光学的に純粋な２−モルフィノール誘導体を調製する新規な方法
本発明は、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物から、光学的に純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール、および医薬上許容される塩および溶媒和物を調製する方法に関する。この方法はマルチカラムクロマトグラフィー（ＭＣＣ）、ＶＡＲＩＣＯＬおよびＣｙｏｌｏｊｅｔなどの技法を含む、連続クロマトグラフィーを利用する。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物、例えば、ラセミ混合物から、光学的に純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよびその医薬上許容される塩および溶媒和物を調製する方法に関する。
【０００２】
（従来技術）
２つのエナンチオマーの混合物からエナンチオマーとして純粋なまたは光学的に豊富化されたエナンチオマーを分離することは、当該分野にて周知である、ジアステレオマーの塩を形成することで、結晶化方法により、あるいは酵素方法により伝統的に行われてきた。キラルクロマトグラフィーは分析技法として周知であり、２つのエナンチオマーを実験規模で分離するのに有用な手段でもある。しかしながら、光学的に豊富化されたエナンチオマーのバッチ式クロマトグラフィーを用いての分離が、特定の医薬化合物の商業生産にまで発展することは、多くの技術的基準が要求されるためめったにないことである。すなわち、バッチ式クロマトグラフィーは最初の供給濃度の高希釈を生じさせ、それは多量の溶出液を必要とし、キラル固定相の非効率的な使用をもたらす。その結果、所望の化合物の溶出液中の濃度は低く、このことは所望の物質を単離し、再使用のために溶媒を回収するのに多くのエネルギーを必要とする。連続クロマトグラフィーはこれらの不利な点のいくつかを打ち消す。というのも、バッチ式クロマトグラフィーと比較して固定相の量当たりの生成物の分離に関して高い効率が可能となり、一般に溶媒の使用量が極めて低く、したがって回収のためのエネルギーをそれほど必要としない。
【０００３】
例えば、連続クロマトグラフィーの例が、Multi-Column Chromatography（ＭＣＣ）、Cyclojet、Simulated Moving Bed（ＳＭＢ）およびVARICOL（登録商標）の名称で知られている液体クロマトグラフィー技法である。ＭＣＣはＳＭＢおよびVARICOL（登録商標）を含む一般的用語である。ＳＭＢのコンセプトは１９６０年代の初期に特許され（米国特許第２９５７９２７号、第２９８５５８９号および第３２９１７２６号）、石油化学工業の分野にてしばらくの間使用されていた（米国特許第３２０５１６６号および第３３１０４８６号）。米国特許第５４３４２９８号、第５４３４２９９号および第５４９８７５２号もまたＳＭＢ方法に関する。米国特許第５５１８６２５号は保持能力の低い条件下で分離するＳＭＢ方法の使用に関する。Cyclojetのコンセプトもまた周知であるが、大規模では証明されていない。最近では、VARICOL（登録商標）システムが使用されており、米国特許第６１３６１９８号、第６３７５８３９号および第６４１３４１９号に記載されている。VARICOL（登録商標）は非ＳＭＢ方法であって、いくつかの利点、例えば、より大きな供給能力および一般により小さな溶媒消費に関して高い処理能力を提供するＭＣＣ技法の変法である。言い換えれば、ＭＣＣ技法は一定の生産能および溶媒消費についてより一貫した製品品質を生み出すことができる（A.Toumiら、J. Chrom.、１００６巻（２００３）、１５−３１頁およびZ.Zhangら、AIChE Journal、２００２年１２月、４８巻、１２号、２８００−２８１６を参照のこと）。公開されたＷＯ００／２５８８５はVARICOL（登録商標）に関連し、公開された米国２００２／００１４４５８Ａ１はＳＭＢ法は最適化に関するものである。米国特許第６１０７４９２号および公開されたＷＯ９９／５７０８９、ＷＯ０３／００６４４９、ＷＯ０３／０３７８４０、ＷＯ０３／０５１８６７、ＷＯ０３／０７２５６２およびＷＯ２００４／０４６０８７は特定の化合物の製法に関する。
【０００４】
化合物（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール、その医薬上許容される塩および溶媒和物ならびにそれらを含む医薬組成物は、鬱病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、肥満、片頭痛、痛み、性的機能不全、パーキンソン病、アルツハイマー病、あるいはコカインまたはニコチン含有の物質（タバコを含む）への依存症などの多数の疾患または障害の治療にて使用される。いくつかの文献は（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）または（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−エナンチオマーのいずれかをラセミ体である（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールから調製することを記載する。例えば、米国特許第６３４２４９６号Ｂ１（２００２年１月２９日にJerussiらに対して付与された）；米国特許第６３３７３２８号Ｂ１（２００２年１月８日にFangらに対して付与された）；米国特許第６３９１８７５号Ｂ１（２００２年５月２１日にMorganらに対して付与された）；米国特許第６２７４５７９号Ｂ１（２００１年８月１４日にMorganらに対して付与された）；米国特許出願公開２００２／００５２３４０Ａ１、２００２／００５２３４１Ａ１および２００３／００２７８２７Ａ１；ならびにＷＯ０１／６２２５７Ａ２を参照のこと。しかしながら、これらの文献は一つとして、ラセミ体の精製に連続クロマトグラフィー技法を利用していない。
【０００５】
連続クロマトグラフィー技法は、正しく実施すれば、古典的なバッチ式クロマトグラフィーよりも、固定相の一定量当たりで分離される生成物の観点から、実質的に溶媒コストを下げることに伴って、効率を上げることが可能であり、コストの点から伝統的な古典的分離法に匹敵するようになることも可能である。しかしながら、ロバストでかつ効率的な連続クロマトグラフィーシステムのセットアップは困難であり、これまで光学的に純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの調製は知られていない。
【０００６】
（発明の開示）
本発明は、ラセミ体または非ラセミ体の混合物とすることのできる、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物からの、光学的に純粋なまたは光学的に豊富化された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの調製方法に関する。バッチ式クロマトグラフィーシステムおよび／または連続クロマトグラフィーシステムのいずれの分離も、アミローストリス−３,５−ジメチルフェニルカルバマート（CHIRALPAK（登録商標）AD）またはその化学的に修飾された形態（CHIRALPAK（登録商標）Ｔ１０１）などの、キラル固定相（ＣＳＰ）を利用する。この連続クロマトグラフィーは、ＭＣＣ、VARICOL（登録商標）およびCyclojetなどのシステムを包含する。処理されうる供給量、ロバストな作動変数および一貫した製品品質の観点からVARICOL（登録商標）が好ましい方法である。
【０００７】
連続クロマトグラフィーと結晶化技法とを組み合わせることで利益を得ることができる（H. Lorenz ら、Journal of Chromatography A、第９０８巻（２００１）、２０１−２１４頁）。性能（すなわち、一般に、一日当たりにＣＳＰ１ｋｇに付き処理されるラセミ体のｋｇ（ラセミ体のｋｇ／ＣＳＰのｋｇ／日）で評価されるクロマトグラフィーシステムの生産性）は、クロマトグラフィーシステムのアウトレットでの光学純度のスペックに大きく依存しうる。このカップリングは、光学純度を少し落とすことでそのユニットの生産性を向上させることを目的とする。ついで、さらなる光学的精製方法として、結晶化を用いることができる。例えば、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール（キラル純度９２％ピーク面積比（ＰＡＲ））に富むエナンチオマーの混合物で出発し、純粋な（＞９９．５％）（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの結晶を純粋なエナンチオマーの理論的に回収しうる量の９２％の回収率で得ることができる。この操作で得られる母液は、共融点と同じ組成を示す（８５％純度）。化学的精製工程としての結晶化もまた、強調されている。濾過して、冷アセトニトリルで洗浄された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの高純度（９９．５％）の粘度の高いスラリー溶液は、大部分の不純物を母液に残したままで、純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを付与するであろう。
【０００８】
所望のエナンチオマーのキラル純度は、少なくとも８５％であり、一般に、９８％と９９．９％の範囲にあり、少なくとも９０％、一般には約９６％で必要とされるエナンチオマーが回収される。望ましくない（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ化をこの精製方法と組み合わせ、供給の流れの中にリサイクルすることもできる。このことは所望の（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを得るのに必要とされるラセミ体の必要な量を有意に減少させるであろう。
【０００９】
（発明の詳細な記載）
本発明は光学的に豊富化された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールならびにその医薬上許容される塩および溶媒和物の製法を包含する。本発明に従って光学的に富ませることのできる、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物は、当該分野にて知られている種々の方法により生成されうる。かかる方法により生成される混合物は、通常、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの５０／５０混合物を含む、ラセミ混合物であろう。しかしながら、本発明は、別の混合物、例えば（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを５０％より多く、（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを実質的な量にて含有する混合物を光学的に豊富とするのに用いることができる。該方法の原材料は、上記した（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの両方、および連続クロマトグラフィー方法に適する溶媒を含むであろう。望ましくない化合物（不純物を含む）、例えば、最初の混合物を合成した時から存在する不純物、原材料中に存在する不純物は、その原材料を連続クロマトグラフィーに供する前に取り除かれていてもよい。
【００１０】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを連続クロマトグラフィー方法により精製し、場合によっては本発明の結晶化によってさらなる精製に付した後、その化合物は、その医薬上許容される塩またはその溶媒和物、特に米国特許第６３４２４９６号Ｂ１、米国特許第６３３７３２８号Ｂ１、米国特許第６３９１８７５号Ｂ１、米国特許第６２７４５７９号Ｂ１、米国特許出願公開番号２００２／００５２３４０Ａ１、２００２／００５２３４１Ａ１および２００３／００２７８２７Ａ１、ならびにＷＯ０１／６２２５７Ａ２に記載されているものに変換されうる。
【００１１】
米国特許第２９８５５８９号（Broughtonに対して付与）に記載の、キラル固定相を用いるＭＣＣは、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを８０−１００％のエナンチオマー過剰、好ましくは少なくとも９０％のエナンチオマー過剰にて得るのに用いられる。
適当には、ＭＣＣは、米国特許第２９８５５８９号にて見られるように、ＭＣＣ方法の最も効果的な実施の一つである４つのゾーンカスケード装置にて実施される。
【００１２】
ＭＣＣ分離の最適条件は、一般に、ＨＰＬＣ（高性能液体クロマトグラフィー）から得られる溶出特性を分析することで同定される。重要なパラメーターは、支持体の負荷能力、移動相の強度、選択性、温度および原料の溶解性である。これらのパラメーターを最適化することで、コストに対する効果的な分離の条件を同定することが助成される。ＭＣＣ操作の条件を同定するのに使用される方法が、the Journal of Chromatography A、７０２巻（１９９５）、９７−１１２頁にて論じられ、かつ実証されている。
好ましいＭＣＣ操作は、その一部として、まず豊富化するのにＭＣＣを通し、つづいて別の分離技法を用いて豊富化を強化する、２段階の「豊富化−洗練化」操作を用いてもよい。第２段階はもう一つ別のＭＣＣ段階であってもよい。別法として、第２段階は異なる操作、例えば、ＨＰＬＣまたは結晶化であってもよい。
【００１３】
移動相は、Ｃ５−Ｃ７アルカン（特に、ヘキサンおよびヘプタン）、Ｃ１−Ｃ３アルカノール（特に、メタノール、エタノールおよび２−プロパノール）、メチルtert−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、酢酸エチル、アセトン、アセトニトリルの単一成分またはその混合物であってもよく、移動相はアセトニトリルとイソプロパノールの組み合わせ溶出液であることが最も好ましい。アセトニトリル／イソプロパノールの好ましい比率は９３／７％ｖ／ｖないし９９／１％ｖ／ｖであり、好ましくは９５／５％ｖ／ｖないし９７／３％ｖ／ｖであり、最も好ましくは９５／５％ｖ／ｖである。もう一つ別の実施形態において、移動相はアセトニトリルとメタノールの、またはアセトニトリルとエタノールの組み合わせ溶出液である。また、純粋な超臨界流体（ＳＣＦ）を、およびＳＣＦをアルコールと一緒に用いることもできる。上記した溶出液に加えて、当業者に知られているように、少量の塩基（ジエチルアミンなど）または酸（ＨＣｌなど）を添加することもできる。典型的には、「ヘキサン」および「ヘプタン」なる語は、直鎖およびその分岐鎖異性体をいう。
【００１４】
ラセミ体の（＋／−）−（２Ｒ＊、３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールをキラルクロマトグラフィーに付し、好ましくはキラル固定相としてCHIRALPAK（登録商標）ADを、移動相としてアセトニトリルまたはアセトニトリル／イソプロパノールを用いるＭＣＣクロマトグラフィーにより、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）エナンチオマーを少なくとも９０％、好ましくは９５％以上のエナンチオマー過剰率で得る。
連続クロマトグラフィー技法を用いると、所望のエナンチオマーの純度は９８％と９９.５％の範囲にあり、必要とされるエナンチオマーの９６％は回収される。本発明の他の実施形態は、連続クロマトグラフィー技法を、その後の所望のエナンチオマーの分離結晶化と組み合わせ、所望の純度および回収率を得ることを包含する。他の実施形態は望ましくないエナンチオマーをラセミ化し、新たな混合物を原材料にリサイクルすることを包含する。
【００１５】
任意の結晶化
ラフィネートおよび／または抽出液のエナンチオマー過剰率（ｅ．ｅ．）は、一般に、９０％より大きく、好ましくは９５％より大きく、その上さらに好ましくは９８％よりも大きい。しかしながら、続く結晶化工程によりｅ．ｅ．を改善することは可能であるため、ラフィネートおよび／または抽出液の６０％くらいの低いｅ．ｅ．も本発明に係る化合物を調製しうるのに十分である。化合物をその塩基付加塩に変換し、その塩を結晶化させることでｅ．ｅ．を改良することも可能である。
一の実施形態において、ラフィネートおよび／または抽出液のｅ．ｅ．は６０％以上、好ましくは７０％より大きく、その上さらに好ましくは８０％よりも大きい。ｅ．ｅ．は、その後、所望により該化合物を塩基付加塩に予め変換して結晶化させることで改良される。
その後の分離結晶化の目的は純度が低下するもより高い処理能を可能とすることである。この純度の低下は後の結晶化を行うことで修正または相殺されうる。
【００１６】
任意のラセミ化
所望とするエナンチオマーに応じて、抽出液またはラフィネートのいずれかの流れは望ましくない。この場合において、および以下の実施例において、それは最終的に所望のエナンチオマーを含有するラフィネートであり、望ましくないエナンチオマーを含有する抽出液である。しかしながら、この抽出液を単に捨てることは不要であり、無駄でもある。むしろ、望ましくないエナンチオマーを化学的または別の操作でラセミ化すればよい。したがって、まずラセミ化を行うことで抽出液を供給の流れの中にリサイクルすることが可能である。この操作は抽出液をリサイクルし、必要とされる新たなラセミ体の供給を減少させるであろう。
【００１７】
この場合において、目的の化合物の化学構造は、そこに水素原子が結合しているキラル炭素原子を有する。この水素原子はその近接環境のため相対的に不安定であり、ラセミ化は塩基性または酸性剤の影響下にあると考えられ得る。
数種のラセミ化方法が周知である。それらは、一般に、外部物質（酸性および塩基性）の助け、あるいは時に純粋なエナンチオマーの溶媒（一般にプロトン性である）中溶液の簡単な還流を必要とする。この最終の任意の工程は、外部物質、すなわち、ラセミ化されたエナンチオマーを供給の流れにリサイクルする前に除去しなければならない、物質を導入しないという利点がある。
【００１８】
規制基準によれば、最初のラセミ体およびラセミ化を介して生成された新たに形成されたラセミ体は、本質的に、類似する不純物の特性を示すはずである。しかしながら、新たに形成されたラセミ体中の付加的な不純物は新たに形成されたラセミ体を再結晶することで取り除くことができ、したがって供給ラセミ体の最初の不純物特性と適合しうる。
ラセミ化剤として使用されうる可能性のある溶媒のうち、沸点が少なくとも５０℃の溶媒が好ましい。より好ましくは沸点が５５−１１０℃の溶媒である。最も好ましくは、溶媒は、以下の：酢酸メチル、酢酸エチル（本明細書中、「ＥｔＯＡｃ」ともいう）、酢酸イソプロピル、酢酸プロピル、酢酸ブチルなどの酢酸アルキル；２,４−ジメチル−３−ペンタノン、３−メチル−２−ブタノン、２−ブタノンおよび４−メチル−２−ペンタノンなどのジアルキルケトン；アセトニトリルおよびプロピオニトリルなどのニトリル；メタノールまたはイソプロパノールなどのモノアルコール；ジエチレングリコールなどのポリアルコール；および水／ＨＣｌおよびメタノール／ＨＣｌなどの酸性混合物から選択される少なくとも一つの溶媒である。
【００１９】
キラル固定相（ＣＳＰ）吸着剤
本願発明の吸着剤は、好ましくは、キラル固定相である。典型的なキラル固定相はセルロース誘導体（例えば、好ましくは、シリカ上にコーティングされたセルロースのエステルまたはカルバマート）、酒席酸エステル相、π−酸性およびπ−塩基性キラル固定相（パークル（Parkle）相）、アミロース誘導体（例えば、好ましくは、シリカ上にコーティングされたアミロースのエステルまたはカルバマート）、ポリアクリルアミド相などを包含する。
【００２０】
いくつかの市販されているキラル固定相として、三酢酸微結晶セルロース（商標名 ＭＣＴＡまたはＣＴＡ−１）、セルローストリス（フェニルカルバマート）（商標名 ＣＨＩＲＡＣＥＬ ＯＪ）、セルローストリス（３,５−ジメチルフェニルカルバマート）（商標名 ＣＨＩＲＡＣＥＬ ＯＤ）、セルローストリベンゾアート（商標名 ＣＨＩＲＡＣＥＬ ＯＢ）、アミローストリス［（Ｓ）−メチルベンジル−カルバマート］（商標名 ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ−Ｖ）、Ｏ,Ｏ’−ビス（４−tert−ブチル−ベンゾイル）−Ｎ,Ｎ’−ジアルキル−Ｌ−タルタルジアミド（商標名 ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＣＨＩ−ＴＢＢ）、Ｏ,Ｏ’−ビス（ジメチル−ベンゾイル）−Ｎ,Ｎ’−ジアルキル−Ｌ−タルタルジアミド（商標名 ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＣＨＩ−ＤＭＢ）および３,５−ジニトロベンゾイルフェニルクリシン（イオン結合または共有結合のいずれか）（商標名 ＤＮＢＰＧ）が挙げられる。ＣＨＩＲＡＣＥＬおよびＣＨＩＲＡＬＰＡＫ製品は、各々、ダイセル化学工業株式会社より入手可能である。ＫＲＯＭＡＳＩＬ製品はエカ・ケミカル（Eka Chemicals）のセパレーション・プロダクト（Separation Products）で開発された。ＭＣＣのための適当なキラル固定相として、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）およびＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）の下でキラル・テクノロジーズ（Chiral Technologies）が市販しているものが挙げられる。ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ、シリカゲル上にコーティングされたアミロース誘導体、またはその化学的修飾体（ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１）が特に適することが判明した。他の入手可能なキラル固定相（ＣＳＰ）がＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）ＯＪ、ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）ＯＤ、ＷＨＥＬＫ−Ｏ１、ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＤＮＢ、ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＴＴＢであり、各々、キラル・テクノロジーズ、レジス・テクノロジーズ（Regis Technologies）およびエカ・ノベル（Eka Novel）より市販されている。
【００２１】
大きさが１０μｍと２０μｍの両方のシリカゲル基質にコーティングされたアミローストリス（３,５−ジメチルフェニルカルバマート）を含むキラル固定相（商標名 ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ）が特に好ましい。２０μｍのＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤは、高生産性を有する製品品質を確保するように背圧を小さくして分割を十分に行えるようにする、エナンチオ選択的分取スケールのクロマトグラフィー分離操作をスケールアップするに選択される材料であると考えられる。
【００２２】
圧力および温度
生成物の分離を液体およびＳＣＦクロマトグラフィーで行う場合の圧力の範囲は、約０．１と４００ＭＰａ、好ましくは０．５と３０ＭＰａの間とすることができる。カラム中の温度は、一般に、−７８℃と２００℃の間に、好ましくは約５と５０℃の間に、より好ましくは約１５と４０℃の間にあり、最も好ましくは約２５℃である。
【００２３】
選択性パラメーター「α」
選択性に影響を及ぼす変数として、カラムの型、温度、圧力、供給速度および溶媒の混合液が挙げられる。加えて、分離する前に、カラムを調整することで、すなわち、カラムに移動相を（分析体と共にまたはなしで）少なくとも１２時間、好ましくは１２ないし１８時間通すことで選択性は劇的に増加しうる。好ましくは、１．１よりも大きな選択性パラメーター「α」を得るように変数を選択する。より好ましくは、αは２．０よりも大きい。最も好ましくは、αは約２．５に等しく、特に好ましくは約２．５より大きい。
【００２４】
得られる選択性はプロセス生産性に対して強い影響力を有する。以下の実施例３に示されるように、イソプロパノールをアセトニトリル移動相に添加することで選択性が２倍以上増加した。プロセス生産性は（α−１／α）３に大体比例するが、ベストなクロマトグラフィー条件を選択するには他のパラメーターも考慮しなければならない。化合物の保持力もまたプロセスに影響を及ぼす。試験では、２−３％イソプロパノールで保持力は最大であることが分かる。しかしながら、ラセミ体の溶解度はイソプロパノールの含有量が大きくなるほど増大し、より濃縮された供給物の注入が可能となることは明らかである。５％イソプロパノールとの競合効果が最適であり、アセトニトリルを単独で用いるよりも優れていることがわかる（参考までに、純粋なアセトニトリルでは２２．５ｇ／Ｌであり、アセトニトリル／イソプロパノール ９５／５の混合液では３０ｇ／Ｌである）。プロセス操作のロバスト性の観点から、ＭＣＣは連続的に操作するため、そのシステムを中断させうるいずれの沈殿作用も回避することが重要である。イソプロパノールを含有する移動相の使用は、沈殿の起こる可能性を減少させ、１００％アセトニトリルで純粋に操作するＭＣＣシステムと比べて、ラセミ体供給量および単離されたエナンチオマーがそれほど可溶性でない点で、有利である。混合溶媒（アセトニトリル／イソプロパノール）の溶出液を使用することにおいて実施例３に示されるように、その得られるプロセス処理能は、純粋なアセトニトリルの使用と比較して、同じキラル純度であるが、プロセス操作パラメーターのロバスト性を増加させ、溶出液の消費量を減少させながら（参考までに、ラセミ体の供給量３１３Ｌ／ｋｇに対してラセミ体の供給量２７０Ｌ／ｋｇである）、約２倍の比選択性を有する。
【００２５】
許容されるα値を有する移動相とキラル固定相の特定の、限定されるものではない、好ましい組み合わせは：ａ）ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ １０μｍと、アセトニトリルとの組み合わせ；ｂ）ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ ２０μｍと、アセトニトリル、９９.９％アセトニトリル＋０.１％ジエチルアミン、９５％アセトニトリル＋５％２−プロパノールまたは９０％アセトニトリル＋１０％２−プロパノールとの組み合わせ；およびｃ）ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）５０８０１ ２０μｍと、アセトニトリルまたは９０％ｎ−ヘプタン＋１０％エタノールとの組み合わせである。％濃度はすべてｖ／ｖ％である。
【００２６】
実施例
次に実施例を用いて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はそれに限定されると解釈されるべきではない。
【００２７】
実施例１：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍおよび純粋なアセトニトリル溶出液を用いるラセミ体のＭＣＣ精製
この実施例はマルチカラムクロマトグラフィー（ＭＣＣ）を用いる精製に関する。（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの良好な標的純度および回収率を、固定相としてＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ２０μｍ、および溶出液として純粋なアセトニトリルを用いて得た。
４つの分離ゾーン（１−２−２−１）にて６本のカラムを備えたＭＣＣ（マルチカラム連続クロマトグラフィー）システムで２５℃にて分離を行った。純度は９９．０％で、回収率は９６％であった。最初に溶出されるエナンチオマーの光学純度の生産性に対する影響を再検討すると、必要とされる純度を９９．６％から９７．８％に減少させると、生産性が２５％以上増加しうることが示された。
【００２８】
ラセミ体化合物（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを、１.８５ｍＬ／分の流速（異性体全体としての濃度：２０ｇ／アセトニトリル１Ｌ）で、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤを充填した約１０ｃｍ長の１．０ｃｍ径の６本のカラムからなるＭＣＣシステムに供給した。アセトニトリルを溶出液として７.２５ｍＬ／分の流速にて使用した。その結果、抽出液を６.９ｍＬ／分の流速で得、ラフィネートを２.２ｍＬ／分の流速で得た。溶媒を蒸発させた後、ラフィネートおよび抽出液中の化合物を白色固体として回収した。回収率は９６.２−９７.３％の範囲にあり、純度は９７.８−９９.６％の範囲にあった。
【００２９】
ＣＳＰを供給物の溶液で調整した後の最適化条件を以下の表１に示す。
【表１】
【００３０】
純度を調節し、回収率を９６％のままラフィネート純度について９８から９９.５％にスキャンするために種々のカラム配置を試験した。カラム配置はゾーンと同じ次数にて記載される。言い換えれば、カラム配置が１−２−２−１である場合、ゾーン１は１個のカラムを、ゾーン２は２個のカラムを、ゾーン３は２個のカラムを、そしてゾーン４は１個のカラムを有する。ゾーンは入口点と出口点との関係で定義される。
ゾーンＩ： 溶出液と抽出液の点の間；
ゾーンＩＩ： 抽出液と供給物の点の間；
ゾーンＩＩＩ： 供給物とラフィネートの点の間；および
ゾーンＩＶ： ラフィネートと溶出液の点の間。
【００３１】
実験を行った３つのより関連するカラム配置を表２に示す。
【表２】
【００３２】
以下の表３は生産性および溶出液の消費の比較を示す。
【表３】
＊ＣＳP：キラル固定相
表３に示される純度および回収率は、それが安定状態に達するように、そのシステムを少なくとも１５−２０サイクル作動させた後に測定したものである。
【００３３】
実施例２：ＭＣＣと結晶化とのカップリングによるエナンチオマー濃縮
ラセミ体の分離を考えれば、実施例１にて示される実験データは生産性がその比純度で有意に影響されることを示した。例えば、実施例１の表３を見れば、比純度が９７．８％から９９．６％に上昇すると、生産性は約２５％減少した。したがって、結晶化によるエナンチオマー濃縮は実施例１のＭＣＣより得られるフラクション（ラフィネート）の一つで得られた。溶媒をラフィネートより蒸発させて乾固させた。純度が約９６.８％（e.e. ９３.６％）の白色固体を得た。その後、再結晶化によるエナンチオマー濃縮をアセトニトリル（ＭＣＣ工程で使用したのと同じ溶媒）を用いてこの固体で行った。該結晶の光学純度は９６．８％（e.e. ９３.６％）から略９９.７％（e.e. ９９.４％）に上昇した。
【００３４】
実施例２は標的エナンチオマーの豊富化された溶液を首尾よく結晶化させ、非常に高い最終純度を得ることができる旨を示す。したがって、必要とされるエナンチオマーを精製するためにクロマトグラフィーを結晶化とカップリングさせることは、生産性を改良し、分離コストを削減するための実現可能な変形である。
【００３５】
実施例３： ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍとアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液を用いるラセミ体のＭＣＣ精製およびＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）最適化
この実施例はＭＣＣを用いるラセミ体（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの精製に関する。該操作は、アセトニトリルの溶出液をアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液と置き換えることを除いて、実質的に実施例１の記載と同じであった。この改善された選択性の結果（α＝４．５３）を実施例１（α＝１．９２）と比較した。
【００３６】
ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍを固定相として用いてラセミ体の分離を行った。最適溶出条件を溶出液としてアセトニトリル／イソプロパノール ９５／５％ｖ／ｖで得た。６個のカラム（１０ｍｍカラム径、１００ｍｍ長）を備えたＭＣＣ（マルチカラム連続クロマトグラフィー）システムで分離そのものを行った。（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）について、純度は９９．０％であり、その回収率は９６％であった。
最適性能を６−カラムのＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスで得た。４.６ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日の処理能を得た。
【００３７】
回収率が９６％で、ラフィネート純度を９９．０％に調節するために種々の操作条件を試験した。表４は、供給物の濃度が３０ｇ／Ｌで、９６％の回収率で９９．０％のラフィネート純度を得ることを可能とする最適配置を示す。
【表４】
【００３８】
得られた処理能は４.５９ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日であった。この結果は実施例１の純粋なアセトニトリル溶出液について上記した結果と比較されうる。同じような純度および回出率の制限で２.０４ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日（実施例１の実験２を参照）の処理能が得られた。その溶出液の組成の修飾は、純粋なアセトニトリルの溶出液の組成と比べてアセトニトリル／イソプロパノール ９５／５％ｖ／ｖの溶出液の組成で生産性を１２０％まで増加させた。
付加的な実験を行い、該プロセスの生産性をさらに最適化させた。供給物の流速の変化を他の物質の流速を同時に調整して行った。この目的は、精製されたラフィネートについて收率を９６％に維持しながら、得られる純度を最大とすることにあった。
【００３９】
表５は種々の純度／注入される供給物の流速を示す。選択されたカラム配置は１−２−２−１であった。
【表５】
【００４０】
得られた結果は３ｍＬ／分の供給物の流速がラフィネートの純度を９９％とする最大の注射可能な量と密接に関連していることを示した。供給物の流速をさらに上げるとラフィネートの純度は急激に低下した。
【００４１】
次に、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスを用いて上記した結果を最適化した。カラム配置を該プロセスの生産性およびロバストが最大となるように最適化した。表６にてＭＣＣおよびＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの性能を比較する。
【表６】
【００４２】
流速を以下の表７に示す。
【表７】
【００４３】
表７の結果を鑑みれば、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）の供給物の流速を３ｍＬ／分にセットしたことがわかる。得られた純度は９９．６％に等しく、同じ供給物の流速で得られるＭＣＣの最良の純度は９９．３％に等しかった（表５の実験１を参照のこと）。ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの配置で得られる純度は２.８ｍＬ／分の供給物の流速で得られるＭＣＣの性能に等しかった（抽出液およびラフィネートの両方で純度が極めて近かった）。ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの適用は４つのゾーンの間に良好なカラム配分を可能とし、ＭＣＣプロセスと比べて分離のロバストを増加させた。
【００４４】
実施例４：ＭＣＣとアセトニトリル／イソプロパノールの混合液を用いる結晶化とのカップリングによるエナンチオマー濃縮
ラセミ体および所望のエナンチオマー（（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール）を用い、２Ｋ／分の加熱速度で、ＳＥＴＡＲＡＭ ＤＳＣ １３１を用いてＤＳＣを行った。吸熱ピークの最高点の値（融点の端）だけが相図を決定するものと考えられる。
【００４５】
純粋なエナンチオマーである（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールは吸熱ピーク（オンセット：３９２.５K、ピーク：３９４.５K、エンタルピー：２６１８４Ｊ／モル）を有し、ラセミ体は吸熱ピーク（オンセット：３９０.１K、ピーク：３９２.７K、エンタルピー：３２６０５Ｊ／モル）を有した。その理論値および実験値を以下の表８に示す：
【００４６】
【表８】
【００４７】
上記した表８において、イクエーション１の列の底部にある３９４．５およびイクエーション２の列の頂部にある３９２．７の値を除き、値はすべて理論値である。これら２つの値（太字で示す）は、上記したようにＤＳＣで実験的に測定された。これらの値を見れば、ラセミ体とエナンチオマーの液相線が集結する、共晶が（０．８０と０．８５の間で変化するが）０．８０の付近にあることがわかる。
【００４８】
共晶に関する情報を用いて、分離後の結晶化工程を最適化することが可能であった。上記したように、クロマトグラフィー選択性は９５／５ アセトニトリル／ＩＰＡの溶出液の組成物で有意に改善されうる。溶出液の組成の修飾は、新たに選択される溶媒の生成物の溶解性を修飾するため、結晶化工程に有意な影響をもたらす。したがって、結晶化による精製は実施例３のＭＣＣプロセスの最後で得られたラフィネートに対して行われた。
【００４９】
約５００グラムのラフィネート溶液（９７．５／２．５のエナンチオマー比率、合計の濃度が１３．３３ｇの固体／Ｌ）より溶媒を蒸発させ、微量の固体が丸底フラスコに出現すれば、蒸発を止めた。得られた懸濁液（合計が５７．５ｇの質量）を７０℃まで加熱し、該固体を再び溶解させた。つづいて、得られた溶液を攪拌しながら約１５℃の温度でサーモスタット付きジャケットに移した。５分後に沈殿が始まった。該懸濁液をこの温度で攪拌しながら２ないし３時間放置した。
【００５０】
純粋なエナンチオマーの理論上の回収率は以下のとおりである：
％回収＝％ＯＰ−％共晶／１００％−％共晶
ラフィネートの最初の溶液５００ｇ中の固体の総重量を、ラフィネートに対して行った溶解性測定（溶解度、１０．３２ｇ／ｋｇ）に基づいて５．１６ｇと評価した。光学純度を９７．５％と評価し、最大共晶組成はｘ＝０．８５であった。したがって、回収率の理論値は８３．３％であった。このことは該溶液から純粋なエナンチオマーの回収可能な理論値が４．３０ｇであったことを示す。
【００５１】
白色固体を濾過し、真空下、４０℃で乾燥させた（純粋なエナンチオマー３．８１ｇ、光学純度＞９９．５％）。実用的な最適化を行うことなく、全收率は約７４％であった：この値は理論的な全回収率に匹敵する（８３．３％）。
母液を攪拌しながら２時間さらに５℃にまで冷却することで第２の収量を得た。濾過により白色固体を集め、真空下、４０℃で乾燥させた（エナンチオマーの収量０．２８ｇ、光学純度９４％）。残りの母液の光学純度は８９．６％であった。
【００５２】
これらの結果は、共晶組成のエナンチオマー比率よりも大きな比率を示すエナンチオマーの混合物を再結晶すると、結晶化固相の濃縮物がある一方で、該溶液（母液）の光学純度は共晶組成に向かって減少することを確認するものである。
【００５３】
もう一つ別の実験が光学純度がわずか８２．２％のラフィネートに対して行われた。溶媒の蒸発を８２．２％の光学純度を有するラフィネート約２００ｇに対して行った。約４６．６ｇの濃縮溶液を回収し、約１０℃に移した。その冷却の間、攪拌しながら、白色懸濁液を得、５分後、５℃にクールダウンした。ついで、該懸濁液を攪拌しながらこの温度で約２時間放置した。白色固体を濾過し（０．６４ｇ）、真空下、４０℃で乾燥させ、キラルＨＰＬＣにより分析した：光学純度は７０．６％に等しかった。母液の光学純度は約９１．６％であり、結晶化により得られる固体の純度よりも高い。
【００５４】
この結果は、共晶組成のエナンチオマー比率より低いエナンチオマー比率を示すエナンチオマーの混合物を再結晶すると、母液に濃縮物がある一方で、固相の光学純度はラセミ体に向かって減少することを確認する。
【００５５】
実施例５：ラセミ体の結晶化工程を用いる最適化、および精製のスケールアップ
この実施例はマルチカラム連続（ＭＣＣ）クロマトグラフィーによるラセミ体のエナンチオ分離に関する。該分離は、固定相としてＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ ２０μｍを用い、アセトニトリル／イソプロパノール ９５／５（ｖ／ｖ）の溶出混合液で溶出してなされた。この分離を６本のカラム（２５ｍｍの内径、９７ｍｍ長）を備えたＬａｂ−ＭＣＣシステムで行われた。（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）について、光学純度は９９．５％であり、回収率は９６％であった。
【００５６】
操作条件を最適化し、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスで５ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日の最大生産性をもたらした。ＭＣＣと結晶化とのカップリングも行った。さらなる光学精製プロセスとして、標的エナンチオマーに富む（９２．７％）エナンチオマーの混合物で開始する用いる結晶化を用いた。純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの結晶を、純粋なエナンチオマーの理論上の回収量の９２％の回収率で得た。得られた母液は共晶点と同じ組成を示した。
【００５７】
化学的精製プロセスとしての結晶化は、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの高純度溶液（＞９９．５％）を粘性スラリーが得られるまで蒸発させることによりなされる。濾過で得た固体を冷アセトニトリルで洗浄した。純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを得、母液中の大部分の不純物を回収した。
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ化もまた、溶媒として還流下にあるメタノールを用いて行った。
【００５８】
該方法は、生産プロセスの光学純度および生産性の両方を担保するのに必要なロバスト性因子を考慮して、１００トン／年のラセミ体を精製するように設計された。９９．５％の光学純度を考慮した場合、分離は内径が６００ｍｍの６−カラムＭＣＣで達成されうる。該クロマトグラフィープロセスは、標的エナンチオマーの精製された結晶を洗浄する工程とカップリングされうる。望ましくないエナンチオマーは容易にラセミ化され、再結晶化工程（不純物の除去）の後に供給ストリーム中にリサイクルされうる。
分離は６−カラム配置を用いて行われた。カラム（２．５ｃｍ内径、９．７ｃｍ長）にＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍをパックした。試験する前に、第１のＣＳＰコンディショニング工程を試みた。該システムは、まず、約３０ｇの供給物を注入する自動モードで行われたが、カラムの保持時間は考えているよりもさらに小さかった。第２のＣＳＰコンディショニング工程は、１２ｇ／Ｌの供給溶液を３０ｍＬ／分で６０時間、再循環ループにてポンプにて注入することで行われた。
【００５９】
ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）作動条件が以下の表９に示された：
【表９】
【００６０】
ついで、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）作動条件が表１０に示されるように最適化された。表１０は、９６％の回収率で９９．５％のラフィネート光学純度を得る、最適、かつロバストなＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスを示す。
【表１０】
【００６１】
供給物の流速を上記した２０ｍＬ／分から２３ｍＬ／分（＋１５％）まで増加させた。これにより回収率は（それでも＞９６％であるが）わずかに減少したが、ラフィネートの光学純度には何ら影響はなかった。供給物の流速を２５ｍＬ／分に設定すると、得られる純度および／または回収率は急速に減少する傾向にあった。純度および回収率のスペックは内部流速を調節したものの、同時に達成され得なかった。この動きは供給物の流速を２７および３０ｍＬ／分に増加させた場合に確認された。
【００６２】
全体の処理能を向上させるために、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの後に最終再結晶工程を行った。相対的に低いラフィネート純度（９２％）で開始する実験を行った。共晶の位置（８５％）を考えれば、純粋なエナンチオマーを理論上回収しうる量は、最初の溶液中に含まれる標的エナンチオマーの約５０％にすぎない。
総濃度が約５．１１％の固体で、光学純度が９２％に豊富化された１２１４．４ｇのラフィネート溶液を、２５℃（透明で、わずかに黄色の溶液が得られる）から１０℃まで約１℃／分の冷却速度で冷やした。該溶液を１０℃で１時間攪拌しながら放置し、第１の結晶（核生成）を得た。さらなる冷却工程を１０℃から０℃に１℃／分の冷却速度で行い、懸濁液をこの温度に約２時間攪拌しながら維持した。該懸濁液を濾過し、洗浄することなく、２５．０４ｇの乾燥結晶を得た。該結晶および母液をキラルＨＰＬＣで分析した。
【００６３】
該溶液中の固体の総量を、まず最初に、約６２．１ｇと推定した。この溶液の光学純度は９２％であった。このことは過剰なエナンチオマー（Ｓ，Ｓ−エナンチオマー）の総重量が約５３ｇであることを意味した。したがって、共晶の位置が約８５％のエナンチオマー比率であることを考えれば、理論上の回収可能な純粋なエナンチオマーの総量は２７．２ｇであり、乾燥結晶の回収量（２５．０ｇ）と一致する。
得られた結晶（洗浄工程なし）は９９．６％の純度を有するのに対して、母液の分析は得られた純度が推定共晶組成に極めて近いことを示した。
【００６４】
ＭＣＣによる化学的精製プロセスも行った。このオプションは、ＭＣＣによる精製により光学純度のスペック（例えば、Ｏ．Ｐ．＞９９．５％）と適合する純粋なエナンチオマーが得られる場合に適用可能であった。得られたラフィネートを蒸発乾固させた。得られた固体を冷アセトニトリルで洗浄し、不純物を除去した。
実験操作は、純粋なラフィネートを乾燥させることで得られる所望のエナンチオマー（３０．４ｇ）と、５０ｍｌのアセトニトリル（ピューレックス等級）の混合物を少し加温（凝集体を排除）して粘性のスラリーを得、それを約４℃の温度に２ないし３時間置いた。
【００６５】
濾過直後の固体を洗浄するのに約−２０℃の温度に４時間保持した２００ｍｌの容量のアセトニトリルを用いた。粘性のスラリー（わずかに黄色）を濾過し、冷溶媒をその結晶上に注ぎ、速やかに濾過した。真空下、４０℃で乾燥させた後、２８．５ｇの結晶を回収した。濾過後の母液は黄色であったのに対して、得られた結晶は白色であり、このことは該洗浄工程で結晶から不純物が除去されたことを示す。黄色の母液から溶媒を蒸発させて黄色がかった固体を得た。
【００６６】
実施例６：ラセミ化工程の最適化
ラセミ化を最適化するために、純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを種々の溶媒と試験した。具体的には、約２ｇの純粋なエナンチオマー（（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール）を１００ｍｌの溶媒（以下、種々の溶媒を参照）に溶かし（総濃度が約２０ｇ／Ｌ）、攪拌（還流下）しながら、約６０−６５℃まで加熱した。ラセミ化の速度を追跡するために、該溶液を定期的にサンプリングした。
【００６７】
表１１は、種々の溶媒または混合溶媒中の、エナンチオマーのラセミ化の光学純度を示す。
【表１１】
【００６８】
表１１はラセミ化が精製のために選択される好ましい溶出液（アセトニトリル／ＩＰＡ ９５／５）で生じるが、その速度はかなり遅いことを示す（６５℃で、２０時間経過した後でもＯＰはまた高い状態にある）。このことは、好ましいエナンチオマーの光学純度が、最終の濃縮および乾燥工程の間に有意に減少することはないことを示唆する。ラセミ化は純粋なイソプロパノール中では混合溶媒と比べて速いが、変換率は２０時間後で低いままである（３０％）。ラセミ化はメタノールがより好ましいようで、２時間後に１０％が変換される。酸性条件下にあるメタノールは純粋なメタノールで得られる結果と比べて改善がない。酸性水性溶媒ではラセミ化は観察されない。このスクリーニングの結果は、試験したラセミ化剤のうち、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを純粋なメタノール中で還流することがそのラセミ化を促進するための最良のオプションであることを示す。かくして、同じことが（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ化にも適用できる。
【００６９】
上記したように、新たに形成されたラセミ体の不純物は最初のラセミ体の原材料の不純物と適合することが好ましい。新たに形成されたラセミ体を再結晶すると、この不純物を除去することができ、したがって最初の不純物の特性が適合されうる。再結晶法は以下の工程を基礎とする：
新たに形成され、得られたラセミ体溶液を濾過し、蒸発乾固させる。得られた固体を６０℃でアセトニトリル（２ｇの固体に対して２０ｍＬ）に溶かした。これにより黄色がかった溶液を得、それを４℃に冷却し、７２時間貯蔵した。ついでこれを濾過する。
【００７０】
実施例７：ラセミ体のＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１ ２０μｍおよびアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液でのＭＣＣ精製
この実施例は、ＭＣＣを用いる、ラセミ体（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの精製に関する。該操作は、ＣＳＰをＣＨＩＲＡＬＰＡＫ Ｔ１０１に変えることを除き、実質的に実施例３の記載と同じである。分離そのものは、８本のカラム（１０ｍｍのカラム径、１００ｍｍのカラム長）を備えたＭＣＣ（マルチカラム連続クロマトグラフィー）システムでなされる。
【００７１】
種々の作動条件を試験した。表１２は、化学純度が９９．１％で、エナンチオマー過剰率が９９．７％の、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）の調製を可能とする最適化配置を示す。
【００７２】
【表１２】
【００７３】
これらの条件を用い、Ｌｉｃｏｓｅｐ８−５０装置に当てはめることで、約２．８ｋｇの供給物／ｋｇ ＣＳＰ／日の生産性を得ることができる。ＳＭＢ変数は以下のとおりであった：
【表１３】
【００７４】
実施例８：ラセミ体のＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１ ２０μｍおよびアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液でのＭＣＣ精製
合計２.３５ｋｇのラセミ体を、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）モード、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１固定相にてＬｉｃｏｓｅｐ Ｌａｂ５０装置を用い、移動相として５／９５ｖ／ｖのイソプロパノール／アセトニトリルを用いて分離した。光学純度が９７．０％の、１.０６ｋｇの（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）を得た。回収率はラフィネート（所望の生成物）について８９．８％であり、残りを抽出液で溶出した。生産性は４.１６ｋｇの供給物／ｋｇ ＣＳＰ／日（２４時間）であった。溶媒消費量は１７１Ｌ／ｋｇであった。このプロセスはさらに最適化されなかった。得られる生産性は供給ポンプの最大流速（５０ｍｌ／分）で制限された。光学純度は結晶化でさらに向上させることができる。
【００７５】
初期スクリーニング実験
以下の表１３Ａおよび１３Ｂは、異なるＣＳＰ／移動相を組み合わせて用いる、単一カラムスクリーニング実験の結果を要約する。
以下にスクリーニングプロセスを、特に試験したＣＨＩＲＡＬＰＡＫおよびＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＣＳＰを用いて、簡単に記載する。
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣシステムは、溶媒をデリバリするための４つで一組のＧ１３１１Ａポンプ、注入用のＧ１３１３Ａオートサンプラーを含む、このプロセスに用いることのできる装置の一例である。カラム溶出液の検出は、ＵＶ ＤＡＤ検出装置Ｇ１３１５Ｂで行われた。表１３Ａおよび１３Ｂに記載のすべての移動相について１ｍｌ／分の流速、２０℃の温度でラセミ体をクロマトグラフィー操作に付した。エナンチオマーの分離をＵＶを用い２２０ｎｍで測定した。
【００７６】
表１３Ａおよび１３Ｂにて用いられる、保持時間、利用率および選択性（α）なる語、ならびにその計算方法は、当業者であれば十分に理解するであろう（例えば、公開特許出願ＷＯ２００４／０４６０８７、頁７、１ないし４行を参照のこと）。
表１３Ａおよび１３Ｂに使用される略語は次の通りである：
ｎ−ヘプタン＝ｎ−ｈｅｐｔ；酢酸メチル＝ＭｅＯＡｃ；ジエチルアミン＝ＤＥＡ；ｎ−ヘキサン＝ｎ−ｈｅｘ；氷酢酸＝ＨＡｃ；イソプロピルアルコール＝ＩＰＡ；メタノール＝ＭｅＯＨ；テトラヒドロフラン＝ＴＨＦ；エタノール＝ＥｔＯＨ；酢酸エチル＝ＥｔＯＡｃ；ジクロロメタン＝ＭｅＣｌ２；ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル＝ＭＴＢＥ
【００７７】
加えて、単一カラムスクリーニング評価を、資生堂ファインケミカル（日本）から入手可能なＲＵ１およびＲＵ２キラル固定相でも行った。移動相としてメタノール、エタノール、アセトニトリル、酢酸エチルおよび酢酸メチルを用いる、２０μｍの粒子をパックした、５０℃または６０℃の高いカラム温度でのＲＵ２カラム（２５０ｍｍｘ４ｍｍ）では分離が得られず、そのピークからラセミ体がカラムと不可逆的に結合しているのは明らかであった。ＲＵ１カラムも同様な結果を示した。
【００７８】
【表１４】
【００７９】
【表１５】
【００８０】
本明細書中にて引用されている特許、刊行物、係属中の出願、仮出願は出典明示により本明細書の一部とする。
本発明はこのように記載されているが、同じ発明を別の方法にて変形しうることは明らかであろう。かかる変形を本発明の精神および範囲から逸脱するものと解釈すべきではなく、かかる修飾は当業者に明らかであり、添付した特許請求の範囲の範囲内にあるものである。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物、例えば、ラセミ混合物から、光学的に純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよびその医薬上許容される塩および溶媒和物を調製する方法に関する。
【０００２】
（従来技術）
２つのエナンチオマーの混合物からエナンチオマーとして純粋なまたは光学的に豊富化されたエナンチオマーを分離することは、当該分野にて周知である、ジアステレオマーの塩を形成することで、結晶化方法により、あるいは酵素方法により伝統的に行われてきた。キラルクロマトグラフィーは分析技法として周知であり、２つのエナンチオマーを実験規模で分離するのに有用な手段でもある。しかしながら、光学的に豊富化されたエナンチオマーのバッチ式クロマトグラフィーを用いての分離が、特定の医薬化合物の商業生産にまで発展することは、多くの技術的基準が要求されるためめったにないことである。すなわち、バッチ式クロマトグラフィーは最初の供給濃度の高希釈を生じさせ、それは多量の溶出液を必要とし、キラル固定相の非効率的な使用をもたらす。その結果、所望の化合物の溶出液中の濃度は低く、このことは所望の物質を単離し、再使用のために溶媒を回収するのに多くのエネルギーを必要とする。連続クロマトグラフィーはこれらの不利な点のいくつかを打ち消す。というのも、バッチ式クロマトグラフィーと比較して固定相の量当たりの生成物の分離に関して高い効率が可能となり、一般に溶媒の使用量が極めて低く、したがって回収のためのエネルギーをそれほど必要としない。
【０００３】
例えば、連続クロマトグラフィーの例が、Multi-Column Chromatography（ＭＣＣ）、Cyclojet、Simulated Moving Bed（ＳＭＢ）およびVARICOL（登録商標）の名称で知られている液体クロマトグラフィー技法である。ＭＣＣはＳＭＢおよびVARICOL（登録商標）を含む一般的用語である。ＳＭＢのコンセプトは１９６０年代の初期に特許され（米国特許第２９５７９２７号、第２９８５５８９号および第３２９１７２６号）、石油化学工業の分野にてしばらくの間使用されていた（米国特許第３２０５１６６号および第３３１０４８６号）。米国特許第５４３４２９８号、第５４３４２９９号および第５４９８７５２号もまたＳＭＢ方法に関する。米国特許第５５１８６２５号は保持能力の低い条件下で分離するＳＭＢ方法の使用に関する。Cyclojetのコンセプトもまた周知であるが、大規模では証明されていない。最近では、VARICOL（登録商標）システムが使用されており、米国特許第６１３６１９８号、第６３７５８３９号および第６４１３４１９号に記載されている。VARICOL（登録商標）は非ＳＭＢ方法であって、いくつかの利点、例えば、より大きな供給能力および一般により小さな溶媒消費に関して高い処理能力を提供するＭＣＣ技法の変法である。言い換えれば、ＭＣＣ技法は一定の生産能および溶媒消費についてより一貫した製品品質を生み出すことができる（A.Toumiら、J. Chrom.、１００６巻（２００３）、１５−３１頁およびZ.Zhangら、AIChE Journal、２００２年１２月、４８巻、１２号、２８００−２８１６を参照のこと）。公開されたＷＯ００／２５８８５はVARICOL（登録商標）に関連し、公開された米国２００２／００１４４５８Ａ１はＳＭＢ法は最適化に関するものである。米国特許第６１０７４９２号および公開されたＷＯ９９／５７０８９、ＷＯ０３／００６４４９、ＷＯ０３／０３７８４０、ＷＯ０３／０５１８６７、ＷＯ０３／０７２５６２およびＷＯ２００４／０４６０８７は特定の化合物の製法に関する。
【０００４】
化合物（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール、その医薬上許容される塩および溶媒和物ならびにそれらを含む医薬組成物は、鬱病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、肥満、片頭痛、痛み、性的機能不全、パーキンソン病、アルツハイマー病、あるいはコカインまたはニコチン含有の物質（タバコを含む）への依存症などの多数の疾患または障害の治療にて使用される。いくつかの文献は（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）または（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−エナンチオマーのいずれかをラセミ体である（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールから調製することを記載する。例えば、米国特許第６３４２４９６号Ｂ１（２００２年１月２９日にJerussiらに対して付与された）；米国特許第６３３７３２８号Ｂ１（２００２年１月８日にFangらに対して付与された）；米国特許第６３９１８７５号Ｂ１（２００２年５月２１日にMorganらに対して付与された）；米国特許第６２７４５７９号Ｂ１（２００１年８月１４日にMorganらに対して付与された）；米国特許出願公開２００２／００５２３４０Ａ１、２００２／００５２３４１Ａ１および２００３／００２７８２７Ａ１；ならびにＷＯ０１／６２２５７Ａ２を参照のこと。しかしながら、これらの文献は一つとして、ラセミ体の精製に連続クロマトグラフィー技法を利用していない。
【０００５】
連続クロマトグラフィー技法は、正しく実施すれば、古典的なバッチ式クロマトグラフィーよりも、固定相の一定量当たりで分離される生成物の観点から、実質的に溶媒コストを下げることに伴って、効率を上げることが可能であり、コストの点から伝統的な古典的分離法に匹敵するようになることも可能である。しかしながら、ロバストでかつ効率的な連続クロマトグラフィーシステムのセットアップは困難であり、これまで光学的に純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの調製は知られていない。
【０００６】
（発明の開示）
本発明は、ラセミ体または非ラセミ体の混合物とすることのできる、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物からの、光学的に純粋なまたは光学的に豊富化された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの調製方法に関する。バッチ式クロマトグラフィーシステムおよび／または連続クロマトグラフィーシステムのいずれの分離も、アミローストリス−３,５−ジメチルフェニルカルバマート（CHIRALPAK（登録商標）AD）またはその化学的に修飾された形態（CHIRALPAK（登録商標）Ｔ１０１）などの、キラル固定相（ＣＳＰ）を利用する。この連続クロマトグラフィーは、ＭＣＣ、VARICOL（登録商標）およびCyclojetなどのシステムを包含する。処理されうる供給量、ロバストな作動変数および一貫した製品品質の観点からVARICOL（登録商標）が好ましい方法である。
【０００７】
連続クロマトグラフィーと結晶化技法とを組み合わせることで利益を得ることができる（H. Lorenz ら、Journal of Chromatography A、第９０８巻（２００１）、２０１−２１４頁）。性能（すなわち、一般に、一日当たりにＣＳＰ１ｋｇに付き処理されるラセミ体のｋｇ（ラセミ体のｋｇ／ＣＳＰのｋｇ／日）で評価されるクロマトグラフィーシステムの生産性）は、クロマトグラフィーシステムのアウトレットでの光学純度のスペックに大きく依存しうる。このカップリングは、光学純度を少し落とすことでそのユニットの生産性を向上させることを目的とする。ついで、さらなる光学的精製方法として、結晶化を用いることができる。例えば、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール（キラル純度９２％ピーク面積比（ＰＡＲ））に富むエナンチオマーの混合物で出発し、純粋な（＞９９．５％）（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの結晶を純粋なエナンチオマーの理論的に回収しうる量の９２％の回収率で得ることができる。この操作で得られる母液は、共融点と同じ組成を示す（８５％純度）。化学的精製工程としての結晶化もまた、強調されている。濾過して、冷アセトニトリルで洗浄された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの高純度（９９．５％）の粘度の高いスラリー溶液は、大部分の不純物を母液に残したままで、純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを付与するであろう。
【０００８】
所望のエナンチオマーのキラル純度は、少なくとも８５％であり、一般に、９８％と９９．９％の範囲にあり、少なくとも９０％、一般には約９６％で必要とされるエナンチオマーが回収される。望ましくない（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ化をこの精製方法と組み合わせ、供給の流れの中にリサイクルすることもできる。このことは所望の（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを得るのに必要とされるラセミ体の必要な量を有意に減少させるであろう。
【０００９】
（発明の詳細な記載）
本発明は光学的に豊富化された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールならびにその医薬上許容される塩および溶媒和物の製法を包含する。本発明に従って光学的に富ませることのできる、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物は、当該分野にて知られている種々の方法により生成されうる。かかる方法により生成される混合物は、通常、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの５０／５０混合物を含む、ラセミ混合物であろう。しかしながら、本発明は、別の混合物、例えば（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを５０％より多く、（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを実質的な量にて含有する混合物を光学的に豊富とするのに用いることができる。該方法の原材料は、上記した（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの両方、および連続クロマトグラフィー方法に適する溶媒を含むであろう。望ましくない化合物（不純物を含む）、例えば、最初の混合物を合成した時から存在する不純物、原材料中に存在する不純物は、その原材料を連続クロマトグラフィーに供する前に取り除かれていてもよい。
【００１０】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを連続クロマトグラフィー方法により精製し、場合によっては本発明の結晶化によってさらなる精製に付した後、その化合物は、その医薬上許容される塩またはその溶媒和物、特に米国特許第６３４２４９６号Ｂ１、米国特許第６３３７３２８号Ｂ１、米国特許第６３９１８７５号Ｂ１、米国特許第６２７４５７９号Ｂ１、米国特許出願公開番号２００２／００５２３４０Ａ１、２００２／００５２３４１Ａ１および２００３／００２７８２７Ａ１、ならびにＷＯ０１／６２２５７Ａ２に記載されているものに変換されうる。
【００１１】
米国特許第２９８５５８９号（Broughtonに対して付与）に記載の、キラル固定相を用いるＭＣＣは、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを８０−１００％のエナンチオマー過剰、好ましくは少なくとも９０％のエナンチオマー過剰にて得るのに用いられる。
適当には、ＭＣＣは、米国特許第２９８５５８９号にて見られるように、ＭＣＣ方法の最も効果的な実施の一つである４つのゾーンカスケード装置にて実施される。
【００１２】
ＭＣＣ分離の最適条件は、一般に、ＨＰＬＣ（高性能液体クロマトグラフィー）から得られる溶出特性を分析することで同定される。重要なパラメーターは、支持体の負荷能力、移動相の強度、選択性、温度および原料の溶解性である。これらのパラメーターを最適化することで、コストに対する効果的な分離の条件を同定することが助成される。ＭＣＣ操作の条件を同定するのに使用される方法が、the Journal of Chromatography A、７０２巻（１９９５）、９７−１１２頁にて論じられ、かつ実証されている。
好ましいＭＣＣ操作は、その一部として、まず豊富化するのにＭＣＣを通し、つづいて別の分離技法を用いて豊富化を強化する、２段階の「豊富化−洗練化」操作を用いてもよい。第２段階はもう一つ別のＭＣＣ段階であってもよい。別法として、第２段階は異なる操作、例えば、ＨＰＬＣまたは結晶化であってもよい。
【００１３】
移動相は、Ｃ５−Ｃ７アルカン（特に、ヘキサンおよびヘプタン）、Ｃ１−Ｃ３アルカノール（特に、メタノール、エタノールおよび２−プロパノール）、メチルtert−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、酢酸エチル、アセトン、アセトニトリルの単一成分またはその混合物であってもよく、移動相はアセトニトリルとイソプロパノールの組み合わせ溶出液であることが最も好ましい。アセトニトリル／イソプロパノールの好ましい比率は９３／７％ｖ／ｖないし９９／１％ｖ／ｖであり、好ましくは９５／５％ｖ／ｖないし９７／３％ｖ／ｖであり、最も好ましくは９５／５％ｖ／ｖである。もう一つ別の実施形態において、移動相はアセトニトリルとメタノールの、またはアセトニトリルとエタノールの組み合わせ溶出液である。また、純粋な超臨界流体（ＳＣＦ）を、およびＳＣＦをアルコールと一緒に用いることもできる。上記した溶出液に加えて、当業者に知られているように、少量の塩基（ジエチルアミンなど）または酸（ＨＣｌなど）を添加することもできる。典型的には、「ヘキサン」および「ヘプタン」なる語は、直鎖およびその分岐鎖異性体をいう。
【００１４】
ラセミ体の（＋／−）−（２Ｒ＊、３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールをキラルクロマトグラフィーに付し、好ましくはキラル固定相としてCHIRALPAK（登録商標）ADを、移動相としてアセトニトリルまたはアセトニトリル／イソプロパノールを用いるＭＣＣクロマトグラフィーにより、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）エナンチオマーを少なくとも９０％、好ましくは９５％以上のエナンチオマー過剰率で得る。
連続クロマトグラフィー技法を用いると、所望のエナンチオマーの純度は９８％と９９.５％の範囲にあり、必要とされるエナンチオマーの９６％は回収される。本発明の他の実施形態は、連続クロマトグラフィー技法を、その後の所望のエナンチオマーの分離結晶化と組み合わせ、所望の純度および回収率を得ることを包含する。他の実施形態は望ましくないエナンチオマーをラセミ化し、新たな混合物を原材料にリサイクルすることを包含する。
【００１５】
任意の結晶化
ラフィネートおよび／または抽出液のエナンチオマー過剰率（ｅ．ｅ．）は、一般に、９０％より大きく、好ましくは９５％より大きく、その上さらに好ましくは９８％よりも大きい。しかしながら、続く結晶化工程によりｅ．ｅ．を改善することは可能であるため、ラフィネートおよび／または抽出液の６０％くらいの低いｅ．ｅ．も本発明に係る化合物を調製しうるのに十分である。化合物をその塩基付加塩に変換し、その塩を結晶化させることでｅ．ｅ．を改良することも可能である。
一の実施形態において、ラフィネートおよび／または抽出液のｅ．ｅ．は６０％以上、好ましくは７０％より大きく、その上さらに好ましくは８０％よりも大きい。ｅ．ｅ．は、その後、所望により該化合物を塩基付加塩に予め変換して結晶化させることで改良される。
その後の分離結晶化の目的は純度が低下するもより高い処理能を可能とすることである。この純度の低下は後の結晶化を行うことで修正または相殺されうる。
【００１６】
任意のラセミ化
所望とするエナンチオマーに応じて、抽出液またはラフィネートのいずれかの流れは望ましくない。この場合において、および以下の実施例において、それは最終的に所望のエナンチオマーを含有するラフィネートであり、望ましくないエナンチオマーを含有する抽出液である。しかしながら、この抽出液を単に捨てることは不要であり、無駄でもある。むしろ、望ましくないエナンチオマーを化学的または別の操作でラセミ化すればよい。したがって、まずラセミ化を行うことで抽出液を供給の流れの中にリサイクルすることが可能である。この操作は抽出液をリサイクルし、必要とされる新たなラセミ体の供給を減少させるであろう。
【００１７】
この場合において、目的の化合物の化学構造は、そこに水素原子が結合しているキラル炭素原子を有する。この水素原子はその近接環境のため相対的に不安定であり、ラセミ化は塩基性または酸性剤の影響下にあると考えられ得る。
数種のラセミ化方法が周知である。それらは、一般に、外部物質（酸性および塩基性）の助け、あるいは時に純粋なエナンチオマーの溶媒（一般にプロトン性である）中溶液の簡単な還流を必要とする。この最終の任意の工程は、外部物質、すなわち、ラセミ化されたエナンチオマーを供給の流れにリサイクルする前に除去しなければならない、物質を導入しないという利点がある。
【００１８】
規制基準によれば、最初のラセミ体およびラセミ化を介して生成された新たに形成されたラセミ体は、本質的に、類似する不純物の特性を示すはずである。しかしながら、新たに形成されたラセミ体中の付加的な不純物は新たに形成されたラセミ体を再結晶することで取り除くことができ、したがって供給ラセミ体の最初の不純物特性と適合しうる。
ラセミ化剤として使用されうる可能性のある溶媒のうち、沸点が少なくとも５０℃の溶媒が好ましい。より好ましくは沸点が５５−１１０℃の溶媒である。最も好ましくは、溶媒は、以下の：酢酸メチル、酢酸エチル（本明細書中、「ＥｔＯＡｃ」ともいう）、酢酸イソプロピル、酢酸プロピル、酢酸ブチルなどの酢酸アルキル；２,４−ジメチル−３−ペンタノン、３−メチル−２−ブタノン、２−ブタノンおよび４−メチル−２−ペンタノンなどのジアルキルケトン；アセトニトリルおよびプロピオニトリルなどのニトリル；メタノールまたはイソプロパノールなどのモノアルコール；ジエチレングリコールなどのポリアルコール；および水／ＨＣｌおよびメタノール／ＨＣｌなどの酸性混合物から選択される少なくとも一つの溶媒である。
【００１９】
キラル固定相（ＣＳＰ）吸着剤
本願発明の吸着剤は、好ましくは、キラル固定相である。典型的なキラル固定相はセルロース誘導体（例えば、好ましくは、シリカ上にコーティングされたセルロースのエステルまたはカルバマート）、酒席酸エステル相、π−酸性およびπ−塩基性キラル固定相（パークル（Parkle）相）、アミロース誘導体（例えば、好ましくは、シリカ上にコーティングされたアミロースのエステルまたはカルバマート）、ポリアクリルアミド相などを包含する。
【００２０】
いくつかの市販されているキラル固定相として、三酢酸微結晶セルロース（商標名 ＭＣＴＡまたはＣＴＡ−１）、セルローストリス（フェニルカルバマート）（商標名 ＣＨＩＲＡＣＥＬ ＯＪ）、セルローストリス（３,５−ジメチルフェニルカルバマート）（商標名 ＣＨＩＲＡＣＥＬ ＯＤ）、セルローストリベンゾアート（商標名 ＣＨＩＲＡＣＥＬ ＯＢ）、アミローストリス［（Ｓ）−メチルベンジル−カルバマート］（商標名 ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ−Ｖ）、Ｏ,Ｏ’−ビス（４−tert−ブチル−ベンゾイル）−Ｎ,Ｎ’−ジアルキル−Ｌ−タルタルジアミド（商標名 ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＣＨＩ−ＴＢＢ）、Ｏ,Ｏ’−ビス（ジメチル−ベンゾイル）−Ｎ,Ｎ’−ジアルキル−Ｌ−タルタルジアミド（商標名 ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＣＨＩ−ＤＭＢ）および３,５−ジニトロベンゾイルフェニルクリシン（イオン結合または共有結合のいずれか）（商標名 ＤＮＢＰＧ）が挙げられる。ＣＨＩＲＡＣＥＬおよびＣＨＩＲＡＬＰＡＫ製品は、各々、ダイセル化学工業株式会社より入手可能である。ＫＲＯＭＡＳＩＬ製品はエカ・ケミカル（Eka Chemicals）のセパレーション・プロダクト（Separation Products）で開発された。ＭＣＣのための適当なキラル固定相として、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）およびＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）の下でキラル・テクノロジーズ（Chiral Technologies）が市販しているものが挙げられる。ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ、シリカゲル上にコーティングされたアミロース誘導体、またはその化学的修飾体（ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１）が特に適することが判明した。他の入手可能なキラル固定相（ＣＳＰ）がＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）ＯＪ、ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）ＯＤ、ＷＨＥＬＫ−Ｏ１、ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＤＮＢ、ＫＲＯＭＡＳＩＬ ＴＴＢであり、各々、キラル・テクノロジーズ、レジス・テクノロジーズ（Regis Technologies）およびエカ・ノベル（Eka Novel）より市販されている。
【００２１】
大きさが１０μｍと２０μｍの両方のシリカゲル基質にコーティングされたアミローストリス（３,５−ジメチルフェニルカルバマート）を含むキラル固定相（商標名 ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ）が特に好ましい。２０μｍのＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤは、高生産性を有する製品品質を確保するように背圧を小さくして分割を十分に行えるようにする、エナンチオ選択的分取スケールのクロマトグラフィー分離操作をスケールアップするに選択される材料であると考えられる。
【００２２】
圧力および温度
生成物の分離を液体およびＳＣＦクロマトグラフィーで行う場合の圧力の範囲は、約０．１と４００ＭＰａ、好ましくは０．５と３０ＭＰａの間とすることができる。カラム中の温度は、一般に、−７８℃と２００℃の間に、好ましくは約５と５０℃の間に、より好ましくは約１５と４０℃の間にあり、最も好ましくは約２５℃である。
【００２３】
選択性パラメーター「α」
選択性に影響を及ぼす変数として、カラムの型、温度、圧力、供給速度および溶媒の混合液が挙げられる。加えて、分離する前に、カラムを調整することで、すなわち、カラムに移動相を（分析体と共にまたはなしで）少なくとも１２時間、好ましくは１２ないし１８時間通すことで選択性は劇的に増加しうる。好ましくは、１．１よりも大きな選択性パラメーター「α」を得るように変数を選択する。より好ましくは、αは２．０よりも大きい。最も好ましくは、αは約２．５に等しく、特に好ましくは約２．５より大きい。
【００２４】
得られる選択性はプロセス生産性に対して強い影響力を有する。以下の実施例３に示されるように、イソプロパノールをアセトニトリル移動相に添加することで選択性が２倍以上増加した。プロセス生産性は（α−１／α）３に大体比例するが、ベストなクロマトグラフィー条件を選択するには他のパラメーターも考慮しなければならない。化合物の保持力もまたプロセスに影響を及ぼす。試験では、２−３％イソプロパノールで保持力は最大であることが分かる。しかしながら、ラセミ体の溶解度はイソプロパノールの含有量が大きくなるほど増大し、より濃縮された供給物の注入が可能となることは明らかである。５％イソプロパノールとの競合効果が最適であり、アセトニトリルを単独で用いるよりも優れていることがわかる（参考までに、純粋なアセトニトリルでは２２．５ｇ／Ｌであり、アセトニトリル／イソプロパノール ９５／５の混合液では３０ｇ／Ｌである）。プロセス操作のロバスト性の観点から、ＭＣＣは連続的に操作するため、そのシステムを中断させうるいずれの沈殿作用も回避することが重要である。イソプロパノールを含有する移動相の使用は、沈殿の起こる可能性を減少させ、１００％アセトニトリルで純粋に操作するＭＣＣシステムと比べて、ラセミ体供給量および単離されたエナンチオマーがそれほど可溶性でない点で、有利である。混合溶媒（アセトニトリル／イソプロパノール）の溶出液を使用することにおいて実施例３に示されるように、その得られるプロセス処理能は、純粋なアセトニトリルの使用と比較して、同じキラル純度であるが、プロセス操作パラメーターのロバスト性を増加させ、溶出液の消費量を減少させながら（参考までに、ラセミ体の供給量３１３Ｌ／ｋｇに対してラセミ体の供給量２７０Ｌ／ｋｇである）、約２倍の比選択性を有する。
【００２５】
許容されるα値を有する移動相とキラル固定相の特定の、限定されるものではない、好ましい組み合わせは：ａ）ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ １０μｍと、アセトニトリルとの組み合わせ；ｂ）ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ ２０μｍと、アセトニトリル、９９.９％アセトニトリル＋０.１％ジエチルアミン、９５％アセトニトリル＋５％２−プロパノールまたは９０％アセトニトリル＋１０％２−プロパノールとの組み合わせ；およびｃ）ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）５０８０１ ２０μｍと、アセトニトリルまたは９０％ｎ−ヘプタン＋１０％エタノールとの組み合わせである。％濃度はすべてｖ／ｖ％である。
【００２６】
実施例
次に実施例を用いて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はそれに限定されると解釈されるべきではない。
【００２７】
実施例１：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍおよび純粋なアセトニトリル溶出液を用いるラセミ体のＭＣＣ精製
この実施例はマルチカラムクロマトグラフィー（ＭＣＣ）を用いる精製に関する。（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの良好な標的純度および回収率を、固定相としてＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ２０μｍ、および溶出液として純粋なアセトニトリルを用いて得た。
４つの分離ゾーン（１−２−２−１）にて６本のカラムを備えたＭＣＣ（マルチカラム連続クロマトグラフィー）システムで２５℃にて分離を行った。純度は９９．０％で、回収率は９６％であった。最初に溶出されるエナンチオマーの光学純度の生産性に対する影響を再検討すると、必要とされる純度を９９．６％から９７．８％に減少させると、生産性が２５％以上増加しうることが示された。
【００２８】
ラセミ体化合物（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを、１.８５ｍＬ／分の流速（異性体全体としての濃度：２０ｇ／アセトニトリル１Ｌ）で、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤを充填した約１０ｃｍ長の１．０ｃｍ径の６本のカラムからなるＭＣＣシステムに供給した。アセトニトリルを溶出液として７.２５ｍＬ／分の流速にて使用した。その結果、抽出液を６.９ｍＬ／分の流速で得、ラフィネートを２.２ｍＬ／分の流速で得た。溶媒を蒸発させた後、ラフィネートおよび抽出液中の化合物を白色固体として回収した。回収率は９６.２−９７.３％の範囲にあり、純度は９７.８−９９.６％の範囲にあった。
【００２９】
ＣＳＰを供給物の溶液で調整した後の最適化条件を以下の表１に示す。
【表１】
【００３０】
純度を調節し、回収率を９６％のままラフィネート純度について９８から９９.５％にスキャンするために種々のカラム配置を試験した。カラム配置はゾーンと同じ次数にて記載される。言い換えれば、カラム配置が１−２−２−１である場合、ゾーン１は１個のカラムを、ゾーン２は２個のカラムを、ゾーン３は２個のカラムを、そしてゾーン４は１個のカラムを有する。ゾーンは入口点と出口点との関係で定義される。
ゾーンＩ： 溶出液と抽出液の点の間；
ゾーンＩＩ： 抽出液と供給物の点の間；
ゾーンＩＩＩ： 供給物とラフィネートの点の間；および
ゾーンＩＶ： ラフィネートと溶出液の点の間。
【００３１】
実験を行った３つのより関連するカラム配置を表２に示す。
【表２】
【００３２】
以下の表３は生産性および溶出液の消費の比較を示す。
【表３】
＊ＣＳP：キラル固定相
表３に示される純度および回収率は、それが安定状態に達するように、そのシステムを少なくとも１５−２０サイクル作動させた後に測定したものである。
【００３３】
実施例２：ＭＣＣと結晶化とのカップリングによるエナンチオマー濃縮
ラセミ体の分離を考えれば、実施例１にて示される実験データは生産性がその比純度で有意に影響されることを示した。例えば、実施例１の表３を見れば、比純度が９７．８％から９９．６％に上昇すると、生産性は約２５％減少した。したがって、結晶化によるエナンチオマー濃縮は実施例１のＭＣＣより得られるフラクション（ラフィネート）の一つで得られた。溶媒をラフィネートより蒸発させて乾固させた。純度が約９６.８％（e.e. ９３.６％）の白色固体を得た。その後、再結晶化によるエナンチオマー濃縮をアセトニトリル（ＭＣＣ工程で使用したのと同じ溶媒）を用いてこの固体で行った。該結晶の光学純度は９６．８％（e.e. ９３.６％）から略９９.７％（e.e. ９９.４％）に上昇した。
【００３４】
実施例２は標的エナンチオマーの豊富化された溶液を首尾よく結晶化させ、非常に高い最終純度を得ることができる旨を示す。したがって、必要とされるエナンチオマーを精製するためにクロマトグラフィーを結晶化とカップリングさせることは、生産性を改良し、分離コストを削減するための実現可能な変形である。
【００３５】
実施例３： ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍとアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液を用いるラセミ体のＭＣＣ精製およびＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）最適化
この実施例はＭＣＣを用いるラセミ体（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの精製に関する。該操作は、アセトニトリルの溶出液をアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液と置き換えることを除いて、実質的に実施例１の記載と同じであった。この改善された選択性の結果（α＝４．５３）を実施例１（α＝１．９２）と比較した。
【００３６】
ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍを固定相として用いてラセミ体の分離を行った。最適溶出条件を溶出液としてアセトニトリル／イソプロパノール ９５／５％ｖ／ｖで得た。６個のカラム（１０ｍｍカラム径、１００ｍｍ長）を備えたＭＣＣ（マルチカラム連続クロマトグラフィー）システムで分離そのものを行った。（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）について、純度は９９．０％であり、その回収率は９６％であった。
最適性能を６−カラムのＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスで得た。４.６ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日の処理能を得た。
【００３７】
回収率が９６％で、ラフィネート純度を９９．０％に調節するために種々の操作条件を試験した。表４は、供給物の濃度が３０ｇ／Ｌで、９６％の回収率で９９．０％のラフィネート純度を得ることを可能とする最適配置を示す。
【表４】
【００３８】
得られた処理能は４.５９ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日であった。この結果は実施例１の純粋なアセトニトリル溶出液について上記した結果と比較されうる。同じような純度および回出率の制限で２.０４ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日（実施例１の実験２を参照）の処理能が得られた。その溶出液の組成の修飾は、純粋なアセトニトリルの溶出液の組成と比べてアセトニトリル／イソプロパノール ９５／５％ｖ／ｖの溶出液の組成で生産性を１２０％まで増加させた。
付加的な実験を行い、該プロセスの生産性をさらに最適化させた。供給物の流速の変化を他の物質の流速を同時に調整して行った。この目的は、精製されたラフィネートについて收率を９６％に維持しながら、得られる純度を最大とすることにあった。
【００３９】
表５は種々の純度／注入される供給物の流速を示す。選択されたカラム配置は１−２−２−１であった。
【表５】
【００４０】
得られた結果は３ｍＬ／分の供給物の流速がラフィネートの純度を９９％とする最大の注射可能な量と密接に関連していることを示した。供給物の流速をさらに上げるとラフィネートの純度は急激に低下した。
【００４１】
次に、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスを用いて上記した結果を最適化した。カラム配置を該プロセスの生産性およびロバストが最大となるように最適化した。表６にてＭＣＣおよびＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの性能を比較する。
【表６】
【００４２】
流速を以下の表７に示す。
【表７】
【００４３】
表７の結果を鑑みれば、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）の供給物の流速を３ｍＬ／分にセットしたことがわかる。得られた純度は９９．６％に等しく、同じ供給物の流速で得られるＭＣＣの最良の純度は９９．３％に等しかった（表５の実験１を参照のこと）。ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの配置で得られる純度は２.８ｍＬ／分の供給物の流速で得られるＭＣＣの性能に等しかった（抽出液およびラフィネートの両方で純度が極めて近かった）。ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの適用は４つのゾーンの間に良好なカラム配分を可能とし、ＭＣＣプロセスと比べて分離のロバストを増加させた。
【００４４】
実施例４：ＭＣＣとアセトニトリル／イソプロパノールの混合液を用いる結晶化とのカップリングによるエナンチオマー濃縮
ラセミ体および所望のエナンチオマー（（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール）を用い、２Ｋ／分の加熱速度で、ＳＥＴＡＲＡＭ ＤＳＣ １３１を用いてＤＳＣを行った。吸熱ピークの最高点の値（融点の端）だけが相図を決定するものと考えられる。
【００４５】
純粋なエナンチオマーである（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールは吸熱ピーク（オンセット：３９２.５K、ピーク：３９４.５K、エンタルピー：２６１８４Ｊ／モル）を有し、ラセミ体は吸熱ピーク（オンセット：３９０.１K、ピーク：３９２.７K、エンタルピー：３２６０５Ｊ／モル）を有した。その理論値および実験値を以下の表８に示す：
【００４６】
【表８】
【００４７】
上記した表８において、イクエーション１の列の底部にある３９４．５およびイクエーション２の列の頂部にある３９２．７の値を除き、値はすべて理論値である。これら２つの値（太字で示す）は、上記したようにＤＳＣで実験的に測定された。これらの値を見れば、ラセミ体とエナンチオマーの液相線が集結する、共晶が（０．８０と０．８５の間で変化するが）０．８０の付近にあることがわかる。
【００４８】
共晶に関する情報を用いて、分離後の結晶化工程を最適化することが可能であった。上記したように、クロマトグラフィー選択性は９５／５ アセトニトリル／ＩＰＡの溶出液の組成物で有意に改善されうる。溶出液の組成の修飾は、新たに選択される溶媒の生成物の溶解性を修飾するため、結晶化工程に有意な影響をもたらす。したがって、結晶化による精製は実施例３のＭＣＣプロセスの最後で得られたラフィネートに対して行われた。
【００４９】
約５００グラムのラフィネート溶液（９７．５／２．５のエナンチオマー比率、合計の濃度が１３．３３ｇの固体／Ｌ）より溶媒を蒸発させ、微量の固体が丸底フラスコに出現すれば、蒸発を止めた。得られた懸濁液（合計が５７．５ｇの質量）を７０℃まで加熱し、該固体を再び溶解させた。つづいて、得られた溶液を攪拌しながら約１５℃の温度でサーモスタット付きジャケットに移した。５分後に沈殿が始まった。該懸濁液をこの温度で攪拌しながら２ないし３時間放置した。
【００５０】
純粋なエナンチオマーの理論上の回収率は以下のとおりである：
％回収＝％ＯＰ−％共晶／１００％−％共晶
ラフィネートの最初の溶液５００ｇ中の固体の総重量を、ラフィネートに対して行った溶解性測定（溶解度、１０．３２ｇ／ｋｇ）に基づいて５．１６ｇと評価した。光学純度を９７．５％と評価し、最大共晶組成はｘ＝０．８５であった。したがって、回収率の理論値は８３．３％であった。このことは該溶液から純粋なエナンチオマーの回収可能な理論値が４．３０ｇであったことを示す。
【００５１】
白色固体を濾過し、真空下、４０℃で乾燥させた（純粋なエナンチオマー３．８１ｇ、光学純度＞９９．５％）。実用的な最適化を行うことなく、全收率は約７４％であった：この値は理論的な全回収率に匹敵する（８３．３％）。
母液を攪拌しながら２時間さらに５℃にまで冷却することで第２の収量を得た。濾過により白色固体を集め、真空下、４０℃で乾燥させた（エナンチオマーの収量０．２８ｇ、光学純度９４％）。残りの母液の光学純度は８９．６％であった。
【００５２】
これらの結果は、共晶組成のエナンチオマー比率よりも大きな比率を示すエナンチオマーの混合物を再結晶すると、結晶化固相の濃縮物がある一方で、該溶液（母液）の光学純度は共晶組成に向かって減少することを確認するものである。
【００５３】
もう一つ別の実験が光学純度がわずか８２．２％のラフィネートに対して行われた。溶媒の蒸発を８２．２％の光学純度を有するラフィネート約２００ｇに対して行った。約４６．６ｇの濃縮溶液を回収し、約１０℃に移した。その冷却の間、攪拌しながら、白色懸濁液を得、５分後、５℃にクールダウンした。ついで、該懸濁液を攪拌しながらこの温度で約２時間放置した。白色固体を濾過し（０．６４ｇ）、真空下、４０℃で乾燥させ、キラルＨＰＬＣにより分析した：光学純度は７０．６％に等しかった。母液の光学純度は約９１．６％であり、結晶化により得られる固体の純度よりも高い。
【００５４】
この結果は、共晶組成のエナンチオマー比率より低いエナンチオマー比率を示すエナンチオマーの混合物を再結晶すると、母液に濃縮物がある一方で、固相の光学純度はラセミ体に向かって減少することを確認する。
【００５５】
実施例５：ラセミ体の結晶化工程を用いる最適化、および精製のスケールアップ
この実施例はマルチカラム連続（ＭＣＣ）クロマトグラフィーによるラセミ体のエナンチオ分離に関する。該分離は、固定相としてＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ ２０μｍを用い、アセトニトリル／イソプロパノール ９５／５（ｖ／ｖ）の溶出混合液で溶出してなされた。この分離を６本のカラム（２５ｍｍの内径、９７ｍｍ長）を備えたＬａｂ−ＭＣＣシステムで行われた。（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）について、光学純度は９９．５％であり、回収率は９６％であった。
【００５６】
操作条件を最適化し、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスで５ｋｇｆｅｅｄ／ｋｇＣＳＰ／日の最大生産性をもたらした。ＭＣＣと結晶化とのカップリングも行った。さらなる光学精製プロセスとして、標的エナンチオマーに富む（９２．７％）エナンチオマーの混合物で開始する用いる結晶化を用いた。純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの結晶を、純粋なエナンチオマーの理論上の回収量の９２％の回収率で得た。得られた母液は共晶点と同じ組成を示した。
【００５７】
化学的精製プロセスとしての結晶化は、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの高純度溶液（＞９９．５％）を粘性スラリーが得られるまで蒸発させることによりなされる。濾過で得た固体を冷アセトニトリルで洗浄した。純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを得、母液中の大部分の不純物を回収した。
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ化もまた、溶媒として還流下にあるメタノールを用いて行った。
【００５８】
該方法は、生産プロセスの光学純度および生産性の両方を担保するのに必要なロバスト性因子を考慮して、１００トン／年のラセミ体を精製するように設計された。９９．５％の光学純度を考慮した場合、分離は内径が６００ｍｍの６−カラムＭＣＣで達成されうる。該クロマトグラフィープロセスは、標的エナンチオマーの精製された結晶を洗浄する工程とカップリングされうる。望ましくないエナンチオマーは容易にラセミ化され、再結晶化工程（不純物の除去）の後に供給ストリーム中にリサイクルされうる。
分離は６−カラム配置を用いて行われた。カラム（２．５ｃｍ内径、９．７ｃｍ長）にＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ２０μｍをパックした。試験する前に、第１のＣＳＰコンディショニング工程を試みた。該システムは、まず、約３０ｇの供給物を注入する自動モードで行われたが、カラムの保持時間は考えているよりもさらに小さかった。第２のＣＳＰコンディショニング工程は、１２ｇ／Ｌの供給溶液を３０ｍＬ／分で６０時間、再循環ループにてポンプにて注入することで行われた。
【００５９】
ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）作動条件が以下の表９に示された：
【表９】
【００６０】
ついで、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）作動条件が表１０に示されるように最適化された。表１０は、９６％の回収率で９９．５％のラフィネート光学純度を得る、最適、かつロバストなＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスを示す。
【表１０】
【００６１】
供給物の流速を上記した２０ｍＬ／分から２３ｍＬ／分（＋１５％）まで増加させた。これにより回収率は（それでも＞９６％であるが）わずかに減少したが、ラフィネートの光学純度には何ら影響はなかった。供給物の流速を２５ｍＬ／分に設定すると、得られる純度および／または回収率は急速に減少する傾向にあった。純度および回収率のスペックは内部流速を調節したものの、同時に達成され得なかった。この動きは供給物の流速を２７および３０ｍＬ／分に増加させた場合に確認された。
【００６２】
全体の処理能を向上させるために、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）プロセスの後に最終再結晶工程を行った。相対的に低いラフィネート純度（９２％）で開始する実験を行った。共晶の位置（８５％）を考えれば、純粋なエナンチオマーを理論上回収しうる量は、最初の溶液中に含まれる標的エナンチオマーの約５０％にすぎない。
総濃度が約５．１１％の固体で、光学純度が９２％に豊富化された１２１４．４ｇのラフィネート溶液を、２５℃（透明で、わずかに黄色の溶液が得られる）から１０℃まで約１℃／分の冷却速度で冷やした。該溶液を１０℃で１時間攪拌しながら放置し、第１の結晶（核生成）を得た。さらなる冷却工程を１０℃から０℃に１℃／分の冷却速度で行い、懸濁液をこの温度に約２時間攪拌しながら維持した。該懸濁液を濾過し、洗浄することなく、２５．０４ｇの乾燥結晶を得た。該結晶および母液をキラルＨＰＬＣで分析した。
【００６３】
該溶液中の固体の総量を、まず最初に、約６２．１ｇと推定した。この溶液の光学純度は９２％であった。このことは過剰なエナンチオマー（Ｓ，Ｓ−エナンチオマー）の総重量が約５３ｇであることを意味した。したがって、共晶の位置が約８５％のエナンチオマー比率であることを考えれば、理論上の回収可能な純粋なエナンチオマーの総量は２７．２ｇであり、乾燥結晶の回収量（２５．０ｇ）と一致する。
得られた結晶（洗浄工程なし）は９９．６％の純度を有するのに対して、母液の分析は得られた純度が推定共晶組成に極めて近いことを示した。
【００６４】
ＭＣＣによる化学的精製プロセスも行った。このオプションは、ＭＣＣによる精製により光学純度のスペック（例えば、Ｏ．Ｐ．＞９９．５％）と適合する純粋なエナンチオマーが得られる場合に適用可能であった。得られたラフィネートを蒸発乾固させた。得られた固体を冷アセトニトリルで洗浄し、不純物を除去した。
実験操作は、純粋なラフィネートを乾燥させることで得られる所望のエナンチオマー（３０．４ｇ）と、５０ｍｌのアセトニトリル（ピューレックス等級）の混合物を少し加温（凝集体を排除）して粘性のスラリーを得、それを約４℃の温度に２ないし３時間置いた。
【００６５】
濾過直後の固体を洗浄するのに約−２０℃の温度に４時間保持した２００ｍｌの容量のアセトニトリルを用いた。粘性のスラリー（わずかに黄色）を濾過し、冷溶媒をその結晶上に注ぎ、速やかに濾過した。真空下、４０℃で乾燥させた後、２８．５ｇの結晶を回収した。濾過後の母液は黄色であったのに対して、得られた結晶は白色であり、このことは該洗浄工程で結晶から不純物が除去されたことを示す。黄色の母液から溶媒を蒸発させて黄色がかった固体を得た。
【００６６】
実施例６：ラセミ化工程の最適化
ラセミ化を最適化するために、純粋な（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを種々の溶媒と試験した。具体的には、約２ｇの純粋なエナンチオマー（（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノール）を１００ｍｌの溶媒（以下、種々の溶媒を参照）に溶かし（総濃度が約２０ｇ／Ｌ）、攪拌（還流下）しながら、約６０−６５℃まで加熱した。ラセミ化の速度を追跡するために、該溶液を定期的にサンプリングした。
【００６７】
表１１は、種々の溶媒または混合溶媒中の、エナンチオマーのラセミ化の光学純度を示す。
【表１１】
【００６８】
表１１はラセミ化が精製のために選択される好ましい溶出液（アセトニトリル／ＩＰＡ ９５／５）で生じるが、その速度はかなり遅いことを示す（６５℃で、２０時間経過した後でもＯＰはまた高い状態にある）。このことは、好ましいエナンチオマーの光学純度が、最終の濃縮および乾燥工程の間に有意に減少することはないことを示唆する。ラセミ化は純粋なイソプロパノール中では混合溶媒と比べて速いが、変換率は２０時間後で低いままである（３０％）。ラセミ化はメタノールがより好ましいようで、２時間後に１０％が変換される。酸性条件下にあるメタノールは純粋なメタノールで得られる結果と比べて改善がない。酸性水性溶媒ではラセミ化は観察されない。このスクリーニングの結果は、試験したラセミ化剤のうち、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを純粋なメタノール中で還流することがそのラセミ化を促進するための最良のオプションであることを示す。かくして、同じことが（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ化にも適用できる。
【００６９】
上記したように、新たに形成されたラセミ体の不純物は最初のラセミ体の原材料の不純物と適合することが好ましい。新たに形成されたラセミ体を再結晶すると、この不純物を除去することができ、したがって最初の不純物の特性が適合されうる。再結晶法は以下の工程を基礎とする：
新たに形成され、得られたラセミ体溶液を濾過し、蒸発乾固させる。得られた固体を６０℃でアセトニトリル（２ｇの固体に対して２０ｍＬ）に溶かした。これにより黄色がかった溶液を得、それを４℃に冷却し、７２時間貯蔵した。ついでこれを濾過する。
【００７０】
実施例７：ラセミ体のＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１ ２０μｍおよびアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液でのＭＣＣ精製
この実施例は、ＭＣＣを用いる、ラセミ体（＋／−）−（２Ｒ＊，３Ｒ＊）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの精製に関する。該操作は、ＣＳＰをＣＨＩＲＡＬＰＡＫ Ｔ１０１に変えることを除き、実質的に実施例３の記載と同じである。分離そのものは、８本のカラム（１０ｍｍのカラム径、１００ｍｍのカラム長）を備えたＭＣＣ（マルチカラム連続クロマトグラフィー）システムでなされる。
【００７１】
種々の作動条件を試験した。表１２は、化学純度が９９．１％で、エナンチオマー過剰率が９９．７％の、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）の調製を可能とする最適化配置を示す。
【００７２】
【表１２】
【００７３】
これらの条件を用い、Ｌｉｃｏｓｅｐ８−５０装置に当てはめることで、約２．８ｋｇの供給物／ｋｇ ＣＳＰ／日の生産性を得ることができる。ＳＭＢ変数は以下のとおりであった：
【表１３】
【００７４】
実施例８：ラセミ体のＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１ ２０μｍおよびアセトニトリル／２−プロパノール溶出混合液でのＭＣＣ精製
合計２.３５ｋｇのラセミ体を、ＶＡＲＩＣＯＬ（登録商標）モード、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）Ｔ１０１固定相にてＬｉｃｏｓｅｐ Ｌａｂ５０装置を用い、移動相として５／９５ｖ／ｖのイソプロパノール／アセトニトリルを用いて分離した。光学純度が９７．０％の、１.０６ｋｇの（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのエナンチオマー（保持されにくいエナンチオマー）を得た。回収率はラフィネート（所望の生成物）について８９．８％であり、残りを抽出液で溶出した。生産性は４.１６ｋｇの供給物／ｋｇ ＣＳＰ／日（２４時間）であった。溶媒消費量は１７１Ｌ／ｋｇであった。このプロセスはさらに最適化されなかった。得られる生産性は供給ポンプの最大流速（５０ｍｌ／分）で制限された。光学純度は結晶化でさらに向上させることができる。
【００７５】
初期スクリーニング実験
以下の表１３Ａおよび１３Ｂは、異なるＣＳＰ／移動相を組み合わせて用いる、単一カラムスクリーニング実験の結果を要約する。
以下にスクリーニングプロセスを、特に試験したＣＨＩＲＡＬＰＡＫおよびＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＣＳＰを用いて、簡単に記載する。
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣシステムは、溶媒をデリバリするための４つで一組のＧ１３１１Ａポンプ、注入用のＧ１３１３Ａオートサンプラーを含む、このプロセスに用いることのできる装置の一例である。カラム溶出液の検出は、ＵＶ ＤＡＤ検出装置Ｇ１３１５Ｂで行われた。表１３Ａおよび１３Ｂに記載のすべての移動相について１ｍｌ／分の流速、２０℃の温度でラセミ体をクロマトグラフィー操作に付した。エナンチオマーの分離をＵＶを用い２２０ｎｍで測定した。
【００７６】
表１３Ａおよび１３Ｂにて用いられる、保持時間、利用率および選択性（α）なる語、ならびにその計算方法は、当業者であれば十分に理解するであろう（例えば、公開特許出願ＷＯ２００４／０４６０８７、頁７、１ないし４行を参照のこと）。
表１３Ａおよび１３Ｂに使用される略語は次の通りである：
ｎ−ヘプタン＝ｎ−ｈｅｐｔ；酢酸メチル＝ＭｅＯＡｃ；ジエチルアミン＝ＤＥＡ；ｎ−ヘキサン＝ｎ−ｈｅｘ；氷酢酸＝ＨＡｃ；イソプロピルアルコール＝ＩＰＡ；メタノール＝ＭｅＯＨ；テトラヒドロフラン＝ＴＨＦ；エタノール＝ＥｔＯＨ；酢酸エチル＝ＥｔＯＡｃ；ジクロロメタン＝ＭｅＣｌ２；ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル＝ＭＴＢＥ
【００７７】
加えて、単一カラムスクリーニング評価を、資生堂ファインケミカル（日本）から入手可能なＲＵ１およびＲＵ２キラル固定相でも行った。移動相としてメタノール、エタノール、アセトニトリル、酢酸エチルおよび酢酸メチルを用いる、２０μｍの粒子をパックした、５０℃または６０℃の高いカラム温度でのＲＵ２カラム（２５０ｍｍｘ４ｍｍ）では分離が得られず、そのピークからラセミ体がカラムと不可逆的に結合しているのは明らかであった。ＲＵ１カラムも同様な結果を示した。
【００７８】
【表１４】
【００７９】
【表１５】
【００８０】
本明細書中にて引用されている特許、刊行物、係属中の出願、仮出願は出典明示により本明細書の一部とする。
本発明はこのように記載されているが、同じ発明を別の方法にて変形しうることは明らかであろう。かかる変形を本発明の精神および範囲から逸脱するものと解釈すべきではなく、かかる修飾は当業者に明らかであり、添付した特許請求の範囲の範囲内にあるものである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物を連続クロマトグラフィーに付し、その混合物から（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを分割することを含む、光学的に豊富化された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの製法。
【請求項２】
該混合物がラセミ混合物であるところの、請求項１記載の方法。
【請求項３】
混合物がＭＣＣシステムを通されるところの、請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項４】
混合物がＶＡＲＩＣＯＬシステムを通されるところの、請求項３記載の方法。
【請求項５】
該連続クロマトグラフィーが少なくとも一種の溶媒を含む溶出液をキラル固定相と接触させることを含み、その溶媒がＣ５−Ｃ７アルカン、Ｃ１−Ｃ３アルカノール、メチルtert−ブチルエーテル、酢酸エチル、アセトンおよびアセトニトリルからなる群より選択されるところの、請求項１ないし４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
該溶出液がアセトニトリルであるところの、請求項５記載の方法。
【請求項７】
該溶出液がアセトニトリルと２−プロパノールの混合液であるところの、請求項５記載の方法。
【請求項８】
アセトニトリルの２−プロパノール対する割合が９３／７％ｖ／ｖと９９／１％ｖ／ｖの間にあるところの、請求項７記載の方法。
【請求項９】
アセトニトリルの２−プロパノールに対する割合が９５／５％ｖ／ｖと９７／３％ｖ／ｖの間にあるところの、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
キラル固定相がアミローストリス−（３,５−ジメチルフェニルカルバマート）であるところの、請求項５記載の方法。
【請求項１１】
さらに、混合物より得られる（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを結晶化させることを含む、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールがラフィネート流にて得られ、（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールが抽出流にて得られるところの、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
さらに、（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールをラセミ化し、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールと（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ混合物を形成させ、こうして形成されたラセミ混合物を連続クロマトグラフィーに付すことを含む、請求項１ないし１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ラセミ体を供給流中に再循環させるところの、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
ラセミ化をメタノール中で行うところの、請求項１３または１４記載の方法。
【請求項１６】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールが少なくとも９０％の量にて回収されるところの、請求項１ないし１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールおよび（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの混合物を連続クロマトグラフィーに付し、その混合物から（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを分割することを含む、光学的に豊富化された（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールの製法。
【請求項２】
該混合物がラセミ混合物であるところの、請求項１記載の方法。
【請求項３】
混合物がＭＣＣシステムを通されるところの、請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項４】
混合物がＶＡＲＩＣＯＬシステムを通されるところの、請求項３記載の方法。
【請求項５】
該連続クロマトグラフィーが少なくとも一種の溶媒を含む溶出液をキラル固定相と接触させることを含み、その溶媒がＣ５−Ｃ７アルカン、Ｃ１−Ｃ３アルカノール、メチルtert−ブチルエーテル、酢酸エチル、アセトンおよびアセトニトリルからなる群より選択されるところの、請求項１ないし４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
該溶出液がアセトニトリルであるところの、請求項５記載の方法。
【請求項７】
該溶出液がアセトニトリルと２−プロパノールの混合液であるところの、請求項５記載の方法。
【請求項８】
アセトニトリルの２−プロパノール対する割合が９３／７％ｖ／ｖと９９／１％ｖ／ｖの間にあるところの、請求項７記載の方法。
【請求項９】
アセトニトリルの２−プロパノールに対する割合が９５／５％ｖ／ｖと９７／３％ｖ／ｖの間にあるところの、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
キラル固定相がアミローストリス−（３,５−ジメチルフェニルカルバマート）であるところの、請求項５記載の方法。
【請求項１１】
さらに、混合物より得られる（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールを結晶化させることを含む、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールがラフィネート流にて得られ、（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールが抽出流にて得られるところの、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
さらに、（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールをラセミ化し、（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールと（−）−（２Ｒ,３Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールのラセミ混合物を形成させ、こうして形成されたラセミ混合物を連続クロマトグラフィーに付すことを含む、請求項１ないし１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ラセミ体を供給流中に再循環させるところの、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
ラセミ化をメタノール中で行うところの、請求項１３または１４記載の方法。
【請求項１６】
（＋）−（２Ｓ,３Ｓ）−２−（３−クロロフェニル）−３,５,５−トリメチル−２−モルホリノールが少なくとも９０％の量にて回収されるところの、請求項１ないし１５のいずれか一項に記載の方法。
【公表番号】特表２００７−５１０６３０（Ｐ２００７−５１０６３０Ａ）
【公表日】平成１９年４月２６日（２００７．４．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５３７１６５（Ｐ２００６−５３７１６５）
【出願日】平成１６年１０月２５日（２００４．１０．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００４／０１２０９３
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０４０１４０
【国際公開日】平成１７年５月６日（２００５．５．６）
【出願人】（５９１００２９５７）スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション (341)
【氏名又は名称原語表記】ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年４月２６日（２００７．４．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年１０月２５日（２００４．１０．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００４／０１２０９３
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０４０１４０
【国際公開日】平成１７年５月６日（２００５．５．６）
【出願人】（５９１００２９５７）スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション (341)
【氏名又は名称原語表記】ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
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