エピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミドの抗腫瘍性誘導体の合成方法
本発明は、抗腫瘍剤としての治療法への応用が有効である、エピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド化合物の新規の調製方法を説明するものである。この方法は、アミノ官能基が保護されていない第一級アミン反応物を、４β−クロロアセトアミド−４’−エピポドフィロトキシンと、非プロトン性極性溶媒中で縮合する過程を含む。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の新規の調製方法に関するものである。
【０００２】
【化１】
【０００３】
該化学式において、Ｒは水素原子または−（ＣＨ２）ｃ−ＮＨ２基を表し、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である。
【０００４】
これらの化合物は、一部はエピポドフィロトキシンタイプのリグナン部によって、そしてもう一部は、アセトアミドのモチーフを有する、エピポドフィロトキシンの４位に共有結合されたポリアミン部で構成されている。
【０００５】
ポリアミン鎖が存在することで、特に塩酸塩に対する該ポリアミンの水溶特性、ならびに、ガン治療に特に利点のある薬学的特性が分子にもたらされる。
【背景技術】
【０００６】
これらの化合物は国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されており、特に充実性腫瘍またはメラノーマのような非充実性腫瘍、結腸ガン、肺ガン、前立腺ガン、膀胱ガン、乳ガン、子宮ガン、胃ガン、膵臓ガン、肝臓ガン、卵巣ガンの治療、ならびに、白血病、リンパ腫および骨髄腫、耳鼻咽喉領域のガンおよび脳腫瘍の治療において有効な抗腫瘍性化合物である。
【０００７】
化学式１の化合物を調製するための国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている合成方法では、化学式２のポドフィロトキシンが原料として用いられる。
【０００８】
【化２】
【０００９】
また、該方法では化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンが用いられる。
【００１０】
【化３】
【００１１】
該４’−デメチルエピポドフィロトキシンにおいて、クロロアセトニトリルを酸性溶媒で反応させることで、化学式４の４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成中間体が得られる。
【００１２】
【化４】
【００１３】
次に、この化合物を化学式５の第一級アミン反応物と縮合させる。
【００１４】
【化５】
【００１５】
該化学式５において、Ｒ’は水素または−（ＣＨ２）ｃ−ＮＨＰ鎖を表し、Ｐはアミノ官能基の保護基を表す。
【００１６】
適切な保護基は、ベンジル基、ベンジルオキシカルボニル基またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基とすることができる。この縮合は、ルイス塩基（トリエチルアミン）の存在下にある非プロトン性極性溶媒（アセトニトリル、ＤＭＦ）を含んだ溶媒の混合物の中で行われる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
しかしこの方法には、過程の数が多く、したがって全体収率がかなり低いということの他に、二つの不都合がある。
【００１８】
一方では、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットで用いられている条件が化学式１のエピポドフィロトキシン誘導体の２位にある炭素のエピ化に適しており、化学式７の「ピクロ」と名付けられたシス−ラクトン形状へとつながる。
【００１９】
【化６】
【００２０】
したがって、求められるトランスラクトン生成物の精製は難しく、手間がかかり、コストもかかるクロマトグラフィー操作が必要である。
【００２１】
他方では、上述した方法では、既に形成されている化学式１の生成物に対してもう一つの分子である４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの反応によって、ビスアルキル化タイプの副生成物ももたらされる。したがって、二次生成物の取得を最小限に抑えて原料の完全な変換を行うには、化学式５の第一級アミン余剰反応物の使用が必要となり、このことは、余剰アミンを回収するという難しい過程を必要とし、この方法が不経済となる。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
予期しなかったことに、本出願人は、ａ、ｂおよびＲが先述したものと同じ意味を有するが、アミノ官能基が保護されていない化学式６に対応する第一級アミン反応物を用いることで潜在的な二次生成物が最小化され、該二次生成物があっても最終的な純化された化合物を得るための主要な障害とはならないことを確認した。
【００２３】
【化７】
【００２４】
化学式４の４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと第一級アミン反応物との直接縮合は、該化合物のアミノ官能基を保護する補助過程を必要とせず、得られる生成物の収率および純度という点で満足できる条件で行うことができる。したがって、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されているように方法を実施するとき、ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化合物の場合、１１の過程を含む全体収率がおよそ１５％の合成から、わずか３つの過程で３０％の全体収率を得ることを可能にする本発明の目的である合成に移行することになる。
【００２５】
本発明の目的である合成の枠組みでは、反応物の化学量論的量が利用され、これによって該反応物のコストが最小化される。
【００２６】
反応の卓越した生成物は、第一級アミンの大半の置換によって直鎖化合物を形成するアルキル化生成物である。このような反応性の選択可能性は、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている合成経路を用いて得られる二次生成物を考慮すれば驚くべきことである。保護されていないアミンの使用の多くは、求められている生成物へとつながるのである。
【００２７】
また、この方法は、第一級アミン反応物を保護する過程が必要でなくなるため、過程の数が抑えられるという利点も有している。
【００２８】
したがって、本発明は、化学式４の中間体４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、アミノ官能基の事前の保護を含んでいない化学式６の第一級アミン反応物を縮合する過程を含む、化学式１の化合物の合成方法に関するものである。
【００２９】
化学式１の化合物は、好ましくは塩酸塩の形状で得られる。
【００３０】
この縮合反応は直接行われ、用いられる化学式６の第一級アミン反応物のいかなるアミノ官能基も、どのようなものであれ、適切な保護基による保護を必要としない。
【００３１】
好ましくは、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の保護されていない第一級アミン反応物を縮合する過程は、非プロトン性極性溶媒の中で行われる。
【００３２】
好ましくは、縮合過程の際に用いられる非プロトン性極性溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンあるいはジメチルスルホキシドから選択される。
【００３３】
また好ましくは、縮合反応は−２０℃と３０℃の間に含まれる温度の範囲で行われる。数十グラムの量について操作が行われるときには発熱が観察されるため、反応温度を制御することが好ましい。したがって、より好ましくは、温度は０℃に維持される。
【００３４】
また、本発明は、化学式４の中間体４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合過程の後に化合物１の回収過程が行われる、化学式１の化合物の合成方法にも関するものである。
【００３５】
化学式１の生成物の回収過程は、好ましくは、メタノールまたはエタノールのようなアルコール溶媒中での沈殿によって行われ、該沈殿の後に、酸性溶媒において逆相でのクロマトグラフィー過程が続く。化合物は塩酸のような酸性溶液中で精製される。該化合物は、「ピクロ」誘導体につながるラクトン部位においてエピ化の危険にさらされない。最後の凍結乾燥によって求められる化合物の塩を単離することができる。
【００３６】
また好ましくは、化学式６の保護されていない第一級アミン反応物として、以下の化学式８および化学式９のスペルミンまたはスペルミジンが用いられる。
【００３７】
【化８】
【００３８】
【化９】
【００３９】
スペルミジンとの縮合の場合、化学式１の２つの異性体化合物である非対称ポリアミンが同量得られる（ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈおよびａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化合物）。
【００４０】
スペルミンとの縮合の場合、得られるのはａ＝３、ｂ＝４そしてＲ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物である。
【００４１】
したがって、本発明はまた、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンの縮合過程と、該過程に続くこの化合物の回収過程を含んでいる。
【００４２】
本発明はまた、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンの縮合過程と、該過程に続くこの化合物の回収過程を含んでいる。
【００４３】
また、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミンの縮合過程と、該過程に続くこの化合物の回収過程を含んでいる。
【００４４】
本発明は、第一級アミン反応物と化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの間の縮合過程を実施する方法にしたがって、一般化学式１の化合物の調製に対する化学式６の第一級アミン反応物の使用にも関するものである。
【００４５】
また、本発明は、化学式２のポドフィロトキシンから化学式１の化合物を調製する方法にも関するものであり、該方法は、以下の過程を含み、また、過程ｃ）で用いられる第一級アミン反応物が化学式６の反応物であることを特徴とする。過程ｃ）の縮合は、用いられる第一級アミン反応物のアミン機能を何らかの保護基によって保護する過程なしに、直接行われる。
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程。
ｂ）４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程。
ｃ）４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物を縮合する過程。
【００４６】
過程ａ）は、好ましくは国際公開第９７／２１７１３号パンフレットに記載の方法、つまり、有機酸もしくは無機酸の存在下または水の存在下、水混和性有機溶剤を使用もしくは使用せずに、一組の試薬すなわち強酸および脂肪族、芳香族もしくは官能化スルフィドを用いたポドフィロトキシン処理を用いた方法によって行なわれる。
【００４７】
過程ｂ）は、好ましくは国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載の方法、つまり、酸性溶媒におけるクロロアセトニトリルによって先行過程で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンの反応によって行われる。
【００４８】
過程ｃ）ならびに後続する回収過程は前述したように行われ、用いられる第一級アミン反応物はアミノ官能基に対していかなる保護も含んでいない。
【００４９】
回収過程の後、一般化学式１の化合物は、場合によっては無機酸または有機酸によって塩化される。
【００５０】
好ましくは、縮合過程ｃ）は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたはジメチルスルホキシドから選択される非プロトン性極性溶媒で行われる。
【００５１】
また好ましくは、縮合反応は、−２０℃と３０℃の間に含まれる範囲の温度で、より特徴的には０℃で行われる。
【００５２】
化学式１の化合物の回収過程は、好ましくは、メタノールまたはエタノールのようなアルコール溶媒中での沈殿によって行われ、これに酸性溶媒における逆相クロマトグラフィー過程が続く。化合物は塩酸のような酸性溶液中で精製される。
【００５３】
また好ましくは、縮合過程ｃ）で用いられる化学式６の保護されていない第一級アミン反応物は、スペルミンまたはスペルミジンである。
【００５４】
過程ｃ）で用いられるのがスペルミジンであるとき、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈと、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の２つの異性体化合物が同量得られることになる。
【００５５】
スペルミンによる縮合の場合、得られるのはａ＝３、ｂ＝４かつＲ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物である。
【００５６】
また、本発明は、前述した過程ａ）、ｂ）そしてｃ）にしたがったポドフィロトキシンからの一般化学式１の化合物の調製における、化学式６の第一級アミン反応物の使用も対象としている。
【００５７】
また、本発明はａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化合物、または、ａ＝４、ｂ＝３かつＲ＝Ｈである化合物、すなわち、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミド、または、２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミジンと縮合する過程
を含んでいる。
【００５８】
これら３つの過程の後に、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドまたは２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの回収過程が続き、これらの生成物は、場合によっては無機酸または有機酸によって塩化される。
【００５９】
また、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４かつＲ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物、すなわち、２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミンと縮合する過程
を含み、該過程の後に、２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの回収過程と、場合によっては塩化過程が続く。
【発明を実施するための形態】
【００６０】
以下の実施例は本発明の範囲を限定することなく、本発明を例示するものである。
【実施例１】
【００６１】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンおよび保護されていないアミノ官能基を有するスペルミンからの、塩酸塩の形状のａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成。
合成のスキーマは次の通りである。
【００６２】
【化１０】
【００６３】
５ｍＬのＤＭＦ溶液中にある１ｇ（２．１ｍｍｏｌ）の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに、５ｍＬのＤＭＦ中にある化学式８のスペルミンを０．４３ｇ（２．１ｍｍｏｌ）加えた。攪拌を５時間維持した。それから２０ｍＬのＥｔＯＨを加え、次に、ｐＨがわずかに酸性になるまでイソプロパノール／ＨＣｌ溶液を添加した。塩酸塩が沈殿した。結晶を濾過し、乾燥することで、粗化合物１を１．９ｇ得た。分取ＨＰＬＣによって精製を行った（Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ １００ ＲＰ １８、ＨＣｌ溶出：ｃ＝５ｍＭ）。画分を凍結乾燥し、次にエチルエーテルにとり、９７％の純度、４０％の収率で非晶形の化合物１の塩酸塩が得られた。
【００６４】
Ｆ℃：２６７℃．１Ｈ ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ）δ９．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３２ Ｈｚ，ＮＨＣＯ），８．２７（ｓ，１Ｈ，ＡｒＯＨ），６．８０（ｓ，１Ｈ，Ｈ５），６．５５（ｓ，１Ｈ，Ｈ８），６．２３（ｓ，２Ｈ，Ｈ２’，Ｈ６’），６．０１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１２ Ｈｚ，ＯＣＨ２Ｏ），５．２３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３および８．１ Ｈｚ，Ｈ４），４．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２ Ｈｚ，Ｈ１），４．２８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８ Ｈｚ，Ｈ１１ａ），３．９４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８および１０．４ Ｈｚ，Ｈ１１ｂ），３．８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６３（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３），３．２２（ｄｄ，１Ｈ，ｊ＝５および１４．４ Ｈｚ，Ｈ２），３．０６（ｍ，３Ｈ，Ｈ３およびＣＨ２ＮＨ），２．９９（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２ＮＨ），２．８９（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２ＮＨ），２．０８（ｔ，Ｊ＝７．６ Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２飽和），１．９９（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，ＣＨ２飽和），１．７３（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２飽和）．ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）６４２．２（ＭＨ＋）．分析：Ｃ３３Ｈ４７Ｎ５Ｏ８，４ＨＣｌ，計算値 Ｃ％５０．３２，Ｈ％６．５３，Ｎ％８．８９．測定値 Ｃ％５０．２６４，Ｈ％６．５７，Ｎ％８．６６。
【実施例２】
【００６５】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンおよび保護されていないアミノ官能基を有するスペルミジンから、
塩酸塩の形状の、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミド、
ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
この合成のスキーマは次の通りである。
【００６６】
【化１１】
【００６７】
実施例１の誘導体に対するものと同一の条件において、しかしスペルミンを化学式９のスペルミジンに置換することで、化学式１の化合物を得た（生成物Ａ：ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈ、生成物Ｂ：ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈ）。実施例１と同様、４０％の全体収率で、これら２つの生成物を均等の割合で単離した。
【００６８】
これらの生成物は、あらゆる点で、それぞれ国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットの実施例３１と実施例３２で得られている化合物と同一である。
【００６９】
これらの実施例１および実施例２は、スペルミンまたはスペルミジンの代わりに、対応する化学式６の保護されていない第一級アミン反応物を用いることで、化学式１のあらゆる化合物の合成に転置することができる。
【実施例３】
【００７０】
ポドフィロトキシンからの、
３つの過程による塩酸塩の形状の、ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成。
【００７１】
第一段階。
合成のスキーマは次の通りである。
【００７２】
【化１２】
【００７３】
１０ｇ（２４ｎｍｏｌ）のポドフィロトキシンを６０ｍｌのトリフルオロ酢酸に溶解した。５．４ｍｌ（７２ｍｍｏｌ）のメタンスルホン酸を徐々に加えた。９時間にわたって攪拌を維持し、再び５．４ｍｌ（７２ｍｍｏｌ）の硫化ジメチルを添加し、９時間攪拌を維持した。溶媒を氷（６００ｍｌ）に広げ、酢酸エチル（３×３００ｍｌ）によって抽出した。有機相を水で洗浄し、次に、中性となるまでＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過、蒸発させた後、次の段階ですぐに使う４’−デメチルエピポドフィロトキシンを６．３ｇ得た。
【００７４】
第２段階。
３０ｇの４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４７．４ｍｌのクロロアセトニトリルに加え、次に、攪拌下において、濃縮した硫酸を３滴加えた。攪拌は室温で３時間維持した。それから、３００ｍｌのイソプロパノールを攪拌下で添加した。得られた沈殿物を濾過し、２００ｍｌのイソプロパノールで洗浄した。中性ｐＨとなるまで沈殿物を水で洗浄し、次にエチルエーテルで洗浄した。真空下で乾燥後、４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに対応する白色固体（ＰＦ＝２４０℃）が３４．２ｇ（収率９６％）得られた。
【００７５】
第３段階。
先行過程で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンから、化学式１の生成物（ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３）を得るための実施例１で説明した方法にしたがって合成を遂行した。
【００７６】
この実施例は、対応する化学式６の保護されていない第一級アミン反応物を用いて化学式１のあらゆる化合物に転置することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００７７】
【特許文献１】国際公開第２００５／１００３６３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９７／２１７１３号パンフレット
【技術分野】
【０００１】
本発明は化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の新規の調製方法に関するものである。
【０００２】
【化１】
【０００３】
該化学式において、Ｒは水素原子または−（ＣＨ２）ｃ−ＮＨ２基を表し、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である。
【０００４】
これらの化合物は、一部はエピポドフィロトキシンタイプのリグナン部によって、そしてもう一部は、アセトアミドのモチーフを有する、エピポドフィロトキシンの４位に共有結合されたポリアミン部で構成されている。
【０００５】
ポリアミン鎖が存在することで、特に塩酸塩に対する該ポリアミンの水溶特性、ならびに、ガン治療に特に利点のある薬学的特性が分子にもたらされる。
【背景技術】
【０００６】
これらの化合物は国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されており、特に充実性腫瘍またはメラノーマのような非充実性腫瘍、結腸ガン、肺ガン、前立腺ガン、膀胱ガン、乳ガン、子宮ガン、胃ガン、膵臓ガン、肝臓ガン、卵巣ガンの治療、ならびに、白血病、リンパ腫および骨髄腫、耳鼻咽喉領域のガンおよび脳腫瘍の治療において有効な抗腫瘍性化合物である。
【０００７】
化学式１の化合物を調製するための国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている合成方法では、化学式２のポドフィロトキシンが原料として用いられる。
【０００８】
【化２】
【０００９】
また、該方法では化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンが用いられる。
【００１０】
【化３】
【００１１】
該４’−デメチルエピポドフィロトキシンにおいて、クロロアセトニトリルを酸性溶媒で反応させることで、化学式４の４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成中間体が得られる。
【００１２】
【化４】
【００１３】
次に、この化合物を化学式５の第一級アミン反応物と縮合させる。
【００１４】
【化５】
【００１５】
該化学式５において、Ｒ’は水素または−（ＣＨ２）ｃ−ＮＨＰ鎖を表し、Ｐはアミノ官能基の保護基を表す。
【００１６】
適切な保護基は、ベンジル基、ベンジルオキシカルボニル基またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基とすることができる。この縮合は、ルイス塩基（トリエチルアミン）の存在下にある非プロトン性極性溶媒（アセトニトリル、ＤＭＦ）を含んだ溶媒の混合物の中で行われる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
しかしこの方法には、過程の数が多く、したがって全体収率がかなり低いということの他に、二つの不都合がある。
【００１８】
一方では、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットで用いられている条件が化学式１のエピポドフィロトキシン誘導体の２位にある炭素のエピ化に適しており、化学式７の「ピクロ」と名付けられたシス−ラクトン形状へとつながる。
【００１９】
【化６】
【００２０】
したがって、求められるトランスラクトン生成物の精製は難しく、手間がかかり、コストもかかるクロマトグラフィー操作が必要である。
【００２１】
他方では、上述した方法では、既に形成されている化学式１の生成物に対してもう一つの分子である４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの反応によって、ビスアルキル化タイプの副生成物ももたらされる。したがって、二次生成物の取得を最小限に抑えて原料の完全な変換を行うには、化学式５の第一級アミン余剰反応物の使用が必要となり、このことは、余剰アミンを回収するという難しい過程を必要とし、この方法が不経済となる。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
予期しなかったことに、本出願人は、ａ、ｂおよびＲが先述したものと同じ意味を有するが、アミノ官能基が保護されていない化学式６に対応する第一級アミン反応物を用いることで潜在的な二次生成物が最小化され、該二次生成物があっても最終的な純化された化合物を得るための主要な障害とはならないことを確認した。
【００２３】
【化７】
【００２４】
化学式４の４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと第一級アミン反応物との直接縮合は、該化合物のアミノ官能基を保護する補助過程を必要とせず、得られる生成物の収率および純度という点で満足できる条件で行うことができる。したがって、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されているように方法を実施するとき、ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化合物の場合、１１の過程を含む全体収率がおよそ１５％の合成から、わずか３つの過程で３０％の全体収率を得ることを可能にする本発明の目的である合成に移行することになる。
【００２５】
本発明の目的である合成の枠組みでは、反応物の化学量論的量が利用され、これによって該反応物のコストが最小化される。
【００２６】
反応の卓越した生成物は、第一級アミンの大半の置換によって直鎖化合物を形成するアルキル化生成物である。このような反応性の選択可能性は、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている合成経路を用いて得られる二次生成物を考慮すれば驚くべきことである。保護されていないアミンの使用の多くは、求められている生成物へとつながるのである。
【００２７】
また、この方法は、第一級アミン反応物を保護する過程が必要でなくなるため、過程の数が抑えられるという利点も有している。
【００２８】
したがって、本発明は、化学式４の中間体４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、アミノ官能基の事前の保護を含んでいない化学式６の第一級アミン反応物を縮合する過程を含む、化学式１の化合物の合成方法に関するものである。
【００２９】
化学式１の化合物は、好ましくは塩酸塩の形状で得られる。
【００３０】
この縮合反応は直接行われ、用いられる化学式６の第一級アミン反応物のいかなるアミノ官能基も、どのようなものであれ、適切な保護基による保護を必要としない。
【００３１】
好ましくは、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の保護されていない第一級アミン反応物を縮合する過程は、非プロトン性極性溶媒の中で行われる。
【００３２】
好ましくは、縮合過程の際に用いられる非プロトン性極性溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンあるいはジメチルスルホキシドから選択される。
【００３３】
また好ましくは、縮合反応は−２０℃と３０℃の間に含まれる温度の範囲で行われる。数十グラムの量について操作が行われるときには発熱が観察されるため、反応温度を制御することが好ましい。したがって、より好ましくは、温度は０℃に維持される。
【００３４】
また、本発明は、化学式４の中間体４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合過程の後に化合物１の回収過程が行われる、化学式１の化合物の合成方法にも関するものである。
【００３５】
化学式１の生成物の回収過程は、好ましくは、メタノールまたはエタノールのようなアルコール溶媒中での沈殿によって行われ、該沈殿の後に、酸性溶媒において逆相でのクロマトグラフィー過程が続く。化合物は塩酸のような酸性溶液中で精製される。該化合物は、「ピクロ」誘導体につながるラクトン部位においてエピ化の危険にさらされない。最後の凍結乾燥によって求められる化合物の塩を単離することができる。
【００３６】
また好ましくは、化学式６の保護されていない第一級アミン反応物として、以下の化学式８および化学式９のスペルミンまたはスペルミジンが用いられる。
【００３７】
【化８】
【００３８】
【化９】
【００３９】
スペルミジンとの縮合の場合、化学式１の２つの異性体化合物である非対称ポリアミンが同量得られる（ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈおよびａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化合物）。
【００４０】
スペルミンとの縮合の場合、得られるのはａ＝３、ｂ＝４そしてＲ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物である。
【００４１】
したがって、本発明はまた、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンの縮合過程と、該過程に続くこの化合物の回収過程を含んでいる。
【００４２】
本発明はまた、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンの縮合過程と、該過程に続くこの化合物の回収過程を含んでいる。
【００４３】
また、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミンの縮合過程と、該過程に続くこの化合物の回収過程を含んでいる。
【００４４】
本発明は、第一級アミン反応物と化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの間の縮合過程を実施する方法にしたがって、一般化学式１の化合物の調製に対する化学式６の第一級アミン反応物の使用にも関するものである。
【００４５】
また、本発明は、化学式２のポドフィロトキシンから化学式１の化合物を調製する方法にも関するものであり、該方法は、以下の過程を含み、また、過程ｃ）で用いられる第一級アミン反応物が化学式６の反応物であることを特徴とする。過程ｃ）の縮合は、用いられる第一級アミン反応物のアミン機能を何らかの保護基によって保護する過程なしに、直接行われる。
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程。
ｂ）４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程。
ｃ）４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物を縮合する過程。
【００４６】
過程ａ）は、好ましくは国際公開第９７／２１７１３号パンフレットに記載の方法、つまり、有機酸もしくは無機酸の存在下または水の存在下、水混和性有機溶剤を使用もしくは使用せずに、一組の試薬すなわち強酸および脂肪族、芳香族もしくは官能化スルフィドを用いたポドフィロトキシン処理を用いた方法によって行なわれる。
【００４７】
過程ｂ）は、好ましくは国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載の方法、つまり、酸性溶媒におけるクロロアセトニトリルによって先行過程で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンの反応によって行われる。
【００４８】
過程ｃ）ならびに後続する回収過程は前述したように行われ、用いられる第一級アミン反応物はアミノ官能基に対していかなる保護も含んでいない。
【００４９】
回収過程の後、一般化学式１の化合物は、場合によっては無機酸または有機酸によって塩化される。
【００５０】
好ましくは、縮合過程ｃ）は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたはジメチルスルホキシドから選択される非プロトン性極性溶媒で行われる。
【００５１】
また好ましくは、縮合反応は、−２０℃と３０℃の間に含まれる範囲の温度で、より特徴的には０℃で行われる。
【００５２】
化学式１の化合物の回収過程は、好ましくは、メタノールまたはエタノールのようなアルコール溶媒中での沈殿によって行われ、これに酸性溶媒における逆相クロマトグラフィー過程が続く。化合物は塩酸のような酸性溶液中で精製される。
【００５３】
また好ましくは、縮合過程ｃ）で用いられる化学式６の保護されていない第一級アミン反応物は、スペルミンまたはスペルミジンである。
【００５４】
過程ｃ）で用いられるのがスペルミジンであるとき、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈと、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の２つの異性体化合物が同量得られることになる。
【００５５】
スペルミンによる縮合の場合、得られるのはａ＝３、ｂ＝４かつＲ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物である。
【００５６】
また、本発明は、前述した過程ａ）、ｂ）そしてｃ）にしたがったポドフィロトキシンからの一般化学式１の化合物の調製における、化学式６の第一級アミン反応物の使用も対象としている。
【００５７】
また、本発明はａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化合物、または、ａ＝４、ｂ＝３かつＲ＝Ｈである化合物、すなわち、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミド、または、２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミジンと縮合する過程
を含んでいる。
【００５８】
これら３つの過程の後に、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドまたは２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの回収過程が続き、これらの生成物は、場合によっては無機酸または有機酸によって塩化される。
【００５９】
また、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４かつＲ＝（ＣＨ２）３−ＮＨ２である化合物、すなわち、２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミンと縮合する過程
を含み、該過程の後に、２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの回収過程と、場合によっては塩化過程が続く。
【発明を実施するための形態】
【００６０】
以下の実施例は本発明の範囲を限定することなく、本発明を例示するものである。
【実施例１】
【００６１】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンおよび保護されていないアミノ官能基を有するスペルミンからの、塩酸塩の形状のａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成。
合成のスキーマは次の通りである。
【００６２】
【化１０】
【００６３】
５ｍＬのＤＭＦ溶液中にある１ｇ（２．１ｍｍｏｌ）の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに、５ｍＬのＤＭＦ中にある化学式８のスペルミンを０．４３ｇ（２．１ｍｍｏｌ）加えた。攪拌を５時間維持した。それから２０ｍＬのＥｔＯＨを加え、次に、ｐＨがわずかに酸性になるまでイソプロパノール／ＨＣｌ溶液を添加した。塩酸塩が沈殿した。結晶を濾過し、乾燥することで、粗化合物１を１．９ｇ得た。分取ＨＰＬＣによって精製を行った（Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ １００ ＲＰ １８、ＨＣｌ溶出：ｃ＝５ｍＭ）。画分を凍結乾燥し、次にエチルエーテルにとり、９７％の純度、４０％の収率で非晶形の化合物１の塩酸塩が得られた。
【００６４】
Ｆ℃：２６７℃．１Ｈ ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ）δ９．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３２ Ｈｚ，ＮＨＣＯ），８．２７（ｓ，１Ｈ，ＡｒＯＨ），６．８０（ｓ，１Ｈ，Ｈ５），６．５５（ｓ，１Ｈ，Ｈ８），６．２３（ｓ，２Ｈ，Ｈ２’，Ｈ６’），６．０１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１２ Ｈｚ，ＯＣＨ２Ｏ），５．２３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３および８．１ Ｈｚ，Ｈ４），４．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２ Ｈｚ，Ｈ１），４．２８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８ Ｈｚ，Ｈ１１ａ），３．９４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８および１０．４ Ｈｚ，Ｈ１１ｂ），３．８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６３（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３），３．２２（ｄｄ，１Ｈ，ｊ＝５および１４．４ Ｈｚ，Ｈ２），３．０６（ｍ，３Ｈ，Ｈ３およびＣＨ２ＮＨ），２．９９（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２ＮＨ），２．８９（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２ＮＨ），２．０８（ｔ，Ｊ＝７．６ Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２飽和），１．９９（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，ＣＨ２飽和），１．７３（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２飽和）．ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）６４２．２（ＭＨ＋）．分析：Ｃ３３Ｈ４７Ｎ５Ｏ８，４ＨＣｌ，計算値 Ｃ％５０．３２，Ｈ％６．５３，Ｎ％８．８９．測定値 Ｃ％５０．２６４，Ｈ％６．５７，Ｎ％８．６６。
【実施例２】
【００６５】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンおよび保護されていないアミノ官能基を有するスペルミジンから、
塩酸塩の形状の、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミド、
ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
この合成のスキーマは次の通りである。
【００６６】
【化１１】
【００６７】
実施例１の誘導体に対するものと同一の条件において、しかしスペルミンを化学式９のスペルミジンに置換することで、化学式１の化合物を得た（生成物Ａ：ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈ、生成物Ｂ：ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈ）。実施例１と同様、４０％の全体収率で、これら２つの生成物を均等の割合で単離した。
【００６８】
これらの生成物は、あらゆる点で、それぞれ国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットの実施例３１と実施例３２で得られている化合物と同一である。
【００６９】
これらの実施例１および実施例２は、スペルミンまたはスペルミジンの代わりに、対応する化学式６の保護されていない第一級アミン反応物を用いることで、化学式１のあらゆる化合物の合成に転置することができる。
【実施例３】
【００７０】
ポドフィロトキシンからの、
３つの過程による塩酸塩の形状の、ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの合成。
【００７１】
第一段階。
合成のスキーマは次の通りである。
【００７２】
【化１２】
【００７３】
１０ｇ（２４ｎｍｏｌ）のポドフィロトキシンを６０ｍｌのトリフルオロ酢酸に溶解した。５．４ｍｌ（７２ｍｍｏｌ）のメタンスルホン酸を徐々に加えた。９時間にわたって攪拌を維持し、再び５．４ｍｌ（７２ｍｍｏｌ）の硫化ジメチルを添加し、９時間攪拌を維持した。溶媒を氷（６００ｍｌ）に広げ、酢酸エチル（３×３００ｍｌ）によって抽出した。有機相を水で洗浄し、次に、中性となるまでＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過、蒸発させた後、次の段階ですぐに使う４’−デメチルエピポドフィロトキシンを６．３ｇ得た。
【００７４】
第２段階。
３０ｇの４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４７．４ｍｌのクロロアセトニトリルに加え、次に、攪拌下において、濃縮した硫酸を３滴加えた。攪拌は室温で３時間維持した。それから、３００ｍｌのイソプロパノールを攪拌下で添加した。得られた沈殿物を濾過し、２００ｍｌのイソプロパノールで洗浄した。中性ｐＨとなるまで沈殿物を水で洗浄し、次にエチルエーテルで洗浄した。真空下で乾燥後、４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに対応する白色固体（ＰＦ＝２４０℃）が３４．２ｇ（収率９６％）得られた。
【００７５】
第３段階。
先行過程で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンから、化学式１の生成物（ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３）を得るための実施例１で説明した方法にしたがって合成を遂行した。
【００７６】
この実施例は、対応する化学式６の保護されていない第一級アミン反応物を用いて化学式１のあらゆる化合物に転置することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００７７】
【特許文献１】国際公開第２００５／１００３６３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９７／２１７１３号パンフレット
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
Ｒが水素原子または−（ＣＨ２）ｃ−ＮＨ２基であり、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である、化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の調製方法であり、
【化２】
化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを、ａ、ｂ、ｃおよびＲが前述したものと同じ意味を有し、アミノ官能基の事前の保護を含んでいない化学式６、
【化３】
の第一級アミン反応物と縮合する過程を含むことを特徴とする調製方法。
【請求項２】
塩酸塩の形状で得られることを特徴とする、請求項１に記載の化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体の調製方法。
【請求項３】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合過程が、好ましくはジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたはジメチルスルホキシドから選択される非プロトン性極性溶媒の中で行われることを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合反応が、−２０℃と＋３０℃の間に含まれる温度の範囲、好ましくは０℃で行われることを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項５】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合反応の後に、一般化学式１の生成物を回収する過程が続くことを特徴とする、請求項１〜請求項４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項６】
化学式１の化合物の回収が、アルコール溶媒中での沈殿と、該沈殿に続く酸性溶媒における逆相クロマトグラフィーによって行われることを特徴とする、請求項１〜請求項５のいずれか一つに記載の方法。
【請求項７】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとの縮合過程の際に用いられる一般化学式６の第一級アミン反応物が、スペルミンまたはスペルミンであることを特徴とする、請求項１〜請求項６のいずれか一つに記載の方法。
【請求項８】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンとの縮合過程を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の、ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項９】
化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンとの縮合過程を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１０】
化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンとの縮合過程を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１１】
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
【化４】
【化５】
ｂ）過程ａ）で得られた化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
【化６】
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式６の第一級アミン反応物と縮合する過程
を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の化学式１の化合物の調製方法。
【請求項１２】
ａ）ポドフィロトキシンから４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミンと縮合する過程を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の、ａ＝３、ｂ＝４かつｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１３】
ａ）ポドフィロトキシンから４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミジンと縮合する過程
を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の、ａ＝３、ｂ＝４かつＲ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１４】
ａ）ポドフィロトキシンから４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミジンと縮合する過程
を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の、ａ＝４、ｂ＝３かつＲ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１５】
請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の一般化学式１の化合物を調製するための、一般化学式６の化合物の使用方法。
【請求項１６】
請求項１１〜請求項１４のいずれか一つに記載の一般化学式１の化合物を調製するための、一般化学式６の化合物の使用方法。
【請求項１】
【化１】
Ｒが水素原子または−（ＣＨ２）ｃ−ＮＨ２基であり、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である、化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の調製方法であり、
【化２】
化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを、ａ、ｂ、ｃおよびＲが前述したものと同じ意味を有し、アミノ官能基の事前の保護を含んでいない化学式６、
【化３】
の第一級アミン反応物と縮合する過程を含むことを特徴とする調製方法。
【請求項２】
塩酸塩の形状で得られることを特徴とする、請求項１に記載の化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体の調製方法。
【請求項３】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合過程が、好ましくはジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたはジメチルスルホキシドから選択される非プロトン性極性溶媒の中で行われることを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合反応が、−２０℃と＋３０℃の間に含まれる温度の範囲、好ましくは０℃で行われることを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項５】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の第一級アミン反応物との縮合反応の後に、一般化学式１の生成物を回収する過程が続くことを特徴とする、請求項１〜請求項４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項６】
化学式１の化合物の回収が、アルコール溶媒中での沈殿と、該沈殿に続く酸性溶媒における逆相クロマトグラフィーによって行われることを特徴とする、請求項１〜請求項５のいずれか一つに記載の方法。
【請求項７】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとの縮合過程の際に用いられる一般化学式６の第一級アミン反応物が、スペルミンまたはスペルミンであることを特徴とする、請求項１〜請求項６のいずれか一つに記載の方法。
【請求項８】
４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンとの縮合過程を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の、ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項９】
化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンとの縮合過程を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１０】
化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとスペルミジンとの縮合過程を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１１】
ａ）化学式２のポドフィロトキシンから化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
【化４】
【化５】
ｂ）過程ａ）で得られた化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンを、化学式４の４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
【化６】
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを化学式６の第一級アミン反応物と縮合する過程
を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の化学式１の化合物の調製方法。
【請求項１２】
ａ）ポドフィロトキシンから４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミンと縮合する過程を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の、ａ＝３、ｂ＝４かつｃ＝３である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１３】
ａ）ポドフィロトキシンから４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミジンと縮合する過程
を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の、ａ＝３、ｂ＝４かつＲ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１４】
ａ）ポドフィロトキシンから４’−デメチルエピポドフィロトキシンを調製する過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた４’−デメチルエピポドフィロトキシンを４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに変換する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた４β−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンをスペルミジンと縮合する過程
を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の、ａ＝４、ｂ＝３かつＲ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製方法。
【請求項１５】
請求項１〜請求項７のいずれか一つに記載の一般化学式１の化合物を調製するための、一般化学式６の化合物の使用方法。
【請求項１６】
請求項１１〜請求項１４のいずれか一つに記載の一般化学式１の化合物を調製するための、一般化学式６の化合物の使用方法。
【公表番号】特表２０１０−５４０５０５（Ｐ２０１０−５４０５０５Ａ）
【公表日】平成２２年１２月２４日（２０１０．１２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５２６３４１（Ｐ２０１０−５２６３４１）
【出願日】平成２０年９月２３日（２００８．９．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００８／０５１６９７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５０３６３
【国際公開日】平成２１年４月２３日（２００９．４．２３）
【出願人】（５０４２４９１４５）
【氏名又は名称原語表記】ＰＩＥＲＲＥ ＦＡＢＲＥ ＭＥＤＩＣＡＭＥＮＴ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１２月２４日（２０１０．１２．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年９月２３日（２００８．９．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００８／０５１６９７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５０３６３
【国際公開日】平成２１年４月２３日（２００９．４．２３）
【出願人】（５０４２４９１４５）
【氏名又は名称原語表記】ＰＩＥＲＲＥ ＦＡＢＲＥ ＭＥＤＩＣＡＭＥＮＴ
【Ｆターム（参考）】
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