トリテルペノイドを有効成分として含有する酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤
【課題】酸化ストレスが関連する眼疾患の新たな予防又は治療剤を提供すること。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩は、神経網膜、網膜色素上皮、網脈絡膜といった後眼部組織において、優れた異物代謝系第２相酵素の誘導能を発揮するので、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤として有用である。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩は、神経網膜、網膜色素上皮、網脈絡膜といった後眼部組織において、優れた異物代謝系第２相酵素の誘導能を発揮するので、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤として有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を有効成分として含む、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤、に関する。
【化１】
【０００２】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、同一か又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、アルキル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環及びベンゾイミダゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環基はハロゲン原子、アルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。］
【背景技術】
【０００３】
生体は、酸化−抗酸化のバランスを調節し、細胞内酸化還元状態を一定に維持して機能している。この酸化−抗酸化のバランスが酸化方向に傾いた状態を酸化ストレスという。酸化ストレスは、脂質、ＤＮＡ、タンパク質などの生体高分子に修飾や障害を与え、細胞機能障害や細胞死を引き起こし、発癌、高血圧、動脈硬化、脳神経変性疾患、炎症、喘息、皮膚疾患、加齢黄斑変性、白内障といった加齢等に伴う慢性疾患の発症や進行に深く関与していることが知られている。そのため、酸化−抗酸化のバランスを一定に維持する防御機構は生体にとって必須の生体防御システムであり、酸化ストレスからの防御能を高めることは、これらの疾患の予防や治療に有用であると考えられている（非特許文献１）。
【０００４】
近年、Ｋｅａｐ１−Ｎｒｆ２システムが、哺乳類の酸化ストレス防御機構において中心的な役割を果たすことが明らかになってきた。Ｎｒｆ２（ＮＦ−Ｅ２ ｒｅｌａｔｅｄ ｆａｃｔｏｒ ２）は、親電子性物質を直接解毒するグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、キノンオキシドレダクターゼといった異物代謝系第２相酵素及びヘムオキシゲナーゼ、ペルオキシレドキシンといった抗酸化酵素等の遺伝子発現を誘導制御している転写因子である。Ｎｒｆ２は、定常状態（未刺激の状態）では、細胞質中でＫｅａｐ１（Ｋｅｌｃｈ−ｌｉｋｅ ＥＣＨ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ １）と複合体を形成し不活性状態にあるが、親電子性物質や活性酸素種といった酸化ストレスに暴露されると、Ｋｅａｐ１との相互作用が減弱し（解離が促進されて）核へ移行する。核に移行したＮｒｆ２は、小Ｍａｆ（Ｍｕｓｃｕｌｏａｐｏｎｅｕｒｏｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ）群因子とヘテロニ量体を形成し、標的配列である抗酸化剤応答配列（ＡＲＥ：ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ）と呼ばれるプロモーター配列に結合して、上述した酵素群の遺伝子発現を誘導する。このように、Ｎｒｆ２は、生体の酸化ストレスからの防御や生体異物の解毒排泄を統一的に制御していることが知られている（非特許文献２）。
【０００５】
また、Ｋｅａｐ１−Ｎｒｆ２システムが破綻したマウス（Ｎｒｆ２遺伝子欠損マウス）では、細胞内の酸化−抗酸化のバランスが崩れて、易発ガン性（ベンツピレンによる前胃部発ガン、ニトロサミンによる膀胱発ガン等）、外来異物／酸化ストレスに対する感受性亢進（アセトアミノフェンによる肝障害、高酸素暴露による肺障害等）、炎症・免疫系の異常（糸球体腎炎、全身性自己免疫疾患、タバコ誘導性肺気腫等）を示すことが報告されている。このように、Ｎｒｆ２の機能欠損は酸化ストレスを引き起こし、癌、高血圧、脳神経変性疾患、炎症といった疾患を誘発することが示唆されている（非特許文献３）。
【０００６】
このような知見から、Ｎｒｆ２の活性化を利用した、酸化ストレスが関連する疾患の予防又は改善への応用が試みられており、いくつかのＮｒｆ２活性化物質でその有用性が報告されている。例えば、Ｎｒｆ２を活性化する物質として知られるオルチプラズやスルフォラファンがベンツピレンによる前胃部発ガンを抑制すること、Ｎｒｆ２を活性化する物質であるオルチプラズがニトロサミンによる膀胱発ガンを抑制することが報告されている（非特許文献３）。
【０００７】
また、酸化ストレスが関連する眼科疾患である加齢黄斑変性や白内障に対するＮｒｆ２活性化物質の有用性に関する報告として、非特許文献４〜５及び特許文献１〜３がある。加齢黄斑変性は、黄斑の加齢変化に伴う変性症で、紫外線暴露により蓄積されるレチンアルデヒド（ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−ｒｅｔｉｎａｌｄｅｈｙｄｅ）といった酸化ストレスが網膜色素細胞を障害することが知られているが、非特許文献４及び特許文献１には、Ｎｒｆ２活性化物質であるスルフォラファンやビス−２−ヒドロキシベンジリデンアセトンがこの細胞障害を抑制することが報告されている。非特許文献５には、Ｎｒｆ２活性化物質であるクルクミンがガラクトース誘発白内障を抑制することが報告されている。特許文献２及び３には、Ｎｒｆ２活性化物質であるクエルセチンを用いた加齢黄斑変性のドルーゼン形成、糖尿病性網膜症及び緑内障に伴う網膜症・視神経症の治療方法が記載されている。
【０００８】
他方で、トリテルペノイドは炭素３０個から成るテルペン及びそれから誘導される化合物の総称である。本願発明の一般式（Ｉ）で表される化合物はトリテルペノイドの一種であり、五環式構造であるオレアナンの誘導体である。特許文献４及び５には、２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸、１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］ニトリル、１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールなどが開示され、これらの化合物がマウスマクロファージにおけるインターフェロンγが誘導する一酸化窒素の生成に対して阻害活性を示し、癌、アルツハイマー病、パーキンソン病といった疾患の治療に有用であることが記載されている。また、非特許文献６及び７には、１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールがＮｒｆ２の活性化能を有することが示唆され、該化合物を投与したマウスの器官（胃、肺など）において、抗酸化酵素であるヘムオキシゲナーゼ１の発現を誘導したことが報告されている。
【０００９】
しかしながら、一般式（Ｉ）で表される化合物に関する報告として、眼組織において、Ｎｒｆ２の活性化能を検討した報告やＮｒｆ２によって誘導制御されている異物代謝系第２相酵素及び抗酸化酵素の発現誘導能を検討した報告はない。また、該化合物の眼疾患に対する薬理作用を検討した報告はなく、特に、酸化ストレスに関連する眼疾患である加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害などに対する予防、改善効果について検討した報告はない。
【特許文献１】国際公開０３／５１３１３号パンフレット
【特許文献２】国際公開２００５／０６３２４９号パンフレット
【特許文献３】国際公開２００５／０６３２９５号パンフレット
【特許文献４】国際公開９９／６５４７８号パンフレット
【特許文献５】国際公開２００４／０６４７２３号パンフレット
【非特許文献１】Biomed. Pharmacother. 57, 251-60（2003）
【非特許文献２】J. Biol. Chem., 278, 14, 12029-38（2003）
【非特許文献３】別冊「医学のあゆみ」レドックス−ストレス防御の医学, 46-9（2005）
【非特許文献４】Proc. Natl. Acad. Sci., 101, 10446-51（2004）
【非特許文献５】Mol. Ｖis., 9, 223-30（2003）
【非特許文献６】Cancer Res., 65（11）, 4789-98（2005）
【非特許文献７】Mol. Cancer Ther., 6（1）, 154-62（2007）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
従って、一般式（Ｉ）で表される化合物に関して、新たな医薬用途を探索することは興味深い課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者等は、一般式（Ｉ）で表される化合物の新たな医薬用途を見出すべく鋭意研究を行ったところ、該化合物が、神経網膜、網膜色素上皮、網脈絡膜といった後眼部組織において、優れた異物代謝系第２相酵素の誘導能を有することを見出し、本発明に至った。なお、該化合物と同様の作用を有する公知化合物についても同様の試験を行ったが、該化合物はこの公知化合物に比べてはるかに高い誘導能を示し、該化合物の優れた有用性を裏付けるものであった。
【００１２】
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩（以下、これらを総称して「本化合物」ともいう）を有効成分として含有する、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤である。
【化２】
【００１３】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、同一か又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、アルキル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基又はイミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環及びベンゾイミダゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環基はハロゲン原子、アルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。］
また、本発明は、薬理上有効量の本化合物を有効成分として患者へ投与することを含む、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療方法である。
【００１４】
また、本発明は、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患を予防又は治療するための本化合物である。
【００１５】
また、本発明は、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤を製造するための、本化合物の使用である。
【００１６】
特許請求の範囲及び明細書中で使用される各基は、特許請求の範囲及び明細書全体を通して下記の意味を有するものとする。
【００１７】
『ハロゲン原子』とはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素を示す。
【００１８】
『アルキル』とは炭素原子数１〜６個の、直鎖又は分枝のアルキルを示す。具体例としてメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル等が挙げられる。
【００１９】
『アルコキシ』とは炭素原子数１〜６個の、直鎖又は分枝のアルコキシを示す。具体例としてメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イオプロポキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、イソペンチルオキシ等が挙げられる。
【００２０】
『アルキルアミノ』とは炭素原子数１〜６個のモノアルキルアミノ又は炭素原子数２〜１２個のジアルキルアミノを示す。モノアルキルアミノの具体例としてメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノ、ヘキシルアミノ等が、ジアルキルアミノの具体例としてジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノ、ジヘキシルアミノ等が挙げられる。
【００２１】
『ハロゲノアルキル』とは、１又は同一若しくは異なる複数のハロゲン原子を置換基として有するアルキルを示す。
【００２２】
『ハロゲノフェニル』とは、１又は同一若しくは異なる複数のハロゲン原子を置換基として有するフェニルを示す。
【００２３】
『ハロゲノアルキルアミノ』とは、１又は同一若しくは異なる複数のハロゲノアルキルを置換基として有するアミノを示す。
【００２４】
本化合物が遊離のアミノ基、遊離のアルキルアミノ基又は遊離のハロゲノアルキルアミノ基を置換基として有する場合、それらの置換基は保護基で保護されていてもよい。また、芳香族複素環が遊離の窒素原子を有する場合も、該窒素原子は保護基で保護されていてもよい。
【００２５】
『遊離のアミノ基、遊離のアルキルアミノ基、遊離のハロゲノアルキルアミノ基又は遊離の窒素原子を有する芳香族複素環基の保護基』とは、アリル基等の無置換アルケニル基；ホルミル基等のヒドロカルボニル基；アセチル基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、ベンゾイル基、４−クロロベンゾイル基、ピコリノイル基等の置換若しくは無置換アルキルカルボニル基、置換若しくは無置換アリールカルボニル基、又は無置換芳香族複素環カルボニル基；メトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ジフェニルメトキシカルボニル基、フェノキシカルボニル基、ｍ−ニトロフェノキシカルボニル基等の置換若しくは無置換アルキルオキシカルボニル、又は置換若しくは無置換アリールオキシカルボニル基；メチルスルホニル基、ベンジルスルホニル基、フェニルスルホニル基、４−クロロフェニルスルホニル基、トリルスルホニル基、２，４，６−トリメチルフェニルスルホニル基等の置換若しくは無置換アルキルスルホニル基、又は置換若しくは無置換アリールスルホニル基；等の遊離のアミノ基、遊離のアルキルアミノ基、遊離のハロゲノアルキルアミノ基又は遊離の窒素原子を有する芳香族複素環基の保護基として汎用されるものを示す。
【００２６】
前記の置換アルキル基、置換アルキルカルボニル基、置換アリールカルボニル基、置換アルキルオキシカルボニル基、置換アリールオキシカルボニル基、置換アルキルスルホニル基又は置換アリールスルホニル基は、それぞれ、ハロゲン原子、アルコキシ基、アルキル基、アリール基、ハロゲノアリール基、アルコキシアリール基及びニトロ基から選択される１又は複数の基で置換された、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリールカルボニル基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アルキルスルホニル基又はアリールスルホニル基を示す。
【００２７】
本発明でいう『複数の基』は、それぞれの基が同一でも異なっていてもよく、又、好ましくは２又は３の基を、より好ましくは２の基を示す。
【００２８】
また、本発明でいう『基』には、水素原子、ハロゲン原子及びオキソ配位子も含まれる。
【００２９】
本化合物における『塩』とは、医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩、酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、グルコン酸、グルコヘプト酸、グルクロン酸、テレフタル酸、メタンスルホン酸、乳酸、馬尿酸、１，２−エタンジスルホン酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、オレイン酸、パモ酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、タンニン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸ラウリルエステル、硫酸メチル、ナフタレンスルホン酸、スルホサリチル酸等の有機酸との塩、臭化メチル、ヨウ化メチル等の四級アンモニウム塩、臭素イオン、塩素イオン、ヨウ素イオンなどのハロゲンイオンとの塩、リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、鉄、亜鉛等との金属塩、アンモニアとの塩、トリエチレンジアミン、２−アミノエタノール、２，２−イミノビス（エタノール）、１−デオキシ−１−（メチルアミノ）−２−Ｄ−ソルビトール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、プロカイン、Ｎ，Ｎ−ビス（フェニルメチル）−１，２−エタンジアミン等の有機アミンとの塩等が挙げられる。
【００３０】
本化合物に幾何異性体又は光学異性体が存在する場合は、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。
【００３１】
また、本化合物は水和物又は溶媒和物の形態をとっていてもよい。
【００３２】
さらに、本化合物にプロトン互変異性が存在する場合には、それらの互変異性体も本発明の範囲に含まれる。
【００３３】
（ａ）本化合物における好ましい例として、一般式（Ｉ）で示される化合物において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００３４】
（ａ１）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；及び／又は
（ａ２）Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；及び／又は
（ａ３）Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；及び／又は
（ａ４）上記で規定した芳香族複素環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。
【００３５】
すなわち、一般式（Ｉ）で示される化合物において、上記（ａ１）、（ａ２）、（ａ３）及び（ａ４）から選択される１又は２以上の各組合せからなる化合物又はその塩。
【００３６】
（ｂ）本化合物におけるより好ましい例として、一般式（Ｉ）で示される化合物において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００３７】
（ｂ１）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；及び／又は
（ｂ２）Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；及び／又は
（ｂ３）Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；及び／又は
（ｂ４）Ｙがイミダゾール環の場合、該イミダゾール環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。
【００３８】
すなわち、一般式（Ｉ）で示される化合物において、上記（ｂ１）、（ｂ２）、（ｂ３）及び（ｂ４）から選択される１又は２以上の各組み合わせからなる化合物又はその塩。
【００３９】
（ｃ）本化合物におけるさらに好ましい例として、上記のように定義された一般式（Ｉ）で示される化合物において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００４０】
（ｃ１）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はメチル基を示し、；及び／又は
（ｃ２）Ｘはシアノ基、カルボキシル基、メチルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボニル基、ブチルオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、メチルアミノカルボニル基、エチルアミノカルボニル基、ジメチルアミノカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノカルボニル基、イミダゾール−１−イルカルボニル基、２−メチルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−フェニルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−（４−フルオロフェニル）イミダゾール−１−イルカルボニル基又はピラゾール−１−イル基を示す。
【００４１】
すなわち、上記のように定義された一般式（Ｉ）で示される化合物において、上記（ｃ１）及び（ｃ２）から選択される１又は２以上の各組み合わせからなる化合物又はその塩。
【００４２】
本化合物における最も好ましい例としては、下記式（ＩＩ）で示される２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸、下記式（ＩＩＩ）で示される２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸メチルエステル、又は、下記式（ＩＶ）で示される１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールが挙げられる。
【化３】
【化４】
【化５】
【００４３】
本化合物は、有機合成化学の分野における通常の方法に従って製造でき、ＷＯ９９／６５４７８又はＷＯ２００４／０６４７２３に記載された方法に基づいても製造することができる。
【００４４】
本発明において、酸化ストレスとは、活性酸素種、紫外線、放射線、金属、化学物質や、細胞内で活性酸素種産生を引き起こす刺激などにより個体や細胞が受けるストレスをいう。また、酸化ストレスが関連する眼疾患とは、このような酸化ストレスに起因する眼疾患をいい、特に、硝子体、網膜、脈絡膜、強膜又は視神経における酸化ストレスに起因する疾患をさし、例えば、加齢黄斑変性（初期加齢黄斑変性におけるドルーゼン形成、萎縮型加齢黄斑変性、滲出型加齢黄斑変性）、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障といった眼疾患が挙げられる。
【００４５】
本化合物は、必要に応じて、医薬として許容される添加剤を加え、単独製剤又は配合製剤として汎用されている技術を用いて製剤化することができる。
【００４６】
本化合物は、前述の眼疾患の予防又は治療に使用する場合、患者に対して経口的又は非経口的に投与することができ、投与形態としては、経口投与、眼への局所投与（点眼投与、硝子体内投与、結膜下投与、テノン嚢下投与等）、静脈内投与、経皮投与等が挙げられ、必要に応じて、製薬学的に許容され得る添加剤と共に、投与に適した剤型に製剤化される。経口投与に適した剤型としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等が挙げられ、非経口投与に適した剤型としては、例えば、注射剤、点眼剤、眼軟膏、ゲル、挿入剤等が挙げられる。これらは当該分野で汎用されている通常の技術を用いて調製することができる。また、本化合物はこれらの製剤の他に眼内インプラント用製剤やマイクロスフェアー等のＤＤＳ（ドラッグデリバリーシステム）化された製剤にすることもできる。
【００４７】
例えば、錠剤は、乳糖、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、無水リン酸水素カルシウム、デンプン、ショ糖等の賦形剤；カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポピドン、デンプン、部分アルファー化デンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等の崩壊剤；ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、デンプン、部分アルファー化デンプン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール等の結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、含水二酸化ケイ素、硬化油等の滑沢剤；精製白糖、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン等のコーティング剤；クエン酸、アスパルテーム、アスコルビン酸、メントール等の矯味剤などを適宜選択して用い、調製することができる。
【００４８】
注射剤は、塩化ナトリウム等の等張化剤；リン酸ナトリウム等の緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート等の界面活性剤；メチルセルロース等の増粘剤等から必要に応じて選択して用い、調製することができる。
【００４９】
点眼剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリンなどの等張化剤；リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどの緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の界面活性剤；クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム等の安定化剤；塩化ベンザルコニウム、パラベン等の防腐剤等から必要に応じて選択して用い、調製することができ、ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、通常４〜８の範囲内が好ましい。また、眼軟膏は、白色ワセリン、流動パラフィン等の汎用される基剤を用い、調製することができる。
【００５０】
眼内インプラント用製剤は、生体分解性ポリマー、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体、ヒドロキシプロピルセルロース等の生体分解性ポリマーを用い、調製することができる。
【００５１】
本発明はまた、薬理上有効量の本化合物を有効成分として患者（ヒト）へ投与することを含む酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療方法に関する。
【００５２】
本化合物の投与量は、剤型、投与すべき患者の症状の軽重、年令、体重、医師の判断等に応じて適宜変えるこができるが、経口投与の場合、一般には、成人に対し１日あたり０．０１〜５０００ｍｇ、好ましくは０．１〜２５００ｍｇ、より好ましくは１〜１０００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができ、注射剤の場合、一般には、成人に対し１日あたり０．０１〜２００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができ、また、点眼剤の場合には、０．０００００１〜１０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．００００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、より好ましくは０．０００１〜０．１％（Ｗ／Ｖ）の有効成分濃度のものを１日１回又は数回点眼することができる。さらに、眼内インプラント用製剤の場合は、成人に対し０．０１〜２０００ｍｇ含有する眼内インプラント用製剤を眼内にインプラントすることができる。
【発明の効果】
【００５３】
後述の試験を実施したところ、試験１において、本化合物が、Ｎｒｆ２によって発現制御されている異物代謝系第２相酵素であるＮＡＤ（Ｐ）Ｈキノン酸化還元酵素（ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ ｑｕｉｎｏｎｅ ｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ １：以下、「ＮＱＯ１」ともいう）を神経系細胞において誘導することが示された。また、試験２において、本化合物が、ＮＱＯ１を神経網膜及び網膜色素上皮において誘導することが示された。すなわち、本化合物は、神経網膜、網膜色素上皮、網脈絡膜といった後眼部組織において、異物代謝系第２相酵素の遺伝子発現を誘導制御し、酸化ストレスからの防御能を増強し、酸化ストレス状態を予防又は軽減する。さらに、試験３において、本化合物がラット光障害モデルにおいて光障害を改善することが示された。また、試験４において、本化合物がレーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルにおいて、優れた脈絡膜血管新生阻害作用を有することが示された。以上より、本化合物は、加齢黄斑変性（初期加齢黄斑変性におけるドルーゼン形成、萎縮型加齢黄斑変性、滲出型加齢黄斑変性）、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５４】
以下に、試験１〜４及び製剤例の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００５５】
試験１．神経系細胞を用いたＮＱＯ１誘導能評価試験及び細胞生存率評価試験
神経系細胞を用いて、本化合物及びＮｒｆ２活性化能が報告されている化合物のＮＱＯ１の誘導能を評価した。併せて、これらの化合物の細胞生存率を評価した。
【００５６】
（実験概要）
神経系細胞として汎用されているＰＣ１２（ラット副腎褐色細胞種）を用いて、本化合物である２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸（以下、「ＣＤＤＯ」ともいう）、２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸メチルエステル（以下、「ＣＤＤＯ−Ｍｅ」ともいう）及び１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾール（以下、「ＣＤＤＯ−Ｉｍ」ともいう）、並びに、Ｎｒｆ２活性化能が報告されている化合物であるクエルセチンのＮｒｆ２活性化能を評価した。また、併せて、これらの化合物の細胞生存率を評価した。なお、Ｎｒｆ２活性化の指標として、Ｎｒｆ２の活性化によって発現増加することが知られているＮＱＯ１（異物代謝系第２相酵素）の酵素活性を用いた。
【００５７】
（ＮＱＯ１活性化能の評価試験方法）
ＰＣ１２を３×１０４個／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２／９５％空気の条件下で２４時間培養した。ＰＣ１２の培養液としては、５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）及び１０％ウマ血清（ＨＳ）を含有するＲＰＭＩ１６４０を用いた。次に培養液を除去し、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ又はクエルセチンを含有する異なる濃度の培養液（調製法は後述）に交換した。３７℃、５％ＣＯ２／９５％空気の条件下で２４時間培養した後に各細胞のＮＱＯ１活性を測定した。ＮＱＯ１活性の測定法は、Ｐｒｏｃｈａｓｋａらの方法（Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８８ Ｍａｒ；１６９（２）：３２８−３６）を参考にして行った。具体的には、細胞を界面活性剤で溶解して得た細胞抽出液にｍｅｎａｄｉｏｎｅとＭＴＴ（ｍｅｔｈｙｌ ｔｈｉａｚｏｌｅ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ）を含有する反応混合液を添加し、５分間反応させた後、５５０ｎｍの吸光度を測定することでＮＱＯ１活性を算出した。
【００５８】
（細胞生存率の評価試験方法）
（ＮＱＯ１活性化能の評価試験方法）と同様の手順でＰＣ１２を培養し、培養液をＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ又はクエルセチンを含有する異なる濃度の培養液に交換し、３７℃、５％ＣＯ２／９５％空気の条件下で２４時間培養した後に細胞の生存率を測定した。測定にはＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８（同仁化学）を用いた。
【００５９】
（データ解析）
後述する基剤培養液で処置した細胞のＮＱＯ１活性を１００％として、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ及びクエルセチンのＮＱＯ１誘導率（％）を表した。ＮＱＯ１誘導率の最大値をＥｍａｘとし、ＮＱＯ１活性の５０％誘導濃度（ＥＣ５０）をＥＸＳＡＳ（Ｖer. 7.1.6；株式会社アーム）にて算出した。また、基剤培養液で処置した細胞の生存率を１００％として、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ及びクエルセチンの生存率（％）を表した。５０％細胞毒性濃度（ＬＣ５０）をＥＸＳＡＳにて算出した。
【００６０】
（被験化合物を含有する培養液の調製）
各化合物をＤＭＳＯに溶解し、これらの溶液を各細胞の培養液で１０００倍希釈することにより各化合物の濃度を下記のように調整した。また、ＤＭＳＯのみを含有する培養液を基剤培養液とした。
【００６１】
ＣＤＤＯ：０．３，１，３，１０，３０，１００，３００，１０００，３０００、１００００及び３００００（ｎＭ）
ＣＤＤＯ−Ｍｅ：０．１，０．３，１，３，１０，３０，１００，３００，１０００，３０００、１００００及び３００００（ｎＭ）
ＣＤＤＯ−Ｉｍ：０．１，０．３，１，３，１０，３０，１００，３００，１０００，３０００、１００００及び３００００（ｎＭ）
クエルセチン：１．５６，３．１３，６．２５，１２．５，２５，５０，１００及び２００（μＭ）
（結果）
ＰＣ１２における各化合物のＥＣ５０、Ｅｍａｘ、ＬＣ５０及びＬＣ５０／ＥＣ５０を表１に示す。
【表１】
【００６２】
（考察）
表１から明らかなように、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ及びクエルセチンが、ＰＣ１２においてＮＱＯ１を誘導することが示された。ここで、クエルセチンはＰＣ１２においてＮＱＯ１の誘導が認められたものの、その誘導能はＥＣ５０値＝６６００ｎＭである。その一方で、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ及びＣＤＤＯ−Ｉｍは、ＰＣ１２において優れたＮＱＯ１誘導能を有し、特に、ＣＤＤＯ−ＩｍはＥＣ５０値＝１１．４ｎＭという極めて優れたものであったことは驚くべき結果である。
【００６３】
以上の結果から、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ及びＣＤＤＯ−Ｉｍに代表される本化合物が、神経系細胞において優れたＮｒｆ２誘導能を有し、酸化ストレスが関与する眼疾患に対して顕著な予防又は改善効果を有することが示された。
【００６４】
試験２．ラットを用いたＮＱＯ１誘導能評価試験
ラットを用いて、経口投与によるＣＤＤＯ−Ｍｅの神経網膜及び網膜色素上皮を含む網脈絡膜におけるＮＱＯ１活性化能を評価した。
【００６５】
（実験方法）
６週齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本チャールスリバー）に対して、基剤としての１％（Ｗ／Ｖ）メチルセルロース水溶液（メチルセルロースを超純水に溶解させて調製）に懸濁したＣＤＤＯ−Ｍｅ溶液を３、１０及び３０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、５日間反復経口投与した。なお、各投与群の例数は４眼（２匹）である。投与１、３及び５日後に、ラットの神経網膜及び網膜色素上皮を含む網脈絡膜画分を摘出し、ホモジナイズすることにより組織抽出液を得た。抽出液中のＮＱＯ１活性は試験１と同様の方法にて測定した。また、抽出液中の総タンパク質濃度を測定し、総タンパク質１ｍｇ当りのＮＱＯ１活性を算出した。
【００６６】
（結果）
各投与群のＮＱＯ１活性の経時変化を図１（神経網膜）及び図２（網膜色素上皮を含む網脈絡膜）に示す。
【００６７】
（考察）
図１及び図２から明らかなように、神経網膜及び網膜色素上皮を含む網脈絡膜画分のいずれにおいても、ＣＤＤＯ−Ｍｅの投与量に依存してＮＱＯ１活性が誘導された。この結果より、ＣＤＤＯ−Ｍｅは経口投与で神経網膜、網膜色素上皮及び網脈絡膜に到達し、各組織においてＮＱＯ１を誘導すること、すなわち、Ｎｒｆ２を活性化することが示された。ここで、網膜組織には、網膜血管内皮細胞で構成される内側血液網膜関門（ｉｎｎｅｒ ｂｌｏｏｄ−ｒｅｔｉｎａｌ ｂａｒｒｉｅｒ: ｉｎｎｅｒ ＢＲＢ）及び網膜色素上皮細胞で構成される外側血液網膜関門（ｏｕｔｅｒ ＢＲＢ）が存在し、これらにより膜組織などの後眼部領域への薬物輸送が厳格に制御されていることが知られている。すなわち、本化合物であるトリテルペノイド化合物を全身投与したとしても、実際に神経網膜、網膜色素上皮又は網脈絡膜に到達するか否かは明らかではない。しかしながら、試験２の結果は、本化合物であるＣＤＤＯ−Ｍｅが神経網膜、網膜色素上皮及び網脈絡膜に到達し、かつ、各組織においてＮＱＯ１を誘導することを示した。
【００６８】
以上の結果から、ＣＤＤＯ−Ｍｅに代表される本化合物が、神経網膜、網膜色素上皮及び網脈絡膜において優れたＮｒｆ２誘導能を有し、酸化ストレスが関与する眼疾患に対して予防又は改善効果を有することが示された。
【００６９】
試験３．ラット光障害モデルを用いた薬理試験
ラット光障害モデルを用いてＣＤＤＯ−Ｍｅの薬理効果を評価した。なお、ラット光障害モデルは光暴露により、主に光受容細胞及び網膜色素上皮細胞層に酸化ストレスを誘発させたモデル動物であり、主に網膜変性（例えば、加齢黄斑変性）のモデル動物として汎用されている。
【００７０】
（実験方法）
６週齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本チャールスリバー）に対して、基剤としての１％（Ｗ／Ｖ）メチルセルロース水溶液（メチルセルロースを超純水に溶解させて調製）に懸濁したＣＤＤＯ−Ｍｅ溶液を１、３及び１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、光照射３日前から光照射直後まで計６回反復経口投与した。なお、ラジカルスカベンジャーであるｐｈｅｎｙｌ−Ｎ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｎｉｔｒｏｎｅ（ＰＢＮ）を１００ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、光照射直前から光照射直後まで計３回反復腹腔内投与し、陽性対照とした。各投与群の例数は８〜１０眼（４〜５匹）である。２０００ｌｕｘで４８時間光照射することにより、光障害を誘発させた。光照射終了後、４時間の暗順応を暗室にて施し、ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ（ＥＲＧ）を測定した。得られた波形から ａ波およびｂ波の振幅を算出した。
【００７１】
（結果）
基剤投与群におけるＥＲＧのａ波およびｂ波の振幅をそれぞれ１００％として、各投与群の振幅を図３（ａ波）及び図４（ｂ波）に示す。
【００７２】
（考察）
図３及び図４から明らかなように、基剤投与群と比較して、ＣＤＤＯ−ＭｅはＥＲＧのａ波及びｂ波の減弱に対する改善作用を有しており、３ｍｇ／ｋｇという極めて少ない投与量でも１００ｍｇ／ｋｇのＰＢＮと同程度の治療効果を有することが示された。以上の結果から、ＣＤＤＯ−Ｍｅに代表される本化合物が、酸化ストレスが関与する眼疾患に対して予防又は改善効果を有することが示された。特に加齢黄斑変性に対して顕著な予防又は改善効果を有することが示された。
【００７３】
試験４．ラットレーザー誘発脈絡膜血管新生モデルを用いた薬理試験
レーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルを用いて、ＣＤＤＯ−Ｍｅの有用性を評価した。
【００７４】
（クリプトンレーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルの作製方法）
８週齢のＢＮ系雄性ラット（日本チャールスリバー）に５％（Ｗ／Ｖ）塩酸ケタミン注射液および２％塩酸キシラジン注射液の混合液（７：１）１ｍｌ／ｋｇを筋肉内投与して全身麻酔し、０．５％（Ｗ／Ｖ）トロピカミド−０．５％塩酸フェニレフリン点眼液を点眼して散瞳させた後、クリプトンレーザー光凝固装置により光凝固を行った。光凝固は、眼底後局部において、太い網膜血管を避け、焦点を網膜深層に合わせて１眼につき８ヶ所散在状に実施した（凝固条件：スポットサイズ１００μｍ、出力１００ｍＷ、凝固時間０．１秒）。光凝固後、眼底撮影を行い、レーザー照射部位を確認した。
【００７５】
（薬物投与方法）
ＣＤＤＯ−Ｍｅを１％（Ｗ／Ｖ）メチルセルロース液（メチルセルロースを精製水に溶解させて調製）に２ｍｇ／ｍｌ又は６ｍｇ／ｍｌになるように懸濁させ、それぞれ１回あたり１０ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇの用量で、光凝固手術日の３日前より、手術日を含め１０日間１日１回経口投与した（１日あたり１０ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇ）。
【００７６】
（評価方法）
光凝固後７日目、ラットに５％（Ｗ／Ｖ）塩酸ケタミン注射液および２％塩酸キシラジン注射液の混合液（７：１）１ｍｌ／ｋｇを筋肉内投与して全身麻酔し、０．５％（Ｗ／Ｖ）トロピカミド−０．５％塩酸フェニレフリン点眼液を点眼して散瞳させた後、１０％フルオレセイン溶液０．１ｍｌを尾静脈から注入して、蛍光眼底造影を行った。蛍光眼底造影で、蛍光露出が認められなかったスポットを陰性（血管新生なし）、蛍光露出が認められたスポットを陽性と判断した。また、若干の蛍光露出が認められる光凝固部位は、それが２箇所存在した時に陽性（血管新生あり）と判定した。その後、式１に従い、レーザー照射８ヶ所のスポットに対する陽性スポット数から脈絡膜血管新生発生率（％）を算出し、式２に従い、評価薬物の抑制率（％）を算出した。ＣＤＤＯ−Ｍｅの評価結果を表２に示す。なお各投与群の例数は８である。
【００７７】
［式１］
脈絡膜血管新生発生率（％）＝（陽性スポット数／全光凝固部位数）×１００
［式２］
抑制率（％）＝（Ａ０−ＡＸ）／Ａ０×１００
Ａ０：基剤投与群の脈絡膜血管新生発生率
ＡＸ：薬物投与群の脈絡膜血管新生発生率
【表２】
【００７８】
（考察）
表２から明らかなように、ＣＤＤＯ−Ｍｅが、レーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルにおいて脈絡膜血管新生を阻害することが示された。すなわち、ＣＤＤＯ−Ｍｅに代表される本化合物は、脈絡膜において優れた血管新生阻害作用を有し、加齢黄斑変性に対して顕著な予防又は改善効果を有することが示された。
【００７９】
［製剤例］
製剤例を挙げて本発明の薬剤をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの製剤例にのみ限定されるものではない。
【００８０】
処方例１ 点眼剤
１００ｍｌ中
ＣＤＤＯ １０ｍｇ
塩化ナトリウム ９００ｍｇ
ポリソルベート８０ 適量
リン酸水素二ナトリウム 適量
リン酸二水素ナトリウム 適量
滅菌精製水 適量
滅菌精製水にＣＤＤＯ及びそれ以外の上記成分を加え、これらを十分に混合して点眼液を調製する。ＣＤＤＯの添加量を変えることにより、濃度が０．０５％（Ｗ／Ｖ）、０．１％（Ｗ／Ｖ）、０．５％（Ｗ／Ｖ）、１％（Ｗ／Ｖ）の点眼剤を調製できる。
【００８１】
処方例２ 眼軟膏
１００ｇ中
ＣＤＤＯ−Ｍｅ ０．３ｇ
流動パラフィン １０．０ｇ
白色ワセリン 適量
均一に溶融した白色ワセリン及び流動パラフィンに、ＣＤＤＯ−Ｍｅを加え、これらを十分に混合して後に徐々に冷却することで眼軟膏を調製する。ＣＤＤＯ−Ｍｅの添加量を変えることにより、濃度が０．０５％（Ｗ／Ｖ）、０．１％（Ｗ／Ｖ）、０．５％（Ｗ／Ｖ）、１％（Ｗ／Ｗ）の眼軟膏を調製できる。
【００８２】
処方例３ 錠剤
１００ｍｇ中
ＣＤＤＯ−Ｉｍ １ｍｇ
乳糖 ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン ２０ｍｇ
カルボキシメチルセルロースカルシウム ６ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ６ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．６ｍｇ
ＣＤＤＯ−Ｉｍ、乳糖を混合機中で混合し、その混合物にカルボキシメチルセルロースカルシウム及びヒドロキシプロピルセルロースを加えて造粒し、得られた顆粒を乾燥後整粒し、その整粒顆粒にステアリン酸マグネシウムを加えて混合し、打錠機で打錠する。また、ＣＤＤＯ−Ｉｍの添加量を変えることにより、１００ｍｇ中の含有量が０．１ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇの錠剤を調製できる。
【００８３】
処方例４ 注射剤
１０ｍｌ中
ＣＤＤＯ−Ｉｍ １０ｍｇ
塩化ナトリウム ９０ｍｇ
ポリソルベート８０ 適量
滅菌精製水 適量
ＣＤＤＯ−Ｉｍ及び塩化ナトリウムを滅菌精製水に溶解して注射剤を調製する。ＣＤＤＯ−Ｉｍの添加量を変えることにより、１０ｍｌ中の含有量が０．１ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇの錠剤を調製できる。
【図面の簡単な説明】
【００８４】
【図１】各投与群の神経網膜におけるＮＱＯ１活性の経時変化を示すグラフである。
【図２】各投与群の網膜色素上皮を含む網脈絡膜におけるＮＱＯ１活性の経時変化を示すグラフである。
【図３】基剤投与群におけるＥＲＧのａ波の振幅をそれぞれ１００％として、各投与群の振幅を示すグラフである。
【図４】基剤投与群におけるＥＲＧのｂ波の振幅をそれぞれ１００％として、各投与群の振幅を示すグラフである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を有効成分として含む、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤、に関する。
【化１】
【０００２】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、同一か又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、アルキル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環及びベンゾイミダゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環基はハロゲン原子、アルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。］
【背景技術】
【０００３】
生体は、酸化−抗酸化のバランスを調節し、細胞内酸化還元状態を一定に維持して機能している。この酸化−抗酸化のバランスが酸化方向に傾いた状態を酸化ストレスという。酸化ストレスは、脂質、ＤＮＡ、タンパク質などの生体高分子に修飾や障害を与え、細胞機能障害や細胞死を引き起こし、発癌、高血圧、動脈硬化、脳神経変性疾患、炎症、喘息、皮膚疾患、加齢黄斑変性、白内障といった加齢等に伴う慢性疾患の発症や進行に深く関与していることが知られている。そのため、酸化−抗酸化のバランスを一定に維持する防御機構は生体にとって必須の生体防御システムであり、酸化ストレスからの防御能を高めることは、これらの疾患の予防や治療に有用であると考えられている（非特許文献１）。
【０００４】
近年、Ｋｅａｐ１−Ｎｒｆ２システムが、哺乳類の酸化ストレス防御機構において中心的な役割を果たすことが明らかになってきた。Ｎｒｆ２（ＮＦ−Ｅ２ ｒｅｌａｔｅｄ ｆａｃｔｏｒ ２）は、親電子性物質を直接解毒するグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、キノンオキシドレダクターゼといった異物代謝系第２相酵素及びヘムオキシゲナーゼ、ペルオキシレドキシンといった抗酸化酵素等の遺伝子発現を誘導制御している転写因子である。Ｎｒｆ２は、定常状態（未刺激の状態）では、細胞質中でＫｅａｐ１（Ｋｅｌｃｈ−ｌｉｋｅ ＥＣＨ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ １）と複合体を形成し不活性状態にあるが、親電子性物質や活性酸素種といった酸化ストレスに暴露されると、Ｋｅａｐ１との相互作用が減弱し（解離が促進されて）核へ移行する。核に移行したＮｒｆ２は、小Ｍａｆ（Ｍｕｓｃｕｌｏａｐｏｎｅｕｒｏｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ）群因子とヘテロニ量体を形成し、標的配列である抗酸化剤応答配列（ＡＲＥ：ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ）と呼ばれるプロモーター配列に結合して、上述した酵素群の遺伝子発現を誘導する。このように、Ｎｒｆ２は、生体の酸化ストレスからの防御や生体異物の解毒排泄を統一的に制御していることが知られている（非特許文献２）。
【０００５】
また、Ｋｅａｐ１−Ｎｒｆ２システムが破綻したマウス（Ｎｒｆ２遺伝子欠損マウス）では、細胞内の酸化−抗酸化のバランスが崩れて、易発ガン性（ベンツピレンによる前胃部発ガン、ニトロサミンによる膀胱発ガン等）、外来異物／酸化ストレスに対する感受性亢進（アセトアミノフェンによる肝障害、高酸素暴露による肺障害等）、炎症・免疫系の異常（糸球体腎炎、全身性自己免疫疾患、タバコ誘導性肺気腫等）を示すことが報告されている。このように、Ｎｒｆ２の機能欠損は酸化ストレスを引き起こし、癌、高血圧、脳神経変性疾患、炎症といった疾患を誘発することが示唆されている（非特許文献３）。
【０００６】
このような知見から、Ｎｒｆ２の活性化を利用した、酸化ストレスが関連する疾患の予防又は改善への応用が試みられており、いくつかのＮｒｆ２活性化物質でその有用性が報告されている。例えば、Ｎｒｆ２を活性化する物質として知られるオルチプラズやスルフォラファンがベンツピレンによる前胃部発ガンを抑制すること、Ｎｒｆ２を活性化する物質であるオルチプラズがニトロサミンによる膀胱発ガンを抑制することが報告されている（非特許文献３）。
【０００７】
また、酸化ストレスが関連する眼科疾患である加齢黄斑変性や白内障に対するＮｒｆ２活性化物質の有用性に関する報告として、非特許文献４〜５及び特許文献１〜３がある。加齢黄斑変性は、黄斑の加齢変化に伴う変性症で、紫外線暴露により蓄積されるレチンアルデヒド（ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−ｒｅｔｉｎａｌｄｅｈｙｄｅ）といった酸化ストレスが網膜色素細胞を障害することが知られているが、非特許文献４及び特許文献１には、Ｎｒｆ２活性化物質であるスルフォラファンやビス−２−ヒドロキシベンジリデンアセトンがこの細胞障害を抑制することが報告されている。非特許文献５には、Ｎｒｆ２活性化物質であるクルクミンがガラクトース誘発白内障を抑制することが報告されている。特許文献２及び３には、Ｎｒｆ２活性化物質であるクエルセチンを用いた加齢黄斑変性のドルーゼン形成、糖尿病性網膜症及び緑内障に伴う網膜症・視神経症の治療方法が記載されている。
【０００８】
他方で、トリテルペノイドは炭素３０個から成るテルペン及びそれから誘導される化合物の総称である。本願発明の一般式（Ｉ）で表される化合物はトリテルペノイドの一種であり、五環式構造であるオレアナンの誘導体である。特許文献４及び５には、２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸、１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］ニトリル、１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールなどが開示され、これらの化合物がマウスマクロファージにおけるインターフェロンγが誘導する一酸化窒素の生成に対して阻害活性を示し、癌、アルツハイマー病、パーキンソン病といった疾患の治療に有用であることが記載されている。また、非特許文献６及び７には、１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールがＮｒｆ２の活性化能を有することが示唆され、該化合物を投与したマウスの器官（胃、肺など）において、抗酸化酵素であるヘムオキシゲナーゼ１の発現を誘導したことが報告されている。
【０００９】
しかしながら、一般式（Ｉ）で表される化合物に関する報告として、眼組織において、Ｎｒｆ２の活性化能を検討した報告やＮｒｆ２によって誘導制御されている異物代謝系第２相酵素及び抗酸化酵素の発現誘導能を検討した報告はない。また、該化合物の眼疾患に対する薬理作用を検討した報告はなく、特に、酸化ストレスに関連する眼疾患である加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害などに対する予防、改善効果について検討した報告はない。
【特許文献１】国際公開０３／５１３１３号パンフレット
【特許文献２】国際公開２００５／０６３２４９号パンフレット
【特許文献３】国際公開２００５／０６３２９５号パンフレット
【特許文献４】国際公開９９／６５４７８号パンフレット
【特許文献５】国際公開２００４／０６４７２３号パンフレット
【非特許文献１】Biomed. Pharmacother. 57, 251-60（2003）
【非特許文献２】J. Biol. Chem., 278, 14, 12029-38（2003）
【非特許文献３】別冊「医学のあゆみ」レドックス−ストレス防御の医学, 46-9（2005）
【非特許文献４】Proc. Natl. Acad. Sci., 101, 10446-51（2004）
【非特許文献５】Mol. Ｖis., 9, 223-30（2003）
【非特許文献６】Cancer Res., 65（11）, 4789-98（2005）
【非特許文献７】Mol. Cancer Ther., 6（1）, 154-62（2007）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
従って、一般式（Ｉ）で表される化合物に関して、新たな医薬用途を探索することは興味深い課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者等は、一般式（Ｉ）で表される化合物の新たな医薬用途を見出すべく鋭意研究を行ったところ、該化合物が、神経網膜、網膜色素上皮、網脈絡膜といった後眼部組織において、優れた異物代謝系第２相酵素の誘導能を有することを見出し、本発明に至った。なお、該化合物と同様の作用を有する公知化合物についても同様の試験を行ったが、該化合物はこの公知化合物に比べてはるかに高い誘導能を示し、該化合物の優れた有用性を裏付けるものであった。
【００１２】
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩（以下、これらを総称して「本化合物」ともいう）を有効成分として含有する、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤である。
【化２】
【００１３】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、同一か又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、アルキル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基又はイミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環及びベンゾイミダゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環基はハロゲン原子、アルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。］
また、本発明は、薬理上有効量の本化合物を有効成分として患者へ投与することを含む、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療方法である。
【００１４】
また、本発明は、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患を予防又は治療するための本化合物である。
【００１５】
また、本発明は、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤を製造するための、本化合物の使用である。
【００１６】
特許請求の範囲及び明細書中で使用される各基は、特許請求の範囲及び明細書全体を通して下記の意味を有するものとする。
【００１７】
『ハロゲン原子』とはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素を示す。
【００１８】
『アルキル』とは炭素原子数１〜６個の、直鎖又は分枝のアルキルを示す。具体例としてメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル等が挙げられる。
【００１９】
『アルコキシ』とは炭素原子数１〜６個の、直鎖又は分枝のアルコキシを示す。具体例としてメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イオプロポキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、イソペンチルオキシ等が挙げられる。
【００２０】
『アルキルアミノ』とは炭素原子数１〜６個のモノアルキルアミノ又は炭素原子数２〜１２個のジアルキルアミノを示す。モノアルキルアミノの具体例としてメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノ、ヘキシルアミノ等が、ジアルキルアミノの具体例としてジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノ、ジヘキシルアミノ等が挙げられる。
【００２１】
『ハロゲノアルキル』とは、１又は同一若しくは異なる複数のハロゲン原子を置換基として有するアルキルを示す。
【００２２】
『ハロゲノフェニル』とは、１又は同一若しくは異なる複数のハロゲン原子を置換基として有するフェニルを示す。
【００２３】
『ハロゲノアルキルアミノ』とは、１又は同一若しくは異なる複数のハロゲノアルキルを置換基として有するアミノを示す。
【００２４】
本化合物が遊離のアミノ基、遊離のアルキルアミノ基又は遊離のハロゲノアルキルアミノ基を置換基として有する場合、それらの置換基は保護基で保護されていてもよい。また、芳香族複素環が遊離の窒素原子を有する場合も、該窒素原子は保護基で保護されていてもよい。
【００２５】
『遊離のアミノ基、遊離のアルキルアミノ基、遊離のハロゲノアルキルアミノ基又は遊離の窒素原子を有する芳香族複素環基の保護基』とは、アリル基等の無置換アルケニル基；ホルミル基等のヒドロカルボニル基；アセチル基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、ベンゾイル基、４−クロロベンゾイル基、ピコリノイル基等の置換若しくは無置換アルキルカルボニル基、置換若しくは無置換アリールカルボニル基、又は無置換芳香族複素環カルボニル基；メトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ジフェニルメトキシカルボニル基、フェノキシカルボニル基、ｍ−ニトロフェノキシカルボニル基等の置換若しくは無置換アルキルオキシカルボニル、又は置換若しくは無置換アリールオキシカルボニル基；メチルスルホニル基、ベンジルスルホニル基、フェニルスルホニル基、４−クロロフェニルスルホニル基、トリルスルホニル基、２，４，６−トリメチルフェニルスルホニル基等の置換若しくは無置換アルキルスルホニル基、又は置換若しくは無置換アリールスルホニル基；等の遊離のアミノ基、遊離のアルキルアミノ基、遊離のハロゲノアルキルアミノ基又は遊離の窒素原子を有する芳香族複素環基の保護基として汎用されるものを示す。
【００２６】
前記の置換アルキル基、置換アルキルカルボニル基、置換アリールカルボニル基、置換アルキルオキシカルボニル基、置換アリールオキシカルボニル基、置換アルキルスルホニル基又は置換アリールスルホニル基は、それぞれ、ハロゲン原子、アルコキシ基、アルキル基、アリール基、ハロゲノアリール基、アルコキシアリール基及びニトロ基から選択される１又は複数の基で置換された、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリールカルボニル基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アルキルスルホニル基又はアリールスルホニル基を示す。
【００２７】
本発明でいう『複数の基』は、それぞれの基が同一でも異なっていてもよく、又、好ましくは２又は３の基を、より好ましくは２の基を示す。
【００２８】
また、本発明でいう『基』には、水素原子、ハロゲン原子及びオキソ配位子も含まれる。
【００２９】
本化合物における『塩』とは、医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩、酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、グルコン酸、グルコヘプト酸、グルクロン酸、テレフタル酸、メタンスルホン酸、乳酸、馬尿酸、１，２−エタンジスルホン酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、オレイン酸、パモ酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、タンニン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸ラウリルエステル、硫酸メチル、ナフタレンスルホン酸、スルホサリチル酸等の有機酸との塩、臭化メチル、ヨウ化メチル等の四級アンモニウム塩、臭素イオン、塩素イオン、ヨウ素イオンなどのハロゲンイオンとの塩、リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、鉄、亜鉛等との金属塩、アンモニアとの塩、トリエチレンジアミン、２−アミノエタノール、２，２−イミノビス（エタノール）、１−デオキシ−１−（メチルアミノ）−２−Ｄ−ソルビトール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、プロカイン、Ｎ，Ｎ−ビス（フェニルメチル）−１，２−エタンジアミン等の有機アミンとの塩等が挙げられる。
【００３０】
本化合物に幾何異性体又は光学異性体が存在する場合は、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。
【００３１】
また、本化合物は水和物又は溶媒和物の形態をとっていてもよい。
【００３２】
さらに、本化合物にプロトン互変異性が存在する場合には、それらの互変異性体も本発明の範囲に含まれる。
【００３３】
（ａ）本化合物における好ましい例として、一般式（Ｉ）で示される化合物において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００３４】
（ａ１）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；及び／又は
（ａ２）Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；及び／又は
（ａ３）Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；及び／又は
（ａ４）上記で規定した芳香族複素環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。
【００３５】
すなわち、一般式（Ｉ）で示される化合物において、上記（ａ１）、（ａ２）、（ａ３）及び（ａ４）から選択される１又は２以上の各組合せからなる化合物又はその塩。
【００３６】
（ｂ）本化合物におけるより好ましい例として、一般式（Ｉ）で示される化合物において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００３７】
（ｂ１）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；及び／又は
（ｂ２）Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；及び／又は
（ｂ３）Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；及び／又は
（ｂ４）Ｙがイミダゾール環の場合、該イミダゾール環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。
【００３８】
すなわち、一般式（Ｉ）で示される化合物において、上記（ｂ１）、（ｂ２）、（ｂ３）及び（ｂ４）から選択される１又は２以上の各組み合わせからなる化合物又はその塩。
【００３９】
（ｃ）本化合物におけるさらに好ましい例として、上記のように定義された一般式（Ｉ）で示される化合物において、各基が下記に示す基である化合物又はその塩が挙げられる。
【００４０】
（ｃ１）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はメチル基を示し、；及び／又は
（ｃ２）Ｘはシアノ基、カルボキシル基、メチルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボニル基、ブチルオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、メチルアミノカルボニル基、エチルアミノカルボニル基、ジメチルアミノカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノカルボニル基、イミダゾール−１−イルカルボニル基、２−メチルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−フェニルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−（４−フルオロフェニル）イミダゾール−１−イルカルボニル基又はピラゾール−１−イル基を示す。
【００４１】
すなわち、上記のように定義された一般式（Ｉ）で示される化合物において、上記（ｃ１）及び（ｃ２）から選択される１又は２以上の各組み合わせからなる化合物又はその塩。
【００４２】
本化合物における最も好ましい例としては、下記式（ＩＩ）で示される２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸、下記式（ＩＩＩ）で示される２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸メチルエステル、又は、下記式（ＩＶ）で示される１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールが挙げられる。
【化３】
【化４】
【化５】
【００４３】
本化合物は、有機合成化学の分野における通常の方法に従って製造でき、ＷＯ９９／６５４７８又はＷＯ２００４／０６４７２３に記載された方法に基づいても製造することができる。
【００４４】
本発明において、酸化ストレスとは、活性酸素種、紫外線、放射線、金属、化学物質や、細胞内で活性酸素種産生を引き起こす刺激などにより個体や細胞が受けるストレスをいう。また、酸化ストレスが関連する眼疾患とは、このような酸化ストレスに起因する眼疾患をいい、特に、硝子体、網膜、脈絡膜、強膜又は視神経における酸化ストレスに起因する疾患をさし、例えば、加齢黄斑変性（初期加齢黄斑変性におけるドルーゼン形成、萎縮型加齢黄斑変性、滲出型加齢黄斑変性）、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障といった眼疾患が挙げられる。
【００４５】
本化合物は、必要に応じて、医薬として許容される添加剤を加え、単独製剤又は配合製剤として汎用されている技術を用いて製剤化することができる。
【００４６】
本化合物は、前述の眼疾患の予防又は治療に使用する場合、患者に対して経口的又は非経口的に投与することができ、投与形態としては、経口投与、眼への局所投与（点眼投与、硝子体内投与、結膜下投与、テノン嚢下投与等）、静脈内投与、経皮投与等が挙げられ、必要に応じて、製薬学的に許容され得る添加剤と共に、投与に適した剤型に製剤化される。経口投与に適した剤型としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等が挙げられ、非経口投与に適した剤型としては、例えば、注射剤、点眼剤、眼軟膏、ゲル、挿入剤等が挙げられる。これらは当該分野で汎用されている通常の技術を用いて調製することができる。また、本化合物はこれらの製剤の他に眼内インプラント用製剤やマイクロスフェアー等のＤＤＳ（ドラッグデリバリーシステム）化された製剤にすることもできる。
【００４７】
例えば、錠剤は、乳糖、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、無水リン酸水素カルシウム、デンプン、ショ糖等の賦形剤；カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポピドン、デンプン、部分アルファー化デンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等の崩壊剤；ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、デンプン、部分アルファー化デンプン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール等の結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、含水二酸化ケイ素、硬化油等の滑沢剤；精製白糖、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン等のコーティング剤；クエン酸、アスパルテーム、アスコルビン酸、メントール等の矯味剤などを適宜選択して用い、調製することができる。
【００４８】
注射剤は、塩化ナトリウム等の等張化剤；リン酸ナトリウム等の緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート等の界面活性剤；メチルセルロース等の増粘剤等から必要に応じて選択して用い、調製することができる。
【００４９】
点眼剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリンなどの等張化剤；リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどの緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の界面活性剤；クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム等の安定化剤；塩化ベンザルコニウム、パラベン等の防腐剤等から必要に応じて選択して用い、調製することができ、ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、通常４〜８の範囲内が好ましい。また、眼軟膏は、白色ワセリン、流動パラフィン等の汎用される基剤を用い、調製することができる。
【００５０】
眼内インプラント用製剤は、生体分解性ポリマー、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体、ヒドロキシプロピルセルロース等の生体分解性ポリマーを用い、調製することができる。
【００５１】
本発明はまた、薬理上有効量の本化合物を有効成分として患者（ヒト）へ投与することを含む酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療方法に関する。
【００５２】
本化合物の投与量は、剤型、投与すべき患者の症状の軽重、年令、体重、医師の判断等に応じて適宜変えるこができるが、経口投与の場合、一般には、成人に対し１日あたり０．０１〜５０００ｍｇ、好ましくは０．１〜２５００ｍｇ、より好ましくは１〜１０００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができ、注射剤の場合、一般には、成人に対し１日あたり０．０１〜２００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができ、また、点眼剤の場合には、０．０００００１〜１０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．００００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、より好ましくは０．０００１〜０．１％（Ｗ／Ｖ）の有効成分濃度のものを１日１回又は数回点眼することができる。さらに、眼内インプラント用製剤の場合は、成人に対し０．０１〜２０００ｍｇ含有する眼内インプラント用製剤を眼内にインプラントすることができる。
【発明の効果】
【００５３】
後述の試験を実施したところ、試験１において、本化合物が、Ｎｒｆ２によって発現制御されている異物代謝系第２相酵素であるＮＡＤ（Ｐ）Ｈキノン酸化還元酵素（ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ ｑｕｉｎｏｎｅ ｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ １：以下、「ＮＱＯ１」ともいう）を神経系細胞において誘導することが示された。また、試験２において、本化合物が、ＮＱＯ１を神経網膜及び網膜色素上皮において誘導することが示された。すなわち、本化合物は、神経網膜、網膜色素上皮、網脈絡膜といった後眼部組織において、異物代謝系第２相酵素の遺伝子発現を誘導制御し、酸化ストレスからの防御能を増強し、酸化ストレス状態を予防又は軽減する。さらに、試験３において、本化合物がラット光障害モデルにおいて光障害を改善することが示された。また、試験４において、本化合物がレーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルにおいて、優れた脈絡膜血管新生阻害作用を有することが示された。以上より、本化合物は、加齢黄斑変性（初期加齢黄斑変性におけるドルーゼン形成、萎縮型加齢黄斑変性、滲出型加齢黄斑変性）、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害、白内障などの酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５４】
以下に、試験１〜４及び製剤例の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００５５】
試験１．神経系細胞を用いたＮＱＯ１誘導能評価試験及び細胞生存率評価試験
神経系細胞を用いて、本化合物及びＮｒｆ２活性化能が報告されている化合物のＮＱＯ１の誘導能を評価した。併せて、これらの化合物の細胞生存率を評価した。
【００５６】
（実験概要）
神経系細胞として汎用されているＰＣ１２（ラット副腎褐色細胞種）を用いて、本化合物である２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸（以下、「ＣＤＤＯ」ともいう）、２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸メチルエステル（以下、「ＣＤＤＯ−Ｍｅ」ともいう）及び１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾール（以下、「ＣＤＤＯ−Ｉｍ」ともいう）、並びに、Ｎｒｆ２活性化能が報告されている化合物であるクエルセチンのＮｒｆ２活性化能を評価した。また、併せて、これらの化合物の細胞生存率を評価した。なお、Ｎｒｆ２活性化の指標として、Ｎｒｆ２の活性化によって発現増加することが知られているＮＱＯ１（異物代謝系第２相酵素）の酵素活性を用いた。
【００５７】
（ＮＱＯ１活性化能の評価試験方法）
ＰＣ１２を３×１０４個／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２／９５％空気の条件下で２４時間培養した。ＰＣ１２の培養液としては、５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）及び１０％ウマ血清（ＨＳ）を含有するＲＰＭＩ１６４０を用いた。次に培養液を除去し、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ又はクエルセチンを含有する異なる濃度の培養液（調製法は後述）に交換した。３７℃、５％ＣＯ２／９５％空気の条件下で２４時間培養した後に各細胞のＮＱＯ１活性を測定した。ＮＱＯ１活性の測定法は、Ｐｒｏｃｈａｓｋａらの方法（Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８８ Ｍａｒ；１６９（２）：３２８−３６）を参考にして行った。具体的には、細胞を界面活性剤で溶解して得た細胞抽出液にｍｅｎａｄｉｏｎｅとＭＴＴ（ｍｅｔｈｙｌ ｔｈｉａｚｏｌｅ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ）を含有する反応混合液を添加し、５分間反応させた後、５５０ｎｍの吸光度を測定することでＮＱＯ１活性を算出した。
【００５８】
（細胞生存率の評価試験方法）
（ＮＱＯ１活性化能の評価試験方法）と同様の手順でＰＣ１２を培養し、培養液をＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ又はクエルセチンを含有する異なる濃度の培養液に交換し、３７℃、５％ＣＯ２／９５％空気の条件下で２４時間培養した後に細胞の生存率を測定した。測定にはＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８（同仁化学）を用いた。
【００５９】
（データ解析）
後述する基剤培養液で処置した細胞のＮＱＯ１活性を１００％として、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ及びクエルセチンのＮＱＯ１誘導率（％）を表した。ＮＱＯ１誘導率の最大値をＥｍａｘとし、ＮＱＯ１活性の５０％誘導濃度（ＥＣ５０）をＥＸＳＡＳ（Ｖer. 7.1.6；株式会社アーム）にて算出した。また、基剤培養液で処置した細胞の生存率を１００％として、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ及びクエルセチンの生存率（％）を表した。５０％細胞毒性濃度（ＬＣ５０）をＥＸＳＡＳにて算出した。
【００６０】
（被験化合物を含有する培養液の調製）
各化合物をＤＭＳＯに溶解し、これらの溶液を各細胞の培養液で１０００倍希釈することにより各化合物の濃度を下記のように調整した。また、ＤＭＳＯのみを含有する培養液を基剤培養液とした。
【００６１】
ＣＤＤＯ：０．３，１，３，１０，３０，１００，３００，１０００，３０００、１００００及び３００００（ｎＭ）
ＣＤＤＯ−Ｍｅ：０．１，０．３，１，３，１０，３０，１００，３００，１０００，３０００、１００００及び３００００（ｎＭ）
ＣＤＤＯ−Ｉｍ：０．１，０．３，１，３，１０，３０，１００，３００，１０００，３０００、１００００及び３００００（ｎＭ）
クエルセチン：１．５６，３．１３，６．２５，１２．５，２５，５０，１００及び２００（μＭ）
（結果）
ＰＣ１２における各化合物のＥＣ５０、Ｅｍａｘ、ＬＣ５０及びＬＣ５０／ＥＣ５０を表１に示す。
【表１】
【００６２】
（考察）
表１から明らかなように、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ、ＣＤＤＯ−Ｉｍ及びクエルセチンが、ＰＣ１２においてＮＱＯ１を誘導することが示された。ここで、クエルセチンはＰＣ１２においてＮＱＯ１の誘導が認められたものの、その誘導能はＥＣ５０値＝６６００ｎＭである。その一方で、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ及びＣＤＤＯ−Ｉｍは、ＰＣ１２において優れたＮＱＯ１誘導能を有し、特に、ＣＤＤＯ−ＩｍはＥＣ５０値＝１１．４ｎＭという極めて優れたものであったことは驚くべき結果である。
【００６３】
以上の結果から、ＣＤＤＯ、ＣＤＤＯ−Ｍｅ及びＣＤＤＯ−Ｉｍに代表される本化合物が、神経系細胞において優れたＮｒｆ２誘導能を有し、酸化ストレスが関与する眼疾患に対して顕著な予防又は改善効果を有することが示された。
【００６４】
試験２．ラットを用いたＮＱＯ１誘導能評価試験
ラットを用いて、経口投与によるＣＤＤＯ−Ｍｅの神経網膜及び網膜色素上皮を含む網脈絡膜におけるＮＱＯ１活性化能を評価した。
【００６５】
（実験方法）
６週齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本チャールスリバー）に対して、基剤としての１％（Ｗ／Ｖ）メチルセルロース水溶液（メチルセルロースを超純水に溶解させて調製）に懸濁したＣＤＤＯ−Ｍｅ溶液を３、１０及び３０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、５日間反復経口投与した。なお、各投与群の例数は４眼（２匹）である。投与１、３及び５日後に、ラットの神経網膜及び網膜色素上皮を含む網脈絡膜画分を摘出し、ホモジナイズすることにより組織抽出液を得た。抽出液中のＮＱＯ１活性は試験１と同様の方法にて測定した。また、抽出液中の総タンパク質濃度を測定し、総タンパク質１ｍｇ当りのＮＱＯ１活性を算出した。
【００６６】
（結果）
各投与群のＮＱＯ１活性の経時変化を図１（神経網膜）及び図２（網膜色素上皮を含む網脈絡膜）に示す。
【００６７】
（考察）
図１及び図２から明らかなように、神経網膜及び網膜色素上皮を含む網脈絡膜画分のいずれにおいても、ＣＤＤＯ−Ｍｅの投与量に依存してＮＱＯ１活性が誘導された。この結果より、ＣＤＤＯ−Ｍｅは経口投与で神経網膜、網膜色素上皮及び網脈絡膜に到達し、各組織においてＮＱＯ１を誘導すること、すなわち、Ｎｒｆ２を活性化することが示された。ここで、網膜組織には、網膜血管内皮細胞で構成される内側血液網膜関門（ｉｎｎｅｒ ｂｌｏｏｄ−ｒｅｔｉｎａｌ ｂａｒｒｉｅｒ: ｉｎｎｅｒ ＢＲＢ）及び網膜色素上皮細胞で構成される外側血液網膜関門（ｏｕｔｅｒ ＢＲＢ）が存在し、これらにより膜組織などの後眼部領域への薬物輸送が厳格に制御されていることが知られている。すなわち、本化合物であるトリテルペノイド化合物を全身投与したとしても、実際に神経網膜、網膜色素上皮又は網脈絡膜に到達するか否かは明らかではない。しかしながら、試験２の結果は、本化合物であるＣＤＤＯ−Ｍｅが神経網膜、網膜色素上皮及び網脈絡膜に到達し、かつ、各組織においてＮＱＯ１を誘導することを示した。
【００６８】
以上の結果から、ＣＤＤＯ−Ｍｅに代表される本化合物が、神経網膜、網膜色素上皮及び網脈絡膜において優れたＮｒｆ２誘導能を有し、酸化ストレスが関与する眼疾患に対して予防又は改善効果を有することが示された。
【００６９】
試験３．ラット光障害モデルを用いた薬理試験
ラット光障害モデルを用いてＣＤＤＯ−Ｍｅの薬理効果を評価した。なお、ラット光障害モデルは光暴露により、主に光受容細胞及び網膜色素上皮細胞層に酸化ストレスを誘発させたモデル動物であり、主に網膜変性（例えば、加齢黄斑変性）のモデル動物として汎用されている。
【００７０】
（実験方法）
６週齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本チャールスリバー）に対して、基剤としての１％（Ｗ／Ｖ）メチルセルロース水溶液（メチルセルロースを超純水に溶解させて調製）に懸濁したＣＤＤＯ−Ｍｅ溶液を１、３及び１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、光照射３日前から光照射直後まで計６回反復経口投与した。なお、ラジカルスカベンジャーであるｐｈｅｎｙｌ−Ｎ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｎｉｔｒｏｎｅ（ＰＢＮ）を１００ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、光照射直前から光照射直後まで計３回反復腹腔内投与し、陽性対照とした。各投与群の例数は８〜１０眼（４〜５匹）である。２０００ｌｕｘで４８時間光照射することにより、光障害を誘発させた。光照射終了後、４時間の暗順応を暗室にて施し、ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ（ＥＲＧ）を測定した。得られた波形から ａ波およびｂ波の振幅を算出した。
【００７１】
（結果）
基剤投与群におけるＥＲＧのａ波およびｂ波の振幅をそれぞれ１００％として、各投与群の振幅を図３（ａ波）及び図４（ｂ波）に示す。
【００７２】
（考察）
図３及び図４から明らかなように、基剤投与群と比較して、ＣＤＤＯ−ＭｅはＥＲＧのａ波及びｂ波の減弱に対する改善作用を有しており、３ｍｇ／ｋｇという極めて少ない投与量でも１００ｍｇ／ｋｇのＰＢＮと同程度の治療効果を有することが示された。以上の結果から、ＣＤＤＯ−Ｍｅに代表される本化合物が、酸化ストレスが関与する眼疾患に対して予防又は改善効果を有することが示された。特に加齢黄斑変性に対して顕著な予防又は改善効果を有することが示された。
【００７３】
試験４．ラットレーザー誘発脈絡膜血管新生モデルを用いた薬理試験
レーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルを用いて、ＣＤＤＯ−Ｍｅの有用性を評価した。
【００７４】
（クリプトンレーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルの作製方法）
８週齢のＢＮ系雄性ラット（日本チャールスリバー）に５％（Ｗ／Ｖ）塩酸ケタミン注射液および２％塩酸キシラジン注射液の混合液（７：１）１ｍｌ／ｋｇを筋肉内投与して全身麻酔し、０．５％（Ｗ／Ｖ）トロピカミド−０．５％塩酸フェニレフリン点眼液を点眼して散瞳させた後、クリプトンレーザー光凝固装置により光凝固を行った。光凝固は、眼底後局部において、太い網膜血管を避け、焦点を網膜深層に合わせて１眼につき８ヶ所散在状に実施した（凝固条件：スポットサイズ１００μｍ、出力１００ｍＷ、凝固時間０．１秒）。光凝固後、眼底撮影を行い、レーザー照射部位を確認した。
【００７５】
（薬物投与方法）
ＣＤＤＯ−Ｍｅを１％（Ｗ／Ｖ）メチルセルロース液（メチルセルロースを精製水に溶解させて調製）に２ｍｇ／ｍｌ又は６ｍｇ／ｍｌになるように懸濁させ、それぞれ１回あたり１０ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇの用量で、光凝固手術日の３日前より、手術日を含め１０日間１日１回経口投与した（１日あたり１０ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇ）。
【００７６】
（評価方法）
光凝固後７日目、ラットに５％（Ｗ／Ｖ）塩酸ケタミン注射液および２％塩酸キシラジン注射液の混合液（７：１）１ｍｌ／ｋｇを筋肉内投与して全身麻酔し、０．５％（Ｗ／Ｖ）トロピカミド−０．５％塩酸フェニレフリン点眼液を点眼して散瞳させた後、１０％フルオレセイン溶液０．１ｍｌを尾静脈から注入して、蛍光眼底造影を行った。蛍光眼底造影で、蛍光露出が認められなかったスポットを陰性（血管新生なし）、蛍光露出が認められたスポットを陽性と判断した。また、若干の蛍光露出が認められる光凝固部位は、それが２箇所存在した時に陽性（血管新生あり）と判定した。その後、式１に従い、レーザー照射８ヶ所のスポットに対する陽性スポット数から脈絡膜血管新生発生率（％）を算出し、式２に従い、評価薬物の抑制率（％）を算出した。ＣＤＤＯ−Ｍｅの評価結果を表２に示す。なお各投与群の例数は８である。
【００７７】
［式１］
脈絡膜血管新生発生率（％）＝（陽性スポット数／全光凝固部位数）×１００
［式２］
抑制率（％）＝（Ａ０−ＡＸ）／Ａ０×１００
Ａ０：基剤投与群の脈絡膜血管新生発生率
ＡＸ：薬物投与群の脈絡膜血管新生発生率
【表２】
【００７８】
（考察）
表２から明らかなように、ＣＤＤＯ−Ｍｅが、レーザー誘発ラット脈絡膜血管新生モデルにおいて脈絡膜血管新生を阻害することが示された。すなわち、ＣＤＤＯ−Ｍｅに代表される本化合物は、脈絡膜において優れた血管新生阻害作用を有し、加齢黄斑変性に対して顕著な予防又は改善効果を有することが示された。
【００７９】
［製剤例］
製剤例を挙げて本発明の薬剤をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの製剤例にのみ限定されるものではない。
【００８０】
処方例１ 点眼剤
１００ｍｌ中
ＣＤＤＯ １０ｍｇ
塩化ナトリウム ９００ｍｇ
ポリソルベート８０ 適量
リン酸水素二ナトリウム 適量
リン酸二水素ナトリウム 適量
滅菌精製水 適量
滅菌精製水にＣＤＤＯ及びそれ以外の上記成分を加え、これらを十分に混合して点眼液を調製する。ＣＤＤＯの添加量を変えることにより、濃度が０．０５％（Ｗ／Ｖ）、０．１％（Ｗ／Ｖ）、０．５％（Ｗ／Ｖ）、１％（Ｗ／Ｖ）の点眼剤を調製できる。
【００８１】
処方例２ 眼軟膏
１００ｇ中
ＣＤＤＯ−Ｍｅ ０．３ｇ
流動パラフィン １０．０ｇ
白色ワセリン 適量
均一に溶融した白色ワセリン及び流動パラフィンに、ＣＤＤＯ−Ｍｅを加え、これらを十分に混合して後に徐々に冷却することで眼軟膏を調製する。ＣＤＤＯ−Ｍｅの添加量を変えることにより、濃度が０．０５％（Ｗ／Ｖ）、０．１％（Ｗ／Ｖ）、０．５％（Ｗ／Ｖ）、１％（Ｗ／Ｗ）の眼軟膏を調製できる。
【００８２】
処方例３ 錠剤
１００ｍｇ中
ＣＤＤＯ−Ｉｍ １ｍｇ
乳糖 ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン ２０ｍｇ
カルボキシメチルセルロースカルシウム ６ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ６ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．６ｍｇ
ＣＤＤＯ−Ｉｍ、乳糖を混合機中で混合し、その混合物にカルボキシメチルセルロースカルシウム及びヒドロキシプロピルセルロースを加えて造粒し、得られた顆粒を乾燥後整粒し、その整粒顆粒にステアリン酸マグネシウムを加えて混合し、打錠機で打錠する。また、ＣＤＤＯ−Ｉｍの添加量を変えることにより、１００ｍｇ中の含有量が０．１ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇの錠剤を調製できる。
【００８３】
処方例４ 注射剤
１０ｍｌ中
ＣＤＤＯ−Ｉｍ １０ｍｇ
塩化ナトリウム ９０ｍｇ
ポリソルベート８０ 適量
滅菌精製水 適量
ＣＤＤＯ−Ｉｍ及び塩化ナトリウムを滅菌精製水に溶解して注射剤を調製する。ＣＤＤＯ−Ｉｍの添加量を変えることにより、１０ｍｌ中の含有量が０．１ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇの錠剤を調製できる。
【図面の簡単な説明】
【００８４】
【図１】各投与群の神経網膜におけるＮＱＯ１活性の経時変化を示すグラフである。
【図２】各投与群の網膜色素上皮を含む網脈絡膜におけるＮＱＯ１活性の経時変化を示すグラフである。
【図３】基剤投与群におけるＥＲＧのａ波の振幅をそれぞれ１００％として、各投与群の振幅を示すグラフである。
【図４】基剤投与群におけるＥＲＧのｂ波の振幅をそれぞれ１００％として、各投与群の振幅を示すグラフである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤。
【化１】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、同一か又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、アルキル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環及びベンゾイミダゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環基はハロゲン原子、アルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。］
【請求項２】
一般式（Ｉ）において、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい、請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項３】
一般式（Ｉ）において、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
Ｙがイミダゾール環の場合、該イミダゾール環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい、請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項４】
一般式（Ｉ）において、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はメチル基を示し、；
Ｘはシアノ基、カルボキシル基、メチルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボニル基、ブチルオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、メチルアミノカルボニル基、エチルアミノカルボニル基、ジメチルアミノカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノカルボニル基、イミダゾール−１−イルカルボニル基、２−メチルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−フェニルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−（４−フルオロフェニル）イミダゾール−１−イルカルボニル基又はピラゾール−１−イル基を示す、請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項５】
一般式［Ｉ］で表される化合物が２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸、２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸メチルエステル又は１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールである請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項６】
酸化ストレスが関連する眼疾患が、硝子体、網膜、脈絡膜、強膜又は視神経における疾患である請求項１〜５のいずれか１記載の予防又は治療剤。
【請求項７】
酸化ストレスが関連する眼疾患が、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害又は白内障である請求項１〜５のいずれか１記載の予防又は治療剤。
【請求項８】
酸化ストレスが関連する眼疾患が、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症又は緑内障に伴う視神経障害である請求項１〜５のいずれか１記載の予防又は治療剤。
【請求項９】
投与形態が点眼投与、硝子体内投与、結膜下投与、テノン嚢下投与又は経口投与である請求項７記載の予防又は治療剤。
【請求項１０】
剤型が、点眼剤、眼軟膏、注射剤、錠剤、細粒剤又はカプセル剤である請求項７記載の予防又は治療剤。
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤。
【化１】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、同一か又は異なって、水素原子又はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水素原子、ハロゲン原子、水酸基、アミノ基、アルキル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環及びベンゾイミダゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環基はハロゲン原子、アルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい。］
【請求項２】
一般式（Ｉ）において、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
上記で規定した芳香族複素環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい、請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項３】
一般式（Ｉ）において、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はアルキル基を示し、；
Ｘはシアノ基又はＣＯ−Ｙを示し、；
Ｙは水酸基、アミノ基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、ハロゲノアルキルアミノ基、又はイミダゾール環及びピラゾール環からなる群より選択される芳香族複素環基を示し、；
Ｙがイミダゾール環の場合、該イミダゾール環はアルキル基、フェニル基又はハロゲノフェニル基で置換されていてもよい、請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項４】
一般式（Ｉ）において、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７はメチル基を示し、；
Ｘはシアノ基、カルボキシル基、メチルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボニル基、ブチルオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、メチルアミノカルボニル基、エチルアミノカルボニル基、ジメチルアミノカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノカルボニル基、イミダゾール−１−イルカルボニル基、２−メチルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−フェニルイミダゾール−１−イルカルボニル基、２−（４−フルオロフェニル）イミダゾール−１−イルカルボニル基又はピラゾール−１−イル基を示す、請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項５】
一般式［Ｉ］で表される化合物が２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸、２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイック酸メチルエステル又は１−［２−シアノ−３，１２−ジオキソオレアナ−１，９（１１）−ジエン−２８−オイル］イミダゾールである請求項１記載の予防又は治療剤。
【請求項６】
酸化ストレスが関連する眼疾患が、硝子体、網膜、脈絡膜、強膜又は視神経における疾患である請求項１〜５のいずれか１記載の予防又は治療剤。
【請求項７】
酸化ストレスが関連する眼疾患が、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、ぶどう膜炎、レーベル病、未熟児網膜症、網膜剥離、網膜色素上皮剥離、これらの疾患に起因する視神経障害、緑内障に起因する視神経障害、虚血性視神経障害又は白内障である請求項１〜５のいずれか１記載の予防又は治療剤。
【請求項８】
酸化ストレスが関連する眼疾患が、加齢黄斑変性、糖尿病網膜症又は緑内障に伴う視神経障害である請求項１〜５のいずれか１記載の予防又は治療剤。
【請求項９】
投与形態が点眼投与、硝子体内投与、結膜下投与、テノン嚢下投与又は経口投与である請求項７記載の予防又は治療剤。
【請求項１０】
剤型が、点眼剤、眼軟膏、注射剤、錠剤、細粒剤又はカプセル剤である請求項７記載の予防又は治療剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２００８−２４７８９８（Ｐ２００８−２４７８９８Ａ）
【公開日】平成２０年１０月１６日（２００８．１０．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５７２３８（Ｐ２００８−５７２３８）
【出願日】平成２０年３月７日（２００８．３．７）
【出願人】（０００１７７６３４）参天製薬株式会社 (177)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年１０月１６日（２００８．１０．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月７日（２００８．３．７）
【出願人】（０００１７７６３４）参天製薬株式会社 (177)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]