【課題】ＣＤ２０陽性悪性腫瘍および自己免疫性疾患の治療を目的としたヒト化およびキメラ抗ＣＤ２０抗体を提供する。
【解決手段】ヒトＣＤ２０に結合するヒト化抗体、またはその抗原結合フラグメントであって、インビボで霊長類のＢ細胞を枯渇するのに有効な抗体であり、Ｈ鎖の可変領域（ＶＨ）に少なくとも一つの抗ヒトＣＤ２０抗体のＣＤＲ３配列および実質的なヒト重鎖サブグループＩＩＩ（ＶＨＩＩＩ）のヒトコンセンサスフレームワーク（ＦＲ）残基を含んでなる抗体。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＣＤ２０に結合するヒト化抗体、またはその抗原結合フラグメントであって、インビボで霊長類のＢ細胞を枯渇するのに有効な抗体であり、Ｈ鎖の可変領域（Ｖ_Ｈ）に少なくとも一つの抗ヒトＣＤ２０抗体の配列番号１２のＣＤＲ３配列および実質的なヒト重鎖サブグループＩＩＩ（Ｖ_ＨＩＩＩ）のヒトコンセンサスフレームワーク（ＦＲ）残基を含んでなる抗体。
【請求項２】
さらに配列番号１０のＨ鎖ＣＤＲ１配列および配列番号１１のＣＤＲ２配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
さらに配列番号４のＬ鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５のＣＤＲ２配列、配列番号６のＣＤＲ３配列、および実質的にヒトコンセンサスフレームワーク（ＦＲ）残基であるヒト軽鎖κサブグループＩ（ＶκＩ）を含む、請求項２に記載の抗体。
【請求項４】
配列番号８のＶ_Ｈ配列（ｖ１６、図１Ｂに示す）を含む、前記請求項に記載の抗体。
【請求項５】
配列番号２のＶ_Ｌ配列（ｖ１６、図１Ａに示す）を含む、請求項４に記載の抗体。
【請求項６】
Ｖ_Ｈ領域がヒトＩｇＧ鎖定常領域に結合している、請求項３に記載の抗体。
【請求項７】
ヒトＩｇＧがＩｇＧ１またはＩｇＧ３である、請求項６に記載の抗体。
【請求項８】
抗体が、それぞれ配列番号２１および２２の軽鎖および重鎖アミノ酸配列［図６および図７に示す］を有する２Ｈ７．ｖ１６である、請求項１に記載の抗体。
【請求項９】
抗体が、それぞれ配列番号２および２３の軽鎖および重鎖アミノ酸配列［図６および図８に示す］を有する２Ｈ７．ｖ３１である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０】
Ｈ鎖にＤ５６ＡとＮ１００ＡおよびＬ鎖にＳ９２Ａのアミノ酸置換基を持つ［ｖ．９６］、請求項５に記載の抗体。
【請求項１１】
さらにＡＤＣＣおよび／またはＣＤＣ活性を向上するＦｃ領域に少なくとも一つのアミノ酸置換基を含む、前記請求項のいずれかに記載の抗体。
【請求項１２】
アミノ酸置換基が、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａである、請求項１１に記載の抗体。
【請求項１３】
抗体が配列番号２３［図８に示す］の重鎖アミノ酸配列を有する２Ｈ７．ｖ３１である、請求項１２に記載の抗体。
【請求項１４】
さらにＣＤＣ活性を減弱するＦｃ領域に少なくとも一つのアミノ酸置換基を含む、請求項１ないし１０のいずれかに記載の抗体。
【請求項１５】
少なくとも置換基Ｋ３２２Ａを含む、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１６】
抗体が、リツキサンと比較して少なくとも１０倍のＡＤＣＣ活性向上を有する２Ｈ７．ｖ１１４または２Ｈ７．ｖ１１５である、請求項１ないし１０に記載の抗体。
【請求項１７】
霊長類のＢ細胞がヒトおよびカニクイザルのものである、請求項１に記載の抗体。
【請求項１８】
細胞障害性剤に結合している、前記請求項のいずれかに記載の抗体。
【請求項１９】
細胞障害性剤が放射性同位体または毒素である、請求項１８に記載の抗体。
【請求項２０】
抗体がＣＨＯ細胞で生成される、前記請求項のいずれかに記載の抗体。
【請求項２１】
前記請求項のいずれか一に記載の抗体をコードする単離した核酸。
【請求項２２】
前記請求項のいずれかに記載の抗体をコードする発現ベクター。
【請求項２３】
請求項２１に記載の核酸を含んでなる宿主細胞。
【請求項２４】
前記請求項のいずれか一に記載の抗体を生成する、請求項２３に記載の宿主細胞。
【請求項２５】
ＣＨＯ細胞である、請求項２４に記載の宿主細胞。
【請求項２６】
前記請求項のいずれか一に記載の抗体の生成方法であって、請求項２４に記載の抗体を生成する細胞を培養し、細胞培地から抗体を回収することを含む方法。
【請求項２７】
請求項１に記載の抗体および担体を含んでなる組成物。
【請求項２８】
抗体が２Ｈ７．ｖ１６であり、担体が薬剤的許容性のある担体である、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
容器およびそれに内包される前記請求項のいずれかに記載の抗体を含む組成物を含んでなる製造品。
【請求項３０】
さらに、組成物が非ホジキンリンパ腫の治療に用いることが可能であることを示す梱包挿入物を含んでなる、請求項２９に記載の製造品。
【請求項３１】
インビボでＢ細胞にアポトーシスを引き起こす方法において、前記請求項のいずれかに記載の抗体をＢ細胞に作用させ、それによってＢ細胞を殺すことを含む方法。
【請求項３２】
ＣＤ２０陽性癌の治療方法において、前記請求項いずれかに記載のヒト化ＣＤ２０結合抗体の治療的有効量を癌患者に投与することを含む方法。
【請求項３３】
ＣＤ２０陽性癌がＢ細胞リンパ腫または白血病である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
ＣＤ２０陽性癌が非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）または白血球優性ホジキン病（ＬＰＨＤ）である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
癌が慢性白血球性白血病またはＳＬＬである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
抗体が、図および表に示すようなアミノ酸配列をそれぞれ持つ２Ｈ７．ｖ１６、ｖ３１、ｖ９６、ｖ１１４、ｖ１１５よりなる群から選択したものである、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３７】
抗体が、図６および図７にそれぞれ示す配列番号２１および２２の軽鎖および重鎖アミノ酸配列を有する２Ｈ７．ｖ１６である、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３８】
抗体を２７５−３７５ｍｇ／ｍ^２の用量範囲で投与する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３９】
さらに、少なくとも一つの化学療法剤を患者に投与することを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４０】
癌が非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）であり、化学療法剤がドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、およびプレドニゾロンよりなる群から選択したものである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
自己免疫性疾患の治療方法において、前記請求項のいずれか一つのヒト化ＣＤ２０結合抗体の治療的有効量を自己免疫性疾患患者に投与することを含む方法。
【請求項４２】
自己免疫性疾患が、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ウェゲナー肉芽種症、炎症性腸疾患、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、自己免疫性血小板減少症、多発性硬化症、乾癬、ＩｇＡ腎症、ＩｇＭ多発神経障害、筋無力症、血管炎、糖尿病、レイノー症候群、シェーグレン症候群、および糸球体腎炎よりなる群から選択したものである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
自己免疫性疾患が関節リウマチである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
さらに、患者に第二治療薬を投与することを含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
第二治療薬が免疫抑制剤である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
免疫抑制剤がメトトレキセートである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
皮膚筋炎、ウェゲナー肉芽腫症、ＡＮＣＡ（血管炎下を含む）再生不良性貧血、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）、第ＶＩＩＩ因子欠損症、血友病Ａ、自己免疫性好中球減少症、カストルマン症候群、グッドパスチャー症候群、固形臓器移植拒絶反応、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、ＩｇＭ媒介、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、橋本甲状腺炎、自己免疫性肝炎、リンパ性間質性肺炎（ＨＩＶ）、閉塞性細気管支炎（非移植性）対ＮＳＩＰ、ギラン-バレー症候群、大血管血管炎、巨細胞（高安）動脈炎、中血管血管炎、川崎病、および結節性多発性動脈炎よりなる群から選択した自己免疫性疾患を治療する方法であって、治療的有効量のＣＤ２０結合抗体またはその機能的フラグメントを罹患患者に投与することを含んでなる方法。
【請求項４８】
ＣＤ２０結合抗体がリツキサン（登録商標）である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
カニクイザルのＣＤ２０の配列番号： のヌクレオチド配列（図１９に示す）またはこの配列の変性変異型を含んでなる単離した核酸。
【請求項５０】
保存的なアミノ酸置換基を有する配列番号： （図２０に示す）または配列番号： （図２０）のアミノ酸配列を持つポリペプチドをコードする配列を含んでなる単離した核酸。
【請求項５１】
請求項５０に記載の核酸を含んでなるベクター。
【請求項５２】
発現コントロール配列に作用可能に結合している請求項４９に記載の核酸を含む発現ベクターである、請求項５１に記載のベクター。
【請求項５３】
請求項５０に記載の核酸を含んでなる宿主細胞。
【請求項５４】
カニクイザルのＣＤ２０のアミノ酸配列［配列番号 、図２０］を含む単離したポリペプチド。
【請求項５５】
２０ｍｇ／ｍＬのヒト化２Ｈ７抗体、ｐＨ５．８の１０ｍＭヒスチジン硫酸塩、６０ｍｇ／ｍｌのショ糖、０．２ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０を含んでなる液状物。

【図１】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図２Ｄ】

【図２Ｅ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図３Ｅ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【公開番号】特開２０１２−４４９９７（Ｐ２０１２−４４９９７Ａ）
【公開日】平成２４年３月８日（２０１２．３．８）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１１−２２８８１３（Ｐ２０１１−２２８８１３）
【出願日】平成２３年１０月１８日（２０１１．１０．１８）
【分割の表示】特願２００８−２９７８０６（Ｐ２００８−２９７８０６）の分割
【原出願日】平成１５年１２月１６日（２００３．１２．１６）
【出願人】（５０９０１２６２５）ジェネンテック，　インコーポレイテッド (357)
【Ｆターム（参考）】