中枢神経系（ＣＮＳ）の原発性および二次性腫瘍を治療する方法並びに組成物
【課題】哺乳類の中枢神経系（脳および脊髄、眼）の原発性および／または二次性腫瘍の治療および／または予防および／または抑制のための方法および組成物の提供。
【解決手段】この場合、タウロリジンおよび／またはタウラルタムおよび／またはその生物学的同等物のようなメチロール転移薬剤の有効量が、中枢神経系腫瘍が増殖しているか、またはそのおそれのある哺乳類対象者に投与される。さらにまた、微量透析法、灌注法、埋め込み法、および血管造影法を用いる、溶液中のタウロリジンおよび／またはタウラルタムおよび／またはその生物学的同等物の局所適用方法が開示される。
【解決手段】この場合、タウロリジンおよび／またはタウラルタムおよび／またはその生物学的同等物のようなメチロール転移薬剤の有効量が、中枢神経系腫瘍が増殖しているか、またはそのおそれのある哺乳類対象者に投与される。さらにまた、微量透析法、灌注法、埋め込み法、および血管造影法を用いる、溶液中のタウロリジンおよび／またはタウラルタムおよび／またはその生物学的同等物の局所適用方法が開示される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、中枢神経系（ＣＮＳ）の腫瘍を治療する分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
タウロリジン（Taurolidine)（ビス−（１，１−ジオキソペルヒドロ−１，２，４−チアジアジニル−４）メタン）はガイストリッヒ＝ファーマ（Geistlich Pharma）によって開発された。それは、白色結晶物質で２％まで水に溶解し、またタウリンアミド２分子およびホルムアルデヒド３分子で構成され、メチレン基によって架橋された２環構造を有する。
タウロリジンは主として抗生物質作用および抗内毒素作用を有する。それは化学反応によって作用するので、微生物の耐性はまだ見つかっていない。タウロリジンのこの作用は、活性を有するメチロール基の供与体であるその活性代謝物質（メチロールタウラルタムおよびメチロールタウリンアミド）によって仲介される。活性メチロール基は細菌の細胞壁および内毒素の第一アミノ基と反応することによって不活化する。
【０００３】
タウロリジンのさらに別の作用は以前に報告された。すなわち、単核細胞におけるＴＮＦおよびＩＬ−１ベータの阻害（Bedrosian, 1991)、腫瘍壊死因子の毒性の抑制、および腹腔鏡による手術での腹腔腫瘍細胞の増殖抑制（Jacobi, 1997）である。
タウロリジン溶液は、腹膜炎の際に腹腔の点滴または洗浄溶液として用いられた。術後点滴の場合には、意識のある患者は、副作用として腹膜神経の刺激、時には鎮痛剤または麻酔剤の静脈投与を必要とする強い焼灼感を訴えた。
【０００４】
Monsonら（ＰＣＴ国際公開ＷＯ９２／００７４３号）は、ある種の身体腫瘍（JRT. Monson, PS. Ramsey, JH. Donohue, Preliminary evidence that taurolidine is anti-neoplastic as well as anti-endotoxin and anti-microbial., Abstract Br. J. Surg. 77(6):1990, A711）、in vivoマウスモデルでのＢ１６メラノーマ細胞およびＭｅｔｈＡ肉腫細胞、並びにin vitroの線維芽腫瘍細胞ＬＳ１７４Ｔ（結腸）癌細胞およびＪｕｒｋａｔ（白血病）細胞（国際出願ＰＣＴ／ＥＰ９１／０１２６９号、国際公開ＷＯ９２／００７４３号、"Use of Taurolidine and/or Taurultam for the treatment of tumors")に対するタウロリジンおよび／またはタウラルタム（Taurultam)の選択的な直接抑制作用を開示している。しかしながら、脳および中枢神経系（ＣＮＳ）の髄質の原発性腫瘍は身体のこれらのものとは非常に異なっている。神経細胞は他の器官の細胞とは顕著に異なっており、はるかに複雑な構造を有する。神経細胞は、刺激および感覚を伝達するために作用する極めて多数の分枝を特徴とする。これら分枝には刺激を受け取る樹状突起および刺激を射出する軸索が含まれる。神経膠は、ニューロンよりも数多く存在し、神経細胞に安定性を与える膠細胞（グリア細胞）である。膠細胞は鋭敏な神経細胞の保護および代謝に必要である。ＣＮＳ腫瘍が生じる細胞は他の腫瘍と比較した場合異なる代謝を有する。ＣＮＳ腫瘍の神経系外への転移は非常に稀である。そのような腫瘍は機能的に重要な領域に存在するか、または疎らに分散しているので、効果的な外科処置はしばしば不可能である。
【０００５】
脳および脊髄の原発性腫瘍はＣＮＳの種々の細胞型から生じる。これらの細胞型は、ニューロン（神経単位機能に寄与する）および膠細胞（支持機能および栄養補給機能を有する）である。膠細胞およびニューロン細胞の種々の亜型に対応して、種々のＣＮＳ腫瘍型が存在する。最も一般的な脳の腫瘍は膠細胞から生じる。種々の亜型（星状細胞腫、稀突起神経膠細胞腫、上衣細胞腫など）は「神経膠腫」という用語に包含される。
神経膠腫は最も一般的な原発性脳腫瘍である。神経膠腫の発生率は年間約５／１０００００人である。５０％以上が神経膠芽細胞腫で、大半は悪性型で、全腫瘍関連死亡率の２．５％以上に一致する。積極的な治療（外科手術、放射線療法および化学療法を含む）にもかかわらず、患者の９５％以上が診断後２年以内に死亡する。
【０００６】
脳腫瘍は、「末梢の」腫瘍と比較した場合いくつかの特異な性状を有する。それらは骨質の頭蓋骨によって作られる空間占有病巣として作用する。この状態はヘルニア形成を惹起し、さらに腫瘍増殖が収容能力より大きいときは死を招く。さらにまた、原発性脳腫瘍はしばしば全中枢神経系内の脳脊髄液を介して転移する。脳腫瘍細胞は、「末梢の」腫瘍細胞と比較して細胞形成で低い凝集性をもつ（W. Janisch: Pathologie der Geschwulste des Zentralnervensystems In: Klinische Neuropathologie, J. Cervos-Navarro & R. Ferszt(Eds.) Thieme, Stuttgart, New York, 1989）。さらに脳腫瘍代謝は脳／血液関門の影響を受ける。
神経膠性およびニューロン性の両タイプの腫瘍は悪性になりやすい。悪性神経膠腫は良性神経膠腫より頻度が高い（８５％対１５％）。米国では、毎年約２００００例の新規な神経膠腫および髄芽腫が発生する。神経膠芽腫が最も一般的である（星状細胞腫の中で約６５％）。
【０００７】
原発性ＣＮＳ腫瘍の治療の選択肢には外科手術、放射線療法、および化学療法が含まれる。腫瘍境界の特定が困難であることと脳領域内に位置するために、完全な切除はしばしば不可能である。ほとんど全ての悪性神経膠腫が数カ月以内に再発し、９０％は原発部位に再発する。再発神経膠腫の再手術によって典型的には約３６週の延命が得られる（良好な生活の質が得られるのは１０週）。神経膠腫手術後の放射線療法の有益な効果に関する優れた構想の研究は見当たらない。６５才以上の患者では、生検プラス照射療法の後の中央生存値は約１７週で、さらに腫瘍除去プラス照射療法の後では約３０週である（神経膠腫の発生率のピークは約６０才である）。しかしながら、完全な腫瘍除去プラス放射線療法が神経膠腫治療の参考標準であると考えられる。
【０００８】
アルキル化剤を用いる化学療法は約３０％の陽性応答率を有する。陽性応答は一般に生存を６−８週延長する。しかしながら、アルキル化剤を用いる化学療法で治療した患者の約５０％しか通常の活動を維持できない。
診断および治療の進歩にもかかわらず、悪性の原発性ＣＮＳ腫瘍をもつ患者の予後はなお不良である。完全な摘出および照射を含む最適療法後の神経膠芽腫患者の中央生存値は、約１０箇月未満である（第ＩＩＩ段階の星状細胞腫で約１．６年）。神経膠芽腫患者の１年生存率は約３５％、２年生存率は約８％である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
いくつかの原発性悪性中枢神経系腫瘍は、その位置またはびまん性拡張のために（神経膠腫症、びまん性脳幹神経膠腫）外科的治療が不可能である。化学療法は一般的に推奨されていない。なぜならば、これらのアルキル化剤（ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ、プロカルバジン）に対する応答率は患者の約１０％であるからである（M.S. Greenberg, Handbook of Neurosurgery. 3rd Ed.(1994), Greenberg Graphics Inc., Lakekand, FL, USA)。これまでこのような患者には姑息的な照射以外に治療は与えられなかった。したがって、中枢神経系の原発性悪性腫瘍の治療法は極めて不満足なものであった。
当技術分野では中枢神経系腫瘍を治療する新規な方法および組成物の必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、哺乳類の中枢神経系腫瘍の治療のために、メチロール転移剤（タウロリジンおよび／またはタウラルタムを含む）を使用することに関する。タウロリジンの腹膜炎術後点滴の副作用である腹膜神経の刺激および強い焼灼感にもかかわらず、驚くべきことにＣＮＳ神経細胞（胎児髄膜細胞の特に感受性の強い幹細胞を含む）はタウロリジン／タウロラルタム溶液の投与後に影響を受けないことが見出された。
【００１１】
ニューロン腫瘍細胞株および神経膠腫瘍細胞株に対してタウロリジンおよび／またはタウラルタムが直接的抗新形成作用を示すことは驚くべきことであった。この作用は、他の腫瘍細胞と比較して、特に化学療法剤に対するそれらの反応に関する脳腫瘍細胞の極めて異なる反応のために極めて予期に反していた。さらにまた、タウロリジンおよび／またはタウロラルタムの抗新形成作用は、細胞粘着分子に対する影響とのみ関連していると考えられた。このことは内視鏡腹腔腫瘍摘出術に続く転移腫瘍増殖の防止を説明する。脳腫瘍細胞に対する直接的抗新形成作用は極めて予想に反するものであった。
【００１２】
タウロリジンおよびタウラルタム、その中間体および活性代謝物はメチロール転移剤である。それらはメチロール基を作用部位に移転させることによって機能する。両物質とも毒性が低く、正常細胞に対して細胞毒性をもたない。
本発明は、哺乳類の中枢神経系の原発性および二次性腫瘍の治療および予防、および／または抑制を提供し、この方法では、有効用量のメチロール転移剤（例えばタウロリジンおよび／またはタウラルタム）が、中枢神経系腫瘍の増殖をもつか、またはそのおそれがある哺乳類の対象者に投与される。さらにまた本発明は、微量透析法、灌注法、埋め込み法および血管造影法を用いて溶液中のタウロリジンおよび／またはタウラルタムを局所に適用する方法を包含する。本明細書で用いられるように、タウロリジンおよび／またはタウラルタムという用語は、化合物タウロリジン、タウラルタム、タウラルタム−グルコース（下記で述べる）および、それらの実質的な生物学的同等物または薬剤であって実質的に類似の態様で作用するものを指す。例えば、タウラルタムに由来するアミノグリカン、並びにタウロリジンおよび／またはタウラルタムの他の適切な任意の誘導体、または実質的に同様な態様で作用する薬剤が、本発明にしたがってタウロリジンおよび／またはタウラルタムとして利用される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本明細書で用いられるように「治療」という用語はＣＮＳ腫瘍の治療、予防および／または抑制を指す。本発明は以下を含むＣＮＳ腫瘍の治療に適用できる：
−多形型神経膠芽腫（ＧＢＭ）
−重度神経膠腫
−無構造性稀突起神経膠細胞腫
−軽度神経膠腫
−再発性悪性神経膠腫
−無構造性星状細胞腫
−進行した転移性メラノーマ
−再発した重度原発脳腫瘍
−原発性中枢神経系リンパ腫
−悪性神経膠腫の髄膜播種（髄膜性神経膠症）
【００１４】
治療は主に、タウロリジンおよび／またはタウラルタム溶液（例えば微量透析法または灌注法を用いる）の術後局所適用だけでなく、外科的介入（例えばＣＮＳ腫瘍の外科的除去）に関連して実施される。タウロリジンおよび／またはタウラルタムは血液／脳関門を通過するので、中心カテーテルにより静脈内に２％タウロリジン溶液または３％タウラルタム溶液を投与するのもまた適切であろう。さらに抗新形成作用の他に、感染の予防もまた患者にとっては極めて大きな利点である。この関係で、適切な投薬量は、成人について、中心カテーテルにより７−８日間に毎日２％溶液としてタウロリジン１５−２０ｇ、また別には７−８日間に毎日３％タウラルタム溶液として２０−３０ｇのタウラルタムであろう。これは、神経学的機能および健康の観点から生活の質を維持または改善しようとするものである。脳の手術と関連する局所適用のためには、グルコース主剤溶液（電解質とともにまたは電解質を含まない）でさらに０．２−１％のタウロリジン、タウラルタム、またはタウラルタム−グルコースを含むものが好ましい。
【００１５】
基礎治療溶液は好ましくは脳脊髄溶液にならって作製され、グルコースおよび電解質を含み、可能な程度に実質的に等張で、わずかにアルカリ性ｐＨ（約７．３−７．５）を有する。基礎溶液は以下の成分を含むことができる：
−重炭酸塩
−ナトリウム
−カリウム
−カルシウム
−マグネシウム
−乳酸塩
−塩化物
−グルコース
タウロリジン、タウラルタム、タウラルタム−グルコースなどが基礎溶液に添加される。
【００１６】
代表的基礎溶液：
基礎溶液は例えば下記の表に示す脳脊髄液（ＣＳＦ）成分で構成される。
【００１７】
【表１】
【００１８】
代表的アミノ−糖／タウラルタム−グルコース治療剤：
１３．６ｇのタウラルタムおよび１８ｇの無水グルコースを２５０ｍｌの血清びんに量りわけ、２００ｍｌの蒸留水を加えた。得られた溶液を１００℃で３０分加熱した。清澄な溶液を真空中で蒸発させて乾燥させた。残留物を９６％アルコールに吸収させ、エーレンマイヤーフラスコ中で一晩静置して結晶を生成させた。
アミノ−糖／タウラルタム−グルコースが結晶化し、この結晶を吸引ろ過して未精製収量で５．３ｇを得た。
数滴の水と混合したアルコールから白色の結晶が再結晶化された：
融点：１６８−１７０℃
計算値：Ｃ＝３６．２３；Ｈ＝６．０３；Ｎ＝９．３９；Ｓ＝１０．７４％
測定値：Ｃ＝３６．２６；Ｈ＝６．１０；Ｎ＝９．０９；Ｓ＝１０．９０％
ＩＲスペクトルはＤＭＳＯ6２００ＭＨＺ中のＮＭＲと一致した。スルホンアミドのＮＨはその隣接するＣＨ2と共役し、１つのＯＨはＣＨ2と共役し、３つのＯＨはＣＨと共役しているのは、水が内部で失われたこと、および鎖が環状化して糖を形成したことを示していた。
【００１９】
灌注および／または微量透析法で使用する溶液：
溶液１：溶液１の１０００ｍｌ中に下記を含む：
注射用グルコース一水塩 ２７．５００ｇ
ナトリウム ３．３８２ｇ
カリウム ０．１５７ｇ
Ｃａ++ ０．００９ｇ
Ｃｌ- ５．５２０ｇ
タウラルタム ０．５％
この溶液はわずかに高張である。グルコースは２５ｇのレブロース（フルクトース）で代替できる。この溶液はしたがってインスリン非依存性である。
【００２０】
溶液２：溶液２の１０００ｍｌ中に下記を含む：
ナトリウム ３．１５１ｇ
カリウム ０．１５６ｇ
Ｃａ++ ０．０６６ｇ
Ｍｇ++ ０．０３３ｇ
Ｃｌ- ３．９００ｇ
アセテート ２．１７３ｇ
タウラルタム−グルコース ０．５％
ｐＨ値をｐＨ７．３に設定する。
溶液１および２を適切な無菌的態様で０．１ミクロンの滅菌フィルターでろ過し、無菌輸液びんに無菌的に分配する。
【００２１】
溶液３：溶液３の１０００ｍｌ中に下記を含む：
注射用グルコース一水塩 １８．３３０ｇ
乳酸ナトリウム ２．４６０ｇ
塩化ナトリウム ２．８００ｇ
塩化カリウム ０．１８７ｇ
塩化カルシウム２Ｈ2Ｏ ０．１４７ｇ
塩化マグネシウム６Ｈ2Ｏ ０．１５２ｇ
タウロリジン １％
ｐＨ値をｐＨ７．３に設定する。
この溶液を無菌的態様でろ過し、１００ｍｌの輸液びんに無菌的に分配する。
【００２２】
溶液４：溶液４の１０００ｍｌ中に下記を含む：
塩化ナトリウム ４．０００ｇ
塩化カリウム ０．０５０ｇ
塩化カルシウム２Ｈ2Ｏ ０．０６６ｇ
炭酸水素ナトリウム ０．０５０ｇ
タウラルタム １％
滅菌前にこの溶液をｐＨ７．５に設定し、続いて無菌的態様でろ過し、２５０ｍｌの輸液びんに分配し蒸気で１２１℃で１５分滅菌する。
【００２３】
代表的治療態様：
タウロリジンおよび／またはタウラルタムは注射または輸液によって、または局所適用によって投与することができる。等張グルコース溶液および／または上記のような人工脳脊髄液溶液でタウロリジンおよび／またはタウラルタム、あるいはその実質的な生物学的同等物を含有するものを用いることができる。局所投与は、（ａ）消息子（プローブ）チューブを用いる微量透析によって、および（ｂ）直接灌注および／またはカテーテルの埋め込みによって、１回または反復灌注により実施できる。微量透析法は、非摘出腫瘍または再発腫瘍の場合に、手術不能腫瘍（例えばびまん性脳幹神経膠腫）の場合と同様に利用できる。
【００２４】
ａ）微量透析法
上記の等張溶液をタンクに体温で保存する。小さなポンプ（皮下用または体外用）でタウロリジンおよび／またはタウラルタム溶液を管状ミクロ消息子を介して腫瘍および／またはその周辺に注入する。ミクロ消息子は小管腔を有するプラスチック材で作ることができる。消息子の先端は、浸透性液体が交換されるように半透膜を有するであろう。このようにして、タウロリジンおよび／またはタウラルタムを腫瘍の内部および腫瘍の周辺に分散させることができる。腫瘍内部で直接終わらせるために、小さな先端をもつ消息子には種々のタイプの消息子が含まれる。大きな腫瘍については、大きな膜を消息子の末端に提供し、腫瘍腔内または腫瘍表面に置くことができる。大きな腫瘍を有するいくつかの事例では、１つ以上の消息子を植え込むことが必要かもしれない。
【００２５】
ｂ）灌注／カテーテル法
腫瘍の除去に続いて、または嚢胞性腫瘍の場合には、腫瘍腔または腫瘍領域に直接１回または反復灌注が実施できる。さらにまた、タウロリジンおよび／またはタウラルタムの反復局所投与のために、カテーテルを腫瘍腔に埋め込んでもよい。
ｃ）血管造影法
タウロリジンおよび／またはタウラルタムの特定領域適用のためのまた別の方法が、１つまたは少数の支配栄養補給動脈によって血液が供給されている腫瘍に提供される。タウロリジンおよび／またはタウラルタムは血管造影カテーテルによって投与でき、このカテーテルを超選択的に栄養補給血管に導入する。続いてタウロリジンおよび／またはタウラルタムを１回または繰り返し投与できる。
ｄ）埋め込み方法
完全または不完全な腫瘍の除去に続いて、タウロリジンおよび／またはタウラルタム含有マトリックスを直接１回または繰り返し腫瘍腔に埋め込むことができる。
【００２６】
結果：
タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、ＣＮＳ腫瘍細胞株（神経膠腫瘍細胞株（Ｃ６）だけでなくニューロン性細胞株（ＨＴ２２）を含む）の増殖を直接抑制することが見出された。さらにまた、この作用は、胎児ラットの中枢神経系の初代細胞株の増殖の抑制には、腫瘍細胞と比較した場合極めて高濃度および極めて長時間の接触を必要とする（胎児ラット中枢神経系の初代細胞株の非常に高い一般的感受性を考慮しても）という点で、選択的であるということが示された。この作用は濃度依存性であった。ＰＶＰおよびグルコース溶液中の０．１から４ｍｇ／ｍｌの濃度でタウロリジンおよび／またはタウラルタムの抗新形成作用が明らかであった。腫瘍細胞は１０分後から抑制された。１から２時間後に９０％の腫瘍細胞が抑制された。
【００２７】
要約：
本発明の腫瘍抑制薬剤（タウロリジンおよび／またはタウラルタムを含む）は、注射または輸液によって投与できる。本発明の薬剤は、消息子を用いる微量透析によって局所的に投与できるだけでなく、超選択的血管造影カテーテルを用いて領域限定的に本発明の薬剤を持続的または連続的に投与できる。
本発明の微量透析法を実施する消息子は、ニューロナビゲーション、ＭＲＩガイダンスおよび／または超音波ガイダンスを用いて配置できる。組織学的診断を実施するために、本発明の微量透析法を用いる処置を施している同じ外科手術時に診断用生検材料を腫瘍から採取することができる。また別に、本発明の微量透析法中に、液体は腫瘍またはその周辺から得られ、その結果腫瘍領域で所望の液レベルを維持できる。
【００２８】
本発明の薬剤は、腫瘍またはその周辺の連続的または反復局所灌注のために永久的または一時的に埋め込んだカテーテルによって投与できる。処置薬は、完全または部分的摘出腫瘍の周辺の灌注によって局所的に投与できる。
好ましい実施態様では、タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、静脈内に一日当たり約５０−５００ｍｇ／ｋｇの投与範囲で、逐次的または持続的投与によって投与される。
本発明のメチロール転移剤の投与とは別にまたはそれと同時に、他の薬剤を投与できる。これらには細胞毒性薬剤、抗新形成薬剤（アルキル化剤、および／または腫瘍代謝に必要な薬剤を含む）が含まれる。また別には、またはそれに加えて（所望する場合には）、他の腫瘍薬、例えばインターロイキン−１、インターロイキン−２、インターフェロンまたは他の免疫調節剤を投与してもよい。
【００２９】
併用療法の利点には以下が含まれる：
１）腫瘍の制御の達成および生存の改善に関して併用療法の使用によって協調作用を認めることができる。
２）抗新形成医薬の投与用量の削減は重要な副作用（例えば脱毛、吐き気、嘔吐、下痢など）の軽減をもたらす。
３）併用療法は医薬の種々の適用態様を可能にする。例えばタウロリジンおよび／またはタウラルタムの局所投与、一般的な全身化学療法など。
タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、局所硬膜下腔内または静脈内一般的化学寮法と併用して腹腔内適用によって投与してもよい。
この併用投与は、開腹手術または腹腔鏡による手術時の体液中および脳内への転移およびそれらの部位での播種発生の防止を促進する。
【実施例】
【００３０】
実施例１：
タウロリジンおよびタウラルタムは、ニューロン腫瘍細胞株（ＨＴ２２、マウス）、神経膠腫瘍細胞株（Ｃ６、ラット）および混合型ニューロン神経膠腫瘍細胞株（Ｕ３７３、ヒト）の増殖を直接的に抑制することが見出された。しかしながら、後者の細胞株の場合、実験はまだ完全ではない。さらにこの作用は、正常な中枢神経系細胞の増殖は顕著には抑制されないという点で選択的であることが示された。この作用は濃度依存性であった。０．１から４ｍｇ／ｍｌの濃度でタウロリジンおよび／またはタウラルタムの抗新形成作用が明らかであった。腫瘍細胞は３０分後から選択的に抑制された。１から３時間後に約９０％の腫瘍細胞が抑制された。細胞培養では、細胞はＲＰＭＩ １６４０培養液中で使用し、ファルコンフラスコで平板培養した。０．１−４ｍｇ／ｍｌのタウロリジンおよび／またはタウラルタムと一緒のインキュベーション後に、細胞学的変化を１０、３０、６０、１２０、１８０、３００分後、および２４、４８時間後に記録した。
【００３１】
３０分後から、以下を含む細胞学的変化が観察された：（ａ）空胞の発生、および（ｂ）核の凝縮、細胞質の収縮および細胞死。
微細構造変化には以下が含まれる：ミトコンドリアの膨張、核の膨張、細胞質
の膨張および細胞膜の破壊。最初の変化は１０分後に出現し、時間および濃度が増すにつれ増加した。
ＤＮＡ−ＦＡＣＳの結果はこの細胞学的変化および微細構造変化を支持するものであった。
ラット胎児脳細胞の培養を用いて、初代ＣＮＳ細胞に対するタウロリジンおよび／またはタウラルタムの作用を調べた。４８時間後で顕著な細胞学的作用は認められなかった。
【００３２】
神経膠腫患者の治療のためには、タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、注射または輸液によって、または局所適用によって投与できる。局所投与は、（ａ）管状消息子を用いる微量透析によるか、さらに（ｂ）直接灌注または一時的もしくは永久カテーテルの埋め込みにより１回灌注または反復灌注によって実施できる。
微量透析法は、非摘出腫瘍または再発の場合に、手術不能腫瘍（例えばびまん性脳幹神経膠腫）の場合と同様に用いることができる。灌注／カテーテル法は完全または不完全腫瘍摘出に続いて用いることができる。
【００３３】
実施例２：神経膠芽腫、神経膠肉腫、無構造性神経膠腫および星状細胞腫患者におけるタウロリジンおよび付加的抗新形成薬剤の併用療法
脳腫瘍（例えば神経膠芽腫、星状細胞腫および神経膠肉腫）の治療で、タウロリジン／タウラルタムと抗新形成薬剤との併用は多くの利点を提供する。例えば、アルキル化剤とタウロリジンおよび／またはタウラルタムとの併用は、抗新形成薬によって誘発される副作用（例えば吐き気、嘔吐、下痢など）を回避または軽減する。こられの抗新形成薬の用量は半分またはそれ以上減らすことができ、それでもなお協調効果によって全体的反応率（疾患安定化率）を高めることができる。
強力な副作用を有する放射線療法もまた多くの事例で回避または減少させることができる。
多形型神経膠芽腫および星状細胞腫の原発性脳腫瘍における播種腫瘍の再発率もまた併用療法によって減少させることができる。
【００３４】
多様な抗新形成薬剤の中で、その分子的構造のゆえにタウロリジンおよび／またはタウラルタムと相互反応しそうにない医薬が選択されるべきである。さらにまた、併用化学療法を種々の態様で腫瘍部位に誘導することが望ましい。これらの態様では、例えばタウロリジンおよび／またはタウラルタムは直接灌注によって、または永久カテーテルの埋め込みによって、またはチューブを使用して微量透析によって脳腫瘍に局所的に投与され、さらに静注または経口的に既によく用いられている通常の化学療法が、例えばテモゾラミド１００ｍｇ／ｍ2、１日１回５日間の投与によって実施される。
【００３５】
また別には、神経膠芽腫の外科的切除の後で、５−フルオロウラシル（ｆ−ＦＵ）の局在的および持続的な薬剤配送を、タウロリジンおよび／またはタウラルタムの中心カテーテルによる数日間の点滴輸液と併用して提供することができる。
腫瘍患者の腹腔鏡による緊急腫瘍手術、腹腔鏡による胆嚢摘出、胆嚢炎、腹腔鏡による胆嚢腸管手術の場合は、一般的開腹手術の場合と同様に、通常の静注化学療法と併用して、洗浄または注入処置として２％タウロリジンの腹腔内投与を腫瘍の処置、脳内転移および播種の防止のために実施することが可能である。
生存率の低い硬膜下腔内（ＩＴ）化学療法剤の使用に付随する悪性神経膠腫の髄膜播種（髄膜神経膠腫症）では、タウロリジンおよび／またはタウラルタム溶液の局所的または全身的投与の併用は、腫瘍制御および生存率の改善のために有用であろう。
【００３６】
以下の抗新形成薬剤はタウロリジンおよび／またはタウラルタムとの併用に適合しているであろう：
ＰＣＶ化学療法：以下を併用する
−プロカルバジンＨＣｌ
−ロムスチン（ＣＣＮＵ）（ＣｅｅＮｕ）
−硫酸ビンクリスチン
シスプラチン
メトトレキセート
シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ） シタラビン塩酸塩
テモゾラミド
ＭＸ２−塩酸塩
トポセタン
パクリタキセル（タキソール）
インターロイキン−２（ＩＬ−２）：インターロイキン−１（ＩＬ−１）およびリンホカイン活性化キラー細胞またはＴＮＦとの同時投与において、タウロリジンとの併用はサイトカインの毒性を低下させ、患者にとってより快適である。
【００３７】
ニトロソウレア系薬物（例えばＡＣＮＵ／ＢＣＮＵ／ＣＣＮＵ）は、一般により低い濃度（例えば３０−５０ｍｇ／ｍ2）で６週間の間１週当たり１回静注によって投与される。テモゾラミドは、５０−１００ｍｇ／ｍ2の用量で５日間経口投与で与えられる。ＭＸ−２塩酸塩は、静脈洞ボーラスとして進展が見られるまで数箇月間２８日毎に２０ｍｇ／ｍ2で投与される。
別の選択として、またべつの抗新形成薬が併用に適している：
シクロホスファミド 約１５０ｍｇ／ｍ2
フルオロウラシル（５−ＦＵ） 局所ボーラスとして４０ｍｇ／ｍ2
また、硬膜下腔内（ＩＴ）化学療法としてマイクロフィアの形態で以下が用いられる：
ドキソルビシン １０−１５ｍｇ／ｍ2静注
ヒドロキシカルバミド
【００３８】
生存率の改善並びに主要制御および播種の防止を達成するためにタウロリジンおよび／またはタウラルタムを種々に併用して、シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ）、チオトリエチレン−ホスホルアミド（チオ−ＴＥＰＡ）およびネオカルジノスタティスをそれぞれ低用量でＩＴ−化学療法で投与できる。
【００３９】
単位投与量：
患者に薬剤を投与するための溶液は、多形型神経膠芽腫細胞の組織培養で有効な用量のタウロリジンおよび／またはタウラルタムおよび／またはタウラルタム−グルコースを含んでいなければならない。０．１−４ｍｇ／ｍｌのタウロリジンが組織培養で腫瘍細胞を抑制し、または殺す。
これまでのところ、タウラルタムはタウロリジンよりもほぼ２倍有効であることが示された。その説明は、水溶液中のタウロリジンのメチロール−タウラルタムとタウラルタムとの間の平衡に見出すことができるであろう。
他方、タウラルタム−グルコースは、その分子量が１３６から２９８にタウラルタムより増加するのでタウラルタムの約２倍を投与しなければならない。
上記の灌注／カテーテル法を用いて患者に投与する場合は、少なくとも約４ｍｇ／ｍｌの濃度でタウロリジン、タウラルタムまたはタウラルタム−グルコースがそれぞれ使用されるべきである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、中枢神経系（ＣＮＳ）の腫瘍を治療する分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
タウロリジン（Taurolidine)（ビス−（１，１−ジオキソペルヒドロ−１，２，４−チアジアジニル−４）メタン）はガイストリッヒ＝ファーマ（Geistlich Pharma）によって開発された。それは、白色結晶物質で２％まで水に溶解し、またタウリンアミド２分子およびホルムアルデヒド３分子で構成され、メチレン基によって架橋された２環構造を有する。
タウロリジンは主として抗生物質作用および抗内毒素作用を有する。それは化学反応によって作用するので、微生物の耐性はまだ見つかっていない。タウロリジンのこの作用は、活性を有するメチロール基の供与体であるその活性代謝物質（メチロールタウラルタムおよびメチロールタウリンアミド）によって仲介される。活性メチロール基は細菌の細胞壁および内毒素の第一アミノ基と反応することによって不活化する。
【０００３】
タウロリジンのさらに別の作用は以前に報告された。すなわち、単核細胞におけるＴＮＦおよびＩＬ−１ベータの阻害（Bedrosian, 1991)、腫瘍壊死因子の毒性の抑制、および腹腔鏡による手術での腹腔腫瘍細胞の増殖抑制（Jacobi, 1997）である。
タウロリジン溶液は、腹膜炎の際に腹腔の点滴または洗浄溶液として用いられた。術後点滴の場合には、意識のある患者は、副作用として腹膜神経の刺激、時には鎮痛剤または麻酔剤の静脈投与を必要とする強い焼灼感を訴えた。
【０００４】
Monsonら（ＰＣＴ国際公開ＷＯ９２／００７４３号）は、ある種の身体腫瘍（JRT. Monson, PS. Ramsey, JH. Donohue, Preliminary evidence that taurolidine is anti-neoplastic as well as anti-endotoxin and anti-microbial., Abstract Br. J. Surg. 77(6):1990, A711）、in vivoマウスモデルでのＢ１６メラノーマ細胞およびＭｅｔｈＡ肉腫細胞、並びにin vitroの線維芽腫瘍細胞ＬＳ１７４Ｔ（結腸）癌細胞およびＪｕｒｋａｔ（白血病）細胞（国際出願ＰＣＴ／ＥＰ９１／０１２６９号、国際公開ＷＯ９２／００７４３号、"Use of Taurolidine and/or Taurultam for the treatment of tumors")に対するタウロリジンおよび／またはタウラルタム（Taurultam)の選択的な直接抑制作用を開示している。しかしながら、脳および中枢神経系（ＣＮＳ）の髄質の原発性腫瘍は身体のこれらのものとは非常に異なっている。神経細胞は他の器官の細胞とは顕著に異なっており、はるかに複雑な構造を有する。神経細胞は、刺激および感覚を伝達するために作用する極めて多数の分枝を特徴とする。これら分枝には刺激を受け取る樹状突起および刺激を射出する軸索が含まれる。神経膠は、ニューロンよりも数多く存在し、神経細胞に安定性を与える膠細胞（グリア細胞）である。膠細胞は鋭敏な神経細胞の保護および代謝に必要である。ＣＮＳ腫瘍が生じる細胞は他の腫瘍と比較した場合異なる代謝を有する。ＣＮＳ腫瘍の神経系外への転移は非常に稀である。そのような腫瘍は機能的に重要な領域に存在するか、または疎らに分散しているので、効果的な外科処置はしばしば不可能である。
【０００５】
脳および脊髄の原発性腫瘍はＣＮＳの種々の細胞型から生じる。これらの細胞型は、ニューロン（神経単位機能に寄与する）および膠細胞（支持機能および栄養補給機能を有する）である。膠細胞およびニューロン細胞の種々の亜型に対応して、種々のＣＮＳ腫瘍型が存在する。最も一般的な脳の腫瘍は膠細胞から生じる。種々の亜型（星状細胞腫、稀突起神経膠細胞腫、上衣細胞腫など）は「神経膠腫」という用語に包含される。
神経膠腫は最も一般的な原発性脳腫瘍である。神経膠腫の発生率は年間約５／１０００００人である。５０％以上が神経膠芽細胞腫で、大半は悪性型で、全腫瘍関連死亡率の２．５％以上に一致する。積極的な治療（外科手術、放射線療法および化学療法を含む）にもかかわらず、患者の９５％以上が診断後２年以内に死亡する。
【０００６】
脳腫瘍は、「末梢の」腫瘍と比較した場合いくつかの特異な性状を有する。それらは骨質の頭蓋骨によって作られる空間占有病巣として作用する。この状態はヘルニア形成を惹起し、さらに腫瘍増殖が収容能力より大きいときは死を招く。さらにまた、原発性脳腫瘍はしばしば全中枢神経系内の脳脊髄液を介して転移する。脳腫瘍細胞は、「末梢の」腫瘍細胞と比較して細胞形成で低い凝集性をもつ（W. Janisch: Pathologie der Geschwulste des Zentralnervensystems In: Klinische Neuropathologie, J. Cervos-Navarro & R. Ferszt(Eds.) Thieme, Stuttgart, New York, 1989）。さらに脳腫瘍代謝は脳／血液関門の影響を受ける。
神経膠性およびニューロン性の両タイプの腫瘍は悪性になりやすい。悪性神経膠腫は良性神経膠腫より頻度が高い（８５％対１５％）。米国では、毎年約２００００例の新規な神経膠腫および髄芽腫が発生する。神経膠芽腫が最も一般的である（星状細胞腫の中で約６５％）。
【０００７】
原発性ＣＮＳ腫瘍の治療の選択肢には外科手術、放射線療法、および化学療法が含まれる。腫瘍境界の特定が困難であることと脳領域内に位置するために、完全な切除はしばしば不可能である。ほとんど全ての悪性神経膠腫が数カ月以内に再発し、９０％は原発部位に再発する。再発神経膠腫の再手術によって典型的には約３６週の延命が得られる（良好な生活の質が得られるのは１０週）。神経膠腫手術後の放射線療法の有益な効果に関する優れた構想の研究は見当たらない。６５才以上の患者では、生検プラス照射療法の後の中央生存値は約１７週で、さらに腫瘍除去プラス照射療法の後では約３０週である（神経膠腫の発生率のピークは約６０才である）。しかしながら、完全な腫瘍除去プラス放射線療法が神経膠腫治療の参考標準であると考えられる。
【０００８】
アルキル化剤を用いる化学療法は約３０％の陽性応答率を有する。陽性応答は一般に生存を６−８週延長する。しかしながら、アルキル化剤を用いる化学療法で治療した患者の約５０％しか通常の活動を維持できない。
診断および治療の進歩にもかかわらず、悪性の原発性ＣＮＳ腫瘍をもつ患者の予後はなお不良である。完全な摘出および照射を含む最適療法後の神経膠芽腫患者の中央生存値は、約１０箇月未満である（第ＩＩＩ段階の星状細胞腫で約１．６年）。神経膠芽腫患者の１年生存率は約３５％、２年生存率は約８％である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
いくつかの原発性悪性中枢神経系腫瘍は、その位置またはびまん性拡張のために（神経膠腫症、びまん性脳幹神経膠腫）外科的治療が不可能である。化学療法は一般的に推奨されていない。なぜならば、これらのアルキル化剤（ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ、プロカルバジン）に対する応答率は患者の約１０％であるからである（M.S. Greenberg, Handbook of Neurosurgery. 3rd Ed.(1994), Greenberg Graphics Inc., Lakekand, FL, USA)。これまでこのような患者には姑息的な照射以外に治療は与えられなかった。したがって、中枢神経系の原発性悪性腫瘍の治療法は極めて不満足なものであった。
当技術分野では中枢神経系腫瘍を治療する新規な方法および組成物の必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、哺乳類の中枢神経系腫瘍の治療のために、メチロール転移剤（タウロリジンおよび／またはタウラルタムを含む）を使用することに関する。タウロリジンの腹膜炎術後点滴の副作用である腹膜神経の刺激および強い焼灼感にもかかわらず、驚くべきことにＣＮＳ神経細胞（胎児髄膜細胞の特に感受性の強い幹細胞を含む）はタウロリジン／タウロラルタム溶液の投与後に影響を受けないことが見出された。
【００１１】
ニューロン腫瘍細胞株および神経膠腫瘍細胞株に対してタウロリジンおよび／またはタウラルタムが直接的抗新形成作用を示すことは驚くべきことであった。この作用は、他の腫瘍細胞と比較して、特に化学療法剤に対するそれらの反応に関する脳腫瘍細胞の極めて異なる反応のために極めて予期に反していた。さらにまた、タウロリジンおよび／またはタウロラルタムの抗新形成作用は、細胞粘着分子に対する影響とのみ関連していると考えられた。このことは内視鏡腹腔腫瘍摘出術に続く転移腫瘍増殖の防止を説明する。脳腫瘍細胞に対する直接的抗新形成作用は極めて予想に反するものであった。
【００１２】
タウロリジンおよびタウラルタム、その中間体および活性代謝物はメチロール転移剤である。それらはメチロール基を作用部位に移転させることによって機能する。両物質とも毒性が低く、正常細胞に対して細胞毒性をもたない。
本発明は、哺乳類の中枢神経系の原発性および二次性腫瘍の治療および予防、および／または抑制を提供し、この方法では、有効用量のメチロール転移剤（例えばタウロリジンおよび／またはタウラルタム）が、中枢神経系腫瘍の増殖をもつか、またはそのおそれがある哺乳類の対象者に投与される。さらにまた本発明は、微量透析法、灌注法、埋め込み法および血管造影法を用いて溶液中のタウロリジンおよび／またはタウラルタムを局所に適用する方法を包含する。本明細書で用いられるように、タウロリジンおよび／またはタウラルタムという用語は、化合物タウロリジン、タウラルタム、タウラルタム−グルコース（下記で述べる）および、それらの実質的な生物学的同等物または薬剤であって実質的に類似の態様で作用するものを指す。例えば、タウラルタムに由来するアミノグリカン、並びにタウロリジンおよび／またはタウラルタムの他の適切な任意の誘導体、または実質的に同様な態様で作用する薬剤が、本発明にしたがってタウロリジンおよび／またはタウラルタムとして利用される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本明細書で用いられるように「治療」という用語はＣＮＳ腫瘍の治療、予防および／または抑制を指す。本発明は以下を含むＣＮＳ腫瘍の治療に適用できる：
−多形型神経膠芽腫（ＧＢＭ）
−重度神経膠腫
−無構造性稀突起神経膠細胞腫
−軽度神経膠腫
−再発性悪性神経膠腫
−無構造性星状細胞腫
−進行した転移性メラノーマ
−再発した重度原発脳腫瘍
−原発性中枢神経系リンパ腫
−悪性神経膠腫の髄膜播種（髄膜性神経膠症）
【００１４】
治療は主に、タウロリジンおよび／またはタウラルタム溶液（例えば微量透析法または灌注法を用いる）の術後局所適用だけでなく、外科的介入（例えばＣＮＳ腫瘍の外科的除去）に関連して実施される。タウロリジンおよび／またはタウラルタムは血液／脳関門を通過するので、中心カテーテルにより静脈内に２％タウロリジン溶液または３％タウラルタム溶液を投与するのもまた適切であろう。さらに抗新形成作用の他に、感染の予防もまた患者にとっては極めて大きな利点である。この関係で、適切な投薬量は、成人について、中心カテーテルにより７−８日間に毎日２％溶液としてタウロリジン１５−２０ｇ、また別には７−８日間に毎日３％タウラルタム溶液として２０−３０ｇのタウラルタムであろう。これは、神経学的機能および健康の観点から生活の質を維持または改善しようとするものである。脳の手術と関連する局所適用のためには、グルコース主剤溶液（電解質とともにまたは電解質を含まない）でさらに０．２−１％のタウロリジン、タウラルタム、またはタウラルタム−グルコースを含むものが好ましい。
【００１５】
基礎治療溶液は好ましくは脳脊髄溶液にならって作製され、グルコースおよび電解質を含み、可能な程度に実質的に等張で、わずかにアルカリ性ｐＨ（約７．３−７．５）を有する。基礎溶液は以下の成分を含むことができる：
−重炭酸塩
−ナトリウム
−カリウム
−カルシウム
−マグネシウム
−乳酸塩
−塩化物
−グルコース
タウロリジン、タウラルタム、タウラルタム−グルコースなどが基礎溶液に添加される。
【００１６】
代表的基礎溶液：
基礎溶液は例えば下記の表に示す脳脊髄液（ＣＳＦ）成分で構成される。
【００１７】
【表１】
【００１８】
代表的アミノ−糖／タウラルタム−グルコース治療剤：
１３．６ｇのタウラルタムおよび１８ｇの無水グルコースを２５０ｍｌの血清びんに量りわけ、２００ｍｌの蒸留水を加えた。得られた溶液を１００℃で３０分加熱した。清澄な溶液を真空中で蒸発させて乾燥させた。残留物を９６％アルコールに吸収させ、エーレンマイヤーフラスコ中で一晩静置して結晶を生成させた。
アミノ−糖／タウラルタム−グルコースが結晶化し、この結晶を吸引ろ過して未精製収量で５．３ｇを得た。
数滴の水と混合したアルコールから白色の結晶が再結晶化された：
融点：１６８−１７０℃
計算値：Ｃ＝３６．２３；Ｈ＝６．０３；Ｎ＝９．３９；Ｓ＝１０．７４％
測定値：Ｃ＝３６．２６；Ｈ＝６．１０；Ｎ＝９．０９；Ｓ＝１０．９０％
ＩＲスペクトルはＤＭＳＯ6２００ＭＨＺ中のＮＭＲと一致した。スルホンアミドのＮＨはその隣接するＣＨ2と共役し、１つのＯＨはＣＨ2と共役し、３つのＯＨはＣＨと共役しているのは、水が内部で失われたこと、および鎖が環状化して糖を形成したことを示していた。
【００１９】
灌注および／または微量透析法で使用する溶液：
溶液１：溶液１の１０００ｍｌ中に下記を含む：
注射用グルコース一水塩 ２７．５００ｇ
ナトリウム ３．３８２ｇ
カリウム ０．１５７ｇ
Ｃａ++ ０．００９ｇ
Ｃｌ- ５．５２０ｇ
タウラルタム ０．５％
この溶液はわずかに高張である。グルコースは２５ｇのレブロース（フルクトース）で代替できる。この溶液はしたがってインスリン非依存性である。
【００２０】
溶液２：溶液２の１０００ｍｌ中に下記を含む：
ナトリウム ３．１５１ｇ
カリウム ０．１５６ｇ
Ｃａ++ ０．０６６ｇ
Ｍｇ++ ０．０３３ｇ
Ｃｌ- ３．９００ｇ
アセテート ２．１７３ｇ
タウラルタム−グルコース ０．５％
ｐＨ値をｐＨ７．３に設定する。
溶液１および２を適切な無菌的態様で０．１ミクロンの滅菌フィルターでろ過し、無菌輸液びんに無菌的に分配する。
【００２１】
溶液３：溶液３の１０００ｍｌ中に下記を含む：
注射用グルコース一水塩 １８．３３０ｇ
乳酸ナトリウム ２．４６０ｇ
塩化ナトリウム ２．８００ｇ
塩化カリウム ０．１８７ｇ
塩化カルシウム２Ｈ2Ｏ ０．１４７ｇ
塩化マグネシウム６Ｈ2Ｏ ０．１５２ｇ
タウロリジン １％
ｐＨ値をｐＨ７．３に設定する。
この溶液を無菌的態様でろ過し、１００ｍｌの輸液びんに無菌的に分配する。
【００２２】
溶液４：溶液４の１０００ｍｌ中に下記を含む：
塩化ナトリウム ４．０００ｇ
塩化カリウム ０．０５０ｇ
塩化カルシウム２Ｈ2Ｏ ０．０６６ｇ
炭酸水素ナトリウム ０．０５０ｇ
タウラルタム １％
滅菌前にこの溶液をｐＨ７．５に設定し、続いて無菌的態様でろ過し、２５０ｍｌの輸液びんに分配し蒸気で１２１℃で１５分滅菌する。
【００２３】
代表的治療態様：
タウロリジンおよび／またはタウラルタムは注射または輸液によって、または局所適用によって投与することができる。等張グルコース溶液および／または上記のような人工脳脊髄液溶液でタウロリジンおよび／またはタウラルタム、あるいはその実質的な生物学的同等物を含有するものを用いることができる。局所投与は、（ａ）消息子（プローブ）チューブを用いる微量透析によって、および（ｂ）直接灌注および／またはカテーテルの埋め込みによって、１回または反復灌注により実施できる。微量透析法は、非摘出腫瘍または再発腫瘍の場合に、手術不能腫瘍（例えばびまん性脳幹神経膠腫）の場合と同様に利用できる。
【００２４】
ａ）微量透析法
上記の等張溶液をタンクに体温で保存する。小さなポンプ（皮下用または体外用）でタウロリジンおよび／またはタウラルタム溶液を管状ミクロ消息子を介して腫瘍および／またはその周辺に注入する。ミクロ消息子は小管腔を有するプラスチック材で作ることができる。消息子の先端は、浸透性液体が交換されるように半透膜を有するであろう。このようにして、タウロリジンおよび／またはタウラルタムを腫瘍の内部および腫瘍の周辺に分散させることができる。腫瘍内部で直接終わらせるために、小さな先端をもつ消息子には種々のタイプの消息子が含まれる。大きな腫瘍については、大きな膜を消息子の末端に提供し、腫瘍腔内または腫瘍表面に置くことができる。大きな腫瘍を有するいくつかの事例では、１つ以上の消息子を植え込むことが必要かもしれない。
【００２５】
ｂ）灌注／カテーテル法
腫瘍の除去に続いて、または嚢胞性腫瘍の場合には、腫瘍腔または腫瘍領域に直接１回または反復灌注が実施できる。さらにまた、タウロリジンおよび／またはタウラルタムの反復局所投与のために、カテーテルを腫瘍腔に埋め込んでもよい。
ｃ）血管造影法
タウロリジンおよび／またはタウラルタムの特定領域適用のためのまた別の方法が、１つまたは少数の支配栄養補給動脈によって血液が供給されている腫瘍に提供される。タウロリジンおよび／またはタウラルタムは血管造影カテーテルによって投与でき、このカテーテルを超選択的に栄養補給血管に導入する。続いてタウロリジンおよび／またはタウラルタムを１回または繰り返し投与できる。
ｄ）埋め込み方法
完全または不完全な腫瘍の除去に続いて、タウロリジンおよび／またはタウラルタム含有マトリックスを直接１回または繰り返し腫瘍腔に埋め込むことができる。
【００２６】
結果：
タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、ＣＮＳ腫瘍細胞株（神経膠腫瘍細胞株（Ｃ６）だけでなくニューロン性細胞株（ＨＴ２２）を含む）の増殖を直接抑制することが見出された。さらにまた、この作用は、胎児ラットの中枢神経系の初代細胞株の増殖の抑制には、腫瘍細胞と比較した場合極めて高濃度および極めて長時間の接触を必要とする（胎児ラット中枢神経系の初代細胞株の非常に高い一般的感受性を考慮しても）という点で、選択的であるということが示された。この作用は濃度依存性であった。ＰＶＰおよびグルコース溶液中の０．１から４ｍｇ／ｍｌの濃度でタウロリジンおよび／またはタウラルタムの抗新形成作用が明らかであった。腫瘍細胞は１０分後から抑制された。１から２時間後に９０％の腫瘍細胞が抑制された。
【００２７】
要約：
本発明の腫瘍抑制薬剤（タウロリジンおよび／またはタウラルタムを含む）は、注射または輸液によって投与できる。本発明の薬剤は、消息子を用いる微量透析によって局所的に投与できるだけでなく、超選択的血管造影カテーテルを用いて領域限定的に本発明の薬剤を持続的または連続的に投与できる。
本発明の微量透析法を実施する消息子は、ニューロナビゲーション、ＭＲＩガイダンスおよび／または超音波ガイダンスを用いて配置できる。組織学的診断を実施するために、本発明の微量透析法を用いる処置を施している同じ外科手術時に診断用生検材料を腫瘍から採取することができる。また別に、本発明の微量透析法中に、液体は腫瘍またはその周辺から得られ、その結果腫瘍領域で所望の液レベルを維持できる。
【００２８】
本発明の薬剤は、腫瘍またはその周辺の連続的または反復局所灌注のために永久的または一時的に埋め込んだカテーテルによって投与できる。処置薬は、完全または部分的摘出腫瘍の周辺の灌注によって局所的に投与できる。
好ましい実施態様では、タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、静脈内に一日当たり約５０−５００ｍｇ／ｋｇの投与範囲で、逐次的または持続的投与によって投与される。
本発明のメチロール転移剤の投与とは別にまたはそれと同時に、他の薬剤を投与できる。これらには細胞毒性薬剤、抗新形成薬剤（アルキル化剤、および／または腫瘍代謝に必要な薬剤を含む）が含まれる。また別には、またはそれに加えて（所望する場合には）、他の腫瘍薬、例えばインターロイキン−１、インターロイキン−２、インターフェロンまたは他の免疫調節剤を投与してもよい。
【００２９】
併用療法の利点には以下が含まれる：
１）腫瘍の制御の達成および生存の改善に関して併用療法の使用によって協調作用を認めることができる。
２）抗新形成医薬の投与用量の削減は重要な副作用（例えば脱毛、吐き気、嘔吐、下痢など）の軽減をもたらす。
３）併用療法は医薬の種々の適用態様を可能にする。例えばタウロリジンおよび／またはタウラルタムの局所投与、一般的な全身化学療法など。
タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、局所硬膜下腔内または静脈内一般的化学寮法と併用して腹腔内適用によって投与してもよい。
この併用投与は、開腹手術または腹腔鏡による手術時の体液中および脳内への転移およびそれらの部位での播種発生の防止を促進する。
【実施例】
【００３０】
実施例１：
タウロリジンおよびタウラルタムは、ニューロン腫瘍細胞株（ＨＴ２２、マウス）、神経膠腫瘍細胞株（Ｃ６、ラット）および混合型ニューロン神経膠腫瘍細胞株（Ｕ３７３、ヒト）の増殖を直接的に抑制することが見出された。しかしながら、後者の細胞株の場合、実験はまだ完全ではない。さらにこの作用は、正常な中枢神経系細胞の増殖は顕著には抑制されないという点で選択的であることが示された。この作用は濃度依存性であった。０．１から４ｍｇ／ｍｌの濃度でタウロリジンおよび／またはタウラルタムの抗新形成作用が明らかであった。腫瘍細胞は３０分後から選択的に抑制された。１から３時間後に約９０％の腫瘍細胞が抑制された。細胞培養では、細胞はＲＰＭＩ １６４０培養液中で使用し、ファルコンフラスコで平板培養した。０．１−４ｍｇ／ｍｌのタウロリジンおよび／またはタウラルタムと一緒のインキュベーション後に、細胞学的変化を１０、３０、６０、１２０、１８０、３００分後、および２４、４８時間後に記録した。
【００３１】
３０分後から、以下を含む細胞学的変化が観察された：（ａ）空胞の発生、および（ｂ）核の凝縮、細胞質の収縮および細胞死。
微細構造変化には以下が含まれる：ミトコンドリアの膨張、核の膨張、細胞質
の膨張および細胞膜の破壊。最初の変化は１０分後に出現し、時間および濃度が増すにつれ増加した。
ＤＮＡ−ＦＡＣＳの結果はこの細胞学的変化および微細構造変化を支持するものであった。
ラット胎児脳細胞の培養を用いて、初代ＣＮＳ細胞に対するタウロリジンおよび／またはタウラルタムの作用を調べた。４８時間後で顕著な細胞学的作用は認められなかった。
【００３２】
神経膠腫患者の治療のためには、タウロリジンおよび／またはタウラルタムは、注射または輸液によって、または局所適用によって投与できる。局所投与は、（ａ）管状消息子を用いる微量透析によるか、さらに（ｂ）直接灌注または一時的もしくは永久カテーテルの埋め込みにより１回灌注または反復灌注によって実施できる。
微量透析法は、非摘出腫瘍または再発の場合に、手術不能腫瘍（例えばびまん性脳幹神経膠腫）の場合と同様に用いることができる。灌注／カテーテル法は完全または不完全腫瘍摘出に続いて用いることができる。
【００３３】
実施例２：神経膠芽腫、神経膠肉腫、無構造性神経膠腫および星状細胞腫患者におけるタウロリジンおよび付加的抗新形成薬剤の併用療法
脳腫瘍（例えば神経膠芽腫、星状細胞腫および神経膠肉腫）の治療で、タウロリジン／タウラルタムと抗新形成薬剤との併用は多くの利点を提供する。例えば、アルキル化剤とタウロリジンおよび／またはタウラルタムとの併用は、抗新形成薬によって誘発される副作用（例えば吐き気、嘔吐、下痢など）を回避または軽減する。こられの抗新形成薬の用量は半分またはそれ以上減らすことができ、それでもなお協調効果によって全体的反応率（疾患安定化率）を高めることができる。
強力な副作用を有する放射線療法もまた多くの事例で回避または減少させることができる。
多形型神経膠芽腫および星状細胞腫の原発性脳腫瘍における播種腫瘍の再発率もまた併用療法によって減少させることができる。
【００３４】
多様な抗新形成薬剤の中で、その分子的構造のゆえにタウロリジンおよび／またはタウラルタムと相互反応しそうにない医薬が選択されるべきである。さらにまた、併用化学療法を種々の態様で腫瘍部位に誘導することが望ましい。これらの態様では、例えばタウロリジンおよび／またはタウラルタムは直接灌注によって、または永久カテーテルの埋め込みによって、またはチューブを使用して微量透析によって脳腫瘍に局所的に投与され、さらに静注または経口的に既によく用いられている通常の化学療法が、例えばテモゾラミド１００ｍｇ／ｍ2、１日１回５日間の投与によって実施される。
【００３５】
また別には、神経膠芽腫の外科的切除の後で、５−フルオロウラシル（ｆ−ＦＵ）の局在的および持続的な薬剤配送を、タウロリジンおよび／またはタウラルタムの中心カテーテルによる数日間の点滴輸液と併用して提供することができる。
腫瘍患者の腹腔鏡による緊急腫瘍手術、腹腔鏡による胆嚢摘出、胆嚢炎、腹腔鏡による胆嚢腸管手術の場合は、一般的開腹手術の場合と同様に、通常の静注化学療法と併用して、洗浄または注入処置として２％タウロリジンの腹腔内投与を腫瘍の処置、脳内転移および播種の防止のために実施することが可能である。
生存率の低い硬膜下腔内（ＩＴ）化学療法剤の使用に付随する悪性神経膠腫の髄膜播種（髄膜神経膠腫症）では、タウロリジンおよび／またはタウラルタム溶液の局所的または全身的投与の併用は、腫瘍制御および生存率の改善のために有用であろう。
【００３６】
以下の抗新形成薬剤はタウロリジンおよび／またはタウラルタムとの併用に適合しているであろう：
ＰＣＶ化学療法：以下を併用する
−プロカルバジンＨＣｌ
−ロムスチン（ＣＣＮＵ）（ＣｅｅＮｕ）
−硫酸ビンクリスチン
シスプラチン
メトトレキセート
シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ） シタラビン塩酸塩
テモゾラミド
ＭＸ２−塩酸塩
トポセタン
パクリタキセル（タキソール）
インターロイキン−２（ＩＬ−２）：インターロイキン−１（ＩＬ−１）およびリンホカイン活性化キラー細胞またはＴＮＦとの同時投与において、タウロリジンとの併用はサイトカインの毒性を低下させ、患者にとってより快適である。
【００３７】
ニトロソウレア系薬物（例えばＡＣＮＵ／ＢＣＮＵ／ＣＣＮＵ）は、一般により低い濃度（例えば３０−５０ｍｇ／ｍ2）で６週間の間１週当たり１回静注によって投与される。テモゾラミドは、５０−１００ｍｇ／ｍ2の用量で５日間経口投与で与えられる。ＭＸ−２塩酸塩は、静脈洞ボーラスとして進展が見られるまで数箇月間２８日毎に２０ｍｇ／ｍ2で投与される。
別の選択として、またべつの抗新形成薬が併用に適している：
シクロホスファミド 約１５０ｍｇ／ｍ2
フルオロウラシル（５−ＦＵ） 局所ボーラスとして４０ｍｇ／ｍ2
また、硬膜下腔内（ＩＴ）化学療法としてマイクロフィアの形態で以下が用いられる：
ドキソルビシン １０−１５ｍｇ／ｍ2静注
ヒドロキシカルバミド
【００３８】
生存率の改善並びに主要制御および播種の防止を達成するためにタウロリジンおよび／またはタウラルタムを種々に併用して、シトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ）、チオトリエチレン−ホスホルアミド（チオ−ＴＥＰＡ）およびネオカルジノスタティスをそれぞれ低用量でＩＴ−化学療法で投与できる。
【００３９】
単位投与量：
患者に薬剤を投与するための溶液は、多形型神経膠芽腫細胞の組織培養で有効な用量のタウロリジンおよび／またはタウラルタムおよび／またはタウラルタム−グルコースを含んでいなければならない。０．１−４ｍｇ／ｍｌのタウロリジンが組織培養で腫瘍細胞を抑制し、または殺す。
これまでのところ、タウラルタムはタウロリジンよりもほぼ２倍有効であることが示された。その説明は、水溶液中のタウロリジンのメチロール−タウラルタムとタウラルタムとの間の平衡に見出すことができるであろう。
他方、タウラルタム−グルコースは、その分子量が１３６から２９８にタウラルタムより増加するのでタウラルタムの約２倍を投与しなければならない。
上記の灌注／カテーテル法を用いて患者に投与する場合は、少なくとも約４ｍｇ／ｍｌの濃度でタウロリジン、タウラルタムまたはタウラルタム−グルコースがそれぞれ使用されるべきである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍の増殖のおそれがある哺乳類の対象者に有効な用量のＣＮＳ腫瘍抑制メチロール転移薬剤を投与することを含む、哺乳類でＣＮＳの腫瘍を治療する方法。
【請求項２】
前記薬剤がタウロリジン、タウラルタムまたはその混合物である請求項１の方法。
【請求項３】
前記薬剤が、注射または輸液によって投与される請求項１の方法。
【請求項４】
前記薬剤が、微量透析を用いる消息子によって局所的に投与される請求項１の方法。
【請求項５】
前記消息子が、ニューロナビゲーション、ＭＲＩガイダンス、または超音波ガイダンスを用いて配置される請求項４の方法。
【請求項６】
前記薬剤の投与と同じ操作時に腫瘍から診断用生検材料が採取される請求項４の方法。
【請求項７】
前記消息子によって前記腫瘍領域から体液を入手する請求項４の方法。
【請求項８】
前記薬剤が、埋め込まれたカテーテルによって投与される請求項１の方法。
【請求項９】
前記薬剤が、摘出腫瘍領域の灌注によって局所的に投与される請求項１の方法。
【請求項１０】
前記薬剤が、１日当たり約５０−５００ｍｇ／ｋｇの用量範囲で静脈内に投与される請求項１の方法。
【請求項１１】
前記薬剤が、前記薬剤の等張溶液の投与によって局所的に投与される請求項１の方法。
【請求項１２】
前記腫瘍が神経膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、上衣細胞腫、神経叢癌腫、神経叢乳頭腫、髄芽腫、神経芽種、神経節膠腫、神経節細胞腫、松果体芽腫、悪性髄膜腫、大脳神経膠腫症、松果体の奇形腫、網膜芽腫および混合細胞性腫瘍から選ばれる請求項１の方法。
【請求項１３】
前記哺乳動物に細胞毒性抗新形成薬剤、アルキル化剤または腫瘍代謝薬剤をさらに投与することを含む請求項１の方法。
【請求項１４】
インターロイキン−１、インターロイキン−２またはインターフェロンをさらに投与することを含む請求項１の方法。
【請求項１５】
さらに、前記哺乳類の腫瘍腔内に適用したマトリックスに前記薬剤を投与することを含む請求項１の方法。
【請求項１６】
前記薬剤がタウラルタム−グルコースである請求項１の方法。
【請求項１７】
中枢神経系腫瘍増殖のおそれがある哺乳類に投与するための、メチロール転移薬剤と、少なくとも１つの抗新形成薬剤、免疫調節剤または中枢神経系腫瘍代謝薬剤とを含む医薬組成物。
【請求項１８】
前記薬剤がタウロリジン、タウラルタムまたはその混合物である請求項１７の組成物。
【請求項１９】
前記薬剤がタウラルタム−グルコースである請求項１７の組成物。
【請求項１】
中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍の増殖のおそれがある哺乳類の対象者に有効な用量のＣＮＳ腫瘍抑制メチロール転移薬剤を投与することを含む、哺乳類でＣＮＳの腫瘍を治療する方法。
【請求項２】
前記薬剤がタウロリジン、タウラルタムまたはその混合物である請求項１の方法。
【請求項３】
前記薬剤が、注射または輸液によって投与される請求項１の方法。
【請求項４】
前記薬剤が、微量透析を用いる消息子によって局所的に投与される請求項１の方法。
【請求項５】
前記消息子が、ニューロナビゲーション、ＭＲＩガイダンス、または超音波ガイダンスを用いて配置される請求項４の方法。
【請求項６】
前記薬剤の投与と同じ操作時に腫瘍から診断用生検材料が採取される請求項４の方法。
【請求項７】
前記消息子によって前記腫瘍領域から体液を入手する請求項４の方法。
【請求項８】
前記薬剤が、埋め込まれたカテーテルによって投与される請求項１の方法。
【請求項９】
前記薬剤が、摘出腫瘍領域の灌注によって局所的に投与される請求項１の方法。
【請求項１０】
前記薬剤が、１日当たり約５０−５００ｍｇ／ｋｇの用量範囲で静脈内に投与される請求項１の方法。
【請求項１１】
前記薬剤が、前記薬剤の等張溶液の投与によって局所的に投与される請求項１の方法。
【請求項１２】
前記腫瘍が神経膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、上衣細胞腫、神経叢癌腫、神経叢乳頭腫、髄芽腫、神経芽種、神経節膠腫、神経節細胞腫、松果体芽腫、悪性髄膜腫、大脳神経膠腫症、松果体の奇形腫、網膜芽腫および混合細胞性腫瘍から選ばれる請求項１の方法。
【請求項１３】
前記哺乳動物に細胞毒性抗新形成薬剤、アルキル化剤または腫瘍代謝薬剤をさらに投与することを含む請求項１の方法。
【請求項１４】
インターロイキン−１、インターロイキン−２またはインターフェロンをさらに投与することを含む請求項１の方法。
【請求項１５】
さらに、前記哺乳類の腫瘍腔内に適用したマトリックスに前記薬剤を投与することを含む請求項１の方法。
【請求項１６】
前記薬剤がタウラルタム−グルコースである請求項１の方法。
【請求項１７】
中枢神経系腫瘍増殖のおそれがある哺乳類に投与するための、メチロール転移薬剤と、少なくとも１つの抗新形成薬剤、免疫調節剤または中枢神経系腫瘍代謝薬剤とを含む医薬組成物。
【請求項１８】
前記薬剤がタウロリジン、タウラルタムまたはその混合物である請求項１７の組成物。
【請求項１９】
前記薬剤がタウラルタム−グルコースである請求項１７の組成物。
【公開番号】特開２００８−１９５７２６（Ｐ２００８−１９５７２６Ａ）
【公開日】平成２０年８月２８日（２００８．８．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−６４５０７（Ｐ２００８−６４５０７）
【出願日】平成２０年３月１３日（２００８．３．１３）
【分割の表示】特願２０００−１６８０５３（Ｐ２０００−１６８０５３）の分割
【原出願日】平成１２年６月５日（２０００．６．５）
【出願人】（５００１４０２１９）エド・ガイストリッヒ・ゼーネ・アクチェンゲゼルシャフト・フュール・ヒェミッシェ・インドゥストリー (10)
【氏名又は名称原語表記】Ｅｄ． Ｇｅｉｓｔｌｉｃｈ Ｓｏｅｈｎｅ ＡＧ ｆｕｅｒ ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ
【住所又は居所原語表記】Ｂａｈｎｈｏｆｓｔｒａｓｓｅ ４０， Ｐ．Ｏ． Ｂｏｘ １５７， ６１１０ Ｗｏｌｈｕｓｅｎ， Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年８月２８日（２００８．８．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月１３日（２００８．３．１３）
【分割の表示】特願２０００−１６８０５３（Ｐ２０００−１６８０５３）の分割
【原出願日】平成１２年６月５日（２０００．６．５）
【出願人】（５００１４０２１９）エド・ガイストリッヒ・ゼーネ・アクチェンゲゼルシャフト・フュール・ヒェミッシェ・インドゥストリー (10)
【氏名又は名称原語表記】Ｅｄ． Ｇｅｉｓｔｌｉｃｈ Ｓｏｅｈｎｅ ＡＧ ｆｕｅｒ ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ
【住所又は居所原語表記】Ｂａｈｎｈｏｆｓｔｒａｓｓｅ ４０， Ｐ．Ｏ． Ｂｏｘ １５７， ６１１０ Ｗｏｌｈｕｓｅｎ， Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ
【Ｆターム（参考）】
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