊１０対立遺伝子の比は２．２０であった（ｐ＝２．４Ｅ−０９）（表１２）。＊５及び＊４１変種にも有意な関連が認められ、ｗｔの１．１９に対して＊５対立遺伝子の比は２．１６（ｐ＝０．００１６）、ｗｔの１．１９に対して＊４１対立遺伝子の比は２．０２であった（ｐ＝０．００４５）（表１２）。
【表１３】
【００７６】
既に検討したように、複数のＣＹＰ２Ｄ６変種の存在はさらに、発現するＣＹＰ２Ｄ６の全体量及びその総酵素活性に影響を及ぼし得る。したがって、機能性及び非機能性対立遺伝子全ての存在並びに変種のいくつかに関連して予測される活性減少を考慮して、さらなる分析を実施した。活性減少に関連した対立遺伝子及び非機能性対立遺伝子の存在によって、（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比増加の明らかな勾配が認められた（表１３）。２個の非機能性対立遺伝子を有する患者は、（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比が６．４であることがわかり、これは非機能性対立遺伝子を１個だけ有する患者（１．８）、活性減少に関連した対立遺伝子を１個もしくは２個有する患者（１．１５）又は機能性対立遺伝子を２個有する患者（０．８０）よりずっと高かった（表１３）。
【表１４】
【００７７】
イロペリドン代謝の有意な減少が少なくとも１個の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者で認められたので、これらの患者ではまた、イロペリドン治療後にＱＴｃＦ延長が増加しているかどうかについても調べた（表１４）。治療１４日後に、少なくとも１個の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者は、ＱＴｃＦ間隔の延長（１６．３ｍｓｅｃ）が２個の機能性コピーを有する患者（９．７ｍｓｅｃ、ｐ＝０．０１）よりも有意に高かった。２８日目までに、ＱＴｃＦ延長は減少したが、２群間にはまだ統計学的に差があった（それぞれ１１．４及び４．４ｍｓｅｃ、ｐ＝０．０２）。
【表１５】
【００７８】
Ｄ．結果及び考察
特定のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に関係ない（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に基づく比較によって、１４日目のＱＴｃは、比が＞１の患者の１６．０ｍｓｅｃと比べて比が≦１の患者では７．９ｍｓｅｃ、ｐ＝０．０００２であることが明らかになった（表１５）。２８日目のＱＴｃＦは、比が≦の患者では４．８ｍｓｅｃ、＞１の患者では１０．１ｍｓｅｃに減少した。
【表１６】
【００７９】
２００人を上回るイロペリドン治療患者の複数のＣＹＰ２Ｄ６変種を遺伝子型同定することによって（表１１）、連鎖不均衡内にあるＣＹＰ２Ｄ６＊４及び＊１０対立遺伝子は白人（それぞれ１６．２％及び１７．１％）及びアジア人（それぞれ１２％及び２０％）において酵素活性減少又は消失に関連した最も一般的な対立遺伝子であることがわかった。黒人及びアフリカ系アメリカ人では、＊１７対立遺伝子が＊４及び＊１０対立遺伝子よりも一般的であった（１７．６％に対してそれぞれ１１％及び１４．７％）。＊５対立遺伝子の頻度は約５％で、その他の非機能性対立遺伝子は非常に稀であった。ＣＹＰ２Ｄ６変種の頻度データの最も詳細な分析は、ヨーロッパの白人集団、中国人及び日本人集団、又は選択されたアフリカ地域から得られた。現在では、ＵＳ集団における対立遺伝子頻度については数少ない研究しか報告されておらず、ヨーロッパの白人、アフリカ人、中国人又は日本人集団のデータとこの研究で認められた差のいくつかは、ＵＳ集団の地域的及び国家的特異性を反映しているようである。
【００８０】
＊４、＊１０、＊５及び＊４１対立遺伝子はＣＹＰ２Ｄ６イロペリドン代謝の減少、より詳細には、（イロペリドン＋８８）／９５比の増加に有意に関連していることが認められた（表１２）。試験した対立遺伝子全ての遺伝子型データを考慮すると、この比は非機能的対立遺伝子及び活性減少に関連した対立遺伝子の数に明らかに左右されることが示された（表１３）。
【００８１】
さらに、イロペリドン代謝の減少は、治療１４日後及び２８日後のＱＴｃＦ延長の増加に関連していた。少なくとも１個の機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者と２個の機能性対立遺伝子を有する患者の間には有意差が認められた（表１４）。この差は、特定のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に関係なく（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比が≦１又は＞１の患者の間にも認められた（表１５）。これらの結果は、ＱＴｃＦ延長の可能性が患者に危険であると考えられるならば、イロペリドンで患者を治療するときに医師にとって期待されるリスクマネージメント戦略及び有望な試験手段となる。
【００８２】
前記で説明したように、イロペリドンの最適用量を決定するための出発点は、イロペリドン及びＰ８８に対して野生型ＣＹＰ２Ｄ６タンパク質と同様の活性を有するタンパク質を生じるＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を有する患者において、許容される安全性及び有効性が示された用量である。このような用量は当業界で公知であり、例えば、前記の米国特許第５，３６４，８６６号に開示されている。
【００８３】
一般的に、患者に投与するイロペリドンの用量は、前記のように、イロペリドン及びＰ８８に対するＣＹＰ２Ｄ６酵素の酵素的活性が野生型ＣＹＰ２Ｄ６の活性の約７５％未満である場合、減少するだろう。酵素活性は、例えば、個体の血液中のイロペリドン及び／又はＰ８８のレベルの測定を含む様々な方法によって測定することができる。このような場合、イロペリドン用量は、イロペリドン及び／又はＰ８８の測定レベルが正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体の血液中で測定されたレベルと実質的に同じであるように減少させることができる。例えば、患者のＣＹＰ２Ｄ６酵素活性が、１種又は複数の方法（例えば、遺伝子型同定、デキストロモルファン（ｄｅｘｔｒｏｍｏｒｐｈａｎ）血中レベルの測定）によって、正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体で通常観察される酵素活性の５０％であると評価された場合、この患者への投与量は、正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体に投与する用量の半分に調節する必要があり得る。同様に、超高速代謝型の場合、類似の計算によって、親化合物及び活性代謝物との類似の血中レベルを実現するために、正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体に投与する量の２倍に投与量を調節する必要があり得るという結論が導かれる。
【００８４】
あるいは、患者に投与するイロペリドンの投与量は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型のみに基づいて、又は患者のＰ８８：Ｐ９５もしくは（イロペリドン＋Ｐ８８）：Ｐ９５比に基づいて減少させることができる。例えば、患者が「代謝欠損者」の遺伝子型を有する場合、又は高いＰ８８：Ｐ９５比もしくは（イロペリドン＋Ｐ８８）：Ｐ９５比を有する場合、イロペリドンの患者投与量は、例えば、２５％、５０％又は７５％減少させることができる。患者の遺伝子型は、体液又は組織の試料に対して標準的技術を使用して容易に測定することができる。このような技術は、例えば、ＰＣＴ出願公開番号第３０５４２２６号パンフレットに開示されている。
【００８５】
さらに、本明細書の開示は遺伝子型に注目したが、当業者であれば、表現型は、イロペリドン及びＰ８８に対するＣＹＰ２Ｄ６蛋白質の活性減少の指標としても使用できることは明らかであろう。例えば、ＭｃＥｌｒｏｙらは、デキトロメトルファン／デキストロファン比によって測定したＣＹＰ２Ｄ６表現型と遺伝子型同定の間の相関について記載している。したがって、従来技術では遺伝子型を注目することがより便利であるが、所与の患者が野生型よりもイロペリドン及びＰ８８に対する活性が低い変異ＣＹＰ２Ｄ６を発現するか、又は異常に低い量のＣＹＰ２Ｄ６を発現することが測定された場合、前述のように、その患者は野生型ＣＹＰ２Ｄ６の患者よりも低い用量のイロペリドンを投与されるだろう。患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の比活性を測定する他の方法には、酵素活性を直接測定するための生化学的測定法、患者ＣＹＰ２Ｄ６のアミノ酸配列を調べるための蛋白質配列決定法、転写及び翻訳レベルのモニター、及びＣＹＰ２Ｄ６遺伝子ｍＲＮＡ転写物の配列決定法が含まれる。例えば、Ｃｈａｉｎｕｖａｔｉ他は、多剤表現型決定カクテル（Ｃｏｏｐｅｒｓｔｏｗｎ５＋１カクテル）を使用したＣＹＰ２Ｄ６表現型の評価について記載している。
【００８６】
イロペリドンは、投与単位に処方し、当業界で公知の技術を使用して患者に投与することができる。例えば、いずれも本明細書に完全に記載されたものとして参考として援用された、ＰＣＴ出願公開番号第０３０５４２２６号パンフレット、米国特許出願公開番号第２００３９１６４５号、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ ＥＰ０３／０７６１９、及びＰＣＴ出願公開番号第０２０６４１４１号パンフレットを参照のこと。
【００８７】
さらに、本発明は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型及び／又は表現型を決定するキットを提供する。このようなキットは、例えば、検出手段、収集装置、容器、及び指示書を含むことができ、イロペリドン処理が必要な１種又は複数の疾患又は障害を有する患者の治療方法の決定に使用することができる。
【００８８】
検出手段は、ＣＹＰ２Ｄ６多形を直接検出してもよく、又は多形遺伝子の特徴的なｍＲＮＡ若しくはそのポリペプチド発現生成物を検出してもよい。さらに、当業者によって認識されるように、検出手段は、ＣＹＰ２Ｄ６多形による連鎖不均衡における多形を検出してもよい。したがって、この出願で開示されたＣＹＰ２Ｄ６多形による連鎖不均衡の多形は、このようなＣＹＰ２Ｄ６多形を間接的に検出するために使用することができ、これは本発明の範囲内である。
【００８９】
本発明の方法及び装置で使用するために適した検出手段は、増幅に使用するポリヌクレオチド、配列決定法及び一塩基多形（ＳＮＰ）検出技術などの当業界で公知の手段、Ｉｎｖａｄｅｒ（登録商標）測定法（Ｔｈｉｒｄ Ｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ．）、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）測定法（Ａｐｐｌｉｅｄ ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．）、遺伝子チップ測定法（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ、Ｉｎｃ．及びＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓから市販されているものなど）、ピロシーケンス、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）をベースとした切断測定法、蛍光偏光、変性高速液体クロマトグラフィー（ＤＨＰＬＣ）、質量分析並びに増幅及び配列決定で使用される蛍光又は放射線学的タグを有するポリヌクレオチドを含む。
【００９０】
本発明のキットの好ましい実施形態は、相補的ＤＮＡ配列に結合すると、特異的な上流「インベーダー」オリゴヌクレオチド及び部分的に重複した下流プローブが一緒になって特定の構造を形成するＩｎｖａｄｅｒ（登録商標）測定法を含む。この構造は、切断酵素によって認識され、特異的部位で切断され、プローブオリゴヌクレオチドの５’フラップ（ｆｌａｐ）を遊離する。次に、この断片は、合成２次標的及び反応混合物中に含有される２次蛍光標識シグナルプローブに対して「インベーダー」オリゴヌクレオチドとして働く。これは、切断酵素による２次シグナルプローブの特異的切断を引き起こす。蛍光共鳴エネルギー移動が可能な色素分子で標識されたこの２次プローブが切断されると、蛍光シグナルが発生する。切断は、重複したＤＮＡ配列又はフラップによって形成された構造に対して厳密な必要件を有し、したがって、下流ＤＮＡ鎖の切断部位のすぐ上流の一塩基対ミスマッチを特異的に検出するために使用することができる。例えば、いずれも本明細書に参考として援用した、Ｒｙａｎ他、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ、４；２：１３５〜１４４（１９９９）、Ｌｙａｍｉｃｈｅｖ他、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１７：２９２〜２９６（１９９９）及び、いずれもＢｒｏｗ他の米国特許第５８４６７１７号及び第６００１５６７号を参照のこと。
【００９１】
本発明のキットの他の好ましい実施形態は、患者の代謝表現型を予測することが知られている対立遺伝子に特異的な少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型同定オリゴヌクレオチドを含む検出手段を含む。より具体的には、この手段は、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ又はＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１１０Ｔ多形に特異的なオリゴヌクレオチドを含む。この手段は、同様に各多形並びに野生型配列に特異的なオリゴヌクレオチドを含んでよい。
【００９２】
本発明での使用に適した検出方法、手段及びキットは、いずれも本明細書に参考として援用した国際公開第０３／０５４４２６６号パンフレット及び第０３／０３８１２３号パンフレットに記載されている。本明細書で説明した本発明の方法は一般的に、本発明によるキットの使用をさらに含むことも理解されたい。
【００９３】
本発明における使用に適した収集装置には、核酸及び／又はポリペプチドを単離することができる個体の生体試料の収集及び／又は保存のために当業界で公知の装置が含まれる。このような生体試料には、例えば、全血、精液、唾液、涙、尿、糞便物質、汗、頬側スメア、皮膚、毛髪並びに器官及び筋肉の生検試料が含まれる。したがって、適切な収集装置には、例えば、試料カップ、綿棒、スライドガラス、試験管、ランセット及びＶａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）管及びキットが含まれる。
【００９４】
本発明は、イロペリドンの投与によって軽減される疾患又は病状のために患者を治療することを包含する。前述のように、このような疾患及び病状には、例えば、統合失調症を含む分裂情動性障害、双極性うつ病を含むうつ病、並びに心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害などのその他の病状が含まれる。
【００９５】
本発明に関連する態様は、イロペリドン又はその活性代謝物、又はいずれかの薬剤として許容される塩を含む医薬組成物の当局承認を得るための方法であって、患者に投与する用量を決定する前に患者がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるかどうかを決定するための指示書を提出された処方情報に含めることを含む方法である。さらに他の態様は、本発明は、このような化合物を含む医薬組成物を商品化する（すなわち、販売及び販売促進する）ための方法であって、患者に投与する用量を決定する前に患者がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるかどうかを決定するために指示書に従って投与したとき、この組成物がヒトを治療するのに有効であることを示すデータを、規制当局に提出することによって、この組成物の当局承認を得るステップと、及びその後このような組成物のこのような形態での使用に関する情報を処方者又は患者又はその両者に広めるステップとを含む方法である。
【００９６】
本発明の他の態様は、患者が既にＣＹＰ２Ｄ６阻害剤、例えば、パロキセチンなどを投与されているならば、より少ない容量の投与を指示する表示に部分的に基づいてイロペリドンを投与するための当局承認を得るための方法である。
【００９７】
本発明を前記に概略した特定の実施形態に関連付けて説明したが、多くの代替、変更及び変種は当業者には明らかであることは明白である。したがって、前述した本発明の実施形態は、例示のためのものであって、制限するものではない。様々な変更は、以下の特許請求の範囲で定義したような本発明の精神及び範囲を逸脱することなく行うことができる。
【背景技術】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２００４年９月３０日出願された米国特許仮出願第６０／６１４７９８号の特典を請求する、２００７年３月２８日に出願され同時に係属している米国特許出願第１１／５７６１７８号の一部継続出願である、２００８年９月１０日に出願され、同時に係属している米国特許出願第１２／２０８０２７号の特典を請求するものであり、これらすべてによって、本明細書に援用される。
【０００２】
薬剤代謝に関連するいくつかの遺伝子は多形であることが発見されてきた。その結果、特定の薬剤を代謝する患者の個々の能力は、大きく異なる可能性がある。非代謝性薬剤又はその代謝物の濃度増加が、望ましくない生理学的効果を引き起こし得る場合には、これは明らかに問題であり、危険をはらんでいる。
【０００３】
２２番染色体に位置するチトクロームＰ４５０ ２Ｄ６遺伝子（ＣＹＰ２Ｄ６）は、第Ｉ相薬剤代謝酵素デブリソキン水酸化酵素をコードする。多くの総中枢神経系薬及び心臓血管薬を含む多数の薬剤は、デブリソキン水酸化酵素によって代謝されることが知られている。このような１薬剤は、イロペリドン（１−［４−［３−［４−（６−フルオロ−１，２−ベンズイソオキサゾール−３−イル）−１−ピペリジニル］プロポキシ］−３−メトキシフェニル］エタノン）である。イロペリドン及びその製造方法、並びに抗精神病薬及び鎮痛薬としての使用は、Ｓｔｒｕｐｃｚｅｗｓｋｉ他の米国特許第５３６４８６６号に記載されている。イロペリドンの投与によって治療することができる疾患及び障害には、統合失調症の全形態（すなわち、妄想型、緊張性、破瓜型、未分化型及び残部）、分裂情動性障害、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、短期精神障害、妄想障害、精神障害ＮＯＳ（不特定）、一般的病状による精神障害、統合失調症様障害及び物質誘導性精神障害が含まれる。Ｐ８８は、イロペリドンの活性型代謝物である。本明細書に参考として援用した国際公開第２００３／０２０７０７号パンフレットを参照すること。
【０００４】
とりわけ、イロペリドン又はその代謝物の濃度増加に関連した望ましくない生理学的効果は、心電図のＱＴ間隔の延長である。ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子中の変異は、いくつかの薬剤耐性関連表現型と関連している。これらには、超高速代謝型（ＵＭ）、迅速代謝型（ＥＭ）、中等度代謝型（ＩＭ）及び代謝欠損型（ＰＭ）の表現型が含まれる。特定の薬剤が代謝型又は非代謝型で望ましくない生理学的効果を生じ得る場合、投与前に患者がその薬剤の代謝欠損型であるかどうかを決定することが望ましい。
【０００５】
いくつかの参考文献では、ＣＹＰ２Ｄ６変異及び対応する表現型の同定を目標としている。例えば、Ｍｉｌｏｓ他の米国特許出願公開第２００３／００８３４８５号は、ＰＭ表現型に関連した新規ＣＹＰ２Ｄ６変種及び薬剤投与前に個体がこの変種を有するかどうかを評価する方法について記載している。Ｄａｗｓｏｎの米国特許出願公開第２００４／００７２２３５号は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の変種を同定するために有用なプライマーの組合せを記載している。同様に、Ｈｕａｎｇの米国特許出願公開第２００４／００９１９０９号は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子及びその他のチトクロームＰ４５０遺伝子における変種について個体をスクリーニングし、個体の表現型プロファイルによって個体の薬剤治療を調節する方法を記載している。最後に、Ｎｅｖｉｌｌｅ他の米国特許出願第２００４／００９６８７４号は、チトクロームＰ４５０変種を同定するための方法を記載している。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、ＣＹＰ２Ｄ６活性が正常人より低い患者の治療は、ＱＴ延長の原因となりやすく、ＣＹＰ２Ｄ６酵素によって代謝される薬剤によって、正常ＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する人に投与するよりも低い用量の薬剤を投与することによって、より安全に実施することができるという発見を含む。このような薬剤には、例えば、ドラセトロン、パロキセチン、ベンラファキシン及びイロペリドンが含まれる。ＣＰＹ２Ｄ６活性が正常より低い患者は、本明細書では、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型と称する。
【０００７】
本発明はまた、ＣＹＰ２Ｄ６酵素によって代謝される化合物、特にイロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩（例えば、それらの溶媒化合物、多形、水和物及び立体異性体）によって治療した後、ＱＴ延長の危険性に関連する可能性がある遺伝子多形の同定方法、並びにこのような多形を有する個体にこれらの化合物を投与する関連方法に関する。
【０００８】
本発明は、イロペリドン又はその代謝物の濃度増加に対応するＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座内の遺伝子多型と、基準値とを比較した修正ＱＴ（Ｑｔｃ）間隔に対するこのような濃度増加の効果との間の関係を説明する。ＱＴｃを計算するために、例えば、特にＦｒｉｄｅｒｉｃｉａ式（ＱＴｃＦ）及びＢａｚｅｔｔ式（ＱＴｃＢ）を含む様々な式を使用することができる。本発明は、このような式又はＱＴｃを計算するための方法を含む。
【０００９】
本発明の第１の態様は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を決定するステップと、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型である患者にはＣＹＰ２Ｄ６迅速代謝型である患者よりも低い用量を投与するように、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に基づいて、有効量のイロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩を患者に投与するステップとを含む、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩による患者の治療方法を提供する。
【００１０】
本発明の他の態様は、患者にＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型ではない個体に投与するよりも低い投与量を投与する、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩によるＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型である患者の治療方法を提供する。
【００１１】
本発明の他の態様は、患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されているかどうかを決定するステップと、患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されている場合、薬剤の投与量を減少させるステップとを含む、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩による患者の治療方法を提供する。
【００１２】
本発明の他の態様は、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩のある量を患者に投与するステップと、患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第１濃度を決定するステップと、少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を患者に投与するステップと、患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第２濃度を決定するステップと、第１及び第２濃度を比較するステップとを含む、患者のＣＹＰ２Ｄ６表現型の決定方法を提供する。
【００１３】
本発明の他の態様は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型又はＣＹＰ２Ｄ６表現型のいずれかを決定することによって患者のＣＹＰ２Ｄ６代謝状態を決定するステップを含む、患者がイロペリドン投与によってＱＴｃ間隔延長の危険性があるかどうかを決定する方法を提供する。患者にＱＴｃ間隔延長の危険性があることが決定された場合、この患者に投与するイロペリドンの投与量は削減することができる。
【００１４】
本発明の他の態様は、野生型ＣＹＰ２Ｄ６酵素の活性と比較してイロペリドン及びその代謝物の少なくとも１種に対する患者のＣＹＰ２Ｄ６酵素の活性を測定するステップと、患者のＣＹＰ２Ｄ６酵素活性が野生型ＣＹＰ２Ｄ６の活性よりも低い場合、イロペリドン及びその薬剤として許容される塩の少なくとも１種の用量を減少させるステップとを含む、ヒト患者における疾患又は障害を治療するために、イロペリドン又はそれらの活性代謝物又はいずれかの薬剤として許容される塩を投与する方法を提供する。
【００１５】
本発明の他の態様は、イロペリドン又はＰ８８で治療した患者の、特にＱＴ延長又はＱＴ延長に関連した有害な作用を起こしやすい患者の血液試料中のＰ８８：Ｐ９５比及び／又は（Ｐ８８＋イロペリドン）：Ｐ９５比に基づいて、イロペリドン又はそれらの薬剤として許容される塩の用量及び／又は投与頻度の変更に関する。
【００１６】
本発明の他の態様は、検出装置、サンプリング装置及びキットを使用するための指示書を含む、個体のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型の測定に使用するためのキットを提供する。
【００１７】
本発明の他の態様は、検出装置、収集装置及びキットを使用するための指示書を含む、個体のＣＹＰ２Ｄ６表現型の測定に使用するためのキットを提供する。
【００１８】
本発明の他の態様は、検出装置、収集装置及びキットを使用するための指示書を含む、個体におけるＰ９５に対するＰ８８の比並びにＰ９５に対するＰ８８及びイロペリドンの比の少なくとも１種の測定に使用するためのキットを提供する。
【００１９】
本発明のさらに他の態様は、イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む医薬組成物を商品化するための方法であって、患者に投与する用量を決定する前に患者がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるかどうかを決定するために指示書に従って投与したとき、この組成物がヒトを治療するのに有効であることを示すデータを、規制当局に提出することによってこの組成物の当局承認を得ること、及びこのような組成物のこのような形態での使用に関する情報を処方者又は患者又はその両者に広めることを含む方法を提供する。
【００２０】
本発明の前記及びその他の特性は、本発明の実施形態の以下のより具体的な説明から明らかであろう。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
イロペリドンは、ベンズイソオキサゾール−ピペリジニル誘導体であり、近年ＣＮＳ障害の治療のために開発されている。イロペリドンのプラセボ対照第ＩＩＩ相試験のデータは、終点のシングルＥＣＧに対して基準のシングルＥＣＧを比較したとき、４〜２４ｍｇの用量においてＱＴ間隔（ＱＴｃＦ）のＦｒｉｅｒｉｃｉａ修正が０．１ｍｓｅｃから８．５ｍｓｅｃに増加することを示した。イロペリドン低用量（４ｍｇ〜１６ｍｇ）では、ＱＴｃＦ延長は最小限であった（０．１〜５ｍｇ）。ごく最近の研究では、より高い用量（２０〜２４ｍｇ／日）のイロペリドンについて研究したとき、より長い延長が認められた。この研究では、２０〜２４ｍｇ／日の用量でのＱＴｃＦの平均変化は８．５ｍｓｅｃであり、１２〜１６ｍｇ／日の用量範囲では４．６ｍｓｅｃであった。これらのデータは、イロペリドンによる治療は、この種のその他の薬剤と同様にＱＴ間隔の延長に関連することができ、その効果は臨床用量範囲内において用量感受性であり得ることを示唆している。
【００２２】
本発明につながる研究は、注意深く制御した条件下で、ジプラシドン及びクエチアピンのＱＴｃ間隔に対する効果と比較してイロペリドンの様々な用量の効果を試験するために設計された。イロペリドンへの曝露と対照薬への曝露との間にあり得る関係をＱＴｃ間隔に対してさらに評価するために、定常状態条件下で、各薬剤の主要な代謝経路を薬理学的に阻害した後に再評価することも計画した。
【００２３】
実施例１
薬理遺伝学的分析用の血液試料をスクリーニング時に収集した。代謝欠損状態に既に関連のある２種の多形性はＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座中に同定され、２５１個の遺伝子型が収集された。個々の遺伝子型を、遺伝子型の種類とイロペリドン及びその代謝物Ｐ８８及びＰ９５濃度との間の関係の検出のために研究した。多形の機能的効果はまた、親薬剤及びその代謝物の濃度に対するＣＹＰ２Ｄ６阻害剤パロキセチンの添加の効果を分析することによって評価された。
【００２４】
本発明につながる研究は、阻害剤を添加する前にＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型とＰ８８の濃度との間の有意な関係並びにＱＴｃ延長に対するこの関係の効果を同定した。
【００２５】
イロペリドンは、２種のＰ４５０酵素、ＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ３Ａ４の基質である。イロペリドンの代謝クリアランスのほとんどはこれら２種の酵素に左右される。ＣＹＰ２Ｄ６は、代謝物Ｐ９４を形成するために付属のアセチル基の加水分解を触媒し、代謝物Ｐ９４はさらにいくつかの反応の後にＰ９５に変換される。イロペリドンと共にＣＹＰ２Ｄ６阻害剤フルオキセチンを添加すると、曲線下面積（ＡＵＣ）の増加が生じ、イロペリドンでは１３１％で、Ｐ８８では１１９％であった。相互作用研究においてＣＹＰ３Ａ４阻害剤ケトコナゾールを添加すると、イロペリドン並びにその主要な代謝物Ｐ８８及びＰ９５の濃度の３８〜５８％の増加が生じた。Ｐ８８は、イロペリドンと同様の、ＨＥＲＧチャンネルに対する親和性を含めた薬理学的プロファイルを有する。Ｐ９５は、ＨＥＦＧチャンネルに対する親和性が非常に低いことを含めて、イロペリドンと比較して親脂質性が低く、結合プロファイルが異なる。これらの理由のため、Ｐ９５は薬理学的に不活性であると見なされる。
【００２６】
したがって、この研究において代謝阻害剤を添加すると、イロペリドン及び／又はその代謝物の血中濃度増加のＱＴ間隔に対する効果の評価が可能であった。より具体的には、この研究は、ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤、パロキセチン添加前後及びＣＹＰ３Ａ４阻害剤、ケトコナゾールの添加前後のイロペリドンのＱＴｃに対する効果の評価が可能であった。
【００２７】
ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子は、多形性が高く、今までに７０個を上回る対立遺伝子変種が記載されている。例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｍ．ｋｉ．ｓｅ／ＣＹＰａｌｌｅｌｅｓ／ＣＹＰ２Ｄ６．ｈｔｍを参照のこと。本発明のほとんどの実施形態は、コーカサス人種のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子内の最も一般的な２種の多形、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ及びＣＹＰ２Ｄ６Ｐ３４Ｓ（ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１１０Ｔとも称する）に関する。これらの多形は、ジーンバンク配列Ｍ３３２８８．１（ＧＩ：１８１３０３）のヌクレオチド３４６５及び１７１９それぞれに対応する。ＣＹＰ２Ｄ６Ｐ３４Ｓ／ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ多形はまた、ジーンバンクｍＲＮＡ配列Ｍ２０４０３．１（ＧＩ：１８１３４９）のヌクレオチド１００に対応する。
【００２８】
ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ多形（ＣＰＹＰ２Ｄ６＊４対立遺伝子として知られる、＊４Ａ、＊４Ｂ、＊４Ｃ、＊４Ｄ、＊４Ｅ、＊４Ｆ、＊４Ｇ、＊４Ｈ、＊４Ｊ、＊４Ｋ及び＊４Ｌを包含する）は、イントロン３とエキソン４の間の接合部のＧからＡへの遷移を表し、１塩基対によってスプライス部位を移動させ、フレームシフト及び蛋白質の中途終止を引き起こす（Ｋａｇｉｍｏｔｏ １９９０、Ｇｏｕｇｈ １９９０、Ｈａｎｉｏｋａ １９９０）。ＣＹＰ２Ｄ６Ｐ３４Ｓ／ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ多形（ＣＹＰ２Ｄ６＊１０及びＣＹＰ２Ｄ６＊１４対立遺伝子として知られている）は、３４位のプロリンのセリンによる置換を生じるＣからＴへの変化を表す（Ｙｏｋｏｔａ １９９３、Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ １９９４）。これらの多形はいずれも、異なる基質に対する酵素活性の減少に関連してきた（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ １９９４、Ｄａｈｌ １９９５、Ｊａａｎｓｏｎ ２００２、Ｂｅｒｔｉｌｓｓｏｎ ２００２の総説も参照のこと）。
【００２９】
方法
Ａ．試料
１２８人の個体が薬理遺伝学研究に同意した。薬理遺伝学プロトコールに従い、患者の同意を得た後、血液試料を採取した。ＤＮＡは、ＣｏｖａｎｃｅによってＰＵＲＥＧＥＮＥ ＤＮＡ単離キット（Ｄ−５０Ｋ）を使用して全血から抽出された。
【００３０】
参加した１２８人の個体は、１６５人の個体の全試料を良く表しており、イロペリドン８ｍｇ群からは、１日２回投与群全体２９人のうちの２２人、イロペリドン１２ｍｇ群からは、１日２回投与群３４人のうちの３０人、イロペリドン２４ｍｇ群からは、１日１回投与群３１人のうちの２２人、リスペリドン群５人のうちの３人、ジプラジドン群３３人のうちの２８人、クエチアピン群３３人のうちの２３人が参加した。
【００３１】
Ｂ．遺伝子型同定
ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ多形の遺伝子型は、同意した個体１２８人のうち１２３人で確認され、ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ多形の遺伝子型は、参加者１２８人全体について確認された。遺伝子型同定は、増幅したＤＮＡ断片で実施された。ＣＹＰ２Ｄ６ゲノム領域は、ｔｒｉｐｌｅｘ ＰＣＲ法（Ｎｅｖｉｌｌｅ ２００２）を使用して増幅した。簡単に説明すると、使用したプライマーは：
エキソン１＆２ 2D6L1F1:CTGGGCTGGGAGCAGCCTC
2D6L1R1:CACTCGCTGGCCTGTTTCATGTC
エキソン３、４、５＆６ 2D6L2F:CTGGAATCCGGTGTCGAAGTGG
2D6L2R2:CTCGGCCCCTGCACTGTTTC
エキソン７、８＆９ 2D6L3F:GAGGCAAGAAGGAGTGTCAGGG
2D6L3R5B:AGTCCTGTGGTGAGGTGACGAGG
であった。
【００３２】
増幅は、ＧＣリッチＰＣＲキット（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｍａｎｎｈｅｉｍ、ドイツ）を使用して、製造元の推奨に従ってゲノムＤＮＡの４０〜１００ｎｇで実施した。熱還流条件は以下の通りである。最初の変性（９５℃、３分）、変性３０秒（９５℃、３０秒）、アニーリング（６６℃、３０秒）、伸長（７２℃、６０秒）を１０回、次いで、９５℃で３０秒、６６℃で３０秒、７２℃で６０秒＋５秒／回を２２回。最後の伸長は（７２℃で７分）で行った。
【００３３】
Ｔｈｉｒｄ Ｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）は、遺伝子型同定用プローブセットを開発した。遺伝子型同定は、Ｉｎｖａｄｅｒ（登録商標）測定法（Ｌｙａｍｉｃｈｅｖ １９９９）（Ｔｈｉｒｄ Ｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ）を使用して、製造元の推奨に従ってＰＣＲ産物で実施した。
【００３４】
３種のイロペリドン群に割り当てられた個体の遺伝子型には、有意な違いはなかった（表１Ａ及び１Ｂ）。
【表１】
【表２】
【００３５】
Ｃ．統計学的分析
期間１濃度に対する２種のＣＹＰ２Ｄ６多形の遺伝子型の効果は、以下のＡＮＯＶＡモデルを使用して評価した。親化合物又は代謝物が最大血中濃度に達したとき（Ｔｍａｘ）、期間１における阻害剤なしでのイロペリドン、Ｐ８８及びＰ９５の濃度を従属変数として使用し、種類及び治療のように各多形の遺伝子型は共変量として使用した。イロペリドンを１回投与した後、治療効果を調節するために、８ｍｇの１日２回投与を８と識別し、１２ｍｇの１日２回投与を１２と識別し、２４ｍｇの１日１回投与を２４と識別した。
【００３６】
ＣＹＰ２Ｄ６酵素の阻害程度に対するこれらの多形の関数は、ＣＹＰ２Ｄ６の阻害剤を添加した後、期間２におけるＰ８８及びＰ９５の濃度の比から計算した。イロペリドン及び／又はその代謝物（例えば、Ｐ８８及びＰ９５）の濃度は、滴定を含めた公知の、又は最近開発された方法もしくは装置によって、期間１及び／又は期間２において測定することができる。
【００３７】
結果及び考察
この酵素の活性に対する２種のＣＹＰ２Ｄ６多形の機能的違いを理解するために、様々な遺伝子型と代謝物Ｐ８８及びＰ９５の相対濃度との関係を調べた。Ｐ８８は、ＣＹＰ２Ｄ６によって分解され、ＣＹＰ２Ｄ６はＰ９５の合成に関係することが知られている。したがって、Ｐ８８及びＰ９５の相対量は、ＣＹＰ２Ｄ６酵素の活性によって調節されるだろう。期間１における阻害前、及び２種の代謝物のＴｍａｘ時のＰ８８／Ｐ９５の比、並びに期間２におけるＣＹＰ２Ｄ６阻害剤パロキセチン添加後のＰ８８／Ｐ９５の比を計算した。野生型酵素を有する個体では、Ｐ８８の濃度は期間２において増加するが、同期間においてＰ９５の濃度は減少することが予測される。
【００３８】
期間１では、イロペリドン治療患者９１人の平均Ｐ８８／Ｐ９５比は１．０に等しく、範囲は０．１４から８．１９であった。期間２における同個体の平均比は２．４で、範囲は０．５から８．４９であった。期間１／期間２比の平均比は０．３７に等しく、範囲は０．１１から２．７５であった。
【００３９】
遺伝子型を決定した患者では、この値は、期間１、期間２及び期間１／期間２それぞれの平均の１、２．４５及び０．３７と類似しており、試料の偏りはないことを示している。多形ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａでは、この平均は３種の遺伝子型、ＡＡ、ＡＧ及びＧＧの間で有意に異なっていた。ＡＡでは、それぞれの値は６．１、３．４１及び１．８９で、ＡＧでは、２．４、４．２及び０．５２で、ＧＧでは０．５７、１．９４及び０．２８であった（表２）。
【表３】
【００４０】
遺伝子型の種類の間の差は、ＡＮＯＶＡ試験でｐ＜０．０００１のレベルで有意であった。これらのデータは、期間１におけるＰ８８／Ｐ９５の比が高く、期間２における阻害剤添加の効果が比較的小さいことによって示されるように、ＡＡ型がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型を表すこと示唆している。ＡＧ型は、比の比によって示されるように、代謝欠損型と阻害剤添加後のＣＹＰ２Ｄ６活性が約２倍減少した野生型との間の中間表現型を示すようである（表２）。この分析は、イロペリドンの代謝物に関連するので、ＣＹＰ２Ｄ６１８４６Ａ多形の表現型特性を提供する。
【００４１】
この多形の機能的役割を確立して、各遺伝型の種類についてＰ８８のＴｍａｘ時の期間１におけるＰ８８の濃度を計算した。３種のイロペリドン投与群それぞれについて、Ｐ８８濃度は、ＧＧ型と比較すると、ＡＡ及びＡＧ型で有意に高かった（ｐ＜０．００５）（表３）。
【表４】
【００４２】
Ａ対立遺伝子を有する個体の数は限定されているが、この研究で得られた結果は一貫して、ＡＡ型及びＡＧ型の個体は、ＧＧ型の個体と比較してＴｍａｘ時により高いＰ８８濃度を経験することが予測されることを示している。同様の結果が、多形ＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔで得られた（表４及び５）。
【表５】
【表６】
【００４３】
この多形は、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ多形とほとんど完全に連鎖不均衡である事実を考えると、この結果は予測される。
【００４４】
期間１のＴｍａｘでのＰ８８の濃度の差が阻害剤添加後のＱＴｃの延長に関係するかどうかを理解するために、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ ＡＧ群のＰ８８で観察された平均値を使用して、患者全体を２種類の群に分けた。最初の群は、両方の阻害剤を添加した後の期間３のＰ８８濃度が３４ｎｇ／ｍＬ以下である個体を含み、第２の群はＰ８８の濃度が３４ｎｇ／ｍＬを上回る個体を含む。次に、期間３の基準値からのＱＴｃ変化に関して２種の群を比較した。最初の群Ｐ８８＞３４（ｎ＝５５）のＡＮＯＶＡ統計値を使用すると、期間３の基準値からのＱＴｃ平均の変化は２２．７ｍｓｅｃであり、Ｐ８８≦３４（ｎ＝１２）を使用すると、同期間の平均ＱＴｃは７．７ｍｓｅｃであった。遺伝子型及びイロペリドン用量による期間１及び期間２の基準値からのＱＴｃ変化を表６及び７に挙げる。
【表７】
【表８】
【００４５】
しかし、これらの結果は、観察数が少ないので、注意深く調べなければならない。イロペリドン２４ｍｇの１日１回に注目するならば、ＧＧと比較して、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６ＡのＡＡ及びＡＧ患者のＱＴｃは高くなる傾向がある。この差は、期間２でＣＹＰ２Ｄ６阻害剤添加後では消失する。
【００４６】
これらの所見は、異なる遺伝子型群間の期間１におけるＰ８８濃度の違いは、基準値からのＱＴｃ変化に関係し得ることを示唆している。観察数が少なく、研究の遺伝子型設計が不均衡であるならば、このデータのさらなる解釈を許可する前に、前向き検証的研究が必要である可能性がある。
【００４７】
これらの警告にもかかわらず、前述した結果は、イロペリドンの用量をそれぞれの患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に基づいて調節するならば、イロペリドンによってより安全に患者を治療できることを示す。例えば、患者が野生型ＣＹＰ２Ｄ６と比較して、ＣＹＰ２Ｄ６蛋白質の活性減少を引き起こす遺伝子型を有する場合、このような患者に投与するイロペリドンの用量は、例えば、Ｐ８８に対して野生型ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型／蛋白質と同じ、又は実質的に同じ酵素活性を有するＣＹＰ２Ｄ６蛋白質を生じるＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を有する患者に一般的に投与する用量の７５％以下、５０％以下、２５％以下に削減させる。例えば、個体に投与するイロペリドン又はその他のＣＹＰ２Ｄ６代謝化合物の通常投与量が１日当たり２４ｍｇである場合、ＣＹＰ２Ｄ６活性減少に関連する遺伝子型を有する患者には、１日当たり１８、１２又は６ｍｇの少ない投与量を投与することができる。
【００４８】
ＣＹＰ２Ｄ６活性減少は、本明細書で参考として援用したｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｍ．ｋｉ．ｓｅ／ＣＹＰａｌｌｅｌｅｓ／ＣＹＰ２Ｄ６．ｈｔｍに記載されたものを含めたその他の変異の結果であることができる。特に、ＣＹＰ２Ｄ６＊２Ａ変異は、イントロン１におけるＣＹＰ２Ｄ７遺伝子変換を含む。場合によって、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型においてＣＹＰ２Ｄ６活性が低い原因は、遺伝子型以外の要素である可能性がある。例えば、患者がＣＹＰ２Ｄ６活性を減少させる薬剤などの薬剤による治療を受けている可能性がある。
【００４９】
ＱＴｃ延長は、Ｐ８８／Ｐ９５比及び（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に相関する。ＣＹＰ２Ｄ６迅速代謝型の平均比は、それぞれ０．５７及び１．００である。前記の表３及び５に示したように、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型は、ＣＹＰ２Ｄ６迅速代謝型と比較してＰ８８レベルが上昇した。
【００５０】
ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型は、集団の約１５％を含むので、研究した集団の約１５％ではＰ８８／Ｐ９５比が２．０を上回り、残りの８５％ではＰ８８／Ｐ９５比は２．０未満であった。以下の表８は、各投与量群のＱＴｃの最小二乗平均変化を示す。いくつかの群の結果は統計学的に有意ではないが、ＱＴｃ延長はＰ８８／Ｐ９５比に相関するという仮説を支持する傾向を示している。カットオフ比３．０及び４．０を分析したとき、同様の結果が得られたので、治療後に患者が経験する可能性があるＱＴｃ延長の範囲は、Ｐ８８及びＰ９５の血液レベルを測定することによって予測できるという仮説がさらに支持される。
【表９】
【００５１】
（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に対するＱＴｃの相関を考察したとき、同様の結果が得られた。また、集団の約１５％がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるため、研究した集団の約１５％では（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比は３．０を上回るが、残りの８５％は３．０未満を示すことが発見された。以下の表９は、各投与量群のＱＴｃの最小二乗平均変化を示す。いくつかの群の結果は統計学的に有意ではないが、ＱＴｃ延長は（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に相関するという仮説を支持する傾向を示している。実際に、カットオフ比３以上を分析したとき、同様の結果が得られたので、治療後に患者が経験する可能性があるＱＴｃ延長の範囲は、イロペリドン、Ｐ８８及びＰ９５の血液レベルを測定することによって予測できるという仮説がさらに支持される。
【表１０】
【００５２】
ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ（ＡＡ又はＡＧ）遺伝子型及びＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ（ＣＴ又はＴＴ）遺伝子型を実施例１で例示するが、本発明の方法は、イロペリドン及びＰ８８に対するＣＹＰ２Ｄ６蛋白質の活性減少をもたらすその他の遺伝子型を使用することができる。本明細書の開示に基づいて、イロペリドン及びＰ８８に対する酵素活性減少をもたらす他のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を同定することは当業者の範囲内である。
【００５３】
実施例２
第２の研究は、非機能性タンパク質の産生又は酵素活性の減少を引き起こす他のＣＹＰ２Ｄ６変種の遺伝子型を同定することによって、イロペリドン応答の薬理ゲノミクス評価を拡大した。
【００５４】
変種の６つは、（ＣＹＰ２Ｄ６＊５多形におけるような）遺伝子の欠失、フレームシフト（＊３及び＊６）、スプライシングエラー（＊４）、又は切断型もしくは異常型タンパク質（＊７及び＊８）のいずれかによって、機能的酵素の欠如を生じることが示された。デブリソキンもしくはスパルテインなどの種々の化合物に対する酵素活性の有意な減少を示すか（＊９、＊１０、＊１７、＊４１）、又は中程度の活性減少を示す（＊２）機能的タンパク質の産生を生じたその他５種類の多形の遺伝子型を同定した。酵素に対するこれらの個々の多形の実際の影響は化合物毎に異なり、同じタンパク質に多形がいくつか存在することによってさらにＣＹＰ２Ｄ６活性が減少し得る。
【００５５】
方法
Ａ．試料
ＣＹＰ２Ｄ６＊４及び＊１０変種（ＶＰ−ＶＹＶ−６８３−３１０１）の遺伝子型が最初に同定されたイロペリドン治療患者３００人の残存するＤＮＡ試料２２２個を使用して、このようなさらに詳しい薬理ゲノミクス分析を行った。１患者は、Ｑｕｅｓｔ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ、ＰＡ）及びＣｏｇｅｎｉｃｓ（Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ、ＮＣ）によって得られたＣＹＰ２Ｄ６＊４対立遺伝子とは矛盾した結果であったので分析から除外した。これらの患者の１６８人について（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比の薬物動態データが利用できた。１４日目及び２８日目のＱＴ測定値は、それぞれ１６９人及び１４６人の患者から入手できた。
【００５６】
Ｂ．遺伝子型同定
１１個の特定のＣＹＰ２Ｄ６多形を評価した（表１０）。
【表１１】
【００５７】
ＣＹＰ２Ｄ６＊１０対立遺伝子の遺伝子型はＱｕｅｓｔ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ、ＰＡ）によって得られ、ＣＹＰ２Ｄ６＊２、＊３、＊５、＊６、＊７、＊８、＊９、＊１７及び＊４１対立遺伝子の遺伝子型はＣｏｇｅｎｉｃｓ（Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ、ＮＣ）によって得られ、ＣＹＰ２Ｄ６＊４の対立遺伝子の遺伝子型はＱｕｅｓｔで得られ、一部の患者についてはＣｏｇｅｎｉｃｓからも得られた。
【００５８】
ＣＹＰ２Ｄ６＊２対立遺伝子は、一連の変異によって特徴付けられる。このアッセイでは、アミノ酸２９６のアルギニンからシステインへの置換を引き起こす２８５０位のシトシンからチミンへのトランジションを調べた（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ他、１９９３、Ｗａｎｇ他、１９９５）。ＣＹＰ２Ｄ６マルチプレックスＰＣＲによる最初の産物を増幅し、得られた産物をＨｈａＩで消化した。ＨｈａＩ消化によって、ｗｔ／ｗｔ遺伝子型では４７６、３７２、２４７、１７８及び８４塩基対断片が生じ、＊２／ｗｔ遺伝子型では５５０、４７６、３７２、２４７、１７８及び８４塩基対断片が生じ、＊２／＊２遺伝子型では５５０、４７６、２４７及び８４塩基対断片が生じた。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００５９】
ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子＊３、＊４、＊６、＊７及び＊８の存在は、マルチプレックスＰＣＲ（Ｓｔｕｖｅｎ他、１９９６）を使用してアッセイした。ＣＹＰ２Ｄ６＊３対立遺伝子は、エキソン５におけるヌクレオチド２５４９の１塩基（アデニン）欠失によって生じる（Ｂｕｃｈｅｒｔ他、１９９３）。ＣＹＰ２Ｄ６＊４対立遺伝子の欠損は、イントロン３における最後のヌクレオチド（１８４６位）のグアニンからアデニンへのトランジションによって異常な３’スプライシング認識部位が生じることによる（Ｈａｎｉｏｋａ他、１９９０）。ＣＹＰ２Ｄ６＊６対立遺伝子は、エキソン３における１７０７位のチミン欠失によって、未熟な終止コドンが生じることによって引き起こされる（Ｓａｘｅｎａ他、１９９４）。ＣＹＰ２Ｄ６＊７対立遺伝子は、２９３５位のアデニンからシトシンへのミスセンス変異によって生じ、エキソン６におけるアミノ酸３２４のヒスチジンからプロリンへの置換が引き起こされ、酵素機能の全欠如がもたらされる（Ｅｖｅｒｔ他、１９９４）。ＣＹＰ２Ｄ６＊８対立遺伝子の欠損は、１７５８位のグアニンからチミンへのトランジションによって未熟な終止コドンの挿入が生じることによる（Ｓｔｕｖｅｎ他、１９９６）。
【００６０】
最初の増幅によって、５種類の対立遺伝子全てを含有する１５７８塩基対の産物が生じた。１５７８塩基対の産物は、５種類の対立遺伝子を同時に同定するマルチプレックス対立遺伝子特異的アッセイの鋳型として役だった。最初のＰＣＲ鋳型を、野生型又は変異型対立遺伝子を認識するプライマーを含有する２種類の別個のマスターミックスに添加した。これらのプライマーは、＊７、＊３、＊４、＊８及び＊６対立遺伝子それぞれに対する１３９４、１０１０、３０４、２１９及び１６７塩基対のＰＣＲ産物を生じる。内部標準として、＊８のプライマーを逆にした。すなわち、＊８の野生型対立遺伝子を認識するプライマーを変異型マスターミックスに存在させ、＊８の変異型対立遺伝子のプライマーを野生型マスターミックスに存在させた。野生型遺伝子型では（＊８を除く）、ＰＣＲ産物は野生型の列に出現し、変異型の列にはＰＣＲ産物は認められなかった。ヘテロ接合体遺伝子型では、同じ大きさの断片のＰＣＲ産物は野生型及び変異型の列の両方に出現した。変異型遺伝子型では（＊８を除く）、ＰＣＲ産物は変異型の列にのみ出現した。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６１】
ＣＹＰ２Ｄ６＊５対立遺伝子は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の完全な欠失から生じる（Ｇａｅｄｉｇｋ他、１９９１、Ｓｔｅｅｎ他、１９９５）。ロングレンジ（ｌｏｎｇ−ｒａｎｇｅ）ＰＣＲ法を使用してＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座の欠失を同定した。ＰＣＲ産物の有無及び強度によって、野生型、ヘテロ接合体変異体又は変異型対立遺伝子を同定した。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６２】
ＣＹＰ２Ｄ６＊９変異は、２６１３〜２６１５位における３塩基対欠失である（Ｔｙｎｄａｌｅ他、１９９１）。これによってアミノ酸２８１のリシンの欠失が生じる。ＣＹＰ２Ｄ６＊４１変異は、２９８８位のグアニンからアデニンへのトランジションによる（Ｒａｉｍｕｎｄｏ他、２００４）。最初の増幅によって、２種類の対立遺伝子を含有する１５７８塩基対の産物が生じた。１５７８塩基対産物は、２種類の対立遺伝子を同時に同定するマルチプレックス対立遺伝子特異的アッセイの鋳型として役だった。最初のＰＣＲ鋳型を、野生型又は変異型対立遺伝子を認識するプライマーを含有する２種類の別個のマスターミックスに添加した。これらのプライマーは、＊９野生型、内部標準及び＊４１野生型それぞれに対する４０９、５９３及び７８０塩基対のＰＣＲ産物を生成した。野生型遺伝子型では、ＰＣＲ産物は野生型の列に出現し、変異型の列にはＰＣＲ産物は認められなかった。ヘテロ接合体遺伝子型では、ＰＣＲ産物は、野生型及び変異型の列の両方に出現した。変異型遺伝子型では、ＰＣＲ産物は変異型の列にのみ出現した。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６３】
ＣＹＰ２Ｄ６＊１７対立遺伝子は、１０２３位のシトシンからチミンへの塩基変化によって、エキソン２におけるアミノ酸１０７のトレオニンからイソロイシンへの置換が生じることによって引き起こされる（Ｍａｓｉｍｉｒｅｍｂｗａ他、１９９６）。最初の増幅によって、ＣＹＰ２Ｄ６＊１７対立遺伝子を含有する３６９塩基対の産物が生じた。最初のＰＣＲ鋳型を、野生型又は変異型対立遺伝子並びに内部標準を認識するプライマーを含有する２種類の別個のマスターミックスに添加した。これらのプライマーは、＊１７対立遺伝子及び内部標準それぞれに対する２３５及び１８１塩基対のＰＣＲ産物を生成した。野生型遺伝子型では、両ＰＣＲ産物は野生型の列に出現したが、変異型の列に認められたのは内部標準ＰＣＲ産物のみであった。ヘテロ接合体遺伝子型では、両ＰＣＲ産物が野生型及び変異型の両方の列に出現した。変異型遺伝子型では、両ＰＣＲ産物は変異型の列に出現し、内部標準ＰＣＲ産物のみは野生型の列に認められた。ＰＣＲ産物は、ゲル電気泳動して、紫外線下で撮影した。
【００６４】
Ｃ．統計学的分析
分析は、観察した症例データにおいて、ＱＴｃ（Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａ式）のベースラインからの変化については共変量として基準値を用いたＡＮＣＯＶＡモデルを使用して、１４日目及び２８日目のイロペリドン血液曝露についてはＡＮＯＶＡモデルを使用して実施した。連鎖不均衡分析は、Ｈａｐｌｏｖｉｅｗ ｖ４．０（Ｂａｒｒｅｔｔ他、２００５）を使用して実施した。
【００６５】
統計学的に有意な関連が、ＣＹＰ２Ｄ６＊４、ＣＹＰ２Ｄ６＊５、ＣＹＰ２Ｄ６＊１０及びＣＹＰ２Ｄ６＊４１対立遺伝子とイロペリドン血液曝露レベルとの間に認められた。薬剤濃度の比［（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５］は、非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子及び酵素活性減少に関連する可能性がある変種が存在すると増加した。さらに、少なくとも１種の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者は、２個の機能性コピーを有する患者よりもイロペリドン治療１４日後のＱＴｃ延長が長かった。２８日目までに、ＱＴｃＦ延長は減少したが、２種類の患者群にはまだ統計学的な差があった。
【００６６】
イロペリドン治療患者において遺伝子型が同定された１１種のＣＹＰ２Ｄ６変種を表１０に挙げ、人種毎のそれぞれの対立遺伝子頻度を表１１に挙げる。
【表１２】
【００６７】
６種類の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６変種、＊３、＊４、＊５、＊６、＊７及び＊８の遺伝子型を同定した。最も一般的な変種は＊４で、白人患者では１６．２％、黒人及びアフリカ系アメリカ人患者では１１．０％、アジア人患者では１２．０％に検出された。＊４変種は白人（約２０％）及びアフリカ系アメリカ人（７．５％）では最も一般的な非機能性ＣＹＰ２Ｄ６変種であり、一方アジア人では稀であると予測されることが以前に報告された（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。＊５変種は、人種群に応じて３〜６％の頻度で認められており、以前の報告（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）と矛盾していなかった。予測通りに、＊３、＊６、＊７は稀で、＊８はいずれの患者においても認められなかった。
【００６８】
ＣＹＰ２Ｄ６酵素活性減少に関与する４種類の変種の遺伝子型を同定した。＊１０はアジア人でよく認められ（３８〜７０％）、＊１７はアフリカ系アメリカ人の約２２％で報告されており、＊４１は白人では一般的と思われ（おそらく約２０％）、＊９は少数の個体でのみ認められた（１〜２％）（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。
【００６９】
＊１０変種は、全人種群のイロペリドン治療患者の１５〜２０％で認められた。＊１０は、白人及びアフリカ系アメリカ人では予測よりも高い頻度で生じていたが、アジア人での頻度は低かった。その他の研究は、アジア人では＊１０の割合が高い（３８％を上回る）が、白人（４〜８％）及びアフリカ系アメリカ人（２〜７％）ではずっと低い割合であることが報告された（Ｂｒａｄｆｏｒｄ、２００２）。＊１７変種は、黒人及びアフリカ系アメリカ人では最も一般的な変種で（１７．６％）、アジア人（５．９％）及び白人（１．１％）では非常に稀であり、この結果は、これらの集団で予測された頻度と一致している（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。
【００７０】
予測通り、＊４１変種は白人では最も一般的であったが（１１．２％）、アフリカ系アメリカ人では稀であった（１．４％）。この変種はその他の集団では詳細に研究されていないが、アジア人の８．８％にも認められた。
【００７１】
機能性＊２変種は、ＣＹＰ２Ｄ６タンパク質をコードする最も一般的に生じる変種であることが報告されたが、活性は少し減少していた（野生型の約８０％）（Ｂｒａｄｆｏｒｄ ２００２）。＊２変種は最も一般的に認められる変種で、人種群に応じて頻度は３２〜４４％であった。
【００７２】
ＣＹＰ２Ｄ６変種の頻度が高いので、何人かの個体は酵素活性の減少又は消失に関連した複数の対立遺伝子を有するようである。
【００７３】
この研究では２個の非機能性対立遺伝子を有する患者は７人のみ確認されており（３．１％）、６人がホモ接合体＊４／＊４で、１人が複合ヘテロ接合体＊５／＊４であった。７２人の患者（３２．１％）がＣＹＰ２Ｄ６の機能性コピーを１個のみ有していた。６１人の患者（２７．２％）がＣＹＰ２Ｄ６の機能性コピーを２個及び酵素活性が減少した可能性のある対立遺伝子変種を１個又は２個有していた。その他の８４人の患者（３７．５％）は、＊２変種のみを有しているか、又は各変種遺伝子座におけるホモ接合体ｗｔ／ｗｔであった。
【００７４】
連鎖不均衡（ＬＤ）分析によって、いくつかのＣＹＰ２Ｄ６遺伝子座が完全な連鎖不均衡内に存在することが明らかになった。＊４変種は、＊１０（Ｄ’＝１、ＬＤ ４２．３３）及び＊２（Ｄ’＝１、ＬＤ ５．７５）のＬＤ内に存在した。＊２変種はまた、＊１７（Ｄ’＝１、ＬＤ １３．４４）、＊１０（Ｄ’＝１、ＬＤ ８．８９）及び＊４１（Ｄ’＝１、ＬＤ ５．４３）のＬＤ内に存在した。
【００７５】
イロペリドン血液曝露した個々のＣＹＰ２Ｄ６変種の分析によって、＊４及び＊１０変種は（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比と有意に関連しており、ｗｔの１．１０に対して＊４対立遺伝子の比は２．２８（ｐ＝２．８Ｅ−０８）、ｗｔの１．０３に対して＊１０対立遺伝子の比は２．２０であった（ｐ＝２．４Ｅ−０９）（表１２）。＊５及び＊４１変種にも有意な関連が認められ、ｗｔの１．１９に対して＊５対立遺伝子の比は２．１６（ｐ＝０．００１６）、ｗｔの１．１９に対して＊４１対立遺伝子の比は２．０２であった（ｐ＝０．００４５）（表１２）。
【表１３】
【００７６】
既に検討したように、複数のＣＹＰ２Ｄ６変種の存在はさらに、発現するＣＹＰ２Ｄ６の全体量及びその総酵素活性に影響を及ぼし得る。したがって、機能性及び非機能性対立遺伝子全ての存在並びに変種のいくつかに関連して予測される活性減少を考慮して、さらなる分析を実施した。活性減少に関連した対立遺伝子及び非機能性対立遺伝子の存在によって、（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比増加の明らかな勾配が認められた（表１３）。２個の非機能性対立遺伝子を有する患者は、（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比が６．４であることがわかり、これは非機能性対立遺伝子を１個だけ有する患者（１．８）、活性減少に関連した対立遺伝子を１個もしくは２個有する患者（１．１５）又は機能性対立遺伝子を２個有する患者（０．８０）よりずっと高かった（表１３）。
【表１４】
【００７７】
イロペリドン代謝の有意な減少が少なくとも１個の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者で認められたので、これらの患者ではまた、イロペリドン治療後にＱＴｃＦ延長が増加しているかどうかについても調べた（表１４）。治療１４日後に、少なくとも１個の非機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者は、ＱＴｃＦ間隔の延長（１６．３ｍｓｅｃ）が２個の機能性コピーを有する患者（９．７ｍｓｅｃ、ｐ＝０．０１）よりも有意に高かった。２８日目までに、ＱＴｃＦ延長は減少したが、２群間にはまだ統計学的に差があった（それぞれ１１．４及び４．４ｍｓｅｃ、ｐ＝０．０２）。
【表１５】
【００７８】
Ｄ．結果及び考察
特定のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に関係ない（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比に基づく比較によって、１４日目のＱＴｃは、比が＞１の患者の１６．０ｍｓｅｃと比べて比が≦１の患者では７．９ｍｓｅｃ、ｐ＝０．０００２であることが明らかになった（表１５）。２８日目のＱＴｃＦは、比が≦の患者では４．８ｍｓｅｃ、＞１の患者では１０．１ｍｓｅｃに減少した。
【表１６】
【００７９】
２００人を上回るイロペリドン治療患者の複数のＣＹＰ２Ｄ６変種を遺伝子型同定することによって（表１１）、連鎖不均衡内にあるＣＹＰ２Ｄ６＊４及び＊１０対立遺伝子は白人（それぞれ１６．２％及び１７．１％）及びアジア人（それぞれ１２％及び２０％）において酵素活性減少又は消失に関連した最も一般的な対立遺伝子であることがわかった。黒人及びアフリカ系アメリカ人では、＊１７対立遺伝子が＊４及び＊１０対立遺伝子よりも一般的であった（１７．６％に対してそれぞれ１１％及び１４．７％）。＊５対立遺伝子の頻度は約５％で、その他の非機能性対立遺伝子は非常に稀であった。ＣＹＰ２Ｄ６変種の頻度データの最も詳細な分析は、ヨーロッパの白人集団、中国人及び日本人集団、又は選択されたアフリカ地域から得られた。現在では、ＵＳ集団における対立遺伝子頻度については数少ない研究しか報告されておらず、ヨーロッパの白人、アフリカ人、中国人又は日本人集団のデータとこの研究で認められた差のいくつかは、ＵＳ集団の地域的及び国家的特異性を反映しているようである。
【００８０】
＊４、＊１０、＊５及び＊４１対立遺伝子はＣＹＰ２Ｄ６イロペリドン代謝の減少、より詳細には、（イロペリドン＋８８）／９５比の増加に有意に関連していることが認められた（表１２）。試験した対立遺伝子全ての遺伝子型データを考慮すると、この比は非機能的対立遺伝子及び活性減少に関連した対立遺伝子の数に明らかに左右されることが示された（表１３）。
【００８１】
さらに、イロペリドン代謝の減少は、治療１４日後及び２８日後のＱＴｃＦ延長の増加に関連していた。少なくとも１個の機能性ＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を有する患者と２個の機能性対立遺伝子を有する患者の間には有意差が認められた（表１４）。この差は、特定のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に関係なく（イロペリドン＋Ｐ８８）／Ｐ９５比が≦１又は＞１の患者の間にも認められた（表１５）。これらの結果は、ＱＴｃＦ延長の可能性が患者に危険であると考えられるならば、イロペリドンで患者を治療するときに医師にとって期待されるリスクマネージメント戦略及び有望な試験手段となる。
【００８２】
前記で説明したように、イロペリドンの最適用量を決定するための出発点は、イロペリドン及びＰ８８に対して野生型ＣＹＰ２Ｄ６タンパク質と同様の活性を有するタンパク質を生じるＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を有する患者において、許容される安全性及び有効性が示された用量である。このような用量は当業界で公知であり、例えば、前記の米国特許第５，３６４，８６６号に開示されている。
【００８３】
一般的に、患者に投与するイロペリドンの用量は、前記のように、イロペリドン及びＰ８８に対するＣＹＰ２Ｄ６酵素の酵素的活性が野生型ＣＹＰ２Ｄ６の活性の約７５％未満である場合、減少するだろう。酵素活性は、例えば、個体の血液中のイロペリドン及び／又はＰ８８のレベルの測定を含む様々な方法によって測定することができる。このような場合、イロペリドン用量は、イロペリドン及び／又はＰ８８の測定レベルが正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体の血液中で測定されたレベルと実質的に同じであるように減少させることができる。例えば、患者のＣＹＰ２Ｄ６酵素活性が、１種又は複数の方法（例えば、遺伝子型同定、デキストロモルファン（ｄｅｘｔｒｏｍｏｒｐｈａｎ）血中レベルの測定）によって、正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体で通常観察される酵素活性の５０％であると評価された場合、この患者への投与量は、正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体に投与する用量の半分に調節する必要があり得る。同様に、超高速代謝型の場合、類似の計算によって、親化合物及び活性代謝物との類似の血中レベルを実現するために、正常なＣＹＰ２Ｄ６酵素活性を有する個体に投与する量の２倍に投与量を調節する必要があり得るという結論が導かれる。
【００８４】
あるいは、患者に投与するイロペリドンの投与量は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型のみに基づいて、又は患者のＰ８８：Ｐ９５もしくは（イロペリドン＋Ｐ８８）：Ｐ９５比に基づいて減少させることができる。例えば、患者が「代謝欠損者」の遺伝子型を有する場合、又は高いＰ８８：Ｐ９５比もしくは（イロペリドン＋Ｐ８８）：Ｐ９５比を有する場合、イロペリドンの患者投与量は、例えば、２５％、５０％又は７５％減少させることができる。患者の遺伝子型は、体液又は組織の試料に対して標準的技術を使用して容易に測定することができる。このような技術は、例えば、ＰＣＴ出願公開番号第３０５４２２６号パンフレットに開示されている。
【００８５】
さらに、本明細書の開示は遺伝子型に注目したが、当業者であれば、表現型は、イロペリドン及びＰ８８に対するＣＹＰ２Ｄ６蛋白質の活性減少の指標としても使用できることは明らかであろう。例えば、ＭｃＥｌｒｏｙらは、デキトロメトルファン／デキストロファン比によって測定したＣＹＰ２Ｄ６表現型と遺伝子型同定の間の相関について記載している。したがって、従来技術では遺伝子型を注目することがより便利であるが、所与の患者が野生型よりもイロペリドン及びＰ８８に対する活性が低い変異ＣＹＰ２Ｄ６を発現するか、又は異常に低い量のＣＹＰ２Ｄ６を発現することが測定された場合、前述のように、その患者は野生型ＣＹＰ２Ｄ６の患者よりも低い用量のイロペリドンを投与されるだろう。患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の比活性を測定する他の方法には、酵素活性を直接測定するための生化学的測定法、患者ＣＹＰ２Ｄ６のアミノ酸配列を調べるための蛋白質配列決定法、転写及び翻訳レベルのモニター、及びＣＹＰ２Ｄ６遺伝子ｍＲＮＡ転写物の配列決定法が含まれる。例えば、Ｃｈａｉｎｕｖａｔｉ他は、多剤表現型決定カクテル（Ｃｏｏｐｅｒｓｔｏｗｎ５＋１カクテル）を使用したＣＹＰ２Ｄ６表現型の評価について記載している。
【００８６】
イロペリドンは、投与単位に処方し、当業界で公知の技術を使用して患者に投与することができる。例えば、いずれも本明細書に完全に記載されたものとして参考として援用された、ＰＣＴ出願公開番号第０３０５４２２６号パンフレット、米国特許出願公開番号第２００３９１６４５号、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ ＥＰ０３／０７６１９、及びＰＣＴ出願公開番号第０２０６４１４１号パンフレットを参照のこと。
【００８７】
さらに、本発明は、患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型及び／又は表現型を決定するキットを提供する。このようなキットは、例えば、検出手段、収集装置、容器、及び指示書を含むことができ、イロペリドン処理が必要な１種又は複数の疾患又は障害を有する患者の治療方法の決定に使用することができる。
【００８８】
検出手段は、ＣＹＰ２Ｄ６多形を直接検出してもよく、又は多形遺伝子の特徴的なｍＲＮＡ若しくはそのポリペプチド発現生成物を検出してもよい。さらに、当業者によって認識されるように、検出手段は、ＣＹＰ２Ｄ６多形による連鎖不均衡における多形を検出してもよい。したがって、この出願で開示されたＣＹＰ２Ｄ６多形による連鎖不均衡の多形は、このようなＣＹＰ２Ｄ６多形を間接的に検出するために使用することができ、これは本発明の範囲内である。
【００８９】
本発明の方法及び装置で使用するために適した検出手段は、増幅に使用するポリヌクレオチド、配列決定法及び一塩基多形（ＳＮＰ）検出技術などの当業界で公知の手段、Ｉｎｖａｄｅｒ（登録商標）測定法（Ｔｈｉｒｄ Ｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ．）、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）測定法（Ａｐｐｌｉｅｄ ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．）、遺伝子チップ測定法（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ、Ｉｎｃ．及びＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓから市販されているものなど）、ピロシーケンス、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）をベースとした切断測定法、蛍光偏光、変性高速液体クロマトグラフィー（ＤＨＰＬＣ）、質量分析並びに増幅及び配列決定で使用される蛍光又は放射線学的タグを有するポリヌクレオチドを含む。
【００９０】
本発明のキットの好ましい実施形態は、相補的ＤＮＡ配列に結合すると、特異的な上流「インベーダー」オリゴヌクレオチド及び部分的に重複した下流プローブが一緒になって特定の構造を形成するＩｎｖａｄｅｒ（登録商標）測定法を含む。この構造は、切断酵素によって認識され、特異的部位で切断され、プローブオリゴヌクレオチドの５’フラップ（ｆｌａｐ）を遊離する。次に、この断片は、合成２次標的及び反応混合物中に含有される２次蛍光標識シグナルプローブに対して「インベーダー」オリゴヌクレオチドとして働く。これは、切断酵素による２次シグナルプローブの特異的切断を引き起こす。蛍光共鳴エネルギー移動が可能な色素分子で標識されたこの２次プローブが切断されると、蛍光シグナルが発生する。切断は、重複したＤＮＡ配列又はフラップによって形成された構造に対して厳密な必要件を有し、したがって、下流ＤＮＡ鎖の切断部位のすぐ上流の一塩基対ミスマッチを特異的に検出するために使用することができる。例えば、いずれも本明細書に参考として援用した、Ｒｙａｎ他、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ、４；２：１３５〜１４４（１９９９）、Ｌｙａｍｉｃｈｅｖ他、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１７：２９２〜２９６（１９９９）及び、いずれもＢｒｏｗ他の米国特許第５８４６７１７号及び第６００１５６７号を参照のこと。
【００９１】
本発明のキットの他の好ましい実施形態は、患者の代謝表現型を予測することが知られている対立遺伝子に特異的な少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型同定オリゴヌクレオチドを含む検出手段を含む。より具体的には、この手段は、ＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ又はＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１１０Ｔ多形に特異的なオリゴヌクレオチドを含む。この手段は、同様に各多形並びに野生型配列に特異的なオリゴヌクレオチドを含んでよい。
【００９２】
本発明での使用に適した検出方法、手段及びキットは、いずれも本明細書に参考として援用した国際公開第０３／０５４４２６６号パンフレット及び第０３／０３８１２３号パンフレットに記載されている。本明細書で説明した本発明の方法は一般的に、本発明によるキットの使用をさらに含むことも理解されたい。
【００９３】
本発明における使用に適した収集装置には、核酸及び／又はポリペプチドを単離することができる個体の生体試料の収集及び／又は保存のために当業界で公知の装置が含まれる。このような生体試料には、例えば、全血、精液、唾液、涙、尿、糞便物質、汗、頬側スメア、皮膚、毛髪並びに器官及び筋肉の生検試料が含まれる。したがって、適切な収集装置には、例えば、試料カップ、綿棒、スライドガラス、試験管、ランセット及びＶａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）管及びキットが含まれる。
【００９４】
本発明は、イロペリドンの投与によって軽減される疾患又は病状のために患者を治療することを包含する。前述のように、このような疾患及び病状には、例えば、統合失調症を含む分裂情動性障害、双極性うつ病を含むうつ病、並びに心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害などのその他の病状が含まれる。
【００９５】
本発明に関連する態様は、イロペリドン又はその活性代謝物、又はいずれかの薬剤として許容される塩を含む医薬組成物の当局承認を得るための方法であって、患者に投与する用量を決定する前に患者がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるかどうかを決定するための指示書を提出された処方情報に含めることを含む方法である。さらに他の態様は、本発明は、このような化合物を含む医薬組成物を商品化する（すなわち、販売及び販売促進する）ための方法であって、患者に投与する用量を決定する前に患者がＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であるかどうかを決定するために指示書に従って投与したとき、この組成物がヒトを治療するのに有効であることを示すデータを、規制当局に提出することによって、この組成物の当局承認を得るステップと、及びその後このような組成物のこのような形態での使用に関する情報を処方者又は患者又はその両者に広めるステップとを含む方法である。
【００９６】
本発明の他の態様は、患者が既にＣＹＰ２Ｄ６阻害剤、例えば、パロキセチンなどを投与されているならば、より少ない容量の投与を指示する表示に部分的に基づいてイロペリドンを投与するための当局承認を得るための方法である。
【００９７】
本発明を前記に概略した特定の実施形態に関連付けて説明したが、多くの代替、変更及び変種は当業者には明らかであることは明白である。したがって、前述した本発明の実施形態は、例示のためのものであって、制限するものではない。様々な変更は、以下の特許請求の範囲で定義したような本発明の精神及び範囲を逸脱することなく行うことができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む活性医薬成分で患者を治療する方法であって、
前記患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を決定するステップと、
前記患者に有効量の前記活性医薬成分を投与するステップと、
を含み、
前記活性医薬成分の量は、前記患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に基づいて決定される、
方法。
【請求項２】
野生型と比較してＣＹＰ２Ｄ６酵素の酵素活性が減少していることを遺伝子型が示す場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ遺伝子型がＡＡの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ遺伝子型がＧＡの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ遺伝子型がＴＴの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ遺伝子型がＣＴの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型が１００Ｃ＞Ｔ；１６６１Ｇ＞Ｃ；１８４６Ｇ＞Ａの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型が１００Ｃ＞Ｔ；１６６１Ｇ＞Ｃ；４１８０Ｇ＞Ｃの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型がＣＹＰ２Ｄ６欠失の場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型が−１５８４Ｃ；−１２３５Ａ＞Ｇ；−７４０Ｃ＞Ｔ；−６７８Ｇ＞Ａ；イントロン１におけるＣＹＰ２Ｄ７遺伝子変換；１６６１Ｇ＞Ｃ；２８５０Ｃ＞Ｔ；２９８８Ｇ＞Ａ；４１８０Ｇ＞Ｃの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記患者は、統合失調症、分裂情動性障害、うつ病、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害及び統合失調症様障害の少なくとも１種に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記患者は、ＱＴ間隔延長の危険性がある、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む、薬剤として活性のある成分、によるＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型である患者の治療方法であって、
前記患者は、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型ではない個体に投与されるよりも低い用量を投与される、方法。
【請求項１４】
前記患者は、前記患者の遺伝子型、前記患者の表現型、及び前記患者がＣＹＰ２Ｄ６活性を減少させる薬剤で治療されている事実、の少なくとも１つに基づいて、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であることが決定される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記患者の遺伝子型は、２５４９Ａ欠損、１８４６Ｇ＞Ａ、１７０７Ｔ欠損、２９３５Ａ＞Ｃ、１７５８Ｇ＞Ｔ、２６１３〜２６１５ＡＧＡ欠損、１０２３Ｃ＞Ｔ、２８５０Ｃ＞Ｔ、４１８０Ｇ＞Ｃ、１６５９Ｇ＞Ａ、１６６１Ｇ＞Ｃ、２８５０Ｃ＞Ｔ、３１８３Ｇ＞Ａ、−１５８４Ｃ、−１２３５Ａ＞Ｇ、−７４０Ｃ＞Ｔ、−６７８Ｇ＞Ａ、１００Ｃ＞Ｔ、２９８８Ｇ＞Ａ及びＣＹＰ２Ｄ６欠失からなる群から選択された少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記患者の遺伝子型は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の少なくとも１個の欠損を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記患者の遺伝子型は、イントロン１のＣＹＰ２Ｄ７遺伝子変換を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記患者は、統合失調症、分裂情動性障害、うつ病、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害及び統合失調症様障害の少なくとも１種に罹患している、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む薬剤として活性のある成分で患者を治療する方法であって、
前記患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されているかどうかを決定するステップと、
前記患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されている場合、薬剤の投与量を削減するステップと、
を含む方法。
【請求項２０】
前記ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤は、パロキセチン、ドラセトロン、ベンラファキシン及びフルオキセチンの少なくとも１種を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者は、統合失調症、分裂情動性障害、うつ病、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害及び統合失調症様障害の少なくとも１種に罹患している、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
患者のＣＹＰ２Ｄ６表現型を決定する方法であって、
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種のある量を患者に投与するステップと、
前記患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第１濃度を測定するステップと、
を含む方法。
【請求項２３】
前記イロペリドン代謝物は、Ｐ８８及びＰ９５からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
第１濃度は、Ｐ８８及びＰ９５のそれぞれについて測定される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記患者は、Ｐ９５に対するＰ８８の第１濃度の比が約２．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者は、（Ｐ８８＋イロペリドン）／Ｐ９５の第１濃度の比が約１．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記患者は、Ｐ９５に対するイロペリドン及びＰ８８の第１濃度の比が約３．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を前記患者に投与するステップと、
前記患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第２濃度を測定するステップと、
前記第１濃度と前記第２濃度とを比較するステップと、
をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤は、パロキセチン、ケトコナゾール及びフルオキセチンからなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
第２濃度は、Ｐ８８及びＰ９５のそれぞれについて測定される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者は、Ｐ９５に対するＰ８８の第２濃度の比が約２．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
第１濃度及び第２濃度は、イロペリドン、Ｐ８８及びＰ９５のそれぞれについて測定される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記患者は、Ｐ９５に対するイロペリドン及びＰ８８の第２濃度の比が約３．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種の投与によって、患者はＱＴｃ間隔延長の危険性があるかどうかを決定する方法であって、
第１ＱＴｃ間隔を測定するステップと、
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種のある量を患者に投与するステップと、
第２ＱＴｃ間隔を測定するステップと、
前記第１ＱＴｃ間隔と前記第２ＱＴｃ間隔とを比較するステップと、
を含む方法。
【請求項３５】
患者に投与するイロペリドンの用量は、１日当たり約２４ミリグラムである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記投与するステップ後に、前記患者に少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与するステップをさらに含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤は、パロキセチン、ケトコナゾール及びフルオキセチンからなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項１】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む活性医薬成分で患者を治療する方法であって、
前記患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型を決定するステップと、
前記患者に有効量の前記活性医薬成分を投与するステップと、
を含み、
前記活性医薬成分の量は、前記患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型に基づいて決定される、
方法。
【請求項２】
野生型と比較してＣＹＰ２Ｄ６酵素の酵素活性が減少していることを遺伝子型が示す場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ遺伝子型がＡＡの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｇ１８４６Ａ遺伝子型がＧＡの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ遺伝子型がＴＴの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
患者のＣＹＰ２Ｄ６Ｃ１００Ｔ遺伝子型がＣＴの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型が１００Ｃ＞Ｔ；１６６１Ｇ＞Ｃ；１８４６Ｇ＞Ａの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型が１００Ｃ＞Ｔ；１６６１Ｇ＞Ｃ；４１８０Ｇ＞Ｃの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型がＣＹＰ２Ｄ６欠失の場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
患者のＣＹＰ２Ｄ６遺伝子型が−１５８４Ｃ；−１２３５Ａ＞Ｇ；−７４０Ｃ＞Ｔ；−６７８Ｇ＞Ａ；イントロン１におけるＣＹＰ２Ｄ７遺伝子変換；１６６１Ｇ＞Ｃ；２８５０Ｃ＞Ｔ；２９８８Ｇ＞Ａ；４１８０Ｇ＞Ｃの場合、前記活性医薬成分の量は削減される、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記患者は、統合失調症、分裂情動性障害、うつ病、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害及び統合失調症様障害の少なくとも１種に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記患者は、ＱＴ間隔延長の危険性がある、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む、薬剤として活性のある成分、によるＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型である患者の治療方法であって、
前記患者は、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型ではない個体に投与されるよりも低い用量を投与される、方法。
【請求項１４】
前記患者は、前記患者の遺伝子型、前記患者の表現型、及び前記患者がＣＹＰ２Ｄ６活性を減少させる薬剤で治療されている事実、の少なくとも１つに基づいて、ＣＹＰ２Ｄ６代謝欠損型であることが決定される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記患者の遺伝子型は、２５４９Ａ欠損、１８４６Ｇ＞Ａ、１７０７Ｔ欠損、２９３５Ａ＞Ｃ、１７５８Ｇ＞Ｔ、２６１３〜２６１５ＡＧＡ欠損、１０２３Ｃ＞Ｔ、２８５０Ｃ＞Ｔ、４１８０Ｇ＞Ｃ、１６５９Ｇ＞Ａ、１６６１Ｇ＞Ｃ、２８５０Ｃ＞Ｔ、３１８３Ｇ＞Ａ、−１５８４Ｃ、−１２３５Ａ＞Ｇ、−７４０Ｃ＞Ｔ、−６７８Ｇ＞Ａ、１００Ｃ＞Ｔ、２９８８Ｇ＞Ａ及びＣＹＰ２Ｄ６欠失からなる群から選択された少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６対立遺伝子を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記患者の遺伝子型は、ＣＹＰ２Ｄ６遺伝子の少なくとも１個の欠損を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記患者の遺伝子型は、イントロン１のＣＹＰ２Ｄ７遺伝子変換を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記患者は、統合失調症、分裂情動性障害、うつ病、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害及び統合失調症様障害の少なくとも１種に罹患している、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種を含む薬剤として活性のある成分で患者を治療する方法であって、
前記患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されているかどうかを決定するステップと、
前記患者がＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与されている場合、薬剤の投与量を削減するステップと、
を含む方法。
【請求項２０】
前記ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤は、パロキセチン、ドラセトロン、ベンラファキシン及びフルオキセチンの少なくとも１種を含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者は、統合失調症、分裂情動性障害、うつ病、双極性障害／うつ病、心不整脈、トゥーレット症候群、精神障害、妄想障害及び統合失調症様障害の少なくとも１種に罹患している、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
患者のＣＹＰ２Ｄ６表現型を決定する方法であって、
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種のある量を患者に投与するステップと、
前記患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第１濃度を測定するステップと、
を含む方法。
【請求項２３】
前記イロペリドン代謝物は、Ｐ８８及びＰ９５からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
第１濃度は、Ｐ８８及びＰ９５のそれぞれについて測定される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記患者は、Ｐ９５に対するＰ８８の第１濃度の比が約２．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者は、（Ｐ８８＋イロペリドン）／Ｐ９５の第１濃度の比が約１．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記患者は、Ｐ９５に対するイロペリドン及びＰ８８の第１濃度の比が約３．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を前記患者に投与するステップと、
前記患者血中のイロペリドン及びイロペリドン代謝物の少なくとも１種の第２濃度を測定するステップと、
前記第１濃度と前記第２濃度とを比較するステップと、
をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤は、パロキセチン、ケトコナゾール及びフルオキセチンからなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
第２濃度は、Ｐ８８及びＰ９５のそれぞれについて測定される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者は、Ｐ９５に対するＰ８８の第２濃度の比が約２．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
第１濃度及び第２濃度は、イロペリドン、Ｐ８８及びＰ９５のそれぞれについて測定される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記患者は、Ｐ９５に対するイロペリドン及びＰ８８の第２濃度の比が約３．０以上である場合、代謝欠損型と命名される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種の投与によって、患者はＱＴｃ間隔延長の危険性があるかどうかを決定する方法であって、
第１ＱＴｃ間隔を測定するステップと、
イロペリドン、イロペリドンの薬剤として許容される塩、イロペリドンの活性代謝物及びイロペリドンの活性代謝物の薬剤として許容される塩の少なくとも１種のある量を患者に投与するステップと、
第２ＱＴｃ間隔を測定するステップと、
前記第１ＱＴｃ間隔と前記第２ＱＴｃ間隔とを比較するステップと、
を含む方法。
【請求項３５】
患者に投与するイロペリドンの用量は、１日当たり約２４ミリグラムである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記投与するステップ後に、前記患者に少なくとも１種のＣＹＰ２Ｄ６阻害剤を投与するステップをさらに含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＣＹＰ２Ｄ６阻害剤は、パロキセチン、ケトコナゾール及びフルオキセチンからなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【公表番号】特表２０１２−５０２１０５（Ｐ２０１２−５０２１０５Ａ）
【公表日】平成２４年１月２６日（２０１２．１．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５２６９７２（Ｐ２０１１−５２６９７２）
【出願日】平成２１年９月１０日（２００９．９．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５６５１７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０３０７８３
【国際公開日】平成２２年３月１８日（２０１０．３．１８）
【出願人】（５０７０２１７０２）ヴァンダ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (20)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１月２６日（２０１２．１．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月１０日（２００９．９．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５６５１７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０３０７８３
【国際公開日】平成２２年３月１８日（２０１０．３．１８）
【出願人】（５０７０２１７０２）ヴァンダ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (20)
【Ｆターム（参考）】
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