分析用試験片及びその製造方法
本発明は、担体１と、担体１の表面１１上及び／又は内部に試薬スポット２とを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料３が担体１の表面１１に導入されると、担体１の表面１１上及び／又は内部に配設された試薬スポット２と接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片１０であって、試薬スポット２が、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポット２１、２２からなり、担体１の表面１１に導入された試料３が、複数種の試薬スポット２１、２２と接触することによって、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なもので、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れたものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分析対象物質を含んだ試料が導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片及びその効率的な製造方法に関する。さらに詳しくは、分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れた分析用試験片及びその効率的な製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための分析用試験片の製造方法としては、例えば、吸収性のよい多孔質構造体（多孔質層、多孔性膜等）からなる試験部に試料を均一に吸収させて隣接する試験部との液絡を防止する多孔性膜及びその製造方法が開示されている（特許文献１参照）。また、検出可能な物質を検出するための検出部を有する試験部を１以上設け、検出部に層状無機化合物（合成スメクタイト等）を含有させた分析用試験片を製造する方法が開示されている（特許文献２参照）。
【０００３】
【特許文献１】特開平２−６５４１号公報
【特許文献２】特開平９−１８４８３７号公報
【０００４】
しかしながら、特許文献１や特許文献２に開示された多孔性膜、分析用試験片及びそれらの製造方法では、複数種の試料を単一のバッファー中に含浸させているため、得られる分析用試験片において、試料の劣化が早く安定性に欠けたり、反応効率が低く、高感度及び高精度の分析ができないという問題があり、必ずしも十分に満足すべきものではなかった。
【０００５】
本発明は、上述の問題に鑑みてなされたものであり、分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れた分析用試験片及びその効率的な製造方法を提供することを目的とする。
【発明の開示】
【０００６】
上記目的を達成するため、本発明によれば、以下の分析用試験片及びその製造方法が提供される。
【０００７】
［１］担体と、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された試薬スポットとを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に配設された前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片であって、前記試薬スポットが、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポットからなり、前記担体の表面に導入された試料が、前記複数種の試薬スポットと接触することによって、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片。
【０００８】
［２］前記担体が、多孔質体である前記［１］に記載の分析用試験片。
【０００９】
［３］前記分析対象物質が、人及び動物の体液である前記［１］又は［２］に記載の分析用試験片。
【００１０】
［４］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、発色体を含有してなる前記［１］〜［３］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１１】
［５］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、蛍光発光する物質を含有してなる前記［１］〜［４］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１２】
［６］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、水溶性ポリマーを含有してなる前記［１］〜［５］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１３】
［７］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体が配設されてなる前記［１］〜［６］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１４】
［８］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった種類のものである前記［１］〜［７］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１５】
［９］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものである前記［１］〜［８］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１６】
［１０］前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い、前記試料に対する反応感度を有してなる前記［１］〜［９］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１７】
［１１］前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い前記試薬濃度を有してなる前記［１］〜［９］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１８】
［１２］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤が配設されてなる前記［１］〜［１１］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１９】
［１３］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤が配設されてなる前記［１］〜［１２］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２０】
［１４］前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに備えてなる前記［１］〜［１３］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２１】
［１５］前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状である前記［１］〜［１４］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２２】
［１６］前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長い前記［１］〜［１５］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２３】
［１７］前記複数種の試薬スポットの大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下である前記［１］〜［１６］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２４】
［１８］前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たす前記［１］〜［１７］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２５】
［１９］前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている前記［１］〜［１８］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２６】
［２０］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに備えてなる前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２７】
［２１］前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている前記［１］〜［２０］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２８】
［２２］担体の表面上に又は担体の表面上及び内部に、所定の溶液を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することによって、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法であって、前記所定の溶液として、導入される前記試料と接触することによって互いに混合することが可能で、かつ互いに混合することによって所定の機能を発揮することが可能な複数種の溶液を、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部にインクジェット法を用いて前記複数種の溶液の液滴として吐出させて、前記複数種の溶液のいずれかからなる複数種の試薬スポットを形成することによって、前記試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に形成された前記複数種の試薬スポットと接触して、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法。
【００２９】
［２３］前記インクジェット法に用いられる液滴吐出装置として、流路が形成された流路基体と、この流路基体に組み付けられて加圧室としてキャビティ内の容積を変化させる機能を有するアクチュエータ部と、流路基体の下面に貼着され、且つ吐出ノズルが形成されたノズル基体と、流路基体の後部の上面に設けられた液体注入部とを備えるものを用いる前記［２２］に記載の分析用試験片の製造方法。
【００３０】
［２４］前記担体として、多孔質体を用いる前記［２２］又は［２３］に記載の分析用試験片の製造方法。
【００３１】
［２５］前記分析対象物質として、人及び動物の体液を用いる前記［２２］〜［２４］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３２】
［２６］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、発色体を含有してなるものを用いる前記［２２］〜［２５］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３３】
［２７］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、蛍光発光する物質を含有してなるものを用いる前記［２２］〜［２６］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３４】
［２８］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、水溶性ポリマーを含有してなるものを用いる前記［２２］〜［２７］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３５】
［２９］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体を配設する前記［２２］〜［２８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３６】
［３０］前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状となるように配設する前記［２２］〜［２９］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３７】
［３１］前記複数種の試薬スポットを、前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くなるように配設する前記［２２］〜［３０］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３８】
［３２］前記複数種の試薬スポットを、その大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下となるように配設する前記［２２］〜［３１］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３９】
［３３］前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすように配設する前記［２２］〜［３２］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４０】
［３４］前記複数種の試薬スポットを、その前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとなるように配設する前記［２２］〜［３３］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４１】
［３５］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに配設する前記［２２］〜［３４］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４２】
［３６］前記確認用試薬スポットのそれぞれを、前記複数種の溶液から形成する前記［３５］に記載の分析用試験片の製造方法。
【００４３】
［３７］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった種類のものとなるように配設する前記［２２］〜［３６］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４４】
［３８］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものとなるように配設する前記［２２］〜［３７］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４５】
［３９］前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試料に対する反応感度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する前記［２２］〜［３８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４６】
［４０］前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試薬濃度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する前記［２２］〜［３８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４７】
［４１］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤を配設する前記［２２］〜［４０］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４８】
［４２］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤を配設する前記［２２］〜［４１］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４９】
［４３］前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに配設する前記［２２］〜［４２］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５０】
［４４］前記複数種の溶液の液滴を、その速度成分として、前記担体の表面に対して垂直な方向以外の成分を有するようにして前記インクジェット法を用いて吐出して、前記試薬スポットを形成する前記［２２］〜［４３］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５１】
［４５］前記溶液の液滴を、複数の独立した微小液滴から構成する前記［２２］〜［４４］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５２】
［４６］前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）を、０．１μＬ以下とする前記［２２］〜［４５］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５３】
［４７］前記複数種の試薬スポットのスポット量を、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとする前記［２２］〜［４６］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５４】
［４８］前記試薬スポットを、前記溶液の液滴を前記試薬スポット一つ当たり複数回吐出させることによって形成する前記［２２］〜［４７］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５５】
［４９］前記担体の温度を４０℃以下に保持した状態で前記溶液の液滴を吐出して、前記試薬スポットを形成する前記［２２］〜［４８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５６】
［５０］前記担体の裏面を前記支持体から隔離した状態で前記溶液の液滴を吐出することによって、前記試薬スポットを形成する前記［４３］〜［４９］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５７】
以上説明したように、本発明によって、分析対象物質（例えば人及び動物の体液、特に、血液や尿等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れた分析用試験片及びその効率的な製造方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
［図１］図１は、本発明の一の実施の形態を模式的に示す斜視図である。
［図２］図２は、図１の一部拡大図であり、複数種の試薬スポットのうち、同一種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長いことを示す。
［図３］図３は、本発明の一の実施の形態において、試薬スポット間の担体表面及び内部に遮蔽体を配置することを模式的に示す説明図である。
［図４］図４は、遮蔽体の形状が直線状であることを模式的に示す説明図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５９】
以下、本発明の分析用試験片の一の実施の形態を、図面を参照しつつ具体的に説明する。
【００６０】
図１に示すように、本実施の形態の分析用試験片１０は、担体１と、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された試薬スポット２とを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料３が担体１の表面１１に導入されると、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に配設された試薬スポット２と接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片１０であって、試薬スポット２が、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポット（図１では符号２１、２２で示す）からなり、担体１の表面１１に導入された試料３が、複数種の試薬スポット２１、２２と接触することによって、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なものである。
【００６１】
このように構成することによって、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性を向上させることができる。
【００６２】
本実施の形態に用いられる担体１としては、表面１１を有するものであれば特に制限はないが、例えば、多孔質体を好適例として挙げることができる。中でも、親水性の多孔質体が好ましい。その材質としては、例えば、セルロース類、ポリエーテルスルホン類、アクリル重合体等が好適で、その孔径としては０．２μｍ〜数μｍが好適である。このように、担体１として多孔質体を用いることによって、試薬スポット２（２１、２２）を形成する溶液の、担体１の内部への浸透量を増大させることができ、分析感度を向上させることができる。
【００６３】
本実施の形態に用いられる試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液としては、試料３の導入によって互いに混合することができ、試料３中の分析対象物質と接触反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なものであれば特に制限はないが、例えば、分析対象物質として乳酸脱水素酵素の活性を測定する場合（試料として、乳酸脱水素酵素を含む溶液を用いる場合）、１つの試薬スポット２１用の溶液としては、基質として乳酸、補酵素としてＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、電子キャリアーとして１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、テトラゾリウム試薬としてＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む溶液を、もう１つの試薬スポット２２用の溶液としては、リン酸緩衝液、トリス塩酸（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ）緩衝液等の緩衝液を挙げることができる。
【００６４】
本実施の形態においては、複数種の試薬スポット２１、２２を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種は、発色体を含有してなることが好ましい。このように構成することによって、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能となる。このような発色体を含有する溶液としては、例えば、還元系としてホルマザン試薬、酸化系として４−アミノアンチピリン、フェノール系等の溶液を挙げることができる。
【００６５】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種は、蛍光発光する物質を含有してなることが好ましい。このように構成することによって、目視検査では確認しにくい試薬スポット２１、２２の接触の可否を蛍光検査で確実に検査することが可能となり、品質の安定化を図ることができる。このような蛍光を発する物質としては特に制限はないが、試薬スポット２１、２２の検査特性を損なうことなく蛍光を発するものが好ましく、例えば、緑色、黄色、青色の食紅等を好適例として挙げることができる。
【００６６】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種は、水溶性ポリマーを含有してなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２の成分が、大気中の水分によって溶出するのを防止することができるため、長期保存をする場合であっても試薬スポット２１、２２の特性を安定して保持することができる。
【００６７】
図３に示すように、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体２４が配設されてなることが、長期保存安定性を向上させる上で好ましい。この場合、水溶性の遮蔽体２４を少なくとも試薬スポット２１、２２間が最短距離となるところに配設することがさらに好ましい。遮蔽体２４の大きさは、試薬スポット２１、２２に接触しない大きさであればよい。遮蔽体２４の形状は、試薬スポット２１、２２に接触することなく、試薬スポット２１、２２の間に配置される形状であれば特に制限はないが、長期安定性を一層向上させるため、図４に示すように、直線状であることが好ましく、曲線状であってもよい。
【００６８】
遮蔽体２４を形成する物質としては特に制限はないが、例えば、水溶性ポリマー等を挙げることができる。水溶性ポリマーは、比較的粘度が高く、担体表面及び内部で拡がりすぎることがないため、試薬スポット２１、２２の形成領域を最大化することができ、感度を向上させることができる。遮蔽体２４を形成する水溶性ポリマーとしては、例えば、プルランのような糖の重合物、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、カルボキシセルロースナトリウム、ポリビニルアルコール、デキストラン、澱粉の部分加水分解物等を好適例として挙げることができる。遮蔽体２４の形成方法としては特に制限はないが、担体１の親水性の程度によって適宜使い分けすることが好ましい。例えば、比較的親水性が高い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体１内部に容易に浸透させることができるため、スクリーン印刷法を用いることが好ましい。また、比較的親水性が低い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体内部に浸透させることが困難であり、担体１の厚さ方向への浸透を確実にするため、インクジェット法を用いることが好ましい。中でも、遮蔽体２４を微細なパターンとし、試薬スポット２１、２２の形成領域を拡大して感度を向上させることが可能なことから、インクジェット法が、さらに好ましい。
【００６９】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、他の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）とは異なった種類のものであることが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で複数項目の検査をすることができる。
【００７０】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、他の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）とは異なった試薬濃度のものであることが好ましい。このように構成することによって、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【００７１】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が担体１の内部にまで配設される場合、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、担体１の表面１１側において最も高い反応感度（試料に対する）を有してなることが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。
【００７２】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が担体１の内部にまで配設される場合、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、担体１の表面１１側において最も高い試薬濃度を有してなることが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。
【００７３】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤が配設されてなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化したり信号物質等の分散化を促進することができる。このような表面活性剤としては、例えば、アニオン系、カチオン系、ノニオン系等のいずれであってもよく、使用条件に応じて適宜選定することができる。アニオン系としては、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩等、カチオン系としては、アルキル・トリメチルアンモニウム、アルキル・ピリジウム等、ノニオン系としては、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニール等を好適例として挙げることができる。
【００７４】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤が配設されてなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合を促進して、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することができる。このような発泡剤としては、例えば、炭酸水素カリウム（ＫＨＣＯ３）又は炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）と有機酸とを個別に配置したものを挙げることができる。
【００７５】
担体１の表面１１とは反対側の表面（裏面）側に、担体１を支持する支持体４をさらに備えてなることが好ましい。このように構成することによって、取り扱いが容易で、さらに試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する際の配列（アライメント）を容易化することができる。なお、支持体４の形状としては、担体１を確実に支持することができるものであれば特に制限はないが、例えば、材質として、金属、セラミックス、ガラス、樹脂等を挙げることができる。中でも、樹脂が、低コスト、溶液に対する安定性から好ましい。さらに、樹脂の種類としては、例えば、ＰＥＴ系樹脂、アクリル系樹脂、塩ビ系樹脂等を挙げることができる。
【００７６】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した断面形状を、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状とすることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することができる。
【００７７】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２のうち、同一種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１同士又は試薬スポット２２同士）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）を、異種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１と試薬スポット２２）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くすることが好ましい。このように構成することによって、試料３が導入されたときに、試薬スポット２１、２２を確実に混合することができる。
【００７８】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２の大きさを、最大径で、好ましくは、０．５ｍｍ以下、さらに好ましくは、０．０５〜０．２５ｍｍとするとともに、異種の試薬スポット（試薬スポット２１と試薬スポット２２と）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）を、好ましくは、０．６ｍｍ以下、さらに好ましくは０．１〜０．４ｍｍとすることによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化したり、信号物質等の分散化を促進することができるとともに、試薬スポット２１と試薬スポット２２との均一な混合を実現し、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示を実現することができる。特に、信号特性として発光量の大小で検査、分析する場合、上記径及びピッチとすると容易に目視でも確認することができるため好ましい。
【００７９】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポット２１、２２を担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した場合の試薬スポット２１、２２の断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体１の表面１１の面積を示す。］を、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすようにすることが好ましい。配設割合（Ａ）を０．０１以下とすると、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間の短縮化が困難になることがあり、配設割合（Ａ）を０．８１４以上とすると、長期安定性が低減することがある。分析の長期信頼性を考慮すると、０．０９＜（Ａ）＜０．３５の範囲を満たすようにすることがさらに好ましい。
【００８０】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）を、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異ならせることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２の、大気中の水分を吸収することによる劣化を簡易に判定することができる（スポットピッチが短く形成された領域では試薬スポット２１、２２の劣化が促進されるため、劣化の状況を定量的に把握することができる）とともに、分析（測定）範囲を拡大することができる。
【００８１】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、複数種の試薬スポット２１、２２が所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに備えてなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２を配設するに先立って、例えば、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合具合等を予め確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。
【００８２】
確認用試薬スポット２３のそれぞれを、前述の複数種の溶液から形成することが好ましい。このように構成することによって、信号物質又は信号特性の生成具合等を予め迅速に確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。
【００８３】
試薬スポット２１、２２の一つを形成する溶液の液滴の量（スポット量）を、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとすること（例えば、試料３が多く導入される中央部のスポット量を大きくすること等）が好ましい。このように構成することによって、試料３に対する最適なスポット量の範囲を拡大すること（分析感度を容易に変更すること）ができるため、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【００８４】
なお、本発明の分析用試験片は、後述するようにインクジェット法を用いて製造することが好ましいが、他の方法、例えば、ピンに溶液を保持させ、そのピンを担体の平坦面に接触させることによって溶液を担体の平坦面に移行させて、試薬スポットを形成するピン方式による方法を用いてもよい。ピンの先端の形状には、ソリッドピンタイプ（特に、溝が切られていないもの）、クイルピンタイプ（万年筆のように溝が切られているもの）、ピンアンドリングタイプ（リングに溶液を張り、張られた溶液の膜に針を貫通させてスポットするタイプ）等、さまざまなタイプがあるが、いずれのタイプのものであっても用いることができる。中でも、クイルピンタイプが好ましい。
【００８５】
以下、本発明の分析用試験片の製造方法の実施の形態を、図面を参照しつつ具体的に説明する。
【００８６】
図１に示すように、本実施の形態の分析用試験片の製造方法は、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、所定の溶液を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポット２を形成することによって、分析対象物質を含んだ試料３が担体１の表面１１に導入されると、試薬スポット２と接触、反応して検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片１０を得る分析用試験片の製造方法であって、所定の溶液として、導入される試料３と接触することによって互いに混合することが可能で、かつ互いに混合することによって所定の機能を発揮することが可能な複数種の溶液を、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、後述するインクジェット法を用いて複数種の溶液の液滴として吐出させて、複数種の溶液のいずれかからなる複数種の試薬スポット（図１では符号２１、２２で示す）を形成することによって、試料３が担体１の表面１１に導入されると、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に形成された複数種の試薬スポット２１、２２と接触して、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片１０を得るものである。
【００８７】
このように複数の溶液のスポットを構成することによって、保存安定性の優れた分析試験片１０を得ることができる。さらに、インクジェット法を用いることによって、試薬スポットの位置の高精度化及び高密度化を図ることができるとともに、試薬スポットごとの投入液量（スポット量）の正確化を図ることができる。従って、分析用試験片内での感度分布が少なく分析の信頼性が向上し、分析用試験片の大きさを大きくしても品質の均一性を保持することができ、生産の効率化を図ることができる。また、高密度化により微小量の試料でも検出可能な高感度の分析用試験片を得ることができる。さらに、投入液量の正確化が図れるので、得られる分析用試験片の保存安定性をさらに向上させることができる。
【００８８】
本実施の形態に用いられるインクジェット法に用いられる液滴吐出装置としては、例えば、流路が形成された流路基体と、この流路基体に組み付けられて加圧室としてキャビティ内の容積を変化させる機能を有するアクチュエータ部と、流路基体の下面に貼着され、且つ吐出ノズルが形成されたノズル基体と、流路基体の後部の上面に設けられた液体注入部とを備えたものを挙げることができる。具体的には、特開２００３−７５３０５号公報に記載されているものを好適に用いることができる。
【００８９】
また、このような液滴吐出装置を制御するシステムとしては、例えば、特開２００３−９８１８３号公報に記載されたものを好適に用いることができる。
【００９０】
本実施の形態に用いられる担体１としては、表面１１を有するものであれば特に制限はないが、例えば、多孔質体を好適例として挙げることができる。中でも、親水性の多孔質体が好ましい。その材質としては、例えば、セルロース類、ポリエーテルスルホン類、アクリル重合体等が好適で、その孔径としては０．２μｍ〜数μｍが好適である。このように、担体１として多孔質体を用いることによって、得られる試薬スポット２（２１、２２）を形成する溶液の、担体１内部への浸透量を増大させることができ、分析感度を向上させることができる。また、インクジェット法を用いることによって、非接触で溶液を担体に供給することができるので、担体が多孔質体であっても変形させることがなく、表面にムラのない分析用試験片を得ることができる。
【００９１】
本実施の形態で用いられる試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液としては、試料３の導入によって互いに混合することができ、試料３中の分析対象物質と接触反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なものであれば特に制限はないが、例えば、分析対象物質として乳酸脱水素酵素の活性を測定する場合（試料として、乳酸脱水素酵素を含む溶液を用いる場合）、一つの試薬スポット２１用の溶液としては、基質として乳酸、補酵素としてＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、電子キャリアーとして１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、テトラゾリウム試薬としてＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む溶液を、もう一つの試薬スポット２２用の溶液としては、リン酸緩衝液、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液等の緩衝液を挙げることができる。
【００９２】
本実施の形態においては、複数種の試薬スポット２１、２２を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種を、発色体を含有するものとすることが好ましい。このように構成することによって、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片１０を得ることができる。このような発色体を含有する溶液としては、例えば、還元系としてホルマザン試薬、酸化系として４−アミノアンチピリン、フェノール系等の溶液を挙げることができる。この場合、発色体を含有する溶液の供給に、インクジェット法を用いることによって、正確な溶液量を供給することができ、高品質な分析用試験片を得ることができる。
【００９３】
複数種の試薬スポット２１、２２を形成する複数種の溶液に、蛍光発光する物質を含有させることが好ましい。このように構成することによって、目視検査では確認しにくい試薬スポット２１、２２の接触の可否を蛍光検査で確実に検査することが可能となり、品質の安定化を図ることができる。このような蛍光を発する物質としては特に制限はないが、試薬スポット２１、２２の検査特性を損なうことなく蛍光を発するものが好ましく、例えば、緑色、黄色、青色の食紅等を好適例として挙げることができる。この場合も、上述の発色体の場合と同様に、蛍光物質を含む溶液の供給に、インクジェット法を用いることによって、正確な溶液量を供給することができ、高品質な分析用試験片を得ることができる。
【００９４】
複数種の溶液の少なくとも一つに、水溶性のポリマー（水溶性ポリマー）を含有させることも長期保存安定性の面から好ましい。水溶性ポリマーを含有させることによって、試薬スポット２１、２２の成分が、大気中の水分によって溶出するのを防止することができるため、長期保存をする場合であっても試薬スポット２１、２２の特性を安定して保持することができる。
【００９５】
図３に示すように、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体２４を配設することが、長期保存安定性を向上させる上で好ましい。この場合、遮蔽体２４を、試薬スポット２１、２２間が最短距離となるところに配設することがさらに好ましい。遮蔽体２４の大きさは、試薬スポット２１、２２に接触しない大きさであればよい。遮蔽体２４の形状は、試薬スポット２１、２２に接触することなく、試薬スポット２１、２２の間に配置される形状であれば特に制限はないが、長期安定性を一層向上させるため、図４に示すように、直線状であることが好ましく、曲線状であってもよい。
【００９６】
遮蔽体２４を形成する物質としては特に制限はないが、例えば、水溶性ポリマー等を挙げることができる。水溶性ポリマーは、比較的粘度が高く、担体表面及び内部で拡がりすぎることがないため、試薬スポット２１、２２の形成領域を最大化することができ、感度を向上させることができる。遮蔽体２４を形成する水溶性ポリマーとしては、例えば、プルランのような糖の重合物、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、カルボキシセルロースナトリウム、ポリビニルアルコール、デキストラン、澱粉の部分加水分解物等を好適例として挙げることができる。遮蔽体２４の形成方法としては特に制限はないが、担体１の親水性の程度によって適宜使い分けすることが好ましい。例えば、比較的親水性が高い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体１内部に容易に浸透させることができるため、スクリーン印刷法を用いることが好ましい。また、比較的親水性が低い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体内部に浸透させることが困難であり、担体１の厚さ方向への浸透を確実にするため、インクジェット法を用いることが好ましい。中でも、遮蔽体２４を微細なパターンとし、試薬スポット２１、２２の形成領域を拡大して感度を向上させることが可能なことから、インクジェット法が、さらに好ましい。
【００９７】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した断面形状を、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状とすることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することが可能な分析用試験片を得ることができる。また、インクジェット法を用いることによって、上記形状を容易に形成することができる。
【００９８】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２のうち、同一種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１同士又は試薬スポット２２同士）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）を、異種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１と試薬スポット２２）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くすることが好ましい。このように構成することによって、試料３が導入されたときに、試薬スポット２１、２２を確実に混合することができる。
【００９９】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２の大きさを、最大径で、好ましくは、０．５ｍｍ以下、さらに好ましくは、０．０５〜０．２５ｍｍとするとともに、異種の試薬スポット（試薬スポット２１と試薬スポット２２と）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）を、好ましくは、０．６ｍｍ以下、さらに好ましくは０．１〜０．４ｍｍとすることによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することが可能な分析用試験片１０を得ることができるとともに、試薬スポット２１と試薬スポット２２との均一な混合を実現し、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片１０を得ることができる。特に、信号特性として発光量の大小で検査、分析する場合、上記径及びピッチとすると容易に目視でも確認することができるため好ましい。
【０１００】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポット２１、２２を担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した場合の試薬スポット２１、２２の断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体１の表面１１の面積を示す。］を、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすようにすることが好ましい。配設割合（Ａ）を０．０１以下とすると、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間の短縮化を図ることが可能な分析用試験片１０を得ることが困難になることがあり、配設割合（Ａ）を０．８１４以上とすると、得られる分析用試験片１０の長期安定性が低減することがある。得られる分析用試験片１０の分析の長期信頼性を考慮すると、０．０９＜（Ａ）＜０．３５の範囲を満たすようにすることがさらに好ましい。なお、非接触で溶液を供給することができるとともに、スポット量が正確であるインクジェット法を用いることによって、上述のスポットピッチ、径、断面積の配設割合を効率よく実現することができる。
【０１０１】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）を、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異ならせることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２の、大気中の水分を吸収することによる劣化を簡易に判定できる（スポットピッチが短く形成された領域では試薬スポット２１、２２の劣化が促進されるため、劣化の状況を定量的に把握することができる）とともに、分析（測定）範囲の拡大した分析用試験片１０を得ることができる。また、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【０１０２】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、複数種の試薬スポット２１、２２が所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポット２３を配設することが好ましい。この場合、確認用試薬スポット２３は、最終形状としての分析用試験片１０の内部に配設されてもよく、最終形状となる前の担体１上（分析用試験片１０の外部）に配設されてもよい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２を配設するに先立って、例えば、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合具合等を予め確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。
【０１０３】
確認用試薬スポット２３のそれぞれを、前述の複数種の溶液から形成することが好ましい。このように構成することによって、信号物質又は信号特性の生成具合等を予め迅速に確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。また、確認用試薬スポット２３の形成にインクジェット法を用いることによって、分析用試験片１０内の試薬スポット２１、２２と同一のスポットを容易に形成することことができ、正確な確認検査を行うことができる。
【０１０４】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域における試薬スポット２１、２２を、他の領域の試薬スポット２１、２２とは異なった種類のものとなるように配設することが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で複数項目の検査をすることができる。さらに、インクジェット法を用いることによって、高密度なスポット形成ができるので、チップを大きくすることなく、異種の検査ができるチップを得ることができる。
【０１０５】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域における試薬スポット２１、２２を、他の領域の試薬スポット２１、２２とは異なった試薬濃度のものとなるように配設することが好ましい。なお、インクジェット法を用いることによって、高密度化することができ、小さな領域でも試薬濃度の変更をすることができる。このように構成することによって、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【０１０６】
試薬スポット２１、２２を担体１の内部にまで配設する場合、試薬スポット２１、２２を、試料に対する反応感度が、担体１の表面１１側において最も高くなるように配設することが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。この場合、インクジェット法を用いることによって、反応感度が担体の表面１１側において最も高くなるように、効率よく配設することができる。すなわち、まず、担体１に所定の濃度の溶液を供給後、同一装置を用いて、ノズル面における溶液の乾燥時間を長くし、より濃縮した溶液を同一箇所へ供給することによって効率よく上述の配設を実現することができる。
【０１０７】
試薬スポット２１、２２を担体１の内部にまで配設する場合、試薬スポット２１、２２を、試薬濃度が、担体の表面側において最も高くなるように配設することが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。
【０１０８】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット２１と試薬スポット２２との間）に、表面活性剤（図示せず）を配設することが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化したり信号物質等の分散化を促進することが可能な分析用試験片１０を得ることができる。このような表面活性剤としては、例えば、アニオン系、カチオン系、ノニオン系等のいずれであってもよく、使用条件に応じて適宜選定することができる。アニオン系としては、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩等、カチオン系としては、アルキル・トリメチルアンモニウム、アルキル・ピリジウム等、ノニオン系としては、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニール等を好適例として挙げることができる。
【０１０９】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット２１と試薬スポット２２との間）に、発泡剤（図示せず）を配設することが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合を促進して、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することが可能な分析用試験片１０を得ることができる。このような発泡剤としては、例えば、炭酸水素カリウム（ＫＨＣＯ３）又は炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）と有機酸とを個別に配置したものを挙げることができる。この場合、インクジェット法を用いることによって、表面活性剤及び発泡剤を微少量で均一に供給することができ、分析用試験片１０内及び分析用試験片１０間で差のないものを得ることができる。
【０１１０】
担体１の表面１１とは反対側の表面（裏面）側に、担体１を支持する支持体４をさらに配設することが好ましい。このように構成することによって、取り扱いが容易で、さらに試薬スポットを形成する際の配列（アライメント）を容易化することができる。なお、支持体４の形状としては、担体１を確実に支持することができるものであれば特に制限はないが、例えば、材質として、金属、セラミックス、ガラス、樹脂等を挙げることができる。中でも、樹脂が、低コスト、溶液に対する安定性から好ましい。さらに、樹脂の種類としては、例えば、ＰＥＴ系樹脂、アクリル系樹脂、塩ビ系樹脂等を挙げることができる。
【０１１１】
試薬スポット２１、２２を配設するため、上述のインクジェット法を用いて吐出される際の、複数種の溶液の液滴を、その速度成分として、担体１の表面１１に対して垂直な方向以外の成分を有するものとすることが好ましい。このように構成することによって、噴射（吐出）ノズルから液滴が吐出されてから担体１に達するまでの時間が長くなり、より高濃度な液滴を担体１に供給することができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度の向上を図ることができる。
【０１１２】
また、インクジェット法を用いて、溶液の液滴を、複数の独立した微小液滴から構成することが好ましい。このように構成することによって、液滴が担体１に達するまでの時間内に、液滴がより濃縮されるため、試薬スポット２１、２２の大きさ（スポット径）を大きくすることなく、多くのスポット量（試薬スポット２１、２２の一つを形成する溶液の液滴の量）を供給することができ、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１３】
試薬スポット２１、２２の一つを形成する溶液の液滴の量（スポット量）を、好ましくは、０．１μＬ以下、さらに好ましくは、０．００２〜０．０２μＬとする。０．１μＬを超えると、溶液の液滴が担体１に拡がりすぎてスポット径が必要以上に大きくなるため、得られる分析用試験片１０において、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間が長くなることがある。
【０１１４】
複数種の試薬スポット２１、２２のスポット量を、担体１の表面１１の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとすること（例えば、試料３が多く導入される中央部のスポット量を大きくすること等）が好ましい。このように構成することによって、試料３に対する最適なスポット量の範囲を拡大すること（得られる分析用試験片１０の分析感度を容易に変更すること）ができるため、１枚の分析用試験片１０で定量化を可能とすることができる。また、インクジェット法を用いることによって、小さなチップであっても容易に作製することができる。
【０１１５】
試薬スポット２１、２２を、溶液の液滴を、試薬スポット２１、２２一つ当たり複数回吐出することにより形成することが好ましい。このように構成することによって、スポット径を必要以上に大きくすることなく、スポット量を大きくすることができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１６】
担体１の温度を、好ましくは、４０℃以下、さらに好ましくは、１５〜３０℃以下に保持した状態で溶液の液滴を吐出することにより試薬スポット２１、２２を形成することによって、試薬スポット２１、２２の形成後、短時間で液滴が乾燥し、試薬スポット２１、２２の拡がりを抑えることができ、スポット径を必要以上に大きくすることなく、スポット量を大きくすることができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１７】
さらに、担体１の裏面を支持体４から隔離した状態で溶液の液滴を吐出することが好ましい。このようにして試薬スポット２１、２２を形成することによって、担体１の裏面における試薬スポット２１、２２の拡がりを抑えることができ、液滴の不必要な混合を防止することができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１８】
上記のいずれかの方法によって製造された分析用試験片１０は、表面１１を有する担体１と、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから、インクジェット法を用いて複数種の溶液の液滴として吐出させることによって形成された複数種の試薬スポット２１、２２からなる試薬スポット２とを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料３が導入されると、試料３が複数種の試薬スポット２１、２２と接触することによって、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して、検出可能な物質又は検出可能な特性（信号物質又は信号特性）を生成することが可能な分析用試験片１０であり、担体１の表面１１に導入された分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料３の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れたものとなる。
【実施例】
【０１１９】
以下、本発明の分析用試験片及びその製造方法を実施例によってさらに具体的に説明する。
【０１２０】
（実施例１、２）
試薬スポットの形成方法として、ピン方式を用いて、下記に示す手順で、サンプルを作製して、長期安定性等の特性評価を行った。すなわち、第１の試薬として、乳酸、ＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、ＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む第１の溶液を使用し、第２の試薬として、リン酸緩衝液（第２の溶液）を使用した。試料としては牛乳を使用した。担体として、材質が親水性セルロース混合エステル、サイズが５ｍｍ×５ｍｍ、孔径が０．８μｍ、厚さが０．１６ｍｍのものを使用した。
【０１２１】
上記第１、第２の溶液と担体とを使用するとともに、試薬スポットの形成方法としてピン方式（クイルピンタイプ、万年筆のように溝が切られているもの）を用い、ピンに第１、第２の溶液を保持させ、そのピンを担体に接触させることによって第１、第２の溶液をそれぞれ担体に移行させて、第１、第２の試薬スポットを形成した。この場合、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ０．０１μＬ、０．０６μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．６ｍｍ、１．５ｍｍのピッチで、ほぼ０．３ｍｍ、１．２ｍｍの大きさ（直径）で形成された第１、第２のサンプルを得、その特性評価を行った。その結果を表１に示す。
【０１２２】
（比較例１）
試薬スポットの形成方法として、液含浸法用いて、比較サンプルを作製し、その特性評価を行った。すなわち、実施例１で用いたものと同様の第１、第２の試薬を、それぞれビーカーに入れ、実施例１で用いたものと同様の担体を、まず、第１の試薬を入れたビーカーに入れて第１の試薬に浸すことで第１の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥後、第２の試薬を入れたビーカーに入れて第２の試薬に浸すことで第２の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥して、担体に第１、第２の試薬を含浸させた比較サンプルを得、その特性評価を行った。その結果を表１に示す。
【０１２３】
実施例１、２及び比較例１における特性評価は、作製後１、７、３０日間、４℃で冷蔵保管した複数のサンプル及び比較サンプル（以下、単に「サンプル」ということがある）の、表面のほぼ中央部全域に検出波長５２０ｎｍのレーザ光を照射し、その反射率を測定することによって行った。反射率が高い（低下しない）ものほど安定性に優れており、反射率が初期値（作製直後）に対し１０％以上低下したサンプルだけが得られた場合を×、反射率の低下が１０％未満のサンプルだけが得られた場合を○と判定した。なお、実施例２においては、試薬スポットのスポット径が大きいため、試薬スポット中央部と周辺部で、実用上の問題がない程度ではあるが、第１、第２の試薬の濃度ムラが発生した。さらに、上記複数のサンプルのそれぞれに試料を滴下して複数の試料滴下サンプルとし、上記と同様にして、その反射率を測定することで感度も確認した。感度は、反射率が試料の滴下前のサンプルの反射率に対し２０％以上低下した試料滴下サンプルだけが得られた場合を○と判定した。さらに、目視観察も行い、スポット内のムラの発生、５ｍｍ×５ｍｍ内のムラの発生を観察した。
【０１２４】
【０１２５】
表１に示すように、担体の表面上及び内部に、所定の溶液（実施例１、２では第１、第２の溶液の２種類）を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することにより、分析対象物質を含んだ試料が担体の表面に導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な信号が得られ、かつ長期安定性に優れた分析用試験片が得られることが確認できた。なお、実施例１、２は、２種の試薬（溶液）を用いて行ったが、安定性を考慮し、３、４種類の試薬（溶液）を用いて、試薬スポットを形成してもよい。
【実施例３〜５】
【０１２６】
試薬スポットの形成方法として、インクジェット法を用いて、下記に示す手順で、サンプルを作製して、長期安定性等の特性評価を行った。すなわち、第１の試薬として、乳酸、ＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、ＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む第１の溶液を使用し、第２の試薬として、リン酸緩衝液（第２の溶液）を使用した。試料は牛乳を使用した。担体として、材質が親水性セルロース混合エステル、サイズが５ｍｍ×５ｍｍ、孔径が０．８μｍ、厚さが０．１６ｍｍのものを使用した。上記第１、第２の溶液と担体とを使用するとともに、特開２００３−７５３０５号公報に記載されている吐出ユニットを使用し、第１、第２の試薬スポットを形成した。この場合、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ０．００３μＬ、０．０１μＬ、０．０６μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．３ｍｍ、０．６ｍｍ、１．５ｍｍのピッチで、ほぼ０．１５ｍｍ、０．３ｍｍ、１．２ｍｍの大きさ（直径）で形成された第１〜第３のサンプル（実施例３〜５）を得、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。
【０１２７】
（比較例２）
試薬スポットの形成方法として、液含浸法用いて、下記に示す手順で、第１の比較サンプル（比較例２）を作製して、その特性評価を行った。すなわち、実施例３で用いたものと同様の第１、第２の試薬を、それぞれビーカーに入れ、実施例３で用いたものと同様の担体を、まず、第１の試薬を入れたビーカーに入れて第１の試薬に浸すことで第１の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥後、第２の試薬を入れたビーカーに入れて第２の試薬に浸すことで第２の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥して、担体に第１、第２の試薬を含浸させた第１の比較サンプル（比較例２）を得、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。
【０１２８】
（比較例３）
試薬スポットの形成方法として、ピンに第１、第２の溶液を保持させ、そのピンを担体に接触させることによって第１、第２の溶液を担体に移行させて、第１、第２の試薬スポットを形成するピン方式（クイルピンタイプ、万年筆のように溝が切られているもの）を用いて、第２の比較サンプル（比較例３）を作製し、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。すなわち、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ０．００３μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．３ｍｍのピッチで、ほぼ０．１５ｍｍの大きさ（直径）で形成された第２の比較サンプル（比較例３）を得、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。
【０１２９】
実施例３〜５及び比較例２、３における特性評価は、作製後１、７、３０日間、４℃で冷蔵保管した複数のサンプル及び比較サンプル（以下、単に「サンプル」ということがある）の、表面のほぼ中央部全域に検出波長５２０ｎｍのレーザ光を照射し、その反射率を測定することによって行った。反射率が高い（低下しない）ものほど安定性に優れており、反射率が初期値（作製直後）に対し１０％以上低下したサンプルだけが得られた場合を×、反射率の低下が１０％未満のサンプルだけが得られた場合を○と判定した。なお、１０％以上低下したサンプル及び１０％未満のサンプルが混在して得られた場合を△と判定した。また、実施例５においては、試薬スポットのスポット径が大きいため、試薬スポット中央部と周辺部で、実用上の問題がない程度ではあるが、第１、第２の試薬の濃度ムラが発生した。さらに、上記複数のサンプルのそれぞれに試料を滴下して複数の試料滴下サンプルとし、上記と同様にして、その反射率を測定することで感度も確認した。感度は、反射率が試料の滴下前のサンプルの反射率に対し２０％以上低下した試料滴下サンプルだけが得られた場合を○と判定した。さらに、目視観察も行い、スポット内のムラの発生、５ｍｍ×５ｍｍ内のムラの発生を観察した。
【０１３０】
【０１３１】
表２に示すように、担体の表面上及び内部に、所定の溶液（実施例３〜５では第１、第２の溶液２種類）を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することにより、分析対象物質を含んだ試料が担体の表面に導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な信号が得られ、かつ長期安定性に優れた分析用試験片が得られることが確認でき、さらにその製造法として、ピン方式よりも、インクジェット法の方が、スポット量のばらつきによるチップ内ムラの発生を防止することができる点で優れていることが確認できた。なお、実施例３〜５は、２種の試薬（溶液）を用いて行ったが、安定性を考慮し、３、４種類の試薬（溶液）を用いて、試薬スポットを形成してもよい。また、表２における比較例２及び表１における比較例１は、同一内容の試験であったが、評価方法等のばらつきによって、それぞれ△及び○と判定されたと推定される。
【０１３２】
（実施例６、７）
試料として、牛乳（乳酸脱水素酵素）の代わりに、アルカリ性フォスファターゼを用いて、第４、第５のサンプル（実施例６、７）を得た。すなわち、試薬スポットの形成方法として、インクジェット法を用いて、下記に示す手順で、サンプルを作製して、長期安定性等の特性評価を行った。第１の試薬として、ｐ−ニトロフェニルリン酸二ナトリウム塩１８．９４ｍＭ、塩化マグネシウム（６水塩）／０．５０５ｍＭ（第１の溶液）を使用し、第２の試薬として、２−エチルアミノエタノール／５．０５ｍＭ、塩化マグネシウム（６水塩）／０．５０５ｍＭ（第２の溶液）を使用した。試料としては、アルカリ性フォスファターゼを使用した。担体として、材質が親水性セルロース混合エステル、サイズが５ｍｍ×５ｍｍ、孔径が０．８μｍ、厚さが０．１６ｍｍのものを使用した。上記第１、第２の溶液と担体とを使用するとともに、特開２００３−７５３０５号公報に記載されている吐出ユニットを使用し、第１、第２の試薬スポットを形成した。この場合、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ、０．０１μＬ、０．０６μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．６ｍｍ、１．５ｍｍのピッチで、ほぼ０．３ｍｍ、１．２ｍｍの大きさ（直径）で形成された第４、第５のサンプル（実施例６、７）を得、その特性評価を行った。その結果を表３に示す。
【０１３３】
（比較例４）
試薬スポットの形成方法として、液含浸法用いて、第３の比較サンプル（比較例４）を作製し、その特性評価を行った。その結果を表３に示す。すなわち、実施例６で用いたものと同様の第１、第２の試薬（すなわち、第１、第２の溶液として、２−エチルアミノエタノール／１．０１ｍＭ、ｐ−ニトロフェニルリン酸二ナトリウム塩／７５．７５ｍＭ、塩化マグネシウム（６水塩）／０．５０５ｍＭ）を、実施例６で用いたものと同様の担体の内部に、比較例２と同様の方法で第１、第２の試薬を含浸させて、第３の比較サンプル（比較例４）を得、その特性評価を行った。その結果を表３に示す。
【０１３４】
実施例６、７及び比較例４における特性評価は、作製後１、１００、１５０日間、４℃で冷蔵保管した複数のサンプル及び比較サンプル（以下、単に「サンプル」ということがある）の表面のほぼ中央部全域における、検出波長４０５ｎｍにおける試薬自身の吸光度を測定することにより、ｐ−ニトロフェニルリン酸の分解物であるｐ−ニトロフェノールの生成率を測定することにより行った。保管開始時の４０５ｎｍにおける吸光度を１００％とした時の相対値が１００に近いほど安定性に優れており、相対値が初期値（作製直後）に対し１０％以上低下したサンプルだけが得られた場合を×、相対値の低下が１０％未満のサンプルだけが得られた場合を○と判定した。なお、実施例７においては、試薬スポットのスポット径が大きいため、試薬スポット中央部と周辺部で、実用上の問題がない程度ではあるが、第１、第２の試薬の濃度ムラが発生した。また、上記複数のサンプルのそれぞれに試料を滴下して複数の試料滴下サンプルとし、上記と同様にして、その反射率を測定することで感度も確認した。感度は、反射率が試料の滴下前のサンプルの反射率に対し２０％以上低下した試料滴下サンプルだけが得られた場合を○と判定した。さらに、目視観察も行い、スポット内のムラの発生、５ｍｍ×５ｍｍ内のムラの発生を観察した。
【０１３５】
【０１３６】
表３に示すように、担体の表面上及び内部に、所定の溶液（実施例６、７では第１、第２の溶液２種類）を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することにより、分析対象物質を含んだ試料が担体の表面に導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な信号が得られ、かつ長期安定性に優れた分析用試験片がさまざまな溶液に対し得られることが確認できた。なお、実施例６、７は、２種の試薬（溶液）を用いて行ったが、安定性を考慮し、３、４種類の試薬（溶液）を用いて、試薬スポットを形成してもよい。
【産業上の利用可能性】
【０１３７】
本発明の分析用試験片及びその製造方法は、研究、創薬、診断、医療等の分野で、分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップ等の製造に有効に利用される。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分析対象物質を含んだ試料が導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片及びその効率的な製造方法に関する。さらに詳しくは、分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れた分析用試験片及びその効率的な製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための分析用試験片の製造方法としては、例えば、吸収性のよい多孔質構造体（多孔質層、多孔性膜等）からなる試験部に試料を均一に吸収させて隣接する試験部との液絡を防止する多孔性膜及びその製造方法が開示されている（特許文献１参照）。また、検出可能な物質を検出するための検出部を有する試験部を１以上設け、検出部に層状無機化合物（合成スメクタイト等）を含有させた分析用試験片を製造する方法が開示されている（特許文献２参照）。
【０００３】
【特許文献１】特開平２−６５４１号公報
【特許文献２】特開平９−１８４８３７号公報
【０００４】
しかしながら、特許文献１や特許文献２に開示された多孔性膜、分析用試験片及びそれらの製造方法では、複数種の試料を単一のバッファー中に含浸させているため、得られる分析用試験片において、試料の劣化が早く安定性に欠けたり、反応効率が低く、高感度及び高精度の分析ができないという問題があり、必ずしも十分に満足すべきものではなかった。
【０００５】
本発明は、上述の問題に鑑みてなされたものであり、分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れた分析用試験片及びその効率的な製造方法を提供することを目的とする。
【発明の開示】
【０００６】
上記目的を達成するため、本発明によれば、以下の分析用試験片及びその製造方法が提供される。
【０００７】
［１］担体と、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された試薬スポットとを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に配設された前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片であって、前記試薬スポットが、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポットからなり、前記担体の表面に導入された試料が、前記複数種の試薬スポットと接触することによって、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片。
【０００８】
［２］前記担体が、多孔質体である前記［１］に記載の分析用試験片。
【０００９】
［３］前記分析対象物質が、人及び動物の体液である前記［１］又は［２］に記載の分析用試験片。
【００１０】
［４］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、発色体を含有してなる前記［１］〜［３］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１１】
［５］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、蛍光発光する物質を含有してなる前記［１］〜［４］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１２】
［６］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、水溶性ポリマーを含有してなる前記［１］〜［５］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１３】
［７］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体が配設されてなる前記［１］〜［６］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１４】
［８］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった種類のものである前記［１］〜［７］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１５】
［９］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものである前記［１］〜［８］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１６】
［１０］前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い、前記試料に対する反応感度を有してなる前記［１］〜［９］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１７】
［１１］前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い前記試薬濃度を有してなる前記［１］〜［９］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１８】
［１２］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤が配設されてなる前記［１］〜［１１］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００１９】
［１３］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤が配設されてなる前記［１］〜［１２］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２０】
［１４］前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに備えてなる前記［１］〜［１３］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２１】
［１５］前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状である前記［１］〜［１４］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２２】
［１６］前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長い前記［１］〜［１５］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２３】
［１７］前記複数種の試薬スポットの大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下である前記［１］〜［１６］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２４】
［１８］前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たす前記［１］〜［１７］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２５】
［１９］前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている前記［１］〜［１８］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２６】
［２０］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに備えてなる前記［１］〜［１９］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２７】
［２１］前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている前記［１］〜［２０］のいずれかに記載の分析用試験片。
【００２８】
［２２］担体の表面上に又は担体の表面上及び内部に、所定の溶液を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することによって、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法であって、前記所定の溶液として、導入される前記試料と接触することによって互いに混合することが可能で、かつ互いに混合することによって所定の機能を発揮することが可能な複数種の溶液を、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部にインクジェット法を用いて前記複数種の溶液の液滴として吐出させて、前記複数種の溶液のいずれかからなる複数種の試薬スポットを形成することによって、前記試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に形成された前記複数種の試薬スポットと接触して、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法。
【００２９】
［２３］前記インクジェット法に用いられる液滴吐出装置として、流路が形成された流路基体と、この流路基体に組み付けられて加圧室としてキャビティ内の容積を変化させる機能を有するアクチュエータ部と、流路基体の下面に貼着され、且つ吐出ノズルが形成されたノズル基体と、流路基体の後部の上面に設けられた液体注入部とを備えるものを用いる前記［２２］に記載の分析用試験片の製造方法。
【００３０】
［２４］前記担体として、多孔質体を用いる前記［２２］又は［２３］に記載の分析用試験片の製造方法。
【００３１】
［２５］前記分析対象物質として、人及び動物の体液を用いる前記［２２］〜［２４］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３２】
［２６］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、発色体を含有してなるものを用いる前記［２２］〜［２５］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３３】
［２７］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、蛍光発光する物質を含有してなるものを用いる前記［２２］〜［２６］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３４】
［２８］前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、水溶性ポリマーを含有してなるものを用いる前記［２２］〜［２７］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３５】
［２９］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体を配設する前記［２２］〜［２８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３６】
［３０］前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状となるように配設する前記［２２］〜［２９］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３７】
［３１］前記複数種の試薬スポットを、前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くなるように配設する前記［２２］〜［３０］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３８】
［３２］前記複数種の試薬スポットを、その大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下となるように配設する前記［２２］〜［３１］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００３９】
［３３］前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすように配設する前記［２２］〜［３２］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４０】
［３４］前記複数種の試薬スポットを、その前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとなるように配設する前記［２２］〜［３３］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４１】
［３５］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに配設する前記［２２］〜［３４］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４２】
［３６］前記確認用試薬スポットのそれぞれを、前記複数種の溶液から形成する前記［３５］に記載の分析用試験片の製造方法。
【００４３】
［３７］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった種類のものとなるように配設する前記［２２］〜［３６］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４４】
［３８］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものとなるように配設する前記［２２］〜［３７］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４５】
［３９］前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試料に対する反応感度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する前記［２２］〜［３８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４６】
［４０］前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試薬濃度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する前記［２２］〜［３８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４７】
［４１］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤を配設する前記［２２］〜［４０］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４８】
［４２］前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤を配設する前記［２２］〜［４１］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００４９】
［４３］前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに配設する前記［２２］〜［４２］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５０】
［４４］前記複数種の溶液の液滴を、その速度成分として、前記担体の表面に対して垂直な方向以外の成分を有するようにして前記インクジェット法を用いて吐出して、前記試薬スポットを形成する前記［２２］〜［４３］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５１】
［４５］前記溶液の液滴を、複数の独立した微小液滴から構成する前記［２２］〜［４４］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５２】
［４６］前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）を、０．１μＬ以下とする前記［２２］〜［４５］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５３】
［４７］前記複数種の試薬スポットのスポット量を、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとする前記［２２］〜［４６］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５４】
［４８］前記試薬スポットを、前記溶液の液滴を前記試薬スポット一つ当たり複数回吐出させることによって形成する前記［２２］〜［４７］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５５】
［４９］前記担体の温度を４０℃以下に保持した状態で前記溶液の液滴を吐出して、前記試薬スポットを形成する前記［２２］〜［４８］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５６】
［５０］前記担体の裏面を前記支持体から隔離した状態で前記溶液の液滴を吐出することによって、前記試薬スポットを形成する前記［４３］〜［４９］のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【００５７】
以上説明したように、本発明によって、分析対象物質（例えば人及び動物の体液、特に、血液や尿等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れた分析用試験片及びその効率的な製造方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
［図１］図１は、本発明の一の実施の形態を模式的に示す斜視図である。
［図２］図２は、図１の一部拡大図であり、複数種の試薬スポットのうち、同一種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長いことを示す。
［図３］図３は、本発明の一の実施の形態において、試薬スポット間の担体表面及び内部に遮蔽体を配置することを模式的に示す説明図である。
［図４］図４は、遮蔽体の形状が直線状であることを模式的に示す説明図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５９】
以下、本発明の分析用試験片の一の実施の形態を、図面を参照しつつ具体的に説明する。
【００６０】
図１に示すように、本実施の形態の分析用試験片１０は、担体１と、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された試薬スポット２とを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料３が担体１の表面１１に導入されると、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に配設された試薬スポット２と接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片１０であって、試薬スポット２が、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポット（図１では符号２１、２２で示す）からなり、担体１の表面１１に導入された試料３が、複数種の試薬スポット２１、２２と接触することによって、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なものである。
【００６１】
このように構成することによって、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性を向上させることができる。
【００６２】
本実施の形態に用いられる担体１としては、表面１１を有するものであれば特に制限はないが、例えば、多孔質体を好適例として挙げることができる。中でも、親水性の多孔質体が好ましい。その材質としては、例えば、セルロース類、ポリエーテルスルホン類、アクリル重合体等が好適で、その孔径としては０．２μｍ〜数μｍが好適である。このように、担体１として多孔質体を用いることによって、試薬スポット２（２１、２２）を形成する溶液の、担体１の内部への浸透量を増大させることができ、分析感度を向上させることができる。
【００６３】
本実施の形態に用いられる試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液としては、試料３の導入によって互いに混合することができ、試料３中の分析対象物質と接触反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なものであれば特に制限はないが、例えば、分析対象物質として乳酸脱水素酵素の活性を測定する場合（試料として、乳酸脱水素酵素を含む溶液を用いる場合）、１つの試薬スポット２１用の溶液としては、基質として乳酸、補酵素としてＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、電子キャリアーとして１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、テトラゾリウム試薬としてＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む溶液を、もう１つの試薬スポット２２用の溶液としては、リン酸緩衝液、トリス塩酸（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ）緩衝液等の緩衝液を挙げることができる。
【００６４】
本実施の形態においては、複数種の試薬スポット２１、２２を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種は、発色体を含有してなることが好ましい。このように構成することによって、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能となる。このような発色体を含有する溶液としては、例えば、還元系としてホルマザン試薬、酸化系として４−アミノアンチピリン、フェノール系等の溶液を挙げることができる。
【００６５】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種は、蛍光発光する物質を含有してなることが好ましい。このように構成することによって、目視検査では確認しにくい試薬スポット２１、２２の接触の可否を蛍光検査で確実に検査することが可能となり、品質の安定化を図ることができる。このような蛍光を発する物質としては特に制限はないが、試薬スポット２１、２２の検査特性を損なうことなく蛍光を発するものが好ましく、例えば、緑色、黄色、青色の食紅等を好適例として挙げることができる。
【００６６】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種は、水溶性ポリマーを含有してなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２の成分が、大気中の水分によって溶出するのを防止することができるため、長期保存をする場合であっても試薬スポット２１、２２の特性を安定して保持することができる。
【００６７】
図３に示すように、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体２４が配設されてなることが、長期保存安定性を向上させる上で好ましい。この場合、水溶性の遮蔽体２４を少なくとも試薬スポット２１、２２間が最短距離となるところに配設することがさらに好ましい。遮蔽体２４の大きさは、試薬スポット２１、２２に接触しない大きさであればよい。遮蔽体２４の形状は、試薬スポット２１、２２に接触することなく、試薬スポット２１、２２の間に配置される形状であれば特に制限はないが、長期安定性を一層向上させるため、図４に示すように、直線状であることが好ましく、曲線状であってもよい。
【００６８】
遮蔽体２４を形成する物質としては特に制限はないが、例えば、水溶性ポリマー等を挙げることができる。水溶性ポリマーは、比較的粘度が高く、担体表面及び内部で拡がりすぎることがないため、試薬スポット２１、２２の形成領域を最大化することができ、感度を向上させることができる。遮蔽体２４を形成する水溶性ポリマーとしては、例えば、プルランのような糖の重合物、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、カルボキシセルロースナトリウム、ポリビニルアルコール、デキストラン、澱粉の部分加水分解物等を好適例として挙げることができる。遮蔽体２４の形成方法としては特に制限はないが、担体１の親水性の程度によって適宜使い分けすることが好ましい。例えば、比較的親水性が高い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体１内部に容易に浸透させることができるため、スクリーン印刷法を用いることが好ましい。また、比較的親水性が低い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体内部に浸透させることが困難であり、担体１の厚さ方向への浸透を確実にするため、インクジェット法を用いることが好ましい。中でも、遮蔽体２４を微細なパターンとし、試薬スポット２１、２２の形成領域を拡大して感度を向上させることが可能なことから、インクジェット法が、さらに好ましい。
【００６９】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、他の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）とは異なった種類のものであることが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で複数項目の検査をすることができる。
【００７０】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、他の領域に配設された試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）とは異なった試薬濃度のものであることが好ましい。このように構成することによって、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【００７１】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が担体１の内部にまで配設される場合、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、担体１の表面１１側において最も高い反応感度（試料に対する）を有してなることが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。
【００７２】
試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が担体１の内部にまで配設される場合、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）は、担体１の表面１１側において最も高い試薬濃度を有してなることが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。
【００７３】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤が配設されてなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化したり信号物質等の分散化を促進することができる。このような表面活性剤としては、例えば、アニオン系、カチオン系、ノニオン系等のいずれであってもよく、使用条件に応じて適宜選定することができる。アニオン系としては、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩等、カチオン系としては、アルキル・トリメチルアンモニウム、アルキル・ピリジウム等、ノニオン系としては、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニール等を好適例として挙げることができる。
【００７４】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）が配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤が配設されてなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合を促進して、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することができる。このような発泡剤としては、例えば、炭酸水素カリウム（ＫＨＣＯ３）又は炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）と有機酸とを個別に配置したものを挙げることができる。
【００７５】
担体１の表面１１とは反対側の表面（裏面）側に、担体１を支持する支持体４をさらに備えてなることが好ましい。このように構成することによって、取り扱いが容易で、さらに試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する際の配列（アライメント）を容易化することができる。なお、支持体４の形状としては、担体１を確実に支持することができるものであれば特に制限はないが、例えば、材質として、金属、セラミックス、ガラス、樹脂等を挙げることができる。中でも、樹脂が、低コスト、溶液に対する安定性から好ましい。さらに、樹脂の種類としては、例えば、ＰＥＴ系樹脂、アクリル系樹脂、塩ビ系樹脂等を挙げることができる。
【００７６】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した断面形状を、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状とすることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することができる。
【００７７】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２のうち、同一種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１同士又は試薬スポット２２同士）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）を、異種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１と試薬スポット２２）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くすることが好ましい。このように構成することによって、試料３が導入されたときに、試薬スポット２１、２２を確実に混合することができる。
【００７８】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２の大きさを、最大径で、好ましくは、０．５ｍｍ以下、さらに好ましくは、０．０５〜０．２５ｍｍとするとともに、異種の試薬スポット（試薬スポット２１と試薬スポット２２と）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）を、好ましくは、０．６ｍｍ以下、さらに好ましくは０．１〜０．４ｍｍとすることによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化したり、信号物質等の分散化を促進することができるとともに、試薬スポット２１と試薬スポット２２との均一な混合を実現し、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示を実現することができる。特に、信号特性として発光量の大小で検査、分析する場合、上記径及びピッチとすると容易に目視でも確認することができるため好ましい。
【００７９】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポット２１、２２を担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した場合の試薬スポット２１、２２の断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体１の表面１１の面積を示す。］を、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすようにすることが好ましい。配設割合（Ａ）を０．０１以下とすると、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間の短縮化が困難になることがあり、配設割合（Ａ）を０．８１４以上とすると、長期安定性が低減することがある。分析の長期信頼性を考慮すると、０．０９＜（Ａ）＜０．３５の範囲を満たすようにすることがさらに好ましい。
【００８０】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）を、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異ならせることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２の、大気中の水分を吸収することによる劣化を簡易に判定することができる（スポットピッチが短く形成された領域では試薬スポット２１、２２の劣化が促進されるため、劣化の状況を定量的に把握することができる）とともに、分析（測定）範囲を拡大することができる。
【００８１】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、複数種の試薬スポット２１、２２が所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに備えてなることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２を配設するに先立って、例えば、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合具合等を予め確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。
【００８２】
確認用試薬スポット２３のそれぞれを、前述の複数種の溶液から形成することが好ましい。このように構成することによって、信号物質又は信号特性の生成具合等を予め迅速に確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。
【００８３】
試薬スポット２１、２２の一つを形成する溶液の液滴の量（スポット量）を、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとすること（例えば、試料３が多く導入される中央部のスポット量を大きくすること等）が好ましい。このように構成することによって、試料３に対する最適なスポット量の範囲を拡大すること（分析感度を容易に変更すること）ができるため、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【００８４】
なお、本発明の分析用試験片は、後述するようにインクジェット法を用いて製造することが好ましいが、他の方法、例えば、ピンに溶液を保持させ、そのピンを担体の平坦面に接触させることによって溶液を担体の平坦面に移行させて、試薬スポットを形成するピン方式による方法を用いてもよい。ピンの先端の形状には、ソリッドピンタイプ（特に、溝が切られていないもの）、クイルピンタイプ（万年筆のように溝が切られているもの）、ピンアンドリングタイプ（リングに溶液を張り、張られた溶液の膜に針を貫通させてスポットするタイプ）等、さまざまなタイプがあるが、いずれのタイプのものであっても用いることができる。中でも、クイルピンタイプが好ましい。
【００８５】
以下、本発明の分析用試験片の製造方法の実施の形態を、図面を参照しつつ具体的に説明する。
【００８６】
図１に示すように、本実施の形態の分析用試験片の製造方法は、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、所定の溶液を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポット２を形成することによって、分析対象物質を含んだ試料３が担体１の表面１１に導入されると、試薬スポット２と接触、反応して検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片１０を得る分析用試験片の製造方法であって、所定の溶液として、導入される試料３と接触することによって互いに混合することが可能で、かつ互いに混合することによって所定の機能を発揮することが可能な複数種の溶液を、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、後述するインクジェット法を用いて複数種の溶液の液滴として吐出させて、複数種の溶液のいずれかからなる複数種の試薬スポット（図１では符号２１、２２で示す）を形成することによって、試料３が担体１の表面１１に導入されると、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に形成された複数種の試薬スポット２１、２２と接触して、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片１０を得るものである。
【００８７】
このように複数の溶液のスポットを構成することによって、保存安定性の優れた分析試験片１０を得ることができる。さらに、インクジェット法を用いることによって、試薬スポットの位置の高精度化及び高密度化を図ることができるとともに、試薬スポットごとの投入液量（スポット量）の正確化を図ることができる。従って、分析用試験片内での感度分布が少なく分析の信頼性が向上し、分析用試験片の大きさを大きくしても品質の均一性を保持することができ、生産の効率化を図ることができる。また、高密度化により微小量の試料でも検出可能な高感度の分析用試験片を得ることができる。さらに、投入液量の正確化が図れるので、得られる分析用試験片の保存安定性をさらに向上させることができる。
【００８８】
本実施の形態に用いられるインクジェット法に用いられる液滴吐出装置としては、例えば、流路が形成された流路基体と、この流路基体に組み付けられて加圧室としてキャビティ内の容積を変化させる機能を有するアクチュエータ部と、流路基体の下面に貼着され、且つ吐出ノズルが形成されたノズル基体と、流路基体の後部の上面に設けられた液体注入部とを備えたものを挙げることができる。具体的には、特開２００３−７５３０５号公報に記載されているものを好適に用いることができる。
【００８９】
また、このような液滴吐出装置を制御するシステムとしては、例えば、特開２００３−９８１８３号公報に記載されたものを好適に用いることができる。
【００９０】
本実施の形態に用いられる担体１としては、表面１１を有するものであれば特に制限はないが、例えば、多孔質体を好適例として挙げることができる。中でも、親水性の多孔質体が好ましい。その材質としては、例えば、セルロース類、ポリエーテルスルホン類、アクリル重合体等が好適で、その孔径としては０．２μｍ〜数μｍが好適である。このように、担体１として多孔質体を用いることによって、得られる試薬スポット２（２１、２２）を形成する溶液の、担体１内部への浸透量を増大させることができ、分析感度を向上させることができる。また、インクジェット法を用いることによって、非接触で溶液を担体に供給することができるので、担体が多孔質体であっても変形させることがなく、表面にムラのない分析用試験片を得ることができる。
【００９１】
本実施の形態で用いられる試薬スポット２（複数種の試薬スポット２１、２２）を形成する複数種の溶液としては、試料３の導入によって互いに混合することができ、試料３中の分析対象物質と接触反応して信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能なものであれば特に制限はないが、例えば、分析対象物質として乳酸脱水素酵素の活性を測定する場合（試料として、乳酸脱水素酵素を含む溶液を用いる場合）、一つの試薬スポット２１用の溶液としては、基質として乳酸、補酵素としてＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、電子キャリアーとして１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、テトラゾリウム試薬としてＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む溶液を、もう一つの試薬スポット２２用の溶液としては、リン酸緩衝液、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液等の緩衝液を挙げることができる。
【００９２】
本実施の形態においては、複数種の試薬スポット２１、２２を形成する複数種の溶液のうちの少なくとも一種を、発色体を含有するものとすることが好ましい。このように構成することによって、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片１０を得ることができる。このような発色体を含有する溶液としては、例えば、還元系としてホルマザン試薬、酸化系として４−アミノアンチピリン、フェノール系等の溶液を挙げることができる。この場合、発色体を含有する溶液の供給に、インクジェット法を用いることによって、正確な溶液量を供給することができ、高品質な分析用試験片を得ることができる。
【００９３】
複数種の試薬スポット２１、２２を形成する複数種の溶液に、蛍光発光する物質を含有させることが好ましい。このように構成することによって、目視検査では確認しにくい試薬スポット２１、２２の接触の可否を蛍光検査で確実に検査することが可能となり、品質の安定化を図ることができる。このような蛍光を発する物質としては特に制限はないが、試薬スポット２１、２２の検査特性を損なうことなく蛍光を発するものが好ましく、例えば、緑色、黄色、青色の食紅等を好適例として挙げることができる。この場合も、上述の発色体の場合と同様に、蛍光物質を含む溶液の供給に、インクジェット法を用いることによって、正確な溶液量を供給することができ、高品質な分析用試験片を得ることができる。
【００９４】
複数種の溶液の少なくとも一つに、水溶性のポリマー（水溶性ポリマー）を含有させることも長期保存安定性の面から好ましい。水溶性ポリマーを含有させることによって、試薬スポット２１、２２の成分が、大気中の水分によって溶出するのを防止することができるため、長期保存をする場合であっても試薬スポット２１、２２の特性を安定して保持することができる。
【００９５】
図３に示すように、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体２４を配設することが、長期保存安定性を向上させる上で好ましい。この場合、遮蔽体２４を、試薬スポット２１、２２間が最短距離となるところに配設することがさらに好ましい。遮蔽体２４の大きさは、試薬スポット２１、２２に接触しない大きさであればよい。遮蔽体２４の形状は、試薬スポット２１、２２に接触することなく、試薬スポット２１、２２の間に配置される形状であれば特に制限はないが、長期安定性を一層向上させるため、図４に示すように、直線状であることが好ましく、曲線状であってもよい。
【００９６】
遮蔽体２４を形成する物質としては特に制限はないが、例えば、水溶性ポリマー等を挙げることができる。水溶性ポリマーは、比較的粘度が高く、担体表面及び内部で拡がりすぎることがないため、試薬スポット２１、２２の形成領域を最大化することができ、感度を向上させることができる。遮蔽体２４を形成する水溶性ポリマーとしては、例えば、プルランのような糖の重合物、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、カルボキシセルロースナトリウム、ポリビニルアルコール、デキストラン、澱粉の部分加水分解物等を好適例として挙げることができる。遮蔽体２４の形成方法としては特に制限はないが、担体１の親水性の程度によって適宜使い分けすることが好ましい。例えば、比較的親水性が高い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体１内部に容易に浸透させることができるため、スクリーン印刷法を用いることが好ましい。また、比較的親水性が低い担体１を用いる場合は、遮蔽体２４を担体内部に浸透させることが困難であり、担体１の厚さ方向への浸透を確実にするため、インクジェット法を用いることが好ましい。中でも、遮蔽体２４を微細なパターンとし、試薬スポット２１、２２の形成領域を拡大して感度を向上させることが可能なことから、インクジェット法が、さらに好ましい。
【００９７】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した断面形状を、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状とすることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することが可能な分析用試験片を得ることができる。また、インクジェット法を用いることによって、上記形状を容易に形成することができる。
【００９８】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２のうち、同一種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１同士又は試薬スポット２２同士）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）を、異種の試薬スポット（図２では、試薬スポット２１と試薬スポット２２）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くすることが好ましい。このように構成することによって、試料３が導入されたときに、試薬スポット２１、２２を確実に混合することができる。
【００９９】
図２に示すように、複数種の試薬スポット２１、２２の大きさを、最大径で、好ましくは、０．５ｍｍ以下、さらに好ましくは、０．０５〜０．２５ｍｍとするとともに、異種の試薬スポット（試薬スポット２１と試薬スポット２２と）の中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）を、好ましくは、０．６ｍｍ以下、さらに好ましくは０．１〜０．４ｍｍとすることによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することが可能な分析用試験片１０を得ることができるとともに、試薬スポット２１と試薬スポット２２との均一な混合を実現し、明確な信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片１０を得ることができる。特に、信号特性として発光量の大小で検査、分析する場合、上記径及びピッチとすると容易に目視でも確認することができるため好ましい。
【０１００】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポット２１、２２を担体１の表面１１に平行な所定の平面（例えば、担体１の表面１１から１／２の深さの部位を通る平面）で切断した場合の試薬スポット２１、２２の断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体１の表面１１の面積を示す。］を、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすようにすることが好ましい。配設割合（Ａ）を０．０１以下とすると、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間の短縮化を図ることが可能な分析用試験片１０を得ることが困難になることがあり、配設割合（Ａ）を０．８１４以上とすると、得られる分析用試験片１０の長期安定性が低減することがある。得られる分析用試験片１０の分析の長期信頼性を考慮すると、０．０９＜（Ａ）＜０．３５の範囲を満たすようにすることがさらに好ましい。なお、非接触で溶液を供給することができるとともに、スポット量が正確であるインクジェット法を用いることによって、上述のスポットピッチ、径、断面積の配設割合を効率よく実現することができる。
【０１０１】
複数種の試薬スポット２１、２２の、担体１の表面１１上における又は担体１の表面１１上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）を、担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異ならせることが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２の、大気中の水分を吸収することによる劣化を簡易に判定できる（スポットピッチが短く形成された領域では試薬スポット２１、２２の劣化が促進されるため、劣化の状況を定量的に把握することができる）とともに、分析（測定）範囲の拡大した分析用試験片１０を得ることができる。また、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【０１０２】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、複数種の試薬スポット２１、２２が所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポット２３を配設することが好ましい。この場合、確認用試薬スポット２３は、最終形状としての分析用試験片１０の内部に配設されてもよく、最終形状となる前の担体１上（分析用試験片１０の外部）に配設されてもよい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２を配設するに先立って、例えば、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合具合等を予め確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。
【０１０３】
確認用試薬スポット２３のそれぞれを、前述の複数種の溶液から形成することが好ましい。このように構成することによって、信号物質又は信号特性の生成具合等を予め迅速に確認することができるため、得られる試験片１０の信頼性を向上させることができる。また、確認用試薬スポット２３の形成にインクジェット法を用いることによって、分析用試験片１０内の試薬スポット２１、２２と同一のスポットを容易に形成することことができ、正確な確認検査を行うことができる。
【０１０４】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域における試薬スポット２１、２２を、他の領域の試薬スポット２１、２２とは異なった種類のものとなるように配設することが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で複数項目の検査をすることができる。さらに、インクジェット法を用いることによって、高密度なスポット形成ができるので、チップを大きくすることなく、異種の検査ができるチップを得ることができる。
【０１０５】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の少なくとも一部の領域における試薬スポット２１、２２を、他の領域の試薬スポット２１、２２とは異なった試薬濃度のものとなるように配設することが好ましい。なお、インクジェット法を用いることによって、高密度化することができ、小さな領域でも試薬濃度の変更をすることができる。このように構成することによって、１枚の分析用試験片で定量化を可能とすることができる。
【０１０６】
試薬スポット２１、２２を担体１の内部にまで配設する場合、試薬スポット２１、２２を、試料に対する反応感度が、担体１の表面１１側において最も高くなるように配設することが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。この場合、インクジェット法を用いることによって、反応感度が担体の表面１１側において最も高くなるように、効率よく配設することができる。すなわち、まず、担体１に所定の濃度の溶液を供給後、同一装置を用いて、ノズル面における溶液の乾燥時間を長くし、より濃縮した溶液を同一箇所へ供給することによって効率よく上述の配設を実現することができる。
【０１０７】
試薬スポット２１、２２を担体１の内部にまで配設する場合、試薬スポット２１、２２を、試薬濃度が、担体の表面側において最も高くなるように配設することが好ましい。このように構成することによって、少量の検体（試料）で明確な信号特性の呈示を得ることができ、確実な検査をすることができる。
【０１０８】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット２１と試薬スポット２２との間）に、表面活性剤（図示せず）を配設することが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化したり信号物質等の分散化を促進することが可能な分析用試験片１０を得ることができる。このような表面活性剤としては、例えば、アニオン系、カチオン系、ノニオン系等のいずれであってもよく、使用条件に応じて適宜選定することができる。アニオン系としては、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩等、カチオン系としては、アルキル・トリメチルアンモニウム、アルキル・ピリジウム等、ノニオン系としては、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニール等を好適例として挙げることができる。
【０１０９】
担体１の表面１１上の又は担体１の表面１１上及び内部の、試薬スポット２１、２２が配設されていない部分（試薬スポット２１と試薬スポット２２との間）に、発泡剤（図示せず）を配設することが好ましい。このように構成することによって、試薬スポット２１と試薬スポット２２との混合を促進して、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間を短縮化することが可能な分析用試験片１０を得ることができる。このような発泡剤としては、例えば、炭酸水素カリウム（ＫＨＣＯ３）又は炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）と有機酸とを個別に配置したものを挙げることができる。この場合、インクジェット法を用いることによって、表面活性剤及び発泡剤を微少量で均一に供給することができ、分析用試験片１０内及び分析用試験片１０間で差のないものを得ることができる。
【０１１０】
担体１の表面１１とは反対側の表面（裏面）側に、担体１を支持する支持体４をさらに配設することが好ましい。このように構成することによって、取り扱いが容易で、さらに試薬スポットを形成する際の配列（アライメント）を容易化することができる。なお、支持体４の形状としては、担体１を確実に支持することができるものであれば特に制限はないが、例えば、材質として、金属、セラミックス、ガラス、樹脂等を挙げることができる。中でも、樹脂が、低コスト、溶液に対する安定性から好ましい。さらに、樹脂の種類としては、例えば、ＰＥＴ系樹脂、アクリル系樹脂、塩ビ系樹脂等を挙げることができる。
【０１１１】
試薬スポット２１、２２を配設するため、上述のインクジェット法を用いて吐出される際の、複数種の溶液の液滴を、その速度成分として、担体１の表面１１に対して垂直な方向以外の成分を有するものとすることが好ましい。このように構成することによって、噴射（吐出）ノズルから液滴が吐出されてから担体１に達するまでの時間が長くなり、より高濃度な液滴を担体１に供給することができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度の向上を図ることができる。
【０１１２】
また、インクジェット法を用いて、溶液の液滴を、複数の独立した微小液滴から構成することが好ましい。このように構成することによって、液滴が担体１に達するまでの時間内に、液滴がより濃縮されるため、試薬スポット２１、２２の大きさ（スポット径）を大きくすることなく、多くのスポット量（試薬スポット２１、２２の一つを形成する溶液の液滴の量）を供給することができ、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１３】
試薬スポット２１、２２の一つを形成する溶液の液滴の量（スポット量）を、好ましくは、０．１μＬ以下、さらに好ましくは、０．００２〜０．０２μＬとする。０．１μＬを超えると、溶液の液滴が担体１に拡がりすぎてスポット径が必要以上に大きくなるため、得られる分析用試験片１０において、試薬スポット２１、２２と試料３との、接触、反応時間が長くなることがある。
【０１１４】
複数種の試薬スポット２１、２２のスポット量を、担体１の表面１１の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとすること（例えば、試料３が多く導入される中央部のスポット量を大きくすること等）が好ましい。このように構成することによって、試料３に対する最適なスポット量の範囲を拡大すること（得られる分析用試験片１０の分析感度を容易に変更すること）ができるため、１枚の分析用試験片１０で定量化を可能とすることができる。また、インクジェット法を用いることによって、小さなチップであっても容易に作製することができる。
【０１１５】
試薬スポット２１、２２を、溶液の液滴を、試薬スポット２１、２２一つ当たり複数回吐出することにより形成することが好ましい。このように構成することによって、スポット径を必要以上に大きくすることなく、スポット量を大きくすることができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１６】
担体１の温度を、好ましくは、４０℃以下、さらに好ましくは、１５〜３０℃以下に保持した状態で溶液の液滴を吐出することにより試薬スポット２１、２２を形成することによって、試薬スポット２１、２２の形成後、短時間で液滴が乾燥し、試薬スポット２１、２２の拡がりを抑えることができ、スポット径を必要以上に大きくすることなく、スポット量を大きくすることができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１７】
さらに、担体１の裏面を支持体４から隔離した状態で溶液の液滴を吐出することが好ましい。このようにして試薬スポット２１、２２を形成することによって、担体１の裏面における試薬スポット２１、２２の拡がりを抑えることができ、液滴の不必要な混合を防止することができるため、得られる分析用試験片１０の分析感度を向上させることができる。
【０１１８】
上記のいずれかの方法によって製造された分析用試験片１０は、表面１１を有する担体１と、担体１の表面１１上に又は担体１の表面１１上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから、インクジェット法を用いて複数種の溶液の液滴として吐出させることによって形成された複数種の試薬スポット２１、２２からなる試薬スポット２とを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料３が導入されると、試料３が複数種の試薬スポット２１、２２と接触することによって、複数種の試薬スポット２１、２２を互いに混合させるとともに、混合した複数種の試薬スポット２１、２２と反応して、検出可能な物質又は検出可能な特性（信号物質又は信号特性）を生成することが可能な分析用試験片１０であり、担体１の表面１１に導入された分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料３の性状を検査、分析するための検査チップとして有用で、分析信頼性、分析感度（分析精度）及び保存安定性に優れたものとなる。
【実施例】
【０１１９】
以下、本発明の分析用試験片及びその製造方法を実施例によってさらに具体的に説明する。
【０１２０】
（実施例１、２）
試薬スポットの形成方法として、ピン方式を用いて、下記に示す手順で、サンプルを作製して、長期安定性等の特性評価を行った。すなわち、第１の試薬として、乳酸、ＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、ＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む第１の溶液を使用し、第２の試薬として、リン酸緩衝液（第２の溶液）を使用した。試料としては牛乳を使用した。担体として、材質が親水性セルロース混合エステル、サイズが５ｍｍ×５ｍｍ、孔径が０．８μｍ、厚さが０．１６ｍｍのものを使用した。
【０１２１】
上記第１、第２の溶液と担体とを使用するとともに、試薬スポットの形成方法としてピン方式（クイルピンタイプ、万年筆のように溝が切られているもの）を用い、ピンに第１、第２の溶液を保持させ、そのピンを担体に接触させることによって第１、第２の溶液をそれぞれ担体に移行させて、第１、第２の試薬スポットを形成した。この場合、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ０．０１μＬ、０．０６μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．６ｍｍ、１．５ｍｍのピッチで、ほぼ０．３ｍｍ、１．２ｍｍの大きさ（直径）で形成された第１、第２のサンプルを得、その特性評価を行った。その結果を表１に示す。
【０１２２】
（比較例１）
試薬スポットの形成方法として、液含浸法用いて、比較サンプルを作製し、その特性評価を行った。すなわち、実施例１で用いたものと同様の第１、第２の試薬を、それぞれビーカーに入れ、実施例１で用いたものと同様の担体を、まず、第１の試薬を入れたビーカーに入れて第１の試薬に浸すことで第１の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥後、第２の試薬を入れたビーカーに入れて第２の試薬に浸すことで第２の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥して、担体に第１、第２の試薬を含浸させた比較サンプルを得、その特性評価を行った。その結果を表１に示す。
【０１２３】
実施例１、２及び比較例１における特性評価は、作製後１、７、３０日間、４℃で冷蔵保管した複数のサンプル及び比較サンプル（以下、単に「サンプル」ということがある）の、表面のほぼ中央部全域に検出波長５２０ｎｍのレーザ光を照射し、その反射率を測定することによって行った。反射率が高い（低下しない）ものほど安定性に優れており、反射率が初期値（作製直後）に対し１０％以上低下したサンプルだけが得られた場合を×、反射率の低下が１０％未満のサンプルだけが得られた場合を○と判定した。なお、実施例２においては、試薬スポットのスポット径が大きいため、試薬スポット中央部と周辺部で、実用上の問題がない程度ではあるが、第１、第２の試薬の濃度ムラが発生した。さらに、上記複数のサンプルのそれぞれに試料を滴下して複数の試料滴下サンプルとし、上記と同様にして、その反射率を測定することで感度も確認した。感度は、反射率が試料の滴下前のサンプルの反射率に対し２０％以上低下した試料滴下サンプルだけが得られた場合を○と判定した。さらに、目視観察も行い、スポット内のムラの発生、５ｍｍ×５ｍｍ内のムラの発生を観察した。
【０１２４】
【０１２５】
表１に示すように、担体の表面上及び内部に、所定の溶液（実施例１、２では第１、第２の溶液の２種類）を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することにより、分析対象物質を含んだ試料が担体の表面に導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な信号が得られ、かつ長期安定性に優れた分析用試験片が得られることが確認できた。なお、実施例１、２は、２種の試薬（溶液）を用いて行ったが、安定性を考慮し、３、４種類の試薬（溶液）を用いて、試薬スポットを形成してもよい。
【実施例３〜５】
【０１２６】
試薬スポットの形成方法として、インクジェット法を用いて、下記に示す手順で、サンプルを作製して、長期安定性等の特性評価を行った。すなわち、第１の試薬として、乳酸、ＮＡＤ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）、１−メトキシＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート）、ＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）を含む第１の溶液を使用し、第２の試薬として、リン酸緩衝液（第２の溶液）を使用した。試料は牛乳を使用した。担体として、材質が親水性セルロース混合エステル、サイズが５ｍｍ×５ｍｍ、孔径が０．８μｍ、厚さが０．１６ｍｍのものを使用した。上記第１、第２の溶液と担体とを使用するとともに、特開２００３−７５３０５号公報に記載されている吐出ユニットを使用し、第１、第２の試薬スポットを形成した。この場合、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ０．００３μＬ、０．０１μＬ、０．０６μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．３ｍｍ、０．６ｍｍ、１．５ｍｍのピッチで、ほぼ０．１５ｍｍ、０．３ｍｍ、１．２ｍｍの大きさ（直径）で形成された第１〜第３のサンプル（実施例３〜５）を得、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。
【０１２７】
（比較例２）
試薬スポットの形成方法として、液含浸法用いて、下記に示す手順で、第１の比較サンプル（比較例２）を作製して、その特性評価を行った。すなわち、実施例３で用いたものと同様の第１、第２の試薬を、それぞれビーカーに入れ、実施例３で用いたものと同様の担体を、まず、第１の試薬を入れたビーカーに入れて第１の試薬に浸すことで第１の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥後、第２の試薬を入れたビーカーに入れて第２の試薬に浸すことで第２の試薬を担体に含浸させ、３０℃で乾燥して、担体に第１、第２の試薬を含浸させた第１の比較サンプル（比較例２）を得、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。
【０１２８】
（比較例３）
試薬スポットの形成方法として、ピンに第１、第２の溶液を保持させ、そのピンを担体に接触させることによって第１、第２の溶液を担体に移行させて、第１、第２の試薬スポットを形成するピン方式（クイルピンタイプ、万年筆のように溝が切られているもの）を用いて、第２の比較サンプル（比較例３）を作製し、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。すなわち、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ０．００３μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．３ｍｍのピッチで、ほぼ０．１５ｍｍの大きさ（直径）で形成された第２の比較サンプル（比較例３）を得、その特性評価を行った。その結果を表２に示す。
【０１２９】
実施例３〜５及び比較例２、３における特性評価は、作製後１、７、３０日間、４℃で冷蔵保管した複数のサンプル及び比較サンプル（以下、単に「サンプル」ということがある）の、表面のほぼ中央部全域に検出波長５２０ｎｍのレーザ光を照射し、その反射率を測定することによって行った。反射率が高い（低下しない）ものほど安定性に優れており、反射率が初期値（作製直後）に対し１０％以上低下したサンプルだけが得られた場合を×、反射率の低下が１０％未満のサンプルだけが得られた場合を○と判定した。なお、１０％以上低下したサンプル及び１０％未満のサンプルが混在して得られた場合を△と判定した。また、実施例５においては、試薬スポットのスポット径が大きいため、試薬スポット中央部と周辺部で、実用上の問題がない程度ではあるが、第１、第２の試薬の濃度ムラが発生した。さらに、上記複数のサンプルのそれぞれに試料を滴下して複数の試料滴下サンプルとし、上記と同様にして、その反射率を測定することで感度も確認した。感度は、反射率が試料の滴下前のサンプルの反射率に対し２０％以上低下した試料滴下サンプルだけが得られた場合を○と判定した。さらに、目視観察も行い、スポット内のムラの発生、５ｍｍ×５ｍｍ内のムラの発生を観察した。
【０１３０】
【０１３１】
表２に示すように、担体の表面上及び内部に、所定の溶液（実施例３〜５では第１、第２の溶液２種類）を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することにより、分析対象物質を含んだ試料が担体の表面に導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な信号が得られ、かつ長期安定性に優れた分析用試験片が得られることが確認でき、さらにその製造法として、ピン方式よりも、インクジェット法の方が、スポット量のばらつきによるチップ内ムラの発生を防止することができる点で優れていることが確認できた。なお、実施例３〜５は、２種の試薬（溶液）を用いて行ったが、安定性を考慮し、３、４種類の試薬（溶液）を用いて、試薬スポットを形成してもよい。また、表２における比較例２及び表１における比較例１は、同一内容の試験であったが、評価方法等のばらつきによって、それぞれ△及び○と判定されたと推定される。
【０１３２】
（実施例６、７）
試料として、牛乳（乳酸脱水素酵素）の代わりに、アルカリ性フォスファターゼを用いて、第４、第５のサンプル（実施例６、７）を得た。すなわち、試薬スポットの形成方法として、インクジェット法を用いて、下記に示す手順で、サンプルを作製して、長期安定性等の特性評価を行った。第１の試薬として、ｐ−ニトロフェニルリン酸二ナトリウム塩１８．９４ｍＭ、塩化マグネシウム（６水塩）／０．５０５ｍＭ（第１の溶液）を使用し、第２の試薬として、２−エチルアミノエタノール／５．０５ｍＭ、塩化マグネシウム（６水塩）／０．５０５ｍＭ（第２の溶液）を使用した。試料としては、アルカリ性フォスファターゼを使用した。担体として、材質が親水性セルロース混合エステル、サイズが５ｍｍ×５ｍｍ、孔径が０．８μｍ、厚さが０．１６ｍｍのものを使用した。上記第１、第２の溶液と担体とを使用するとともに、特開２００３−７５３０５号公報に記載されている吐出ユニットを使用し、第１、第２の試薬スポットを形成した。この場合、第１、第２の試薬スポット一つ当り、それぞれ、ほぼ、０．０１μＬ、０．０６μＬの第１、第２の溶液量をスポットすることによって、担体上に、第１、第２の試薬スポットが、それぞれ、ほぼ０．６ｍｍ、１．５ｍｍのピッチで、ほぼ０．３ｍｍ、１．２ｍｍの大きさ（直径）で形成された第４、第５のサンプル（実施例６、７）を得、その特性評価を行った。その結果を表３に示す。
【０１３３】
（比較例４）
試薬スポットの形成方法として、液含浸法用いて、第３の比較サンプル（比較例４）を作製し、その特性評価を行った。その結果を表３に示す。すなわち、実施例６で用いたものと同様の第１、第２の試薬（すなわち、第１、第２の溶液として、２−エチルアミノエタノール／１．０１ｍＭ、ｐ−ニトロフェニルリン酸二ナトリウム塩／７５．７５ｍＭ、塩化マグネシウム（６水塩）／０．５０５ｍＭ）を、実施例６で用いたものと同様の担体の内部に、比較例２と同様の方法で第１、第２の試薬を含浸させて、第３の比較サンプル（比較例４）を得、その特性評価を行った。その結果を表３に示す。
【０１３４】
実施例６、７及び比較例４における特性評価は、作製後１、１００、１５０日間、４℃で冷蔵保管した複数のサンプル及び比較サンプル（以下、単に「サンプル」ということがある）の表面のほぼ中央部全域における、検出波長４０５ｎｍにおける試薬自身の吸光度を測定することにより、ｐ−ニトロフェニルリン酸の分解物であるｐ−ニトロフェノールの生成率を測定することにより行った。保管開始時の４０５ｎｍにおける吸光度を１００％とした時の相対値が１００に近いほど安定性に優れており、相対値が初期値（作製直後）に対し１０％以上低下したサンプルだけが得られた場合を×、相対値の低下が１０％未満のサンプルだけが得られた場合を○と判定した。なお、実施例７においては、試薬スポットのスポット径が大きいため、試薬スポット中央部と周辺部で、実用上の問題がない程度ではあるが、第１、第２の試薬の濃度ムラが発生した。また、上記複数のサンプルのそれぞれに試料を滴下して複数の試料滴下サンプルとし、上記と同様にして、その反射率を測定することで感度も確認した。感度は、反射率が試料の滴下前のサンプルの反射率に対し２０％以上低下した試料滴下サンプルだけが得られた場合を○と判定した。さらに、目視観察も行い、スポット内のムラの発生、５ｍｍ×５ｍｍ内のムラの発生を観察した。
【０１３５】
【０１３６】
表３に示すように、担体の表面上及び内部に、所定の溶液（実施例６、７では第１、第２の溶液２種類）を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することにより、分析対象物質を含んだ試料が担体の表面に導入されると、試薬スポットと接触、反応して、検出可能な信号が得られ、かつ長期安定性に優れた分析用試験片がさまざまな溶液に対し得られることが確認できた。なお、実施例６、７は、２種の試薬（溶液）を用いて行ったが、安定性を考慮し、３、４種類の試薬（溶液）を用いて、試薬スポットを形成してもよい。
【産業上の利用可能性】
【０１３７】
本発明の分析用試験片及びその製造方法は、研究、創薬、診断、医療等の分野で、分析対象物質（例えば、人及び動物の体液、特に尿、血液等）を含んだ試料の性状を検査、分析するための検査チップ等の製造に有効に利用される。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
担体と、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された試薬スポットとを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に配設された前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片であって、
前記試薬スポットが、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポットからなり、
前記担体の表面に導入された試料が、前記複数種の試薬スポットと接触することによって、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片。
【請求項２】
前記担体が、多孔質体である請求の範囲第１項に記載の分析用試験片。
【請求項３】
前記分析対象物質が、人及び動物の体液である請求の範囲第１項又は第２項に記載の分析用試験片。
【請求項４】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、発色体を含有してなる請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項５】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、蛍光発光する物質を含有してなる請求の範囲第１項〜第４項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項６】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、水溶性ポリマーを含有してなる請求の範囲第１項〜第５項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項７】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体が配設されてなる請求の範囲第１項〜第６項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項８】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった種類のものである請求の範囲第１項〜第７項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項９】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものである請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１０】
前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い、前記試料に対する反応感度を有してなる請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１１】
前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い前記試薬濃度を有してなる請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１２】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤が配設されてなる請求の範囲第１項〜第１１項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１３】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤が配設されてなる請求の範囲第１項〜第１２項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１４】
前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに備えてなる請求の範囲第１項〜第１３項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１５】
前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状である請求の範囲第１項〜第１４項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１６】
前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長い請求の範囲第１項〜第１５項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１７】
前記複数種の試薬スポットの大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下である請求の範囲第１項〜第１６項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１８】
前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たす請求の範囲第１項〜第１７項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１９】
前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている請求の範囲第１項〜第１８項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項２０】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに備えてなる請求の範囲第１項〜第１９項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項２１】
前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている請求の範囲第１項〜第２０項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項２２】
担体の表面上に又は担体の表面上及び内部に、所定の溶液を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することによって、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法であって、
前記所定の溶液として、導入される前記試料と接触することによって互いに混合することが可能で、かつ互いに混合することによって所定の機能を発揮することが可能な複数種の溶液を、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部にインクジェット法を用いて前記複数種の溶液の液滴として吐出させて、前記複数種の溶液のいずれかからなる複数種の試薬スポットを形成することによって、前記試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に形成された前記複数種の試薬スポットと接触して、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法。
【請求項２３】
前記インクジェット法に用いられる液滴吐出装置として、流路が形成された流路基体と、この流路基体に組み付けられて加圧室としてキャビティ内の容積を変化させる機能を有するアクチュエータ部と、流路基体の下面に貼着され、且つ吐出ノズルが形成されたノズル基体と、流路基体の後部の上面に設けられた液体注入部とを備えるものを用いる請求の範囲第２２項に記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２４】
前記担体として、多孔質体を用いる請求の範囲第２２項又は第２３項に記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２５】
前記分析対象物質として、人及び動物の体液を用いる請求の範囲第２２項〜第２４項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２６】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、発色体を含有してなるものを用いる請求の範囲第２２項〜第２５項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２７】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、蛍光発光する物質を含有してなるものを用いる請求の範囲第２２項〜第２６項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２８】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、水溶性ポリマーを含有してなるものを用いる請求の範囲第２２項〜第２７項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２９】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体を配設する請求の範囲第２２項〜第２８項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３０】
前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状となるように配設する請求の範囲第２２項〜第２９項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３１】
前記複数種の試薬スポットを、前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３０項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３２】
前記複数種の試薬スポットを、その大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下となるように配設する請求の範囲第２２項〜第３１項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３３】
前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすように配設する請求の範囲第２２項〜第３２項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３４】
前記複数種の試薬スポットを、その前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３３項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３５】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに配設する請求の範囲第２２項〜第３４項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３６】
前記確認用試薬スポットのそれぞれを、前記複数種の溶液から形成する請求の範囲第３５項に記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３７】
前記担体の表面の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった種類のものとなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３６項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３８】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものとなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３７項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３９】
前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試料に対する反応感度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３８項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４０】
前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試薬濃度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３９項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４１】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤を配設する請求の範囲第２２項〜第４０項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４２】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤を配設する請求の範囲第２２項〜第４１項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４３】
前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに配設する請求の範囲第２２項〜第４２項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４４】
前記複数種の溶液の液滴を、その速度成分として、前記担体の表面に対して垂直な方向以外の成分を有するようにして前記インクジェット法を用いて吐出して、前記試薬スポットを形成する請求の範囲第２２項〜第４３項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４５】
前記溶液の液滴を、複数の独立した微小液滴から構成する請求の範囲第２２項〜第４４項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４６】
前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）を、０．１μＬ以下とする請求の範囲第２２項〜第４５項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４７】
前記複数種の試薬スポットのスポット量を、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとする請求の範囲第２２項〜第４６項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４８】
前記試薬スポットを、前記溶液の液滴を前記試薬スポット一つ当たり複数回吐出させることによって形成する請求の範囲第２２項〜第４７項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４９】
前記担体の温度を４０℃以下に保持した状態で前記溶液の液滴を吐出して、前記試薬スポットを形成する請求の範囲第２２項〜第４８項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項５０】
前記担体の裏面を前記支持体から隔離した状態で前記溶液の液滴を吐出することによって、前記試薬スポットを形成する請求の範囲第４３項〜第４９項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項１】
担体と、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設された試薬スポットとを備えてなり、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に配設された前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片であって、
前記試薬スポットが、互いに混合することによって所定の機能を発揮する複数種の溶液のいずれかから形成された複数種の試薬スポットからなり、
前記担体の表面に導入された試料が、前記複数種の試薬スポットと接触することによって、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片。
【請求項２】
前記担体が、多孔質体である請求の範囲第１項に記載の分析用試験片。
【請求項３】
前記分析対象物質が、人及び動物の体液である請求の範囲第１項又は第２項に記載の分析用試験片。
【請求項４】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、発色体を含有してなる請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項５】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、蛍光発光する物質を含有してなる請求の範囲第１項〜第４項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項６】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種が、水溶性ポリマーを含有してなる請求の範囲第１項〜第５項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項７】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体が配設されてなる請求の範囲第１項〜第６項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項８】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった種類のものである請求の範囲第１項〜第７項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項９】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域に配設された前記試薬スポットが、他の領域に配設された前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものである請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１０】
前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い、前記試料に対する反応感度を有してなる請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１１】
前記試薬スポットが前記担体の内部にまで配設される場合、前記試薬スポットが、前記担体の表面側において最も高い前記試薬濃度を有してなる請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１２】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤が配設されてなる請求の範囲第１項〜第１１項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１３】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤が配設されてなる請求の範囲第１項〜第１２項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１４】
前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに備えてなる請求の範囲第１項〜第１３項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１５】
前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状である請求の範囲第１項〜第１４項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１６】
前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長い請求の範囲第１項〜第１５項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１７】
前記複数種の試薬スポットの大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下である請求の範囲第１項〜第１６項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１８】
前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たす請求の範囲第１項〜第１７項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項１９】
前記複数種の試薬スポットの、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている請求の範囲第１項〜第１８項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項２０】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに備えてなる請求の範囲第１項〜第１９項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項２１】
前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なっている請求の範囲第１項〜第２０項のいずれかに記載の分析用試験片。
【請求項２２】
担体の表面上に又は担体の表面上及び内部に、所定の溶液を、スポット状に所定の配列パターン（スポットピッチ）で配設して、試薬スポットを形成することによって、分析対象物質を含んだ試料が前記担体の表面に導入されると、前記試薬スポットと接触、反応して、検出可能な物質（信号物質）の生成又は検出可能な特性（信号特性）の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法であって、
前記所定の溶液として、導入される前記試料と接触することによって互いに混合することが可能で、かつ互いに混合することによって所定の機能を発揮することが可能な複数種の溶液を、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部にインクジェット法を用いて前記複数種の溶液の液滴として吐出させて、前記複数種の溶液のいずれかからなる複数種の試薬スポットを形成することによって、前記試料が前記担体の表面に導入されると、前記担体の表面上に又は前記担体の表面上及び内部に形成された前記複数種の試薬スポットと接触して、前記複数種の試薬スポットを互いに混合させるとともに、混合した前記複数種の試薬スポットと反応して、前記信号物質の生成又は信号特性の呈示が可能な分析用試験片を得る分析用試験片の製造方法。
【請求項２３】
前記インクジェット法に用いられる液滴吐出装置として、流路が形成された流路基体と、この流路基体に組み付けられて加圧室としてキャビティ内の容積を変化させる機能を有するアクチュエータ部と、流路基体の下面に貼着され、且つ吐出ノズルが形成されたノズル基体と、流路基体の後部の上面に設けられた液体注入部とを備えるものを用いる請求の範囲第２２項に記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２４】
前記担体として、多孔質体を用いる請求の範囲第２２項又は第２３項に記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２５】
前記分析対象物質として、人及び動物の体液を用いる請求の範囲第２２項〜第２４項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２６】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、発色体を含有してなるものを用いる請求の範囲第２２項〜第２５項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２７】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、蛍光発光する物質を含有してなるものを用いる請求の範囲第２２項〜第２６項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２８】
前記複数種の試薬スポットを形成する前記複数種の溶液のうちの少なくとも一種として、水溶性ポリマーを含有してなるものを用いる請求の範囲第２２項〜第２７項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項２９】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、水溶性の遮蔽体を配設する請求の範囲第２２項〜第２８項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３０】
前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面に平行な所定の平面で切断した断面形状が、楕円形状、長円形状又はレーシングトラック形状となるように配設する請求の範囲第２２項〜第２９項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３１】
前記複数種の試薬スポットを、前記複数種の試薬スポットのうち、同一種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ２）が、異種の前記試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）よりも長くなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３０項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３２】
前記複数種の試薬スポットを、その大きさが、最大径で０．５ｍｍ以下であるとともに、前記異種の試薬スポットの中心間の距離（スポットピッチ）（Ｌ１）が、０．６ｍｍ以下となるように配設する請求の範囲第２２項〜第３１項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３３】
前記複数種の試薬スポットを、前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配設割合［（Ａ）＝（Ｓ１／Ｓ２）、ここで、Ｓ１は、複数種の試薬スポットを担体の表面に平行な所定の平面で切断した場合の試薬スポットの断面積の合計を示し、Ｓ２は、担体の表面の面積を示す。］が、０．０１＜（Ａ）＜０．８１４の範囲を満たすように配設する請求の範囲第２２項〜第３２項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３４】
前記複数種の試薬スポットを、その前記担体の表面上における又は前記担体の表面上及び内部における配列パターン（スポットピッチ）が、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３３項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３５】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記複数種の試薬スポットが所定の前記配列パターン（スポットピッチ）で配設された領域の外側に、前記試薬スポットが正常に配設されることを予め確認するための確認用試薬スポットをさらに配設する請求の範囲第２２項〜第３４項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３６】
前記確認用試薬スポットのそれぞれを、前記複数種の溶液から形成する請求の範囲第３５項に記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３７】
前記担体の表面の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった種類のものとなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３６項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３８】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域における前記試薬スポットを、他の領域の前記試薬スポットとは異なった試薬濃度のものとなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３７項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項３９】
前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試料に対する反応感度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３８項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４０】
前記試薬スポットを前記担体の内部にまで配設する場合、前記試薬スポットを、前記試薬濃度が、前記担体の表面側において最も高くなるように配設する請求の範囲第２２項〜第３９項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４１】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、表面活性剤を配設する請求の範囲第２２項〜第４０項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４２】
前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の、前記試薬スポットが配設されていない部分（試薬スポット間）に、発泡剤を配設する請求の範囲第２２項〜第４１項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４３】
前記担体の表面とは反対側の表面（裏面）側に、前記担体を支持する支持体をさらに配設する請求の範囲第２２項〜第４２項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４４】
前記複数種の溶液の液滴を、その速度成分として、前記担体の表面に対して垂直な方向以外の成分を有するようにして前記インクジェット法を用いて吐出して、前記試薬スポットを形成する請求の範囲第２２項〜第４３項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４５】
前記溶液の液滴を、複数の独立した微小液滴から構成する請求の範囲第２２項〜第４４項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４６】
前記試薬スポットの一つを形成する前記溶液の液滴の量（スポット量）を、０．１μＬ以下とする請求の範囲第２２項〜第４５項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４７】
前記複数種の試薬スポットのスポット量を、前記担体の表面上の又は前記担体の表面上及び内部の少なくとも一部の領域において、他の領域とは異なったものとする請求の範囲第２２項〜第４６項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４８】
前記試薬スポットを、前記溶液の液滴を前記試薬スポット一つ当たり複数回吐出させることによって形成する請求の範囲第２２項〜第４７項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項４９】
前記担体の温度を４０℃以下に保持した状態で前記溶液の液滴を吐出して、前記試薬スポットを形成する請求の範囲第２２項〜第４８項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【請求項５０】
前記担体の裏面を前記支持体から隔離した状態で前記溶液の液滴を吐出することによって、前記試薬スポットを形成する請求の範囲第４３項〜第４９項のいずれかに記載の分析用試験片の製造方法。
【国際公開番号】ＷＯ２００４／１１３９１６
【国際公開日】平成１６年１２月２９日（２００４．１２．２９）
【発行日】平成１８年８月３日（２００６．８．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５０７２７８（Ｐ２００５−５０７２７８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／００８８８６
【国際出願日】平成１６年６月２４日（２００４．６．２４）
【出願人】（０００００４０６４）日本碍子株式会社 (2,325)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１６年１２月２９日（２００４．１２．２９）
【発行日】平成１８年８月３日（２００６．８．３）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／００８８８６
【国際出願日】平成１６年６月２４日（２００４．６．２４）
【出願人】（０００００４０６４）日本碍子株式会社 (2,325)
【Ｆターム（参考）】
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