エフェクター機能が向上した抗体

【課題】エフェクター機能が増強された抗体、該抗体を簡易に製造する方法、抗体のエフェクター機能を向上させる方法、及び該抗体を含み、薬理活性が高く投与量を低減でき、しかも副作用が少なく、広範な用途に利用可能な治療用組成物を提供する。
【解決手段】（１）特定の位置の複数のアミノ酸が置換したムテイン抗体、（２）抗体に結合する糖鎖のフコースが低減された抗体であって、ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸が、システイン残基に置き換えられた抗体。

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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸がシステイン残基に置き換えられた抗体であって、以下の（a）及び／又は（b）に記載の特徴を有する抗体；
（a）定常領域において295番目以外の３つのアミノ酸が他のアミノ酸に置き換えられた抗体、及び／又は
（b）Ｆｃ領域に結合しているN-グリコシド結合糖鎖において還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない抗体。
【請求項２】
ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で298、333、334、及び295番目のアミノ酸が、それぞれ、アラニン、アラニン、アラニン、及びシステイン残基に置き換えられたことを特徴とする抗体。
【請求項３】
ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で239、330、332、及び295番目のアミノ酸が、それぞれ、アスパラギン酸、ロイシン、グルタミン酸、及びシステイン残基に置き換えられたことを特徴とする抗体。
【請求項４】
ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸が、システイン残基に置き換えられた抗体であって、Ｆｃ領域に結合しているN-グリコシド結合糖鎖において還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない抗体。
【請求項５】
定常領域がヒトＩｇＧの定常領域である請求項１から４の何れかの項に記載の抗体。
【請求項６】
ヒト細胞表層存在分子を認識する部位を有する、請求項１から５の何れかの項に記載の抗体。
【請求項７】
サイトカイン受容体、細胞接着分子、がん細胞表層分子、がん幹細胞表層分子、血液細胞表層分子、ウイルス感染細胞表層分子からなる群から選択される少なくとも一つを認識する、請求項１から６の何れかの項に記載の抗体。
【請求項８】
抗原ＣＤ３、ＣＤ１１ａ、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ５２、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＥＧＦ受容体、ＥｐＣＡＭ、ＭＵＣ１、ＧＤ３、ＣＥＡ、ＣＡ１２５、ＨＬＡ−ＤＲ、ＴＮＦａｌｐｈａ受容体、ＶＥＧＦ受容体、ＣＴＬＡ−４、ＡＩＬＩＭ／ＩＣＯＳ、インテグリン分子からなる群から選択される少なくとも一つを認識する、請求項１から７の何れかの項に記載の抗体。
【請求項９】
請求項１から８の何れかの項に記載の抗体をコードする単離された核酸。
【請求項１０】
請求項９に記載の核酸を含むベクター。
【請求項１１】
請求項１０に記載のベクターを有する宿主細胞又は宿主生物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の宿主細胞又は宿主生物を、核酸がコードする抗体を発現するように培養することを特徴とする抗体の製造方法。
【請求項１３】
請求項１から８の何れかの項に記載の抗体を含む治療用組成物。
【請求項１４】
ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸残基がシステイン残基に置き換えられたエフェクター機能を有する抗体を発現する細胞であって、還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースを付加する酵素の活性が低減、または欠失した細胞。
【請求項１５】
以下（１）から（３）の工程を含むエフェクター機能が向上した抗体の製造方法；
（１）エフェクター機能を有する抗体におけるＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で298、333、334、及び295番目のアミノ酸を、それぞれ、アラニン、アラニン、アラニン、及びシステイン残基に置き換える工程、
（２）ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で298、333、334、及び295番目のアミノ酸が、それぞれ、アラニン、アラニン、アラニン、及びシステイン残基に置換されたＨ鎖をコードするDNA、及び、Ｌ鎖をコードするDNAを宿主細胞又は宿主生物に導入し、該DNAを発現させる工程、及び
（３）発現産物を回収する工程。
【請求項１６】
以下（１）から（３）の工程を含むエフェクター機能が向上した抗体の製造方法；
（１）エフェクター機能を有する抗体におけるＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で239、330、332、及び295番目のアミノ酸を、それぞれ、アスパラギン酸、ロイシン、グルタミン酸、及びシステイン残基に置き換える工程、
（２）ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で239、330、332、及び295番目のアミノ酸が、それぞれ、アスパラギン酸、ロイシン、グルタミン酸、及びシステイン残基に置き換えられたＨ鎖をコードするDNA、及び、Ｌ鎖をコードするDNAを宿主細胞又は宿主生物に導入し、該DNAを発現させる工程、及び
（３）発現産物を回収する工程。
【請求項１７】
以下（１）から（３）の工程を含むエフェクター機能が向上した抗体の製造方法；
（１）エフェクター機能を有する抗体におけるＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸残基をシステイン残基に置き換える工程、
（２）ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸残基がシステイン残基に置き換えられたＨ鎖をコードするDNA、及び、Ｌ鎖をコードするDNAを、還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースを付加する酵素の活性が低減、または欠失した宿主細胞又は宿主生物に導入し、該DNAを発現させる工程、及び
（３）発現産物を回収する工程。
【請求項１８】
エフェクター機能を有する抗体におけるＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で298、333、334、及び295番目のアミノ酸を、それぞれ、アラニン、アラニン、アラニン、及びシステイン残基に置き換える工程を含む、抗体のエフェクター機能を向上させる方法。
【請求項１９】
エフェクター機能を有する抗体におけるＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で239、330、332、及び295番目のアミノ酸を、それぞれ、アスパラギン酸、ロイシン、グルタミン酸、及びシステイン残基に置き換える工程を含む、抗体のエフェクター機能を向上させる方法。
【請求項２０】
下記（１）から（３）の工程を含む抗体のエフェクター機能を向上させる方法；
（１）エフェクター機能を有する抗体におけるＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸残基をシステイン残基に置き換える工程、
（２）ＫａｂａｔのＥＵインデックス番号で295番目のアミノ酸残基がシステイン残基に置き換えられたＨ鎖をコードするDNA、及び、Ｌ鎖をコードするDNAを、還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースを付加する酵素の活性が低減、または欠失した宿主細胞又は宿主生物に導入し、該DNAを発現させる工程、及び
（３）発現産物を回収する工程。

【図１】